Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Деструкция тяжелых нефтепродуктов в почве иммобилизованными углеводородокисляющими микроорганизмами

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата технических наук, Лизунов, Александр Борисович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Изменения свойств почвы под воздействием нефти и нефте-ф продуктов.

1.2. Оценка состояния основных почвенных элементов в загрязненных нефтью почвах.

1.2.1. Соотношение форм азота в загрязненной и незагрязненной нефтью почве.

1.2.2. Влияние нефтяного загрязнения на содержание в почве фосфора.

1.2.3. Формы калия в почве.

1.2.4. Почвенный магний.1 б

1.3. Применение минеральных удобрений.

1.4. Токсическое действие нефти на почвенную микробиоту. ф 1.5. Диагностические признаки различных уровней загрязнения почвы нефтью.

1.6. Этапы естественной деградации нефти в почве

1.7. Рекультивация загрязненных нефтью почв.

1.8. Микробиологические механизмы утилизации нефтяных УГВ .27 1. 9. Биоремедиация.

1.9.1. Принципы технологий биоремедиации

1.9.2. Эффективность различных методов ремедиации

1.10. Роль биопрепаратов-нефтедеструкторов в процессе биоремедиации

1.10.1. О роли ассоциаций микроорганизмов-деструкторов нефтепродуктов в почве.

1.10.2. Адгезия микроорганизмов на носителях и иммобилизованные формы биопрепаратов в очистке почвы и воды от нефтезагрязнений.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Углеводородокисляющие культуры и условия их культивирования.

2.2. Характеристика носителей.

2.3. Получение иммобилизованных клеток.

2.4. Условия проведения экспериментов по биодеструкции мазута нативными и иммобилизованными клетками.

2.5. Методы определения содержания нефтепродуктов.

2.5.1. Инфракрасная спектроскопия.

2.5.2. Флуоресцентный метод определения НУГВ.

2.5.3. ЯМР- спектроскопия.

2.6. Методика проведения 1-го почвенного эксперимента.

2.7. Методика проведения 2-го почвенного эксперимента.

2.8. Методика проведения промышленного полевого эксперимента.

2.9. Определение клеточного титра.

2.10. Определение концентрации ионов аммония, нитратов, фосфатов и магния в почве.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Скрининг микроорганизмов, окисляющих тяжелые нефтепродукты.

3.2. Выбор носителей для иммобилизации алканотрофных культур.

3.3. Выбор и оптимизация питательных сред для микроорганиз-мов-нефтедеструкторов.

3.4. Деструкция мазута в жидких питательных средах.

3.5. 1-ый почвенный эксперимент.

3.6. 2-ой почвенный эксперимент.

3.6.1. Динамика снижения концентрации биогенных ионов во 2-ом почвенном эксперименте.

3.6.2. Динамика изменения концентрации мазутных углеводородов во 2-ом почвенном эксперименте.

3.6.3. Значения рН и влажности во 2-ом почвенном эксперименте.

3.6.4. Состояние алканотрофной микрофлоры при биодеструкции мазутных углеводородов в почве.

3.7. Натурная апробация (испытания).

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Деструкция тяжелых нефтепродуктов в почве иммобилизованными углеводородокисляющими микроорганизмами"

Новое столетие, по логике развития науки и промышленного производства обещает стать веком чистых технологий, что, безусловно, потребует дальнейшего привлечения в сферу производства процессов, основанных на использовании различных культур микроорганизмов .

Разнообразная деятельность человека, связанная с варварской эксплуатацией среды обитания, на рубеже веков, привела к угрозе потери природных ресурсов Земли и поставила задачу сохранения и защиты Природы. Биотехнологии защиты окружающей среды - это тот инструментарий, который призван обеспечить восстановление затронутых деятельностью человека природных экосистем.

Формирование этой области научных знаний состоялось в конце 90-х годов, и в настоящее время, происходит дальнейшее интенсивное развитие биотехнологий защиты природы от различных загрязнений, в том числе от нефти и нефтепродуктов.

В настоящее время на территории России, особенно в промышленных зонах, складывается достаточно непростая экологическая ситуация, связанная с большими количествами загрязнений, находящихся и продолжающих поступать в почвы, грунты, поверхностные и глубинные воды. Одним из наиболее массовых (распространенных) загрязнителей являются нефтепродукты. Поскольку самоочищение от нефтезагрязнений в природе длится десятилетиями, для интенсификации процессов восстановления почвы и необходимы быстрые и эффективные технологические решения. В последнее время все чаще и чаще применяются природоохранные технологии, в основе которых лежит способность микроорганизмов использовать нефтяные углеводороды как единственный источник углерода и энергии.

Среди биологических методов можно выделить два основных: первый-очистка от нефтепродуктов происходит за счет активизации природных аборигенных микроорганизмов; второй-использование высоко эффективных, селекционированных культур микроорганизмов-нефтедеструкторов. К настоящему времени существует ряд промышленных биопрепаратов, деградирующих НУГВ.

Данное исследование посвящено разработке биотехнологии утилизации тяжелых нефтяных углеводородов (НУГВ). Целью настоящей работы было изучение биодеградации мазута в почвах Северозападного региона нефтеокисляющими микроорганизмами и разработка научных основ технологии очистки почв от мазута.

Достижение этой цели предусматривало решение следующих задач:

-выбор микроорганизмов, окисляющих тяжелые нефтеуглеводороды;

-подбор биогенных элементов и их концентраций для повышения эффективности процессов биодеструкции мазута в почвах культурами нефтедеструкторами, на основе результатов культивирования микроорганизмов на жидких питательных средах с минеральными удобрениями;

-выбор носителей и получение иммобилизованных форм культур микроорганизмов-нефтедеструкторов;

-сравнительная оценка биодеградации мазута в почвах нативны-ми и иммобилизованными культурами углеводородокисляющих микроорганизмов;

-проведение натурных испытаний.

Научная новизна.

Разработаны научные основы биотехнологии очистки торфяно-болотной (ТБ), дерново-подзолистой (ДП) почв от тяжелых углеводородов мазута при их высокой начальной концентрации до 300 г/кг.

Проведен скрининг нефтеокисляющих микроорганизмов, в результате которого были выбраны культуры, наиболее активно разрушающие мазут: Acinetobacter oleovorum, Rhodococcus erythropolis 7HX, Pseudomonas putida, Д1-7 и П-45. На их основе созданы новые искусственные ассоциации бактериальных культур, обладающие способностью к более полной деструкции мазутных углеводородов.

Изучена деструкция алканов и ароматических соединений входящих в мазут нативными и иммобилизованными культурами, а так же их ассоциациями в почве. Показана эффективность деградации тяжелых НУГВ иммобилизованными на торфе мазутоокисляющими культурами.

Экспериментально обоснованы концентрации и соотношения биогенных элементов (N,P,K) в форме промышленных минеральных удобрений (азофоска, аммофос), обеспечивающие и оптимальный рост в почве микроорганизмов-алканотрофов и биодеструкцию мазута.

Практическая ценность.

Результаты проведенных лабораторных исследований легли в основу технологии очистки почв от высоких концентраций тяжелых НУГВ. Проведено натурное испытание опытных партий иммобилизованных мазутоокисляющих бактериальных ассоциаций при ликвидации мазутных загрязнений почв. Поддержание клеточного титра выбранных микроорганизмов во время биоокисления НУГВ, нейтральной величины рН, оптимального соотношения и количества N,P,K позволили снизить за год испытаний концентрацию НУГВ в почве с 200 до 2г/кг. Ре-культивационный почво-грунт полученный после очистки используется для озеленения промышленных территорий.

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы были представлены на I международной и II Всероссийской конференции «Охрана окружающей среды при поисках, разведке, разработке месторождений углеводородного сырья, его переработке и транспортировке», Санкт-Петербург, 1996г.; на 2nd Practical Conference "Sustainable development:system analysis in ecology", Sevastopol,1996г., на Международной конференции «ISEB'97» по биоремедиации, Лейпциг

Германия),1997г., на Всероссийской конференции «Опыт и перспективы развития ресурсосберегающих технологий и утилизации твердых отходов на предприятиях различных форм собственности», Санкт-Петербург, 1998г . ; на конференции Экобиотехнология: «Борьба с нефтяным загрязнением окружающей среды», Пущино,2001г., на V международной конференции «Освоение Севера и проблемы природовосста-новления», Сыктывкар, 2001 г.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 9 работ.

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения результатов исследования, выводов, списка литературы и приложений, содержащего 101 литературных источников. Диссертация изложена на 107 страницах машинописного текста, содержит 34 таблицы, 5 рисунков и б приложений.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Лизунов, Александр Борисович

ВЫВОДЫ

1.Разработаны научные принципы биотехнологической очистки почв Северо-Западного региона сильнозагрязненных мазутом, заключающиеся во внесении в почвы иммобилизованных на торфе ассоциаций микроорганизмов-нефтедеструкторов, создании и поддержании высокого титра культур в процессе очистки, дробном внесении биогенных элементов, поддержания нейтрального уровня реакции среды в очищаемой почве, аэрации.

2.Проведен мониторинг углеводородокисляющих культур, в результате которого отобраны культуры: Rh. erythropolis, Ac. oleovorum, Ps.putida, П-45, Д1-7, способные окислять мазутные углеводороды.

3. В качестве эффективных и доступных источников N,P,K для роста алканотрофных микроорганизмов предложены минеральные удобрения азофоска и аммофос, расход которых для утилизации 1 г мазута составляет 100 мг.

4.В качестве носителя для иммобилизации алканотрофов предложен верховой торф, позволяющий получить иммобилизованные бактериальные ассоциации с высоким клеточным титром- 1010 кл/г носителя. Выбранный носитель является также хорошим структуратором почвы, обеспечивает создание оптимальных значений влажности и эффективной аэрации.

5.Для нейтрализации почвенной среды и стабилизации величины рН, при биодеструкции мазута алканотрофными микроорганизмами, предложено внесение мела.

6.Применение иммобилизованных ассоциаций микроорганизмов-нефтедеструкторов дает высокий эффект утилизации мазута, биодеструкция при использовании свободных клеток достигала 14-41%, с иммобилизованными клетками - 55-73%.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата технических наук, Лизунов, Александр Борисович, Санкт-Петербург

1. Голодяев Г.П., Иванов Г.И. Биохимическая очистка почв прибрежной зоны юга Дальнего Востока, изд.-Владивосток, 1988.-54с.

2. Микроорганизмы и охрана почв /под ред. Д.Г.Звягинцева -М.: Изд. МГУ, 1989.-206 с.

3. Марфенина О.Е. Микробиологические аспекты охраны почв.-М.:Изд. МГУ, 1991.-118 с.

4. Барбер С.А. Биологическая доступность питательных виществ в почве.-М.:Агропромиздат, 1988.-375с.

5. Помазкина JI.B. Азот, его превращения и баланс в почвах Ср. Сибири. Автореферат диссертации д-ра биол. наук.-Новосибирск. ,1989.-36с.

6. Исмаилов Н.М. Нефтяное загрязнение и биологическая активность почв//Добыча полезных ископаемых и геохимия природных экосистем. М.:Наука. -1982.-С.227-235.

7. Киреева Н.А.Микробиологические процессы в нефтезагрязненных почвах:Диссертация на соискание ученой степени доктора биол. наук/Башкирский Государственный ун-т.-Уфа.,.1996.-317с.

8. Исмаилов Н.М. Влияние нефтяного загрязнения на круговорот азота в почве//Микробиология.-1983.-Т.52.-№6.-С.1003-1007.

9. Кудеяров В.Н. Цикл азота в почве и эффективность удобре-ний.М.:Наука.-1989.-216с.

10. Григорян К.В. Влияние ионов тяжелых металлов на активность ферментов почв//Биол.ж.Армении.-1982.-Т.35.-№8.-С.653-656.

11. Гилязов М.Ю. Изменение некоторых агрохимических свойств выщелоченного чернозема при загрязнении его нефтью//Агрохимия.-1980.-№12.-С.72-75.

12. Микробиологическое разложение тяжелых фракций нефти / Лизунов А.Б.,Хадеева В.В.,Янкевич М.И., Яковлев В.И.//Экологически чистые технологические процессы в решении проблем охраны окружающей среды: Тез. докл. конф.,-Иркутск,1996.-С.56-57.

13. Квасников Е.И., Клюшникова Т.М. Микроорганизмы- деструкторы нефти в водных бассейнах.-1981.-С.132.

14. Михновоська А.Д., Тете Л.Г. Микрофлора почв, загрязненных нефтепродуктами//Агрохимия и почвоведение.-198 0.-№40.-С.79-8 5.

15. Диагностические признаки различных уровней загрязнения почвы нефтью/Д.Г.Звягинцев, В.С.Гузев, С.В.Левин и др.//Почвоведение.-1989.- N 1.- С.72-78.

16. Михновська А.Д., Пете Л.Г. Микрофлора почв, загрязненных нефтепродуктами //Агрохимия и почвоведение.-1980.- N 40.-С.79-85.

17. A local oil spill revisited// Teal J.M.//Oceanus.-36.-№2,US,0.Q.93, P.65-70.

18. Биоремедиация природных и промышленных территорий с применением нефтеокисляющих препаратов/ М.И.Янкевич, В.В.Хадеева, К.В.Квитко, А.Б.Лизунов//Микробиология почв и земляделия: Тез. докл. Всерос. конф.,13-17 апреля 1998г.-СПб,1998.-С.102.

19. Biodegradation of phenolic compounds. Improved degradation of phenol and benzoate by indigenous strains of Acinetobacter and Pseudomonas/D.Aquino M., Rozol S., Santini P., Moretton J.//Rev. Latinoamer. Microbiol.-1988.-30,№3.-C.283-288.

20. Staff C.P. Mutant bacteria decontaminates spilled crude oil site./Chem.Process(USA).-1982.-Vol.4 5,№14.-P.96.

21. Очистка почвы от загрязнения нефтью./Гарейшина А.3.,Ахметшина С.М.,Ибатуллина Л.М.//Загрязнение окружающей среды, пробл. токси-кол. и эпидиомил.: тез. докл. Межд. конф., ,11-19 мая 1993 г.Москва-Пермь , 1 993 . -С . 32 .

22. Биодеградация нефти психрофильными микроорганизмами/Губанова Т.А., Полякова И.Н., Герасимова Т.В., Пауков В.Н., Яненко А.С.// Нов. направления биотехнол.:Тез. докл. 5 Конф. Рос. Федерации, 18-22 мая 1992г.,-Пущино,1992.-С.146.

23. N.A.Sorkhoh,A.S.Ibrahim, М.А.Ghannoum, S.S.Radwan. High-temperature hydrocarbon degradation by Bacillus stearothermophilus from oil-polluted Kuwaiti desert/Appl. Microbiol.Biotechnol.-1993.-P.123-126.

24. Hong-Gyu Song,R.Bartha /Effects of Jet Fuel Spills on the Microbial Community of Soil//Applaied and Environmental

25. Microbiology.-19 90.-v.3.-№3.-P.64 6-651.

26. Hinchee R.E.,Arthur M., Bench scales studies of the soil aeration process for bioremediation of petroleum hydrocarbons/Appl.Biochem.Biotechnol.-1991.-P.28-29.

27. Bumpus J.A.,Fernando T.,Jurek M.,Mileski G.J.,Aust S.D. /Biologicaal treatment of hhazardous wastes by phonerochoete chrysosporrium"//Biotechnol.Appl.Hazardous waste Treatment.-1989.-P. 167-183.

28. Микробиологическая деструкция мазута в почве при использовании биопрепарата Деворойл/ Д.Г.Сидоров,И.А.Борзенков, Е.И.Милехина и др.//Прикладная биохимия и микробиология.-1998.-Т.34,№3.-С.281-286.

29. Киреева Н.А. Использование биогумуса для ускорения деструкции нефти в почве//Виотехнология.-1995.-№5-6.-С.32-35.

30. Плещева О.В. Морфологические нарушения фитоценоза растительных сообществ на участках нефтяного загрязнения почв.-1985.-С.34 35 .

31. Беспамятков Г.П., Кротов Ю.А. Предельно допустимые концентра ции химических веществ в окружающей среде.-J1.-1983.-528с.

32. Bioremediation of petroleum contaminated using vegetation a microbial study./Lee Euisang, Banks M.K.//J.Environ.Sci. and Health. A, Part A,En.sci. and Eng.-1993.-№10.- P.2187-2198.

33. A.c.709557 СССР,к l.C02c 5/00. Применение перекиси водорода для очистки сточных вод от нефтепродуктов/ Н.И.Плотников(СССР).-№2;3аявл.10.01.74;Опубл.15.01.80;-112с.

34. Pech.J.L. et.al./Recents Prog.Genie Procedes//Genie React.-1993.- v.118.-№26.-P.111-116.

35. Striolo P. et.al./Recents Prog.Genie Procedes//20 Technol. Innovantes Epur Eaux.-1992.-P.1173-1182.

36. Pullman /Washington State Transportation Center //Government reports.-1995.-№1.-501549.

37. Pat.5178762 USA, K1.C02F 1/72.The Mead. corp./Pokora A.R.,Yohnson M.A.;publ.12.01.93.

38. Mueller B.G. u.a./Mikrobiol.Reinig.Boeden,Beitr. DECHEMA-Fachgespraechs Umweltschutz,9th 1991(pub.1992).-1993.-v.119.-№12.- P.252-258.

39. Muller B.G. u.a./Bewertung Sanierung Minerallol-Kontamin.Boden,Resume Beitr.DECHEMA-Fachgesprachs

40. Umweltschutz,10th 1992(pub.1993), с.a.-1994.-v.120.-№2.- P.462-470 .

41. Barenschee E.R. u.a./Bewertung Sanierung Mineralol

42. Kontam.Boden,Resume Beitr.DECHEMA Fachgesprachs Umweltschutz,10th 1992,(pub.1993).-1994.-v.120.-№4.-P.332-347.

43. Oxydation of n-tetradecaane by Candida parapsilosis KSh 21 adsorbed on different glass rings/El-Aassar S.A., OmaarS.H., Rehm H.J.// Appl. Microbiol, and Bioteeechnol.-1988.-29.№5-C.442-446.

44. Видовая структура углеводородокисляющих бактериоценозов водных экосистем разных климатических зон / Корнелли Т.В.,Дермичева С.Г.,Ильинский и др.//Микробиология.-1994.-Т.63., №5.-С.917-923.

45. Functions of the associations of phototrophic and heterotrophic microorganisms in processes of soil and water remediation after oil spills / K.V.Kvitko,E.Th.

46. Safonova,I.A.Dmitrieva, M.I.Iankevitch, V.V.Hadeeva, A.B.Lyzynov //2nd Practical Conference "Sustainable development:system analysis in ecology", September 9-12,1996,- Sevastopol,Ukraine,-P.112.

47. Свойства углеродокисляющей бактерии Rhodococcus erytropolis, изолированной из нефтяного месторождения/

48. Е.И.Милехина,И.А.Борзенков, И.С.Звягинцева и др.//Микробиология.-1998.-Т.67,№3.-С.328-332.

49. Biotechology in processes of soil remediation after oil spills/ А.В. Lyzunov, M.I. Iankevitch, V.I.Iakovlev //International conference"ISEB-97-Meeting Bioremediation", September 24-27,1997,-Leipzig, Germany,-P.106.

50. G.Barabas, N.A.Sorkhoh, F.Fardoon, S.S.Radwan/n-Alkane-Utilization by Oligocarbophilic Actinomycete Strains from Oil-Polluted Kuwaiti Desert Soil. Actinomycetol.-1995.-Vol.9.-№1.-P.13-18.

51. Методы почвенной микробиологии и биохимии /Д.Г.Звягинцев, И.В.Алексеева, И.П.Вабьева, Т.Г.Мирчник.-М.:Изд-во МГУ,1980.-224с.

52. Cerniglia С.Е.,Gibson D.T.,van Baalen С./Oxidation of naphtalene by cyanobacteria and microalgae.//J.Gen.Microbiol.-1980.-Vol.116.-P.495-500.

53. Пальгунов П.П., Сумароков М.В. Утилизация промышленных отходов. -М.: Стройиздат,19 90.-352с.

54. Богомолов А.И., Гайле А.А., Драбкина А.Е. Химия нефти и газа Учеб. пособие для вузов/ -2-е изд.,перераб.-J1.,-1989.-424 с.

55. Шлыгин И.А. Нефтяные углеводороды в морских донных отложениях: химические и биологические процессы./ Обзор, сер.87. Мониторинг состояния окружающей природной среды.-Обнинск: ВНИИГМУ-МУД. 1986.-47с.

56. Cerniglia С.Е. Biodegraddation of polycyclic aromatic hydrocarbons.//Biodegrad.-1992.-Vol.3.-N 2-3.-P.351-3368.

57. Bauer J.E.,Capone D.G. Effects of co-occurring aromatic hydrocarbons on degrdation of individual polycyclic aromatic hydrocarbons in marine sediment slurries.//Appl. Environ. Microbiol.-1988.-Vol.54.-P.1649-1655.

58. Al-Bashir B.,Cseh T.,Leoluc R.,Samson R. Effect of soil/contaminant interaction on the biodegradation of naphtalene in flooded soil under denitrifyingcondition.//Appl.Microbiol.Biotechnol.-1990.-Vol.34.-№3.-P.414-419.

59. Young L.Y.,Haggblom M.M. The anaerobic microbiology and biodegradation of aromatic compounds.//Advan. Appl.Biotechnol.-Ser. Biotechnol. Biodegradation.-1990.-P.3-19.

60. Bioremediation of oil spills./Foght J.M.,Westlake D.W.S.//Spill Technol. Newslett.,17,№3,CA,0.0.92.p.1-10.

61. Бельков В.В. Биоремедиация: принципы, проблемы, подходы //Биотехнология.-1995.-№3-4.-С.20-27.

62. Утилизация и обезвреживание нефтесодержащих отходов/

63. Bioventing for in situ remediation/Lee Michael DSwindoll Michael//Hydrol. Sci.J.,38,№4,GB,0.0.93. P.273-282.

64. Пат. 2023686,кл.С 0 2 F 3/34. Консорциум микроорганизмов, ис пользуемый для очистки почвенных и солоноватоводных экосистем от загрязнения нефтепродуктами/ Борзенков И.А. идр.;заявл.13.04.92;опубл.30.11.94.-73с.

65. Звягинцев Д.Г. Управление микробными популяциями в почве . //Сельхоз . Биология.-1983.-№10.-С.102-107 .

66. Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы.-М.:Изд-во МГУ,1987.-С.256.

67. Исмаилов Н.М. Биодеградация нефтяных углеводородов в почве, инокулированной дрожжами//Микробиология.-1985.-Т.54.-№5.-С.835-841.

68. Губанова Т.А., Полякова И.Н., Герасимова Т.В. и др. Биодегра дация нефти психрофильными микроорганизмами.//Новые направления биотехнологии.-1992.-С.146.

69. Панозишвили К.П. Влияние углеводородокисляющих бактерий на процесс восстановления продуктивности загрязненной нефтью почвы. //Достижения микробиологии-практике.-1985.-Т.6.-С.143.

70. Лалыцнов П.П., Сумароков Н.В./ Утилизация промышленных отхо-дов//Стройиздат.- 1990.-С.15.

71. Дядечко B.H., Толстокорова J1.E., Гашев C.H. и др. О биологической рекультивации нефтезагрязненных лесных почв Среднего При-обья.//Почвоведение.-1990.-№9.-С.14 8-151.

72. Комплексная биотехнология очистки воды промышленных предприятий от нефтезагрязнений/Янкевич М.И.,Хадеева В.В.,Квитко К.В.// Освоение Севера и проблемы рекультивации: Тез. докл. Ш-Межд. конф. 28-31 мая1996 г.-СПб,1996.-С. 234-234.

73. Холоденко В.П., Чугунов В.А., Кобелев В.С и др. Использование препарата "Экойл" для очистки почв и водоемов от нефтяных загрязнений . //Интродукция микроорганизмов в окружающую среду.-М.-1994.-С.113.

74. Борзенков И.А. и др. Использование микроорганизмов при ликвидации нефтяных загрязнений почв//Интродукция микроорганизмов в окружающую среду.-М.-1994.-С.14-15.

75. Стабникова Е.В., Селезнева М.В., Дульгеров А.Н., Иванов В.Н. Применение биопрепарата "Лестан" для очистки почвы от углеводородов нефти//Прикладная биохимия и микробиология.-1996.-Т.32.-№2.-С.219-223.

76. Вельков В.В. Интродукция генетически модифицированных микроорганизмов в окружающую среду: перспективы//Генетика.-1994.1. Т.30.-№5.-С.581-592.

77. Головлева Л.А. Микробные методы деконтаминации почв и грунтовых вод.//Биотехнология.-1992.-№5.-С.60-64.

78. Микробиологическая очистка воды и почвы от нефти и нефтепродуктов/Войкова И.А., Конев Ю.Е. // Тез. докл. конференции по интродукции микроорганизмов в окружающую среду,17-19 мая 1994 г.Москва, 1994,-С.145.

79. Деструкция нефти внесенной в почву популяцией бактерий/Лысак А.В., Лапыгина Е.В. // Тез. докл. конференции по интродукции микроорганизмов в окружающую среду,17-19 мая 1994 г.-Москва, 1994,-С.145.

80. Sorhoh N.А.,Al-Hasan R.H.,Majeda Khanafer,Radwan

81. S.S./Establishment of oil-degrading bacteria in oil associated with cyanobacteria in oil-polluted soil//J.Applied Bacteriology.-1995.-P.194-199.

82. Al-Hasan R.H.,Sorkhoh N.A.,Al-Balder D.,Radwan S.S.(1994) "Utilization of hydrocarbons by cyanobacteria from microbial mats on oily coast of the Gulf".Applied Microbiology and Biotechnology.41,615-619.

83. Иммобилизация дрожжевых культур p. Candida на капроновых во-локнах/Суржко Л.Ф., Янкевич М.И., В.И.Яковлев, И.И.Шамолина// Охрана окружающей среды от загрязнения промышленными выбросами ЦБП, СПбТИ ЦБП,-СПб, 1993,-С.124-128.

84. New biopreparations for water and soil decontamination from oil products/L. Surzhko, M. Jankevich, V, Hadeeva,V.Jakovlev// International conference "Biotechnology St.Peterburg, 94", September 21-23,1994,-St.Peterburg,Russia,-P.164.

85. Суржко Л.Ф.Очистка природных и сточных вод от нефтезагрязне-ний иммобилизованными углеводородокисляющими микроорганизмами: Диссертация на соискание ученой степени канд.техн. наук/Санкт

86. Петербургский Технологический институт(Технический университет). СПб,1999.-117с.

87. Утилизация нефти в почве и воде микробными клетками /Л.Ф.Суржко,3.И.Финкельштейн, Б.П.Баскунов, М.И.Янкевич, В.И.Яковлев, Л.А.Головлева// Микробиол.-1995.-т.64.-N3.-С.3 93-398 .

88. Гусев М.В., Коронелли Т.В. Микробиологическое разрушение неф тяного загрязнения//Биол.-1981.-№6.-С.835-84 4.

89. Утилизация нефти в почве и воде микробными клетками/Л . Ф . Суржко, 3.И.Финкельштейн, Б.П.Баскунов. М.И.Янкевич, В.И.Яковлев, Л.А.Головлева//Микробиол.-1995.-т.64.-№3.-С.393-398

90. Кросс А. Введение в практическую инфракрасную спектроскопию. М.:Иностр. литер.,1961.- С.110.

91. Столяров Б.В.//Прикладная Химия.-1961.-т.34, №12.-С.2726-2733 .

92. Семенов А.Д. Руководство по химическому анализу поверхности вод и суши.-Л.:Гидрометеоиздат,197 0.-С.427.

93. Методы почвенной микробиологии и биохимии:Учеб.пособие/под ред.Д.Г.Звягинцева.-М.:Изд-во МГУ,.1991.-304с.

94. Хаваш Е. Ионно и молекулярно селективные электроды в биологи ческих системах//Мир.-1988.-С.221.

95. Утилизация нефтесодержащих отходов управляемым биокомпостированием/Лизунов А.Б.,Янкевич М.И.,Хадеева В.В.,Авсюкевич А.П.// Экобиотехнология:борьба с нефтяным загрязнением окружающей среды: Тез. докл. конф.,29-30 января 2001 г.-Пущино,2001.-С.36-38.

96. Микробиологические методы очистки почв от тяжелых нефтепродуктов/Лизунов А.Б.,Суржко Л.Ф.,Янкевич М.И.,Хадеева В.В., Авсюкевич А.П.//Освоение Севера и проблемы природовосстановления: Тез. докл. V Межд. конф.,5-8 июня 2001 г.Сыктывкар,2 001.-С.166.