Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Антигенные свойства средств специфической профилактики ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей
ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Антигенные свойства средств специфической профилактики ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей"

005005721 На правах рукописи

ЗОТОВА Зоя Витальевна

Антигенные свойства средств специфической профилактики ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

- 8 ДЕК 2011

Москва-2011

005005721

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ).

Научный руководитель: кандидат ветеринарных наук, доцент

Пименов Николай Васильевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Фомина Наталья Васильевна; доктор биологических наук, Лауреат государственной премии РФ Соловьев Борис Васильевич

Ведущая организация: Федеральное государственное учреждение «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ ВГНКИ).

Защита состоится «¿Я» Р^й^иШХ 1 г. в // часов на заседании диссертационного совета Д 220.042.01 при ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23; тел.(495) 377-93-83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23) и на сайте http://www.vak.ed.gov.ru.

Автореферат разослан « & 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, профессор /

Грязнева Т.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Грипп птиц, возбудитель которого относится к ортомиксовирусам, и болезнь Ньюкасла, возбудитель которой - парамик-совирус, классифицированы МЭБ и ВОЗЖ (OIE) как высоко контагиозные инфекционные болезни птиц, приводящие к значительным ущербам. Однако, эти инфекции у голубей изучены недостаточно (Бессарабов Б.Ф., 2010).

Есть данные о субклинической инфекции гриппа птиц у голубей и ее специфической профилактики, но применение вакцин против гриппа птиц на голубях не было научно обоснованно (Грошева Г.А., 2008).

Болезнь Ньюкасла является одной из основных проблем современного голубеводства. При этом система профилактических мероприятий при болезни Ньюкасла голубей не разработана, а применение вакцинации носит спонтанный и неконтролируемый ветслужбой характер.

Кроме того, использование вакцинных препаратов в голубеводстве лимитировано породными, анатомо-физиологическими, иммунологическими, генетическими и другими особенностями семейства птиц Columbi-dae (Пименов Н.В., 2010).

Поэтому, изучение антигенных свойств средств специфической профилактики ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей является актуальной задачей для птицеводства и голубеводства.

Цель и задачи исследований. Цель работы - изучить особенности проявления ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей и определить антигенные свойства вакцинных препаратов против гриппа птиц и болезни Ньюкасла у голубей.

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить факторы риска распространения ортомиксо- и парамик-совирусной инфекций птиц в Москве и Московской области.

2. Изучить особенности эпизоотического процесса и клинического проявления гриппа птиц и болезни Ньюкасла у голубей в условиях г. Москвы и Московской области.

3. Изучить реактогенные и антигенные свойства атгенуированных и инактивированных вакцин против гриппа и болезни Ньюкасла птиц на голубях в сравнительном аспекте.

4. Изучить на голубях безвредность и антигенность ассоциированной инактивированной вакцины «Виросальм» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц в сравнительном аспекте с аналоговой вакциной «Salmavir» и при введении в антигенный состав вакцины «Виросальм» нового штамма вируса ньюкаслской болезни «PN-T».

5. Провести исследования протективных и антигенных свойств вакцины «Виросальм» в условиях неблагополучных голубятен.

6. Разработать методические рекомендации по специфической профилактике ортомиксо- и парамиксовирусной инфекций у голубей.

Научная новизна. Впервые установлены особенности эпизоотического процесса и факторы риска распространения ортомиксовирусных и парамиксовирусных инфекций у голубей в г. Москве и Московской обл.

От больных голубей разных пород в голубятнях г. Москвы и Московской области выделен возбудитель парамиксовирусной инфекции типа 1, вызывающий поражение головного мозга и желудочно-кишечного тракта у голубей при сверхостром и остром течении болезни.

Впервые в сравнительном аспекте изучены антигенные свойства и безвредность применения для голубей 8 вакцин: против гриппа птиц - инак-тивированная эмульгированная на основе штамма H5N1, инактивирован-ная эмульгированная ФЛУ ПРОТЕКТ Н5, инактивированная бивалентная против гриппа птиц подтипов Н5+Н7; против ньюкаслской болезни птиц -ассоциированные инактивированные вакцины «Виросальм» и «Salmavir», живая лиофилизированная вирусвакцина из штамма «La Sota» , вирусвак-цина сухая против ньюкаслской болезни из штамма «Бор-74 ВГНКИ», вирусвакцина из штамма «ГАМ-61».

Доказано, что введение в состав вакцины «Виросальм» штамма вируса болезни Ньюкасла голубиного варианта - «PN-T» вместо штамма «Н», достоверно повышает антигенность вакцины в 1,6 раза и поддерживает

напряженность иммунитета у голубей в течение не менее 10 мес.

Практическая значимость. Результаты исследований по особенностям течения эпизоотических процессов ортомиксо- и парамиксовирусной инфекций у голубей, изучение факторов риска возникновения гриппа птиц и болезни Ньюкасла, а также эффективности вакцинных препаратов включены в комплекс противоэпизоотических мероприятий в голубеводстве и птицеводстве в Москве и Московской области.

Разработаны методические рекомендации по специфической профилактике ортомиксо- и парамиксовирусной инфекций у голубей.

Для повышения антигенности вакцины «Виросальм» предприятию-изготовителю ООО «Торговый дом «БиАгро» даны рекомендации о замене вакцинного штамма «Н» на новый штамм вируса болезни Ньюкасла голубиного варианта - «Р1Ч-Т».

Результаты исследований антигенных и реактогенных свойств вакцины «Виросальм» были использованы при составлении нормативной документации с целью регистрации модифицированной вакцины «Виросальм» для применения на территории РФ (инструкция по применению, СТО), а также в регламенте производства вакцины и в 2 отчетах по испытанию вакцины на голубях.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе в ФГБОУ ВПО МГАВМиБ при изучении студентами дисциплин «Эпизоотология» и «Болезни птиц».

Личный вклад соискателя. Автору принадлежит непосредственное осуществление исследований по мониторингу за гриппом птиц и болезнью Ньюкасла у голубей, изучение антигенных и реактогенных свойств вакцин против ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей, а также анализ и обобщение полученных результатов.

Апробация результатов диссертации. Основные результаты исследований доложены на научно-практической конференции, посвященной памяти академика Коровина Р.Н. (Санкт-Петербург - Ломоносов, 2008), на Международной научно-практической конференции молодых ученых и

специалистов «Молодежь. Наука. Будущее: технологии и проекты» (Казань, 2011), на научной конференции молодых ученых «Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии» (Москва, 2011).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 6 научных работ, в т.ч. 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Материалы диссертации изложены на 173 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, данные о практическом использовании результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы, включающий 173 источника, в т.ч. 71 иностранных авторов. Работа содержит 19 таблиц, 5 рисунков, 20 страниц приложений.

На защиту выносятся следующие положения и результаты:

1. Результаты эгшзоотологического анализа, клинических и патолого-анатомических исследований ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у птиц, в т.ч. голубей в условиях Москвы и Московской области.

2. Факторы риска возникновения и распространения ортомиксо- и па-рамиксовирусной инфекций голубей в Москве и Московской области.

3. Антигенные и реактогенные свойства живых и инактивированных вакцин против гриппа птиц и болезни Ньюкасла у голубей.

4. Безвредность, антигенные и протективные свойства вакцины «Виро-сальм» при профилактике болезни Ньюкасла у голубей.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена на кафедре клинической диагностики и болезней молодняка ФГБОУ ВПО МГАВМиБ в период с 2008 по 2011 гг. Ряд исследований проведены на базах кафедры эпизоотологии и инфекционных болезней ФГБОУ ВПО МГАВМиБ, биокомбинате ООО «Торговый дом «БиАгро» и в ветеринарных лабораториях г. Москвы и Московской обл.

Определяли антигенные свойства и безвредность вакцин в сравнительном аспекте: инактивированная эмульгированная на основе штамма Н5Ш; инактивированная эмульгированная ФЛУ ПРОТЕКТ Н5; инактиви-

6

рованная бивалентная против гриппа птиц подтипов Н5+Н7; ассоциированная инактивированная «Виросальм» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц; живая лиофилизированная из штамма «La Sota»; сухая против ньюкаслской болезни из штамма «Бор-74 ВГНКИ»; против ньюкаслской болезни из штамма «ГАМ-61»; инактивированная «Salmavir» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла.

В работе были использованы голуби беспородные массой 250-350 г -100 голов, голуби декоративные и спортивные - 2192 голов; белые мыши массой 16-20 г - 35 голов, СПФ куриные эмбрионы - 120 шт.

Совместно с органами Россельхознадзора РФ проведено обследование условий содержания и соблюдения ветеринарно-санитарных и гигиенических правил в 42 личных и 10 фермерских хозяйствах Московской обл.

С целью корреляционного сравнительного анализа факторов, способствующих вспышкам вирусных инфекций птиц, применяли пакет статистической обработки данных SPSS. 10.1 с оценкой статистической значимости коэффициента корреляции.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Особенности эпизоотического процесса и клинической картины гриппа

птиц в период эпизоотии 2007 года в г. Москве и Московской обл.

Для изучения и характеристики эпизоотической вспышки гриппа птиц в г. Москве и Московской области в 2007 г были проанализированы отчеты о работе выездных противоэпизоотических отрядов и ветеринарных пунктов в очагах заболевания. Во время эпизоотии гриппа в исследуемом регионе неблагополучными являлись 9 личных приусадебных хозяйств и ОАО «ОРР «Садовод».

Были изучены 296 случаев гриппа - 88,9% от всех зарегистрированных во время вспышки в регионе. Клинические формы гриппа отмечали у кур, уток, гусей, индеек, мускусных уток, фазанов. Согласно полученным данным, молниеносная форма наблюдалась в 109 случаях (35,8%), острая у 184 птиц (62,1 %), подострая - у единичных особей.

Смертность в первые сутки заболевания составила 41,2%.

Наиболее часто у кур наблюдали экссудативно-геморрагический (50,3%), неврологический (36,1%) и интоксикационный (42,6%) синдромы. У домашних водоплавающих были выражены неврологический (69,9%) и респираторный (63%) синдромы. У гусей и индеек грипп проявлялся острой интоксикацией (65,6%), поражением органов дыхания (71,9%), экс-судативно-геморрагическим воспалением подкожной клетчатки в области головы, туловища (65,6%).

У кур, наблюдали синюшность кожных покровов, сережек, гребня, образование участков некроза и мумификации.

Картина респираторного и гастроэнтеритного синдрома у различных видов птиц являлась характерной. Однако частота их проявления была различной: у водоплавающих птиц чаще отмечали признаки респираторных поражений, у кур - желудочно-кишечных.

Патологоанатомические признаки при гриппе птиц

в период эпизоотии 2007 года в г. Москве и Московской области

В процессе работы в очаге инфекции нами проведено патолого-анатомическое исследование 80 трупов кур и 40 трупов уток и гусей, убитых с клиническими признаками гриппа птиц.

Наиболее часто у трупов кур отмечали поражение органов желудочно-кишечного тракта (89,8%). В 82,3% случаев обнаруживали геморрагическое воспаление яичников, отек подкожной клетчатки и слизистых оболочек - 71,2%; геморрагические и некротические изменения кожных покровов и слизистых оболочек - 62,8%. У водоплавающих птиц наряду с ката-рально-геморрагическим воспалением органов дыхания (68,7%), регистрировали катаральный, катарально-гнойный кератоконъюнктивит (59,3%).

