Доиммунный и иммунный гомеостаз, механизмы его регуляции при отравлении тетрахлорметаном. Способы коррекции

Балашов, Сергей Владимирович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Доиммунный и иммунный гомеостаз, механизмы его регуляции при отравлении тетрахлорметаном. Способы коррекции
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Доиммунный и иммунный гомеостаз, механизмы его регуляции при отравлении тетрахлорметаном. Способы коррекции"

На правах рукописи

БАЛАШОВ СЕРГЕЙ ВЛАДИМИРОВИЧ

Доиммунный и иммунный гомеостаз, механизмы его регуляции при отравлении тетрахлорметаном. Способы коррекции

03.00.13 - физиология 14.00.36 - аллергология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Саратов 2009

003466054

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Саратовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию и Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Саратовский военный институт биологической и химической безопасности МО РФ.

Научные руководители:

заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Киричук Вячеслав Федорович;

доктор медицинских наук Лим Владимир Григорьевич.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Коршевер Натан Григорьевич;

доктор медицинских наук, профессор Щуковская Татьяна Николаевна.

Ведущая организация: Федеральное государственное

учреждение «1 Центральный научно-исследовательский институт Минобороны России »

Защита состоится « /Уу> 2009 г. в « часов на

заседании диссертационного совета Д208.094.03 при ГОУ ВПО Саратовский ГМУ Росздрава по адресу: г. Саратов, ул. Б. Казачья, 112.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Саратовский ГМУ Росздрава.

Автореферат разослан « //•>-> г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских ]

профессор Л ^^ Кодочигова А.И.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Исследование острого действия ксенобиотиков на доиммунные факторы защиты организма от инфекций (неспецифическая резистентность организма) и систему иммунитета и возможностей коррекции его нарушений при помощи перспективных иммуностимуляторов является одной из наиболее актуальных проблем физиологии, токсикологии и иммунологии [Смирнов B.C. и соавт., 2000; Забродский П.Ф. и соавт., 2007]. Это определяется применением в Вооруженных Силах Российской Федерации разнообразных токсикантов, возможными авариями на химических объектах, вероятностью террористических актов с применением высокотоксичных соединений, возрастанием бытовых интоксикаций различными соединениями, вызывающих постинтоксикационные иммунодефицитные состояния и различные инфекционные заболевания [Саватеев Н.В., Куценко С.А., 1982, 1993; Хаитов P.M. и соавт., 1995; Забродский П.Ф. и соавт., 1998, 2002, 2007; Агапов В.И. и соавт., 2004; Descotes J., 1986; Kimber I., 1996; Manibusan M.K. et al., 2007].

Тетрахлорметан (TXM) широко используется в промышленности как растворитель масел, жиров, каучука, битумов и смол; для экстрагирования жиров и алкалоидов из костей и семян; при производстве фреонов; для чистки и обезжиривания одежды в быту и производственных условиях [Тиунов JI.A., 1990; Wernke M.J., Schell J.D., 2004]. В последние годы частота острых интоксикаций хлорированными углеводородами, в частности ТХМ, и показатель смертельных исходов от отравлений не уменьшаются [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000; Забродский П.Ф. и соавт., 2007; Rusinski Р., Kolasinski Z., 2003]. Несмотря на относительно небольшую частоту острых интоксикаций данными соединениями (до 5%), они характеризуются весьма высокой смертностью отравленных (20-96%) [Курашов О.В., Троцевич В.А, 1992; Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000; Елькин А.И. и соавт., 2004]. Пациенты с отравлениями ТХМ составляют до 60% всех больных с токсическим поражением печени [Голиков С.Н. и соавт., 1986; Венгеровский А.И., Седых И.М., Саратиков A.C., 1993; Лим В.Г., 2006]. Особую опасность ТХМ может представлять при аварийных ситуациях на химических объектах, в частности, в процессе уничтожения химического оружия, когда в силу его высокой летучести, ингаляционным отравлениям может подвергаться большое количество людей. Продукты термической деструкции ТХМ образуют, наряду с многочисленными токсикантами, отравляющее вещество фосген. Нельзя исключить употребление ТХМ в качестве суррогата алкоголя или с суицидальными целями [Курашов О.В., Троцевич В. А., 1992; Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000; Лим В.Г., 2006; Забродский П.Ф.и соавт., 2007].

Одной из причин высокой смертности после острого отравления ТХМ [Кожемякин JI.A. и соавт., 1991; Лим В.Г., 2006] могут являться инфекционные осложнения и заболевания, связанные с формированием вторичного иммунодефицита. При этом влияние ТХМ на доиммунные факторы защиты организма и систему иммунитета нуждается в дальнейшем изучении [Лим В.Г., 2006; Забродский П.Ф.и соавт., 2002, 2007; Descotes J., 1986; Luster M.I. et al., 1987; Streets K.L., Wustefeld T., 2001; Louis H. et al., 2003].

Следует отметить, что вопрос о медикаментозной коррекции нарушений иммунного гомеостаза под влиянием ТХМ в постинтоксикационном периоде до сих пор изучен недостаточно [Лим В.Г., 2006; Забродский П.Ф. и соавт., 2007].

Таким образом, учитывая достаточно широкое распространение и использование в промышленности, технике и быту ТХМ, высокую летальность при отравлении им, недостаточно изученные особенности его действия на физиологические механизмы регуляции системы иммунитета, следует заключить, что проблема изучения нарушения иммунного гомеостаза при остром отравлении ТХМ, обоснование фармакологической коррекции его нарушений в постинтоксикационный период важны как в теоретическом, так и в практическом отношении.

Цель исследования: изучить неспецифические и специфические защитные механизмы крови, характер и механизмы нарушения физиологической регуляции иммуногенеза при отравлении тетрахлорметаном и разработать обоснованные направления медикаментозной коррекции выявленных нарушений.

Задачи исследования:

1. Оценить действие тетрахлорметана на неспецифические защитные механизмы крови.

2. Изучить влияние острой интоксикации тетрахлорметаном на содержание лимфоцитов в органах системы иммунитета.

3. Исследовать особенности влияния острой интоксикации тетрахлорметаном на гуморальный иммунный ответ и кооперацию Т- и В-лимфоцитов, определяющую тимусзависимое антителообразование.

4. Определить характер изменения клеточных иммунных реакций (функции Thl-клеток, антителозависимой клеточной цитотоксичности, активности естественных клеток-киллеров) после воздействия тетрахлорметана.

5. Оценить роль Thl- и ТЪ2-лимфоцитов, нарушения функции коры надпочечников, активности ацетилхолинэстеразы Т-лимфоцитов, перекисного окисления липидов в нарушении иммунного статуса под влиянием тетрахлорметана.

6. Оценить влияние средств специфической терапии отравлений тетрахлорметаном (а-токоферола ацетата и унитиола), ингибиторов и индукторов P-450-зависимых монооксигеназ на реализацию его иммунотоксических эффектов и обосновать применение иммуностимуляторов для коррекции постинтоксикационного иммунодефицитного состояния.

Научная новизна. В экспериментах на животных проведена оценка иммунотоксических эффектов ТХМ и обосновано применение иммуномодуляторов для коррекции нарушений показателей системы иммунитета. Показано, что ингибиторы P-450-зависимых монооксигеназ могут быть использованы для снижения супрессирующего действия ТХМ на показатели системы иммунитета. Проведена оценка особенностей нарушения физиологических механизмов иммуногенеза при остром воздействии ТХМ.

Острое воздействие ТХМ вызывает дозозависимое снижение доиммунных факторов защиты организма от инфекций: сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарного катионного белка, фагоцитарно-метаболической активности полиморфноядерных лейкоцитов.

При остром отравлении ТХМ снижается содержание Т-лимфоцитов в тимусе и лимфоцитов в органах системы иммунитета.

Установлено, что острая интоксикация ТХМ в прямой зависимости от дозы более выраженно снижает Т-зависимые и Т-независимые гуморальные иммунные реакции в продуктивной фазе иммуногенеза по сравнению с индуктивной.

Показано, что ТХМ в прямой зависимости от концентрации снижает эффект кооперации лимфоцитов, поражая преимущественно Т-клетки.

Экспериментально выявлено, что острое отравление ТХМ снижает функцию Т-клеток, реакцию гиперчувствительности замедленного типа (функция Thl -лимфоцитов, моноцитов и макрофагов), характеризующую как первичный, так и вторичный клеточный иммунный ответ. При остром воздействии ТХМ происходит дозозависимое уменьшение антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ) преимущественно в продуктивной фазе иммуногенеза по сравнению с индуктивной фазой. Выявлено выраженное нарастание эффекта супрессии от индуктивной к продуктивной фазе иммунного ответа при остром отравлении ТХМ.

Действие ТХМ снижает активность естественных клеток-киллеров в прямой зависимости от дозы. Редуцирующие эффекты ТХМ на функцию естественных клеток-киллеров in vitro прямо зависят от концентрации.

Впервые показано, что подострое отравление ТХМ в суммарной

дозе 1,0 ОЬ50 вызывает редукцию иммунных реакций, обусловленных активностью ТЪ2-лимфоцитов, в меньшей степени по сравнению с иммунным ответом, связанным с функцией ТЫ-клеток. Это доказано как исследованием показателей системы иммунитета, связанными с функцией лимфоцитов ТЫ- и ТЪ2-типов, так и изучением содержания в крови у-интерферона (ИФН-у) и интерлейкина-4 (ИЛ-4).

Проведена оценка роли кортикостерона, ацетилхолинэстеразы Т-клеток и перекисного окисления липидов (ПОЛ) в реализации иммунотоксического эффекта ТХМ. Выявлена обратная корреляция между концентрацией кортикостерона в крови и иммунными реакциями при остром отравлении крыс ТХМ. Доказано, что иммуносупрессия, обусловленная действием ТХМ, прямо связана со снижением активности ацетилхолинэстеразы в Т-лимфоцитах тимуса и селезенки.

В экспериментальных исследованиях показано, что ТХМ инициирует ПОЛ, что проявляется снижением активности антиоксидантной системы - АОС (редукция каталазы и пероксидазы) и увеличением содержания малонового альдегида и суммарной продукции радикалов в плазме крови. Установлена соответственно отрицательная и положительная высокая степень корреляции активности антиоксидантных ферментов и продуктов ПОЛ с показателями системы иммунитета.

Изучено влияние на формирование постинтоксикационного иммунодефицитного состояния, вызванного ТХМ, средств специфической терапии (а-токоферола ацетата и унитиола) при отравлении данным соединением, индукторов (фенобарбитал 2, 4, 6-трифенил-4Н-селенопиран) и ингибиторов (2-диэтиламиноэтил - 2,2 -дифенилпропилацетат - 8КР-525А) Р-450-зависимых монооксигеназ и иммуностимуляторов в эквитерапевтических дозах: имунофана (20 мкг/кг) и полиоксидония (700 мкг/кг). Показано, что токоферола ацетат, унитиол, 8КР-525А и иммуностимуляторы снижают иммунотоксичность ТХМ, а индукторы монооксигеназных энзимов (фенобарбитал, трифенилселенопиран) увеличивают ее. Полиоксидоний и имунофан обладают выраженной иммуностимулирующей активностью и практически полностью восстанавливают показатели системы иммунитета при интоксикации ТХМ и применении средств специфической терапии токоферола ацетат и унитиол. После интоксикации ТХМ в дозе 1,0 ЭЬ5о в условиях антидотной терапии в комбинации с полиоксидонием или имунофаном обеспечивает полное восстановление всех исследованных показателей иммунной системы.

преимущественным поражением Thl-лимфоцитов, а применение в качестве антидота ТХМ токоферола ацетата или унитиола уменьшает иммунотоксичность токсиканта. Ингибиторы Р-450-зависимых монооксигеназ, а также иммуностимуляторы имунофан и полиоксидоний могут быть использованы для восстановления показателей доиммунной защиты организма и системы иммунитета после острого отравления ТХМ.

Положения, выносимые на защиту

1. Острая интоксикация тетрахлорметаном вызывает дозозави-симое снижение доиммунных факторов защиты организма от инфекций: сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарного катионного белка, фагоцитарно-метаболической активности полиморфноядерных лейкоцитов.

2. После острого и подострого отравления тетрахлорметаном снижается содержание Т- и В-лимфоцитов в органах системы иммунитета, Т-зависимое и Т-независимое антителообразование преимущественно в индуктивной фазе антителогенеза по сравнению с продуктивным периодом антителогенеза. При этом в большей степени поражаются Thl-лимфоциты по сравнению с ТЬ2-клетками.

3. Острая интоксикация тетрахлорметаном уменьшает функцию Thl-лимфоцитов, антителозависимую клеточную цитотоксичность и активность естественных клеток-киллеров.

4. Нарушение физиологической регуляции иммунного гомеостаза при действии тетрахлорметана связано с иммуносупрессивным эффектом кортикостерона вследствие постинтоксикационной стресс-реакции (активация гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы), инициацией перекисного окисления липидов и ингибированием ацетилхолинэстеразы Т-лимфоцитов.

5. Применение токоферола ацетата, унитиола (средств специфической терапии отравлений тетрахлорметаном) в комбинации с иммуностимуляторами имунофаном и полиоксидонием восстанавливает показатели иммунного статуса после отравления тетрахлорметаном.

Апробация и реализация работы, публикации

Результаты исследований доложены на Всероссийской конференции молодых ученых «Иммунитет и аллергия: от эксперимента к клинике» (Пермь, 2006); V Всемирном конгрессе по иммунопатологии и аллергии (Москва, 2007); II Всемирном форуме по астме и респираторной аллергии (Санкт-Петербург, 2009); заседаниях секции прикладных проблем безопасности хранения и уничтожения химического

оружия Поволжского отделения академии военных наук (2006, 2007, 2008, 2009), совместных научных конференциях кафедр нормальной физиологии ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет Росздрава»; технологий уничтожения химического оружия и токсичных веществ ГОУ ВПО «Саратовский военный институт биологической и химической безопасности МО РФ»; токсикологии и медицинской защиты ГОУ ВПО «Саратовский военно-медицинский институт МО РФ» (2006, 2007, 2008 2009); научно-практических конференциях ГОУ ВПО «Саратовский военно-медицинский институт МО РФ» (2006, 2007, 2008); внедрены в педагогический процесс кафедр технологии уничтожения химического оружия и токсичных веществ ГОУ ВПО «Саратовский военный институт биологической и химической безопасности МО РФ»; физиологии ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет».

По теме диссертации опубликовано 10 работ, в том числе 5 в журналах, рекомендованных ВАК Минобразования науки РФ.

Объем и структура работы

Диссертационная работа изложена на 157 страницах машинописи (включая таблицы и список литературы), состоит из обзора литературы (глава 1); материалов и методов исследований (глава 2); собственных экспериментальных исследований (главы 3-6); заключения, выводов и практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 19 таблицами и 13 рисунками. Библиографический указатель включает 241 источник отечественной и зарубежной литературы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал и методы исследований

Исследования проводили на 712 беспородных крысах, крысах популяции Вистар, на 68 беспородных белых мышах и мышах линии СВА обоего пола. Масса крыс и мышей составляла соответственно 180-240 и 18-22 г.

ТХМ вводили внутрь в растворе оливкового масла в дозах 0,25, 0,50 и 0,75 LD50. Для оценки эффективности средств специфической терапии и иммуностимуляторов токсикант применяли в дозах 1,0 LD5o. Среднелетальная доза ТХМ для мышей и крыс составляла соответственно 8,3+0,7 и 6,5+0,6 г/кг. ТХМ применяли в дозе 1/4 DL50 в течение 4 сут. и 1/13 DL5o- в течение 13 сут. для оценки функции Thl- и ТЬ2-лимфоцитов.

Концентрацию цитокина ИФН-у исследовали в плазме крови крыс через 4 сут. после первой инъекции ТХМ, а интерлейкин ИЛ-4 - через 13 сут. после первого введения ТХМ методом ферментного иммуносорбентного анализа (ELISA) [Ройт А. и соавт., 2000], используя наборы (ELISA Kits) фирмы BioSource Int. Сроки определения цитокинов в крови соответствовали особенностям иммуногенеза при иммунизации эритроцитами барана.

При изучении влияния специфической терапии унитиолом [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000] при остром отравлении ТХМ на показатели иммунной системы препарат вводили крысам внутримышечно по общепринятой схеме: в первые сутки -15 мг/кг 3 раза с интервалом 6 ч; во вторые сутки - по 15 мг/кг 2 ра за с интервалом 8 ч; в последующие 3 сут. - по 15 мг/кг 2 раза в сут. Токоферола ацетат вводили крысам внутримышечно по 2 мл 30% - ного раствора 4 раза в сутки в течение 4 дней. Первую дозу антидотного средства животные получали через 10 мин после введения ТХМ в дозе 1,0 DL50. Обратимый ингибитор цитохрома Р-450, участвующего в биотрансформации ТХМ, 2-диэтиламиноэтил-2,2-дифенилпропилацетат (SKF-525A) вводили внутриперитонеально в дозе 50 мг/кг за 1 сут. до применения ТХМ. Кроме того, применяли в течение 3-х сут. до острой интоксикации ТХМ в дозе 1,0 ЛД50 внутрижелудочно в растворе оливкового масла индукторы цитохрома Р-450 фенобарбитал в дозе 50 мг/кг и 2,4,6-трифенил-4Н-селе-нопирана (ТФСП) в дозе 0,8 мг/кг.

В качестве иммуностимуляторов использовали в эквитерапевтичес ких дозах имунофан (20 мкг/кг) и полиоксидоний (700 мкг/кг), которые применяли в течение 4 суток. Первую дозу вводили через 5-30 мин после применения ТХМ. Дозы имму ностимуляторов для животных обоснованы данными литературы [Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 2005] и расчетными методами [Рыболовлев Ю.Р., 1982].

Кровь для исследования титра антител получали из подъязычной вены крыс. Лимфоидные органы извлекали у животных после цервикальной дислокации в различные сроки после интоксикации.

Эксперименты на животных проводили в соответствии с требованиями Женевской конвенции "International Guiding Principles for Biomedical Research Inroling Animals" (Geneva, 1990).

Содержание сывороточного лизоцима и тромбоцитарного катионного белка определяли фотонефелометрическим методом [Ремезов П.И., Башмаков Г.А., 1976]. Оценку фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов проводили общепринятыми методами: по восстановлении поглощенного фагоцитом растворимого красителя нитросинего тетразолия в нерасворимый диформазан в спонтанном и индуцированном зимозаном НСТ-тесте, по содержанию микробных клеток в нейтрофиле и среднему число поглощенных

микрорганизмов фагоцитом [Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 1995]. Лимфоциты в тимусе, селезенке, лимфатических узлах, костном мозге (исследовали клетки костного мозга бедренной кости) и крови определяли общепринятыми методами [Гольдберг Д.И., 1980].

Исследование показателей тимусзависимого гуморального иммунного ответа проводил через 5, 8, 14 и 20 сут. после острой интоксикации ТХМ. Иммунизацию эритроцитами барана выполняли путем их внутрибрюшинного введения в дозе 2-Ю8 клеток в 0,5 мл изотонического раствора хлорида натрия. Гуморальный иммунный ответ оценивали по отрицательному двоичному логарифму титра антител (ОДЛТА, -log2 ТА). Данный тест отражает способность органов системы иммунитета синтезировать IgM через 4 сут и IgG через 8 и 14 сут [Ройт А. и соавт., 2000]. Гуморальную иммунную реакцию к Т-зависимому и Т-независимому антигенам оценивали также через 4 сут по числу антителообразующих клеток в селезенке [Jeme N.K., Nordin A.A., 1963] после внутрибрюшинной иммунизации крыс ЭБ в дозе 2-Ю8 клеток в 0,5 мл изотонического раствора хлорида натрия и Vi-Ag в дозе 8 мкг/кг (использованный тест отражал синтез IgM B-клетками селезенки). Антителообразующие клетки, характеризующие продукцию IgG, определяли в селезенке на 14 сут. ( пик синтеза иммуноглобулинов IgG) [Ройт А. и соавт., 2000]. При изучении действия ТХМ на индуктивную и продуктивную фазы иммунного ответа токсикант вводили одновременно с иммунизацией или через 3 сут. после нее.

Кооперацию Т- и В- лимфоцитов под влиянием ТХМ для оценки роли Т- и B-лимфоцитов ex vivo и in vitro в обеспечение антителопродукции оценивали по методу J. К. Thomas, Т. Imamura (1986).

Оценка состояния клеточного звена системы иммунитета проводилась по функции Thl-лимфоцитов в реакции гиперчувствительности замедленного типа, антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ) [Зимин Ю.И., Ляхов В.Ф., 1985] и функции естественных клеток-киллеров [Гордиенко С. М., 1984]. Активность ацетилхолинэстеразы в Т-лимфоцитах крыс определяли методом G.M. Ellman et al. (1961), выделяя клетки по методике С.В Ширшева (1998). За единицу активности ацетилхолинэстеразы принимали мкмоль ацетилхолина, гидролизованного за 1 мин в мл суспензии, содержащей 109 Т-лимфоцитов [Kutty K.M. et al., 1976]. Активность ацетилхолинэстеразы определяли через 4 сут после отравления ТХМ.Уровень кортикостерона в плазме крови крыс исследовали флюорометрическим методом, определяя уровень неконъюгированных 11-оксикетостероидов по методике В.В. Давыдова (1970).

Перекисное окисление липидов (ПОЛ) оценивали по суммарной продукции радикалов, активности каталазы и пероксидазы и содержанию

малонового диальдегида общепринятыми методами [Валеева И.Х. и соавт., 2002; Михальчик Е.В. и соавт., 2004].

Полученные данные обрабатывались с использованием общепринятых статистических методов. Расчеты проводились на персональном компьютере с использованием пакета программ 81а1£гарЫсз.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Влияние тетрахлорметана на физиологические механизмы

регуляции доиммунных механизмов защиты от инфекций

В экспериментах на белых крысах нами показано, что острая интоксикация ТХМ в дозах 0,25; 0,50 и 0,75 ОЬ50 дозозависимо снижала сывороточную активность лизоцима через 1 сут. соответственно в 1,82; 2,60 и 3,03 раза (р<0,05), через 6 сут. - соответственно в 1,65; 2,28 и 2,68 раза (р<0,05), а через 9 сут - соответственно в 1,51; 1,57 и 1,75 раза (р<0,05).

Установлено, что при действии ТХМ в дозах 0,25; 0,50 и 0,75 ОЬзо сывороточная активность тромбоцитарного катионного белка через 1 сут снижалась соответственно в 1,45; 1,71 и 1,97 раза (р<0,05), через 6 сут -в 1,34; 1,43 и 1,54 раза (р<0,05), а через 9 сут - в 1,21; 1,32 и 1,41 раза (р<0,05) соответственно.

Нами установлено, что при действии ТХМ в дозах 0,25; 0,50 и 0,75 1Л}50 фагоцитарно-метаболическая активность нейтрофилов, оцениваемая в НСТ-тесте, через 1 сут снижалась соответственно в 1,62; 1,91 и 2,47 раза (р<0,05), через 6 сут - в 1,45; 1,68 и 2,10 раза (р<0,05), а через 9 сут - в 1,27; 1,45 и 1,61 раза (р<0,05) соответственно.

Действие ТХМ (0,75 ЛД50) приводило к существенной редукции всех четырех исследованных показателей фагоцитарно -

макрофагальной активности нейтрофилов (фагоцитарного показателя, фагоцитарного числа; НСТ-теста спонтанного и индуцированного) в течение 1-9 сут. (табл. 1). Так, фагоцитарный показатель, фагоцитарное число и показатель активности нейтрофилов в индуцированном НСТ-тесте под влиянием токсиканта через 1 сут. Снижалась - в 1,55; 2,25 и 2,48 раза (р<0,05), а через 9 сут. - в 1,32; 1,50 и 1,32 раза (р<0,05).

Таким образом, доказано, что острая интоксикация ТХМ дозозависимо снижает сывороточную активность лизоцима, тромбоцитарного катионного белка и фагоцитарно - метаболическую активность нейтрофилов более 9 сут.

2. Влияние тетрахлорметана на физиологические механизмы регуляции системы иммунитета

Установлено, что под влиянием ТХМ (0,75 ОЬ50) снижалось число Т-лимфоцитов в тимусе через 1 и 6 - е сутки в 1,58; 1,51 раза (р<0,05), а количество лимфоцитов в селезенке - в 1,43 и 1,55 раза (р<0,05) соответственно. В костном мозге количество лимфоцитов через 1 и 6 - е сут уменьшалось в 1,26 и 1,24 раза (р<0,05), а в лимфоузлах - в 1,50 и 1,39 раза (р<0,05) соответственно. Число лимфоцитов в органах системы иммунитета оставалось сниженным по сравнению с контролем до 9 сут. после отравления.

При действии ТХМ через 1 сут. в дозах 0,25; 0,50 и 0,75 БЬ50 число лимфоцитов в тимусе дозозависимо снижалось в 1,28; 1,47 и 1,58 раза (р<0,05), а в селезенке - в 1,25; 1,33 и 1,43 раза (р<0,05) соответственно.

Таблица 1.

Изменение фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов крыс под влиянием острого отравления ТХМ (0,75 ЛД50) через 1-9 сут (М+ш)

Группы Показатели Срок наблюдения, сут

1 3 6 9

Контроль ФП, % 29,7+1,8

ФЧ,% 1,8+0,2

НСТ сп, иан 0,42+0,02

НСТ инд, иан 0,62+0,02

ТХМ ФП,% 19,1+1,6* 21,3+1,7* 22,0+2,0* 22,5+2,1*

ФЧ,% 0,8+0,2* 0,9+0,2* 1,1+0,2* 1,2+0,2*

НСТ сп, иан 0,17+0,02* 0,15+0,02* 0,19+0,02* 0,25+0,03*

НСТинд, иан 0,25+0,03* 0,21 +0,03* 0,40+0,03* 0,47+0,04*

Примечание: ФП, ФЧ - соответственно фагоцитарный показатель, фагоцитарное число; НСТ - НСТ-тест спонтанный (сп) и индуцированный (инд) - индекс активности нейтрофилов (иан); в каждой серии использовали 8-12 животных; * - различие с контролем достоверно - р<0,05.

Токсикант через 2 сут. уменьшал в тимусе белых мышей содержание Т-клеток в 1,32 раза (р<0,05), а Т- и В-лимфоцитов в селезенке - в 1,17 и 1,20 (р<0,05) соответственно. В костном мозге число Т-клеток уменьшалось в 1,30 раза (р<0,05), в лимфоузлах содержание Т- и В-лимфоцитов снижалось соответственно в 1,21 и 1,67 (р<0,05).

Через 12 сут. исследованные показатели восстанавливались до контрольных значений.

Под влиянием ТХМ в дозе 0,75 ЛД50 через 1 сут. снижение содержания лимфоцитов в крови белых мышей не зарегистрировано, а через 3 сут. их содержание уменьшалось в 1,11 раза по сравнению с контролем. Через 6 сут. значимого снижения лимфоцитов в крови не выявлено.

Острая интоксикация ТХМ в индуктивной фазе иммунного ответа (введение яда одновременно с иммунизацией эритроцитами барана) в дозах 0,25, 0,50 и 0,75 DL50 приводила к редукции ОДЛТА через 5 сут. соответственно в 1,50,1,58 и 1,63 раза (р<0.05); через 8 сут. - в 1,50,1,67 и 1,82 раза (р<0.05); через 14 сут. - в 1,23, 1,36 и 1,49 раза (р<0.05); через 20 сут. - в 1,20; 1,26 и 1,29 раза (р<0.05) по сравнению с контрольными показателями соответственно.

Полученные данные свидетельствуют о том, что при остром действии ТХМ иммуносупрессивные эффекты прямо связаны с дозой яда, а токсикант дозозависимо снижает синтез IgM до 8 сут. и IgG до 20 сут. Это доказывает супрессию активности как Thl, так и Th2-лимфоцитов [Ройт А. и соавт., 2000; Maekawa Y., Yasutomo К., 2005].

При дозах ТХМ, составляющих 0,25, 0,50 и 0,75 DL50, число антителообразующих клеток к эритроцитам барана дозозависимо снижалось в 1,45

1,80 и 2,19 раза (р<0,05) соответственно (рис.1).

Более выраженные изменения числа антителообразующих клеток к эритроцитам барана были обнаружены при введении ТХМ через 3 сут после иммунизации. Так, в продуктивной фазе антителогенеза число антителообразующих клеток в селезенке при дозах ТХМ, составляющих 0,25, 0,50 и 0,75 DL50, уменьшалось соответственно в 1,88, 2,41 и 3,48 раза (р<0,05).

Изучение антителообразования по числу антителообразующих клеток в селезенке мышей, синтезирующих IgG, через 14 сут после иммунизации при остром действии ТХМ, показало (рис.2), что данный токсикант значительно снижает исследованный показатель в индуктивной (ТХМ применяли одновременно с иммунизацией) и продуктивной фазах антителогенеза (ТХМ вводили на 8 сут. после иммунизации) соответственно в 2,04 и 3,03 раза (р<0,05).

Следует отметить, что продуктивный период синтеза IgG наступает после иммунизации эритроцитами барана через 8-е сут. [Хаитов P.M. и соавт., 2002].

Рис. 1. Влияние острого действия тетрахлорметана на число АОК к эритроцитам барана (х103), синтезирующих IgM в селезенке крыс через 5 суток после иммунизации (М+т).

По оси абсцисс: доза (LD50); по оси ординат: число АОК к эритроцитам барана 103 , К - контроль; И, П - соответственно, индуктивная и продуктивная фазы иммуногенеза; в каждой серии использовалось от 7 до 9 животных; * - различие с контролем достоверно р<0,05.

Использованный метод оценки гуморальной иммунной реакции характеризует преимущественно функцию ТЪ2-лимфоцитов и В-клеток, обеспечивающих синтез IgG, составляющих около 70% общего числа молекул данного класса [Ройт А. и соавт.,2000].

В наших исследованиях показано, что ТХМ в концентрациях 1, 10 и 50 мМ в пря мой зависимости от дозы уменьшает функцию Т- и В-клеток в кооперации соответственно с В- и Т-лимфоцитами. В большей степени под влиянием ТХМ поражались Т-клетки. Так, при концентрации 10 мМ ТХМ снижал активность В- и Т-клеток соответственно в 1,62 и 1,78 раза (р<0,05), а при концентрации 50 мМ - в 2,45 и 3,27 раза (р<0,05) соответственно.

При исследовании кооперации Т- и В-клеток (ex vivo) после выделения их у мышей через 1 сут после введения им ТХМ в дозах 0,25 и 0,75 DLS0 установлено, что в прямой зависимости от дозы ТХМ поражал в большей степени Т-клетки по сравнению с В-лимфоцитами. Зарегистрировано существенное снижение активности Т-лимфоцитов в эффекте кооперации клеток после действия ТХМ в дозе 0,25 DL50 в 2,02 раза, а В-клеток - в 1,77 раза.

50 -; 40 -

Щfa

tffiffii:

tí«: гНШНп

Рис. 2. Влияние острого отравления тетрахлорметаном (0,75 LD50) на число антителообразующих клеток к эритроцитам барана 103, синтезирующим IgG в селезенке мышей через 14 сут., в индуктивной и продуктивной фазах антителогенеза (М+ш).

По оси абсцисс - фазы антителогенеза; по оси ординат - число антителообразующих клеток в селезенке 103; И, П - индуктивная и продуктивная фазы иммуногенеза; К - контроль; в каждой серии использовались от 8 до 9 животных;

* - различие с контролем достоверно - р<0,05.

В дозе 0,75 DL50 отмечалась супрессия функции Т-лимфоцитов в 2,96 раза, а В-клеток - в 2,27 раза соответственно.

Таким образом, ТХМ вызывает прямо связанную с дозой и концентрацией редукцию кооперации Т- и В-клеток ex vivo и in vitro (при действии токсиканта преимущественно на Т-клетки, по сравнению с В-лимфоцитами).

При оценке содержания антителообразующих клеток к Vi- антигену в селезенке у крыс после острой интоксикации ТХМ в индуктивной и продуктивной фазах антителогенеза через 5 суток после иммунизации данный показатель снижался соответственно в 1,37 и 1,76 раза - р<0,05.

Таким образом, под влиянием ТХМ в продуктивной фазе иммуногенеза по сравнению с индуктивным периодом происходит более выраженная редукция функции В-клеток (плазмоцитов) селезенки, синтезирующих IgM.

Исследование Т-независимого гуморального иммунного ответа после острого отравления ТХМ в индуктивной фазе иммуногенеза показало прямо связанное с дозой его снижение.

В экспериментах на крысах популяции Вистар показано, что при острой интоксикации ТХМ (0,75 DL50) происходит снижение реакции гиперчувствительности замедленного типа (без переноса клеток) в 1,67 раза (р<0,05), а при переносе спленоцитов крысам-реципиентам от крыс-доноров - в 1,46 раза. (р<0,05). Оценка реакции гиперчувствительности замедленного типа после острого отравления ТХМ показала прямо связанное с дозой ее снижение.

Таким образом, острая интоксикация ТХМ дозозависимо снижает функцию Thl-лимфоцитов как в первичном, так и вторичном клеточном иммунном ответе.

При действии ТХМ в дозе 0,75 LD50 на антителозависимую клеточную цитотоксичность селезенки крыс при иммунизации эритроцитами барана одновременно с интоксикацией (индуктивный период иммуногенеза) и через 3 сут после нее (продуктивный период) происходило статистически значимое уменьшение исследованного показателя при остром отравлении ТХМ соответственно в 1,96 и 2,71 раза (р<0,05) через 5 сут. после иммунизации. Исследование АЗКЦ после острого отравления ТХМ в индуктивной фазе иммуногенеза показало прямо связанное с дозой ее снижение.

Исследование влияния на естественные клетки-киллеры ТХМ показало (табл. 2), что происходило статистически значимое уменьшение их активности через 1, 3, 6 и 9 сут. соответственно в 3,28; 2,67; 2,34 и 1,41 раза (р<0,05).

Исследование активности естественных клеток-киллеров после острого отравления ТХМ при введении его в дозах 0,25; 0,50 и 0,75 DLjo через 3 сут. показало прямо связанное с дозой ее снижение.

При изучении действия ТХМ в концентрациях, составляющих 1; 10 и 50 мМ, на активность естественных клеток-киллеров белых мышей in vitro установлено снижение исследованного параметра соответственно в 1,41; 2,13; 3,59 (р<0,05) раза.

Необходимо заметить, что в отличие от воздействия ТХМ на естественные клетки-киллеры in vivo его эффект in vitro обусловлен действием преимущественно неметаболизированной молекулы яда. При исследовании функции естественных клеток-киллеров у мышей in vitro под влиянием ТХМ выявлено, что редукция их активности была прямо связана с концентрацией токсиканта.

Таким образом, ТХМ вызывает прямо связанную с дозой и концентрацией редукцию кооперации Т- и В-клеток ex vivo и in vitro (придействии токсиканта преимущественно на Т-клетки, по сравнению с В-лимфоцитами).

Таблица 2.

Влияние острого отравления ТХМ (0,75 ЛД50) на активность естественных клеток-киллеров крыс, ЕЦ % (М+гп)

Группы Время после интоксикации, сут

1 3 6 9

Контроль 30,2+3,1

ТХМ 9,2+1,7* 11,3+2,2* 12,8+2,4* 21,4+2,7*

Примечание: в каждой серии использовалось от 8 до 10 крыс; *- различие с контролем достоверно р<0,05.

3. Механизмы нарушения физиологической регуляции иммунного гомеостаза при отравлении тетрахлорметаном

При исследовании концентрации цитокинов в плазме крови крыс под влиянием подострого действия ТХМ установлено (табл. 3) уменьшение содержания ИФН-у на 5-е сут. и ИЛ-4 на 14-е сут. после отравления ТХМ соответственно в 2,50 и 1,58 раза (р<0,05).

При определении концентрации кортикостерона в плазме крови крыс при остром отравлении ТХМ установлено существенное увеличение его концентрации через 1-12 ч. При этом максимальное увеличение концентрации гормона отмечалось через 1 ч. Так, концентрация кортикостерона в плазме крови через 1, 6, 12 ч увеличивалась соответственно в 9,35; 3,69 и 2,23 раза (р<0,05).

Коэффициенты корреляции между концентрацией кортикостерона в крови и антителообразующих клеток к эритроцитам барана и реакцией гиперчувствительности замедленного типа при остром отравлении крыс ТХМ составляли соответственно -0,705 и -0,701 (р<0,05).

Это доказывает существенную роль кортикостерона в супрессии основных иммунных реакций при остром отравлении ТХМ. Под влиянием ТХМ активности каталазы и пероксидазы, характеризующих антиоксидантную систему, снижались соответственно в 1,95 и 1,98 раза (р<0,05).

Основной продукт ПОЛ малоновый диальдегид при остром отравлении ТХМ существенно повышался в 1,51 раза (р<0,05), а суммарная продукция радикалов - в 3,44 раза (р<0,05). Коэффициенты корреляции (г) при остром отравлении ТХМ между числом антителообразующих клеток к эритроцитам барана и содержанием каталазы, пероксидазы и малоновый диальдегид в крови крыс составляли соответственно 0,741 (р<0,05) и 0,753 (р<0,05) и -0,697 (р<0,05), а между содержанием малоновый диальдегид в крови и реакцией гиперчувствительности замедленного типа при действии ТХМ -0,696 (р<0,05).

Таблица 3.

Влияние интоксикации ТХМ на содержание цитокинов в плазме крови крыс, пг/мл (М+т, п = 7)

Цитокины Контроль ТХМ

ИФН-у 987±78 395±37*

ИЛ-4 150±22 95±10*

ИФН-у /ИЛ-4 6,6 4,2

Примечание: * -р<0,05 по сравнению с контролем.

Нами показано, что под влиянием ТХМ активность ацетилхолинэстеразы в Т- лимфоцитах тимуса и селезенки у крыс через 4 сут. снижается соответственно в 1,44 и 1,46 раза (р<0,05).

Коэффициент корреляции между активностью ацетилхолинэстеразы в Т- лимфоцитах тимуса крыс и антителообразующих клеток к эритроцитам барана, реакцией гиперчувствительности замедленного типа при остром отравлении крыс ТХМ составляли соответственно - 0,715 (р<0,05) и - 0,707 (р<0,05).

Таким образом, активация функции коры надпочечников, ПОЛ и ингибирование ацетилхолинэстеразы Т-лимфоцитов под влиянием ТХМ могут являться значимыми механизмами, приводящими к формированию постинтоксикационного иммунодефицитного состояния.

4. Коррекция нарушений физиологической регуляции иммунного гомеостаза при остром отравлении тетрахлорметаном

Нами в экспериментах на крысах после острой интоксикации ТХМ в дозе 1,0 БЬ5о применялись средства специфической терапии (антидоты: токоферола ацетат и унитиол).

Установлено, что токоферола ацетат и унитиол, а также их комбинация при острой интоксикации ТХМ частично восстанавливали фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов, гуморальные и клеточные иммунные реакции (показатели системы иммунитета после применения средств специфической терапии оставались ниже, чем в контроле). Так, токоферола ацетат и унитиол увеличивали гуморальный иммунный ответ (антителообразующие клетки к эритроцитам барана) по сравнению с показателями после интоксикации ТХМ соответственно в 1,40 и 1,45 раза (р<0,05), а комбинация токоферола ацетата и унитиола увеличивала фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов, гуморальный иммунный ответ к тимусзависимому (эритроциты барана) антигену, активности ТЫ-клеток и естественных клеток-киллеров соответственно в 1,83; 1,67; 1,32 и 1,66 раза (р<0,05).

Таким образом, унитиол, токоферол ацетат и их комбинация при использовании в качестве антидотов при остром отравлении ТХМ частично снижают вызванную им редукцию фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов, тимусзависимого гуморального иммунного ответа, активности ТЫ-лимфоцитов и естественных клеток-киллеров.

Применение индуктора Р-450-зависимых монооксигеназ фенобарбитала приводило к снижению фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов, гуморального иммунного ответа к тимусзависимому антигену, активности ТЫ-лимфоцитов и естественных клеток-киллеров соответственно в 1,50; 1,35; 1,34 и 1,17 раза (р<0,05) по сравнению с показателем после интоксикации ТХМ. Аналогичное действие оказывал и 2,4,6-трифенил-4Н-селенопиран.

Полученные данные свидетельствуют о том, что редукция параметров иммунного статуса под влиянием индукторов Р-450-зависимых монооксигеназ фенобарбитала и ТФСП после острой интоксикации ТХМ, метаболизирующегося до более токсичных соединений (феномен «летального синтеза»), более выражена, чем при изолированном действии ТХМ.

После использования ингибитора Р-450-зависимых монооксигеназ 8КР-525А внутриперитонеально в дозе 50 мг/кг за 1 сут до введения ТХМ иммуносупрессивные эффекты токсиканта статистически значимо уменьшались (р<0,05). Так, острое отравление ТХМ после введения БКР-525А приводило к увеличению фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов, гуморального иммунного ответа к тимусзависимому антигену, активности ТЫ-клеток и естественных клеток-киллеров по сравнению с показателями после действия токсиканта соответственно в 1,61; 1,38; 1,30; 2,13 раза (р<0,05). При этом все показатели оставались существенно ниже, чем в контроле (р<0,05). Препарат 8КБ-525А на исследованные показатели системы иммунитета существенного влияния не оказывал.

Ингибирование 8КР-525А монооксигеназной системы печени и лимфоидной ткани, значительно снижая биотрансформацию ТХМ, вероятно, уменьшает образование его высокотоксичных свободных радикалов - СС1+3; 0-0-СС1; НО-ОССС13; НО-СС13. метаболитов.

Таким образом, использование препарата 8КР-525А до острого отравления белых крыс ТХМ в дозе 1,0 ОЬ50, метаболизирующегося в организме до соединений с более высокой токсичностью (феномен «летального синтеза»), вызывает частичную редукцию иммунотоксических свойств ТХМ.

Данные литературы и полученные нами результаты позволяют полагать, что иммуностимуляторы имунофан и полиоксидоний могут быть использованы для восстановления доиммунных механизмов

защиты, клеточного и гуморального иммунных ответов после отравления ТХМ с целью профилактики инфекционных осложнений и заболеваний.

Кроме того, при введении при остром отравлении токоферола ацетата и унитиола, имунофана, полиоксидония, комбинации токоферола ацетата, унитиола и имунофана, комбинации токоферола ацетата, унитиола и полиоксидония летальность белых крыс снижалась соответственно на 30% (р<0,05), 10% (р<0,05), 15% (р<0,05), 35% (р<0,05), 40% (р<0,05).

Применение имунофана приводило к увеличению фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов, гуморального иммунного ответа, формированию гиперчувствительности замедленного типа (активности ТЫ-клеток) и активности естественных клеток-киллеров соответственно в 1,83; 1,65; 1,32 и 1,96 раза (р<0,05), а полиоксидония -2,44; 1,74; 1,47 и 2,19 раза (р<0,05). Использование комбинации токоферола ацетата, унитиола и имунофана, а также токоферола ацетата, унитиола и полиоксидония полностью восстанавливало данные показатели до контрольных уровней.

Следует отметить, что и полиоксидоний также (без применения антидотов ТХМ) полностью восстанавливал фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов.

Доказано, что снижение летальности животных и полное восстановление показателей иммунного статуса после острого отравления ТХМ в дозе 1,0 достигаются применением комбинации токоферола ацетата, унитиола, имунофана, а также в результате комбинированного использования токоферола ацетата, унитиола и полиоксидония.

Выводы

1. Тетрахлорметан при остром воздействии дозозависимо снижает содержание лимфоцитов в органах системы иммунитета, уменьшает кооперацию Т- и В-лимфоцитов, антителопродукцию, клеточный иммунный ответ вследствие эффекта кортикостерона, пероксидации липидов и ингибирования ацетилхолинэстеразы Т-лимфоцитов. Комбинированное применение токоферола ацетата, унитиола, полиоксидония (или имунофана) вызывает полное восстановление нарушений иммунного гомеостаза после острого отравления тетрахлорметаном

2. Под влиянием тетрахлорметана происходит дозозависимая редукция факторов доиммунной защиты организма от инфекций в течение 9 сут. Острая интоксикация токсикантом вызывает прямо связанное с дозой уменьшение активности лизоцима, тромбоцитарно-

катионного белка в сыворотке крови, а также фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов.

3. Острая интоксикация тетрахлорметаном вызывает дозозависимое снижение содержания Т- и В-лимфоцитов в органах системы иммунитета.

4. Под влиянием острого отравления тетрахлорметаном отмечаются прямо связанные с дозой редукция тимусзависимого и тимуснезависимого антителообразования, более выраженная в продуктивной фазе иммуногенеза, нарушение функции Т- и В-лимфо-цитов в эффекте кооперации клеток (ex vivo и in vitro). При этом в большей степени поражаются Т-лимфоциты по сравнению с В-клетками, а также ТЫ -лимфоциты, с функцией которых связан синтез IgM, по сравнению с ТЬ2-клетками, влияющими на продукцию В-лимфоцитами IgG.

5. Под влиянием острого отравления ТХМ в прямой зависимости от дозы снижаются функция ТЫ-лимфоцитов, участвующих в формировании гиперчувствительности замедленного типа в первичном и вторичном клеточном иммунных ответах, антителозависимая клеточная цитотоксичность, активность естественных клеток-киллеров in vivo и in vitro.

6. Тетрахлорметан в большей степени поражает Thl-клетки по сравнению с ТЬ2-лимфоцитами. Супрессия иммунных реакций при остром отравлении тетрахлорметаном находится в прямой корреляции с концентрацией кортикостерона в плазме крови, показателями перекисного окисления липидов (содержание свободных радикалов и малонового диальдегида в крови) и обратной корреляции с показателями антиоксидантной системы (активность каталазы и пероксидазы), а также с активностью ацетилхолинэстеразы Т-лимфоцитов.

7. Средства специфической терапии отравления тетрахлорметаном (токоферола ацетат, унитиол), индукторы P-450-зависимых монооксигеназ (фенобарбитал и 2,4,6-трифенил-4Н-селенопиран) уменьшают вызванную токсикантом супрессию доиммунных факторов защиты организма (параметров фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов), гуморальных и клеточных иммунных реакций, а ингибитор монооксигеназных энзимов 2-диэтиламиноэтил-2,2-дифенилпропилацетат (препарат SKF-525A), иммуностимуляторы имунофан и полиоксидоний -уменьшает обусловленную тетрахлорметаном редукцию иммунного статуса. Снижение летальности животных и полное восстановление параметров фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов и иммунного статуса после острого отравления токсикантом в дозе 1,0 DLJ0 достигаются применением комбинации токоферола ацетата, унитиола, имунофана, а также в результате комбинированного использования токоферола ацетата, унитиола и полиоксидония.

Практические рекомендации

1. В экспериментах на животных наиболее информативными показателями для оценки иммуносупрессивных эффектов тетрахлорметана являются тесты, характеризующие фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов, Т-зависимого антителообразования, активность ТЫ -клеток, естественных клеток-киллеров и ПОЛ.

2. После острого отравления тетрахлорметаном возникает супрессия показателей системы иммунитета, требующая применения фармакологических средств для ее устранения с целью профилактики и лечения возможных инфекционных осложнений и заболеваний.

3. После острого отравления тетрахлорметаном для восстановления иммунных реакций целесообразно наряду со средствами специфической терапии (а-токоферола ацетата, унитиола) применять иммуностимуляторы (полиоксидоний или имунофан).

Перечень принятых сокращений

АЗКЦ - антителозависимая клеточная цитотоксичность

АОС - антиоксидантная система

ИЛ-1 (2 и т.д.) - интерлейкин-1 (2 и т.д.)

ИФН-7 - у - интерферон

ОДЛТА - отрицательный двоичный логарифм титра антител ПОЛ - перекисное окисление липидов ТХМ - тетрахлорметан

ТЫ-(ТЬ2)-лимфоциты - Т-лимфоциты-хелперы типа 1 и 2 ТФСП - 2,4,6,-трифенил-4Н-селенопиран

Ь05о (ЛД50) - средняя смертельная доза, вызывающая смертельный исход

у 50% отравленных БКР - 525А - 2-диэтиламиноэтил-2,2-дифенилпропилацетат

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Балашов, C.B. Относительное увеличение функции Th2 - лимфоцитов при интоксикации фосфорорганическими соединениями как фактор риска развития респираторных аллергических реакций /С.В.Балашов, П.Ф.Забродский, А.М.Кадушкин // Аллергология и иммунология . 2007.-Т. 8,-№ 3. - С. 54.

2. Балашов, C.B. Влияние интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами на гуморальные иммунные реакции / C.B. Балашов, П.Ф Забродский, Н.Д. Киселев // Актуальные вопросы военной медицины и военно-медицинского образования Сб. науч. работ / Под общ. ред. М.С. Громова. - Сарат. воен.-мед. ин-т.- Саратов, 2007. - С. 154 - 156.

3. Балашов, C.B. Влияние полиоксидония на показатели системы иммунитета и перекисного окисления липидов после острых отравлений токсичными химикатами / C.B. Балашов, П.Ф.Забродский, М. Сидель-никова // Сб. науч. тр. СВИБХБ. - Саратов, 2007,- Вып. 6,- С. 115 -117.

4. Балашов, C.B. Особенности нарушения функции Thl - и Th2 - лимфоцитов при остром отравлении различными токсичными веществами / C.B. Балашов, П.Ф.Забродский, В.Ф.Киричук // Токсикол. вестник,- 2007 - №6. - С. 16 -18.

5. Балашов, C.B. Изменение токсичности и иммунотоксичности тетрахлор-метана и карбофоса под влиянием 2,4,6 - трифенил - 4Н - селенопирана и их связь с P-450-зависимой монооксигеназной системой / C.B. Балашов, П.Ф. Забродский, Б.И. Древко // Экспериментальная и клин, фармакология. 2008.Т. 71,-№6.-С. 42-44.

6. Балашов, C.B. Влияние подострого отравления тетрахлорметаном на функцию субпопуляций Т-лимфоцитов / C.B. Балашов, П.Ф. Забродский,

B.Г. Лим // Вестник новых медицинских технологий. 2008.- №4. - С. 28 -29.

7. Балашов, C.B. Изменение токсичности и иммунотоксичности химических соединений под влиянием 2, 4, 6 - трифенил- 4Н - селенопирана и их связь с P-450-зависимой монооксигеназной системой / C.B. Балашов, П.Ф. Забродский, В.Г. Мандыч // Доклады Академии военных наук. -Саратов, 2008.- № 3 (32).- С. 86 - 89.

8. Балашов, C.B. Влияние полиоксидония на показатели системы иммунитета и перекисного окисления липидов при интоксикации хлорированными углеводородами / C.B. Балашов, В.Ф. Киричук, П.Ф. Забродский // Сб. науч. тр. СВИБХБ. - Саратов, 2009. - Вып. 11.- С.19 - 21.

9. Балашов, C.B. Влияние тетрахлорметана на гуморальные и клеточные иммунные реакции / C.B. Балашов, П.Ф. Забродский, В.Ф. Киричук // Сб. науч. тр. СВИБХБ. - Саратов, 2009.- Вып. 11,- С.21-23.

10. Балашов, C.B. Изменение цитокинового профиля и редукция функций субпопуляций лимфоцитов при подостром отравлении тетрахлорметаном/

C.B. Балашов, П.Ф. Забродский, В.Ф. Киричук // Бюл. эксперим. биол. и мед.-2009. - Т. 147.-№6.-С. 55-58

Выражаю глубокую признательность и благодарность за помощь в выполнении данной работы, ценные советы и замечания заслуженному деятелю науки РФ, доктору медицинских наук, профессору Забродскому Павлу Францевичу

Подписано в печать 16. 03. 2009 г. Формат 60x841/16. Бумага офсетная. Гарнитура литературная. Печ. л. 1,0 Заказ С-80 Тираж 100 экз.

Отпечатано в ФГУП «107 ВКФ» Минобороны России. 410010, г. Саратов, ул. Техническая, 1 «а» Тел./факс: 8(8452)559-100, 559-085 E-mail: 107vkf@mail.ru

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Балашов, Сергей Владимирович

Перечень сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ТЕТРАХЛОРМЕТА-НА. НАРУШЕНИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИ ИММУНОГЕ

НЕЗА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Объект исследования и применяемые препараты.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Сывороточная активность лизоцима.

2.2.2. Тромбоцитарный катионный белок сыворотки крови.

2.2.3. Определение фагоцитарно-метаболической активности нейтрофи-лов.

2.2.4. Определение содержания лимфоцитов в органах системы иммунитета и циркулирующей крови.

2.2.5. Исследование гуморального звена иммунного ответа.

2.2.6. Оценка кооперации Т- и В- лимфоцитов ex vivo и in vitro.

2.2.7. Исследование функции Thl-лимфоцитов.

2.2.8. Изучение антителозависимой клеточной цитотоксичности.

2.2.9. Оценка активности естественных клеток- киллеров.

2.2.10. Исследование функции надпочечников, активности эстераз Т-клеток, моноцитов, макрофагов и перекисного окисления липидов.

2.3. Методы статистической обработки результатов исследований

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ ТЕТРАХЛОРМЕТАНА НА ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ ДОИММУННЫХ МЕХАНИЗМОВ ЗАЩИТЫ ОТ ИНФЕКЦИЙ.

3.1. Сывороточная активность лизоцима при остром действии ТХМ.

3.2. Активность тромбоцитарного катионного белка в сыворотке крови

3.3. Фагоцитарная активность нейтрофилов.

Резюме

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ТЕТРАХЛОРМЕТАНА НА ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ СИСТЕМЫ ИММУНИТЕ

4.1. Изменение содержания лимфоцитов в органах системы иммунитета.

4.2. Влияние ТХМ на тимусзависимый гуморальный иммунный ответ.

4.2.1. Оценка воздействия тетрахлорметана на антителообразование к ти-мусзависимому антигену в динамике по титру антител в крови.

4.2.2. Исследование действия острого отравления ТХМ на число антите-лообразующих клеток в селезенке.

4.2.3. Оценка влияния острого отравления ТХМ на число антителообра-зующих клеток в селезенке, синтезирующих IgG.

4.2.4. Нарушение кооперации Т- и В- клеток в формировании антитело-образования ex vivo и in vitro.

4.3. Влияние ТХМ на тимуснезависимый гуморальный иммунный ответ.

4.4. Оценка влияния ТХМ на клеточный иммунный ответ.

4.4.1. Изучение функции Thl- клеток.

4.4.2. Изучение антителозависимой клеточной цитотоксичности.

4.4.3. Воздействие острой интоксикации ТХМ на функцию естественных клеток-киллеров.

Резюме.

ГЛАВА 5. МЕХАНИЗМЫ НАРУШЕНИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИ ИММУННОГО ГОМЕОСТАЗА ПРИ ОТРАВЛЕНИИ ТЕТРА

ХЛОРМЕТАНОМ.

5.1. Исследование редукции функции Thl- Тп2-лимфоцитов и продуцируемых ими цитокинов в супрессии иммунных реакций.

5.2. Роль кортикостероидов и ПОЛ в супрессии иммунного ответа при отравлении тетрахлорметаном.

5.3. Оценка действия тетрахлорметана на активность ацетилхолинэстеразы Т-клеток.

Резюме.

ГЛАВА 6. КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИ ИММУННОГО ГОМЕОСТАЗА ПРИ ОСТРОМ ОТРАВЛЕНИИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОМ.

6.1. Влияние антидотов, индукторов и ингибиторов Р-450-зависимых монооксигеназ при отравлении тетрахлорметаном на фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов и параметры системы иммунитета.

6.2. Исследование действие ингибитора Р-450-зависимых монооксигеназ 2-диэтиламиноэтил-2,2-дифенилпропилацетата (8КР-525А) при остром отравлении тетрахлорметаном на фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов и иммунный ответ.

6.3. Обоснование иммунокоррекции нарушений физиологической регу ляции иммунного гомеостаза после острого отравления тетрахлорметаном

6.4. Влияние имунофана и полиоксидония на фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов и показатели иммунного ответа при острой интоксикации тетрахлорметаном с применением антидотов.

Резюме.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Доиммунный и иммунный гомеостаз, механизмы его регуляции при отравлении тетрахлорметаном. Способы коррекции"

Актуальность темы. Исследование острого действия ксенобиотиков на доиммунные факторы защиты организма от инфекций (неспецифическую резистентность организма) и систему иммунитета и возможностей коррекции их нарушений при помощи перспективных иммуностимуляторов является одной из наиболее актуальных проблем физиологии, токсикологии и иммунологии [Смирнов B.C. и соавт., 2000; Забродский П.Ф. и соавт., 2007]. Это определяется применением в Вооруженных Силах Российской Федерации разнообразных токсикантов, возможными авариями на химических объектах, вероятностью террористических актов с применением высокотоксичных соединений, возрастанием интоксикаций различными соединениями, вызывающих постинтоксикационные иммунодефицитные состояния, различные инфекционные заболевания [Саватеев Н.В., Куценко С.А., 1982, 1993; Хаитов P.M. и соавт., 1995а; Забродский П.Ф. и соавт., 1998, 2002, 2007; Агапов В.И. и соавт., 2004; Miller К., 1985; Descotes J., 1986; Luster M. J. et al., 1987; Sullivan J. В., 1989; Kimber I., 1996; Manibusan M.K., et al., 2007].

Тетрахлорметан (ТХМ) широко используется в промышленности как растворитель масел, жиров, каучука, битумов и смол; для экстрагирования жиров и алкалоидов из костей и семян; при производстве фреонов; для чистки и обезжиривания одежды в быту и производственных условиях [Тиунов JT.A., 1990; Wernke M.J., Schell J.D., 2004]. В последние годы частота острых интоксикаций хлорированными углеводородами, в частности, ТХМ и показатель смертельных исходов от отравлений не уменьшаются [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000; Забродский П.Ф. и соавт., 2007; Rusinski Р., Kolasinski Z., 2003]. Несмотря на относительно небольшую частоту острых интоксикаций данными соединениями (до 5%), они характеризуются весьма высокой смертностью отравленных (20-96%) [Курашов О.В., Троце-вич В.А, 1992; Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000; Елькин А.И. и соавт., 2004]. Пациенты с отравлениями ТХМ составляют до 60% всех больных с токсическим поражением печени [Голиков С.Н. и соавт., 1986; Венгеровский А.И., Седых И.М., Саратиков A.C., 1993; Лим В.Г., 2006]. Особую опасность ТХМ может представлять при аварийных ситуациях на химических объектах, в частности, в процессе уничтожения химического оружия, когда в силу его высокой летучести ингаляционным отравлениям может подвергаться большое количество людей. Продукты термической деструкции ТХМ (данное соединение может быть использован для пожаротушения) образуют наряду с многочисленными токсикантами отравляющее вещество фосген. Нельзя исключить употребление ТХМ в качестве суррогата алкоголя или с суицидальными целями [Курашов О.В., Троцевич В.А., 1992; Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000; Лим В.Г., 2006; Забродский П.Ф.и соавт., 2007].

Одной из причин высокой смертности после острого отравления ТХМ [Кожемякин Л.А. и соавт., 1992; Лим В.Г., 2006] могут являться инфекционные осложнения и заболевания, связанные с формированием вторичного иммунодефицита. При этом влияние ТХМ на систему иммунитета нуждается в дальнейшем изучении [Лим В.Г., 2006; Забродский П.Ф.и соавт., 2002, 2007; Descotes J., 1986; Luster M.I. et al., 1987; Streets K.L., Wustefeld T., 2001; Louis H. et al., 2003].

Изучение действия ТХМ на доиммунные факторы защиты организма и систему иммунитета имеют как теоретическое значение, раскрывая неизвестные механизмы регуляции неспецифической резистентности организма и иммуногенеза, так и практическое, позволяя проводить научно обоснованные профилактику и лечение возникающих при отравлениях данным токсикантом инфекционных, аллергических, аутоиммунных, онкологических и других заболеваний [Хаитов Р. М. и соавт., 1995; Ратькин A.B. и соавт., 2005; Забродский П.Ф., 1993, 2002, 2007; Loose L.D., 1985; Miller К., ,1985; Descotes J., 1986; Luster M. I. et al., 1987; Georgiev V. S, Yamaguuchi H., 1993; Kimber I., 1996; Popp W.,1996; Gobba F. et al., 1997; Plaa G.L., 2000; Sell S., 2000; Luster M.I., Simeonova P.P., 2001; Weber L.W. et al., 2003; Wernke M.J., Schell J.D.,

2004; Rosenberg Y.J., 2005; Masuda Y., 2006]. Следует отметить, что вопрос о медикаментозной коррекции нарушений иммунного гомеостаза под влиянием ТХМ в постинтоксикационном периоде до сих пор изучен недостаточно [Лим В.Г., 2006; Забродский П.Ф. и соавт., 2007].

Задачи исследования:

1. Оценить действие тетрахлорметана на неспецифические защитные механизмы крови.

3. Исследовать особенности влияния острой интоксикации тетрахлор метаном на гуморальный иммунный ответ и кооперацию Т- и В - лимфоцитов, определяющую тимусзависимое антителобразование.

4. Определить характер изменения клеточных иммунных реакций функции Thl-клеток, антителозависимой клеточной цитотоксичности, активности естественных клеток-киллеров) после воздействия тетрахлорметана.

5. Оценить роль Thl- и Т112-лимфоцитов, нарушения функции коры надпочечников, активности ацетилхолинэстеразы Т-лимфоцитов, перекисно-го окисления липидов в нарушении иммунного статуса под влиянием тетра-хлорметана.

6. Изучить влияние средств специфической терапии отравлений тетра-хлорметаном (а-токоферола ацетата и унитиола), ингибиторов и индукторов Р-450-зависимых монооксигеназ на реализацию его иммунотоксических эффектов и обосновать применение иммуностимуляторов для коррекции постинтоксикационного иммунодефицитного состояния.

Научная новизна. В экспериментах на животных проведена оценка иммунотоксических эффектов ТХМ и обосновано применение иммуномоду-ляторов для коррекции нарушений показателей системы иммунитета. Показано, что ингибиторы Р-450-зависимых монооксигеназ могут быть использованы для снижения супрессирующего действия ТХМ на показатели системы иммунитета. Проведена оценка особенностей нарушения физиологических механизмов иммуногенеза при остром воздействии ТХМ.

Острое воздействие ТХМ вызывает дозозависимое снижение доиммун-ных факторов защиты организма от инфекций: сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарного катионного белка, фагоцитарно-метаболической активности полиморфноядерных лейкоцитов.

Установлено, что острая интоксикация ТХМ в прямой зависимости от дозы более выраженно снижает Т-зависимые и Т-независимые гуморальные иммунные реакции в продуктивную фазу иммуногенеза по сравнению с индуктивной.

Экспериментально выявлено, что острое отравление ТХМ снижает функцию Т-клеток, реакцию гиперчувствительности замедленного типа (функция ТЫ-лимфоцитов, моноцитов и макрофагов), характеризующую как первичный, так и вторичный клеточный иммунный ответ. При остром воздействии ТХМ происходит дозозависимое уменьшение антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ) преимущественно в продуктивной фазе иммуногенеза по сравнению с индуктивной фазой. Выявлено выраженное нарастание эффекта супрессии от индуктивной к продуктивной фазе иммунного ответа при остром отравлении ТХМ.

Действие ТХМ снижает активность естественных клеток-киллеров (ЕКК) в прямой зависимости от дозы. Редуцирующие эффекты ТХМ на функцию ЕКК in vitro прямо зависят от концентрации.

Впервые показано, что подострое отравление ТХМ в суммарной дозе 1,0 DL50 вызывает редукцию иммунных реакций, обусловленных активностью ТЬ2-лимфоцитов, в меньшей степени по сравнению с иммунным ответом, связанным с функцией Thl -клеток. Это доказано как исследованием показателей системы иммунитета, связанных с функцией лимфоцитов Thl- и Th2-типов, так и изучением содержания в крови у-интерферона (ИФН-у) и интер-лейкина - 4 (ИЛ-4).

Проведена оценка роли кортикостерона, ацетилхолинэстеразы (АХЭ) Т-клеток и перекисного окисления липидов (ПОЛ) в реализации иммунотокси-ческого эффекта ТХМ. Выявлена обратная корреляция между концентрацией кортикостерона в крови и иммунными реакциями при остром отравлении крыс ТХМ. Доказано, что иммуносупрессия, обусловленная действием ТХМ, прямо связана со снижением активности ацетилхолинэстеразы в Т-лимфоцитах тимуса и селезенки.

В экспериментальных исследованиях показано, что ТХМ инициирует ПОЛ, что проявляется снижением активности антиоксидантной системы (редукция каталазы и пероксидазы) и увеличением содержания малонового альдегида и суммарной продукции радикалов в плазме крови. Установлена соответственно отрицательная и положительная высокая степень корреляции активности антиоксидантных ферментов и продуктов ПОЛ с показателями системы иммунитета.

Изучено влияние на формирование постинтоксикационного иммуноде-фицитного состояния, вызванного ТХМ, средств специфической терапии (а-токоферола ацетата и унитиола) при отравлении данным соединением, индукторов (фенобарбитал, 2,4,6-трифенил-4Н-селенопиран) и ингибиторов (2-диэтиламиноэтил-2,2-дифенилпропилацетат-8КР-525А) Р-450-зависимых монооксигеназ и иммуностимуляторов в эквитерапевтических дозах: иму-нофана (20 мкг/кг) и полиоксидония (700 мкг/кг). Показано, что а-токоферола ацетат, унитиол, 8КР-525А и иммуностимуляторы снижают им-мунотоксичность ТХМ, а индукторы монооксигеназных энзимов (фенобарбитал, 2,4,6-трифенил-4Н-селенопиран) увеличивают ее. Полиоксидоний и имунофан обладают выраженной иммуностимулирующей активностью и практически полностью восстанавливают показатели системы иммунитета при интоксикации ТХМ и применении средств специфической терапии - а-токоферола ацетата и унитиола. После интоксикации ТХМ в дозе 1,0 ОЬ50 в условиях антидотной терапии в комбинации с полиоксидонием или имуно-фаном обеспечивает полное восстановление всех исследованных показателей иммунной системы.

Практическая значимость работы заключается в доказательстве того, что в результате острой и подострой интоксикации ТХМ формирование иммунодефицитного состояния сопровождается преимущественным поражением ТЫ-лимфоцитов, а применение в качестве антидота ТХМ а-токоферола ацетата или унитиола уменьшает иммунотоксичность токсиканта. Ингибиторы Р-450-зависимых монооксигеназ, а также иммуностимуляторы имунофан и поликсидоний могут быть использованы для восстановления показателей доиммунной защиты организма и системы иммунитета после острого отравления ТХМ.

Положения, выносимые на защиту

1. Острая интоксикация тетрахлорметаном вызывает дозозависимое снижение доиммунных факторов защиты организма от инфекций: сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарного катионного белка, фагоцитарно-метаболической активности полиморфноядерных лейкоцитов.

2. После острого и подострого отравления тетрахлорметаном снижается содержание Т- и В-лимфоцитов в органах системы иммунитета, Т-зависимое и Т-независимое антителообразование преимущественно в индуктивной фазе антителогенеза по сравнению с продуктивным периодом антителогенеза. При этом в большей степени поражаются ТЫ-лимфоциты по сравнению с ТЪ2-клетками.

3. Острая интоксикация тетрахлорметаном уменьшает функцию ТЫ-лимфоцитов, антителозависимую клеточную цитотоксичность и активность естественных клеток-киллеров.

4. Нарушение физиологической регуляции иммунного гомеостаза при действии тетрахлорметана связано с иммуносупрессивным эффектом кор-тикостерона вследствие постинтоксикационной стресс-реакции (активация гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы), инициацией перекисного окисления липидов и ингибированием ацетилхолинэстеразы Т-лимфоцитов.

5. Применение а-токоферола ацетата, унитиола (средств специфической терации отравлений тетрахлорметаном) в комбинации с иммуностимуляторами имунофаном и полиоксидонием восстанавливает показатели иммунного статуса после отравления тетрахлорметаном.

Апробация и реализация работы, публикации

Результаты исследований доложены на Всероссийской конференции молодых ученых «Иммунитет и аллергия: от эксперимента к клинике» (Пермь,

2006); V Всемирном конгрессе по иммунопатологии и аллергии (Москва,

2007); II Всемирном форуме по астме и респираторной аллергии (Санкт-Петербург, 2009); межвузовской научно-практической конференции «Новые технологии в медицине» (Саратов, 2008); заседаниях секции прикладных проблем безопасности хранения и уничтожения химического оружия Поволжского отделения АВН (2006, 2007, 2008, 2009); совместных научных конференциях кафедр нормальной физиологии ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет Росздрава»; технологий уничтожения химического оружия и токсичных веществ ГОУ ВПО «Саратовский военный институт биологической и химической безопасности», токсикологии и медицинской защиты ГОУ ВПО «Саратовский военно-медицинский институт МО РФ» (2006, 2007, 2008, 2009); научно-практических конференциях ГОУ ВПО «Саратовский военно-медицинский институт Министерства обороны Российской Федерации (2006, 2007, 2008) и внедрены в педагогический процесс кафедр нормальной физиологии ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет Росздрава» и технологии уничтожения химического оружия и токсичных веществ ГОУ ВПО «Саратовский военный институт биологической и химической безопасности» По теме диссертации опубликовано 10 работ.

Объем и структура работы

Диссертационная работа изложена на 158 страницах машинописи (включая таблицы и список литературы), состоит из обзора литературы (глава 1); материалов и методов исследований (глава 2); собственных экспериментальных и клинических исследований (главы 3-6); заключения, выводов и практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 19 таблицами и 13 рисунками. Библиографический указатель включает 241 источник отечественной и зарубежной литературы.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Балашов, Сергей Владимирович

ВЫВОДЫ

1. Тетрахлорметан при остром воздействии дозозависимо снижает содержания лимфоцитов в органах системы иммунитета, уменьшает кооперацию Т- и В-лимфоцитов, антителопродукцию, клеточный иммунный ответ вследствие эффекта кортикостерона, пероксидации липидов и ингибирова-ния ацтилхолиэстеразы Т-лимфоцитов. Комбинированное применение токоферола ацетата, унитиола, полиоксидония (или имунофана) вызывает полное восстановление нарушений иммунного гомеостаза после острого отравления тетрахлорметаном.

4. Под влиянием острого отравления тетрахлорметаном отмечается прямо связанное с дозой редукция тимусзависимого и тимуснезависимого анти-телообразования, более выраженное в продуктивной фазе иммуногенеза, нарушение функции Т- и В-лимфоцитов в эффекте кооперации клеток (ex vivo и in vitro). При этом в большей степени поражаются Т-лимфоциты по сравнению с В-клетками, а также Thl-лимфоциты, с функцией которых связан синтез IgM, по сравнению с ТЬ2-клетками, влияющими на продукцию В-лимфоцитами IgG.

5. Под влиянием острого отравления ТХМ в прямой зависимости от дозы снижается функция Thl-лимфоцитов, участвующих в формировании гиперчувствительности замедленного типа в первичном и вторичном клеточном иммунном ответе, антителозависимая клеточная цитотоксичность, активность естественных клеток-киллеров in vivo и in vitro.

6. Тетрахлорметан в большей степени поражает ТЫ -клетки по сравнению с ТЪ2-лимфоцитами. Супрессия иммунных реакций при остром отравлении тетрахлорметаном находится в прямой корреляции с концентрацией кор-тикостерона в плазме крови, показателями перекисного окисления липидов (содержанием свободной продукции радикалов и малонового диальдегида в крови) и обратной корреляции с показателями антиоксидантной системы (активностью каталазы и пероксидазы), а также с активностью ацетилхолинэ-стеразы Т-лимфоцитов.

7. Средства специфической терапии отравления тетрахлорметаном (токоферола ацетата, унитиол), индукторы Р-450-зависимых монооксигеназ (фенобарбитал и 2,4,6-трифенил-4Н-селенопиран) уменьшают вызванную токсикантом супрессию доиммунных факторов защиты организма (параметров фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов), гуморальных и клеточных иммунных реакций, а ингибитор монооксигеназных энзимов диэтиламиноэтил-2,2-дифенилпропилацетат (препарат 8КР-525А), иммуностимуляторы имунофан и полиоксидоний - уменьшает обусловленную тетрахлорметаном редукцию иммунного статуса. Снижение летальности животных и полное восстановление параметров фагоцитарно-метаболической активности нейтрофилов и иммунного статуса после острого отравления токсикантом в дозе 1,0 ВЬ5о достигается применением комбинации токоферола ацетата, унитиола, имунофана, а также в результате комбинированного использования токоферола ацетата, унитиола и поли-оксидония.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В экспериментах на животных наиболее информативными показателями для оценки иммуносупрессивных эффектов тетрахлорметана являются тесты, характеризующие фагоцитарно-метаболическую активность нейтро-филов, Т-зависимого антителообразования, активность ТЫ-клеток, естет-свенных клеток-киллеров и ПОЛ.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Балашов, Сергей Владимирович, Саратов

1. Абдрашитова, Н.Ф. Состояние эритроцитарной системы и ПОЛ-окислительной активности у больных хроническим бронхитом, вдыхавших и не вдыхавших озон / Н.Ф.Абдрашитова, Ю.А.Романов // Бюлл. эксперим. биол. и мед.-2001.- Т. 132,- №9. - С.317-319.

2. Арчаков, А.И. Оксигенация биологических мембран / А.И.Арчаков. -М.: Медицина, 1993.-С.145-159.

3. Ахматова, М.А. Исследование биологических мембран при регламентировании содержания химических веществ в окружающей среде / М.А.Ахматова, Н.В.Савватеев, Л.А.Тиунов // Гиг. труда и проф. забол. 1982.-№10.-С.55-57.

4. Базарный, В.В. Действие некоторых иммуномодуляторов на гемопоэз / В.В.Базарный, А.П. Ястребов // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1993.Т. 115.-№2.-С. 53-54.

5. Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М.Л.Беленький.- 2-е изд. М.: Медицина, 1963. — 235 с.

6. Беликов, В.Г. Коррекция тимогеном нарушений физиологических механизмов регуляции иммуногенеза при остром отравлении токсичнымихимическими веществами: Автореф. дисс. . канд. мед. наук / В.Г. Беликов. Саратов, СГМУ. -2001.- С.83-95.

7. Белокрылов, Г.А. Левамин и церебролизин как иммуностимуляторы / Г.А.Белокрылов, И.В.Молчанов // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1991.- № 2.- С.165-166.

8. Белокрылов, Г.А. Сходство иммуно-, фагоцитозмодулирующих и антитоксических свойств дипептидов и составляюцих их аминокислот / Г.А.Белокрылов, О.Я.Попова, Е.И.Сорочинская // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1999,- Т. 127.- № 6.-С. 674-676.

9. Брызгина, Т.М. Изменение бласттрансформации лимфоцитов крови крыс в условиях экспериментального воздействия на печень / Т.М.Брызгина, Т.В. Мартынова // Физиолог, журн. Киев, 1985. -Т.31.-№3.-С.278-281.

10. Брызгина, Т.М. Изменение кооперации Т- и В-лимфоцитов при иммунном ответе на эритроциты барана на фоне поражения печени четы-реххлористым углеродом / Т.М. Брызгина // Физиол. журн. -1989. №1. - С.25-29.

11. Брюхин, Г. В. Антителообразующая способность клеток селезенки потомства крыс с хроническими поражениями печени / Г.В.Брюхин, Г. И.Михайлова// Физиол. журн. -1989.-Т. 35.-№2.- С. 97-99.

12. Брюхин, Г.В. Интенсивность реакции гиперчувствительности замедленного типа у потомства крыс с хроническим поражением печени / Г.В.Брюхин, Г.И. Михайлова // Физиол. журн. Киев, 1990. - Т.36. -№ 6. - С.94-100.

13. Брюхин, Г.В. Интенсивность Fc-завиеимого фагоцитоза перитониаль-ных макрофагов и моноцитов крови у потомства крыс с хроническим поражением печени / Г.В.Брюхин, А.Ю. Грачев // Физиол. журн. -1991. Т.37. - №6. - С.91-94.

14. Бухарин, О.В. Способность микроорганизмов к инактивации бактерицидного действия тромбоцитарного катионного белка (ß-лизина) / О. В. Бухарин, К.Г.Сулейманов, О.П.Чернова // Бюл. экспер. биол. и мед.-1998.-№7.- С.66-67.

15. Василенко, O.A. Характер и механизмы нарушения неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты приостром отравлении арсенитами: Автореф.дисс. . канд. мед. наук / O.A. Василенко; СГМУ. Саратов, 2004,- С.65-73.

16. Венгеровский, А.И. Эффективность ферментиндуцирующих средств при экспериментальном поражении печени тетрахлорметаном / А.И. Венгеровский, И.М.Седых, А.С.Саратиков // Эксперим. и клин, фарма-кол. 1993. - Т.56.- № 5. - С. 47-49.

17. Виноградов, В.М. Фармакология (общая, частная и основы клинической) /В.М.Виноградов, Е.В.Гембицкий, Е.А.Мухин.- Под ред.

18. B.М.Виноградова.- 2 изд., доп. и перераб.- JL: Изд-во BMA, 1986. 515 с.

19. Германчук, В.Г. Нарушения регуляции физиологических механизмов иммуногенеза при остром отравлении нитрилами: Автореф. дисс. . канд. мед. наук / В.Г. Германчук ; СВИРХБЗ. Саратов,2000.- С.76 - 82.

20. Голиков, С.Н. Общие механизмы токсического действия / С.Н. Голиков, И.В.Саноцкий, Л.А.Тиунов // -М.: Медицина, 1986. -280 с.

21. Гордиенко, С.М. Приемлемый для клинической практики метод оценки активности естественных и антителозависимых киллерных клеток /

22. C.М. Гордиенко // Лаб. дело.-1983.-№9.-С. 45-48.

23. Горизонтов, П. Д. Стресс. Система крови в механизме гомеостаза. Стресс и болезни. / П.Д. Горизонтов// Гомеостаз. М.:Медицина, 1981.-С. 538-573.

24. Гребенюк, А.Н. Общие механизмы иммуноцитологических реакций при химических воздействиях / А.Н.Гребенюк, О.И.Романенко // Сб. материалов XIII научн. докл. молодых ученых и специалистов военно-медицинской академии. СПб., 1996.- С. 21-22.

25. Гребенюк, А.Н. Нейтрофил и экстремальные воздействия / А.Н.Гребенюк, А.Е.Антушевич, В.Ф.Беженарь / Под ред. А.Н. Гребеню-ка и В.Г. Бовтюшко. СПб., 1998.- 215 с.

26. Гублер, Е. В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов / Е. В. Гублер . Л.: Медицина, 1978.-296 с.

27. Давыдова, Е.В. Лейкоцитарная защита при острых отравлениях липо-фильными ксенобиотиками / Е.В.Давыдова, Е.Ю.Бонитенко, О.И.Романенко.- Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. СПб.: ООО «Изд. Фолиант», 20046. - С. 74-75.

28. Денисенко, П.П. Роль холинореактивных систем в регуляторных процессах / П.П.Денисенко. М: Медицина, 1980.- 296 с.

29. Диксон, М. Ферменты / М.Диксон, Э. Уэбб. Пер. с англ. М.: Мир, 1982.-Т. 2.- 806 с.

30. Елизарова, Н.Л. Опиоиды в составе Т-активина: Р-эндорфин / Н.Л.Елизарова, В.Я.Арион, И.В.Зимина // Аллергология и иммунология. 2005. - Т.6.- № 2. - С. 204.

31. Елькин, А.И. Эффективность гемосорбции на синтетических сорбентах при отравлении 1,2-дихлорэтаном / Д.П.Елизаров, В.А.Даванков, С.С.Катаев // Токсикол. вестн. 2004. - №2. - С.6-8.

32. Ефремов, А. М. Исследование биотрансформации нитрила акриловой кислоты в организме животных / А.М.Ефремов // Здравоохр. Белоруссии.- 1976.-№7.- С. 85-86.

33. Забродский, П.Ф. Влияние холинергической стимуляции на формирование гиперчувствительности замедленного типа / П.Ф.Забродский,

34. A.К.Мышкина // Фармакол. и токсикол.- 1990.-№ 6.-С. 46-48.

35. Забродский, П.Ф. Механизмы иммунотропных эффектов фосфороргани-ческих соединений / П.Ф. Забродский // Бюл. эксперим. биол. и мед. — 1993.-Т 116.-№8.-С. 181-183.

36. Забродский, П. Ф. Влияние тиосульфата натрия на неспецифическую резистентность организма и иммунные реакции при остром отравлении ак-рилонитрилом / П. Ф. Забродский, С. А. Ромащенко // Эксперим. и клин, фармакол. 1998.-Т 61.-№5.-с. 56-58.

37. Забродский, П.Ф. Механизмы иммунотропных эффектов акрилонитрила / П.Ф.Забродский, В.Ф.Киричук, В.Г.Германчук.// Бюл. эксперим. биол. и мед. 2000.-Т. 129,- №5.-С. 547-549.

38. Забродский, П.Ф. Роль антихолинэстеразного механизма в супрессии антителообразования при острой интоксикации фосфорорганическими соединениями /П.Ф.Забродский, В.Ф. Киричук, В.Г.Германчук // Бюл. эксперим. биол. и мед. — 2001.-Т 131.- №5.-С. 551-553.

39. Забродский, П.Ф. Влияние ксенобиотиков на иммунный гомеостаз. / Общая токсикология. / П.Ф. Забродский// Под ред. Б.А. Курляндского,

40. B.А. Филова. М.: Медицина, 2002. - С. 352-384.

41. Забродский, П.Ф. Влияние тетрахлорметана на показатели системы иммунитета / П.Ф.Забродский, В.Ф. Киричук, В.Г.Германчук // Бюл. эксперим. биол. и мед. -20046.-Т. 137.-№1.-С. 56-58.

42. Забродский, П.Ф. Иммунотропные свойства холинергических веществ Под ред. П.Ф. Забродского / П.Ф.Забродский, В.Г.Лим, Г.М.Мальцева. -Саратов: Изд. «Научная книга», 2005. 251 с.

43. Забродский, П.Ф. Иммунотоксикология ксенобиотиков / П.Ф.Забродский, В.Г.Мандыч. Саратов: Изд. СВИБХБ, 2007.- 420 с.

44. Зарубина, И.В. Антиоксидантная защита головного мозга при острой гипоксии беметилом /И.В.Зарубина, О.П.Миронова // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2001. - Т. 133.- №2. — С. 165-167.

45. Идова, В.Г. Иммунная реакция у мышей при психоэмоциональном напряжении в условиях снижения синтеза серотонина в мозге /В.Г.Идова, М.А.Чайно, Л.В.Девойно // Сб. докл. Акад. наук, 2004. Т. 398.- №1. -С. 132-134.

46. Ильичевич, Н.В. Иммунологическая реактивность организма в условиях экспериментальных воздействий на печень / Н.В.Ильичевич, И.Н.Алексеева, Т.М.Брызгина// Иммунология. 1984. - №5. — С.65-67.

47. Каган, Ю.С. Использование индукции цитохрома Р-450 как один из новых принципов терапии отравлений фосфорорганическими инсектицидами / Ю.С Каган., Н.В.Кокшарева, Л.М.Овсянникова, // Вестн. АМН СССР.-1983.-№ 8.-С. 55-57.

48. Караулов, A.B. Молекулярно-биологическое обоснование применения имунофана в клинической практике /A.B.Караулов// Лечащий врач. -2000. -№4. -С.46-47.

49. Караулов, A.B. Клинико-иммунологическая эффективность применения имунофана при оппортунистических инфекциях /А.В.Караулов// Лечащий врач. 2000. - №5-6. - С. 28-29.

50. Караулов, A.B. Оценка различных методов иммуномониторинга при проведении иммунокоррекции /А.В.Караулов, В.Ф.Ликов, И.В.Евстигнеев// Аллергология и иммунология.- 2005. — Т.6.-№2.-С.136-137.

51. Киричук, В.Ф. Физиология крови / В.Ф.Киричук. Саратов: изд-во Саратовского ГМУ, 1999. - 106 с.

52. Кожемякин, М.И. Этиопатогенез отравлений компонентами технических жидкостей / М.И.Кожемякин, Ю.Ю.Бонитенко, Л.И. Иванова // Воен.-мед. журн. 1992. - №9. - С.36-39.

53. Козлов, В.А. Активность цитохром P-450-зависимых монооксигеназ и функции иммунокомпетентных клеток /В.А.Козлов, Г.Ю.Любимов, Н.Н.Вольский//Вестн. АМН СССР.-1991.-№ 12.-С. 8-13.

54. Козлов, В.А. Участие интерлейкина-1 в развитии Thl и ТЬ2-зависимых вариантов хронической реакции «трансплантат против хозяина» / В.А.Козлов, И.В.Сафронов, О.Т.Кадаева // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 2001. - Т. 132.- №8. - С. 185-187.

55. Конопля, А.И. Изучение иммуномодулирующего фактора выделяемого клетками селезенки при токсическом поражении печени / А.И. Конопля, В.Е. Козлов, В.Е. Ивакин // Пат. физиол. 1985. - №6. - С.45-50.

56. Конопля, E.H. Развитие иммунного ответа при сочетанном действии на организм гепатотропных ядов и высокой внешней температуры / Е.Н.Конопля, Л.Г. Прокопенко // Пат. физиол. и эксперим. терап. -1994.-№12.-С. 27-31.

57. Константинов, Б.А. Иммунореабилитация в кардиохирургии на примере больных с инфекционным эндокардитом /Б.А.Константинов, Л.И.Винницкий, В.А.Иванов // Inter. J. Immunorehabilitation. — 2000. -Vol. 2.- №1. P. 146-151.

58. Корнева, E.A. Нарушение нейрогуморальной регуляции функций иммунной систем / Е.А.Корнева // Вест. АМН СССР.- 1990.- №11.- С. 3642.

59. Коробейникова, Э.Н. Фотометрический метод определения малонового альдегида / Э.Н. Коробейникова // Лаб. дело. 1989. - №7. - С.8-10.

60. Кузнецов, В.П. Коррекция лейкинфероном иммуно-деффицитных состояний при экспериментальных токсических и медикаментозных гепатитах / В.П.Кузнецов, ДЛ.Беляев, Ю.Г.Сливинская // Тез. докл. I съезда иммунологов России.- Новокузнецк, 1992 г.- С.259.

61. Курашов, О.В. Применение ацетилцистеина в комплексном лечении больных с острым отравлением 1,2-дихлорэтаном / О.В. Курашов, В.А. Троцевич //Врачебное дело. 1992. - №10. - С. 109-111.

62. Куценко, С.А. Военная токсикология, радиобиология и медицинская защита /С.А. Куценко. СПб.: Изд. «Фолиант», 2004. - 528 с.

63. Лакин, Г.Ф. Биометрия./ Г.Ф. Лакин. М.: Высш. шк., 1980. - 293 с.

64. Лебедев, В.В. Имунофан синтетический пептидный препарат нового поколения /В.В.Лебедев, В.И.Покровский// Вестник Российской АМН.-1999,-№4.- С. 56-61.

65. Лебедев, В.В. Имунофан — синтетический пептидный препарат нового поколения: иммунологические и патогенетические аспекты клинического применения / В.В.Лебедев // Иммунология.-1999.-№1.- С. 25-30.

66. Ледванов, М. Ю. Введение в клиническую иммунологию. / М. Ю. Ледванов, В. Ф. Киричук. М: Медицина, 1996.- 141 с.

67. Лим, В.Г. Нарушение неспецифической резистентности организма и иммунного статуса при острых отравлениях спиртами и хлорированными углеводородами и их коррекция: Автореф. дисс. . докт. мед. наук / В.Г.Лим ; СГМУ. Саратов,2006,- 350 с.

68. Лужников, Е.А. Острые отравления: Руководство для врачей. 1-е изд. / Е.А. Лужников, Л.Г. Костомарова . М.:Медицина, 1989. -434 с.

69. Лужников, Е.А. Острые отравления: Руководство для врачей. 2-е изд., перераб и доп. / Е.А. Лужников, Л.Г. Костомарова.- М.:Медицина. 2000. -434 с.

70. Лукьянова, Л.Д. Об особенностях нарушений энергетического обмена при травматическом шоке и возможности их фармакологической коррекции / Л.Д.Лукьянова, Н.Н.Михайлова, Д.В.Фоменко // Бюл. эксперим. биол. и мед.-2001.-Т. 13 2.-№9.-С. 263-267.

71. Маркова, И.В. Клиническая токсикология детей и подростков./ И.В. Маркова, В.В.Афанасьева, Э.К.Цыбулькин. СПб: Изд. «Интермедиа», 1998.-304 с.

72. Мартынова, Т.В. Изменение активности антигеннеспецифических Т-хелперов и Т-супрессоров у кроликов в условиях поражения печени че-тыреххлористым углеродом / Т.В. Мартынова, Т.М. Брызгина, С.И.Павлович // Физиол. журн. 1991. - Т.37.-№1. - С.74-80.

73. Машковский, М.Д. Лекарственные средства 4.2. / М.Д. Машковский, 12-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 2001. - 205 с.

74. Медуницин, Н.В. Регуляция вакцинального иммунитета /Н.В.Медуницин // Аллергология и иммунология. 2005. - Т.6, № 2. -С. 137-139.

75. Меерсон, Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемиче-ских повреждений сердца /Ф.З.Меерсон.- М.: Медицина-1984.- 272 с.

76. Михальчик, Е.В. Профилактическое и лечебное действие комплексного антиоксидантного препарата при ожоговой травме у крыс / Е.В. Михальчик, А.В.Иванова, М.В.Ануров // Бюл. эксперим. биол. и мед. -2004. Т.138.- №9. - С.299-301.

77. Молотков, А.О. Нарушения физиологических механизмов регуляции системы иммунитета при остром отравлении фосфорорганическим соединением карбофосом: Автореф. Дисс. . канд. мед. наук /А.О.Молотков; РГМУ.- М., 2002.-24 с.

78. Мутускина, Е.А. Некоторые показатели стресс-реакции организма на разных этапах постреанимационного периода / Е.А. Мутускина, JI.A. Багдасаров, И.Е. Трубина // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2001. -Т. 133.- №1. - С. 38-41.

79. Нестерова, И.В. Стратегия и тактика иммунотерапии вторичных имму-нодефицитных состояний с инфекционным синдромом /И.В.Нестерова // Аллергология и иммунология. — 2005. — Т.6.- № 2. С. 139-140.

80. Петров Р.В. Миелопептиды и иммунный статус /Р.В. Петров, А.А.Михайлова, Л.А.Фанина // Аллергология и иммунология. — 2005. -Т.6.- № 2. С. 204.

81. Попова, Е.А. Иммунофармакотерапия имунофаном в лечении больных с гнойными менингитами /Е.А.Попова, И.И.Лисун// Inter. J. Immunorehabilitation. Физиология и патология иммунной системы. 2003.- Т. 5.-№2.- С. 252.

82. Прокопенко, Л.Г. Влияние четыреххлористого углерода на выделение иммуностимулирующего фактора спленоцитами животных / Л.Г. Прокопенко, А.И. Конопля // Фармакол. и токсикол. — 1982. №6. — С.61-65.

83. Прокопенко, Л.Г. Иммунорегуляторные факторы сыворотки при токсическом поражении печени / Л.Г. Прокопенко, Н.Н. Кедровская // Пат. физиол. и эксперим. терап. — 1983. №4. — С.56-61.

84. Прокопенко, Л.Г. Изменение функции иммунорегуляторных клеток под влиянием фактора селезенки животных, отравленных гепатотроп-ным ядом / Л.Г. Прокопенко // Пат. физиол. и эксперим. терап. 1985. -№4. - С.72-76.

85. Покровский, А.А. Биохимические методы исследования в клинике. Справочник / А.А. Покровский. М.: Медицина, 1969. - 651 с.

86. Ратькин, А.В. Гепатопротекторы препятствуют токсическому действию циклофосфана на печень крыс при ССЦ-гепатите / А.В.Ратькин, А.С.Саратиков, В.С.Чучалин // Эксперим. и клин, фармакология.-2005,-Т.68.- № 2.- С.47-50.

87. Ремезов, А. И. Методы определения естественной (неспецифической) резистентности организма / А. И. Ремезов, Г. А. Башмаков. Л.: Медицина, 1976. - 65 с.

88. Ройт, А. Иммунология Пер. с англ. / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д.Мейл -М.:Мир, 2000.- 582 с.

89. Романенко, О.И. Лейкоцитарная защита при острых отравлениях /О.И.Романенко, А.Н.Гребенюк // Морской мед. журн. -1997.- Т.4.-№4.- С. 8-11.

90. Ротенберг, Ю.С. Классификация ксенобиотиков по локализации их действия на ферментные системы митохондрий / Ю.С.Ротенберг // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1982,- №9.-С. 42-45.

91. Рыболовлев, Ю.Р. Прогнозирование действия ксенобиотиков на человека / Ю.Р. Рыболовлев // Фармакол. и токсикол. 1982. - №1. - С. 110114.

92. Саватеев, Н.В. Характеристика токсического действия веществ, представляющих опасность при разрушении промышленных объектов / Н.В. Саватеев, С.А. Куценко. Л.: ВмедА им. С.М. Кирова, 1982,- 44 с.

93. Саватеев, Н.В. Ядовитые вещества, выделяющиеся при разрушении промышленных объектов, и мероприятия по оказанию медицинской помощи пострадавшим / Н.В. Саватеев, С.А. Куценко // Воен.-мед. журн. -1993.- №6.-С. 36-40.

94. Саприн, А.Н. О взаимосвязи активности цитохрома Р-450 в лимфоцитах с их иммунной функцией / А.Н. Саприн., A.B. Караулов, Ю.И. Хро-менков // Докл. АН СССР.-1982.-Т. 267.- № 5.-С. 1276-1280.

95. Свирид, В.Д. Синтез специфических белков в клетках некоторых органов белых мышей при действии температурного фактора внешней среды /В.Д.Свирид // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2002. - Т. 133.- №3. — С. 331-336.

96. Семина, О.В. Стимуляция тимогеном (GW-дипептидом) восстановления кроветворения у облученных и подвегнутых действию цитостатикамышей /О.В. Семина, В.И. Семенец, В.И. Дейгин// Иммунология.-1997.-№1.- С.33-35.

97. Сидельникова, H. М. Характер и механизмы нарушения неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при остром отравлении веществом BZ: Автореф. дисс. . канд. мед. наук / Н.М.Сидельникова; СГМУ Саратов,2004.- С. 19-22.

98. Смахтин, М.Ю. Иммуномодулирующие факторы спленоцитов в условиях воздействия этанола и тетрахлорметана / М.Ю. Смахтин, И.И. Го-ряйнов, А.И. Конопля // Тез. докл. науч. конф. РАМН. Москва, 1994. -С.425-426.

99. Смахтин, М.Ю. Влияние тетрахлорметана и этанола на выделение спленоцитами крыс иммуномодулирующих факторов / М.Ю. Смахтин, А.И. Конопля, Г.А. Чалый // Эксперим. и клин, фармакол. 1995. - №4. - С.48-50.

100. Смирнов, B.C. Иммунотоксичесие эффекты химических ксенобиотиоков / B.C. Смирнов, C.B. Петленко, А.Е. Сосюкин // Иммунодефицитные состояния / Под. ред. B.C. Смирнова и И.С.Фрейдлина.- СПб: «Фолиант», 2000.- С. 337-367.

101. Сосюкин, А.Е. Влияние ксенобиотиков на состояние нейтрофилов / А.Е. Сосюкин, Г.А Софронов, А.Н. Гребенюк // Морской мед журн.-1997.- Т.4.- №8.-С. 26-31.

102. Сухих, Г.Т. Интерлейкин-2 и его возможная роль в патогенезе стрессор-ных изменений иммунной системы / Г.Т. Сухих, В.В Малайцев, И.М. Богданова //Докл. AM СССР.- 1984.-Т. 278.- № З.-С. 762-765.

103. Тиунов, JI.A. Четыреххлористый углерод. 1,2-дихлорэтан. Хлорпроиз-водные алканов / JI.A. Тиунов // Вредные химические вещества. Углеводороды. Галогенпроизводные углеводородов; Справ, изд./ Под. ред. В .А. Филова-Л.: Химия, 1990.- С. 337-351.

104. Урбах, В. Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях / В. Ю. Урбах. М.: Медицина, 1975. - 295 с.

105. Утешев, Б. С. О некоторых методологических вопросах скрининга им-мунотропных средств / Б. С. Утешев // Фармакол. и токсикол. 1984. -№3. - С.5-13.

106. Фримель, X. Основы иммунологии Пер. с нем. / X. Фримель, Й. Брок. -М.: Мир, 1986. 254 с.

107. Хабибуллаев, Б.Б. Коррекция вторичных иммунодефицитов с помощью металлсодержащих соединений хитозана / Б.Б. Хабибуллаев // Аллер-гол. и иммунол. — 2005. — Т.6.- № 2. С.207.

108. Хаитов, Р. М. Современные подходы к оценке основных этапов фагоцитарного процесса / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин // Иммунология. -1995а.-№4.- с. 3-8.

109. Хаитов, P.M. Экологическая иммунология / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин, Х.И. Истамов. М.: Изд-во ВНИРО, 19956,- 219 с.

110. Хаитов, Р. М. Иммунология / P.M. Хаитов, Г.А.Игнатьева, И.Г.Сидорович. М.: Медицина, 2000. - 430 с

111. Хаитов, P.M. Иммунология. / P.M. Хаитов, Г.А.Игнатьева, И.Г.Сидорович. 2-е изд., перераб. и доп. -М.: Медицина, 2002.- 536 с.

112. Хаитов, P.M. Экологическая иммунология / Р.М.Хаитов, Б.В.Пинегин, Х.И. Истамов. М.: Изд-во ВНИРО, 2005.- 219 с.

113. Хейхоу, Ф. Г. Дж. Гематологическая цитохимия / Ф. Г. Дж. Хейхоу, Д.Кваглино.-М.: Медицина, 1983.- 319 с.

114. Холмухамедова, Н.М. Фосфо- и гликолипидный спектр органов иммунной системы при экспериментальном хроническом токсическом гепатите / Н.М. Холмухамедова, А.И. Николаев, З.К. Зиямутдинова // Мед. журн. Узбекистана. 1991. - № 3. - С.56-61.

115. Чекнёв, С.Б. Активность лимфоцитов человека в присутствии соединений, содержащих углеводные компоненты /С.Б.Чекнев, Е.Е.Бабаева // Бюл. эксперим. биологии и мед.-2004.-Т. 138.- №11.-С. 555-558.

116. Чиркова, В.М. Четыреххлористый углерод / В.М. Чиркова.—JL: Химия, 1983,- 20 с.

117. Шилов, Ю.И. Влияние гидрокортизона на функции фагоцитирующих клеток брюшной полости крыс в условиях блокады p-адренорецепторов / Ю.И.Шилов, Д.В.Ланин // Бюл. эксперим. биол. и мед. — 2001. — Т.131.- №10. С.439-442.

118. Ширинский, B.C. Проблемы иммуностимулирующей терапии /В.С.Ширинский, Е.А.Жук//Иммунология.-1991.-№ З.-С. 7-10.

119. Ширшев, С.В. Зависимость внутриклеточного уровня цАМФ интакт-ных спленоцитов от популяционного состава клеточной суспензии и активности циклооксигеназы / С.В. Ширшев // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1998. - №6. - С.666-669.

120. Шуршалина, А.В. Соотношение уровней цитокинов при генитальном герпесе в различные фазы инфекционного процесса /А.В .Шуршалина,

121. B.Н.Верясов, Г.Т.Сухих // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2001. - Т. 132.-№7.-С. 59-61.

122. Щеглова, М.Ю. Клиническая эффективность применения иммунофана у больных бронхиальной астмой /М.Ю.Щеглова, Г.А.Макарова // Inter. J. Immunorehabilitation. Физиология и патология иммунной системы. -2003.- Т. 5,-№2.-С. 222. .

123. Юшков, Б.Г. Влияние иммуностимуляторов на регенерацию печени /Б.Г.Юшков, И.Г.Данилова, Ю.С.Храмцов// Эксперим. и клин, фарма-кол.- 2006.-Т.69. №1. - С.53-55.

124. Abbas, А.К. Functional diversity of helper T-lymphocytes / A.K. Abbas, K.M Murphy, A. Sher // Nature. 1996. - Vol.383. - P.787-793.

125. Ademuyiva, O. Vitamin С in CC14 hepatotoxicity / O. Ademuyiva, O.Adesanya, O.R. Ainwon // Hum. and Exp. Toxicol. 1994. - Vol.13.- №2. -P. 107-109.

126. Aquith, B. In vivo T lymphocyte dynamics in humans and the impact of human T-lymphotropic virus 1 infection / B. Aquith, Y. Zhang, A.J. Mosley,

127. C.M. de Lara // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2007.- Vol. 104.- № 19. P. 8035-8040.

128. Basu, S. Carbon tetrachloride-induced lipid peroxidation: eicosanoid formation and their regulation by antioxidant nutrients / S. Basu // Toxicology. -2003.-.Vol. 189. -№ 1-2.-P. 113-127.

129. Bishayee, A. Carrot aqueous extract protectijn against hepatic oxidative stress and lipid peroxidation induced by acute carbon tetrachloride intoxication in mice / A. Bishayee, M. Chatterjee // Fitoterapia. 1993. - Vol.64.-№3. - P.261-265.

130. Botsoglou, N.A. Effect of long-term dietary administration of Oregano on the alleviation of carbon tetrachloride-induced oxidative stress in rats / N.A. Botsoglou, I.A. Taitzoglou, E. Botsoglou // J. Agric. Food Chem. 2008.-Vol. 28.-№7,-P. 110-115.

131. Brautbar, N. Industrial solvents and liver toxicity: risk assessment, risk factors and mechanisms / N. Brautbar, J. Williams 2nd // Int. J. Hyg. Environ. Health. -2002. -.Vol. 205.-№ 6.-P. 479-491.

132. Calabrese, E.J. A review of the role of tissue repair as an adaptive strategy: why low doses are often non-toxic and why high doses can be fatal / E.J. Calabrese, H.M. Mehendale // Food Chem. Toxicol. -1996. -.Vol. 34.- № 3. -P. 301-311.

133. Chen, G. J. Ethanolmodulation of tumor necrosis factor and gamma interferon production by murine splenocytes and macrophages / G. J. Chen, D. S. Huang, B. Watzl // Life Sci. 2007. - Vol. 52.- № 3.- p. 1319-1326.

134. Claman, H.N. Corticosteroids as immunomodulators.Immunomodulation drugs/ H.N. Claman // Ann. of the N.-Y. Acad. Sci. 1993.-Vol. 685. -P. 288-292.

135. Dalu, A. Efficient tissue repair underlies the resiliency of postnatally developing rats to chlordecone + CC14 hepatotoxicity / A. Dalu, H.M. Mehendale // Toxicology. -1996. -.Vol. 117. № 1-3. - P. 29-42.

136. Delves, P.J. The immune system (Part 1) / P.J. Delves, I.M. Roitt // N. Engl. J. Med. 2000. - Vol.343.- №2. - P.37-49.

137. Descotes, J. Immunotoxicology of drugs and chemicals /J.Descotes. — Am-sterdam-N. Y-. Oxford: Elsiver, 1986. 400 p.

138. Dhabhar, F. S. Stress -induced in blood leukocyte distribution: A role of adrenal steroid hormones / F. S. Dhabhar, A. H. Miller, B. S. Mc Even // J. Immunol. 1996.-Vol.157. -№4. -P.1638-1644.

139. Durant, S. In vivo effects of catecholamines and glucocorticoids on mouse thymic cAMP content and thymolysis / S. Durant // Cell Immunol. 1986. -Vol.102.-№1.-P.136-143.

140. Dyakonova, V.A. Study of interaction between the polyoxidonium immunomodulator and the human immune system cells / V.A. Dyakonova, V.A Dam-baeva., S.V. Dambaeva // Int. Immunopharmacol. 2004.- Vol. 154,- №13. -P. 1615-1623.

141. Elsbach, P. Oxygendependent and oxygenindependent mechanisme of microbiological activity of neutrophilis / P. Elsbach, J. Weise // Immunol.-1985.-Vol. 11.-№3-4. P. 159-163.

142. Elsisi, A.E. Vitamin A potentiates the hepatotoxicity of carbon tetrachloride and allyl alcohol /A.E. Elsisi, D. Earnest, I.G. Sipes// Toxicologist.-1986.-Vol. 6.-N l.-P. 111-118.

143. Farlcas, D. In vitro methods to study chemically induced hepatotoxicity: a literature review / D. Farkas, S.R. Tannenbaum. // Curr. Drug. Metab. -2005. -Vol. 6.- №2. - P. 111 -125.

144. Ferluga, J. The effect of organophosphorus inhibitors, p-nitrophenol and cytocholasin-B on cytotoxic killing of tumor cells and the effect of shaking /J. Fergula, G. L. Ashercon, E. L. Becker// Immunol. 1972.-Vol. 23.-N4.-P. 577-590.

145. Ficek, W. Changes in biological processes in lymphatic cells and tissues after loading with by glycocorticoids / W. Ficek // Bioche. Arch.- 1997,-Vol. 13.-№ l.-P. 1-6.

146. Fink, PJ. Positive selection of thymocytes / P.J. Fink, M.J. Bevan // Adv. Immunol. 1995. - Vol.59 - №5. - P.99 - 133.

147. Fleisher, T.A. Functional and molecular evaluation of lymphocytes /T.A.Fleisher, J.B. Oliveira// J. Allergy Clin. Immunol. 2004. - Vol. 114. -№4. -P.227-234.

148. French, A. R. Natural killer cells and viral infunction / A. R. French, W. M. Yokoyama // Curr. Opin. Immunol. 2003. - Vol. 15. - P. 45- 99.

149. Friedman, H. Microbial Infections, Immunomodulation, and Drugs of Abuse /H. Friedman, C. Newton, T.W. Klein// Clin. Microb. Rev. 2003,- Vol. 16.-№2.-P. 209-219.

150. Fu, Q.S. Simple menaquinones reduce carbon tetrachloride and iron (III) / Q.S.Fu // Biodégradation. 2008. - Vol. 26. - № 7. - P. 225-231.

151. Garrity, D. The activating NK/C2D receptors assembles in membrane with twosignaling dimmers into hexameric structure / D. Garrity, M.E. Call, J. Feng // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. - Vol. 102. - P.7641-7646.

152. Georgiev, V.St. Immunomodulation drugs / V.St. Georgiev, H. Yamaguchi // Ann. of theN.-Y. Acad. Sci. 1993. - Vol.685. - 816 p.

153. Georgiev, V.St. Cytokines. Immunomodulation drugs / V.St. Georgiev, J.E. Albright // Ann. of the N.-Y. Acad. Sci. 1993. - Vol.685. -P.284-602.

154. Gilbert, R.V. cAMF is essential signal in the induction of antibody production by B cells but inhibits helper function of T cells / R.V. Gilbert, M.K. Hoffmann//J. Immunol. 1985. - Vol.135. - №3. - P.2084-2089.

155. Gobba, F. The urinary excretion of solvents and gases for the biological monitoring of occupational exposure: a review / F. Gobba, S. Ghittori, M.Imdriani // Sci. Total. Environ. 1997. - Vol. 199. - № 1-2. - P. 3-12.

156. Halaskova M. Immunotoxic effects of carbonium tetrachloride-morphological and functional changes in mice: / M. Halaskova, D. Jirova, I. Sperlirgova // Funct. and Dev. Morphol. 1993. - Vol.3. - №1. - P.37.

157. Husband, A. I. The immune system and integrated homeostasis. / A. I. Husband //Immunol, and Cell Biol.- 1995.- Vol. 73,- №4. P. 377-382.

158. Iokobsen, D. Glikolat cauzed the acidosis in the ethylen glicol poisoning. /D. Iokobsen// Acta Med. Skand. 1984.-Vol.216. - № 3. - P. 409-416.

159. Jerne N. K., Plaque formation in agar by single antibody producing cells / N. K. Jeme, A. A. Nordin // Sceince. 1963. - Vol.140. - №4. - P.405.

160. Jeurissen A. T cell-dependent and -independent responses / A. Jeurissen, X. Bossuyt // J. Immunol. 2004. - Vol. 172. - №5. - P. 2728-2729.

161. Kaminski N.E., The role of metabolism in carbon tetrachloridemediated immunosuppression. In vitro studies /N.E. Kaminski, W.D. Stevens// Toxicology. 1992. - Vol.75. - №2. - P.175-188.

162. Kullenkampff, J. Acid esterase in human lymphoid cells and leukaemic blasts: a marker for T-lymphocytes. / J. Kullenkampff, G. Janossy, M.F. Greanes // Brit. J. Haemat.-1977.-Vol. 36. № 2.- P. 231-240.

163. Kimber, I. Chemical Induced Hypersensitivity / I. Kimber // Exper. Immun.- Boca Raton; New York; London; Tokyo, 1996. - P.391-417.

164. Klingemann, H.G. Ex vivo expansion of natural killer cells for clinical applications / H.G. Klingemann, J. Martinson // Cytotherapy- 2004. Vol. 6. - P. 15-22.

165. Kutty, K. M Acetylcholinesterase in erytrocytes and lymphocytes: its contribution to cell membrane structure and function / K. M. Kutty, R. K. Chandra, S.Chandra // Experientia. 1976. - Vol.32. - №3. - P.289.

166. Lanier, L. L. Natural killer cell receptor signaling / L.L.Lanier // Curr. Opin. Immunol. 2003. - Vol. 15. - P. 308-314.

167. Laskin, D.L. Sinusoidal lining cells and hepatotoxicity / D.L. Laskin // Toxi-con Pathol.-1996. -.Vol. 24. № l.-P. 112-118.

168. Li, C. G. Esterases in human leucocytes / C. G. Li, R. W. Lam, L. T. Gam // J. ITistochem. Cytochem. 1983. - Vol.21. - №1. - P. 1-12.

169. Lee, J. C. Elevated TGF-IH secretion and down-modulation of NKG2D underlies impaired of NK cytotoxicity in cancer patients / J. C. Lee, K. M. Lee, D.W. Kim // J. Immunol. 2004. -Vol. 172. - P. 7335-7340

170. Li, C. Y. Esterases in human leucocytes / C. Y. Li, R. W. Lam, L. T. Gam // J. Histochem. Cytochem. 1973. - Vol. 21. - №1. - P. 1-12.

171. Li, Q. The mechanism of organophosphorus pesticide-induced inhibition of cytolytic activity of killer cells / Q Li, T.Kawada // Cell. Mol. Immunol. -2006.- Vol. 3. №3. - P. 171-178.

172. Lieber, C.S. Pathogenesis and treatment of liver fibrosis in alcoholics: 1996 update / C.S. Lieber // Dig. Dis. -1997. -.Vol. 15. № 1-2. - P. 42-66.

173. Lieber, C.S. Prevention and treatment of liver fibrosis based on pathogenesis / C.S. Lieber // Alcohol. Clin. Exp. Res. -1999. -.Vol. 23. № 5. - P. 944-949.

174. Loose, L.D. Immunotoxicology-1985 / L.D. Loose // Year Immunol, 19851986. Vol.2. - 1986. - P.365-370.

175. Louis, H. Modulation of liver injury by interleukin-10 / H. Louis, O. Le Moine, M. Goldman // Acta Gastroenterol. Belg. 2003. - Vol. 66. - № 1. - P. 7-14.

176. Luster, M. J. Molecular and cellular basis of chemically induced immu-notoxicity / M. J. Luster, J. A. Blank, J. H. Dean // Annu. Rev. Pharmacol, and Toxicol. Vol.27. - 1987. - P.23-49.

177. Luster, M.I. Immunotoxicology: role of inflammation in chemical-induced hepatotoxicity / M.I. Luster, P.P. Simeonova // Int. J. Immunopharmacol. -2000. -.Vol.22. -№ 12.-P. 1143-1147.

178. Luster, M.I. Immunotoxicology: role of inflammation in chemical-induced hepatotoxicity / M.I. Luster, P.P. Simeonova // Toxicol. Lett. 2001. -.Vol. 120. -№ 1-3.-P. 317-321.

179. Lynge, E. Organic solvents and cancer / E. Lynge, A. Anttila, K. Hemminki // Cancer Causes Control. -1997. -.Vol. 8. № 3. - P. 406-419.

180. MacFarlane, A.W. Signal transduction in natural killer cells / A.W. MacFarlane, K.S. Campbell // Curr. Top. Microbiol. Immunol. 2006. - Vol. 298. - P. 3-57.

181. Madden, K. S. Catecholamine action and immunologic reactivity /K. S. Madden, S. Livnat// Psychoneuroimmunology, Second Edition.- Academic Press, Inc,1991.-P. 283-310.

182. Maekawa, Y. Antigen-driven T-cell repertoire selection /Y. Maekawa, K. Yasutomo// Crit. Rev. Immunol. 2005. - Vol. 25. - № 5. - P. 59-74.

183. Manibusan, M.K. Postulated carbon tetrachloride mode of action: a review / M.K. Manibusan Odin,D.A. Eastmond // J. Environ. Sci. Health C. Environ. Carcinog. Ecotoxicol. Rev. 2007. -Vol. 25. - № 3. - P. 185-209.

184. Marshak Rothstein, A. Properties and application of monoclonal antibodes directed against determinants of the Thy - 1 locus / A. Marshak - Rothstein, P.Fink, T.GrilPay // J.Immunol.-1979. - Vol. 122. - P.2491-2497.

185. Maslinski, W. Muscarinic antagonist binding to intact rat thymocytes /E. Grabczewska, T. Bartgai, J. Rysewski // Acta chem. scand. -1990. Vol.44. -№2. - P. 147-151.

186. Masuda, Y. Learning toxicology from carbon tetrachloride-induced hepato-toxicity / Y. Masuda // Yakugaku Zasshi. 2006. -Vol. 126. - № 10. - P. 885-899.

187. McGregor, D. Carbon tetrachloride: genetic effects and other modes of action / D. McGregor, Lang M. // Mutat. Res. -1996. -.Vol. 336. № 3. - P. 181-195.

188. Mehendale, H.M. Tissue repair: an important determinant of final outcome of toxicant-induced injury /H.M. Mehendale// Toxicol. Pathol. 2005. -Vol. 33.-№1.-P. 41-51.

189. Mehmeicic, G. Effect of pretreatment with artichoke extract on carbon tetrachloride-induced liver injury and oxidative stress /G.Mehmeicic, G. Ozdemirler, N. Kocak-Toker 11 Exp. to col. Pathol. -2008. Vol. 46. - №6. - P. 135-141.

190. Miller, K. Immunotoxicology / K. Miller // Clin, and Exp. Immunol. 1985. - Vol 61. -№2. -P.219-223.

191. Moore, K. Isoprostanes and the liver / K. Moore // Chem. Phys. Lipids. -2003. -.Vol. 128. № 1-2. - P. 125-133.

192. Moyer, E.S. Carbon tetrachloride replacement compounds for organic vapor air-purifying respirator cartridge and activated carbon testing a review /E.S. Moyer, S.J. Smith, G.O. Wood // AIHAJ. 2001. -.Vol. 62. - № 4. - P. 494507.

193. Newcombe, D.S. Immune surveillance, organophosphorus exposure, and lymphomagenesis / D.S. Newcombe // Lancet. 1991. - №8792. - P.539-541.

194. Nouragargh, S. Ingibition of human neutrophil degranulation by forskolin in the presence phosfodiesters ingibitors / S. Nouragargh, J.R.S. Holt // Eur. J. Pharmacol. 1986. - Vol. 222. - № 2.- P. 205-212.

195. Parker, D.C. T cell dependent B cell activation / D.C. Parker // Annu. Rev. Immunol. 1993. - Vol. 11. - № 2. - P. 331-360.

196. Pereira-Filho, G. Role of N-acetylcysteine on fibrosis and oxidative stress in cirrhotic rats / G. Pereira-Filho, C. Ferreira, A. Schwengber // Arq. Gastroen-terolol. -2008. Vol. 45. - № 2. - P. 156-162.

197. Plaa, G.L. Chlorinated methanes and liver injury: highlights of the past 50 years / G.L. Plaa // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2000. -.Vol. 40. - № 1. -P. 42-65.

198. Popp, W. New data on syncarcinogenesis in tumors of exogenous origin / W. Popp // Zentralbl. Hyg. Umweltmed. -1996. -.Vol. 198. № 5. - P. 407-428.

199. Richman, D.P. Nicotinic acetylcholine receptor: evidence for a functionally distinct receptor on human lymphocytes / D.P. Richman, B.G.W. Arnason // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1989.-Vol. 76.- №9.-P. 4632-4635.

200. Roberts, R.A. Role of cytokines in non-genotoxic hepatocarcinogenesis: cause or effect? / R.A. Roberts, N.H. James, S. Cosulich // Toxicol. Lett. -2001.-.Vol. 120.-№ 1.-P. 301-306.

201. Romagnani, S. The Thl/Th2 paradigm / S. Romagnani // Immunol. Today. -1997. Vol. 18. - №6. - P. 263-266.

202. Rosenberg, Y.J. A pretreatment or post exposure treatment for exposure to a toxic substance by pulmonary delivery (inhaler) of a bioscavenger / Y.J. Rosenberg // PCT Int. Appl. WO 2005000195 A2. -2005. Vol. 6. - №1. -P.22.

203. Roskams, T. Neuroregulation of the neuroendocrine compartment of the liver / T. Roskams, D. Cassiman // Anat. Rec. Deskoy Mol. Cell Evol. Biol. 2004. -.Vol. 280. - № 1. - P. 910-923.

204. Rusinski, P. Acute poisoning with selected hepatotoxic agents: biochemistry of toxic effect, clinical symptoms and treatment / P. Rusinski, Z. Kolasinski // Przegl. Lek. -2003. -.Vol. 60. № 4. - P. 210-217.

205. Salazar-Montes, A. Potent antioxidant role of Pirfenidone in experimental cirrhosis / A. Salazar-Montes, L. Ruiz-Corro, A. Lopez-Reyes // Eur. J. Pharmacol. -2008. Vol. 29.-№ 8. - P. 119-124.

206. Saracyn, M. Hepatorenal syndrome in view of experimental studies / M. Sara-cyn // Pol. Mercur. Lekarski. 2002. -Vol. 13. - № 77. - P. 417-420.

207. Schumann, J. Pathophysiological mechanisms of TNF during intoxication with natural or man-made toxins / J. Schumann, G. Tiegs // Toxicology. -1999. -.Vol. 138. № 2. - P. 103-126.

208. Sell, S. Heterogeneity and plasticity of hepatocyte lineage cells / S. Sell // Hepatology. 2000. -.Vol. 33. - № 3. - P. 738-750.

209. Singh, N. Immune reconstitution syndrome associated with opportunistic mycoses / N. Singh, J.R. Perfect // Lancet Infect. Dis. -2007. Vol. 7. - № 6. - P. 395-401.

210. Spoo, W. Industrial chemicals and the horse / W. Spoo // Vet. Clin. North. Am. Fquine Pract. 2001. -.Vol. 17. - № 3. - P. 501-515.

211. Streets, K.L. Mediators of inflammation and acute phase response in the liver / K.L. Streets, T. Wustefeld // Cell. Mob. Biol. 2001. -.Vol. 47.-№ 4. - P. 661-673.

212. Sullivan, J. B. Immunological alterations and chemical exposure / J. B. Sullivan // J. Toxicol-Clin. Toxicol. 1989. - Vol.27. - №6. - P.311-343.

213. Szelenyi, J.G. Acetilcholinestrase activity of lymphosytes: an enzyme characteristic of T-cells / J.G. Szelenyi, E. Bartha, S.R. Hollan // Brit. J. Haematol. 1982. - Vol. 50. - № 2. - P. 241-245.

214. Tiefenbach, B. Dosisabhangigkeit und Mechanismus der acuten Wirkung von Methamidophos auf das Immunsystem der Maus / B. Tiefenbach, S. Wichner // Z. gesamte Hyg. und Grenzdeb. 1985. - Bd.31, №4. - S.228-231.

215. Timmons, B.W. Sex-based effects on the distribution of NK cell subsets in response to exercise and carbohydrate intake in adolescents / B.W. Timmons, M.A. Tarnapolsky, O. Bar-Or // J. Appl. Physiol.- 2006.- Vol. 100.- №5.-P. 1513-1519.

216. Tomenson, J.A. Hepatic function in workers occupationally exposed to carbon tetrachloride / J.A. Tomenson, C. E. Baron, J.J. O'Sullivan // Occup. Environ. Med. 1995. - Vol. 52. - № 8. - P. 508-514.

217. Wasser, S. Experimental models of hepatic fibrosis in the rat / S. Wasser, Tan C.E. // Ann. Acad. Med. Singapore. -1999. -.Vol. 28. № 1. - P. 109-111.

218. Weber, L.W. Hepatotoxicity and mechanism of action of haloalkanes: carbon tetrachloride as a toxicological model / L.W. Weber, M. Boll, A. Stampfl // Crit. Rev. Toxicol. 2003. - Vol. 33. - № 2. - P. 105-136.

219. Weiler-Normann, C. Mouse models of liver fibrosis / C. Weiler-Normann, J. Herkel, A.W. Lohse // Z. Gastroentgerol. 2007. -Vol. 45. - № 1. - P. 43-50.

220. Wernke, M.J., Solvents and malignancy / M.J. Wernke, J.D. Schell // Clin. Occup. Environ. Med. 2004. -.Vol. 4. - №3. - P. 513-527.

221. Wilson, S. Immune neuroendocrine interactions / S. Wilson, D. Mireille // Immunol. Today. - 1995. - Vol. 16. - № 7. - P. 318-322.

222. Yodaiken, R.E. 1,2-dichloroethane poisoning / R.E. Yodaiken, J.R. Babcock // Arch, environ. Health. 1973. - Vol.26. - №3. - P.281-284.

223. Zimmerman, H.J. Chemical- and toxin-induced hepatotoxicity /H.J. Zimmerman, J.H. Lewis // Gastroenterol. Clin. North. Am. 1995. - Vol. 24. - № 4. 1. P. 1027-1045.

Информация о работе

Балашов, Сергей Владимирович
кандидата медицинских наук
Саратов, 2009
ВАК 03.00.13

Диссертация

Доиммунный и иммунный гомеостаз, механизмы его регуляции при отравлении тетрахлорметаном. Способы коррекции - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы