Эффективность противоящурных вакцин в зависимости от используемого адъюванта

Большакова, Маргарита Васильевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Эффективность противоящурных вакцин в зависимости от используемого адъюванта
ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Автореферат диссертации по теме "Эффективность противоящурных вакцин в зависимости от используемого адъюванта"

На правах рукописи

ГГ6 ОД 2 5 Дсй ЯМ

Большакова Маргарита Васильевна

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОТИВОЯЩУРНЫХ ВАКЦИН В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИСПОЛЬЗУЕМОГО АДЪЮВАНТА.

03.00.23 - биотехнология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Щелково - 2000

Работа выполнена на Федеральном государственном унитарном предприятии «Щелковский биокомбинат» и во Всероссийском научно-исследовательском и технологическом институте биологической промышленности РАСХН.

Научные руководители:

- доктор ветеринарных наук, профессор,

член-корреспондент РАСХН А.Я. Самуйленко

- доктор биологических наук, профессор,

лауреат Государственной премии СССР,

заслуженный ветеринарный врач РФ Н.Д. Скичко

Официальные оппоненты:

-доктор ветеринарных наук, профессор,

лауреат Государственной премии СССР А.И. Дудников

- кандидат биологических наук А. Г. Бирюков

Ведущее учреждение - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко.

Защита диссертации состоится 26 декабря 2000 года в 10 часов на заседании диссертационного совета К 120.17.01 при Всероссийском научно-исследовательском и технологическом институте биологической промышленности: 141142, Московская обл., Щелковский район, п/о Кашинцево, ВНИИТИБП.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВНИИТИБП.

Автореферат разослан 25 ноября 2000 года.

Ученый секретарь специализированного совета

кандидат биологических наук Ю.Д. Фролов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность темы. Важной задачей сельского хозяйства в нашей стране является возрождение и дальнейшее развитие промышленного животноводства. Сейчас, когда многие хозяйства столкнулись с финансовыми трудностями, надо бо^ее рационально подходить к проблемам лечения и профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных.

Ящур, являясь одним из наиболее распространенных заболеваний, наносит большой экономический ущерб животноводству вследствие резкого снижения продуктивности скота, гибели молодняка, выбраковки продуктов животноводства и проведения карантинных мер.

Эпизоотическая обстановка по ящуру вокруг России усложняется, в первую очередь, на юго-востоке по границе государства. Сохраняется угроза заноса этого заболевания в страну в связи с импортными закупками мясных и других продуктов животноводства.

Возможность срочного наращивания производства противоящурных вакцин в России уменьшилась.

Возникла необходимость разработать технологию вакцин эффективных и безопасных для всех видов восприимчивых к ящуру животных.

Для специфической профилактики ящура, как свидетельствует мировой опыт борьбы с этим заболеванием, широко применяются моно-и поливалентные вакцины из инактивированного вируса, культивируемого в различных биологических системах (Бойко А.А.,1971; Герасимов В.Н.,1998; Дудников А.И., 1970-1998; Иванов С.П.,1961; Еремец В.И.,1999; Киндяков В.И.,1965; Лихачев Н.В., 1962; Михалишин

B.В.,1998; Ререр X., 1971;Скичко Н.Д.,1990; Соболев В.В.,1981; Сюсюкин А.А. и др., 1975;. Henderson W.M. е.а.,1953; Mackorwiak

C.е.а.,1966; ValleH.e.a.,1926 и др.).

Иммуногенность противоящурных вакцин зависит от количества и качества антигена, технологии изготовления препарат^, способа применения, а также от правильного выбора неспецифических стимуляторов иммуногенеза - адъювантов или иммуностимуляторов (Андреев Е.В. и др., 1968; Воробьев A.A. и др.,1968; Дудников А.И.,1990; Майков Н.С.,1999; Самуйленко АЛ. и др.,1990; Шипилов В.Й. и др.,1991; Bachnemann H.G.,1986; Brooksby J.B.,1971; Forgacs Are.a.,1984; Rivenson S.e.a., 1979 и др.).

Большинство противоящурных вакцин выпускается в виде сорбированных препаратов, адъювантами в которых служат минеральные производные (ГОА, бетонит, сапонин, фосфат кальция).

У этих вакцин есть ряд существенных недостатков: недостаточно напряженный и продолжительный иммунитет, высокая себестоимость вакцин из-за закупаемого за рубежом сапонина, использование только для иммунизации крупного и мелкого рогатого скота (у свиней они не создают надежного иммунитета).

В ряде стран Южной Америки для профилактики ящура крупного рогатого скота успешно применяются эмульсионные вакцины, приготовленные на основе минеральных масел и эмульгаторов (Bahnemann /rf). е.а., 1987).

Попытки использования других адъювантов в составе противоящурных вакцин не вышли за рамки экспериментальных исследований (Гусев A.A. и др., 1977; Коропов В.Н. и др., 1990; Малахов А.Г., 1967; Морев Ю.Б. и др., 1983; Нуриев Г.П., Бусыгин К.Ф.,1970).

Биологическая промышленность России выпускает две формы противоящурных вакцин: сорбированные на основе адъювантов геля ГОА и сапонина и эмульсионные на основе масляного адъюванта.

Отечественные эмульсионные противоящурные вакцины применяются лишь для вакцинации свиней, так как обладают

выраженной реактогенностью для мелкого и крупного рогатого скота (Бегларян C.B.-и др.,1987; Дудников А.И. и др.,1985; Павлов В.Г. и др., 1982).

Эмульсионные вакцины обладают повышенной вязкостью, перед применением требуют подогрева, что может снизить иммуногенную активность препарата. От биологических и физико-химических свойств компонентов масляных адъювантов зависит качество эмульсионных противоящурных вакцин.

Несмотря на достигнутые успехи при подборе адъювантов и разработке технологий изготовления эмульсионных противоящурных вакцин, дальнейшего изучения и практического решения требуют многие вопросы.

Цель и задачи исследования. Целью настоящих исследований являлось изучение эффективности противоящурных вакцин в зависимости от адъюванта. Для достижения этой цели исследования были поставлены следующие задачи:

1. Изучить в сравнении токсичность адъювантов с использованием высокочувствительного количественного метода на культуре клеток почек свиней (СП) в монослое и иммуногенную активность вакцин, изготовленных с этими адъювантами.

2. Изучить влияние разных адъювантов (ГОА, аэросила, сапонина, масляного) на показатели иммунитета.

3. Разработать рекомендации по применению эмульсионных вакцин при вакцинации и последующих ревакцинациях. .

Научная новизна работы. Впервые показана связь результатов токсичности масляных адъювантов с использованием высокочувствительного количественного способа ее оценки на культуре клеток СП (патент № 2000126125 от 19 октября 2000 г.) с иммуногенной активностью вакцин, изготовленных с этими адъювантами

Впервые даны объяснения, почему, несмотря на высокие титры вируснейтрализующих антител, у вакцинированных животных, привитых вакциной с масляным адъювантом, при заражении не было соответствующих высоких показателей процента защиты, как в случае применения вакцин с гелем ГОА и сапонином. Это связано с невысоким показателем местного иммунитета у животных, привитых вакциной с масляным адъювантом, по отношению к уровню гуморального иммунитета.

Практическое значение работы. Результаты экспериментальной работы вошли в нормативно-технические документы по изготовлению противоящурных вакцин. Изучены в сравнительном аспекте токсичность новых марок масел и эмульгаторов, входящих в состав адъювантов, и показатели иммуногенности изготовленных из них вакцин, что позволяет высокоэффективно готовить и применять на практике эти биопрепараты.

Апробация работы. Основные положения работы доложены, обсуждены и одобрены на научных конференциях по актуальным проблемам ветеринарной вирусологии (Москва, 1987; 1991 гг.); на Всероссийской научно-производственной конференции «Разработка и освоение производства нового поколения лекарственных средств для животных и их применение в ветеринарной практике» (Ставрополь, 2000г.); на Всероссийской научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных препаратов», посвященной 30-летию Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности (Щелково,2000 г.), а также на заседаниях Ученого совета ВНИиТИБП 1990-2000 гг. Публикация научных исследований. По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе Патент № 2000126125 от 19 октября 2000 года.

На защиту выносятся результаты экспериментальных исследований по изучению:

токсичности эмульсий и их компонентов, используемых при изготовлении противоящурных вакцин;

иммуногенной активности биопрепаратов, изготовленных с использованием различных адъювантов.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 105 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы и приложения. Диссертация иллюстрирована 20 таблицами и графиком. Список литературы содержит 250 источников, в том числе 112 зарубежных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2Л.Матернали и методы.

Работа выполнена на Федеральном государственном унитарном

предприятии «Щелковский биокомбинат» Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации и во Всероссийском научно-исследовательском и технологическом институте биологической промышленности РАСХН.

Для экспериментальных работ использованы: первичная культура клеток СП; 35 овец, 96 свиней, 696 морских свинок, 141 голова крупного рогатого скота.

Для приготовления масляных адъювантов и эмульсионных вакцин использовали масла минерального и синтетического происхождения.

Минеральные масла: Масло для противоящурных препаратов, ТУ 38101884-84; Маркол 52 фирмы «Эссо», США.

Эмульгаторы: ланолин безводный, ФС 42-2520-88; сорбитанолеат, ТУ 18-16-9-81; Монтанид 888 фирмы «Сеипик», Франция.

Штаммы вируса ящура: Экспериментальную работу проводили с использованием вируса ящура трех типов А. О. С в виде афт крупного рогатого скота: А22№550- 8 пассаж (ВНИЯИ); 0|№1618 - 6 пассаж

(ВНИЯИ); С №564 - 4 пассаж (ВНИЯИ). Для приготовления матричного вируса брали производственный замороженный и лиофилизированный вирус. Для изготовления экспериментальных вакцин использовали инактивированные 0,05%-ным раствором формальдегида или 0,04%-ным раствором димер этилен-имина производственные фильтраты вируса ящура 9-12 пассажей по типам А, О и С.

Подопытные животные: Крупный рогатый скот в возрасте 1,5-2 лет массой не менее 250 кг из благополучной по ящуру Тверской области. Сыворотку крови каждого животного проверяли на наличие антител к вирусу ящура.

Подсвинки в возрасте 2-6 месяцев, клинически здоровые, не иммунные к ящуру и не подвергавшиеся обработке антигельминтными препаратами.

Овцы в возрасте 1,5-3 лет массой 20-40 кг, клинически здоровые, не иммунные к ящуру.

Морские свинки массой 450-500 г.

Вакцины: производственные моно- и поливалентные противоящурные вакцины, изготовленные по инструкциям:

- Временная инструкция по изготовлению и контролю трехвалентной противоящурной вакцины из вируса ящура ОАС, культивируемого на эпителии языка КРС, 1975;

- Временная инструкция по изготовлению и контролю вакцины бивалентной АО концентрированной сорбированно-эмульсионной из вируса ящура, культивируемого на эпителии языка КРС, 1988;

- Временная инструкция по изготовлению и контролю вакцин из вируса ящура типа Оь культивируемого на эпителии языка КРС, 1988;

- Временная инструкция по изготовлению, контролю эмульсионных вакцин против ящура Oi для свиней, 1984;

и экспериментальные серии эмульсионных вакцин.

Культивирование вируса ящура. Культивирование вируса ящура проводили при температуре 37°С в течение 18 часов в 100, 200 и 600-литровых реакторах Френкеля. Использовали эпителий языков КРС, поступивший с мясокомбинатов не позднее 40 часов с момента убоя животных.

Очистка вируссодержащей суспензии. В полученную при культивировании суспензию добавляли хлороформ (1 мл на 20 л суспензии), денатурированные белки удаляли сепарированием.

Инактивация вируса. Вирус инактивировали 0,05%-ным раствором формальдегида при температуре 30°С (тип О-в течение 38 часов, А и С

- 40 часов) или 0,04%-ным раствором димер этилен-имина при температуре 27°С (в течение 24 часов).

Определение 146 S компонента проводили методом зонального центрифугирования в градиенте плотности сахарозы.

Приготовление и контроль масляных адъювантов. Для изготовления масляных адъювантов использовали минеральные и синтетические масла, а в качестве эмульгирующего агента -неионогенные поверхностно-активные вещества - эмульгаторы. Масляные адъюванты готовили путем добавления -к маслу 2-10% эмульгатора, и смесь стерилизовали в автоклаве в течение 2 часов при температуре 120°С. Хранили приготовленные адъюванты до применения при комнатной температуре в темном месте.

Изготовление эмульсионных вакцин. Инактивированный вирус ящура диспергировали с равным объемом стерильного масляного

адъюванта с помощью ультра-тюракса до получения стабильной эмульсии.

Определение токсичности эмульгаторов на культуре клеток СП. Разведения эмульгаторов готовили на питательной среде Эрла с гидролизатом лактальбумина без сыворотки (рН 7,0-7,3). Эмульгаторы разводили с логарифмической разностью 1 или 0,6 На каждое разведение использовали 5-6 пробирок с культурой клеток. В каждую пробирку вносили по 1 мл разведенных эмульгаторов и ставили в роллерный барабан в термостате при температуре 37°С. Учет результатов токсичности эмульгаторов проводили через 24 часа. Расчет титра токсичности ТЦД50 делали по методу Кербера.

Оценку иммуногенной активности авирулснтных и безвредных противоящурных вакцин проводили на КРС, овцах, свиньях и морских свинках. Животных вакцинировали: КРС - 1,7 мл или 2 мл ; овцам - 1 мл; свиньям - 2 мл; морским свинкам - 1,7 мл моновалентной вакцины. При определении ИмД50 в вакцинальном объеме вакцину разводили карбонатным буфером (рН 8,5). Животных прививали в разных разведениях. На 21 день животных (морских свинок на 10 день) заражали вирусом ящура, гомологичным вакцинному. Наблюдение проводили 7 дней. После убоя по количеству животных, предохраненных ог генерализованной формы заболевания, определяли ИМД50 в прививном объеме по методу пробитое.

Изучение гуморального иммунитета у животных проверяли путем определения титра ВНА в сыворотке их крови с помощью реакции серонейгрализации.

Уровень местного иммунитета у КРС определяли с помощью показателя индекса запшгы К. Расчет титра ИД50, инфекционной активности вируса, проводили по методу Кербера, выражали в десятичных логарифмах.

Значение индекса К определяли по разности титров, полученных на контрольных (Т) и вакцинированных (V) животных по формуле: lg К = lgT-IgV.

При анализе и обобщении результатов исследований использовали общепринятые в биологии методы статистической обработки.

По методу Кербера обрабатывали статистические данные, полученные при сравнительном изучении иммуногенной активности противоящурных вакцин на лабораторных и сельскохозяйственных животных. Инфекционный титр, титр ВНА сывороток крови животных рассчитывали по методу Рида и Менча.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Для специфической профилактики ящура и других болезней сельскохозяйственных животных широкое применение нашли эмульсионные вакцины на основе минеральных масел и эмульгаторов.

В России при изготовлении эмульсионных противоящурных вакцин нет четких требований к показателям качества масел и эмульгаторов. Одним из решающих факторов в получении иммуногенной противоятцурной эмульсионной вакцины является подбор соответствующего масла и способа приготовления вакщшы.

2.2.1. Изучение влияния токсичности эмульгаторов, используемых при изготовлении эмульсионных противоящурных вакцин, на их иммуногеннуго активность.

Исследования проводили на морских свинках с использованием вируса ящура типов А22 № 550, Oi № 1618 и С № 564.

Вирус репродуцирован на эпителии языка КРС в 100, 200 и 600-литровых реакторах Френкеля.

Показатели качества вирусной суспензии представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Результаты изучения свойств натурального вируса ящура типов А, О и С.

Тип РСК (ед.) вируса «Техникою) ТЦДзо/мл 16 146 Б мкг/мл Белок мг/мл

А22№550 230+20 О! №1618 202+21 С № 564 220 +20 8,0+0,3 7,8±0,3 8,3±0,2 3,5±0,4 3,2+0,3 3,3±0,4 0,66±0,4 0,62+0,4 0,65±0,6

Инактивацию вирусной суспензии проводили 0,05%-ным

раствором формальдегида или 0,04%-ным раствором димер этилен-

имина. Таблица 2.

Результаты изучения свойств инактивированного вируса ящура

типов А, О и С.

Тип РСК (ед.) вируса «Техникон» ТЦДи/мл 146 8 мкг/мл Белок мг/мл

А22 №550 226 +16 0[ №1618 200+20 С №564 218 ±18 0 0 0 3,4+0,3 3,2±0,4 3,3±0,3 0,67±0,4 0,60±0,3 0,66±0,5

Эмульгированные вакцины получали из равных частей суспензии антигена и масляной фазы. С использованием ультра-тюракса проводили диспергирование эмульсионной смеси и получали стойкую высокодисперсную эмульсию.

Вакцины готовили на основе традиционного масляного адъюванта, состоящего: 1) из минерального масла Ангарского или Маркол 52 и эмульгатора ланолина; 2) Ангарского масла или Маркол 52 и эмульгатора сорбитанолеата; 3) Ангарского масла или Маркол 52 и эмульгатора Монтанид 888.

Контроль иммуногенности проводили количественным методом путем определения ИмД50 на морских свинках.

Токсичность эмульгаторов проверяли на культуре клеток СП.

Исходя из результатов-, полученных нами при исследовании, наиболее токсичным эмульгатором является Сорбитанояеат (3,3+0,2 но и иммуногенная активность вакцин, изготовленных с этим эмульгатором гораздо выше (Рс=60+20), чем вакцин с ланолином и, тем более, с Монтанидом 888 (Рс=30+15). Последний же является и наименее токсичным (1,6+0,2). Иммуногенная активность вакцин с использованием ланолина и его токсичность имеют промежуточные значения (Рс= 40+10; 2,1±0,2 1§)

Таким образом, установлено, чем выше токсичность эмульгатора, используемого в противоящурной вакцине, тем выше иммуногенная активность этой вакцины.

2.2.2. Изучение влияния различных адыовантов (ГОА,

аэроснл, сапонин, масляные эмульгаторы) на показатели иммунитета.

Безвредность эмульсионных вакцин во многом зависит от реактогенности масляных адъювантов, состоящих из масляной основы и эмульгатора.

Влияние адъювантов на показатели иммунитета изучали на морских свинках, крупном рогатом скоте, овцах и свиньях.

Для изготовления экспериментальных вакцин брали инактивированный вирус, средние показатели которого представлены в таблице 2.

Нами было приготовлено по 3 серии вакцин с различными адъювантами: 1) гель ГОА + сапонин; 2) аэросил + сапонин; 3) эмульсия.

При определении количества ИмД50 для морских свинок получили результаты, представленные в таблице 3, исходя из которых, 'следует, что наибольшей иммуногенной активностью обладают вакцины, в которых использовали масляный адъювант.

Чаще всего используемые в промышленности адъюванты гель ГОА и сапонин при исследовании на морских свинках также показ'али высокие результаты иммуногенной активности. Вакцины с комбинированным адьювантом аэросил + сапонин - наименее иммуногенно активны.

Таблица 3.

Результаты иммуногенной активности вакцин из вируса ящура типов А, О и С ИмДц/1,7 мл с различными адъювантами при исследовании на морских свинках.

Тип Адъювант ИмД5о/1,7мл Кол-во использ. Кол-во вируса к м/свинок (гол.) серии

Гель ГОА + сапонин Аэросил + сапонин

48 + 6 39 + 5

96 72

Эмульсия Гель ГОА+"

56 + 6

О,

Эмульсия

61 + 11

сапонин Аэросил +

сапонин 52+11

74 + 12

96 72 72

Гель ГОА + сапонин Аэросил + Сапонин

22 ±4 17 + 3

96 72

Эмульсия

31 +4

При оценке иммуногенной активности экспериментальных серий вакцин на крупном рогатом скоте получили результаты (таблица 4), которые свидетельствуют о том, что:

- все животные, привитые не разведенной вакциной, вне зависимости от используемого адъюванта, 100% защищены от ящура;

- показатель местного иммунитета (индекс К) у вакцин с использованием ГОА и эмульсии выше, чем у вакцин с аэросилом;

- гуморальный иммунитет существенно выше у вакцин, изготовленных с масляным адъювантом.

Таблица 4.

Результаты иммуногенной активности вакцин из вируса ящура типов А, О и С с различными адъювантами при исследовании на крупном рогатом

скоте.

Тип Адъювант ИмД50 Животные (цельная вакцина) Кол-во вируса (РВ) % защиты Индекс К ВНА голов

А22 Гель ГОА 14 100 2,7 1,7+0,2 15

Аэросил 10 100 2,1 1,6+0,2 15

Эмульсия 18 100 2,6 2,2+0,3 17

О, Гель ГОА 8 100 3,4 1,6+0,1 15

Аэросил 6 100 2,9 1,6+0,1 15

Эмульсия 12 100 3,5 2,1+0,1 17

С Гель ГОА 21 100 2,0 1,6+0,2 15

Аэросил 18 100 2,0 1,5+0,2 15

Эмульсия 26 100 2,1 2,0+0,1 17

Эти же вакцины использовали при изучении показателей иммунитета у овец.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что более эффективными для иммунизации овец являются эмульсионные вакцины. Они вызывают 100% защиту животных при их иммунизации не разведенным биопрепаратом, и образование более высокого титра ВНА

(1,9+0,2 по сравнению с гелиевыми препаратами (1,4+0,1 Показатели местного иммунитета были одинаковыми.

При изучении на свиньях иммуногенной активности вакцин из вируса ящура типов А, О и С с различными адъювантами получили результаты, представленные в таблице 5.

Таблица 5.

Результаты иммуногенной активности вакцин из вирусов ящура типов А, О и С с различными адъювантами при исследовании на свиньях.

Тип Адъювант Кол-во Животные (цельная вакцина) Кол-во

вируса ИМД50 % защиты ВНА голов ~ Гель ГОА +

сапонин 3 80 1,3 ±0,2 15

Эмульсия 12 100 1,8 ±0,2 17

О! Гель ГОА +

сапонин 2 60 1,2 + 0,1 15

Эмульсия 8 100 1,9 + 0,2 17

С Гель ГОА +

Сапонин 4 80 1,4 ±0,1 15

_Эмульсия 12_100_2,0 ± 0,2_17

Судя по полученным нами результатам, эмульсионные вакцины

обеспечивают 100% защиту свиней от ящура. При этом их гуморальный

иммунитет существенно выше, чем у вакцин ГОА с сапонином.

2.2.3. Изучение показателей иммунитета у КРС при вакцинации биопрепаратами, содержащими различные адъюванты и при их ревакцинации различными объемами.

Известно, что при ревакцинации для достижения высоких показателей иммунитета требуется меньший объем вводимой вакцины, чем при первичной иммунизации. Мы проводили такие исследования на крупном рогатом скоте, вакцинируя его трехвалентной (АОС) вакциной, содержащей в своем составе различные адъюванты. Наиболее высокие

показатели иммунитета получили при использовании вакцин с масляными адъювантамн. Для получения высоких показателей гуморального иммунитета при ревакцинации животных достаточна доза в 2 - 10 раз меньшая, чем используемая при вакцинации.

При сравнительном изучении показателей иммунитета у КРС, привитого вакциной ГОА с сапонином ■ и вакциной с масляным адъювантом, получили коррелятивную зависимость между процентом защиты и уровнем гуморального иммунитета.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что показатели уровня гуморального иммунитета, обеспечивающие один и тот же процент защиты животных от ящура у КРС, привитого вакциной с масляным адъювантом на 0,2-0,3 ^ выше, чем у вакцин с ГОА и сапонином.

На основании проведенных исследований и анализа полученных результатов нами разработаны рекомендации по использованию для иммунизации животных вакцин, содержащих в своем составе различные адъюванты. Использование этих рекомендаций на практике повысит эффективность применения противоящурных вакцин.

3. ВЫВОДЫ.

1. Установлено, чем токсичнее эмульгатор, тем более высокой иммуногенной активностью обладает эмульсионная вакцина,

изготовленная с его использованием.

2. Зависимость иммуногенности вакцины от токсичности эмульгатора,

в о

входящего состав эт >го препарата, сохраняется с различными типами вируса ящура (А, О и С).

3. Высокий уровень гуморального иммунитета у животных, вакцинированных эмульсионной противоящурной вакциной, (в сравнении

с вакциной с ГОА и сапонином) при одинаковом

показателе местного иммунитета, объясняет несоответствие уровня защиты этих животных от уровня гуморального иммунитета при ящуре.

4. Уровень местного иммунитета снижается быстрее, чем уровень гуморального иммунитета.

5. Объем вакцины при ревакцинации животных может быть уменьшен по сравнению с вакцинирующей (первоначальной) дозой в 2 - 10 раз в зависимости от качества препарата.

6. Разработаны рекомендации по применению противоящурных вакцин для иммунизации животных.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Разработанный нами способ количественной оценки токсичности масляных адъювантов и их компонентов с использованием культуры клеток СП в пробирках с монослоем (Патент № 2000126125 от 19.10.2000г.) и его использование в разработке и производстве противоящурных вакцин повысит эффективность, как при изготовлении этих биопрепаратов, так и при их применении.

5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1.Самуйленко А.Я., Шапкина Т.А., Красуткин С.Н., Большакова М.В., Скичко Н.Д., Еремец В.И., Желтов В.В., Казаков М.А., Поляков Ю.В., Поляков АЛО., Рубцова Г.Н. «Иммуногенность эмульсионной вакцины из вируса ящура, репродуцированного на эксплантатах эпителия языка крупного рогатого скота.» // Передовой научно-производственный опыт в биологической промышленности. № 3, 1987, с. 12-14.

2.Самуйленко А.Я., Шапкина Т.А., Еремец В.И., Большакова М.В., Казаков М.А., Поляков Ю.В., Рубцова Г.Н., Красуткин С.Н. «Изучение

качества эмульсионной противоящурной вакцины»// Передовой научно-производственный опыт в биологической промышленности. № 4, 1987, с. 9-10.

3.Самуйленко А.Я., Шапкина Т.А., Скичко Н.Д., Еремец В.И., Поляков Ю.В., Казаков М.А., Красуткин С.Н., Большакова М.В. «Количественная оценка эффективности эмульсионных противоящурных вакцин на свиньях»// Передовой научно-производственный опыт в биологической промышленности. № 5, 1987, с. 9-11.

4. Самуйленко А.Я., Скичко Н.Д., Большакова М.В.. Шапкина Т.А., Еремец В.И., Стрельников В.А. «Оценка реактогенности эмульгаторов в составе эмульсионных противоящурных вакцин на морских свинках»// III Всесоюзная научно-практическая конференция «Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов», М., 1987, с.34-35.

5.Самуйленко А.Я., Скичко Н.Д., Еремец В.И., Соколов В.Д., Шапкина Т.А., Большакова М.В. « Физико-химические свойства эмульсий, используемых при производстве противоящурных вакцин»// III Всесоюзная научно-практическая конференция «Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов», М., 1987, с. 35.

6.Самуйленко А.Я., Шапкина Т.А., Скичко Н.Д., Еремец В.И., Большакова М.В. «Напряженность и длительность иммунитета у свиней, привитых бивалентной (А, О) эмульсионной противоящурной вакциной».// III Всесоюзная научно-практическая конференция «Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов», М., 1987, с.42-43.

7.Самуйленко А.Я., Большакова М.В. « Оценка безвредности эмульгаторов, масел и эмульсионных вакцин с использованием различных биосистем » .//1Y Всесоюзная научно - практическая

конференция «Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов», М., 1991, с. 185186.

8.Еремец В.И., Сорокина О.Ф., Большакова М.В., Силаева Н.В. «Спектрофотометрический способ оценки репродукции вируса ящура».// Всероссийская научно-практическая конференция, посвященная 30-летию ВНИИТИБП «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов», Щелково, 2000, с.51-52

9.Еремец В.И., Большакова М.В., Фомина Г.А., Сорокина О.Ф., Самуйленко А.Я., Еремец Н.К. «Изыскание эффективных инактивантов при крупномасштабном производстве противоящурных вакцин».//Всероссийская научно-практическая конференция, посвященная 30-летию ВНИИТИБП « Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов», Щелково, 2000, с.52-54.

10. Еремец В.И., Самуйленко А.Я., Еремец Н.К., Большакова М.В., Фомина Г.А., Казаков М.А., Сорокина О.Ф. «Инактиванты в производстве противоящурных вакцин».// Всероссийская научно-производственная конференция «Разработка и освоение производства нового поколения лекарственных средств для животных и их применение в ветеринарной практике», Ставрополь, 2000, с.51-52.

11 .Самуйленко С.А., Самуйленко А.Я., Еремец В.И., Рубан Е.А., Соловьев Б.В., Бирюков А.Г., Албулов А.И., Большакова М.В., Васенина Т.И., Дадасян А.Я. «Способ определения токсичности масляных адъювантов и их составляющих компонентов».// Патент № 2000126125 от 19 октября 2000.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Большакова, Маргарита Васильевна

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Адъюванты, используемые в производстве противоящурных вакцин.

2.2. Методы оценки иммуногенной активности вакцин.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Материалы.

3.2. Штаммы вируса ящура.

3.3. Подопытные животные.

3.4. Вакцины.

3.5. Методы.'- ■-. ■■■ - ■

3.6. Статистический анализ.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4.1. Изучение влияния токсичности эмульгаторов, используемых при изготовлении эмульсионных противоящурных вакцин, на их иммуногенную активность.

4.1.1. С использованием вируса ящура типа А и оценки иммуногенности на морских свинках.

4.1.2. С использованием вируса яшура типа О и оценки иммуногенности на морских свинках."

4.1.3. С использованием вируса яшура типа С и оценки иммуногенности на морских свинках.

4.2. Изучение влияния различных адъювантов (ГОА, аэросил, сапонин, масляных эмульгаторов) на показатели иммунитета.

4.2.1. На морских свинках.

4.2.2. На крупном рогатом скоте.

4.2.3. На мелком рогатом скоте.

4.2.4. На свиньях.

4.3. Разработка рекомендаций по применению эмульсионных вакцин при иммунизации животных.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

6. ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Эффективность противоящурных вакцин в зависимости от используемого адъюванта"

Актуальность темы.

Важной задачей сельского хозяйства в нашей стране является возрождение и дальнейшее развитие промышленного животноводства. Сейчас, когда многие хозяйства столкнулись с финансовыми трудностями, надо более рационально подходить к проблемам лечения и профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных.

Возможность срочной наладки производства противоящурных вакцин на порядок уменьшилась.

Возникла необходимость разработать технологию вакцин, эффективных и безопасных для всех видов восприимчивых к ящуру животных.

Для специфической профилактики ящура, как свидетельствует мировой опыт борьбы с этим заболеванием, широко применяют моно- и поливалентные вакцины из инактивированного вируса, культивируемого в различных биологических системах (11, 32, 46, 51, 57, 88, 90, 93, 191, 202, 235, и др.).

Иммуногенность противоящурных вакцин зависит от количества и качества антигена, способа применения, технологии изготовления 5 препарата, а также от правильного выбора неспецифических стимуляторов иммуногенеза - адъювантов или иммуностимуляторов (6, 19, 36, 47, 97, 126, 140, 158, 175,221 и др.)

Большинство противоящурных вакцин выпускают! в виде сорбированных препаратов, адъювантами в которых служат минеральные производные (ГОА, бетонит, сапонин, фосфат кальция).

В ряде стран Южной Америки для профилактики ящура КРС успешно применяют эмульсионные вакцины, приготовленные на основе минеральных масел и эмульгаторов (138).

Попытки использования других адъювантов в составе противоящурных вакцин не вышли за рамки экспериментальных исследований (25, 54, 60, 63, 69).

Отечественные эмульсионные противоящурные вакцины применяют лишь для вакцинации свиней, так как обладают выраженной реактогенностью для мелкого и крупного рогатого скота (12, 20, 34, 74).

Несмотря на успехи, достигнутые при подборе адъювантов и разработке технологий изготовления эмульсионных противоящурных вакцин, дальнейшего изучения и практического решения требуют многие вопросы.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящих исследований явилось: изучение эффективности противоящурных вакцин в зависимости от адъюванта. Для достижения этой цели исследования были поставлены следующие задачи:

2. Изучить влияние разных адъювантов (ГОА, аэросила, сапонина, масляного) на показатели иммунитета.

3. Разработать рекомендации по применению эмульсионных вакцин при вакцинации и последующих ревакцинациях.

Научная новизна работы.

Впервые показана связь результатов токсичности масляных адъювантов с использованием высокочувствительного количественного способа ее оценки на культуре клеток СП (патент № 2000126125 от 19 октября 2000 г.) с иммуногенной активностью вакцин, изготовленных с этими адъювантами.

Впервые даны объяснения, почему, несмотря на высокие титры вируснейтрализующих антител, у вакцинированных животных, привитых вакциной с масляным адъювантом, при заражении не было 7 соответствующих высоких показателей процента защиты, как в случае применения вакцин с гелем ГОА и сапонином. Это связано с невысоким показателем местного иммунитета у животных, привитых вакциной с масляным адъювантом, по отношению к уровню гуморального иммунитета.

Практическое значение работы.

Результаты экспериментальной работы вошли в нормативно-технические документы по изготовлению противоящурных вакцин. Изучены в сравнительном аспекте токсичность новых марок масел и эмульгаторов, входящих в состав адъювантов, и показатели иммуногенности изготовленных из них вакцин, что позволяет высокоэффективно готовить и применять на практике эти биопрепараты.

Апробация работы.

Основные положения работы доложены, обсуждены и одобрены на научных конференциях по актуальным проблемам ветеринарной вирусологии (Москва, 1987; 1991 гг.), на Всероссийской научно-производственной конференции «Разработка и освоение производства нового поколения лекарственных средств для животных и их применение в ветеринарной практике» в Федеральном государственном унитарном предприятии «Ставропольская биофабрика» (Ставрополь,2000г.), на Всероссийской научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных препаратов», посвященной 30-летию Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности (Щелково,2000 г.), а также на заседаниях Ученого совета ВНИИТИБП. 8

Публикация научных исследований.

По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе Патент №2000126125 от 19 октября 2000 г

На защиту выносятся: результаты экспериментальных исследований по изучению токсичности эмульгаторов, используемых при изготовлении эмульсионных противоящурных вакцин, на их иммуногенную активность и влиянию различных адъювантов на показатели иммунитета. 9

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Большакова, Маргарита Васильевна

6. ВЫВОДЫ.

1. Установлено: чем токсичнее эмульгатор, тем более высокой иммуногенной активностью обладает эмульсионная вакцина, изготовленная с его использованием.

2. Зависимость иммуногенности вакцины от токсичности эмульгатора, входящего в состав этого препарата, сохраняется с различными типами вируса ящура (А, О и С).

3. Высокий уровень гуморального иммунитета у животных, вакцинированных эмульсионной противоящурной вакциной, (в сравнении с вакциной ГОА и сапонином) при одинаковом показателе местного иммунитета, объясняет несоответствие уровня защиты этих животных от уровня гуморального иммунитета при ящуре.

4. Уровень местного иммунитета снижается быстрее, чем уровень гуморального иммунитета.

6. Разработаны рекомендации по применению эмульсионных противоящурных вакцин при иммунизации лабораторных и сельскохозяйственных животных.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Большакова, Маргарита Васильевна, Щелково

1. Авилов В.М. Материалы по активной иммунизации свиней против ящура. Автореферат дисс. канд. вет. наук.-М.,1966- с. 19

2. Албулов А.И., Самуйленко А.Я., Скичко Н.Д., Еремец В.И. Безамиачный гель гидроокиси алюминия для противоящурных вакцин. -Науч. основы технологии пром. пр-ва вет. биол. преп. М., 1987- с. 159160

3. Алексанян Р.Л., Гусев A.A., Шипилов В.И. и др. Реактогенность и адъювантные свойства масляных препаратов. — Актуал. пробл. вет. вирусологии Владимир, 1987- ч. 1 - с. 19-20

4. Андреев Е.В., Филатов И.П., Михайлюк А.П. и др. Антитела у крупного рогатого скота, привитого противоящурными ГОА и ГОА-сапонин-формол-вакцинами. Акт. вопр. вет. вирусологии- М., 1967 4.1-с. 177-1.

5. Андреев Е.В., Филатов И.П., Михайлюк А.П. и др. Испытание сапониновой ГОА-формол-вакцины из лапинизированного вируса ящура А22. Ящур. мат. науч. конф. - Владимир, 1968- с. 62-63

6. Андреев Е.В., Сюсюкин A.A., Дрягалин H.H. и др. Противоящурные вакцины, применяемые в ветеринарной практике. М., 196871

7. Андреев Е.В., Бойко A.A., Луцевич Ф.Ф. и др. Сапониновая вакцина из лапинизированного вируса варианта Аи. Ветеринария, 1968 - № 1 -с.28-31

8. Андреев Е.В., Филатов И.П., Михайлюк А.Н. и др. Испытание сапониновой ГОА-формол-вакцины из лапинизированного вируса ящура А22.- Ящур. матер, науч. конф. Владимир, 1968 - с.68-69

9. Андреев Е.В., Михайлюк А.П., Пронина H.A. и др. Материалы экспериментального изучения противоящурной вакцины. Изучение свойств сапонина. Ящур. - Владимир, 1970 - т. 1 - с. 138-144

10. Андреев Е.В., Пронина H.A., Филатов И.П. и др. Сравнительное изучение токсических и адъювантных свойств сапонина. Вирус, болезни с-х животных, матер. 1-й межвузовской вет. вирусол. конф. - М., 1970 - ч. 1 - с.240-241

11. Андреев Е.В., Активная иммунизация против ящура. -Автореф.дисс.канд.вет.наук Харьков, 1971 -с.22

12. Бегларян С.В., Саркисян P.A., Михалишин В.В., Овсепян JI.B. Эффективность противоящурных вакцин с масляным адъювантом для свиней. Акт.пробл.вет.вирусол. - Владимир, 1987 - ч. 1-е. 21-22

13. Бобыро А.Я. Вакцинация свиней против ящура. ТР.ВИЭВ М.,1957 - 20 - с.54-62

14. Бойко A.A. Активная профилактика и борьба с ящуром сельскохозяйственных животных в СССР. М., 1962 - с.2472

15. Бомфорд Р. Адъюванты. Биотехнол.клеток животных. - М.,1989 -т. 2- с. 264-280

16. Бусыгин К.Ф. Нуриев Г.Г. Сравнительное изучение влияния некоторых неспецифических стимуляторов на выработку противояшурных преципитинов и белки крови. Уч.зап.КВИ - Казань, 1969 - тр. 102 - с. 147-150

17. Василев 4.JI. Адъюванты иммунного ответа и макрофаги. -Успехи современной биологии.-1986 -т. 101 -вып. 3 -с.430-435

18. Ветлугина Т.П., Васильева O.A. Разработка оптимальных условий изготовления гидроокиси алюминия и сорбции некоторых бактерийных и вирусных антигенов. Адъюванты в вакцинно-сывороточном деле. - М., 1975- с. 17-19

19. Воробьев A.A., Васильев H.H. Адъюванты. М., Медицина 1969 -с. 206

20. Временная инструкция по изготовлению и контролю эмульсионной вакцины против ящура Ol для свиней. Утв. ГУВ МСХ СССР 24.04.84 г.

21. Гизатулин Х.Г. О неспецифической стимуляции иммуногенеза у животных, вакцинируемых против ящура. Докл.сов.ученых к XYIII Всемирному вет.конгрессу - М., 1967 -с.66-68

22. Глушко Б.А., Овчаренко И.В., Головкин В.В. и др. Количественная оценка иммуногенной активности противоящурной вакцины Азия-1 на73крупном рогатом скоте и морских свинках. Акт.пробл.вет.вирусол. -Владимир,1987 - ч. 1 - с.54-55

23. Горский В.В. Влияние сенсибилизированных лимфоцитов на поствакцинальное антителообразование у свиней при ящуре.-Акт.вопр.вет.вирусологиию-Владимир,1976, ч. 2- с. 13-14

24. Гусева Е.В. Изучение иммуногенной активности противоящурной декстран-сульфат-вакцины. Акт.пробл.вет.вирусол.- Владимир, 1980 - с. 63-65

25. Гусев A.A., Муравьев В.К., Михалусев В.И. и др. Гипсофилин -адъювант в противоящурной вакцине. Акт.пробл.вет.вирусол.-Владимир, 1977 -с. 116-118

26. Гусев A.A., Муравьев В.К., Кудачкина С.Б. Влияние дозы сапонина на иммуногенность противоящурной вакцины. Акт.пробл.вет.вирусол. -Владимир, 1977-с.119-120

27. Гусев A.A. Новые подходы в создании высокоэффективных вакцин из лапинизированного вируса ящура. Акт.пробл.вет.вирусол. -Владимир, 1987 -ч. 1 - с.7-9

28. Гусев A.A., Михалишин В.В., Яременко H.A., Бахуташвили Т.О. Иммуногенная активность противоящурной вакцины, изготовленной из лапинизированного вируса Азия-1. Акт.пробл.вет.вирусол. - Владимир, 1987-С.16-1774

29. Гусев A.A., Улупов H.A., Михалишин B.B. и др. Иммуногенная активность трехвалентной вакцины из лапинизированного вируса ящура. Акт.пробл.вет.вирусол. - Владимир, 1988 - ч.2 -с.46-47

30. Гусев A.A., Дудников А.И., Улупов H.A. и др. Иммуногенность бивалентной противоящурной вакцины, изготовленной на различных биопредприятиях страны. Акт.пробл.вет.вирусол. - Владимир, 1988 -4.2- с.47-48

31. Гуджу И., Малинетеску М., Константинеску Кр. И др. Изготовление противоящурной вакцины с использованием бентонита в качестве адъюванта. Матер.семинара спец.стран-чл.СЭВ - Владимир, 1990 -с.27

32. Дудников А.И., Коропов В.И., Улупов H.A. и др. Совершенствование технологии изготовления инактивированной противоящурной вакцины из лапинизированного вируса. Вирусные болезни с-х. животных - М., 1970 - ч.2 - с.49-50

33. Дудников А.И. Пути совершенствования инактивированных противояшурных вакцин. Акт.пробл.вет.вирусол.- Владимир, 1980 -с.55-56

34. Дудников А.И., Коропов В.Н., Ашуров С.А. и др. Иммуногенность у крупного рогатого скота и свиней противоящурной вакцины с масляным адъювантом. Проблемы вет. иммунологии. - М., 1985 - с.138-139

35. Дудников А.И. Новые поколения противояшурных вакцин. -Акт.пробл.вет.вирусологии Владимир, 1988 -с.13-1575

36. Дудников А.И. Эмульсионные вакцины. Ящур М.,ВО «Агропромиздат», 1990 - с.239-250

37. Дудников А.И. Сорбированные вакцины.- Ящур М., ВО «Агропромиздат», 1990- с.231-239

38. Еремец Н.К. Оценка качества алюмогидрогеля на уровне тонкой структуры,- Передовой науч-произв.опыт в биол. промышленности. М., 1984, № 11-с. 10-12

39. Еремец В.И., Самуйленко А.Я. Стандартизация реакции серонейтрализации при ящуре. Акт.пробл.вет. вирусологии , Владимир, 1980- с.75-76

40. Еремец В.И., Самуйленко А.Я.Изучение влияния различных соотношений антигенов вируса ящура на результаты реакции серонейтрализации.- Науч.основы технол.пр-ва вет.препаратов.Тез.П Всес.конф.,М.,1981, с. 161-163

41. Еремец В.И., Самуйленко А.Я., Албулов А.И. и др. Выбор методов оценки качества гелей гидроокиси алюминия, используемых для производства депонированных вакцин. Науч. основы технологии прм. пр-ва вет.биол.преп. -М., 1987 -с.157-158

42. Еремец В.И., Скичко Н.Д., Самуйленко А.Я. Эффективность моновалентной противоящурной вакцины, предназначенной для ранней вакцинации животных. Акт.пробл.вет.вирусологии - Владимир, 1988 -Ч.2-с. 48-4976

43. Ершов Ф.И., Новохватский A.C. Интерферон и его продукты. М., Медицина - 1980 -с. 174

44. Ефимов Н.И. Изучение иммунобиологических свойств вируса ящура, адаптированного к различным системам культивирования. Автореф. дисс. канд. биол. наук Владимир, 1969 -с.23

45. Ефимов Н.И., Мамков Н.С., Шоршнев В.И. Реактогенность культуральной противоящурной вакцины в зависимости от содержания адъювантов. Акт.пробл.вет.вирусологии - Владимир, 1987 - Ч. 2 - с.25-26

46. Иванов С.П. Способ получения вируса ящура для изготовления иммуногенной инактивированной противоящурной вакцины. A.c. № 121910, кл.ЗОПб (3.613115 от 2.12.1958), «Животн. и вет.» - М.,1961 -с.62

47. Инструкция (временная) по изготовлению и контролю трехвалентной противоящурной формолвакцины из вируса ящура О, А, С, культивируемого на эпителии языка крупного рогатого скота. М., 1976 -с.74

48. Кабанов В. А. Физико-химические основы создания нового поколения искусственных иммуногенов и вакцин. Научное сообщение. -Вестн. АН СССР. 1987, № 1 с.14-28

49. Киндяков В.И., Доронин H.H. Опыты по иммунизации против ящура. Труды Казан.НИВИ - Алма-Ата, 1940 - Т.4 - с. 142-14877

50. Киндяков В.И., Доронин H.H., Румянцев А.П. Сравнительное изучение иммуногенных свойств хлороформвакцины и гидроокисьалюминиевой противоящурной вакцины. Ветеринария, 1946, №10-11-с.23-24

51. Киндяков В.И. Ящур и борьба с ним. Алма-Ата, Хайнар, 1965 -с. 170

52. Козловский Г.А., Носов И.И., Шакин М.Ф., Ибрагимов А.И. Методика изготовления вакцины из лапинизированного вируса ящура типа О. Тез.докл.науч.-призв.конф. (ГНКИ) - М., 1972 - с.54-55

53. Конозенко П.А. Сравнительное изучение противоящурных вакцин на свиньях. Акт.вопр.вет.вирусологии - М., 1965, 2 - с. 19-20

54. Коропов В.Н., Дудников А.И., Коропов Г.Н. и др. Гемолитические, токсические и адъювантные свойства отечественного адъюванта аллохрозида. Метод.семинара спец.стран-чл.СЭВ - Владимир, 1990 -с. 18-20

55. Кунанбаев А.К. Разработка методов получения специфической вакцины против ящура свиней. Автореф.канд.дисс. - Алма-Ата, 1958 -с.16

56. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета. М., Медицина, 1985- с.25678

57. Лихачев Н.В., Бойко A.A., Воинов С.И. и др. Сравнительные испытания иммуногенных свойств лапинизированного вируса ящура в зависимости от возраста крольчат. ТР.ГНКИ - М., 1962 - Т. 11 - с. 15-20

58. Лихолетов С.М. Современные аспекты разработки вакцин, адъювантов и иммуномодуляторов. Успехи современной биологии -1988 - Вып. 1 - Т. 105 - с.83-99

59. Лукьянченко A.B. Эмульгированная вакцина против пастереллеза свиней. Автореф.дисс.канд.вет.наук М., 1969 - с.20

60. Малахов А.Г. Влияние неспецифических антигенов и свободных аминокислот на формирование противоящурного иммунитета. -Акт.вопр.вет.вирусрлогии М., 1967-Ч. 1-е. 178-180

61. Митев Г, Текерликов П., Шопов И. Сравнительни проучвания на имунитета при свине, вакцинирани с противошапни ваксини, приготвени с различии аджуванти. Вет.мед.наука - 1975 - Т. 12 № 1 -с. 16-22

62. Михалишин В.В. Разработка технологии изготовления моно- и поливалентных вакцин из лапинизированного вируса ящура с масляным адъювантом. Дисс.канд.вет.наук. - Владимир, 1981

63. Морев Ю.Б., Коропов В.Н., Глушко Б.А., Шипилов В.И. Влияние додецилсульфата натрия на качество противоящурной вакцины. -Акт.пробл.вет.вирусологии ВладимирД983 - с.72-73

64. Муравьев В.К., Онуфриев В.П. Изучение поствакцинального иммунитета у мышей, иммунизированных противоящурной бивалентной79вакциной. Тезисы докл.Всес.науч.конф.по вет.вирусологии М., 1973 -4.1- с.157

65. Муравьев В.К., Гусев A.A., Коган JI.M. и др. Промышленное испытание гипсофелина в качестве адъюванта в противоящурной вакцине.- Акт.пробл.вет.вирусологии Владимир, 1978 - с.70-72

66. Нерсесян С.Е., Багдасарян Э.С. и др. Профилактика яшура универсальной эмульсионной вакциной на животноводческом комплексе.- К новой стратегии борьбы с ящуром Владимир, 1991 - ч. 1 - с.56-58

67. Николаенко Н.И. Практическая ценность хлороформ-формолвакцины в борьбе с ящуром. Сов.ветеринария -1938, № 4-5 -с.25-27

68. Николаенко Н.И. Вакцинащя велко1 poraToi худобы проти ящуру.- Соц. товарництво 1941, № 4 - с.47-52

69. Нуриев Г.П., Бусыгин К.Ф. Применение препаратов пиримидинового ряда для стимулирования поствакцинального иммуногенеза при ящуре. Вирусные болезни с-х животных - М., 1970 -ч. 2-С.15-16

70. Нуриев Г.П., Белкина A.B., Бусыгина Е.Ф. и др. Влияние витамина В12 на некоторые показатели общей резистентности и иммуногенез у животных, вакцинированных против ящура. Уч.зап.КВИ - Казань, 1969 (1970)-т. 104-с. 17-2380

71. Онуфриев В.П., Дудников А.И., Швецов Ю.Ф. и др. Анализ ящурных антигенов и антител в реакции диффузной преципитации -Акт.вопр.вет.вирусологии М., 1965- 4.1 — с.58-59

72. Онуфриев В.П., Кравец И.Л., Швецов Ю.Ф. и др. Реакция диффузной микропреципитации при ящуре. — Вопр.вет.вирусологии. М., 1966- т.2 - с. 120-134

73. Павлов В.Г., Рахманов A.M., Смирнов В.И. Особенности строения олеогранулем у свиней при испытании противоящурной эмульсионной вакцины с разными маслами. Акт.пробл.вет.вирусологии - Владимир, 1978 - с.65-61

74. Павлов В.Г., Рахманов A.M., Смирнов В.И. и др. Морфологические изменения у крупного рогатого скота, привитого эмульсионной вакциной. Акт.вопр.пат-анат.диагностики болезней животных. - Л., 1982- с.237-239

75. Петров Р.В., Кабанов В.А., Хаитов P.M. Модификация иммунного ответа при помощи антигена, связанного с неприродными полиэлектролитами. Журн.микробиол., 1981, № 2 - с.58-63

76. Петров Р.В., Кабанов В.А., Хаитов P.M. Искусственные антигены и вакцины. Иммунология- 1986, № 1 - с.5-24

77. Петров В.Н., Рыбаков С.С., Павлов A.B. и др. Синтез и изучение антигенных и иммуногенных свойств пептидов фрагментов VP1 вируса ящура типов А, О и Азия-1. - Ящур- Владимир, 1992 -4. 2 -с. 77-9381

78. Пешков А.Д. Реактогенность и морфологические показатели крови овец при комплексной и ассоциированной вакцинации против ящура и клостридиозов. Акт.пробл.вет.вирусологии и микробиологии -Владимир, 1987- с.20-22

79. Плецитый К.Д. Витамины в иммунном ответе. Тер.арх. 1980 № 2 - с. 19-23

80. Плецитый К.Д. Витамины и иммунитет. 1. Аскорбиновая кислота. -Вопр.питания 1986, № 6 - с.3-9

81. Пронин И. А. Определение иммуногенной активности инактивированной противоящурной вакцины на лабораторных животных и крупном рогатом скоте. Автореф.дисс.канд.вет.наук - Покров, 1970 -с.19

82. Пронин И.А. Изучение иммунореактивности мышей при введении противоящурной вакцины. Акт.пробл.вет.вирусологии. - Владимир, 1976- ч. 2- с.34-35

83. Пронина H.A. Изучение сапониновой термовакцины из культурального вируса ящура А22. Автореф.дисс.канд.вет.наук.-Покров, 1969 - с.20

84. Пронина H.A., Рахманов A.M., Гетманский О.И. и др. Производственные испытания новых противоящурных вакцин. К новой стратегии борьбы с ящуром. - Владимир, 1991 - ч. 1 - с. 55-5682

85. Равилов А.З., Пронин И.А., Никонов В.И. и др. К методике контроля иммуногенной активности противоящурных вакцин. -Науч.тр.КВИ Казань, КВИ, 1980 - т. 133 -с.40-42

86. Рамон Г. Сорок лет исследовательской работы. М., Медгиз, 1962 -с.459

87. Ратнер JI.C. Активная иммунизация скота против ящура гидроокись алюминиевой вакциной. Вестн.с-х науки. - Ветеринария, 1941, № 1 - с.5-11

88. Ратнер Л.С., Грибанов В.Н. Противоящурная вакцина ВИЭВ и ее практическое применение. Ветеринария, 1954, № 9 - с.33-37

89. Рахманов A.M., Павлов В.Г., Удалых М.Г. и др. Иммуноморфологические реакции при применении противоящурной вакцины с различным содержанием адъювантов и антигена. Ящур. -Владимир, 1974 - т.2 - с. 120-121

90. Ререр X. Ящур М., Колос, 1971 - с.431

91. Рогожин С.П., Шмаленко Т.Г., Пухов В.А. и др. Влияние величины рН при синтезе алюмогидрогеля на его физико-химические свойства. -Передовой науч.-произв.опыт в биол. пром-ти.- М., 1985 вып. 5 - с. 1-3

92. Салажов Е.Л., Кулешова Л.А., Бондаренко В.Е. и др. Сравнительное изучение иммуногенной активности противоящурной вакцины на крупном рогатом скоте и морских свинках. Биолог.препараты против инфек.болезней животных - М., 1981 - с. 77-8283

93. Самуйленко А.Я. Сорбенты и иммуногенная активность противоящурных вакцин. Науч.основы технологии и пром.пр-ва вет.биол.преп. - М., 1981 -с. 159-160

94. Самуйленко А.Я. Зависимость уровня специфического местного и гуморального иммунитета у вакцинированного крупного рогатого скота от компонентного состава инактивированных противоящурных вакцин. -Акт.пробл.вет.вирусологии Владимир, 1983 - с.93-95

95. Самуйленко А.Я. Иммунологические аспекты изготовления инактивированных противоящурных вакцин. Пробл.вет.иммунологии -М., 1985 - с.139-141

96. Самуйленко А.Я., Скичко Н.Д., Еремец В.И. и др. Эффективность бивалентной (О, А) эмульсионной вакцины из вируса ящура, репродуцированного на эксплантатах эпителия языка крупного рогатого скота. акт.пробл.вет.вирусологии - Владимир, 1987-ч. 1 -с.32-34

97. Самуйленко А.Я., Белоусов В.И., Кузнецов П.П. и др. Использование адъювантов, способов их приготовления, контроля и применения при разработке противоящурной и других вакцин. -Метер.семинара спец.стран-чл. СЭВ Владимир, 1990 - с.26-27

98. Сероджев А. Т. Культивирование вируса ящура в культуре первичных и перевиваемых клеток почек ягнят. -Автореф.дисс.канд.вет.наук -Владимир, 1976 с.2284

99. Сероджев А.Т., Карпанина JI.B. и др.Динамика антителообразования у крупного рогатого скота после применения трехвалентной противояшурной вакцины.- Акт.пробл.вет.вирусологии.-Владимир, 1980 -с.75

100. Сидоров И.В. Изучение иммунитета у свиней, привитых противоящурными препаратами. Автореф.дисс.канд.вет.наук - Харьков, 1975 - с.20

101. Смертин В.П., Свиридов A.A. Постановка реакции нейтрализации вируса ящура.- Ветеринария, 1975, № 1 с.97-99

102. Смертин В.П., Свиридов A.A. Сравнительное изучение двух вариантов методики постановки реакции нейтральзации вируса ящура. -Сибирский вестник с-х науки. 1975, № 1 с. 71-76

103. Собко А.И., Соколов J1.H., Кошецян Э.Г и др. Серологический метод оценки напряженности противоящурного иммунитета. -Акт.вопр.вет. вирусологии. Владимир, 1976, ч.2 -с. 16-17

104. Соловьев В.Д., Бектемиров Т.А. Интерферон в теории и практике медицины. М., Медицина, 1981 - с.400

105. Соловьев В.Д., Баландин И.Г. Современное состояние учения об интерфероне. Достижения и перспективы. Иммунология, 1981, № 3 - с. 53-5885

106. Тальман Г., Неклер А. Сравнительное испытание противоящурных адсорбированных и эмульсионных вакцин для свиней. Матер.П симп.спец.стран-чл.СЭВ - София, 1988 - с.205-213

107. Текерликов П., Митев Г. Использование непрямой реакции связывания комплемента при исследовании вируса ящура. -Вест.мед.науки, 1976, № 7- с.35-41

108. Удалых М.Г., Дудников А.И., Мачульская К.В. и др. Сорбция лапинизированного вируса ящура гидратом окиси алюминия, изготовленным различными методами. Ящур. - Владимир, 1974 - ч.2 -с.36-37

109. Улупов H.A., Дудников А.И., Онуфриев В.П. Способ приготовления противоящурной вакцины. А.с.СССР №684880. Заявл.06.10.77

110. Улупов H.A., Михалишин В.В., Дудников А.И. и др. Эффективность противоящурной вакцины, содержащей двуокись кремния в качестве адсорбента-адъюванта. Матер.семин.спец.стран-чл.СЭВ -Владимир, 1990-с. 11-12

111. Улупов H.A., Михалишин В.В., Дудников А.И. и др. Иммунобиологические свойства противоящурной вакцины, изготовленной на основе двуокиси кремния. К новой стратегии борьбы с ящуром. Междунар.конф.- Владимир, 1991 - с.73-7486

112. Фишелевич М.А., Русецкий К. А. Испытание эффективности противоящурной вакцины ВИЭВ. Науч.тр.Белорусского ин-та животноводства. 195 8, 1 -с.317-321

113. Флаксел П., Губик Р., Новак Б. Напряженность и продолжительность иммунитета против ящура у вакцинированных крупного рогатого скота и свиней. Матер.И симп.спец.стран-чл.СЭВ -София, 1988-с.23 8-242

114. Франек Ф., Незлин Р. Изучение роли различных пептидных цепей антитела в реакции антиген-антитело. -Биохимия, 1963, с. 193-200

115. Хаитов P.M., Нариманов А.Ш., Завгородний С.Г. Отмена иммунологической толерантности и эффекта Т-супрессоров синтетическими полиэлектролитами. Иммунология, 1980, №2 - с.47-50

116. Хорьков И.А., Соболев В.В., Скичко Н.Д. Определение антител к вирусу ящура с помощью РПГА. Ветеринария, 1974, № 1 - с. 106-107

117. Хухоров М.В., Байбаков Т.З., Голота Н.Д. Изучение постинфекционного иммунитета у коров, переболевших ящуром типа А22. Акт.вопр.вет.вирусологии.- Владимир, 1976, ч.2 - с. 6-8

118. Цымбал В.И. Изучение иммунитета при ящуре посредством реакции диффузной преципитации, конглютинации и угнетения связывания комплемента. Акт.вопр.вет.вирусологии. М., 1967, ч.1 -с. 180-18287

119. Цымбал В.И. Изучение иммунобиологического состояния организма крупного рогатого скота, переболевшего ящуром типа А, варианта А22, посредством серологических методов. Автореф. дисс. канд.вет наук. Харьков, 1970 с. 19

120. Чунаев Ю.В., Пронина H.A., Плотников В.Т. и др. Изучение иммуногенности противоящурной бивалентной универсальной вакцины. -К новой стратегии борьбы с ящуром. Владимир, 1991 — 4.1 — с.74-75

121. Шажко Ж.А. Реакция нейтролизации на культуре перевиваемых клеток и ее использование для изучения иммунитета при ящуре. Автореф.дисс.канд.вет.наук. М., 1967 с.22

122. Шажко Л.Ф., Удалых М.Г. Сравнительная оценка иммуногенности противоящурных формолвакцин, приготовленных с гидратом окиси алюминия и фосфатом кальция. Ящур. - Владимир, 1970 - с.56-57

123. Шажко Л.Ф. Изучение серологических и физико-химических свойств противоящурных антител у лабораторных животных. -Акт.пробл.вет.вирусологии Владимир, 1977 - с. 126-128

124. Швецов Ю.Ф. Идентификация вируса ящура посредством реакции угнетения связывания комплемента и реакции гемаглютинации. Автореф. дисс.канд.вет.наук Белая церковь, 1978 -с.135-136

125. Шипилов В.И. Разработка технологии изготовления противоящурных вакцин на основе концентрированных антигенов. -Дисс.канд.вет.наук Владимир, 198788

126. Шипилов В.И., Смирнов В.И., Швецов Ю.Ф. и др. Оптимизация компоновки моновалентных антигенов в трехвалентном препарате с учетом количественного содержания 146S компонента вируса ящура. — К новой стратегии борьбы с ящуром. Владимир, 1991 - ч.1- с.43-44

127. Шмаленко Т.Г., Пухов В.А., Галкин Н.И. и др. Свойства алюмогидрогеля, полученного с применением механизированного способа отмывки на нутчфильтрах. передовой науч.-произв.опыт в биол.пром-ти. - М., 1984, вып. II - с. 4-6

128. Яременко H.A., Гусев A.A., Старов С.К. и др. Результаты исследования иммуногенных свойств вакцины, изготовленной из лапинизированного вируса ящура Азия-1, в зависимости от срока хранения. Акт.пробл.вет.вирусологии. - Владимир, 1987 - ч.1- с.29-30

129. Abarason D., Mesguita I.A., Sallua S., Perez Rama R. Emulsificante montanide 888 para la preparación de vacuna antiaftosa con adjuvante oleoso. -Bol.Centro Panamer. Fiebre Añosa. 1982, № 45-46. р. 51-53

130. Alterauge W. Uber das Prpblem der Immunisierung des Schweines gegen Maul-und-Klauenseuche. Mh. Tierh., 1962 - V.14, № 5 - p. 148-149

131. Anderson E.C., Masters R.C., Mowatt G.N. Immune response of pigs to inactivanted foot-and-mouth disease vaccines. Response to-dextran and saponin adjuvanted vaccines. Res.Vet.Sci., 1971, V. 12 - p.352-357

132. Armbruster O., Deck W., Garbe H.G., e.a. Herstellung und Wirsamkeitsnachweis mono-und trivalenter MKS Vakzinen aus virus von Nierenzellkulturen. Mh. Tierheilk., 1959, 11- p.254-259

133. Armbruster O., Garbe H.G., Pilz W., Schweckendiek O.E. Zur Problem der aktiven Immunisierung des Schweines gegen MKS mit Verschiedenartigen Vakzinen. Vet.Med.Nachr., 1960- p.75-80

134. Astidillo V.M., de Mello P.A. Cjst and effectiveness analysis of two foot-and-mouth disease vaccination procedures/ Bol. CFFA, 1980, № 37-38 -p. 57-63

135. Ayme G., Caroff M., e.a. Biological activities of tragments derived from Bordetella pertussis endotoxin: Isolation of a monoxis, Schwartzman negative lopid A possessing high adjuvant properties. - Ingect.Immun.,1980 -V.27 - p/ 739-745

136. Bahnemann H., de Mello A., Abaracon D., e.a. Immunogenicity in cattle of foot-and-mouth disease vaccines inactivated with binary ethylenimine. -XIV-TH Conf.OYE. Comm.FAMD, Paris, 11-14 March 1975.10.- p.3 tabl.

137. Bahnemann H., Mesquita I., Astudille V., e.a. The production and application of an oil adjuvant vaccine against foot-and-mouth disease in cattle. Mol.approaches Anim. Technol. - London, 1987 — p.628-64090

138. Bangham A.D., Horme B.W. Action of saponin on biological cell membranes. Nature (London), 1962 - V. 196 - p.952

139. Bachnemann H.G. Large scale application of oil adjuvant foot-and-mouth disease vaccine. Europ.Commiss.Control FMD - Rio de Janeiro.Brazil, 15-18 oct. 1985 -Rome, 1986-p/132-135

140. Bachrach H.L., Breese S., Hess W. e.a. Inactivation of foot-and-mouth disease virus by pH and temperature changes and by formaldegyd. Proc.Soc.Exper.Biol.Med., 1957, 95 -p. 147

141. Basarab O., Pay T. The protection of fattening pigs against foot and mouth disease with an oil-adjuvant vaccint. -Rev.Sci.Techn.Off.Intern.Epizoot.-1982 -V.l, № 4 p. 1147-1154

142. Bauer K., Wittmann G., Geilhausen H., Irion E. Die Schutzimfung von Schweinen mit einer DEAE-Dextran-antigen bivalenten Mfbl-und-Klauenseuchevalzine. Berl.Und Munch.Tièrarztl.Wschr. - 1974- Bd.87, № 9 -p. 170-173

143. Bayramoglu O.S., Yalim Y.N. Bentonid used as an adjuvant in the preparation of foot-and-mouth disease vaccine. Europ.Commiss.Control FMD. Ankara, 23-26 Sept. 1970 - Rome, 1971 -p.183-187

144. Bayramoglu O.S., Yalim Y.N. Use of bentonite as an adjuvant in the preparation of FMD vaccine. Bull.Off.Intern.Epizoot., 1974 - V.81, № 11 -12 -p. 1311-131891

145. Bekkum Van J.G., Frenkel H.S., Nathans I. Den enting van tegen monden Kiauwzeer. Tijdschr. Diergeneesk., 1963,88 - p.1936-1944

146. Bekkum Van J.G. Use and experiences with Frenketype vaccine.- 3 Inter-Amer. Mtg.En FMD and Zoonoses Control.(Buenos Aires, april 1970) -Washington, PAHO, 1971 Publ. № 218 - p. 47-51

147. Berlin B.S. Relation between physical properties of adjuvant vaccine made with petroleum synthetic, or vegetable oils and antibody response. -Fed.Proc. 1957-V.16-p.406

148. Berlin B.S. Chemical and biological properties of Arlacel A. Ann.Allg. 1963-V.21 -p.82-90

149. Bittle S.J., Houghten R.A., Brown F. Carriers and adjuvants for chemically synthesized antigens.- Advances in Carriers Adjuvants Vet.Biologics. Jowa, 1986 p. 151 -157

150. Bomford R. Saponin and other haemoly sins (vitamin A, aliphatic amines, polyene antibiotics) as adjuvants for SRBC in the mouse. Evidence in saponin adjuvanticity. Int.Aech.Allergy Appl. Immunol, 1980- V.63-p.l70-177

151. Bomford R. The adjuvant activity of fatty acid esters. The role of acyl chain length and degree of saturation.- Immunology, 1981-V.44- p. 187-192

152. Bomford R. Studies on the cellular site of action of the adjuvant activity of saponin for sheep erythrocytes. Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. 1982-V.67-p.127-13192

153. Brown F., Crick J. Spesific precipitia reactions with the viruses of foot-and-mouth disease and vesicular stomatitic. Nature, 1957, 179 - p. 316

154. Brown F., Crick J. Application of agar gel precipitin test to the study of the virus of foot-and-mouth disease. Virology, 1958, 5- p. 133

155. Brooksby J.B., Wardle E. Titration of the virus of foot-and-mouth diseanse in culture. J.Hyg.Cambr., 1954, 52,p.87-99

156. Brooksby J.B. Intervention a la IX conference de la Cjmmission permanente de la fievre aphteuse. Bull.Off.Intern.Epiz.,1960 - 57- p.847

157. Brooksby J.B. Tissue culture vaccines (BHK) in foot-and-mouth disease control. In: 3 Inter-Amer.MTG.FAMD and Zoonoses Control (Buenos Aires, 14-17 April 1970) - Washington, PAHO, 1971 -p. 52-57

158. Camand R., Fontaine J., Petermann H.G., Mackoviak C. Le controle du vaccin antiaphteux actuel inactive.- Ber.Symp. Intern.Virol.vet.Lyon, 23-24 may 1962- p.89

159. Carmenes P. Dietilaminoetil-dextran (DEAE-D) comoadjuvante de la immunidad. Anales Fac.Vet.Leon, 1978 (1980)- V.24 - №1 -p.95-108

160. Chedid L. Neuroimmunopharmacological activities of muramyl peptides. Progr.Immunol. 6 th Int.Congr.Immunol.,1986- V.6 -p.915-923

161. Clark A.I. Antigen delivered by biodegradable polymers may provide long-lasting immunity. -Res.Resour.Rep.,1987 -V.l 1№12 p.1-493

162. Cunha R.G., Honigman M.N. A comparison of serum tests in mice for the detection of FMD antibody. Amer.J.Vet. Res., 1963, 24 -p.371

163. Deply L. Sur les anavaccins saponines antiaphteux. -Bull. Acad.Vet.France, 1959-V.32 № 9 -p.571-577

164. Dhennin L. Immunisation du porc contre la fievre aphteuse. Rec.Med.Vet., 1976 -152,3 p. 182-188

165. De Mello P.A. The use of oil adjuvanted foot and mouth disease vaccine in endemic areas. - Bol.Centro Panamer.Fiebre Añosa - 1982,№45-46 -p.33-42

166. Dohotaru V.,Muntiu N., Bercan A. e.a. Asupra prepararii unui vaccin antiaftos pentru porc.- Lucr.Inst.Cercet.Vet.Bioprep. «Pasteur», 1968, 5 -p. 1727

167. Espinet R.G. Nuevo typo de vacuna antiaftosa a comlejo glucovirico. -Gas.Vet.Buenos Aires, 1951, 13 p.265

168. Espinet R.G. Vacunación antiaftosa, ruptures de imunidad Fallas de vacinas. Gas.Vet.- Buenos Aires, 1960, 22, 126 - p. 175-181

169. Espinet R.G. Posibilidades de una vacuna antiaftosa a silice de diatomeas. Comunication.- Gas.Vet., 1977 V.39 № 321 -p.304-31794

170. Fedida M. Etude quantitative de L'état immunitairo post-vaccinale et des interrelations entre ses divere aspecte dans une virose animale, la fievre aphteuse.-These doct., Leon,1971-p.307

171. Fedida M., Dannacher G., Coudert M. e.a. Le contrôle d'activité des vaccine antiaphteux.- Int.Symp.on FMD, Deelop. In Biol.Stand., 1976,V.35 -p.243-271

172. Fernandez A.A., Olascoaga C.R., Bahnemann H.G. e.a. Production and quality control of food and mouth disease vaccine in South America. -Europ.Commiss.Control FMD Rio de Janeiro, Brazil, 15-18 Oct. 1985 -Rome, 1986- p.50-55

173. Fontaine J., Terre J. Le contrôle des vaccine antiaphteux inactives. -Rev.Med.Vet., 1971, 122, № 3 -p.289-322

174. Forgacs A., Pernyi T., Soluom F. Kontrollmethoden zur standartisiezung der emulsionsimfstoffe. Tagunsber.Acad.Landwirtsch. - Wiss.DDR ,1984, №228- p.219-228

175. Francis M.J., Fry C.M., Rowlands D.L.,e.a/ Immunological Priming with syntetic peptides of foot and mooth disease virus. J.Gen.Virol.,1985 - V.66

176. Freund J. The effect of paraffin oil an mycobacteria on antibody formation and sensitization: A review. Amer.J.Clin. Path., 1951 - V.21- p. 645-656

177. Gagliardi G., Zoletto R., Borghi G. L'efecte adiuvante della saponina nel vaccine antiaftose. Vet.Ital., 1963, 17 - p.721-72895

178. Gadliardi G., Zoletto R. La vaccinaziona anti afyosa del vitelli. -Vet.ItaL, 1972, V.23,№ 5-6 -p.328-332

179. Gall D., Knight P.A. Adjuvant activity of polyelectrolytes. -Immunoljgy, 1972, V.23- p. 569-575

180. Gayot G., Dhennin L. Loi dose-effect de Tantigene antiaphteux sur sourie ansaquines.- C.R.Acad.Sci.,1964, 258 (7) -p.2236-2239

181. Gayot G., Dhennin L. Utilisation Tune sonche aphteuse murinises pour la determination du potenciel antigenique du vaccin antiaphteux inactive.- Bull. Off. Intern.Eriz., 1969,61 (8-10)-p. 1079-1089

182. Ginsburg H.S. Serum and tisseum inhibitors of virus. Bact.Rev., 1960, 24-p. 141-150

183. Girard H., Mackowiak C. La culture du virus aphteux au stade industriel. Rev.Immonol., 1953,17,4-5 - p. 224-239

184. Girard H., Bayramoglu O., Unluleblebici N e.a. Advantages and disadvantages of saponin used as adjuvant in foot and mouth disease vaccine. -Europ.Commiss.Control FMD Lindholm, Denmark, 17-18 Sept. 1968- Rome, 1969 -p.15-21

185. Glouert H.M., Dingle J.T. e.a. Action of saponin on biological cell membranes. Nature (London)- 1962- V.196- p. 95396

186. Glenny A.T., Pope C.G. e.a. The antigenic value of the foxine-antitoxine precipitate of Ramon. J.Patnol.Bacteriol.,1926-V.29-p.31-40

187. Gomes J., Sutmoller P. Cases Olascoaga R. Response of cattle to foot and mouth disease virus exposure one year after immunization with oil adjuvanted foot and mouth disease vaccine. Bol.CPFA ,1980, № 37-38- p. 31-35

188. Henderson W.M. The quantitative study of foot and mouth disease virus.- Rep.Ser.Agric.Res.Council. London, 1949, №8-p.49

189. Henderson W.M. A comparison of different routen of inoculation of cattle for detection of the virus of foot and mouth disease. J.Hyg., 1952,50-p. 183-194

190. Henderson W.M., Galloway I.A. The use of culture virus in the preparation of foot and mouth disease vaccine/ Hygiene, 1953 , 51- p.546-558

191. Herbert W.J. Injectable emulsion Containing antigens. -naT.BejiHKo6pHTamffl № 1080994io Kji.MKH A 61, 3/62. 3a*bji. 25.10.63.Ony6n. 31.08.67

192. Holf L.B. Oily adjuvants. Symp.Gen.Immunobiol.Stand.,, 1967, V.6 -p/131-136

193. Kucsera Gy. Experiments on active immunization of pigs against foot and mouth disease.- Acta Vet.Hung., 1971,21,2-3 p. 175-17697

194. Labecka W. The immunizing potency of foot and mouth disease vaccines for swines. Asta Microbiol.Polonica (ser.A), 1974,6,1,132. FAMD Bull., 1974, 13,7- p.78

195. Larenaudie B., Senal E.S. Titrage automatique des anticorps aphteux par la metode S.E.C. appliqués a Tauto-analyser Technicon. -Europ.Comm.Control FMD, 23-26 Sept. 1970, Rome, 1971 p. 128-135

196. Lidermann Ht., Lidermann H. Synthetische Vakzine (Ubersichtsreferat) Mh.Vet.Med.,1987 - Bd. 42, 23 -p.841-845

197. Lucam F., Fedida M. Une nouvelle methode quantitative pour F appreciation de F immunité antiaphteuse.- Symp.Int.Virol.,27-29 juin 1958 -p.l 17-122

198. Lucam F., Mackowiak C. Methodes et norms pour une standardization des vaccine antiaphteux.- Bull.Off.Intern.Epiz.,1960,53-p.743

199. Lucam F., Fedida M., Dannacher G. Le contrôle officiai français des vaccine antiahyteux.- Bull.Off.Intern.Epiz., 1966,65 -p.385-418

200. Mackorwiak C. Relation entre titre d'anticorps neutralisants et protection des animaux après vaccination antiaphteuse. Ann. Inst.Pasteur, 1962,103-p.252

201. Mackorwiak C. e.a. Repport of the meeting of the research group of the Standing technical committee of the institut français de la Fievre aphteuse.-Rome, 1966 p.6598

202. Marucci A.A. Detection of FMD antibody in vaccinated cattle by direct complement fixation.-Amer.J.Vet.Res., 1958, 19-p.979

203. McKercher P.D., Morgan D.O. Immune response of swine to revaccination with an oil adjuvanted inactivated foot and mouth disease virus vaccine. Report Mtg.Res.Group.- FAO- Brescia Rome, 1970 -p. 170-176

204. McKercher P.D., Graves J.H. Oil adjuvants-treir present use in foot and mouth disease vaccines. Int.Symp.FMD - Leon, 5-8 Oct. 1976 - p. 42-43

205. McKercher P.D. Oil adjuvants: their use in veterinary biologies. -Advances in Carriers and Adjuvants for Veterinary Biologies Iowa, 1986 - p. 111-115

206. Maupas P. Mesure de Fimmunite antiaphteuse post-vaccinale par la technique de seroneutralisation sur souriceaux.- Bull. Off.Intern.Epiz.,1966, 65 -p. 2063-2070

207. Mayr A. Impfstoffe gegen die Maul-und-Klauenseuche. Zuchtungs, 1961, №33-p. 542-554

208. Michelsen E. Experimences on vaccination of pigs. Arch. Exper.Vet.-med.,1961-V.15- p.315

209. Misra J.D., Lai S.M. Studies on the efficiency of inactivated bentonite gel adsorbed foot and mouth disease monovalent type A22 vaccine.- Indian Vet.J.1990< V. 67-p.789-79499

210. Molmann H. Die active immunisierung des schweines gegen Maul-und-Klauenseuche. Arch.exp.Vet.Med.,1950, 2 -p.79-85

211. Mowat G.N. A comparison of the adjuvant effects of saponin and jil emulsions in foot-and-mouth disease vaccines for cattle. -Bull.Off.Intem.Epiz.,1974, V.81, № 11-12 -p.1319-1334

212. Ochsenfahrt K., Prange H. MKS-FlachenimpfVersuche bei Schweinen in den Landkreisen Cloppenburg und Vechta in Oldenburg DTW, 1967, 74, 9 -p.200-225

213. Oil adjuvanted foot-and-mouth disease vaccine: a cooperative stude. -Bol.CPFA, 1978, № 31-32 -p.35-40

214. Patty R.E. Inhibition of foot-and-mouth disease virus by normal bovine serum.- Amer.J.Vet.Res., 1970, 31, № 1 p. 165-171

215. Pay T.W.F. Queiques problèmes statistiques et biologiques inherents aux tests du pouvbir immunisant du vaccin antiaphteux- IV Journees Argent de Nicrobiol., Buenos Aires, 7-11 juin 1979

216. Pilz W., Garbe H.G. Betrachtungen und Versuche zur activen Immunisierung des Schweines gegen MKS. Veterinarmed. Nachr., 1965,4 -p. 225-261

217. Reynolds S.A., Harrington D.G. e.a. Adjuvant activity of a novel metabolizable lipid emulsion with inactivated viral vaccines.- Inject.Immun., 1980, V.29 -p. 937-943100

218. Richou R. e.a.Immune adjuvsnts. Mechanism of saponin action in relation to its inflammatory power.- Compt. Rend.Acad.Sci., 1967 Ser.D 265 (18) -p.1349-1352

219. Rivenson S. Une nouvelle technique de controle d'efficacité des vaccines antiaphteuse sur le cobaye.- Bull.Off.Intern.Epiz., 1969, 53 p.693-706

220. Rivenson S. e.a. Ensayos con vacunas oleosas antiaftosas. Gas.Vet., 1979,№ 345 -p. 670-678

221. Rosenbush C.T., Cardarelli A.C. Utilisacion del cobayo en la modicion antigeno immunitaria de vacunas antiaftosas. Cong. Argentino de fiebre aftosa. B.Aires, 14-16 mai 1957

222. Rossi F., Campion R.L., Troisi L.F. Resultados de 14 aunes de preparación y control de vaccines antiaftosa. Gas.Vet. B.Aires, 1952, 14 -p.207

223. Rweyemamu M., Black L., Nichills V.e.a. The response of cattle tj FMD vaccination.- O.I.E XVI Conf. Commiss.Pour Teture Fievre Aphteuse Paris, 1982- p. 293-295

224. Rweyemamu M., Umehara O., Neto R.e.a. Avridine: a new syntetic adjuvant for veterinary vaccines.- X Cong.Panamen. Zootech.- Buenos Aires, 1985- Réf. 384

225. Savan M. An evaluation of the complement fixation test in stady of MKS. Amer.J.Vet.Res., 1959, 20 -p.996101

226. Skinner H.H., Henderson W.M., Brooksby J.B. Use of unweaned white in foot-and-mouth disease research.- Nature, 1952,169 p.794

227. Stellmann C. e.a. Controle quantitative du vaccin antiaphteux.III. Analise statistique par la methode de Litchfield. Rev.Ned.Vet.,1965, 116 — p.609-615

228. Tekerlekov P., Nikolaeva E. e.a. Etude du niveau at de la duree de F immunité chez les porcs immunizes a Laide d'un vaccin huileux antiaphteux/ Bull. Off. Intern.Epiz.-1978-V.89, № 11-12- p. 1055-1065

229. Terre J., Bornarel P. e a Controle quantitative du vaccin antiaphteux. Determination de la dose vaccinante 50% cyez le bovin.- Rec.Med.Vet.Alfort, 1965,141-p.1109-1130

230. Tokuda G., Warrington R.E. Detection of foot-and-mouth disease virus antibodies. 1.Passive gemagglutination test. Appl.Microbiol., 1970, 20, № 1 -p. 35-39

231. Traub E., Schwobel U. Versuche zur ergrudung des mongel haften immunisierungsvermogens von Maul-und-Klauenseuche Vakzinen bei Schweinen. Mhefte, Tierheilkd, 1959,1 l-p.1-13

232. Tschesche R., Wulff G. Chemie und Biologie der saponine.- Fortschritte der chemie den organischen Naturstoffe, 1973- p.462-606

233. Ubertini B., Nardelli L., Barei S. e.a. Vaccination antiaphteuse par un vaccin inactive des porcs d'elevagen industriels de la piain du Po.- BOIE, 1964, 61-p.9-10; 1311-1349102

234. Valle H., Carre H., rinjard P. Sun F immunization antiaphteuse par le virus formole.- Rev.gen.Med.Vet.,1926, 35- p. 129-134

235. Waldmann O., Kobe K. Die active Immunisierrung des Rindes gegen MKS Berl.Munch.Tierarztl.Wochenschr., 1938,54- p.317-320

236. Williems R. Projet d'une technique pour la standartisation du contrôle des vaccine antiaphteux.-Bull.Off.Intern.Epiz., 1953,40 p.487-493

237. Wirsing van Koenig C.H., Heymer B.e a Biological activity of Bordetella pertussis in lipopolysaccharide-resistant mice.- Infect.Immun.,1981, V.33-p. 223-230

238. Wittman G., Bauer K., Mussgay V. Immunisierungsversuche bei Schweinen gegen Maul-und-Klauenseuche unter Verwendung von EEI/DEAE-Dextran-Vakzinen. In: 13 Conf.Comm.Permanente fievre aphteuse FOIE Paris,22-26 fevrier 1972 - p. 10

239. Wittman G. DEAE-dextran, a new adjuvant in a FMD vaccine for pigs. -Proc. 2 Int.Conf70n FMD, 1973- p.65-77103

Информация о работе

Большакова, Маргарита Васильевна
кандидата биологических наук
Щелково, 2000
ВАК 03.00.23

Диссертация

Эффективность противоящурных вакцин в зависимости от используемого адъюванта - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы