Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В УСЛОВИЯХ УЗБЕКИСТАНА

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В УСЛОВИЯХ УЗБЕКИСТАНА"



ВСЕСОЮЗНЫЙ СРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА (ВИЖ)

На правах рукописи УДК 612.646.02

Алмарданов Абдухалкк

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В_ УСЛОВИЯХ УЗБЕКИСТАНА

03.00.13 - Физиология человека в животных

А ВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени к е.;икцата биологических наук

п. Дубровицы Московской области 1990

Работа эыполнэна в лаборатории т^ансплакгацкк эмбрионов крупного рогетого окота "Зкгога" Респобликанекого селекционного центра по скотоводству Уз.РКЯО по плевел по ь'у ::,ол;' з встнозодсгве и з центра по траасядэнтэцаи экорио;:ов сельскохозяйственных ггивотнкх ВНИИ зивотнсводстзэ.

Научный руководитель - доктор■ баологичзсяи:с наук,

Официальные оппоненты: докгор йкологзческих нзук, профзссср Ю-Д-КЛйНСКЯЯ; кандидат баолдг::чзс£-.й:с каук С.З*СОЗЕТКИН.

Зеду^ее учреждение: Белорусский научнс-исследозательс-янЗ институт навотнсаодства.

Зздя-га диссергацки состоится " Р " 155 / г»

в " {С1 " час. на заседании с лакали з;; роза иного Совета Д.020.16.02. по защите диссертации на соискание ученой степени доктора наук при Всесоюзном научно-исследозательско!.' институте яивотнозодстла. - ■

Адрес института: 1^2012, Московская область, Подольский р-н, пос. ДубрОЗИдЫ,

С диссертацией хсхно ознакомиться э библиотека института.

профессор Н.И.С2НР233

Ученкй секретарь специализированного Совзтз, гчядадат Сиало'.- .эг^' наук

Л.и^Гйй

I. ОБЩАЯ ШШЗРИСТНСА РАБОТЫ

1.1. Актуальность теш;. В ссноьшх направлении! эксг.о^ьческого и сопельного развития СССР ?.ь 1ЭЬь-1Э9С гг. к яа период до 2000 года подчеркнута ьеейгодакосгь на ос^озе укреплении корнов о Саги,использования достижения геаеткки и селекднк, яозкх СиогехаологЕчас-кпх направлений качественного улучшено стада, существънного поэкшевяя прсдукгпь.чости :5>яютекх и обеспечения усидчивого роста производства продуктов :;;:вотноэодства.

5 результате до синений з озласги искусственного осеменения жыоГяОэсдг голу чмк ко^яоб средство созер^еногюгзнхя >:;: - . во.кых, гугеы кспользоганйя се^ен/ й:коб с эксок^и генетические потенциалом. 3 процессе соверийнсгэоьанг.Е стад значительно возросла рель производителей, а влияние ¡.<аток осталось неаиачй-тельккк кз-за малого числа производимого кш; поточена. Беоло-гичеекке'возможности воспроизводства у у б ток велики. Вичники ногорс;:х£нша- гелс^ек ссдеру.оТ евкие 75 гкс. потенциальных яйцеклеток. Дле.более полного использовано этого генетического потенциала прозеде а; проходягея исследования, направленные на реапа&ацак вооаоы:оста использований максимального числа зародышей от ввдаккцихся лагерей путей применения метода трансплантации реп ню: вибрионов.

¡¡прозой опыт показывает, что трансплантация гкбрковоз го-жег ускорить селекд\;оннь:£ прогресс з колочяок скотоводстве а 6-? раз по сравнений с обкчнт: методаки разведения к позволит получать от одно:: яорсвы-донэрв до 1С телят в год, а от отдель-

ных жиботквх до 100. " ЦЕНТРАЛЬНАЯ

^ ЛУЧНАЯ БИБЛИОТЕКА оси. сельскохоз академии

и,: №язт

Траясплэнгадая оол^ ин^ьс^;^

азотных с высоко;! гензткчгско:! ^нностьз ;; жвогнкх гэ-.ютаслвЕлых сокращай гаиарац'.'.окны;'; цнсгрвсл к дач?

возмагность более строгой се леку и;: магерзй £ыков.

Одним из главных факторов, огрзнкчявакциж использование метода' траяспяаагашш эмбрионов, яаляетсг зксоязя варкзо'ель-носгь а непредсказуемость реакции йвчееяэв кз гонздотропин. Известные способа шзыванкк кшэкесгаенно^ овуяацвя не даю? эоэшжаости получать супзровуляцки у одной трети короз,э индуцирование высокой стелена кнопке сгвеиноЯ овулкдкм не обеспечивает досгаточного выхода нормальных эмбрионов.

Для повыкания эффективности внедрении нетодз традсплан-тацзи эмбрионов в практику животноводс-га з больше теоретическое я прзкткчесгсое значение ъивет выяснение роли различных §зкторэв, влияавдх нз уровень суперовуляции, качество эмбрионов и их праяиЕЛяеиосЕЬ после еересадки» Дальнейазе усовершенствование гэхнологиа трансплантации эмбрионов з слецк^к-чзских пр нродно-клинэтичзскшс условиях Узбекистана г применение ого э практике зивотноводствз является-актуальней задачей. '-' о ; '

1.2. Цель а задачи исследований

-•••ДзЛд исследований заключается в освоении л усовераекст-вовании гетодэ гормонального вы ей а кк л сулзровуляааи кехи-рургичегкоЯ пересадки зьбр-лоноа, изучения факторов, вдкяявдх на качество и дракивляемоотб-экбриоеов в аеетких природко-клииатичезккх услоееях* "

В задача исследований входило:

- ocBOr.i-L и jCQpepaeHcriOBCib .vero* горпо.челъкого гиггвс-нкЕ и кеор^ргичбСгх;: и-р&сгдкк г кленов г гра-."Tiri-iiic.'X уело5иях;

-'изучить кгчестлП эмбрионoí ъ зээксеностй от типа гск&-до?роп;;ка, города, Еоьрзспа ¿опора к сезона годе;

- определкгь уровень прнкиьляя.'ости гыСрконов при hгхи-pvrrt:»üCKo:-i п&реседке: в зарксккос;;: от стадий разЕигкя и качества

1.5. Н:-;:ч!;=:г teC&Tî сосгскг з о пред елецки '

Tirshooïft npt¡.nópt-;ci лр>; с;пер02улЕ;д::в s спе-

цк^чвек;::-: л ¿ :: р сд ко-к л i; и з ik ч е с к х услоъкех УзбекгстЕка,изучение уоз, мкяээдх ае качество э1:бр::оиов прк

Э jСЛС iíIíiX r^Spí;»

1.4. гкечк^оегь к,'.ort: ггкпкчаегсЕ в vctbtp-ie:!.0!.sci£ü2ü :: г::е/;ре;-:ш: r í x:; о л ст i'i: транспльшЕч":! эг5р:?о*:ов

ё сухо ГС жаркого климата Узбекистана, о j: рей & л ski::;

s^yâL'TiTJîKocTB лерес£~кн с в 6. s. ь по л j ч е н hüx и е £ ь; о рда.е нн о-с ; т i яа-

1.5. An:.-ijf3"i:f. '-'сбетг;. Осноьнье лолонеккя гиссерта^да • SC.TS^SHK ьэ:

- екегедшх кскберен^кях лаборатории Sm-ori::: рзг'.:ксге-sl:-; i: 1раксплалтэ^;;;: l-l:Cp;»ühcb с.-х. ¿л^откь'х, Уг.К&Х (IS'6?-I5cS rr.)í

- н í з чн о-и с ? оч t с гокф-ерен-ккх: 'Центра гргкеглгнтад;:!: зг'.:-;-ойое с.-х. sksúíhw: Bi-Xs (19оЗ-19?0 гг.);

- ;-ísv4íiC-:.4-TC.",;;vsCKsr. конференции аеялрангез 1.:оло-Г." Ъ'Л-И, 19SÛ г.

L.6. Объеи работы. Диссертация изложена на страницах '¡¡а^нолясного текста, содержат 30 таблиц, 21 рксуаок, состоит ма введения, обзора литературы, экопзргаеитзльксЗ части,обсуждения, выводов и предложений, списка литературы, вовчащен. 175 источников, яз икх 82 икостран;-их. ' -

2. НАТШМ И МЕТОДЫ ¡ЮСЛЗДОВАШЙ

Работа выполаеаа в научно-производственной лаборатории до трансплантации эибрконов "Зигота" Республиканского селекционного центра по скотоводству Узбекского научио-провзводст-зенного объединения по плеыенноиу делу в хквотновэдстге Гос-агропрона УзССР, племсовхозе-техшжуце "Чяяаз", а колхозеТо-литогдел" Ташкентской области, в совхозе "Малек" Скрдарванс-кой области,, в совхозе им. Будгакого Сурхандарькясгой области в опытных хозяйствах ВЖа "Щалсэо51 к "Дуброзицк" Московской области. ,.'. v: ■■'.'->

3 опытах (1987-19ЭО гг.) было использовано 150 плег^енних коров с продуктизностьв от 5 до 12 тысяч килограмм молока а 190 телок реципиентов в основном чарно-пестроЗ породы.

Для .гормонального вызывания суперовуляции у короэ-доно-роз использовали стандартный препарат СЕК (фояхигок, йирка Ид тервет, Голландия); СЕК (ЧССР); JCT-n (CEA) к фоллитропкн . (СССР); СКеыа гормональных обработок Г, 2 и 3.

Осеменение коров-доаоров проводили заиороженно-оттаякной сязриой элитных быков трехкратно дзойкой дозой спермы, рзкто-цервикальныи способом. - V.-. "

Извлечение эмбрионов осуществляла с ломоцьэ закрытой и открытой састекы с использованием катетеров "НсПугсдт" (ЗРГ).

ЙСйСК, MOJj^O.IOrVMüCíiTj OU.'iHKj* ¡'ЛЧ-jCTbS Ы'бр'.'.ОКОВ ВКПОЛНЕЛИ по

методике я шкзле Biíа. Пбреездку ^йрконоз осуществляли прзбо-ра;;д ";ííik;;tj5"' (víT) t: y:¡p;.:i: "£3" (Фракцкя'!. Пр^гивляеиость х<брко;;сз определял;', рехтально спустя 3 кесяца после пересадки.

з^уг.онн з солог.йаках с кргапроте.-лораа глицерин з 1,4- л а "регрг.'.'гко!: 3í;:op2:-K2S геле УОП-1 :: 2, (ла.Г'ЬКО^), £"-!, c.'-Z. ^сьо;! гггг^ркгл еСраСг-тьззли 6еог.х?}.е:чзс::::1: нетолст.

3 к^чло-п^с^^одсгье;:^ лаЗйр&тогл:;: тргн сслангацЕИ горкомов "3;;го?2" в гг-чзстье докороз з::5гковоэ кс;;о«ьгевелЕ 30 кзрОБ з 0Cn0;;¡0'. чз^о-леогге:'] с продуктивксстав ст 5

до ? ткс. кг молока з гезрзеге ст 3 до 1С лег.

3 пЛ|3(.'Ссзхоз&-тезсн:;К1'^& "Чкяэз", колхозе "Политотдел"; созхозз "lisлек" кероь-донероз огб;:рзл;: кз чкела гкбракозеннкх до зоспрзиззодсгзу ;*з молочных стад.

3 эксп«р;:ге.чтельЕ01: хозяйстве "Щапове" я oül:tkol' хозяйство бровкцк" з кгчеегге доноров З!,'.бр;:оно2 нсполъаовелк (20 л 30, соотзегсгеенно) кероз г cckosbwí лакхкрувзвх.

Рецшт;;ектоз для нашего донора отбирали з тех не хозяйствах, «з числа тс-л с к ;i коров не предег азлядах пяекеккой ценности.

телок

Е кзчеехэе рецкг.пептез ясполъзоъелк в ьозрзсте 16-18 месяцев.

3. ВУЛЬГАТЫ СОБСТЗЗННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Эйектявность примененкя ргзлкчкп: доз гонадогровшж препаратов прз знзнвипк; е^лброзуляциа у короз-дснороэ

С цель» изучения влияния различных типов и доз гокадотроп-ных препаратов кз jposeHb сулеровуляйии и качество эмбрионов у

корсв-доноров при разных схемах обработка, использовала стандарт^! препарат СШ (фоллягоа, фврма Интернет) и С2Н (ЧСС?); 5СГ-С (СИ.); ^сииштропий (СССР) в сочетаний с простатландина-ш.

Стены гормональных обработок для вызывания суперовуляпии и технология подготовка к нехар^ргическому нззлбченнп эмбрионов

Схема I

День : полового: цикла ; Название препарата и технологического пропесса V Доза

10-12 ГС^К, Н.Е. 3030-4300

12-14 Простагландзн, :.'кг-:аг 523-30

14-15 Охота а осеменение

21-23 Нехирургяческое извлечение экбря оноз Схема 2 (доза 32, 43 и 48)

13-12 5СГ-1Г (ыг) 12 7 17,4

II ФСГ-п (да) • 10 13 13

12 ФСГ-п (кг) 6 10 10,8

Простагландин, мкг-гя1 500-33

13 ФСГ-В (мг) 4 7 6,3

14 ФСГ-п (мг)' - 3

14-15 -Охота а осеманенае

21-23 Нехирургическое извлечение экбрионов

. Схема 3 (доза 960, 1123, 1230, 2100 ЕЕ)

10-12 Заллдтропин 360 283 423 600

II 300 280 360 540.

12 180 280 240 480

Простагландян (Йкг-;лг) 50Э-ЗЭ

13 ФОЛЛЯТрОЕЯН 120 280 180 480

14-15 Окота я осеменение

21-23 Нахярургическое извлечение эибрюиов

Установлено, что применение фолл&гояа к препарата СЕК (ЧССР) в дозе 4000 Ii.Б, повышало число эвуляциЙ на донора и выход нормальных эмбрионов, по сравЕвнкв с дозой 3000 U.E. препарата (табл. I).

Таблица X

Уровень суперовуляции и качество эмбрионов у коров-доноров при использовании препарата CEC

Гонадотролин

Показатели : СЕК (ЧССР * * * 4 Фоллигон

: Доза (Й.Е.)

3000 . : * 4000 : » 3000 4000

Обработано коров 6 5 5 Ъ

Реагировало суперовуляций (п-%) 6 5 5 5

Число овуляций на донора 8,7±1,?6 9»4±1,50х 5,6±р,85 К.Е^.О?1

Лимит 4-14 6-13 3-7 2-21

Коэффициент изменчивости, % 45,4 31,9 30,5 63,7

Волокительных доноров по извлечению эибрио нов,с—^ 5-83,3 5-100,0 4-80,0 4-80,0

Число зародышей

ва донора 2»2±0,43 З.ед.ЗО33: 1,0. б^З.З!*31

в т.ч. нормальных I,0^0,21 3,211,50** 0,8 4,6±3,651ХХ

Р I 0,01; и> Р £ 0,01; 0,05.

Увеличение дозы СЕК до 4000 Е.Б. способствовало повышению числа овуляций до 12,8, нормальных эмбрионов до 4,6 на донора. Выход нормальных эмбрионов был з пользу группы коров, обработанных препаратом фодлагон (4,6 против 3,2).

Во второе серии опытов проведено определение эффективности применения для вызывания пуперовуляций у коров, различных доз препарата ФСГ производства СЗЦ и СССР.

Препарат ФСГ (СОЛ) использовали в дозе 32, 40 и 48 мг. 09-

рабэтыэалк коров по 4-х и 5-ти дневной схе^е с 9-го и с П-го дня астрального цикла з разных ежедневных дозах препаратов.

Результаты гормонального вызывания суперовуляции у короз-доноров препаратом ФСГ-г, (США) приведены г таблице 2.

Таблица 2

Уровень суперовуляции и качество эмбрионов у коров, обработанных гипоф!]зарнкм препаратом ФСГ-п

• Показатели ; Доза, аг

» • 32 ; : 40 : > • 48

Обработано короз 18 16 10

Реагировало суперовуляций 17-54,4 16-100,0 9-90,0

Число овуляций нэ донора 5,8*0,90 11,3*1,35* 8,0+0,59х

Лимит 2-17 4-22 5-10

Коэффициент изменчивости 42,6 46,4 21,0

Положительных доноров по извлечения эмбрионов 16-94,1 14-87,5 7-77,8

Число зародышей на донора 5,9^,98 * 10,2*1,03 3,1*1,21

в т.ч. нормальных- 3,9±0,68 6,6*1,15 3,1+1,21

Лиаат 1-14 3-17 1т9

Коэффициент изменчивости^) 64,2 39,5 95,5

Р / 0,01.

Данные таблицы 2 показывав?, что доза фолл ику ло с тимулирую-щего гормона ФСГ-п (США) влияет на уровень суг.еровуляции и качество-эмбрионов. Гак в группе коров, обработанных ФСГ в дсэе 40 кг супероауляцкей реагировала в-в коровы или на 5,6 и 10,0% больше, чем в других группах коров. Аналогичные результаты были получены в числе овуляций (11,3 против 9,8 и 8,0) и нормальных эмбрионов (6*6 против 3,9 и 3,1) на донора.

На уровень суперовуляции и качество эмбрионов окззало вли-

янле день обработки от начала охоты (табл. 3).

Таблица 3

Уровень суперовуляцки качество эибрионов в зависимости от дня обработки

Показатели « » ФСГ-п (США)

; 9-и * : ю-й : II-fi

Обработано коров б 16 20 Реагировало супероэуляцлей

(п-£) 6-100,0 16-100,0 19-95,0

Чссяо овуляций на донора 10,712,12 Э,4д1,50 10,0+0,83

Лимит 5-17 2-22 4-17

Коэффициент изменчивости, %

44,3 62,0 35,2

Положительных доноров по извлечению эибрконов

6-100,0 12-75,0 18-94,7

Число зародышей не до-

кора 8,2±2,47х 7,9+1,38 6,0+0,87х

в т.ч. нереальных экб- v т

рконов 4,2il,94x 6,Iii,38 4,0+0,53х

Лимит . 3-17 I-I6 I-I4

Коэффициент изменчивости, % 67,4 58,2 59,5

Р L 0.05.

Наилучв::)! зрененеи качала обработки препаратами ССГ-п является 9-10 день эстрзльного цикла. Более позднее введение препарата сникало число зародышей на донора на 1% и нормальных эмбрионов аа 34£ (? ¿ 0,05).

В исследованиях была определена эффективность использования фоллвтропина (СССР) в разных дозах (табл. 4).

Данные таблица 4 показывают, что $оллитропш в дозе 960,

1120,1200 И*Е. обеспечивал супаровуледию у 100£ коров. Так среднее число овуляций к зародыше!! на донора, в т.ч. нормальных эмбрионов было больше при обработке ФСГ в дозе 960 и X20Q И.Е. Эти дозе вероятна мохно считать оптимальными, при которых можно получать до 5,4 нормальных эмбрионов на донора.

Таблица 4

Уровень суперовуляции и качество эибряоноз при использовании разных доз фоллитропинэ

Ч ' ' " ■ 1 1 '-■■■■

: Доза U.E.

Показатели

%о : иго : I2C0 : гюо

Обработано коров 24 12 22 7

Реагировало суперовуляцией 24 12 22 6-65,7^

Число овуляций V

на донора 13,611,39х б,4*1,92х 13,4±С,91Х 10,5+1,76

Лимит 3-29 1-22 4-20 5-15

Коэффициент изменчивости,

% 49,0 ЮО^О ' 31,3 3?,б

Пояояияеяышх

доноров по ЙЗ-

глочвнкю эиб-

рионов (п-55) 23-95,8 11-91,7 • 20-90,1 6-100,0

Получено зародышей на 'лоно- „ Р9 10,аде,21х 5,111,20 П,9±2,03х б,3±1,59 в.т.ч. нормальных 5,4^0,88 2,5£р,50 5,2*0,68 5,3±1,24

Ликит 1-23 1-13 >34 3-12

Коэффициент И9- ■■.-■-■■..

моачивоив, % 57,0 74,3 74,3 56,5

х> Р I 0,05.

Результаты сравнительною иенктания разных гонадотропи-нов доказали, что фоялктропин (ФСГ) отечественного производстве по своему действии не уступает другим гонадотропикам и' за-

pj'66;:-:¡iOí.íj £»£ЛОгу (табл. 5).

Таблица 5

Уровень супзроЕул;-:ш:й к качесгьо ог.:брпонов у норов-до но ров, ойрабоганкьх развита гонад от ропкнаии

: Гокадотропвн

: GHÍ ■ ÍCT

{ (Чсс?) : Фоллкгсн : (cea; : (ссср)

Обработ&но коров II 10 44 65

Реагировало су-перезуляцкеЛ

(п-*) II- ЮС,О 10-100,0 42-55,4 63-96,9

Чксло оэулща:-! v

на донора 9,0+0,59х 9,2+1,24х 5,9*0,71*12,С+О,77х

4-14 5-21 2-22 1-29

Коэ^кциенг ;;з-

кенчгЕОсгп {>.>) 55,0 63,4 46,2 49,8

Положительных доноров го извлечен:}» вибрионов (n-íO 10-Ю,9 8-80,0 37-88,1 60-95,2 Еолучеко гародк- „ <

iae;i в а доноса 2,9+С,76х 4,7+2,64х 7,2¿0,62XX9,4¿D,92XX

в т.ч. нормальных 2,1±С,76 2,2+1,65 4,B¿0,58 4,8±0,45

I-S I-2I I-I7 1-34

кз—

кевчивосги 7о,3 149,0 52,0 75,6

Р I 0,05; Р i 0,01.

Так, по числу реагирующих животных суперовуляцкеЯ разница была несущественной. Число овуляцаЗ на донора было несколько больпе з группах коров, обрабоган-шх препараток ¿оллитролия, при коэффициенте ;:з;.;енчиЕосги 49,и с ФСГ (США) - 46,2$, что свидетельствует о возгонноета получения более стабильных результатов г.ри обработке препаратом ФСГ-п производства CEA и фоллитропакон (СССР).

- 14 -

Аналогичные результаты были получены а в числе аорг^адь-.чых эмбрионов. Из приведенных данных монно зэклич:;ть,что препараты ФСГ разных £ирм ионно использовать с равной доле"; ус-хгехз при гормональном вызывания суперовуляции у короэ-доноров,

3 условиях каркого язаиатэ Узбекистана изучав;; в ли к н;: о сезона года на уровень суперовуляцнк при использовании разных гонадотропинов. Из литературных данных известно, ч?о набл?дпз-атся определенная зависимость индекса множественно!: овулйця;: от сезона года.

Анализ экспериментальных данных вызывания суперовуляцаи показал, что при обработке доноров з течение всех сезонов пропек реагирувдкх животных был одинаковый (табл. б), но овуляций на донора боо больае осеньэ (13,8 против 12,9; 12,7; 12,3) при коэффициенте изменчивости детом и згшой (32,7 и 37,8) и веской и осенью (52,1 и 44,

Из данных таблицы б видно, что в усдозккх нзркого климата уровень суйеровуляздк не зависит от сезэка года. Нормальных эмбрионов было больше осень» и летом (6,4-7,3).

Сравнительное изучение влияния гонадотропинов на уровень супзрозуляции в разных зонах страны показало, чго в условиях Узбекистана ыокко получить обнадеживающие результата (та<?я,7).

Из таблицы 7 видно, что в условиях наркого климата на го-надотропин реагировали супсроэуляцией все обработанное коровы и получено достаточное число овуляций а нормальных эибриоаов на донора, по сравнение с зоной Московской области (11,4 против 9,7; 5,3 и 4,6) соответственно.

Таблице б

суп^слулкцн;: и'к&честю экСрксяов в зарасвкосуи о? сасояз гола

Покэ^атсл:: Сентябрь- : Декабрь-

: август ноябрь : февраль

Обработано ко- 10 16

рОй-ДСпСуОЗ 23 8

Ре а г;; р о ь э л о с у-

порозултцав* 23 8 1С 16

Число Н2 ДОКО;.:.: 12,9+1,43х 12,?+1,Ь5х 13,8+2,05х 12,3±1,20х

5-29 4-Х 6 4-23 4-20

Ког^цпекг из-

¡'енчпвостл,;; 52,1 44,6 37,8

ПОЛЗ^ГСЛЬЙК*

доноров по ;:з-

влсчеа::.':

РГ.ОЙО? (г.-.) 2С-86,9 7-67,5 10-100,0 15-63,9

Чг.слс гзредк-

ой:: !-я. донора 10,8+1,83 10,3+2,41 П, 1+2,05 10,0+2,0

в т.ч. нормаль- 5,2!С,Ь5х

¡гих 4,3+0,73 7,3+2,11 6,411,08х

1-31 3-19 4-23 1-27

Коэффициент аз-

^нч^остк, ;; 7-.0 50,3 55,5 74,9

Дегенэрирован-

2,6+1,52 1,3+0,6 1,2+0,22 0,5

Н50ПЛОДОТЗОС6Й-

ных Е.щгклз:о1: 7,7+1,63 1,7+0,45 3,5+2,27 4,3*2,0

Таблица ?

Уровень супаровулЕции и качество-гибркоков в зависимости

от зоны

Искатели

ОШС "[-слово": Хозяйства "Дубровицы" ¡Узбекистана

Обработано короз-допогов Реагировало супероэуляцие?; (п->-) Число овуляца* ка донора Л;«л;т

Ксэ^1;ц':енг изменчивости, £ Положительных доносов :;о извлечению эмбрионов Число защ^ие* на донора В т.ч, нбр^альньх Лимит

Коэ-4>£иц;-:ен? йз:;екчиьостн, £ ДегекерироваЕпЬХ Неоплсдотвореня^о яйцеклетки

38 33-86.8

4?~0

31-93,9 ?,3+0,?0 6+0,'66 1=1? 53,2

0.8+0,13

1,£70,48

95

95-100,0 11,4^

54,5

77-87,0 8,9±0,$8 5 3®, 38

76,7 1,210,61

- к -

В экономической отношении более выгодно использовать коров в качество доноров несколько раз в год. НзЗлэдатхя незначительные различия в уровне суперовуляции при повторных гормональных обработках. У некоторых коров5 не реагировавших на первую гормональнуа обработку, при повторных обработка:: получают хорошие результаты суперовуляций.

В условиях научно-проиэводствзаноН лаборатории "Зг.готз" ш изучали влияние повторных гориональкых обработок на уровень суперовуляции и качество эмбрионов.

По числу овуляций и выходу нормальных 3-Мб?!'ОНОВ у коров при многократной обработке наблюдается высокая индивидуальная изменчивость. Многократная обработка короз-донороэ на влияла на уровень супзровуляций и качество эмбрионов. При 7 а 6-крэт ной обработка получено в средк^* II,^ и 13,5 овулкцЕй на обра ботку, а при (икраткой обработке 12,2 а 15,7 овуляций. 0п:ече ны небольшие различая в числе нормальных гкбршиоз (4,8; 5,1; 5,5 и 7,2).

При однократной обработке коров-докороя в условиях Узбекистана было получено II,4 овуляций л 8,9 за родней, в т.ч. 5,3 нормальных на донорз. Показатели многократной обработка не уступали однократной. Наин установлено, что для многократного использования необходимо отбирать тех коров, от которых в год при 4-5-кратной обработке получено в среднем по 5,05,5 нормальных эмбрионов на обработку.

3.2. С;шхр(ш135ция охоты у короэ-донсров и телок-ре цкпвеатоэ

Для синхронизации охотк у телок-рецкпнеитов был исполь-эоэзк простзгдавдЕН "остроуэя" э дозе 500 «кг в сочетании с препаратов СЬК (г;олл;;гон). Зводвла его БаухрЕвниечко через 42 часов после ¡¡ньекцик ¿оллигика (320 КЗ.) с одновременна введением триватакина (табл. 8),

Таблице В

' Сккхрспкьзцак гяотк у телок при однократной обработка прсетзглекд^о;.: э сочетании с СИ трмвктакикоы

Показатели

Группы

Лростаглбздин С1.Н

Прост8ГЛ8ВДИЯ

! к тризатаку н однократно

л : * п * • 4 ■ %

Обработано г.квот-ккх 22 _ 71 _

Проявили псизнаки охоты 19 66,4 42 59,1

в т.ч. черег 45 часов 15 78,9 26 61,9

через 72 чеса 3 15,3 13 О 4/

через 36 часов I 5.3 3 7,2

Не пришли в охоту 3 13,6 2Э 40,9

Доннке таблицы Б показывают, что через 48 часов после инъекции простаглзндниа в сочетании с СЕК к трквитеиикои проявило признаки полноценной охоты 75,9*; телок и лишь незначительное число Ш'всткьл присдо в охоту через 72 и 26 часов (15,8 и 5»3#) соответственно. При однократной обработке прос-таглавдиноы из 71 гелю; пркзлп з охоту только 59,1/3 ели пеньте на 27,3^, чек л группа, обработанных вростагленданов в сочетании с $.К.

- 18 -

Исходя из приведенных данных можно заключить, что наиболее приемлемая технология подготовки реципиентов для пересадки язляеюя однократная обработка простаглаидинов в сочетании о (Ж-и витаминами.

3.3. Искусственное осеменение короэ-донороз при суперовуляциа

Изучали влияние нратностк осеменения коров-доноров на оплодотворяемость яйцеклеток и выход эмбрионов не донора.

Процент оплодотворяемостк яйцеклеток был выше при двукратном осеменении и соответственно больше получено эмбрионов на донора (табл. 9).

Таблица 9

Оплодотворяемость яйцеклеток и выход эмбрионов у коров-доноров при двух- и трехкратной

осеменении

Показатели : • ' Осеменение

; дзукратное : трехкратное

Число коров-доноров 31 38

Получено,зародышей, всего 206 299

на одного донора б, 6+0,89х 7,8*1,15х

3,1.4. эмбрионов, всего 166 173

на одного донора 5,3*0.71 4,5*0,61

Йесплодотворенных яйцекле-

ток:......................

зсего 40 126

на одного донора 1,3*0.27 3,3*1,15

Процент оплодотворяеиостк 80,6 57,8

Р / 0,05.

В исследовачиях было изучено влияние типа препарата и дозы его аа оплодотворяемость кйцзклеток у коров-доноров. —

- 19 -

Установлено, что тип препарата к доза его не оказала существенного влияния на этот -показатель.

з исследованиях сделан анализ влияния сезона года на ол-лодог£орне;.;осгь яйцеклеток у коров-доноров.

Установлено, что оплодотворшлость яйцеклеток била висе летон (83,че;.- в другие сегонн года (табл. 10). Еыла подучена лороаак оплодотзоряб^ос'^ь яйцеклеток осенью (68,5%) и весной (65,7;:). выяснено, что-^аркиЗ клвкат (лете::) не влияет отрицательно на оп.юдотзсрнекость яйцеклеток. Низкую оплодог-воряемость я/цеклегок , вероятно, !,:омко осъйснить резким колебание» температура и ухудшение!/: состава рациона, чем в другие сезсж: года.

Таблица 10

Оплодотворяемоеть яйцеклеток у коров-доноров в зависимости от сезона года

Показатели : Декабрь-уезрзль : :,!зрт-1.;аз « : лзкь-: август :Сентябрь-; ноябрь

Число коров-доноров 15 20 ? 20

Получено ззро-дыыей, всего 151 216 72 III '

в т.ч. нормальных эмбрионов 86 142 60 76 ■

Неоплодотворен-них яйцеклеток 65 74 12 ■ 35

Процент оплодотворяемом и 56,9 65,7 83,3 68,5

3.4. Результаты кехирургкческого извлечения ^брконов у коров-доноров

¿"зале чек не э;:бр;юноз проводил!; открытой к закрытой с«с-текой. При закрытой систеке на извлечение знОрлонов из одного рога иатйи затрачивалось около 5 Ускорение обзеле-

- 20 -

чкаалось зэ счет увеличения разового объема- пробной среды и легким открытием заявка яри введении а выведении прошеной ка-дксстк.

Преимущесхво закрытой система состоит в том, что жидкость поступает в рог самотеком без излишнего давления, при этом пол-носи» исключается травмирование слизистой эндометрии за счет переавпрякзнвя стенки рога матки* Сравнительные результаты нехирург яческого извлечения эмбрионов при открытой и закрытой системах у коров с множественной овуляцией приведены в таблице II.

Таблица II

Эффективность промивания рогов матки коров-докоров в зависимости от способа извлечения

Показатели

Система

я открктая : закрытая.

Оперировано коров-доноров 30 30

Положительных доноров по извлечению эмбрионов (л-5&) 27-90,0 30-100,0

Средний объем введенной среды на I рог -хатки (мл) " 451,6 449,8

Средний сбгьеы полученной среды на I рог матки (мл) 420,6 434,0

Процент о; объемз введенной среды 93,1 96,4

Получено зародышей на донора 4,410,98х Ю,9±1,35х

Процент от числа овуляций 50,5 ■ 83,8

в т.ч. нормальных 4,í*fP,54

Р 1 0 ,001.

Открытая система извлечения по всем показателям уступала гакрыгоЗ системе. В первой группе не удалось извлечь даже яй-цекдетет у 3-х коров что, вероятно, не было связано с

*етшиж& Еаалечения эмбрионов. Зо второй группе коров при дро-ааати рогов катки было больше изъято промывной <-реды (96,4 и

93,1^). Процент извлечения загюдышей от числа овуляций Сел такке в пользу закрытой системы и составил 50,5 в первой группе и 83,8 - во второй. Различая в числе полученных нормальных эмбрионов иекду группам достоверны.

3.5. Морфологическая оценка качества гибрионов Морфологическая оценка качесиа эмбрионов крупного рогатого скота является одк:;к ;:э методов кс^п^бпсг:;! их оценки.

В каэих опытах ;*орСолог::ч; cr-.it сценке Он.:о яодвергкуто 1238 зародыие?. ¡'з не:: оквз?л::сь пингслго.^ для пересадки 51,% зкбрконов и ае п риг одни::!: - 1С,(дегенсрироэаннкз эмбрионы). Чйслс неоплодотворен¿ых йщ^г.гто" составило 3?,6£ (табл. 12).

Таблица 12

1!ор0олсг;,ческ5я оценка качества змбряокоз

Показателя

Сгагкя развития

Еластоцкси:

рзнк::е : лоздк;;е

ранние: позднее

Всего

Исследовано эмбрионов

% от общего числа эмбрионов

в т.числе: отличные хородпе удовлетворительные

условно годные

дегеверкро-вэнные

167 21,3

226 29,5

201

172

766

4-2,4 25-10,2 10-5,9 94-41,6

12-7,2 67-29,6

■33-30,5 33-14,6

108-64,7 9-4,0

Из таблицы 12 видно, что ранней стадии развития (раны;е и позднее корулк) число эибрхоноэ отл::чйого качества было незяа-

26,2 22,4

45-22,4 57-33,1 129-16,8

79-39,3 59-34,4 242-31,6

47-23,4 42-24,4 168-21,9

20-10*0 12-7,0 98-12,8

10-5,0 2-1,2 229-16,8

- 22 -

читальное (2,4-10,2?)« на стадии рэннпз морулк в большинстве своей были оценены как условно годные и дегенерароза?1кые (30,5-64,7^), на стадии поздние иорулы хороших эмбрионов было Золыпе, чем нэ рагшзй стадии (41,6 проткз З,^)« а часло

у&лозно годных и дегенерированиях резко уменьшалось (14,6-ОД

На стадии бластоцисгк было больше эмбрионов отл;;чнсго и хорошего качества (33,1 и 34,4;"). Отмечена тенденция уьсаыай-ния услоьногодных а дегенерировавших эмбрионов.

Из приведенных данных следует, что для практической трансплантации целесообразно лээягчзиие э^5р::оноз проводить ь;а 8-Я день, когда они находятся на более поздних стадиях.

3.6. Заморанкзач!;? :-! оттзазание зчбр/дпог

3 задачу наши исследован;;?. входило осволть :.:етод глубокого ззиор а звания л оттаивания зибрконов; изучать Бланйсз зэ-ио рани зэк;; я и отх,аивак;;я на Бьшзаеуос^ь эмбрионов разных стадий разздтия.

Згиорааквание и оттаивание эмбрионов проводил по из год к-кз ЗШа. После морфологической оценка качества оттаянных эмбрионов, якзнеспособнке, использоволк для трансллантации(тэбя.

13)-

Занорзгизание зм бри о коз позволило сохранить и г-:; э не способность у 91,6$ (С3,2£ корулы и 94,бластоцистк) с ляе.чостьк; 53,3% (короли) и 35,3£ (блзстоцнсгн).

Стадия развитая з::брионов пнеет определенное значение в-технологии захоранивания и оттадззнпе и находятся в свя-

зи с уровнен их пригнвляекости при нехярургичзскоЯ пересадке.

Таблица 23

Результаты закорачивания, оттаивания к пересадки

гвбрионсв

Есказзгели ; Стадия развития гг'бриснов

: вору ль* : блЁстоцистс ; всего

Закорочено эмбрионов 70 102 172

Оттаяно I? 19 35

Яз них норкальнне от

числа оттаянные 15-88,2 18-94,7 33-51,6

Пересажено экЗркоаов 16 28 34'

Число реципиентов 15 17 32

Сгелышх рецкпиентоз

(п-£) Ь-53,3 ■ 6-35,3 14-43,7

3.7, Нехпрургическгя пересадка з^Срковов Пересадку осуществлял;; после уорс-о логической оценки качества све^еполучеиньдс и Э£^оро^ен;;о-отт8ян:^х -з^Срлокоз приборов:: для пересадка "^пнктуб" (ФИ1) упр-к (фракция).

лз общего чяслз 152 пересаженных гиСрисасв стельность состазьла 38,6>ь. При гти* просматривалась некоторая эав:;ск-: кость лрихпвляе^ости з!;бр!:снов от стадии развития. Ог пересадки корулы получено 35,5£ к бластоцксгн - 40,8% с?е.тьнсетей,

'"ПршьЕвлкеуосгь гибрионоэ скелз связь не только со стадией развитая, но и их качеством Так, при пересадке зибрконоз отличного качества н= стадии корулк пркЕЕЭляеиоеть составила 5С£, нз стадии блеете цисть: - 57,1% (табл. 14), ЭвбрЕонн хорошего качестза з дв^х стадиях развития дали почти одинаковуя при-изляемость (42,3-41,5%).

Приказл_явность Сила лучке у реципиентов с келтыи телоа в ЕЕчнйке хорошего качества (35,9^), чэы удовлетворительного

с слэбовыражевного. У реципиентов с удовлзтвоуихзльник к сла-божраненныы колтун телом'пригдавллемость была почти одинаковая (18,4 и 16,7Д), соответственно (гзбл. 15). Зто вероягно, объясняется способом оценки, котор»:1 сугубо субъективный к зависит от квалификации оператора.

Таблица 15

Праетгелкеыость эибрионов в эависккости от качества желтого тела в яичнике реципиента в день пересадки

: Качество желтого тела в яачкике

Показатели :—--------------- -:-

: хорошие :удовлзтворц- ^плохие или сла-: цельные ^озыоахенкке

[¡з^-зсагено 31: о с к О нов 67 38 6

Число реципиентов 64 . : 38 .6

Стельных реая- ПмЗНТОВ 23 7 т А

Процент стельных 35,9 18,9 16,7

Место расположения эмбрионов в просвете рога матхк при -яерзсздне оказывает существенное влияние на их прияиэляемосгь (табл. 16).

; . ■ г ■■::■■■.. . ■ Таблица 16

Прихивляеиость эмбрионов ъ зависимости от места их аппликации в просэетз рога катки при пересадке

* Показатели : РОГ матки

Праги й Левьй

» ♦ верхушка | середина 1 середина

Пегзсатено 7 . 51 47

Число релипк- ¿НТОЛ '7 '45 42 .

Стельнкх рЗЦИПИ- еНТОЬ 4 14 10

Зрзцзит стельности 57,1 31,1 23,3

- 25 -

Пр:: пересадке .эмбрионов ? верхушку рога иагкг лриЕИвля-si'ocib эмбрионов составила 57;, в середину рога - 31,1 а Сдасгвеншпс ¿еълпчу.И в притдеекссти яри пересадке гкбр;;зноз г середину правого клк левого рогое msíkjj не бы кале но.

Введение перед пересадков (за 20 ииорелаксаната-

20 ил, прогестероне ij*» - 5 мл, трквита^кна - 10 вл* улучшало лрижйзлнеаосгь ъийрконсъ на (34,6 йрсгкв 26,В), таблица 17.

Таблице 2?

Урозел! пр^ггглябксстк в зависимости от гьnеis счj=.c:-о введьнкя гет. лоепьраюв

Покэзаяел;:

В день перед перссьдкой

:).;порелзксава:г-20 н~ ; прогестерон - Ц-5 ¡^л ¡тривкта^яв - Ю ил

без препаретов

Псресахено экбркоков 51 43

Число реципиентов 43 .41

Стельных рзшзиентсв "15 II

Процент стельности 34,6 26,8

■ Таблица 16 Пркгп.'БД.теххсгь гкбриснсв ог сезона года

"Показателя i Декабрь-: : ■¿■евраль .; ttspt- : г.8Я . J Лшь— август •Сентябрь; ноябрь

Пересакено эмбрионов 33 49 24 5

Число реципиентов 29 46 21 5

Стельных рецйпийЕтог 7 17 3 3

Процент стельности 24,1 56,9 14,3 60,0

Пол)"!ендк-е дзанне кэ таблицы 18 показывав!, что пр::аивля-емосхь экбрконов наиболее выше деток (36,9%) и осенью (60,0%). Однако осень» было л ensopes о квлсе количество эмбрионов, повлеку эти данные требуют уточнения.

ВЫВОДЫ

1. В специфических природных и кормовых условиях Уэбекис . таза способ гормонального вызывания сулзровуляции у крупного

рогатого скота с использовзвиеч СЖК з сочетании с простаглаи-динааи и биологически активными ведествами обеспечивает индуцирование суперовуляции практически у всех коров и дает воз-иояносгь получать до 12,8 овуляция г до 6,8 нормальных эибрно-нов на донора.

2. Оптимальной дозой препарата 4СГ-П (США) следует считать 4Q lt, обеспечивайте Г! получение э среднем 11,3 овуляций,

й 6,6 нормальных эибриоаов на донора. Наиболее целесообразным временем начала обработки препаратом ФСГ-п следует считать Ю-й дань астрального цикла, до 4-доезной схеие.

3. Фоллитропин (ФСГ) отечественного производсгээ по свое ыу действию не уступает другим гонадотропкяаа и зарубежному аналогу» Оптимальной дозой препарата фэдлитропина следует счи

, гать 960 Е.Д., обеспечивавце2 получение в средней 13,6 овуляций, и 5,4 нормальных эмбрионов на донора, -

Для многократного использования коров в качзстве доно ров необходимо отобрать тех коров, от которых в год при 4-5 ; ■кратной обработке получено в средкем по 5,0-5,5 нормальных эи брионоа- не обработку. ■.■■•■■.-■-■>-■-

5. Сравнительные результаты нзхнрургического извлечения эмбрионов при открытой и закрытой системах показали, что закрытая система по всей показателям не уступает открытой системе. Иэзлеченае эмбрионов на 7-й день после первого осеменения шиэоляат получать до 57,9^ качественных змбршнов с мелызим

- 27 -

чис.тон деголоркролаянкх, чек Н8 8-Й день цикла.

6, Прйлкьляйсосгь змбр?оксв при кехирургической пересгдке 3SHüCüT от ctrai'.k развита и vx кьчестза. Лучшая прижйвляе-кссть пслучйнз после перчсадкк бластоцис? (40,8£), чек исрул При лепесадке эмбрионов отличного качества на стадии к^руль пркли*ляекоегь составила 50,С/а, на стадии бяэстоцисгы -57,1А.

ПРАКШ2Ш!В EPSUCISKEfl

1. Для гор^'олольлого вмзьзьййя сулерогуляцки у вксокопро-дукг!::нкых коре? ¿екокедуется нслсльзсьать фолликулоотикулиру-d.:;¡tvi пр«г.^рьт 5СГ-п (CEA) I дозе 40 кг по четырехдневной схеме с iG-ro йКЕ эсгральшго цикла, &одлитролин (ОТ, отечественного произведена) £ дозе 960 Е.Д.» с П-го дня астрального цикла. рижское извлечение эмбриоксв осуществлять в jсло-вкнх j'.ep!í. закрытой системой, Обеспечивающей максимальное извлечение sapoiKoisii и исключающей м,; пробку с контаминацию полоста матки.

2. Для nOBKüisñZR уровня суперовуняцик и увеличения числе нормальных ?t/5pKOH0B б условиях специфических природных и кормовых усдоъккх Узбеки стала (особенно зикнее к ранне-весеннее периоды), целесообразна комплексная обработка коров-доноров с исло-"ьойьаку:е,,1: фолликулостииулирувдих гормонов в сочетании с биологически активными земствами.

Оснсыза ре-зудьтйгл гселедовавиЯ опубликованы в следующих работах:

I. Тзанеплвнтбцая змбргоъов /Бкккулов А,, Аберкулов IÍ., Мурстходаэев А., Алкерданов А. //Сельское хозяйство Узбекиста-

£6. - ХОД Чё 12. -С.11-12.

с 2« АЙвркуловМ.Б., Иуротходхаев А,Р., Алиардэноз А. Влля айв гормональных препаратов на качество экЗряоноз крупного ро гаюго окота // Биология воспроизведения и блотехнологическле методы разведения с.-х. кивотных / Сб. тр. БКЖп.теьи - !£. -1989. ■

3.Применение гипофиззрнкх препаратов при трансплантант: эмбрионов. / Сергеев Н.И., Лебедзв В.11,, Ибрагимов Ю-, Алкэр-даноа А. // Зоотехния. - 1990. - К» 7. -С.69-72.

4» Алиарданов А. Факторы, влияющие на уровень с^перовуля ции» качество и прккизляэиость эыбрионов крупного рогатого ск та. Ц Достижения науки и техники АЛХ. - Агропромкздаг. - 195 „..- й 7. -С.29-31. -Типография ВПК. Тирах 100 экз. ДуСрегица, Уоскозс.ч. обл.

Подписано к печати 12.11.1990 г.. Заказ 626.

Тираж 100 экз. . с Объем 1,0 уч.-изо.л.

ПМП ВИЖа