Эмбриотехнологические подходы к сохранению исчезающих видов млекопитающих

Амстиславский, Сергей Яковлевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Эмбриотехнологические подходы к сохранению исчезающих видов млекопитающих
ВАК РФ 03.00.08, Зоология

Автореферат диссертации по теме "Эмбриотехнологические подходы к сохранению исчезающих видов млекопитающих"

На правах рукописи АМСТИСЛАВСКИЙ СЕРГЕЙ ЯКОВЛЕВИЧ

ЭМБРИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К СОХРАНЕНИЮ ИСЧЕЗАЮЩИХ ВИДОВ МЛЕКОПИТАЮЩИХ

03.00.08 - зоология.

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Новосибирск 2006

Работа выполнена в лаборатории эволюционной генетики Института цитологии и генетики СО РАН

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Мошкин Михаил Павлович

доктор биологических наук, Хегай Игорь Ильич

доктор биологических наук, профессор Кочнев Николай Николаевич

Ведущее учреждение: Институт проблем экологии и эволюции

им. А.Н. Северцова РАН

Защита состоится "30" мая 2006 г. на утреннем заседании Диссертационного совета по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора биологических наук (Д 003.033.01) в конференц-зале Института систематики и экологии животных СО РАН. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института систематики и экологии животных СО РАН: 630091, г. Новосибирск, ул. Фрунзе, 11

Автореферат разослан «_» _2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета д.б.н., профессор

у А.Ю. Харитонов

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования.

Многие виды млекопитающих, обитавшие ранее на нашей планете, безвозвратно исчезли. В XIX в. было зарегистрировано вдвое больше исчезнувших видов млекопитающих по сравнению с веком XVIII (Flesness, 1989). Процесс принял особенно угрожающие размеры в конце XX (Woodford, 1990) и в начавшемся XXI веке. Существует два принципиальных подхода к сохранению исчезающих видов млекопитающих. Первый заключается в сохранении жизнеспособных популяций in situ - т.е. в местах их обитания, включая охранные мероприятия и создание благоприятных условий для существующих в природе популяций. Второй подход основан на сохранении видов ex situ - т.е. вне их мест обитания. Сюда относится как сохранение небольших популяций в зоопарках, питомниках и т.п., так и создание криобанков эмбрионов и гамет (Wildt, 1992; Holt, Pickard, 1999). Имеется ряд публикаций, в которых перечислены существенные ограничения традиционных методов сохранения животных из дикой природы (Wildt, 1992; Lasley et al., 1994; Loskutoff, 1998). Подавляющее большинство специалистов согласны с тем, что оптимальной стратегией для сохранения биоразнообразия видов млекопитающих является сочетание традиционных мероприятий и арсенала современных методов, основанных на достижениях репродуктивной биологии (Wildt, 1992; Loskutoff, 1998;2003; Pukazhenthi, Wildt, 2004). Применение последних позволяет преодолеть целый ряд ограничений, свойственных традиционным методам сохранения генофонда животных (Bainbridge, Jabbour, 1998; Pukazhenthi, Wildt, 2004). Так, например, путем сочетания традиционных мероприятий и репродуктивных технологий удалось предохранить от полного исчезновения черноногого хорька (Mustela nigripes) (Wildt et al., 1992; Howard et al., 2001). Подобных успешных примеров, однако, не очень много. В большинстве же случаев при попытках применения эмбриотехнологий при работе с дикими и исчезающими видами млекопитающих возникают серьезные проблемы (Loskutoff, 2003). В каждом из успешных случаев применения эмбриотехнологий по отношению к конкретному виду млекопитающих из дикой фауны учитывается видовая специфика, а успеху предшествует детальное изучение репродуктивной биологии данного вида (Wildt et al., 1992; Pukazhenthi, Wildt, 2004).

первая международная конференция, которая целиком была посвящена этой проблеме. В резолюциях этой конференции, в качестве одного из приоритетных направлений, было намечено изучение особенностей репродуктивной биологии и разработка современных биотехнологических методов для сохранения этого вида куницеобразных (1st International Conference on Conservation of the European mink. Logroño, 2003; http://www.l4treo)a.ee/english/conf-cond-enp.litm'>.

Актуальность предложенной темы обусловлена, прежде всего, актуальностью разработки новых подходов к сохранению исчезающих видов млекопитающих. В последнее время, однако, накапливается достаточно много данных о том, что применение некоторых репродуктивных технологий может сопровождаться весьма заметными побочными эффектами и негативно сказываться на последующем развитии индивида (McEvoy et al., 1998, 2001). В нашей работе мы сосредоточились на базовых репродуктивных технологиях, имеющих достаточно длительную историю применения, таких, как трансплантация и криоконсервация эмбрионов и вызванная введением гормонов суперовуляция. Несмотря на то, что вопросы о возможных длительных побочных эффектах этих репродуктивных технологий первого поколения поднимались ранее (Foote, Ellington, 1998; Dulioust et al., 1995), эти вопросы до настоящего времени остаются все ещё открытыми. Актуальность этой части работы определяется тем, что при применении репродуктивных технологий эмбрион подвергается комплексу базовых процедур, которые можно квалифицировать как более или менее жесткое изменение среды эмбрионального развития. Неизбежным элементом при трансплантации эмбрионов, например, является изменение как пренатальной, так и постнатальной компоненты материнской среды. Зачастую эмбрионы подвергаются также гормональному воздействию (в случае суперовуляции) и комплексу процедур, связанных с криоконсервацией (т.е. замораживанию, размораживанию и воздействию криопротекторов).

Таким образом, актуальность данного исследования определяется не только разработкой видоспецифичных репродуктивных технологий, но и попыткой изучить последствия изменения материнской среды для потомков (в связи с современными эмбриотехнологиями). Актуальным является также изучение обратного влияния кросс-фостеринга и трансплантации эмбрионов па приемную мать. Кроме того, в рамках данной работы впервые изучено раннее развитие у исчезающего вида - европейской норки в сравнении с другим малоизученным видом куницеобразных - горностаем и в сравнении с ближайшим родственником европейской норки — черным хорьком.

Цели исследования.

1. Разработка подходов к сохранению европейской норки на основе сравнительного изучения особенностей раннего развития этого исчезающего вида куницеобразных и применения методов эмбриотехнологии.

2. Изучение последствий изменения материнской среды в результате применения таких репродуктивных технологий, как криоконсервация и трансплантация эмбрионов, а также гормональных воздействий (гонадотропины, эстрогены).

Основные задачи исследования.

1. Изучить особенности преимплантационного развития европейской норки (М lutreola) в сравнении с двумя другими видами куницеобразных — черным хорьком (М. putorius) и горностаем (М ermined).

2. Разработать эмбриотехнологические подходы к сохранению биоразнообразия исчезающего вида - европейской норки.

3. Изучить последствия гормональных (гонадотропных, эстрогенных) воздействий во время преимплантационного развития млекопитающих in vivo: как на уровне развивающегося зародыша, так и на более поздних этапах онтогенеза.

4. На различных линиях лабораторных мышей и крыс определить последствия применения комплекса процедур криоконсервации по отношению к преимплантационным зародышам.

5. Изучить роль материнской среды в формировании фснотипических характеристик, свойственных определенным линиям лабораторных крыс (гипертензивная линия НИСАГ и линия крыс ГК с аномальным поведением).

6. Изучить обратные влияния кросс- и ин-фостеринга, а также трансплантации эмбрионов на физиологический статус приемной матери.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Результаты работы свидетельствуют о том, что методы репродуктивной биологии, такие, как криоконсервация и трансплантация эмбрионов, представляют собой дополнительную возможность для сохранения генофонда исчезающих видов куницеобразных.

2. Раннее развитие европейской норки (М lutreola) сходно с ранним развитием черного хорька (М. putorius). В связи с этим, хорька следует использовать в программах сохранения европейской норки ex situ, в частности, хонорики и нохорики подходят в качестве реципиентов для трансплантации эмбрионов европейской норки.

3. Различные эстрогенные и гонадотропные воздействия в ходе ранней беременности млекопитающих приводят к сходным нарушениям в пре- и постнатальном онтогенезе, вызывая характерные изменения развития эмбрио-

нов и полового созревания потомков, такие, как изменение темпов развития зародышей и их миграции в матку, уменьшение полового диморфизма в ходе раннего постнатального онтогенеза и ускорение полового созревания самок, а также функциональные нарушения репродуктивной системы у взрослых животных.

4. При применении методов репродуктивной биологии с целью сохранения исчезающих видов млекопитающих следует учитывать, что как прена-тальные (трансплантация эмбрионов, гормональные воздействия), так и постнатальные (приемное воспитание) изменения материнской среды отражаются на поведении/физиологии потомков. Таким образом, при восстановлении популяций/видов из криобанка первое поколение может обладать особыми свойствами и характеристиками, а у самок-реципиентов могут возникать транзиторные изменения их физиологического статуса.

Научная новизна.

Впервые изучено преимплантационное развитие у исчезающего вида куницеобразных - европейской норки (А/ lutreola), а также систематически изучено преимплантационное развитие горностая, о котором до начала данной работы имелись лишь фрагментарные сведения.

Впервые показана принципиальная возможность успешной криокон-сервации эмбрионов у куницеобразных. Разработана модель преодоления межвидового барьера в семействе куницеобразных при трансплантации эмбрионов европейской норки межвидовым гибридам хорька и норки (хонорикам и нохорикам).

Впервые системно изучены эффекты воздействия различных эстроген-ных и гонадотропных препаратов в ходе преимплантационного развития in vivo у млекопитающих и выявлены отдаленные эффекты этих воздействий, а именно:

а) воздействия на развивающиеся in vivo зародыши мышей эстрадиолом (Э), ксеноэстрогеном метоксихлором (МКХ), или человеческим хорионическим гонадотропином (ЧХГ) приводят к задержке части зародышей в яйцеводах и угнетающе влияют на их развитие, вызывая характерные аномалии;

б) впервые продемонстрировано, что воздействие перечисленными выше гормональными препаратами на ранних стадиях беременности у мышей сопровождается нарушениями полового развития у потомков в постнаталь-ном онтогенезе (демаскулинизация у самцов; маскулинизация и ускоренное половое созревание у самок), что приводит к репродуктивным нарушениям при взрослении этих потомков.

Впервые изучена роль материнской среды в проявлении артериальной гипертензии у крыс линии НИСАГ и каталепсии у крыс линии ГК. Было показано, что характерный для каждой из этих двух линий фенотип развива-

ется в наиболее полной форме лишь тогда, когда вскармливание производится матерями этой же линии. Если же крысят НИСАГ или ГК вскармливают приемные матери «нормальной» линии Вистар, то формирование артериальной гипертензии или генетической каталепсии (соответственно) замедляется и смягчается, причем поведение таких животных становится более похожим на поведение крыс Вистар.

Научно-практическая значимость. Основным вкладом исследования в зоологию является систематическое изучение наиболее ранних этапов развития европейской норки (преимплантационное развитие которой до начала данной работы вообще не изучалось) и горностая (о раннем развитии которого имелись лишь фрагментарные сведения). Полученные данные по раннему развитию европейской норки открывают новые подходы к сохранению этого исчезающего вида млекопитающих. Технологии вымывания, трансплантации и криоконсервации эмбрионов куницеобразных были отработаны на хорьках. Продемонстрирована практическая возможность их применения по отношению к европейской норке. В частности, практическое значение имеет создание технологии трансплантации эмбрионов европейской норки межвидовым гибридам (хонорикам и нохорикам). Практическое значение также имеет цикл работ по криоконсервации эмбрионов куницеобразных, в ходе которого было показано, что зародыши куницеобразных выживают после глубокого замораживания и криохранения и способны к дальнейшему развитию как in vitro, так и in vivo. Было показано, что такие известные криопротекторы, как ДМСО и глицерин не пригодны для использования в процессе замораживания эмбрионов куницеобразных, однако этиленгликоль пригоден для этих целей.

Изучение характерных последствий воздействия гонадотропных и эсгрогенных гормонов на стадии преимплантационного зародыша может рассматриваться как теоретическая база метода суперовуляции, широко используемого в сельском хозяйстве и в медицине. Учет описанных в работе эффектов применения гонадотропных и эсгрогенных гормонов дает возможность принимать практически важные решения о применимости (или неприменимости) этого метода в зависимости от целей программы/эксперимента. Другим важным аспектом является усиление гормональных влияний на млекопитающих и человека со стороны окружающей среды в современном мире. В данной работе показано, что развивающиеся in vivo зародыши мле-

копитающих являются чувствительной мишенью этих влияний. Описание последствий ранних гормональных воздействий имеет важное теоретическое значение не только для зоологии, экологии и эмбриологии, но и для осознания возможных перспектив репродуктивного здоровья различных видов млекопитающих и человека.

Многочисленные эксперименты по гормональным воздействиям на ранних этапах развития зародышей, перекрестному воспитанию и трансплантации эмбрионов позволили сформулировать важное положение о том, что эти широко применяемые на практике биотехнологические приемы сопровождаются характерными изменениями в дальнейшем онтогенезе потомков первого поколения, что важно практически учитывать в программах сохранения редких и исчезающих видов и пород. Изучение роли материнской среды в ходе ранних периодов пренатального и постнатального развития у крыс НИСАГ и ГК имеет существенное значение для понимания механизмов формирования артериальной гипертензии и каталепсии, а в более широком контексте имеет прямое отношение к важнейшей теоретической проблеме современной биологической науки: роли ранней среды развития в реализации генетически обусловленных признаков.

Основные экспериментальные результаты и теоретические выводы работы используются в курсе лекций, читаемом на факультете естественных наук в Новосибирском госуниверситете. Результаты диссертации, касающиеся изучения репродуктивной биологии европейской норки, хорька и горностая, используются в курсе лекций для студентов университета города Куопио (Финляндия). Методические приемы и новые данные, полученные в ходе выполнения данной диссертации, используются в научных исследованиях, проводимых в ИЦиГ и ИСЭЖ СО РАН, Институте прикладной биотехнологии университета Куопио (Финляндия) и в университете Айдахо (США). Областями применения экспериментальных результатов и теоретических выводов диссертации являются зоология, эмбриология, генетика, а также практика сохранения исчезающих видов и пород млекопитающих.

Апробация работы.

tion, 1996 (Warsaw, Poland). • международной конференции "Современные концепции эволюционной генетики", посвященной 80-летию акад. Д.К.Беляева, 1997 (Новосибирск) • 15-м рабочем совещании по консервации генетических ресурсов, 1998 (г. Пущино, Московская область) • Международном симпозиуме «Генетика и развитие психонейроэндокринных механизмов», посвященном памяти проф. Е.В. Науменко, 1999 (Новосибирск) • 14th International Congress on Animal Reproduction (ICAR), 2000 (Stockholm, Sweden) • 17-м рабочем совещании по консервации генетических ресурсов, 2002 (г. Пущино, Московская область) • научной конференции «Эндокринная регуляция физиологических функций в норме и патологии», посвященной 80-летию со дня рождения проф. М.Г.Колпакова, 2002 (г. Новосибирск) • International Conference on the Conservation of the European Mink, November 5-8 (Logroño, Spain) • международной научной конференции «Сохранение генетических ресурсов», 19-22 октября 2004 (Санкт-Петербург).

Структура и объем диссертации.

Материалы диссертации изложены на 265-ти страницах и включают 21-ну таблицу и 35 рисунков. Список цитированной литературы содержит 644 ссылки на статьи и монографии, в том числе 68 отечественных и 576 зарубежных.

Публикации.

Основные результаты диссертации представлены в монографии и в 35 научных статьях, опубликованных в рецензируемых отечественных и международных журналах.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Животные. Эксперименты проведены на европейской норке (M. lutreola), черном хорьке (M putorius) и хорьке фуро (М. putorius furo), а также па гибридах между этими видами (хонориках и нохориках). Хонориков получали скрещивая самцов черного хорька и самок европейской норки. Нохориков получали при обратном направлении гибридизации. Ещё один вид куницеобразных, на котором проводили исследование, - это горностай {М. ermineá). Эксперименты проводили также на крысах инбредных линий НИСАГ и WAG, а также крысах аутбредиых линий ГК и Вистар. В работе использованы мыши линий ICR, DD/Не, WR/Y, CC57BR, C57BL, DBA/2 и их межлинейные гибриды.

Методы получения, трансплантации и криоконсервации эмбрионов.

Вымывание зародышей у лабораторных животных (мыши, крысы) проводили стандартным методом при забое животных (Hogan et al., 1986). На хорьках отрабатывались наименее травмирующие технологии, позволяющие производить вымывание эмбрионов без существенного повреждения репродуктивной функции самок-доноров. Впоследствии этот подход был применен и по

отношению к европейской норке. Вымывание эмбрионов производили у наркотизированных животных, вводя среду для вымывания зародышей (Complete Embryo Flushing Solution, Emcare™, Immuno-Chemicals Ltd., Auckland, New Zealand) через канюлю в кончик рога матки таким образом, что она прокачивалась через матку и вытекала в чашку Петри через вторую канюлю, введенную в кончик другого рога матки. Эмбрионы мышей и крыс получали в течение всего года. В силу сезонности размножения куницеобразных (Терновский, Терновская, 1994; Туманов, 2003) эмбрионы у хорька и европейской норки получали во время сезона размножения. Трансплантацию зародышей (как куницеобразных, так и крыс) осуществляли всегда в рог матки самки-реципиента, прокалывая матку заостренным стеклянным капилляром, содержащим зародыши в небольшом количестве той же среды и выдавливая зародыши в просвет матки (Amstislavsky et al., 2004). У куницеобразных реципиентами служили псевдобеременные самки (псевдобсременность вызывали спариванием этих самок со стерильными самцами). У крыс трансплантацию осуществляли беременным самкам, при этом собственное потомство отличалось от потомков-трансплантантов окраской меха.

Замораживание зародышей осуществляли при помощи программного замораживателя на основе "стандартной программы замораживания эмбрионов" (Willadsen, 1977; Leibo, Songassen, 2002). В процессе замораживания и криоконсервации эмбрионы находились в пластиковых соломинах 0,25 мл (IMV, France). Эта программа была применена в двух разных модификациях. Замораживание зародышей мышей и крыс и первые эксперименты по замораживанию эмбрионов куницеобразных (хорьки) осуществляли при помощи метода 1. В этом случае в качестве криопротектора использовали раствор ДМСО (конечная концентрация 1,5 М). Соломины с зародышами охлаждали на программном замораживателе производства СКТБ Института Криобиологии и Криомедицины (Харьков, Украина) со скоростью 0,5°С/ мин до температуры минус 6°С, термостатировагги в течение 10 минут при этой температуре (в это время происходила инициация образования кристаллической фазы льда) и далее охлаждали со скоростью 0,3°С/мин до температуры минус 40°С, после чего быстро переносили соломины с эмбрионами в жидкий азот (-19б°С). Размораживали эмбрионы в водяной бане при + 38°С и производили отмывку от криопротектора при комнатной температуре.

Успешное замораживание эмбрионов куницеобразных было осуществлено при помощи метода 2. В этом случае охлаждение зародышей осуществляли при помощи программного замораживателя (Freeze Control CL856, Biogenics, Napa, CA, USA) и этиленгликоля (ЭГ, 1,5 M) в качестве

криопротектора. Программа замораживания заключалась в постепенном охлаждении соломин с эмбрионами от +15 до -6°С со скоростью 3,0 °С/мин, тер мостатир о в а н ии в течение 10 мин при этой температуре, во время чего осуществляли инициацию кристаллизации прикосновением к стенкам соломины охлажденным в жидком азоте пинцетом. После этого эмбрионы продолжали охлаждать, но уже со скоростью 0,3°С/мин до -32°С. Далее соломины с эмбрионами погружали в жидкий азот. Размораживали эмбрионы, в данном случае, в струе теплого воздуха. Некоторые зародыши подвергались отмывке от криопротектора, другие были трансплантированы без отмывки от криопротектора - в той среде, в которой они находились во время криоконсерпации.

После процедур замораживания/криоконсервации и последующего размораживания осуществляли оценку повреждений зародышей с использованием световой (Amstislavsky et al., 1996) и электронной (Кизилова и др., 1998) микроскопии. В некоторых случаях после криоконеервации культивировали зародыши in vitro (Amstislavsky et al., 2000). При работе с такими видами животных, на которых до начала нашей работы не было осуществлено успешного замораживания зародышей (куницеобразные), было необходимо получить живое потомство после трансплантации этих эмбрионов самкам-реиипиентам, что и было нами сделано (Lindeber et al., 2003). Методы изучения преимплантационного развития зародышей. Пре-имплантацнонкые эмбрионы мышей, крыс и куницеобразных (европейская норка, хорьки, горностаи) вымывали из репродуктивных путей (яйцеводов и матки) через определенные сроки после спаривания. Срок развития зародышей отсчитывали от момента спаривания. Фертильное спаривание у мышей идентифицировали по наличию влагалищной пробки; у остальных видов млекопитающих - по наличию сперматозоидов во влагалище. Отдельно извлекали зародыши га яйцеводов и рогов матки, чтобы определить сроки миграции в матку. Извлеченные из репродуктивных путей зародыши исследовали при помощи световой микроскопии при 16 — 300 кратном увеличении и фотографировали. При этом определяли диаметр зародышей, стадию развития, характерные аномалии. При необходимости зародыши подвергали гипотоническому воздействию раствора цитрата натрия, фиксировали в жидкости Карнуа и изготавливали препараты по модифицированной методике Тарковского. Кроме того, в ряде случаев применяли флуоресцентные красители, в частности, акридиновый оранжевый (АО), флуоресцеин-диацетат (ФДА) и другие. Препараты зародышей исследовали при помощи светового и/или люминесцентного микроскопа при 200 - 1000 кратных увеличениях. При этом подсчитывали число бластомеров, а также подсчитывал индекс фрагментации ядер.

Применяемые на практике методы суперовуляции/криоконсервации/

трансплантации зародышей представляют собой достаточно радикальное изменение материнской среды в ходе раннего развития. С целью моделирования развития эмбрионов в измененной материнской среде и изучения отдаленных последствий эмбриотехнологических процедур были проведены следующие эксперименты на лабораторных мышах и крысах:

1. Воздействие на эмбрионы отдельных элементов и полного комплекса процедур криоконсервации и изучение изменений в эмбрионах;

2. Изучение эффектов трансплантации эмбрионов и перекрестного воспитания по отношению к потомству и приемной матери;

3. Воздействие на преимплантационное раззитие in vivo гонадотропных препаратов (используемых для суперовуляции) и эстрогенных/ксеноэстро-генных препаратов с изучением эффектов как на само преимплантационное развитие эмбрионов in vivo, так и на половое развитие в постнатальном онтогенезе. В качестве модели гонадотропного воздействия была использована стандартная суперозуляторная схема (ГСЖК+ЧХГ), либо отдельно ЧХГ перед спариванием самок. Контролем служило введение физ. раствора и отсутствие воздействий (интактный контроль). В качестве модели ксеноэстрогенного воздействия вводили метоксихлор со 2-го по 4-й день беременности. Контролем служило введение растворителя (сезамового масла), а позитивным контролем служило введение эстрадиола.

Изучение отдаленных эффектов изменения гормональной среды в ходе раннего развития. Для изучения характера полового развития в раннем постнатальном онтогенезе у самцов и самок мышей измеряли анально-генитальное расстояние (АГР) в конце периода вскармливания (на 21-й день после рождения); у этих же животных определяли вес тела в качестве показателя общего развития. Наряду с этими двумя характеристиками, определяли долю самок с открытым влагалищем на 30-й день развития в каждой из экспериментальных и контрольных групп для изучения скорости полового созревания.

Для изучения репродуктивной функции взрослых самок был использован тест с суперовуляцией, используемый для этих целей в репродуктивной токсикологии (Eroschenko et а!., !997) в нашей оригинальной модификации. Исследуемые самки подвергались воздействию стандартной сунеровулятор-ной схемы и спаривались с самцами, а затем оценивался характер суперову-ляторного ответа и производилось взвешивание яичников.

Для изучения репродуктивных нарушений у взрослых самцов производили взвешивание таких важнейших желез, как семенные пузырьки, семенники и препуциальные железы. Для оценки функционального состояния репродуктивной функции применяли тест с предъявлением самцу рецептивной самки (Amstislavskaya, Popova, 2004; Amstislavsky et al., 2006).

Изучение последствий изменения материнской среды в ходе пренаталь-ного или раннего постнагального периодов развития. Эти эксперименты проводили на крысах линий НИСАГ, ГК и Вистар. Пары контрастирующих линий НИСАГ - Вистар и ГК - Вистар подвергали кросс- и ин-фостерингу и исследовали физиологические и поведенческие характеристики у потомства. В первом случае, наряду с кросс-фостерингом, проводили ещё и трансплантацию эмбрионов от НИСАГ к Вистар и исследовали не только потомков, но и приемную мать. Конкретные методики этой части перечислены ниже:

1. Артериальное давление измеряли в условиях легкого эфирного наркоза сфигмографическим методом (tail-cuff method): как у потомков, так и у приемных матерей в экспериментах на паре линий крыс НИСАГ-Вистар.

2. Вес тела потомков и относительный вес надпочечников определяли в экспериментах по кросс- и ин-фостерингу на паре линий крыс НИСАГ-Вистар.

3. Поведение потомков в экспериментах по кросс- и ин-фостерингу на НИСАГ-Вистар и ГК-Вистар изучали в тестах «открытое поле» и «крестообразный лабиринт» .

4. Каталепсию изучали в экспериментах на крысах ГК-Вистар при помощи специальных тестов (Korczynski, Korda, 1988; Kolpakov et al., 1996).

Раннее развитие европейской норки и эмбриотехнологические подходы к сохранению биоразнообразия этого исчезающего вида.

1. Сравнительное изучение преимплантационного развития куницеобразных: европейская норка, чёрный хорек, горностан .

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Ж г. 5-й день

А. 2-й день

б. 3-й день

в. 4-й день

■г я®-

I ггао.

ИМПЛАНТАЦИЯ

Рис.2. Стадии развития преимпланта-ционных зародышей европейской норки

Были изучены основные события преимплантационного периода и динамика роста зародышей европейской норки от овуляции до имплантации (Рис. 1-2). Овуляция у европейской норки провоцируется спариванием. В первый день после спаривания в яичниках были обнаружены преовуляторные фолликулы, однако в яйцеводах и матке — лишь сперматозоиды. На второй день после спаривания в яичниках имеются желтые тела, а в яйцеводах -овулировавшне яйцеклетки и двухклеточные зародыши. Дробление эмбрионов продолжается до 6-го дня, когда зародыши мигрируют в матку, будучи на стадии морулы/рапней бластоцисты. Начиная с 7-го дня бластоциста увеличивается в размерах, а на 10/11-й дни заметны процессы дифференцировки в ВКМ, причем к этому сроку бластоциста достигает 1,5 мм в диаметре. По нашим наблюдениям, имплантация у европейской норки происходит на 12-й день развития. Эксперименты подтвердили предположение об отсутствии диапаузы у этого вида животных. Наши данные позволяют сделать заключение о том, что динамика развития зародышей у европейской норки, сроки овуляции, перехода зародышей в матку и имплантации совпадают в целом с таковыми у хорька (М. putorius), преимплантааионное развитие которого изучалось как в наших экспериментах, так и в более ранних работах (Robinson, 1918; Hamilton, 1934; Lindeberg, 2003). Это сходство преимплантационного развития европейской норки и хорька позволило использовать последнего для отработки эмбриотехнологий, направленных на европейскую норку, а также применять межвидовые гибриды (хонориков и нохориков) в качестве реципиентов при трансплантации эмбрионов норки. В соответствии с классическими представлениями (Mead, 1989; Терновский, Терновская, 1994), по типу беременности куницеобразные распадаются на три основных группы. Европейская норка и хорек относятся к группе куницеобразных с короткой консервативной беременностью (Терновский, Терновская, 1994).

Однако существует достаточно большое число видов куницеобразных с длительной и лабильной беременностью, для которых характерна обли-гатная диапауза (Mead, 1989; Терновский, Терновская, 1994; Renfree, Shaw, 2000). Для характеристики преимплантационного развития у этой группы куницеобразных был изучен горностай (Mustela ermineá). Ранее было показано, что для горностая характерно

1000 |эоо ä«oo

•s

д700

ЗвОО Ч

°500 р)400 £зоо

ы 1200

£100

МИГРАЦИЯ • МАТХУ

7 11 34 дни

ПОСЛЕ

БЛАСТОЦИСТА НА 234-Й ДЕНЬ РАЗВИТИЯ , v> ,

СРЕЗ ЧСРСЭ ВКМ ЭТОЙ ЖЕ ВЛАЛоцИСТЫ

тгг

165

СПАРИВАНИЯ

"251

Рис.3. Основные события преимплантационного периода развития у горностая

оплодотворение юных самок взрослыми самцами (Терновский, 1983; King, 1990). Эксперимент по изучению преимплантационного развития был проведен на таких самках спаренных в юном возрасте (Табл. 1, Рис. 3; Amstislavsky et al.,1993; Амстиславский и др., 1994).

Таблица 1. Овуляция и преимилантационное развитие зародышей горностая._

День D.C. Сперматозоиды П.Ф. ж.т. Ооциты Зародыши Число животных (П)

Матка Яйцевод Яичник Яйцевод Яйцевод Матка

0* _ - + - - - - 1

1 + + + - - - - о

2 + + + - - - - 2

3 ± + + -j- + - -

4 - + - + + - - 1

7 - - - + - + - 1

9 - - - + - + - 1

11 - - - + - + 1

12 - - - + - - + 1

21-251 - - - + - - + 12

270272 - - - + - - Имплант О л.

Примечания: "+ " наличие ; " - " отсутствие, "±" наличие лишь в одном из двух случаев. *- самка была исследована до спаривания. Имплант -имплантация. П.Ф.- преовуляторные фолликулы. Ж.Т.- желтые тела. Р. с. -post coitum.

Для горностая характерны замедленное развитие эмбрионов, удлинение периодов между спариванием и овуляцией, а также более длительные сроки развития зародышей в яйцеводах (Табл.1). После попадания в матку зародыши не имплантировались в течение 8-9 мес. (диапауза), при этом диаметр зародышей увеличивался, но процессы дифференцировки во внутренней клеточной массе (ВКМ) наблюдались лишь в конце периода диапаузы, за несколько дней до их имплантации (Рис.3).

2.Тпансплантаиия эмбрионов как ключевой элемент сохранения европейскойнорки ex sifts.

Были проведены эксперименты по внутривидовой трансплантации у хорька, в том числе и при трансплантации эмбрионов от доместици-рованной альбиносной формы хорька (М. ргпог-ius furo) черному лесному хорьку (М, putorins) (Рис.4).

В общей сложности пяти самкам-реципиентам было пересажено 26 эмбрионов и родилось 13 потомков, т.е. эффективность составила 50% (Amstislavsky et al., 2000). Было произведено также пять межвидовых трансплантаций между европейской норкой и хорьком, но ни в одном из этих случаев не было рождения потомства. Следует отметить, что при межвидовых трансплантациях эмбрионов млекопитающих, зачастую, на определенной стадии беременности возникает иммунологический конфликт (Clark et al., 1984), ■аномалии формирования плаценты (Stover et al., 1981; Hammer et al., 2001; Alien, 1992; Allen et al., 1993) и другие проблемы (Anderson, 1988; Bainbridgc, Jabbour, 1998). В этих ситуациях беременность обычно прерывается, либо потомство рождается с

Рис.4. Результат одного из экспериментов по трансплантации эмбрионов от хорька фуро чёрному хорьку

СЭ контроль 5S3 трансплантация

Верхняя граница нормы

новорожденны« самцы Веохндя гсаница нормы

J I нв»Фреед*нныв самки

Нижцяв rj>j ница «ормы для» П: стф^едвнных самцов и самок

1 Н

______, ,

САМЦЫ

САМКИ

Рис. 5. Вес новорожденных у европейской норки при естественном размножении и после трансплантации эмбрионов хонорикам/нохорикам

данные для еерхней и нижней границы нормы на монографии Торновскнй. Терноеская (1994) * -Р<0,01 по сравнению с контролем ** - р<0.001 по сравнению с контролем

дефектами. Для преодоления межвидового барьера зародыши европейской порки были пересажены псевдобеременным самкам хонорика и нохорика (Табл.2).

В 2002 г. было трансплантировано 32 эмбриона европейской норки (пяти самкам хонорика и одной самке нохорика)и родилось 16

потомков (Агг^Ыаузку ег а1., 2004). Семеро из них погибли в течение первых десяти дней жизни и лишь 9 потомков выжило. Уровень постнатальной смертности в потомстве, рожденном после трансплантации (43,7%), был достоверно выше (р<0,05), чем в контроле (9,17%). Контролем служило естественное размножение европейской норки на данной ферме в этот же сезон. По всей вероятности, причиной высокой смертности в выводках, рожденных после трансплантации эмбрионов в 2002 г., было некоторое недоразвитие потомков (Рис.5).

Таблица 2. Результаты экспериментов по трансплантации эмбрионов от европейской норки хонорикам/нохорикам в течение 2002 и 2004 гг.

Самки-доноры Самки- реципиенты Выводок

Вид (п)* Возраст Число Вес, г Стадия Размер Выжило

эмбриона гранспл. псевдобере- выводка, после

(дней) бласто- менности эффектив- 10 дней

цист (дней) ность, (%)

Трансплантация эмбрионов реципиентам - хонорикам

е. норка (1)6 7 5 835 6 1(20) 0

е. норка (2)" 7,8 . 8 930 7 2(25) 0

е. норка (2)' 8,8 7 735 7 4(57) 2

е. порка (2)' 7,8 5 830 7 4(80) 4

е. Норка (2)° 7,8 7 894 7 6 (85,7) 5

е.норка(1)0-г 8 5 764 7 5 (50)д 3

+ч.хорек(1)б,г 7 5

е. норка (2)в 8,10 9 804 8 5 (55,6) 3

е. норка (2)0 10 4 720 10 1(25) 0

е. норка (1)" 7 1 835 6 0 0

Всего 56 28 (50)

Трансплантация эмбрионов реципиентам - нохорикам

е. норка (1)" 8 6 642 6 5(83,3) 3

г. норка (2)0 8,9 8 584 8 3 (37,5) 3

г. норка (1)в 11 2 656 10 0 0

Всего 16 8(50)

Примечания: е. норка - европейская норка; ч. хорёк — черный хорек (М риШгшз)\ * В скобках - число самок-доноров, использованных в каждом конкретном случае трансплантации; 6 В этих случаях эмбрионы были получены вымыванием из матки после забоя самки-донора; ' В этих случаях эмбрионы получены методом, позволяющим сохранить репродуктивные способности самки-донора; г В этом случае самке-реципиенту были трансплантированы пять эмбрионов норки совместно с пятью эмбрионами хорька.

" В этом случае в потомстве были четыре норки и один хорек.

В 2004 г. эксперимент был повторен. Сорок эмбрионов нерки европейской было трансплантировано четырем псевдобеременным самкам хонорика и двум псевдобеременным самкам нохорика. В результате родилось 20 потомков, из которых выжило 14. Таким образом, эффективность трансплантации в обоих экспериментах была на уровне 50%. Во втором эксперименте (эксперимент 2004 г.) уровень постна-тальной смертности в опытной и контрольной группах достоверно не различался. Улучшение показателей выживаемости потомков, рожденных после трансплантации эмбрионов (ТЭ), обусловлено, скорее всего, изменением рациона питания, который в 2004 г. был богаче, чем в 2002 г.; соответственно состояние кормящих матерей во втором эксперименте было лучше, с чем и связано, вероятно, снижение постнатальных потерь в ТЭ группе. Как в 2002 г., так и в 2004 г. гибель молодняка з экспериментальной группе имела место лишь до десятого дня жизни. Если же рожденные в результате трансплантации реципиентам хонорикам/нохорикам норчата выживали в течение этого периода, то дальнейшее развитие их протекало нормально (Рис.6). В возрасте 3 мес. вес самцов и самок из контрольной и экспериментальной (ТЭ) групп не различался.

3. Криоконсервацня эмбрионов куницеобрязнык.

При замораживании эмбрионов хорька с ДМСО и глицерином (метод 1) были получены противоречивые результаты. Инкубация с витальным красителем ФДА (по методике Mohr, Trounson, 1980) показала, что некоторые клетки зародыша хорька сохраняют жизнеспособность после замораживания и криоконсервации (Amstislavsky et al., 1996).

Некоторые из этих зародышей были разморожены и трансплантированы самкам-реципиентам, однако рождения потомков не было. Впоследствии, при проведении ультраструктурного анализа внутриклеточных повреждений (Кизилова и др., 1998), было показано, что в этих бластоцистах

Puc.S. Норчата рожденные в результате трансплантации эмбрионов самке-реципигнту хонорику

имеются серьезные нарушения, особенно в ВКМ. Дальнейшие эксперименты по замораживанию эмбрионов черного хорька (M putorius) проводились с использованием ЭГ в качестве криопротектора (метод 2). Эти эксперименты показали, что после замораживания, криокон-сервации и размораживания эмбрионы развиваются в культуре in vitro (Рис. 7; Amstislavsky et al., 2000). Более того, после трансплантации таких эмбрионов псевдобеременным самкам-реципиентам черного хорька рождается живое потомство (Табл.3; Lindeberg et al., 2003).

Из 8-ми самок-реципиентов, которым была осуществлена внутривидовая трансплантация зародышей хорька, перенесших замораживание и крио-консервацию, три принесли потомство. Эффективность составила 11,25 % (9 рождений после трансплантации 80 эмбрионов). Было замечено, что во время отмывки от криопротектора у хорька происходят деструктивные изменения в зародышах. Следует отметить, что некоторые эмбрионы не подвергались отмывке от криопротектора после размораживания и были трансплантированы прямо "из соломины". Если рассматривать отдельно эту группу, то эффективность процедуры была существенно выше (7 потомков после трансплантации 42-х зародышей, то есть 16,7%).

Выбранная нами программа замораживания успешно применялась для многих видов млекопитающих, и этот способ иногда называют стандартным способом замораживания эмбрионов (Leibo, Songsasen, 2002). В работе Dresser et al. (1988), в которой впервые было получено живое потомство после криоконсервации и трансплантации зародышей домашней кошки была использована сходная программа. Недавно появились сообщения о получении живого потомства после криоконсервации и последующей трансплантации эмбрионов двух других видов кошачьих, а именно - оцелота (Felis pardalis) (Swanson, 2001; Swanson, Brown, 2004) и дикой африканской кошки (Felis silvestris lybica) (Pope, 2000). Следует, однако, отметить, что до опубликования результатов наших экспериментов (Amstislavsky et al., 2000; Lindeberg et al., 2003) не было известно успешных попыток криоконсервации эмбрионов у других видов отряда Carnivora за пределами семейства кошачьих. Сложности применения методов эмбриотехнологии к

А 300 мкм Б •** IV m ®® W 300 мкм

В Г

t ^J^ü ^^^^■^^JOO мкм

мм

Рис.7. Развитие эмбрионов хорька в культуре in vitro после криоконсервации

A. Эмбрионы хорька до замораживания

Б. Те же эмбрионы после криоконсервации

B. Те же эмбрионы после 4-х дней культивирования

Г. На 8-й день культивирования один из зародышей прикрепился ко дну чашки Петри

представителям отряда хищных перечисляются в соответствующих обзорах (1а1капеп, 1993; Ра^аё, 2000). По всей вероятности, успех применения метода замораживания по отношению к куницеобразным был обусловлен, в частности, выбором ЭГ в качестве криопротектора и трансплантацией без обратной отмывки.

Таблица 3. Результаты внутривидовой трансплантации зародышей хорька (М риЮгш$) после их криоконсервации.

Номер Возраст Способ Число Стадия Число

самки- зародышей размо- пересажен- псевдобере- рожден-

донора (дней) ражи- ных менности реци- ных

вания зародышей пиента (дней) потомков

1,2,3,4 8 С 11 8 0

5,6,7 8-9 П 9 8 0

1,8 8-9 п 9 7 0

1,9,10 8 п 13 8 4

11,12,13 8 с 11 8 2

14 8 с 7 7 0

15,16 8 п 11 7 3

17,18 8 с 9 7 0*

Всего 80 9

Примечания;

4 Этот реципиент погиб в результате пиометрита через 13 дней после

операции;

С- проводилась обратная отмывка от криопротектора в растворе сахарозы; П- прямая трансплантация без отмывки (в растворе криопротектора).

4. Суперопуляция у куницеобразных.

Воздействие на самок горностая препаратом ГСЖК за 24 часа до спаривания их с самцами сопровождалось реакцией суперовуляции, но только в правой половине репродуктивного тракта (Табл. 4; Амстиславский и др., 1997). Подобная же тенденция имела место и при попытках получения суперовуляции у хорька, хотя в случае хорька эксперимент проводился на малом числе самок. Более того, наблюдалось изменение темпов развития и миграции зародышей горностая из яйцеводов в матку после гонадотропной стимуляции. В норме (без гонадотропной стимуляции) стадия морулы у горностая достигается лишь на 9-10-е сутки развития, а на 11-е сутки зародыши мигрируют из яйцевода в матку (Табл.1). Однако при воздействии препаратом ГСЖК перед спариванием зародыши горностая уже на 7-е сутки p.c. достигали стадии морулы и мигрировали в матку, что свидетельствует об

ускорении их развития и преждевременной эвакуации из яйцеводов. Метод суперовуляции применяли по отношению к хорьку (1л е1 а1., 2001), однако влияние гонадотропных препаратов на динамику развития зародышей и их миграцию в матку при этом не исследовалось. Данные, полученные на горностае, указывают на репродуктивную асимметрию у этого вида и характеризуют особенности применения метода суперовуляции по отношению к куницеобразным.

Таблица 4. Влияние препарата ГСЖК на число извлеченных зародышей у горностая

Яйцеводы и рога матки Число извлеченных зародышей

Суперовуляция Естественная овуляция

Правые 10,25 ± 0,75*# ( 5) 5,0 ±0,70 (11)

Левые 4,0 ± 0,70 (5) 4,43 ±0,52 (11)

Примечания:

молодых самок горностая либо непосредственно спаривали со взрослыми самцами проверенной фертилыюсти, либо перед спариванием вводили препарат ГСЖК (ПЗБ, Россия) в дозе 20 единиц и спаривали с самцами через 24 часа после введения препарата; *-Р< 0,001 по сравнению с естественной овуляцией;

#-Р< 0,001 по сравнению с левой стороной при гормональном воздействии; в скобках - число исследованных яйцеводов/рогов матки

Влияние процедур криоконсервации на эмбрионы млекопитающих.

Для изучения эффектов комплекса процедур криоконсервации на зародыши млекопитающих были проведены эксперименты на лабораторных животных (мышах и крысах). Выживаемость зародышей мышей линии C57BL была почти втрое выше (а гибридов и ICR х СВАМас - более чем в 3,5 раза выше) по сравнению с таковой у зародышей мышей линии DBA/2 (Табл. 5; Amstislavsky et al., 1996).

На крысах линий НИСАГ и WAG было исследовано влияние полного комплекса процедур криоконсервации и, отдельно, экспозиции в растворе криопротектора (1,5 М раствор ДМСО) на частоту фрагментации ядер в бластоцистах. Известно, что криоконсервация различных клеток может приводить к таким нарушениям, как увеличение частоты хроматидных обменов (Ashwood-Smith, Grant, 1977; Bouquet et al., 1993), образованию микроядер, фрагментаций ядер (Sathananthan et al.,1988; Schmidt-Preuss et al., 1990) и повреждению хромосом (Shaw et al., 1991). Представляется вполне обоснованным предположение о том, что именно зародыши, у которых

имеются значительные повреждения ядер бластомеров, элиминируются после их трансплантации реципиентам.

Таблица 5. Влияние фактора генотипа на выживаемость зародышей в ходе процедур криокоисервацин у мышей._

Генотип Число Число Число Выживае-

заморожен- разморожен- морфологи- мость (%)

ных ных чески

зародышей зародышей нормальных зародышей

DBA\2 43 40 8 20,0

WR\Y 128 125 27 21,6

CC57Br 16 15 5 33,3

BALB\c х WR\Y 17 16 6 37,5

C57BL 250 212 124 58,4**

DD\He x C57BL 248 238 124 52,1*

ICR x CBAUac 150 132 94 -7 j 2**

Примечание: Зародыши, у которых отсутствовали видимые повреждения после размораживания и отмывки от криопротектора хорошо развивались при культивировании in vitro. Сравнения проведены при помощи критерия %2 с поправкой Yates. * - Р<0,05; **- Р<0,01 по сравнению с выживаемостью у мышей DBA/2

Как у крыс НИСАГ, так и у WAG частота фрагментации ядер была достоверно выше в эмбрионах, прошедших процедуру криоконсервации (по сравнению с интактными контролями). В результате криоконсервации показатель фрагментации ядер возрастал в 10,3 раза в зародышах у гипер-тензивных крыс НИСАГ и всего лишь в 4,3 раза в зародышах крыс нормотензивной линии WAG (Табл.б). Эти различия являются, очевидно, проявлением избирательной криоселекции в зависимости от генотипа замораживаемых зародышей, что также проявлялось и при заморозке зародышей мышей (Табл.5). Следует отметить, что криоконсервация является комплексным воздействием, и необходимо оценить роль такого фактора, как экспозиция в растворе криопротектора. В результате экспериментов, было установлено, что экспозиция зародышей крыс в 1,5 молярном растворе ДМСО сама по себе не приводит к разрушению ядер, а лишь полный комплекс процедур криоконсервации (включая замораживание) сопровождается возрастанием уровня фрагментации ядер бластомеров в эмбрионах.

Таблица 6. Влияние криоконсервации на частоту фрагментации ядер (ФЯ) в бластоцистах крыс НИСАГ и WAG._

Экспериментальная Число Число Доля Индекс

группа (п) зароды- ядер зародышей фрагментации

шей с ФЯ (%) Ядер (%)

WAG - контроль (6) 32 997 9/32 (28%) 18/997 (1,8%)

WAG - крио (9) 33 933 24/33 (75,0 %) 72/933 (7,72%) **

НИСАГ - коитр (6) 26 708 5/26 (19,3%) 9/708 (1,3%)

НИСАГ - ДМСО (6) 18 478 3/18(5,5%) 3/478 (0,63%)

НИСАГ-крио (6) 22 508 16/22 (72,7%)* 68/508(13,4%) **#

Примечание: *-р<0,05; **-р<0,001 по сравнению с контролем; #- Р<0,01 по сравнению с соответствующей группой крыс линии WAG; в скобках (п) указано число исследованных самок.

Онтогенетические и эмбриотоксические эффекты гонздотр очных, эстрогенных и ксеноэстрогенпых воздействий на пренмплаптацноиное развитие млекопитающих in vivo.

Были исследованы последствия введения экзогенных гонадотропных или эстрогеиных/ксеноэстрогенпых препаратов непосредственно до и/или во время преимплантационного периода развития у мышей. С этой целью мышам взодили перед спариванием либо суперовуляторную комбинацию гонадотропинов (ГСЖК + ЧХГ), либо только ЧХГ. В параллельной серии экспериментов в первые дни беременности мышам вводили эстрогенные препараты (эстрадиол или МКХ).

1. Влияние изменений гормональной среды на преимплантацнонное развитие зародышей млекопитающих.

Даже без специального анализа можно заметить, что все применявшиеся гопадотроиные и эстрогенные воздействия приводили к тому, что некоторое число зародышей задерживалось в яйцеводах на 4-й день развития (Рис. 8 А, В; Amstislavsky et al., 2003). В обеих контрольных группах практически все зародыши были извлечены из матки, что соответствует данным литературы о том, что миграция зародышей из яйцевода в матку у мышей имеет место преимущественно через 60-94 часа после овуляции (Handyside, Hunter, 1986; Hardy, Spanos, 2002; Stanton et al., 2003).

Таким образом, сравнительный анализ показал, что воздействие па развитие зародышей мышей in vivo гормональными препаратами, которые

ЯЙЦЕВОДЫ Г"1 МАТКА ш ВСЕГО

гзпоэлмис бластоцисты С2 PAHHMi И ОЧДНМк ЬНАСТОЦИСТЫ С 5 АНОИЛЛЬИЫЬ ЫМСТОШСТЫ «ОТСТАВШИЕ (МОРУПЫ, ДРОБЯЩИЕСЯ) Ca/ttrCHtCHPObAUME .

РОЛЬ ЧХГ ГОкЖ » ЧХГ

** * i г?

JilliL

9-М

Рис.8. ЭсЬсЬекты гоналотоопных и эстрог^ных препаратов на .развитие зародышей и их миграцию из яйцеводов в матку

*Р<0,05; **Р<0,01; **"Р<0,001 по сравнению с контролем А. Влияние гонадотрслинов на миграцию эмбрионов из яйцеводов в матку Контроль«мнтактные самки 1п«10>; ЧХГ • ЯЕ<8егопо). (п*10) ~------------------------""ЖК - 5 1Е <3(дта) + ЧХГ <8егопо>, (пМ2)

Супероауляторная схема:_Г СЖК Б. Влияние гоналотпопинов ГСЖК i

lEiSigmaH .... __________

Хг на развитие эмбрионов,

......................................с.А

В. Влияние разных лоэ эстоалиола {Э> и кееноэстрогена метоксихлора (МКХ)

Ra миграцию эмбрионов из яйцеводов в матку

онтропь: сезамовое масло - CM (Sigma) на 2-4 дни беременности (п*14)

_ .. _____ _______,____!-4 дни беременности(п*10£

3-2.5 • эстрадиол (5:Ьта, 2.5 мкг) на 2-й день Беременности (п«71

МКХ -метоксихлор (31дта, 0,5 мг) на 2-4 дни береь----------'— "

Г. Влияние Э и МКХ на развитие эмбрионов. Дозы и

дни^ёременности"(п= 2^) - "— • •'«как на Рис. В

Iя

А Б

*- Р<0,01 по сравнению с ннтактным контролем (КИ) Р<0,001 по сравнению с интакгным контролем (КИ) маслом (КМ) КИ - контроль интактный (п"5;28) > КМ - контроль масло - 0,03 мл

(п=10;76) I Э'2,5 • эстрадиол в дозе 2,5 мкг (п«5; 19) Э-10 - эстрадиол в дозе 10 мкг

(п*9; 41) МКХ - метокснхлор в дозе 0,5 мг

(пк9; 66) ЧХГ - 5 |и перед спариванием (п-4: 33) | ГСЖК + ЧХГ - стандартная суперовулятормаясхема(п=12; 105)

Рис. 9. Влияние экзогенных гормонов на ядра

бластомеров лреимплзнтацнонных зародышей мышей А - Среднее число клеток в зародышах после разных воздействий Б - Суммарный индекс ФЯ в зародышах разных групп В - Микрофотография типичной фрагментации ядра масштабная полоса 10 мкм

прямо (эстрадиол, МКХ) или косвенно (гонадотро-пин ЧХГ) влияют на эстра-диоловые рецепторы (ЭР), приводит к задержке миграции некоторого числа зародышей в матку, причем в случае эстрадиола наблюдалась зависимость выраженности эффекта от дозы препарата.

D контрольных группах бластоцисты (на 4-й день развития) составляли чуть более 80 % всех зародышей (Рис. 8 Б, Г). В большинстве случаев это были ранние и средние бластоцисты, но имелось достаточно много и поздних бластоцист. Менее 20% всех зародышей имели признаки отставания в развитии или признаки дегенерации. Это соответствует нормальной динамике развития зародышей, так как образование бластоцеля имеет место у мышей через 66-96 часов после овуляции (Handyside, Hunter, 1986; Hardy, Spanos, 2002; Stanton et al., 2003).

Примененные гормональные воздействия приводили либо к достоверному снижению доли бластоцист, либо к достоверному возрастанию доли

отставших в развитии зародышей; иногда имели место оба этих процесса (Рис.8). В результате введения различных экзогенных гормональных препаратов доля аномальных и отставших в развитии зародышей во всех экспериментальных группах составляла около 50%. Кроме того, после всех гормональных воздействий (как эстрогенных/ксеноэстрогенных, так и гона-дотропных) возникали бластоцисты с двумя бластоцелями.

С целью более детального исследования эффектов воздействия экзогенных гормонов были приготовлены и изучены сухо-воздушные препараты эмбрионов. Было посчитано среднее число бластомеров по группам и посчитан суммарный ИФЯ (Рис. 9). Как показано ранее, в ходе нормального развития мышиных (Brison, Schultz, 1998) или крысиных (Pampfer et al., 1997) бластоцист in vivo ИФЯ составляет 2-3%. Именно такой ИФЯ был характерен для контрольных групп. Воздействие же ксеноэстрогена МКХ, а также гонадотропинов (ЧХГ или ГСЖК + ЧХГ) сопровождалось возрастанием эгого показателя до 10-15%, что достоверно выше, чем в контрольных группах (Рис. 9 Б). Кроме того, во всех экспериментальных группах наблюдалось снижение числа среднего бластомеров в эмбрионах (Рис. 9 А), что свидетельствует о тормозящем эффекте использованных гормональных препаратов на развитие зародышей.

2. Отдаленные эффекты изменения гормональной среды в ходе ранней беременности на общее и половое развитие потомков.

Воздействие на развивающиеся in vivo зародыши мыши каким-либо из препаратов (эстраднолом, ксено-эстрогеном МКХ или гона-дотропином ЧХГ) приводило к размыванию полового диморфизма в потомстве (Рис. 10 А, В). Во всех экспериментальных группах наблюдалась демаскулиниза-ция самцов, выражавшаяся в уменьшении значений АГР (Amstislavsky et al., 2004). В большинстве экспериментальных групп (кроме группы МКХ) наряду с признаками демаскулиниза-

чхг.S ~' ЧХГ-10

Я 4 2

Л1- с«

ксщршь ЧХГ -5

В г

Рис. 10. Постнатальмые эффекты воздействия гонадотропных и эетрогенных гормонов на развивающиеся зародыши мышей

АГР измеряли на 21' * День жизни. * -Р<0,001 по сравнении» скоктраг№м; # - Р<0,001 по сравнению с группой Э

А ■ АГР поел« пренатального воздействия разных доз ЧХГ Б - вес тела у тэк же животных 8 - АГР после пренатзльного воздействия Э или МКХ Г - вес тела у тех же ж* вотных

ЧХГ с дозе 5 IE или to IE вводили непосредственно лер*д с п войнам ив м ЧХГ-5: самцы (п=5Ч) самки <r«S«!; ЧХГ-10: самцы (п^ЗВ), самки <п=о41 контроль: самиы (п-Ч4), самки (л >4 5) МКХ в «о» 4 мг (в 0.5 мл СМ) вводили на 24 дни (top.; с&мии(п*39), свмки(п-»4) Эв дозе 1 мп (с 0.9 мл СМ) вводи пи на 2-Й А«нь вер.; г«мцы(пв$в|1 смосн{п«4А) контроль • введение р«стаорит«ля (СМ): самцы (п«&в), с*икм(п»47)

ции у самцов имелись признаки маскулинизации самок, что выражалось в увеличении у них АГР по сравнению с контролем. Отсутствие же видимых признаков маскулинизации у женского потомства в группе МКХ связано, очевидно, с отставанием в развитии крысят этой группы (Рис 10 Г). С этим же обстоятельством связано, очевидно, и наблюдаемое в группе МКХ усиление признаков демаскулинизации у самцов. Как установлено ранее, АГР в раннем постнатальном онтогенезе мышей определяется не только пренатальным уровнем тестостерона (Clemens et al., 1978), но также и воздействием ксеноэстрогенов или антиандрогенов во время пренаталыюго онтогенеза (Kelce et al., 1995; Palanca et al., 2001). Однако, совершенно очевидно, что АГР зависит и от размеров животных, что и показано ранее Palanca et al (2001). Скорее всего, в группе МКХ, как и з других экспериментальных группах, наряду с уменьшением АГР у самцов имело место увеличение АГР у самок. Однако из-за того, что МКХ обладал еще и токсическим эффектом, мышата этой группы отставали в общем развитии (Рис 10 Г). По этой причине эффект демаскулинизации у самцов был в данной группе наиболее выражен, а маскулинизация самок, наоборот, оказалась замаскированной.

У самок, подвергавшихся воздействию экзогенных эстрогенов/ксе-ноэстроггнов или гонадотропина ЧХГ во время преимплантационного периода, наряду с маскулинизацией был обнаружен эффект ускорения полового развития (Табл. 7; Amstislavsky et al., 2004).

Таблица 7. Отдаленные эффекты гонадотропина ЧХГ, эстрадиола и ксеноэстрогена МКХ на темпы полового созревания потомства (самок).

Группа Число Состояние вагины самок Значение

самок/ на 30-й день жизни критерия х2

вывод- открыта закрыта открыта с поправкой

ков L(%) Yates

Эстрогенные/ ксеноэстрогенные воздействия

Контроль 47/11 7 40 14,9

(СМ)

МКХ (5 мг) 66/18 26 40 39,4 6,83**

Э (1 мкг) 56/ 15 23 33 41,1 7,26**

Гонадотропные воздействия

Контроль 45/9 4 41 8,9

(физ. раствор )

ЧХГ-5 IU 31/6 6 25 19,4 0,44

ЧХГ-ЮШ 30/6 17 13 56, 7 9,13*

Примечания: СМ - сезамовое масло; *-Р<0,01; **-Р<0,001 — по сравнению с контролем; ЧХГ(РгоГа51, Бегопо, Италия) вводили в дозах 5 или 10 Интернациональных единиц (Ш).

3. Отдаленные эффекты изменения гормональной среды п ходе раяией беременности на репродуктивный статус взрослых самцов и самок.

Самцы из групп МКХ и Э были исследованы и во взрослом состоянии. Функциональные тесты на проявление половой активации по подъему уровня тестостерона в присутствии эстральной самки продемонстрировали, что у самцов экспериментальных групп (групп эстрадиола и метоксихлора) имеются серьезные нарушения половой активации как в 3-х, так и 6-ти мес. возрасте. Кроме того, в возрасте б мес. у самцов из обеих экспериментальных групп наблюдалось увеличение относительного веса семенных пузырьков (Р<0,001).

Самки этих же групп также были протестированы. Функциональный тест (суперовуляция) достаточно часто используется в репродуктивной токсикологии для выявления отдаленных эффектов применения тех или иных гормонально активных препаратов (ЕгоясЬепко й а1., 1997). Проведение такого теста на самках мышей из групп Э или МКХ выявило, что такие воздействия, осуществленные во время преимплантационного развития, приводят к изменению характеристик реакции суперовуляции у взрослых самок. Около 80% суперовуляторного ответа в контроле составляли зиготы со сформированными пронуклеусами и лишь около 20% - отставшие в развитии ооциты (в том числе и с признаками аномалии). В группах Э и МКХ имелось лишь 20-40 % зигот, а процент аномальных ооцитов превышал в обеих группах 50%. Кроме того, в обеих экспериментальных группах имела место полиспермия.

Прямые и обратные эффекты изменения материнской среды в раннем пренатальном/раннем постнатальном развитии млекопитающих.

В данном разделе исследовано, как влияет изменение материнской среды в раннем пренатальном онтогенезе (трансплантация эмбрионов) и раннем постнатальном онтогенезе (перекрестное воспитание) на проявление гипертензивного и каталептического фенотипа у крыс. Эксперименты проводились на контрастных по данным признакам линиях крыс НИСАГ -Вистар (наличие - отсутствие генетически обусловленной гипертензии) и ГК - Вистар (наличие - отсутствие генетически обусловленной каталепсии). На первой паре линий исследовали влияние трансплантации эмбрионов и перекрестного воспитания как на потомство, так и на приемную мать. На второй паре линий крыс исследовали влияние перекрестного воспитания на потомство.

1. Последствия изменений материнской среды в раннем пренатальном онтогенезе на формирование гипертензивиого фенотипа у крыс НИСАГ.

В наших экспериментах АД в покое у взрослых крыс НИСАГ (под легким эфирным наркозом) и при стрессе (рестрикция) было достоверно выше, чем у крыс Вистар. У взрослых самцов линии НИСАГ АД в покое было на уровне 170 мм рт. ст., что соответствует более ранним наблюдениям (Магке1 е1 а1., 1999). Дальнейшие эксперименты показали, что если крысят НИСАГ с первого дня жизни воспитывает приемная мать нормотензивной линии Вистар, то п-шертешия у них развивается медленнее и менее выражена, чем у контрольных крыс НИСАГ. Смягчение признаков гипер-тензии наблюдалось и у крыс НИСАГ рожденных самками-реципиентами линии Вистар в результате трансплантации эмбрионов (Рис. 11 А).

В обеих этих группах наблюдалось также снижение общей двигательной активности, что особенно было выражено после трансплантации эмбрионов (Рис. 11 Б, В). При воспитании крысят Вистар приемными матерями НИСАГ каких-либо изменений поведения или развития гипертен-зии обнаружено не было (Рис. 11).

Те же самые группы крыс были исследованы в тесте «крестообразный лабиринт». Крысы всех групп (кроме группы трансплантантов) периодически

заходили в открытые рукава лабиринта и проводили там некоторое время. Рожденные же в результате трансплантации эмбрионов крысы НИСАГ заходили в закрытый рукав лабиринта и уже не выходили из него на протяжении б-ти минут теста. Таким образом, результаты теста «открытое поле» и «крестообразный лабиринт» свидетельствуют о том, что трансплантация зародышей оказала самостоятельное (а не только опосредованное через перекрестное воспитание) влияние на поведение потомков, что выразилось в снижении у лих двигательной активности и усилении тревожности.

.О.

25100

1 80

о ее

о 40

£ 20

а 0

-и

*-Р<0.06. *»-Р<0,001 п Мкр<0.001 г

| сравнению е вистар > «равнению с НИСАГ

»ксперимант гш сами« » возраст* 4 мае.

8 • Внсгар К•НИСАГ

п " в

Рис.11. Влияние перекрестного воспитания и трансплантации эмбрионов крыс НИСАГ- Вистар на артериальное давление потомков

A. Артериальное давление в покое и при стрессе после кросс-фостеринга или ТЭ

Б. Обшая локомоторная ахтивность в тесте "открытое поле" после кросс-фостеринга или ТЭ

B. Вертикальная активность в тесте "открытое поле" после кросс-фостеринга или ТЭ

2. Обратное влияние трансплантации эмбрионов и/или приемного воспитания на приемную мать.

Во всех ситуациях воспитания генетически чужеродного потомства наблюдалось достоверное (хотя и транзиторное) повышение АД у приемных матерей. Это имело место при трансплантации эмбрионов от крыс линии НИСАГ реципиентам Вистар (Рис. 12 Б; Амстиславский и др., 1997), кросс-фостеринге (Рис. 12 В,Г; Амстиславский и др., 1999), ин-фостеринге (Рис. 12 Б). Однако в контроле (ложная операция, воспитание собственного потомства) АД у самок не повышалось (Рис. 12 А, Д).

A. Динамика АД у 10-ти самок-рецигшентоз Вистар, которым трансплантировали эмбрионы крыс НИСАГ, но не было имплантации (контроль).

Б. Динамика АД у 6 самок-рсципиентов Вистар при трансплантации им зародышей ог крыс линии НИСАГ, при развитии этих зародышей до рождения и последующем вскармливании выводков.

B. Динамика АД у 13 самок Вистар после приемного воспитания крысят линии НИСАГ (кросс-фостеринг). Г. Динамика АД у 12 самок НИСАГ после приемного воспитания крысят линии Вистар (кросс-фостерннг). Д. Динамика АД у 8 самок Вистар, которые размножались естественным путем и вскармливали собственное потомство (контроль). Е. Динамика АД у 11 самок Вкстар, после приемного воспитания крысят Вястар (ин-фостерипт).

Рис. 12. Изменение АД у самок крыс после воспитания ими приемных крысят (кросс- ; ян-фостеринг и трансплантация эмбрионов). *-Р<0,05; **-Р<0,01; ***-Р<0,001 по сравнению с исходным АД. Значения АД предстазлены как М±т; по оси абсцисс - число месяцев после рождения потомства.

^ га Н

1Я П Г-1

ш з: х

Ш но С; 1»

ы < »

сс

м с <,

г, о. ш , н

с. <

1,5 3 Г

По всей вероятности, при приемном воспитании (как при кросс-, так и при пн-фостеринге) физиологические последствия в виде транзиторного повышения АД у приемных матерей являются той "ценой" за усиление материнской заботы, которая, как показано Maccari et al. (1995), возникает при усыновлении приемных крысят.

Можно высказать также некоторые предположения, касающиеся возможных механизмов этого феномена. Известно, что крысята активно воздействуют на мать посредством разного рода сигналов, например, путем вокализации в ультразвуковом диапазоне (Gourevitch, Hack, 1966), причем при сгрессировании крысят эта вокализация усиливается (Bell, 1974), что вызывает возбуждение у их матерей (Wright et al., 1977). Такого рода механизм может, в частности, быть причиной транзиторного повышения артериального давления во всех группах приемных матерей, так как и кросс-, и ин-фостеринг являются, вероятно, стрессом для крысят, и такого рода изменения материнской среды в раннем постнатальном онтогенезе могут приводить к усиленной вокализации. Важнейшим механизмом взаимодействия между матерью и потомством у мышей и крыс являются также ольфакторные сигналы (Leon, Moltz, 1971; Новиков, 1988; Levy et al., 1996), которые могут быть ключевыми в идентификации/различении своего собственного потомства от чужеродного и играть важную роль в механизмах обнаруженного феномена.

Следует отметить, что транзиторный подъем кровяного давления наблюдался у самок в тех случаях, когда они вынашивали и воспитывали (либо лишь воспитывали) генетически чужеродных (и, следовательно, антигенно отличных) потомков. В случае же вынашивания и воспитания своего собственного потомства подобного транзиторного подъема кровяного давления не наблюдалось. Это расширяет представления о взаимоотношениях в системе «мать-потомство», поскольку ранее систематически изучалась роль генетически контролируемых взаимоотношений мать-плод в онтогенетическом становлении адаптивных признаков потомков (Евсиков и др., 1998; Gerlinskaya, Evsikov, 2001), но отсутствовали данные о том, как влияет вынашивание или воспитание генетически чужеродного потомства на физиологию приемных матерей.

В случае трансплантации эмбрионов НИСАГ самкам-реципиентам Вистар, приемные матери воспитывают генетически чужеродное потомство. Однако изменение материнской среды у крысят происходит не в постнатальном, а в раннем пренатальном онтогенезе. В этом случае повышение АД у приемных матерей имеет более длительный характер (Рис.12 Б). Кроме того, потомство в этом случае отличается снижешюй двигательной активностью и тревожностью (Рис. 11 Б, В). По всей вероятности, оба феномена являются следствием стресса во время беременности.

Беременность у крыс достаточно короткая - всего 21-22 дня, поэтому последствия хирургической трансплантации, проведенной на 4-й день беременности, могут сказываться на состоянии потомков. Известно, что пренатальный стресс, в том числе, и в самом начале беременности, приводит к тому, что потомство теряет способность адекватного реагирования на стрессовые ситуации и становится более стрессируемым (Вгааз1а<3, 1998). Увеличенная же стрессируемость потомства может, в свою очередь, приводить к напряжению взаимодействий в системе "мать-потомство" в течение периода вскармливания и, таким образом, вызывать повышение АД у самок-реципиентов, воспитывающих это потомство. В то же время, хирургические воздействия при трансплантации эмбрионов сами по себе не приводят к повышению АД у самок Вистар, так как при отсутствии имплантации трансплантированных эмбрионов подъем АД не возникал (Рис.12 А). 3. Изменение материнской среды во время постнатального развития крыс ГК: отдаленные эффекты приемного воспитания.

СГЭ Вистар

100 80

е>

160

120

о.

ш 80

КОНТРОЛЬ КРОСС-ФОСТЕР ИН-4ЮСТЕР

I . 4

КОНТРОЛЬ КРОСС-ЛОСТЕР ИН.ФОСТЕР

Рис.13. Проявление каталепсии у крыс ГК 8 зависимости от типа воспитания

А. Щипковая катвлепсия у крысят ГК и вистар в возраст« г-ч недель при кросс- и ии- фостеринг* и в контроле (число крысят в группах 63-118)

Б. Врами застывании у 2-х месячных самцов ГК и Вистад в тест» "открыто* пол*" поел* кросс- и ин-фостеринга и в контроле (число животных в группах 3-13)

'-Р<0.СБ; *"-Р<0,001 по сравнению с Вистар ♦^40,01; #»-Р<0,П01 по сравнению с НИСАГ

В экспериментах по перекрестному воспитанию крыс линии ГК и Вистар было показано, что имеет место коррекция такой девиантной формы поведения, как каталепсия (Амстислав-ский и др., 2000; Колпаков и др., 2001, 2002; Атэ^аУБку й а1., 2001). Выраженность этой реакции была у крыс ГК, воспитанных приемными матерями Вистар, существенно ниже, чем у крыс ГК, воспитанных их естественными матерями. Это, в частности, было выражено уже в возрасте 2-х недель при применении теста «щипковая каталепсия» (Рис.13 А), а также при применении теста "открытое поле " в возрасте 2 мес. (Рис. 13 Б).

Проявление каталепсии хорошо корригировалось приемным воспитанием. Во всех случаях воспитания крысят ГК приемными матерями Вистар проявление каталептической реакции у них снижалось. Этот обнаруженный нами факт особенно интересен,

если учесть два важных обстоятельства.

Во-первых, у крыс Вистар, у которых отсутствовала генетическая предрасположенность к каталепсии, не удавалось сформировать «каталептический фенотип» даже если их воспитывали приемные матери линии ГК.

Во-вторых, как показал тест «открытое поле», другие поведенческие характеристики, такие, например, как общая (горизонтальная) и вертикальная двигательная активность, не были подвержены столь существенным изменениям при перекрестном воспитании, как «каталепсия» (Amstislavsky ct al., 2001).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В данной работе впервые изучено преимплантационное развитие у исчезающего вида - европейской норки. Для сравнения было также изучено преимплантационное развитие у горностая и хорька. С учетом специфики преимплаитационного развития европейской норки была отработана модель трансплантации эмбрионов от европейской норки гибридным самкам-реципиентам (хонорикам/нохорикам). На хорьках был освоен метод прижизненного получения зародышей без ущерба для дальнейшей репродукции самок-доноров и изучены оптимальные условия для трансплантации эмбрионов. Эти методы были применены и по отношению к европейской норке. Результаты наших экспериментов (главным образом, на хорьках) показали, что эмбрионы куницеобразных можно подвергать замораживанию при использовании этиленгликоля в качестве криопротектора и хранить при температуре жидкого азота, причем после размораживания эти эмбрионы способны развиваться как in vitro, так и in vivo. Этот положительный результат делает возможным создание криобанков исчезающих видов куницеобразных. В то же время, эти исследования продемонстрировали, что традиционные и наиболее часто применявшиеся криопротекторы (ДМСО и глицерин) не пригодны для замораживания и криоконсервации эмбрионов куницеобразных. Было показано, что применение гонадотропных гормонов влияет на скорость развития зародышей куницеобразных и сроки их миграции из яйцеводов в матку, в связи с чем следует с особой тщательностью подбирать суперовуляторную схему или вообще отказаться от применения метода суперовуляции по отношению к куницеобразным. На основании полученных результатов можно рекомендовать заморажива-ние/криоконсервацию и трансплантацию эмбрионов европейской норки в качестве методов сохранения биоразнообразия этого вида, дополняющих традиционные мероприятия (разведение в неволе, ре-интродукция в природу).

Наряду с изучением особенностей европейской норки и разработкой эмбриотехнологических подходов к сохранению исчезающих видов куницеобразных, были исследованы отдаленные эффекты эмбриотехнологических

процедур по отношению к млекопитающим. Было показано, что при крио-консервации зародышей линейных мышей стандартным способом имеется выраженная криоселекция, причем выживаемость зародышей зависит от их генотипа. Этот фактор следует учитывать при создании криобапков популяций диких видов млекопитающих, так как структура популяции может измениться после криоконсервации.

Были прослежены эффекты воздействия гонадотропных и эстрогснных гормонов в ходе преимплантационного развития in vivo и охарактеризованы отдаленные последствия этих воздействий по отношению к половому развитию и созреванию в постнатальном онтогенезе. Кроме того, охарактеризованы эффекты изменения материнской среды в раннем пренатальном или раннем постнатальном онтогенезе. Такого рода изменения имеют место, в частности, при трансплантации эмбрионов. Было показано, что трансплантация эмбрионов может приводить к изменению поведения у развившихся из этих эмбрионов потомков, В то же время, изменение материнской среды может приводить к смягчению развития генетически обусловленной патологии, что имеет место, например, при воспитании крысят НИСАГ или ГК приемными матерями Вистар.

Таким образом, изученные в данной диссертации базовые эмбрио-технологические процедуры (трансплантация/криоконсервация эмбрионов, суперовуляция) могут отражаться на некоторых физиологических и поведенческих характеристиках потомков и самок-реципиентов. Тем не менее, потомки, полученные в результате трансплантации/криоконсервации эмбрионов куницеобразных, характеризовались совершенно нормальной способностью к размножению и каких-либо существенных аномалий у этих животных обнаружено не было. Описанные в данной диссертации эмбрио-технологические подходы не отменяют традиционные способы сохранения биоразнообразия исчезающих видов млекопитающих, а являются инструментом, позволяющим сделать их более эффективными. Криоконсервация эмбрионов, как известно, позволяет создать генетический банк в виде хранящихся в замороженном состоянии зародышей, что позволяет сохранять биоразнообразие вида и существенно облегчает обмен генетическим материалом между различными центрами. В будущем, вероятно, этот подход, наряду с охранными мероприятиями, разведением в неволе и ре-интродукцией в природу, будет реализован в национальных и интернациональных программах сохранения биоразнообразия европейской норки.

ВЫВОДЫ

1. Впервые изучено преимлантационное развитие эмбрионов европейской норки (М lutreola), что было сделано в сравнении с черным хорьком (М putorius) и горностаем (М ermineá). Преимлантационное

развитие европейской норки имеет длительность 12 дней и сходно с ранним развитием черного хорька. В частности, миграция зародышей из яйцеводов в матку у европейской норки и у хорька происходит на 6-й день после спаривания. В силу сходства преимплантационного развития европейской норки и хорька представляется целесообразным использовать последнего в программах, имеющих целью сохранение европейской норки.

2. Способы получения и трансплантации эмбрионов куницеобразных были отработаны на хорьке и впервые применены по отношению к европейской норке. Трансплантация эмбрионов от европейской норки межвидовым гибридам норки и хорька (хонорикам или нохорикам) приводит к рождению потомства в 50% случаев, а 56-70% полученных таким образом потомков выживает. Разработанная модель трансплантации может быть использована для сохранения европейской норки. Сходная модель (трансплантация эмбрионов от самок-доноров исчезающего вида межвидовым гибридам) может применяться и для сохранения других видов млекопитающих.

3. Впервые проведены успешные эксперименты по криоконсервации эмбрионов куницеобразных. На хорьке было проведено сравнение разных условий замораживания-оттаивания зародышей, в частности, сравнение трех различных криопротекторов. Было продемонстрировано, что зародыши хорька после процедур замораживания/криохранения/оттаивания были способны к дальнейшему развитию в условиях in vitro и in vivo, и было получено живое потомство. Эти результаты дают основание утверждать, что создание криобанков эмбрионов следует рассматривать в качестве реальной возможности сохранения биоразнообразия исчезающих видов куницеобразных. В то же время в наших экспериментах на разных линиях мышей выживание зародышей после криоконсервации составило от 20 до 71 %, в зависимости от их генотипа. Эти результаты свидетельствуют о том, что при криоконсервации эмбрионов может иметь место криоселекция, и этот фактор следует учитывать при создании криобанков исчезающих видов млекопитающих.

4. Впервые изучены особенности преимплантационного развития и суперовуляторного ответа у горностая. Периоды между спариванием и овуляцией, овуляцией и миграцией зародышей в матку, а также сроки переживания сперматозоидов в репродуктивных путях у горностая удлинены, и имеется период длительной диапаузы (9 мес.). Воздействие на самок горностая гонадотропным препаратом ГСЖК сопровождалось более ранней миграцией зародышей в матку и их ускоренным развитием. Более того, воздействие препаратом ГСЖК выявляет функциональную асимметрию репродуктивной системы у этого вида куницеобразных, так как суперовуляторный ответ наблюдали главным образом со стороны правого яичника.

5. Гормональные воздействия, влияющие на уровень и соотношение

половых гормонов, вызывают изменения в развитии преимплантационных зародышей (нарушение миграции из яйцеводов в матку, изменение темпов их развития, появление характерных аномалий, усиление фрагментации ядер), а также приводят к изменениям в половом развитии потомков в период вскармливания (демаскулинизация самцов, ускорение полового созревания и маскулинизация самок) и нарушению репродуктивного статуса во взрослом состоянии. То, что гонадотропные препараты, подобно эстрогенам и ксеноэстрогенам, при воздействии на развивающиеся in vivo зародыши млекопитающих приводят к отдаленным эффектам на состояние репродуктивной системы потомков, следует учитывать при применении метода суперовуляции на различных видах млекопитающих.

6. Эксперименты по трансплантации эмбрионов и перекрестному воспитанию проведенные на различных линиях крыс (НИСАГ, ГК, Вистар) показали, что эти процедуры не являются нейтральными по отношению к потомкам и приемным матерям/самкам-реципиентам. В частности, выяснилось, что у предрасположенных к гипертензии крыс НИСАГ, воспитанных приемными матерями Вистар, существенно увеличен вес надпочечников и снижена двигательная активность, а у самих приемных матерей Вистар возникает временный подъем кровяного давления. Поведение крыс НИСАГ, рожденных в результате трансплантации эмбрионов самкам-реципиентам линии Вистар, также изменено в сторону снижения двигательной активности и возрастания тревожности, причем в ещё большей мере, чем при приемном воспитании. В то же время, у крыс НИСАГ, выношенных и/или воспитанных самками линии Вистар, развитие гипертензии замедлялось и смягчалось. Эти эксперименты свидетельствуют о том, что изменения материнской среды, в частности, при трансплантации зародышей могут оказывать смягчающее действие на проявление генетически обусловленных патологий, хотя при этом может возникать обусловленное генетической чужеродностью напряжение в системе мать-потомство, что приводит к нарушениям поведения и другим характерным последствиям.

7. «Материнская среда» является важнейшим фактором формирования каталепсии у крыс линии ГК. Подсадка на воспитание приемным матерям линии Вистар новорожденных крысят ГК существенно замедляет и смягчает развитие каталепсии у последних, причем даже в возрасте 6-ти мес. проявление каталепсии у таких животных выражено существенно слабее, чем у их сверстников, воспитанных естественными матерями крыс ГК. Эксперименты на крысах альтернативных линий НИСАГ-Вистар и ГК-Вистар указывают на то, что материнская среда может влиять на развитие генетически обусловленной патологии (гипертензии и каталепсии, соответственно), но при отсутствии у потомков генетической предрасположенности сама по себе " чужая" материнская среда этой патологии не вызывает.

СПИСОК ОСНОВНЫХ ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Монография:

Амстиславский СЛ., Максимовский Л.Ф., Воротников М.Т. Методы биотехнологии в практике разведения животных. Новосибирск: Изд-во ИЦиГ, 1991. 170 С. Статьи:

1. Амстиславский С.Я., Максимовский Л.Ф., Файзуллин Р.З., Голубица А. Н., Железова А.И., Манзюк A.B. Использование гонадотропных препрартов для индуцирования суперовуляции у разных линий мышей // Сиб. биолог, журнал. 1991. Вып. 6. С. 27-31.

2. Редина O.E., Амстиславский СЛ., Максимовский Л.Ф., Кузнецов В.Е., Елизарова И.Б. Суперовуляция у двух видов лабораторных животных при введении им гонадотропина СЖК в разные фазы астрального цикла // Сиб. биолог, журнал, 1992. С. 24-28.

3. Amstislavsky S., Maksimovsky L., Temovskaya Yu., Ternovsky D. Cryo-preservation of carnívora. Mustela erminea // Scientifur, 1993. V.17. P. 127-131.

4. Amstislavsky S., Maksimovsky L., Temovskaya Yu., Ternovsky D. Ermine reproduction and embryo development (Mustela erminea) // Scientifur, 1993. V.17. P. 293 - 298.

5. Штейн M.A, Амстиславский СЛ., Максимовский Л.Ф., Маркель А.Л. и др. Эффекты криоконсервации и пересадки эмбрионов на величину артериального давления у крыс линии НИСАГ с наследственно обусловленной артериальной гипертензией // Физиол. журнал им. И.М. Сеченова, 1993. Т. 79. С. 51-56.

6. Амстиславский СЛ., Максимовский Л.Ф., Терновская Ю.Г., Терновский Д.В. Особенности биологии размножения и развития зародышей у горностая (Mustela erminea) // Зоол. журнал, 1994. Т. 73. С. 124-131.

7. Максимовский Л.Ф., Амстиславский СЛ., Голубица А.Н., Железова А.И., Терновская Ю.Г., Терновский Д.В. Доимплантационное развитие зародышей двух видов млекопитающих из семейства куницеобразных (Mustela erminea и Mustela vison) // Онтогенез, 1994. Т.25. С. 45-51.

8. Redina O.E., Amstislavsky S.Ya., Maksimovsky L.F. Induction of superovulation in DD mice at different stages of the oestrous cycle // J. Reprod. Fert., 1994. V.102. P.263-267.

9. Amstislavsky S., Amstislavskaya T, Stein M., Maksimovsky L., Markel A., Temovskaya Yu., Ternovsky D. Embryo cryobanking for conserving laboratory and wild animal species // Scand. J. Lab. Anim. Sei., 1996. V. 23. P. 269-277.

10. Амстиславский С Л, Качанова И. Ю., Маркель А. Л., Якобсон Г.С. Повышение артериального давления у нормотензивных крыс Вистар после трансплантации им эмбрионов гипертензивных крыс НИСАГ // Росс, физиол. журнал им. И.М. Сеченова, 1997. Т.83. С. 47-52.

11. Амстиславский СЛ., Кривохарченко А. С., Ротг H.H. Использование криоконсервации и методов биологии развития как способ сохранения генетических ресурсов. Сообщение 3. Перспективы, проблемы и ограничения:

селекция, модификация и мутации // Онтогенез, 1997. Т. 28. Р. 413-420.

12. Амстиславский С.Я., Максимовский Л.Ф., Зудова Г.А., Терновская Ю.Г. Суперовуляция, вызванная введением препаратов ГСЖК у куницеобразных // Онтогенез, 1997. Т.28. С. 359-366.

13. Амстиславский С.Я., Качанова И.Ю., Кизилова Е.А., Максимовский Л.Ф., Маркель А.Л., Якобсон Г.С. Влияние криоконсервации на морфологию доимплантационных зародышей крыс линии НИСАГ // Онтогенез, 1998. Т. 29. С. 92-95.

14. Кизилова Е. А., Байбородин С. И., Максимовский Л.Ф., Терновская Ю.Г. Амстиславский С.Я. Влияние криоконсервации на морфологию бластоцист хорька//Онтогенез, 1998. Т.29. С. 1-8.

15. Амстиславский С.Я., Попова Н.К., Томилова Ю.Э., Басова И.Ю., Маркель А.Л. Влияние материнской среды на артериальное давление и рефлекс испуга у крыс с наследственной артериальной гипертензией // Росс, физиол. журнал им. И.М. Сеченова, 1998. Т. 84. С. 783-789.

16. Amstislavsky S.Ya., Amstislavskaya T.G, , Eroschenko V.P. Methoxychlor given in the preimplantation periods blocks sexual arousal in male mice // Reprod. Toxicol., 1999. V.13. P. 405-411.

17. Амстиславский С.Я., Маркель А.Л., Якобсон Г.С. Повышение артериального давления.у приемных матерей крыс НИСАГ и Вистар: эффект перекрестного воспитания потомства// Росс, физиол. журнал им. И.М. Сеченова, 1999. Т. 85. С. 1496- 1502.

18. Amstislavsky S., Ternovskaya Yu. Reproduction in mustelids // Animal. Reprod. Sci., 2000. V. 60. P. 571-581.

19. Amstislavsky S. , Lindeberg H., Jarvinen M., Kizilova E., Zudova G., Ternovskaya Yu., Valtonen M. Ex-situ preservation of Mustclidae: primer of application of genetic resource bank concept with the use of polecats as the model species // Scientifur, 2000. V. 24. P. 45-58.

20. Амстиславский С.Я., Ерошенко В.П. Влияние экоэстрогенов на развитие репродуктивной системы млекопитающих // Онтогенез, 2000. Т. 31. С. 165177.

21. Амстиславский С.Я., Булыгина В., Маслова Л.Н., Алехина Т.А., Барыкина Н.Н., Чугуй В.Ф., Попова Н.К., Колпаков В.Г. Влияние перекрестного воспитания на некоторые физиологические и поведенческие признаки у крыс линий Вистар и ГК (генетическая каталепсия)// Росс, физиол. журнал им. И.М. Сеченова, 2000. Т. 86. С. 1630-1637.

22. Amstislavsky S.Ya, Alekhina Т.А., Barykina N.N., Chuguy V.F., Petrenko O.I., Kolpakov V.G. Effects of maternal environment during early postnatal development on behavior in cataleptic rats. Behav. Proc., 2001. V. 56. P. 41-47.

23. Колпаков В.Г., T.A. Алехина, Т.Г. Амстиславская, H.H. Барыкина, В.Ф. Чугуй, Амстиславский С.Я. Влияние перекрестного восшгтания на проявление каталепсии и содержание моноаминов в мозге у крыс линий Вистар и ГК// Росс, физиол. журнал им. И.М. Сеченова, 2001. Т. 87. С, 918925.

24. Якобсон Г.С., Антонов А.Р., Маркель А.Л., Амстиславский С.Я., Таранов

А.Г., Якобсон М.Г. Влияние вскармливания гипертензивных крыс линии НИСАГ нормотензивными самками Вистар на развитие гипертензивного статуса//Бюлл. Эксп. Биол. Мед., 2001. Т. 132. Р. 145-148.

25. Lindeberg Н., Amstislavsky S., Jarvinen М., Aalto J., Valtonen M. Surgical transfer of in vivo produced farmed European polecat (Mustela putorius) embryos // Theriogenology, 2002. V. 57. P. 2167-2177.

26. Колпаков В.Г., Алехина, T.A., Барыкина H.H., Чугуй В.Ф., Петренко О.И., Амстиславский С .Я. Эффект изменения материнской среды на предрасположенность к каталепсии у крыс разного возраста // Журн. Высш. Нервн. Деят., 2002. Т. 52. С. 255- 260.

27. Eroschenko V.P. Amstislavsky S.Ya., Schwabel H., Ingermannn R.L. Altered behaviors in male mice, male quail, and salamander larvae following early exposures to the estrogenic pesticide methoxychlor // Neurotoxicol. Teratol., 2002. V. 24. P. 29-36.

28. Амстиславский С.Я., Кизилова E. А., Голубица A.H., Тышкевич О.Б., Доронин Б.М., Ерошенко В.П. Роль экоэстрогенов в развитии некоторых патологий // Сиб. эколог, журнал, 2003. Вып. 2. С. 231-237.

29. Amstislavsky S., Kizilova Е., Eroschenko V. Preimplantation mouse embryo development as a target of the pesticide methoxychlor//' Reprod. Toxicol., 2003. V.17. P. 79-86.

30. Lindeberg H., Aalto J., Amstislavsky S., Piltti K., Jarvinen M., Valtonen M. Surgical recovery and successful surgical transfer of conventionally frozen-thawed embryos in the farmed European polecat (Mustela putorius) // Theriogenology, 2003. V. 60. P. 1515-1526.

31. Amstislavsky S., Kizilova E., Golubitsa A., Vasilkova A., Eroschenko V. Preimplantation exposures of murine embryos to estradiol or methoxychlor change postnatal development//Reprod. Toxicol., 2004. V.18. P. 103-108.

32. Amstislavsky S., Aalto J., Jarvinen M., Lindeberg H., Valtonen M., Zudova G., Ternovskaya Yu. Transfer of European mink (Mustela lutreola) embryos into hybrid recipients // Theriogenology, 2004. V 62. P. 458-467.

33. Petrenko O., Chuguy V., Barykina N., Alekhina Т., Kolpakov V., Amstislavsky S. Components of early maternal environment affecting predisposition to catalepsy// Behav. Proc., 2004. V. 65. P. 1-6.

34. Amstislavsky S.Ya., Amstislavskaya T.G., Amstislavsky V.S., Tibeikina M.A., Osipov K.V. Eroschenko V.P. Reproductive abnormalities in adult male mice following preimplantation exposures to estradiol or pesticide methoxychlor // Reprod. Toxicol., 2006. V. 21. P. 154- 159.

35. Амстиславский С.Я. Межвидовая трансплантация эмбрионов и клеточных ядер как подход к сохранению исчезающих видов млекопитаю-щих//Онтогенез, 2006. Т. 37. N1. С. 3-11.

Подписано к печати 23.03.2006

Формат бумаги 60 х 90/16. Печ. л. 2. Уч. изд.л. 1,4

Тираж 110 экз. Заказ 27_

Ротаприпт Института цитологии и генетики СО РАН 630090, Новосибирск, пр. ак. Лаврентьева, 10.

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Амстиславский, Сергей Яковлевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Преимплантационное развитие зародышей млекопитающих

1.2. Репродуктивная система животных, как среда для раннего развития и как мишень репродуктивных технологий

1.2.1. Репродуктивная система самцов в качестве индикатора влияния гормонально активных соединений

1.2.2. Репродуктивная система самок млекопитающих в связи с преимплантационными этапами развития зародышей

1.3. Раннее поснатальное развитие млекопитающих. Взаимодействие матери и новорожденных в период вскармливания 29 1.3.1. Изменение материнской среды в раннем постнаталыюм онтогенезе. Приемное воспитание

1.4. Изменение материнской среды в преимплантациопный период: инструмент изучения онтогенеза млекопитающих и подход к сохранению генофонда

1.4.1. Трансплантация эмбрионов и базирующиеся на ней технологии в сельскохозяйственной биотехнологии

1.4.2. Межвидовая трансплантация эмбрионов: общий обзор в исторической ретроспективе

1.4.3. Межвидовая трансплантация и криоконсервация эмбрионов как подход к сохранению исчезающих видов млекопитающих

1.4.3.1. Влияние комплекса процедур криоконсервации на состояние ядерной ДНК в различных клетках, а также на последующую судьбу эмбрионов, ооцитов и клеточных популяций

1.4.4. Репродуктивное клонирование в сочетании с трансплантацией эмбрионов - как метод сохранения исчезающих видов млекопитающих

1.4.5. Программа экстракорпорального оплодотворения; ее применение в медицине и с целью сохранения исчезающих видов млекопитающих

1.5. Роль гормональной среды в раннем развитии млекопитающих

1.5.1. Эффекты воздействия гормонов на раннее развитие млекопитающих (преимплантационные эмбрионы и имплантация)

1.5.2. Влияние эстрадиолаи ксеноэстрогепов на поздние этапы пренатального онтогенеза млекопитающих

1.5.3. Влияние эстрадиола и ксеноэстрогенов на формирующуюся репродуктивную систему в постнатальном онтогенезе млекопитающих

1.5.4. Использование гормональных препаратов при вызывании суперовуляции

1.5.5. Отдаленные эффекты гормональных воздействий

1.6. Европейская норка - исчезающий вид млекопитающих. Существующий статус и стратегии сохранения

1.6.1. Характеристика европейской норки в сравнении с другими видами куницеобразных

1.6.2. Причины исчезновения европейской норки

1.6.3. Сохранение европейской норки - достижения, проблемы и перспективы

Введение Диссертация по биологии, на тему "Эмбриотехнологические подходы к сохранению исчезающих видов млекопитающих"

Актуальность исследования.

Многие виды млекопитающих, обитавшие ранее на нашей планете, безвозвратно исчезли. В XIX в. было зарегистрировано вдвое больше исчезнувших видов млекопитающих по сравнению с веком XVIII (Flesness, 1989). Процесс принял особенно угрожающие размеры в конце XX (Woodford, 1990) и в начавшемся XXI веке. Существует два принципиальных подхода к сохранению исчезающих видов млекопитающих. Первый заключается в сохранении жизнеспособных популяций in situ - т.е. в местах их обитания, включая охранные мероприятия и создание благоприятных условий для существующих в природе популяций. Второй подход основан па сохранении видов ex situ - т.е. вне их мест обитания. Сюда относится как сохранение небольших популяций в зоопарках, питомниках и т.п., так и создание криобанков эмбрионов и гамет (Wildt, 1992; Holt, Pickard, 1999). Имеется ряд публикаций, в которых перечислены существенные ограничения традиционных методов сохранения животных из дикой природы (Wildt, 1992; Lasley et al., 1994; Loskutoff, 1998). Подавляющее большинство специалистов согласны с тем, что оптимальной стратегией для сохранения биоразиообразия видов млекопитающих является сочетание традиционных мероприятий и арсенала современных методов, основанных на достижениях репродуктивной биологии (Wildt, 1992; Loskutoff, 1998;2003; Pukazhenthi, Wildt, 2004). Применение последних позволяет преодолеть целый ряд ограничений, свойственных традиционным методам сохранения генофонда животных (Bainbridge, Jabbour, 1998; Pukazhenthi, Wildt, 2004). Так, например, путем сочетания традиционных мероприятий и репродуктивных технологий удалось предохранить от полного исчезновения чернопогого хорька (Mustela nigripes) (Wildt et al., 1992; Howard et al., 2001). Подобных успешных примеров, однако, не очень много. Более общим случаем является ситуация, когда при попытках применения эмбриотехпологий при работе с дикими и исчезающими видами млекопитающих возникают серьезные проблемы (Loskutoff, 2003). В каждом из успешных случаев применения эмбриотехнологий по отношению к конкретному виду млекопитающих из дикой фауны учитывается видовая специфика, а успеху предшествует детальное изучение репродуктивной биологии данного вида (Wildt et al., 1992; Pukazhenthi, Wildt, 2004).

В семействе куницеобразных исчезающих видов достаточно много (Schreiber et al., 1989; Терновский, Терновская, 1994). В частности, в России и в Европе широко обсуждается проблема европейской норки (Mustela lutreola) (Терновский, Туманов, 1973; Терновский, Терновская, 1994; Maran, Henttonen, 1995; Sidorovich, 2000). В 2003 году состоялась первая международная конференция, целиком посвященная этой проблеме. В резолюциях этой конференции, в качестве приоритетных направлений, наряду с традиционными подходами было намечено изучение особенностей репродуктивной биологии и разработка современных биотехнологических методов для сохранения этого вида куницеобразных (Ist International Conference on Conservation of the European mink. Logrono, Spain, 2003).

Актуальность предложенной темы обусловлена, прежде всего, актуальностью разработки новых подходов к сохранению исчезающих видов млекопитающих. В последнее время, однако, накапливается достаточно много данных о том, что применение некоторых репродуктивных технологий может сопровождаться весьма заметными побочными эффектами и негативно сказываться на последующем развитии индивида (McEvoy et al., 1998, 2001). В нашей работе мы сосредоточились на базовых репродуктивных технологиях, имеющих достаточно длительную историю применения, таких, как трансплантация и криоконсервация эмбрионов и вызванная введением гормонов суперовуляция. Несмотря на то, что вопросы о возможных длительных побочных эффектах этих репродуктивных технологий первого поколения поднимались ранее (Dulioust et al., 1995; Foote, Ellington, 1998), эти вопросы до настоящего времени остаются все ещё открытыми. Актуальность этой части работы определяется тем, что при применении репродуктивных технологий эмбрион подвергается комплексу базовых процедур, которые являются более или менее жестким изменением среды эмбрионального развития. Неизбежным элементом при трансплантации эмбрионов, например, является изменение как пре-натальной, так и постнатальной компоненты материнской среды. Зачастую эмбрионы подвергаются также гормональному воздействию (в случае суперовуляции) и комплексу процедур, связанных с криоконсервацией (т.е. замораживанию, размораживанию и воздействию криопротекторов).

Таким образом, актуальность данного исследования определяется не только разработкой видоспецифичных репродуктивных технологий, но и попыткой изучить последствия изменения материнской среды для потомков (в связи с современными эмбриотехиологиями). Актуальным является также изучение обратного влияния кросс-фостеринга и трансплантации эмбрионов па приемную мать. Кроме того, в рамках данной работы впервые изучено раннее развитие у исчезающего вида - европейской норки в сравнении с другим малоизученным видом куницеобразных - горностаем и в сравнении с ближайшим родственником европейской норки -черным хорьком. Цели и задачи исследования. Цели:

1. Разработка подходов к сохранению европейской норки на основе сравнительного изучения особенностей раннего развития этого исчезающего вида куни-цеобразных и применения методов эмбриотехнологии.

Для достижения указанных целей были поставлены и решены следующие основные задачи:

1. Изучить особенности преимплантациоипого развития европейской норки (М. lutreola) в сравнении с двумя другими видами куницеобразных - черным хорьком (М putorius) и горностаем (М erminea).

3. Изучить последствия гормональных (гонадотропных, эстрогенных) воздействий во время преимплантациоипого развития млекопитающих in vivo: как на уровне развивающегося зародыша, так и на более поздних этапах онтогенеза.

4. На различных линиях лабораторных мышей и крыс определить последствия применения комплекса процедур криокопсервации по отношению к преим-план-тационным зародышам.

5. Изучить роль материнской среды в формировании фепотипических характеристик, свойственных определенным линиям лабораторных крыс (гипертензив-ная линия НИСАГ и линия крыс ГК с аномальным поведением).

Положения, выносимые на защиту.

2. Раннее развитие европейской порки (М. lutreola) сходно с ранним развитием черного хорька (М putorius). В связи с этим, хорька следует использовать в программах сохранения европейской норки ex situ, в частности, хонорики и похо-рики подходят в качестве реципиентов для трансплантации эмбрионов европейской норки.

3. Различные эстрогенные и гонадотропные воздействия в ходе ранней беременности млекопитающих приводят к сходным нарушениям в пре- и постнаталь-ном онтогенезе, вызывая характерные изменения развития эмбрионов и полового созревания потомков, такие, как изменение темпов развития зародышей и их миграции в матку, уменьшение полового диморфизма в ходе раннего постнаталыюго онтогенеза и ускорение полового созревания самок, а также функциональные нарушения репродуктивной системы у взрослых животных.

4. При применении методов репродуктивной биологии с целью сохранения исчезающих видов млекопитающих следует учитывать, что как пренатальные (трансплантация эмбрионов, гормональные воздействия), так и постнатальные (приемное воспитание) изменения материнской среды отражаются па поведении/физиологии потомков. Таким образом, при восстановлении популя-ций/видов из криобапка первое поколение может обладать особыми свойствами и характеристиками, а у самок-реципиентов могут возникать трапзиторные изменения их физиологического статуса. Научная новизна.

Впервые изучено преимплаптациоииое развитие у исчезающего вида куни-цеобразных - европейской норки (М. lutreola). Также впервые было систематически изучено преимплаптациоииое развитие горностая, о котором до начала данной работы имелись лишь фрагментарные сведения.

Впервые показана принципиальная возможность успешной криоконсервации эмбрионов у куницеобразных. Разработана модель преодоления межвидового барьера в семействе куницеобразных при трансплантации эмбрионов европейской норки межвидовым гибридам хорька и норки (хонорикам и нохорикам).

Впервые системно изучены эффекты воздействия различных эстрогенных и гонадотроппых препаратов в ходе преимплантационного развития in vivo у млекопитающих. На мышах выявлены отдаленные эффекты этих воздействий как на уровне самих преимплантационных зародышей, так и па постимплантационных этапах онтогенеза, а именно: а) впервые показано, что воздействия на ранних стадиях беременности эстрадио-лом (Э), ксепоэстрогеном метоксихлором (МКХ), а также человеческим хориони-ческим гонадотропином (ЧХГ) (в комбинации с гонадотропином сыворотки жеребых кобыл (ГСЖК) либо самостоятельно) приводят к задержке части зародышей в яйцеводах и угнетающе влияют на их развитие, вызывая характерные аномалии; б) впервые продемонстрировано, что воздействие перечисленными выше гормональными препаратами на ранних стадиях беременности у мышей сопровождается нарушениями полового развития у потомков в постнатальпом онтогенезе (демаску-линизация у самцов; маскулинизация и ускоренное половое созревание у самок), что приводит к репродуктивным нарушениям при взрослении этих потомков.

Впервые изучена роль материнской среды в проявлении артериальной ги-пертепзии у крыс линии НИСАГ и каталепсии у крыс линии ГК. Было показано, что характерный для каждой из этих двух линий фенотип развивается в наиболее полной форме лишь тогда, когда вскармливание производится матерями этой же линии. Если же крысят НИСАГ или ГК вскармливают приемные матери «нормальной» линии Вистар, то формирование артериальной гипертензии или генетической каталепсии (соответственно) замедляется и смягчается. Кроме того, как в том, так и в другом случае, при воспитании крысят НИСАГ или ГК приемными матерями Вистар их поведение в тесте «открытое поле» изменялось и становилось более похожим на поведение крыс Вистар. В то же время, крысы линии Вистар не становились гипертониками или каталептиками при вскармливании их, соответственно, приемными матерями линии НИСАГ или ГК.

Впервые обнаружено, что физиология приемной матери/самки-реципиента может меняться в результате приемного воспитания и/или трансплантации эмбрионов. Так артериальное давление самок-реципиентов Вистар было повышенным в течение четырёх месяцев после окончания вскармливания крысят НИСАГ, родившихся в результате трансплантации эмбрионов, что является новой моделью для изучения взаимодействия эмбриона/новорожденного и приемной матери. Научно-практическая значимость. Основным вкладом исследования в зоологию является систематическое изучение наиболее ранних этапов развития европейской норки (преимплантационное развитие которой до начала данной работы вообще не изучалось) и горностая (о раннем развитии которого имелись лишь фрагментарные сведения). Полученные данные по раннему развитию европейской норки открывают новые подходы к сохранению этого исчезающего вида млекопитающих. Технологии вымывания, трансплантации и криоконсервации эмбрионов куницеобразных были отработаны на хорьках. Продемонстрирована практическая возможность их применения по отношению к европейской норке. В частности, практическое значение имеет создание технологии трансплантации эмбрионов европейской норки межвидовым гибридам (хонорикам и нохорикам). Практическое значение также имеет цикл работ по криоконсервации эмбрионов куницеобразных, в ходе которого было показано, что зародыши куницеобразных выживают после глубокого замораживания и криохранения и способны к дальнейшему развитию как in vitro, так и in vivo. Было показано, что такие известные криопротекторы, как ДМСО и глицерин не пригодны для использования в процессе замораживания эмбрионов куницеобразных, однако этиленгликоль пригоден для этих целей.

Изучение характерных последствий воздействия гопадотропных и эстроген-ных гормонов на стадии преимплантационного зародыша может рассматриваться как теоретическая база метода суперовуляции, широко используемого в сельском хозяйстве и в медицине. Учет описанных в работе эффектов применения гонадотропных и эстрогенных гормонов дает возможность принимать практически важные решения о применимости (или неприменимости) этого метода в зависимости от целей программы/эксперимента. Другим важным аспектом является усиление гормональных влияний на млекопитающих и человека со стороны окружающей среды в современном мире. В данной работе показано, что развивающиеся in vivo зародыши млекопитающих являются чувствительной мишенью этих влияний. Описание последствий ранних гормональных воздействий имеет важное теоретическое значение не только для зоологии, экологии и эмбриологии, но и для осознания возможных перспектив репродуктивного здоровья различных видов млекопитающих и человека.

Изучены эффекты комплексной процедуры криоконсервации и отдельных ее компонентов по отношению к зародышам млекопитающих и выявлена роль генотипа в криорезистентности. Это является экспериментальным обоснованием крио-селекции при создании криобанков. Таким образом, появляется возможность понять механизм улучшения характеристик некоторых клеточных культур после криоконсервации.

Многочисленные эксперименты по гормональным воздействиям на ранних этапах развития зародышей, перекрестному воспитанию и трансплантации эмбрионов позволили сформулировать важное положение о том, что эти широко применяемые на практике биотехнологические приемы (приемное воспитание является неотъемлемым компонентом трансплантации эмбрионов) сопровождаются характерными изменениями в дальнейшем онтогенезе потомков первого поколения, что важно практически учитывать в программах сохранения редких и исчезающих видов и пород. Изучение роли материнской среды в ходе ранних периодов прена-тального и постнатальиого развития у крыс НИСАГ и ГК имеет существенное значение для понимания механизмов формирования артериальной гипертензии и каталепсии, а в более широком контексте имеет прямое отношение к важнейшей теоретической проблеме современной биологической науки: изучению роли ранней среды развития в реализации генетически обусловленных признаков.

Основные экспериментальные результаты и теоретические выводы работы используются в курсе лекций, читаемом на факультете естественных наук в Новосибирском госуниверситете. Кроме того, результаты диссертации, касающиеся изучения репродуктивной биологии европейской норки, хорька и горностая, используются в курсе лекций для студентов университета города Куопио (Финляндия). Методические приемы и новые данные, полученные в ходе выполнения данной диссертации, используются в научных исследованиях, проводимых в ИЦиГ и ИСЭЖ СО РАН, Институте прикладной биотехнологии университета Куопио

Финляндия) и в университете Айдахо (США). Областями применения экспериментальных результатов и теоретических выводов диссертации являются зоология, эмбриология, генетика, а также практика сохранения исчезающих видов и пород млекопитающих. Апробация работы.

Основные результаты диссертации обсуждены на всероссийских и международных конгрессах: • 2-м съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока, 1995 (Новосибирск) • International Conference: Frontiers in Laboratory Animal Science, Joint Conference of ICLAS, ScandLas and FinLAS ,1995 (Helsinki, Finland) • 6-th International Scientific Congress in Fur Animal Production, 1996 (Warsaw, Poland). • международной конференции "Современные концепции эволюционной генетики", посвященной 80-летию акад. Д.К.Беляева, 1997 (Новосибирск) • 15-м рабочем совещании по консервации генетических ресурсов, 1998 (г. Пущино, Московская область) • Международном симпозиуме «Генетика и развитие психонейроэндокрин-ных механизмов», посвященном памяти проф. Е.В. Науменко, 1999 (Новосибирск) • 14th International Congress on Animal Reproduction (ICAR), 2000 (Stockholm, Sweden) • 17-м рабочем совещании по консервации генетических ресурсов, 2002 (г. Пущино, Московская область) • научной конференции «Эндокринная регуляция физиологических функций в норме и патологии», посвященной 80-летию со дня рождения проф. М.Г.Колпакова, 2002 (г. Новосибирск) • International Conference on the Conservation of the European Mink, November 5-8 (Logrono, Spain) • международной научной конференции «Сохранение генетических ресурсов», 19-22 октября 2004 (Санкт - Петербург).

Сотрудничество. Все основные результаты представленные в диссертации получены автором самостоятельно. Эксперименты по разработке подходов к сохранению исчезающих видов куницеобразных ex situ были начаты нами в Новосибирске в сотрудничестве с Л.Ф. Максимовским, Д.В. Терновским Ю.Г. Терновской (на хорьках и горностае), а затем продолжены (на хорьках) в университете Куопио (Финляндия) в сотрудничестве с Хели Липдеберг, Юсси Аальто, Микко Ярвинеп и Майей Валтонен. Впоследствии эти разработки были использованы при работе с европейской норкой, которая проводилась в сотрудничестве с Ю.Г. Терновской Е.А. Кизиловой, Г.А. Зудовой, Хели Линдеберг, Юсси Аальто, Микко Ярвинен и Майей Валтонен.

В проведении экспериментов на других моделях, таких, как мыши и крысы, ряд опытов был выполнен в сотрудничестве с Т.Г. Амстиславской, Е.А. Кизиловой, О.Е. Рединой, А.Н. Голубицей, В.Г. Колпаковым, Т.А. Алехиной, Н.Н. Барыкиной, В.Ф. Чугуй, О.И. Петренко, Л.Н. Масловой и В.А.Булыгиной. В проведении экспериментов на крысах НИСАГ существенную помощь оказывали студенты-дипломники М. А. Штейн и И. Ю. Басова. Особенной благодарности заслуживает внимательное отношение к работе зав. лабораторией эволюционной генетики профессора A.JT. Маркеля, который предоставил возможность работы на полученных им путем селекции крысах НИСАГ, а кроме того, своей личностью и отношением к науке, задавал высокий научный стандарт на всем протяжении выполнения данного исследования.

Гранты. Работа была поддержана программой "Биоразнообразие" в 19931995 гг., грант: "Создание криобапка зародышей и спермы редких и исчезающих видов хищных животных". В 1995-1997 гг. работа была поддержана грантом РФФИ "Влияние криоконсервации и трансплантации эмбрионов на артериальное давление и другие физиологические функции у крыс с наследственной артериальной гипертензией". В 1999-2001 гг. работа проводилась в соответствии с программой гранта РФФИ "Влияние изменения материнской среды в ходе пренатального и раннего постнатального онтогенеза на формирование некоторых аномальных форм поведения у крыс". Та часть исследований данной диссертации, которая связана с изучением влияния гормональных воздействий на преимплантациоппые зародыши, поддержана двумя грантами программы "Университеты России". В 1999-2001 гг. работа была поддержана грантом «Изучение эмбриотоксических и генотоксиче-ских эффектов экоэстрогенов в развитии эмбрионов млекопитающих: поиск безопасных репродуктивных технологий". В 2002-2003 гг. это направление исследование было продолжено в соответствии с планом гранта «Ранние стадии развития зародышей млекопитающих и рыб как возможная мишень экоэстрогенов: влияние на соотношение полов в потомстве и половое развитие». Исследование европейской норки и разработатка репродуктивно-биологических подходов направленных на сохранение этого исчезающего вида млекопитающих поддержано совместным грантом российской и финской академий наук: "Embryo cryobanking and assisted reproductive techniques in Mustelidae species with special emphasize on the preservation and propagation of endangered European mink» (2000-2005 гг.). Структура и объем диссертации.

Основные результаты представлены в монографии и 35 научных статьях, опубликованных в рецензируемых отечественных и международных журналах.

Заключение Диссертация по теме "Зоология", Амстиславский, Сергей Яковлевич

ВЫВОДЫ

1. Впервые изучено преимлантационное развитие эмбрионов европейской иорки (М lutreola), что было сделано в сравнении с черным хорьком (М putorius) и горностаем (М erminea). Преимлантационное развитие европейской норки имеет длительность 12 дней и сходно с ранним развитием черного хорька. Основные события этого периода у этих двух видов куницеобразных происходят в одни и те же сроки. В частности, миграция зародышей из яйцеводов в матку у европейской иорки и у хорька происходит па 6-й день после спаривания. В силу сходства преимплантационного развития европейской норки и хорька представляется целесообразным использовать последнего в программах, имеющих целыо сохранение европейской норки.

2. Способы получения и трансплантации эмбриоиов куницеобразных были отработаны па хорьке и впервые применены по отношению к европейской норке. Трансплантация эмбрионов от европейской норки межвидовым гибридам иорки и хорька (хонорикам или нохорикам) приводит к рождению потомства в 50% случаев, а 56-70% полученных таким образом потомков выживает. Разработанная модель трансплантации может быть использована для сохранения европейской норки. Сходная модель (трансплантация эмбрионов от самок-доноров исчезающего вида межвидовым гибридам) может применяться и для сохранения других видов млекопитающих.

3. Впервые проведены успешные эксперименты по криоконсервации эмбрионов куницеобразных. На хорьке было проведено сравнение разных условий замораживания-оттаивания зародышей, в частности, сравнение трех различных криопротекторов. Было продемонстрировано, что зародыши хорька после процедур замораживания/криохрапепия/оттаивапия были способны к дальнейшему развитию в условиях in vitro и in vivo, и было получено живое потомство. Эти результаты дают основание утверждать, что создание криобанков эмбрионов следует рассматривать в качестве реальной возможности сохранения биоразпообразия исчезающих видов куницеобразных. В то же время в наших экспериментах па разных лиииях мышей выживание зародышей после криоконсервации составило от 20 до 71 %, в зависимости от их генотипа. Эти результаты свидетельствуют о том, что при криоконсервации эмбрионов может иметь место криоселекция, и этот фактор следует учитывать при создании криобанков исчезающих видов млекопитающих.

4. Впервые изучены особенности преимплантационного развития и суперовуляторного ответа у горностая. Периоды между спариванием и овуляцией, овуляцией и миграцией зародышей в матку, а также сроки переживания сперматозоидов в репродуктивных путях у горностая удлинены, и имеется период длительной длительной диапаузы (9 мес.). Воздействие на самок горностая гонадотропным препаратом ГСЖК сопровождалось более ранней миграцией зародышей в матку и их ускоренным развитием. Более того, воздействие препаратом ГСЖК выявляет функциональную асимметрию репродуктивной системы у этого вида куницеобразных, так как суперовуляторный ответ наблюдали главным образом со стороны правого яичника.

5. Гормональные воздействия, влияющие на уровень и соотношение половых гормонов, в первые дни беременности мышей вызывают изменения в развитии преимплаптациоппых зародышей (нарушение миграции из яйцеводов в матку, изменение темпов их развития, появление характерных аномалий, усиление апоптозных процессов), а также приводят к изменениям в половом развитии потомков в период вскармливания (демаскулинизация самцов, ускорение полового созревания и маскулинизация самок) и нарушению репродуктивного статуса во взрослом состоянии. То, что гонадотропные препараты, подобно эстрогенам и ксепоэстрогенам, при воздействии на развивающиеся in vivo зародыши млекопитающих приводят к отдаленным эффектам на состояние репродуктивной системы, следует учитывать при применении метода суперовуляции па различных видах млекопитающих.

6. Эксперименты по трансплантации эмбрионов и перекрестному воспитанию проведенные на различных линиях крыс (НИСАГ, ГК, Вистар) показали, что эти процедуры не являются нейтральными по отношению к потомкам и приемным матерям/самкам-реципиентам. В частности, выяснилось, что у предрасположенных к гипертензии крыс НИСАГ, воспитанных приемными матерями Вистар, существенно увеличен вес надпочечников и снижена двигательная активность, а у самих приемных матерей Вистар возникает временный подъем кровяного давления. Поведение крыс НИСАГ, рожденных в результате трансплантации эмбрионов самкам-реципиентам линии Вистар, также изменено в сторону снижения двигательной активности и возрастания тревожности, причем в ещё большей мере, чем при приемном воспитании. В то же время, у крыс НИСАГ, выношенных и/или воспитанных самками линии Вистар, развитие гипертензии замедлялось и смягчалось. Эти эксперименты свидетельствуют о том, что изменения материнской среды, в частности, при трансплантации зародышей могут оказывать смягчающее действие па проявление генетически обусловленных патологий, хотя при этом может возникать обусловленное генетической чужеродностью напряжение в системе мать-потомство, что приводит к нарушениям поведения и другим характерным последствиям.

7. «Материнская среда» является важнейшим фактором формирования каталепсии у крыс линии ГК. Подсадка на воспитание приемным матерям линии Вистар новорожденных крысят ГК существенно замедляет и смягчает развитие каталепсии у последних, причем даже в возрасте 6-ти мес. проявление каталепсии у татаких животных выражено существенно слабее, чем у их сверстников, воспитанных естественными матерями крыс ГК. Эксперименты на крысах альтернативных линий НИСАГ-Вистар и ГК-Вистар указывают на то, что материнская среда может влиять на развитие генетически обусловленной патологии (гипертензии и каталепсии, соответственно), но при отсутствии у потомков генетической предрасположенности сама по себе " чужая" материнская среда этой патологии не вызывает.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В данной работе впервые изучено преимплаитационное развитие у исчезающего вида - европейской порки. Для сравнения было также изучено преимплаитационное развитие у горностая и хорька. С учетом специфики преимплантационного развития европейской норки была отработана модель трансплантации эмбрионов от европейской норки гибридным самкам-реципиентам (хонори-кам/похорикам). На хорьках был освоен метод прижизненного получения зародышей без ущерба для дальнейшей репродукции самок-доноров и изучены оптимальные условия для трансплантации эмбрионов. Эти наработки были затем применены по отношению к европейской норке. Результаты наших экспериментов (главным образом, на хорьках) показали, что эмбрионы куницеобразных можно подвергать замораживанию при использовании этиленгликоля в качестве криопротектора и хранить при температуре жидкого азота, причем после размораживания эти эмбрионы способны развиваться как in vitro (в культуре), так и in vivo (после трансплантации). Этот положительный результат делает возможным создание криобап-ков исчезающих видов куницеобразных. В то же время, эти исследования продемонстрировали, что такие наиболее часто применявшиеся криопротекторы, как ДМСО и глицерин, не пригодны для замораживания/ криоконсервации эмбрионов куницеобразных. Было показано, что применение гонадотропных гормонов влияет па скорость развития зародышей куницеобразных и сроки их миграции из яйцеводов в матку, в связи с чем, следует с особой тщательностью подбирать суперовуля-торную схему или вообще отказаться от применения метода суперовуляции по отношению к куницеобразным. Особо следует отметить асимметрию суперовуляторного ответа, который у горностаев и хорьков наблюдался лишь с правой стороны. На основании полученных результатов можно рекомендовать замораживание и криохранение и последующую трансплантацию эмбрионов европейской норки в качестве дополнительного метода сохранения биоразнообразия этого вида.

Наряду с изучением особенностей европейской иорки и разработкой эм-бриотехнологических подходов к сохранению исчезающих видов куницеобразных, были исследованы отдаленные эффекты эмбриотехнологических процедур по отношению к млекопитающим. Было показано, что при криоконсервации зародышей линейных мышей стандартным способом имеется выраженная криоселекция, причем выживаемость зародышей зависит от их генотипа. Этот фактор следует учитывать при создании криобанков популяций диких видов млекопитающих, так как структура популяции может измениться после криоконсервации.

Были прослежены эффекты воздействия гонадотропных и эстрогенных гор монов в ходе преимплантационного развития in vivo и охарактеризованы отдаленные последствия этих воздействий по отношению к половому развитию и созреванию в постнатальном онтогенезе. Кроме того, охарактеризованы эффекты изменения материнской среды в раннем пренатальном или раннем постнатальном онтогенезе. Такого рода изменения имеют место, в частности, при трансплантации эмбрионов. Было показано, что трансплантация эмбрионов может приводить к изменению поведения у развившихся из этих эмбрионов потомков. В то же время, изменение материнской среды может приводить к смягчению развития генетически обусловленной патологии, что имеет место, например, при воспитании крысят НИСАГ или ГК приемными матерями Вистар.

Таким образом, изученные в данной диссертации базовые эмбриотехнологи-ческие процедуры (трапсплантация/криоконсервация эмбрионов, суперовуляция) могут отражаться на некоторых физиологических и поведенческих характеристиках потомков и самок-реципиентов. Тем не менее, потомки полученные в результате трансплантации/криоконсервации эмбрионов куницеобразных характеризовались совершенно нормальной способностью к размножению и каких-либо существенных аномалий у этих животных обнаружено не было. Описанные в данной диссертации эмбриотехнологические подходы не отменяют традиционные способы сохранения биоразнообразия исчезающих видов млекопитающих, а являются инструментом, позволяющим сделать их более эффективными. Вероятно, этот подход наряду с охранными мероприятиями, разведением в неволе и ре-интродукцией в природу будет реализован в национальных и интернациональных программах сохранения биоразнообразия европейской норки. Криоконсервация эмбрионов, как известно, позволяет создать генетический банк и существенно облегчает обмен генетическим материалом между различными центрами.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Амстиславский, Сергей Яковлевич, Новосибирск

1. Адаричев В.А., Корохов Н.П., Остапчук Я.В., Дымшиц Г.М., Маркель А.Л. Генетика 1996. Т.32 (12). С. 1453-1456.

2. Амстиславский С.Я. Особенности центральной альфа-адренергической регуляции артериального давления у крыс с наследственной индуцированной стрессом артериальной гипертензией//Известия СО АН СССР. Сер. Биол. Науки, 1986(a). Вып. 3.№ 18. С. 118-122.

3. Амстиславский С.Я. Особенности центральной бета-адренергической регуляции артериального давления у крыс с наследственной ин -дуцированной стрессом артериальной гипертензией. // Известия СО АН СССР. Сер. Биол. Науки, 1986 (б). Вып. 3.№ 18. С. 112-125.

4. Амстиславский С.Я. Центральные адренергические механизмы регуляции артериального давления и гипофизарно-адренокортикалыюй системы у крыс с наследственной артериальной гипертепзией. Кандидатская диссертация . Новосибирск, 1987. 145 С.

5. Амстиславский С.Я., Максимовский Л.Ф., Воротников М.Т. Методы биотехнологии в практике разведения животных. Новосибирск: Изд-во ИЦиГ. 1991. 170 с.

6. Амстиславский С.Я.,.Максимовский Л.Ф, Терновская Ю.Г, Терновский Д.В. Особенности биологии размножения и развития зародышей у горностая // Зоологический журнал. 1994. Т.73. Вып. 11. С. 124-131.

7. Амстиславский С.Я., Качанова И.Ю.,Кизилова Е.А. и др. Влияние криоконсервации на морфологию доимплантационных зародышей крыс линии НИСАГ // Онтогенез 1998 (а). Т. 29. №2. С. 92-95.

8. Амстиславский С.Я.Попова Н.К, Томилова Ю.Э. и др.Влияние материнской среды на артериальное давление и рефлекс испуга у крыс с наследственной артериальной гипертензией // Российский физиологический журнал им. Сеченова. 1998 (б) Т.84. С.783-789.

9. Суперовуляция, вызванная введением препаратов ГСЖК у куницеобразных // Онтогенез. 1997. Т.28. С. 359-366.

10. Амстиславский С.Я., Ерошенко В.П. Влияние экоэстрогенов на развитие репродуктивной системы млекопитающих // Онтогенез. 2000. Т. 31. С. 165-177.

11. Амстиславский С.Я., Кизилова Е.А., Голубица А.Н. и др. Роль экоэстрогенов в развитии некоторых патологий // Сиб. Экол. Журнал. 2003. Вып.2. С.231- 237.

12. Амстиславский С.Я. Межвидовая трансплантация эмбрионов и клеточных ядер как подход к сохранению исчезающих видов млекопитающих // Онтогенез. 2006. Т. 37. №1. С. 3-11.

13. Амстиславская Т.Г., Храпова М.В. Влияние генотипа па поведенческую и гормональную компоненты половой активации самцов мышей // Бюлл. Эксп. Биол. Мед. 2002. Т 133. С. 548-551.

14. Баевский Ю.Б. Об эмбриональной диапаузе соболя // Докл. Акад. Наук СССР. 1955. Т. 105. С. 866-869.

15. Баевский Ю.Б. Наблюдения над некоторыми стадиями внутриутробного развития соболя // Труды Института Морфологии Животных им. А. Н. Северцова. 1960. Вып. 30. С.246-247.

16. Баевский Ю.Б. Эмбриональная диапауза млекопитающих. Автореферат на соискание ученой степени доктора биологических наук. Новосибирск. 1970. 31 С.

17. Барыкина Н. Н., Чепкасов И.Л., Алехина Т.А., Колпаков В.Г. Селекция крыс Вистар на предрасположенность к каталепсии // Генетика. 1983. Т. 19. С. 2014- 2021.

18. Бузуева И.И., Шмерлинг М.Д., Филюшина Е.Е. и др. Морфо-функциональные особенности коры надпочечника крыс НИСАГ в разные периоды постпатального онтогенеза//Бюллетень СО РАМН. 1997. Вып. 2. С. 95-99.

19. Бэйрд Д. Яичник // Гормональная регуляция размножения млекопитающих. Под ред. Остин К., Шорт Р. М.: Мир. 1987. С. 118-144.

20. Волобуев В.Т., Терновский Д.В. Сравнение кариотипов европейской (lutreola lutreola) и американской (lutreola vison) норок // Зоологический журнал, 1974, Т.53, вып. 10.1. С.1579-1580.

21. Воронов Г.А. Использование, охрана и реконструкция наземных охотничье-промысловых млекопитающих Курильских островов. //Сб.научных трудов ВНИИОЗ, Киров. 1989. С.56-73.

22. Графодатский А.С., Волобуев В.Т., Терновский Д.В., Раджабли С.И. G- окраска хромосом семи видов куньих (Carnivora, Mustelidae)// Зоологический журнал, 1976, Т. LV, Вып. И, С Л 704-1708.

23. Грищенко В. И., Панков Е. Я., Обозная Э. И. Качественное обновление клеток после криоконсервирования// Усп. Совр. Биол. 1989. Т. 108. Вып. 2. С. 299-309.

24. Грищенко В. И., Алексеевская Э.И. Криообновление основа для прогресса современных технологий в биологии и медицине // Усп. Совр. Биол. 2003. Т. 123. С. 435-444.

25. Евсиков В.И., Герлинская Л.А., Мошкин М.П. и др. Концентрация прогестерона у мышей на ранних стадиях гомо- и гетерогенной беременности // ДАН СССР. 1991. Т.319. С.494-497.

26. Евсиков В.И., Герлинская Л.А., Мошкин М.П., Осетрова Т.Д., Потапов М.А. Гене-тико-физиологические взаимоотношения мать-плод и их влияние на адаптивные признаки потомков // Онтогенез. 1998. Т. 29. С. 405-418.

27. Железова А.И., Голубица А.Н. Трансплантация бластоцист у норки. ДАН. 1978. Т.238. С.462-465.

28. Жизнь животных. Том 6. Млекопитающие или звери. Под ред. С.П. Наумова, А.П. Кузякина. М.: Просвещение. 1971. 627 С.

29. Квасницкий О.В. Досл!д м1жпородного пересаджувания яйцеклетш на свиньях // Социалистическое животноводство. 1950. Т. 11. С. 12-15.

30. Кизилова Е.А., Байбородин С.И., Максимовский Л.Ф., Терновская Ю.Г., Амстиславский С.Я. Влияние криоконсервации на морфологию бластоцист хорька // Онтогенез. 1998. Т. 29. С. 1-8.

31. Колпаков В.Г., Н.Н. Барыкина, В.Ф. Чугуй, Т.А. Алехина. Взаимоотношение между некоторыми формами каталепсии у крыс. Попытка генетического анализа // Генетика. 1999. Т.35. С.807-810.

32. Колпаков В.Г., Т.А. Алехина, Амстиславская Т.Г. и др. Влияние перекрестного воспитания па проявление каталепсии и содержание моноамипов в мозге у крыс линий Вистар и ГК // Росс. Физиол. Журнал им. Сеченова. 2001. Т. 87. С. 918- 925.

33. Кречмер Э. Строение тела и характер // С-Пг. 1917.

34. Кривенко А.А., Филипенко M.JL, Адаричев В.А. и др. Анализ косегрегации полиморфных ДНК-маркеров с величиной артериального давления у крыс гипертензивной линии НИСАГ. Генетика 1999. Т. 35. С. 164-169.

35. Леонов Б.В. Половые гормоны и гормоноподобные соединения в раннем эбриогенезе //М: Медицина. 1979.159 С.

36. Линкольн Д.У. Задняя доля гипофиза // Гормональная регуляция размножения млекопитающих / Под ред. Остин К., Шорт Р. М.: Мир. 1987. С. 32-71.

37. Маркель А.Л. Особенности поведения у крыс с наследственной артериальной гипертензией //Жури. Высш. Нервн. Деят. 1986. Т.36. С. 956-961.

38. Маслова Л.Н., Шишкина Г.Т., Булыгина В.В., Маркель А.Л., Науменко Е.В. // Кате-холамины мозга и гипоталамо-гипофизарпо- адренокортикальная система при наследственной артериальной гипертензии // Росс. Физиол. Журнал им. Сеченова. 1996. Т.82. С.30-38.

39. Мошонкин Н.Н. Потенциальная полиэстричность европейской норки (Lutreola lutreola Ь)//Зоол. Журнал. 1981. Т. 9. С. 1731-1733.

40. Новиков С.Н. // Феромоны и размножение млекопитающих . Л.: Наука, 1988,169 С.

41. Обозная-Печенежская Э.И., Грищенко В.И., Панков Е.Я. Криобиология обновления: факты и перспективы // Проблемы криобиологии. 1993. № 4. С. 11-20.

42. Осадчук А.В. Науменко Е.В. Роль генотипа и некоторых видов зоосоциалыюго поведения в регуляции эндокринной функции семенников у мышей // Докл. Акад. Наук СССР. 1981. Т.258. С.746-749.

43. Попова Н.К., Амстиславская Т.Г., Кучерявый С.А. Половая мотивация самцов мышей, индуцированная присутствием рецептивной самки. Журн. Высш. Нервн Деят. 1998. Т.48. С. 84-89.

44. Попова Н.К., Барыкина Н.Н., Плюснина И.З. и др. Экспрессия реакции испуга у крыс, генетически предрасположенных к разным видам защитного поведения // Росс. Физиол. Журн. им. И.М. Сеченова. 1999. Т. 85. С. 99-104.

45. Прокофьев О. Н. // Справочник по ядохимикатам. Алма-Ата: Кайнар, 1972. 230 С.

46. Пурмаль А.П. Антропогенная токсикация планеты. Часть 2 // Соросовский образовательный журнал, 1998, № 9, С. 46-51.

47. Робинсон Р., Маркель А.Л. Генетика норвежской крысы. 1994, Новосибирск, Из-во ИцИГ СО РАН, 205 С.

48. Ротт Н.Н. Создание генетических криобанков и использование методов биологии развития как способ сохранения редких видов животных. Получение и криоконсер-вация зародышей диких млекопитающих // Онтогенез. 1996. Т. 27. С. 245-255.

49. Серая крыса. Систематика, экология, регуляция численности. Ред. Соколов, Карасева. М.: Наука. 1990,453 С.

50. Смит О. Биологическое действие замораживания и переохлаждения. Из-во Иностр. Лит. Москва. 1963. 503 С.

51. Смоляпинов Б.В. Индукция множественной овуляции у коров при трансплантации эмбрионов (обзор) // Сельскохозяйственная биология. 1990. Вып. 2. С. 56-64.

52. Справочник по пестицидам: Гигиена применения и токсикология. К.: Урожай, 1986. 432 С.

53. Терновский Д.В„ Туманов И.Л. Сохранить европейскую норку. Охота и охотничье хозяйство. 1973. №2. С. 20-21.

54. Терновский Д.В. Биология куницеобразных. 1977. Новосибирск. Наука. 279 С.

55. Терновский Д.В. Биология размножения и развития горностая (carnivora, mustelidae). Зоол. Журн. 1983. Т. 62 . Вып. 7. С. 1097-1105.

56. Терновский Д.В, Терновская Ю.Г. Экология куницеобразных. Новосибирск: Наука, 1994. 223 С.

57. Туманов И.Л. Биологические особенности хищных млекопитающих России. Наука: Санкт- Петербург. 2003. 437 С.

58. Сидорович В. Куньи Беларусии. Эволюционная экология, демография и межвидовые связи. Золотой улей: Минск. 1997.

59. Трут Л.Н. Голубица А.Н. Трансплантация бластоцист у серебристо-черной лисицы // Докл. Акад. Наук СССР. 1979. Т. 249. С. 471-473.

60. Хворостова Ю.В, Филлипенко М.Л, Дымшиц Г.М, Маркель А.Л. Экспрессия гена проопиомеланокортина в гипофизе гипертензивных крыс линии НИСАГ. Генетика // 2001. Т. 37. С.643-648.

61. Хип Р, Флинт А. Беременность // Гормональная регуляция размножения млекопитающих / Под ред. Остин К, Шорт Р./ М.: Мир, 1987, С. 194-244.

62. Шварц Е.А,Вайсфельд М.А. Проблема сохранения исчезающих видов животных и острова (к итогам дискуссии об акклиматизации европейской норки (Mustela lutreola) на о.Кунашир) // Успехи современной биологии, 1993. Т. 133, вып.1. С.46-59.

63. Шорт Р.В. Эстральный и менструальный цикл // Гормональная регуляция размножения млекопитающих / Под ред. Остин К, Шорт Р. / М.: Мир. 1987. С. 145-192.

64. Штейн М.А., Амстиславский С.Я, Максимовский Л.Ф и др. Эффекты криоконсервации и трансплантации эмбриоиов на артериальное давление у крыс НИСАГ с наследственной артериальной гипертензией // Росс. Физиол. Журнал им. И.М. Сеченова. 1993. Т. 79/С. 51-56.

65. Adams С.Е. The development of rabbit eggs in the ligated oviduct and their viability after re-transfer to recipient rabbits // J. Embryol. Exp. Morph. 1973. V. 29. P. 133-144.

66. Adams C.E. Egg transfer in carnivores and rodents between species and to ectopic sites // Mammalian egg transfer/ Adams C.E. (ed.)/ Boca Raton: C.R.C Press. 1982. P.49-61.

67. Aitken R.J. Delayed implantation in roe deer (Capreolus capreolus) II J. Reprod. Fertil. 1974. V.39. P.225-233.

68. Alden R.H. Aspects of the egg- ovary- oviduct relationship in the albino rat // J. Exp. Zool. V.90. P. 159-170.

69. Anisman H, Zaharia M.D, Meaney M.J, Merali Z. Do early-life events permanently alter behavioral and hormonal responses to stressors? // Int. J. Dev. Neurosci. 1998. V.16. P. 149-164.

70. Ashby J, Lefevre P.A. The weanling male rat as an assay for endocrine disruption: preliminary observations // Regul. Toxicol. Pharmacol. 1997. V. 26. P. 330-337.

71. Ashby J, Lefevre P.A, Odum J. et al. Synergy between synthetic oestrogens? // Science. 1997. V.385. P. 494

72. Allan B.B, Brant R, Seidel J.E, Jarrell J.F. Declining sex ratios in Canada // Can. Med. Assoc. J. 1997. V.156. P. 37-41.

73. Allen W.R, Stewart F, Trounson A.O. et al. Viability of horse embryos after storage and long-distance transport in the rabbit // J. Reprod. Fert. 1976. V. 47. P. 387-390.

74. Allen WR. Immunological aspects of the endometrial cup reaction and the effect ofxeno-geneic pregnancy in horses and donkeys // J. Reprod. Fertil. Suppl. 1982. V. 31. P. 57-94.

75. Allen W.R. Inter and extraspecies pregnancies in equids // Embryonic development and manipulation in animal production. Trends in Research and Application/ Editors, Lauria A, Gandolfi F. / 1992. Portland Press: London. P. 103-124.

76. Allen W.R, Kydd J.H, Antczak D.F. Interspecies and extraspecies equine pregnancies // Equine reproduction / Editors Angus O.McKinnon, James L. Voss/ 1993. Lea & Febiger : Philadelphia, London. P. 536-553.

77. Allen W. R. Fetomaternal interactions and influences during equine pregnancy // Reproduction. 2001. V. 121. P. 513-527.

78. Aim H, Tiemann U, Torner H. Influence of organochlorine pesticides on development of mouse embryos in vitro // Reprod. Toxicol. 1996. V. 10. P.321-326.

79. Ames B, Gold L.S. Environmental pollution, Pesticides, and Prevention of Cancer: Misconceptions //FASEB J. 1997. V.ll. P. 1041-1052.

80. Amstislavsky S, Maksimovsky L, Ternovskaya Yu, Ternovsky D. Cryopreservation of Carnivora. Mustela erminea. // Scientifur. 1993. V. 17. P. 127- 131.

81. Amstislavsky S, Maksimovsky L, Ternovskaya Yu, Ternovsky D. Ermine reproduction and embryo development // Scientifur. 1993. V. 17. P. 293- 298.

82. Amstislavsky S, Amstislavskaya T, Stein M. et al. Embryo cryobanking for conserving laboratory and wild animal species // Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 1996. V. 23. P.269-277.

83. Amstislavsky S, Amstislavskaya T, Eroschenko V.P. Methoxychlor given in the preim-plantation periods blocks sexual arousal in male mice // Reprod. Toxicol. 1999. V.13. P.405-411.

84. Amstislavsky S, Ternovskaya Yu. Reproduction in mustelids // Animal Reprod. Sci, 2000. V. 60. P. 571-581.

85. Amstislavsky S, Lindeberg H, Jarvinen M. et al. Ex-situ preservation of Mustelidae: primer of application of genetic resource bank concept with the use of polecats as the model species // Scientifur. 2000. V. 24. P.45-58.

86. Amstislavsky S, Alekhina T, Barykina N. et al. Effects of maternal environment during early postnatal development on behavior in cataleptic rats // Behav. Proc. 2001. V. 56. P. 41-47.

87. Amstislavsky S, Kizilova E, Eroschenko V. Preimplantation mouse embryo development as a target of the pesticide methoxychlor // Reprod. Toxicol. 2003. V. 17. P. 79-86.

88. Amstislavsky S, Kizilova E, Golubitsa A. et al. Preimplantation exposures of murine embryos to estradiol or methoxychlor change postnatal development // Reprod. Toxicol. 2004. V.18. P.103-108.

89. Amstislavsky S, Aalto J, Jarvinen M, Lindeberg H. et al. Embryo transfer in European mink and related species // International Conference on the Conservation of the European Mink. Logrono (LaRioja, Spain). 2003. P. 33-34.

90. Amstislavsky S, Aalto J, Jarvinen M, Lindeberg II. et al. Transfer of European mink (Mustela lutreola) embryos into hybrid recipients // Ther. 2004. V 62. P.458-467.

91. Amstislavsky S, Welker P, Friihauf Y. et al. Renal and endocrine changes in rats with inherited stress-induced arterial hypertension // J. Hystochem. Cell Biol. 2005. № 8. P. 1-9.

92. Amstislavsky S, Amstislavskaya T, Amstislavsky V. et al. Reproductive abnormalities in adult male mice following preimplantation exposures to estradiol or pesticide methoxychlor // Reprod. Toxicol. 2006. V. 21. P. 154- 159.

93. Amstislavskaya T, Osadchuk A, Naumenko E. Pathways of activation and change of the endocrine function of testes elicited by effect of presence of the female // Neurosc. Behav. Physiol. 1990. V.20. P.549-552 .

94. Amstislavskaya T.G, Popova N.R. Female-induced sexual arousal in male mice and rats: behavioral and testosterone response // Horm. Behav. 2004. V. 46. P. 544-550.

95. Anderson G.B. Interspecific prcgnancy: barriers and prospects // Biol. Reprod. 1988. V. 38. P. 1-15.

96. Anon I. Reviving the Tasmanian tiger // Science. 2002. V. 296. P. 1797.

97. Astolfi P., Zonta L.A. reduced male births in major Italian cities // Human Reprod. 1999. V.14. P.3116-3119.

98. Antzak D.F., Davies C.J., Kydd J., Allen W.R. Immulogical aspects of pregnancy in mules // Equine Vet. J. 1985. V. 3 . P. 68-72.

99. Appel RJ, Eroschenko VP. Passage of methoxychlor in milk and reproductive organs of nursing female mice. 1. Light and scanning electron microscopic observations // Reprod. Toxicol. 1992. V.6. P. 223-231.

100. Atherton R.W. A review of Domestic Ferret Reproduction // Conservation Biology and Black-Footed Ferret / Seal U.S., E.T. Thorne, M.A. Bogan, S.H. Anderson (eds)/ Thomson-Shore Inc., Dexter, Michigan. 1989. P.190-198.

101. Atanassova N., McKinnell C., Walker M. Permanent effects of neonatal estrogen exposure in rats on reproductive hormone levels, Sertoli cell number, and the efficiency of spermatogenesis in adulthood // Endocrinology. 1999. V.140. P.5364-5373.

102. Aussel C., Masseyeff R. Rat alpha-fetoprotein-estrogen interaction // J. Steroid. Biochem. 1978. V. 9. P. 547-554.

103. Austin C.R. The Egg // Reproduction in mammals. Vol.1. Germ cells and fertilization/ Eds C.Austin,R.Short. L./Cambridge. 1982. P.46-62.

104. Averill R.L., Adams C.E., Rowson L.E.A. Transfer of mammalian ova between species // Nature (London). 1955. V. 176. P. 167.

105. Bainbridge D.R.J., Jabbour H.N. Potential of assisted breeding techniques for the conservation of endangered mammalian species in captivity: a review // Vet. Rec. 1998. V.143. P.159-168.

106. Bal H.S. Effect of methoxychlor on reproductive systems of the rat // Proc. Soc. Expcr. Biol. Med. 1984. V.176. P. 187-196.

107. Barker D.J.P. In utero programming of cardiovascular disease. Ther.2000. V. 53. P. 555574.

108. Beaumont HM, Smith AF. Embryonic mortality during the pre- and post-implantation periods of pregnancy in mature mice after superovulation // J. Reprod. Fertil. 1975. V.45. P.437-448.

109. Beebe L.F.S., Cameron R.D.A., Blackshaw A.W. Piglets born from centrifuged and vitrified early and peri-hatching blastocysts // Ther. 2002. V. 57. P.2155-2165.

110. Bell R.W. Ultrasounds in small rodents: Arousal-produced and arousal-producing // Develop. Psychobiol. 1974. V. 7. P. 39-42.

111. Berg D.K., Asher G.W. New developments reproductive technologies in deer // Ther. 2003. V. 59. P. 189-205.

112. Betteridge K.J. An historical look at embryo transfer // J. Reprod. Fertil. 1981. V.62(l). P.l-13.

113. Betteridge K.J., Eaglesome M.D., Mitchell D. et al. Development of horse embryos up to twenty two days after ovulation: observations on fresh specimens // J. Anat. 1982. V.135. P.191-209.

114. Betteridge K.J. The anatomy and physiology of preattachment bovine embryos // Ther. 1988. V.29. 155- 187.

115. Bevan J. A Pictorial Handbook of Anatomy and Physiology. Mitchell Beazley Publishers Limited. London. 1978. 96 C.

116. Bigsby R., Chapin R.E., Daston G.P. et al. Evaluating the effects of endocrine disruptors on endocrine function during development // Environ. Health. Perspect. 1999. V.107. P. 613618.

117. Bischoff T.L.W. Entwicklungsgeschichte des Rehes. Giessen, 1854.

118. Blair P. Immunologic consequences of early exposure of experimental rodents to diethylstilbestrol and steroid hormons// Developmental effects of diethylstilbestrol (DES) in pregnancy/Eds. A. Herbst, H. Bern . N-Y.: Thieme-Stratton. 1981. P. 167-178.

119. Bleuler E. Dementia Praecox on the Group of Schizophrenias. Translated by Zinkin. New York. International Universities Press, 1911.

120. Boland M., Goudling D., Roche J.F. Alternative gonadotropinfor superovulation in cattle // Ther. 1991. V. 35. P. 5-19.

121. Boldyrev A.A., Kotlobai A.A., Kamernitskii A.V. et al. In vivo corticosteroid production by the adrenal glands of the SSH (stress-sensitive hypertensive) strain of rat // Biomed. Sci. 1990. V.l. P.524-527.

122. Bolton V.N., Oades P.J., Johnson M.H. The relationship between cleavage, DNA, replication and gene expression in the mouse 2-cell embryo // J. Embryol. Exp. Morphol. 1984. V.79. P. 139-163.

123. Boone W.R., Catlin J.C., Casey K.J. et al. Live birth of a bear cub following nonsurgical embryo collection //Ther. 1999. V.51. P.519-529.

124. Bos-Mikich A., Wood M. G., Candy M. G., et al. Cytogenetic analysis and developmental potential in vitrified mouse oocytes // Biol. Reprod. 1995. V. 53. P. 780-785.

125. Bouquet M., Seiva J., Auroux M. Cryopreservation of mouse oocytes: mutagenic effects in the embryo. Biol. Reprod. 1993. V. 49. P. 764-769.

126. Bouquet M., Seiva J., Auroux M. Effects of cooling and equilibration in DMSO, and cryopreservation of mouse oocytes on the rates of in vitro fertilization, development and chromosomal abnormalities // Mol. Reprod. Dev. 1995. V. 40. P. 110-115.

127. Bowlby J. Attachment. New York, Basic Books, 1969.

128. Boyd J.D., Hamilton W.J. Cleavage, early development and implantation of the egg // Marshall's physiology of reproduction / Longmans, Green and Co , London-N-Y- Toronto, Parkes A.S. editor, Third edition, 1952. P. 1-110.

129. Boving B.G. Blastocyst-uterine relationships // Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1954. V.l9. P. 9-28.

130. Boving B.G. Rabbit egg coverings //Anat. Rec. 1957. V.l27. P.270.

131. Boving B.G. Spacing and orientation of blastocysts in utero // Biology of Mammalian Fertilization and Implantation / Moghissi K.S:, Hafez E.S.E. editors. Springfield, Thomas, 1972. P. 357-378.

132. Braastad B. Effect of prenatal stress on behaviour of offspring of laboratory and farmed mammals//Appl. Anim. Behav. Sci. 1998. V. 61. P. 159-180.

133. Brison D.R., Schultz R.M. Apoptosis during mouse blastocyst formation: evidence for a role for survival factors including transforming growth factor-a // Biol. Reprod. 1997. V. 56. P.1088-1096.

134. Bronson F.H. Effects of prolonged anabolic steroids on the behavior of male and female mice // Pharm. Biochem. Behav. 1996. V.53. P. 329-334.

135. Brusov K.P. Zum Stand und der Bedeutung des Embriotransfer beim Schwein. Tierzucht. 1987. V.8. P.364-368

136. Buchanan G. Asymmetrical distribution of implantation sites in the rat uterus // Biol. Reprod. 1974. V.ll. P. 616-618.

137. Buckrell B.C., Gartley C.J., Mehren K.G., et al. Failure to maintain interspecific pregnancy after transfer of Dall's sheep embryos to domestic ewes // J. Reprod. Fertil. 1990. V.90. P.387-394.

138. Buhi W.C. Haracterization and biological roles of oviduct specific oestrogen-dependent glycoprotein//Reproduction. 2002. V. 123. P. 355-362.

139. Bulger W., Mucitelli R.M., Kupfer D. Studies on the in vivo and in vitro estrogenic activities of methoxychlor and its metabolites : Role of hepatic mono-oxidase in methoxychlor activation // Biochem. Pharmacol. 1978. V. 27. P. 2417-2423.

140. Bulger W.H., Kupfer D. Estrogenic activity of pesticides and other xenobiotics on the uterus and male reproductive tract // Endocrine Toxicology /Thomas JA, Korach KS, McLachlan JA, eds. / Raven Press. 1985. New York. P. 1-33.

141. Bunag R.D. Measurement of blood pressure in rats // Handbook of Hypertension / Ed. De Jong W./ Amsterdam. Elsevier Science . 1984. V. 4. P. 1-12.

142. Bunch T, Foote W, Whitaker B. Interspecies ovum transfer to propagate wild sheep // J. Wildl. Manage. 1977. V.41. P.726-730.

143. Burns J.M., Weinberger M.J., Veneziale C.M. Sex-steroid responses and binding in seminal vesicle epithelium // J. Biol. Chem. 1979. V.254. P.2258-2264.

144. Calessen H., Greve Т., Avery B. Embryo technology in cattle: brief review // Acta Agric. Scand. 1998. V. 29. P. 19-29.

145. Cappai P., Branca A., Casu S. et al. Embryo transfer da Ovis A. mussimon a Ovis aries // Atti. Soc. Ital.Sci. Vet. 1988. V.42. P. 179-181.

146. Carroll RS, Erskine MS, Doherty PC, Lundell LA, Baum MJ. Coital stimuli controlling luteinizing hormone secretion and ovulation in the female ferret. Biol. Reprod. 1985. V.32. P.925-933.

147. Castren H., Algers В., de Passille A.M. et al. Preparturient variation in progesterone , prolactin, oxytocin and somatostatin in relation to nest building in sows // Appl. Anim. Behaviour Science. 1993. V. 38. P. 91-102.

148. Chang M.C., Yanagimachi R. Fertilization of ferret ova by deposition of epididimal sperm into the ovarian capsulae with special reference to fertilizable life of ova and the capacitation of sperm // J. Exp. Zool. 1963. V. 154. P. 175-188.

149. Chang M.C. Fertilizing life of ferret sperm in the female tract // Exp. Zool. 1965. V. 158. P. 87-100.

150. Chang M.C. Reciprocal transplantation of eggs between rabbit and ferret // J. Exp. Zool 1966. V.161.P. 297.

151. Chang M.C. Reciprocal insemination and egg transfer between ferrets and mink // J. Exp. Zool. 1968. V.168. P. 49-60.

152. Chapin R.E., Harris M.W., Davis B.J. et al. The effects of perinatal/juvenile methoxychlor exposure on adult rat nervous, immune and reproductive system function // Fundam. Appl. Toxicol. 1997. V.40. P.138-157.

153. Choi Y.H., Love C.C., Love L.B. Developmental competence in vivo and in vitro of in vi-tro-matured equine oocytes fertilized by intracytoplasmic sperm injection with fresh or frozen-thawed spermatozoa// Reproduction. 2002. V.123. P.455-465.

154. Christiansen J. Reproduction in the dog and cat. 1984. Baillere Tindall, London, 309 P.

155. Cierpial M.A., McCarty R. Hypertension in SHR rats: contribution of maternal environment // Am. J. Physiol. 1987. V. 253. H980-H984.

156. Cierpial M.A., Shasby D.E., McCarty R. Patterns of maternal behavior in the spontaneously hypertensive rat // Physiol Behav. 1987. V. 39. P. 633-637.

157. Cierpial M.A., Konarska M., McCarty R. Maternal influences on sympathetic-adrenal medullary system in spontaneously hypertensive rats // Am. J. Physiol. 1990 (a). V. 258. P. H1312-H316.

158. Cierpial M.A., Murphy C.A., McCarty R. Maternal behaviour of spontaneously hypertensive and Wistar-Kyoto normotensive rats: effects of reciprocal cross fostering of litter // Behav. Neural. Biol. 1990 (b) V. 54. P. 90-96.

159. Clark D.A., Slapsys R., Croy B.A. et al. Local active suppression by suppressor cells in the decidua: a review // Am. J. Reprod. Immunol. 1984. V.5. P.78-83.

160. Clemens L., Glaude В., Coniglio L. Prenatal endogenous androgenic influences on masculine sexual behavior and genital morphology of male and female rats // Horm. Behav. 1978. V.10. P. 40-53.

161. Cline E.M., Randall P.A., Oliphant G. Hormone-mediated oviductal influence on mouse embryo development// Fertil. Steril. 1977. V.28. P. 766-71.

162. Cognie Y. State of the art in sheep-goat embryo transfer // Ther. 1999. V.51. P. 105-116.

163. Cognie Y. Current status of embryo technologies in sheep and goat // Ther. 2003. V.59. P. 171-188.

164. Colborn T, Vomsaal F.S, Soto A.M. Developmental effects of endocrine-disrupting chemicals in wildlife and humans// Environ. Health. Perspect. 1993. V.101. P. 378-384.

165. Cole H.H, Hart G.H. The potency of blood serum of mares in progressive stages of pregnancy in effecting the sexual maturityof the immature rat // Am. J. Physiol. 1930. V. 93. P. 57-68.

166. Connell P.H. Amphetamine Psychosis. London: Chapman Hall, 1958.

167. Cooke P.S, Eroschenko V.P. Inhibitory effects of technical grade methoxychlor on development of neonatal male mouse reproductive organs // Biol. Reprod. 1990. V.42. P. 587598.

168. Cools AR, Brachten R, Heeren D. et al. Search after neurobiological profile of individual specific features of Wistar rats // Brain Res. Bull. 1990. V.24. P.49-69.

169. Copp A.J. Interaction between inner cell mass and trophectoderm of the mouse blastocyst. I. A study of cellular proliferation //J. Embryol. Exp. Morphol. 1978. V.48. P.109-125.

170. Corvol P, Persu A, Gimenez-Roqueplo A.P, Jeunemaitre X. Seven lessons from two candidate genes in human essential hypertension: angiotensinogen and epithelial sodium channel // Hypertension. 1999. V.33. P.1324-1331.

171. Cummings A.M., Perreault S.D. Methoxychlor accelerates embryo transport through the rat reproductive tract // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1990. V. 102. P. 110-116.

172. Cummings A.M., Gray L.E. Methoxychlor affects the decidual cell response of the uterus but not other progestational parameters in female rats // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1987. V. 90. P.330-336.

173. Cupps P.T. Reproduction in Domestic Animals. 1991. Acadcmic Press, San Diego, California, 670 P.

174. Davis D.L, Bradlow H. Can environmental estrogens cause breast cancer? // Sci. Am. 1995. P. 165-172.

175. Davis D.L, Gottlieb M.B, Stampnintzky J.R. Reduced ratio of male to female births in several industrial countries. A sentinel health indicator? //JAMA. 1998. V.279. P. 10181023.

176. Deanesly R. Delayed implantation in the stoat (Mustela erminea) // Nature. 1943.V.151. P.365.

177. De la Fuente R, Plante L, King W.A. X chromosome inactivation in the preattachment bovine embryo // Ther. 1993. V.39. P.200.

178. Denker H.-W. Structural dynamics and function of early embryonic coats // Cell Tiss. Organs. 2000. V. 166. P. 180-207.

179. Dennenberg V.H, Rosenberg K, Zarrow M.X. Mice reared with rat aunts: effect in adulthood upon plasma corticosterone and openfield activity // Physiol. Behav. 1969. V. 4. P.705-707.

180. Di Berardino M. A. Animal cloning- the route to new genomics in agriculture and medicine // Differentiation 2000. V. 68. P. 67-83

181. Dinnyes A, Wallage G.A, Rail W.F. Effect of genotype on the efficiency of mouse embryo cryopreservation by vitrification or slow freezing methods // Mol. Reprod. Dev. 1995 V.40. P. 429-435.

182. Dixon Т.Е., Hunter J.W, Beatson N.S. Pregnancies following the export of frozen red deer embryos from New Zealand to Australia// Theriogenology 1991. V.35. P. 193.

183. Dobrinsky J.R. Advancements in cryopreservation of domestic animal embryos // Ther. 2002. V. 57. P.285-302.

184. Dickson A.D. The form of mouse blastocyst // J. Anat. 1966. V. 100. P. 335-348.

185. Dochi О, Imai К, Takakura H. Birth of calves after direct transfer of thawed bovine embryos stored frozen in ethylene glycol // Anim. Reprod. Sci. 1995. V.38. P. 179-185.

186. Donoghue A.M., Johnston L.A., Seal U.S et al. In vitro fertilization and embryo development in vitro and in vivo in the tiger (Panthera tigris) // Biol Reprod. 1990. V.43. P. 733744.

187. Donovan B.T., Ter Haar M.B. Effects of luteinizing hormone releasing hormone on plasma follicle-stimulating hormone and luteinizing hormone levels in the ferret // J. Endocr. 1977. V.73. P.37-52.

188. Dorn C. G. Application of reproductive technologies in North American Bison (Bison bison)//Ther. 1995. V. 43. P. 13-20.

189. Dresser B.L. Embryo transfer in exotic bovides. Int. Zoo yearbook. 1986. V. 24/25. P. 138142.

190. Dresser BL, Gelwicks EJ, Wachs KB, Keller GL. First successful transfer of cryopreserved feline (Felis catus) embryos resulting in live offspring // J. Exp. Zool. 1988. V. 246. P. 180186.

191. Driancourt M.A. Follicular dynamics in sheep and cattle // Ther. 1991. V. 35. P.55-69.

192. Driscoll S., Taylor S. Effects of prenatal maternal estrogen on the male urogenital system // Obstet. Gynecol. 1980. V. 56. P. 537-542.

193. Drost M., Wright J.M., Cripe W.S, Richter A.R. Embryo transfer in water buffalo {Bubalus bubalis) II Ther. 1983. V.20. P. 579-584.

194. Ducibella Т., Anderson E. Cell shape and membrane changes in the eight-cell mouse embryo: prerequisites for morphogenesis of the blastocyst // Dev. Biol. 1975. V.47. P. 45-58.

195. Dulioust E., Toyama K., Busnel M-C. et al. Long-term effects of embryo freezing in mice. Proc. Nat. Acad. Sci. 1995. V.92. P.589-593.

196. Dutourne B, Canivenc R. Dynamics of blastocyst migration in the European badger (Meles meles L.) //Acad. Sci. Hebd. Seances. 1971. V. 273. P.2579-2582.

197. Ebert K.M., Selgrath J.P., DiTullio P. et al. Transgenic production of a variant of human tissue-type plasminogen activator in goat milk: generation of transgenic goats and analysis of expression // Biotechnology (N -Y). 1991.V.9. P.835-838.

198. Edwards R.G. Bavister B.D. Steptoe P.C. Early stages of fertilization in vitro of human oocytes matured in vitro //Nature 1969. V. 221. P. 632-635.

199. Eiscnbach M. Sperm chemotaxis // Reviews of Reproduction. 1999. V. 4. P. 56-66.

200. Elbing L., Colot M. Abnormal development and transport and increase sister chromatid exchange in preimplantation embryos following superovulation in mice // Mutat. Res. 1985. V.147. P.189-195.

201. El-Danasouri I., Selman H. Successful pregnancies and deliveries after a simple vitrification protocol for day 3 human embryos // Fert. Steril. 2001. V.76. P. 400-402.

202. Ellenbroek B.A., Sluyter F., Cools A.R. The role of genetic and early environmental factors in determining apomorphine susceptibility // Psychopharmacol. 2000. V. 148. P. 124-131.

203. Enders AC, Schlafke S. Cytological aspects of trophoblast-uterine interaction in early implantation //Am. J. Anat. 1969. V.125. P. 1-29.

204. Enders A.C., Schlafke S. Implantation in the ferret: epithelial penetration // Am. J. Anat. 1972. V. 133. P. 291-315.

205. Enders R.K. Reproduction in the mink (Mustela vison) // Proc. Am. Phyl. Soc. 1952.V.96. P.696-74I.

206. Enders A.C. The fine structure of the blastocyst // The Biology of the Blastocyst / Blandau RJ editor / University Chicago Press. 1971. P.71-94.

207. Enders A., Schlafke H., Hubbard N.E., Mead R.A. Morphological Changes in the Blastocyst of the Western Spotted Skunk during Activation from Delayed Implantation. Biology of Reprod. 1986. V.34. P.423-437.

208. England G.C, Verstegen J.P, Hewitt D.A. Pregnancy following in vitro fertilisation of canine oocytes II Vet. Rec. 2001. V.148. P.20-22.

209. Eppig J.J, O'Brien M.J. Development in vitro of mouse oocytes from primordial follicles // Biol Reprod. 1996. V.54. P. 197-207.

210. Eroschenko V.P, Cooke P.S. Morphological and biochemical alterations in reproductive tracts of neonatal female mice treated with the pesticide methoxychlor // Biol. Reprod. 1990. V. 42. P.575-585.

211. Eroschenko V.P. Ultrastructure of vagina and uterus in young mice after methoxychlor exposure // Reprod. Toxicol. 1991.V.5. P.427-435.

212. Eroschenko V.P, Abuel-Atta A.A, Grober M.S. Neonatal exposure to technical methoxychlor alters ovaries in adult mice // Reprod. Toxicol. 1995. V.9. P. 379-387.

213. Eroschenko V.P, Rourke A.W, Sims W.F. Ontogeny of estrogen receptors (ER) and ER mRNA in mouse uteri after estradiol or methoxychlor exposures // Reprod. Toxicol. 1996. V.10. P.265-271.

214. Eroschenko V.P. Atlas of Histology with Functional Correlations, Baltimore, Williams & Wilkins. 1996, 362 P.

215. Eroschenko V.P, Swartz W.J, Ford L. Decreased superovulation in adult mice following neonatal exposure to technical methoxychlor//Reprod. Toxicol. 1997. V. 11. P. 807-814.

216. Eroschenko V.P., Amstislavsky S.Ya, Schwabel H, Ingermann R.L. Altered behaviors in male mice, male quail, and salamander lavrae following early exposures to estrogenic pesticide methoxychlor // Neurotoxicol. Teratol. 2002. V.24. P.29-36.

217. Eroschenko V.P. diFiore's Atlas of Histology with Functional Correlations. 10-th edition Phyladelphya, Baltimore, N-Y. Lippincott Williams & Wilkins. 2005. 448 P.

218. Erskin M.S., Dennenberg V.H, Goldman B.D. Agresssion in the lactating rat: effect of intruder age and test arene // Behav. Biol. 1978. V. 23. P. 52-66.

219. Ertzeid G,Storeng R. Adverse effects of gonadotrophin treatment on pre- and postimplan-tation development in mice // J. Reprod. Fert. 1992. V. 96. P. 649-655.

220. Ertzeid G, Storeng R. The impact of ovarian stimulation on implantation and fetal development in mice // Human Reprod. 2001. V. 16. P. 221-225.

221. Facemire C.F, Gross T.S, Guillette L.J. Reproductive impairment in the Florida panther: nature or nurture // Environ. Health. Perspect. 1995. V.103. P. 79-86.

222. Fairbanks L.M. Individual differences in maternal style // Adv. Study Behav. 1996. V. 25. P. 579-611.

223. Farstad W. Assisted reproductive technology in canid species // Ther. 2000 (a) V.53. P.175-186.

224. Farstad W. Current state in biotechnology in canine and feline reproduction // Anim. Reprod. Sci. 2000 (b) V.60-61. P.375-387.

225. Fehilly C.B, Willadsen S.M, Tucker E.M. Interspecific chimaerism between sheep and goat // Nature. 1984. V. 307. P.634-636.

226. Fekete E, Little C.C. Observation on the mammary tumor incidence of mice born from transferred ova // Cancer Res. 1942. V. 2. P. 525-530.

227. Fisher J.S, Millar M.R, Majdic G. Immunolocalisation of oestrogen receptor-alpha within the testis and excurrent ducts of the rat and marmoset monkey from perinatal life to adulthood // J. Endocrinol. 1997. V.153. P. 485-495.

228. Foote R.H, Ellington J.E. Is a superovulated oocyte normal? // Ther. 1988. V. 29. P.l 11 -123.

229. Fleming R., Coutts J.R.T. Induction of multiple follicle development for IVF // British Med. Bull. 1990. V. 46 (3). P. 596-613.

230. Fox G.A., Gilman A.P., Peakall D.B., Andrerka F.W. Aberrant behavior of nesting gulls // J. Wildl. Manage. 1978. V.42. P. 477-483.

231. Fox J.G. Biology and diseases of the ferret. 2nd ed. Baltimore. Williams and Wilkins. 1998. 227 P.

232. Francis D., Diorio J., Liu D., Meaney M.J. Nongenomic transmission across generations in maternal behaviour and stress responses in the rat // Science. 1999. V.286. P.l 155-1 158.

233. Francis D., Meaney M.J. Maternal care and development of stress responses // Curr. Opinion in Neurobiol. 1999. V. 9. P. 128-134.

234. Freeman Z.S. Stress and hypertension- a critical review. 1990. V.153. P. 621- 625.

235. Freud S. Three essays on sexuality // The Standard Edition of the complete Psychological Works / Strachley J (ed)/ London: Hogarth, 1953.

236. Friedman M.J. Bruno J.P. Alberts J.R. Physiological and behavioral consequences in rat of water recycling during lactation // J. Сотр. Physiol. Psychol. 1981. V. 95. P. 25-35.

237. Fry D.M., Toone C.K. DDT-induced feminization of gull embryos // Science. 1981. V. 213 P. 922-924.

238. Fry D.M. Reproductive effects in birds exposed to pesticides and industrial chemicals // Environ. Health. Perspect. 1995. V. 103. Suppl 7. P. 165-171.

239. Fukuda, M., Fukuda, K., Andersen, C.Y. et al. Right sided ovulation favours pregnancy more than left sided ovulation // Hum. Reprod. 2000. V. 15. P. 1921-1926.

240. Galli C„ Duchi R., Crotti G. et al. Bovine embryo technologies // Ther. 2003. V. 59. P.599-616.

241. Gamow E.I., Prescott D.M. The cell life cycle during early embryogenesis of the mouse // Exp. Cell. Res. 1970. V. 59. P.l 17-123.

242. Gates A.H. Maximizing yield and development uniformity of eggs // Methods in Mammalian Embriology/ Daniel J.С ed./ San Francisco Freeman. 1971. P.64 75.

243. Gawronska В., Stepien A., Ziecik A.J. Role of luteinizing hormone in control of oviduct function // Reproduction in Domestic Animals 2000. V. 35. P. 129-133.

244. Geisert R.D., Brookbank J.W., Roberts R.M., Bazer F.W. Establishment of pregnancy in the pig: II. Cellular remodeling of the porcine blastocyst during elongation on day 12 of pregnancy//Biol. Reprod. 1982. V.27. P.941-955.

245. Gerlinskaya L.A., Moshkin M. P., Evsikov V.I. Allogenic stimulation in early pregnancy improves pre- and postnatal ontogenesis in BALB/cLac mice // J. Reprod. Devel. 2000. V.46. P. 387-396.

246. Gerlinskaya L.A., Evsikov V.I. Influence of genetic dissimilarity of mother and fetus on progesterone concentrations in pregnant mice and adaptive features of offspring // Reprod. 2001. V. 121. P. 409-417.

247. Gomez M.C., Jenkins J.A., Giraldo A., Harris R.F., King A., Dresser B.L., Pope C.E. Nuclear transfer of synchronized african wild cat somatic cells into enucleated domestic cat oocytes // Biol. Reprod. 2003. V.69. P.1032-1041.

248. Gomez M.C., Pope C.E., Giraldo A. Birth of African Wildcat cloned kittens born from domestic cats // Cloning Stem Cells. 2004. V.6. P. 247-258.

249. Gonzales-Mariscal G., Rosenblatt L. Maternal behavior in rabbits: a historical and multid-isciplinary perspective // Advances in the study of behavior. 1996. V.25. P. 333-360.

250. Gorski J. Hou Q. Embryonic estrogen receptors: Do they have a physiological function? // Environ. Health. Perspect. 1995. V.103. P. 69-72.

251. Goto К., Nakanishi Y., Ohkutsu S. Plasma progesterone profiles and embryo quality in su-perovulated black cattle // Ther. 1987. V.27. P.819 826.

252. Gouldsborough I., Ashton N. Effect of cross-fostering on neonatal sodium balance and adult blood pressure in the spontaneously hypertensive rat // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 1998. V. 25. P. 1024-1031.

253. Gouldsborough I., Black V., Johnston I.T., Ashton N. Maternal nursing behaviour and the delivery of milk to the neonatal spontaneously hypertensive rats // Acta Physiol. Scand. 1998. V.l. P. 107-114.

254. Gouldsborough I., Ashton N. Maternal environment alters renal response to angiotensin 2 in the spontaneously hypertensive rat // Clin. Exper. Pharmacol. Physiol. 2001. V. 28. P. 504-509.

255. Gourevitch G., Hack M.M. Audibility in the rat // J. Сотр. Physiol. Psychol. 1966. V. 62. P. 289.

256. Graham L.H., Swanson W.F., Brown J.L. Chorionic gonadotropin administration in domestic cats causes an abnormal endocrine environment that disrupts oviductal embryo transport //Ther. 2000. V.54. P.l 117-1131.

257. Gray L.E., Ostby J., Ferrell J. et al. A dose-response analysis of methoxychlor-induced alterations of reproductive development and function in the rat // Fundam. Appl. Toxicol. 1989. V.12.P. 92-108.

258. Gray L.E. , Ostby J.S., Kelce W.R. Developmental effects of an environmental antiandro-gen: the fungicide vinclozolin alters sex differentiation of the male rat // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1994. V. 129. P. 46-52.

259. Greenlee A.R., Quail C.A., Berg R.L. Developmental alterations in murine embryos exposed in vitro to an estrogenic pesticide, o,p'-DDT // Reprod. Toxicol. 1999. V.13. P.555-565.

260. Greenlee A.R., Quail C.A., Berg R.L. The antiestrogen ICI 182,780 abolishes developmental injury for murine embryos exposed in vitro to o'p'-DDT // Reprod. Toxicol. 2000. V.14. P.225-234.

261. Greenwald G.S. Species differences in egg transport in response to exogenous estrogen // Anat. Rec. 1967. V. 157. P. 163-172.

262. Grober M., Winterstrain G.M., Ghazanfar A.A., Eroschenko V. The effects of estradiol on gonadotropin -releasing hormone neurons in the developing mouse brain // Gener. Com-par. Endocrinol. 1998. V. 112. P. 356-363.

263. Grota L.J., Ader R. Continouos recording of maternal behaviour in Rattus norvegicus // Animal Behav. 1969. V. 17. P.722-729.

264. Gubernick D.J., Alberts J.R. Maternal licking by virgin and lactating rats: water transfer from pups. Physiol. Behav. 1985. V. 34. P. 501-506.

265. Guillette L.J. Gross T.S, Masson G.R., et al. Developmental abnormalities of the gonad and abnormal sex hormone concentrations in juvenile alligators from contaminated and control lakes in Florida// Environ. Health. Perspect. 1994. V. 102. P. 680-688.

266. Guillette L.J., Gunderson M P. Alteration in development of reproductive and endocrine systems of wildlife populations exposed to endocrine-disrupting contaminants // Reproduction. 2001. V. 122. P. 857-864.

267. Gulamhusein A.P. Reproductive studies in the Mustelidae. Ph.D. Thesis, Universirty of London. 1972.

268. Gulamhusein A.P., Thawley A.R. Plasma progesterone levels in the stoat // J. Reprod. Fert. 1974. V.36. P.405-408.

269. Gustafsson H., King W.A., Elofson L. et al. Studies on ovarian follicular development and preimplantation embryonic development in mink // Ther. 1987. V. 27. P. 234.

270. Guyton A.C. Abnormal renal function and autoregulation in essential hypertension // Hypertension. 1991. V.18 (Suppl 5). P. 49-53.

271. Hafez E.S.E. (Ed.) Reproduction in Farm Animals. (5th Edition), Lea & Febiger, Philadelphia, 1987. 649 P.

272. Hafez В., Hafez E.S.E. Reproduction in Farm Animals. Philadelphia, Lippincont Williams & Williams, 2000. 475 P.

273. Hall D.L., Payne L.A., Putnam J.M., Huet-Hudson Y.M. Effect of methoxychlor on implantation and embryo development in the mouse // Reprod. Toxicol. 1997. V.l 1. P.707-708.

274. Hailing A., Forsberg J.G. Ovarian reproductive function after exposure to diethylstilbestrol in neonatal life // Biol. Reprod. 1990. V.43. P. 472-477.

275. Hamilton WJ. The early stages in the development of the ferret: fertilisation to the formation of the prochordal plate//Trans. R. Soc. Edinb. B. 1934. V. 58. P. 251-278.

276. Hamilton G.V., MacGowan K. What is wrong with Marriage. Albert and Charles Boni, New York, 1929.

277. Hammer R.E., Pursel V.G., Rexroad C.E. Production of transgenic rabbits, sheep and pigs by microinjection //Nature. 1985. V.315. P.680-683.

278. Hammer C.J., Tyler H.D., Loskutoff N.M. et al. Compromised development of calves (Bos gaurus) derived from in vitro-generated embryos and transferred interspecifically into domestic cattle (Bos taurus) II Ther. 2001. V.55. P.1447-1455.

279. Hammond J., Walton A. Notes on ovulation and fertilization in ferret // J. Exp. Biol. 1934. V.l 1. P. 307-319.

280. Handyside A.H., Hunter S. Cell division and death in the mouse blastocyst before implantation//Roux's Arch. Dev. Biol. 1986. V. 195. P. 519-526.

281. Hansen P.J., Block J. Towards an embryocentric world: the current and potential uses of embryo technologies in dairy production // Reprod. Fert. Devel. 2004. V.16. P. 1-14.

282. Hansson A. The physiology of reproduction in mink (Mustela vison Schreb) with special reference to delayed implantation //Acta Zool (Stockh) 1947. V. 28. P.l-136.

283. Hardy K. Apoptosis in the human embryo// Rev. Reprod. 1999. V.4. P.125-134.

284. Hardy K., Wright C., Rice S. et al. Future developments in assisted reproduction in humans // Reproduction. 2002. V. 123(2). P.171-183.

285. Hardy K., Spanos S. Growth factor expression and function in the human and mouse preimplantation embryo // J. Endocrinol. 2002. V.l72. P.221-236.

286. Harrap S.B., Charchar F.J., Kapuscinski M. Renal phenotypes and the development and prevention of genetic hypertension // Handbook of Hypertension. Elsevier Science. 1999. Vol.19. P. 253-271.

287. Harrer J.A., Lee H.H. Differential effects of oestrogen on the uptake of nucleic acid precursors by mouse blastocysts in vitro // J. Reprod. Fert. 1973. V.33. P.327-330.

288. Harrer R. Sperm and egg transport // Reproduction in mammals (Second Edition). Book 1. Germ cells and fertilization / Eds.: Austin C.R., Short R.V./ Cambridge University Press, Cambridge, 1982, P. 102-127.

289. Hasler J.F. Factors affecting frozen and fresh embryo transfer pregnancy rates in cattle 11 Ther. 2001. V.56. P.1401-1415.

290. Hayachi M, Sofuni T, Ishidate M. An application of acridine orange fluorescent staining to the micronucleus test // Mutat. Res. 1983. V.120. P. 241-247.

291. Hazeleger W, Kemp B. State of the art in pig embryo transfer // Ther. 1999. V.51. P.81-90.

292. Heap W. Preliminary note on the transplantation and growth of mammalian ova within a uterine foster- mother//Proc. R. Soc. (London). 1891. Vol. 48. P. 457-458.

293. Henry J.P, Stephens P.M., Ely D.L. Psychosocial hypertension and the defence and defeat reactions // J. Hypertens. 1986. V.4. P.687-697.

294. Henry J.P, Grim C.E. Psychosocial mechanisms of primary hypertension . Editorial review // J. Hypertens. 1990. V.8 P.783-793.

295. Hess R.A, Gist D.H, Bunick D. Estrogen receptor (alpha and beta) expression in the ex-current ducts of the adult male rat reproductive tract. J. Androl. 1997 (a). V.18. P.602-611.

296. Hess R.A, Bunick D, Lee K.H et al. A role for oestrogens in the male reproductive system // Nature 1997(6). 390 (4). P. 447-448.

297. Herman-Giddens M.E, Slora E.J, Wasserman R.C. Secondary sexual characteristics and menses in young girls seen in office practice: a study from the Pediatric Research in Office Settings network// Pediatrics. 1997. V.99. P.505-512.

298. Herbst A.L, Ulferder H, Poskanzer D.C. Adenocarcinoma of the vagina // N. Engl. J. Med. 1971. V. 284. P. 878-881.

299. Hill J.L, Walker S.K, Brown G.H, Nancarrow C.D. The effects of an estrus-associated oviductal glycoprotein on the in vitro fertilization and development of ovine oocytes matured in vitro // Ther. 1996. V. 46. P. 1379-1388.

300. Hinrichs K. Production of embryos by assisted reproduction in the horse. Theriogenology. 1998. V.49. P. 13-21.

301. Hiroi H, Momoeda M, Inoue S. et al. Stage-specific expression of estrogen receptor subtypes and estrogen responsive finger protein in preimplantation mouse embryos // Endocr. 1999. V.46. P. 153-58.

302. Hogan B, Constantiny F, Lacy E. Manipulating the mouse embryo. A laboratory manual. N.Y.: Spring Harbor Laboratory. 1986.

303. Hoist P, Phemister R.D. The prenatal development of the dog: preimplantaion events // Biology of Reproduction. 1971. V. 5. P. 194-206.

304. Holt W.V, Pickard A.R, Prather R.S. Wildlife conservation and reproductive cloning // Reproduction 2004. V. 127. P. 317-324.

305. Hou Q, Gorski J. Estrogen receptor and progesterone reccptor genes are expressed differentially in mouse embryos during preimplantation development // Proc. Natl. Acad. Sci. 1993. V.90. P.9460-9464.

306. Hou Q, Paria ВС, Mui С et al. Immunolocalization of estrogen receptor protein in the mouse blastocyst during normal and delayed implantation // Proc. Nat. Acad. Sci. 1996. V.93. P.2376-2381.

307. Howard J, Wildt D.E. Ejaculate-hormonal traits in the leopard cat (Felis bengalensis) and sperm function as measured by in vitro penetration of zona-free hamster ova and zona-intact domestic cat oocytes // Mol. Reprod. Dev. 1990. V.26. P. 163-174.

308. Howard J.G, Marinari P.E, Wildt D.E. Mustelid reproductive biology and integration of assisted reproductive technology in species recovery. Proceedings of the Г1 International

309. Symposium on Assisted Reproductive Technology for the Conservation and Genetic Management of Wildlife, Omaha, 17-18 January, 2001. P. 159-165.

310. Hunter R.H.F. The Fallopian Tubes. Their Role in Fertility and Infertility. 1988. Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, New-York, P. 126.

311. Huck U.W., Banks E.M. The effects of cross-fostering on the behaviour of two species of North American lemmings, Dicrostonyx croenlandicus and Lemmus trimucronatus. Sexual behaviour//Anim. Behav. 1980.V.28, P. 1053-1062.

312. Hummel K.P., Richardson F.L., Kekete E. Anatomy // Biology of Laboratory Mouse/ Green EL., Editor / Dover Publications, Inc. 2nd Ed, New York, 1968,288 P.

313. Hunter G.L., Bishop G.P., Adams C.E. Rowson L.E. Successful long-distance aerial transport of fertilized sheep ova // J.Reprod. Fert. 1962. V.3 P. 33-40.

314. Isaacs J.Т., Furuya Y., Berges R. The role of androgen in the regulation of programmed cell death/apoptosis in normal and malignant prostatic tissue // Seminars in cancer Biology. 1994. V.5. P.391-400.

315. Jalkanen L. Prospects of embryotechnology in fox research // Scientifur. 1993. V. 17. P. 287-293.

316. Jalkanen L., Lindeberg H. Successful embryo transfer in the silver fox (Vulpes vulpes) // Anim. Reprod. Sci. 1998. V.54. P. 139-147.

317. James W.H. Was the widespread decline in sex ratios at birth caused by reproductive hazards?//Human Reproduction. 1998. V. 13. P. 1083-1084.

318. Johnson M.H., Ziomek C.A. Induction of polarity in mouse 8-cell blastomeres: specificity, geometry, and stability //J. Cell Biol. 1981. V.91. P.303-308.

319. Johnson M, Everitt B.J. Essential Reproduction. L.: Blackwell Science Ltd., 2000. 264 P.

320. Johnson L.A. Sexing mammalian sperm for production of offsprint: the -state- of- the- art //Anim. Reprod. Sci. 2000. V. 60-61. P. 93-107.

321. Johnson L, Varner D.D., Roberts M.E. Efficiency of spermatogenesis: a comparative approach // Anim. Reprod. Sci. 2000. V. 2. P.471-480.

322. Jones P. The early origins of schizophrenia // Br. Med. Bull. 1997. V. 53. P. 136-155.

323. Kaiser J. Scientists Angle for Answers//Science 1996. V.124. P.1837-1838.

324. Kamjoo M., Brison D., Kimber S. Apoptosis in the preimplantation mouse embryo: effect of strain difference and in vitro culture // Mol.Reprod. Devel. 2002. V. 61. P. 67-77.

325. Kandel E.R. Biology and the future of psychoanalysis: a new intellectual framework for psychiatry revisited // Am. J. Psychiatry. 1999. V.156. P.505-524.

326. Kasai M., Niwa K., Iritani A. Effects of various cryoprotective agents on the survival of unfrozen and frozen mouse embryos II J. Reprod. Fert. 1981. V. 3. P. 175-180.

327. Kasai M., Nishimori M., Zhu S. E., Sakurai T. et al. Survival of mouse morulae vitrified in an ethylene glycol-based solution after exposure to the solution at varions temperatures // Biol. Repred. 1992. V. 47. P. 1134-1139.

328. Kanka J. Gene expression and chromatin structure in the pre-implantation embryo // Ther. 2003. V. 59. P.3-19.

329. Kashiwazaki N, Ohtani S, Miyamoto K, Ogawa S. Production of normal piglets from hatched blastocysts frozen at -196°C // Vet. Rec. 1991.V.128. P.256-257.

330. Katz R.J. Animal model of depression: effect of electroconvulsive shock therapy // Neuro-sci. Biobehav. Rev. 1981. V.5. P. 273-277.

331. Kelce W.R., Stone C.R., Laws S.L. et al. Persistent DDT metabolite p,p'-DDE is a potent androgen receptor antagonist // Nature. 1995. V. 375. P.581-585.

332. Kendrick K.M., Haupt M.A, Hinton M.R, Broad K.D., Skinner J.D. Sex difference in the influence of mothers on the social preferences of their offspring // Hormones and Behavior. 2001. V.40. P.322-338

333. King C.M. Stoat // The handbook of the New Zealand Mammals/ King C.M ed./Oxford University Press: Aukland. 1990. pp.288-312.

334. King R.S, Anderson S.H, Killian G.J. Effect of bovine oviductal estrus-associated protein on the ability of sperm to capacitate and fertilize oocytes // Journal of Andrology 1994. V.15. P. 468-478.

335. Kinney GM, Pennycook JW, Schriver MD, Templeton JW, Kraemer DC. Surgical collection and transfer of canine embryos // Biol. Reprod. 1979. V. 20. P.96.

336. Kirkpatrick J.F. Differential sensitivity of preimplantation mouse embryos in vitro to oestradiol and progesterone // J. Reprod. Fert. 1971. V.27. P. 283.

337. Klotchkov D.V, Eryuchenkov P.A. Effects of hCG on folliculogenesis and fecundity in mink ( Mustela vison Schreb). Ther. 2003. V. 60.P. 1583-1593.

338. Kolpakov V.G, Barykina N.N, Alekhina T.A, Ponomarev I.Yu. Some Genetic Ani mal Models for Comparative Psychology and Biological Psychiatry. 1996. Inst, of Cy-tol. and Genetics, Novosibirsk, 172 P.

339. Korczynski R, Korda P. Immobility reflex evoked by vertical lifting of the rat // Acta Neurobiol. Exp. 1988. V. 48.P. 145-159.

340. Kouba A.J, Abeydeera L.R, Alvarez I.M. et al. Effects of the porcine oviduct-specific glycoprotein on fertilization, polyspermy, and embryonic development in vitro // Biology of Reproduction. 2000. V. 63. P. 242-250.

341. Kraemer D.C, Flow B.L, Schriver M.D, Kinney G.M, Pennycook J.W. Embryo transfer in the nonhuman primate, feline and canine // Ther. 1979. V.l 1. P.51-62.

342. Kraemer D. Intraspecific and interspecific embryo transfer // J . Exper. Zool. 1983. V. 228. P. 363-371.

343. Krimpenfort P, Rademakers A, Eyestone W. et al.Generation of transgenic dairy cattle using in vitro embryo production// Biotechnology 1991.V.9. P.844-847.

344. Kudryavtseva N.N, Bakshtanovskaya I.V, Koryakina L.A. Social model of depression in mice of C57BL/6J strain//Pharmacol. Biochem. Behav. 1991.V.38. P.315-320.

345. Lanza R.P. Cibelli J.B, Diaz F. et al. Cloning of an endangered species (Bos gaurus) using interspecies nuclear transfer // Cloning 2000. V. 2. P. 79-90.

346. Lanza R.P, Cibelli J.B, Faber D. et al. Cloned cattle can be healthy and normal // Science. 2001. V. 294. P.1893-1984.

347. Lavranos T.C, Seamark R.F. Addition of steroids to embryo-uterine monolayer cocul-ture enhances survival and implantation in vitro // J. Reprod. Fert. 1989.V.l. P.41-47.

348. Lawson R.A, Adams C.E, Rowson L.E. The development of sheep eggs in the rabbit oviduct and their viability after re-transfer to ewes // J. Reprod. Fertil. 1972 (a). V. 29. P.105-116

349. Lawson R.A, Rowson L.E, Adams C.E. The development of cow eggs in the rabbit oviduct and their viability after re-transfer to heifers // J. Reprod. Fertil. 1972(b) V.28. P.313-315.

350. Z.Y., Jiang Q.S., Zhang Y.L. et al. Successful production of offspring after superovu-lation and in vitro culture of embryos from domestic ferrets (Mustela putorius furos) // Reproduction. 2001. V.l22(4). P.611-618.

351. Loskutoff N.M., Raphael B.L., Nemec L.A. Reproductive anatomy, manipulation of ovarian activity and non-surgical embryo recovery in suni (Neotragus moschatus zuluen-sis) // J. Reprod. Fertil. 1990. V.88. P.521-532.

352. Loskutoff N. M., P. Bartels M., Godke R.A. et al. Assisted reproductive technology in nondomestic ungulates: a model approach to preserving and managing genetic diversity. Ther. 1995. V. 43. P. 3-12.

353. Loskutoff, N.M. Biology, technology and strategy of genetic resource banking in conservation programs for wildlife // Gametes: development and function / A. Lauria, F. Gan-diolfi, G. Enne, L. Gianaroli (Eds)/ 1998. Rome. P. 275-286.

354. Luyet B.J. The vitrification of organic colloids and protoplasm // Biodynam. 1937. No.29. P.1-14.

355. Lucion А.В., de Almeida M.M. On the dual nature of maternal aggression in rats // Aggressive Behavior. 1996. V.22. P. 366-373.

356. Maccari S., Piazza P.V., Kabbaj M., Barbazanges A., Simon H., Le Moal M., Adoption reverses the long-term impairment in glucocorticoid feedback induced by prenatal stress//J. Neurosci. 1995. V. 15. P. 110-116.

357. Mangos GJ, Turner SW, Fraser ТВ, Whitworth JA. The role of corticosterone in cortico-trophin (ACTH)-induced hypertension in the rat // J. Hypertens. 2000. V.l8. P. 1849-1855.

358. Manual of the International Embryo Transfer Society. Stringfellow D.A., Seidel S. editors, USA. 172 P.

359. Maran Т., Henttonen H. Why is the European mink disappearing ? A review of the process and hypotheses // Ann Zool Fennici. 1995. V.32. P. 47-54.

360. Maran T, Robinson P. European mink, Mustela lutreola linnaeus 1761, captive breeding and husbandry protocol // European mink conservation & breeding committee & Tallinn Zoological Gardens, Tallinn, Estonia. 1996. P. 1-33.

361. Maran T. European mink // Endangered Animals. A reference Guide to Conflicting Issues/ Reading R.P., Miller B. eds./ Greenwood Press: Westport, London. 2000. P. 101-106.

362. Markel A.L.,. Maslova L.N., Shishkina G.T. et al. Developmental influences on blood pressure regulation in ISIAH rats // Handbook of Hypertension / McCarty R, Blizard D.A., Chevalier R.L. eds. / Elsevier Science. 1999. V.19. P.493- 526.

363. Martinez A.G., Matkovic M. Cryopreservation of ovine embryos : slow freezing and vitrification//Theriogenology. 1998. V. 49. P. 1039-1049.

364. Martus N.S., Verhage H.G., Mavrogianis P.A., Thidodeaux J.K. Enhancement of bovine oocyte fertilization in vitro with bovine oviductal specific glycoprotein // J. Reprod. Fert. 1998.V. 113. P. 323-329.

365. Martuzzi M., Di Tanno N., Bertollini R. Declining trends of male proportion at birth in Europe//Archives of Environmental Health. 2001. V.56. P.358-364.

366. Maslova L.N., Bulygina V.V., Markel A.L. Chronic stress during prepubertal development: immediate and long-lasting effects on arterial blood pressure and anxciety -related behaviour// Psychoneuroendocr. 2002. V.27. P. 549-561.

367. Mattapallil M.J., Ali S. Parentage assessment of an IVF calf from Bubalus bubalis by DNA fingerprinting // Gene. 1998. V. 206. P.209-214.

368. Maudlin I., Frazer L. The effect of PMSG dose on the incidence of chromosomal anomalies in mouse embryos fertilized in vitro // J. Reprod. Fert. 1977. V.50. P. 275-280.

369. Maunder R.G., Hunter J.J. Attachment and Psychosomatic Medicine: Development Contributors to Stress and Disease // Psychosomatic Medicine. 2001. V.63. P. 556-567.

370. Mayer J., Fritz H. The culture of preimplantation rat embryos and the production of allo-phenic rats // J.Reprod. Fert. 1974. V. 39. P. 1-4.

371. Mazur P., Leibo S.P., Chu E.H.Y. A two-factor hypothesis of freezing injury // Exp. Cell. Res. 1972. V. 71. P.345-355.

372. Mazur P. Freezing of living cells: mechanisms and implications // Am. J. Physiol (Cell Physiol). 1984. V. 16. C125-C142.

373. McCarty R., Tong H. Development of hypertension in spontaneously hypertensive rats: role of milk electrolytes // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. Suppl. 1995.V. 22. S215-S217.

374. McCarty R., Lee J.H. Maternal influences on adult blood pressure of SHRs: a single pup cross-fostering study//Physiol. Behav. 1996. V. 1. P. 71-75.

375. McCarty R. Development of the Hypertensive Phenotype. Basic and Clinical Studies // Handbook of Hypertension/ McCarty R., Blizard D.A., Chevalier R.L. eds / Elsevier Science 1999. Vol.19. P.413- 429.

376. McClintock M.K. Modulation of the oestrous cycle by pheromones from pregnant and lac-tating rats // Biol. Reprod. 1983. V.28. P. 823-829.

377. McDonald L.E. Veterinary Endocrinology and Reproduction. Philadelphia. Lea & Febin-ger. 1975.493 P.

378. McEvoy T.G., Sinclair K.D., Broadbent P.J. et al. Postnatal growth and development of Simmental calves derived from in vivo or in vitro embryos // Reprod. Fert. Develop. 1998. V.10. P. 459-464.

379. McEvoy T.G., Robinson J.J., Sinclair K.D. Developmental consequences of embryo and cell manipulation in mice and farm animals // Reproduction 2001. V.l22. P. 507-518.

380. McGinnis L.K., Duplantis S.C., Youngs C.R. Cryopreservation of sheep embryos using ethyleneglycol // Anim. Reprod. Sci. 1993. V. 30. P.273-280.

381. McGuire В., Novak M. The effects of cross-fostering on the development of social preferences in meadow voles (Microtus pensilvanicus) // Behav. Neural. Biol. 1987. V. 47. P. 167-172.

382. McKinney W.T., Bunney W.E. Animal model of deprseeion: review of evidence and implications for research // Arch.Gen.Psychiatry 1969. V.21. P. 240-248.

383. McLachlan J.A., Newbold R.R., Bullock B.C. Reproductive tract lessions in male mice exposed prenatally to diethylstilbestrol // Science 1975. V. 190. P. 191-192.

384. McLachlan J.A. Functional Toxicology: A new approach to detect biologicallyactive xeno-biotics // Envir. Helth. Persp. 1993. V. 101. P. 386-387.

385. McLachlan J.A., Arnold S.F. Environmental Estrogens // American Scientist. 1996. V.84. P. 452-461.

386. McLachlan J.A.Environmental Signaling: What Embryos and Evolution Teach Us About Endocrine Disrupting Chemicals // Endocr. Rev. 2001. V.22. P. 319-341.

387. McLaren. The Embryo // Reproduction in mammals: 2. Embryonic and fetal development/ Austin C.R., Short R.V. editors/ 1982, Cambridge University Press, Cambridge, P. 1-25.

388. McMurtry J.P., Wright G.L., Wexler B.C. Spontaneous hypertension in cross suckled rats // Science 1981. V. 16, P. 615-616.

389. Mead R.A. Delayed implantation in mustelids with special emphasis on the spotted skunk // J.Reprod.Fert. 1981. Suppl.29. P. 11-24.

390. Mead R.A. Embryonic diapause in vertebrates //J. Exp. Zool. 1993. V.266. P. 629-641.

391. Mead H.M. Dairy gene // The Sciences. 1997. P. 20-25.

392. Meaney M.J. Maternal care, gene expression, and the transmission of individual differences in stress reactivity across generations // Annu. Rev. Neurosci. 2001. V. 24. P. 11611192.

393. Miller N. Reproduction in the Brown rat// Amer. Natur. 1911. V. 45. P. 623-635.

394. Miller B, Armstrong D. Effects of a superovulatory dose of pregnant mare serum gonadotropin on ovarian function, serum estradiol, and progesterone levels and early embryo development in immature rats // Biol. Reprod. 1981. V. 25. P. 261- 271.

395. Miller B.G, Armstrong D.T. Infertility in superovulated immature rats: Role of ovarian steroid hypersecretion // Biol.Reprod. 1982. V. 26. P. 861 868.

396. Miller L, Kramer R, Warner V. Et al. Intergenerational transmission of parental bonding among women // J. Am. Acad. Child. Adolesc. Psychiatry. 1997. V.36. P. 1134-1139.

397. Mobraaten L. Mouse Embryo Cryobanking // J. of in Vitro Fertilization and Embryo Transfer. 1986. V. 5. P. 28-32.

398. Mobraaten L. and the embryo freezing crew. Cryopreservation. The Jackson Laboratory. 1989. P.l-11.

399. Mohr L, Trounson A. The use of fluorescein diacetate to assess embryo viability in the mouse // J. Reprod. Fert. 1980.V. 58. P. 189-196.

400. Moller O.M. Plasma progesterone before and after ovariectomy in unmated and pregnant mink, Mustela vison //J. Reprod. Fert. 1974. V. 37. 367-372.

401. Monk M, Harper M.I. Sequential X- chromosome inactivation coupled with cellular differentiation in early mouse embryos //Nature 1979. V.281. P. 311-313.

402. Moor C.L. An olfactory basis for maternal discrimination of sex of offspring in rat. Anim. Behav. 1981. V. 29. P. 383-386.

403. Moor C.L. Maternal contribution to the development of masculine sexual behaviour in laboratory rats // Dev. Psychobiol. 1984. V.17. P.347-356.

404. Moor CL Maternal stimulation affects the number of motor neurons in sexually dimorphic nucleus of lumbar spinal cord // Brain Res. 1992. V.572. P. 52-56.

405. Moor C.L. Maternal contribution to mammalian reproductive development and the divergence of males and females//Adv. Study Beh. 1995. V.24. P. 47-118.

406. Morrow C.J, Asher G.W, Berg D.K. et al. Embryo transfer in fallow deer (Dama dama): Superovulation, embryo recovery and laparoscopic transfer of fresh and cryopreserved embryos//Ther. 1994. V.42. P.579-590.

407. Moudgal N.R, Papkoff H. Equine luteinizing hormone posses follicle- stimulating hormone activity in hypophysectomized female rats // Biol. Reprod. 1982. V.26. P. 935-942.

408. Mueller W.-U, Schlusen I, Streffer C. Direct evidence that radiation induced micronuclei of early embryos require a mitosis for expression // Radiat. Environ. Biophys. 1991. V. 30. P.117-122.

409. Mueller W.-U, Streffer C. Micronucleus assays. Advantances in mutagenesis Research. Berlin; Heidelberg; N.-Y.: Sringer-Verlag. 1994. V. 5. P. 1-163.

410. Murphy B.D., Mapletoft R.G., Manns J., Humphrey W.D. Variability in gonadotrophin preparations as a factor in the superovulatory response // Ther. 1984. V. 21. 117-122.

411. Murphy C.A., McCarty R. Maternal environment and development of high blood pressure in Dahl hypertensive rats //Am. J. Physiol. 1989. V. 257. P. H1396-H1401.

412. Myers M.M., Brunelli S.A., Squire J.M. et al. Maternal behavior of SHR rats and its relationship to offspring blood pressures // Dev. Psychobiol. 1989 (a). V. 22. P. 29-53.

413. Myers M.M., Brunelli S.A., Shair H.N. et al. Relationships between maternal behavior of SHR and WKY dams and adult blood pressures of cross-fostered F1 pups // Dev. Psychobiol. 1989 (b). V. 22. P. 55-67.

414. Naitana S., Bogliolo L., Ledda S et al. Survival of vitrified mouflon (Ovis g. Mussimon ) blastocysts // Ther. 2000. V.53. P. 340.

415. Naumenko E. V., Maslova L. N., Gordienko N. I., Amstislavsky S. et al. Persistent hypotensive effect of L-DOPA given early during development to rats with inherited stress-induced arterial hypertension // Develop. Brain Res. 1989. V. 46. P. 205-212.

416. Newbold R.R., Bullock B.C., McLachlan J.A. Lessions of the rete testis in mice exposed prenatally to diethylstilbestrol // Cancer Res. 1985. V. 45. P. 5145-5150.

417. Newbold R.R., Bullock B.C., McLachlan J.A. Mullerian remnants of male mice exposed prenatally to diethylstilbestrol //Teratog. Carcinog. Mutagen. 1987. V.7. P. 377-389.

418. Niemann H., Rath D. Progress in reproductive biotechnology in swine // Ther. 2001. V.56. P.1291-1304.

419. Nonneman D.J., Ganjam V.K., Welshons W.V., Vom Saal F.S. Intrauterine position effects on steroid metabolism and steroid receptors of reproductive organs in male mice // Biol. Reprod. 1992. Vol.47. P.723-729.

420. Nowak R., Porter R., Levy F. et al. Role of mother-young interactions in the survival of offspring in domestic animals // Rev. Reprod. 2000. V. 5. P. 153-163.

421. Oguri N, Tsutsumi Y. Non-surgical egg transfer in mares//J. Reprod. Fertil. 1974. V.41. P. 313-320.

422. Okamoto K., Aoki K. Development of a strain of spontaneously hypertensive rats // Jap.Circ.J. 1963. V.27. P. 282-289.

423. Oklahoma State University, website on rare breeds of livestock-http://pc200.anmsci.okstate. edu/BREEDS/

424. Olea N., Pulgar R., Perez P. Estrogenicity of resin-based composites and sealants used in dentistry//Environment. Health Perspect. 1996. V. 104. P. 298-305.

425. Oliphant G., Reinolds AB, Smith PF, Ross PR, Marta JS. Immunocytochemical localization and determination of hormone -induced synthesis of the sulfated oviductal proteins // Biol. Reprod. 1984. V. 31. P. 165-174.

426. Otoi Т., Murakami M., Fujii M. et al. Development of canine oocytes matured and fertilised in vitro // Vet. Rec. 2000. V.146. P.52-53.

427. Palanza P.A. Morellini S. Pannigiani S., vom Saal F.S Prenatal exposure to endocrine disrupting chemicals: Effects on behavioral development // Neurosci. Behav. Rev. 1999. V. 23. P. 1011-1027.

428. Palanza P., Parmigiani S., vom Saal F.S. Effects of prenatal exposure to low doses of diethylstilbestrol , o,p'DDT, and methoxychlor on postnatal growth and neurobehavioral development // Horm. Behav. 2001. V. 40. P. 252-265.

429. Palmer E., Bezard J., Magistrini M., Duchamp G. In vitro fertilization in the horse. A retrospective study // J. Reprod. Fertil. Suppl. 1991. V.44. P.375-384.

430. Pampfer S., Vanderheyden I., McCracken J. et al. Increased cell death in rat blastocysts exposed to maternal diabetes in utero and to high glucose or tumor necrosis factor-a in vitro // Development 1997. V.124. P.4827-4836.

431. Pampfer S. Apoptosis in rodent peri-implantation embryos: differential susceptibility of inner cell mass and trophectoderm cell lineages a review // Placenta. 2000. V.21 Suppl A: S3-S10.

432. Palermo G., Joris H., Devroey P., Van Steirteghem A.C. Pregnancies after intracytoplas-mic sperm injection of single spermatozoon into an oocyte // Lancet 1992. V.340. P. 1718.

433. Perez-Cruet J., Douhitt Т., Shekin W. Models of manic behavior in rats // Catecholamines: basic and clinical problems. New York, 1978. V.2. P. 1747-1749.

434. Perry JS. The reproduction in the wild Brown rat (Rattus norvegicus Erxleben) // Proc Zool. Soc. London. 1945. V. 115. Pt 1. P. 19-46.

435. Potashnik G., Insler V., Meizner I. Frequency, sequence, and side of ovulation in women menstruating normally // Br.Med. J. 1987. V. 294. P. 219.

436. Nicholas J.S. Development of transplanted rat eggs // Proc.Soc.exp.Biol.Med. 1933. V.30. P.l 111-1113.

437. Palanza P., Parmigiani S., vom Saal F.S. Effects of prenatal exposure to low doses of diethylstilbestrol , o,p'DDT, and methoxychlor on postnatal growth and neurobehavioral development // Horm. Behav. 200l.V. 40. P. 252-265.

438. Peippo J., Bredbacka P. Sex related growth rate differences in mouse preimplantation embryos in vivo and in vitro // Mol. Reprod. Dev. 1995. V. 40. P. 56-61.

439. Perreault S.D., Cancel A.M. Significance of incorporating measures of sperm production and function into rat toxicology studies//Reproduction 2001. V.121. P.207-216.

440. Petrenko O.I., Chuguy V.F., Barykina N.N. et al. Components of early maternal environment affecting predisposition to catalepsy // Behav. Proc. 2004. V. 65. P. 1-6.

441. Pierce J., Parsons T. Glycoprotein hormons: structure and function // Ann. Rev. Biochem. 1981. V. 50. P. 465-495.

442. Piotrowska K, Wianny F., Pedersen R., Zernicka-Goetz M. Blastomeres arising from the first cleavage division have distinguishable fates in normal mouse development // Development 2001, Vol. 128, P. 3739-3748.

443. Piotrowska K, Zernicka-Goetz M. Role for sperm in spatial patterning of the early mouse embryo //Nature. 2001. V. 409. P.517-521.

444. Polzin V.J, Anderson D.L, Anderson G.B. et al. Production of sheep-goat chimeras by inner cell mass transplantation //J Anim Sci. 1987. V.65. P.325-330.

445. Pollard J.W, Leibo S.P. Chilling sensitivity of mammalian embryos. Ther.1994. V. 41. P. 101-106.

446. Pollock D.P, Kutzko J.P, Birck-Wilson E. et al. Transgenic milk as a method for the production of recombinant antibodies. J. Immunol. Methods. 1999. V.231(l-2). P.147-157.

447. Pope C.E, Dresser B.L, Kuehn G. et al. Live birth of a Gaur (Bos gaurus calf following nonsurgical embryo transfer to a Holstein (Bos Taurus) recipient // Ther. 1988. V. 29. P. 289.

448. Pope C.E. Embryo technology in conservation efforts for endangered felids // Ther. 2000. V.53. P.163-174.

449. Prather R.S, Day B.N. Practical considerations for the in vitro production of pig embryos // Ther. 1998, V. 49. P. 23-31.

450. Proctor R.N. Bitter pill//The Sciences. 1999. V.39. P.14-19.

451. Ptak G, Clinton M, Barboni B. et al. Preservation of the wild European mouflon: the first example of genetic management using a complete program of reproductive biotechnologies //Biol. Reprod. 2002. V.66. P.796-801.

452. Poindron P, Le Neindre. Endocrine and sensory regulation of the maternal behavior in the ewe // Advances in the Study of Behavior. 1980. V. 11. P. 75-119.

453. Poindron P, Nowak R, Levy F. et al. Development of exclusive bonding in sheep and goats // Oxford Rev. Reprod. Biol. 1993. V.15. P. 311-364.

454. Pukazhenthi B.S. Wildt D.E. Which reproductive technologies are most relevant to studying, managing and conserving wildlife? // Reprod Fert Devel. 2004. V. 16. P. 33-46.

455. Rail W.F, Fahy G.M. Ice-free cryopreservation of mouse embryos at -196 °C by vitrification // Nature 1985. V. 313. P. 573-575.

456. Rail W.F. Cryopreservation of mammalian embryos, gametes, and ovarian tissues. Current issues and progress // Assisted fertilization and nuclear transfer in mammals / Wolf DP, Ze-linski-Wooten M (eds)/ New Jersey: Humana Press, 2001. P. 173-187.

457. Ramamoorthy K, Wang F, I-Chen Chen et al. Potency of combined estrogenic pesticides //Science. 1997. V.275. P. 405.

458. Rankin T, Soyal S, Dean J. The mouse zona pellucida: folliculogenesis, fertility and preimplantation development//Mol. Cell. Endocrinol. 2000. V.163. P.21-25.

459. Rapp J.P. Genetic analysis of inherited hypertension in the rat // Physiol. Rev. 2000. V.80. P.135-172.

460. Rasweiler J. J. Differential transport of embryos and degenerarating ova by the oviducts of the long tongued bat (Glossophaga soricina)// J. Reprod. Fert. 1979. V. 55. P. 329-334.

461. Redina O.E, Amstislavsky S.Ya, Maksimovsky L.F. Induction of superovulation in DD mice at different stages of the oestrous cycle // J Reprod Fertil. 1994. V. 102. P.263-267.

462. Reinisch J.M, Karow W.G. Prenatal exposure to synthetic progestins and estrogens: effect on human development//Arch. Sex. Behav. 1977. V.6. P. 257-288.

463. Renard J.P., Zhou Q., LeBourhis D. et al. Nuclear transfer technologies: between successes and doubts // Ther. 2002. V.57. P. 203-222.

464. Renfree M.B. Implantation and placentation // Reproduction in mammals. Part 2. Embryonic and fetal development / Austin C.R., Short R.V. eds / 1982, Cambridge University Press. Cambridge. P. 1-25.

465. Renfree M.B., Shaw G. Diapause // Annu. Rev. Physiol. 2000. V.62. P. 353-375.

466. Rodgers R.J., Cole J.C. The elevated plus-maze: pharmacology, methodology and ethology // Ethology and Psychoparmacology /S.J. Cooper, C.A. Hendrie eds./ John Wiley & Sons, N.Y, 1994, P. 1- 43.

467. Ryder O.A., Benirschke K. The potential use of "Cloning" in the conservation effort // Zoo Biology 1997. V. 16. P. 295-300.

468. Robertson I., Nelson R.E. Certification and identification of the embryo // Manual of the International Embryo Transfer Society / Stringfellow D.A., Seidel S. editors / USA, P. 103116.

469. Robinson A. The formation, rupture, and closure of ovarian follicles in ferrets and ferrct-polecat hybrids, and some associated phenomena // Trans. R. Soc. Edinb. 1918. V.52. P.303-362.

470. Robinson A. Lipoids in mammalian ova and their zygotes // Proc Anat Soc Great Britain and Ireland. J. Anat 1925. V.59. P. 109-111.

471. Roblero L., Moscoso H., Riffo M. Effect of postcoital oestradiol treatment upon transport, growth, differentiation and viability of preimplantation mouse embryos // Arch. Biol. Med. Exp. (Santiago) 1983. V.l6. P.55-59.

472. Rodrigues B. Rodrigues J. Recent approaches to the study of in vitro oocyte maturation and in vitro fertilisation of canine oocytes // Embryo Transfer Newsletter. 2002. V.20. P. 4-16.

473. Romagnano A., Richer C.L., King W.A., Betteridge K.J. Analysis of X-chromosome inac-tivation in horse embryos // J. Reprod. Fertil. Suppl. 1987. V. 35. P. 353-361.

474. Rose J.L., McCarty R. Maternal influences on milk intake in SHR and WKY pups // Physiol. Behav. 1994. V.56. P.901-906.

475. Rosenberg K., Dennenberg V.H., Zarrow M.X. Mice reared with rat aunts : the role of rat-mouse contact in meditating behavioral and physiological changes in the mouse // Anim. Behav. 1970. V.18. P.138-143.

476. Rowson L.E., Moor R.M., Lawson R.A. Fertility following egg transfer in the cow; effect of method, medium and synchronization of oestrus // J. Reprod. Fertil. 1969. V.l 8. P. 517523.

477. Rudd N. L., Hoar D. I., Williams S. E., et al. Genotype and the cryopreservation process affect the levels of aneuploidy and chromosome breakage in cultured human fibroblasts // Genome 1989. V. 32. P. 196-202.

478. Saegusa A. Mother bears could help save giant panda // Nature 1998. V. 30. P. 409.

479. Safe S.H. Endocrine disruptors and human health Is there a problem? An update // Environ. Health Perspect. 2000. V.108. P. 487-493.

480. Safro E., O'Neil C., Saunders D. elevated luteal phase estradiol: progesterone ratio in mice cause implantation failure by creating a uterine environment that suppresses embryonic metabolism//Fertil. Steril. 1990. V. 54. P. 1150- 1153.

481. Santiago-Moreno J., Gonzalez-Bulnes A., Gomez-Brunet A. et al. Procedure for successful interspecific embryo transfer from mouflon (Ovis gmelini musimon) to Spanish Merino sheep (Ovis aries) Hi. Zoo Wildl. Med. 2001. V.32. P.336-341.

482. Sassard J., Lo M., Liu K. Lyon genetically hypertensive rats: an animal model of "low renin hypertension"//Acta Pharmacol. Sin. 2003. V.24. P. 1-6.

483. Sathananthan A., Trounson A., Bongo A. et al. The effects of ultrarapid freezing on meiotic and mitotic spindles of mouse oocytes and embryos // Gamete Res. 1988. V. 21. P. 385401.

484. Seiler P., Fischer В., Lindenau A., Beier HM. Effects of persistent chlorinated hydrocarbons on fertility and embryonic deveopment in the rabbit // Hum. Reprod. 1994. V.9. P. 1920-1926.

485. Sandell M. The evolution of seasonal delayed implantation//Q. Rev. Biol. 1990. V.65. P. 23-42.

486. Schiewe M., Bush M., Phillips L. Comparative aspects of estrus sinchronization , ovulation induction and embryo cryopreservation in scimilar -horned oryx, bongo eland and greater kudu // J. Exp. Zool. 1991. V. 58. P. 75-88.

487. Schmidt H. M., Schiewe M. C., Wildt D. E. The genotypic response of mouse embryos to multiple freezing variables // Biol. Reprod. 1987. V. 37. P. 1121-1128.

488. Schmidt-Preuss U., Roser M., Weichenthal M., et al. Elevated friquences of micronuclei in cultured fibroblasts after freezing and thawing // Mut. Res. 1990. V. 241. P. 279- 282.

489. Schneider N., Maurer R. R. Factors affecting survival of frozen-thawed mouse embryos // Biol. Reprod. 1983. V. 29. P. 121-128.

490. Schreiber A , Wirth R , Riffel M., Van Rompaey H. Weasels, Civets, Mongooses and their relatives. An action plan for conservation of Mustelids and Viverrids. USA : Kelvin Press. 1989.99 P.

491. Schriver M.D., Kraemer D.C. Embryo transfer in the domestic feline // Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. Publ. 1978. V.4.P.12.

492. Swartz W.J., Eroschenko V.P., Schutzmann R.L. Ovulatory response of chlordecone (Ke-pone)-exposed mice to exogenous gonadotropins // Toxicol. 1988. V. 51. P. 147-153.

493. Scrhal P., Craft I.L. Oocyte donation in 61 patiens // Lancet. 1989. V. I. P.l 185-1187.

494. Sengupta J., Roy S.K., Manchanda S.K. Effect of an oestrogen inhibitor , 1,4,6-androstatriene-3,17 dione on mouse embryo development in vitro. J. Reprod. Fert. 1982. V.66. P.63-66.

495. Sharpe R.M. Another DDT connection // Nature. 1995. V. 375. P.538.

496. Sharpe R.M., Skakkebaeck N.E. Are oestrogens involved in falling sperm counts and disorders of the male reproductive tract? // Lancet. 1993. V.341. P. 1392-1395.

497. Shaw J. M., Kola I., MacFarlane D.R., et al. An association between chromosomal abnormalities in rapidly frozen 2-cell mouse embryos and ice-forming properties of the cryopro-tective solution. J. Reprod. Fert. 1991. V. 91. P. 9-18.

498. Shelby M.D., Newbold R.R., Tully B. et al. Assessing environmental chemicals for estro-genicity using a combination of in vitro and in vivo assays // Environ. Helth. Perspcct. 1996. V. 104. P. 1297-1300.

499. Shemesh M. Actions of gonadotrophins on the uterus // Reproduction 2001. V. 121. P. 835-842.

500. Shin Т., Kraemer D., Pryor J. et al. A cat cloned by nuclear transplantation // Nature. 2002. V.415. P.859.

501. Squires E.L. Embryo transfer procedures // Equine reproduction / Angus 0. McKinnon, James L. Voss eds/ Lea & Febiger, 1993, Philadelphia , London, P. 357-367.

502. Squires E.L, McCue P.M., Vanderwall D. The current status of equine embryo transfer // Ther. 1999. V.51. P. 91-104.

503. Squires E.L, Carnevale E.M, McCue P.M., Bruemmer J.E. Embryo technologies in the horse. Ther. 2003. V.59. P. 151-170.

504. Smith D.M, Smith A.E. Uptake and incorporation of amino acids by cultured mouse embryos: estrogen stimulation // Biol Reprod. 1971. V. 4. P.66-73.

505. Smith R, McLaren A. Factors affecting the time of formation of the mouse blastocoele // J. Embryol. Exp. Morphol. 1977. V.41. P. 79-92.

506. Solti L, Crichton E.G., Loskutoff N.M, Cseh S. Economical and ecological importance of indigenous livestock and the application of assisted reroduction to their preservation // Ther. 2000. V.53. P. 149-162.

507. Spearow J.L. Characterization of genetic differences in hormonal induced ovulation in mice // J. Reprod. Fert. 1988. V.82. P. 799-806.

508. Stanton J.A, Macgregor A.B, Green D.P. Gene expression in the mouse preimplantation embryo // Reproduction 2003. V. 125. P. 457-468.

509. Staub C, Hardy V.B, Chapin R.E. The hidden effect of estrogenic antiandrogenic methoxychlor on spermatogenesis // Toxicol. Appl. Pharmocol. 2002. V.80. P.129-135.

510. Stein A, Fisch B, Tadir Y, Ovadia J, Kraicer P. F. Cryopreservation of rat blastocysts a comparative study of different cryoprotectants and freezing/thawing methods // Cryobiol-ogy 1993. V. 30. P. 128-134.

511. Steptoe P.C. Edwards R.G. Birth after reimplantation of human embryo//Lancet 1978. V. 2. P.366.

512. Stringfellow D.A, Givens M.D, Waldrop J.G. Biosecurity issues associated with current and emerging embryo technologies // Reprod Fert Devel. 2004. V.16. P. 93-102.

513. Stover J, Evans J, Dolensek E. Interspecies embryo transfer from the gaur to domestic Holstein // Proc. Am .Assoc. Zoo Vet. 1981. P. 122-124.

514. Suarez S.S. The oviducal sperm reservoir in mammals: mechanism of formation // Biol. Reprod. 1998. V.58. P. 1105-1107.

515. Summers P.M., Shelton J.N, Edwards J. The production of mixed-species Bos taurus- Bos indicus twin calves // Anim. Reprod. Sci. 1983. V.6. P.79-89.

516. Summers P.M., Shephard A.M., Hodges J.K, Kydd J, Boyle M.S., Allen W.R. Successful transfer of Przewalski's horses (Equus przewalskii) and Grant's zebra (E. burchelli) to domestic mares (E. caballus) // J. Reprod. Fert. 1987. V. 80. P. 13-20.

517. Sundqvist C, Amador AG, Bartke A. Reproduction and fertility in the mink (Mustela vi-son) //J. Reprod. Fert. 1989. V. 85. P. 413-441.

518. Suomi S. Early determinants of behaviour: evidence from primate studies // Br. Med. Bull. 1997. V.53. P. 170-184.

519. Sutcliffe A.G. Follow-up of children from cryopreserved embryos. Molecular and Cellular Endocrinology 2000. V.169. P. 91-93.

520. Swanson W.F, Roth T.L, Wildt D.E. In vivo embryogenesis, embryo migration, and embryonic mortality in the domestic cat // Biol. Reprod. 1994 .V.51. P.452-464.

521. Swanson W.F. Reproductive biotechnology and conservation of the forgotten felids the small cats. Proceedings of the 1st International Symposium on Assisted Reproductive

522. Technology for the Conservation and Genetic Management of Wildlife, Omaha, January 17-18, 2001. P.100-120.

523. Swanson W.F., Brown J.L. International training programs in reproductive sciences for conservation of Latin American felids // Anim. Reprod. Sci. 2004. V.82-83. P.21-34.

524. Swartz W.J., Eroschenko V.P., Schultzmann R.L. Ovulatory response of chlordecone (Ke-pone)-exposed mice to exogenous gonadotropins // Toxicol. 1988. V. 51. P. 147-153.

525. Swartz W.J., Eroschenko V.P. Neonatal exposures to technical methoxychlor alters pregnancy outcome in female mice // Toxicol. 1998. V. 12. P. 565-573.

526. Takagi N. Differentiation of X chromosomes in early female mouse embryos // Exp. Cell Res. 1974. V.86. P.127-135.

527. Takahashi R., Nagayama H., Kido A., Morita T. An animal model of depression // Biol. Psychiatr. 1974. V.9. P.191-204.

528. Takai Y., Tsutsumi O., Ikezuki Y., Hiroi H., Osuga Y., Momoeda M., Yano Т., Taketani Y. Estrogen receptor-mediated effects of xenoestrogen, bisphenol A, on preimplantation mouse embryos // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. V.270. P.918-921.

529. Takai Y., Tsutsumi O., Ikezuki Y. Et al. Preimplantation exposure to bisphenol A advances postnatal development // Reprod. Toxicol. 2001. V.15. P.71-74.

530. Takimoto E., Ishida J., Sugiyama F., et al. Hypertension induced in pregnant mice by placental rennin and maternal angiotensinogen // Science. 1996. V.274. P. 995998.

531. Takeda H., LasnizkiL, Mizuno T. Analysis of prostatic bud induction by brief androgen treatment in the fetal rat urogenital sinus // J. Endocr. 1986. V.l 10. P.467-470.

532. Takeishi M., Akai R., Tsunekane Т., Iwaki Т., Nakanowatari K. Studies on the reproduction in dogs A trial of ova transplantation in dogs // Jpn. J. Anim. Reprod. 1980. V.26. P.151-153.

533. Tarkowski A.K. An air-drying method for chromosome preparation from mouse eggs // Cytogenetics. 1966. V.5. P.394-400.

534. Thibier M. The 1997 embryo transfer statistics from around the world: a Data Retrieval Committee report // Embryo Transfer Newslett. 1998. V. 16, P. 17-20.

535. Thibier M. A contrasted year for the world activity of the animal embryo transfer industry. A report from the IETS Data Retrieval Committee. Embryo Transfer Newslett. 2002. V. 20. P. 13-18.

536. Thibier M., Guerin B. Embryo transfer in small ruminants: the method of choice for health control in germplasm exchanges // Livest. Prod. Sci. 2000. V. 62. P. 253-270.

537. Thomson A.J.M., Gazvani M.R., Wood S. J. et al. Kingsland Comparison of ovarian response in right and left ovaries in IVF patients // Human Reprod. 2001. V. 16. P. 16941697.

538. Thomson A. A. Role of androgens and fibroblast growth in prostatic development // Reproduction 2001. V.121. P.187-195.

539. Trippodo N.C., Frochlich E.D. Similarities of genetic (spontaneous) hypertension. Man and rat// Circ. Res. 1981. V.48. P. 309-319.

540. Trounson A., Mohr L. Human pregnancy following cryopreservation, thawing and transfer of an eight cell embryo //Nature 1983. V.305. P.707-709.

541. Tsutsui Т., Shimada K., Nishi M. et al. An experimental trial on embryo transfer in the dog //Jpn. J. Vet. Sci. 1989. V.51. P.797-800.

542. Tsutsui Т., Hori Т., Kawakami E. Intratubal transplantation of early canine embryos // J. Reprod. Fertil. 2001.Suppl 57.P.309-314.

543. Tucker E.M., Denis В., Kilgour L. Blood genetic marker studies of a sheep-goat hybrid and its back-cross offspring// Anim. Genet. 1989. V.20. P. 179-186.

544. Turner K.J., Sharpe R.M. Environmental oestrogens- present understanding // Rev. Reprod. 1997. V.2. P. 69-73.

545. Umbaugh R.E. Superovulation and ovum transfer in cattle // Fertil. Steril. 1951. V. 2. P. 243-252.

546. Utena H. Behavior and neurochemistry: a special type of model psychosis // Brain and Nerve 1961. V. 13. P. 687-692.

547. Uvnas-Moberg K. The physiological and endocrine effects of social contact II Ann. NY Acad. Sci. 1997. V. 807. P.146-163.

548. Valbuena D., Martin J., de Pablo J.L. et al. Increasing levels of estradiol are deleterious to embryonic implantation because they directly affect the embryo II Fertil. Steril. 2001. V.76. P.962-968.

549. Valtonen M, Jalkanen L. Species-specific features of oestrous development and blastogene-sis in domestic canine species // J. Reprod. Fertil. 1993. Suppl. 47. P.133-137.

550. Van Niekerk C.H.,Gerneke W.H. Persistence and parthogenetic cleavage of tubal ova in the mare //J.Vet.Rec. 1966. V. 31. P. 195-232.

551. Van der Auwera I., D'Hooghe T. Superovulation of female mice delays embryonic and fetal development // Human Reprod. 2001. V.16. P. 1237-1243.

552. Van Soom A., de Kruif A. Oocyte maturation, sperm capacitation and preimplantation development in the bovine: implication for in vitro production of embryos // Reprod. Dom. Anim. 1996. V.31.P. 687-701.

553. Vicente J.S., Garcia-Ximenez F. Effects of strain and embryo transfer model (embryos from one versus two donor does/recipient) on results of cryopreservation in rabbit II Reprod. Nutr. Dev. 1993. V. 33. P. 5-13.

554. Vogel G. Endangered species. Cloned gaur a short-lived success // Science. 2001. V. 291. P. 409.

555. Vom Saal F.S. Sexual differentiating in litter bearing mammals: Influence of sex of adjacent fetuses in utero//J. Anim. Sci. 1989. V.67. P. 1824-1840.

556. Vom Saal F.S., Timms B.G., Montano M.M. et al. Prostate enlargement in mice due to fetal exposure to low doses of estradiol or diethylstilbestrol and opposite effect of high doses // Proc. Natl. Acad. Sci. 1997. V. 94. P. 2056-2061.

557. Wada I., Macnamee M.C., Wick K. et al. Birth characteristics and perinatal outcome of babies conceived from cryopreserved embryos // Hum. Reprod. 1994. V.9. P.543-546.

558. Walker A.H., Bernstein L., Warren D.W. et al. The effect of in utero ethyniloestradiol exposure on the risk of cryptorchid testis and testicular teratoma in mice // Br. J. Cancer. 1990. V. 62. P. 599-563.

559. Walters L.W., Rourke A.W., Eroschenko V.P. Purified methoxychlor stimulates reproductive tract in immature female mice // Reprod. Toxicol. 1993.V.7. P.599-606.

560. Walton E.A., Evans G., Armstrong D.T. Ovulation response and fertilization failure in immature rats induced to superovulate//J. Reprod. Fertil. 1983. V.67. P.91-96.

561. Warwick В., Berry R. Inter-generic and intra-specific embryo transfers in sheep and goats // J. Hered. 1949. V. 40. P. 297-303.

562. Warwick B.L., Berry R.O. Horlacher W.R. Resulting of mating rams to Angora female goats // Proc. 27th Ann. Meet.Am. Soc.Anim.Prod. 1934. pp. 225-227.

563. Watt G.C., Harrap S.B., Foy C.J. et al. Abnormalities of glucocorticoid metabolism and the renin-angiotensin system: a four-corners approach to the identification of genetic determinants of blood pressure//J. Hypertens. 1992. V.10. P.-.473-482.

564. Watzka M. Mikroskopisch-anatomische Untersuchungen uber die Ranzeit und Trogdauer des Hermelins (Putorius ermineus) // Z. mikr.-anat.Forsch. 1940. V.48. P.359-379.

565. Wells D.N., Misica P.M., Tervit H.R., Vivanco W.H. Adult somatic cell nuclear transfer is used to preserve the last surviving cow of the Enderby Island cattle breed // Reprod. Fertil. Dev. 1998. V.10. P. 369-378.

566. Wemmer C. Opportunities lost: Zoos and the marsupial that tried to be a wolf // Zoo Biology. 2000. V. 21. P. 1-4.

567. Wen D.C., Yang C.X., Cheng Y. et al. Comparison of developmental capacity for intra-and interspecies cloned cat (Felis catus) embryos // Mol. Reprod. Dev. 2003. V. 66. P. 3845.

568. Westhusin M.E., Burghardt R.C., Ruglia J.N., Willingham L.A., Liu L., Shin Т., Howe L.M., Kraemer D.C. Potential for cloning dogs // J. Reprod. Fertil. Suppl. 2001. V.57. P.287-293.

569. Wiebold J.L., Becker W.C. Inequality in function of the right and left ovaries and uterine horns of the mouse//J.Reprod. Fert. 1987. Vol.79. P. 125-134.

570. Wiesner H., Lampeter W.W., Rietschel W. Erfahrungen beim unblutigen embryotransfer vom banteng auf hausrinder. Verhandlungen 26. Int Symp Erkrankungen Zootiere, Brno Cczech. 1984. P. 99-102.

571. Wilcox A.J., Baird D.D., Weinberg C.R. et al. Fertility in men exposed prenatally to di-ethylstylbestrol // N. Engl. J. Med. 1995. V. 332. P. 1411-1416.

572. Wildt D.E., Monfort S.L., Donoghue A.M. et al. Embryogenesis in conservation biology -or, how to make an endangered species embryo // Ther. 1992. V. 37. P. 161-184.

573. Wildt D.E, Rail W.F., Critser J.K., et al. Genome resource banks. Living collections for biodiversity conservatio // Bioscience 1997. V.47. P.689-698.

574. Willadsen S. Factors affecting the survival of sheep embryos during deep freezing and thawing // Ciba Found Symp 52. The Freezing of Mammalian Embryos. Amsterdam, Elsevier. 1977. P. 175-201.

575. Wilmut I. The effect of cooling rate, warming rate, cryoprotective agent and stage of development on survival of mouse embryos during freezing and thawing // Life Sci. 1972. V. 11. P. 1071-1079.

576. Wilmut I, Schnieke A.E, McWhir J. Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells //Nature. 1997. V. 385. P.810-813.

577. Williams J, Fisher J.S, Turner K.J, et al. Relatioinship between expression of sex steroid receptors and structure of the seminal vesicles after neonatal treatment of rats with potent or weak estrogens. Environ. Health. Perspect. 2001. V.l09. V.21-29.

578. Wimsatt W.A. Some comparative aspects of implantation // Biol. Reprod. 1975. V.l 2. P.l-40.

579. Winston R.M, Handyside A.H. New Challenges in Human in Vitro Fertilization // Science 1993. V. 260. P. 932-936.

580. Whitten W.K. Modification of oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male. Changes in the oestrous cycle determined by vaginal smears // J. Endocrinol. 1958. V.17. P. 307-313.

581. Whittingham D. G. Survival of mouse embryos after freezing and thawing //Nature. 1971. V. 233. P.125-126.

582. Whittingham D.G, Leibo S.P, Mazur P. Survival of mouse embryos frozen to -196° and -269°C // Science 1972. V. 178. P.411-414.

583. Whren C.D. Cause-effect linkages between chemicals and populations of mink (Mustela vison) and otter (Lutra canadensis) in the Great Lakes basin // J. Toxicol. Environ. Health. 1991. V. 33. P. 549-585.

584. Witorsch R.J. Low -dose in utero effects of xenoestrogens in mice and their relevance to humans : an analytical review of the literature // Food Chem. Toxicol. 2002. V. 40. P. 905912.

585. Wordinger R.J, Brown D, Atkins E, Jackson F.L. Superovulation and early embryo development in the adult mouse after prenatal exposure to diethylstilboestrol // J. Reprod. Fertil. 1989. V. 85. P. 383-388.

586. Wright L.L, Bell R.W, Schreiber H.L. Interactive effects of parity and pup stress on the maternal behavior of rattus norvegicus // Dev. Psychobiol. 1977. V.10. P. 331-337.

587. Yamamura K, Markert C. The production of chimeric rats and their use in the analysis of the hooded pigmentation pattern // Develop. Genet. 1981. V. 2. P. 131-146.

588. Yamashita S, Newbold R.R, McLachlan J.A, Korach K.S. The role of the estrogen receptors in uterine epithelial proliferation and cytodifferentiation in neonatal mice // Endocrinol. 1990. V. 127 (5). P. 2456-2463.

589. Yasuda Y, Kihaija T, Tanimura T. Effect of ethinyl estradiol on the differentiation of mouse fetal testis // Teratol. 1985. V. 32. P. 113-118.

590. Young L.E, Sinclair K.D, Wilmut I. Large offspring syndrome in cattle and sheep // Rev. Reprod. 1998. V. 3. P. 155-163.

591. Youngs C.R. Factors influencing the success of embryo transfer in the pig // Ther. 2001. V. 56. P. 1311-1320.

592. Zarrow M.X. Wilson E.D. The influence of age on superovulation in the immature rat and mouse// Endocrinol. 1961. V. 69. P. 851 855.

593. Zeilmaker F.H, Alberda A.T, Gent I. et al. Two pregnancies following transfer of intact frozen-thawed embryos // Fertil. Steril. 1984. V.43. P.293-296.

594. Zernicka-Goetz M.Patterning of the embryo: the first spatial decisions in the life of a mouse // Development 2002. V.l29. P. 815-829.

595. Ziegler L. Beobachtungen ueber die Brunst und den Embryo der Rehe. Hannover, 1843.

Информация о работе

Амстиславский, Сергей Яковлевич
доктора биологических наук
Новосибирск, 2006
ВАК 03.00.08

Диссертация

Эмбриотехнологические подходы к сохранению исчезающих видов млекопитающих - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно