Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экологическая оценка отходов производства лизина и их использования в сельском хозяйстве

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Экологическая оценка отходов производства лизина и их использования в сельском хозяйстве"

На правах рукописи

Воржев Владимир Федорович

ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ОТХОДОВ ПРОИЗВОДСТВА ЛИЗИНА И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЬСКОМ ХОЗЯЙСТВЕ

Специальность 03 00 16 — экология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

ии^иБОБ47

Орел - 2007

003060647

Работа выполнена на кафедре защиты растений и химии ФГОУ ВПО «Елецкий государственный университет имени И А Бунина»

Научные руководители

кандидат химических наук, профессор Стекольников Юрий Александрович

Официальные оппоненты

доктор сельскохозяйственных наук, профессор

Степанова Лидия Павловна доктор сельскохозяйственных наук, профессор

Гулидова Валентина Андреевна

Ведущая организация ВНИИ Рапса

Защита диссертации состоится «30» мая 2007 года в Щ часов00 минут на заседании диссертационного совета КМ 220 052 01 в Орловском государственном аграрном университете по адресу 302019, г Орел, ул Генерала Родина, 69

С диссертацией и авторефератом можно ознакомиться в научной библиотеке ОГАУ (г Орел, Бульвар Победы, 19)

Автореферат разослан «30» апреля 2007года

Объявление и автореферат размещены на сайте orel sau ru

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат сельскохозяйственных наук, доцент Уп'Л/о Т Ф Макеева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследований. Производство синтетических аминокислот и разработка условий их эффективного использования являются одним из путей решения проблемы увеличения продуктов животноводства при минимальных затратах белка Среди проблем аминокислотного питания животных наибольшую важность представляет разработка вопросов лизинового питания, так как он относится к незаменимым аминокислотам, а также экологически целесообразного способа производства лизина В микробиологическом производстве это может быть достигнуто, начиная от приемов выращивания бактерий до рационального использования отходов, которыми являются культуральныв среды Они содержат также ряд других аминокислот, питательные и ростовые вещества, и другие продукты биосинтеза, которые могут быть использованы как в качестве корма, так и комплексных удобрений Увеличение продуктивности arpo - и техносферы требует разработок источников питания, корма и сырья для перерабатывающей промышленности

Использование экологических решений в управляемых промышленных условиях биотехнологий позволяет получать кормовые продукты, аминокислоты, удобрения с минимальным воздействием на окружающую среду Необходим экологический контроль осуществления микробиологических конкретных процессов вплоть до очистки сточных вод при выделении веществ из культуральных сред или из биомассы микроорганизмов, так как побочные продукты могут привести к уничтожению природной микрофлоры и потере очищающей способности окружающей среды Поскольку в микробиологической промышленности все технологические процессы связаны с потреблением воды и после извлечения целевого продукта в ней остается много редуцирующих веществ в виде ассимилируемых микроорганизмами источников углерода, то ее можно использовать в качестве среды для получения кормовых дрожжей, иных полезных продуктов Сказанное справедливо и в отношении жидких и твердых отходов биосинтеза в смысле извлечения полезных и утилизации вредных побочных продуктов

В настоящее время имеет место дефицит лизина как при потреблении человеком, так и при кормлении животных Концепция государственной политики в области здорового питания населения, принятая правительством Российской Федерации (постановление №910 от 10 августа 1998г), предусматривает разработку технологии качественно новых продуктов питания функционального назначения В связи с чем извлечение лизина из культуральных сред и его последующее использование является актуальной задачей, решение которой позволяет, наряду с утилизацией отходов, способствовать повышению качества жизни населения и кормления животных

Существующая биотехнология получения лизина, разработанная институтом им А Н Баха экологически небезопасна, т к требует больших объемов воды и, соответственно, наличия стоков, содержащих редуцирующие вещества, микроорганизмы, органические вещества и иные источники углерода, которые могут быть неконтролированно использованы микроорганизмами окружающей среды в сторону изменения микрофлоры и нарушения биологического равновесия Поэтому актуальной является разработка технологических приемов выделения лизина, использования культуральной среды в качестве корма и комплексных удобрений Экологически целесообразным« методами выделения лизина являются сорбци-онные Литературные данные содержат сведения о возможности использования катионо и анионообменных сорбентов для выделения лизина, однако, они обладают рядом недостатков, повышенной сорбцией органических веществ, и в связи с этим, потерями лизина, невысокой стойкостью сорбентов в кислой и щелочных средах, что ведет к загрязнению целевого продукта В то же время ряд катеонитов обладает высокой сорбционной селективностью к аминокислотам и химической стойкостью. Использование таких смол в технологии извлечения лизина позволяет решить актуальную задачу — повысить эффективность процесса выделения лизина без отделения от биомассы в виде двухзарядного катионита с получением легко вытесняемого продукта в условиях элюирования аммиаком

Культуральные среды, помимо лизина, содержат в своем составе другие аминокислоты, а также такие минеральные примеси как азот, фосфор, калий, которые можно с одной стороны использовать в качестве корма животных, а с другой - получить удобрение, что в целом повышает экологическую безопасность и экономическую целесообразность биотехнологического производства Решение этой задачи может быть осуществлено на основе использования катионообменных смол марок КУ при выделении лизина, а также культуральных сред в качестве удобрений в сельскохозяйственной промышленности

Литературные данные содержат сведения об использовании лизина в качестве кормовых добавок для выращивания животных, недостаточно сведений об использовании биомассы в качестве удобрений зерновых культур Поэтому актуальным является поиск технологических решений экономии кормового протеина и кормовых средств растительного происхождения за счет балансировок кормов животных препаратами незаменимых аминокислот (лизина), а также путей повышения продуктивности зерновых культур за счет эффективного использования отходов биосинтеза, в том числе и биомассы микробного синтеза

Цель и задачи исследования Целью работы является разработка процесса сорбционного извлечения лизина из культуральных сред без отделения от биомассы и экологически целесообразных приемов использования биомассы в качестве удобрений под ячмень и кукурузу

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи

1 Исследование возможности применения биомассы микробного синтеза в качестве удобрений полевых культур, изучение структуры урожая и качества зерна

2 Выявление путей использования лизина для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных

3 Повышение уровня экологической безопасности процесса биохимического выделения лизина за счет комплексного использования отходов производства

4 Определение рациональных параметров сорбции лизина катеонитом КУ-2-8

5 Выявление оптимальных условий глубокой и эффективной десорбции лизина

6 Установление физико-химических характеристик культуральных

сред

7 Разработка технологической схемы получения лизина и путей использования биомассы в качестве удобрений зерновых культур

8 Санитарно-химическая оценка катеонитов" и анионитов, используемых в микробиологическом производстве лизина

Научная новизна работы. Выявлено, что применение биомассы в качестве удобрений способствовало улучшению качества зерна, содержание сырого протеина и крахмала в зерне ячменя Дина повышалось, в зеленой массе кукурузы РОСС-209 содержание сырого протеина увеличивалось, а клетчатки не менялось Внесение биомассы способствовало повышению урожайности ячменя на 100 и 25%, а кукурузы на 70 и 25% в вегетационных и микрополевых опытах соответственно Улучшилась сохранность растений за вегетацию, увеличилась озерненность колоса и масса зерна с колоса

Проведены санитарно-химические и токсикологические исследования катионитов КУ-2, анионитов ИА-3, АВ-17-2П Выявлено по данным морфологических, биохимических, патолопгческих исследований, что экстракты из водных вытяжек отмытых и неотмытых форм смол не оказывают влияния на организм животных, а органолептическая активность экстрактов из смол незначительна и находится в пределах санитарных норм

Исследована кинетика и динамика сорбции лизина из водных соляно-и сернокислых сред микробного синтеза в широкой области изменения концентрации, рН и температуры, высоты слоя сорбента, скорости потока раствора на разных сорбентах

На основании экспериментов и выявленных закономерностей сорбции лизина в зависимости от многих параметров разработана технология выделения лизина из культуральных сред без отделения от биомассы

Выявить параметры процесса, повышающие эффективность сорбции лизина, которые внедрены в виде технологических рекомендаций

В результате изучения взаимодействия насыщенного лизином катеонита и анионита с различными основаниями разработан способ и режим регенерации отработанного сорбента для восстановления его работоспособности, позволяющий достигать высокого эффекта десорбции при минимальном расходе реагентов

Предложен механизм сорбции и десорбции лизина и дано объяснение закономерностей сорбции и десорбции с позиций физико-химических свойств лизина в виде цвитгер-ионов, катионов, анионов, нейтральных молекул

Практическая значимость работы: повышена экологичность процесса микробного синтеза лизина за счет вовлечения отходов производства в качестве удобрений полевых культур Установлено, что биомасса содержит азот, фосфор, калий, другие минеральные ионы, органические элементы питания, которые усваивались растениями и повышали урожай зерна ячменя и зеленой массы кукурузы

Предложены методики определения тяжелых металлов в продуктах с/х производства, крови, шерсги и органах животных с помощью Р-дикетонатных аддуктов

Научно обосновано практическое применение катеонита КУ-2-8 для выделения лизина из культуральных сред без отделения от биомассы Разработан режим проведения процесса в промышленном производстве. Показана возможность восстановления сорбционной емкости сорбента и предложены параметры регенерации фильтра

Определены режимы безопасного кондиционирования ионитов КУ-2-8 ИА-3, АВ-17-2П в условиях сельскохозяйственного производства

Положения, выносимые на защиту:

1 Агроэкологические условия выращивания, урожайность и качество полевых культур в свете использования биомассы микробного синтеза в качестве удобрений

2 Экологически обоснованная технологическая схема получения лизина в качестве кормовой добавки

3 Результаты исследований санитарно - химических свойств ионитов, используемых в сельскохозяйственной и микробиологической промышленности

4 Экспериментальные результаты исследований по сорбции лизина на ряде ионитов Влияние на сорбционную способность ионитов- рН, концентрации, температуры, скорости потока раствора, вида смолы

5 Определение оптимального расхода регенерирующего агента для эффективного восстановления сорбционной емкости

Достоверность результатов работы Достоверность результатов работы, представленных в диссертации, подтверждается использованием современных физико-химических методов анализа, математических методов обработки данных, лабораторными и полевыми испытаниями

Апробация работы Основные положения диссертационной работы были представлены и обсуждены

- На 17 Менделеевском съезде по общей и прикладной химии «Достижение и перспективы химической науки», Казань, 2003 год

- На V международной научно-практической конференции «Проблемы строительства, инженерного обеспечения, благоустройства и экологии», Пенза, 2003 год

- На Всероссийской научно-практической конференции «Среды обитания, проблемы экологической реабилитации нарушенных экосистем», Пенза, 2003 год

- На V Международной научно-практической конференции «Экономика, экология и общество России в 21-м столетии», Санкт-Петербург, 2003год

- На III Международной конференции «Экстракция органических соединений», Воронеж, 2005 год

- На Х-ой Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы экологической безопасности центрального черноземья Российской Федерации, Липецк, 2006 год

- На научных и учебно-методических конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников ЕГУ им И А Бунина 2004 - 2007гг

Работа выполнена в соответствии с открытым планом хоздоговорных работ ЕГУ им И А Бунина «Разработка экологических основ и технологий производства в агроэкосистемах ЦЧР» на 2000 - 2007 г г

Публикации По теме исследования опубликовано 12 научных работ, в том числе 2 в изданиях, реферируемых ВАК РФ

Структура и объём работы Диссертация состоит из введения, 5 глав, выводов и рекомендаций по практическому применению Общий объем диссертации состоит из 212 страниц, в том числе 40 рисунков, 93 таблиц В списке используемой литературы приведено 247 библиографических ссылок на отечественные и иностранные источники Приложения даны на 8 страницах

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Во введении приведено обоснование актуальности работы, определяются цель и задачи исследования, рассматривается научная новизна и практическая ценность полученных результатов

Глава 1. Обзор литературы. В обзоре литературы приведена информация о составе аминокислот, их классификация, дана подробная характеристика лизина, микробиологического производства и сырья для него Обобщены сведения о сорбционном выделении аминокислот Показано, что поглощение аминокислот лимитируется кинетическими характеристи-

ками сорбентов, зависит от состояния кислоты в среде (анион, катион, цвиттер-ион) и сделан вывод, согласно которому при разработке сорбци-онного выделения лизина нужно опираться на кинетические закономерности сорбции Приведены теоретические положения о механизмах, кинетике сорбции и методах ее исследования

Анализ литературных данных показал, что, несмотря на большое количество работ по технологии выделения лизина, они мало систематизированы и относятся к ионитам разной природы Практически все исследования сосредоточены на одной из операций технологической схемы, а стадии относящиеся к технологии использования биомассы, культуральной жидкости в целом не рассматриваются, хотя ее функциональный состав и физико-химические свойства позволяют эффективно использовать оную не только как кормовую добавку, но и эффективное удобрение полевых культур На основании проведенного анализа литературы поставлена цель и конкретные задачи по оптимизации технологии выделения лизина микробного синтеза и использования отходов производства в свете экологических требований

Глава 2. Условия, объекты и методы исследования. Приведена почвенно-климатическая характеристика зоны, в которой расположено опытное хозяйство «Солидарность» ЕГУ им И А Бунина Приведены агротехнические условия, при которых выращивались полевые культуры при испытаниях биомассы микробного синтеза лизина в качестве удобрений

Объектами исследования были ячмень сорта Дина, а также кукуруза - РОСС-209 Для получения сравнительных результатов использовались научно-рекомендованные нормы удобрений для указанных культур

Агрохимическая характеристика почвы определялась по следующим показателям, содержание гумуса по методу Тюрина в модификации ЦИ-НАО (ГОСТ 26213-91), общий азот Кьельдалю (ГОСТ 26107 - 84), валовой фосфор по Гинзбург и Щегловой (ГОСТ 26261-84), валовой калий пламенно-фотометрическим методом (ГОСТ 26261 - 84), сумма поглощенных оснований и гидролитическая кислотность по Каппену (ГОСТ 27821 - 88), влажность почвы по ГОСТ 28268 -89, актуальная кислотность - потенцио-метрическим методом (ГОСТ 26483 - 85). Определение подвижных элементов питания проводилось три раза за вегетационный период в слое почвы О-ЗОсм, нитратный азот определялся ионометрическим методом (ГОСТ 26591 - 86), подвижный фосфор и обменный калий - по методу Чи-рикова (ГОСТ 26483-85)

Выделение лизина проводили из модельных растворов, содержащих лизин, подкисленных соляной или серной кислотой, а также из промышленной культуральной жидкости (КЖ) микробиологического производства лизина заводов г Ливаны и Щебехино Изучение физико-химических свойств окрашенных соединений культуральной жидкости проведено методами ИК-и УФ - спектроскопии, бумажной и гель-хроматографии

В качестве сорбентов при изучении сорбции лизина использованы высокоосновные аниониты марки АВ-17, а также катиониты КУ-1, КУ-2 При выделении и идентификации аминокислот применены методы определения типа функциональных групп, сорбционной емкости в динамических условиях, приемы исследования кинетических показателей ионитов При проведении исследований применяли математические методы отработки результатов эксперимента с использованием PC Intel Pentium Кондиционирование сорбентов проводили по общепринятым методикам (Самсонов 1970, Селеменев 2001г)

Глава 3. Основные результаты исследовании. В третьей главе проведен анализ технологических особенностей выделения лизина из культуральных сред и возможных путей утилизации отходов производства 3.1. Природа н свойства окрашенных соединений сопутствующих выделению лизина. Присутствие в растворах высокомолекулярных красящих веществ осложняет производство лизина В связи с чем возникает необходимость изучения свойств красящих веществ с целью правильного выбора обесцвечивающего ионообменника

При производстве лизина в качестве питательной среды используется меласса Цветность культуральной жидкости может быть обусловлена наличием красящих веществ исходной массы, кроме этого, в составе мелассы находятся как аминокислоты, так и сахар На отдельных стадиях производства лизина температура раствора достигает высокой величины, что обусловливает возможность протекания реакций между карбонильными и аминогруппами различных соединений и приводит к образованию мела-ноидинов с повышением цветности культуральных сред Возможно, повышение цветности за счет осмоления органических веществ при подкис-лении концентрированной серной кислотой КЖ перед подачей на ионообменную колонну Таким образом, в ферментационных растворах лизина содержатся окрашенные соединения, что требует учета при разработке эффективной технологической схемы обесцвечивания

Нами установлено с использованием методов электрофореза, бумажной хроматографии, УФ-спектрофотометрии, элементного анализа, что в состав КЖ входят меланоидины, которые представляют из себя высокомолекулярные соединения, содержащие карбонильные группы, С -НС = N - группы В таблице 3 1 приведен средний молекулярный вес, элементарный состав и эмпирические формулы меланоидинов (на основе разделения красящих веществ методом бумажной и гель-хроматографии промышленной КЖ Щебекинского биохимзавода)

Методами УФ- и ИК- спектрофотометрии культуральных сред установлено, что цветность обусловлена наличием в них меланоидинов, карамелей и продуктов щелочного распада Сахаров Меланоидины имеют положительный заряд, продукты щелочного распада Сахаров - отрицательный, заряд карамелей близок к нулю Различие между отдельными фракциями ме-

ланоидинов состоит в разном соотношении одинаковых фракционных групп и связей Цветность КЖ обусловлена меланоидинами

Таблица 3 1 Свойства меланоидов___

Молекулярный вес Номер зоны Содержание, % Эмпирическая формула

С Н N О

22500 №1-1 22,38 8,49 9,62 59,51 (С ю-и Н49 О20-21 N4)40

20000 №1-2 24,02 5,40 11,99 59,59 (С9.10Н25 о 17.18 N4)42

13000 №1-3 43,86 6,77 4,68 44,69 (Сц Н20-22 08-9 N^2

Следует отметить, что производственные растворы содержат наряду с окрашенными компонентами-лизин, другие аминокислоты метионин, тирозин, аланин, фенилаланин, которые идентифицированы по результатам хроматографического анализа

Исходя из результатов УФ-спектроскопии. установлено, что мела-ноидины зоны № 1-1 образуются при взаимодействии лизина с сахарами в процессе производства аминокислоты Меланоидины других зон отличаются присутствием связей С=1Ч, наличием связей С=С, сопряженных с С=0 связями В них по данным ИК-спектроскопии наблюдаются максимумы на спектрах поглощения, обусловленные колебаниями пиранозных и фуранозных колец

Таким образом, исходя из результатов химических и спектрофото-метрических исследований, меланоидины можно охарактеризовать как высокомолекулярные оксикислоты, способные к образованию цвиттер-ионов и имеющие в своем составе цепи сопряжения, а также гетероциклические структуры

Методом спектрофотометрии определены константы ионизации СО-ОН-групп отдельных меланоидинов

Ионизация рассматриваемых окрашенных продуктов по первой степени происходит легко (константы ионизации имеют порядок 7 10"3—1,5 10'2), что объясняется присутствием в меланоидинах водородсо-держащих аминогрупп, способствующих ослаблению связи водорода к аминогруппам с образованием биполярных ионов Проведенные исследования позволили установить, что ферментационные растворы содержат продукты щелочного распада редуцирующих Сахаров, аминокислоты, а также меланоидины (основные окрашивающие соединения)

3.2. Сорбция лизина микробиологического синтеза. Культуральная жидкость (КЖ) после ферментации содержит большое количество минеральных компонентов и органических окрашенных веществ как образующихся в процессе производства, так и перешедших из мелассы, которые препятствуют кристаллизации лизина

Наиболее эффективным способом очистки аминокислот с последующим их выделением в кристаллическом виде является применение иони-тов Правильный выбор ионообменника связывается с разработкой способов обесцвечивания культуральной жидкости, что требует изучения строения и свойств окрашенных соединений, образующихся в ферментационных средах или разработки процесса сорбции лизина без отделения от биомассы

Изучение физико-химических свойств и определение емкости катио-нита КУ-1 в Н-форме в процессе длительной эксплуатации при выделении лизина из культуральной жидкости Ливанского биохимического завода показали нецелесообразность его применения (в виду низкой емкости), так как емкость смолы по фенольным группам составила 3,84 мг-экв/г, а по сульфогруппам - 1,80 мг-экв/г, суммарная емкость по всем активным группам - 5,64 мг-экв/г Исследования показали, что сорбция лизина осуществляется в основном за счет взаимодействия с сульфогруппами сорбента

Сильноосновной макропористый анионит АВ-17-2П в ОН-форме поглощает лизин преимущественно из растворов, содержащих цвиттер-ионы аминокислоты; анионы сорбируются в меньших количествах из-за конкурирующей адсорбции гидроксил-ионов, катионные формы лизина не сорбируются анионообменником Данный анионит можно использовать при низких значениях рН для очистки производственных растворов лизина от красящих пигментов, так как лизин при этом не поглощается

Проведено определение параметров сорбционного извлечения лизина из модельных солянокислых растворов лизина при различных рН и отработка условий извлечения лизина из культуральной жидкости микробного синтеза

В качестве объекта исследования использовалась культуральная жидкость лизинокислого производства Щебекинского биохимического завода Динамические характеристики сорбции лизина изучены на катионитах КУ-2-8 и КУ-23 (30/100) в аммонийной форме при различных значения рН на специальных хроматографических колонках из модельных солянокислых растворов лизина (с концентрацией последнего 20 г/л)

Предварительно установлены ионные формы лизина в зависимости от кислотности модельной среды (солянокислые растворы лизина) (рис1) Количественное содержание лизина и его ионные формы определены методом восходящей бумажной хроматографии после проявления нингидри-ном на фотоколориметре ФЭК-56 М Изменение величины рН в строну низких значений способствует образованию двухвалентных катионов лизина, а высоких - цвиттер-ионов и в основном - однозарядных анионов, что и определяет впоследствии динамику сорбции лизина Резкое изменение величины рН на выходе из колонки свидетельствует о практически полной сорбции катионов водорода и лизина как в форме двухвалентного

катиона (кр 1,3 рис 2), так и одновалентного катиона (кр 2,4 рис 2) уже в начальные моменты сорбции в результате вытеснения ионов аммония и для КУ-23 и КУ-2-8 Начиная с 5 и 7 объема очищаемого раствора происходит выравнивание значений рН соответственно для КУ-23 и КУ-2-8, которые далее практически неизменны

Из данных рис 3 следует, что сорбция лизина лучше происходит из кислых растворов, так как наблюдаемый фронтальный процесс обусловлен поглощением двухзарядного катиона аминокислоты Известно, что однозарядные катионы менее селективны, чем многовалентные

Видно, что фронт сорбции двухзарядного катиона лизина на макропористом катионите КУ-23 формируется быстрее, чем на гелевом сорбенте КУ-2-8, что обусловлено большей доступностью обменных мест в среде смолы Однако, обменная емкость катеонита КУ-23 меньше, чем катеонита КУ-2-8, хотя емкость по отдельным сульфогруппам у катеонита КУ-23 выше, чем у катионита КУ-2-8

1,0 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0.4 О.з 0,2 0.1

Л

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 рН Рис 1 Ионные формы лизина в зависимости от значений рН

рн

9

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 уД/0

Рис 2 Изменение рН при сорбции лизина из модельных растворов на катионите КУ-23 (1-рН=1,42, 2-рН=5,60) и катионите КУ-2-8 (3-рН=1,55, 4-рН=5,51

Возможность промышленного применения сорбентов определяется не только их органоемкостью, но и способностью к регенерации, то есть к восстановлению утерянной в течение рабочего цикла сорбционной емкости ионитов Для регенерации, насыщенных лизином катионитов, использованы 2N растворы аммиака Изменение концентрации лизина в растворах регенерантов в зависимости от их расхода показаны на рис 4

2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 УЛ/0

Рис 3 Сорбция лизина из модельных растворов на катионите КУ-23 (1-рН=1,42, 2-рН=5,вО) и на катионите КУ-2-8 (3-рН=1,55, 4-рН=5,51)

Рис 4 Десорбция лизина с катионита КУ-23 (1 - рн » 1,42, 2 - рН = 8,60) и катионита КУ-2-8 (3 - рН - 5,51, 4 - рН = 1,55).

Использование аммиачного щелочного раствора в количестве 2 и 4 м3/м3 наиболее эффективно при десорбции лизина, соответственно, для

КУ-2-8 и КУ-23 Характер изменения рН в процессе десорбции (рис 5) подтверждает регенерирующие свойства раствора МН4ОН Установлено, что повышение скорости фильтрации аминокислоты (лизина) через сорбент КУ-2-8 при рН = 1,5-2 практически не сказывается на эффективности процесса сорбции (рис 6) Не выявлено влияния скорости потока де-сорбирующего раствора и на количество извлекаемого лизина (рис.7)

2 4 6 8 12 14 16 11 2 4 0 8 1214 УЛ/С

Рис 5 Изменение величины рН при десорбции лизина с катеонита КУ-23 (1-рН=1,42, 2-рН=5,60) и с катионита КУ-2-8 (3-рН=1,55; 4-рН=5,51)

Рис 6. Сорбция лизина из модельных растворов на катионите КУ-2-8 (1- \А 2м/час; 2- ЧИм/час).

Отсутствие размытия фронта сорбции на начальных участках кривых сорбции (рис 3) свидетельствует о внутридиффузионном кинетическом механизме и о возможности использования уравнений выходной кривой при сильновыпуклой адсорбции (как для КУ-2-8, так и для КУ-23) для рас-

чета процесса сорбции двухзарядиого катиона лизина Используя значение констант обмена, провели графическое определение эффективных коэффициентов взаимодиффузии Согласно, полученным данным макропористый катионит КУ-23 (30/100) обладает лучшими кинетическими свойствами при поглощении лизина (Д= 4,8* 10'7см2/сек), чем гелевый катионит КУ-2-8 (2,7*10"7 см2/сек)

8 9 10

УЛ/

Рис 7. Десорбция лизина с катионита КУ - 2 - 8 (1-\/5= 1м/час, 2-У-2м/час).

Итак, на основании исследования модельных растворов лизина было установлено, что в сильнокислых растворах при рН =1,5-1,9 лизин присутствует в виде двухзарядиого катиона Для выделения лизина можно использовать катионит КУ-2-8 в аммонийной форме, так как его обменная емкость по лизину выше по сравнению с КУ-23 Селективная сорбция двухзарядиого катиона аминокислоты приводит к вытеснению в равновесный раствор минеральных ионов кальция, калия, натрия, а ионит насыщается аминокислотой Перезарядка лизина и переход его в анионную форму (рН =11) способствуют быстрому вытеснению его из сорбента элюирую-щим раствором аммиака

Данная схема положена в основу промышленного выделения лизина из культуральной жидкости с использованием катионита КУ-2-8 (г Щебе-кино) После ферментации КЖ без отделения от биомассы подкисляется кислотой до рН 1,5-1,9, охлажденная биомасса подается на ионообменник до полного насыщения катионита лизином (контроль по содержанию лизина, показателю преломления, электропроводности) После процесса сорбции слой катионита обрабатывается водой до полной отмывки бакте-

риальных клеток и окрашенных веществ Начальные фракции и полученные в конце элюации собираются для повторного пропускания через ка-тионит По окончании элюации катеонит отмывался от избытка аммиака водой до рН 8-8,5 и вновь использовался для поглощения лизина из КЖ Фракции КЖ, не содержащие лизин собираются и могут использоваться в качестве удобрений

Промышленная апробация данной схемы выявила следующие преимущества не требуется отдельная регенерационная обработка, так как двухзарядный катион лизина в процессе сорбции вытесняет поглощенные минеральные ионы и для регенерации катеонита КУ-2-8 достаточно последующей элюации лизина раствором аммиака Лизин в процессе сорб-ции-элюации эффективно отделяется от примесей сопутствующих аминокислот Выходные кривые, отражающие процессы, происходящие на промышленной ионообменной колонне приведены на рис 8 При пропускании 0,5м3 КЖ на 1м3 катионита происходит сорбция всех катионов и вытеснение ионов аммония из слоя Поступление новых порций КЖ, наряду с ио-нообменом, приводит к перераспределению ионов в сорбенте и вытеснению наименее селективного иона натрия и накопления ионов калия и кальция, которые обладают большим сродством к катеониту КУ-2-8 В связи с чем рост концентрации ионов кальция и калия на выходе из колоны происходит медленнее по сравнению с ионом натрия Отметим, что концентрация Са2+ в четыре раза меньше ионов К+, а выходные кривые имеют аналогичный вид, что обусловлено большим сродством Са2+ к сорбенту Двухвалентный катион лизина обладает наивысшим сродством к иониту при рН 1,5-1,9, вытесняет менее селективные ионы, а проскок на выходе их колоны наступает позже других катионов Несмотря на то, что концентрация лизина не превышает концентрацию минеральных ионов, сорбция его протекает наиболее полно и селективно, что обусловлено дополнительным взаимодействием гидрофобной части иона лизина с матрицей сорбента

О 15 30 45 60 75 Vp-pa.ii

4 5

Ур-раЛ/ионита

Рис 8 Сорбция лизина и минеральных примесей из КЖ катеонитом КУ-2-8 (НН^-) 1-ионы К+, 2-ионы На+, 3-ионы Са'+, 4-ионы лизина Я+-

Отмывка катеонита от КЖ горячей водой (333° К) после сорбции осуществлена при скорости 8м3/час при расходе воды 3 объема на 1 объем катеонита Один объем промоя (20м3) содержит лизин и используется вместе с лизин содержащим равновесным раствором для повторного пропускания через ионит Элюация проведена 5% раствором N11(011 с линейной скоростью 1м3/час при 1,5 V элюата / V катионита (рис 9) Концентрация лизина в обогащенной фракции составила 130 г/л Концентрация Ка+, К+, Са2+ снижались в 20, 12, 11 раз соответственно Из 2400 кг лизина содержащегося в КЖ, выделяется в виде обогащенной фракции 1900 кг, остальное используется для повторного извлечения Отмывка колоны после элюации требует 6У Н20/объем катионита Потери составили 3% от общего содержания лизина в КЖ Оптимальные условия извлечения аминокислоты без отделения от биомассы на катеоните КУ-2-8 достигаются при концентрации лизина в КЖ ~ 20 г/л Эффективная емкость катионита КУ-2-8 по лизину составила 116 кг/м3 Содержание аммиака в обогащенном элюате 0,6%, что позволило исключить из технологической схемы завода операцию по отпарке аммиака и доупаривания растворов Применение батареи из двух и более катионитовых фильтров значительно снижает объем сто-

Рис 9 Элюация лизина и минеральных примесей 4,5%-ным раствором аммиака с катионита КУ-2-8 1-ионы К+, 2-ионы Ыа+, 3-ионы Са , 4-ионы лизина Л2+

Таким образом, использование катионита КУ-2-8 в аммонийной форме позволяет получить растворы лизина высокой концентрации без отделения биомассы с минимальным количеством минеральных примесей Десорбция лизина раствором аммиака повышает селективность процесса де-

сорбции, упрощает процесс десорбции, устраняет ряд отмывок, что приводит к сокращению объема сточных вод.

Глава 4. Использование биомассы микробного синтеза лизина в качестве удобрений. В культурапьной жидкости, после извлечения лизина, остаётся большое количество минеральных компонентов, целый ряд органических веществ как образовавшихся в процессе микробного синтеза, так и перешедших из мелассы Оставшиеся в культурной жидкости аминокислоты являются незаменимыми (триптофан, метионин, аланин, глицин, тирозин) и в виду их биологической активности, а также наличия в культу-ральной жидкости минеральных ионов представляет интерес ее использования в качестве комплексных удобрений, что решает проблемы утилизации биомассы на предприятии, а также может служить источником органических и минеральных питательных веществ большого спектра при внесении их в почву в качестве удобрений Проведенные испытания показали

1)в биомассе содержится азот (2,5%), фосфор (9%), калий (0,4%) и в меньших количествах другие минеральные ионы,

2) элементы питания, содержащиеся в биомассе, усваивались растениями и повышали урожай зерна и зелёной массы кукурузы,

3)в вегетационных лабораторных опытах (по сравнению с контролем) прибавки урожая от внесения биомассы составили у ячменя 5 г с 1м2 или 100%, у кукурузы 200 г или 70%,

Отметим, что при внесении рекомендованных доз минеральных удобрений прибавки были выше и составили у ячменя 10,8г (220%), у кукурузы 270г (93%),

4) в микрополевых опытах внесение биомассы увеличивало урожай зерна ячменя на 24г (22%), у кукурузы на ЗЗОг (21%) с 1м2,

5) изучение структуры урожая ячменя, показало, что при внесении биомассы улучшилась сохранность растений за вегетацию, увеличилось озерненность колоса и масса зерна с колоса,

6) применение биомассы в вегетационных и микрополевых опытах способствовало улучшению качества зерна, содержание сырого протеина и крахмала в зерне ячменя повышалось, в зеленой массе кукурузы содержание сырого протеина увеличивалось, а клетчатки практически не менялось (табл 4 1,42)

Исследование проводилось на территории ООО «Солидарность» (Липецкой области) на типичных среднемощных черноземах на сорте ячменя Дина и кукурузы на силос РОСС-209 Отметим, что в годы исследований периоды вегетации характеризовались жаркой погодой, большим недобором осадков, что не могло не сказаться на минерализации биомассы, усвояемости питательных веществ и в конечном итоге на урожае

Лабораторными и почвенными исследованиями установлена возможность применения биомассы в качестве удобрения полевых культур.

Таблица 4 1

Влияние удобрений на структуру урожая ячменя сорта «Дина»

Варианты опыта Количество растени йна 1 м\ [ИТ Количество продуктивных с геблей, шт Продуктивная кустис тость стеблей райе-кии Высота' расте ния см Анализ 25 котичество зерен, шт растений масса зерна, г Масса зерна с 1 м", с Масса соло- 1 мы с 1 м2,г Отношение зерна к соломе Масса 1 1000 зерен, г

25 колоссов в ко лосе 25 ко-оосков В колосе

208 208 1,0 44 386 15,3 12,8 0,51 106,7 149,5 1 1,4 ззд

234 234 10 50 398 15,9 13,7 0,55 129,1 167,9 1 1,3 34,5 34,7

Мин удобрен 238 238 1,0 54 403 16,1 140 0> 133,3 173,3 1 13

243 244 1,0 55 436 17,4 17 б" 150 060 145,9 189,7 1 13 34,3

ЫРК,«, 242 242 1 0 54 441 15,5 0 62 150Д 195,3 1 1,3 35,1

Таблица 4 2

Влияние удобрений на структуру зерна ячменя сорта «Дина»

Варианты опыта Коли честно растений в сосудах шт Коти честно продук тивных стеблей шт Продуктивная кустистость стеблей расге ния Высота растения см Количество зерна, шт Масса зерна с 1 колоса, г Масса зерна в сосуде г Масса 1000 зерен г Масса соломы в сосуде Отношение зерна к соломе

в сосуде в колосе

Контроль 12 11 091 65 0 120 ПО 0 42 47 38 2 7 1 1 15

Биомасса 13 21 1 6 74 2 248 118 0,45 95 38 5 15 3 1 16

Мин удобрен эквивал биомассе 13 20 1 6 79 3 240 12 0 0 47 94 39 1 15,1 1 16

Биомасса + N К 13 27 2 1 87 0 351 13 0 0,51 13 9 39,6 23,9 1 17

ЫРК,,,, 13 28 2 1 91 4 387 13 8 0 55 156 40 2 26 3 1 17

Глава 5. Санитарно-химнческне исследования ионитов. Одной из целей проведенных исследований является профилактика неблагоприятных последствий использования ионообменных смол в пищевой, микробиологической и сельскохозяйственной промышленности, обусловленных десорбцией органических веществ из материала ионита В связи с этим проведена санитарно-химическая и технологическая оценка ионитов АВ-17-2П, ИА-3, КУ-1, КУ-2-8 Иониты обрабатывались дистиллированной водой при разных соотношениях их объемов, температурах и временах выдержки

Выявлено, что товарный анионит АВ-17-2П выделяет в воду больше органических соединений, чем обработанная смола ИК-спекгры водных экстрактов показали отсутствие в них токсических веществ По данным

органолептических исследований анионита АВ-17-2П экстракты не имели постороннего привкуса, запаховые ощущения были в пределах гигиенических норм Исследования биохимического потребления кислорода показали, что примеси, выделяемые из анионита АВ-17-2П физиологически инертны, количество примесей невелико Анионит АВ-17-2П как в СГ, так ОН" - формах обладает высокой химической, термической и механичекой стойкостью

Увеличение температуры резко повышает количество извлекаемых из анионита ИА-3 примесей, наблюдается ухудшение органолептических свойств, хотя их изменение невелико По данным ИК-спектров отмытого и товарного анионита ИА-3 выявлено, что при отмывке удаляются низкомолекулярные фракции и мономеры При 80°С под действием водыпроисхо-дит термохимическая деструкция смолы с образованием поли-мерных амидо- и аминокислот В экстрактах из товарного анионита ИА-3 обнаружен фенол Это требует при разработке экологически безопасной технологии использования смолы ее тщательного кондиционирования с токсикологическим контролем производства и ограничением температурного режима использования не выше 40°С

При проведении идентификации и токсико-биологической оценки примесей, вымываемых из катионитов КУ-1,КУ-2-8 установлено, что в экстракт попадают остаточные количества легкорастворимых мономерных соединений, не удаленных при кондиционировании растворами кислот и щелочей Изучение санитарно-химических характеристик катионитов исходного и работавшего два года в производственных условиях показало, что при эксплуатации катионитов происходит разрушение активных групп сорбентов, а не его матрицы В воде, полученной с использованием катионитов, стирол не обнаружен

Приложение. Определение ионов железа и меди в воде, сельскохозяйственных продуктов в виде р-дикетонатных аддуктов. На экологию жизни человека влияет загрязнение водных источников ионами тяжелых металлов, что также влияет на урожайность сельскохозяйственных культур, развитие животных, их продуктивность, провоцирует многие заболевания и в конечном итоге сказывается на здоровье людей

Известные методы определения железа и меди, имеют сравнительно низкую избирательную точность и плохую воспроизводимость

Нами разработаны методы определения ионов железа и меди экс-тракционно-спектрофотометрическим методом в виде пиперидиновых аддуктов ацетилацетонатов или дибензоилметанатов Для этого анализируемый объект обрабатывали методом мокрого озоления до появления паров серного ангидрида и удаления окислов азота

К аликвотной части раствора добавляли Р-дикетон, уксуснокислый натрий, пиперидин, полученные аддукты экстрагировали бензолом (или толуолом, хлороформом) Спектры поглощения снимали в видимой облас-

ти, оптические плотности определяли при максимальной длине волны, для аддуктов железа пр 480 нм, аддуктов меди - 680 нм Содержание ионов железа и меди определяли по соответствующим калибровочным графикам (табл 1)

Определение элементов различных материалах (п=5, р=0,95)

Опред элемент Объект анализа Апестов содерж , % Предл реагенты Х±8, % Sr Реаген-тные сравнения

1 2 3 4 5 6 7

Fe Сточная вода 5,0 10"4 НАА PiPy (2,1 ±0,1) 10"4 0,04 NH4SCN

Fe Сточная вода 5,0 10"4 НДБМ PiPy (2,1±0,1) 10"4 0,04 nh4scn

Fe Питьевая вода 3,0 105 НАА PiPy (1,19±0,03)) 105 0,01 nh4scn

Fe Питьевая вода 3,0 103 НДБМ PiPy (1,17±0,03) 10° 0,01 nh4scn

Cu Питьевая вода 5,0 10"5 НДБМ PiPy (12,0±0,01) 103 0,05 ДЭДТК

Fe Кровь крупного рог скота 6,44 10"' НДБМ PiPy (6,22±0,1) 10"2 0,04 nh4scn

Cu Кровь крупного рог скота 8,50 10"2 НДБМ PiPy (2,31 ±0,02) 10"2 0,01 ДЭДТК

Fe Печень крупного рог скота 2,0 10 2 НДБМ PiPy (3,20±0,02) W'¿ 0,01 nh4scn

Cu Печень крупного рог скота 2,45 10¡ НДБМ PiPy (3,01±0,03) 10"' 0,01 ДЭДТК

Fe Пшеница 1,2 10' НДБМ PiPy (4,10±0,01) 10'¿ 0,006 nh4scn

Cu Пшеница 4,11 10"4 НДБМ PiPy (7,50±0,02) 10"4 0,01 ДЭДТК

Fe Ячмень 1,8 10" НДБМ PiPy (2,30±0,01) 10"' 0,01 nh4scn

Cu Ячмень 5,9 10^ НДБМ PiPy (3,70±0,04) 10"4 0,03 ДЭДТК

Разработанные методики превосходят рекомендованные ГОСТом, обладают большой избирательностью и хорошей воспроизводимостью

Выводы

1 Найдено, что в биомассе содержится азот, фосфор, калий, другие минеральные ионы, аминокислоты, а также много других редуцирующих веществ в виде ассимилируемых микроорганизмами источников углерода, что можно использовать в качестве среды для получения кормовыч дрож-

жей, других полезных продуктов Наличие метионина и других незаменимых аминокислот позволяет доводить растительные белки до кондиций животных белков и, следовательно, повышать продуктивность сельскохозяйственных животных, интенсифицировать технологии кормления и выращивания Эффективность использования лизина в животноводстве доказана литературными данными

2 Отходы биохимического производства лизина в виду их биологической активности, наличия минеральных ионов могут использоваться в качестве комплексных удобрений, что решает проблемы утилизации биомассы на предприятии, а также служит источником органических и минеральных веществ большого спектра при внесении их в почву в качестве удобрений В вегетационных и микрополевых опытах установлено, что элементы питания, содержащиеся в биомассе, усваивались растениями и повышали урожай зерна и зеленой массы кукурузы По сравнению с контролем прибавки урожая от внесения биомассы составили ячменя сорта Дина 100%, у кукурузы РОСС-209 - 200% Изучение структуры урожая ячменя показало, что при внесении биомассы улучшилась сохранность растений за вегетацию, увеличилась озерненность колоса и масса зерна с колоса, улучшилось качество зерна - повысилось содержание сырого протеина и крахмала в зерне ячменя, в зеленой массе кукурузы содержание сырого протенина увеличилось, клетчатки не изменилось Установлена возможность применения биомассы в качестве удобрения полевых структур

3 Проведены санитарно-химические и токсикологические исследования катионитов КУ-1, КУ-2, анионитов АЯ-17-2П, ИА-3 Выявлено, что товарная форма смолы КУ-2, АВ-17-2П содержит незначительное количество органических примесей, которые удаляются при отмывке По данным морфологических, биохимических, патологических исследований установлено, что экстракты из водных вытяжек отмытых и не отмытых форм смол не оказывают заметного влияния на организм животных, а органолептиче-ская активность экстрактов из смол незначительна и находится в пределах санитарно-химических норм.

4 Научно обоснован и экспериментально подтвержден выбор наиболее органоемкого катионита КУ-2-8 для извлечения лизина в виде двухзаряд-ного катионита в сильнокислой среде как из модельных, так и промышленных культуральных сред Исследована сорбционная емкость по лизину в виде цвиттер-ионов, нейтральных молекул и однозарядных анионов Реакция среды сильно влияет на форму существования лизина, которая и определяет количественную сторону взаимодействия лизина и катионита Максимальная сорбционная емкость катионита КУ-2 реализуется при рН 1,5-1,9 Основной причиной поглощения лизина является ионообменная сорбция

5 Исследованиями сорбции лизина в динамических условиях установлен характер влияния скорости потока, кислотности, содержания лизина в

обрабагываемой культуральной жидкости на эффективность выделения лизина без отделения от биомассы

6 Установлена повышенная поглотительная способность катеонита КУ-2 по сравнению с катеонитом КУ-1 Выявлено, что влияние скорости потока культуральной жидкости на эффективность процесса сорбции лизина незначительно Оптимальные условия для накопления лизина на катеоните КУ-2-8 при концентрации лизина - 20 г/л в культуральной жидкости, эффективная емкость катионита по лизину составляет ~ 116—120 кг/м3, а концентрация лизина в богатой фракции элюата 130-140 г/л

7 Разработан режим регенерации сорбционного фильтра раствором аммиака Определены оптимальная концентрация и удельный расход реагента в расчете на 1м3 катионита Элюация лизина проводится 4-5% раствором аммиака с линейной скоростью 1-1,3 м/час Объем элюанта составляет 1,5 объема от объема катионита Содержание Са+, К , в элюате снижается 11, 12, 20 раз по сравнению с исходной КЖ Остаточное содержание аммиака в обогащенном элюате составляет 0,6-0,7%, что позволяет исключить из технологической схемы операцию по отпарке аммиака и до-упаривания растворов, чго соответственно, значительно снижает объем стоков после ионообменной десорбции лизина

8 Анионит АВ-17-2П поглощает лизин в форме цвиттер-иона, однако, сорбционная емкость незначительна Анионит имеет высокую сорбцион-ную емкость в отношении органических окрашенных веществ (меланои-динов), присутствующих в КЖ, что можно использовать в технологических схемах для предварительной очистки ферментационных сред

9 Выявлено, что промышленная кулыуральная жидкость включает в себя продукты щелочного распада редуцирующих Сахаров, аминокислоты (лизин, метионин, триптофан, аланин, фенилаланин, а также меланоидины Методами хроматографии, ИК- и УФ- спектроскопии, элементного анализа установлены физико-химические характеристики меланоидинов, их элементный состав, а так же константы диссоциации функциональных групп

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации.

1 Воржев В Ф Определение ионов железа и меди в воде, сельскохозяйственных продуктах в виде ß-дикетонатных аддуктов /В Ф Воржев, В А Алексеевский, Е В Гуляк // Проблемы строительства инженерного обеспечения, благоустройства и экологии, 2003 Материалы V международной науч - практ конф (2003) - Пенза, 2003 - С 7-8

2 Алексеевский В А Экстракционно-спектрофотометрическое определение d-элементов в виде ß-дикетонатных аддуктов / В А Алексеевский, В Ф Воржев, Е В Гуляк // Среды обитания и проблемы реабилитации нарушенных экосистем, 2003 материалы Всероссийской науч - практ конф (2003) - Пенза, 2003,-С 10-11

3 Алексеевский В А Экстракция пиперидиновых аддуктов дибензилме-танов малополярными органическими растворителями /В А Алексеевский, В Ф Воржев // Экстракция органических соединений, 2005 материалы III Международной конф (2005) -Воронеж - С 163-164

4 Алексеевский В А Определение ионов железа, меди в воде и пищевых продуктах / В А Алексеевский, В Ф Воржев, Е В Гуляк // Экономика, экология и общество России в 21-м столетии, 2003 Труды 5-й Международной науч - практ конф (2003) - Санкт-Петербург, 2003, - С 215-216

5 Алексеевский В А Исследование комплексообразования ß-дикетонатов с аминами / В А Алексеевский, В Ф Воржев, Е В Гуляк // Проблемы строительства инженерного обеспечения, благоустройства и экологии, 2003 Материалы V международной науч - практ конф (2003) -Пенза, 2003,- С 9-14

6 Алексеевский В А Экстракционно-спектрофотометрическое определение с применением пиперидиновых аддуктов дибензоилметанатов в экологическом мониторинге водных сред /В А Алексеевский, В Ф Воржев // Экстракция органических соединений, 2005 материалы III Международной конф (2005) —Воронеж - С 366-367

7 Алексеевский В А Синтез, идентификация ацетилацетонатов, дибензоилметанатов, бензоилацетонатов, аналогичных сера -, селен-содержащих ß-дикетонатных аддуктов / В А Алексеевский, В Ф Воржев, Е В Гуляк // Достижения и перспективы химической науки, 2003 материалы 17 Менделеевского съезда по общей и прикладной химии (2003) -Казань -С 73

8 Воржев В Ф Использование биомассы микробиологического синтеза лизина в качестве удобрений / В Ф Воржев, Н М Стекольникова // Проблемы экологии и экологической безопасности центрального черноземья Российской Федерации, 2006 материалы Х-й Всероссийской науч - практ конф (2006) - Липецк, - С 57-59

9 Воржев В Ф Экологические аспекты использования разбавленных электролитов хромирования / В Ф Воржев, НМ Стекольникова, ЕЮ

Ломовская, 10 А Стекольников // Проблемы экологии и экологической безопасности центрального черноземья Российской Федерации, 2006 материалы Х-й Всероссийской науч - практ конф (2006) - Липецк, - С 5960

10 Воржев В Ф Сорбция микробного лизина на ионитах / ВФВоржев, НМ Стекольникова И Проблемы экологии и экологической безопасности центрального черноземья Российской Федерации, 2006 материалы Х-й Всероссийской науч - практ конф (2006) - Липецк,-С 60-61

11 Воропаев Н В Эколого-агрохнмическая оценка состояния почвы и растений в агроландшафтах Липецкой области / ВЫ Воропаев, В Ф Воржев, К Н Гасиев // Экология центрально-черноземной области РФ -2006 -№2(17) -С 63-70

12 Воржев ВФ, Стекольникова НМ, Стекольников ЮА, Глянцев НИ/ Сорбция лизина микробного синтеза // Сорбционные и хроматогра-фические процессы - 2007г т 8, №2 - С 157-161

Лицензия на издательскую деятельность ИД № 06146 Дата выдачи 26 10 01

Формат 60x84/16 Гарнитура Times Печать трафаретная Усл-печл 1,0 Уч-издл 1,2 Тираж 100 Заказ 35

Отпечатано с готового оригинал-макета на участке оперативной полиграфии Елецкого государственного университета им И А Бунина

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Етецкий государственный университет им И А Буиинач 399770, г Елец, ул Коммунаров, 28

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Воржев, Владимир Федорович

Введение.

1. Получение, свойства и использование лизина в сельском хозяйстве.

1.1. Значение микроорганизмов в природе.

1.2. Получение органических кислот.

1.3. Получение аминокислот.'.

1.4. Биологические свойства кормового концентрата

L-лизина (ККЛ).

1.5. Питание человека.

2. Условия, объекты и методы исследования.

2.1. Метеорологические условия в год проведения исследования.

2.2. Задачи и программа исследования.

2.3. Методика эксперимента.

3. Вещества, сопутствующие биохимическому синтезу лизина.

3.1. Определение свойств меланоидов, содержащихся в КЖ, методом гельхроматографии на сефадексах.

3.2. Изучение природы и свойств окрашенных соединений, сопутствующих выделению лизина.

3.3. Полученные результаты и их обсуждение.

3.4. Свойства меланоидинов, содержащихся в КЖ.

3.5. Свойства окрашенных веществ, содержащихся в КЖ Ливанского биохимзавода.

3.6. Сорбция лизина микробиологического синтез.

4. Исследование осажденной биомассы микробиологического лизина в качестве удобрений.

4.1. Агрохимическая характеристика почвы вегетационных опытов и опытных участков.

4.2. Влияние удобрений на урожайность и качество зерна ячменя и кукурузы на силос.

5. Санитарно-химическое исследование ионитов.

5.0. Эксплуатация ионитов в условиях пищевых производств.

5.1. Санитарно-химические исследования анионита АВ-17-2П5.2.

5.2. Исследования санитарно-химических свойств ионита ИА-1Р.

5.3. Санитарно-химические исследования ионита ИА-3.

5.4. Гигиенические оценки катионита КУ-1.

5.5. Токсико-гигиеническая оценка катионита КУ-2-8.

5.6. Органолептические исследования катионита КУ-2-8.

5.7. Токсикологические исследования КУ-2-8.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экологическая оценка отходов производства лизина и их использования в сельском хозяйстве"

Актуальность исследования. Производство синтетических аминокислот и разработка условий их эффективного использования являются одним из путей решения проблемы увеличения продуктов животноводства при минимальных затратах белка. Среди проблем аминокислотного питания животных наибольшую важность представляет разработка вопросов лизинового питания, так как он относится к незаменимым аминокислотам, а также экологически целесообразного способа производства лизина. В микробиологическом производстве это может быть достигнуто, начиная от приёмов выращивания бактерий до рационального использования отходов, которыми являются культуральные среды. Они содержат также ряд других аминокислот, питательные и ростовые вещества, и другие продукты биосинтеза, которые могут быть использованы как в качестве корма, так и комплексных удобрений. Увеличение продуктивности агро - и техносферы требует разработок источников питания, корма и сырья для перерабатывающей промышленности [25, 59, 26, 171,172,173,183].

Использование экологических решений в управляемых промышленных условиях биотехнологий позволяет получать кормовые продукты, аминокислоты, удобрения с минимальным воздействием на окружающую среду. Необходим экологический контроль осуществления микробио-логических конкретных процессов вплоть до очистки сточных вод при выделении веществ из культуральных сред или из биомассы микроорганизмов, так как побочные продукты могут привести к уничтожению природной микрофлоры и потере очищающей способности окружающей среды. Поскольку в микробиологической промышленности все технологические процессы связаны с потреблением воды и после извлечения целевого продукта в ней остается много редуцирующих веществ в виде ассимилируемых микроорганизмами источников углерода, то ее можно использовать в качестве среды для получения кормовых дрожжей, иных полезных продуктов. Сказанное справедливо и в отношении жидких и твёрдых отходов биосинтеза в смысле извлечения полезных и утилизации вредных побочных продуктов.

В настоящее время имеет место дефицит лизина как при потреблении человеком, так и при кормлении животных. Концепция государственной политики в области здорового питания населения, принятая правительством Российской Федерации (постановление №910 от 10 августа 1998г.), предусматривает разработку технологии качественно новых продуктов питания функционального назначения. В связи с чем извлечение лизина из культуральных сред и его последующее использование является актуальной задачей, решение которой позволяет, наряду с утилизацией отходов, способствовать повышению качества жизни населения и кормления животных [9,12,16,27, 110, 125, 132, 133].

Существующая биотехнология получения лизина, разработанная институтом им. А.Н. Баха экологически небезопасна, т.к. требует больших объёмов воды и, соответственно, наличия стоков, содержащих редуцирующие вещества, микроорганизмы, органические вещества и иные источники углерода, которые могут быть неконтролированно использованы микроорганизмами окружающей среды в сторону изменения микрофлоры и нарушения биологического равновесия. Поэтому актуальной является разработка технологических приёмов выделения лизина, использования культуральной среды в качестве корма и комплексных удобрений. Экологически целесообразными методами выделения лизина являются сорбционные. Литературные данные содержат сведения о возможности использования катионо и анионообменных сорбентов для выделения лизина; однако, они обладают рядом недостатков, повышенной сорбцией органических веществ, и в связи с этим, потерями лизина, невысокой стойкостью сорбентов в кислой и щелочных средах, что ведёт к загрязнению целевого продукта. В то же время ряд катионитов обладает высокой сорбционной селективностью к аминокислотам и химической стойкостью.

Использование таких смол в технологии извлечения лизина позволяет решить актуальную задачу - повысить эффективность процесса выделения лизина без отделения от биомассы в виде двухзарядного катионита с получением легко вытесняемого продукта в условиях элюирования аммиаком [63, 74,75, 76, 77, 78, 150].

Культуральные среды, помимо лизина, содержат в своём составе другие аминокислоты, а также такие минеральные примеси как азот, фосфор, калий, которые можно с одной стороны использовать в качестве корма животных, а с другой - получить удобрение, что в целом повышает экологическую безопасность и экономическую целесообразность биотехнологического производства. Решение этой задачи может быть осуществлено на основе использования катионообменных смол марок КУ при выделении лизина, а также культуральных сред в качестве удобрений в сельскохозяйственной промышленности [13, 17, 32, 33, 34, 93,111].

Литературные данные содержат сведения об использовании лизина в качестве кормовых добавок для выращивания животных, но недостаточно сведений об использовании биомассы в качестве удобрений зерновых культур. Поэтому актуальным является поиск технологических решений экономии кормового протеина и кормовых средств растительного происхождения за счет балансировок кормов животных препаратами незаменимых аминокислот (лизина), а также путей повышения продуктивности зерновых культур за счёт эффективного использования отходов биосинтеза, в том числе и биомассы микробного синтеза [13, 35, 37, 40, 138, 248].

Цель и задачи исследования. Целью работы является разработка процесса сорбционного извлечения лизина из культуральных сред без отделения от биомассы, а также экологически целесообразных приёмов использования биомассы в качестве удобрений под ячмень и кукурузу.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Исследование возможности применения биомассы микробного синтеза в качестве удобрений полевых культур, изучение структуры урожая и качества зерна.

2. Выявление путей использования лизина для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных.

3. Повышение уровня экологической безопасности процесса биохимического выделения лизина за счёт комплексного использования отходов производства.

4. Определение рациональных параметров сорбции лизина катеонитом КУ-2-8.

5. Выявление оптимальных условий глубокой и эффективной десорбции лизина.

6. Установление физико-химических характеристик культуральных сред.

7. Разработка технологической схемы получения лизина и путей использования биомассы в качестве удобрений зерновых культур.

8. Санитарно-химическая оценка катеонитов и анионитов, используемых в микробиологическом производстве лизина.

Научная новизна работы. Выявлено, что применение биомассы в качестве удобрений способствовало улучшению качества зерна, содержание сырого протеина и крахмала в зерне ячменя Дина повышалось; в зелёной массе кукурузы РОСС-209 содержание сырого протеина увеличивалось, а клетчатки не менялось. Внесение биомассы способствовало повышению урожайности ячменя на 100 и 25%, а кукурузы на 70 и 25% в вегетационных и микрополевых опытах соответственно. Улучшилась сохранность растений за вегетацию, увеличилась озернённость колоса и масса зерна с колоса.

Проведены санитарно-химические и токсикологические исследования катеонитов КУ-2, анионитов ИА-3, АВ-17-2П. Выявлено по данным морфологических, биохимических, патологических исследований, что экстракты из водных вытяжек отмытых и неотмытых форм смол не оказывают влияния на организм животных, а органолептическая активность экстрактов из смол незначительна и находится в пределах санитарных норм.

Исследована кинетика и динамика сорбции лизина из водных соляно-и сернокислых сред микробного синтеза в широкой области изменения концентрации, рН и температуры, высоты слоя сорбента, скорости потока раствора на разных сорбентах.

На основании экспериментов и выявленных закономерностей сорбции лизина в зависимости от многих параметров разработана технология выделения лизина из культуральных сред без отделения от биомассы.

Выявить параметры процесса, повышающие эффективность сорбции лизина, которые внедрены в виде технологических рекомендаций.

В результате изучения взаимодействия насыщенного лизином катионита и анионита с различными основаниями разработан способ и режим регенерации отработанного сорбента для восстановления его работоспособности, позволяющий достигать высокого эффекта десорбции при минимальном расходе реагентов.

Предложен механизм сорбции и десорбции лизина и дано объяснение закономерностей сорбции и десорбции с позиций физико-химических свойств лизина в виде цвиттер-ионов, катионов, анионов, нейтральных молекул.

Практическая значимость работы: повышена экологичность процесса микробного синтеза лизина за счет вовлечения отходов производства в качестве удобрений полевых культур. Установлено, что биомасса содержит азот, фосфор, калий, другие минеральные ионы, органические элементы питания, которые усваивались растениями и повышали урожай зерна ячменя и зелёной массы кукурузы.

Предложены методики определения тяжелых металлов в продуктах с/х производства, крови, шерсти и органах животных с помощью дикетонатных аддуктов.

Научно обосновано практическое применение катионита КУ-2-8 для выделения лизина из культуральных сред без отделения от биомассы. Разработан режим проведения процесса в промышленном производстве. Показана возможность восстановления сорбционной емкости сорбента и предложены параметры регенерации фильтра.

Определены режимы безопасного кондиционирования ионитов КУ-2-8. ИА-3, АВ-17-2П в условиях сельскохозяйственного производства.

Положения, выносимые на защиту:

1. Экспериментальные результаты исследований по сорбции лизина на ряде ионитов. Влияние на сорбционную способность ионитов- рН, концентрации, температуры, скорости потока раствора, вида смолы.

2. Определение оптимального расхода регенерирующего агента для эффективного восстановления сорбционной ёмкости.

3. Экологически обоснованная технологическая схема получения лизина.

4. Агроэкологические условия выращивания, урожайность и качество полевых культур в свете использования биомассы микробного синтеза в качестве удобрений.

5. Результаты исследований санитарно - химических свойств ионитов, используемых в пищевой и микробиологической промышленности.

Достоверность результатов работы. Достоверность результатов работы, представленных в диссертации, подтверждается использованием современных физико-химических методов анализа, математических методов обработки данных, лабораторными и полевыми испытаниями.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были представлены и обсуждены:

• На 17 Менделеевском съезде по общей и прикладной химии

Достижение и перспективы химической науки», Казань, 2003 год.

• На V международной научно-практической конференции «Проблемы строительства, инженерного обеспечения, благоустройства и экологии», Пенза, 2003 год.

• На Всероссийской научно-практической конференции «Среды обитания, проблемы экологической реабилитации нарушенных экосистем», Пенза, 2003 год.

• На V Международной научно-практической конференции «Экономика, экология и общество России в 21-м столетии», Санкт-Петербург, 2003год.

• На III Международной конференции «Экстракция органических соединений», Воронеж, 2005 год.

• На Х-ой Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы экологической безопасности центрального черноземья Российской Федерации, Липецк, 2006 год.

• На научных и учебно-методических конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников ЕГУ им. И.А. Бунина 2004 - 2007г. г.

Работа выполнена в соответствии с открытым планом хоздоговорных работ ЕГУ им. И.А. Бунина «Разработка экологических основ и технологий производства в агроэкосистемах ЦЧР» на 2000 - 2007 г.г.

Публикации. По теме исследования опубликовано 12 научных работ, в том числе 2 в изданиях, реферируемых ВАК РФ.

Структура и объём работы. Диссертация состоит из введения, 5 глав, выводов и рекомендаций по практическому применению. Общий объём диссертации состоит из 212 страниц, в том числе 40 рисунков, 93 таблиц. В списке используемой литературы приведено 247 библиографических ссылок на отечественные и иностранные источники. Приложения даны на 8 страницах.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Воржев, Владимир Федорович

Выводы

1. Найдено, что в биомассе содержится азот, фосфор, калий, другие минеральные ионы, аминокислоты, а также много других редуцирующих веществ в виде ассимилируемых микроорганизмами источников углерода, что можно использовать в качестве среды для получения кормовых дрожжей, других полезных продуктов. Наличие метионина и других незаменимых аминокислот позволяет доводить растительные белки до кондиций животных белков и, следовательно, повышать продуктивность сельскохозяйственных животных, интенсифицировать технологии кормления и выращивания. Эффективность использования лизина в животноводстве доказана литературными данными.

2. Отходы биохимического производства лизина в виду их биологической активности, наличия минеральных ионов могут использоваться в качестве комплексных удобрений, что решает проблемы утилизации биомассы на предприятии, а также служит источником органических и минеральных веществ большого спектра при внесении их в почву в качестве удобрений. В вегетационных и микрополевых опытах установлено, что элементы питания, содержащиеся в биомассе, усваивались растениями и повышали урожай зерна и зеленой массы кукурузы. По сравнению с контролем прибавки урожая от внесения биомассы составили ячменя сорта Дина 100%, у кукурузы РОСС-209 - 200%. Изучение структуры урожая ячменя показало, что при внесении биомассы улучшилась сохранность растений за вегетацию, увеличилась озерненность колоса и масса зерна с колоса; улучшилось качество зерна - повысилось содержание сырого протеина и крахмала в зерне ячменя; в зеленой массе кукурузы содержание сырого протенина увеличилось, клетчатки не изменилось. Установлена возможность применения биомассы в качестве удобрения полевых структур.

3. Проведены санитарно-химические и токсикологические исследования катионитов КУ-1, КУ-2, анионитов АЯ-17-2П, ИА-3. Выявлено, что товарная форма смолы КУ-2, АВ-17-2П содержит незначительное количество органических примесей, которые удаляются при отмывке. По данным морфологических, биохимических, патологических исследований установлено, что экстракты из водных вытяжек отмытых и не отмытых форм смол не оказывают заметного влияния на организм животных, а органолептическая активность экстрактов из смол незначительна и находится в пределах санитарно-химических норм.

4. Научно обоснован и экспериментально подтвержден выбор наиболее органоемкого катионита КУ-2-8 для извлечения лизина в виде двухзарядного катионита в сильнокислой среде как из модельных, так и промышленных культуральных сред. Исследована сорбционная емкость по лизину в виде цвиттер-ионов, нейтральных молекул и однозарядных анионов. Реакция среды сильно влияет на форму существования лизина, которая и определяет количественную сторону взаимодействия лизина и катионита. Максимальная сорбционная емкость катионита КУ-2 реализуется при рН 1,5+1,9. Основной причиной поглощения лизина является ионообменная сорбция.

5. Исследованиями сорбции лизина в динамических условиях установлен характер влияния скорости потока, кислотности, содержания лизина в обрабатываемой культуральной жидкости на эффективность выделения лизина без отделения от биомассы.

6. Установлена повышенная поглотительная способность катионита КУ-2 по сравнению с катионитом КУ-1. Выявлено, что влияние скорости потока культуральной жидкости на эффективность процесса сорбции лизина незначительно. Оптимальные условия для накопления лизина на катионите КУ-2-8 при концентрации лизина - 20 г/л в культуральной жидкости, эффективная емкость катионита по лизину составляет ~ 116+120 кг/м , а концентрация лизина в богатой фракции элюата 130+140 г/л.

7. Разработан режим регенерации сорбционного фильтра раствором аммиака. Определены оптимальная концентрация и удельный расход л реагента в расчете на 1м катионита. Элюация лизина проводится 4^-5% раствором аммиака с линейной скоростью 1-г1,3 м/час. Объем элюанта составляет 1,5 объема от объема катионита. Содержание Са+, К+, Na+ в элюате снижается 11, 12, 20 раз по сравнению с исходной КЖ. Остаточное содержание аммиака в обогащенном элюате составляет 0,6-г0,7%, что позволяет исключить из технологической схемы операцию по отпарке аммиака и доупаривания растворов, что соответственно, значительно снижает объем стоков после ионообменной десорбции лизина.

8. Анионит АВ-17-2П поглощает лизин в форме цвиттер-иона, однако, сорбционная емкость незначительна. Анионит имеет высокую сорбционную емкость в отношении органических окрашенных веществ (меланоидинов), присутствующих в КЖ, что можно использовать в технологических схемах для предварительной очистки ферментационных сред.

9. Выявлено, что промышленная культуральная жидкость включает в себя продукты щелочного распада редуцирующих Сахаров, аминокислоты (лизин, метионин, триптофан, аланин, фенилаланин, а также меланоидины. Методами хроматографии, ИК- и УФ- спектроскопии, элементного анализа установлены физико-химические характеристики меланоидинов, их элементный состав, а так же константы диссоциации функциональных групп.

184

Заключение

Экологические вопросы - и прежде всего вопросы экологии человека -особенно актуальны в последнее время. В результате технологических воздействий человека на природные процессы опасность глобальных изменений окружающей среды грозит трагедией с непредсказуемыми последствиями. Промышленное производство ведет к непрерывному загрязнению водоемов. Накопление в воде, воздухе и почве тяжелых металлов, канцерогенных веществ, ядохимикатов вызывает гибель растений и животных, отрицательно сказывается на здоровье людей. Основная доля вины за все эти изменения падает на промышленное производство. Сейчас отчетливо ясно, что экологическая напряженность берет свое начало в низком уровне технологий и усугубляется несовершенством очистных сооружений. Это основные факторы экологических бед во всем мире, сопровождающие экстенсивный способ производства на фоне пренебрежения задачами снижения энергетических и сырьевых затрат на единицу производственной продукции.

В настоящее время для предотвращения экологических последствий жизнедеятельности требуется создание ресурсосберегающих безотходных технологий с переводом производства на интенсивный путь развития, на достижения высокого качества производимой продукции.

Отсюда вытекает системный характер агротехнического производства: его экологические аспекты есть в тоже время экономические аспекты. Это обстоятельство одно из главных мотивов настоящей работы: интенсификация биохимического производства лизина (селективное извлечение лизина ионообменным способом с высокой эффективностью), ресурсосбережение (оптимальные режимы сорбции и десорбции лизина на катионите КУ-2-8); безотходности (использование отходов микробного синтеза лизина в качестве удобрений полевых культур); повышение качества продукции (как самого лизина, незаменимой кислоты в процессе питания человека и животных, так и производственных сточных вод на основе использования биомассы в качестве удобрений сельскохозяйственных культур). Производство незаменимых аминокислот является сложным, и оно позволяет решить проблемы эффективного производства продуктов животноводства, сбалансировать питание человека и животных при минимуме затрат. Биологическая доступность лизина в пище человека и в кормах животных обуславливает увеличивающиеся масштабы его производства.

Разработана технология выделения и очистки лизина для употребления в пищу человеком, в кормах животных.

Биохимическое производство лизина сопровождается синтезом ряда сопутствующих органических веществ, осложняющих его выделение. Эти вещества обладают биологической ценностью, в культуральной жидкости содержится большое количество минеральных компонентов, других аминокислот. Доказана возможность использования биомассы микробного синтеза после извлечения лизина в качестве комплексных удобрений полевых культур, что решает проблему утилизации биомассы на предприятии, а также может служить источником органических и питательных веществ большого спектра при внесении их в почву в качестве удобрений.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата сельскохозяйственных наук, Воржев, Владимир Федорович, Орел

1. Abernathy, R. Р., / Sewell R. F. J. Anim. Sci. //, 17, 635, 1958.

2. Авдеенко, B.H. / Abercade Consulting // PG FOOD: Деловой журнал пищевой отрасли, 2003. № 1. С. 46-50

3. Алексеевский, В.А. Экстракция пиперидиновых аддуктов дибензилметанов малополярными органическими растворителями. /В.А.Алексеевский, В.Ф.Воржев. // Экстракция органических соединений, 2005: материалы III Международной конф. (2005). Воронеж. - С. 163-164.

4. Алексеевский, В.А. Синтез, идентификация ацетилацетонатов, дибензоилметанатов, бензоилацетонатов, аналогичных сера -, селен-содержащих |3-дикетонатных аддуктов. / В.А.Алексеевский, В.Ф.Воржев,

5. Е.В.Гуляк. // Достижения и перспективы химической науки, 2003: материалы 17 Менделеевского съезда по общей и прикладной химии (2003). Казань. -С. 73.

6. Алиханян ,С. И., / Зайцева Э. М., Аркелова В. А., Миндлин С. 3. // Прикладная биохим. и микробиол., 1966. С. 2, 655

7. Alice, G. L., Baker D. Н. J. Anim. Sci., 1970. С. 30, 748

8. Anderson, G. H., Bowland J. P., Canad. J. Anim. Sci.,, N 1, 1967. C. 47

9. Арешкина, JI. Я., / Бекер М. Е., Букин В. Н., Карклинь Р. Я., Клюева Н. М., Куцева Л. С., Лиепиныи Г. К. // Прикладная биохим. и микробиол., I, 1965. С. 396.

10. Арешкина, Л. Я., / Букин В. Н., Бекер В. Ф., Бекер М. Е., Вальдман А. Р., Карклинь Р. Я., Куцева Л. С., Клюева Н. М., Лиениныи Г. К., Раминя Л. О. // Способ производства L-лизина. Авт. свид-во № 171727. Бюлл. изобретений, № 11, 1965.

11. Арешкина, Л. Я., / Букин В. Н., Бекер М. Е., Карклинь Р. Я., Клюева И. М., Куцева Л. С., Лиепиныи Г. К. // Прикладная биохим. и микробиол. 1965. С. 2, 396,

12. Арешкина, Л. Я., / Букин В. Н., Бекер М. Е., Карклиныи Р. Я., Клюева Н. // Allison J. В. In «Some Aspects of amino acid supplementation». New Brunswick, 1956.

13. Аузан, С. И. / В сб. «Получение и применение аминокислот» // Рига, 1970.

14. Аузан, С. И. / Тезисы докл. III биохим. конф. Прибалтийских республик. //Минск, 1968.

15. Аузан, С. И., /Платниеце Р. Ф. // Прикладная биохим. и микробиол., 2, 132.

16. Аузан, С. И. / Бекер М., Дамберг Б. В // сб. «Материалы IV Всес. конф. по физиологическим и биохимическим основам повышения продуктивности сельскохозяйственных животных», т. I, 1966.

17. Аузан, С.И., / Биохимические изменения состава кормового концентрата1.лизина в зависимости от условий культивирования Brevibaclerium штамм // Автореф. канд. дисс, Рига, 1970.

18. Baker, D. Н., / Becker D. Е., Jensen А. Н., Harmon В. G. // J. Anim. Sci., 1970.С. 30, 364.

19. Балавадзе, Э.М., Пат. 2195995 Россия, С1 7 В 01 D 61/44. Способ электродиализа / Бобрешова О.В., Бобринская Г. А., Кулинцов П.И. №2001133802/12; Заявл. 18.12.2001; Опубл. 10.01.2003. Бюл. № 1.

20. Беккер, В.Ф., / Лизин микробиологического синтеза. // Риги. Изд-во «Зинанте» 1982 г., С. 100.

21. Беккер, В. Ф./ Известия АН Латв. ССР // № 1, 1967.

22. Беккер, М. Е. / Введение в биотехнологию. М. - Пищевая промышленность // - 1978. С. 237 .

23. Беккер, М. Е. / Известия АН Латв. //ССР, № 7, 1972.

24. Беккер, М. Е., / Виестур У. Э., Лиепиныи Г. К., Бруновский Ю. Ю. //В сб. «Культивирование микроорганизмов». Рига, 1969.

25. Беккер, М. Е., / Борисевич Л. П., Бруновский Ю. Ю., Брикман С. М., Виестур У. Э, Карклс Б. О., Лиепиныи Г. К., Лаже Я. Я., Ласманович Р. А. //Способ получения концентрата клеточного сока картофеля, Авт. свид-во № 256716. Бюлл. изобретений, № 35, 1969.

26. Беккер, М. Е., / Межиня Г. Р., Руклиша М. П., Виестур У. Э., Селга С. Э., Александрова М. А., Апсите А. Ф., Савенков В, В. // Тезисы докл. I симпозиума: «Прогресс в биологии и инженерном деле». Прага, 1972. С. 201, 205.

27. Беккер, М. Е., Межиня Г. Р. / Тезисы II Всес. совещ. по управляемому биосинтезу и биофизике популяций. // Красноярск, 1969. С.53.

28. Беккер, М. Е., /Селга С. Э„ Межиня Г. Р., Лацар А. А., Краузе И. Я., Калниньш Э. Я., Аузан С. И., Виестур У. Э. // Тезисы докл. научн. конф. по биосинтезу лизина и глутаминовой кислоты. Ереван, 1969. С.72.

29. Беккер, В. Ф„ / Дамберг Б. Э. // Известия АН Латв. ССР, 5,1968.

30. Беккер, М. Е., / Упит А. А. // В сб. «Аминокислоты микробного синтеза». Рига, 1968. С.68.

31. Беккер, В. Ф. / Биологическая эффективность кормового концентрата L-лизина// Автореф. канд. дисс. Рига, 1967.

32. Беккер, В. Ф., /Бекер М. Е. Известия АН Латв.// ССР, 10 1960.

33. Беккер, В. Ф. /Физиологически активные компоненты питания животных. Рига//, «Зинатне», 1969. С.8-16.

34. Беккер, В. Ф. /Известия АН Латв. ССР// № 1, 1967,90.

35. Беккер, В. Ф., /Васильева С. В. Биохимия и физиология питания животных. Рига// «Зинатне», 1972.

36. Беккер, В. Ф., /Благова Т. А., Вевере Л. К., Строжа И. К., Фелдман А. М.// Физиологически активные компоненты питания животных. Рига, «Зинатне», 1969.

37. Беккер, В. Ф. /Биохимия и физиология питания животных.// Рига, «Зинатне», 1969

38. Беккер, В. Ф. Известия АН Латв. ССР, 10, 1966, 107.

39. Беккер, В. Ф. / Биохимия и физиология питания животных. Рига, «Зинатне». 1972.

40. Беккер, В. Ф. /Регуляторы роста и метаболизма животных. Рига, «Зинатне», 1971.

41. Беллани, Л. Инфракрасные спектры. М. - 1957. - 444 с.

42. Ben-Gera, J„ /Zimmermann G. Nature, 202,4936, 1964.

43. Берзинь, Я. М., / Захарченко С. А., Захарченко И. М. // Животноводство. 5, 1967, 82.

44. Березинь, Н.М., / Захарченко С. А., Захарченко И. М. //Вестник с.-х. науки, 8, 63, 1968.

45. Берзинь, Н. М., / Захарченко С. А., Захарченко И. М. // Свиноводство, № 3, 1968.

46. Берштейн,ИЯ., /КалинскийЮЛ. //Спектрофотометрическийанализ.-М.-1971.-с.76-79.

47. Богданов, Г. А. / Обмен веществ и продуктивность свиней в связи с уровнем и качеством протеина в рационах. Автореф. докт. дисс, Персиановка,1969.

48. Богданов, Г. А., / Скорятина В. И. Свиноводство //, № 9, 1967.

49. Богданов, Г. А., // Скорятина В. И., Корон В. П. // Научи, труды ВАСХНИЛ, серия пищеварение и обмен веществ у свиней. М., «Колос», 1971.

50. Brooks, С, / Davis S., Thomas Н., Vipperman S. J. // Anim. Sci., 23, 2, 1964.

51. Букин, В. H. /В сб. «Биохимия и жизнь». М., «Знание», 1972.

52. Бобрешова, О. В., / Кулинцов П. И., Аристов И. В. и др. Механизмы химических превращений и особенности транспорта аминокислот в электромембранных системах//Мембраны. 2000.№7. С. 3-12.

53. Бобрешова, О. В. / Разработка малоотходных мембранно-сорбционных технологий очистки и концентрирования L-аминокислот для чищевой промышленности и медицины: Отчет НИР НТП Министерства образования РФ (203.05.001). Воронеж: ВГУ, 2002. 104с.

54. Бугаенко, И. Р., / Славгородская И.П. // Сахарная промышленность. -1973.-№3, с. 12-16.

55. Букин, В. Н., / Куцева Л. С, Клюева Н. М. // «Получение и применение аминокислот». Рига, «Зинатне», 1970.

56. Букин, В.Н. / Лизин. Получение и применение в животноводстве. М. -Наука. - 1973.-223 с.

57. Вазонов, В. Н. / Свиноводство, № 12, 1967.

58. Vipperman, Р. Е., / Brooks С. С, Kelly R. F., Graham P. P., Thomas H. R. J. //Anim. Sci., 22, N3,1963.

59. Вальдман, A. P., / Беккер В. Ф. // В сб. «Биологически активные кормовые добавки». Рига, 1965.

60. Вальдман, А. Р. / В сб. «Биологические активные добавки». Рига, «Зинатне», 1965

61. Вальдман, А. Р., / Бекер В. Ф. // Биологически активные кормовые добавки. Рига, «Зинатне», 1965.

62. Вальдман, А. Р. В сб. «Регуляторы роста и метаболизма животных».

63. Рига, «Зинатне», 1971. П. М. Bekers, В. Damberga, J. Jakobsons, G. LiepinS. Aminoskabes, to nozimeun ieguves iespejas. Riga, «Zinatne», 1966.

64. Ван Лоен. Применение кристаллических аминокислот в кормлении животных. Междунар. выставка «Химия в промышленности, строительстве и сельском хозяйстве». Произвол, изд. комбинат ВИНИТИ, М., 1965.

65. Ван Лоен. Применение кристаллических аминокислот в кормлении скота. Международная выставка «Химия в промышленности, строительстве и сельском хозяйстве». ВИНИТИ. М., 1965.

66. Van Slyke, D. D., / Sinex F. M. J. // Biol. Chem., 232, 797, 1968.

67. Ward, G. W., / Becker D. E., Norton H. W., Terrill S. W., Jensen R. H. J. // Anim. Soi., 18. N3,1959.

68. Василюк, Я. Птицеводство, № 5, 1972, 23.

69. Wasserman, R. H., / Comar С L., Nold M. M. J. Nutrit. // 50, 371,1956.

70. Wasserman, R. H., / Comar С L., Schooley J. C, Zengeman F. W. J. Nutrit// 69, 371,1959.

71. Виестур, У. Э. Аэрация и перемешивание в процессах микробного синтеза. Спец. отд. научно-техн. информации Микробнопрома, 1972.

72. Виестур, У. Э., / Стурманис И. А., Кристапсон М. Ж., Паберз А. О., Лацар А. А. // Устройство для гашения пены. Авт. свид-во № 248606. Бюлл. изобретений, № 24, 1969.

73. Виестур, У. Э., / Стурманис И. А., Селга С. Э., Кристапсон М. Ж. // Тезисы докл. научн. конф. по биосинтезу лизина и глутаминовой кислоты. Ереван, 1969.

74. Виестур, У., / Голуб Ю. М., Бекер М. Е., Карклиныи Р. Я., Стурманис И. А. // Аппарат для культивирования микроорганизмов. Авт. свид-во № 243554. Бюлл. изобретений, № 17, 1969.

75. Виестур, У. Э. Микробиологическая промышленность, № 7,1970.

76. Виестур, У. Э., / Клинтс Б. А. // В сб. «Получение и применение аминокислот». Рига, 1970.

77. Weisman, N. / Schoenheimer R. J.// Biol. Chem., 140, 779, 1941.

78. Weber, W. Fluid-carbon for sorption of persistenets, organic pollutans.// Advantes Water Pollut. Res. Vol.1. Washington Д.С. - Water Pollut Control Federal. -1967/ - P/253 -276/

79. Воропаев, Н.В. Эколого-агрохимическая оценка состояния почвы и растений в агроландшафтах Липецкой области. / В.Н.Воропаев, В.Ф.Воржев, К.Н.Гасиев. // Экология центрально-черноземной области РФ. 2006. -№2(17).-С. 63-70.

80. Воржев, В.Ф., Стекольникова Н.М., Стекольников Ю.А., Глянцев Н.И. / Сорбция лизина микробного синтеза. // Сорбционные и хроматографические процессы 2007г. т.8, №2. - С. 157-161.

81. Vohra, P., Kratzer F. Н. Science, 124,1145, 1956.

82. Гаранча, Э. Ф., / Циеленс Э. А. // Физиологически активные компоненты питания животных, Рига, «Зинатне», 1969

83. Гельферих , Ф. Иониты. М., 1962. 148 с.

84. Grau, С. R. J. Nutrition, 36. N 1, 1948.

85. Градусов, Ю. Н. Аминокислотное питание свиней. М., «Колос», 1968.

86. Григоров, В. В. Материалы по вопросам микробиологического получения и применения аминокислот. Рига, «Зинатне», 1968.

87. Дамберг, Б. Э. В сб. «Аминокислоты микробного синтеза». Рига, 1968.

88. Дмитроченко, А. П. Свиноводство, № 10, 1969.

89. Dean, W. Е. Poultry Sci., 44, N 3, 1965.

90. Дмитроченко, А. П. Сельское хозяйство за рубежом, серия животноводство, № 3,1963.

91. Дмитроченко, А. П. Сельское хозяйство за рубежом, серия животноводство, № 3,1963.

92. Доманова, Е. Г., / Варшавская Н. 3., Вальнягина А. И. // Диффузия и электромиграция нейтральных аминокислот через ионообменные мембраны. Журнал прикладной химии. 1974. Т. 47. №6. С. 1258-1261.

93. Доспехов, ВА Методика полевого опыта.-М-1979. -406 с.

94. Evans, R. J., / Groschke А. С, Bulls Н. А. // Arch. Biochem., 30, 2, 414, 1951.

95. Eckel, R. Е., / Norris J. Е. С, Pope С. Е. Amer. J.//Physiol., 193,644, 1958.

96. Eckel, R. E., / Pope С E. Norris J. E. С Amer. J. Physiol. // 193, 653, 1958.

97. Erbersdobler, И., / Zucker И. Z. // Tierphysiol. Tierernahrung und Futtermittelkun-V de, 19,4, 1964.

98. Есперсен, И., / Клаусон Я. // Разведение и содержание беконных свиней в Дании. М., Сельхозгиз, 1957.

99. Жевноватая, Г. С. Эффективность использования синтетического лизина в кормлении молодняка свиней. Автореф. канд. дисс, Харьков, 1972.

100. Журбинский, З.И. Теория и практика вегетационного метода. М. -1968. - 264 с.

101. Заболоцкий, В. И., / Гнусин Н. П., Ельникова Л. Ф. // Исследование процесса глубокой очистки аминокислот от минеральных примесей электродиализом с ионообменными мембранами // Журнал прикладной химии. 1986. Т. 59. № 1. С. 140-145.

102. Забродская, А. Г., / Витковская В. А. // Биохимия, 19, 6, 1954.

103. Зайцева, Н. И., / Дмитроченко А. П., Мороз 3. М. // Кормление с. х. животных, № 8,1968; № 9, 1971.

104. ПО.Зариня, Д. Г., / Якобсон Ю. О. // В сб. «Получение и применение аминокислот». Рига, 1970,

105. Захарченко, / П. М., Абрамов И. А., Яншевский Р. М. // В сб. «Получение и применение аминокислот». Рига, 1970.

106. Збарский, Б. И., / Иванов И. И., Мордашев С. Р. // Биологическая химия. Л., «Медицина», 1965.

107. Зельнер, В, Р. Сельское хозяйство за рубежом, № 7, 1971.

108. Инструкция по санитарно-химическому исследованию изделий, изготовленных из полимерных и синтетических материалов, предназначенных для контакта с пищевыми средами. М. - 1972. - 25 с.

109. Казацина, Л.Ф. Применение УФ, ИК, ЯМР-спектроскопии в органической химии. М. - Высшая школа. - 1975. - с.170

110. Калашников, А. П. Кормление молочного скота. М., «Колос», 1968.

111. Каренман, И.М. Фотометрический анализ. Методы определения органических соединений. М. 1970. - 343 с.

112. Каугерс, П. Труды Латвийской с. х. академии. Елгава, 24, 1969.

113. Kiel, F. J. Nutrition, 36. N I, 1948.

114. Kiel, F. J. Anim. Sci., 23, N 3, 1964.

115. Clawson, A. J., / Richards H. L., Malrone G., Barrick E. R. J. // Anim. Sci., 22,662, 1963.

116. Clausen, H. F. Wld. Rev. Anim. Prod., I separat., 1965.

117. Кормовые рационы и нормы кормления для сельскохозяйственных животных. Под ред. члена-корр. ВАСХНИЛ Томмэ М. Ф. М., изд-во сельхоз.лит. журн. и плак., 1963.

118. Кочетков, Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М. - 1971. -127 с.

119. Кристапсон, М. Ж., / Межиня Г. Р., Клинте Б. А., Май JT. А., Зиемеле Р. А., Певзнере JI. Ю. //В сб. «Аминокислоты микробного синтеза». Рига, 1968.

120. Кристапсон, М. Ж., / Виестур У. Э., Бекер М. Е. // Тезисы докл. научн. конф. по биосинтезу лизина и глутаминовой кислоты. Ереван, 1969.

121. Крохина, В. А. В сб. «Вопросы технологии производства свинины», вып. 14. Дубровицы, 1969.

122. Кулинцов, П. И., / Бобрешова О. В., Аристов И. В. // Механизмы электротранспорта в системах ионообменная мембрана-раствор аминокислоты // Электрохимия. 2000. Т. 36. № 3. С. 365-368.

123. Курилов, Н.В., / Кроткова А.П. // Физиология и биохимия пищеварения жвачных. М., «Колос», 1971.

124. Кукуина, JT. А., Куппетская Н.Б. Применение УФ и ИК, ЯМР -спектроскопии в органической химии. М. - 1971. - 264 с.

125. Курухалия, Ц.С., / Салдадзе К.М. // Химически активные полимеры и их применение. JT. - 1969. - с.208.

126. Куцева, JI. С. / Клюева Н. М. // Прикладная биохим. и микробиол., 2, 729,1966.

127. Куцева, JI. С, / Клюева Н. М. // Прикладная биохим. и микробиол., 6, 158,1970.

128. Куцева, JI. С, / Клюева Н. М. // Прикладная биохим. и микробиол., 2. 729, 1966.

129. Лацарс, А. А., / Калване И. Б., Клявиня С. Ю. // В сб. «Получение и применение аминокислот». Рига, 1970.

130. Ленинджер, А. Биохимия. М.: Мир. 1975. 977 с.

131. Лиепиныи, Г. К. Использование картофельного сока для микробного биосинтеза. Автореф. канд. дисс, Рига, 1967.

132. Лобас, Н. Д. Эффективность применения концентрата лизина приоткорме свиней на зерновых рационах. Автореф. канд. дисс. Немчпновка, Московской обл., 1971.

133. Лозинов, А. Б., / Финогенова Т. В., Лиепиньш Г. К., Калниньш 3. А., Слава В. А., Якобсон Ю. О., Пелцмане И. Ж. // В сб. «Получение и применение аминокислот». Рига, 1970.

134. Levis, D. F. Sci. Food Agric, 17, 1966, 8, 382.

135. Lucas, E. W., Holden P. ., Speer V. C, Hays V. W. J. Anim. Sci., 29, 429,1969.

136. Майстер, А. Биохимия аминокислот. M., ИЛ. 1961.

137. Макгрудер, Н. Сельское хозяйство за рубежом, серия животноводство, № 12, 1962.

138. Маршавина, 3. В., / Асланян С. Г. // В сб. «Получение и применение» аминокислот». Рига, 1970.

139. Махаев, Е. А., / Крохина В. А. // Труды Всес. ин-та животноводства,1970.

140. Махаев, А. Е. В сб. «Вопросы технологии производства свинины», вып. 14. Дубровицы, 1969.

141. Международный симпозиум: «Аминокислоты в животноводстве». Тезисы докл., Калуга, 1971.

142. Межиня, Г. Р. Тезисы докл. научн. конф. по биосинтезу лизина и глутаминовой кислоты. Ереван, 1969.

143. Межиня, Г. Р. В сб. «Аминокислоты микробного синтеза». Рига, 1968.

144. Межиня, Г. Р., / Бекер М. Е., Виестур У. Э., Кристапсон М. Ж. Стурманис И. А., Селга С Э. // Тезисы и Всес. совещ. по управляемому биосинтезу и биофизике популяций. Красноярск, 1969.

145. Meister, A. Biochemistry of the amino acids, 1, II, Acad. New York, 1965.

146. Mertz, E. Т., Beeson W. M., Shellon D. C. J. Anim. Sci., 8,4, 1949.

147. Методы агрохимических анализов почв по методике. ОСТ 4640-76. ОСТ 465276-М. -1977. -109 с.

148. Методические указания по санитарно-химической оценке смол при обработкеводы.-Киев.-1965.61 с.

149. Miiller, Z. Aminokyselinu ve vyzive zvirat. Praha, SZN, 1969.

150. Miiller, Z., Rozman S. 11 Intern. Aminosauren. Symposium. Teil II. Rostock, 1969.

151. Miller, G. M„ / Becker D. E„ Jensen A. H., Harmon B. G., Norton H. W. J. // nim. Soi., 28, 204, 1969.

152. Miner, J. J. J. Anim. Sci., 14, 24, 1955.

153. Морозов, В. Г. В сб. «Интенсивный откорм свиней». М., 1967.

154. Мошкутело, И. И. Животноводство, № 11, 1968, 64.

155. Mohan, D. С, // Becker D. Е., Jensen А. Н. J. // Anim. Sci., 32,470, 1971.

156. Miller, Z. Biol. chem. Vizivy Zvirat, N 2, 1969.

157. Назаров, E. Я. Влияние различных норм лизина и метионина на продуктивность племенных кур и инкубационные качества яиц. Автореф. канд. дисс, Краснодар, 1972.

158. Накаписи, К. Инфрактасные спектры и строение органических соединений. М. - 1965. - 216 с.

159. Nation. Res. Council USA. 1968. Nutrient requirements of domestic animals, N 2 Nutrient requirements of swine. Pub. 1599, Nat. Res.

160. Nielsen, H„ / Hays V. Speer V. J. // Anim. Sci., 22, 2, 1963.

161. Овсянников, А. И. В кн. «Наука социалистическому животноводству». М., 1963. -С.125-131.

162. Озолин, Р. К. В сб. «Получение и применение аминокислот». Рига, 1970.

163. Oslrowski, Н. Nowe Rolnictwo, 10, 25, 1968.

164. Пат.З 0516640 США, МКИ С 07 С. W. Amino acids separation by electrodialysis Traxler G. 19. 05. 62.

165. Патент Японии № 11002, 1962.

166. Патент Японии № 10696, I960.

167. Патент США № 2979439, 1961.

168. Поленок, В. А. В сб. «Материалы 4-й Всес. конф. по физиологическим ибиохимическим основам повышения продуктивности с. х. животных». Боровок, 1966.

169. Попехина, П. С. Протеиновое питание, как фактор воздействия на продуктивность свиней и использование ими корма. Автореф. докт. дисс, М., 1964.

170. Попов, И. С. Животноводство, № 7, 1961.

171. Попов, И. С. Избранные труды. М., «Колос», 1966.

172. Попов, И. С. В сб. «Наука социалистическому животноводству». М., 1958.

173. Прохоренко, В. А., / Стручалина Г. Н., Котов В. В. //. Перенос аминокислот через ионитовые мембраны при электродиализе их астворов // Академии наук Киргизской СССР. Хим. тех. и биол. науки. № 4. С. 20-25.

174. Птак, И., Филипович Э. Г. В сб. «Аминокислоты в животноводстве». Калуга,1971.

175. Птак, И. Доступность лизина в кормах животного происхождения, методы определения и влияние технологии производства. Автореф. канд. дисс., Дубровины, 1967.

176. Ralner, S., / Weisman N., Schoenheimer R. // J. Biol, Chem., 147, 549, 1943.

177. Раминя, P. О., / Карклинь P. Я., Ape P. Ю., Бекер M. E., Рутите А. Э. // Способ производства L-лизина. Автореф. свид-ва № 279621. Бюлл. изобретений, №27, 1970.

178. Рекомендации по применению витаминных концентратов в животноводстве. М. «Колос». 1965.

179. Rerat, A. Ann. med. veterin., N 6, 1970.

180. Riba, J. Aminoskabes cuku edinasana. Riga, «Liesma», 1967.

181. Риба, E. П., / Раминыи Э. Э. // В сб. «Материалы 7-й Всес. конф. по физиологическим и биохимическим основам повышения продуктивности с. х. животных». Боровск, 1970.

182. Риба, Е. JI. В сб. «Аминокислоты в животноводстве». Калуга, 1971.

183. Розенбах, Я. Я., / Андерсон П. П., Вальдман А. Р., Страутмане Р. Э. // Физиологически активные компоненты питания животных. Рига, «Зинатне» 1969

184. Rippel,R. Н.,/Harmon В. G„ Jensen А. Н., Norton Н. W., Becker D. Е.// J. Anim. Sri., 24, 373,1965.

185. Robinson, D. N., / Lewis D. J. // Sci. Food and Agric, 14, NII, 1963.

186. Рогов, И. A., / Антипова JI. В., Дунченко Н. И., Жеребцов Н. А. // Химия пищи. Книга 1: Белки: структура, функции, роль в питании. М.: Колос, 2000. 384 с.

187. Рядчиков, В. Г. Свиноводство, № 10, 1961.

188. Рядчиков, В. Г. Животноводство, № 11, 1962. Рядчиков В. Г. Известия ТСХА, вып. 5, 1963.

189. Салдадзе, К.М. Изучение термомеханической устойчивости ионитов. // Сб. исследование в области ионообменной хроматографии. М. - 1957. - с. 214

190. Салдадзе, К.М. Ионнообменные высокомолекулярные соединения. М., 1960, 221 с.

191. Сапронов, А.Р. Красящие вещества и их влияние на качество сахара. М. 1975.-347 с.

192. Светликовска, У. Международный с. х. журн., № 1, 1970.

193. Селеменев, В.Ф. и др. Известия ВУЗов. Пищевая технология. 1977. №5. С. 165-167.

194. Селеменев, В.Ф. Руководство по аналитической химии. Воронеж, -ВГУ,- 1995, с.238-248.

195. Семушкин, А. М. Инфракрасные спектры поглощения ионообменныхматериалов. JI. - 1980. - 225 с.

196. Сидорова, К. Т. Животноводство, № 11,1968, 62.

197. Sydensiricker, V. Р., / Hall W. К., Hoch С W., Pund Е. R. // Science, 103, 194,1946.

198. Силин, П. М. Технология сахара. М. 1967. - 164 с.

199. Singal, S. А., / Hazan S. J., Sydensiricker V. P. // J. Biol. Chem., 200, 867, 1953.

200. Симон, E. И. Методика определения баланса азота у сельскохозяйственных животных. М., 1956.

201. Славинская, Г.В., / Чикин Г.А. // Использование асимтотического уравнения динамики сорбции для прогнозирования ионообменных процессов. Межвузовский сборник научных трудов. Воронеж. Изд-во ВГУ, 1998 г., вып. 23, с. 94-102.

202. Смирнов, А. Н. Влияние добавок синтетических аминокислот на рост, развитие и биологическую ценность протеина рационов телят до 6-месячного возраста. Автореф. канд. дисс. Л., Пушкино.

203. Смирнов, А. Н. В сб. «Кормление с. х. животных», стр. 147, 1969.

204. Soldevila, М., / Meade R. J. // Anim. Sci., 22, 2, 1964.

205. Sockland, W. L. J. Anim. Sci. 32, N 2, 1971.

206. Степурин, Г. Ф. Труды Кишиневского с.-х. ин-та им. М. В. Фрунзе, 58. Кишинев. 1969.

207. Степурин, Г. Ф. В сб. Труды Кишиневского с. х. ин-та. Кишинев, 58, 1969.

208. Степурин, Г. Ф., / Ренсевич А. А. // В сб. «Материалы 7-й Всес. конф. по физиологическим и биохимическим основам повышения продуктивности с. х. животных». Боровск, 1970.

209. Степчук, К. А., / Ракитин В. Ю., Головкина Г. П. // Спец. отд. научно-техн. информации Мнкробиопрома, М., 1969.

210. Ткачев, И. Ф., / Перетщкая И. П., Пелипенко В. Г., Григорова. В. В // сб. «Получение и применение аминокислот». Рига, 1970. С.57.

211. Ткачев, И. Ф., / Григоров В. В., Чиков А. Е. // Животноводство, 4, 1972, С. 49.

212. Ткачев, И. Ф., / Перетицкая Н. П., Пемшенко В. Г., Григоров В. В.// Материалы по вопросам микробиологического получения и применения аминокислот. Рига, «Зинатне», 1968.

213. Ткачев, И. Ф. В сб. «Кормление с. х. животных», вып. 7. JL, 1966.

214. Томмэ, М. Ф. В сб. «Синтетические азотистые препараты в животноводстве». М., «Колос», 1967.

215. Томмэ, М. Ф. В сб. «Аминокислотное питание свиней и птицы». М., Сельхозгиз, 1963.

216. Томмэ, М. Ф., / Крохина В. А. В // сб. «Вопросы технологии производства свинины», вып. 14. Дубровицы, 1969.

217. Томмэ, М. Ф., / Модянов А. В. // Заменители кормового протеина. Изд-во сельхоз. лит. журн. и плак., М., 1963.

218. Томмэ, М. Ф. В сб. «Аминокислотное питание свиней и птицы». М., Сельхозиз, 1963.

219. Томмэ, М. Ф., / Филипович Э. Г., Птак И. // Аминокислоты в животноводстве. Материалы междунар. симпозиума. Калуга, 1971.

220. Томмэ, М. Ф„ / Мошкутелло И. И. // Докл. ВАСХНИЛ, № 8, 1970.

221. Томмэ, М. Ф., / Лебедев А. А. // Докл. ВАСХНИЛ, № 6, 1966.

222. Their, Е., Н. Brune. Z. Tierphysiol, Tierernar und Futtermiitelkunde, 2, 25, 1969.

223. Фердман, Д. Л. Биохимия. К.: Высшая школа, 1988.432 с.

224. Филиппович, Э. Г., / Птак И. Р. // Животноводство, № 3, 1972.

225. Frobish, L. Т., Speer V. S., Hays V. W. J. Anim. Sci., 25, 729, 1966. Hawlon J. D„ Meade, R. J. J. Anim. Sci., 32, 88, 197

226. Хаджинов, M. И., / Рядчиков В. Г. // Животноводство, 2, 1972, 51.

227. Хайс, И.Н., / Мацекк К. // Хроматография на бумаге. М., 1962,407 с.

228. Chalmers, М. Annal. Nutr. Jalimention, 15, 6, 1961.

229. Handlin, D.J. Animal. Sci, II, 767, 1952.

230. Харпер, А. Е., / Кумта Ю. С. // В кн. «Новое в кормлении сельскохозяйственных животных». М., 1962.

231. Харпер, А., / Мюленаре X. // Дж. Труды V Междунар. биохим. конгресса, симпозиум VIII. М., 1962.

232. Harper, А. Е., Benevenga N. J., Wohlhueter R. M. J. Physiol. Rev., 50, N 3, 1970.

233. Hesby, J. H., Conrad J. H., Plumlee M. P., Martin T. G. J. Anim. Sci., 31, 474. 1970.

234. Holden, P. J., Lucas E. W., Speer V. C, Hays V. W. J. Anim. Sci., 27, 1587, 1968.

235. Homb, T. Meld Norges Landbruksh'Ogskole, 42, 1963.

236. Челапа, У. Сельское хозяйство за рубежом, серия животноводство, № I, 1969. С 88.

237. Чикин, Г. А., Шамрицкая И. П., Селеменев В. Ф. Ионообменные технологические процессы в пищевой промышленности II Прикладная хроматография: Сб. М.: Наука, 1984. С. 141-156.

238. Чикин ,Г.А., / Мягкой О.Н. // Ионнообменные методы очистки вещества. Воронеж. Изд-во ВГУ, 1984, 371 с.

239. Шапошник, В. А., / Селеменев В. Ф. // Терентьева Н. П. Барьерный эффект при электромиграции пролина и валина через ионообменные мембраны при электродиализе/УЖурнал прикладной химии. 1988. Т. 61. №5. С. 1185-1187.

240. Шапошник, В. А., / Селеменев В. Ф. // Полянская-Хельдт Н. Н. Разделение валина, лизина и глутаминовой кислоты электродиализом с ионообменными мембранами // Журнал прикладной химии. 1990. Т. 63. № 1.С. 206-209.

241. Шманенков, Н. А., / Кошаров А. Н., Дьячкова Г. С. // Биологические основы рационального аминокислотного питания сельскохозяйственных животных. ВИНИТИ, М., 1967. С. 184-170.

242. Шманенков, Н. А. В сб. «Материалы 7-й Всес. коиф. пофизиологическим и биохимическим основам повышения продуктивности с.-х. животных». Боровск, 1970.С. 55-78.

243. Шманенков, Н. А. Свиноводство, № 7, 1969.

244. Щеглов, В. В., / Фицев А. И. // Аминокислотное питание свиней. Минск, «Урожай», 1966.

245. Щеглов, В. В. Белковое кормление свиней. Минск, «Урожай», 1965.

246. Эглите, М., / Израилиет JL, Раминь Е., Риба Я. // Известия АН Латв ССР 10 1972, С. 30.

247. Jensen, D. R. J. Nutr., 76, 2, 2, 1962.