Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Эпизоотологические аспекты природной очаговости иксодовых клещевых боррелиозов
ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Эпизоотологические аспекты природной очаговости иксодовых клещевых боррелиозов"

На правах рукописи

ПЕРЕВОЗЧИКОВА МАРИЯ АЛЕКСАНДРОВНА

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРИРОДНОЙ ОЧАГОВОСТИ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛИОЗОВ

06.02.02 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология»

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Владимир-2010

004600387

004600387

Работа выполнена в Государственном научном учреждении Всероссийском научно-исследовательском институте охотничьего хозяйства и звероводства (ВНИИОЗ) им. проф. Б.М. Житкова Российской академии сельскохозяйственных наук и Вятской государственной сельскохозяйственной академии

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, лауреат премии Правительства РФ в области науки и техники Домский Игорь Александрович ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и звероводства им. проф. Б.М. Житкова (ГНУ «ВНИИОЗ»), г. Киров

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Михалишин Валерий Васильевич ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГУ «ВНИИЗЖ»), г. Владимир

кандидат ветеринарных наук Сазонкин Владимир Николаевич ФГУ «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ»), г. Москва

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина (ФГОУ ВПО МГАВМиБ), г. Москва

Защита состоится о?О апреля 2010 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 220.015.01 при ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» по адресу: 600901, г. Владимир, мкр. Юрьевец, ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных», тел / факс (4922) 26-15-73

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных»

С авторефератом можно ознакомиться на сайте ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных»: http:// wvAv.arriah.ru

Автореферат разослан марта 2010 года.

Ученый секретарь диссертационного cobi доктор биологических наук

А.П. Пономарев

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ) -сравнительно новая группа природноочаговых трансмиссивных инфекционных заболеваний. С момента ее описания как нозологической формы не прошло еще и четырех десятилетий, а возбудитель был открыт лишь в 1982 году (Burgdorfer W. et al., 1982).

В настоящее время широкое распространение природных очагов ИКБ, высокая заболеваемость людей и домашних животных обуславливают актуальность данной проблемы для многих стран Америки, Европы, Азии и Австралии (Ананьева JI.П., 2006; Шетекаури С.А. с соав., 2005; ШулякБ.Ф., 2003; Korenberg E.I., 1994; Steere A.C. et al., 1989).

Изучение ИКБ в России показало, что эта новая природноочаговая инфекция - одна из наиболее распространенных на территории страны и регистрируется в 70 субъектах (Наумов Р.Л. с соав., 2005). С начала официальной регистрации болезни в 1991 г., заболеваемость выросла с 0,7 до 5,41 на 100 тыс. населения в 2008 г. (Белоусова Е.А. с соав., 2009). Для ИКБ характерен полиморфизм клинических признаков и значительный удельный вес хронических форм, что обуславливает сложности в диагностике заболевания (Скрипникова И.А. с соав., 1992; Кравчук JI.H. с соав., 1993; Logigian E.L. et al., 1990). Кроме того, несовершенными остаются диагностические лабораторные тесты (Барскова В.Г. с соав., 2001; МанзенюкИ.Н. с соав., 2005). Не разработаны меры специфической профилактики болезни (Ананьева Л.П., 2007; Оберт A.C. с соав., 2001).

В природной среде у клещей семейства Ixodidae практически не существует естественных врагов, поэтому только человеческий фактор является основным регулятором численности этой группы членистоногих (Шевкопляс В.Н., 2006). В России снижение общей площади акарицидных обработок - одна из основных причин эпизоотического неблагополучия по клещевым инфекциям (Огурцов A.A., 2004). Расширение географии очагов ИКБ происходит также в результате отказа от интенсивной агрокультуры, сокращения пахотных земель, озеленения городских территорий и увеличения пригородного строительства. Все это привело к мозаичному воссозданию лесов и созданию идеальных условий для существования клещей и их прокормителей (Васильева И.С. с соав., 1996; Кирьянова Е.В., 2005; Коренберг Э.И., 1996).

Очевидно, что природный очаг болезни представляет собой сложную многокомпонентную экосистему, возможность его существования и эпизоотического проявления в значительной мере определяют взаимоотношения возбудителя в организме переносчика и резервуарного хозяина, а также в экосистеме в целом. В связи с этим, создание наиболее целостной картины эпизоотического функционирования природного очага ИКБ, на наш взгляд, является актуальным и представляет несомненный научный и практический интерес. Кроме того, новые сведения могут быть ключом к выявлению факторов, определяющих уровни риска заражения людей и животных.

Так как на протяжении многих лет Кировская область сохраняет лидирующие позиции по заболеваемости людей ИКБ, которая в последние годы превышает федеративные показатели в 7 -10 раз, территория области представляет собой хорошую модель для изучения природных очагов инфекции.

Цель и задачи исследований. Цель исследований - изучение природных очагов ИКБ и получение новых данных об эпизоотологии заболевания.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить современную ситуацию по заболеваемости природноочаговыми клещевыми инфекциями на территории Кировской области;

- изучить зараженность возбудителем боррелиоза иксодовых клещей и провести анализ их микстинфицированности боррелиями и вирусом клещевого энцефалита;

- апробировать методы лабораторной диагностики болезни у животных, установить их особенности и диагностическую ценность; .

- изучить зараженность ИКБ некоторых охотничьих видов животных, уточнить видовой состав и их роль в поддержании природных очагов ИКБ;

- изучить зараженность ИКБ собак;

- провести биохимические исследования сывороток крови животных, имеющих в НРИФ диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi.

Научная новизна. На ряде территорий области получены в динамике данные по инфицированное™ иксодовых клещей боррелиями и вирусом КЭ. Апробированы методы лабораторной диагностики ИКБ у животных. Получены серологические и бактериологические доказательства циркуляции возбудителя боррелиоза у свободноживущих видов животных. Получены доказательства участия в поддержании природных очагов болезни 8 охотничьих видов животных. Впервые на территории Кировской области проведены исследования по изучению зараженности ИКБ собак и получены серологические доказательства инфекции. Получены данные по некоторым биохимическим показателям крови у животных, чьи сыворотки в НРИФ имели диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi.

Практическая значимость. Полученные результаты по изучению ИКБ дополняют имеющиеся представления о функционировании и особенностях природных очагов болезни. Дают возможность прогнозировать развитие эпизоотической ситуации. Проведенные исследования позволяют более эффективно осуществлять эпидемиологический и эпизоотологический надзор. Показана целесообразность проведения НРИФ для исследования на зараженность боррелиями различных диких и домашних видов животных.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены:

- на 6-й научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века - знания молодых», ВГСХА, 2006 г., г. Киров;

- на Международной научно-практической конференции, посвященной 85-летию ВНИИОЗ «Современные проблемы природопользования, охотоведения и звероводства», 2007 г., г. Киров;

- на 8-й научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века - знания молодых», ВГСХА, 2008 г., г. Киров;

- на Ученом совете ФГОУ ВПО ВГСХА, протокол № 6 от 19.06.2008 г.;

-на 10-ой Всероссийской научно-практической конференции

«Региональные и муниципальные проблемы природопользования», 2008 г., г. Кирово-Чепецк;

-на 2-й Международной научно-практической конференции «Современные проблемы охотничьего собаководства», 2009 г., г. Киров;

-на расширенном межлабораторном совете ГНУ ВНИИОЗ, протокол №2 от 27.10.2009 г.

Основные положения, выносимые на защиту:

-Кировская область - зона высокого риска заражения иксодовыми клещевыми боррелиозами;

- охотничьи виды животных и собаки являются прокормителями переносчиков болезни - иксодовых клещей, входят в круг резервуарных хозяев боррелий и участвуют в поддержании природных очагов ИКБ;

- методы лабораторной диагностики, используемые в медицинской лабораторной практике, имеют высокую диагностическую ценность у охотничьих животных и собак.

Публикации. По материалам исследования опубликовано 9 научных работ, в том числе в издании, рекомендованном ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 121 странице. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа проиллюстрирована 14 таблицами и 22 рисунками. Список использованной литературы включает 327 источников, в том числе 182 на иностранных языках.

1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В работе использованы имаго иксодовых клещей (п = 707) для исследования микроскопическим, культуральным, молекулярно-биологическим и серологическим методами.

Сыворотки крови для серологических исследований получены от следующих видов животных: заяц-беляк (Lepus timidus L.) - 95, лисица (Vulpes vulpes L.) - 24, енотовидная собака (Nyctereutes procyonoides Gray) -37, лось (Alces alces L.) - 67, кабан (Sus scrofa L.) - 11, волк (Canis lupus L.) -2, собака (Canis familiaris L.) - 24, тетеревиные птицы (Lyrurus tetrixL., Tetrao urogallus L., Tetrastes bonasia L.) - 34, вальдшнеп (Scolopax rusticóla L.) - 24, кролик (Oryctolagus cuniculus) - 3 головы (n = 321).

Для бактериологических исследований использовали внутренние органы (сердце, почки, селезенка, печень) от следующих видов животных: заяц-беляк (Lepus timidus L.) -5, кабан (Sus ser of a L.) - 3, барсук (Meies meles L.) -7, глухарь (Tetrao urogallus L.) - 2 головы (n = 17).

Для заражения культурой боррелий, выращенных на питательной среде BSK - Н, использовали лабораторных животных - кроликов (Oryctolagus cuniculus).

Питательные среды. Питательная среда BSK-H (среда Barbour-Stoenner-Kelly), производство Sigma (США); мясопептонный бульон (МПБ) и мясопептонный агар (МПА), приготовлен в лаборатории ветеринарии ВНИИОЗ (Байрак В.А., 1980).

Биологические и химические препараты. Антибиотик коммерческий Antibiotic mixture for Borrelia (фосфомицин 2 мг, рифампицин 5 мг, раствор амфоторицина В 20 %), производство Sigma (США).

Антиген боррелий корпускулярный (Borrelia garinii), серия 020907, дата изготовления 09. 2007, производство НПО «Микроген» г. Томск (Россия); иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие антивидовые против иммуноглобулинов кролика (серия 390), собаки (серия 207), быка (серия 331), свиньи (серия 177) и курицы сухие; альбумин бычий меченный родамином сухой, серия 375, производство филиал «Медгамал» ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН г. Москва (Россия).

Наборы коммерческих реагентов для биохимических исследований фирмы «High Technology», производство США.

Наборы реагентов «РИБО-сорб» (ТУ 9398-004-01897593-2006) серия № А06.06.08, дата изготовления 06.06.08; «PEBEPTA-L» (ТУ 9398-00501897593-2006) серия № 31.05.08, дата изготовления 31.05.08; «АмплиСенс Borrelia burgdorferi sensu /aío-EPh» серия № 18.06.08, дата изготовления 18.06.08, производство ФГУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» г. Москва (Россия).

Набор реагентов для иммуноферментного выявления антигена вируса клещевого энцефалита «ВектоВКЭ-антиген» D-1154, производство ЗАО «Вектор-Бест» г. Новосибирск (Россия).

Микроскопические методы. Данные методы использовали для прямой микроскопии содержимого кишечника клещей, для просмотра капель культур при контроле роста боррелий на питательной среде, а также для просмотра мазков, приготовленных из культур с плотной питательной среды -МПА.

Для обнаружения боррелий в клещах применяли метод прямой темнопольной микроскопии содержимого кишечника. Клещей вскрывали на предметном стекле в капле физиологического раствора. Поля зрения просматривали параллельными рядами. Норма просмотра, при которой препарат считается отрицательным, составляет не менее 200 - 250 полей зрения. Для определения микрофлоры кишечника клещей применяли метод прямой микроскопии мазков. Всего проведено исследование 321 клещей методом прямой микроскопии.

Культуральные методы. Выделение возбудителя боррелиоза из клещей и внутренних органов охотничьих животных осуществляли методом бактериологических посевов на питательную среду BSK-H. Биоматериал вносили в пробирки с питательной средой. Герметически закрытые пробирки помещали в термостат при температуре 33 °С. Рост боррелий контролировали просмотром капли культуры в темном поле микроскопа к концу первой - началу второй недели, а затем еженедельно в течение 2 месяцев. При первом же обнаружении боррелий проводили пересев на полную среду BSK - Н. Всего проведено 223 посева из клещей и 54 посева из внутренних органов охотничьих животных.

Посев содержимого кишечника клещей на МПБ проводили с последующим пересевом на МПА для определения микрофлоры организма переносчиков согласно общепринятым методикам (БайракВ.А., 1980). Рост культур контролировали путем визуального осмотра и микроскопического исследования. Данным методом проведено исследование 5 имаго клещей.

Молекулярно-биологические методы. Исследование клещей на определение РНК Borrelia burgdorferi sensu lato проводили методом полимеразно-цепной реакции. Постановку ее проводили согласно инструкциям по применению предприятия-изготовителя (Инструкция для выделения РНК / ДНК из клинического материала «РИБО-сорб», 2008; для получения кДНК на матрице ДНК «Реверта-L», 2008; для выявления 16S рРНК Borrelia burgdorferi sensu lato в биологическом материале методом полимеразной цепной реакции с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле «АмплиСенс Borrelia burgdorferi sensu lato-EPh», 2008). Учет результатов проводили по наличию или отсутствию на электрофореграмме специфических полос амплифицированной кДНК. Всего выполнено 163 молекулярно-биологических исследований клещей.

Серологические методы. Обнаружение противоборрелиозных антител в сыворотке крови осуществляли в реакции непрямой иммунофлуоресценции с использованием корпускулярного антигена В. afzelii (штамма 1р-21) и люминесцирующей иммунной сыворотки, меченной ФИТЦ против глобулинов различных видов животных (кролик, собака, бык, свинья, курица). Постановку НРИФ проводили согласно рекомендациям Э.И. Коренберга, В.А. Насоновой (1991). Результаты учитывали в люминесцентном микроскопе под иммерсионным объективом. Диагностически значимые титры специфических антител считали в разведение 1:40 и выше (Инструкция по применению альбумина бычьего или бараньего меченного родамином сухого, 2003; Козлов С.С. с соав., 1998; Оберт А.С. с соав., 2001). Методом НРИФ в общей сложности проведено 321 исследование проб сывороток крови различных видов животных.

Исследование клещей на определение антигена к вирусу клещевого энцефалита проводили методом иммуноферментного анализа. Реакцию ставили согласно инструкции по применению предприятия-изготовителя (Инструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного выявления антигена вируса клещевого энцефалита, 2007). Результаты ИФА

s

регистрировали с помощью спектрофотометра. Методом ИФА проведено 103 исследований клещей.

Биохимические методы. Биохимические исследования проводили на биохимическом анализаторе фирмы «BioChem SA» (США) при помощи коммерческих реагентов фирмы «High Technology». Исследования сывороток крови лосей (Alces alces L.) проводили по следующим показателям: ACT, АЛТ, общий билирубин, прямой билирубин, общий белок, альбумин, холестерин, щелочная фосфатаза, креатинин. Всего проведены биохимические исследования сывороток крови от 24 животных.

Заражение лабораторных животных. Заражение кроликов проводили культурой боррелий, выращенных на питательной среде BSK - H в объеме 1 мл, подкожно. Всего проведено заражение 3 животных.

Гематологические методы. Кровь у опытных кроликов (Oryctolagus cuniculus) брали из краевой ушной вены на 19, 35, 44 день после введения культуры боррелий. Определение количества лейкоцитов проводили согласно общепринятой методике (Берестов В.А., 2005).

Аналитические методы. Закономерности проявления эпизоотических и эпидемиологических процессов ИКБ и КЭ на территории Кировской области и России за 1998 - 2007 гг. проводили по данным официальной статистики ФГУЗ «Центра гигиены и эпидемиологии в Кировской области» (Белоусова Е.А. с соав., 2006, 2008, 2009; ГрухинаГ.Н. с соав., 2003). В ходе эпизоотического и эпидемиологического анализа изучались проявления ИКБ и КЭ по следующим характеристикам: структура природноочаговых инфекций в области; интенсивность в показателях на 100 тыс. населения; многолетняя динамика заболеваемости в Кировской области и России; распределение заболеваний по природно-ландшафтным подзонам и административным территориям области.

Статистические методы. Статистическую обработку цифровых материалов проводили с использованием программного пакета Microsoft Excel 7.0 для Windows 2007. Полученные в работе цифровые данные обработаны методами вариационной статистики при помощи специализированной программы для биологических и медицинских исследований «Primer of Biostatistics», версия 4.30. Для каждого показателя определяли среднее арифметическое значение (М), среднюю статистическую ошибку средней величины (±ш) и достоверную разницу между средними арифметическими двух вариационных рядов по критерию достоверности Ньюмена-Кейлса (Р). Разницу между двумя величинами считали достоверной при уровне вероятности р < 0,05.

Благодарности. Автор приносит искреннюю благодарность и признательность за помощь в выполнении диссертационной работы: сотрудникам лаборатории ветеринарии ВНИИОЗ старшим научным сотрудникам, кандидатам ветеринарных наук Д.М. Журавлеву и Ю.А.Березиной за методическую и практическую помощь в проведении лабораторных исследований; специалистам вирусологической лаборатории ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Кировской области» заведующей

лаборатории JI.А. Калининой, врачу-вирусологу А.И. Беленковой и врачу-бактериологу А.Е. Козлову за предоставление рабочего места, методическую и практическую помощь в проведении серологических, молекулярно-биологических исследований; автор благодарен охотоведу A.M. Перевозчикову (Котельничское РООиР) и сотрудникам ВНИИОЗ им. проф. Б.М. Житкова за большую помощь в сборе биоматериалов.

2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Эпидемиологическая характеристика инфекций и современное состояние заболеваемости иксодовыми клещевыми боррелиозами и клещевым энцефалитом на территории Кировской области (1998 -2008 гг.)

Эпизоотическая ситуация по природноочаговым инфекциям в Кировской области остается напряженной. В 2008 г. наибольшее значение и распространение имели ИКБ - с показателем заболеваемости 37,42 на 100 тыс. населения, на втором месте клещевой энцефалит - 9,60 на 100 тыс. населения, на третьем месте геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) - 7,22 на 100 тыс. населения (Белоусова Е.А. с соав., 2009).

Структура природно-очаговых инфекций Кировской области в 2008 г. представлена на рис. 1 (Белоусова Е.А. с соав., 2009).

ГЛПС

Рис. 1. Структура природно-очаговых инфекций на территории Кировской

области (2008 г.)

На территории Кировской области зарегистрированы клещи I. persulcatus и I. ricinus (Утенкова Е.О. с соав., 2004). По данным паразитологических наблюдений в 2008 г. начало эпидсезона пришлось на первую декаду мая, окончание - первую декаду октября. Первые укусы

клещей (2008 г.) зарегистрированы в Кильмезском районе 29 марта. Продолжительность периода активности клещей колебалось от 103 (2004 г.) до 202 дней (2007 г.) (Белоусова Е.А. с соав., 2006, 2008, 2009).

На протяжении 10-летнего периода (1999 - 2008 гг.) заболеваемость людей ИКБ в области характеризовалась уровнем, значительно превышающем среднероссийские показатели (рис. 2). Например, в 2007 г. показатель заболеваемости 48,24 на 100 тыс. населения примерно в 10 раз превысил среднероссийский уровень - 5,05 на 100 тыс. населения (Белоусова Е.А. с соав., 2006,2008,2009; Грухина Г.Н. с соав., 2003).

U и 19 X

о 2>

о о

<ч х

п m

з

о с

О--

1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008

Рис. 2. Динамика заболеваемости ИКБ в Кировской области и России (19992008 гг.)

За 2008 г. число установленных заболеваний ИКБ составило 534 случая, что на 22,4 % ниже уровня 2007 г. Показатель заболеваемости 37,42 на 100 тыс. населения, остается высоким и превышает среднероссийский уровень в 7 раз (5,41 на 100 тыс. населения) (Белоусова Е.А. с соав., 2009).

Среднемноголетний уровень заболеваемости людей ИКБ в Кировской области составил 34,88 на 100 тыс. населения, что в 6,36 раз превышает аналогичный показатель по России (5,48 на 100 тыс. населения). В 2007 г. случаи заболевания людей ИКБ выявлены в 35 административных районах области. В 9 районах и г. Кирове заболеваемость превышала среднеобластной показатель (Белоусова Е.А. с соав., 2008).

Заболеваемость клещевым энцефалитом в Кировской области в период 1999-2008 гг. (рис.3) характеризовалась уровнем, превышающим среднероссийские показатели (Белоусова Е.А. с соав., 2006, 2008, 2009; Грухина Г.Н. с соав., 2003).

-•-Кирооская

1999 2000 2001 2002 2003 2004 200s 2006 2007 2008

Рис. 3. Динамика заболеваемости КЭ в Кировской области и России (19992008 гг.)

В 2008 г. отмечается прирост заболеваемости КЭ на 8,2 % по сравнению с уровнем 2007 г., которая по-прежнему остается выше заболеваемости по РФ в 4,8 раза (1,98 на 100 тыс. населения) (Белоусова Е.А. с соав., 2009).

При сравнительном изучении динамики заболеваемости КЭ за 10-летний период (1999 - 2008 гг.) в Кировской области и России отмечена неравномерность ее по годам как в области, так и в целом по России. Среднемноголетний уровень заболеваемости в Кировской области составил 7,20 на 100 тыс. населения, что 2 раза превышает аналогичный показатель России (3,59 на 100 тыс. населения).

В 2007 г. заболеваемость КЭ отмечалась в г. Кирове и 26 районах области, в 17 из них и в г. Кирове заболеваемость превышала средний областной показатель (Белоусова Е.А. с соав., 2008).

Следует отметить, что случаи заболевания ИКБ регистрировались во всех районах Кировской области, однако наибольшими показателями отличались центральные районы области (например, Верхошижемский, Богородский, Куменский, Арбажский, Оричевский), расположенные в подзоне южной тайги. Показатель заболеваемости в этих районах достигал 141,31 на 100 тыс. населения (Верхошижемский район). Значительная часть заражений происходила в окрестностях г.Кирова и прилегающих к нему районах. Минимальный уровень заболеваемости ИКБ отмечен в южных районах, расположенных в подзоне широколиственно-хвойных лесов (Белоусова Е.А. с соав., 2008).

Наибольшие показатели заболеваемости КЭ регистрировались в северных районах области, например, Нагорском, Опаринском, Мурашинском, Верхнекамском, Лузском, Юрьянском, расположенных в подзоне средней тайги (Белоусова Е.А. с соав., 2008).

Кроме того, в г. Кирове и 4 районах области (Арбажский, Верхошижемский, Котельничский, Оричевский) заболеваемость как по ИКБ, так и по КЭ превышает средний областной уровень.

Приведенные выше литературные сведения подтверждают мысль о возможной приуроченности очагов ИКБ и КЭ к определенным природно-географическим условиям. Наиболее благоприятны по климатогеографическим особенностям для формирования природных очагов ИКБ и КЭ центральные и северные районы. В южных районах отмечаются наименьшие показатели заболеваемости людей по этим инфекциям.

Таким образом, на территории Кировской области существуют напряженные природные очаги иксодовых клещевых боррелиозов. Характерна сочетанность их с очагами клещевого энцефалита. Приведенные данные свидетельствуют о том, что проблема клещевых инфекций на территории Кировской области актуальна и представляет, на наш взгляд, несомненный научный и практический интерес.

2.2. Изучение зараженности иксодовых клещей боррелиями

Клещи собраны на территориях заречной части г. Кирова (Заречный парк, сады Кировского мясокомбината, территория бывшего лагеря «Спутник»), которая является местом массового отдыха людей, а также в Котельничском (д. Слобода) и Зуевском (п. Мотоус) районах Кировской области.

В результате исследования клещей-переносчиков (п=707) методами прямой темнопольной микроскопии, бактериологических посевов на питательную среду ВвК - Н, полимеразно-цепной реакции, возбудитель боррелиоза или его РНК обнаружены на всех исследуемых нами территориях.

Результаты вышеперечисленных методов исследования иксодовых клещей отражены на рис. 4.

70

40

30

20

10

60

50

О

■ 2007 г.

■ 2009 г.

2008 г.

Рис. 4. Зараженность клещей боррелиями в Кировской области

Данные рисунка показывают, что зараженность иксодовых клещей в различных районах области различна. Минимальный показатель зараженности составил 7,6 % случаев (2007 г.) на территории лагеря «Спутник» заречной части г. Кирова, максимальный был получен в д. Слобода Котельничского района и составил 65,0 % (2007 г.).

Установлено, что инфицированность иксодовых клещей боррелиями в заречной части г.Кирова составила 22,5 (2007 г.), 32,4 (2008 г.) и 45,1 % (2009 г.); в Котельничском районе (д. Слобода) - 65,0 (2007 г.), 29,4 (2008 г.) и

29.4 % (2009 г.); в Зуевском районе (п. Мотоус) - 33,3 (2007 г.), 21,7 (2008 г.) и 31,8 % (2009 г.); по области в целом - 40,4 % (2007 г.), 31,1 % (2008 г) и 41,9% (2009 г.).

Таким образом, за последние 3 года на территории Кировской области уровень инфицированности иксодовых клещей боррелиями в среднем составляет 37,8 %. По мнению A.C. Оберта с соав. (2001), зараженность клещей-переносчиков более 25 %, характеризуется как высокая.

2.3. Изучение уровня зараженности боррелиями самок и самцов иксодовых клещей

В результате проведенных нами исследований по изучению уровня зараженности самок и самцов иксодовых клещей установлено, что они имеют приблизительно равный уровень зараженности: самки - 42,6 %, самцы -

41.5 % случаев (табл. 1).

Таблица 1

Уровень зараженности боррелиями самок и самцов иксодовых клещей

Пол Количество исследуемых особей Количество зараженных особей Зараженность, %

Самки 230 98 42,6

Самцы 190 79 41,5

2.4. Изучение зараженности переносчиков вирусом клещевого энцефалита и микстинфицирование их возбудителями ИКБ и КЭ

В результате проведенных исследований (п = 103) установлено, что на территориях, неблагополучных по ИКБ выявлены клещи, зараженные вирусом КЭ. На всех исследуемых территориях встречаются переносчики, зараженные вирусом КЭ.

Установлено, что в Кировской области зараженность клещей энцефалитом составила в 2007 г. 11,1 %, в 2008 г. - 18,0% и в 2009 г. -26,6 % (рис. 5).

При сопоставлении данных инфицированности иксодовых клещей боррелиями и вирусом КЭ выявлено, что зараженность переносчиков боррелиями превышает зараженность их вирусом КЭ.

2007 г. 2008 г. 2009 г.

Рис. 5. Зараженность клещей вирусом КЭ в Кировской области

Кроме того, нами установлено, что на территории Кировской области встречаются переносчики, инфицированные одновременно боррелиями и вирусом клещевого энцефалита, то есть микстинфицированые.

Наибольшее число случаев микстинфицирования зарегистрировано на территории Заречного парка (12,5 %), несколько ниже отмечено в Зуевском (9,0 %) и Котельничском районах (8,3 %).

Таким образом, в пределах ареала I. persulcatus и I. ricinus природные очаги ИКБ являются сочетанными с очагами КЭ за счет общего переносчика и его прокормителей.

2.5. Изучение микрофлоры кишечника клещей

В результате бактериологических посевов (п = 5) на МПБ во всех пробах обнаружили помутнение среды и осадок на дне пробирок.

На МПА наблюдали 2 вида колоний: равномерно выпуклые, полупрозрачные сероватые колонии с ровными краями, 2 - 3 мм в диаметре и сплошной сливающийся рост.

В результате микроскопического исследования нами были выявлены кишечная палочка (Escherichia coli) и протей (Proteus vulgarisj.

2.6. Изучение зараженности иксодовыми клещевыми боррелиозами охотничьих животных

Изучение зараженности осуществляли серологическим (п = 321), в основе которого лежит обнаружение противоборрелиозных антител в сыворотке крови, и культуральным (п = 54) методами, при котором происходит выделение возбудителя боррелиоза из внутренних органов охотничьих видов животных.

Проведены серологические исследования 10 охотничьих видов животных на зараженность В. burgdorferi s. /., в том числе: заяц-беляк (Lepus timidus L.j, лисица (Vulpes vulpes L.), енотовидная собака (Nyctereutes procyonoides Gray), лось (Alces alces L.), кабан (Sus scrofa L.), волк (Canis lupus L.), тетеревиные птицы (Lyrurus tetrix L., Tetrao urogallus L., Tetrastes bonasiaL.), вальдшнеп (Scolopax rusticola L.).

Результаты серологических исследований представлены на рис. 6.

60

50

о

I

О заяц-беляк

■ лисица

■ лось

0 енотовидная собака □ тетеревиные птицы

2006 2007 2008 2009

Рис. б. Уровень зараженности охотничьих животных возбудителем

боррелиоза

Проведенные исследования выявили, что наиболее высокий уровень заболеваемости ИКБ выявлен у зайца-беляка (Lepus timidus L.) 52,7 % (2006 г.), 20,0 % (2007 г.) и 47,0 % (2008 г.) и лисицы (Vulpes vulpes L.) 38,4 % (2006 г.), 37,5 % (2007 г.). Несколько ниже он отмечен у енотовидной собаки (Nyctereutes procyonoides Gray) - 12,5 % (2006 г.) и лося (Alces alces L.) -10,0% (2006 г.), 7,4% (2008 г.), 27,2% (2009 г.). Наименьший уровень зараженности выявлен у тетеревиных птиц (Lyrurus let rix L., Tetrao urogallus L., Tetrastes bonasia L.) - 5,8% (2006 г.). В сыворотках крови вальдшнепа антитела к возбудителю боррелиоза обнаружены не были.

Значительный процент зараженности зайца-беляка (Lepus timidus L.) объясняется большей вероятностью его контакта с клещами в виде покусов, вследствие таких факторов как размеры, соответствующие ярусу концентрации на растительности клещей, наличие обильного, многоярусного шерстного покрова, высокая активность и подвижность в весенний период (гон), включая и светлое время суток.

Размеры и наличие густого, высокого шерстного покрова лисицы (Vulpes vulpes L.) также объясняет высокий процент инфицированности этого вида животных. Невысокая зараженность лосей (Alces alces L.) - 10,0 % (2006 г.), 7,4 % (2008 г.), по нашему мнению, связана в первую очередь с размерами животного, но на высоко эндемичных территориях инфицированность этого вида может существенно увеличиваться. Например, 27,2 % (2009 г.) лосей (Alces alces L.) в НООХ ВНИИОЗ были инфицированы В.burgdorferi.

Из 54 бактериологических посевов внутренних органов свободноживущих видов животных на питательную среду BSK - H боррелии были выделены из сердца барсука (Meies meles L.), печени и селезенки кабана (Sus scrofa L.), то есть в 5,5 % случаев.

При этом, установлены случаи, когда при посевах из внутренних органов животных (зайцы-беляки) на питательную среду возбудитель боррелиоза не был выделен, хотя титры антител к боррелиям в их сыворотках крови при исследовании в НРИФ имели диагностически значимые показатели (1 : 40 и 1 : 80). Это подтверждает определенные сложности по выделению боррелий.

На основании серологических и бактериологических результатов исследований установлено, что животные, сыворотки которых в НРИФ дали положительные результаты (заяц-беляк, лисица, лось, енотовидная собака, тетерев, глухарь) и в посевах на питательную среду ВБК - Н обнаружены боррелии (барсук, кабан) являются прокормителями переносчиков болезни -иксодовых клещей (преимущественно стадии имаго) и входят в число резервуарных хозяев, распространителей и накопителей возбудителей боррелиоза.

Дикие животные, инфицированные боррелиями, добыты на следующих территориях: Даровской, Котельничский, Слободской, Советский районы и в научно-опытном охотничьем хозяйстве ВНИИОЗ (рис. 7).

70

60 50 40 30 20 10 О

t

2006

2007

2008

2009

а Даровской □ Котельничский В Слободской В Советский ■ НООХ

Рис. 7. Зараженность охотничьих животных возбудителем боррелиоза в различных районах Кировской области

В результате серологических и бактериологических исследований установлено, что наиболее высокий уровень зараженности охотничьих животных возбудителем боррелиоза зарегистрирован на территории Даровского района в 2006 г. и составил 60,0 %. Несколько ниже он отмечен в Котельничском районе - 39,4 (2006 г.), 16,0 (2007 г.) и 42,8 % (2008 г.). На территории Слободского района зараженность составила 14,2 (2006 г.) и 33,3 % (2008 г.). В Советском районе - 28,5 %, на территории НООХ -11,4 (2006 г.), 3,8 (2008 г.) и 26,0 % (2009 г.).

Кроме того, на территории Котельничского района в окрестностях близких к следующим 12-ти населенным пунктам (с. Высокого, с. Екатерина,

д. Копылы, с. Курино, с. Молотниково, с. Покровское, с. Родичи, д. Роминская, д. Слобода, с. Спасское, д. Треничи, п. Юбилейный) из 18 были добыты инфицированные животные. Более того, на большинстве территорий Котельничского района Кировской области уровень зараженности охотничьих животных составил 50,0 % и более.

При анализе показателей титров антител в НРИФ у зайца-беляка (Lepus timidus L.) (n = 36) установлено, что 66,6 % случаев диагностически значимых титров антител (1 :40 и 1 :80) были получены у животных, добытых в весенне-летний период. Несколько ниже они отмечены у животных, добытых в осенне-зимний период -48,1 % случаев.

Мы склонны полагать, что показатель обилия (численности) зайца-беляка (Lepus timidus L.) может использоваться как параметр, позволяющий прогнозировать эпизоотическую ситуацию по ИКБ в последующие годы потому, что даже незначительные колебания численности этих резервуарных хозяев способны влиять на численность и уровень зараженности переносчиков, так как увеличивается возможность горизонтальной передачи боррелий. Снижение же численности резервуарных хозяев приведут к сокращению популяции переносчика и, как следствие, и возбудителя.

Исследованные в НРИФ сыворотки крови лося (Alces alces L.), зайца (Lepus timidus L.), лисицы (Vulpes vulpes L.) и енотовидной собаки (Nyctereutes procyonoides Gray), имеющие высокие титры антител (1 : 80), мы повторно исследовали в этой же реакции, но с гетерогенными невидоспецифичными диагностическими сыворотками. В итоге мы получили отрицательные результаты всех реакций. Эти данные необходимо учитывать при серологической диагностике ИКБ в ветеринарной лабораторной практике при исследовании различных видов животных.

2.7. Изучение зараженности иксодовыми клещевыми боррелиозами собак

В доступной нам литературе мы не встретили данных, касающихся исследований зараженности собак возбудителем боррелиоза на территории Кировской области.

Актуальность изучения этого вопроса определяет тем, что весенне-летний период домашние собаки, выезжая с владельцами в загородную зону, часто подвергаются нападению клещей-переносчиков. Более того, собаки участвуют в прокормлении клещей, а также заносе их на садовые участки, городские парки, в жилье человека, чем способствуют возникновению новых очагов и существенно увеличивают риск заражения людей.

Из 24 собак, поступивших в ветеринарную клинику «Верный друг», 2 (8,3 %) имели в крови антитела к возбудителю боррелиоза (т.е. были сероположительными).

Полученные нами результаты позволяют отнести собак к прокормителям иксодовых клещей и резервуарным хозяевам возбудителя боррелиоза, а также считать их индикаторами неблагополучия местности по ИКБ.

2.8. Биохимические исследования сывороток крови животных

В доступной нам литературе мы не встретили данных, касающихся биохимических исследований крови диких животных, сыворотки крови которых в НРИФ имели диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi (1 :40 и 1 : 80).

Биохимические исследования сывороток крови лосей (Alces alces L.) показали, что имеются существенные различия в биохимических показателях у животных сыворотки крови которых в НРИФ имели диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi по сравнению с неинфицированными.

Результаты исследований приведены в табл. 2.

Таблица 2

Биохимические исследования сывороток крови лосей (Alces alces L.)

Биохимические Животные, чьи сыворотки в НРИФ не имели диагностически значимые Животные, чьи сыворотки в НРИФ имели диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi (1 : 40 и 1 : 80) (М±ш)

показатели титры антител к В. burgdorferi (M±m)

ACT, Е/л 106,30 ± 9,45 292,4 ±22,13*

АЛТ, Е/л 52,34 ± 4,90 77,02 ± 12,94*

Общий билирубин, мг/дл 9,41 ±2,31 16,30 ±2,59

Прямой билирубин, мг/дл 1,36 ±0,36 4,84 ± 1,34*

Общий белок, г/л 77,38 ± 6,78 145,40 ± 9,20*

Альбумин, г/л 47,64 ± 3,04 57,14 ±4,00

Холестерин, ммоль/л 0,50 ± 0,04 0,39 ± 0,07

ЛДГ, Е/л 517,50 ±55,24 1142,00 ±54,36*

Щелочная фосфатаза, Е/л 76,09 ±11,67 147,80 ±21,74*

Креатинин, ммоль/л 135,10 ± 18,58 189,90 ±13,52*

Примечание: * - различия величин достоверно значимы (р < 0,05)

В результате проведенных исследований установлено, что животные, в сыворотках крови которых в НРИФ были обнаружены диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi (1 : 40 и 1 : 80), имели достоверное (р<0,05) повышение уровня ACT 292,4 ± 22,13 Е/л; АЛТ 77,02 ± 12,94 Е/л; прямого билирубина 4,84 ± 1,34 мг/дл; общего белка 145,40 ± 9,20 г/л; ЛДГ 1142,00 ± 54,36 Е/л; щелочной фосфатазы 147,80 ±21,74 Е/л и креатинина 189,90 ± 13,52 ммоль/л. Эти данные свидетельствуют о патологическом влиянии В. burgdorferi на организм диких животных.

2.9. Заражение лабораторных животных и гематологические исследования

Заражение кроликов (п = 3) проводили культурой боррелий, выращенных на питательной среде В8К - Н, подкожно.

Взятие крови для гематологических и серологических исследований проводили трижды: через 19,35 и 49 дней после заражения.

Результаты изучения показателей лейкоцитов приведены в рис. 8.

19 35 49

Дни исследования

---№1-№2------№3-----норма min----норма та*

Рис. 8. Показатели количества лейкоцитов у лабораторных животных, зараженных возбудителем боррелиоза

В результате проведенных исследований установлено, что у всех кроликов мы получили сходные показатели лейкоцитов, а именно на 19-й день после заражения возбудителями боррелиоза отмечен лейкоцитоз -увеличение показателей лейкоцитов в среднем до 10,36 тыс / мкл (при норме от 6,5 до 9,5 тыс / мкл). На 35 - й день после заражения наблюдалось резкое снижение показателей лейкоцитов (лейкопения) в среднем до 3,91 тыс / мкл. К 49-му дню эти показатели несколько возросли в среднем до 4,11 тыс / мкл.

При этом, параллельно исследуя эти же сыворотки в НРИФ, мы не получили диагностически значимых титров антител к В. burgdorferi.

ВЫВОДЫ

1. Территория Кировской области - зона высокого риска заражения иксодовыми клещевыми боррелиозами. Заболевание ежегодно регистрируется практически во всех административных районах. За последние 3 года средний уровень инфицированности клещей боррелиями составил 37,8 %.

2. Максимальные показатели заболеваемости населения ИКБ и К регистрируют в центральных и северных районах Кировской облает расположенные в подзоне южной и средней тайги. В южных района расположенных в подзоне широколиственно-хвойных лесов, отмечают наименьшие показатели заболеваемости по этим инфекциям.

3. Природные очаги иксодовых клещевых боррелиозов являютс сочетанными с очагами клещевого энцефалита.

4. Реакция непрямой иммунофлуоресценции, используемая медицинской лабораторной практике, является надежным методо диагностики боррелиоза у охотничьих видов животных и собак, при услови! что получение достоверных результатов реакции возможно лишь пр использовании групповых видоспецифичных диагностических сыворото Культуральный метод диагностики ИКБ у животных недостаточь эффективен по причине низкой частоты выделения возбудителя.

5. В результате серологических и бактериологических исследовани установлено, что в природных очагах ИКБ в круг резервуарных хозяев накопителей инфекции, кроме м ышевидных грызунов, входят следуклщ виды животных: заяц-беляк (Lepus timidus L.), лось (Alces alces-L.), лист (Vulpes vulpes L.), енотовидная собака (Nyctereutes procyonoides Gray), барсу (Meies meles L.), кабан (Sus scrofaL.), тетеревиные птицы (Lyrurus tetrixl Tetrao urogallus L.).

6. Учитывая то, что заяц-беляк (Lepus timidus L.), является охотничьи видом с достаточно высокой численностью на обширных территориях РФ его можно рекомендовать в качестве тест - объекта в целях более глубоко1 изучения и прогнозирования эпизоотической ситуации непосредственно природных очагах ИКБ.

7. Существенное повышение некоторых биохимических показателе сыворотки крови у лосей (Alces alces), имеющих диагностически значимь титры антител к В. burgdorferi по сравнению с неинфицированным! свидетельствует о патологическом влиянии возбудителя на организм дики животных.

8. Полученные результаты позволяют также отнести домашних собак индикаторам неблагополучия местности по ИКБ и к резервуара боррелиозной инфекции на территории населенных пунктов и окружающи их территорий.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Учитывая сложную эпизоотологическую и эпидемическую ситуацию в отношении природных очагов ИКБ, рекомендуется в дополнение к комплексу мероприятий по профилактике иксодовых клещевых боррелиозов организация проведения систематического мониторинга за циркуляцией возбудителя боррелиоза в дикой природе. При организации работы важно взаимодействие и координация различных служб и ведомств.

2. Апробированные методы рекомендуются для использования в ветеринарной лабораторной практике, а также в научно-исследовательской и практической деятельности медицинских и ветеринарных специалистов для объективной прогностической оценки эпидемиологической и эпизоотической ситуации в природных очагах ИКБ.

3. В целях профилактики ИКБ и других клещевых инфекций на территории городов, других населенных пунктов и прилегающим к ним территориях рекомендуется регулировать популяцию бродячих собак, что предотвращает возможность появления новых очагов инфекции и снижает риск заражения людей.

4. Полученные новые данные по эпизоотологии ИКБ рекомендуем использовать в учебном процессе при изложении соответствующих курсов на медицинских, биологических и ветеринарных факультетах учебных заведений, а также включить в учебные руководства по эпидемиологии и эпизоотологии и специальную литературу для медицинских работников, ветеринарных врачей и биологов.

5. Разработаны наставления по мониторингу иксодовых клещевых боррелиозов для прогнозирования развития эпизоотий в природных очагах и профилактики болезни, которые рассмотрены на расширенном межлабораторном совещании отдела звероводства ГНУ ВНИИОЗ (протокол №2 от 17.09.2009) и направлены на рассмотрение профильных секций Российской академии сельскохозяйственных наук.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. ПеревозчиковаМ.А. Необходимость проведения исследований по изучению природных очагов иксодовых клещевых боррелиозов / И.А. Домский, М.А. Перевозчикова // 6-я научная конференция аспирантов и соискателей «Науке нового века-знания молодых». Киров. 2006. С. 51-53.

2. Перевозчикова М.А. Опыт диагностики и выделения возбудителя боррелиоза у диких животных и птиц / И.А. Домский, Д.М. Журавлев, М.А. Перевозчикова // 7-я научная конференция аспирантов и соискателей «Науке нового века - знания молодых». Киров. 2007. С. 75-77.

3. ПеревозчиковаМ.А. К прогнозу обилия активных голодных иксодовых клещей / И.Н. Соломин, В.М. Сюткин, М.А. Перевозчикова // Международная научно-практическая конференция, посвященная 85-летию ВНИИОЗ «Современные проблемы природопользования, охотоведения и звероводства». Киров. 2007. С. 398.

4. Перевозчикова М.А. Результаты изучения зараженности клещей иксодовыми клещевыми боррелиозами на территории Кировской области / М.А. Перевозчикова, И.А. Домский, Д.М. Журавлев, Ю.А. Березина // 8-я научная конференция аспирантов и соискателей «Науке нового века - знания молодых». Киров. 2008. С. 18-21.

5. Перевозчикова М.А. Лайм-боррелиоз в Кировской области М.А. Перевозчикова, Д.М. Журавлев, Ю.А. Березина, И.А. Домский II Международная научно-практическая конференция «Вопросы физиологи содержания, кормопроизводства и кормления, селекции с.-х. животны биологии пушных зверей и птиц, охотоведения». Киров. 2008. С. 93-95.

6. Перевозчикова М.А. Изучение иксодовых клещевых боррелиозов Кировской области / М.А. Перевозчикова, Д.М. Журавлев, И.А. Домски Ю.А. Березина // 10-ая Всероссийская научно-практическая конференщ «Региональные и муниципальные проблемы природопользования». Киров Чепецк. 2008. С. 96-97.

7. Перевозчикова М.А. Переносчики и резервуарные хозяева природных очагах иксодовых клещевых боррелиозов М.А. Перевозчикова, И.А. Домский // Ветеринарная патология. 2009. № (28). С 20-24.

8. Перевозчикова М.А. Диагностика иксодовых клещевых боррелиозов охотничьих животных / И.А. Домский, М.А. Перевозчикова, Д.М. Журавл // Охотничье собаководство. 2009. № 1 (13). С 24-25.

9. Перевозчикова М.А. Иксодовые клещевые . боррелиозы собак М.А. Перевозчикова, И.А. Домский, Д.М. Журавлев, Ю.А. Березина II Международная научно-практическая конференция «Современш проблемы охотничьего собаководства». Киров. 2009. С. 89-91.

Отпечатано на полиграфической базе ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГУ «ВНИИЗЖ») Тираж 90 экз., март 2010 г.

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Перевозчикова, Мария Александровна

СПИСОК ПРИМЕНЯЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. История изучения иксодовых клещевых боррелиозов

1.2. Этиология заболевания

1.3. Эпизоотологическая и эпидемиологическая характеристика иксодовых клещевых боррелиозов

1.4. Патогенез

1.5. Клинические признаки болезни у животных

1.6. Лабораторная диагностика

1.6.1. Прямые методы 3 О

1.6.2. Косвенные методы

1.7. Лечение заболевания

1.8. Профилактика

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

2.2. Эпидемиологическая характеристика инфекций и современное состояние заболеваемости иксодовыми клещевыми боррелиозами и клещевым энцефалитом на территории Кировской области (1998 - 2008 гг.)

2.3. Изучение зараженности боррелиями иксодовых клещей

2.4. Изучение уровня зараженности боррелиями самок и самцов иксодовых клещей

2.5. Изучение зараженности переносчиков вирусом клещевого энцефалита и микстинфицирование их возбудителями боррелиоза и энцефалита

2.6. Изучение микрофлоры кишечника клещей

2.7. Изучение зараженности иксодовыми клещевыми боррелиозами охотничьих животных

2.8. Изучение зараженности иксодовыми клещевыми боррелиозами собак

2.9. Биохимические исследования сывороток крови

2.10. Заражение лабораторных животных и гематологические исследования

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Эпизоотологические аспекты природной очаговости иксодовых клещевых боррелиозов"

Актуальность темы. Иксодовые клещевые боррелиозы — сравнительно новая группа природноочаговых трансмиссивных инфекционных заболеваний. С момента ее описания как нозологической формы не прошло еще и четырех десятилетий, а возбудитель был открыт лишь в 1982 году (Burgdorfer W. et al., 1982).

В настоящее время широкое распространение природных очагов ИКБ, высокая заболеваемость людей и домашних животных обуславливают актуальность данной проблемы для многих стран Америки, Европы, Азии и Австралии (Ананьева JT.П., 2006; Шетекаури С.А. с соав., 2005; ШулякБ.Ф., 2003; Korenberg E.I., 1994; Steere A.C. et al., 1989).

Изучение ИКБ» в России показало^ что эта новая природноочаговая инфекция - одна из наиболее распространенных на? территории страны и , регистрируется в 70 субъектах (Наумов Р!Л. с соав., 2005). С начала официальной регистрации болезни-в 1991 г., заболеваемость, выросла с 0,7 до* , 5,41 на 100 тыс. населения в 2008 г. (Белоусова Е.А. с соав., 2009). Для ИЮ> характерен» полиморфизм клинических признаков и значительный удельный вес хронических форм, что обуславливает сложности в диагностике заболевания (Скрипникова И.А'. с соав., 1992; Кравчук Л;Н. с соав., 1993; LogigianE.L. etal., 1990). Кроме того, несовершенными остаются диагностические лабораторные тесты (Барскова В.Г. с соав., 2001; МанзенюкИ.Н. с соав., 2005). Не разработаны меры специфической профилактики болезни (Ананьева Л.П., 2007; Оберт A.C. с соав:, 2001).

В природной среде у клещей семейства Ixodidae практически' не существует естественных врагов, поэтому только человеческий фактор является основным регулятором численности этой группы членистоногих (Шевкопляс В.Н., 2006). На сегодняшний день в России снижение общей площади акарицидных обработок - одна из основных причин эпизоотического неблагополучия по клещевым инфекциям (Огурцов A.A.,

2004). Расширение географии очагов ИКБ происходит также в результате отказа от интенсивной агрокультуры, сокращения пахотных земель, озеленения городских территорий и увеличения пригородного строительства. Все. это привело к мозаичному воссозданию-лесов и- созданию идеальных условий для' существования клещей- и их прокормителей (Васильева И.С. с соав., 1996; Кирьянова Е.В., 2005; Коренберг Э.И., 1996).

Очевидно, что природный, очаг болезни представляет собой сложную многокомпонентную экосистему, возможность его существования1 и эпизоотического проявления в значительной мере определяют взаимоотношения возбудителя в организме переносчика и резервуарного хозяина, а также в экосистеме в целом. В' связи с этим, создание наиболее целостной картины эпизоотического функционирования природного очага ИКБ, на наш- взгляд, является* актуальным и представляет несомненный научный и практический интерес. Кроме того, новые- сведения могут быть ключом- к выявлению факторов, определяющих уровни1 риска заражения-людей и животных.

Так как на протяжении многих • лет Кировская* область, сохраняет , лидирующие позиции по заболеваемости людей ИКБ, которая в-последние годы превышает федеративные показатели' в 7 - 10* раз, территория области представляет собой хорошую модель для. изучения природных очагов инфекции.

Цель и задачи исследований. Цель исследований - изучение природных очагов ИКБ и получение'новых данных об эпизоотологии заболевания.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: изучить современную ситуацию по заболеваемости природноочаговыми клещевыми- инфекциями на территории Кировской области; изучить зараженность возбудителем боррелиоза иксодовых клещей и провести анализ их микстинфицированности боррелиями и вирусом клещевого энцефалита; апробировать методы лабораторной диагностики болезни у животных, установить их особенности и диагностическую ценность; изучить зараженность ИКБ некоторых охотничьих видов животных, уточнить видовой состав и их роль в поддержании природных очагов ИКБ;

- изучить зараженность ИКБ собак;

-провести биохимические исследования сывороток крови животных, имеющих в НРИФ диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi.

Научная новизна. На ряде территорий области получены» в динамике данные по инфицированности иксодовых клещей боррелиями и вирусом КЭ. Апробированы методы лабораторной диагностики ИКБ у животных. Получены серологические и бактериологические доказательства циркуляции возбудителя боррелиоза у свободноживущих видов животных. Получены доказательства участия в поддержании природных очагов болезни 8 охотничьих видов, животных. Впервые на территории Кировской области проведены исследования по изучению зараженности ИКБ собак и получены серологические доказательства инфекции. Получены,-данные по некоторым биохимическим показателям крови у животных, чьи сыворотки в НРИФ имели диагностически значимые титры антител к В: burgdorferi.

Практическая значимость. Полученные результаты по-изучению ИКБ дополняют имеющиеся^ представления«' о функционировании' и особенностях природных очагов болезни. Дают возможность прогнозировать развитие эпизоотической ситуации. Проведенные исследования позволяют более эффективно осуществлять эпидемиологический и эпизоотологический надзор. Показана целесообразность проведения' НРИФ для исследования на зараженность боррелиями различных диких и домашних видов животных.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены:

-на 6-й научной конференции аспирантов и соискателей' «Науке нового века - знания молодых», ВГСХА, 2006 г., г. Киров;

- на Международной научно-практической конференции, посвященной 85-летию ВНИИОЗ «Современные проблемы природопользования, охотоведения и звероводства», 2007 г., г. Киров; на 8-й научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века —знания молодых», ВГСХА, 2008 г., г. Киров; на Ученом совете ФГОУ ВПО ВГСХА, протокол № 6, от 19.06.2008 г.; на 10-ой Всероссийской научно практической конференции «Региональные и муниципальные проблемы природопользования», 2008 г:, г. Кирово-Чепецк; на 2-й Международной научно-практической конференции «Современные проблемы охотничьего собаководства», 2009 г., г. Киров; на расширенном межлабораторном совещании отдела звероводства ГНУ ВНИИОЗ, протокол № 2 от 27.10.2009'г.

Основные положения, выносимые на защиту:

-Кировская область - зона высокого риска заражения иксодовыми клещевыми боррелиозами; охотничьи виды животных и собаки являются прокормителями переносчиков болезни - иксодовых клещей, входят в круг резервуарных хозяев боррелий и участвуют в поддержании природных очагов ИКБ; методы лабораторной диагностики, используемые в медицинской лабораторной практике, имеют высокую диагностическую ценность у охотничьих животных и собак.

Публикации. По материалам» исследования опубликовано 9 научных работ, в том числе в изданиях, рекомендуемых ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 121 странице. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа проиллюстрирована 14 таблицами и 22 рисунками. Список использованной литературы включает 327 источников, в том числе 182 на иностранных языках.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Перевозчикова, Мария Александровна

выводы

1. Территория Кировской области - зона высокого риска заражения иксодовыми клещевыми боррелиозами. Заболевание ежегодно регистрируется практически во всех административных районах. За последние 3 года средний уровень инфицированности клещей боррелиями составил 37,8 %.

2. Максимальные показатели заболеваемости населения ИКБ и КЭ регистрируют в центральных и северных районах Кировской области, расположенные в подзоне южной и средней тайги. В южных районах, расположенных в подзоне широколиственно-хвойных лесов, отмечаются наименьшие показатели заболеваемости по этим инфекциям.

3. Природные очаги иксодовых клещевых боррелиозов являются сочетанными с очагами клещевого энцефалита.

4. Реакция непрямой иммунофлуоресценции, используемая в медицинской лабораторной практике, является надежным методом диагностики боррелиоза у охотничьих видов животных и собак, при условии, что получение достоверных результатов реакции возможно лишь при использовании групповых видоспецифичных диагностических сывороток. Культуральный метод диагностики ИКБ у животных недостаточно эффективен по причине низкой частоты выделения возбудителя.

5. В результате серологических и бактериологических исследований установлено, что в природных очагах ИКБ в круг резервуарных хозяев и накопителей инфекции, кроме мышевидных грызунов, входят следующие виды животных: заяц-беляк (Lepus timidus L.)> лось (Alces alces L.), лисица (Vulpes vulpes L.), енотовидная собака (Nyctereutes procyonoides Gray), барсук (Meies melesL.), кабан (Sus s erofa L.), тетеревиные птицы (Lyrurus tetrixL., Tetrao nrogallus L.).

6. Учитывая то, что заяц-беляк (Lepus timidus L.), является охотничьим видом с достаточно высокой численностью на обширных территориях РФ, его можно рекомендовать в качестве тест - объекта в целях более глубокого изучения и прогнозирования эпизоотической ситуации непосредственно в природных очагах ИКБ.

7. Существенное повышение некоторых биохимических показателей сыворотки крови у лосей (Alces alces), имеющих диагностически значимые титры антител к В. burgdorferi по сравнению с неинфицированными, свидетельствует о патологическом влиянии возбудителя на организм диких животных.

8. Полученные результаты позволяют также отнести домашних собак к индикаторам неблагополучия местности по ИКБ и к резервуарам боррелиозной инфекции на территории населенных пунктов и окружающих их территорий.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Учитывая сложную эпизоотологическую и эпидемическую ситуацию в отношении природных очагов ИКБ, рекомендуется в дополнение к комплексу мероприятий по профилактике иксодовых клещевых боррелиозов организация проведения систематического мониторинга за циркуляцией возбудителя боррелиоза в дикой природе. При организации работы важно взаимодействие и координация различных служб и ведомств.

2. Апробированные методы рекомендуются для использования в ветеринарной лабораторной практике, а также в научно-исследовательской и практической деятельности медицинских и ветеринарных специалистов для объективной прогностической оценки эпидемиологической и эпизоотологической ситуации в очагах ИКБ.

3. В целях профилактики ИКБ и других клещевых инфекций на территории городов, других населенных пунктов и прилегающим к ним территориях рекомендуется регулировать популяцию бродячих собак, что предотвращает возможность появления новых очагов инфекции и снижает риск заражения людей.

4. Полученные новые данные по эпизоотологии ИКБ рекомендуем использовать в учебном процессе при изложении соответствующих курсов на медицинских, биологических и ветеринарных факультетах учебных заведений, а также включить в учебные руководства по эпидемиологии и эпизоотологии и специальную литературу для медицинских работников, ветеринарных врачей и биологов.

5. Разработаны наставления по мониторингу иксодовых клещевых боррелиозов для прогнозирования развития эпизоотий в природных очагах и профилактики болезни, которые рассмотрены на расширенном межлабораторном совещании отдела звероводства ГНУ ВНИИОЗ (протокол № 2 от 17.09.2009) и направлены на рассмотрение профильных секций Российской сельскохозяйственной академии.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Перевозчикова, Мария Александровна, Киров

1. Ананьева Л.П. Боррелиоз Лайма и его ревматические проявления: автореф. дис. докт. мед. наук. М., 1999. 56 с.

2. Ананьева Л.П., Студенцов Е.Е., Левин Э. Определение антиборрелиозных антител методом иммуноблоттинга при боррелиозе Лайма // Клиническая лабораторная диагностика. 2002. № 6. С. 45-47.

3. Ананьева Л.П. Болезнь Лайма // Справочник поликлинического врача. 2006. № 1.С. 29-33.

4. Ананьева Л.П. Иксодовые клещевые боррелиозы (болезнь Лайма) влпрактике терапевта // Российский медицинский журнал. 2007. № 1. С. 37-41.

5. Антибактериальная терапия как способ профилактики иксодовых клещевых боррелиозов / Э.И. Коренберг и др. II Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1996. № 2. С. 3-8.

6. АрумоваЕ.А., ВронцоваТ.В. Клещевой боррелиоз (болезнь Лайма) в России // Дезинфекционное дело. 2000. № 2. С. 12.

7. Байрак В.А. Практикум по микробиологии. М.: Колос, 1980. С. 44-55.

8. Балашов Ю.С., Амосова Л.И., Григорьева Л.А. Трансоовариальная и трансфазовая передача боррелий таежным клещам Ixodes persulcatus II Паразитология. 1998. Т. 32, № 6. С. 489-493.

9. Берестов В.А. Клиническая биохимия пушных зверей. Петрозаводск: Карелия, 2005. 160 с.

10. Бессонов A.C. Определение мест обитания иксодовых клещей и профилактика вызываемых и передаваемых ими болезней // Ветеринария. 2004. № 12.С. 54-56.

11. Бирюков A.A. Новый препарат «Адвантикс» как средствопрофилактики заражения собак боррелиозом // Ветеринарная клиника. 2004. № 3.С. 13.

12. Брылин А.П. Экофлис инсектицид нового поколения // Ветеринария. 2006. № 2. С. 12-14.

13. Ванеева Г.Г. Опыт диспансерного наблюдения больных, перенесших клещевой энцефалит в Пермской области: автореф. дис. . канд. мед. наук. Пермь, 1971. 16 с.

14. Васильева И.С., Наумов Р.Л. Паразитарная система болезни Лайма, состояние вопроса. Сообщение 1. Возбудители и переносчики // Acariña. 1996. Vol. 4, No. 1-2. Р.53-75.

15. Верета Л.А., КантерВ.М. Клещевой энцефалит в Хабаровском крае. Хабаровск, 1963. 216 с.

16. Ветеринарная микробиология / П.А. Емельяненко и др.. М.: Колос, 1982.304 с.

17. Взаимосвязь среды обитания и заболеваемости человека природноочаговыми инфекциями / Л.П. Абросимова и др. // Санитарно-гигиенические аспекты охраны здоровья человека: мат. международ, науч.-практ. конф. Казань, 1997. С. 91-93.

18. Визен Э.М. Об атипичных формах клещевого энцефалита // Журнал невропатологии и психиатрии имени С.С.Корсакова. 1963. Т. 63, №10. С. 1462-1466.

19. Воробьева H.H. Клиника, лечение и профилактика иксодовых клещевых боррелиозов. Пермь: Урал-Пресс, 1998. 136 с.

20. Генетические варианты Borrelia afzelii — одного из возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов / И.А. Фадеева и др. // Молекулярнаягенетика, микробиология и вирусология. 2005. № 3. С. 18-22.

21. Глинских Н.П., Федотова Т.Т., Перескокова И.Г. Клиника, диагностика, лечение и профилактика клещевого энцефалита, Лайм-боррелиоза и геморрагической лихорадки с почечным синдромом: методическое руководство. Екатеринбург, 1994. 72 с.

22. Горелова Н.Б. Музей боррелий Российского центра по боррелиозам // Проблемы клещевых боррелиозов. М., 1993. С. 31-44.

23. Горелова Н.Б., Коренберг Э.И., ПостикД. Микстинфицированность переносчиков и носителей в сочетанном очаге иксодовых клещевых боррелиозов // Природно-очаговые инфекции в России: тез. докл. всерос. науч.- практ. конф. Омск, 1998. С. 76-77.

24. Григорян Е.В., Коренберг Э.И., Воробьева H.H. Первые данные о клиническом течении моноцитарного эрлихиоза в России // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2000. № 6. С 20-23.

25. Давиденков С.Н. Клинические особенности атипической формы клещевого энцефалита // Клиническая медицина. 1952. № 2. С. 19-24.

26. Давыдова Н.С., Харитоненков И.Г., Бурлаков В.А. Серологическая диагностика болезни Лайма у собак // VII международ, конф. по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных. 1999. М., С. 292-294.

27. Деконенко Е.П., Уманский К.Г., Вирич И.Е. Основные синдромы неврологических нарушений при Лайм-боррелиозе // Терапевтический архив. 1995. №11. С. 52-53.

28. Деконенко Е.П. Лайм-боррелиоз. Инфекционные болезни. Руководство по внутренним болезням / под общ. ред. В.И.Покровского. М.: Медицина, 1996. С. 428-434.

29. Деконенко Е.П. Клинические проявления и особенности Лайм-боррелиоза// Российский медицинский журнал. 2005. № 1. С. 52-55.

30. Диагностика, лечение и профилактика иксодовых клещевых боррелиозов в Ульяновской области / A.B. Меркулов и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2003. № 2. С. 78-80.1 I '95

31. Доклад «О санитарно-эпидемиологической обстановке в Кировской области в 2005 году» / Е.А. Белоусова и др., под общ. ред. Г.Н. Грухиной. Киров, 2006. С. 128-136.

32. Доклад «О санитарно-эпидемиологической обстановке в Кировской области в 2007 году» / Е.А. Белоусова и др., под общ. ред. Г.Н. Грухиной. Киров, 2008. С. 134-144.

33. Доклад «О санитарно-эпидемиологической обстановке в Кировской области в 2008 году» / Е.А. Белоусова и др., под общ. ред. Г.Н. Грухиной. Киров, 2009 С. 172-182.

34. Доклад «О санитарно-эпидемиологической обстановке в Кировской области в 2002 году» / Г.Н. Грухина и др., под общ. ред. Л.П. Абросимовой. Киров, 2003 С. 117-124.

35. Дубов А.В. Клиника клещевого энцефалита в Западной Сибири (итоги трехлетних наблюдений) // Вирусные нейроинфекций: тез. докл. XI сессии института вирусологии. 1958. Т. 1. С. 29-30.

36. Егорова Т.В. Клинико-иммунологическая характеристика болезни Лайма (клещевого боррелиоза) у детей: дис. . канд. мед. наук. Киров, 1998. 142 с.

37. Енгашев С.В., Гришин В.В., ШемяковаС.А. Капли инсектоакарицидные «Барс» для собак и кошек//Ветеринария. 2005. № 7. С. 16.

38. Инструкция по применению альбумина бычьего или бараньего меченного родамином сухого. М., 2003.

39. Инструкция по применению комплекта реагентов для выделения РНК/ДНК из клинического материала «РИБО-сорб». М.: ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзор, 2008.

40. Инструкция по применению комплекта реагентов для получения кДНК на матрице ДНК «Реверта-L». М.: ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзор, 2008.

41. Инструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного выявления антигена вируса клещевого энцефалита. Новосибирск: ЗАО Вектор-Бест, 2007

42. Катаева Т.С. Изучение развития иксодовых клещей как критерий выбора акарицида // Ветеринария. 2006. № 7. С. 35-37.

43. Кербабаев Э.Б. Борьба с иксодовыми клещами // Ветеринария. 1987. № 3. С. 59-61.

44. Кирилловских В.А., Стрелец И.П. Состояние рынка ветеринарных инсектоакарицидных препаратов // Ветеринария. 2005. № 12. С. 6-9.

45. Кирьянова Е.В. Иксодовые клещевые боррелиозы // Медицинская сестра. 2005. № 5 С. 23-28.

46. Клещевой боррелиоз в Ярославской области / Т.А. Дружинина и др. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2002. № 2. С. 9-11.

47. Клещевой боррелиоз в Удмуртии / С.Г. Шадрин и др. // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2004. № 5. С. 10-14.

48. Клещевой боррелиоз на территории Алтайского края / В.П. Прейдер и др. // Медицинская география на пороге XXI века: X всерос. конф. с международ, участием по медицинской географии. СПб., 1999. С. 143-144.

49. Клинические варианты микстинфекций (клещевой энцефалит с Лайм-боррелиоз) / С.О. Вельгин и др. // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2007. № 3. С. 38-41.

50. Клинические и серологические проявления Лаймской болезни в России / Л.П. Ананьева и др. // Терапевтический архив. 1995. № 11. С. 38-42.

51. Клинические проявления Лайм-боррелиоза на Среднем Урале и их ассоциации с геновидами Borrelia burgdorferi / О.М. Лесняк и др. // Терапевтический архив. 1997. № 5. С. 9-12.

52. Клинический полиморфизм нейроборрелиоза в поздней стадиизаболевания / С.О. Бельгии и др. // Журнал неврологии и психиатрии имени С.С. Корсакова. 2006. Т. 106, № 3. С. 48-51.

53. Ковалевский Ю.В., Горелова Н.Б., Коренберг Э.И. Распределение микстизолятов боррелий на территории природного очага // Природно-очаговые инфекции в России: тез. докл. всерос. науч.- практ. конф. Омск, 1998. С. 74-76.

54. Коваленко В.Н. Клиника клещевого энцефалита и дифференцируемых с ним заболеваний в Кемеровской области: эпидемиологические, клинические, серологические и вирусологические исследования: автореф. дис. докт. мед. наук. М., 1972. 54 с.

55. Козлов С.С., Усков А.Н., Крумгольц В.Ф. Болезнь Лайма (иксодовые клещевые боррелиозы) / под общ. ред. Ю.В. Лобзина и А.Ф. Никитина. СПб., 1998. 18 с.

56. Кондратьев В.Г., Быкова Л.А., Полторацкая Т.Н. Эпидемическая ситуация по клещевому энцефалиту и болезни Лайма в г. Томске // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1998. № 1. С. 52-53.

57. Коренберг Э.И. Что такое природный очаг. М.: Знание, 1983. 64 с.

58. Коренберг Э.И., Насонова В.А. Методические указания по эпидемиологии, диагностике, клинике и профилактике болезни Лайма. М., 1991а. 60 с.

59. Коренберг Э.И., Кузнецова Р.И., Ковалевский Ю.В. Основные черты эпидемиологии болезни Лайма на Северо-Западе СССР // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 19916. №'3. С. 14-18.

60. Коренберг Э.И. Проблема болезни Лайма в России // Проблемы клещевых боррелиозов. М., 1993а. С. 13-21.

61. Коренберг Э.И. Болезнь Лайма: Лекция // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 19936. № 1. С. 48-51.

62. Коренберг Э.И. Инфекции группы Лайм-боррелиоз иксодовые клещевые боррелиозы в России // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1996. № 3. С. 14-18.

63. Коренберг Э.И. Эрлихиозы новая для России проблема инфекционной патологии // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1999. № 4. С. 10-16.

64. Коренберг Э.И., Литвин В.Ю. Природная очаговость болезней: развитие концепций к исходу лета // Паразитология. 1999. № 3. С. 179-191.

65. Коренберг Э.И. Изучение и профилактика микстинфекций, передающихся иксодовыми клещами // Вестник Российской академии медицинских наук. 2001. № 11. С. 41-45.

66. Коренберг Э.И. Иксодовые клещевые боррелиозы: основные итоги изучения и профилактики в России // Клещевые боррелиозы: мат. науч.-практ. конф. Ижевск, 2002. С. 165-172.

67. Коренберг Э.И. Микстинфекции, передающиеся иксодовыми клещами: современное состояние проблемы // Успехи современной биологии. 2003. № 5. С. 475-486.

68. Коренберг Э.И. Происхождение возбудителей природноочаговых инфекций//Природа. 2006. № 10. С. 33-40.

69. Короткое Ю.С., Кисленко Г.С., Чунихин С.П. Результаты лабораторных и полевых испытаний действий эктомина на таежного клеща // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1991. № 4. С. 18-20.

70. Коротков Ю.С., Кисленко Г.С., Чунихин С.П. Итоги испытания дилора в борьбе против таежного клеща // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1993. № 1. С. 18-21.

71. Кравчук Л.Н., Коренберг Э.Г., Калинин М.И. Клинические варианты Лайм-боррелиоза в Кемеровской области // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1993. № 1. С. 29-31.

72. Краткий курс медицинской микробиологии / Г.М. Шуб и др.. Саратов, 2001. 340 с.

73. Критерии позитивности для антител в методе иммунного блоттинга при болезни Лайма / В.Г. Барскова и др. // Научно-практическая ревматология. 2001. № 5. С. 19-23.

74. Крумгольц В.Ф. Этиотропная терапия и экстренная антибиотикопрофилактика иксодовых клещевых боррелиозов: автореф. дис. . канд. мед. наук. СПб., 1999. 24 с.

75. Крючечников В.Н., Коренберг Э.И. Серологическая диагностика иксодовых клещевых боррелиозов: состояние проблемы // Природно-очаговые инфекции в России: тез. докл. всерос. науч.- практ. конф. Омск, 1998. С. 73-74.

76. Курдина М.И. Современная диагностика и терапия болезни Лайма // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2004. № 2. С. 29-33.

77. Кузнецова И.А. Эпизоотическая обстановка и методы борьбы с иксодовыми клещами в Лабинском районе Краснодарского края // Ветеринария. 2005. № 10. С. 30-31.

78. Курдина М.И. Современная диагностика и терапия болезни Лайма // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2004. № 2. С. 29-33.

79. Куфко И.Т., Мельников В.Г., Андреева Е.А. Сравнительное изучение результатов серологической диагностики Лайм-боррелиоза в реакции непрямой иммунофлюоресценции и иммуноферментном анализе // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. № 3. С. 34-37.

80. Лабораторная диагностика весенне-летних инфекций в Екатеринбурге в эпидемический сезон клещевого энцефалита /

81. B.Г. Мельников и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. № 7.1. C. 21-23.

82. Лепехин A.B., Лукашова Л.В., РузаеваЛ.А. Вопросы антибиотикопрофилактики иксодовых клещевых боррелиозов // Природно-очаговые инфекции в России: тез. докл. всерос. науч.- практ. конф. Омск, 1998. С. 93-94.

83. Лесняк О.М., ЛирманА.В., АнтюфьевВ.Ф. Поражение сердца при Лаймовской болезни // Клиническая медицина. 1994. № 1. С. 45-47.

84. Ливанова H.H. Экологические связи таежного клеща и его хозяев с возбудителями иксодовых клещевых боррелиозов (на примере природного лесостепного очага Приобья): автореф. дис. . канд. биол. наук. Новосибирск,2004. 24 с.

85. Лихачева Т.В. Распространение и эпидемическое проявление клещевого энцефалита и иксодовых клещевых боррелиозов: сравнительный анализ на примере Удмуртии: автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2004. 20 с.

86. Лобзин Ю.В., Крумгольц В.Ф., Антонов B.C. Экстренная антибиотикопрофилактика клещевого боррелиоза // Актуальные проблемы природно-очаговых инфекций: мат. II республ. науч.- практ. конф. Ижевск, 1998. С. 260-261.

87. Лобзин Ю.В., Усков А.Н., Козлов С.С. Лайм-боррелиоз (иксодовые клещевые боррелиозы). СПб: Фолиант, 2000. 160 с.

88. Лобзин Ю.В., Козлов С.С., Усков А.Н. Патогенез и клинико-патогенетическая классификация иксодовых клещевых боррелиозов // Клещевые боррелиозы: мат. науч.- практ. конф. Ижевск, 2002. С. 185-189.

89. Магазаник С.С., Погодина В.В. О кожно-эритемных реакциях при клещевом энцефалите // Клиническая медицина. 1960. Т. 38, № 9. С. 59-64.

90. Магазаник С.С. Клиника клещевого энцефалита в Свердловской области и лечение остаточных явлений физическими методами: автореф. дис. докт. мед. наук. Свердловск, 1962. 36 с.

91. Макаренко Л.А., КурдинаМ.И., Побединская Н.Н. Состояние иммунной системы при болезни Лайма // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2002. № 3. С. 9-11.

92. Макаров В.В., БетлингЕ.С., Тимофеев Б.А. Боррелиоз Лайма // Ветеринария. 1999. № 7. С. 11-13.

93. Манзенюк И.Н., Манзенюк О.Ю. Клещевые боррелиозы (болезнь Лайма). Кольцово, 2005. 85 с.

94. Многолетняя динамика эпизоотической активности природных очагов иксодового клещевого боррелиоза западного Урала / Ю.В. Ковалевский и др. // Клещевые боррелиозы: мат. науч.- практ. конф. Ижевск, 2002. С. 149151.

95. Москвитина Г.Г., Коренберг Э.И., ГорбаньЛ.Я. Присутствиеборрелий в кишечнике и слюнных железах спонтанно зараженных взрослых клещей Ixodes persulcatus schulze при кровососании // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1995а. № 3. С. 16-20.

96. Москвитина Г.Г., Коренберг Э.И., Спилман Э.О. О частоте генерализованной инфекции у взрослых голодных клещей рода Ixodes в очагах боррелиозов России и США // Паразитология. 19956. Т. 29. Вып. 5. С. 353-359.

97. Москвитина Г.Г. Экстренная профилактика иксодовых клещевых боррелиозов на основе индикации возбудителя в присосавшихся клещах: автореф. дис. канд. мед. наук. М., 1996. 56 с.

98. Намалофеева H.A., АкбаевМ.Ш. Распространение иксодовых клещей в Рязанской области // Ветеринария. 2006. № 2. С. 36-39.

99. Наумов P.JI. Возможность применения аттрактантов для подавления популяций пастбищных иксодовых клещей и направление их поиска//Паразитология. 1990. Т. 24. Вып. 2. С. 97-101.

100. Наумов P.JL, Витлин JIM. Реакция таежных клещей на аттрактант. Сообщение I. Контакт нимф с аттрактивно-акарицидными гранулами в эксперименте // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1995. №3. С. 49-51.

101. Наумов P.JI., Витлин JI.M., Пепельницкая Н.П. Реакция таежных клещей на аттрактант. Сообщение II. Применение аттрактивно-акарицидных гранул в полевом эксперименте // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1996. № 3. С. 22-24.

102. Наумов P.JL, Гутова В.П., Ершова A.C. Реакция таежных клещей на аттрактант. Сообщение III. Темпы изъятия клещей из популяции // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1997. № 1. С. 41-44.

103. Наумов Р.Л., Васильева И.С. Пораженность населения боррелиями и заболеваемость болезнью Лайма // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2005. № 2. С. 40-42.

104. Никитин П.Н. Млекопитающие носители прородноочаговых инфекций на территории Нижегородской области // Зоологическиеисследования регионов России и сопредельных территорий: мат. международ, науч. конф. Нижний Новгород, 2002. С. 139-141.

105. Новый препарат Бовозан для борьбы с иксодовыми клещами /

106. A.А. Бурова и др. // Ветеринария. 2000. № 5. С. 8-30.

107. Оберт А.С., Дроздов В.Н., Рудакова С.А. Иксодовые клещевые боррелиозы: нозогеографические и медико-экологические аспекты. Новосибирск: Наука, 2001. 110 с.

108. Огурцов А.А. Оптимизация эпидемиологического надзора и профилактических мероприятий в сочетанных очагах клещевого энцефалита и иксодового клещевого боррелиоза: автореф. дис. . канд. мед. наук. Тюмень, 2004. 24 с.

109. Оптимизация серологической диагностики Лайм-боррелиоза /

110. B.В. Базарный и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2003. № 12.1. C. 49-50.

111. Павловский Е.Н. Природная очаговость и понятие ландшафтной эпидемиологии трансмиссивных болезней человека // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1944. № 6. С. 29-38.

112. Потекаев Н.С., ПотекаевН.Н. Болезнь Лайма и обусловленные ею поражения кожи // Вестник дерматологии и венерологии. 2006. № 6. С. 3-9.

113. ПустовитН.С. Иксодовые клещевые боррелиозы (болезнь Лайма) у собак: автореф. дис. канд. биол. наук. М., 2003. 24 с.

114. Резервуарные хозяева и переносчики иксодовых клещевых боррелиозов / Э.И. Коренберг и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1997. № 6. С. 36-38.

115. Рязанцева Г.А., ХазоваТ.Г., Куркатов С.В. Акарицид нового поколения — аттрактивно-акарицидные гранулы // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1998. № 4. С. 22-24.

116. Сбор, учет и подготовка к лабораторному исследованию кровососущих членистоногих переносчиков возбудителей природно-очаговых инфекций: Методические указания. М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2002. 55 с.

117. Сердюкова Г.В. Иксодовые клещи фауны СССР. M.-JL: АН СССР, 1956. 122 с.

118. Скрипникова И.А. Клинико-серологическая характеристика вариантов болезни Лайма: автореф. дис. канд. мед. наук. М., 1992. 26 с.

119. Скрипникова И.А., Ананьева Л.П., БарсковаВ.Г. Результаты клинико-серологического обследования 60 пациентов с Лаймской болезнью // Терапевтический архив. 1992. Т. 64, № 5. С. 93-98.

120. Смирнова О.И. О резистентности иксодовых клещей к акарицидам // Ветеринария. 1985. № 3. С. 41-44.

121. Снарская Е.С., Лезвинская Е.М., Овсянникова Г.В. Дерматологическая симптоматика болезни Лайма // Российский журнал кожных и венерический болезней. 2006. № 6. С. 23-27.

122. Современная эпидемиологическая ситуация по клещевому энцефалиту в-Кировской области / А.Л. Бондаренко и др. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2002. № 3. С. 42-45.

123. Стир A.C. Лайм-артрит: поражение суставов при Лайм-боррелиозе в США // Терапевтический архив. 1995. №• 11. С. 43-45.

124. Фадеева И.А. Генотипическая. гетерогенность спирохет Borrelia afzelii одного из возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов: автореф. дис. канд. мед. наук. М., 2006. 20 с.

125. Филиппова НА. Таксономические; аспекты, переноса возбудителя ; болезни Лайма//Паразитология. 19901* Т. 24. Вып. 4. С^ 257-267.

126. Фоменко Н.В., Романова Е.В., Мельникрва.О.В. Детекция ДНК боррелий комплекса; Borrelia, Burgdorferi sensu lato в крови;, больных иксодовыми клещевыми; боррелиозами // Клиническая лабораторная! диагностика. 2006. № 8. С. 35-37.

127. Фризен В.И. Эпидемиологическая: характеристика: и клинико-лабораторная диагностика заболеваний; передающихся: иксодовыми; клещами (на примере Прикамья): автореф. дисканд. хмед. наук. Пермь, 2005. 24 с.

128. Характер поражений нервной системы при клещевом боррелиозе / Е.П. Деконенко и др. // Клещевые боррелиозы: мат. науч.- практ. конф. Ижевск, 2002. С. 118-121.

129. Христиановский П.И., Белименко В.В. Иксодовые клещи в условиях современного города // Ветеринария. 2004. № 4. С. 33-34.136.^ШаповалА.Н:, Кузнецова Р1И!,Чурилова^A.A. ©клещевой эритеме// Проблемы клещевых боррелиозов. М., 1993. С. 56-65.

130. Шевкопляс В.Н. Акарицидные препараты в решении регионарных противопаразитарных программ //Ветеринария. 2006. № 10. С. 7-9.

131. Шетекаури С.А., МарьинаН.М., Солохина Д.В. Эпидемиологическая характеристика иксодовых клещевых боррелиозов в Красноярском крае // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2005. № 1. С. 78-80.

132. ШинскийГ.Э., Самсонов В.А., Ватутина Н.А. Клиническая оценка полимеразной цепной реакции при болезни Лайма // Вестник дерматологии и венерологии. 2000. № 4. С. 11-13.

133. Шмидт Т.Е. Дифференциальная диагностика рассеянного склероза // Неврологический журнал. 2004. № 3. С. 4-15.

134. Шубин Н.В. Клиника клещевого энцефалита в Западной Сибири // Сб. трудов межинститутской' науч. конф., посвященной 50-летию Томского НИШС. М., 1958. Т. 8. С. 151-165.

135. Шуляк Б.Ф. Болезнь Лаймы у собак //Практик. 2003. № 7-8. С. 90-97.

136. Экология иксодовых клещей и эпизоотология передаваемых ими заболеваний / Т.В. Новикова и др. // Ветеринария. 2004. № 11. С. 32-34.

137. Эпидемиология иксодового клещевого боррелиоза на севере Волго-Вятского региона / Е.О. Утенкова и др. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2004. № 2. С. 7-9.

138. Этиотропная терапия клещевого боррелиоза (болезни Лайма) / К.С. Иванов и др. // Клиническая медицина. 1994. Т 72, № 4. С. 60-61.

139. A bacterial genome in flux: the twelve linear and nine circular extrachromosomal DNAs in an infectious isolate of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi / S. Casjens et al. // Mol. Microbiol. 2000. Vol. 35. P. 490516.

140. A vaccine consisting of recombinant Borrelia burgdorferi outer-surface protein A to prevent Lyme disease: Recombinant outer-surface protein a Lyme disease vaccine study consortium / L.H. Sigal et al. // N. Engl. J. Med. 1998. Vol. 339. P. 216-222.

141. Abilities of OspA proteins from different seroprotective groups of

142. Borrelia burgdorferi to protect hamsters from infection / S.D. Lovrich et al. // Infect. Immun. 1995. Vol. 63. P. 2113-2119.

143. Active immunization with pC protein of Borrelia burgdorferi protects gerbils against B. burgdorferi infection / V. Preac-Mursic et al. II Infection. 1992. Vol. 20. P. 342-349.

144. Adult Ixodes dammini on rabbits: A hypothesis for the development and transmission of Borrelia burgdorferi / J.L. Benach et al. II J. Infect. Dis. 1987. Vol. 155. P. 1300-1306.

145. Afzelius A. Verhandlungen der dermatologicher Gesselschaft zu Stokholm, December 1909 // Arch. Dermatol. Syph. 1910. Vol. 101. S. 404-407.

146. Alban P.S., Johnson P.W., Nelson D.R. Serum-starvation-induced changes in protein synthesis and morphology of Borrelia burgdorferi II Microbiol. 2000. Vol. 146, Pt. 1. P. 119-127.

147. An avian reservoir (Turdus merula) of the Lyme borreliosis spirochetes / P.F. Humair et al. II Zentralbl. Bakteriol. 1998. Bd. 287. S. 521-538.

148. An optimized PCR leads to rapid and highly sensitive detection of Borrelia burgdorferi in patients with Lyme borreliosis / S. Priem et al. I I J. Clin. Microbiol. 1997. Vol. 35. P. 685-690.

149. An OspA serotyping system for Borrelia burgdorferi based on reactivity with monoclonal antibodies and OspA sequence analysis / B. Wilske et al. II J. Clin. Microbiol. 1993. Vol. 31. P. 340-350.

150. Analysis of T-limphocytes cloned form the synovial of a with Lyme arthritis / H. Yssel et al. // Int. Immunol. 1990. Vol. 2. P. 1081-1089.

151. Anderson J.F., Magnarelli L.A. Vertebrate hosts relationships and distribution of ixodid ticks and insects (Acari: Ixodidae) in Connecticut, USA // J. Med. Entomol. 1980. Vol. 17. P. 314-323.

152. Anderson J.F., Magnarelli L.A. Avian and mammalian hosts for spirochete-infected ticks and insect in a Lyme disease focus in Connecticut // Yale J. of Biology and Medicine. 1984. Vol. 57. P. 627-641.

153. Anderson J.F. Mammalian and avian reservoirs for Borrelia burgdorferi II Ann. NY Acad. Sei. 1988. Vol. 539. P. 180-191.

154. Anderson J.F., Magnarelli L.A., Stafford K.C. Bird-feeding ticks transstadially transmit B. burgdorferi that infect Syrian hamsters // J. Wildlife Dis. 1990. Vol. 26. P. 1-10.

155. Anguita J., Hedrick M.N., Fikrig E. Adaptation of Borrelia burgdorferi in the tickandthe mammalian host//Ferns. Microbiol. Rew. 2003. Vol. 27. P. 493-504.

156. Antibodies to Borrelia burgdorferi in deer and raccoons I I L.A. Magnarelli et al. II J. Wildlife Dis. 1991. Vol. 27. P. 562-568.

157. Antibodies to Borrelia burgdorferi in dogs in Hokkaido / E. Isogai et al. // Med. Microbiol. Immunol. 1990. Vol. 34. P. 1005-1012.

158. Antibodies to Borrelia burgdorferi in New England horses: serologic survey / L.C. Marcus et-al. I I Am. J. Vet. Res. 1985. Vol. 46. P. 2570-2571.

159. Antigenic variability of Borrelia burgdorferi / B. Wilske et al. II Ann. NY Acad. Sei. 1988. Vol. 539. P. 126-143.

160. Antigenically variable Borrelia burgdorferi isolated from cottontail rabbits and Ixodes dentatus in rural and urban areas / J.F. Anderson et al. // J. Clin. Microbiol. 1989. Vol. 27. P. 13-20.

161. Appel M.J., Allan S., Jacobson R.H. Experimental Lyme disease in dogs produces arthritis and persistent infection // J. Infect. Dis. 1993. Vol. 167, No3. P. 651-654.

162. AsbrinkE., Hovmark A. Successful cultivation of spirochetes from skin lesions of patients with erythema chronicum migrans Afzelius and acrodermatitis chronica atrophicans // Acta Path. Microbiol. Immunol. Scand. Sect. B. 1985. Vol. 93. P. 161-163.

163. Azithoromycin versus penicillin V for the treatment of early Lyme borreliosis / K. Weber et al. // Infection. 1993. Vol. 21. P. 367-372.

164. Bannwarth A. Chronische lymphozyt are meningitis, entzund-liche Polyneuritis und Pheumatismus // Arch. Psyhiat. Nervenkr. 1941. Vol. 113. P. 284376.

165. Baradaran-Dilmahani R., StanekG. In vitro susceptibility of thirty Borrelia strains from various sources against eight antimicrobial chemotherapeutics // Infection. 1996. Vol. 24. P. 60-63.

166. Baranton G., Marti RasN., PosticD. Borrelia burgdorferi, taxonomy, pathogenicity and spread // Ann. Med. Interne (Paris). 1998a. Vol. 149. P. 455-458.

167. BarantonG., Marti RasN., PosticD. Molecular epidemiology of the aetiological agents of Lyme borreliosis // Wien. Klin. Wochenschr. 1998b. Vol. 110. P. 850-855.

168. Barbour A.G., TessierS.L., Todd W J. Lyme disease spirochetes and ixodid tick spirochetes share a common surface antigenic determinant defined.by a monoclonal antibody // Infect. Immun. 1983. Vol. 41. P: 795-804.

169. Battaly G.R:, FishD., DowlerR.C. The seasonal occurrence of Ixodes dammini and Ixodes dentatus (Acari: Ixodidae) on birds in a Lyme disease endemic area of southeastern New York State //J. NY Entomol. Sei. 1987. Vol.95. P! 461-468.

170. BelongiaE.A. Epidemiology and" impact of coinfections acquired from Ixodes ticks // Vector Borne and Zoonotic Dis. 2002. Vol. 2, No 4. P. 265-273.

171. Benach J.L., BoslerE.M., HanrahanJ.P. Spirochetes isolated from the blood of patients with Lyme disease //N. Engl. J. Med. 1982. Vol. 308. P. 740-742.

172. Bloodstream invasion in early Lyme disease: results from a prospective, controlled, blinded study using the polymerase chain reaction / J.I. Goodman et al. //Am. J. Med. 1995. Vol. 99. P. 6-12.

173. Borrelia burgdorferi in the central nervous system: experimental and clinical evidence for early invasion / J.C. Garcia-Monco et al. // J. Infect. Dis. 1990: Vol. 161. P. 1187-1193.

174. Borrelia burgdorferi RevA antigen is a surface-exposed outer membrane protein whose expression is regulated in response to environmental temperature and pH / J.A. Carroli et al. // Infect. Microbiol. 2001. Vol. 69. P. 5286-5293.

175. Borrelia burgdorferi sp. nov.: etiologic agent of Lyme disease / R.C Johnson et al. // Int. J. Syst. Bacteriol. 1984. Vol. 34. P. 496-497.

176. Borrelia sinica sp. nov., a Lyme disaese-related Borrelia speties isolated in China / T. Masuzawa et al. // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2001. Vol.51. P. 1817-1824.

177. Borreliosis in dogs from southern Connecticut / L.A. Magnarelli et al. // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1985. Vol. 186. P. 955-959.

178. Borreliosis in equids in. northeastern United States / L.A. Magnarelli et al. // Am. J. Vet. Res. 1988. Vol. 49. P. 359-362.

179. Bradley J.F., Johnson R.C., Goodman-J.L. The persistence of spirochetal nucleic acids in active Lyme arthritis//Am. Intern. Med. 1994. Vol. 120. P: 487-489.

180. Brorson O., BrorsonS. Transformation of cystic forms of Borrelia burgdorferi to normal, mobile spirochetes // Infection. 1997. Vol. 25. P. 240-246.

181. Brorson O., BrorsonS. In vitro conversion of Borrelia burgdorferi to cystic forms in spinal fluid, and transformation to mobile spirochetes by incubation in BSK-H medium // Infection. 1998. Vol. 26. P. 144-150.

182. Brunetl.R., Spielman A., Telford III S.R. Short report: density of Lyme disease spirochetes within deer ticks collected from zoonotic sites // Am. J. Trop. Med. Hyg. 1995. Vol. 53. P. 300-302.

183. Bunikis J., Olsen B., WestmanG. Variable serum immunoglobulin responses against different Borrelia burgdorferi sensu lato species in a population at risk for and patients with Lyme disease // J. Clin: Microbiol. 1995. Vol. 33, No 6. P. 1473-1478.

184. Burgdorfer W. Vector / host relationship of the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdorferi II Rheum. Dis. Clin. North Am. 1989. Vol. 15. P. 775-787.

185. Burgess E.C. Experimental inoculation of dogs with Borrelia burgdorferi II Zentralbl. Bakteriol. 1986. Bd. 263. S. 49-54.

186. Burgess E.C., Gillette D., Pickett J.P. Arthritis and panuveitis as manifestations of Borrelia burgdorferi infection in a Wisconsin pony // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1986. Vol. 189. P. 1340-1342.

187. Burgess E.C., Gendron-Fitzpatrick A., Wright W.O. Arthritis and systemic disease caused by Borrelia burgdorferi in a cow // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1987. Vol. 191. P. 1468-1470.

188. Burgess E.C. Borrelia burgdorferi infection in Wisconsin horses and cows II Ann. NY Acad. Sei. 1988. Vol. 539. P. 235-243.

189. Burgess E.C., Gendron-Fitzpatric A., MattisonM. Foal mortality, associated with natural infection of pregnant' mares with Borrelia burgdorferi II Proc. 5th Int. Conf. Equine. Infect. Dis. 1989. P. 217-220.

190. Burgess E.C., WachalM.D., ClevenT.D. Borrelia burgdorferi infection in dairy cows, rodents, and birds from four Wisconsin daily farms I I Vet. Microbiol. 1993. Vol. 35. P. 61-77.

191. Bushmich S.L., Post J.E. Lyme borreliosis in dairy cattle // V Int. Conf. on Lyme Borreliosis. Arlington. VA. Abstract 172, 1992.

192. Bushmich S.L. Lyme borreliosis in domestic animals // J. Spirochetal and Tick-Borne Dis. 1994. Vol. 1, No 1. P. 24-28.

193. Canine exposure to Borrelia burgdorferi and prevalence of Ixodes dammini risk in the northeastern United States / T.J. Daniels et al. II J. Med. Entomol. 1993. Vol. 30, No l.P.171-178.

194. Carditis in Lyme disease susceptible and resistant strains of laboratory mice infected with Borrelia burgdorferi / A.L. Armstrong et al. II Am. J. Trop. Med: Hyg. 1992. Vol. 42, No 2. P. 249-258.

195. Carey A.B., Krinsky W.L., Main A.J. Ixodes dammini (Acari: Ixodidae) and associated ixodid ticks in southcentral Connecticut, USA // J. Med. Entomol.1980. Vol. 17. P. 89-99.

196. Clinical and epizootiologic characteristics of dogs seropositive for Borrelia burgdorferi in Texas / N.D. Cohen et al. // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1990. Vol. 197. P. 893-898.

197. Clinical spectrum of early Lyme borreliosis in patients with culture-confirmed Erythema migrans / R.B.Nadelman et al. // Am. J. Med. 1996. Vol. 100. P. 502-508.

198. Coinfection with Babesia microti and Borrelia burgdorferi in a western Wisconsin resident / C.J. Sweeney et al. // Mayo Clin. Proc. 1998. Vol. 73. P. 338341.

199. Cultivation and characterization of spirochetes from cerebrospinal fluid of patients with Lyme borreliosis / M. Karlsson et al. // J. Clin. Microbiol. 1990. Vol. 28. P. 473-479.

200. Daniel M., Kolar J. Using satellite data to* forecast the occurrence of the common tick Ixodes ricinus (L.) // J. Hyg. Epidemiol. Microbiol. Immunol. 1990. Vol. 34. P. 243-252.

201. Delineation of B. burgdorferi sensu stricto, B. garinii sp. nov., and Grup VS461 associated'with Lyme borreliosis / G. Baranton et al. // Int. J. Syst. Bactcriol. 1992. Vol. 42. P. 378-383.

202. Detection of Borrelia burgdorferi DNA by polimerasa chain reaction in synovial fluid in Lyme arthritis / J.J. Nocton et al. // N. Engl. J. Med. 1994. Vol. 330. P. 229-234.

203. Detection of Borrelia burgdorferi DNA in museum specimens of Ixodes dammini ticks / D.H. Persing et al. // Science. 1990. Vol. 249. P. 1420-1423.

204. Detection of Borrelia burgdorferi in urine specimens from dogs by a nested polymerase chain reaction / R. Bauerfeind et al. // Zentralbl. Bakteriol. 1998. Bd. 287. S. 347-361.

205. Diagnostic value of PCR for detection of Borrelia burgdorferi in skin biopsy and urine samples from patients with skin borreliosis / S. Brettschneider et al. // J. Clin. Microbiol. 1998. Vol. 36. P. 2658-2665.

206. Diversity of OspA and OspC among cerebrospinal fluid isolates of Borrelia burgdorferi sensu lato from patients with neuroborreliosis in Germany / B. Wilske etal. //Med. Microbiol. Immunol. 1996b. Vol. 184. S. 195-201.

207. Duffy J. Lyme disease: a clinical review // Minnesota Medicine. 1991. Vol. 74. P. 21-26.

208. Duray P.H. Clinical pathologic correlations of Lyme disease // Rev. Infect. Dis. 1989. Vol. 11. Suppl. 6. P. 1487-1493.

209. Effects of penicillin, ceftriaxone, and doxycycline on morphology of Borrelia burgdorferi / A. Kersten et al. // Antimicrob. Agents Chemotherapy. 1995. Vol. 39. P. 1127-1133.

210. Electron microscopy of Langerhans cells and Borrelia burgdorferi in Lyme disease patients / D. Hulinska et al. // Zentralbl. Bakteriol. 1994. Bd. 280. S. 348-349.

211. Elimination of Borrelia burgdorferi from vector ticks feeding on OspA-immunized mice / E.F. Fikrig et al. // Proc. Nat. Acad. Sei. USA. 1992b. Vol. 89. P. 5418-5421.

212. Engstrom S.M., ShoopE., Johnson R.C. Immunoblot interpretation criteria for serodiagnosis of early Lyme disease // J. Clin. Microbiol. 1995. Vol. 33. P. 419-427.

213. Epidemiologic studies of Lyme disease in horses and their public health significance / D. Cohen et al. // Ann. NY Acad. Sei. 1988. Vol. 539. P. 244-257.

214. Erythema chronicum migrans and Lyme arthritis. The enlarging clinical spectrum / A.C. Steere et al. // Ann. Intern. Med. 1977. Vol. 86. P. 685-698.

215. European interlaboratory comparison of Lyme borreliosis serology / E.C. Guy et al. // Zentralbl. Bakteriol. 1998. Bd. 287. S. 241-247.

216. Evolution of a focus of Lyme disease / T.L. Schulze et al. // Zentralbl. Bakteriol. 1986. Bd. 263. S. 65-71.

217. Exner M. Successful vaccination for Lyme disease: a novel mechanism? // Expert. Opin. Biol. Ther. 2001. Vol. 1. P. 783-793.

218. Failure of Borrelia burgdorferi to survive in the Skin of patients withantibiotic-treated Lyme disease / B.W. Berger et al. // J. Amer. Acad. Dermatol. 1992. Vol. 27, No 1. P. 34-37.

219. Genomic sequence of a Lyme disease spirochaete, Borrelia burgdorferi / C.M. Fräser et al. //Nature. 1997. Vol. 390. P. 580-586.

220. Gern L., Sell K. Isolation of Borrelia burgdorferi sensu lato from the Skin of the European Badger (Meies meles) in Switzerland // Vector Borne Zoonotic Dis. 2008 Oct 22.

221. Golightly M.G. Lyme borreliosis: laboratory considerations // Seminars Neurol. 1997. Vol. 17, No 1. P. 11-17.

222. Goossens H.A., van den Bogard'A.E., Nohlmans M.K. Dogs as sentinels for human Lyme borreliosis in the Netherlands // J. Clin. Microbiol. 2001. Vol. 39, No3. P. 844-848.

223. Gruntar I., Malovrh T., Murgia R. Conversion of Borrelia garinii cystic forms to motile spirochetes in vivo // APMIS. 2001. Vol. 109. P. 383-388.

224. Guidelines for the diagnosis of tick-borne bacterial diseases in Europe / P. Brouqui et al. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2004. Vol. 10. P: 11081132.

225. Halperin JJ. Nerous system Lyme disease // J. Neurol. Sei. 1998. Vol. 15. P. 182-191.

226. Hansen K., Asbrink E. Serodiagnosis of erythema migrans and acrodermatitis chronica atrophicans by the Borrelia burgdorferi flagellum enzyme-linked immunosorbent assay // J. Clin. Microbiol; 1989. Vol. 27. P. 545-551.

227. Hansen K. Lyme neuroborreliosis: Improvements of the laboratory diagnosis and a survey of epidemiological and clinical features in Denmark 1985-1990//ActaNeurol. Scand. 1994. Vol. 89,No 151.P. 11-18.

228. Heroldova M., Nemec M., Hubalek Z. Growth parameters of Borrelia burgdorferi sensu stricto at various temperatures // Zentralbl. Bakteriol. 1998. Bdl. 288. S. 451-455.

229. Heterogeneity of Borrelia burgdorferi in the skin / E. Aberer et al. // American J. Dermatopathol. 1996. Vol. 18. P. 571-579.

230. Heterogeneity of Borrelia burgdorferi sensu lato demonstrated by an ospA-type-specific PCR in synovial fluid from patients with Lyme arthritis / V. Vasiliu et al. // Med. Microbiol. Immunol. 1998. Vol. 187. P. 97-102.

231. Host responses to Borrelia burgdorferi in dogs and horses / E.M. Bosler et al. // Ann. NY Acad. Sei. 1988. Vol. 339. P. 221-234.

232. Hovius K.E. Borrelia infections in dogs // Epidemiological, clinical and diagnostic aspects. 1999. 148 p.

233. Human borreliosis on Nantucket Island, USA: description of the vector, Ixodes (Ixodes) dammini, n. sp. (Acarina: Ixodidae) / A. Spielman et al. II J. Med. Entomol. 1979. Vol. 15. P. 218-234.

234. Identification of Borrelia burgdorferi sensu lato species on Europe / I. Saint Girons et al. //Zentralbl. Bakteriol. 1998. Bd. 287. S. 190-195.

235. Identification of endemic foci of Lyme disease: isolation of Borrelia burgdorferi from feral rodents and ticks (Dermacentor variabilis) / J.F. Anderson et al. II J. Clin. Microbiol. 1985. Vol. 22. P. 36-38.

236. Immature Ixodes dammini (Acari: Ixodidae) on small animals in Connecticut, USA / A.J. Main et al. II J. Med. Entomol. 1982. Vol. 19. P. 655-664.

237. Immunization with a polyvalent OspA vaccine protects mice against Ixodes ricinus tick bites infected by Borrelia burgdorferi s.s., Borrelia garinii and BorreliaafzeliiIL. Gern et al. //Vaccine. 1997. Vol. 15. P. 1551-1557.

238. Immunoblot analysis of immunoglobulin G response to the Lyme disease agent (Borrelia burgdorferi) in experimentally and naturally exposed dogs / R.T. Greene et al. II J. Clin. Microbiol. 1988. Vol. 26. P. 648-653.

239. Immunogenicity and efficacy study of a commercial Borrelia burgdorferi bacterin / H.J. Chu et al. II J. Am. Vet. Med. Assoc. 1992. Vol. 201. P. 403-411.

240. Immunological and molecular variability of OspA and OspC. Implications for Borrelia vaccine development / B. Wilske et al. // Infection. 1996a. Vol. 24. P. 208-212.

241. Impact of strain heterogeneity on Lyme disease serology in Europe:comparison of enzyme-linked immunosorbent assays using different species of Borrelia burgdorferi sensu lato / U. Hauser et al. // J. Clin. Microbiol. 1998. Vol. 36. P. 427-436.

242. Induction of an outer surfase protein on Borrelia burgdorferi during tick feeding / T.G. Schwan et al. // Proc. Natl. Acad. Sei. 1995. Vol. 92. P. 2909-2913.

243. Influence of outer surfase protein A antibody on Berrelia burgdorferi within feeding ticks / A.M. de Siva et al. II Infect. Immun. 1999. Vol. 67. P. 30-35.

244. Interlaboratory comparison of test results for detection of Lyme disease by 516 participants in the Wisconsin State Laboratory of Hygiene / L.L. Bakken et al. // J. Clin. Microbiol. 1997. Vol. 35. P. 537-543.

245. Intrauterine transmission of Borrelia burgdorferi in dogs / J.M. Gustafson et al. // Am. J. Vet. Res. 1993. Vol. 54. P. 882-890.

246. Involvement of birds in the endemiology of the Lyme disease agent Borrelia burgdorferi / J.F. Anderson et al. // Infect. Immun. 1986. Vol. 51. P. 394396.

247. Johnson R.C., Kodner C., Russell M. Active immunization of hamsters against experimental infection with Borrelia burgdorferi II Infect. Immun. 1986. Vol. 54. P. 713-714.

248. Johnson R.C. Lyme borreliosis a disease that has come into its own // Lab. management. 1987. P. 34-40.

249. Juricovä Z., Hubälek Z. Serologic Survey of the Wild Boar (Sus scrofa) for Borrelia Burgdorferi Sensu Lato II Vector Borne Zoonotic Dis. 2008 Oct 30.

250. Kamradt T. Lyme disease and current aspects of immunization // Arthritis Res. 2002. Vol. 4. P. 20-29.

251. Kazmierczak J.J., Burges E.C. Antibodies to Borrelia sp. in wild foxes and coyotes from Wisconsin and Minnesota // J. Wildlife Dis. 1989. Vol. 25 P. 108-111.

252. Korenberg E.I. Camparative ecology and epidemiology of Lyme disease and tick-borne encephalitis in the former Soviet Union // Parasitology Today. 1994. Vol. 10, No 4. P. 65-68.

253. Korenberg E., GorelovaN., Kovalevskii Yu. Ecology of Borrelia burgdorferi sensu lato in Russia // Lyme Borreliosis: Biol., Epidemiol, and Control. 2002. Vol. 7. P. 175-200.

254. Kornblatt A.N., UrbandP.H., SteereA.C. Arthritis caused by Borrelia burgdorferi in dogs // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1985. Vol. 186. P. 960-964.

255. Laboratoiy evaluation in the diagnosis of Lyme disease / P. Tugwell et al. // Ann. Intern. Med. 1997. Vol. 127. P. 1109-1123.

256. Lane R.S., Burgdorfer W. Spirochetes in mammals and ticks (Acari: Ixodidae) from a focus of Lyme borreliosis in California // J. Wildlife Dis. 1988. Vol. 24. P. 1-9.

257. Lebech A.M., Hansen K. Detection of Borrelia burgdorferi DNA in urine samples and cerebrospinal fluid samples from patients with early and late Lyme neuroborreliosis by polymerase chain reaction // J. Clin. Microbiol. 1992. Vol.30. P. 1646-1653.

258. LedueN.B., Collins M.F., Craig W.Y. New laboratory guidelines for serologic diagnosis of Lyme disease: evaluation of the two-test protocol // J. Clin. Microbiol. 1996. Vol. 34. P. 2343-2350.

259. Levy S.A., Duray P.H. Complete heart block in a dog seropositive for Borrelia burgdorferi. Similarity to human Lyme carditis // J. Vet. Inten. Med. 1988. Vol. 2. P. 138-144.

260. Levy S.A., Magnarelli L.A. Relationship between development of antibodies to Borrelia burgdorferi in a dog and the subsequent development of limb/joint borreliosis // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1992. Vol. 200. P. 344-347.

261. Levy S.A., Barthold S.W., Dambach D.M. Canine Lyme borreliosis // Compendium. 1993. Vol. 15. P. 833-846.

262. Logigian E.L., Kaplan R.F., SteereA.C. Chronic neurologic manifestations of Lyme disease //N. Engl. J. Med. 1990. Vol. 323. P. 1438-1444.

263. Luft B.J., BoslerE.M., DattwylerR.J. Lyme diseases: molecular and immunologic approaches // Current Communications in Cell and Molecular Biology. 1992. No 6. P. 317-325.

264. Lyme borreliosis and tick-borne encephalitis / P. Oschmann et al. I I UN1MED Verlag AG. Bremen. 1999. Vol. 16. 141 p.

265. Lyme disease a tick-borne spirochetosis? / W. Burgdorfer et al. // Science. 1982. Vol. 216. P. 1317-1319.

266. Martakova O.A., Domsky LA., Sazonkin V.N. Tick-borne borreliosis in game animals // XXVII th Congress of the International i Union of Game Biologists: extendedabstracts, Hanover, Germany. 2005: P; 41:1-412.

267. Matuschka F.R., Spielman A. Risk of infection from and; treatment of tick bite//The Lancet.1993: Vol. 342; P. 529-530;

268. Molecular typing of Borrelia burgdorferi sensu lato: taxonomic, epidemiological, and clinical implications / G. Wang et al. I I J. Clin. Microbiol. 1999b. Vol. 12. P. 633-653.

269. Monoclonal antibodies; for identification of Borrelia afzelii sp. nov. associated with late cutaneous manifestations of Lyme* borreliosis / M. Canica et al. // Scand. J. Infect. Dis. 1993. Vol. 25. P. 441-448.

270. New colorimetric microdilution method for in vitro susceptibility testing of Borrelia burgdorferi against antimicrobial substances / K.P. Hunfeld et al. // Eur. J. Glin. Microbiol. Infect. Dis. 2000. Vol. 19. P. 27-32.

271. Nondifferentiation between Lyme disease spirochetes from vector ticks and human cerebrospinal fluid / H. Eiffert et al. // J. Clin. Dis. 1995. Vol.„171. P. 476-476.

272. Parker J.L., White K.K. Lyme borreliosis in cattle and horses: A review of the literature // Cornell Vet. 1992. Vol. 82. P. 253-274. •

273. Pavia Charles S . Overview of the pathogenic spirochetes // J. Spirochetal and Tick-Borne Dis. 1994: Vol. 1, No 1.P: 3-11.

274. Peptide-based OspC enzyme-linked immunosorbent assay for serodiagnosis of Lyme borreliosis / M.J; Mathiesen et al. // J. Clin. Microbiol. 1998. Vol. 36. P. 3474-3479.

275. Peuchert W. Lyme-Borreliose: unterdiagnostiziert? — ubertherapiert // Mschr. Kinderheilk. 1990. Bd 138, No 4.S. 190-195.

276. Pfister H.W., WilskeB., Weber K. Lyme borreliosis: basic science and clinical aspects//The Lancet. 1994. Vol. 343. P. 1013-1016.

277. Phenotypic and genotypic analysis of Borrelia burgdorferi isolates from; various sources / T. Adam et al. // Infect. Immun. 1991. Vol. 59. P. 2579-2585.

278. Piesman J., Spielman A. Host associations and seasonal: abundanse of immature Ixodes dammini ^ southeastern Massachusetts // Ann. Entomol: Soc. Am. 1979. Vol: 72. P. 829-832.

279. Post J.E., Shaw E.E., PalkaF. Lyme disease in horses // Proc. 32nd Conv. Am. Assoc. Equine Pract. 1986. P. 415-424.

280. Post J.E. Lyme disease in large animals // N. Engl. J. Med. 1990. Vol. 87. P. 575-577.

281. Preac-Mursic V., WilskeB., Reinhardts. Culture of Borrelia burgdorferi on six solid media // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1991. Vol. 10. P. 1076-1079;

282. Predictive map of Ixodes ricinus high-incidence habitats and a tickborne encephalitis risk assessment using satellite data / M. Daniel et al. // Exp. Appl. Acarol. 1998. Vol. 22. P. 417-433.

283. Prevalence of Borrelia burgdorferi and Babesia microti in mice on islands inhabited by white-tailed deer / J.F. Anderson et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1987. Vol. 53. P. 892-894.

284. Prevalense of Lyme disease spirochetes in Ixodes persulcatus and wild rodents in Far Eastern Russia / Y. Sato et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1996. Vol. 62. P. 3387-3389.

285. Primary and secondary erythema migrans in central Wisconsin / J.W. Melcki et al. // Arch. Dermatol. Syph. 1993. Vol. 129. P. 709-716.

286. Protection of mice against the Lyme disease agent by immunizing with recombinant OspA/E.F. Fikrig et al. // Science. 1990. Vol. 250. P. 553-556.

287. Protective immunization with plasmid DNA containing the outer surface lipoprotein A gene of Borrelia burgdorferi is independent of an eukaiyotic promoter /M.M. Simon et al. //Eur. J. Immunol. 1996. Vol. 26. P. 2831-2840.

288. Roles of OspA, OspB, and flagellin in protective immunity to Lymeiborreliosis in laboratory mice / E.F. Fikrig et al. // Infect. Immun. 1992a. Vol. 60. P. 657-661.

289. Rose C.D., Fawcett P.T., Singsen B.N. Use of western blot and enzyme-linked immunosorbent assays to assist in the diagnosis of Lyme disease // Pediatrics. 1991. Vol. 88, No 3. P. 465-470.

290. Sadziene A.P., Thompson P.A., Barbour A.G. A flagella-less mutant of Borrelia burgdorferi as a live attenuated vaccine in the murine model of Lyme disease // J. Infect. Dis. 1996. Vol. 173.P. 1184-1193.

291. Schöffel I., Schein E., Wittstadt U. Parasite fauna of red foxes in Berlin (West) // Berl. Munch. Tierarztl. Wochenschr. 1991. May 1;104. P. 153-157.

292. Schwan T.G., Piesman J. Temporal changes in outer surface proteins A and C of the Lyme disease-associated spirochete, Borrelia burgdorferi, during the chain of infection in ticks and mice // J. Clin. Microbiol. 2000. Vol. 38. P. 383-388.

293. Serodiagnosis in early Lyme disease / M.E. Aguera-Rosenfeld et al. //

294. J. Clin. Microbiol. 1993. Vol. 31. P. 3090-3095.

295. Serodiagnosis of Lyme disease: accuracy of a two-step approach using a flagellabased ELISA and immunoblotting / B J. Johnson et al. // J. Infect. Dis. 1996. Vol. 174. P. 346-353.

296. Serologic diagnosis of canine and equine borreliosis: use of recombinant antigens in enzyme-linked immunosorbent assays / L.A. Magnarelli et al. // J. Clin. Microbiol. 1997. Vol.35, No 1. P. 169-173.

297. Small mammals as reservoir hosts for Borrelia in Russia / N.B. Gorelova et al. // Zentralbl. Bakteriol. 1995. Bd. 282. S. 315-322.

298. Spirochetes in Ixodes dammini and mammals from Connecticut / J.F. Anderson et al. // Am. J. Trop. Med. Hyg. 1983. Vol. 32. P. 818-824.

299. Steere A.C., Green J., Hutchinson G.J. Treatment of Lyme disease // Zentralbl. Bakteriol. Bd. 263: S. 352-356.

300. Steere A.C. Medical progress: Lyme disease // N. Engl. J. Med. 1989. Vol. 321. P. 586-596.

301. Steere A.C. Clinical definitions and differential diagnosis of Lyme arthritis // Scand. J. Infect. Dis. 1991. Vol. 77. Suppl. P. 51-54.

302. Stevenson B:, Schwan T.G., Rosa-P.A. Temperature-related differential expression of antigens in the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdorferi I I Infect. Immun. 1995. Vol. 63. P. 4535-4539^

303. Straubinger R.K. PCR-based1 quantification of Borrelia burgdorferi in canine tissues over a 500-day postinfection period // J. Clin. Microbiol. 2000. Vol. 38, No 6. P. 2191-2199.

304. The early clinical manifestations of Lyme disease / A.C. Steere et al..// Ann. Intern. Med. 1983a. Vol. 99. P. 76-82.

305. The spirochetal etiology of Lyme disease / A.C. Steere et al. //N. Engl. J. Med. 1983b. Vol. 308. P. 733-740.

306. Tick parasitism and antibodies to Borrelia burgdorferi in cats / L.A. Magnarelli etal.//J. Am. Vet. Med. Assoc. 1990. Vol. 197,No. l.P. 63-66.

307. Treatment of early Lyme disease / E. Massarotti et al. // Am. J. Med.1992. Vol. 92. P. 396-403.

308. Ultrastructural demonstration of intracellular localization of Borrelia burgdorferi in Lyme arthritis / I. Chary-Valckenaere et al. // Br. J. Rheumatol. 1998. Vol. 37. P. 468-470.

309. Van Dam A.P. Recent advances in the diagnosis of Lyme disease // Exp. Rev. Mol. Diagn. 2001. Vol. 1. P. 413-427.

310. Vascular clearance of Borrelia burgdorferi in rats / J.L. Galbe et al. // Microbiol. Pathog. 1993. Vol. 14, No 3. P. 187-201.

311. Walker D.H. Tick-transmitted infectious diseases in the United States // Annu. Rev. Public Health. 1998. Vol. 19. P. 237-269.

312. Weisbrod A.R., Johnson R.C. Lyme disease and migrating birds in the Saint Croix River Valley // Appl. Environ. Microbiol. 1989. Vol. 55. P. 1921-1924.

313. Wilske B. Microbiological diagnosis in Lyme borreliosis // Intern. J. Med. Microbiol. 2002. Vol. 291, No 33. P. 314-319.

314. Wilske B. Diagnosis of Lyme borreliosis in Europe // Vector Borne Zoonotic Dis. 2003. Vol. 3. P. 215-227.