Экологические аспекты интенсивного культивирования грибов рода Pleurotus в Приамурье

Азарова, Василина Александровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Экологические аспекты интенсивного культивирования грибов рода Pleurotus в Приамурье
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Экологические аспекты интенсивного культивирования грибов рода Pleurotus в Приамурье"

На правах рукописи

084600084

АЗАРОВА Василина Александровна

ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИНТЕНСИВНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ГРИБОВ РОДА РЬЕШОТиБ В ПРИАМУРЬЕ

Специальность 03.00.16. - экология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Хабаровск-2010

1 АПР

Работа выполнена в отделе биотехнологий и защиты растений государственного научного учреждения - Дальневосточного ордена Трудового Красного Знамени НИИ сельского хозяйства РАСХН (г. Хабаровск)

Научный руководитель: доктор сельскохозяйственных наук,

член-корреспондент РАСХН Анненков Борис Глебович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Кондратьева Любовь Михайловна (ИВЭП ДВО РАН)

кандидат биологических наук, доцент Рубцова Тамара Александровна (ИКАРП ДВО РАН)

Ведущая организация:

Дальневосточный государственный аграрный университет

Защита состоится «29» апреля 2010 г. в 14-30 часов на заседании диссертационного совета Д 005.019.01 при Институте водных и экологических проблем ДВО РАН по адресу: 680000, г. Хабаровск, ул. Ким Ю Чена, 65.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института водных и экологических проблем ДВО РАН

Автореферат разослан « » марта 2010 г.

Отзывы на автореферат в двух экземплярах, заверенные и скрепленные гербовой печатью, просим направлять ученому секретарю диссертационного совета.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук

Н.А. Рябинин

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Проблема загрязнения окружающей среды экотокси-кантами, оскудение лесных угодий в начале XXI века привели к тому, что население Дальневосточного Федерального округа России все меньше используют дикоросы для пищевых хозяйственных целей (Мухамедшин, 2005). Грибы -белковая, деликатесно-целебная пища, важный источник адаптогенов, становятся опасными и малодоступными для жителей региона. В то же время во всем мире наблюдается всевозрастающий бум производства и потребления культурных безопасных грибов. В условиях нарастания угрозы глобального продовольственного кризиса, культивируемые грибы призваны мировым сообществом, наряду с соей, птицей, рыбой, решать проблемы дефицита белка и сбалансированного (здорового) питания (Гарибова, 2005; Заикина и др., 2007). Успешное становление регионального культивирования грибов и его научного обеспечения - актуальная, своевременная задача для дальневосточной агробиологической науки в первой четверти XXI века, отвечающая целям продовольственной безопасности и создания новых рабочих мест в городах и сельской местности.

Современные исследования в областях фунгобиохимии и фунготерапии показали, что вешенка, как и некоторые другие грибы-ксилотрофы, является продуцентом редких целебных и онкостатических соединений: антибиотиков, антиоксидантов, иммуномодулирующих полисахаридов (Р-Д-глюканы) и ди-мерных лектинов (Wang et al., 2000; Zhao et al., 2000; Бухман и др., 2003; Мее-рович и др., 2005; Краснопольская и др. 2006; Заикина и др., 2007).

В последние годы отмечаются отечественные и зарубежные исследования, в которых особое значение придается оптимизации культивирования путем регулирования абиотических и биотических факторов, защите инокулируемых сельскохозяйственных субстратов и мицелия вешенки от конкурентных микро-мицетов в условиях полустерильной евротехнологии выращивания (Дудка, Вассер, 1978; Павлов, Девочкин, 1987; Бисько, Дудка, 1987; Дудка и др., 1992; Морозов, Тимофеев, 2001; Карпов, Тишенков, 2003; Сычев, Ткаченко, 2003; Морозов, 2004; Матершев, 2006,2007; Тишенков, 2009).

Ситуация развития грибоводства в Приамурье связана, в первую очередь, с массовым выращиванием вешенки обыкновенной (Pleurotus ostreatus) как наиболее перспективного вида (Беляев, 2000; Измоденов, 2008).

Проблемы эффективного интенсивного культивирования грибов во многом обусловлены отсутствием региональных исследований и слабой изученностью многих экологических аспектов (влияние сезонного фактора (освещенность), конкурентных отношений между базидиомицетами и микромицетами и другие), а также недостаточным использованием различных видов и штаммов из рода Pleurotus.

Несмотря на многообразие исследований, выполненных в России и за рубежом, разработка биотехнологических принципов селективных субстратов, создание искусственных фунгоэкосистем и оценка устойчивости различных видов Pleurotus остается одной из основных проблем экологизации дальневосточного культивирования грибов.

Цель исследования: разработать экологические принципы оптимизации процессов функционирования искусственных фунгоэкосистем для интенсивного выращивания вешенки в условиях Хабаровского Приамурья.

Задачи исследования:

1. Определить биологический и хозяйственный потенциал видов и штаммов Pleurotus перспективных для возделывания в условиях Приамурья.

2. Разработать методические основы оптимизации культивирования видов и штаммов рода Pleurotus путем регулирования абиотических и биотических факторов среды.

3. Разработать метод экстенсивного культивирования Pleurotus с оптимизацией процесса путем использования в качестве субстратного посадочного мицелия материал, полученный после стерильного интенсивного процесса выращивания.

4. Выявить новые возможности культивирования Pleurotus ostreatus в условиях полустерильных и нестерильных фунгоэкосистем на основе «селективных живых субстратов» с чистыми культурами Bacillus cereus и Bacillus subtilis.

Защищаемые положения:

1. Разные адаптивные возможности окультуренных видов и коллекционных штаммов рода Pleurotus позволяют выявить условия для оптимизации их культивирования и оценить влияние различных биотических и абиотических факторов на продуктивность грибов.

2. Продуктивность грибов рода Pleurotus зависит от характера конкурентных отношений между микромицетами и термофильными природными микроорганизмами, которые улучшают ферментацию и селективность субстрата. В результате применения селективной среды для посадочного мицелия Pleurotus ostreatus повышается адаптивный потенциал, и создаются условия для эффективного культивирования грибов.

3. Искусственно созданная модельная микроэкосистема (Pleurotus + Bacillus) активизирует ферментацию субстрата и ингибирование роста микромице-тов. В этом случае исключается конкуренция за субстрат и необходимость в использовании химических фунгицидов.

Научная новизна. Впервые выполнена научно-исследовательская работа, которая является новой (пионерной) в направлении создания искусственных микроэкосистем на Дальнем Востоке и затрагивает ряд важных аспектов экологии, микологии и биотехнологии. На примере культивирования различных видов и штаммов грибов рода Pleurotus научно обоснованы, разработаны и экспериментально подтверждены экологические принципы функционирования искусственных фунгоэкосистем в Хабаровском Приамурье.

Впервые наиболее перспективным для Приамурья объектом грибоводства определен вид - вешенка обыкновенная (Pleurotus ostreatus), выделены другие перспективные виды и штаммы Pleurotus, пригодные для использования, как при интенсивном, так и экстенсивном культивировании.

Впервые дана оценка отличительных элементов стерильного (азиатский) и нестерильного (европейский) методов интенсивного культивирования Pleurotu и сформирована научно-технологическая система эффективного массового получения грибов в условиях Хабаровского Приамурья.

Впервые детально разработаны научно-методические основы получения качественных «селективных живых субстратов» с использованием Bacillus sub-tilis, особенно Bacillus cereus.

Практическая значимость. Разработаны способы, способствующие ста-билизировано-прогрессивному выращиванию Pleurotus ostreatus в региональных условиях. Впервые определены рациональные нормы расхода важных компонентов: питательных добавок к соломистому и опилочному субстрату; количество мицелия; объем микроэкосистемы.

Результаты биохимических исследований выявили различие содержания сырого протеина, макро- и микроэлементов у исследуемых видов и штаммов рода Pleurotus в зависимости от времени года.

На основе созданной и сохраняемой генетической коллекции культивируемых видов Pleurotus впервые организовано производство качественного посадочного мицелия на зерне овса. Исследования в области интенсивной культуры Pleurotus, производства качественного посадочного мицелия и сохранения генетической коллекции грибов-ксилотрофов поддержаны грантами Правительства Хабаровского края №15-261 от 30.12.2005 года, №15-353 от 2.02.2007 года и №15-383 от 10.01.2008 года. По материалам диссертационных исследований получен патент РФ на изобретение «Способ интенсивного выращивания вешенок и производство субстратного посадочного мицелия для их экстенсивного культивирования» № 2378821 от 17.04.2008.

Личный вклад автора. Диссертационная работа является результатом исследований автора, выполненных согласно планам НИР ГНУ-ДВ ордена ТКЗ НИИ РАСХН. Фактические данные по разработке эколого-технологических вопросов, связанных с созданием искусственных микроэкосистем, получены автором при его непосредственном участии в лабораторных опытах, включая проведение модельных экспериментов, приготовление питательных сред и субстратов, анализ и обобщение полученных результатов.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы докладывались и получили положительную оценку на международных научных конференциях: «Дендрарию Дальневосточного НИИ лесного хозяйства - 110 лет» (Хабаровск, 2006); «Лесные биологически активные ресурсы» (Хабаровск, 2007); на межрегиональной научно-практической конференции «Ресурсы и экологические проблемы Дальнего Востока» (Хабаровск, 2006); на сессии, посвященной 70-летию ГНУ-ДВ ордена ТКЗ НИИ РАСХН «Энергосберегающие технологии возделывания сельскохозяйственных культур в условиях Дальнего Востока» (Хабаровск, 2005); на региональной научной конференции «Природопользование на Дальнем Востоке России» (Хабаровск, 2006); на IV и V Казь-минских научных чтениях «Научные основы повышения эффективности сельскохозяйственного производства на Дальнем Востоке России (Хабаровск, 2005), «Современное научное обеспечение дальневосточной аграрной отрасли» (Хабаровск, 2006); на Втором Дальневосточном международном экономическом форуме «Инновационное развитие как приоритет экономической политики в регионах Востока России» (Хабаровск, 2007); на международной научной конференции «Российско-китайское приграничье в интеграционных процессах в СВА: проблемы и перспективы» (Благовещенск, 2007); в региональной кон-

ференции «Молодые ученые аграрному комплексу ДФО» (г. Благовещенск, 2005); во всероссийской конференции с международным участием «Состояние лесов Дальнего Востока и актуальные проблемы лесоуправления» (Хабаровск, 2009); на VIII и IX Хабаровских краевых конкурсах молодых ученых и аспирантов (Хабаровск, 2006, 2007; диплом III степени).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 25 научных печатных работ, в т.ч. в изданиях, рекомендованных ВАК -2, патент РФ на изобретение -1.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 153 страницах компьютерного текста, содержит 35 таблиц и 25 рисунков. Состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов и рекомендаций. Список литературы включает 194 источника, в т.ч. 23 иностранных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Глава 1. Обзор литературы

В главе представлен детальный анализ имеющихся научных работ отечественных и зарубежных авторов по разделам связанным с экологией дикорастущих и культивируемых видов вешенок, с научными основами интенсивного культивирования грибов рода Pleurotus как объекта мирового, отечественного и приамурского грибоводства, с перспективами развития интенсивного культивирования.

Глава 2. Объекты и методы исследования

Объектами исследований являлись чистые культуры грибов и бацилл из коллекции, депонированные на питательной среде - картофельно-глюкозном агаре (КГА). Чистые культуры бацилл и актиномицетов были получены от Тен Хак Муна (ИВЭП ДВО РАН, г. Хабаровск).

Предметом исследований являлись искусственные микроэкосистемы -фунгоэкосистемы, содержащие различные компоненты: субстраты - солома пшеницы и овса, мелкодробленые кукурузные стержни, опилки свежие и лежалые и единая крупная партия овсяной половы; мицелий разных видов и штаммов грибов рода Pleurotus; химические, физические и биологические факторы.

В исследованиях использованы общепринятые методы микологии, микробиологии, экологии, биотехнологии, лабораторно-вегетационного опыта (Методы экспериментальной микологии, 1982; Аникиев, Лукомская, 1983; Stamets, 1993; Мюллер, Леффлер, 1995; Анненков 1999, 2002; Никаноров, Хоружая, 2001; Заикина и др., 2007; Журбицкий, 1968). Для инокуляций в разных опытах использованы единые партии стерильного зернового (на овсе) посадочного мицелия, высокое качество которого доказано многолетними испытаниями (Анненков, 1999-2008).

В качестве субстратов выбрана солома пшеницы и овса, мелкодробленые кукурузные стержни, опилки свежие и лежалые и единая крупная партия овсяной половы, полученная от сортировки семенного зерна в ДальНИИСХ. Для точных опытов использовали влажный (70%), тщательно перемешанный и взвешенный на весах субстрат - 3-5 кг, инокулированный мицелием в количестве от 3 до 15%. Перфорацию субстратных мешков проводили на 2-3 день после инокуляции, делая на упаковке 14 прорезей длиной 6 см. Повторность вариантов опытов - от пяти до восьмикратной.

Стерилизация для получения соломистых субстратов с нулевым титром микрофлоры проводилась путем: автоклавирования (при 1,5 атм, 3 часа); гид-ротермии (варка 1 час в воде при 100 °С); ксеротермии (многочасовое пропари-вание сухого соломистого субстрата, увлажнение и охлаждение чистой водой с фундазолом - 0,01%).

Для подготовки «живых селективных субстратов» использовали общепринятые схемы для условий аэробной ферментации (Бисько, Билай, 2006) (рис. 1). В нашей работе для получения селективных субстратов применяли наиболее простой способ с анаэробной ферментацией - заливку кипятком с добавлением фундазола (0,01%) или без него, при медленном остывании до 25-30 "С в течении суток.

сутки

Рис. 1. Схемы термобациллярной подготовки субстратов

Примечание: 1 - анаэробная упрощенная (ускоренная) ферментация соломистого субстрата (заливка горячей водой в емкостях и медленным 1,5-суточным остыванием); 2 - анаэробная ферментация увлажненного соломистого субстрата (в полипропиленовых мешках) в термостате (фаза 2); 3 - улучшенная анаэробная ферментация соломистого субстрата в термостате, предварительно замоченного в емкостях на 22,5 суток (фаза 1+ фаза 2).

Биохимические анализы содержания протеинов в плодовых телах, определение макро- и микроэлементного состава проведено согласно ПДК (СанПиН 2.3.2.560-96), в условиях аккредитованной испытательной лаборатории Центра агрохимслужбы «Хабаровский».

Потенциальным показателем функционирования фунгоэкосистем при интенсивном культивировании Р1еиго1ш является плодоотдача или продуктивность (П%), на сыром (влажность 70%), уплотненном субстрате, которая рассчитывается как отношение массы технически зрелых грибов, получаемых с мешка (или сосуда) к изначальной массе субстрата с мицелием, выраженное в процентах: П% = М плод, тел : М влажн.субстр.х 100%.

Анализ эффективности фунгоэкосистем для культивирования вешенок, в том числе при создании «селективных живых субстратов», проведен с использованием стандартных методов вариационной статистики: определение досто-

верности полученных данных в условиях нормального распределения для независимых выборок - по коэффициенту Стьюдента; ошибка оценивалась с помощью средней квадратической ошибки (М±ш) (Минкевич, Хохрякова, 1968; Ла-кин, 1990; Ермолаев, 2003).

Для математических расчетов использовали статистический пакет SPSS и Microsoft Office Excel 2007.

Глава 3. Научные основы получения посадочного мицелия и культивирования видов и штаммов базидиомицетов рода Pleurotus

Первоосновой научного обеспечения дальневосточного интенсивного культивирования грибов является интродукция, сохранение, оценка, отбор и использование в производстве адаптированных и урожайных штаммов (сортов) Pleurotus и организация производства качественного посадочного материала.

Базисом проведения НИР явилось создание, сохранение и изучение генетических коллекций съедобных базидиомицетов и производство посадочного мицелия на основе видов и штаммов обыкновенной, ильмовой, королевской, розовой вешенки, сохранение его в генетической грибной коллекции ДальНИ-ИСХ. Собраны штаммы вешенки обыкновенной: НК-35, А-77, В-1, Пиньгу, «Флорида», «Гибридный белый» (обыкн. * флор.), «Америка» и «Корея» европейской, отечественной, американской, китайской и корейской селекции.

Экспериментальные исследования выявили лучшие качества и общий потенциал биопродуктивности штаммов вешенки обыкновенной (Pleurotus ostrea-tus) из коллекции. Проведено итоговое сравнительное испытание штаммов (табл. 1). Определено, что лучшим для интенсивного культивирования Р. ostreatus в региональных условиях является НК-35 как самый высокоурожайный селекционный (гибридный) штамм, хорошо адаптированный к европейским методам культивирования и различным субстратам, что согласуется с литературными данными (Морозов, Тимофеев, 2001; Сычев, Ткаченко, 2003; Ти-шенков, 2000, 2003; Матершев, 2005).

Наряду с НК-35, широко используется отечественный штамм А-77. Они генетически близкородственны (Шнырева, 2006), морфологически похожи (серая шляпка), но имеются и отличия. Штамм А-77 считается криолабильным, формирует, как правило, более крупные плодовые тела, более адаптирован к опи-лочным субстратам и к возделыванию экстенсивным методом (на пнях). Штаммы НК-35 и А-77 отличаются жесткой длинной ножкой, особенно во втором сборе сырой массы (МСыр) грибов. Этот недостаток характерен также для «Гибридного» штамма, который образует белые плодовые тела, зимой плотные, а летом - с рыхлой и хрупкой шляпкой. Удлиненной, но более толстой, ножкой отличается также продуктивный криолабильный штамм «Америка», с плотными крупными шляпками серого цвета, высокими эстетическими качествами и хорошей сохранностью при транспортировке.

Характерной особенностью штаммов азиатской селекции является ножка: рыхлая, полупустая (В-1) или нежная, очень мягкая (Пиньгу), толстая, короткая и мясистая («Корея»).

Самым скороспелым является изолят «Корея» (табл. 1), образующий крупные плодовые тела с мясистой шляпкой. Однако этот штамм при увеличенной

Таблица 1

Биопродуктивность коллекционных штаммов вешенки обыкновенной Р/еигой« о$1геа1и$ в сравнительном испытании (весна, 2008 г.)

р<0,01 (**); р<0,001 (***); количество зернового посадочного мицелия во всех вариантах равнялась 6%; масса полово-опилочного (4:1) субстрата в мешках по 3 кг; субстрат подготовлен кипятком с фундазолом (0,01%) и суточным остыванием.

влажности воздуха поражается бактериозами, поэтому необходимо уменьшать влажность воздуха в культивационном помещении до 80%.

Таблица 2

Массовая доля белка и макроэлементов (М±т) в составе сухой массы плодовых тел некоторых штаммов Р. ostreatus (в %) (зима, лето 2005-2006)

"Характеристики Штамм^ч вешенки \ обыкновенной^ Сырой протеин, % К, % I', % Ca, % Сырая зола, %

Грибы, выращенные зимой - весной 2005 года

НК-35 А-77 Пиньгу «Америка» 23.3±2,0 22,9±2,2 25,1 ±2,4 25,5±2,4 2,3*0,1 2,5±0,1 2,1 ±0,2 2,4±0,2 1,10±0.04 1,18±0,08 1,23±0,04 1,24±0,08 0,15±0.009 0,07±0,005 0,11 ±0,009 0,07±0,007 6.4±0,2 6,0±0,4 5,6±0,4 6,0±0,3

Грибы, вы ращенные ранним летом 2006 года

НК-35 «Флорида» «Гибридный белый» 34.2±2;8ААА 32,1±3,1 29,3±2,3 2,9±0,2А 3,0±0,3 3,1±0,2 2,01 ±0,04 А 1,87±0,05 2,01±0,01 0,03±0,001 А А А 0,08±0,003 0,09±0,005 8,3±0,2а аа 7,5±0,4 8,6±0,5

Примечание: здесь и далее: достоверность отличий показателей массовой доли НК-35 в разные сезоны показана: р<0,05 (а); р<0,01 (а а); р<0,001 (аа а); грибы выращены на субстратах из фрагментов стержней кукурузы и соломы зерновых (1:1), по евротехнологии.

Анализ результатов при культивировании штаммов Р1еигоШ ояКеаШ из коллекции ДальНИИСХ по интенсивной евротехнологии показал, что масса сухого вещества содержит высокую долю сырого протеина (в среднем от 24,2% зимой, до 31,9% летом), калия, кальция и фосфора - важных для организма человека нутриентов, в физиологических концентрациях (табл. 2, 3). Содержание тяжелых металлов во всех случаях не превышало ЦДК (табл. 3). Важным фактором оптимизации процессов интенсивного культивирования грибов рода Р1еиго(ш является применение качественного посадочного мицелия, производимого с учетом региональных условий. Мировые образцы посадочного мицелия выращивают на просе. Однако при использовании посадочного мицелия, изготовленного на мелкосеменных зерновых культурах (сорго, просо или пайза) согласно европейским методам культивирования, особых преимуществ не обнаружено. Более того, такой посадочный мицелий менее адаптирован к неселективным, смесовым субстратам. Кроме этого, мелкосеменные культуры в местных условиях практически не выращиваются.

В результате исследования разработаны условия оптимизации выращивания мицелия разных видов и штаммов Р1еигоШ.$ на автоклавированном овсяном зерне объемом 1-2 литра, в стеклянных банках, покрытых двумя слоями фольги, путем регулирования абиотических и биотических факторов. Мицелий Р. оя/геаШя заращивает зерновой овсяный субстрат объемом 1 л за 25 дней. Его использование в евротехнологии на «селективных живых субстратах»

Таблица 3

Содержание микро- и макроэлементов в составе сухой массы плодовых тел некоторых штаммов Р. овггеагт,

выращенных в разные сезоны года

^-^Характеристики Концентрация элементов, мг/кг

Штамй^. Ре 1п Си N1 РЬ Со са Аэ Нё

вешенки

обыкновенной

■ Грибы выращены зимой - весной 2005 года

НК-35 95,8±1,0 34,5±1,6 4,8±0,7 9,7±0,06 0,84+0,04 1,25±0,11 0.87±0,02 0,19±0,03 0,19±0,01 0,003±0,0001

А-77 66,2+2,6 36,3±3,2 4,2±0,5 9,8±0,06 0,68±0,03 *** 1,02±0,06 ♦ 0,87±0,03 0,26±0,03 0,15±0,01 *** 0,004±0,0001

Пиньгу 74,0±5,6 44,7±3,1 *** 4,9±0,6 9,3±0,07 0,70±0,04 *»» 1,06±0,09 0,96±0,05 0,18±0,04 0,15±0,01 *** 0,003±0,0001

«Америка» 83,6±5,1 *** 30,2±3,0 3,8±0,6 6,1±0,08 *** 0,98±0,05 1,12±0,09 0,82±0,06 0,25±0,03 0,18±0,01 0,002±0,0001

Грибы выращены ранним летом 2006 года

НК-35 35,2±1,3 22,4±1,4 2,7±0,1 2,3±0,03 0,44±0,01 2,91±0,03 0,43±0,02 0.2±0.01 0.2±0,01 0.004±0.0001

ккк ккк ккк Ж11 ккк ккк ккк

«Флорида» 99,6±6,2 *** 28,7±1,7 * 4,2±0,4 *** 2,6±0,05 0,52±0,01 *** 2,81±0,03 *** 0,4±0,04 0,2±0,01 0,2±0,01 0,003±0,0001 ***

«Гибридный белый» 60,2±5,1 *** 19,0±1,1 * 3,4±0,3 * 2,4±0,05 0,44±0,02 1,94±0,05 0,2±0,05 *** 0,2±0,02 0,2±0,01 0,003±0,0001 ***

ПДК <100 <50 <30 <30 <11 <3,0 <3,0 <0.5 <0,5 <0.05

Примечание-, достоверность различий от штамма НК-35 в определенный сезон показана: р<0,05 (*); р<0,01 (**); р<0,001 (***); грибы выращены на смесовом субстрате из фрагментов стержней кукурузы, соломы и половы овса (1:1:1), по евротехнологии.

позволяет достичь 20%-го и более уровня плодоотдачи за первый сбор Мсыр, что делает культивирование Р. ostreatus высокопродуктивным в местных условиях.

В России посадочный мицелий на зерне традиционно используют для инокуляций при экстенсивном выращивании Pleurotus на чурках (Нурметов, Де-вочкин, 2005). В работе представлен способ, позволяющий совместить два отдельных биотехнологических процесса - интенсивного получения плодовых тел (табл. 4) на объеме субстрата 1л (вариант азиатского культивирования), с использованием стеклянных банок, постоянно прикрытых фольгой, а также использование отработанного субстратного (полово-опилочного) прививочного материала для экстенсивного культивирования. Мелкофрагментированные сельскохозяйственные компоненты субстрата способствуют хорошей биопродуктивности - 200 г за сбор при объеме субстрата 1л, а 1/3 опилочная часть адаптирует его в последующем к инокулируемой древесине. Два слоя обжатой фольги поддерживают стерильные условия, что положительно отражается на выход Мсыр грибов.

Таблица 4

Продуктивность первого сбора М СЫр грибов штамма Р. ostreatus НК-35, в зависимости от объема стерильного субстрата (начало лета, 2005 г.)

Характеристики Объем \ субстрата \ Начальная масса сырого субстрата, г Период от инокуляции до первого сбора Мсыр грибов, дн. Мсыр грибов с субстрата в банке (М±т), г П,% Среднее количество грибов на банке, шт. Средняя Мсыр одного гриба, г

1 литр 2 литра 3 литра 600 1300 1900 34-36 42-46 52-54 124±9 235±15*" 248±12*" 20,7 18,1 13,0 20 27 29 6,2 8,7 8,6

Примечание: смесовый субстрат из размола кукурузных стержней и соевой трухи (1:1); достоверность различий в зависимости от объема субстрата, в сравнении с 1 л, показана: при р<0,05 (*); при р<0,01 (**); при р<0,001 (***).

В работе показаны результаты испытания на вирулентность заявленного отработанного субстрата как для весенних инокуляций свеженапиленных осиновых и тополиных обрубков (с1 > 20 см), так в качестве инокулюма стерилизованного соломистого субстрата при евротехнологии (2006-2007). Анализ полученных данных позволил сделать заключение о том, что инокулюм отработанного субстрата отличается, относительно мицелия на зерне, пониженной силой разрастания, что явно недостаточно для быстрой успешной колонизации стерилизованного соломистого субстрата. После проведенной в весенний период инокуляции 20 обрубков древесины: по пять торцевых отверстий, диаметром 2 см и глубиной 4-5 см, с покрытием вносимого субстрата опилочной пробкой -на всех привитых обрубках (сентябрь) получено плодоношение, т.о. заявленный субстратный материал пригоден для экстенсивного культивирования.

Глава 4. Перспективные направления защиты субстратов и Pleurotus ostreatus от конкурирующих микромицетов

В системе выращивания вешенки обыкновенной по европейской технологии к числу наиболее конкурентных по освоению субстрата организмов относятся виды микромицетов из родов Trichoderma, Aspergillus, Pénicillium, Rhi-zomukor. В процессе метаболизма большинство из них выделяют сильные токсины (антимикотики), устойчивость к которым отсутствует у не развитого мицелия Pleurotus ostreatus, что приводит к остановке его роста и гибели.

Для получения качественного питательного субстрата при выращивании Р. ostreatus по евротехнологии, при любом способе его подготовки, важен тщательный выбор партий качественной злаковой соломы, без очагов прелости. При этом качественная солома злаковых содержит определенную композицию покоящихся форм микроорганизмов (МО), представленную бактериями, акти-номицетами и микроскопическими грибами. При увлажнении сырья из соломы активность МО быстро возрастает. Мастерство приготовления качественного «живого селективного субстрата» состоит в сохранении и достаточном наращивании численности полезных (термофильных) МО и, одновременно, в инактивации или уничтожении антагонистичных конкурентных организмов.

Известно множество способов подготовки субстратов для культивирования P. ostreatus полустерильным и нестерильным способом, основанных на термической, химической или микробиологической защите. Некоторые из них обеспечивают получение субстрата с достаточным уровнем селективности, задерживающим развитие конкурентных организмов и позволяющим вешенке более результативно колонизировать его, достигнуть относительно высокого выхода МСЫР грибов. Анализ проведенного специального эксперимента по сравнению эффективности приемов и способов приготовления субстрата определил наиболее простые, надежные варианты и с лучшим выходом Мсыр грибов (табл. 5).

При использовании стерилизованного (автоклавированного) субстрата, инокулируемого качественным мицелием, в достаточном количестве (7%), но в нестерильных условиях, наблюдали развитие очагов колонизации конкурентов, которое приводило к существенным потерям урожая и т.д. В первом варианте итогового эксперимента (табл. 5) со стерильной подготовкой субстрата для выращивания P. ostreatus, продолжительность периода от инокуляции до первого сбора МСыр грибов была значительной -32-36 дней, в то время как в остальных вариантах (табл. 5, № 2-5) этот этап грибооборота составлял 24-28 дней. Продуктивность главного первого сбора МСыр грибов P. ostreatus в варианте № 1 была невысокая и составляла всего 11,6%.

Согласно литературным данным, в России культивирование P. ostreatus становится высокопродуктивным, если на первом сборе Мсыр грибов при евро-технологии удается получить плодоотдачу в 15% и более, а при суммарном количестве первых двух главных сборов Мсыр плодовых тел - более 20% (Тишен-ков, 2001). Более высокого уровня продуктивности можно достигнуть, используя субстраты с повышенной селективностью, путем введения в их состав фунгицида фундазола (в концентрации около 0,01 %) или размножения в массе субстрата термофильных бациллярных бактерий при ферментации.

Установлено, что бациллярные метаболиты, не оказывая, зачастую, существенного влияния на вегетативные формы как высших (вешенка), так и низших грибов (микромицетов), негативно воздействуют на них в стадии спор, сдерживая прорастание и снижая скорость развития, аналогично химическим фунгицидам (фундазол, бенлат, беномил). При этом в два раза удлиняется период (с 4-5 до 8-10 дней) до накопления в субстрате вегетативных форм сопутствующих конкурентных микромицетов, но за это время мицелий Р. ostreatus успевает колонизировать либо профундазоленный, либо «живой» ферментированный субстрат. На уровень потенциальной продуктивности Р. ostreatus, выращенных на ферментированных субстратах, могут оказывать позитивное воздействие водорастворимые полисахариды, различные витамины, стимуляторы роста, выделяемые в субстрат бактериями рода Bacillus. Кроме того, мицелий Р. ostreatus способен использовать большую часть накопленных в субстрате клеток термофильных бактерий в качестве источника углерода, азота, фосфора, а совместный комплекс гидролитических ферментов гриба и бацилл ускоряет разложение целлюлозы и лигнина (Камзолкина, 2006).

Согласно результатам наших исследований (табл. 5), в варианте 2 и 3 добиться повышения селективности субстрата наиболее просто, а по эффективности эти варианты практически равноценны. Однако вариант 2 позволяет существенно увеличить выход Мсыр грибов Р. ostreatus. Максимальной продуктивности Р. ostreatus удалось добиться на длительно ферментированных субстратах (вариант 4 и 5) (табл. 5). Дальнейшее увеличение продуктивности Р. ostreatus возможно, если использовать подобранную чистую культуру термофильных бацилл, особенно когда используется сырье для субстрата с недостаточным исходным титром нужных МО.

Фундазол - пестицид, действующим веществом которого является беномил - 500 г/кг. При его применении необходимо соблюдение экологического регламента: запрещается его использование в санитарной зоне вокруг рыбохо-зяйственных водоемов на расстоянии 500 метров от границы затопления при максимальном уровне паводковых вод. Считается, что мицелий Р. ostreatus, обладая активными ферментами, разрушает фундазол к началу плодоношения. Однако, слив влаги с фундазолом из субстратов в окружающую среду приводит к попаданию фунгицида в водоемы и включению в пищевые цепи, что создает экологически опасную ситуацию. В этом плане использование популяции термофильных МО и их метаболитов для ферментативной подготовки селективных субстратов предпочтительно с экологической точки зрения.

Фундазол - обязательный элемент при ксеротермической подготовке субстратов, но может применяться после любого способа термической стерилизации. Однако использовать фундазол при бациллярной ферментативной подготовке субстрата нерационально, поскольку он проявляет бактериостатическое влияние и сдерживает наработку ценных метаболитов.

В начале третьего тысячелетия все большее внимание уделяется методу аэробной ферментации, который позволяет создавать субстрат, обладающий высокой селективностью. Ферментация субстрата отличается от простой термообработки тем, что при подъеме температуры до 60-62 °С (>10 часов) проис-

ходит частичная пастеризация субстрата - уничтожаются мезофильные формы широкого спектра МО, но сохраняются термофильные спорообразующие бактерии. Постоянная подача свежего воздуха создает благоприятные условия для развития полезных аэробных МО и получения субстрата высокого качества.

Таблица 5

Сравнительная продуктивность Р. ойкеаШв при грибообороте на стерилизованных (1,2) и ферментированных субстратах (3,4, 5) (2007 г.)

Характерисгииг Вариант подготовки-^ субстрата (овсяная полова)\ Номер сбора Мсыр грибов Мсыр грибов с субстрата в мешке (по 2 кг), г П, % Количество грибов на субстрате,шт. Средняя Мсыр одного гриба, г

Пределы (М±ш)

1. Автоклавированная сухая 1 189-290 232±10 11,6 21 9,1

полова и ее замачивание 2 70-92 84±4 4,2 12 7,0

охлажденной кипяченной 3 32-80 65±8 3,3 10 6,5

водой Е (очаги сонкурентов) 19,1

2. Автоклавированная сухая 1 265-420 315±16 15,8 60 5,3

полова и ее замачивание 2 59-157 87±7 4,4 24 3,6

чистой водой с фундазолом 3 40-50 45±3 2,3 7 6,4

(0,01%) I 22,5

3. Заливка сухой половы 1 289-395 329±14*** 16,5 58 5,7

кипятком и 1,5-сугочное 2 66-130 97±8 4,8 25 3,9

остывание в емкости 3 40-52 45±3* 2,3 8 5,6

под крышкой (фактически I 23,6

полуфаза 2)

4. Замачивание сухой 1 492-532 508±6***А А А 25,4 102 5,0

половы водопроводной

водой,закладка в полиэти- 2 100-139 112±6* * * А А А 5,6 12 9,3

леновых мешках в термока-

меру: для суточной пастери- 3 37-65 47±3* 2,4 8 5,7

зации (при 62 °С), суточной Z 33,4

ферментации (при 50°С) и

суточного остывания

(т.е. фаза 2)

5. Тоже самое, но с предва- 1 452-550 511±8***АА А 25,6 60 8,5

рительной 2,5-суточной

заливкой водой в емкостях 2 128-290 222±9***ааа 11,1 31 7,2

(т.е. полуфаза 1 + фаза 2)

3 48-57 52±3 2,6 7 7,4

I 39,3

Примечание: количество посадочного мицелия составляла 5%, штамм P. ostreatus НК-35; достоверность различий от характеристик с условиями ферментированных субстратов от 1 варианта (стерилизованный субстрат) показана: р<0,05 (*); р<0,01 (**); р<0,001 (***);от характеристик 2 варианта (обработанный фунгицидом субстрат) показана: р<0,05 (а); р<0,01 (А А); р<0,001 (AAA).

В результате работы разработан способ использования эффективной чистой бациллярной культуры {Bacillus cereus) при анаэробной подготовке качественных «живых селективных субстратов» для выращивания Р. östreatus, с упрощением процесса предварительной ферментации и сокращением времени на подготовку субстрата достаточной селективности. Выявлено, что наибольшая эффективность в защите от конкурентов и стимуляции биопродуктивности Р. östreatus, растущей на «живых селективных субстратах» присуща бактериям из рода Bacillus, которые взяли из коллекции чистых культур и искусственно ввели в ферментируемый субстрат (Определитель бактерий Берджи, 1997; Прудникова и др., 2004;). В. subtilis рода Bacillus («сенная» палочка) распространена в атмосфере, переносится с пылью, встречается в почвах, наиболее распространена на пашнях основных зернопроизводящих регионов (Черников и др., 2004). Бактерии подгруппы В. subtilis известны как продуценты антибиотиков био-фунгицидного действия субтилина и бацитрацина, использующие углеводы только в аэробных условиях. В России и за рубежом запатентован ряд штаммов В. subtilis, ингибирующих рост фитопатогенных грибов и на основе которых в РФ налажено производство биофунгицидных препаратов (бактофит, бисолби-сан, интеграл, фитоспорин-М).

Для В. cereus отличительным признаком является способность использовать сахара как аэробно, так и при отсутствии кислорода воздуха (Прудникова и др., 2004). Этот вид выступает доминантой в экосистемах, где слабо протекают процессы трансформации органического вещества, т.е. на влажных сенокосах и полях с тяжелыми, периодически переувлажненными почвами. Поэтому на злаковой соломе, прошедшей комбайновую уборку и молотьбу, их количество очень мало. Очень важно, что В. cereus является продуцентом термостабильного антибиотика широкого спектра действия цвитгермицина (Handelsman et al., 1996). Вегетативные формы отмеченных термофильных бацилл способны сохранять жизнедеятельность при многочасовом воздействии температурой в 60-62 °С. Это подтверждено экспериментальными исследованиями (табл. 6), в которых использовались чистые культуры факультативного анаэроба В. cereus для создания качественных селективных субстратов в термостате. Установлено, что при использовании для замачивания и приготовления соломистого субстрата (как в фазе 2 - ферментация сразу, так и в фазе 1 + фаза 2-ферментация после трехсуточного замачивания) бациллярных суспензий «молодых» (свежих) культур В. subtilis или В. cereus, продуктивность культивируемого гриба существенно возрастает, относительно контроля (табл. 6). Максимально высокая продуктивность Р. östreatus в опыте на анаэробно ферментированной овсяной полове отмечена в вариантах с В. cereus. Обнаружено (вариант 4), что при использовании смеси нескольких культур бациллярных МО для ферментации субстратов, качество готового субстрата понижается (табл. 6). Это связано с конкуренцией за питательный субстрат и взаимным ингибированием роста. Конкуренция искусственно культивируемых МО происходит и с дикими формами, которые присутствуют на соломистом сырье и участвуют в процессе ферментации, однако их исходный титр, по-видимому, существенно ниже, чем у внесенных суспензий В. subtilis или В. cereus.

Таблица 6

Биопродуктивность Р. о$1геа1и$ (штамм НК-35) за два сбора Мсыр грибов в грибообороте на субстрате, залитом для ферментации бациллярными суспензиями (весна, 2007 г.)

Характеристики Вариант \ замачивания\ овсяной \ половы \ 1 Порядок сбора Мсыр грибов с субстрата Ферментация по схеме - фаза 2 Ферментация по схеме - фаза 1 + фаза 2

Период от инокуляции до первого сбора Мсыр грибов и между сборами, дн. Мсыр грибов с субстрата в мешке (по 2 кг), г | (М ± т) П,% Количество грибов на субстрате в мешке, шт. 1 Средняя Мсыр одного гриба, г Период от инокуляции до первого сбора Мсыр грибов и между сборами, дн. Мсыр грибов с субстрата в мешке (по 2 кг), г (М±т) П, % Количество грибов на субстрате в метке, тпт. Средняя Мсыр одного гриба, г

1.Заливка водой (контроль) 1 2 7 20-22 14-16 476±10 86±1 562±9 23,8 4,3 28,1 72 13 6,6 6,6 24-26 9-12 511±14 221±2 732±11 25,6 11,0 36,6 60 31 8,5 7,1

2. Суспензия Вас. subtilis 1 2 7 20-22 15-17 509±13а 109±7а 618±10аа 25,4 5,5 30,9 83 15 6,1 7,3 25-27 9-10 550±16а 234±4а аа 784±14аа 27,5 11,7 39,2 84 33 6,5 7,1

3. Суспензия Вас. cereus 1 2 7 21-23 14-16 542±4аа а 37±12аа а 679±10а аа 27,1 6,9 34,0 68 27 8,0 5,1 25-26 10-11 583±12аа а 246±8 а 829±9а а а 29.2 12.3 41,5 51 35 11,4 7,0

4. Смесь суспензий В. subtilis + В. cereus (1:1) 1 2 I 22-24 16-17 482±6 123±5 а а а 605±4ааа 24.1 6,1 30.2 89 21 5,4 5,9

Примечание: достоверность различий характеристик штамма НК-35 в условиях разных фунгоэкосистем в сравнении с контролем показана: р<0,05 (а); р<0,01 (а а); р<0,001 (а а а); субстрат из половы овса был помещен в термостат для ферментации сразу (фаза 2) или после трехсуточного замачивания (фаза 1+ фаза 2); количество зернового посадочного мицелия 3%.

Глава 5. Сравнительный анализ и оценка стерильной и нестерильной

технологий интенсивного культивирования грибов рода Pleurotus

В настоящее время в России для интенсивного культивирования вешенки обыкновенной в основном используется фактически нестерильная европейская (венгерская) технология на крупных полиэтиленовых мешках со специально подготовленным из соломы субстратом. Однако большая часть культурных грибов-ксилотрофов в мире выращивается по стерильной (азиатской) технологии, которая до последнего времени практически не использовалась для культивирования грибов в Европе и России. Возможно, что большое будущее за европейской биотехнологией. Нами разработаны экологические аспекты (объем и качество сырья субстратов, количество вносимого мицелия, питательных добавок, сезонные климатические факторы и т.д.) азиатской и европейской технологий интенсивного выращивания Pleurotus в условиях Хабаровского Приамурья.

В результате исследования определены важнейшие детерминирующие факторы культивирования Pleurotus по стерильному (азиатский) способу, которыми являются: питательные добавки к опилочному субстрату (пшеничные отруби - 25-30%, овсяные зерновые отходы - до 30-40%, размол соевой соломы (труха) - до 50%, смесь 10% отрубей + 20% смеси отработанного субстрата-кекинга), вид и штамм базидиомицета, объем субстрата до 1 литра. К положительным сторонам стерильной технологии, в сравнении с европейской нестерильной технологией, можно отнести применение мицелия менее 1%, незаменимость для культивирования оригинальных видов рода Pleurotus с медленным линейным ростом мицелиальных гиф, а также возможность решения задачи получения посадочного материла для экстенсивного культивирования. Отрицательная сторона касается высоких затрат ручного труда и обязательное создание стерильных условий защиты субстратов от конкурентов на всех этапах культивирования.

Заключение

В исследовании проанализированы варианты оптимизации процессов культивирования расширенного состава видов грибов рода Pleurotus - P. eryngii (королевская или степная), P. citrinopileatus (дальневосточная ильмовая) и P. jla-bellatus (субтропическая розовая), в разных сезонах, связанных в первую очередь с разной освещенностью и термическими условиями.

Вешенка королевская (Pleurotus eryngii (ДСFr.) Quel), отличается длительной сохранностью в свежем виде (3 недели). Ее выращивание обусловлено сезоном года (весна, осень), предполагает применение длительно лежалых опилок и кэкинга, азиатской технологии выращивания, а также прореживание при-мордиев в сростках (Тишенков, 2006; Вонг-Зи-кьянг, 2008).

Другие виды вешенки: обыкновенная, в т.ч. легочная и флоридская, ли-монношляпковая и розовая отличаются более короткой сохранностью плодовых тел (от 2-х до 5-ти дней). Термолабильные виды - желтая P. citrinopileatus и розовая P. flabellatus, достигают качественного плодоношения при температурах 27-30 °С, что делает возможным стабилизировать процесс интенсивного культивирования в Хабаровском Приамурье в летний период времени.

Установлено (табл. 7), что Р. сИппорИеаШя, и особенно Р. ]1аЬе11аШ$ в летний период содержат больше сырого протеина и минеральных элементов, чем Р. ойНеаШ, а биоаккумуляция тяжелых металлов в термолабильных искусственно культивируемых видах ниже, чем в Р. оьЬгеаШь и не превышает ПДК.

Таблица 7

Химический состав сухой массы грибов (М±т) разных видов рода Pleurotus

(лето, 2006 г.)

^Характеристики Массовая доля белка и минеральных элементов, % сухой массы Содержание микроэлементов, мг/кг сухой массы

ö О м fe S « - Ca Fe Zn Си Ni РЬ Hg

Вид вешенки §■ о d & р, g з g о "

1. Р. os/realus (НК-35) 34,2± 1,1 8,3± 0,29 0,03± 0,001 35.2± 1,2 22,4± 2,5 2,3± 0,08 0,4± 0,02 3,0± 0,21 0,004± 0,0001

2. Р. citrinopileatus (ВИХ-1) 36,1± 2,3 9,2± 0,30* 0,10± 0,004 *** 93,4± 2,0 *** 27,9± 2,1 3,7± 0,04 *** 0,2± 0,01 2,9± 0,21 0,003± 0,0001 ***

3. Р. flabel latus («Фламинго») 38,4± 2,1* 9,3± 0,31* 0,14± 0,005 *** 72,0± 1,6 *** 30,9± 3,1 7,4± 0,4 *** 0,6± 0,05 *** 2,8± 0,24 0,002± 0,0002 ***

ПДК <100 <50 <30 <11 <3,0 <0,03

Примечание: здесь и далее из табл. 3

Из таблицы 8 видно, что по биопродуктивности за сумму трех сборов МСыр грибов, для успешного культивирования Р. с'иппорИеаШБ и Р. АаЬеИаШя допустимы высокие температуры для образования и роста плодовых тел. Уровень плодоотдачи Р. оя^еаШя при этом снижается, а плодовые тела хуже по качеству, чем при культивировании в осенний, зимний и весенний периоды.

Р. сИппорИеШш (ильмак) скороплодный, содержит каротин. К недостатку относится хрупкость и короткая сохранность плодовых тел. Используемые для интенсивного культивирования штаммы Р. сИгторйеаШэ фактически не отличаются от диких форм. Сравнительные испытания в ДальНИИСХ посадочного материала собственного спорового изолята из Хабаровского края (ВИХ-1) и полученного через научный обмен из северного Китая, показали близкие результаты продуктивности, морфологии и биологии этих штаммов. Р. сШпорИеаШ не переносит ферментированные субстраты, поэтому успешно культивируется по стерильной азиатской технологии.

Р. /1аЬе11аШ по урожайности уступает как Р. 0й1геа1ш, так и Р. сИгторНеа-Шя, но, учитывая питательность и целебные свойства, эстетичный вид и вкус, ее считают ценной (Краснопольская и др., 2001). Достоинство Р. /¡аЬеПаШя в отсутствии ножки, поэтому вся Мсыр грибов представлена только шляпками, в то время как у Р. оз^еаШз существенная часть Мсыр грибов приходится на волокнистые ножки, а у Р. сИгторИеа1ш - на клубневидное основание сростка.

Таблица 8

Продуктивность некоторых видов рода Р1еигоШ при различном температурном режиме и освещенности (весна-лето, 2006 г.)

Весна, 1и < 20°С Лето, t° > 25"С

общая П,% качество общая П,% качество

Вид вешенки Мсыр плодовых Мсыр плодовых

грибов с субстрата, г тел грибов с субстрата, г тел

1. Р. о$1геаШя 1017 25,4 высокое 725±16,4 18,2 низкое

(НК-35) ±11,2

2. Р. сИгторНеаШз 544 13,6 высокое 801 20,1 высокое

(ВИХ-1) ±9,8»** ±8,1***

3. Р.АаЬеМаШ 320 8,0 высокое 488 12,2 очень

(«Фламинго») ±15,9*** ±10,6*** высокое

Примечание: масса субстрата из половы в мешках по 4 кг; продуктивность представлена по сумме трех сборов Мсыр грибов с мешков; -//-// -// - Н -.

Выводы

1. Адаптивные возможности, продуктивность, биохимический состав окультуренных видов и коллекционных штаммов рода Р1еиШт, в том числе впервые полученной Р1еиШш сИппорИеаШ ВИХ-1, зависят от факторов культивирования: времени года, освещенности, состава и способа приготовления субстрата, качества и количества посадочного мицелия для инокуляции. Выделен перспективный и продуктивный гриб-ксилотроф РкигоШя ов1геаШя для культивирования в условиях Хабаровского Приамурья.

2. Использование смесовых субстратов, полученных в местных условиях (фрагменты кукурузных стержней, солома и полова овса) для культивирования разных штаммов и видов Р1еигоШв, не приводит к превышению ПДК по содержанию элементов, в том числе тяжелых металлов в плодовых телах исследуемых грибов.

3. Применение посадочного мицелия выращенного на стерилизованном (автоклавирование при 1,5 Атм, 120°С, 3 часа) зерне овса в количестве 5% приводит к повышению уровня продуктивности Р1еиго1из озП-еМив на 9,9%, по сравнению с использованием посадочного стерильного мицелия выращенного на мелкосеменных субстратах - 9,1%.

4. Полово-опилочный материал в соотношении 4:1 полученный после культивирования Р. 051геаШ в стеклянных банках под двумя слоями фольги пригоден для вторичного использования в качестве посадочного мицелия при экстенсивном культивировании гриба (на пнях и обрубках древесины). Процесс выращивания грибов рода Р1еигоШ по стерильной технологии можно оптимизировать путем внесения питательных добавок к опилочному субстрату: пшеничные отруби - 25-30%; овсяные зерновые отходы - 30-40%; размол соевой соломы -до 50%; смесь 10% отрубей и 20% отработанного субстрата-кекинга. Количество мицелия для инокуляции в этом случае составляет менее 1%.

5. При определении влияния различных биотических и абиотических факторов на процессы культивирования разных видов и коллекционных штаммов рода Pleurotus были выделены штаммы НК-35, А-77, В-1, «Корея» и «Америка» Pleuroíus ostreatus с высоким адаптивным потенциалом для культивирования на селективном субстрате - соломе и полове овса, обработанной фунгицидом фундазолом с минимально эффективной концентрацией для защиты от конкурентов -0,01%, или прошедшей ферментацию термофильными природными анаэробными микроорганизмами. Продуктивность на субстратах прошедших химическую обработку фундазолом была ниже, чем после их бактериальной ферментации. Применение фундазола приводит к угнетению термофильных природных анаэробных микроорганизмов.

6. Защита питательного субстрата из соломы от конкурентных микромице-тов в искусственно созданной модельной микроэкосистеме с Bacillus subtilis и 1 или Bacillus cereus в анаэробных условиях (субстрат заливают водой) способствует увеличению продуктивности Р. ostreatus до 42%. Высокая селективность анаэробно-ферментируемых субстратов позволяет проводить инокуляцию без соблюдения стерильных условий, предотвращает образование очагов колонизации конкурентных микромицетов и снижает расход инокулюма (посадочного мицелия) до 3%.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

Статьи, опубликованные в журналах рекомендованных ВАК

1. Анненков Б.Г. Научное обеспечение грибоводства в Приамурье / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Вестник РАСХН, 2008, № 4. - С. 45-48.

2. Анненков Б.Г. Сравнительная оценка способов повышения селективности соломистых субстратов для успешного выращивания вешенки обыкновенной по евротехнологии / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Доклады Россельхоза-кадемии, 2009, №6. - С. 25-28 .

Патент РФ на изобретение

3. Анненков Б.Г. Способ интенсивного выращивания вешенок и производство субстратного посадочного мицелия для их экстенсивного культивирования / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова //№ 2378821 от 17.04.2008.

Статьи в других журналах и в научных сборниках

4. Анненков Б.Г. Научные основы грибоводства и интенсивного культивирования вешенок в Приамурье / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Научные основы повышения эффективности с.-х. производства на Дальнем Востоке России: матер. IV Казьминских чтений, 29 ноября 2005 г. - Хабаровск: ДальНИИСХ, 2006.-С. 130-140.

5. Анненков Б.Г. Сравнительная оценка венгерской и китайской технологий интенсивного выращивания вешенок / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Энергосберегающие технологии возделывания с.-х. культур в условиях Дальнего Востока: матер, науч. сессии, к 70-летию ДальНИИСХ, Хабаровск, 14-15 июля 2005 г.: науч.тр. / ДальНИИСХ. - Владивосток: Дальнаука, 2006. - С. 225233.

6. Анненков Б.Г. Внедрение в приамурское грибоводство новых оригинальных видов вешенок / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Современное научное

обеспечение дальневосточной аграрной отрасли: матер. V Казьминских чтений, Хабаровск, 29 ноября 2006 г. - Хабаровск: ДальНИИСХ, 2007. - С.51-60.

7. Азарова В.А. Использование новых видов вешенок для интенсивного грибоводства на Дальнем Востоке / В.А. Азарова // Наука—Хабаровскому краю: матер. IX краевого конкурса молод, ученых, Хабаровск, 15-23 янв.2007 г. - Хабаровск: ТОГУ, 2007. - С. 82-96.

8. Анненков Б.Г. Методические основы производства в ДальНИИСХ качественного посевного мицелия съедобных грибов-ксилотрофов / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Лесные биологически активные ресурсы (берёзовый сок, живица, эфирные масла, пищевые, технические и лекарственные растения): матер, третьей междун. конф., Хабаровск, 25-27 сент. 2007 г. — Хабаровск: ДальНИ-ИЛХ, 2007. - С. 234-240.

9. Чайка А.К. Научное обеспечение развития грибоводства в Дальневосточном Федеральном округе / А.К. Чайка, Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Инновационное развитие как приоритет экономической политики в регионах Востока России: матер. Второго дальнев. междун. эконом, форума, Хабаровск, 1819 сент. 2007 г. - Хабаровск, 2007, том 7. - С. 214-222.

10. Анненков Б.Г. Проблемы и перспективы массового грибоводства в Дальневосточном Федеральном округе / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова, Е.Д. Целых // Российко-китайское приграничье в интеграционных процессах в СВА: проблемы и перспективы: матер, междун. конф., Благовещенск, 27-29 сент. 2007 г.- Благовещенск: ИГиП ДВО РАН, 2007. - С. 55-61.

11. Анненков Б.Г. Хабаровский центр научного обеспечения дальневосточного грибоводства / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Школа грибоводства, 2008, № 1,-С. 46-53.

12. Анненков Б.Г. Сортимент культурных вешенок для интенсивного грибоводства в ДФО / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Современное состояние и перспективы развития овощеводства и картофелеводства на юге Дальнего Востока России: матер, науч.-практич. конф., посвященной 20-летию Прим. овощ, оп. станции, Артём, 7 августа 2008 г. - Артём, 2008 - С. 285-303.

13. Анненков Б.Г. Способы повышения элективности субстрата для интенсивного культивирования вешенки обыкновенной / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Дальневосточный аграрный вестник, 2008, №1 - С. 29-35.

14. Анненков Б.Г. Использование Bacillus cereus в создании качественных избирательных субстратов для интенсивного культивирования вешенки обыкновенной / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Дальневосточный аграрный вестник, 2008,№2-С. 9-17.

15. Анненков Б.Г. Методика совмещения процессов интенсивного культивирования вешенок в стеклобанках и наработки субстратного инокулюма для экстенсивного грибоводства / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Дальневосточный аграрный вестник, 2008, № 4. — С. 10-15.

16. Азарова В.А. Биотехника интенсивного культивирования вешенки в стеклобанках и использования отработанного субстрата для прививок гриба на чурки / В.А. Азарова, Б.Г. Анненков // Биологические и агротехнические исследования - сельскохозяйственному производству Дальнего Востока: матер, на-

уч.-практич, конф. молод, ученых, Благовещенск, 11-13 марта 2008 г. - Благовещенск: ВНИИсои, 2009. - С. 167-173.

17. Анненков Б.Г. Коллекция штаммов вешенки обыкновенной, их оценка и использование в грибоводстве / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Дальневосточный аграрный вестник, 2009, № 1. — С. 22-28.

18. Анненков Б.Г. Научно-биотехнологические основы искусственного культивирования съедобных грибов-ксилотрофов на Дальнем Востоке России / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Актуальные вопросы развития аграрной науки в Дальневосточном регионе: науч. тр. / ДВНЦ РАСХН. - Владивосток: Дальнау-ка, 2009. - С. 96-106.

Тезисы и сообщения

19. Азарова В.А. Исследования по интенсивной культуре вешенок в Дальневосточном НИИСХ / В.А. Азарова, Б.Г. Анненков// Молодые ученые аграрному комплексу ДФО: матер, per. науч.-практ. конф., Благовещенск, 23-24 ноября 2005 г. - Благовещенск: Даль ГАУ, 2005. - С. 195-197.

20. Анненков Б.Г. Научное обеспечение Хабаровского грибоводства / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Природопользование на Дальнем Востоке России : тез. докл. науч. конф. Хабаровск, РАЕН, 19-20 янв. 2006 г.). —Хабаровск: ИВЭП ДВО РАН, 2006. - С. 8-10.

21. Анненков Б.Г. Разработка актуальных вопросов интенсивного культивирования древесных грибов / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Ресурсы и экологические проблемы Дальнего Востока: матер, науч.-практич. конф., Хабаровск, 20-22 февраля 2006 г.) - Хабаровск, ДВГГУ, 2006 - С. 3-6.

22. Анненков Б.Г. Интродукция в интенсивное грибоводство теплостойких видов вешенок - лимонношляпковой (P. citrinopileatus) и розовой (Р. flabellatus) / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Современное состояние лесной растительности и ее рацииональное использование: матер, межд. конф., посвящ. 110-летию дендрария ДальНИИСХ, 18-19 октября 2006 г., Хабаровск). - Хабаровск, 2006. - С. 44-48.

23. Анненков Б.Г. Культивируемые съедобно-целебные грибы-ксилотрофы в ДФО / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова, Е.Д. Целых, И. А. Толмачева, А.И. Коло-товкина Н Инновационные технологии в области холодильного хранения и переработки пищевых продуктов: матер, межд. науч.-практич. конф., Краснодар, 15-16 сент. 2008 г. - Краснодар: КНИИХПСП, 2008. - С. 16-18.

24. Анненков Б.Г. Первоосновы биотехнологии выращивания Pleurotus ostreatus на Амуре / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Леса России в XXI веке: матер, первой межд. науч.-практ. интернет-конф., СПб, июль 2009 г.- СПб.: СПбГЛТА, 2009. - С. 3-6.

25. Анненков Б.Г. Искусственное разведение съедобных видов древесных вешенок, аборигенов Амуро-Уссурийской тайги / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Состояние лесов Дальнего Востока и актуальные проблемы лесоуправления: матер. Всерос. конф. с междунар. участием, посвященной 70-летию ДальНИ-ИЛХ, Хабаровск, 6-8 окт. 2009 г.- Хабаровск: ДальНИИЛХ, 2009. - С. 108-111.

Научное издание

Азарова Василина Александровна

ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИНТЕНСИВНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ГРИБОВ РОДА РЬЕиЯОТиЗ В ПРИАМУРЬЕ

Автореферат

Подписано в печать 17.03.2010. Формат 60^84 1/16 Бумага писчая. Гарнитура «Тайме». Печать RISO. Усл. печ. л. 1,39.

Тираж 100 экз. Заказ 48.

Издательство Дальневосточного государственного гуманитарного университета. 680000, Хабаровск, ул. К. Маркса, 68.

Отдел оперативной полиграфии издательства Дальневосточного государственного гуманитарного университета. 680000, Хабаровск, ул. Лермонтова, 50.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Азарова, Василина Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. КУЛЬТИВИРУЕМЫЕ ДРЕВЕСНЫЕ ГРИБЫ РОДА PLEUROTUS (обзор литературы).

1.1. Экология дикорастущих и культивируемых видов рода Pleurotus

1.2. Вешенка как перспективный продукт питания.

1.3. Перспективы развития методов культивирования грибов — ксилотрофов.

1.4. Вешенка как объект мирового, отечественного и приамурского культивирования. 1.5. Научно-биотехнологические основы оптимизации процессов интенсивного культивирования вешенок.

Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 3. НАУЧНЫЕ ОСНОВЫ ПОЛУЧЕНИЯ ПОСАДОЧНОГО МИЦЕЛИЯ И КУЛЬТИВИРОВАИЯ ВИДОВ И ШТАММОВ БАЗИДИОМИЦЕТОВ РОДА PLEUROTUS.

3.1. Оценка, выделение и использование адаптивных штаммов Pleurotus ostreatus из хабаровской коллекции грибов—ксилотрофов.

3.2. Оптимизация процессов производства качественного посадочного мицелия базидиомицетов рода Pleurotus в Приамурье для эффективного интенсивного культивирования грибов.

3.3. Биотехника совмещения процессов интенсивного культивирования P. ostreatus в стеклянных банках и массовой наработки субстратного инокулюма для прививок гриба на пнях.

Глава 4. ПЕРСПЕКТИВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ ЗАЩИТЫ СУБСТРАТОВ И PLEUROTUS OSTREATUS ОТ КОНКУРИРУЮЩИХ МИКРОМИЦЕТОВ.

4.1. Поиск простых и надежных способов повышения селективности субстратов для культивирования P. ostreatus по евротехнологии.

4.2. Использование Bacillus cereus в создании качественных селективных субстратов для более эффективного культивирования Р. ostreatus по евротехнологии.

Глава 5. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ И ОЦЕНКА СТЕРИЛЬНОЙ И НЕСТЕРИЛЬНОЙ ОПТИМИЗАЦИИ ПРОЦЕССОВ ИНТЕНСИВНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ PLEUROTUS OSTREATUS.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экологические аспекты интенсивного культивирования грибов рода Pleurotus в Приамурье"

Актуальность темы. Проблема загрязнения окружающей среды эко-токсикантами, оскудение лесных угодий в начале XXI века привели к тому, что население Дальневосточного Федерального округа России все меньше используют дикоросы для пищевых хозяйственных целей (Мухамедшин, Мухамедшин, 2005). Грибы — белковая, деликатесно-целебная пища, важный источник адаптогенов, становятся опасными и малодоступными для жителей региона. В то же время во всем мире наблюдается всевозрастающий бум производства и потребления культурных безопасных грибов. В условиях нарастания угрозы глобального продовольственного кризиса, культивируемые грибы призваны мировым сообществом, наряду с соей, птицей, рыбой, решать проблемы дефицита белка и сбалансированного (здорового) питания (Гарибова, 2005; Заикина и др., 2007).

Современные исследования в областях фунгобиохимии и фунготерапии показали, что вешенка, как и некоторые другие грибы-ксилотрофы, является продуцентом редких целебных и онкостатических соединений: антибиотиков, антиоксидантов, иммуномодулирующих полисахаридов ((З-Д-глюканы) и димерных лектинов (Wang et al., 2000; Zhao et al., 2000; Буллах, 2001; Бухман и др., 2003; Меерович и др., 2005; Краснопольская и др., 2006; Заикина и др., 2007).

В России сейчас наиболее широко культивируются два вида съедобных грибов — шампиньон двуспоровый (Agaricus bisporus) и вешенка обыкновенная (Pleurotus ostreatus). Ксилосапротроф вешенка пока является вторым после шампиньона по объему выращивания в стране, годовой результат культивирования ее превысил 4 тысячи тонн (Хренов, 2008), но эта статистика не учитывает количество грибов, получаемое любителями-грибоводами.

В последние годы отмечаются отечественные и зарубежные исследования, в которых особое значение придается оптимизации культивирования путем регулирования абиотических и биотических факторов, защите инокулируемых сельскохозяйственных субстратов и мицелия Pleurotus ostreatus от конкурентных микромицетов в условиях полустерильной евротехнологии выращивания (Дудка, Вассер, 1978; Павлов, Девочкин, 1987; Бисько, Дудка, 1987; Дудка и др., 1992; Морозов, Тимофеев, 2001; Карпов, Тишенков, 2003; Сычев, Ткаченко, 2003; Морозов, 2004; Матершев, 2006, 2007; Тишенков, 2009).

Ситуация развития грибоводства в Приамурье связана, в первую очередь, с массовым выращиванием вешенки обыкновенной (.Pleurotus ostreatus) как наиболее перспективного вида (Беляев, 2000; Измоденов, 2008).

Проблемы эффективного интенсивного культивирования грибов во многом обусловлены отсутствием региональных исследований и слабой изученностью многих экологических аспектов технологических процессов (влияние сезонного фактора (освещенностью), конкурентных отношений между бази-диомицетами и микромицетами и другие), а также недостаточным использованием различных видов и штаммов из рода Pleurotus.

Отечественному опыту товарного (интенсивного) выращивания вешенки обыкновенной три десятилетия. Это эволюционный путь зарубежных заимствований от стерильной (баночной) азиатской технологии до современной фактически нестерильной евротехнологии. Однако инновационный характер становления приамурского грибоводства и задачи повышения его эффективности и конкурентоспособности в российско-китайском приграничье предполагают апробацию и постоянную модернизацию используемых в мире технологических процессов, их упрощение и адаптацию к условиям Приамурья. Патентные исследования убеждают, что создаваемые условия интенсивного культивирования вешенок без учета биологии грибов будут слепы, без экологии - опасны, а без эффективной защиты от конкурентов - фактически мертвы.

Защита в грибоводстве защищенного грунта мощный, наукоемкий фактор эффективного и экологичного культивирования. Особое значение в евро-технологии выращивания Pleurotus (принятой в России) имеет защита инокулированных мицелием Pleurotus сельскохозяйственных субстратов и развивающейся Pleurotus ostreatus от конкурентных вредоносных микроскопических грибов («сорных плесеней»), справляться с которыми пытались, используя сначала термические (тщательное пропаривание и проваривание), затем химические (используя фунгициды: фундазол, бенлат, беномил) и микробиологические способы подготовки соломистых субстратов. Широкое использование в евротехнологии фундазола создает экологически опасную ситуацию, поэтому роль микробиологической защиты при получении безопасной грибной продукции в Европе и России непрерывно возрастает.

Несмотря на многообразие исследований, выполненных в России и за рубежом, разработка технологических принципов создания селективных субстратов, создание искусственных фунгоэкосистем и оценка устойчивости различных видов вешенки остается одной из основных проблем дальневосточного грибоводства. Биологизация систем защиты субстратов инокулиро-ванных вешенкой — основа экологизации дальневосточного эффекивного культивирования.

Цель исследования: разработать экологические принципы оптимизации процессов функционирования искусственных фунгоэкосистем для интенсивного выращивания вешенки в'условиях Хабаровского Приамурья.

Задачи исследования:

Защищаемые положения:

3. Искусственно созданная модельная микроэкосистема {Pleurotus + Bacillus) активизирует ферментацию субстрата и ингибирование роста мик-ромицетов. В этом случае исключается конкуренция за субстрат и необходимость в использовании химических фунгицидов.

Впервые наиболее перспективным для Приамурья объектом грибоводства определен вид — вешенка обыкновенная {Pleurotus ostreatus), выделены другие перспективные виды и штаммы вешенок, пригодные для использования, как при интенсивном, так и экстенсивном культивировании.

Впервые детально разработаны научно-методические основы получения качественных «селективных живых субстратов» с использованием

Bacillus subtilis, и особенно Bacillus cereus.

Впервые дана оценка отличительных элементов стерильного (азиатский) и нестерильного (европейский) методов интенсивного культивирования вешенок и сформирована научно-технологическая система эффективного массового получения грибов в условиях Хабаровского Приамурья.

Практическая значимость. Разработаны способы, способствующие для стабилизировано-прогрессивного выращивания вешенок в региональных условиях. Впервые определены рациональные нормы расхода компонентов фунгоэкоситем: питательных добавок к соломистому и опил очному субстрату, количество мицелия; объем микроэкосистемы.

На основе созданной и сохраняемой генетической коллекции культивируемых видов вешенок впервые организовано производство качественного посадочного мицелия на зерне овса. Исследования в области интенсивной культуры вешенок, производства качественного посадочного мицелия и сохранения генетической коллекции грибов-ксилотрофов были поддержаны грантами Правительства Хабаровского края №15-261 от 30.12.2005 года, №15-353 от 2.02.2007 года и №15-383 от 10.01.2008 года. По материалам диссертационных исследований выдан патент РФ на изобретение «Способ интенсивного выращивания вешенок и производство субстратного посадочного мицелия для их экстенсивного культивирования» № 2378821 от 17.04.2008.

Личный вклад автора. Диссертационная работа является результатом исследований автора, выполненных согласно планам НИР ГНУ—ДВ ордена ТКЗ НИИ РАСХН. Фактические данные по разработке эколого-технологических вопросов, связанных с созданием искусственных микроэкосистем, получены автором при его непосредственном участии в лабораторных опытах, включая проведение модельных экспериментов, приготовление питательных сред и субстратов, анализ и обобщение полученных результатов.

2006); на IV и V Казьминских научных чтениях «Научные основы повышения эффективности сельскохозяйственного производства на Дальнем Востоке России (Хабаровск, 2005), «Современное научное обеспечение дальневосточной аграрной отрасли» (Хабаровск, 2006); на Втором Дальневосточном международном экономическом форуме «Инновационное развитие как приоритет экономической политики в регионах Востока России» (Хабаровск,

2007); на международной научной конференции «Российско-китайское приграничье в интеграционных процессах в СВА: проблемы и перспективы» (Благовещенск, 2007); в региональной конференции «Молодые ученые аграрному комплексу ДФО» (г. Благовещенск, 2005); во всероссийской конференции с международным участием «Состояние лесов Дальнего Востока и актуальные проблемы лесоуправления» (Хабаровск, 2009); на VIII и IX Хабаровских краевых конкурсах молодых ученых и аспирантов (Хабаровск, 2006, 2007; диплом III степени).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 25 научных печатных работ, в т.ч. в изданиях, рекомендованных ВАК —2 и патент РФ на изобретение —1.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 153 страницах компьютерного текста, содержит 35 таблиц и 25 рисунков. Состоит из введения, пяти глав, заключения, выводов и рекомендаций. Список литературы включает 194 источника, в т.ч. 23 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Азарова, Василина Александровна

выводы

1. Адаптивные возможности, продуктивность, биохимический состав окультуренных видов и коллекционных штаммов рода Pleurotus, в том числе впервые полученной Pleurotus citrinopileatus ВИХ-1, зависят от факторов культивирования: времени года, освещенности, состава и способа приготовления субстрата, качества и количества посадочного мицелия для инокуляции. Выделен перспективный и продуктивный гриб-ксилотроф Pleurotus ostreatus для культивирования в условиях Хабаровского Приамурья.

2. Использование смесовых субстратов, полученных в местных условиях (фрагменты кукурузных стержней, солома и полова овса) для культивирования разных штаммов и видов Pleurotus, не приводит к превышению ПДК по содержанию элементов, в том числе тяжелых металлов в плодовых телах исследуемых грибов.

3. Применение посадочного мицелия выращенного на стерилизованном (автоклавирование при 1,5 атм, 120°С, 3 часа) зерне овса в количестве 5% приводит к повышению уровня продуктивности Pleurotus ostreatus на 9,9%, по сравнению с использованием посадочного стерильного мицелия выращенного на мелкосеменных субстратах — 9,1%.

4. Полово-опилочный материал в соотношении 4:1 полученный после культивирования Pleurotus в стеклянных банках под двумя слоями фольги пригоден для вторичного использования в качестве посадочного мицелия при экстенсивном культивировании вешенок (на пнях и обрубках древесины). Процесс выращивания грибов рода Pleurotus по стерильной технологии можно оптимизировать путем внесения питательных добавок к опилочному субстрату: пшеничные отруби — 25-30%; овсяные зерновые отходы — 30-40%; размол соевой соломы -до 50%; смесь 10% отрубей и 20% отработанного субстрата-кекинга. Количество мицелия для инокуляции в этом случае составляет менее 1%.

5. При определении влияния различных биотических и абиотических факторов на процессы культивирования разных видов и коллекционных штаммов рода Pleurotus были выделены штаммы НК-35, А-77, В-1, «Корея» и «Америка» Pleurotus ostreatus с высоким адаптивным потенциалом для культивирования на селективном субстрате - соломе и полове овса, обработанной фунгицидом фундазолом с минимально эффективной концентрацией для защиты от конкурентов -0,01%, или прошедшей ферментацию термофильными природными анаэробными микроорганизмами. Продуктивность на субстратах прошедших химическую обработку фундазолом была ниже, чем после их бактериальной ферментации. Применение фундазола приводит к угнетению термофильных природных анаэробных микроорганизмов.

6. Защита питательного субстрата из соломы от конкурентных микро-мицетов в искусственно созданной модельной микроэкосистеме с Bacillus subtilis и / или Bacillus cereus в анаэробных условиях (субстрат заливают водой) способствует увеличению продуктивности P. ostreatus до 42%. Высокая селективность анаэробно-ферментируемых субстратов позволяет проводить инокуляцию без соблюдения стерильных условий, предотвращает образование очагов колонизации конкурентных микромицетов и снижает расход ино-кулюма (посадочного мицелия) до 3%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В качестве базового объекта приамурского грибоводства (с конца лета до начала следующего лета) рекомендуется использовать вешенку обыкновенную {Pleurotus ostreatus), стерильный (на зерне овса) посадочный мицелий ее адаптированных мировых сортов (штаммов) из коллекции ДальНИ-ИСХ (НК-35, А-77, В-1, «Америка» и «Корея») и европейскую технологию оптимизации процессов интенсивного культивирования.

2. На начальных этапах организации в Приамурье грибных производств, для создания селективных, питательных субстратов для выращивания вешенки обыкновенной по евротехнологии предлагается использовать самый скорый, простой, экологичный, вполне эффективный способ - заливкой в крупных чанах под крышкой фрагментированной соломы зерновых растений горячей водой с последующим 1,5-суточным термобациллярным анаэробным ферментированием, тщательным сливом влаги и остыванием до 25—30 °С.

3. Для подготовки высококачественных селективных субстратов в анаэробных условиях, особенно при использовании смесового сырья или с низким титром нужной природной микрофлоры необходимо до заливки горячей водой вносить в чан суспензию свежей чистой культуры факультативного анаэроба Bacillus cereus (размножаемую на питательной среде КГА).

4. При выращивании видов вешенок экстенсивным методом (на пнях и обрубках древесины), в качестве прививочного материала вполне можно использовать отработанный (после двух главных сборов сырой массы грибов) в стерильной (баночной) технологии интенсивного культивирования (от зимне-весенних грибооборотов) субстрат, сохраняемый до мая месяца при низких положительных температурах (хранилище, погреб, холодильник).

5. Для стабилизации интенсивного культивирования в летний период целесообразно закладывать грибообороты с термофильными видами вешенок -P. citrinopileatus и P. flabellatus, способные давать эстетичные и качественные грибы (соответственно ярко-желтые и розовые) при температурах до 27-30 °С.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Азарова, Василина Александровна, Хабаровск

1. Автономова А.В. Лекарственные грибы: путь от научной информации до получения лечебного эффекта / А.В. Автономова, Л.М. Краснопольская // Школа грибоводства, 2007, № 6.- С. 48-50.

2. Анненков Б. Г. Научно-технологические основы использования методов фитопатологии и биотехнологии при селекции и семеноводстве картофеля в Приамурье: дис. в виде науч. докл. . докт. с.-х. наук / Б. Г. Анненков. Хабаровск // ДальНИИСХ, 1996. - 65 с.

3. Анненков Б.Г. Производство зернового мицелия съедобных грибов: Ин-форм.листок / Б.Г. Анненков Хабаровск: Хабар. ЦНТИ, 1999, № 34. -Зс.

4. Анненков Б.Г. Методические основы клеточной селекции картофеля / Б.Г. Анненков -Хабаровск: ДальНИИСХ ДВНМЦ РАСХН, 2002.-40 с.

5. Анненков Б.Г. Оздоровление семенного картофеля от вирусных инфекций в Приамурье / Б.Г. Анненков // Защита и карантин растений, 2003, №9- С. 17-19.

6. Анненков Б.Г. Становление грибоводства в Приамурье / Б.Г. Анненков // Теоретические и прикладные аспекты растениеводства на Дальнем Востоке: матер. II Казьминских чтений, Хабаровск, 29.11.2003. Хабаровск: ДВНИИСХ, 2004. - С. 134-142 (172 е.).

7. Анненков Б.Г. Зарождение товарного и любительского грибоводства в Приамурье / Б.Г. Анненков, И.А. Толмачева // Вестник Хабар, гос. академии экономики и права, 2004, № 4. С. 158-162.

8. Анненков Б.Г. Хабаровский центр научного обеспечения дальневосточного грибоводства / Б.Г. Анненков, В.А. Азарова // Школа грибоводства, 2008, № 1.-С. 46-53.

9. Анникиев В.В. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / В.В. Анникиев, К.А. Лукомская // Учеб. п. для студентов биол. спец. пед. ин-тов., 2-е изд.- М.: Просвещение, 1983.- 127 с.

10. Асонов Н.Р. Практикум по микробиологии / Н.Р. Асонов — М.: Агропром издат, 1988 155 с.

11. Бакайтис В.И. Теоретическое и экспериментальное обоснование повышения потребительских свойств и сохраняемости грибной продукции /

12. В.И. Бакайтис // Автореф. дис. докт. техн. наук. Кемерово, 2006. — 43с.

13. Барсукова Т.Н. Распространение и биология вешенок (p. Pleurotus (Fr.) Kumm.) на территории ЗБС МГУ (Моск. обл.) / Т.Н. Барсукова // Пробл. соврем, биол. —М.,1986, Ч. 1- С. 71-75.

14. Барсукова Т.Н. Pleurotus cornuccopiae (Paulet) Rolland — новый вид для искусственного культивирования / Т.Н. Барсукова, А.И. Иванов // Ми-кол. и фитопатол. 1987. Т.21, вып.2. С. 113-117.

15. Барсукова Т.Н. Эколого-биологическая характеристика Pleurotus pulmonarius (Fr) Qull / Т.Н. Барсукова, JI.B. Гарибова, А.И. Иванов // Ми-кол. и фитопатол. 1989, Т. 23, вып. 1. — С. 14-19.

16. Беляев С.П. Гриб вешенка в Хабаровске / С.П. Беляев // Дачное движение в Хабаровске (Зарождение, становление, проблемы). Хабаровск: Кн. изд-во, 2000. - С. 295-299.

17. Бисько Н.А. Высшие съедобные базидиомицеты в поверхностной и глубинной культуре / Н.А. Бисько, А.С. Бухало, С.П. Вассер Киев: Наук, думка, 1983.-312с.

18. Бисько Н.А. Биология и культивирование съедобных грибов рода вешенка / Н.А. Бисько, И.А. Дудка Киев: Наук, думка, 1987. - 148с.

19. Бисько Н.А. Термофильные бактерии и элективность субстрата для выращивания съедобных грибов рода вешенка / Н.А. Бисько, В.Т. Билай // Школа грибоводства, 2006, №5 С.49-53.

20. Богатырев А.Н. Здоровая пища здоровая нация / А.Н. Богатырев // Пищевая промышленность, 2001, № 8. - С. 68-69.

21. Брындина Е.В. Действие выбросов медеплавильного завода на сообщества ксилотрофных базидиомицетов южной тайги / Е.В. Брындина // Сиб. эколог, журн., 2000, №6. С. 679-684.

22. Булах Е.М. Грибы источник жизненной силы / Е.М. Булах - Владивосток: «Русский остров», 2001. - 64с.

23. Бухало А.С. Каталог колекци культур шапинкових гршв (IBK) / А.С. Бухало, Н.Ю. Митропольска. Кшв: 1нститут боташки iM. М.Г. Холодного НАН Укршни. 2001- 40 с.

24. Бухман В.М. Изучение противоопухолевых свойств мицелия лекарственного гриба Ganoderma lucidum в опытах in vitro / В.М. Бухман, Е.Б. Исакова, А.В. Автономова и др. // Успехи медицинской микологии, 2003, т. 1.-С. 245-247.

25. Вавриш П.Е. Грибы в лесу и на столе. / П.Е. Вавриш, Л.Ф. Горовой -Киев: Урожай, 1993. 208с.

26. Васильева Л.Н. Съедобные грибы Приморского края / Л.Н. Васильева -Владивосток: АН СССР, 1951. 62с.

27. Васильева Л.Н. Агариковые шляпочные грибы Приморского края / Л.Н. Васильева Л., 1973. - 330с.

28. Васильева Л.Н. Съедобные грибы Дальнего Востока / Л.Н. Васильева — Владивосток: ДВ кн. изд-во, 1978. -240с.

29. Васильков Б.П. Белый гриб / Б.П. Васильков — М.; Л.: Наука, 1966 -132 с.

30. Вассер С.П. Съедобные и ядовитые грибы Карпат.- Ужгород: Карпаты, 1990.-С. 98-102 (204 е.).

31. Ващенко С.Ф. Методические рекомендации по проведению опытов с овощными культурами в сооружениях защищенного грунта / С.Ф. Ва-щенко, Т.А. Набатова М.: ВАСХНИЛ, 1976.- 108 с.

32. Вонг-Зи-кьянг. Новые разновидности грибов, культивируемых в Китае / Вонг-Зи-кьянг// Школа грибоводства, 2008, №4. С. 14-19.

33. Воробьев В.В. Состояние здоровья россиян и проблемы качества продовольственной продукции // Аграрная Россия, 2007, №6 С. 11-14.

34. Гарибова JI.B. Грибная индустрия сегодняшнего дня // Биология наших дней. М.: Знание, 1987. - С. 115-135.

35. Гарибова JI.B. Вешенка: интенсивный способ выращивания / JI.B. Гарибова // Приусадебное хозяйство, 1988, № 5. С. 72-74.

36. Гарибова JI.B. Эколого-биологические характеристики Pleurotus ostreatus (Fr.) Kumm. / JI.B. Гарибова, Т.Н. Барсукова, А.И. Иванов // Биол. науки, 1989, №7.-С. 73-77.

37. Гарибова Л.В. Виды вешенок, перспективные для промышленного культивирования / Л.В. Гарибова, Т.Н. Барсукова, А.И. Иванов и др. // Биол. науки, 1992, № 3. С. 109-115.

38. Гарибова Л.В. Виды рода вешенка Pleurotus (Jacg.: Fr.) Kumm. Средней полосы России / Л.В. Гарибова, Т.Н. Барсукова, М.Н. Чайка и др. // Грибные сообщества лесных экосистем. Том 2 (Мат. координац. исследований). М. - Петрозаводск, 2004. - С. 61-88.

39. Гарибова Л.В. Выращивание грибов / Л.В. Гарибова М.: «Вече», 2005. -96с.

40. Гарибова Л.В. Коллекция чистых культур макроскопических грибов как источник новых видов для культивирования в пищевых и лечебно-профилактических целях / Л.В. Гарибова, Л.А. Завьялова, М.Н. Чайка и др. // Школа грибоводства, 2007, №4. С.47-52.

41. Гарибова Л.В. Пищевая ценность съедобных грибов / Л.В. Гарибова // Школа грибоводства, 2008, №3. С. 48-50.

42. Германов Н.И. Микробиология / Н.И. Германов — М.: Просвещение, 1969- 226с.

43. Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов: сб. нормативных актов. Санитарные правила и нормы(СанПиН 2.3.2.560-96). Новосибирск: ПРИОР, 2001. -464с.

44. Грин Н. Биология / Н. Грин, У. Стаут, Д. Тейлор — М.: Мир, 1990, том 1. С. 44.

45. Двин Ф. Грибы / Ф. Двин М.: ACT, 2004. - 303 с.

46. Додик С.Д. Грибы российских лесов. / С.Д. Додик М.: «АТС», 2001. -320с.

47. Доценко В.А. Лечебно-профилактическое питание / В.А. Доценко // Вопросы питания, 2001, № 1. С. 21-25.

48. Дудка И.А. Промышленное культивирование съедобных грибов / И.А. Дудка, С.П. Вассер, А.С. Бухало и др. Киев: Наук, думка, 1978. -264 с.

49. Дудка И.А. Грибы: справочник миколога и грибника / И.А. Дудка, С.П. Вассер Киев: «Наукова думка», 1987.- 535с.

50. Дудка И.А. Культивирование съедобных грибов / И.А. Дудка, Н.А. Бисько, В.Т. Билай. Киев: Урожай, 1992 — 160 с.

51. Дуплищев И.Т. Использование древесного неликвида для выращивания съедобных грибов — ильмаков в условиях юга Приморья / И.Т. Дупли-щев, В.П. Сивашев // Повышение продуктивности лесов Дальнего Востока. Уссурийск, 1982. - С. 54-70.

52. Дуплищев И.Т. Возможности выращивания грибов-ильмаков на древесном неликвиде / И.Т. Дуплищев // Производство высших съедобных грибов в СССР. Киев, 1985. - С. 97-99.

53. Дьяков Ю.Т. Введение в альгологию и микологию / Ю.Т. Дьяков // Учеб. Пособие М.: Изд-во МГУ, 2000 - 192 с.

54. Дьяков Ю.Т. Коллекции грибных культур кафедры микологии и альгологии МГУ им. М.В. Ломоносова / Ю.Т. Дьяков // Школа грибоводства, 2007, № 1. С.42-44.

55. Евтухова О.М. Грибы. Кулинарное использование грибов на предприятиях общественного питания: учеб. пособие / О.М. Евтухова, Н.Ю. Те-плюк, В.М. Леоньтьев Красноярск, 2006.- 108 с.

56. Ермолаев О.Ю. Математическая статистика для психологов / О.Ю. Ермолаев М.: Московский психол.-соц. ин-т - Из-во Флинт, 2003. - С. 19-72.

57. Журбицкий З.И. Теория и практика вегетационного метода / З.И. Жур-бицкий М.: Наука, 1968. - 266с.

58. Иванов Л. Многоликая вешенка / Л. Иванов, Ю. Урунчиков // Приусадебное хозяйство, 1987, № 1. С. 52-54.

59. Измоденов А.Г. Продовольственные растения лесов Дальнего Востока и проблемы их рационального использования: дис. в виде науч. докл.докт. с.-х. наук / А.Г. Измоденов — Хабаровск, 1997. 58с.

60. Измоденов А.Г. Силедия: начало учения лесные соки и ягоды (монография, учебник, справочник, повествование) / А.Г. Измоденов. - Хабаровск: Хаб.кн. изд-во, 2001. - 368 с.

61. Измоденов А.Г. Силедия 2: начало учения, лесное целебье / А.Г. Измоденов. - Хабаровск: Изд-во «Риотип», 2008. -С. 374-382 (480 е.).

62. Камзолкина О.В. Удивительные взаимоотношения макромицетов, обитающих на древесных субстратах, с другими организмами / О.В. Кам-золкина // Школа грибоводства, 2006, №1.- С. 48-49.

63. Карпов Ф.Ф. Гидротермическая обработка субстрата для выращивания вешенки / Ф.Ф. Карпов, А.Д. Тищенков // Школа грибоводства, 2003, № 2.-С. 8-10.

64. Клепинина З.А. Справочник грибника (1000 советов) / З.А. Клеипинина, Е.В. Клепинина М.: АТС-Пресс книга, 2005. - 256с.

65. Колтунов Б.П. Качество, сохраняемость и использование культивируемого гриба вешенка обыкновенная / Б.П. Колтунов // Автореф. дис.канд. техн. наук. М., 1990. - 19с.

66. Кувыкина О. Ассорти от фунготерапевтов / О. Кувыкина // Вокруг света, 2007, май- С. 166-172.

67. Кузнецов О.Ю. Способ приготовления зернового мицелия высших грибов / О.Ю. Кузнецов // Патент РФ № 2192119 С2 06.05.2000 г.

68. Курачева Е.Е. Перспективы использования растительных белков для пищевых целей / Е.Е. Курачева, В.И. Манжестов // Вестн. Рос. Акад. с.-х. наук, 2003 № 1. - С. 87-88.

69. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1990. - С. 113124.

70. Литвинов С.С. Грибоводство. Нужен механизм финансирования отрасли / С.С. Литвинов, Р.Д. Нурметов, Н.Л. Девочкина // Картофель и овощи, 2004, №6 С.24-26.

71. Лобанкова О.Ю. Грибоводство / О.Ю. Лобанкова, А.Н. Есаулко, В .В. Агеев и др. // учеб. пособие Ставрополь: АГРУС, 2006.- С.63-86 (140 е.).

72. Лозовой В.Д. Особенности биологии грибов рода Pleurotus ostreatus (Fr.) Kumm. в связи с их культивированием / В.Д. Лозовой // Автореф. дис.канд. биол. наук. -М., 1984. 22с.

73. Лукашук Н.П. Грибы съедобные // Энциклопедия овощевода дальневосточника // Н.П. Лукашук, П.П. Фисенко, А.В. Уманец - Хабаровск: Приамагробизнес, 2005. - С. 325-333.

74. Максимова Т.А. Грибные тайны / Т.А. Максимова Абакан: Изд-во Хакасского гос-го ун-та им. Н.Ф. Катанова, 1999. — 157 с. С. 73-75.

75. МСЭ. М.: ГНИ БСЭ, 1959, том 3. - С. 155.

76. Матершев В.Г. Грибные «стерильные» технологии / В.Г. Матершев // Школа грибоводства, 2006, № 1 (а). С. 18-20.

77. Матершев В.Г. Внесение мицелия / В.Г. Матершев // Школа грибоводства, 2006, №2 (б). — С.12-14.

78. Матершев В.Г. Сколько стоит. селективность? / В.Г. Матершев //Школа грибоводства, 2007, №1. С. 25-26.

79. Мелик-Хачатрян Д.Г. Определитель агарикальных грибов Закавказья / Д.Г. Мелик-Хачатрян, И.Г. Нахруцришвили, А.С. Садыхов — Тбилиси, 1985 -263с.

80. Методы биохимического исследования растений / Под ред. Н.Л. Маркова Л.: Агропром, 1977.- 119 с.

81. Методы экспериментальной микологии / под ред. В.И. Билай.— Киев: Наукова думка, 1982.- 276 с.

82. Минкевич И.Н. Применение статистических методов в микологических и фитопатологических исследованиях / И.Н. Минкевич, Т.Н. Хохрякова -Л.: ВИР, 1968-50 с.

83. Михайлова Л.И. Определение азота / Л.И. Михайлова // Школа грибоводства, 2003, №5 С.25.

84. Михайловский Л.В. Виды вешенок из родства Pleurotus ostreatus (Fr.) Kumm. в СССР / Л.В. Михайловский // Новости систематики низших растений-Л., 1974, Т. 11. С. 211-219.

85. Мишустин Е.Н. Микробиология / Е.Н. Мишустин, В.Т. Емцев — М.: Высш. шк., 1978.— 278 с.

86. Морозов А.И. Разведение грибов. Мицелий / А.И. Морозов, А.А. Тимофеев М.: ACT, 2001. - 43 с.

87. Морозов А.И. Промышленное производство вешенки / А.И. Морозов -М.: АТС, 2004.- 112 с.

88. Морозов А.И. Грибы на грядке / А.И. Морозов. М.: ACT, Донецк: Сталкер, 2005.- 172 с.

89. Морозов А.И. Большая грибная энциклопедия / А.И. Морозов М.: АТС, 2005.-479с.

90. Мухамедшин, К.Д. Повышать эффективность использования пищевых ресурсов леса / К.Д. Мухамедшин, Р.К. Мухамедшин // Лесное хозяйство, 2005, №2. С.24-26.

91. Мюллер Э. Микология / Э. Мюллер, В. Леффлер М.: Мир, 1995 (пер. с нем.).

92. Никаноров A.M. Экология / A.M. Никаноров, Т.А. Хоружая — М.: «Изд-во ПРИОР», 2001. 304 с.

93. Ю.Никитина А.В. Недревесная продукция леса / А.В. Никитина, Я.М. Глубиш, Б.Н. Владимиров М.: Изд-во гос-го ун-та леса, 2005. — С. 23-27 (34 е.).

94. Новикова И.И. Биологические особенности и компонентный состав активного комлекса штамма Streptomyces chrisomallus Р-21 антагонистафитопатогенных грибов / И.И. Новикова, И.В. Бойкова, Ю.Д. Шенин // Вестник защиты растений, 2006, №3. — С. 13-21.

95. Нурметов Р.Дж. Выращивание вешенки на садово-огородном участке / Р.Дж. Нурметов, H.JI. Девочкина, И.А. Рубцова и др. // Картофель и овощи, 2005, №7.-С. 17-19.

96. Определитель бактерий Берджи / Под. ред. Дж. Хоута, Н. Крига, П. Снита и др. М.: Мир, 1997. - Т. 1-2. - 450 с.

97. Орлов Н.И. Съедобные и ядовитые грибы / Н.И. Орлов М.: Медгиз, 1953 -270 с.117.0разов Х.Н. Вешенка в Туркменистане / Х.Н. Оразов // Школа грибоводства, 2006, № 4. С. 38-39.

98. Павлов Ф.И., Выращивание грибов на промышленной основе / Ф.И. Павлов, Л.А. Девочкин-М.: Россельхозиздат,1987- С.38-44 (45 е.).

99. Панкратов А.Я. Микробиология / А.Я. Панкратов М.: Колос, 1971— 272 с.

100. Петров А.Н. К флоре агариковых грибов юго-западного побережья озера Байкал /А.Н. Петров // Новости систематики низших растений. — Л., 1984. Т. 21.-С. 108-116.

101. Пименов К. Грибы в лесу, на столе, в аптечке (Справочник-определитель). / К. Пименов — М.: Эксмо, 2006, — 192с.

102. Практикум по агрохимии / под ред. В.Г. Миниева М.: МГУ, 1989 -202 с.

103. Производство в Донецке (новости школы грибоводства). // Школа грибоводства, 2002, №2 С.7.

104. Прудникова С.В. Микробиология: руководство для работ по малому практикуму / С.В. Прудникова, Ц.М. Гукасян, Н.И. Сарматова — Красноярск: Краснояр.гос. ун-т, 2004.- 105 с.

105. Похвалина Г.М. Блюда из грибов (Сам себе повар). / Г.М. Похвалина — Челябинск: «Аркаим», 2004. 61 с.

106. Семичаевский В.Д. Высшие базидиальные грибы — продукты целлю-лазных комплексов Итоги науки и техники / В.Д. Семичаевский // Биотехнология, №10, 1988 - С. 97-132.

107. Сержанина Г.И. Шляпочные грибы Белоруссии / Г. И. Сержанина. — Минск, 1984.-407с.

108. Соломко Э.Ф. Физиолого-биохимические свойства и биосинтетическая активность высшего базидиального гриба Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm. / Э.Ф. Соломко // Дис. на соис. уч. ст. д-ра биол. наук в форме науч. докл. К., 1992 — 49 с.

109. Список пестицидов и агрохимикатов разрешенных к применению на территории Российской Федерации в 2006 году (Приложение к журналу «Защита и карантин растений, 2006, №6).- М., 2006. 419 с.

110. Список пестицидов и агрохимикатов разрешенных к применению на территории Российской Федерации в 2008 году (Приложение к журналу «Защита и карантин растений, 2008, №6).— М., 2008.—539 с.

111. Сычев П.А. Грибы и грибоводство / П.А. Сычев, Н.П. Ткаченко -М.: АТС, 2003.-511с.

112. Сэги Й. Методы почвенной микробиологии / Й. Сэги М.: Колос, 1983. -294 с.

113. Тен Хак Мун. Микробиологический метод агротехники / Тен Хак Мун Хабаровск: Крайгосстат, 2004. - 97с.

114. Тишенков А.Д. Выращивание вешенки в Венгрии / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2000, № 2. С. 2-7.

115. Тишенков А.Д. Повышение селективности субстрата для выращивания вешенки с помощью аэробной ферментации / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2000, № 5. С. 14-17.

116. Тишенков А.Д. Выращивание вешенки в Италии / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2001, № 2. С. 5-7.

117. Тишенков А.Д. Приготовление субстрата для вешенки: актуальные проблемы сегодняшнего дня и пути их решения / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2001, № 3. С. 11-14.

118. Тишенков А.Д. Влияние параметров культивирования на качество плодовых тел вешенки / А.Д. Тишенков, Ф.Ф. Карпов // Школа грибоводства, 2002, № 1.-С. 9-14.

119. Тишенков А.Д. Обзор культивирования вешенки за рубежом / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2002, № 3. С. 9-11.

120. Тишенков А.Д. Характеристика культивируемых видов и штаммов вешенки производства фирмы Sylvan / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2003, № 1.-С. 10-13.

121. Тишенков А.Д. Как повысить надежность субстратного производства вешенки / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2003, №2. С. 13-15.

122. Тишенков А.Д. Повышение урожайности вешенки путём оптимизации состава субстрата / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2003, № 5. -С. 6-8.

123. Тишенков А.Д. Краткий обзор производства вешенки в России / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2003, № 5. С.15-19.

124. Тишенков А.Д. Какой способ подготовки субстрата для вешенки лучше? / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2004, № 5. С. 17-20.

125. Тишенков А.Д. Грибоводство в Китае / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2006, № 1. С. 29-35.

126. Тишенков А.Д. Грибоводство в Китае / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2006, № 2. С. 29-36.

127. Тишенков А.Д. Грибоводство в Китае / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2006, № 3. С. 25-31.

128. Тишенков А.Д. Особенности приготовления субстрата вешенки в субстратных машинах и смесителях-кормозапарниках / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2006 (д), № 3 С. 18-19.

129. Тишенков А.Д. Технология производства субстрата вешенки на полках в термокамере / А.Д. Тишенков, Ф.Ф. Карпов // Школа грибоводства, 2006, №4.-С. 16-17.

130. Тишенков А.Д. Испания 2006 / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2006, №4.-С. 30-36.

131. Тишенков А.Д. Выращивание вешенки в Испании / А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2006, №6. С. 25-26.

132. Тишенков А.Д. Европа голосует за селективный субстрат вешенки/ А.Д. Тишенков // Школа грибоводства, 2007, №2. С. 23-25.

133. Тутельян В.А. Питание и здоровье / В.А. Тутельян // Пищевая промышленность, 2004, № 5. С. 5-6.

134. Тутельян В.А. Реализация концепции государственной политики здорового питания населения России: наилучшее обеспечение / В.А. Тутельян, В.А. Княжев // Вопросы питания, 2000, № 3. С. 4-7.

135. Феофилова Е.П. Хитон, хитин, хитан, хитозан./ Е.П. Феофилова // Наука и жизнь, 1992, № 11. С. 26.

136. Хренов А.В. Грибной рынок России 2005 года: Поехали! / А.В. Хренов // Школа грибоводства, 2006, № 2. С. 15-21.

137. Хренов А.В. Грибной рынок России 2007 год / А.В. Хренов // Школа грибоводства, 2008, № 2. С. 21-29.

138. Цапалова И.Э. Биохимические и товарные свойства некоторых видов свежих и сушеных грибов Западной Сибири / И.Э. Цапалова // Аврореф. дис.канд. техн. наук.-М., 1971. —24с.

139. Цапалова И.Э. Экспертиза грибов / И.Э. Цапалова, В.И. Бакайтис, Н.П. Кутафьева и др. Новосибирск: Изд-во Новосиб. ун-та, 2002. - 256с.

140. Цветкова О.В. Аккумуляция Cs высшими грибами и их роль в биохимической миграции нуклида в лесных экосистемах / О.В. Цветкова,

141. A.И. Щеглов // Вестник Моск. Унив. 1996. Сер. 17. Почвовед. № 4. С.59-69.

142. Цилюрик А.В. Грибы лесных биоценозов: атлас / А.В. Цилюрик, С.В. Шевченко Киев: «Выща шк. Головное изд-во», 1989 — 255с.

143. Черников В.А. Агроэкология: методология, технология, экономика /

144. B.А. Черников, И.Г. Грингоф, В.Т. Емцев и др. М.: Колос, 2004. - С.49 (400 е.).

145. Чистовский О. Грибы целители. / О.Чистовский - СПб.: Питер Паб-лишинг, 1997. - 256с.

146. Чураков Б.П. Аккумуляция тяжелых металлов представителями мико-биоты в лесных экосистемах / Б.П. Чураков, У.П. Зырянова, С.В. Пантелеев // Грибные сообщества лесных экосистем: матер, координац. исследований М. -Петрозаводск, 2004, том 2. - С. 287-305.

147. Шапиро Я.С. Микроорганизмы: вирусы, бактерии, грибы / Я.С. Шапиро СПб.: Изд-во «ЭЛБИ-СПб», 2003. - 323с.

148. Шнырева А.В. Молекулярное генотипирование коммерческих штаммов культивируемых съедобных грибов / А.В. Шнырева // Школа грибоводства, 2006, №4 С.48-51.

149. Шубин В.И. Грибы Карелии и Мурманской области (Эколого-систематический список) / В.И. Шубин, В.И. Крутов JL, 1979. - 107с.

150. Энгельбрехт Иоланда. Выращивание грибов дома и в саду / Иоланда Энгельбрехт М.: ACT, 2006. - 128с.

151. Efron В., Gong G. A leisureli look at the bootstrap, the jackknife, and cross-validation / B. Efron, G. Gong // Am. Stat. 1983, vol. 37. P. 36-48.

152. Eger G. Contribution to the discussion on the species in the Pleurotus ostreatus complex / G. Eger, S. F. Li, H. Leal-Lara // Mycologia, 1979, vol. 71, №3.-P. 577-588.

153. Felsenstein J. Confidence limits on phylogenies: an approach using the bootstrap / J. Felsenstein // Evolution, 1985, vol. 39. P. 783-791.

154. Handelsman J. Method of identifying Bacillus cereus having biocontrol activity / J. Handelsman, L. Halverson, E. Stabb // Патент США, №5543301, 1996.

155. Hauksworth D.L. Ainsworth and Bisby's Dictionary of the Fungi / D.L. Hauksworth, P.M. Kirk, B.S. Sutton et al. // CAB International, 8-th ed., 1995-616 p.

156. Hilber O. Die Gattung Pleurotus (Fr.) Kummer / O. Hilber // Munchen. Vaduz, 1982.-488 p.

157. Jackson M. Calbistrins, novel antifungal agents produced by Penicillium restrictum / M. Jackson, J. Karwowski, P. Humphrey // J. Antibiotics, 1993, vol.46, № l.-P. 34-38.

158. Kubo K. Fungal inhibiting composition coprising Bacillus subtilis FERM BP-3418 / K. Kubo // Патент США №5667779, 1999.

159. Rajarathnam S. Biodegradative and Biosynthetic capacities of mushrooms: present and future strategies / S. Rajarathnam, M.N. Shashirekha, Z. Bano // Crit. Rev. Biotechnol., 1998, vol.18 (2,3). P.91-236.

160. Saitou N. The neighbour-joining method: a new method for reconstructing phylogenetic trees / N. Saitou, M. Nei // Mol. Biol. Evol. 1987, vol. 4. -P. 406-425.

161. Seifert K.A., Evaluation of Bacillus subtilis С 186 as a potential biological of sapstain and mould on unseasoned lumber / K.A. Seifert, W.E. Hamilton, C. Breul et al. // Can. J. Microbiology. 1987, vol. 33. P. 1102-1107 p.

162. Singer R. Das system der Agaricales / R. Singer // Ann. Mycol., 1943, vol. 41-181 p.

163. Singer R. The Agaricales in Modern Taxonomy / R. Singer // Vaduz. Cramer. 1975.-912 p.

164. Singer R. The Agaricales in Modern Taxonomy / R. Singer // 4 th ed Koeltz Scientific Books FDR, 1986.

165. Stamets P. Growing gourment and medicinal mushrooms / P. Stamets — Hong Kong, 1993. 552 p.

166. Studier J. A. A note on the neighbour-joining algorithm of Saitou and Nei / J. A. Studier, K. J. Keppler//Mol. Biol. Evol., 1988, vol. 5.-P. 729-731.

167. Wang H. A new lectin with highly potent antihepatoma and antisarcoma activities from the oyster mushroom Pleurotus Ostreatus / H. Wang, J. Gao, T.B. Ng // Biochem. Biophys. Res. Com., 2000, vol. 275. P. 810-816.

168. Watling R. Crepidotaceae: Pleurotaceae and other pleurotoid agarics. British Fungus Flora. Agarics and Boleti / R. Watling, N.M. Gregory // Royal Botanic Garden Edinburgh, 1989. - 157 p.

169. Yang Q.Y. A quick and efficient method of making mushroom spawn. / Q.Y. Yang, S.C. Jong // Mushroom Science XII, 1987- P. 317-324.

170. Yu Li, Tolgor Bau. Mushrooms of changbai mountains / Yu Li, Tolgor Bau China:CIP, 2003. - 362 p. (кит.)

171. Zadrazil F. The ecology and industrial production of Pleurotus ostreatus, Pleurotus florida, Pleurotus cornucopiae and Pleurotus eryngii / F. Zadrazil // Mushroom Science, 1976, vol. 9 (Part I). P. 621-652.

172. Zervakis G. A pluralistic approach in the study of Pleurotus species with emphasis on compatibility and physiology of the European morphotaxa / G. Zervakis, C.Balis // Mycol. Rev., 1996, vol. 100, № 6. P. 717-731.

173. Zhao C. A new lectin with highly potent antihepatoma and antisarcoma activities from the oyster mushroom Pleurotus Ostreatus / C. Zhao, H. Wang, T. Gao Ng // Biochem. Biophys. Res. Com., 2000, vol. 275. P.810-816.

Информация о работе

Азарова, Василина Александровна
кандидата биологических наук
Хабаровск, 2010
ВАК 03.00.16

Диссертация

Экологические аспекты интенсивного культивирования грибов рода Pleurotus в Приамурье - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно