Аполипопротеин-Е в липидном обмене у жителей Европейского Севера

Канева, Анастасия Михайловна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Аполипопротеин-Е в липидном обмене у жителей Европейского Севера
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Аполипопротеин-Е в липидном обмене у жителей Европейского Севера"

□□3457828

На правах рукописи

КАНЕВА АНАСТАСИЯ МИХАЙЛОВНА

АПОЛИПОПРОТЕИН-Е В ЛИПИДНОМ ОБМЕНЕ У ЖИТЕЛЕЙ ЕВРОПЕЙСКОГО СЕВЕРА

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Сыктывкар - 2008

003457826

Работа выполнена в ГУ Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Евгений Рафаилович Бойко

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Лев Исаакович Иржак

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Козлов Андрей Игоревич

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение

высшего профессионального образования «Поморский государственный университет им. М.В. Ломоносова» (г. Архангельск)

Защита состоится » декабря 2008г. в /и- _ часов на заседании диссертационного совета Д 004.017.01 в ГУ Институт физиологии Коми НЦ Уральского отделения Российской академии наук по адресу: 167982, Республика Коми, Сыктывкар, ГСП-2, ул. Первомайская, д. 50.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГУ Институт физиологии Коми НЦ Уральского отделения Российской академии наук

2/»,

Автореферат разослан « ¿У » ноября 2008г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент /А Н.Г. Варламова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Природно-климатические условия Севера предъявляют повышенные требования к организму человека (Данишевский, 1968; Авцын, 1972; Агаджанян, 1983; Авцын и др., 1985; Ткачев и др., 1992). Воздействие неизбегаемых природных факторов Севера приводит к существенным перестройкам физиологических функций в организме человека, в основе которых лежат изменения функционального состояния эндокринной системы и метаболических процессов, в особенности липидного обмена (Панин, 1978, 1983; Данилова, 1986; Бойко, Ткачев, 1994; Бойко, 1996; Бойко и др., 2007). Согласно концепции Л.Е. Панина (1978), в высоких широтах происходит «переключение метаболизма с углеводного типа на жировой». Данная концепция постулирует преобразования липидного профиля периферической крови у человека на Севере, возникающие под влиянием внешних факторов, что нередко приводит к трансформации функционирования метаболических путей и развитию нарушений липидного обмена. Установлено, что у жителей Севера повышена частота встречаемости гиперлипидемий (Авцын и др., 1985; Nikitin, 1988). В свою очередь, нарушения липидного обмена способствуют развитию большого числа социально-значимых заболеваний, особенно сердечнососудистой патологии.

Важную роль в регуляции липидного обмена играет аполипопротеин-Е (апоЕ), входящий в состав большинства сывороточных липопротеинов. Основная роль апоЕ заключается в том, что он в качестве лиганда специфических рецепторов (апоЕ и апоВ,Е-рецепторов) печени и периферических тканей, обеспечивает захват и удаление липопротеинов, тем самым поддерживая в организме гомеостаз липидов (Mahley, Innerarity, 1983; Funke et al., 1984). Установлено, что апоЕ принимает непосредственное участие в синтезе ряда липопротеинов, поэтому отклонения содержания апоЕ от нормы сопровождаются дислипидемиями. Это показано в экспериментах на животных с врожденным апоЕ-дефицитом и избыточным содержанием апоЕ (Hofker et al., 1998; Bock et al., 2007). У человека описаны случаи дефицита и повышения содержания апоЕ при некоторых видах наследственных (первичных) гиперлипидемий (Ghiselli et al., 1982; Schaefer et al., 1986; Gibson et al., 1987). В то же время, роль апоЕ в развитии вторичных нарушений липидного обмена у человека освещена недостаточно.

В настоящее время основное внимание уделяется изучению полиморфизма гена апоЕ. Три основных аллеля гена апоЕ (е2, сЗ, 84) определяют существование трех изоформ: Е2, ЕЗ, Е4. Установлено, что изоформы апоЕ (Е2 и Е4) оказывают выраженное влияние на уровень липидов в крови и предрасположенность к ряду сердечно-сосудистых и нейродегенеративных заболеваний (Breslow, 1988). Однако, в большинстве работ, посвященных изучению полиморфизма гена апоЕ, как правило, не учитывается содержание апоЕ в крови. Тем не менее, показано, что уровень апоЕ в крови может существенно изменять, а в ряде случаев даже маскировать влияние генотипа апоЕ на содержание липидов (Haddy et al., 2002). Кроме того, наиболее распространенной аллелью гена апоЕ в большинстве популяций мира является аллель еЗ, частота встречаемости которой варьирует от 67 до 80% (Gerdes et al., 1992; Howard et al., 1998). В связи с этим, полиморфизм гена апоЕ не вносит ведущий вклад в развитие нарушений липидного обмена.

Между тем, практически не изучены особенности содержания и функциональное значение апоЕ в липидном обмене у жителей Севера, несмотря на то, что специфические черты липидного обмена у человека на Севере давно выявлены. Не определены также возрастные и тендерные особенности показателей апоЕ у человека на Севере.

Диссертационное исследование выполнено в соответствии с планом НИР Института физиологии Коми НЦ УрО РАН «Физиолого-биохимические взаимосвязи в сезонных циклах у человека на Севере» (№ ГР 01.2.007 01808).

Цель исследования. Изучить влияние содержания апоЕ на показатели липидного обмена у жителей европейского Севера.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Определить содержание апоЕ в сыворотке, крови у здоровых жителей европейского Севера.

2. Установить тендерные и возрастные особенности содержания сывороточного апоЕ у человека на Севере.

3. Оценить роль апоЕ в развитии нарушений липидного обмена у жителей европейского Севера.

4. Выявить влияние апоЕ на показатели липидного обмена у жителей европейского Севера при различных функциональных состояниях печени.

Научная новизна исследования. Впервые исследовано содержание апоЕ в сыворотке крови у жителей европейского Севера. Установлено смещение границ варьирования уровня сывороточного апоЕ в сторону более низких показателей. Показано повышение содержания апоЕ в старших возрастных группах и отсутствие гендерных различий уровня апоЕ у северян. Впервые выявлено, что гиперхолестеринемия у жителей европейского Севера сопровождается инверсией корреляционных связей между апоЕ и показателями сывороточных липидов. У жителей европейского Севера впервые показано развитие гипертриглицеридемии при низких уровнях сывороточного апоЕ. Установлено влияние апоЕ на содержание триглицеридов в сыворотке крови в зависимости от функционального состояния печени.

Научно-практическая значимость исследования. Полученные результаты дополняют современное представление об адаптационных перестройках липидного обмена у человека на Севере. Установленные показатели апоЕ у жителей европейского Севера могут быть положены в основу региональных нормативов для людей, проживающих в соответствующих климатических условиях. Данные исследования о повышенном риске развития гипертриглицеридемии при низких уровнях сывороточного апоЕ у жителей европейского Севера могут быть рекомендованы к использованию органами практического здравоохранения для целей диагностики и прогнозирования нарушений липидного обмена. Вьивленная сопряженность возникновения гипертриглицеридемии при низком содержании апоЕ с функциональным состоянием печени может быть использована для разработки современных диагностических алгоритмов при формировании групп риска и прогноза развития сердечно-сосудистой патологии.

Исследование поддержано государственным контрактом № 02.512.11.2190 от 28:09.2007г. «Разработка пектиновых биопрепаратов, повышающих устойчивость

человека к экстремальным условиям Севера», хоздоговорной работой «Разработка системы мероприятий по повышению показателей здоровья, снижению заболеваемости и профилактики социально значимых заболеваний у лиц, работающих в шумных условиях на предприятиях заказчика ОАО «Монди Бизнес Пейпа Сыктывкарский ЛПК» на 2007-2010 годы», грантами молодых ученых и аспирантов УрО РАН «Особенности обмена сывороточных липопротеидов в норме и при гиперлипидемии у жителей европейского Севера» (в 2006г.), «Роль аполипопротеина-Е в липидном обмене при сердечно-сосудистой патологии у человека на Севере» (в 2007г.). Результаты исследования внедрены в работу клинико-диагностической лаборатории и терапевтических отделений МУЗ «Центральная поликлиника г.Сыктывкара» (акт о внедрении от 28.08.2008г.).

Положения, выносимые на защиту:

1. Содержание апоЕ в сыворотке крови у жителей европейского Севера понижено по сравнению с общепринятой нормой.

2. Уровень сывороточного апоЕ у жителей европейского Севера коррелирует с изменением содержания общего холестерина и триглицеридов. Повышение уровня апоЕ в сыворотке крови сопровождается гиперхолестеринемией, тогда как снижение содержания апоЕ — гипертриглицеридемией.

3. Наибольшее содержание триглицеридов у жителей европейского Севера отмечается при низком уровне сывороточного апоЕ на фоне высоких значений активности печеночного фермента - гамма-глутамилтрансферазы.

Апробация работы. Результаты исследования представлены на семинарах отдела экологической и социальной физиологии человека Института физиологии Коми НЦ УрО РАН (2006-2008г.); 13 Международном конгрессе по приполярной медицине, Новосибирск, 2006; Всероссийской конференции с международным участием «Медико-физиологические проблемы экологии человека», Ульяновск, 2007; IV симпозиуме с международным участием «Проблемы адаптации человека к экологическим и социальным условиям Севера», Сыктывкар, 2008.

По материалам исследования опубликовано шесть научных работ, из них четыре статьи - в центральных рецензируемых журналах.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы. Работа содержит 15 таблиц и 11 рисунков. Библиография состоит из 212 источников (36 - отечественных и 176 - зарубежных авторов).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В работе обследованы практически здоровые жители (п=421) Республики Коми (г. Сыктывкар - 62°с.ш., г. Ухта - 63,5°с.ш.), из них 297 мужчин и 124 женщины. В рамках исследования проведено нагрузочное тестирование с помощью стандартной одноразовой жировой нагрузки у 6 мужчин-добровольцев, с исходно нормальными показателями триглицеридов (ТГ) и общего холестерина (ОХ).

Забор крови производился утром строго натощак из локтевой вены в вакутайнеры «Bekton Dickinson ВР» (Англия). В сыворотке крови определяли

показатели липидного обмена — ОХ, ТГ, холестерин липопротеинов высокой плотности (ХС-ЛПВП), anoAI, апоВ и апоЕ коммерческими наборами фирмы «Chronolab» (Швейцария). Содержание холестерина липопротеинов очень низкой плотности (ХС-ЛПОНП) и липопротеинов низкой плотности (ХС-ЛПНП) определяли расчетным путем по формуле Friedewald (1972). Коэффициент атерогенности (КА) рассчитывали по формуле Климова (1999).

С целью оценки функционального состояния печени определяли активность фермента - гамма-глутамилтрансферазы (ГГТ) в сыворотке крови унифицированным колориметрическим методом с использованием коммерческих наборов фирмы «Витал Диагностике СПб» (Санкт-Петербург). Оптическую плотность образцов измеряли на спектрофотометре Power Wave-200 (Bio-Tek Instruments, США) при следующих длинах волн: 340 нм (аполипопротеины), 405 нм (ГГТ), 505 нм (ОХ, ТГ) и 600 нм (ХС-ЛПВП).

Оценку нарушений липидного обмена у обследуемых лиц проводили по показателям ТГ и ОХ. За норму принимались уровни ТГ и ОХ до 1,8 и 5,2 ммоль/л, соответственно (Рекомендации ВНОК). Гипертриглицеридемию (гиперТГ) диагностировали при содержании ТГ более 1,8 ммоль/л. При показателях ОХ выше 5,2 ммоль/л диагностировали гиперхолестеринемию (гиперХС).

Применена методика одноразовой жировой нагрузки (Patsch et al., 1983) в модификации, состоящей в том, что мониторинг продолжался 24 часа (Бойко и др., 2000). Прием жирового завтрака состоял в употреблении утром эмульгированного жира в виде 30%-ных сливок. В течение последующих 24 часов обследуемые не принимали пищу, только воду до 1,5 л/сут. Кровь забирали из локтевой вены до приема жирового завтрака и через 2,9 и 24 часа.

Статистическая обработка полученных результатов. Статистическую обработку полученных результатов осуществляли с помощью прикладного пакета программ «STATISTICA» (версия 6.0, StatSoft Inc, 2001) и «Биостат» (версия 4.03). Достоверность различий между изучаемыми выборками по анализируемым показателям оценивали с помощью критериев Манна-Уитни (в случае двух выборок), Крускала-Уоллиса (в случае трех и более выборок) с последующим попарным межгрупповым сравнением величин методом Данна, Фридмана (в случае повторных наблюдений одной выборки). Для выявления взаимосвязей между изучаемыми показателями вычисляли коэффициент ранговой корреляции Спирмена. Влияние группирующих признаков на показатели оценивали с помощью однофакторного (ANOVA) и двухфакторного (MANOVA) дисперсионного анализа. Для анализа качественных признаков использовали критерий у? (Гланц, 1998; Реброва, 2002). Различия считали достоверными при уровне значимости р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Тендерные и возрастные особенности содержания апоЕ у жителей европейского Севера. Результаты исследования содержания апоЕ в сыворотке крови у жителей европейского Севера свидетельствуют, что средние показатели апоЕ у мужчин и женщин (2,90±1,15 и 2,80±0,98 мг/дл) достоверно не различались. Данное наблюдение согласуется с результатами ряда авторов (Gregg et al., 1984; Au et al., 1986; Liu, Liu, 1992). Вместе с тем, некоторые исследователи отмечают

наличие тендерных различий в содержании апоЕ и объясняют их особенностями гормонального статуса у мужчин и женщин (Havel et al., 1980; Phillips et al., 1983; Noma et al., 1991). В частности, установлено, что эстрадиол повышает содержание апоЕ в крови, тогда как тестостерон оказывает противоположный эффект (Patsch et al., 1980; Kushwaha et al., 1991; Haddy et al., 2002). Таким образом, можно предположить, что либо у жителей европейского Севера гормональный профиль не сказывается существенно на уровне апоЕ в сыворотке крови, либо его эффект маскируется влиянием других факторов.

У жителей европейского Севера наблюдалось увеличение содержания сывороточного апоЕ в старших возрастных группах (табл. 1), что соответствует данным литературы (Phillips et al., 1983; Noma et al., 1991; Schiele et al., 2000; Haddy et al., 2002).

Таблица 1

Содержание апоЕ у жителей европейского Севера в зависимости от возраста (M±SD)

Возрастная Мужчины Женщины

группа Возраст, апоЕ, % лиц с апоЕ Возраст, апоЕ, % лиц с алоЕ

лет мг/дл ниже нормы лет мг/дл ниже нормы

1-я группа 17-21 2,42±1,22 70,4 16-20 2,66±0,80 56,1

п=27 п=41

2-я группа 22-35 2,51±1,17 59,8 21-35 2,66±0,97 57,4

п=102 п=47

3-я группа 36-45 3,03±1,06 38,6 36-45 2,99±1,35 41,7

п=88 ** 1-2,2-3 п=12

4-я группа 46-60 3,42±0,95 21,3 46-55 3,20±0,98 33,3

п=80 ** 1-4, 2-4, 3-4 п=24

Примечание: ** - различия между группами достоверны при р<0,01.

В возрастных группах достоверных различий по содержанию апоЕ в сыворотке крови между мужчинами и женщинами также не наблюдалось. Средние показатели апоЕ у обследуемых лиц в возрастных группах до 36 лет находились за нижними пределами нормы (2,7-4,5 мг/дл). В данных возрастных группах отмечался максимальный процент лиц с показателями апоЕ ниже нормы.

Средний уровень сывороточного апоЕ у мужчин в возрасте 36-45 лет достоверно повышался на 25,2 и 20,7% относительно средних значений 1-й и 2-й возрастных групп. Наиболее высокое содержание апоЕ выявлялось у мужчин после 45 лет. В целом, средние значения апоЕ у мужчин в возрасте 46-60 лет увеличились на 41,3% по сравнению с показателями в группе лиц 17-21 лет.

Тенденция к повышению содержания апоЕ у женщин отмечалась после 35 лет, но достоверных различий между возрастными группами по сывороточным показателям анализируемого аполипопротеина не выявлено. Увеличение среднего показателя апоЕ у женщин в возрасте 46-55 лет относительно такового у лиц в возрасте 16-20 лет составило 20,3%.

Увеличение средних значений апоЕ в возрастных группах мужчин и женщин сопровождалось снижением доли лиц с показателями апоЕ ниже нормы. Можно предположить, что наблюдаемое повышение содержания апоЕ в старших

возрастных группах в значительной степени связано с возрастными изменениями липидного обмена.

Анализ индивидуальных данных показал, что у жителей европейского Севера отмечался довольно высокий процент лиц с низким содержанием сывороточного апоЕ (рис. 1).

мужчины женщины

! ЕЗ апоЕ ниже нормы НИ апоЕ норма □ апоЕ выше нормы

Рис. 1. Процентное соотношение лиц с показателями апоЕ ниже, выше и в пределах нормы у жителей европейского Севера.

Содержание сывороточного апоЕ ниже нормы отмечалось у 43,9% мужчин и 50,0% женщин. Вместе с тем, за пределами верхней границы нормы находилось незначительное количество вариант, 8,7% у мужчин и 5,8 % у женщин. Сравнить полученные результаты с данными литературы достаточно сложно, вследствие отсутствия стандартизации методов количественного определения апоЕ. В популяционных исследованиях, которых сравнительно немного, для измерения концентрации апоЕ в крови широко использовали различные иммунологические методы, и поэтому референсные значения апоЕ, полученные в данных работах, несколько расходятся (Siest et al., 1995). Согласно результатам сравнительной оценки содержания апоЕ в крови у людей, проживающих в шести странах Европы, существует северо-южный градиент увеличения концентрации апоЕ в крови (Schiele et al., 2000; Haddy et al., 2002). Наиболее низкое содержание апоЕ отмечалось у I жителей Финляндии.

Концентрация апоЕ в крови у жителей Финляндии в возрасте 45-64 лет (3,69 мг/дл у мужчин и 3,56 мг/дл у женщин (Haddy et al., 2002)) вполне сопоставима с нашими результатами для жителей европейского Севера соответствующей [ возрастной группы. По мнению ряда авторов, содержание апоЕ в крови в основном зависит от скорости синтеза, а не от интенсивности его катаболизма (Mahley et al., I 1999; Millar et al., 1999). Можно предположить, что у жителей Севера генетически детерминирована более низкая продукция апоЕ. Вероятно, более низкое содержание сывороточного апоЕ у жителей Севера обусловлено особенностями метаболизма, в том числе и липидного обмена. Установлено, что у жителей Севера отмечается интенсификация липидного обмена, которая лежит в основе так называемого переключения метаболизма с «углеводного» типа на «жировой» (Панин, 1978). Одним из наиболее ярких проявлений этого феномена являются повышенные уровни ТГ и липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП) в крови у северян. Таким образом, низкие показатели апоЕ у жителей европейского Севера, вероятно, можно рассматривать как адаптивное приспособление, обеспечивающее

возможность осуществления метаболических перестроек для активизации использования липидных энергоносителей в целях компенсации повышенных энергозатрат на Севере.

Функциональное значение апоЕ при нарушениях липидного обмена у жителей европейского Севера. В связи с тем, что большая часть случаев гиперлипидемий приходилась на возрастные группы после 35 лет, а также для исключения возможного влияния эстрогенов на показатели липидного профиля, выяснение роли апоЕ в развитии нарушений липидного обмена проводилось у мужчин в возрасте 35-60 лет.

У жителей европейского Севера повышение показателей ОХ и ТГ сопровождалось достоверными изменениями содержания апоЕ в сыворотке крови (табл. 2).

Таблица 2

Показатели липидного обмена у жителей европейского Севера при нормолипидемии, гипертриглицеридемии и гиперхолестеринемии (М±8Э)

Показатель Нормолипидемия п = 55 Гиперхолестеринемия п = 28 Гипертриглицеридемия п = 34

ОХ, ммоль/л 3,92±0,52 5,62±0,50 ** 4,27±0,57 *, ##

ТГ, ммоль/л 1,20±0,27 1,33±0,34 2,54±0,46 **, ##

ХС-ЛПОНП, ммоль/л 0,55±0,12 0,61±0,16 1,17±0,21 **,##

ХС-ЛПНП, ммоль/л 1,76±0,56 3,57±0,66 ** 1,77±0,67 т

ХС-ЛПВП, ммоль/л 1,64±0,52 1,45±0,28 1,39±0,31 **

апо-AI, мг/дл 119,59±42,07 133,20±50,40 144,38±36,33 *

апо-В, мг/дл 82,08±42,86 82,95±49,12 109,44±34,71 **

апоЕ, мг/дл 3,28±1,04 3,87±0,81* 2,64±0,94*

Примечание: * - различия по сравнению с нормолипидемией достоверны при р<0,05, ** - при р<0,01; ## - различия по сравнению с гииерхолестеринемией достоверны при р<0,01.

При гиперХС содержание сывороточного апоЕ было достоверно выше (на 17,9%; р<0,05), чем при нормолипидемии. Причем у 22,2% лиц показатели апоЕ находились за верхней границей нормы. Наблюдаемое увеличение содержания апоЕ в сыворотке крови у жителей европейского Севера при гиперХС соответствует данным литературы (Mahley, 1982; Gibson et al., 1987; Takagi et al., 1988; Shimano et al., 1992).

При гиперТГ, напротив, наблюдалось снижение уровня сывороточного апоЕ (на 19,5%; р<0,05), по сравнению с показателями при нормолипидемии. Анализ индивидуальных значений показал, что у 54% лиц с гиперТГ показатели апоЕ оказались ниже нормы. В целом, отклонение содержания апоЕ от нижней границы нормы у лиц с гиперТГ составило от 6 до 51%. Лиц с показателями апоЕ выше нормы в группе с гиперТГ не наблюдалось. В литературе развитие гиперТГ при пониженных концентрациях апоЕ не описано.

Развитие гиперХС и гиперТГ у обследованных лиц сопровождалось изменениями в липид-транспортной системе крови. При гиперХС отмечалось достоверное повышение уровня ХС-ЛПНП (р<0,01) по сравнению с

нормолипидемией. Содержание ХС-ЛПОНП и ХС-ЛПВП при гиперХС существенно не отличалось от показателей при нормолипидемии.

При гиперТГ более чем в 2 раза (р<0,01) увеличивалось содержание ХС-ЛПОНП. Уровень ХС-ЛПВП при гиперТГ по сравнению с нормолипидемией снижался на 15% (р<0,01), тогда как содержание ХС-ЛПНП практически не изменялось. Можно предположить, что основной причиной указанных изменений при гиперТГ является недостаточное количество апоЕ, которое приводит, прежде всего, к замедлению рецептор-опосредованного удаления ЛПОНП, а также, возможно, к снижению интенсивности образования липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) и липопротеинов высокой плотности (ЛПВП). Последнее предположение основывается на результатах исследований Gabelli et al. (1986), которые установили, что скорость образования ЛПНП у лиц с наследственной недостаточностью апоЕ снижена примерно в 5 раз и Gordon et al. (1983), показавших, что для эффективного формирования зрелых ЛПВП необходимо наличие апоЕ.

Изменение липидного профиля при гиперХС и гиперТГ у жителей европейского Севера отражалось на характере корреляционных связей между показателями апоЕ и липопротеинов (табл. 3). Выявлены значимые корреляционные связи между уровнем апоЕ и содержанием ХС-ЛПОНП (р<0,05) и ХС-ЛПВП (р<0,01) при нормолипидемии, в то время как, при гиперХС корреляция между данными показателями отсутствовала.

Наличие значимых корреляций между содержанием апоЕ и ХС-ЛПОНП, ХС-ЛПВП при нормолипидемии свидетельствует об определяющей роли этого аполипопротеина в поддержании уровня указанных липопротеинов в сыворотке крови. Отсутствие корреляции между показателями апоЕ и ХС-ЛПОНП, ХС-ЛПВП при гиперХС показывает, что регулирующие влияние апоЕ на метаболизм ЛПОНП и ЛПВП в значительной степени ослабевает.

Таблица 3

Коэффициенты корреляции апоЕ с показателями липопротеинов при нормолипидемии, гипертриглицеридемии и гиперхолестеринемии

Группа ХС-ЛПОНП ХС-ЛПНП ХС-ЛПВП

Нормолипидемия п = 55 -0,28 * 0,23 0,37 **

Гипертриглицеридемия п = 34 апоЕ 0,19 0,08 -0,05

Гиперхолестеринемия п = 28 , 0,01 -0,43 * 0,04

Примечание: корреляция достоверна при *р<0,05; **р<0,01.

Можно предположить, что корреляционная связь между показателями апоЕ и ХС-ЛПОНП при гиперХС в значительной степени утрачивается вследствие того, что обогащение холестерином молекулы ЛПОНП изменяет ее конформацию, в результате апоЕ/В-100-лиганд становится неактивным и нарушается процесс рецепторного поглощения липопротеинов (Кш1та11а, НахгатА, 1978). Отсутствие корреляционной зависимости между уровнями апоЕ и ХС-ЛПВП, вероятно,

является следствием того, что при гиперХС изменяется количественное содержание отдельных субфракций ЛПВП. ЛПВП являются довольно гетерогенным классом липопротеинов, состоящим из двух основных подклассов - ЛПВП2 и ЛПВПЗ, каждый из которых, в свою очередь, разделяется на ряд субфракций ^¡БепЬе^, 1984). Среди субфракций ЛПВП выделяют как апоЕ-«богатые», так и апоЕ-«бедные» частицы (Коо е1 а!., 1985). В норме в крови преобладают субфракции класса ЛПВП2. При нарушениях липидного обмена увеличивается доля частиц класса ЛПВПЗ (Е15епЬег§, 1984; Камышников, 2004).

Напротив, при гиперХС отмечалось наличие достоверной отрицательной корреляции между уровнями апо-Е и ХС-ЛПНП (р<0,05) и отсутствие таковой при нормолипидемии. АпоЕ не оказывает непосредственного влияния на концентрацию ЛПНП в крови, поскольку содержится в данном классе липопротеинов в минорных количествах (МаЫеу, 1ппегагку, 1983). Тем не менее, при изучении метаболизма ЛПНП у лиц с наследственной недостаточностью апоЕ установлена важная роль этого аполипопротеина в образовании нормальных ЛПНП. Показано, что апоЕ не только интенсифицирует процесс превращения липопротеинов промежуточной плотности (ЛППП) в ЛПНП, но и определяет кинетические свойства ЛПНП. При наследственной недостаточности апоЕ образуются ЛПНП, обладающие пониженной скоростью катаболизма (СаЬеШ е! а1., 1986). В связи с этим, предполагается, что основное влияние апоЕ на содержание ЛПНП оказывает на этапе превращения ЛППП в ЛПНП. Наблюдаемая при гиперХС отрицательная корреляция между показателями апоЕ и ХС-ЛПНП, вероятно, отражает интенсификацию поглощения ЛППП клетками печени при участии ЛПНП-рецепторов и снижение интенсивности процесса образования ЛПНП из ЛППП при увеличении содержания апоЕ, и наоборот.

При гиперТГ значимых корреляций между уровнем апоЕ и показателями липопротеинов не обнаружено. Это может свидетельствовать о снижении регулирующего влияния аполипопротеина на процессы липидного обмена при гиперТГ.

Таким образом, при нарушениях липидного обмена у жителей европейского Севера наблюдается изменение содержания апоЕ в сыворотке крови. Уровень сывороточного апоЕ при гиперТГ достоверно ниже, а при гиперХС значимо выше по сравнению с нормолипидемией. Различный характер корреляционных связей между апоЕ и показателями липидного обмена при гиперлипидемиях может отражать изменение функциональных свойств апоЕ.

Влияние апоЕ на показатели липидного обмена при различных функциональных состояниях печени. Повышенные показатели активности ГТТ в сыворотке крови отмечались у 30,7% обследованных мужчин (п=192). Анализ индивидуальных данных показал, что значения активности ГГТ у обследуемых лиц относительно верхней границы нормы увеличивались от 1,0 до 182,9%, это соответствовало легкой степени повышения активности фермента. Незначительное повышение активности ГТТ в сыворотке крови, как правило, наблюдается при слабом токсическом воздействии на печень, приеме алкоголя или лекарственных препаратов (Титов, Творогова, 2004). В этом случае, увеличение активности ГТТ в сыворотке крови является следствием высвобождения мембраносвязанной ГГТ в результате повреждения гепатоцитов (Камышников, 2004).

Достоверных различий по частоте выявления нарушений липидного обмена между группами лиц с нормальными и высокими значениями ГГТ не наблюдалось (%2=2,71, р=0,10). Вместе с тем, рассмотрение структуры нарушений липидного обмена у обследованных лиц позволило установить, что гиперТГ при повышенных относительно нормы показателях активности ПТ встречалась достоверно чаще, чем при нормальных активностях фермента (х2=8,18, р=0,004). Следовательно, можно предположить, что у жителей европейского Севера изменение функционального состояния печени, сопровождающееся повышением активности ГГТ в сыворотке крови, отражалось на метаболизме ТГ.

Зависимость показателей липидного обмена у жителей европейского Севера от активности ГГТ оценивали с помощью однофакторного дисперсионно го анализа, результаты которого представлены в таблице 4.

Выявлена зависимость содержания ТГ (р<0,01) и ХС-ЛПОНП (р<0,05) от показателей активности ГГТ в сыворотке крови, что согласуется с результатами многих исследований (БаШа й а1., 2005; 1лт й а1., 2005; ХепоиПз е! а1., 2008). Сила влияния значений активности ГГТ на содержание ТГ и ХС-ЛПОНП составила 10 и 6%, соответственно. Влияние активности ГГТ на другие показатели липидного обмена, в том числе и на апоЕ, не обнаружено.

Таблица 4.

Дисперсионный анализ влияния активности гамма-глутамилтрансферазы на показатели липидного обмена у жителей европейского Севера

Р-критическое Р-фактическое р-значение Сила влияния

ОХ 1,19 0,93 0,335 -

ТГ 1Д9 10,37 0,002 10%

ХС-ЛПОНП 1,19 5,87 0,016 6%

ХС-ЛПНП 1,19 1,62 0,204 -

ХС-ЛПВП 1,19 1,80 0,182 -

апоА1 1,19 0,73 0,394 -

апоВ 1,19 0,20 0,659 -

апоЕ 1,19 1,36 0,243 -

Содержание ТГ и ХС-ЛПОНП при повышенной активности ГГТ в сыворотке крови у жителей европейского Севера составило 1,90±1,09 и 0,81±0,36 ммоль/л, соответственно, и было значимо выше (р<0,05), чем при нормальных показателях активности ГГГ (1,51±0,59 и 0,69±0,27 ммоль/л). При этом содержание апоЕ в сыворотке крови у жителей европейского Севера при повышенных относительно нормы значениях активности ГГТ достоверно не отличалось от полученного у лиц с нормальными показателями активности фермента. Это может свидетельствовать о том, что изменение функционального состояния печени у обследованных лиц сопровождалось уменьшением относительного количества апоЕ в ЛПОНП.

В свою очередь, содержание апоЕ в сыворотке крови у жителей европейского Севера также оказывало влияние на ряд показателей липидного обмена (табл. 5).

Таблица 5

Дисперсионный анализ влияния содержания апоЕ на показатели липидного обмена у жителей европейского Севера

Р-критическое Р-фактическое р-значение Сила влияния

ОХ 2,19 4,03 0,019 5%

ТГ 2,19 3,77 0,025 5%

хс-лпонп 2,19 2,66 0,072 -

ХС-ЛПНП 2,19 7,07 0,001 10%

хс-лпвп 2,19 0,66 0,519 -

апоА1 2,19 0,52 0,594 -

апоВ 2,19 12,57 <0,001 17%

Обнаружена значимая зависимость показателей ОХ, ТГ, ХС-ЛПНП и апоВ от уровня сывороточного апоЕ. Влияние содержания сывороточного апоЕ на другие показатели липидного обмена не выявлено. Сравнительный анализ показателей липидного обмена у жителей европейского Севера в зависимости от уровня апоЕ показал,' что с увеличением содержания аполипопротеина в сыворотке крови отмечается повышение показателей ОХ и ХС-ЛПНП и снижение ТГ и апоВ.

Таким образом, у обследованных лиц отмечалось одновременное влияние значений апоЕ и активности ГТТ на содержание ТГ в сыворотке крови. С помощью двухфакторного дисперсионного анализа оценивали зависимость уровня сывороточных ТГ от содержания апоЕ при нормальных и высоких значениях активности ГТТ (рис. 2)._

Р(2.19)=14.74; р=0.00000

3.6

.ч л <=: о 2 2

2.4

1.2

0.6

( Ь_Т

х- Г.................Г"

- -

норма высок

активность ГГТ, нмоль/(с*л)

...-о~ ап0£ ниже нормы апоЕ норма ----- апоЕ выше нормы

Примечание: ** - различия по сравнению с другими группами достоверны при р<0,01; вертикальные линии показывают доверительный интервал среднего.

Рис. 2. Сравнительная характеристика показателей триглицеридов у жителей европейского Севера в зависимости от различного относительно нормы содержания апоЕ при нормальных и высоких значениях активности гамма-глутамил-трансферазы.

Сопоставление полученных результатов показало, что совместный эффект влияния содержания апоЕ и показателей активности ГГТ на уровень ТГ в сыворотке крови у жителей европейского Севера оказался более значительным (р«0,001), чем раздельное влияние апоЕ (р=0,025) и активности ГГТ (р=0,002).

При значениях апоЕ выше или в пределах нормы показатели активности ГГТ не оказывали существенного влияния на уровень ТГ в сыворотке крови. Так, содержание сывороточных ТГ в группах лиц с повышенными относительно нормы показателями апоЕ составило 1,40±0,80 ммоль/л при нормальной активности ГГТ и 1,42±0,41 ммоль/л при высокой активности ГГТ. В группе с нормальными значениями апоЕ и активности ГГТ средний уровень сывороточных ТГ оказался равным 1,41±0,65 ммоль/л, тогда как в группе с нормальным содержанием апоЕ, но с высокими показателями активности ГГТ - 1,49±0,51 ммоль/л.

При пониженном относительно нормы содержании апоЕ уровень сывороточных ТГ в значительной степени зависел от показателей активности ГГТ. Максимальное содержание ТГ в сыворотке крови отмечалось у лиц с показателями апоЕ ниже нормы на фоне повышенных значений активности ГГТ. У лиц с низким содержанием апоЕ в сочетании с высокими показателями активности ГТТ средний уровень сывороточных ТГ составил 2,61±1,32 ммоль/л и был на 56% выше такового при нормальных показателях фермента (1,67±0,61 ммоль/л) и на 45% выше верхней границы нормы.

Ведущую роль в избыточном накоплении ТГ у лиц с низким содержанием апоЕ в сыворотке крови на фоне высоких показателей активности ГГТ, по-видимому, играют нарушения катаболизма ЛПОНП. Основной причиной изменения интенсивности катаболизма липопротеинов у лиц данной группы, вероятно, являлось снижение рецептор-опосредованного удаления ЛПОНП, возникающее в результате как понижения общего уровня апоЕ в сыворотке крови, так и уменьшения относительного содержания апоЕ в ЛПОНП. Согласно данным литературы, сродство апоЕ-содержащих липопротеинов к рецепторам прямо пропорционально зависит от количества апоЕ в их составе (Innerarity, Mahley, 1978; Mahley, 1988).

Другая возможная причина нарушения катаболизма ЛПОНП у обследованных лиц при низком содержании апоЕ может быть связана с ослаблением процесса гидролиза ТГ в липопротеинах. Установлено, что гидролиз ТГ при участии липопротеинлипазы в «апоЕ-бедных» ЛПОНП осуществляется менее эффективно по сравнению с «апоЕ-богатыми» ЛПОНП (Evans et al., 1993).

Кроме того, можно предположить, что повышение показателей активности ГГТ у обследуемых лиц сопровождалось изменением активности ряда липолитических ферментов, синтезируемых печенью. Наиболее важным ферментом, принимающим непосредственное участие в регуляции элиминации «ТГ-богатых» липопротеинов, является печеночная триглицеридлипаза (ТГ-липаза). Печеночная ТГ-липаза осуществляет гидролиз ТГ в ремнантах липопротеинов до их захвата печеночными клетками или превращения в ЛПНП (Никитин и др., 1985; Титов, Лисицын, 2006). Снижение активности печеночной ТГ-липазы при заболеваниях печени, сопровождающееся увеличением содержания ТГ в сыворотке крови, показано во многих работах (Freeman et al., 1977; Sabesin et al., 1980; Itakura et al., 1983).

Таким образом, низкое содержание апоЕ в сыворотке крови и повышение показателей активности ГГТ, отражающих изменение функционального состояния печени - ее синтетическую функцию, у жителей европейского Севера, сказывается на различных этапах синтеза и катаболизма ТГ и ЛПОНП, способствуя развитию гиперТГ.

Динамика профиля сывороточных липидов и аполипопротеинов у мужчин при проведении нагрузочного тестирования с помощью «жирового завтрака». Исходное содержание липидов и липопротеинов у обследованных мужчин находилось в диапазоне нормальных значений (табл. б).

Таблица 6

Показатели липидного профиля и активности гамма-глутамилтрансферазы при жировой нагрузке у здоровых мужчин

Мужчины п = 6

Время исследования

натощак через 2 ч через 9 ч через 24 ч

ОХ, ммоль/л 4,21±0,41 4,01 ±0,52 4,36±0,31 5,00±0,99

ТГ, ммоль/л 0,88±0,17 1,01±0,13 1,00±0,37 0,91 ±0,11

ХС-ЛПОНП, ммоль/л 0,42±0,08 0,49±0,06_ 0,48±0,18 0,44±0,06

ХС-ЛПВП, ммоль/л 1,14±0,26 1,20±0,20 1,26±0,26 1,18±0,27

ХС-ЛПНП, ммоль/л 2,64±0,37 2,32±0,44 2,62±0,32 3,38±0,86

КА, отн. ед. 2,80±0,78 2,37±0,40 2,58±0,73 3,40±1,26

anoAI, мг/дл 138,83±38,76 152,33±50,99 134,67±27,65 138,17±50,21

апоВ, мг/дл 81,67±17,10 87,67±30,05 86,50±12,23 86,00± 19,73

апоЕ, мг/дл 1,96±0,78 1,82±0,60 2,24±0,93 2,40±0,83

ГГТ, нмоль/(с*л) 1350,0±500,0 1706,7±407,4 1681,7±668,8 1310,0±613,9

Показатели ТГ у обследованных лиц располагались преимущественно в нижней части лимитов нормы. Уровень ОХ в сыворотке крови варьировал в пределах от 3,65 до 4,62 ммоль/л. К А свидетельствовал о сбалансированности содержания атерогенных и антиатерогенных фракций липопротеинов. Содержание anoAI и апоВ у обследованных мужчин также находилось в пределах нормы, тогда как уровень апоЕ в сыворотке крови был довольно низким.

В ходе жировой нагрузки показатели липидного профиля у обследованных лиц достоверно не изменялись (табл. 6). Отсутствие повышения уровня сывороточных ТГ после жировой нагрузки не согласуется с данными литературы. Большинство авторов отмечают увеличение содержания ТГ в крови через 2-6 часов после жировой нагрузки с последующим возвращением его к исходному уровню через 8-9 часов (Groot, Scheek, 1984; Cohn et al., 1988; Бойко и др., 2000). При этом показано, что степень повышения уровня ТГ после «жирового завтрака» определяется исходными показателями липидного обмена. Более выраженное увеличение показателей ТГ в ответ на жировую нагрузку наблюдается у лиц с исходно повышенным содержанием липидов (Линейцева, Верещагина, 1980; Annuzzi et al., 1989; Щербакова и др., 1991; Karpe et al, 1999). Можно предположить, что стабильность показателей ТГ у обследованных лиц после «жирового завтрака» в

определенной степени была обусловлена исходно невысоким содержанием сывороточных ТГ.

Тенденция к повышению содержания ОХ и ХС-ЛПНП в сыворотке крови отмечалась у обследуемых лиц к 24 часу исследования. Отсутствие выраженной динамики содержания сывороточного ОХ в первые часы после приема «жирового завтрака» соответствует результатам ряда исследований (Линейцева, Верещагина, 1980; Щербакова и др., 1991; Бойко и др., 2000). Сведения по более длительному наблюдению (в течение 24 часов) за уровнем ОХ в крови после жировой нагрузки в литературе практически не встречаются. В работе Бойко и др. (2000) достоверных изменений содержания ОХ в сыворотке крови в течение 24 часов после жировой нагрузки также не выявлено.

Небольшое повышение содержания апоЕ в сыворотке крови у обследуемых лиц отмечалось с 9 часа тестирования. По данным литературы, жировая нагрузка у здоровых лиц с нормолипидемией не оказывает значимого влияния на уровень апоЕ в крови, тогда как при гиперлипидемии способствует снижению содержания апоЕ (Mero et al., 1998; Annuzzi et al., 1989).

Показатели активности ГТТ у обследованных мужчин после приема «жирового завтрака» не проявляли выраженной динамики. В первые часы после жировой нагрузки показатели активности ГГТ у обследуемых лиц незначительно повышались, но к 24 часу исследования возвращались к исходным значениям.

Таким образом, отсутствие достоверных изменений в липидном профиле в ходе нагрузочного теста свидетельствует о достаточно высокой толерантности здоровых мужчин к жировой нагрузке, и о незначительном влиянии на метаболизм апоЕ.

ВЫВОДЫ

1. Содержание аполипопротеина-Е в сыворотке крови у жителей европейского Севера характеризуется смещением границ варьирования в сторону более низких значений. Показатели аполипопротеина-Е ниже нормы отмечаются почти у 50% обследованных лиц, при этом гендерных различий в содержании апобелка не наблюдается.

2. При низких уровнях аполипопротеина-Е в сыворотке крови у жителей европейского Севера наблюдается развитие гипертриглицеридемии и повышение содержания липопротеинов очень низкой плотности.

3. Содержание сывороточного аполипопротеина-Е в старших возрастных группах северян повышается и сопровождается сокращением числа лиц с показателями апобелка ниже нормы.

4. Повышение уровня аполипопротеина-Е в сыворотке крови у жителей европейского Севера сопровождается гиперхолестеринемией.

5. Влияние содержания сывороточного аполипопротеина-Е на показатели триглицеридов у жителей европейского Севера определяется функциональным состоянием печени. Наиболее высокое содержание триглицеридов в сыворотке крови отмечается при низком уровне аполипопротеина-Е на фоне повышенных показателей активности фермента - гамма-глутамилтрансферазы.

6. Под влиянием однократной жировой нагрузки уровень аполипопротеина-Е в сыворотке крови у здоровых мужчин-жителей европейского Севера значимо не изменяется.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

Статьи:

1. Бойко Е.Р. Взаимосвязь мочевой кислоты, АПО-СШ и АПО-Е у здоровых, пациентов с ишемической болезнью сердца и гипертонической болезнью / Е.Р. Бойко, A.M. Канева. А.О. Овечкин, H.H. Потолицына // Клиническая лабораторная диагностика. - 2007. - № 2. - С. 16-18.

2. Бойко Е.Р. Сезонные аспекты оксидативного стресса у человека в условиях Севера / Е.Р. Бойко, В.Г. Евдокимов, H.A. Вахнина, В.Д. Шадрина, H.H. Потолицына, Н.Г. Варламова, Т.Н. Кочан, A.M. Канева. Ю.Г. Солонин, Т.П. Логинова, Т.В. Есева, O.A. Кеткина, О.В. Рогачевская, А.Ю. Людинина // Авиакосмическая и экологическая медицина. - 2007. - Т. 41, № 3. - С. 44-47.

3. Бойко Е.Р. Корреляционная связь концентрации мочевой кислоты, АПО-Е и АПО-СЗ в условиях нормо- и гиперлипидемии / Е.Р. Бойко, А.О. Овечкин, A.M. Канева. H.H. Потолицына, С.Г. Бойко // Терапевтический архив. - 2007. - Т.79, № 12.-С. 51-54.

4. Бойко С.Г. Особенности метаболизма апопротеида Е и процессов свободнорадикального окисления в патогенезе развития сенсоневральной тугоухости / С.Г. Бойко, A.M. Канева. А.Д. Пчелинцева, H.H. Потолицына, Е.Р. Бойко, Ю.К. Янов // Российская оториноларингология. - 2008. - Т. 33, № 2. - С. 510.

Тезисы докладов на конференциях:

1. Бойко Е.Р. Особенности аполипопротеинового профиля у ненцев-оленеводов / Е.Р. Бойко, A.M. Канева. H.H. Потолицына // Материалы 13 Международного конгресса по приполярной медицине. Приложение к журн. Бюллетень СО РАМН. - Новосибирск, 2006. - С. 26.

2. Канева A.M. Особенности аполипротеинового профиля у жителей европейского Севера / A.M. Канева. H.H. Потолицына, С.Г Бойко // Материалы Всероссийской конференции с международным участием «Медико-физиологические проблемы экологии человека». - Ульяновск, 2007. - С. 115-116.

Заказ № 43_Тираж 150

Информационно-издательский отдел Коми НЦ УрО РАН

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Канева, Анастасия Михайловна

Список сокращений.

Введение.

Глава 1 Обзор литературы.

1.1 Липиды и липопротеины крови человека

1.2 Структура, биосинтез и катаболизм аполипопротеина-Е.

1.3 Функциональное значение аполипопротеина-Е.

1.4 Полиморфизм гена аполипопротеина-Е и риск развития гиперлипидемии.

1.5 Физиологическое значение уровня аполипопротеина-Е в крови человека.

Глава 2 Материалы и методы.

2.1 Объекты исследования.

2.2 Методы исследования.

2.3 Статистическая обработка полученных результатов.

Глава 3 Результаты исследования.

3.1 Тендерные и возрастные особенности содержания аполипопротеина-Е у жителей европейского Севера.

3.2 Полиморфизм гена аполипопротеина-Е и показатели сывороточных липидов у жителей европейского Севера.

3.3 Функциональное значение аполипопротеина-Е при нарушениях липидного обмена у жителей европейского Севера

3.4 Влияние аполипопротеина-Е на показатели липидного обмена при различных функциональных состояниях печени.

3.5 Динамика профиля сывороточных липидов и аполипопротеинов у мужчин при проведении нагрузочного тестирования с помощью «жирового завтрака».

Глава 4 Обсуждение результатов.

4.1 Содержание аполипопротеина-Е у жителей европейского Севера в зависимости от пола и возраста.

4.2 Функциональное значение аполипопротеина-Е при гиперхолестеринемии у жителей европейского Севера.

4.3 Роль аполипопротеина-Е в развитии гипертриглицеридемии у жителей европейского Севера.

4.4 Влияние аполипопротеина-Е на показатели триглицеридов при различных функциональных состояниях печени.

4.5 Показатели сывороточных липидов и аполипопротеинов у мужчин при проведении нагрузочного тестирования с помощью «жирового завтрака».

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Аполипопротеин-Е в липидном обмене у жителей Европейского Севера"

Актуальность исследования. Природно-климатические условия Севера предъявляют повышенные требования к организму человека (Данишевский, 1968; Авцын, 1972; Агаджанян, 1983; Авцын и др., 1985; Ткачев и др., 1992). Воздействие неизбегаемых природных факторов Севера приводит к существенным перестройкам физиологических функций в организме человека, в основе которых лежат изменения функционального состояния эндокринной системы и метаболических процессов, в особенности липидного обмена (Панин, 1978, 1983; Данилова, 1986; Бойко, Ткачев, 1994; Бойко, 1996, Бойко и др., 2007). Согласно концепции JI.E. Панина (1978), в высоких широтах происходит «переключение метаболизма с углеводного типа на жировой». Данная концепция постулирует преобразования липидного профиля периферической крови у человека на Севере, возникающие под влиянием внешних факторов, что нередко приводит к трансформации функционирования метаболических путей и развитию нарушений липидного обмена. Установлено, что у жителей Севера повышена частота встречаемости гиперлипидемий (Авцын и др., 1985; Nikitin, 1988). В свою очередь, нарушения липидного -обмена способствуют развитию большого числа социально-значимых заболеваний, особенно сердечнососудистой патологии.

Важную роль в регуляции липидного обмена играет аполипопротеин-Е (апоЕ), входящий в состав большинства сывороточных липопротеинов. Основная роль апоЕ заключается в том, что он в качестве лиганда специфических рецепторов (апоЕ и апоВ,Е-рецепторов) печени и периферических тканей, обеспечивает захват и удаление липопротеинов, тем самым поддерживая в организме гомеостаз липидов (Mahley, Innerarity, 1983; Funke et al., 1984). Установлено, что апоЕ принимает непосредственное участие в синтезе ряда липопротеинов, поэтому отклонения содержания апоЕ от нормы сопровождаются дислипидемиями. Это показано в экспериментах на животных с врожденным апоЕ-дефицитом и избыточным содержанием апоЕ (Hofker et al., 1998; Воск et al., 2007). У человека описаны случаи дефицита и повышения содержания апоЕ при некоторых видах наследственных (первичных) гиперлипидемий (Ghiselli et al., 1982; Schaefer et al., 1986; Gibson et al., 1987). В то же время, роль апоЕ в развитии вторичных нарушений липидного обмена у человека освещена недостаточно.

В настоящее время основное внимание уделяется изучению полиморфизма гена апоЕ. Три основных аллеля гена апоЕ (в2, вЗ, е4) определяют существование трех изоформ: Е2, ЕЗ, Е4. Установлено, что изоформы апоЕ (Е2 и Е4) оказывают выраженное влияние на уровень липидов в крови и предрасположенность к ряду сердечно-сосудистых и нейродегенеративных заболеваний (Breslow, 1988). Однако, в большинстве работ, посвященных изучению полиморфизма гена апоЕ, как правило, не учитывается содержание апоЕ в крови. Тем не менее, показано, что уровень апоЕ в крови может существенно изменять, а в ряде случаев даже маскировать влияние генотипа апоЕ на содержание липидов (Haddy et al., 2002). Кроме того, наиболее распространенным аллелем гена апоЕ в большинстве популяций мира является аллель еЗ, частота встречаемости которого варьирует от 67 до 80% (Gerdes et al., 1992; Howard et al., 1998). В связи с этим, полиморфизм гена апоЕ не вносит ведущий вклад в развитие нарушений липидного обмена.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Определить содержание апоЕ в сыворотке крови у здоровых жителей европейского Севера.

2. Установить тендерные и возрастные особенности содержания сывороточного апоЕ у человека на Севере.

3. Оценить роль апоЕ в развитии нарушений липидного обмена у жителей европейского Севера.

Научная новизна исследования. Впервые исследовано содержание апоЕ в сыворотке крови у жителей европейского Севера. Установлено смещение границ варьирования уровня сывороточного апоЕ в сторону более низких показателей. Показано повышение содержания апоЕ в старших возрастных группах и отсутствие тендерных различий уровня апоЕ у северян. Впервые выявлено, что гиперхолестеринемия у жителей европейского Севера сопровождается инверсией корреляционных связей между апоЕ и показателями сывороточных липидов. У жителей европейского Севера впервые показано развитие гипертриглицеридемии при низких уровнях сывороточного апоЕ. Установлено влияние апоЕ на содержание триглицеридов в сыворотке крови в зависимости от функционального состояния печени.

Научно-практическая значимость исследования. Полученные результаты дополняют современное представление об адаптационных перестройках липидного обмена у человека на Севере. Установленные показатели апоЕ у жителей европейского Севера могут быть положены в основу региональных нормативов для людей, проживающих в соответствующих климатических условиях. Данные исследования о повышенном риске развития гипертриглицеридемии при низких уровнях сывороточного апоЕ у жителей европейского Севера могут быть рекомендованы к использованию органами практического здравоохранения для целей диагностики и прогнозирования нарушений липидного обмена. Выявленная сопряженность возникновения гипертриглицеридемии при низком содержании апоЕ с функциональным состоянием печени может быть использована для разработки современных диагностических алгоритмов при формировании групп риска и прогноза развития сердечно-сосудистой патологии.

Исследование поддержано государственным контрактом № 02.512.11.2190 от 28.09.2007 г. «Разработка пектиновых биопрепаратов, повышающих устойчивость человека к экстремальным условиям Севера», хоздоговорной работой «Разработка системы мероприятий по повышению показателей здоровья, снижению заболеваемости и профилактики социально значимых заболеваний у лиц, работающих в шумных условиях на предприятиях заказчика ОАО «Монди Бизнес Пейпа Сыктывкарский ЛПК» на 2007-2010 годы», грантами молодых ученых и аспирантов УрО РАН «Особенности обмена сывороточных липопротеидов в норме и при гиперлипидемии у жителей европейского Севера» (в 2006 г.), «Роль аполипопротеина-Е в липидном обмене при сердечно-сосудистой патологии у человека на Севере» (в 2007 г.). Результаты исследования внедрены в работу клинико-диагностической лаборатории и терапевтических отделений МУЗ «Центральная поликлиника г.Сыктывкара» (акт о внедрении от 28.08.2008 г.).

Положения, выносимые на защиту:

3. Наибольшее содержание триглицеридов у жителей европейского Севера отмечается при низком уровне сывороточного апоЕ на фоне высоких значений активности печеночного фермента — гамма-глутамилтрансферазы.

Апробация работы. Результаты исследования представлены на семинарах отдела экологической и социальной физиологии человека Института физиологии Коми НЦ УрО РАН (2006-2008 г.); 13 Международном конгрессе по приполярной медицине, Новосибирск, 2006; Всероссийской конференции с международным участием «Медико-физиологические проблемы экологии человека», Ульяновск, 2007; IV симпозиуме с международным участием «Проблемы адаптации человека к экологическим и социальным условиям Севера», Сыктывкар, 2008.

По материалам исследования опубликовано шесть научных работ, из них четыре статьи - в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы. Работа содержит 15 таблиц и 11 рисунков. Библиография состоит из 212 источников (36 — отечественных и 176 — зарубежных авторов).

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Канева, Анастасия Михайловна

ВЫВОДЫ

1. Содержание аполипопротеина-Е в сыворотке крови у жителей европейского Севера характеризуется смещением границ варьирования в сторону более низких значений. Показатели аполипопротеина-Е ниже нормы отмечаются почти у 50% обследованных лиц, при этом тендерных различий в содержании апобелка не наблюдается.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Канева, Анастасия Михайловна, Сыктывкар

1. Авцын А.П. Введение в географическую патологию. М.: Медицина, 1972.-326 с.

2. Авцын А.П. Патология человека на Севере / А.П. Авцын, А.А. Жаворонков, А.Г. Марачев, А.П. Милованов. М.: Медицина, 1985. -416 с.

3. Агаджанян Н.А. Адаптации и резервы организма. — М.: Физкультура и спорт, 1983,- 174 с.

4. Бойко Е.Р. Взаимосвязь мочевой кислоты, АПО-CIII и АПО-Е у здоровых, пациентов с ишемической болезнью сердца и гипертонической болезнью / Е.Р. Бойко, A.M. Канева, А.О. Овечкин, Н.Н. Потолицына // Клин. лаб. диагностика. 2007а. - №1. - С. 16-18.

5. Бойко Е.Р. Корреляционная связь концентрации мочевой кислоты, АПО-Е и АПО-СЗ в условиях нормо- и гиперлипидемии / Е.Р. Бойко, А.О. Овечкин, A.M. Канева, Н.Н. Потолицына, С.Г. Бойко // Тер. архив. -20076. -Т.79, № 12.-С. 51-54.

6. Бойко Е.Р. Некоторые закономерности метаболических перестроек у человека на Крайнем Севере // Физиология человека. — 1996. Т. 22, №4.-С. 122-129.

7. Бойко Е.Р. Основные аспекты метаболической адаптации человека на Севере / Е.Р. Бойко, А.Л. Максимов, Т.В. Годовых, Ф.А. Бичкаева // Человек на Севере: системные механизмы адаптации: Сб. науч. тр. -Магадан: СВНЦ ДВО РАН, 2007. С. 173-188.

8. Бойко Е.Р. Характеристика липидного обмена у постоянных жителей Севера / Е.Р. Бойко, А.В. Ткачев // Физиология человека. 1994. - Т. 20, №2.-С. 151-157.

9. Бойко Е.Р. 24-часовой мониторинг профиля сывороточных липидов у женщин с нормальной и избыточной массой тела / Е.Р. Бойко, Ф.А. Бичкаева, А.В. Стрелкова // Росс, физиол. журн. им И.М. Сеченова. -2000. Т. 86, № 1. - С. 113-119.

10. Воевода М.И. Этногенетические особенности подверженности атеросклерозу в этнических группах Сибири (на примере гена аполипопротеина Е) / М.И. Воевода, В.А. Степанов, А.Г. Ромащенко, В.Н. Максимов // Бюллетень СО РАМН. 2006. - Т. 120, № 2. - С. 6372.

11. Гланц С. Медико-биологическая статистика. — М.: Практика, 1998. — 459 с.

12. Данилова Р.И. Физиологические особенности липидного обмена у жителей европейского Севера СССР: Автореф. дисс. . канд. биол. наук: 03.00.13.-М., 1986.- 16 с.

13. Данишевский Г.М. Патология человека и профилактика заболеваний на Севере. М.: Медицина, 1968. - 68 с.

14. Дергунов А.Д. Связь структуры апобелка Е, субстратных свойств и рецепторной активности триглицерид-богатых липопротеинов плазмыкрови при нормо- и гипертриглицеридемии // Биохимия. — 2004. Т. 69, № 7. - С. 887-906.

15. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике: Справочник. — М.: МЕДпресс-информ, 2004. 920 с.

16. Климов А.Н. Взаимодействие холестерина с полипептидами и аминокислотами / А.Н. Климов, Г.В. Титова, К.А. Кожевникова, Н.Н. Клюева, И.В. Смирнова // Биохимия. 1982. - Т. 47, № 2 - С. 226-232.

17. Климов А.Н. Липиды, липопротеиды и атеросклероз / А.Н. Климов, Н.Г. Никульчева. СПб.: Питер Пресс, 1995. - 304 с.

18. Кожевникова К.А. Участие аполипопротеина Е в транспорте эфиров холестерина / К.А. Кожевникова, Л.Г. Петрова-Маслакова, Е.В. Белова, Н.С. Парфенова, Н.Н. Клюева // Укр. биохим. журн. 1989. - Т. 61, № 3.- С. 42-47.

19. Линейцева Л.Е. Использование жировой нагрузочной пробы для оценки состояния липидного обмена / Л.Е. Линейцева, Г.Н. Верещагина // Лаб. дело. 1980. - № 5. - С. 302-306.

20. Мустафина О.Е. Исследование полиморфизма гена аполипопротеина Е в популяциях Волго-Уральского региона / О.Е. Мустафина, И.А. Туктарова, A.M. Бикмеева, Т.Р. Насибуллин, Э.К. Хуснутдинова // Генетика.-2001.-Т. 37, №4.-С. 558-562.

21. Никитин Ю.П. Печень и липидный обмен / Ю.П. Никитин, С.А. Курилович, Г.С. Давидик". Новосибирск: Наука, 1985. - 191 с.

22. Панин Л.Е. Биохимические механизмы стресса. Новосибирск: Наука, 1983.-231с.

23. Панин Л.Е. Энергетические аспекты адаптации. — Л.: Медицина, 1978.- 192 с.

24. Поляков JI.M. Аполипопротеин Е: структура и функции / JI.M. Поляков, JI.E. Панин // Успехи совр. биологии. 1998. - Т.118, №6. -С.743-753.

25. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. М.: МедиаСфера, 2002. - 312 с.

26. Сусеков А.В. Гипертриглицеридемия как фактор риска развития атеросклероза / А.В. Сусеков, В.В. Кухарчук // Тер. архив. 1997. - Т. 69, №9.-С. 83-88.

27. Титов В.Н. Аполипопротеин Е как фактор риска коронарного атеросклероза / В.Н. Титов, С.В. Никитин, М.Г. Творогова // Кардиология. 1991. -№ 7. - С. 71-74.

28. Титов В.Н. Жирные кислоты. Физическая химия, биология и медицина / В.Н. Титов, Д.М. Лисицын. М.: Триада, 2006. - 672 с.

29. Титов В.Н. Лабораторная диагностика и диетотерапия гиперлипопротеидемий (биологические основы). — М.: Медпрактика-М, 2005.-328с.

30. Титов В.Н. Липопротеины очень низкой и низкой плотности: функция, транспорт жирных кислот и диагностическое значение // Клин. лаб. диагностика. 2000. - № 11. - С. 25-32.

31. Титова Г.В. Взаимодействие холестерина с апопротеином Е -аргининбогатым белком липопротеидов очень низкой плотности / Г.В. Титова, Н.Н. Клюева, К.А. Кожевникова, А.Н. Климов // Биохимия. -1980.-Т. 45, №1 -С. 51-54.

32. Ткачев А.В. Эндокринная система и обмен веществ у человека на Севере: Монография / А.В. Ткачев, Е.Р. Бойко, З.Д. Губкина, Е.Б. Раменская, С.Г. Суханов. Сыктывкар: Коми НЦ УрО РАН, 1992. -156 с.

33. Alaupovic P. Apolipoproteins and lipoproteins // Atherosclerosis. 1971. — V. 13, N 2. - P. 141-146.

34. Al-Bustan S.A. Apolipoprotein E genotyping among the healthy Kuwaiti population / S.A. Al-Bustan, M.A. Alnaqeeb, B.G. Annice, G. Ibrhim, J. Al-Rubaian, A.H. Ahmed, T.M. Refai // Hum. Biol. 2005. - V. 77, N 4. -P. 487-498.

35. AH K. Apolipoprotein E suppresses the type I inflammatory response in vivo / К. АН, M. Middleton, E. Pure, D.J. Rader // Circ. Res. 2005. - V. 97, N 9. - P. 922-927.

36. Apostolov E.O. Modified LDLs induce proliferation-mediated death of human vascular endothelial cells through МАРК pathway / E.O. Apostolov,

37. A.G. Basnakian, X. Yin, E. Ok, S.V. Shah // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2007. - V. 292, N 4. - P. 1836-1846.

38. Arai H. Effect of L-ascorbic acid on the oxidative modification of apolipoprotein E in human very-low-density lipoprotein / H. Arai, K. Nakamura // J. Nutr. Sci. Vitaminol (Tokyo). 2004. - V. 50, N 1. - P. 6668.

39. Au Y.P.T. A rapid apolipoprotein E radioimmunoassay using solid-phase Staphylococcus protein. Use of pooled plasma as a secondary standard / Y.P.T. Au, N.D. Bren, B.A. Kottke // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1986.-V. 138.-P. 455-462.

40. Avogaro P. Relationship between apolipoproteins and chemical components of lipoproteins in survivors of myocardial infarction / P. Avogaro, G.B. Bon, G. Cazzolato, E. Rorai // Atherosclerosis. 1980. - V. 37. - P. 69-76.

41. Baraona E. Alcohol and lipids / E. Baraona, C.S. Lieber // Recent Dev. Alcohol. 1998. - V. 14. - P. 97-134.

42. Basil S.K. Independent pathways for secretion of cholesterol and apolipoprotein E by macrophages / S.K. Basu, J.L. Goldstein, M.S. Brown // Science. 1983.-V. 219.-P. 871-873.

43. Bock H.H. Conditional animal models for the study of lipid metabolism and lipid disorders / H.H. Bock, J. Herz, P. May // Handb. Exp. Pharmacol. -2007.-V. 178.-P. 407-439.

44. Breslow J.L. Apolipoprotein genetic variation and human disease // Physiol. Rev. 1988.-V. 68, N l.-P. 85-132.

45. Breslow J.L. Human apolipoprotein molecular biology and genetic variation // Annu. Rev. Biochem. 1985. - V. 54. - P. 699-727.

46. Calles-Escandon J. Basal fat oxidation decreases with aging in women / J. Calles-Escandon, P.J. Arciero, A.W. Gardner, C. Bauman, E.T. Poehlman // J. Appl. Physiol. 1995. - V. 78, N 1. - P. 266-271.

47. Cariolou M.A. Underexpression of the apolipoprotein E2 and E4 alleles in the Greek Cypriot population of Cyprus / M.A. Cariolou, A. Kokkofitou, P. Manoli, S. Christou, A. Karagrigoriou, L. Middleton // Genet. Epidemiol. -1995. V. 12, N 5. - P. 489-497.

48. Chen C.H. Activation of lecithin:cholesterol acyltransferase by apolipoproteins E-2, E-3 and A-IV isolated from human plasma / C.H. Chen, J.J. Albers // Biochim. Biophys. Acta. 1985. - V. 836. - P. 279-285.

49. Chen J. Alveolar type I cells protect rat lung epithelium from oxidative injury / J. Chen, Z. Chen, N.R. Chintagari, M. Bhaskaran, N. Jun, T. Narasaraju, L. Liu // J. Physiol. 2005. - V. 572, N 3. - P. 625-638.

50. Cohn J.S. Postprandial plasma lipoprotein changes in human subjects of different ages / J.S. Cohn, J.R. McNamara, S.D. Cohn, J.M. Ordovas, E.J. Schaefer // J. Lipid Res. 1988. - V. 29, N 4. - P. 469-479.

51. Corbo R.M. Apolipoprotein E (APOE) allele distribution in the world. Is APOE*4 a "thrifty" allele? / R.M. Corbo, R. Scacchi // Ann. Hum. Genet. -1999.-V. 63, N4.-P. 301-310.

52. Curry M.D. Determination of apolipoprotein E by electroimmunoassay / M.D. Curry, W.J. McConatry, J.H. Alaupovic, J.H. Ledford, M. Popovic // Biochim. Biophys. Acta. 1976. - V. 439, N2-P. 413-425.

53. Curtiss L.K. Identification of a lymphocyte surface receptor for low density lipoprotein inhibitor, an immunoregulatory species of normal human serum low density lipoprotein / L.K. Curtiss, T.S. Edgington // J. Clin. Invest. -1978.-V. 61.-P. 1298-1308.

54. Curtiss L.K. Regulatory serum lipoproteins: regulation of lymphocyte stimulation by a species of low density lipoprotein / L.K. Curtiss, T.S. Edgington // J. Immunol. 1976. - V. 116. - P. 1452-1458.

55. Durrington P.N. Biological variation in serum lipid concentrations // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1990. - V. 198. - P. 86-91.

56. Eisenberg Sh. High density lipoprotein metabolism // J. Lipid Res. 1984. -V. 25,N 10.-P. 1017-1058.

57. Eto M. Apolipoprotein E alleles and hyperlipoproteinemia in Japan / M. Eto, K. Watanabe, K. Ishii // Clin. Genet. 1988. - V. 34, N 4. - P. 246-251.

58. Eto M. Reciprocal effects of apo E alleles (s 2 and s 4) in plasma lipid levels in normolipidemic subjects / M. Eto, K. Watanabe, K. Ishii // Clin. Genet. -1986.-V. 29.-P. 477-484.

59. Evans A.J. Reduced lipolysis of large apo E-poor very-low-density lipoprotein subfractions from type IV hypertriglyceridemic subjects in vitro and in vivo / A.J. Evans, B.M. Wolfe, W.L. Strong, M.W. Huff // Metabolism. 1993. - V. 42, N 1. - P. 105-115.

60. Freeman M. Hepatic triglyceride-lipase deficiency in liver disease / M. Freeman, L. Kuiken, J.B. Ragland, S.M. Sabesin // Lipids. 1977. - V. 12, N5.-P. 443-445.

61. Friedewald W.T. Estimation of the concentration of low-density lipoprotein cholesterol in plasma, without use of the preparative ultracentrifuge / W.T. Friedewald, R.I. Levy, D.S. Fredrickson // Clin. Chem. 1972. - V. 18, N 6. - P. 499-502.

62. Funke H. Uptake of apolipoprotein E-containing high density lipoproteins by hepatic parenchymal cells / H. Funke, J. Boyles, K.H. Weisgraber, E.H. Ludwig, D.Y. Hui, R.W. Mahley // Arteriosclerosis. 1984. - V. 4, N 5. -P. 452-461.

63. Gabelli C. Abnormal low density lipoprotein metabolism in apolipoprotein E deficiency / C. Gabelli, R.E. Gregg, L.A. Zech, E. Manzato, H.B. Brewer // J. Lipid Res. 1986. - V. 27. - P. 326-333.

64. Garfagnini A. Relationship between HDL-C and apolipoprotein A-I and the severity of coronary artery disease / A. Garfagnini, G. Devoto, P. Rosselli, P. Boggiano, M. Venturini // Eur. Heart J. 1995. - V. 16, N 4. - P. 465470.

65. Gerdes L.U. Apolipoprotein E polymorphism in a Danish population compared to findings in 45 other study populations around the world / L.U.

66. Gerdes, I.C. Klausen, I. Sihm, O. Faergeman 11 Cenet. Epidemiol. 1992. -V. 9, N 3. - P. 155-167.

67. Gerdes L.U. The common polymorphism of apolipoprotein E: geographical aspects and new pathophysiological relations // Clin. Chem. Lab. Med. -2003. V. 41, N 5. - P. 628-631.

68. Gerritsen G. ApoC-III deficiency prevents hyperlipidemia induced by apoE overexpression / G. Gerritsen, P.C.N. Rensen, K.E. Kypreos, V.I. Zannis, L.M. Havekes, K.W. van Dijk // J. Lipid Res. 2005. - V. 46. - P. 14661473.

69. Ghiselli G. Phenotype study of apolipoprotein E isoforms in hyperlipoproteinaemic patients / G. Ghiselli, R.E. Gregg, L.A. Zech, E.J. Schaefer, H.B. Brewer // Lancet. 1982. - V. 2. - P. 405-407.

70. Ginsberg H.N. New perspectives on atherogenesis. Role of abnormal triglyceride-rich lipoprotein metabolism // Circulation. — 2002. V. 106. — P. 2137-2142.

71. Gordon V. Formation of cholesterol- and apoprotein E-enriched high density lipoproteins in vitro / V. Gordon, T.L. Innerarity, R.W. Mahley // J. Biol. Chem. 1983.-V. 258.-P. 6202-6212.

72. Gottlieb M.C. Association among oxidized LDL levels, MnSOD, apolipoprotein E polymorphisms, and cardiovascular risk factors in a south Brazilian region population / M.C. Gottlieb, C.H. Schwanke, A.F. Santos,

73. P.F. Jobim, D.P. Mussel, I.B. da Cruz// Genet. Mol. Res. 2005. - V.4, N 4. -P. 691-703.

74. Green P.H. Lipoprotein metabolism in liver disease // Lab. Res. Methods Biol. Med. 1983. - V. 7. - P. 199-204.

75. Gregg R.E. Abnormal in vivo metabolism of apolipoprotein E4 in humans / R.E. Gregg, L.A. Zech, E.J. Schaefer, D. Stark, D. Wilson, H.B. Brewer // J. Clin. Invest. 1986. - V. 78, N 3 - P. 815-821.

76. Gregg R.E. Abnormal metabolism of apolipoprotein E 4 / R.E. Gregg, R. Ronan, L.A. Zech // Circulation. 1982. - V. 66, N. 2. - P. 160.

77. Gregg R.E. Apolipoprotein E metabolism in normolipoproteinemic human subjects / R.E. Gregg, L.A. Zech, E.J. Schaefer, H.B. Brewer // J. Lipid Res. 1984. - V.25. - P. 1167-1176.

78. Gregg R.E. The role of apolipoprotein E and lipoprotein receptors in modulating the in vivo metabolism of apolipoprotein B-containing lipoproteins in humans / R.E. Gregg, H.B. Brewer // Clin. Chem. 1988. -V. 34, N8.-P. 28-32.

79. Groot P.H. Effects of fat ingestion on high density lipoprotein profiles in human sera / P.H. Groot, L.M. Scheek // J. Lipid Res. 1984. - V. 25, N 7. -P. 684-692.

80. Guo Y. Morphological and functional alterations of the cochlea in apolipoprotein E gene deficient mice / Y. Guo, C. Zhang, X. Du, U. Nair, T.-J. Yoo // Hear Res. 2005. - V.208, N.l-2. - P. 54-67.

81. Haddy N. The importance of plasma apolipoprotein E concentration in addition to its common polymorphism on inter-individual variation in lipid levels: results from Apo Europe / N. Haddy, D. De Bacquer, M.M. Chemaly,

82. M. Maurice, С. Ehnholm, A. Evans, S. Sans, M.C. Martins, G. De Backer, G. Siest. S. Visvikis // Europ. J. Hum. Genetics. 2002. - V. 10, N 12 - P. 841-850.

83. Hamilton R.L. Apolipoprotein E localization in rat hepatocytes by immunogold labeling of cryothin sections / R.L. Hamilton, J.S. Wong, L.S. Guo, S. Krisans, R.J. Havel // J. Lipid Res. 1990. - V. 31, N 9. - P. 15891603.

84. Hayek T. Increased plasma and lipoprotein lipid peroxidation in apo E-deficient mice / T. Hayek, J. Oiknine, J.C. Brook, M. Aviram // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994. - V. 201, N 3. - P. 1567-1574.

85. Hixson J.E. Restriction isotyping of human apolopoprotein E by gene amplification and cleavge with Hha I / J.E. Hixson, D.T. Vernier //J. Lipid Res. 1990. - V. 31P. 545-548.

86. Hofker M.H. Transgenic mouse models to study the role of APOE in hyperlipidemia and atherosclerosis / M.H. Hofker, B.J. van Vlijmen, L.M. Havekes // Atherosclerosis. 1998. - V. 13. - P. 1-11.

87. Howard B.V. Association of apolipoprotein E phenotype with plasma lipoproteins in African-American and white young adults. The CARDIA

88. Study / B.V. Howard, S.S. Gidding, K. Liu // Am. J. Epidemiol. 1998. - V. 148, N9.-P. 859-868.

89. Huang H. The oxidation ratio of LDL: a predictor for coronary artery disease / H. Huang, W. Mai, D. Liu, Y. Hao, J. Tao, Y. Dong // Dis. Markers. 2008. - V. 24, N 6. - P. 341-349.

90. Huang Y. Overexpression and accumulation of apolipoprotein E as a cause of hypertriglyceridemia / Y. Huang, X.Q. Liu, S.C. Rail, J.M. Taylor, A. von Eckardstein, G. Assmann, R.W. Mahley // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273, N41.-P. 26388-26393.

91. Hui D.Y. Immunoregulatory plasma lipoproteins. Role of apoprotein E and apoprotein В / D.Y. Hui, J.A.K. Harmony, T.L. Innerarity, R.W. Mahley // J. Biol. Chem. 1980. - V. 255. - P. 11775-11781.

92. Hui D.Y. Inhibition of Ca accumulation by mitogen-activated lymphocytes: role of membrane-bound plasma lipoprototeins / D.Y. Hui, J.A.K. Harmony // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. - V. 77. - P. 47644768.

93. Innerarity T.L. Enhanced binding by cultured human fibroblasts of apo E-containing lipoproteins as compared with LDL / T.L. Innerarity, R.W. Mahley//Biochemistry. 1978.-V. 17.-P.1440-1447.

94. Itakura H. Hepatic triglyceride lipase activity in plasma of patients with fatty liver, after treatment with heparin / H. Itakura, T. Murase, F. Takaku // Clin. Chem. 1983. - V. 29, N 4. - P. 726-727.

95. Kervinen K. Serum lipids and apolipoprotein E phenotypes in identical twins reared apart / K. Kervinen, J. Kaprio, M. Koskenvou, J. Juntunen, Y.A. Kesaniemi // Clin. Gehet. 1998. -V. 53, N 3. - P. 191-199.

96. Kesaniemi Y.A. Intestinal cholesterol absorption efficiency in man is related to apoprotein E phenotype / Y.A. Kesaniemi, C. Ehnholm, T.A. Miettinen // J. Clin. Invest. 1987. -V. 80, N 2. - P. 578-581.

97. Koo C. Obligatory role of cholesterol and apolipoprotein E in the formation of large cholesterol-enriched and receptor-active high density lipoproteins / C. Koo, T.L. Innerarity, R.W. Mahley // J. Biol. Chem. 1985. - V. 260. -P. 11934-11943.

98. Koo C. Uptake of cholesterol-rich remnant lipoproteins by human monocyte-derived macrophages is mediated by low density lipoprotein receptors / C. Koo, M.E. Wernette-Hammond, Z. Garcia, M.J. Malloy, R.

99. Uauy, С. East, D.W. Bilheimer, R.W. Mahley, T.L. Innerarity // J. Clin. Invest. 1988.-V. 81, N5.-P. 1332-1340.

100. Kreisberg R.A. Cholesterol metabolism and aging / R.A. Kreisberg, S. Kasim // Am. J. Med. 1987. - V. 82. - P. 54-60.

101. Kushwaha R.S. Catabolism of very low density lipoproteins in the rabbit. Effect of changing composition and pool size / R.S. Kushwaha, W.R. Hazzard // Biochim. Biophys. Acta. 1978. - V. 528, N 2. - P. 176-189.

102. Kushwaha R.S. Metabolic regulation of plasma apolipoprotein E by estrogen and progesterone in the baboon (Papio sp) /R.S. Kushwaha, D.M. Foster, P.H. Barrett, K.D. Carey, M.G. Bernard // Metabolism. 1991. - V. 40, N 1. -P. 93-100.

103. Kushwaha R.S. Type III hyperlipoproteinemia: diagnosis in whole plasma by apolipoprotein E immunoassay / R.S. Kushwaha, W.R. Hazzard, P.W. Wahl, J.J. Hoover //Ann. Intern. Med. 1977. - V. 87. - P. 509-516.

104. Lamarche B. Triglyceride enrichment of HDL enhances in vivo metabolic clearance of HDL apoA-I in healthy men / B. Lamarche, K.D Uffelman, A. Carpentier, J.S. Cohn, G. Steiner, P.H. Barrett, G.F. Lewis // J. Clin. Invest. 1999.-V. 103.-P. 1191-1199.

105. Lim J.S. The association between serum GGT level within normal range and risk factors of cardiovascular diseases / J.S. Lim, Y.J. Kim, B.Y. Chun, J.H. Yang, D.H. Lee, S. Kam // J. Prev. Med. Pub. Health. 2005. - V. 38, N 1. -P. 101-106.

106. Lin R.C. Concentrations of apolipoprotein Al, All and E in plasma and lipoprotein fractions of alcoholic patients: gender differences in the effect ofalcohol / R.C. Lin, B.A. Miller, T.J. Kelly // Hepatology. 1995. - V. 21 -P. 942-949.

107. Liu M. Serum apolipoprotein E levels in 238 healthy adults and 161 hyperlipidemic subjects in Chengdu area / M. Liu, B. Liu // Hua Xi Yi Ke Da Xue Xue Bao. 1992. - V. 23, N. 3. - P. 261-263.

108. Lock D.R. Apolipoprotein E levels in vegetarians / D.R. Lock, A. Varhol, S. Grimes, W. Patsch, G. Schonfeld // Metabolism. 1982. - V. 31, N 9. -P. 917-921.

109. Mahley R.W. Apolipoprotein E: cholesterol transport protein with expanding role in cell biology // Science. 1988. - V. 240. - P. 622-630.

110. Mahley R.W. Apolipoprotein E: far more than a lipid transport protein / R.W. Mahley, S.C. Rail // Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. 2000. -N 1. - P. 507-537.

111. Mahley R.W. Atherogenic hyperlipoproteinemia. The cellular and molecular biology of plasma lipoproteins altered by dietary fat and cholesterol // Med. Clin. North Am. 1982.-V. 66, N2.-P. 375-402.

112. Mahley R.W. Lipoprotein receptors and cholesterol homeostasis / R.W. Mahley, T.L. Innerarity // Biochim. Biophys. Acta. 1983. - V. 737. -P. 197-222.

113. Mahley R.W. Pathogenesis of type III hyperlipoproteinemia (dysbetalipoproteinemia): questions, quandaries, and paradoxes / R.W. Mahley, Y. Huang, S.C. Rail // J. Lipid Res. 1999. - V. 40. - P. 1933

114. Mahley R.W. Plasma lipoproteins: apolipoprotein structure and function / R.W. Mahley, T.L. Innerarite, S.C. Rail, K.H. Weisgraber // J. Lipid Res. -1984. V. 25. - P. 1277-1294.

115. Markel A. Increased plasma triglycerides, cholesterol and apolipoprotein E during prolonged fasting in normal subjects / A. Markel, J.G. Brook, M. Aviram //Postgrad. Med. J. 1985. -V. 61. - P. 395-400.

116. Mazzone T. Macrophage free cholesterol content regulates apolipoprotein E synthesis / T. Mazzone, H. Gump, P. Diller, G.S. Gets // J. Biol. Chem. -1987.-V. 262, N. 24.-P. 11657-11662

117. Melchior G.W. Apo E levels and distribution in rhesus monkeys consuming an atherogenic diet / G.W. Melchior, S.C. Willard, M.T. Brandon // Atherosclerosis. 1985.-V. 58, N 1-3.-P. 65-80.

118. Mezey E. Liver disease and protein needs // Annu. Rev. Nutr. 1982. - N 2. -P. 21-50.

119. Millar J.S. Apo E and apo В100 kinetics in triglyceride-rich lipoproteins and their role in LDL production / J.S. Millar, J. Mayer, A.H. Lichtenstein, G.G. Dolnikowski, J.M. Ordovas, E.J. Schaefer // Circulation. 1998. - V. 98. -P. 305-306.

120. Millar J.S. Impact of age on the metabolism of VLDL, IDL, and LDL apolipoprotein B-100 in men /J.S. Millar, A.H. Lichtenstein, M. Cuchel, G.G. Dolnikowski, D.L. Hachey, J.S. Cohn, E.J. Schaefer // J. Lipid Res. -1995. V. 36, N 6. - P. 1155-1167.

121. Moghadasian M.H. Pathophysiology of apolipoprotein E deficiency in mice: relevance to apo E-related disorders in humans / M.H. Moghadasian, B.M.

122. McManus, L.B. Nguyen, S. Shefer, M. Nadji, D.V. Godin, T.J. Green, J. Hill, Y. Yang, C.H. Scudamore, J.J. Frohlich // FASEB J. 2001. - V. 15, N 14.-P. 2623-2630.

123. Nikitin Yu.P. Chronic noncommunicable diseases in native residents and newcoming populations of circumpolar areas // Arctic. Med. Res. — 1988. -V. 47, N 1. — P. 426-433.

124. O'Brien T. The effect of the treatment of hypothyroidism and hyperthyroidism on plasma lipids and apolipoproteins Al, All and E / T. O'Brien, K. Katz, D. Hodre, T.T. Nguyen, B.A. Kottke, I.D. Hay // Clin. Endocrinol. 1997. -V. 46, N 1. - P. 17-20.

125. Patsch J.R. Release in ship between blood level of high density lipoprotein subfraction 2 and magnitude of postprandial lipemia / J.R. Patsch, J.B. Karlin, L.W. Scott // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1983. - V. 80, N5.-P. 1449-1453.

126. Patsch W. Effects of sex hormones on rat lipoproteins / W. Patsch, K. Kim, W. Wiest, G. Schonfeld // Endocrinology. 1980. - V. 107, N 4. - P. 10851094.

127. Pham T. The receptor binding domain of apolipoprotein E is responsible for its antioxidant activity / T. Pham, A. Kodyawala, D.Y. Hui // Biochemistry. 2005. - V. 44, N 20. - P. 7577-7582.

128. Phillips N.R. Sex-related differences in the concentrations of apolipoprotein E in human blood plasma and plasma lipoproteins / N.R. Phillips, R.J. Havel, J.P. Kane // J. Lipid Res. 1983. - V. 24. - P. 1525-1531.

129. Rail S.C. Human apolipoprotein E. The complete amino acid sequence / S.C. Rail, K.H. Weisgraber, R.W. Mahley // J. Biol. Chem. 1982. - V. 257. - P. 4171-4178.

130. Rail S.C. The role of apolipoprotein E genetic variants in lipoprotein disorders / S.C. Rail, R.W. Mahley // J. Int. Med. 1992. - V. 231. - P. 653659.

131. Rensen P.C. Apolipoprotein E effectively inhibits lipoprotein lipase-mediated lipolysis of chylomicron-like triglyceride-rich lipid emulsions in vitro and in vivo / P.C. Rensen, T.J. van Berkel // J. Biol. Chem. 1996. -V. 271, N. 25.-P. 14791-14799.

132. Rifai N. A simple immunotechnique for the determination of serum concentration of apolipoprotein E / N. Rifai, L.M. Silverman // Clin. Chim. Acta.- 1987.-V. 163.-P. 207-213.

133. Sabesin S.M. Lipoprotein metabolism in liver disease / S.M. Sabesin, P.D. Bertram, M.R. Freeman // Adv. Intern. Med. 1980. - V. 25. - P. 117-146.

134. Sakuta H. y-Glutamil transferase and metabolic risk factors for cardiovascular disease / H. Sakuta, T. Suzuki, H. Yasuda, T. Ito // Internal Medicine. 2005. - V. 44, N 6. - P. 538-541.

135. Schaefer EJ. Familial apolipoprotein E deficiency / E.J. Schaefer, R.E. Gregg, G. Ghiselli, T.M. Forte, J.M. Ordovas, L.A. Zech, H.B. Brewer // J. Clin. Invest 1986. - V. 78, N 5. - P. 1206-1219. '

136. Schaefer E.J. Lipoproteins, nutrition, aging, and atherosclerosis / E.J. Schaefer, A.H. Lichtenstein, S. Lamon-Fava, J.R. McNamara, J.M. Ordovas // Am. J. Clin. Nutr. 1995. - V. 61, N 3 (Suppl). - P. 726-740.

137. Schaefer E.J. Plasma triglycerides in the regulation of HDL-cholesterol levels / E.J. Schaefer, R.I. Levy, D.W. Anderson, R.N. Danner, H.B. Brewer, W.C. Blackwelder // Lancet. 1978. - V. 2. - P. 391-393.

138. Schneider J. Ethanol induced hyperlipoproteinemia. Crucial role of preceding ethanol intake in the removal of chylomicrons / J. Schneider, E. Panne, M. Braun, R. Mordasini, H. Kaffarnik // J. Lab. Clin. Med. - 1983. -V. 101,N 1.-P. 114-142.

139. Scott J. Localization of genes encoding apolipoproteins C-I, C-II and E in the pl3 —► cen region of human chromosome 19 / J. Scott, T.J. Knott, D.J. Shaw, J.D. Brook//Hum. Genet. 1985. -V. 71. - P. 144-146.

140. Shore B. Heterogeneity of human plasma very low density lipoproteins / B. Shore, V. Shore // Biochemistry. 1973. - V. 12. - P. 502-507.

141. Siest G. Apolipoprotein E: an important gene and protein to follow in laboratory medicine / G. Siest, T. Pillot, A. Regis-Bailly, B. Leininger-Muller, J. Steinmetz, M.-M. Galteau, S. Visvikis // Clin. Chem. 1995. -V. 41,N8.-P. 1068-1086.

142. Sing C. Role of the apolipoprotein E polymorphism in determining normal plasma lipid and lipoprotein variation / C. Sing, J. Davignon // Am. J. Hum. Genet.- 1985.-V. 37.-P. 268-281.

143. Srinivasan S.R. Serum apolipoprotein E in children and adolescents: the Bogalusa Heart Study / S.R. Srinivasan, W. Wattigney, L.S. Webber, G.S. Berenson // Metabolism. 1989. - V. 38, N 12. - P. 1173-1178.

144. Steinberg D. Lipoproteins and the pathogenesis of atherosclerosis / D. Steinberg, Т.Е. Carew, C. Fielding, A.M. Fogelman, R.W. Mahley, A.D. Sniderman, D.B. Zilversmit // Circulation. 1989. - V. 80, N 3. - P. 719723.

145. Tada H. Serum concentrations of apolipoproteins in patients with thyroid dysfunction / H. Tada, Y. Irue, A. Yagoro, H. Ohya, S. Hayashi, R. Fushimi, H. Tamaki, N. Amino // Thyroidology. 1994. - V. 6, N 3. - P. 93-97.

146. Tada N. Abnormal apolipoprotein composition in alcoholic hepatitis / N. Tada, P.J. Nestel, N. Fidge, G. Campbell // Biochim. Biophys. Acta. 1981. -V. 664, N2.-P. 207-220.

147. Takagi Y. Platelet-enhanced apolipoprotein E production by human macrophages: a possible role in atherosclerosis / Y. Takagi, C.A. Dyer, L.K. Curtiss // J. Lipid Res. 1988. - V. 29, N 7. - P. 859-867.

148. Tan C.E. APOE polymorphism and lipid profile in the three ethnic groups in the Singapore population / C.E. Tan, E.S. Tai, C.S. Tan, K.S. Chia, J. Lee, S.K. Chew, J.M. Ordovas // Atherosclerosis. 2003. - V. 170, N. 2. - P. 253-260.

149. Thelma B.K. APOE polymorphism in a rural older population-based sample in India / B.K. Thelma, R.C. Juyal, H.H. Dodge, R. Pandav, V. Chandra, M. Ganguli//Hum. Biol. 2001. - V. 73, N l.-P. 135-144.

150. Toth M.J. Lipid metabolism in the elderly / M.J. Toth, A. Tchernof // Eur. J. Clin. Nutr. -2000. V. 54.-P. 121-125.

151. Utermann G. Apolipoprotein E phenotypes and hyperlipidemia / G. Utermann, I. Kindermann, H. Kaffarnik, A. Steinmetz // Hum. Genet. —1984.-V. 65.-P. 232-236.

152. Utermann G. Apolipoprotein E polymorphism in health and disease // Am. Heart J. 1987. - V. 133, N 2. - P. 433-440.

153. Utermann G. Polymorphism of apolipoprotein E and occurrence of dysbetalipoproteinaemia in man / G. Utermann, M. Hees, A. Steinmetz // Nature. 1977. - V. 269.-P. 604-607.

154. Vincelette J. Reduced cardiac functional reserve in apolipoprotein E knockout mice / J. Vincelette, B. Martin-McNulty, R. Vergona, M.E. Sillivan, Y.X. Wang // Transl. Res. 2006. - V. 148, N 1. - P. 30-36.

155. Vogel Т. Apolipoprotein E: a potent inhibitor of endothelial and tumor cell proliferation / T. Vogel, N.H. Guo, R. Guy, N. Drezlich, H.C. Krutzsch,

156. D.A. Blake, A. Panet, D.D. Roberts // J. Cell Biochem. 1994. - V. 54, N 3. -P. 299-308.

157. Walldius G. Apolipoprotein В and apolipoprotein A-I: risk indicators of coronary heart disease and targets for lipid-modifying therapy / G. Walldius, L. Jungner // J. Internal Medicine. 2004. - V. 255, N 2. - P. 188-205.

158. Wehr H. Apolipoprotein E in alcoholics / H. Wehr, M. Bednarska-Makaruk,

159. E. Szacka // Alcohol. Alcohol. 1995. - V. 30. - P. 27-30.

160. Weisgraber K.H. Abnormal lipoprotein receptor-binding activity of the human E apoprotein due to cysteine-arginine interchange at a single site / K.H. Weisgraber, T.L. Innerarity, R.W. Mahley // J. Biol. Chem. 1982. -V.257.-P. 2518-2521.

161. Wernette-Hammond M.E. Glycosylation of human apolipoprotein E. The carbohydrate attachment site is threonine 194 / M.E. Wernette-Hammond, S.J. Lauer, A. Corsini, D. Walker, J.M. Taylor, S.C. Rail // J. Biol. Chem. -1989. -V. 264, N 15. P. 9094-9101.

162. Wientgen H. Subphysiologic apolipoprotein E (ApoE) plasma levels inhibit neointimal formation after arterial injury in ApoE-deficient mice / H. Wientgen, F.E. Thorngate, S. Omerhodzic, L. Rolnitzky, J.T. Fallon, D.L.

163. Williams, E.A. Fisher 11 Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2004. - V. 24, N8.-P. 1460-1465.

164. Williams D.L. Synthesis of apolipoprotein by peripheral tissues / D.L. Williams, P.A. Dowson, T.C. Newman, L.L. Rudel // Ann. NY Acad. Sci. -1985.-V. 455.-P. 222-229.

165. Xenoulis P.G. Serum liver enzyme activities in healthy Miniature Schnauzers with and without hypertriglyceridemia / P.G. Xenoulis, J.S. Suchodolski, M.D. Levinski, J.M. Steiner // J. Am. Vet. Med. Assos. 2008. -V. 232, N1.-P. 63-67.

166. Yamada N. Role of apolipoprotein E in lipoprotein metabolism and in the process of atherosclerosis / N. Yamada, H. Shimano, Y. Yazaki // J. Atheroscler. Thromb. 1995. - V. 2, N 1. - P. 29-33.

167. Yuan G. Hypertriglyceridemia: its etiology, effects and treatment / G. Yuan, K.Z. Al-Shali, R.A. Hegele//CMAJ. 2007. - V. 176, N8.-P. 1113-1120.

168. Zannis V.I. Human apolipoprotein E isoprotein subclasses are genetically determined / V.I. Zannis, P.W. Just, J.L. Breslow // Am. J. Hum. Genet. -1981.-V. 33.-P. 11-24.

169. Zannis V.I. Synthesis, intracellular processing, and signal peptide of human apolipoprotein E / V.I. Zannis, J. McPherson, G. Goldberger, S.K. Karathanasis, J.L. Breslow // J. Biol. Chem. 1984. - V. 259, N 9. - P. 5495-5499.

170. Zhu B. Apolipoprotein E inhibits neointimal hyperplasia after arterial injury in mice / B. Zhu, D.G. Kuhel, D.P. Witte, D.Y. Hui // Amer. J. Pathology. -2000.-V. 157.-P. 1839-1848.

Информация о работе

Канева, Анастасия Михайловна
кандидата биологических наук
Сыктывкар, 2008
ВАК 03.00.13

Диссертация

Аполипопротеин-Е в липидном обмене у жителей Европейского Севера - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы