Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Экологические связи таежного клеща и его хозяев с возбудителями иксодовых клещевых боррелиозов
ВАК РФ 03.00.08, Зоология
Автореферат диссертации по теме "Экологические связи таежного клеща и его хозяев с возбудителями иксодовых клещевых боррелиозов"
РОССИЙСИКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК СИБИРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ Институт систематики и экологии животных
На правах рукописи
УДК 598.2/591.50+591.67
Ливанова Наталья Николаевна
ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ СВЯЗИ ТАЕЖНОГО КЛЕЩА И ЕГО ХОЗЯЕВ С ВОЗБУДИТЕЛЯМИ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛИОЗОВ (НА ПРИМЕРЕ ПРИРОДНОГО ЛЕСОСТЕПНОГО ОЧАГА ПРИОБЬЯ)
03. 00. 08 - ЗООЛОГИЯ
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Новосибирск - 2004
Работа выполнена в Институте систематики и экологии животных Сибирского отделения Российской Академии Наук.
Научный руководитель:
кандидат биологических наук А.К. Добротнорский.
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук, профессор M.IL Мошкин; кандидат медицинских наук С.А. Рудакова.
Ведущая организация: ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. И.Ф. Гамалеи (г. Москва).
Защита состоится 3 февраля 2004 г. в 10 часов на заседании Диссертационного совета Д 003.033.01 по присуждению ученой степени доктора биологических наук при Институте систематики и экологии животных СО РАН
Отзывы в двух экземплярах, заверенные печатью учреждения, просим направлять в Диссертационный совет по адресу: 630091, г. Новосибирск, У1, ул Фрунзе, 11, Институт систематики и экологии животных СО РАН, Ученому секретарю Диссертационного совета.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института систематики и экологии животных СО РАН.
Ученый секретарь
Диссертационного совета,
доктор биологических наук, проф.
А.Ю. Харитонов.
3
Общая характеристика работы
Актуальность темы. Иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ) - сравнительно недавно открытая группа природноочаговъгх трансмиссивных инфекционных заболеваний, вызываемых боррелиями комплекса Borrella burgdorferi sensu lato (Burgdorfer et al., 1982; Коренберг, 1987). В природе циркуляция возбудителей ИКБ осуществляется благодаря обмену между клещами-переносчиками и резервуарными хозяевами-лозвоночными. Популяции, поддерживающие существование возбудителей, образуют сложные трехчленные паразитарные системы, характеризующиеся разветвленными связями между всеми составляющими (Peteny et al., 1996; Humair et al., 1998; Humair, Gcrn, 1998; Pichon ct al., 2000; Коренберг и др., 1997; Горелова и др., 2001; Коренберг и др., 2002).В связи с этим изучение экологических взаимоотношений таежного клеща и его прокормитслей с возбудителями клещевых боррелиозов - актуально и имеет как теоретическое, так и практическое значение. Большинство исследований иксодовых клещевых боррелиозов посвящены, главным образом, изучению молекулярной структуры боррелий, а также решению задач эпидемиологии и медицинской паразитологии. Сравнительно редко рассматривались зоологические, экологические и эпизоотологические аспекты проблемы. В частности практически не изучена резервуарная роль многих видов млекопитающих, обитающих в природных очагах. Остается открытым вопрос о межгодовых изменениях зараженности переносчиков и сезонных изменениях, происходящих в течение лета в популяциях клещей и мелких млекопитающих. Ценность подобных данных заключается в том, что они могут быть ключом к выявлению факторов, определяющих уровень риска заражения людей.
Цель данного исследования - на примере природного очага в лесостепном При-обье изучить взаимоотношения таежного клеща и его прокормитслей с возбудителями клещевых боррелиозов на эндемичных территориях юга Западной Сибири. В соответствии с поставленной целью сформулированы следующие задачи:
- установить состав геновидов возбудителей ИКБ, циркулирующих в природных очагах;
- оценить зараженность различных фаз развития таежного клеща боррелиями;
- изучить межгодовые изменения уровня зараженности взрослой части популяции переносчика;
- выявить основные виды мелких млекопитающих, поддерживающих циркуляцию борре-лий;
-охарактеризовать динамику эпизоотического процесса в популяциях фонозых видов зверьков.
Научная новизна работы. Впервые для природных очагов Западной Сибири
оценены уровень зараженности боррелиями В. bur dfipuXi ИЛЦИО^ЛБЦД^
БИБЛИОТЕКА
таежного
клеща и, на основании косвенных оценок, показано участие в поддержании цикла циркуляции возбудителей 12 видов мелких лесных грызунов и насекомоядных, среди которых лесная мышовка упоминается впервые какрезервуарный хозяин боррелий. Впервые в России с использованием прямого ПЦР-детектирования установлен уровень зараженности боррелиями трех видов мелких млекопитающих {Sorex araneux, Apodemut agrnrius, Clerhrionomys rutilus) и продемонстрировано, что уровень зараженности зверьков закономерно изменяется в ходе легпего сезона. Впервые выявлено, что полевые мыши Ар. agrarius участвуют в поддержании циркуляции В. afzelii и В. garinii1fT29. Впервые показано участие белогрудого ежа [Erinaceus concolor) в передаче боррелий личинкам и нимфам 1. pcr.iulcatus. Впервые для России оценено генетическое сходство западносибирских спирохет В. burgdorferi s.l., паразитирующих в таежных клещах, с представителями этого комплекса из европейских к азиатских природных очагов ИКБ. Выявлен нетипичный изо-лят боррелий из клещей /. persulcatus, не относящийся к известным геновидам и генетическим вариантам.
Практическое значепие. Полученные результаты дополняют имеющиеся представления о функционировании и особенностях паразитарных систем ИКБ и уточняют сведения об ареале отдельных геновидов боррелий. Исследования, построенные по принципу мониторинга, позволяют подойти к выяснению основных критериев прогноза эпидемической напряженности природных очагов ИКБ. Материалы диссертационного исследования могут быть использованы санитарно-эпидемиологическими службами для планирования профилактических мероприятий и проведения санитарно-просветительной работы, а также для преподавания курсов медицинской паразитологии и эпидемиологии в университетах и медтщинских ннститутах.
Апробация работы и публикации. Основные положения работы были представлены и доложены на VI международном симпозиуме по проблемам клещевых инфекций (Потсдам, 2001), на региональной научной конференции «Исследования эталонных природных комплексов Урала» (Екатеринбург, 2001), на XI международном симпозиуме по биоиндикаторам (Сыктывкар, 2001), на межрепюнальной научно-практической конференции «Актуальные аспекты природноочаговых болезней» (Омск, 2001), на научно-практической конференции с международным участием «Клещевые боррелиозы» (Ижевск, 2002). По теме диссертации опубликовано 10 работ.
Благодарности. Исследование реализовано под руководством к.б.н. А.К. Добро-творского, которому автор выражает искренною благодарность. Молекулярно-биологическая часть исследования начата в лаборатории генной инженерии НИИ биохимии СО РАМН и курировались заведующим этой лаборатории к.б.н. А.Б. Беклемишевым.
В дальнейшем эта часть работы была продолжена в лаборатории молекулярной вирусологии Института химической биологии и фундаментальной медицины (ИХБФМ) СО РАН при поддержке и неоценимой помощи со стороны заведующего лабораторией д.б.н. О.В. Морозовой, которой также было сделано много ценных советов при прочтении рукописи. Автору трудно переоценить помощь в повседневной работе сотрудников НИИ биохимии СО РАМН и ипститута химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН Н.В. Фоменко, к.б.н. ВА. Матвеевой» ВЛ. Рар, СЕ. Ткачева, к.б.н. H.IL Пичко, к.б.н. B.C. Караваева, к.б.н. ИА. Лавриненко, И.Т. Иванова, А.В. Питермной, Л.А. Шишковой, Н.А. Титовой и И.Н. Ивлсвой. Всем вышеперечисленным коллегам автор глубоко признателен- Отдельная благодарность В.В. Панову (лаборатория экологического прогнозирования, ИСиЭЖ СО РАН) за определение видовой принадлежности, генеративного состояния и возраста мелких млекопитающих.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, 5 глав и выводов. Общий объем работы -199, из них 147 страниц текста. Диссертация иллюстрирована 7 рисунками и содержит 17 таблиц. Список используемой литературы включает 380 названий, в том числе 280 на иностранных языках.
Содержание работы Глава 1. Состояние изученности клещевого боррелиоза.
Приводится обзор работ, выполненных в России и за рубежом. Дается характеристика особенностей возбудителей ИКБ, молекулярпо-генетических методов их типирова-ния. Описаны связи клинических проявлений ИКБ с генетическими группами возбудителя. Рассмотрены итоги изучения экологии ИКБ с использоваттем молекулярно-генетических и микроскопических методов, а также географического распространения, связей геновидов В. burgdorferi s.L с клещами рода Ixodes и резервуариыми хозяевами. Проанализированы гипотезы о роли резервуарных хозяев в формировании региональных спектров возбудителей боррелиоза. Обобщены данные литературы, в которых дастся оценка структуры паразитарных систем ИКБ, механизмов трансмиссивной передачи В. burgdorferi s.l. Характеризуются пространственно-временная динамика компонентов природных очагов ШСБ и используемые методы прогнозирования их эпидемической активности.
Глава 2. Район работ. Материалы, методы. 2.1. Краткая характеристика природных условий северной лесостепи Приобья.
Краткая характеристика природных условий составлена по литературным источникам («Западная Сибирь», 1963; «Новосибирская область. Природа и ресурсы», 1978;
«Природные условия центральной части Западно-Сибирской равнины», 1977; «Растительный покров СССР», 1956; «Растительный покров Западно-Сибирской равнины», 1985; Колдомасов, 1947; Орлова, 1954,1962; Крылов, 1961, Сляднев 1965,1973).
Район, где проводились исследования, находится в юго-восточной части ЗападноСибирской равнины, занимая правобережье Оби в пределах подзоны подтаежных (осмно-во-березовых) лесов лесной зоны и подзоны северной лесостепи лесостепной зоны. Рельеф местности Приобской лесостепи преимущественно равнинный. В целом климат региона умеренно-континентальный с неустойчивым увлажнением территории и отклонениями температуры воздуха в различные годы. Район характеризуется как территория с преобладанием относительно крупных массивов осиново-березовых лесов и березовых перелесков, чередующихся с сельскохозяйственными угодьями. Сбор и учеты численности таежного клеща и мелких млекопитающих проводили в трех лесных местообитаниях, типичных для данного участка: осиново-березовых лесах, которые занимают окаю 59% площади облесенной территории участка; березово-сосновых лесах, составляющих примерно 29% территории, покрытой лесными массивами и максимально подверженной рекреационной нагрузке и березово-осиновых лесах в понижениях рельефа (лога и овраги), занимающих 12% площади. 2.2. Материалы и методы
2.2.1. Зоологические и паразитоло1-ическне методы. Имаго таежного клеща учитывали на стандартный флаг (60 х 100 см) с пересчетом на 1 флаго-километр (Времепная... , 1966). Всего собрано и исследовано на зараженность боррелиями 994 клеща. Отлов мелких млекопитающих проведен в стандартные 50-метровые канавки с пятью цилиндрами, а также в ловушко-линии (Калабухов, Раевский, 1933; Наумов, 1955). В каждом из пунктов отлова линию живоловок выставляли один раз в месяц. Всего отработано около 5,5 тыс. цилиндро- и 2,5 тыс. ловушко-суток.
Личинок и нимф таежного клеша собирали при паразЕТОлогическом осмотре мелких и средних млекопитающих. Всего осмотрено 253 звсрька20-и видов, с которых собрано и исследовано на боррелий 285 личинок и 113 нкмф таежного клеша. У мелких млекопитающих трех видов (обыкновенной бурозубки, полевой мыши и красной полевки) исследованы ткани органов на наличие ДНК боррелий. Всего исследовано 138 зверьков.
В качестве основного показателя, характеризующего пораженность хозяев личинками и нимфами, использовали индекс обилия, рассчитанный как среднее число клещей на одного зверька (Беклемишев, 1970).
2.2.2. Микробиологические методы.
Индикацию боррелий в клещах осуществляли микроскопированием витальных (темное поле) или фиксированных препаратов (в проходящем свете). В каждом препарате просмотрено 250 полей зрения при общем увеличении х800 (Ковалевский и др., 1996). Приготовление витальных и фиксированных препаратов проводили по методике, описанной Ю.В. Ковалевским с соавт. (Ковалевский и др., 1988) с некоторыми дополнениями. Численность спирохет В. burgdorferi si, выявленных в клещах, оценена с использованием индекса встречаемости. Зараженность клещей боррелиями охарактеризована при помощи индексов обилия и интенсивности заражения (Беклемишев, 1970). Всего за период исследований приготовлено и просмотрено 392 фиксированных и 292 витальных препарата из голодных имаго, 258 фиксированных и 127 витальных препаратов из частично напитавшихся личинок, 115 фиксированных и 57 витальных препаратов из частично или полностью напитавшихся нимф.
2.23. Молекулярно-биологические методы. Молекулярно-биолопгягеская часть исследований была проведена на базе лаборатории генной инженерии Института биохимии СО РАМН и лаборатории молекулярной вирусологии Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН.
Для выделения ДТ1К из бактериальных клеток нами был использован метод, основанный на разрушении клеточной стенки и мембраны под воздействием 4M гуанидин-тиоцианата. Выявление специфической ДНК В. hurgdnrferi s.l. в клещах I. persulcahis и пробах тканей мелких млекопитающих осуществляли в однораувдовой полимеразной цепной реакции (ПЦР). Структура измененных праймеров для амплификации межгенной области 5S-23S рибосомальной РНК В. burgdorferi s.l. (Postic et al., 1994) для однораундо-вой НЦР была любезно предоставлена к.б.н. А.Б. Беклемишевым (лаборатория генной инженерии, НИИ Биохимии СО РАМН). Для идентификации геновидов боррелий с "использованием анализа полиморфизма длины фрагментов рестрикции (ПДФР) наработку ампликонов осуществляли в двухраундовой ПЦР, позволяющей увеличить количество исследуемого продукта при низком исходном содержании молекул ДНК Borrelia в анализируемых пробах. Для двухраундовой ГГЦР структура внешних праймероа специально подобрана Н.В. Фоменко (лаборатория молекулярной вирусологии, институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН), внутренние праймеры были синтезированы по (Postic et aL, 1994). В качестве положительного конгроля в ПЦР была использована ДНК Borrelia burgdorferi s.s. (штамм В31), любезно предоставленная профессором F.C. CabeJJo (F.C. Cabello, New York Medical College. Valhalla, NY, США). В качестве отрицательного контроля использовати бчдистиллированную воду. Всего исследовано 610
голодных имаго таежного клеша и 276 изолятов от 138 зверьков (138 изолятов из тканей, ушных, раковин и 138 изолятов из тканей мочевых пузырей).
Молекулярное типирование В. burgdorferi s. 1. проведено методом анализа полиморфизма длин фрагментов рестрикции с использованием ферментов MseI и Tru91 (Postic et ai, 1994). Разделение фрагментов ДНК, полученных в результате гидролиза рестрикта-зами, осуществляли в 12% полиакриламидном геле (ПААГ).
Для девяти изолятов, полученных из кишечника таежных клещей и тканей органов мелких млекопитающих, проведена расшифровка нуклеотидных последовательностей межгенного спейсера 5S-23S рРНК. Для проведения секвенирутощей реакции готовили рс-акциопную смесь объемом 5,5 мкл, содержащую 1,5 мкл праймера (0,9 пмоль), 2 мкл ДНК, 2 мкл Big Dye1*1 Dideoxy Terminators (BD) и инкубировали на амплифвкаторе Gene AmpR PCR System, фирмы РЕ Applied Biosystem США по общепринятой схеме. После предварительной очистки препараты были переданы в Межинститутский Центр Секвени-рования ИХБФМ СО РАН для анализа продуктов амплификации. Выравнивание нуклеотидных последовательностей проведено с использованием программы ClustalW (DNASTAR, Inc., USA). Для построения филогенетического древа по методу ближайшего присоединения были использованы нуклеотидные последовательности межгенного участка 5S-23S рРНК семи упомянутых выше изолятов и 16 изолятов, описанных в литературе. Номера доступа GenBank исследованных изолятов AF538265, AF538266, AF538267, AF538268, AF538269, AF538270, AF538271.
Различия показателей зараженности сравнивали с использованием t-хритерия для выборочных долей (Лакин, 1980; Плохинский, 1980). Поскольку распределение клещей на зверьках и боррелнй в клещах отличалось от модели нормального распределения, достоверность различий средних величин (индексов обилия) оценивали с использованием непа-рамстрического критерия Манп-Уитпи (Sokal, Rholph, 1981). Различия считали достоверными, если нулевая гипотеза отвергалась с 95%-ной вероятностью (р<0,05).
Глава 3. Характеристика геноцидов В. burgdorferi sJ. в западносибирских очагах
ИКБ.
3.1. Генетическая характеристика изолятов ДНК Л. burgdorferi sJ.
В исследуемом природном очаге ИКБ с использованием ПДФР-анализа продуктов ТЩР межгенного участка 5S-23S рРНК в клещах-переносчиках и мелких млскопи-
тающих выявлено два геновида боррелия комплекса В. burgdorferi s.l. - В. garinii и В. afzelii. Идентифицированы два генетических варианта В. garinii - 20047т и NT29, хорошо различающиеся по числу и длине фрагментов рестрикции. Часть изолятов была представлена смесями этих геновидов и генетических вариантов (табл. 1).
Для 9 изолятов ДНК, полученных из голодных имаго таежного клеща и мелких млекопитающих, правильность идентификации В. burgdorferi s.l. подтверждена на основании определения нуклеотидных последовательностей межгенного участка 5S-23S рРНК Сравнение показало, что для подавляющего большинства исследованных изолятов, структура данного межгенного участка в высокой степени гомологична известным последовательностям, ранее описанным для геновидов В. burgdorferi s.L (рис. 1). В частности, на филогенетическом древе западносибирские изоляты, типированные ках В. garinii, группируются с типовым штаммом даштого геновида 20047Т, образуя две компактные ветви, соответствующие генетическим группам 20047т и NT29 (Postic et al., 1994). Изолят, типиро-ванный как В. afzelii, в высокой степени гомологичен типовому штамму VS461 (рис.2), выделенному в Швейцарии (Postic et al., 1994). У одного из исследованных образцов (изолят 03, номер доступа GenBanx AF538270), отнесенного на основании ПДФР-анализа к генетической группе В. garinii 20047т, была выявлена нетипичная структура межгеяного участка 5S-23S рРНК (см. рис. 4, 5). Филогенетический анализ показал, что он наиболее близок к изоляту В. garinii ChY13p, полученному из клещей /. persulcatus в СевероВосточном Китае (Li et al., 1998). В структуре межгенных участков 5S-23S рРНК обоих упомянутых изолятов имеются фрагменты, сходные с последовательностями некоторых других геновидов. У изолята RU03 первые 65 пар нуклеотидных оснований межгенного участка 5S-23S рРНК были типичными для В:garinii, а фрагмент с 70 по 115 пару нуклео-тидных оснований - в высокой степени сходен с последовательностями соответствующего фрагмента В. afzelii. Таким образом, на основании анализа структуры межгенного участка 5S-23S рРНК он не может быть отнесен ки к В. garinii, ни к В. afzelii. He исключено, что выявленпая нетипичная структура межгенного участка 5S-23S рРНК изолята 03 является результатом рекомбинации между В. gariniiи В. afzelii.
10
»
30
40
50
60
ГО
АСТААСТТАТТСССАее<5ТТТТТАТТТТАГАСТТТАААС^ТС^^ТТТАТТТТТТА|^*Г^^-*АТ0ТГ^АТАТТ| А(ЗТААаТТАТТвССАаОСТТТТТВТТТТАТАСТТТАМСАТТ(»ТТТТАТТГТТТ}5/|«йгы^3^5ЙАТАТТ| АОТААа[ТЙ(ГТвССАСевТТТТ10ТТТ^АТАСТТТАААСАТТйАТТГТАТТТТТТАГСТТТТТАвАТОТТСАТ0ГТ. АСТААСТ1АТТ0ССА00еТТТТТАТТТТАТАСТТТАААСКГТ0Аг1»ТТТАТТТТТТА|^~}Я4Т.ЙАТСТТЮМАТТ| АаТААаТТАТТОССА<ЗОвТТТТТЙТТТТАТАСТПАААСАТТОАТТТТАТГТТТТАТвТТТТТАОАТСГГТ5АТАТТ) АВТ»А0ТТАТТвССА0ССТТТТТАТТТТАТАСТТТАААСАТТ0АТТТТАТТТТТТАТВТТТТТАСАТвТТСАТ1ГГТ. АеТААОТТАТТеССАОййТТТТТАТТТТАТАСТТТАААСАТТСЗАТТТТАТТТТТТАТОТТТТТАСАТОТТСАТЙГТ. АВТААвТТАТТеОСАОеОТТТТТАТТТТАТАСТТТАААСАТТеАТТТТАТТГТТТАТСТТТГТАбАТОТТСАТЙТГ. АСТААОТТАТТСССАОООТТТТТЙТТТТАТАСТТТАААСАТТаАТТТТАТТТТТТАТеТТТТТАСАТОТТСАТЙТТ. АаТААаТТАТТ0ССАС5аТТТТТЗГТТТАТ5СТТТАААСАТ70АТТТТАТ7ТТТТАТ0ТТТТТАйЛ7СГГГСАТАТТ.
90
100
110
120
130
140
150
80 -и
£гтт >ттт ттт ггтт ¿ттт ттт ттт ттт ттт ттт
160
а ваЙШСЬПЗр (СМИ. ЛВИЮТ5) а даппИ 20047 (Гяпм, 1301191 В гЬЫН вЗ АНЭНЛ) В дмМ 03 <ЧмЛ.АРвЗ«гМ) в валян 05 <Яим*|,АГОа2М)
в дипи 34 <Ри»а.*гаг207)
В е>г1Ш1 8Т <В>я»».ЛРЯ«2вЗ) В. ¡мШ Б9 |ЯтМ.АГ5за2в9) В. дмНяй Ы (ВиЫ»А«М2ГО)
ОААТАЛЛДвАТТСАААТААТАТААААААТАА^чнтатататтсасатссаттааасаааоататататтаттстатотт оаатд^«|1ааттсааа^аа(5атаааааатаааа. - татататтсасатсбаттааасаааоататататтаттстатотт оаатсттттаттсааатаататаааааатаааа-.татататтоасатссаттааасаааоататататтаттстатстт здат»эдаттсалатаататаааааатлан11тататлттсасатс6атталасаалватататлттаттстлтотт саатм^лбаттсааатаататаааааатаааагататататтсасатооаттааасаааеататататтаттстатотт г а ат ОТ т т т атттааат алтат аааааат аааа. - татлт аттсасат ОгАТТАА асааават ат ат ат т ат т ст ат отт СААТСТТТТАТТ^ааатаататаааааатаааа- - татататтбасатосаттааасааайататататтаттстатотт олатоттттаттсааатаататаааааатлааа.. татататтсзасатоваттааасаааеататататтаттстатотт саатоттттаттсааатАЛТАТААААААТАААА- . ТАТАТАТТвАСАТСвАТТАААОАААОАТАТАТАТТАТТСТАТСТТ вААТОТТТТАТТСААЛТААТАТААААААТАААА--ТАТАТАТТ6АСАТвОАТТАААСААА6АТАТАТАТТАТТСТАТСТТ
В айвИУ®*61 (СиижЦпА АП»»13) в ца>ЫС1|У13р(От.Аа<»зг>]| В д*ппИ 10047 ^кп« ион» В.шйаЩ М (ШнАМЪЗКП) В длгШ 03 АР:И2Ю) в.а*гЫ1 05 (пипм.АР:мгее) в. вч*>11 34 <Кии».АГ»в2<7) В ¡м1п11 вт (№км аизюм) В. д*г*>№ 89 юиии АГвэаЯв) В.Г*гМ1 М (Яиинмкяащ
170
1в0
190
200
210
С1А1А ААСАААТТ ООСАА А АТ АОАвАТ ООААОАТАААААТ А} ОбТ СА АА вТ А АТ ОТАТАААСАААТТ6вСААААТАОА(ЗАТСОААСАТАААААТА{.ввТСАААСгТААТ ОТ АТ А ААСАААТТ С<ЗСА А А АТ АвА САТвСААОАТАААААТ АГССТ С АА АвТ А АТ СТАШ*АСАААТТ»ЗСАЛЛАТАС5АСЗЛТО<ЗАЛеЛТААЛАЛТАКО-ТСЛААОТАА7 СТАТАААСАААТТООСААААТАСАОАТСОААСАТАААААТАКО- ТСААЛвТЛАТ в$АТААЗСАЛАТТСССЛАЛАТАвЛбАТСаААСАГААЛААТАКО-ТСААА<ПААТ ССАТААОСАААТТбССААААТАОАвАТваААСАТАААААТАКО.ТСАААвТААТ СТ АТАААСАААТТСЙСААААТАОАОАТбСААОАТАААААТАКа- ТСАААОТААТ СТАТАААСАААТТвОСААААТАОАОАТвС^АСАТАААААТАКО-ТСАААОТААТ ОТАТАААСАААТТСОСААААТА13А(ЗАТввААСАТАААААТАКв.ТСАААОТААТ
В (МглЬпЛ. ЛУО&М)
В нимГ СЛПЗр (а*а.АВООЭ793) а увппА' 20047 Цгтк* Ш11» В. Шт1В вд (Лии1в,АРВа27Ц в. аяЛл* 03 (Лшт, АР53ЮС$) В дагтл 08 (Яими.Л1ЗД«кб)
я дмпи м лгиюат-,
В дкШ1 87 <Яю1«.АЮа»«) В, дк<п11 М (Яики.АПЭШ6Э) В дИЫ! б* (№м ЛЯЭ»270)
Рис. 1. Выравнивание нуклеотидных последовательностей межгенного участка 5S-23S рРНК ДНК В. Ьы^йафп s.l. западносибирских изолятов В. garinii 20047т и N129, В. аДеШ и изолята В. garinii Зр (Северо -Восточный Китай, Li et а1., 1998). Различающиеся позиции выделены серым цветом.
ft afzahl D-3 (Czetfi Republic, AF4S797») B afeeW VS481 (Switzerland, AY03ZS13) S tfralil S3 (Russia, ATS38271)
B japonlca H014 (Japon, L3012S) ' B gannll CtlY13p (China, AB0037SS)
■CE
B. garlnll 03 (Rusaa, AF538265)
-- a lusitanlao Poti B2 (Portugal, L30131)
■ S. valalslana VS116 (SwiUwlamt 130134)
• 8 afzelt I-2 (Cierh Republic AF497903)
_|fl ganntl 1-172 (CzsKii Republic, AF497990)
J 1 a gannTi 20047 (Franc». L3D119) r-j* B. ga/intl 59 (Russia. af535is9)
— '-B garlnil 64 (Russia. AF538270)
1-B Sarm» J-21 piech RepuNIc, AF49T991)
' B. Qarlnli 57 (Russia, Af538268) B. girirtll 09 (Russa, AF538266) B. garin/f 34 (Russia, 536167) B flarfnff NT29 (Japan, L50130) B burgdorferi 8. sir. 212 (France, L30121)
B. burgdorferi s. str 831 (USA, U30tii) B. burgdorferi S Str. A26 (Czech Republic. AF497979)
L. a h
■ B. bisseÜK ON127 (USA, 130126)
16 5.
• a andersonb 21133 (USA. L30«0)
-t-
16
14
12
10
HyrcieoTHAHKe aaMenu (xlOO)
Ptc. Z .BpiopcipaMMa cxqzpma ncrcw»areiiii!ocrsfi nyicKJUO?« voKraiHoro (JpurMarra 5S-23S pFHK R hrghfcri si Thbbus mnwMM ßoppenaß: VS461, H014, BodB2, VS116,20047, N129,212, B31, DN127,21133 (ftdio et aL, 1994X GiY13p (Ii etal, 1998X D-3,1-2,1-72, J-21, A26 (Dodltovaet aL, 2003)
XHjrwMiifiKjncw Bmosnaai voonmuGcflxmii re ras>RHt.K fCHi*ii, cofjimuHx KaKxe CaSipH.
Таблица 1.
Распределение геновидов и генетических вариантов боррелий в переносчиках и резер-_вуарных хозяевах. _
Источник июлями Тширсвада В том числе (доля.
й кпппи В-абйа Неагти N129+Д дйей" &ЖШ 20047+Я ФгШ
N129 2ГХМ7Т
Гсясдаьк имаго Грег-яАсаьк 36 14(385±8.1) 12(313*73) 3 (83±4.6) 6 (1б,7±62) 1 (2.8=42.8)
Мелке млекопи-такпзяе 25 8 (згсазд 7 (28ДВ.4) 7 (2ШЯД> 3 (12Д*9,4)
Всею 61 22 (36.Ш02) 19 (31,1±юб) 10 (16,4+11,7) $ <14,7+1 1 аэад
Недавние исследования показали, что среди природных изолятов В. hurgdor-feri встречаются редкие нетипичные формы, отличающиеся по структуре межгенного участка 58-238 рРНК от известных геновидов и генетических групп (1л Ы аЬ, 1998; БепЗакоуа е! а1., 2003). Однако структура упомянутого выше межгенного участка, выявленная у изолята 03, не была описана ранее и такая форма является пока единственной находкой.
3.2. Зараженность голодных имаго клешей I. persulcatus различными геноцидами боррелий.
В голодных имаго таежного клеща, собранных с растительности, выявлено два геновида боррелий - В. garinii и В. afz,eШ Из 36 проанализированных изолятов, 26 были типированы как 5. garinii, 3 - как В. afzelii, 7- как смесь В. gariniiи В. afzelii (см. табл. 1). Соотношение генетических вариантов В. garinii N129 и 20047т было приблизительно равно 1:1. Следует отметить, что в исследованных изолятах из голодных взрослых клещей геяовид В. afzeШ чаще всего встречался в смеси с В. garinii, чем индивидуально.
Доля клещей, инфицированных одновременно двумя геновидами боррелий, составила около 20% от общего числа типированных изолятов. В подавляющем большинстве была отмечена смесь В. garinii ОТ29 и В. afzeШ, и лишь в одном случае выявлена смесь В. garinii 20047' и В. afzeШ. Одновременное заражение переносчика В. gorinii генетических групп 20047" и N129 не отмечено.
31. Зараженность фоновых видов мелких млекопитающих различными генови-дами боррелий.
В результате исследования трех видов мелких млекопитающих (Ар. agrarius, СШ. гиНШш, 3. агапеш), доминирующих в северной лесостепи Западной Сибири, выявлены тс же геновиды и генетические варианты боррелий, что и в голодных имаго 1.репи1са-
tus (см. табл. 1). В сравнении с клещами, в мелких млекопитающих чаще выявляли В. afzelii, соответственно 8,3% и 28% типированных изолатов. При сопоставлении соотношений различных геновидов и генетических групп спирохет В. burgdorfei s.l. и в зверьках, и в клещах вместе достоверных различий не обнаружено (х2=1,3; d.f.=l; р=0,25). В мелких млекопитающих были выявлены те же варианты смешанного заражения (В. garinii NT29 и В. afzelii), которые преобладали и в клещах. Почти полное отсутствие микстов, в состав которых входит В. garinii 20047Т, позволяет предположить, что на псследуемой территории наиболее эффективно клещи и мелкие млекопитающие обмениваются В. garinii NT29 и В. afzelii.
У мелких млекопитающих специфические ДНК В. garinii и В. afzelii были обнаружены как в тканях кожи ушных раковин, так и в тканях внутренних органов (табл. 2). Соотношения различных геновидов и генетических вариантов боррелий для изоля-тов из кожи и мочевых пузырей не различались. В обоих случаях преобладали В. garinii, среди которых наиболее часто выявляли боррелий генетического варианта NT29. Таким образом, какой либо закономерной локализации различных геновидов и генетических вариантов возбудителей ИКБ не отмечено.
Таблица 2.
Распределение геловвдов и генетических вариантов боррелий в переносчиках и резер-
вуарных хозяевах.
Нсгочник' изоляции Типиро- B2HÜ В том числе (доля, %)
В., NT 29 ¡armn 20047Т В. afzelii В. afzelii +В. arinii NT29
Ушные раковины 15 5 4 4 2
Мочевые пуялри 10 3 3 3 1
Ваге 25 8 (ЗЩЩ) 7 (2ХДШ,К) 7 (28ДЩ8) 3 (12Д£18,8)
У некоторых зверьков в пробах из кожи ушных раковин детектирован один геновид боррелий, а в пробах из мочевого пузыря - другой. В частности, у двух самцов красной полевки (перезимовавшие особи) в одном случае в тканях кожи была детектирована ДНК В. garinii 20047, а в тканях мочевого пузыря - В. afzelii, в другом - в тканях кожи - В. afzelii, в тканях мочевого пузыря - В. garinii КТ29. Одновременное заражение тканей кожи и внутренних органов различными геновидами боррелий отмечено и у неполовозрелых зверьков. Зафиксировано одновременное заражение внутренних органов (мочевой пузырь) у половозрелого
самца сеголетки этого же вида В. afielii, В. garinii NT29, тогда как в тканях кожи (ушные раковины) ДНК боррелий не выявлена. Напротив заражение тканей кожи упомзпгутьши гепо-видами и генетическими вариантами боррелий было отмечено у самцов обыкновенной бурозубки. Очевидно, что эти виды зверьков способны одновременно заражаться различными геновидами В. burgdorferi s.i. и передавать их питающимся на них клещам.
Глава 4. Взаимоотношения боррелий с таежным клещом.
4.1. Зараженность боррелиями таежного клеща /. persulcatus.
Уровень зараженности рахпичных фаз развития таеэкиого клещей При микроскопическом исследовании фиксированных препаратов боррелий были выявлены как у голодных имаго, собранных с растительности, так и у преимагинальных фаз, собранных с мелких млекопитающих. В среднем за три года наблюдений наименьший процент зараженпых особей (7,1%) отмечен для напитавшихся и полунатггавшихся личипок, снятых с мелких лесных 1рызушв и насекомоядных. Доля зараженпых особей среди лимф, паразитировавших на зверьках, достоверно выше (р<0,05) и составляет 14,4%. Средний процент зараженных боррелиями голодных имаго /. persulcatus (14,7%) не отличался от показателя зараженности нимф и был достоверно выше (р<0,05) соответствующего показателя для личинок. Несмотря на то, тго доля зараженных нимф и имаго была приблизительно вдвое выше, чем личинок, среднее число боррепшЧ в пересчете па одного исследовшшого клеща (индекс обилия) и в пересчете на одну зараженную особь (интенсивность заражения) достоверно не различалось по критерию Манн-Уитни для всех трех фаз развития.
Относительпая численность имаго таежного клеща в северной лесостепи Нриобья варьирует в различные годы от 6,9 до 18,6 особей на 1 км, что значительно ниже показателей в оптимуме ареала (Добротворский, 1991). Средний уровень зараженности клеща боррелиями здесь близок к минимальным значениям, приведенным в литературе для Западной Сибири (Колчанова, 1997; Рудакова, Матущенко, 1996). По-видимому, невысокая напряженность эпизоотического процесса в исследуемом природном очаге ИКБ связана с низким уровнем численности переносчика, которая лимитируется недостаточным увлажнением. Кроме того, низкий уровень численности переносчиков также обусловлен нарушенпостью лесных ме-стообита»гай вследствие интенсивной рекреационной нагрузки.
Уровень зараженности боррелиями самок и самцов I. persulcatus. У самок и самцов таежного клеща выявлен приблизительно одинаковый процент зараженных особей: 15,0±2,6% и 14,4+2,5%, соответственно. Предполагают, что вероятность заражения самок, выше, так как нимфы, из которых они перелжыют, поглощают большие порции крови (Ковалевский и др., 1993; Hubalek et a!., 1994; Kovalevskii, КотепЬсгу, 1995; Васильева, Наумов,
1996). Однако наблюдения в природных очагах показывают, что, как правило, различия в зараженности самцов и самок если и проявляются, то лишь как тенденция.
дачвякя нкмфы
Число боррелий на 100 полей зрения: _
□ -0 □ -0,1-10,1 ® -10,2-50,1 В ->50,1
Рис. 3. Частотное распределение боррелий в индивидуальных клещах hodes persulcatus (по данным световой микроскопии фиксированных препаратов).
Обилие боррелий в индивидуальных зараженных клещах. Распределение боррелий в индивидуальных зараженных клещах всех фаз крайне неравномерно и варьирует в очень широких пределах (табл. 10, рис. 3). Максимальные показатели количества бактериальных клеток ца 100 полей зрения составили для зараженных личинок 410, для нимф - 54, а в зараженных имаго было выявлено до 500 бактериальных клеток. Для личицок и нимф, сля-тых с мелких млекопитающих, отмечен приблизительно вдвое меньший процент особей с очень низким (до 5) содержанием боррелий, чем для зараженных голодных имаго, снятых с растительности. У зараженных личинок и нимф большинство составляют особи с средним и высоким содержанием боррелий Сравнение соотношений зараженных клещей с высоким и низким содержанием боррелий показало достоверные различия между имаго и личинками (х,1=11,04; £=1, р<0,001), и между имаго и нимфами (х2=9,77; ¿£=1, р<0,001). Вполне вероятно, что описанные выше различия в распределении возбудителей связаны с их размножением в кишечниъе паразитирующих клещей. Нельзя также исключить, что наличие крови в кишечнике затрудняет выявление боррелий у клещей, что, вероятно, может занижать процент особей с слабой зараженностью.
Таким образом, в северной лесостепи Приобья уровень зараженности клещей 7. persulcatus возбудителями ИКБ, оцененный с применением микроскопии фиксированных препаратов, близок к минимальным показателям, приведенным в литературе для природных очагов Западной Сибири Паразитирующие иа мелких млекопитающих личинки таежного клеща заражены боррелиями в мепьшей степени по сравнению с нимфами и юлод-ными имаго. Для всех фаз развития клещей свойственно неравномерное распределение
борреяий, а среди зараженных голодных имаго подавляющее большинство составляют особи с низким содержанием возбудителей. Среди зараженных личинок и нимф, снятых со зверьков, преобладают особи с средней и высокой индивидуальной' инфицированностью В. burgdorferis.1.
4.2 Межгодовые изменения зараженности имаго клещей боррелиямн.
Согласно оценкам, полученным с применением световой микроскопии, уровень зараженности голодных имаго /. persulcatus на протяжении трех лет исследований оставался приблизительно одинаковым. Вместе с тем, исследование клещей с применением ГЩР позволило выявить межгодовые различия зараженности клещей боррелиями. Согласно этим данным, в 2001 г. процент зараженных клещей был достоверно выше (р<0,001), чем в 2000 и 2002 1Т. Увеличение зараженности имаго боррелиями отмечено в год пика относительной численности клещей, когда этот показатель составил 16,7 особей на 1 флаго-км. Вместе с тем, увеличения обилия боррелнй в индивидуальных клещах в год увеличения численности переносчика и уровня его зараженности не отмечено. Общее число зарегистрированных в клещах спирохет в 2001 г. (163 микробных клетки на 10 зараженных клещей из 100 исследованных) было ниже в сравнении с таковым для 2002 г. (1492 на 11 зараженных клещей из 100 исследованных). За год до увеличения численности и уровня зараженности клещей-переносчиков отмечено увеличение численности мелких млекопитающих. С июня по август 2000 г. она составила 72,4 особей на 100 цилиндро-суток, тогда как в предыдущий и последующий годы данный показатель был ниже приблизительно в два раза (1999 г. - 30,1; 2001г. - 33,0 особей на 100 цилиндро-суток). Увеличение суммарного количества боррелий в голодных имаго зарегистрировано в 2002 г., то есть через год после пика численности клещей (2001 г.) и через два года после пика численности мелких млекопитающих (2000 г.). Примечательно, что по данным областного центра Госсанэпиднадзора г. Новосибирска в 2001 г. были отмечены максимальные показатели уровня заболеваемости ИКБ населения города и области, которые составили 10,8 случаев на 100 тыс. населения. В 2000 г. эта цифра не превышала 7,8, в 2002 г. - 8,1.
Таблица 3.
Межгодовые изменения встречаемости (%±тр) боррелий в имаго I.persulcatus (по дан-
Оптсигелыая чымвннпсп, клещей (особейпа 1 флаго-км) Варечаалильбсстзеяий
Год Микросксшя пир
■Щ) 122 16,7127 (192)* 153»2,1 (317)
2001 16,7 16ДВ.4 (НП> 3&<й4.0 (150)
2002 9,0 Ш2.9 (102) 15.(*3,4 П00)
* В скобках приведено число исследованных клещей.
Впервые тесная корреляционная связь между плотностью населения взрослых клещей, уровнем их зараженности, суммарным количеством связанных с ними боррелий и численностью мелких млекопитающих была показана на примере природных очагов ИКБ в Чусовском районе Пермской области (Ковалевский и др., 2002). Установлено, что подобная динамика эпизоотической активности природных очагов ИКБ определяет соответствующий характер их эпидемического проявления (Коренберг и др., 2002). Вполне вероятно, что для лесостепного очага Приобья показатель обилия мелких млекопитающих может использоваться как параметр, позволяющий оценить эпидемическую ситуацию по ИКБ в последующие годы, так как даже незначительные колебания численности зверьков способны влиять на численность и уровень зараженности клещей боррелиями. Возможно, что небольшой размах колебаний численности и прокормителей, и переносчика определяют отставание увеличения суммарного количества боррелий в имаго на год от увеличения уровня зараженности и па два года от увеличения численности мелких млекопитающих.
Таким образом, зараженность имаго клешей 7. persulcatus боррелиями в северной лесостепи Приобья относительно стабильна по годам. Значимые межгодовые изменения уровня зараженности переносчика, синхронные с колебаниями его численности, выявлены только с использованием ПЦР-детектирования возбудителей ИКБ. На подъеме и, особенно, на пике численности клещей процент инфицированных особей растет, но снижается обилие боррелий в индивидуальных клещах. Спад численности переносчиков сопровождается снижением уровня их зараженности при увеличении обилия возбудителей ИКБ в зараженных клещах. Увеличению уровня зараженности переносчика возбудителями ИКБ предшествует увеличение численности резервуарных хозяев - лесных грызунов и насекомоядных.
Глава 5. Экологические связи В. burgdorferi s.l. с млекопитающими. 5.1 Зараженность боррелпями личинок и нимф таежного клеща, паразитирующих на мелких в средних млекопитающих.
Цораженность различных видоа мелких и средних млекопитающих преима-гиналъными фазами таежного клеща. За период исследований установлено, что преима-пшальные фазы таежного клеща паразитируют на подавляющем большинстве видов мелких и средних млекопитающих, населяющих лесные местообитания в районе исследований. В сообществе мелких млекопитающих наибольшее обилие личинок и нимф характерно для доминирующих видов грызунов - красной полевки и лесной мышовки. Кроме того, по уровню обилия нимф выделялись узкочерепная полевка и полевка-экономка. На большинстве видов землероек, а также на обыкновенной куторе и сибирской белозубке обилие личинок, как правило, не превышает 1 (ИО от 0,1 до 0,8), а обилие нимф крайне низко (0,01 до 0,05). Для большинства видов мышей и полевок обилие личинок (0,7 до 4,0) и нимф (0,1 до 0,6) приблизительно в 5-10 раз выше. С более крупных по размеру видов грызунов и насекомоядных (обыкновенный хомяк, обыкновенный бурундук и белогрудый еж) было снято больше паразитировавших нимф, чем личинок.
Встречаемость заражентлх боррелиямиличинок и нимф таезкного клеща на различных видах мелких и средних млекопитающих. На зараженность В. burgdorferi s.l. исследованы личинки таежного клеща, снятые с 18 видов зверьков (табл. 4). В целом, процент зараженных клещей этой фазы составил 6,3±1,4%. Боррелии были обнаружены в личинках, паразитировавших на 9 видах зверьков: обыкновенной и средней бурозубках, обыкновенной мышовке, полевом мыши, красной, красно-серой, рыжей и узкочерепной полевках, а также на белогрудом еже. Для перечисленных выше видов мелких млекопитающих процент зараженных боррелиями личинок варьировал от 3,7+2,6% (красная полевка) до 14,3+5,9% (рыжая полевка). Однако различия встречаемости зараженных личинок, паразитировавших на отдельных видах хозяев, не были достоверными. На ззражен-ность боррелиями исследованы нимфы, снятые с 18 видов мелких и средних млекопитающих. Паразитирование зараженных боррелиями нимф отмечено на 9 видах зверьков (водяной куторе, лесной мышовке, полевой мыши, красно-серой, красной, узкочерепной, темной и восточноевропейской полевках и белогрудом еже). За исключением красной полевки, объем выборки исследованных нимф для каждого вида зверьков в отдельности невелик
и не позволяет достоверно говорить об отличиях в уровне зараженности клещей этой фазы развития. Общий процент зараженных нимф составил 13,3+3,2, что достоверно выше аналогичного показателя для личинок (р<0,05). Для нимф, паразитировавших на красной полевке, показатель заражениости был приблизительно таким же и составил 13,5+5,6%.
Тенденция к увеличению уровня зараженности боррелиями по ходу развития хорошо известна для многих видов клещей-переносчиков (Васильева, Наумов, 1996; Горелова и др., 1997; 1999). Исследования В.В. Нефедовой с соавторами (Нефедова и др., 2002) показали, что трансовариальный путь передачи боррелий у таежного клеща незначим. На основании этого можно предположить, что подавляющее большинство инфицированных личинок, снятых нами со зверьков, получили возбудителей при питании на зараженных хозяевах. По-видимому, виды насекомоядных и грызунов, на которых в районе исследований обнаружены ипфицироваияые боррелиями личинки, способны передавать боррелий преимапшальным фазам таежного клеща.
Таблица 4.
Встречаемость (%+БЕ) зараженных боррелиями личинок и нимф таежного клеща /.
persulcatus на различных видах мелких и средних млекоп игаюших.
№ Вщ Оемолрно заерькзв Лжижк (ÇttSE) Нимфы СШЕ)
1. Sûre.г araneus 18 5,8±3.2 (52)* 0(6)
2. S. caecutiens 13 9.Ш.7Ш) 0(3)
3. S. minutu f 9 0(9) 0(2)
4. Crocidura sibirica 5 0(5) 0(2)
5. Neomys fodiens 3 0(2) 50,0+50.0 (2)
6. Sicista betuîina 25 5,7±3,9 <35} 10,0±9,5 (10)
7. Apodemus agrarius 19 11, (±7.4 (18) 16,7±15,2(6)
8. Ap. pcrminwlac 3 0(4) -
9. Micrnmys minutus 1 0(1) -
10. Rattus norvégiens 1 0(1)
И Cricetux cricetus 1 . 0(1)
12. Clelhriottomys rufocanux 24 3,8+3.7(26) 11.1±10,5(9)
13. CL glareolus 20 14,3+5.9 (35) 0(4)
14. CL rutilas 45 3,7±2,6 (54) 13,5+5,6 (37)
15. Microtus gregalis 3 50,0+50,0 (2) 20,0+17,9(5)
16. M. orcorwmus 1 0(1) 0(1)
17. M. agrestis 15 0(16) 11,1 ±10,5 (9)
18. M. rossomeridionnlis 13 0(11) 16,7±15,2(6)
19. Tamias sibiricus 3 0(1) 0(5)
20. Erinaceus concolor 1 50,0+50,0 (2) 75,0±21,6(4)
Всего 253 6,3±1,4 (285) 133±3,2 (113)
* В скобках приведено число исследованных клещей.
Круг таких хозяев включает в себя практически все фоновые виды. В этой связи примечательно обнаружение зараженных клешей на лесной мышовке и белогрудом еже, которые не упоминаются в литературе в качестве резервуарных хозяев боррелин. Близкородственный белогрудому ежу вид, обыкновенный еж, известен как хозяин возбудмтслей ИКБ в Западной Европе (Gray ct al., 1994; Gem ct al., 1997). Лесная мышовка и белогрудый еж характеризуются высокими показателями обилия личинок и нимф таежного клеща, зверьки живут в природе несколько лет и впадают в зимнюю спячку. Вполне вероятно, что эти виды вовлечены в циклы циркуляции возбудителей ИКБ и способны эффективно заражать паразитирующих на них клешей.
Таким образом, паразитирование зараженных боррелиями личинок или нимф таежного клеща отмечено на 12 из 20 исследованных видов грызунов и насекомоядных. Большинство из этих видов относятся: к фоновым и принадлежат к числу основных прокормителей преимаги-нальных фаз клещей.
Изменения зараженности боррелиями личинок и нимф таежного клеща в ходе летнего сезона. Показатели зараженности личинок и нимф, снятых с отдельных видов зверьков, достоверно не различались, поэтому для анализа сезонных изменений использованы данные, суммированные по всем видам мелких млекопитающих. Максимум обилия личинок и нимф на зверьках приходится на напало летнего сезона, в районе исследований у нимф он обычно бывает в конце мая - начале июня, а у личинок несколько позже - в середине-конце июня. В июле и августе обилие обеих преимагинальных фаз снижается, и к началу сентября пара-зитирование клещей на зверьках прекращается. В отдельные годы в августе наблюдается небольшой подъем обилия личинок (Добротворский, 1991). Выявлено, что от июня к июлю процент зараженных клещей обеих фаз развития, снятых со зверьков, увеличился приблизительно в 2 раза (рис. А). Вместе с тем, в августе зараженных личинок и нимф на зверьках обнаружено не было. Максимальный процент зараженных боррелиями личинок и нимф, паразитировавших на зверьках, отмечен в июле, тогда как сезонный пик обилия клещей приходится на конец мая и июнь. Следовательно, сезонный максимум зараженности сдвинут приблизительно на месяц позже по сравнению с сезонным максимумом обилия клещей. Вполне вероятно, что увеличение частоты встречаемости зараженных личинок от июня к июлю, наблюдавшееся вслед за пиком обилия переносчиков, связано с ростом в популяциях хозяев доли инфицированных боррелия-ми зверьков, способных передавать их питающимся личинкам и нимфам. Возможно, снижение зараженности личинок в августе связано с тем, что в этот период в популяциях хозяев преобладают зверьки-сеголетки поздних генераций, которые инфицированы в значительно меньшей степени.
зараженных личинок и нимф, паразитировавших на зверьках, не выявил достоверных различий, связанных с полом, возрастом
и генеративным состоянием зверьков. Вместе с тем, максимальный процент зараженных личинок (21,2±7,1%, n=33) отмечен на самцах-сеголетках, принимающих участие в размножении. Этот показатель достоверно выше доли зараженных личинок, снятых с перезимовавших самцов (6,2±2,79Ь, n=80, р<0,05). В популяциях мелких грызунов самцы, принимающие участие в размножении, прокармливают значительно больше личинок и нимф таежного клеща по сравнению с самками и неполовозрелыми сеголетками (Васильева, Никифоров, 1968; Лабзин и др., 1980; Бахвалова и др., 2003). Тем не менее, процент зараженных личинок, шитых с половозрелых самцов, не отличался от процента зараженных личинок, снятых с самок и неполовозрелых сеголеток (10,6±2,9%, n=113 и 7,2±3,1%, n=69, соответственно).
Таким образом, судя по встречаемости зараженных боррелиями личинок, зверьки, принадлежащие к различным половозрастным группам, приблизительно в одинаковой степени способны инфицировать паразитирующих на них клещей. По-видимому, участие различных демографических групп хозяев в передаче возбудителей переносчикам почти не зависит от уровня их пораженное™ личинками и нимфами таежного клеща.
5.2 Зараженность боррелиями фоновых видов мелких млекопитающих.
Для исследования на зараженность В. burgdorferi s.l. были выбраны три фоновых вида мелких млекопитающих, принадлежащих к различным таксонам и различавшихся по уровню обилия личинок и нимф таежного клеща - обыкновенная бурозубка, полевая мышь и красная полевка. Специфическая ДИК боррелий выявлена у 27 (19,6+3,4%) из 138 исследованных зверьков. ДНК боррелий обнаружена в 16,6±3,2% проб, выделенных из тканей ушных раковин, и 10,9±2,7% проб, выделенных из тканей мочевого пузыря. У 6,5± 2,0% зверьков ДНК возбудителя выявлена одновременно в пробах из тканей ушных раковин и мочевого пузыря. В районе исследований ДНК В. burgdorferi s.l. выявлена у 12,9±6,0% обыкновенных бурозубок, 16,1 ±6,0% полевых мышей и 21,1±4,7% красных полевок. При этом у обыкновенных бурозубок ДНК возбудителя чаще обнаруживали в пробах ушных раковин, у нолевых мышей и у красных полевок - приблизительно с одинаковой частотой в пробах тех и других органов. Вместе с тем, различия между отдельными видами зверьков по частоте встречаемости зараженных особей не достоверны.
Прямая связь между уровнями обилия нимф и их зараженностью для исследованных видов мелких млекопитающих не прослеживается. В среднем, обилие нимф на Ар. agrarius и S. агапеихв 10-30 раз меньше, чем на С/. ruthiluA. Несмотря на то, что основная роль в заражении мелких млекопитающих боррелиями принадлежит нимфам, процент зараженных боррелиями
полевых мышей и обыкновенных бурозубок всего лишь в 1,6-2 раза ниже, чем процент зараженных красных полевок.
В ходе исследования с помощью ТТЦР-ГТДФР-анализа были типированы 25 изолятов ДНК боррелий, выделенных из органов зверьков. Для двух из них определены нуклеотидные последовательностей межгенного участка 5S-23S рРНК. Результаты секвенирования совпали с результатами ПДФР-анализа. В большинстве случаев среди положительных изолятов ДНК боррелий преобладал геновид В. garinii. При этом генетический вариант В. garinii NT29 был детектирован в пробах тканей значительно чаще, чем В. garinii 20047т. Геновид В. afzelii был выявлен в пробах с той же частотой, что и вариант В. garinii 20047Т. Доля микстинфекций у мелких млекопитающих была невелика и составила 12% от общего числа типировапных изоля-тов. Примечательно, что в процентном соотношении число микстинфицировадных зверьков достоверно не отличалось от такового для имаго /. persulcatus, а частота одновременного заражения В. afzelii и геновариантом В. garinii 20047T была практически одинаковой.
Таким образом, несмотря на значимые различия в уровне обилия личинок и нимф таежного клеща на обыкновенной бурозубке, полевой мыши и красной полевке, частота выявления специфической ДНК В. burgdorferi s.L у зверьков этих видов достоверно не различалась. Судя по выявлению ДНК боррелий в пробах внутренних органов, у половины зараженных зверьков развивается системная инфекция.
S3. Динамика эпизоотическою процесса у мелких млекопитающих в течение летнего сезона.
Так как встречаемость зараженных боррелиями обыкновенных бурозубок, полевых мышей и красных полевок достоверно не различалась, для анализа сезонных изменений зараженности мелких млекопитающих боррелпямц использованы суммированные дапные.
Общая зараженность зверьков с мая по июль изменялась незначительно (от 16,1 до 21,1%). Вместе с тем, доля зверьков, у которых специфическая ДНК В. burgdorferi s.l. выявлялась в пробах из ушных раковин, была максимальной в мае, а в июне-июле она постепенно снижалась (см. рис. 4). В противоположность этому, ни у одного из мелких млекопитающих, отловленных в мае, ДНК боррелий не была обнаружена в пробах из мочевого пузыря. В июне отмечены первые зверьки, у которых боррелий присутствовали во внутренних органах, а в июле их процент был самым высоким за период наблюдений. Сравнение показало, что в мае и июле распределение изолятов ДНК боррелий среди положительных проб из тканей ушных раковин и мочевого пузыря достоверно различалось (х2=4,65; d.f.=l; p<0,05). Снижение доли грызунов и насекомоядных, у которых боррелий выявляли в пробах тканей из ушных раковин, наблюдалось от мая к июлю, параллельно уменьшению обилия личинок и нимф таежного клеща.
Одновременно с этим увеличивался процент зверьков, у которых ДНК боррелий детекгирозали в пробах из мочевого пузыря. Существование такого большого интервала между сезонными максимумами зараженности зверьков боррелиямн и обилия клещей может быть объяснено длительными сроками развития генерализованной (системной) инфекции, которая у мелких грызунов выявляется не ранее чем через две-четыре недели после первоначального заражения (Piesman, 1988; Shm at aL, 1992; Gem et aL, 1993). Таким образом, в течение летнего сезона соотношение зверьков, у которых возбудители ИКБ локализованы в кожных покровах и внутренних органах, изменяется. Процент особей, у которых боррелки выявляются и козгпых бкоптатах максимален в мае и снижается к июлю в соответствии с изменениями обилия клещей. В противоположность этому, в мае зверьки с генерализованной формой инфекции встречаются крайне редко, затем их доля постепенно увеличивается, достигая максимума в июле. Одновременно увеличивается зараженность боррелиями личинок и нимф, паразитирующих на зверьках.
5.4. Зараженность боррелиями различных демографических групп мелких млекопитающих.
Анализ частоты выявления специфической ДНК боррелий у различных половозрастных групп мелких млекопитающих це показал значимых различий зараженности самцов и самок. У зверьков обоих полов боррелий в пробах из тканей ушных раковин и мочевого пузыря были встречены, практически, с одинаковой частотой. Процент положительных проб из кожных биоптатов и мочевых пузырей зверьков, принадлежащих к различным возрастным группам, достоверно не различайся. Не выявлено также достоверных различий между особями, участвующими в размножении и неполовозрелыми сеголетками.
Выводы
1. В природных очагах иксодовых клещевых боррелиозов зарегистрированы два патогенных для человека геновида боррелий: Borreiia afielii и В. gariniu Последний геновид представлен генетическими группами NT29 и 20047т. Выявлеп нетипичный изолят, который по структуре межгенного участка 5S-23S рРНК не может быть отнесен ни к одному известному геиовиду.
2. Уровень зараженности имаго /. persulcatus невысок (14,7%), вместе с тем, для Приобской лесостепи характерна высокая инфицированность прсимагинальных фаз, паразитирующих на мелких млекопитающих.
3. Зараженность боррелиями имаго таежного клеща в годы исследований слабо изменялась по годам. При этом, днк численности имаго клещей, обычно наблюдающийся па следующий год
после пика численности хозяев, в наших условиях сопровождался достоверным увеличением процента зараженных перепосчихов. Максимальное обилие боррелий в клещах отмечено лишь через два года после пика численности грызулов и насекомоядных на фоне снижения обилия клешей.
4. В условиях лесостепного Приобья принимать участие в поддержании циркуляции боррелпй может большинство из обитающих в регионе видов. В их числе ранее не упоминавшиеся в литературе полевая мышь, лесная мышовка и белогрудый еж. Уровень зараженности обыкновенной бурозубки, полевой мыши и крзспой полевки, доминирующих в западносибирских очагах ИКБ, не превышает 21%. Эти виды участвуют в циркуляции всех выявленных в регионе патогенных для человека геновидов боррелий.
5. Судя по сезонной динамике зараженности боррелиями паразитирующих на хозяевах преима-гинальыых фаз развития переносчика и динамике эпизоотического процесса в популяциях мелких млекопитающих, системная инфекция чаще развивается у сеголеток, которые, вероятно, и определяют уровень зараженности нимф, а, следовательно, и имаго таежного клеща.
Список работ, опубликованных по теме диссертации:.
1. BeklemLshev А.В., Dobrotvoisky А. К., Livanova N.N., Ivanov ID., Piteiina AV., Ivanov L.I. Different genospecies of Borrelia burgdorferi sensu lato dominate in Ixodes persuicatus ticks rn West Siberia and in the Far East, Russia // VI th International Potsdam symposium on tick-borne diseases. Berlin (Germany), April 26-27th. 2001. Programme and compendium ofabstracts. - Berlin. 2001. - P. 16.
2. Ливанова Н.Н. Перспективы мониторинга клещевых боррелиозов в особо охраняемых природных территориях // Исследования эталонных природных комплексов Урала. Материалы научной конференции, посвященной 30-летию Внсимского заловедпиха. - Екатеринбург, 2001.-С. 65-68.
3. Ливанова Н.Н., Добротворский А.К., Беклемишев А.Б. Опыт организации и первые итоги мониторинга клещевых боррелиозов в Новосибирском Академгородке //XI Международный симпозиум по биоиндикаторам «Современные проблемы биоилдикации и биомониторипга», Сыктывкар, 17-21 сенгября 2001 г., Тез. докл. - Сыктывкар, 2001.- С. 111.
4. Ливанова Н.Н., Добротворскин А.К., Иванов И.Д., Питерина А.В., Беклемишев А.Б. Об уровне зараженности клешей Ixodespersulcatus Schulzc спирохетами Borrelia burgdorferi sensu lato на юге Западной Сибири // Актуальные аспекты природноочаговых болезней. Материалы межрегиональной научно-практическая конференция 16-17 октября 2001 г., посвященной 80-летию Омского НИИПИ. - Омск 2001. - С. 107-108.
5. Ливанова Н.Н., Добротворский А.К. Инфицированность взросзлых и 1феимагинальных фаз таежного клеща возбудителями ихсодовых клещевых боррелиозов на кн*е Западной Сибири // История и развитие идей П.П. Семенова-Тян-Шанского в современной науке и практике школьного образования. Мат. Вссроссийск, науч.-практ. конф., посвященной 175-лстию со дня рожднешм П.П. Семенова-Тян-Шанского. 16-18 мая 2002.- Т. 2 (Зоология, ботаника, экология). - Липецк, 2002.- С. 61-62.
6. Morozova O.V., Dobrotvoisicy А.К., Livanova N.N., Tkachev S.E., Bakhvalova V.N., Beklemishev A.B., Cabello F.C. PCR Detection ofBorrelia burgdorferi seasu lato, tick-borne encephalitis vims and human granuiocytic erlichiosis agent in Txodespersulcatus ticks from Western Siberia, Russia// Journal of Clinical Microbiology, 2002.- Vol. 40, № 10.- P. 3802-3804.
7. Добротворский A.K., Бахвалова В.Н., Ливанова Н.Н., СЕ. Ткачев, ВА. Матвеева, Л.Э. Матвеев, А.Б. Беклемишев, О.В. Морозова Характеристика возбудителей клещевых боррелиозов и клещевого энцефалита Западной Сибири // Клещевые боррелиозы. Мат. науч.-иракт. конф. -Ижевск, 2002.-С. 126-129.
8. Ливанова Н.П., Добротворский А.К., Панов В.В., Морозова О.В. Взаимоотношениях компонентов паразитарных систем иксодовых клещевых боррелиозов на юге Западной Сибири // Сибирский экологический журнал, 2003.- Т. 10, № 5.- С. 581-590.
9. Beklemishev A3., Dobrotvorsky A.K., Piterina A.V., Ivanov I.D., Nomokonova N.Y., livanova N.N. Detection and typing ofBorrelia burgdorferi sensu lato genospecies in Ixodes persulcatus ticks in West Siberia, Russia // FEMS Microbiology Letters, 2003. -Vol. 227, № 26 P. 157-161.
10. Livanova N.N., Morozova O.V., Morozov I.V., Beklemishev A.B., Cabello E, Dobrotvorsky A.K. Characterization of Borrelia burgdorferi sensu lato from Novosibirsk Region (West Siberia, Russia) based on direct PCR//European Journal ofEpidemiology, 2003-Vol. 18, № 12.-P. 1155-U58.
Подписано в печать 17 12.2003 печ. л. 0,1- бумага офсет 80 г/м2 тир. 100. Зак. № 257 Отпечатано в типографии "Капитель" 630007, Новосибирск, ул. Фабричная, 14, тел.: 23-69-51
РНБ Русский фонд
2004-4 24538
Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Ливанова, Наталья Николаевна
Введение 4
Глава 1. Состояние изученности клещевого боррелиоза 10
1.1. Особенности возбудителей ИКБ 10
1.2. Методы титрования геновидов и генетических групп комплекса Borrelia burgdorferi s.l. 12
1.3. Связь клинических проявлений ИКБ с генетическими группами возбудителя 17
1.4. Экология Borrelia burgdorfei sensu lato в Евразии 20
1.4.1. Итоги изучения экологии ИКБ с использованием микроскопических методов 20
1.4.2. Географическое распространение, связи геновидов В. burgdorferi s.l. с клещами Ixodes и резервуарными хозяевами 32
1.5. Роль хозяев и клещей-переносчиков в поддержании природных очагов ИКБ 54
Глава 2. Район работ. Материалы и методы 68
2.1. Краткая характеристика природных условий северной лесостепи Приобья 68
2.2. Материалы и методы 76
2.2.1. Зоологические и паразитологические методы 76
2.2.2. Микробиологические методы 78
2.2.3. Молекулярно-биологические методы 81 -
Глава 3. Характеристика геновидов Borrelia burgdorferi s.l. в западносибирских очагах иксодовых клещевых боррелиозов 90
3.1. Генетическая характеристика изолятов ДНК
В. burgdorferi s. 1. 90
3.2. Зараженность голодных имаго клещей I. persulcatus различными геновидами боррелий 99
3.3. Зараженность фоновых видов мелких млекопитающих различными геновидами
В. burgdorferi s.1. 103
Глава 4. Взаимоотношения боррелий с таежным клещом 111
4.1. Зараженность боррелиями таежного клеща I. persulcatus 111
4.2 Межгодовые изменения зараженности имаго клещей боррелиями 120-
Глава 5. Экологические связи В. burgdorferi s.l. с млекопитающими 125
5.1 Зараженность боррелиями личинок и нимф таежного клеща, паразитирующих на мелких и средних млекопитающих 126
5.2. Зараженность боррелиями фоновых видов мелких млекопитающих 134
5.3. Динамика эпизоотического процесса у мелких млекопитающих в течение летнего сезона 139
5.4. Зараженность боррелиями различных демографических групп мелких млекопитающих 144
Выводы 147
Введение Диссертация по биологии, на тему "Экологические связи таежного клеща и его хозяев с возбудителями иксодовых клещевых боррелиозов"
Актуальность темы. Иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ) - сравнительно недавно открытая группа природноочаговых трансмиссивных инфекционных заболеваний, вызываемых борре-лиями комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato. К настоящему времени описано 13 геновидов Borrelia burgdorferi s.l., из которых три геновида (В. burgdorferi s.str., В. garinii и В. afzelii) способны вызывать заболевания человека (Горелова и др., 2001; Коренберг и др., 1999). Клещи рода Ixodes, принадлежащие к систематической группе "/. persulcatus", являются основными переносчиками борре-лий. Природные очаги ИКБ широко распространены в лесной зоне Северного полушария. В России они приурочены, главным образом к ее южной части, и выявлены от Прибалтики до Южного Сахалина (Коренберг, 1987).
Иксодовые клещевые боррелиозы являются наиболее значимыми из всех передаваемых клещами инфекций. В США ежегодно регистрируется около 16 тыс. случаев заболеваний (Centers for disease., 1999), в Западной и Центральной Европе - 50 тыс. (O'Connell et al., 1996), в России - от 10 до 12 тыс., что превышает уровень заболеваемости клещевым энцефалитом (см. Коренберг и др., 2002). Наиболее напряженные очаги ИКБ выявлены на Урале, в Западной Сибири и Волго-Вятском регионе (Алыпова и др., 2002; Коренберг и др., 2002). Поскольку выявление и регистрация заболеваний ИКБ на территории России далеко неполно отражают действительную картину, уровень заболеваемости инфекцией может быть значительно выше.
Различные геновиды спирохет комплекса В. burgdorferi s.l. морфологически неразличимы, вместе с тем для них отмечено высокое антигенное разнообразие (van Dam et al., 1997). Предполагают, что выявленные региональные особенности клинического проявления ИКБ (Воробьева и др., 1998; Лесняк и др., 1997; Скрип-никова, 1992; Стир, 1995), во многом обусловлены генетическими особенностями возбудителей, в частности, составом и соотношением геновидов на данной территории (van Dam et al., 1997).
В природе циркуляция возбудителей ИКБ осуществляется благодаря обмену между клещами-переносчиками и резервуарны-ми хозяевами-позвоночными. Популяции, поддерживающие существование возбудителей, образуют сложные трехчленные паразитарные системы, характеризующиеся разветвленными связями между всеми составляющими. Помимо основных переносчиков, в передаче боррелий могут участвовать другие виды клещей рода Ixodes, паразитирующих на тех же хозяевах. В различных природных очагах боррелий могут долговременно хранить и передавать клещам 2-3 основных и до 10-15 дополнительных видов млекопитающих, а также птицы, кормящиеся на земле (Горелова и др., 2001; Peteny et al., 1996; Miyamoto et al., 1997; Humair et al., 1998; Humair, Gem, 1998; Pichon et al., 2000). Вместе с тем, экологические связи В. burgdorferi s.l. с переносчиками и резервуарными хозяевами, в особенности для природных очагов Азиатской части России, изучены слабо.
Установлено, что в России практически по всему ареалу таежного клеща I. persulcatus и с его участием поддерживается цикл циркуляции спирохет В. garinii и В. afzelii (Коренберг и др., 1997; Postic et al., 1997; Коренберг и др., 1999; Горелова и др., 2001; Коренберг и др., 2002). Для 11 видов мелких лесных грызунов, как правило, видов-доминантов, выявлена спонтанная инфицирован-ность возбудителями ИКБ. Приуроченность различных геновидов боррелий к определенным группам мелких млекопитающих не установлена (Горелова и др., 2001).
Резервуарная роль многих видов млекопитающих, обитающих в природных очагах ИКБ в Азиатской части России, остается практически неизученной. Для подавляющего большинства видов хозяев, у которых выявлена спонтанная инфицированность борре-лиями, сведения об уровне зараженности в природных популяциях отсутствуют. Вместе с тем, эти данные могли бы служить основой для сравнительной оценки эпизоотического значения мелких мышевидных грызунов и насекомоядных в поддержании природных очагов ИКБ.
Весьма отрывочны сведения об экологии возбудителей боррелиозов для природных очагов на территории юга Западной Сибири, для которых характерен высокий эпидемический риск. В частности, в различных ландшафтных подзонах западной части региона (Тюменская область) с использованием микроскопических методов оценена зараженность имаго таежного клеща (Колчанова, 1997). Помимо этого, сведения об уровне зараженности имаго /. persulcatus, составе и соотношении геновидов ооррелий, встречающихся в клещах, имеются лишь для некоторых районов Омской, Новосибирской областей и Алтайского края (Рудакова, Ма-тущенко, 1996; Рудакова и др., 2002; Оберт и др., 2001). В литературе имеются сообщения о спонтанной зараженности боррелиями некоторых видов мелких грызунов и насекомоядных (Матущенко и др., 19966; Рудакова и др., 2002; Калягин, Зубко, 2003), однако, в большинстве случаев, идентификацию возбудителей не проводили.
Таким образом, для многих территорий Западносибирского региона не установлены количественные соотношения геновидов боррелий, заражающих переносчиков и резервуарных хозяев. Практически отсутствуют данные о значении различных наземных позвоночных (птицы, мелкие, средние и крупные млекопитающие) в поддержании циркуляции отдельных геновидов боррелий. Остается открытым вопрос о межгодовых изменениях зараженности переносчиков и резервуарных хозяев боррелиями.
Цель и задачи исследования. Основная цель нашей работы - на примере природного очага в лесостепном Приобье изучить взаимоотношения таежного клеща и его прокормителей с возбудителями клещевых боррелиозов.
Для реализации цели были поставлены следующие задачи:
- установить состав геновидов возбудителей ИКБ, циркулирующих в природных очагах;
- оценить зараженность различных фаз развития таежного клеща боррелиями;
- изучить межгодовые изменения уровня зараженности взрослой части популяции переносчика;
- выявить основные виды мелких млекопитающих, поддерживающих циркуляцию боррелий;
-охарактеризовать динамику эпизоотического процесса в популяциях фоновых видов зверьков.
Научная новизна работы. Впервые для природных очагов Западной Сибири оценены уровень зараженности боррелиями В. burgdorferi s.l. всех фаз развития таежного клеща и, на основании косвенных оценок, показано участие в поддержании цикла циркуляции возбудителей 12 видов мелких лесных грызунов и насекомоядных, среди которых лесная мышовка упоминается впервые как резервуарный хозяин боррелий. Впервые для России с использованием прямого ПЦР-детектирования установлен уровень зараженности боррелиями трех видов мелких млекопитающих (Sorex araneus, Apodemus agrarius, Clethrionomys rutilus) и продемонстрировано, что уровень зараженности зверьков закономерно изменяется в ходе летнего сезона. Впервые выявлено, что полевые мыши Ар. agrarius участвуют в поддержании циркуляции В. afzelii и В. garinii NT29. Впервые показано участие белогрудого ежа (Erinaceus concolor) в передаче боррелий личинкам и нимфам I. persulcatus. Впервые для России оценено генетическое сходство западносибирских спирохет В. burgdorferi s.l., паразитирующих в таежных клещах, с представителями этого комплекса из европейских и азиатских природных очагов ИКБ. Выявлен нетипичный изолят боррелий из клещей I. persulcatus, не относящийся к известным генови-дам и генетическим вариантам.
Практическое значение. Полученные результаты дополняют имеющиеся представления о функционировании и особенностях паразитарных систем ИКБ и уточняют сведения об ареале отдельных геновидов боррелий. Исследования, построенные по принципу мониторинга, позволяют подойти к выяснению основных критериев прогноза эпидемической напряженности природных очагов ИКБ. Материалы диссертационного исследования могут быть использованы санитарно-эпидемиологическими службами для планирования профилактических мероприятий и проведения сани-тарно-просветительной работы, а также для преподавания курсов медицинской паразитологии и эпидемиологии в университетах и медицинских институтах.
Апробация работы и публикации. Основные положения работы были представлены и доложены на VI международном симпозиуме по проблемам клещевых инфекций (Потсдам, 2001), на региональной научной конференции «Исследования эталонных природных комплексов Урала» (Екатеринбург, 2001), на XI международном симпозиуме по биоиндикаторам (Сыктывкар, 2001), на межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные аспекты природноочаговых болезней» (Омск, 2001), на научно-практической конференции с международным участием «Клещевые боррелиозы» (Ижевск, 2002). По теме диссертации опубликовано 10 работ.
Благодарности. Исследование реализовано под руководством к.б.н. А.К. Добротворского, которому автор выражает искреннюю благодарность. Молекулярно-биологическая часть исследования начата в лаборатории генной инженерии Института биохимии СО РАМН и курировалась заведующим этой лаборатории к.б.н. А.Б. Беклемишевым. В дальнейшем эта часть работы была продолжена в лаборатории молекулярной вирусологии института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН при поддержке и неоценимой помощи со стороны заведующего лабораторией д.б.н. О.В. Морозовой, которой также было сделано много ценных советов при прочтении рукописи. Автору трудно переоценить помощь в повседневной работе сотрудников ИХБФМ СО РАН и Института биохимии СО РАМН Н.В. Фоменко, к.б.н. В.А. Матвеевой, В.А. Pap, С.Е. Ткачева, к.б.н. Н.П. Пичко, к.б.н. B.C. Караваева, к.б.н. И.А. Лавриненко, И.Т. Иванова, А.В. Питериной, Л.А. Шишковой, НА. Титовой и И.Н. Ивлевой. Всем вышеперечисленным коллегам автор глубоко признателен. Отдельная благодарность В.В. Панову (лаборатория экологического прогнозирования, ИСиЭЖ СО РАН) за определение видовой принадлежности, генеративного состояния и возраста мелких млекопитающих.
Заключение Диссертация по теме "Зоология", Ливанова, Наталья Николаевна
147 Выводы
1. В природных очагах иксодовых клещевых боррелиозов лесостепного Приобья зарегистрированы два патогенных для человека геновида боррелий: Borrelia afzelii и В. garinii. Последний геновид представлен генетическими группами NT29 и 20047т Выявлен нетипичный изолят, который по структуре межгенного участка 5S-23S рРНК не может быть отнесен ни к одному известному геновиду.
2. Уровень зараженности имаго I. persulcatus невысок (14,7%), вместе с тем, для Приобской лесостепи характерна высокая инфи-цированность преимагинальных фаз, паразитирующих на мелких млекопитающих.
3. Зараженность боррелиями имаго таежного клеща в годы исследований слабо изменялась по годам. При этом, пик численности имаго клещей, обычно наблюдающийся на следующий год после пика численности хозяев, сопровождался достоверным увеличением процента зараженных переносчиков. Максимальное обилие боррелий в клещах отмечено лишь через два года после пика численности грызунов и насекомоядных на фоне снижения обилия клещей.
4. В условиях лесостепного Приобья принимать участие в поддержании циркуляции боррелий может большинство из обитающих в регионе видов, в их числе ранее не упоминавшиеся в литературе полевая мышь, лесная мышовка и белогрудый еж. Уровень зараженности обыкновенной бурозубки, полевой мыши и красной полевки, доминирующих в западносибирских очагах ИКБ, не превышает 20%. Эти виды участвуют в циркуляции всех выявленных в регионе патогенных для человека геновидов боррелий.
5. Судя по сезонной динамике зараженности боррелиями паразитирующих на хозяевах преимагинальных фаз развития переносчика и динамике эпизоотического процесса в популяциях мелких млекопитающих, системная инфекция чаще развивается у сеголеток, которые, вероятно, и определяют уровень зараженности нимф, а, следовательно, и имаго таежного клеща.
149
Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Ливанова, Наталья Николаевна, Новосибирск
1. Алексеев А.Н., Арумова Е.А., Буренкова J1.А., Чунихин С П. Об особенностях распространения возбудителя болезни Лайма и поведения зараженных им клещей рода Ixodes // Паразитол., 1993,- Т. 27, Вып. 4 С. 389-398.
2. Алексеев А.Н., Чунихин С.П., Рухкян М.Я., Стефуткина Л.Ф. Возможная роль субстрата слюнных желез иксосдид в качестве адъюванта, усиливающего передачу арбовирусов // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1991.- № 1,- С. 28-31.
3. Алыпова И.И., Коренберг Э.И., Воробьева Н.Н. Риск заражения ик-содовым клещевым боррелиозом населения различных ландшафтных подзон Пермской области // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 2002,- № 1,- С. 37-40.
4. Атлас Новосибирской области // М., Роскартография, 2002. -55 с.
5. Балашов Ю.С. Кровососущие клещи (Ixodoidea) переносчики болезней человека и животных // Л., Наука, 1967,- 319 с.
6. Балашов Ю.С., Григорьева Л.А. Локализация боррелий в организме клеща Ixodes persulcatus (Ixodidae) // ДАН, 1997,- Т. 352, № 1,- С. 130-132.
7. Балашов Ю.С., Г ригорьева Л.А. Оливер Дж.Х. Локализация боррелий в организме клеща Ixodes persulcatus на разных стадиях развития// Паразитология, 1997.- Т. 31, № 2,- С. 97-103.
8. Беклемишев В Н. Биоценологические основы сравнительной паразитологии // М.: Наука, 1970. 502 с.
9. Биологическое районирование Новосибирской области (в связи с проблемой природноочаговых инфекций) // Новосибирск, Наука, 1969. -294 с.
10. Брегетова Н.Г. Клещи грызунов фауны СССР //М.-П, изд-во АН СССР, 1955. 459 с.
11. Васильева И.С., Наумов Р.Л. Паразитарная система болезни Лайма: состояние вопроса. Сообщение 1. Возбудители и пара-носчики //Acarina, 1996.- Т. 4, № 1-2.- С. 53-75.
12. Васильева И.С., Никифоров Л.П., Личинки и нимфы таежного клеща и их связи с мелкими млекопитающими Кемчугского стационара // Вопросы эпидемиологии клещвого энцефалита и биологические закономерности в его природном очаге. М.: Медицина, 1968 - С. 168-167
13. Воробьева Н.Н., Коренберг Э.И., Волегова Г.М., Москвитина Г,Г., Рысинская Т.К. Клинические аспекты антибиотикопрофилак-тики иксодовых клещевых боррелиозов \\ Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1996,- № 2,- С. 8-10.
14. Временная программа наблюдений за состоянием прродных очагов клещевого энцефалита и методические указания по ее выполнению (для областных, краевых, и республиканских санитарно-эпидемиологических станций) // М., 1966.- 15 с.
15. Гагина Т.Н., Скалон Н.В. О заселении обыкновенным ежом Са-лаиро-Кузнецкой горной области // Проблемы сохранения биологического разнообразия южной Сибири. Мат. I межрегиональн. науч.-практ. конф. 19-22 мая 1997 г. Кемерово, 1997.-С. 35-37.
16. Горелова Н.Б., Белленгер Э., Постик Д., Ковалевский Ю.В. Спонтанная микстзараженность грызуна боррелиями и лептоспи-рами II Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1996,- № 4,- С. 53.
17. Горелова Н.Б., Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Постик Д. Зараженность клеща Ixodes trianguliceps различными геновидами борреллий в Приуралье // VII Акарологическое совещание, С.Петербург, 28-30 сент. 1999 г., С-Петербург, 1999,- С. 21-22.
18. Горелова Н.Б., Коренберг Э.И., Филиппова Н.А., Постик Д. Первая изоляция, патогенных для человека боррелий от клещей Ixodes pavlovskyi Pom. // Доклады РАН, 2001.- Т. 378, № 4,- С. 1-2.
19. Григорьева Л.А. Землекройки как резервуар боррелий на северо-западе России // Паразитология, 1996.- Т. 30, № 5,- С. 458460.
20. Григорьева Л.А., Третьяков К.А. Особенности паразитарной системы иксодовые клещи боррелии - мелкие млекопитающие на северо-западе России // Паразитология, 1998,- Т. 32, № 5.- С. 422-429.
21. Добротворский А.К., Бахвалова В.Н., Харитонова Н.Н., Сапегина В.Ф. Динамика параметров паразитарной системы клещевого энцефалита в условиях северной лесостепи Приобья // Сибирский экологический журнал, 1994, Т. 1, № 4,- С. 369375.
22. Жмаева З.М., Земская А.А., Шлугер Е.Г. Кровососущие клещи. Общие вопросы сбора и обработки материалов // Методы изучения природных очагов болезней человека. М., Медицина, 1964.-С. 68-74.
23. Западная Сибирь II М.: Изд-во АН СССР, 1963. -488 с.
24. Калабухов Н.И., Раевский В.В. Методика изучения некоторых вопросов экологии мышевидных грызунов // Вестник микроб.,эпидем. и паразитол. -Саратов, 1933,- Т. 12, Вып. 1. -С. 6773.
25. Кисленко Г.С., Короткое Ю.С. Сравнительная оценка методов сбора и длительного содержания иксодовых клещей II Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1989,- № 1.- С. 60-62.
26. Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Дауйотас С.В.Оценка различных способов приготовления витальных препаратов для выявления боррелий у иксодовых клещей II Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1990.- № 1,- С. 33-35.
27. Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Кутлина Т.В., Устинова О.А. нормы просмотра препаратов при исследовании нимф иксодовых клещей методом темнопольной микроскопии в очагах боррелиозов // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1996.-№4,-С. 18-21.
28. Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Левин М.Л. Сезонная и годовая вариабельность зараженности клещей I. ricinus и /. persulcatus возбудителем болезни Лайма // Пробл. клещевых боррелиозов. 1993. С. 137- 146.
29. Ковалевский Ю.В., Крючечников В.Н., Коренберг Э.И. Сравнительная оценка двух методов индикации боррелий в клещах переносчиках болезни Лайма // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1988,- № 5,- С. 75-77.
30. Козлов С.С. Лайм-боррелиоз в Северо-Западном регионе России // Автореф. дисс. докт. мед. н.- Санкт-Петербург, 1999 30 с.
31. Колдомасов ЛИ. Климат Западной Сибири // Новосибирск, Новосибгиз, 1947 59 с.
32. Колонии Г. В. Мировое распространение иксодовых клещей (род Ixodes)// М.: Наука, 1981,-С. 114.
33. Колчанова Л.П. Спонтанная зараженность клещей боррелиями и степень их индивидуальной инфицированности в различных ландшафтных подзонах Тюменской области // Мед. парази-тол. и паразитар. болезни. 1997,- № 1,- С. 49-50.
34. Конева И.В. Зооантропонозы Сибири и Дальнего Востока: географический и экологические аспекты // Новосибирск, Наука, 1992,- 163 с.
35. Коренберг Э.И. Биохорологическая структура вида (на примере таежного клеща)//М.: Наука, 1979,-С. 170.
36. Коренберг Э.И. Проблема болезни Лайма в России // Проблемы клещевых боррелиозов. М., 1993,-С. 13-21.
37. Коренберг Э.И., Горелова Е.И., Постик Д. Резервуарные хозяева и переносчики боррелий возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов России // Журн. микробиол., эпидемиол. и им-мунобиол., 1997,- № 6,- С. 36-38.
38. Коренберг Э.И., Горелова Е.И., Постик Д., Котти Б.К. Новые для России виды бореллий возможные возбудители иксодовых клещевоых боррелиозов // Журн. микробиол. эпидемиол. и иммунобиол., 1999.- № 2,- С. 3-5.
39. Коренберг Э.И., Горелова Н.Б., Ковалевский Ю.В. Основные черты природной очаговости иксодовых клещевых боррелиозов России // Паразитология, 2002,- Т. 36, № 3.- С. 177-191.
40. Коренберг Э.И., Ковалевский Ю.В. Основные черты ландшафтной приуроченности // Таежный клещ Ixodes persulcatus schulze
41. Acarina: ixodidae). Морфология, систематика, экология, медицинской значение,-Л.: Наука, 1985.-С. 193-198.
42. Коренберг Э.И., Крючечников В.Н., Деконенко Е.П., Щербаков С. В., Ананьина Ю.В. Серологическое подтверждение болезни Лайма в СССР // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммуноби-ол., 1985 № 6.- С. 111-113.
43. Коренберг Э.И., Щербаков С. В., Крючечников В.Н. Материалы по распространению болезни Лайма в СССР // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1987.- № 2- С. 71-73.
44. Коренберг Э.И., Щербаков С.В., Баннова Г Г., Левин М.Л., Каранов А.С. Зараженность клещей I. persulcatus возбудителями болезни Лайма и клещевого энцефалита одновременно // Паразитол., 1990.- Т. 24, В. 2,- С. 102-105.*
45. Коренберг Э.И., Щербаков С.В., Блинова Г.Г., Левин М.Л., Караванов А.С. Зараженность клещей Ixodes persulcatus возбудителями болезни Лайма и клещевого энцефалита одновременно // Паразитол., 1990,- Т. 24,- В. 2,- С.102-105.
46. Кравчук Л.Н., Коренберг Э.И., Калинин М.И., Сысолятин В.А. Клинические варианты Лайм-боррелиоза в Кемеровской области // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1993.- №1,- С.29-31.
47. Крылов Г.В. Леса Западной Сибири // М., Изд-во АН СССР, 1961.252 с.
48. Куминова А. В. Формирование геоботанических комплексов на стыке подтаежных и лесостепных районов Приобья // В кн.: Растительность Приобья и ее хозяйственное использование- Новосибирск, Наука, 1973. -С. 79-97.
49. Лакин Г.Ф. Биометрия // М. Высшая школа, 1980.- 292 с.
50. Лапшина Е.И. Растительный покров // В кн.: Новосибирская область. Природа и ресурсы. Новосибирск, Наука, 1978,- С. 112-124.
51. Лесняк О. М. Истомина О. Ю., Рипкема Ш., Бруининк И., Беляева М. Л. Клинические проявления Лайм-боррелиоза на Среднем Урале и их ассоциации с геновидами Borrelia burgdorferi II Терапевтический архив, 1997,- №5.- С. 9-12.
52. Лесняк О.М., Пономарев Д.Н., Волкова Л.И., Ильина Н.С., Лайков-ская Е. Э., Двоснина Б.А. Некоторые аспекты эпидемиологии Лайм-боррелиоза в Свердловской области // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 1995.-№1.-С.7-10.
53. Лобзин Ю.В., Антонов B.C., Козлов С.С., Крумгольц В.Ф. Болезнь Лайма Северо-Западном регионе //Ж. инфекц. патол., 1996.Т. 3, № 4,- С. 32-34.
54. Максимов А.А. Природные циклы. Причины повторяемости экологических процессов //Л., Наука, 1989. -263 с.
55. Масузава Т., Наумов Р.Л., Кудекен М., Харитоненков И.Г. Обнаружение Borrelia burgdorferi sensu stricto в Московской области, Россия // Мед. паразитол. и паразитар. болезни., 2001.-№2,-С. 52.
56. Матущенко А.А., Венедиктов B.C., Якименко В В., Танцев А.К. Роль мелких млекопитающих в циркуляции боррелий в очагах клещевого боррелиоза на юго-западе Сибири // Ж. инфекц. патол., 1996.- Т. 3, № 1,- С. 37-39.
57. Москвитина Г.Г., Коренберг Э.И., Горбань Л.Я. Присутствие боррелий в кишечнике и слюнных железах спонтанно зараженных взрослых клещей Ixodes persulcatus Schulze при кровососа-нии // Мед. паразитол. и паразитар. болезни., 1995,- № 3.- С. 16-20.
58. Москвитина Г.Г., Коренберг Э.И., Спилман Э., Щеголева Т.В. О частоте генерализованной инфекции у взрослых голодных клещей рода Ixodes в очагах боррелиозов России и США // Паразитология, 1997,- Т. 29, № 5,- С. 353-360.
59. Наумов Н.П. Изучение подвижности и численности мелких млекопитающих с помощью ловчих канавок // Вопросы краевой, общей и экспериментальной паразитологии и медицинской зоологии. -М., Медгиз., 1955. -Вып. 9. -С. 179-202.
60. Наумов Р.Л., Васильева И.С. Болезнь Лайма: проблемы эпизоотологии // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 2002.- № 4,- С.38-42.
61. Наумов Р.Л., Васильева И.С., Гутова В.П., Ершова А.С. Лабораторная модель паразитарной системы болезни Лайма // Мед. паразитол. и паразитар. болезни, 2002,- № 1,- С. 40-43.
62. Наумов Р.Л., Гутова В.П. Географическая и годовая изменчивость зараженности клещей вирусом клещевого энцефалита // Мед. паразитология и паразитар. Болезни, 1977.- Т. 46, вып 3. С. 346-355.
63. Новосибирская область. Природа и ресурсы // Новосибирск: Наука, 1978. -152 с.
64. Оберт А.С. О региональных особенностях клиники иксодовых клещевых боррелиозов // Актуальные аспекты природноочаговых болезней. Мат. межрегиональн. науч,-практ. конф. 16-17 октября 2001 г., посвященного 80-летию Омского НИИПИ. Омск, 2001.- С. 126-127.
65. Орлова В.В. Западная Сибирь // Климат СССР, Вып. 4.- Л., Гид-рометеоиздат, 1962-360 с.
66. Орлова В.В. Климатический очерк Барабинской низменности // Л., Гидрометеоиздат, 1954.-С. 189-200.
67. Павлинов И.Я. Борисенко А.В., Крускоп С.В., Яхонтов Е.Л. Млекопитающие Евразии II. Non-Rodentia. Систематико-географический справочник // М., изд-во Моск. ун-та, 1995,333 с.
68. Плохинский Н.А. алгоритмы биометрии II М.: Изд-во МГУ, 1980,150 с.
69. Природные условия центральной части Западно-сибирской равнины // М., Изд-во МГУ, 1977. 216 с.
70. Пространственно-временная динамика животного населения. Птицы и мелкие млекопитающие // Новосибирск, Наука, 1985.-206 с.
71. Растительный покров Западно-Сибирской равнины // Новосибирск, Наука, 1985.-251 с.
72. Растительный покров СССР // М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1956, т. 1-2.
73. Рудакова С. А., Матущенко А. А., Токаревич Н.К. Эколого-эпидемиологическая характеристика природных очагов иксодовых клещевых боррелиозов в Сибирском регионе // Науч. практич. конф. «Клещевые боррелиозы» 19-21 ноября. 2002 г., Ижевск, 2002.- С. 252-254.
74. Телегин В.И. Фауна лесопарка и влияние на ее формирование антропогенного фактора // Известия СО АН СССР, Вып. 1, биологический. 1971. -№ 5. -С. 58-66.
75. Трофимов Н.М., Счесленок Е.П., Коренберг Э.И., Горелова Н.Б., Постик Д., Барантон Г. Генотипирование штаммов Borrelia burgdorferi sensu lato, выделенных в Белоруссии от клещей Ixodes ricinus II Мед. паразитол. и паразитар. болезни. 1998.-№4,-С. 21-22.
76. Филиппова Н.А. Иксодовые клещи подсем. Ixodinae II Фауна СССР. Паукообразные. Т. 4, Вып. 6,- Л.: Наука,- 1977.- С. 393.
77. Филиппова Н.А. Таксономические аспекты переноса возбудителей болезни Лайма // Паразитология, 1990,- Т. 24, № 4,- С. 257267.
78. Цыбулин С.М. Птицы диффузного города (на примере Новосибирского Академгородка)//Новосибирск; Наука, 1985 -169с.
79. Чунихин С.П., Леонова Г.Н. Экология и географическое распространение арбовирусов // М., Медицина, 1985,- 127 с.
80. Alekseev A.N., Arumova Е.А., Vasilieva I.S. Borrelia burgdorferi sensu lato in the female cement plug of Ixodes persulcatus ticks (Acari, Ixodidae)//Exp. Appl. Acarol., 1995,-Vol. 19, № 9.-P. 519-522.
81. Alekseev A.N., Burenkova L.A., Vasilieva I.S., Dubinina H.V., Chunikhin S.P. Preliminary studies on virus and spirochete accumulation in the cement plug of ixodid ticks // Exp. Appl. Acarol., 1996.- Vol. 60, № 12 -P. 713-723.
82. Alekseev A.N., Dubinina H.V. Exchange of Borrelia burgdorferi between Ixodes persulcatus (Ixodidae: Acarina) sexual partners // J. Med. Entomo)., 1996,- Vol. 33, № 3,- P. 351-354.
83. Alekseev A.N., Dubinina H.V., Rijpkema S.G., Schouls L.M. Sexual transmission of Borrelia garinii by male Ixodes persulcatus ticks {Acari, Ixodidae) II Exp. Appl. Acarol., 1999- Vol. 23, № 2,- P. 165-169.
84. Alekseev A.N., Dubinina H.V., van de Pol I., Schouls L.M. Identification of Ehrlichia spp., and Borrelia burgdorferi in Ixodes ticks in the Baltic regions of Russia // J. Clin. Microbiol., 2001,- Vol. 39, № 6.-P. 136-142.
85. Anderson J.F., Magnarelli L.A. Natural history of Borrelia burgdorferi in vectors and vertebrate hosts // In.: Ecology and Environmental Management of Lyme disease (ed. H.S. Ginsberg).- New Brunswick, NJ, USA, Rutgers University Press, 1993.- P. 11-24.
86. Anthonissen F. M., De Kesel M., Hoet P. P., Bigaignon G. H. Evidence for the involvement of different genospecies of Borrelia in the clinical outcome of Lyme disease in Belgium // Res. Microbiol., 1994,- Vol. 145, № 4,- P. 327-331.
87. Asbrink E., Hovmark A., Hederstedt B. The spirochetal etiology of acrodermatitis chronica atrophicans Herxheimer // Acta. Dermatol. Venereol., 1984.- Vol. 64, № 6,- P. 506-512.
88. Assous M., Postic D., Baranton G. Clinical and epidemiological implications of Borrelia burgdorferi sensu lato taxonomy // In Y. Yanagihara, Т. Masuzava (ed), Proceeding of the International Symposium on Lyme Disease in Japan 1994., 1994,- P. 148-162.
89. Balmelli Т., Piffaretti J. C. Association between different clinical manifestations of Lyme disease and differend species of Borrelia burgdorferi sensu lato // Res Microbiol. 1995 Vol. 146, № 4,- P. 329-340.
90. Baranton G., Seinost G., Theodore G., Postic D., Dykhuizen D. Distinct levels of genetic diversity of Borrelia burgdorferi are associated with different aspects of patogenicity // Res. Microbiol., 2001.-Vol. 152, №2,- P.149-156.
91. Barbour A.G. Plasmid analisis of Borrelia burgdorferi, the Lyme disease agent//J. Clin. Microbiol., 1988,-Vol. 26, №3.-P. 475-478.
92. Barbour A.G., Hayes S.F. Biology of Borrelia species // Microbiol. Rev., 1986,- Vol. 50, № 4,- P. 381-400.
93. Barbour A.G., Heiland R.A., Howe T.R. Heterogeneity of major proteins in Lyme disease borreliae: a molecular analysis of North American and European isolates // J. Infect., 1985.- Vol. 152, № 4,- P. 478-484.
94. Basta J., Murgia R., Cinco M. Effects of some stress factors on the morphology of Borrela burgdorferi // VII Int. Congr. Lyme Borrelio-sis. San Francisco. California., 1996.-Abstract. P.17.
95. Britner-Ruddock S., Wurzner R., Shulze J., Brade V. Heterogenity in the complement-dependent bacteriolysis within the species of Borrelia bu rgdorferi II Med. Microbiol. I mmunol. (Berl.), 1997.-Vol. 185, №4,- P. 253-260.
96. Burgdorfer W., Barbour A.G., Hayes S.F., Benach J.L., Grunwaldt E., Davis J.P. Lyme disease a tick-borne spirochetosis? // Science. 1982.-Vol. 216, №.- P. 1317-1319.
97. Callister S.M., Schell R.F., Case K.L., Lovrich S.D., Day S.P. Characterization of borreliacidal antibody response to Borrelia burgdorferi in humans: A serdiagnostic test // J. Infect. Dis., 1993.- Vol. 167, № 1.-P. 158-164.
98. Callister S.M., Schell R.F., Lim I.C. Detection of borreliacidal antibodies by flow cytometri. An accurete, hidhly specific serodiagnostic test for Lyme disease // Arch. Intern. Med., 1994.- Vol. 154, № 14,-P.1625-1632.
99. Casjens S., Huang W.M. Linear chromosomal physical and genetic map of Borrelia burgdorferi, the Lyme disease agent // Mol. Microbiol., 1993; Vol. 8, № 5.- P. 967-980.
100. Centers for Disease Control and Prevention. 1999. Availability of Lyme disease vaccine. Morbid. Mortal. Weekly Rep. 48: 36-36,43
101. Christova I., Hohenberger S., Zehetmeier C., Wilske B. First characterization of Borrelia burgdorferi sensu lato from ticks and skin biopsyin Bulgaria // Med. Microbiol. Immunol. (Berl.), 1998.- Vol. 186, № 4,- P. 171-175.
102. Coleman J.L., Sellati T.J., Testa J.E., Kew R.R., Furie M.B., Benach J.L. Borrelia burgdorferi binds plasminogen, resulting in enhanced penetration of endothelial monolayers // Infect. Immun., 1995.-Vol. 63, № 7 P. 2478-2484.
103. Craine N.G., Randolph S.E., Nuttall P.A. Seasonal variations in the role of grey squirrels as hosts of Ixodes ricinus, the tick vector of the Lyme disease spirochaete, in a British woodland // Folia Parasi-tol., 1995.-Vol. 42, № 1.- P. 73-80.
104. Doby J.M., Degeilh В., Cayouette S., Guiguen C. Borrelia burgdorferi sensu lato observed in Ixodes (Trichotoixodes) pari Leach, 1815 (.Acari; Ixodidae) II Bull. Soc. Pathol. Exot. 1995,- Vol. 88,- № 4,-P. 185-186.
105. Dolan M.C., Piesman J., Mbow L., Maupin G., Oliver P., Brossard M., Golde W.T. Vector competence of Ixodes scapularis and Ixodes ricinus (Acari: Ixodidae) for three genospecies of Borrelia burgdorferi И J. Med. Entomol., 1998,- Vol. 35, № 4.- 465-470.
106. Donahue J.C., Piesman J., Spilman A. Reservoir competence of white-footed for Lyme-disease spirochetes // Am. J. Trop. Med. Hyg., 1987,- Vol. 36, № 1.-P. 92-96.
107. Dykhuizen D.E., Polin D.S., Dunn J.J., Wilkie В., Preac-Mursic V., Datt-wyler R.J., Luft B.J. Borrelia burgdorferi is clonal: implications for taxonomy and vaccine development // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993,- Vol. 90, № 21,- P. 10163-10167
108. Estrada-Pena A., Oteo J.A., Estrada-Pena R., Gortazar C., Osacar J.J., Moreno J.A., Castella J. Borrelia burgdorferi sensu lato in ticks (Acari: Ixodidae) from two different foci in Spain // Exp. Appl. Acarol., 1995,-Vol. 19, № 3,-P. 173-180.
109. Firking E., Barthold S.W., Marcantonio N., Deponte K., Kantor F.S., Flavell R.A. Roles of OspA, OspB, OspC, and flagellin protective immunity to Lyme borreliosis in laboratory mice // Infect. Immun., 1992a.- Vol. 60, № 2,- P. 657-661.
110. Firking E., Telford III S.R., Barthold S.W., Kantor F.S., Spielman A., Flavell R.A. Elimination of Borrelia burgdorferi from vector ticks feeding on OspA-immunized mice // Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 19926,-Vol. 89, № 12,- P. 5418-5421.
111. Fushs H., Wallich R., Simon M.M., Kramer M.D. The outer surface protein A of the spirochete Borrelia burgdorferi is a plasmin(ogen) receptor // Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 1994,- Vol. 91, № 26- P. 12594-12598.
112. Gazumjan A., Schwartz J.J., Liveris D., Schwartz I. Sequence analysis of the ribosomal RNA operon of the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdorferi/ Gene, 1994.- Vol. 146, № 1.- P. 57-65.
113. Gern L., Estrada-Pena A., Frandsen F., Gray J.S., Jaenson T.G., Jon-gejan F., Kahl O., Korenberg E., Mehl R., Nuttall P.A. European reservoir hosts of Borrelia burgdorferi sensu lato // Zentralbl. Bak-teriol., 1998,- Vol. 287, № 3 P. 196-204.
114. Gern L., Ни C.M., Kocianova E., Vyrostekova V., Rehacek J. Genetic diversity of Borrelia burgdorferi sensu lato isolates obtained from Ixodes ricinus ticks collected in Slovakia // Eur. J. Epidemiol., 1999.- Vol. 15, № 7,- P. 665-669.
115. Gern L., Humair P.-F. Natural history of Borrelia burgdorferi sensu lato //Wien. Klin. Wochenshr., 1998,- Vol. 110, № 24-P. 856-858.
116. Gern L., Rais O. Efficient transmission of Borrelia burgdorferi between cofeeding Ixodes ricinus ticks // J. Med. Entomol., 1996a.- Vol. 33, № 1.-P. 189-192.
117. Gern L., Rouvinez E., Toutoungi L.N., Godfroid E. Transmission cycles of Borrelia burgdorferi sensu lato involving Ixodes ricinus and/or /. hexagonus ticks and the European hedgehogs // Folia Parasi-tol.,1997,-Vol. 44, №4 P. 309-314.
118. Gern L., Schaible U.E., Simon M.M. Mode of inoculation of the Lyme disease agent Borrelia burgdorferi influences infection and immune responses in inbred strains of mice // J. Infect. Dis., 1.993,-Vol. 167, №4,- P. 971-975.
119. Gern L., Siegenthaler M.C., Ни M., Leuba-Garcia S., Humair P.F., Moret J. Borrelia burgdorferi in rodents (Apodemus flavicol/is and
120. A. sylvaticus): Duration and enhancement of infectivity for Ixodes ricinus ticks // Eur. J. Epidemiol., 1994a.- Vol. 10, № 1.- P. 75-80.
121. Gern L., Toutoungy L.N., Hu Chang Min, Aeshliman A. Ixodes (Pholeoixodes) hexagonus, an efficient vector cf Borrelia burgdorferi in the laboraratory // Med. End Vet. Entomol. 1991.- Vol. 5,-№ 4.-P. 431-435.
122. Giardina A.R., Schmidt K.A., Schauber E.M., Ostfeld R.S. Modeling the role of songbirds and rodents in the ecology of Lyme disease // Can. J. Zool., 2000,- Vol. 78, № 12,- P. 2184-2197.
123. Golde W.T., Burkot T.R., Sviat S., Keen M.G., Mayer L.W., Johnson
124. B.J.В., Piesman J. The major histocompatibility complex-restricted response of recombinant inbred strains of mice to natural tick transmission of Borrelia burgdorferi II J. Experim. Med., 1993,-Vol. 177, № 1,- P. 9-17.
125. Golubic D., Rijpkema S., Tkalec-Makovec N., Ruzic E. Epidemiologic, ecologic and clinical characteristics of Lyme borrelliosis in northwest Croatia // Acta Med. Croatica, 1998,- Vol. 52, №1- P. 7-13.
126. Gorelova N.B., Korenberg E.I., Kovalevskii Y.V., Shcerbakov. S.V. Small mammals as reservoir hosts for Borrelia in Russia // Zen-tralbl. Bakteriol., 1995.-Vol. 282, № .- P. 315-322.
127. Gray J.S., Kahl O., Janetski-Mittman C., Stain J., Guy E. Acquisition of Borrelia burgdorferi by Ixodes ricinus ticks fed on the European hedgehog, Erinaceus europaeus L. // Exp. Appl. Acarol., 1994,-Vol. 18, № 8,-P. 485-491.
128. Gray J.S., Kirstain F., Robertson J.N., Stein J., Kahl O. Borrelia burgdorferi sensu lato in Ixodes ricinus ticks and rodents in a recreational park in south-western Ireland // Exp. Appl. Acarol., 1999,- Vol. 23, № 9.- P. 717-729.
129. Gray J.S., Robertson J.N., Key S. Limited role of rodens as reservoirs of Borrelia burgdorferi II Eur. J. Epidemiol., 2000.- Vol. 16, № 2-P. 101-103.
130. Guner E.S., Sigal L. Enhanced attachment of B. burgdorferi grown in mammalian tissue supported co-cultures // VI Int. Conf. Lyme Borreliosis. Bologna. Italy, 1994.- Program and Abstract.- P. 82.
131. Gylfe A., Yabuki M., Drotz M., Bergstrom S., Fukunaga M., Olsen B. Phylogeographic relationships of Ixodes uriae (Acari: Ixodidae) and their significance to transequatorial dispersal of Borrelia garinii II Hereditas, 2001.-Vol. 134, № 3,-P. 195-199.
132. Hainichka V., Kocakova P., Slovak P., Labuda M., Fushberger N., Nut-tal P. Inhibition of the antiviral action of interferon by tick salivary gland extract // Parasite Immunol., 2000,- Vol. 22,- № 4,- P. 201206.
133. Ни C.M., Humair P.F., Wallich R., Gern L. Apodemus sp. rodents, reservoir hosts for Borrelia afzelii in an endemic area in Switzerland // Zentralbl. Backt., 1997.- Vol. 285, № 4,- P. 558-564.
134. Ни C.M., Wilske В., Fingerle V., Lobet Y., Gern L. Transmission of Borrelia garinii OspA serotype 4 to BALB/c mice by Ixodes ricinusticks collected in the field // J. Clin. Microbiol., 2001,- Vol. 396 № 3,- P. 1169-1171.
135. Hubalek Z., Anderson J.F., Halouzka J., Hajek V. Borreliae in immature Ixodes ricinus (Acari.lxodidae) ticks parasitizing birds in the Czech Republic //J. Med. Entomol., 1996.- Vol. 33, № 5 P. 766771.
136. Hubalek Z., Halouzka J. Distribution of Borrelia burgdorferi sensu lato genomic groups in Europe, a review // Eur. J. Epidemiol. 1997-Vol. 13, № 1,- P. 951-957.
137. Hubalek Z., Halouzka J., Juricova Z. Investigation of haematophagous arthropods for borreliae--summarized data, 1988-1996 // Folia Parasitol. (Praha), 1998,- Vol. 45, № 1,- P. 67-72.
138. Hubalek Z., Halouzka J., Jurikova Z. A simple method of transmission risk assessment in enzootic foci of Lyme borreliosis // Eur. J. Epidemiol., 1996,- Vol. 12, № 4,- P. 331-333.
139. Hubbard M.J., Baker A.S., Cann K.J. Distribution of B. burgdorferi s.l. spirochaetae DNA in British ticks (Argasidae and Ixodidae) since 19th century, assessed by PCR // Med Vet Entomol., 1998.- Vol. 12, № 1,- P. 89-97.
140. Humair P.F., Gern L. Relationship between Borrelia burgdorferi sensu lato species, red squirrels (Sciurus vulgaris) and Ixodes ricinus in enzootic areas in Switzerland // Acta Trop., 1998.- Vol. 69, № 3-P. 213-227.
141. Humair P.-F., Peter O., Wallich R., Gern L. Strain variation of Lyme disease spirochetes isolated from Ixodes ricinus ticks and rodents collected in two endemic areas in Switzerland // J. Med. Entomol., 1995,- Vol. 32,- P.433-438.
142. Humair P.F., Postic D., Wallich R., Gern L. An avian reservoir (Tardus merula) of the Lyme borreliosis spirochetes // Zentralbl. Bakteriol., 1998.- Vol. 287, № 4 P. 521-538.
143. Humair P.F., Rais O., Gern L. Transmission of Borrelia afzelii from Apodemus mice and Clethrionomys voles to Ixodes ricinus ticks: differential transmission pattern and overwintering maintenance // Parasitology, 1999,-Vol. 118, Pt 1,- P. 33-42.
144. Humair P.-F., Turrian N., Aeschlimann A., Gern L. Borrelia burgdorferi in a focus of Lyme borreliosis: Epizootologic contribution of small mammals // Folia Parasitol. (Prague), 1993a.- Vol. 40, № 1.- P. 65-70.
145. Jaenson T.G.T., Talleklint L. Lyme borreliosis spirochetes in Ixodes ricinus (Acari: Ixodidae) and the varying hare on isolated islands in the Baltic sea // J. Med. Entomol., 1996.- Vol. 33, № 3,- P. 339343.
146. Jensen P.M., Frandsen F. Temporal risk assessment for Lyme borreliosis in Denmark // Scand. J. Infec. Dis., 2000,- Vol. 32, № 5 P. 539-544.
147. Jensen P.M., Hansen H., Frandsen F. Spatial risk assessment for Lyme borreliosis in Denmark // Scand. J. Infec. Dis., 2000,- Vol. 32, № 5,- P. 545-550.
148. Johnson R.C., Schmid G.P., Hyde F.W., Steigerwalt A.G., Brenner D.J. Borrelia burgdorferi sp. nov.: etiological agent of Lyme disease // Int. J. Syst. Bacterid., 1984,- Vol. 34, № 5,- P. 496-497.
149. Jones C.G., Ostfeld R.S., Richard M.P., Schauber E.M., Wolff J.O. Chain reactions linking acorns to gypsy moth outbreaks and Lyme disease risk // Science, 1998,- Vol. 279, № 5353, P. 1023-1026.
150. Junttila J., Peltomaa M., Soini H., Marjamaki M., Viljanen M.K. Prevalence of Borrelia burgdorferi in Ixodes ricinus ticks in urban recreational areas of Helsinki // J. Clin. Microbiol., 1999.- P. 37, № 5,- P. 1361-1365.
151. Kawabata H., Masuzawa Т., Yanagihara Y. Genomic analysis of Borrelia japonica sp. nov. isolated from Ixodes ovatus in Japan // Microbiol. Immunol., 1993,- Vol. 37, №.- P. 843-848.
152. Kawabata H., Tashibu H., Yamada K., Masuzawa Т., Yanagihara Y. Polymerase chain reaction analysis of Borrelia species isolated in Japan // Microbiol Immunol., 1994,- Vol. 386, № 8,- P. 591-598.
153. Kersten A., Poitschek C., Rauch S., Aberer E. Effects of penicillin, ceftriaxone, and doxycycline on morphology of Borrelia burgdorferi II Antimicrob. Agents. Chemother., 1995.- Vol. 39, № 5.- P. 11271133.
154. Khal O., Janetzki C., Gray J.S., Stein J., Bauch R.J. Tick infection with Borrelia: Ixodes ricinus versus Haemaphysalis concinna and Dermacentor reticulatus in two locations in Eastern Germany // Med. and Vet. Entomol., 1992,- Vol. 6, № 4,- P.363-366.
155. Kimito U., Koichi M., Kenji M., Minoru N. An extensive prevalence of Borrelia burgdorferi, the etiologic agent of Lyme borreliosis, in
156. Nagano prefecture, Japan // Jap. J. Sanit. Zool., 1991.- Vol. 42, № 4 P. 293-299.
157. Kirstein F., Rijpkema S., Molkenboer M., Gray J.S. Local variations in the distribution and prevalence of Borrelia burgdorferi sensu lato genomospecies in Ixodes ricinus ticks // Appl. Environ. Microbiol., 1997.-Vol. 63, № 3,- P. 1102-1106.
158. Korenberg E.I., Gorelova N.B., Kovalevskii Y.V. Ecology of Borrelia burgdorferi sensu lato in Russia // In: Lyme borreliosis: Biology, epidemiology and control (Gray J., Kahl O., Lane R.S., Stanek G. eds.).- CAB International, 2002,- P. 175-200.
159. Korenberg E.I., Kovalevskii Y.V., Karavanov A.S., Moskvitina G.G. Mixed infection by tick-borne encephalitis virus and Borrelia in ticks // Med. Vet. Entomol. 1999,- Vol. 13,- № 2,- P. 204-208.
160. Korenberg E.I., Kryuchechnikov V.N., Kovalevsky Y.V. Advances in Investigations of Lyme Borreliosis in the Territory of the Former USSR//Eur J Epidemiol., 1993,-Vol. 9, № 1,- P.86-91.
161. Kurtenbach K., Carey D„ Hoodless A.N., Nuttall P.A., Randolph S.E. Competence of pheasants as reservoirs for Lyme disease spirochetes//J. Med. Entomol., 1998.-Vol. 35, № 1,- P. 77-81.
162. Kurtenbach K., de Michelis S., Etti S., Schafer S.M., Sewell H.S., Brade V., Kraiczy P. host association of Borrelia burgdorferi sensu latothe key role of host complement // Trends in Microbiol., 2002.~ Vol. 10, № 2 P. 74-79.
163. Kurtenbach К., Peacey M., Rijpkema S.G., Hoodless A.N., Nuttall P.A., Randolph S.E. Differential transmission of the genospecies of Borrelia burgdorferi sensu lato by game birds and small rodents in
164. Macagine F., Perez-Eid C. Presence de Borrelia affines de Borrelia burgdorferi chez Haemophysalis (Alloceraea) inermis Birula, 1895 (Acarina, Ixodoida), dans lesud-oust de la France // Ann. Parasi-tol. Hum.et Сотр. 1991.- Vol.66, № 6,- P. 269-271.
165. Magnarelli L.A., Anderson J.F., Fish D., Transovarial transmission of Borrelia burgdorferi in Ixodes dammini (Acari: Ixodidae) // J. Infect. Dis., 1987,- Vol. 156, № 1,- P. 234-236.
166. Marconi R.T., Garon C.F. Indentification of thrid genomic group of Borrelia burgdorferi through signature nucleotid analysis and 16S r RNA sequence determination // J. Gen. Microbiol., 1992.- Vol. 138, № Pt 3.-P. 533-536.
167. Masuzawa Т., Iwaki A., Sato Y., Miyamoto K., Korenberg E.I., Yanagihara Y. Genetic diversity of Borrelia burgdorferi sensu lato isolated in far eastern Russia // Microbiol. Immunol., 1997.- P. 41, № 8,- P. 595-600.
168. Masuzawa Т., Suzuki H., Kawabata H., Ishiguro F., Takada N., Yano Y., Yanagihara Y. Identification of spirochetes isolated from wild rodents in Japan as Borrelia japonica II J. Clin. Microbiol., 1995.-Vol. 33, № 5 P. 1392-1394.
169. Mateicka F., Kozakova D., Rosa P.A., Kmety E. Identification of Borrelia burgdorferi sensu lato tick isolates from Slovakia by PCR typing with 16S rRNA primers // Zentralbl. Bakteriol., 1997,- Vol. 286, № 3 -P. 355-361.
170. Mather T.N., Adler G.H. Absence of transplacental transmission of Lyme disease spirochetes from reservoir mice (Peromiscus leu-copus) to their offspring // J. Infect. Dis., 1991.- Vol. 164, № 3,- P. 564-567.
171. Mather T.N., Telford III S.R., Moore S.I., Spielman A. Borrelia burgdorferi and Babesia microti: Efficiency of transmission from reservoirs from reservoirs to vector ticks (Ixodes dammini) II Exp. Parasitol., 1990,-Vol. 70, № 1,- P. 55-60.
172. Mather T.N., Wilson M.L., Moore S.I., Ribero J.M., Spielman A. Comparing the relative potential of rodents as reservoirs of Lyme disease spirochete (Borrelia burgdorferi) II Am. J. Epidemiol., 1989.-Vol. 130, № 1.-P. 143-150.
173. Matuschka F.R., Allgower R., Spielman A., Richter D. Characteristics of garden dormice that contribute to their capacity as reservoirs for lyme disease spirochetes // Appl Environ Microbiol, 1999.- Vol. 65, № 2.-P. 707-11.
174. Matuschka F.R., Fisher P., Heiler M., Richter D., Spielman A. Capacity of European animals as reservoir hosts for the Lyme disease spirochete // J. Infect. Dis., 1992,- Vol. 165, № 3,- P. 479-483.
175. Matuschka F.R., Klug В., Schinkel T.W., Spielman A., Richter D. Diversity of European Lyme disease spirochetes at the southern margin of their range // Appl. Environ. Microbiol., 1998.- Vol. 64, № 5,-P. 1980-1982.
176. Matuschka F.R., Ohlenbusch A., Eiffert H., Richter D., Spielman A. Characteristics of Lyme disease spirochetes in archived European ticks // J. Infect. Dis., 1996.- Vol. 174, № 2,- P. 424-426.
177. Matuschka F.R., Richter D. Mosquitoes and soft ticks cannot transmit Lyme disease spirochetes // Parasitol. Res., 2002.- Vol. 88, № 4,-P. 283-284.
178. Matuschka F.R., Spielman A. Loss of Lyme disease spirochetes from Ixodes ricinus ticks feeding on European blackbirds // Experim. Parasitol., 1992,- Vol. .74, № 1,- P. 55-61.
179. Missone M.C., Hoet P.P. Species-specifuc plasmid seguences for PCR identification of the three species of Borrelia burgdorferi sensu lato involved in Lyme disease // J.Clin. Microbiol., 1998.- Vol. 36, № 1.- P.269-272.
180. Miyamoto K., Nakao M., Uchikawa K., Fujita H. Prevalenca of Lyme borreliosis spirochetes in ixodid ticks of Japan, with spetial reference to a new potential vector, Ixodes ovatus (Acari: Ixodidae) // J. Med. Entomol., 1992,- Vol. 29, № 2,- P. 216-220.
181. Miyamoto K., Sato Y., Okada K., Fukunaga M., Sato F. Competence of a migratory bird, red-bellied thrush (Turdus chrysolaus), as an avian reservoir for the Lyme disease spirochetes in Japan // Acta. Trop., 1997,-Vol. 30, № 1,- P. 43-51.
182. Mount G.A., Haile D.G., Daniels E. Simulation of blacklegged tick (Acari: Ixodidae) population dynamics and transmission of Borrelia burgdorferi II J. Med. Entomol., 1997a.- Vol. 34, № 4,- P. 461484.
183. Mount G.A., Haile D.G., Daniels E. Simulation of management strategies for the blacklegged tick (Acari: Ixodidae) and the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdorferi I/ J. Med. Entomol., 19976.-Vol. 34, №6.-P. 672-683.
184. Nakao M., Miyamoto K. Mixed infection of different Borrelia species among Apodemus speciosus mice in Hokkaido, Japan // J. Clin. Microbiol., 1995.- Vol. 33, № 2 P. 490-492.
185. Nakao M., Miyamoto K., Fukunaga M. Lyme disease spirochetes in Japan: enzootic transmission cycles in birds, rodents, and Ixodes persulcatus ticks // J. Infect. Dis., 1994,- Vol. 170, № 4,- P. 878882.
186. Nakao M., Uchikawa K., Dewa H. Distribution of Borrelia species associated with Lyme disease in the subalpine forests of Nagano prefecture, Japan // Microbiol. Immunol. 1996,- Vol. 40, № 4 P. 307311.
187. Nguyen T.P., Lam T.T., Barthold S.W., Telford III S.R., Flavell R.A., Fik-rig E. Partial destruction of Borrelia burgdorferi within ticks that engorged on OspE- or OspF-immunized mice // Infect. Immun., 1994,- Vol. 62, № 5,- P. 2079-2084.
188. Nicholson M .С., М ather Т .N. М ethods f or Е valuating L yme dis ease risks using geographic information systems and geospatial analysis // J. Med. Entomol., 1996,- Vol. 33,- № 5,- P. 711-720.
189. Nohlmans L.M., de Boer R., van den Bogaard A.E., van Boven C.P. Genotypic and phenotypic analysis of Borrelia burgdorferi isolates from the Netherlands // J. Clin. Microbiol., 1995,- Vol. 33, № 1,- P. 119-125.
190. Norman G. L., Antig J. M., Bigaignon G., Hogrefe W. R. Serodiagnosis of Lyme borrelios by Borrelia burgdorferi sensu stricto, B.garinii and B. afzelii Western blots (immunoblots) // J. Clin. Microbiol., 1996,-Vol. 34, №7,-P. 1732-1738.
191. Nuttall P .A. Pathogen-tick-host interactions: Borrelia burgdorferi and TBE virus // Zbl. Bakt.(Eur. J. Med. Microbiol.), 1999,- Vol. 289, № 5-7,- P. 492-505.
192. O'Connell S., M. Granstrom, J. S. Gray, G. Stanek. 1998. Epidemiology of European Lyme borreliosis. Zentbl. Bakteriol. 287; 229-240.
193. Ogden N.H., Nuttall P.A., Randolph S.E. Natural Lyme disease cycle maintained via sheep by cofeeding ticks // Parasitology, 1997.-Vol. 115, Pt. 6- P. 591-599.
194. Olsen В., Duffy D.C., Jaenson T.G., Gylfe A., Bonnedahl J., Bergstrom S. Transhemispheric exchange of Lyme disease spirochetes by seabirds // J. Clin. Microbiol., 1995,- Vol. 33, № 12.- P. 32703274.
195. Olsen В., Jaenson T.G., Bergstrom S. Prevalence of Borrelia burgdorferi sensu lato infected ticks on migrating birds // Appl. Environ. Microbiol., 1995,- Vol.61, № 8 - P. 3082-3987.
196. Olsen В., Jaenson T.G.T., Noppa L., Bunikis J., Bergstrom S. A Lyme borreliosis cycle in seabirds and Ixodes uriae ticks // Nature (Lond.)., 1993-Vol. 362, № 6418 P. 340-342.
197. Ostfeld R.S. The ecology of Lyme disease risk // Am. Sci., 1996.- Vol. 85, № 4,-P. 338-346.
198. Pachner A.R. Neurologic manifestations of Lyme disease, the new "great imitator" // Rev. Infect. Dis.,1989.- Vol. 11, Suppl. 6,- P. S1482-S1486.
199. Pal U., de Silva A.M., Montgomery R.R., Fish D., Anguita J., Anderson J.F., Lobet Y., Fikrig E. Attachment of Borrelia burgdorferi within Ixodes scapularis mediated by outer surface protein A // J. Clin. Invest., 2000,- Vol. 106, № 4,- P. 561-569.
200. Park K.H., Chang W.H., Schwan T.G. Identification and characterization of Lyme disease spirochetes, Borrelia burgdorferi sensu lato, isolated in Korea // J. Clin. Microbiol., 1993.- Vol. 31, № 7,- P. 1831-1837.
201. Parveen N., Robbins D., Leong J. M. Strain variation in glycosamingly-can recognition influences cell-type-specific binding by Lyme disease spirochetes // Infect. Immun., 1999.- Vol. 67, № 4 P. 17431749.
202. Patrican L.A. Absence of Lyme disease spirochetes in larval progeny of naturally infected Ixodes scapularis (Acari: Ixodidae) fed on dogs // J. Med. Entomol., 1997.- Vol. 34, № 1.- P. 52-55.
203. Patrican L.A. Acquisition of Lyme disease spirochetes by cofeeding Ixodes scapularis ticks // Am. J. Trop. Med. Hyg., 1997,- Vol. 57, № 5.-P. 589-593.
204. Peavey С.A., Lane R.S., Damrov T. Vector competente of Ixodes an-gustus (Acari: Ixodidae) for Borrelia burgdorferi sensu stricto // Exp. Appl. Acarol., 1997,- Vol. 21, № 8 P.-569-584.
205. Peavey C.A., Lane R.S., Kleinjan J.E. Role of small mammals in the ecology of Borrelia burgdorferi in a peri-urban park in North coastal California // Exp. Appl. Acarol., 2000,- Vol. 23, № 1,- P.-77-84.
206. Peteny T.N., Hassler D., Bruckner M., Maiwald M. Comparison of urinary bladder and ear biopsy samples for determining prevalence of Borrelia burgdorferi in rodents in Central Europe // J. Clin. Microbiol., 1996.-Vol. 34, № 5,- P. 1310-1312.
207. Peter O., Bretz A.G., Bee D. Occurrence of different genospecies of Borrelia burgdorferi sensu lato in ixodid ticks of Valais, Switzerland // Eur. J. Epidemiol., 1995,- Vol. 11, № 4,- P. 463-467.
208. Peter O., Bretz A.G., Postic D., Dayer E. Association of distinct species of Borrelia burgdorferi sensu lato with neuroborreliosis in Switzerland // Clin. Microbiol. Infect., 1997,- Vol. 3, № 1,- P. 423-431.
209. Pichon В., Gilot В., Perez-Eid C. Detection of spirochaetes of Borrelia burgdorferi complexe in the skin of cervids by PCR and culture // Eur. J. Epidemiol., 2000,- Vol. 16, № 9,- P. 869-873.
210. Pichon В., Mousson L., Figureau C., Rodhain F., Perez-Eid C. Density of deer in relation to the prevalence of Borrelia burgdorferi s.l. in Ixodes ricinus nymphs in Rambouillet forest, France // Exp. Appl. Acarol., 1999,- Vol. 23, № 3,- P. 267-275.
211. Picken R.N., Cheng Y., Strle F., Picken M.M. Patient isolates of Borrelia burgdorferi sensu lato with genotypic and phenotypic similarities of strain 25015 // J. Infect. Dis., 1996,- Vol. 174, № 5.-P. 11121115.
212. Piesman J. Dispersal of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi to salivary glands of feeding nymphal Ixodes scapularis (Acari: Ixodidae) // J. Med. Entomol., 1995.- Vol. 32, № 4.- P. 519-521.
213. Piesman J. Intensity and duration of Borrelia burgdorferi and Babesia microti infectivity in rodent hosts // Int. J. Parasitol., 1988.- Vol. 18, № 5 P. 687-689.
214. Piesman J., Dolan M.C., Happ C.M., Luft B.J., Rooney S.E., Mather Т., Golde W.T. Duration of Immunity to reinfection with tick-transmitted Borrelia burgdorferi in naturally infected mice 11 Infect. Immun., 1997.- Vol. 65, № 10,- P. 4043-4047.
215. Postic D., Korenberg E., Gorelova N., Kovalevski Y.V., Bellenger E., Baranton G. Borrelia burgdorferi sensu lato in Russia and neighbouring countries: High incidence of mixed isolates // Res. Microbiol., 1997.-Vol. 148, №8,- P. 691-702.
216. Postic D., Ras N.M., Lane R.S., Hendson M., Baranton G. Expanded diversity among California Borrelia isolates and description of Borrelia bissettii sp. nov. (formerly Borrelia group DN127) // J. Clin. Microbiol., 1998,- Vol. 36, № 12,- P. 3497-3504.
217. Ralph D., Postic D., Baranton C., Pretzman C., McClelland M Species of Borrelia distinguished by site polymorphisms in 16S rRNA genes // FEMS Microbiol. Lett., 1993,- Vol. 111, № 2-3,- P. 239243.
218. Randolph S.E. Mighty theories from little acorns grow: is Lyme disease risk predictable from mast-seeding by oak trees // Tree, 1998.-Vol. 13, №8,-P. 301-303.
219. Rawlings J.A., Teitow G.J. Prevalence of Borrelia (Spirochaetaceae) spirochetes in Texas ticks // J. Med. Entomol., 1994.- Vol. 31, № 2,- P. 297-301.
220. Richter D., Endepols S., Ohlenbusch A., Eiffert H., Spielman A., Matuschka F.R. Genospecies diversyti of Lyme disease spirochetes in rodent reservoirs // Emerg. Infect. Dis., 1999.- Vol.5, № .- P. 291-296.
221. Richter D., Spielman A., Komar N., Matuschka F.R. Competence of american robins as reservoir hosts for Lyme disease spirochetes // Research, 2000,- Vol. 6,- № 2,- P. 133-138.
222. Richter D., Spielman A., Matuschka F.R. Effect of prior exposure to noninfected ticks on susceptibility of mice to Lyme disease spirochetes // Appl. Environ. Microbiol., 1998.- Vol. 64,- № 11.- P. 4596-4599.
223. Rijpkema S., Bruinink H. Detection of Borrelia burgdorferi sensu lato by PCR in questing Ixodes ricinus larvae from the Dutch North Sea island of Ameland // Exp. Appl. Acarol., 1996.- Vol. 20, № 7- P. 381-385.
224. Roessler W.C., Hauser U., Wilske B. Heterogeneity of BmpA (P39) among European isolates of Borrelia burgdorferi sensu lato and infuence interspecies variability on serodiagnosis // J. Clin. Microbiol., 1997,-Vol. 35, №11.- P. 2752-2758.
225. Sadziene A., Thomas D.D., Bundoc V.G., Holt S.C., Barbour A.G. A flagella less mutant of Borrelia burgdorferi. Structural molecular and in vitro functional characterization // J. Clin. Invest., 1991.-Vol. 88, № 1,- P. 82-92.
226. Saint-Girons I., Gern L., Gray J.S., Guy E.C., Korenberg E., Nuttall P.A., Rijpkema S.G., Schonberg A., Stanek G., Postic D. Identification of Borrelia burgdorferi sensu lato species in Europe // Zen-tralbl. Bakteriol., 1998,-Vol. 287, № 3,- P. 190-195.
227. Sato Y., Nakao M. Transmission of the Lyme disease spirochete, Borrelia garinii, between infected and uninfected immature Ixodespersulcatus during cofeeding on mice // J. Parasitol., 1997.- Vol. 83, № 3 P. 547-550.
228. Schulze T.L., Tailor R.C., Tailor G.C., Bosler E.M. Lyme disease: A proposed ecological index to assess areas of risk in the northeastern United States // Am. J. Public Health, 1991.- Vol., 1991, № 6,-P. 714-718.
229. Schwan T.G., Burgdorfer W., Garon C.F. Changes in infectivity and plasmid profile of the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdorferi, as a result of in vitro cultivation // Infect. Immun., 1988.- Vol. 56, № .- P.1831-1836.
230. Schwan T.G.,. Hinnebusch J., Piesman J. Change in outer surface proteins of the Lyme disease spirochete in tick and mammalian hosts //VIII nt. С ongr. L yme В orreliosis. San F rancisco. С alifornia., 1996,- Abstracts.- P. 334.
231. Shih C.M., Chao L.L.Lyme disease in Taiwan: primary isolation of Borrelia burgdorferi-like spirochetes from rodents in the Taiwan area // Am. J. Trop. Med.Hyg., 1998,- Vol. 59, № 5.- P. 687-692.
232. Shih C.M., Pollack R.J., Telford III S.R., Spielman A. Delayed dissemination of Lyme disease spirochetes from the site of deposition inthe skin of mice // J. Infect. Dis., 1992,- Vol. 166, № 4,- P. 827831.
233. Sinski E., Rijpkema S.G. Prevalence of Borrelia burgdorferi infection in Ixodes ricinus ticks at urban and suburban forest habitats. // Przegl. Epidemiol., 1997.- Vol. 51, № 4 -P. 431-435.
234. Sokal R.R., F.J. Rholph, Biometry, 2nd. ed., Freeman, San Francisco, 1981.
235. Sonenshine D.E. Biology of ticks // New York, Oxford, Oxford University Press, 1993.- Vol. 2.-488 p.
236. Spielman A. Development of Lyme disease spirochetes in vector ticks // 1st Int. Conf. on Tick-borne Pathogens at the Host-Vector Interface: an Agenda for Research. Proc. and Abstr. St. Paul, MN, USA, 1992,- P. 47-53.
237. Stepanova-Tresova G., Petko В., Stefanciova A., Nadzamova D. Occurence of Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia garinii and
238. Borrelia afzelii in the Ixodes ricinus ticks from Eastern Slovakia // Eur. J. Epidemiol., 2000,- Vol. 16, № 2,- P. 105-109. Strle F. Lyme borreliosis in Slovenia // Int. J. Med. Microbiol. Virol.
239. Talleklint L., Jaenson T.G.T. Maintenance by hares of European Borrelia burgdorferi in ecosystems without rodents // J. Med. Entomol., 1993,-Vol. 30, № 1,- P. 273-276.
240. Talleklint L., Jaenson T.G.T. Relationships between Ixodes ricinus and prevalence of infection with Borrelia-like spirochetes and density of infected ticks // J. Med. Entomol., 1996,- Vol. 33, № 5,- P. 805811.
241. Talleklint L., Jaenson T.G.T. Transmission of Borrelia burgdorferi s.l. from mammal reservoirs to the primary vector of Lyme borreliosis, Ixodes ricinus (Acari: Ixodidae), in Sweden // J. Med. Entomol., 19956,-Vol. 31, №6 -P. 880-886.
242. Talleklint L., Jaenson T.G.T., Mather T.N. Season variation in the capacity of the bank vole to infect larval ticks (Acari: Ixodidae) with the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdo'feri s.l. // J. Med. Entomol., 1993,- Vol. 30, № 4,- P. 812-815.
243. Talleklint-Eisen L., Lane R.S. Variation in the density of questing Ixodes pacificus (Acari: Ixodidae) nymphs infected with Borrelia burgdorferi at different spatial scales in California // J. Parasitol., 1999.-Vol. 85, № 5.-P. 824-831.
244. Thomas D. D., Calavid D., Barbour A.G. Differential association of Borrelia species with cultured neural cells // J. Infect. Dis., 1994-Vol. 169, №2,-P. 445-448.
245. Tian W., Moldenhauer S., Guo Y., Yu Q., Wang L., Chen M. Detection of Borrelia burgdorferi from ticks (Acari) in Hebei Province, China // J. Med.Entomol., 1998.- Vol.2, № 35.- P. 95-98.
246. Titus R.G., Ribero J.M.C. The role of vector saliva in transmission of arthropod-borne disease // Parasitol. Today, 1990.- Vol. 6, № 5.- P. 157-160.
247. Wallich R., Helmes C., Schaible U.E., Lobet Y., Moter S.E., Kramer M.D., Simon M.M. Evaluation of genetic divergence among Borrelia burgdorferi isolates by use of OspA, fla, HSP60, HSP70 gene probes // Infect. Immun., 1992.- Vol. 60, № 11- P. 4856-4866.
248. Wanchung Т., Zhikun Z., Moldenhauer S., Yixiu G., Quili Y., Lina W., Mei C. Detection of Borrelia burgdorferi from ticks (Acari) in Hebei Province, China // Proc. Entomol. Society of America., 1998,- Vol. 35, № 2 P. 95-98.
249. Wang G., van Dam A., Schwartz I., Dankert J. Molecular typing of Borrelia burgdorferi sensu lato: Taxonomic, epidemiological, and clinical implications // Clin. Microbiol. Reviews, 1999.- Vol. 12, № 4,- P. 633-653.
250. Wang G., van Dam A.P., Dankert J. Phenotypic and genetic characterization of a novel Borrelia burgdorferi sensu lato isolate from a patient with Lyme borreliosis // J. Clin. Microbiol., 1999.- Vol. 37, № 9. P. 3025-3028.
251. Wang G., van Dam A.P., Spanjaard L., Dankert J. Molecular typing of Borrelia burgdorferi sensu lato by randomly amplyfied polymorphic DNA fingerprinting analysis // J. Clin. Microbiol., 1998.- Vol. 36, № 3,- P. 768-776.
252. Wang H., Nuttall P.A. Excretion of the host immunoglobulin in the tick saliva and detection of IgG-binding proteins in tick haemolymph and salivary glands // Parasitology, 1994,- Vol. 109, № 4,- P. 525530.
253. Weber K., Pfister H.-W. History of Lyme borreliosis in Europe // In: Aspects of Lyme borreliosis (Weber K., Burgdorfer W. eds.). Berlin, Germany, Springer-Verlag KG, 1993,- P.25-29.
254. Wilske В., Anderson J.F., Baranton G., Barbour A.G., Hovind-Hougen K., Johnson R.C., Preac-Mursic V. Taxonomy of Borrelia spp. // Scand. J. Infect. Dis. Suppl., 1991,-Vol. 77.- P. 108-129.
255. Wilske В., Busch U., Fingerle V., Jauris-Heipke S. Preac-Mursic V., Rossler D.,Will G. Immunological and molecular variability of OspA and OspC. Implications for Borrelia vaccine development // Infections, 1996,- Vol. 24, № .- P. 208-212.
256. Woodrum J.E., Oliver J.H. Investigation of venerial, transplacental, and contact t ransmission о f t he L yme d isease s pirochete, В orrelia burgdorferi, in Sirian hamsters // J. Parasitol. 1999,- Vol. 85, № 3.- P. 426-430.
257. Xu Y., Kodner L., Coleman L., Johnson R. Correlation of plasmids with infectivity of Borrelia burgdorferi sensu stricto type strain B31 // Infect. Immun., 1996.- Vol. 64, № 9.- P. 3870-3876.
258. Yabuki M., Nakao M., Fukunaga M. Genetic diversity and the absence of regional differences of Borrelia garinii as demonstrated by ospA and ospB gene sequence analysis // Microbiol. Immunol., 1999,-Vol. 43, № 12.- P. 1097-1102.
259. Yanagihara Y., Masuzawa T. Lyme disease (Lyme borreliosis) // FEMS Immunol. Med. Microbiol., 1997,- Vol.18, №.- P. 249-261.
260. Yano Y., Takada N., Ishiguro F. Location and ultrastructure of Borrelia japonica in naturally infected Ixodes ovatus and small mammals // Microbiol. Immunol. 1997,- Vol. 41,- № 1. P. 9-13.
261. Younsi H., Postic D., Baranton G., Bouattour A. High prevalence of Borrelia lusitaniae in Ixodes ricinus ticks in Tunisia // Eur. J. Epidemiol., 2001,- Vol. 17,№ 1,- P. 53-56.
-
Ливанова, Наталья Николаевна
-
кандидата биологических наук
-
Новосибирск, 2004
-
ВАК 03.00.08
- Эпизоотологические аспекты природной очаговости иксодовых клещевых боррелиозов
- Клещевой боррелиоз собак в условиях Вологодской области
- Генетическая гетерогенность Borrelia spp. Западной Сибири
- Эколого-эпидемиологические аспекты клещевых инфекций на юге Тюменской области
- Экологические основы борьбы с иксодовыми клещами на юге Тюменской области