Совершенствование мер общей профилактики гриппа птиц и болезни Ньюкасла в Москве и Московской области

Усовершенствованы мероприятия по предупреждению гнездования перелетной водоплавающей птицы на водоемах, расположенных вблизи населенных пунктов и птицеводческих хозяйств; разработаны указания и

8

методические рекомендации для руководителей птицеводческих хозяйств и населения о действиях в период вспышки гриппа птиц; предложены учебные мероприятия по действиям в чрезвычайной ситуации; проведен расчет необходимого запаса дезинфектантов для птицехозяйств открытого и закрытого типа, специального оборудования, транспорта, средств индивидуальной защиты; опубликованы информационные материалы для просветительской работы с населением.

На птицефабриках и в специализированных фермах были выявлены 152 нарушения в содержании птицы, что свидетельствует о наличии условий, способствующих возникновению эпизоотии. Отмечены случаи возможного контакта диких голубей с птицей промышленного содержания в 14 из 32 обследованных объектов. Только 19 птицефабрик из 28 (64,3%) оснащены достаточным количеством дезинфекционных установок. Для профилактики возможной эпизоотии требуется дополнительное приобретение специального оборудования на сумму 7657 тыс. руб.

Запас специального оборудования и дезинфектантов должен определяться из расчета вовлечения в эпизоотический процесс, как минимум, 25% хозяйств.

Проведено исследование условий содержания, выполнения ветеринар-но-санитарных правил и зоогигиенических норм в 42 личных и 10 фермерских хозяйствах Московской области.

В 71,2% обследованных личных подсобных и фермерских хозяйствах птицу содержат способом свободного выгула, не ограничивающим контакт с дикой водоплавающей и прочей птицей.

Предотвращено инфицирование вирусом гриппа птиц в 36,5% хозяйствах, регулярно контактирующих с дикой перелетной водоплавающей птицей, и в 57,7% хозяйствах, где контакт был возможен с большой степенью вероятности.

Работа по исключению заноса вирусов из других регионов через сельскохозяйственную птицу, продукты птицеводства, корма должна включать следующие мероприятия:

- усиление контроля за ввозом и реализацией птицы в регионе;

- интенсификация мер, подтверждающих инфекционную безопасность новых партий живой птицы, птицеводческой продукции, кормов и кормовых добавок;

- обязательное лабораторное исследование на грипп живой птицы, поступающей на объекты региона для содержания, разведения и реализации, а также кормов, не имеющих промышленной упаковки.

Контроль за объектами размещения живой птицы зрелищного предназначения является неотъемлемой частью противоэпизоотической работы.

Специфическая профилактика гриппа птиц

Для Московского региона ежегодная потребность вакцины против гриппа птиц составляет 1100 тыс. доз, в т.ч. 1000 тыс. доз - для Московской области и 100 тыс. доз - для г. Москвы.

В 2006 г. в Московской обл. было вакцинировано однократно 96% восприимчивого поголовья птиц, ревакцинация была проведена в 66,9% хозяйств. В Москве вакцинировано 47559 птиц учтенного поголовья, в т.ч. 33565 голубей (табл. 1).

Таблица 1. Сведения о вакцинации домашней птицы в г. Москве

№ Место проведения Кол-во птиц, Кол-во вак- Доля от под- Не вак-

п/ вакцинации подлежащих цинирован- лежащих циниро-

п вакцинации, гол. ных птиц, гол. вакцинации, % вано, гол.

1 Московский зоопарк 1623 303 18,7 1320

2 Тимирязевская СХА 1690 1690 100,0 0

3 Объекты общественного пользования:

ЦАО 2567 789 30,7 1778

САО 2635 314 11,9 2321

ЗАО 2429 412 17,0 2017

ЮЗАО 3050 807 26,5 2243

4 Голубятни 33565 8941 26,6 24624

Итого 47559 13256 27,9 34303

Ревакцинировано - 1420 - -

В течение года в голубятнях вакцинировано 8941 (26,6%).

10

Поствакцинальный мониторинг реактивности птиц был организован недостаточно, вследствие чего анализу подверглись лишь наиболее крупные фермерские хозяйства. Существенное отрицательное влияние на своевременное проведение специфической профилактики оказало отсутствие методов групповой вакцинации, особенно затрудняющее ее выполнение в хозяйствах промышленного типа.

Материалы проведенных мониторинговых исследований, свидетельствуют о том, что значительный контингент птиц сохраняет восприимчивость к вирусу гриппа штамма Н51Ч1. Причиной невыполнения плана им-мунации птиц в г. Москве являются отсутствие необходимого количества вакцины, недостаточная численность ветеринарных специалистов, а также недостаточная разъяснительная работа среди населения.

Факторы риска распространения эпизоотии ортомиксо- и парамиксо-вирусной инфекции птиц в Московской области

Детализация особенностей климато-географических, экологических и антропологических факторов, повышающих риск возникновения гриппа и болезни Ньюкасла, способствует правильной организации противоэпизоо-тических мероприятий. Из имеющихся материалов следует, что, прежде всего, это - климатический и географический факторы, определяющие особенности орнитофауны.

Кроме этого был установлен риск распространения эпизоотий ортомиксо- и парамиксовирусной инфекции птиц в Москве и Московской обл. птицами семейства Со1итЫс1ае. Голуби, являясь объектом слабовосприимчивым к инфекции гриппа, могут представлять угрозу бессимптомного носительства и распространения инфекции среди восприимчивой сельскохозяйственной птицы. Вирус болезни Ньюкасла, распространяясь через водоплавающих, диких и синантропных птиц, циркулирует среди голубей и вызывает на голубятнях вспышки болезни с высокой летальностью.

Отмечается необходимость в применении средств специфической профилактики ортомиксо- и парамиксовирусной инфекции - вакцинации голубей против гриппа и болезни Ньюкасла, что актуализирует исследования антигенных свойств имеющихся вакцин в сравнительном аспекте.

11

Антигенные свойства вакцин против гриппа птиц, используемые для вакцинации голубей

Проведены исследования антигенной реактивности голубей при использовании трех вакцин против гриппа птиц. Для этого были сформированы 3 группы беспородных голубей старше 1 года массой 280-350 г, по 10 голов в каждой группе.

Голубей I опытной группы иммунизировали вакциной против гриппа птиц инактивированной эмульгированной на основе штамма Н5Ш производства ФГУП «Покровский завод биопрепаратов» однократно подкожно в нижнюю треть шеи в дозе 0,25 см3, согласно инструкции по применению. Голубей П опытной группы иммунизировали вакциной против гриппа птиц инактивированной эмульгированной ФЛУ ПРОТЕКТ Н5 производства ФГУП «Ставропольская биофабрика», подкожно в аналогичной дозе. Голубей 1П группы иммунизировали вакциной инактивированной бивалентной против гриппа птиц подтипов Н5 и Н7 экспериментальной серии ГНУ ВНИВИП в дозе 0,5 см3 подкожно.

Применение исследованных вакцин на голубях вызывало изменения клинического статуса и системные реактогенные реакции со случаями падежа. Вакцины в I и П группах провоцировали угнетенное состояние птиц, отказ от корма и питья, часть голубей становились вяльми, нахохлившимися с болезненной областью инъекции. Отход в I и в Ш группах составил по 30%, во II - 10% гол. Гибель птиц отмечали в течение первых 5 суток после вакцинации.

До вакцинации и через 14, 28, 42 дня после введения вакцины у голубей из подкрыльцовой вены брали кровь и исследовали в РТГА.

Вакцина на основе штамма Н5Ш обусловливала образование специфических антител, титр которых в РТГА не превышал разведения 1:8 у 42,9% голубей в течение 42 дней. После применения вакцины ФЛУ ПРОТЕКТ Н5 через 14 дней после иммунизации поствакцинальных антител не было обнаружено, через 28 и 42 дня титр у 55,6% голубей не превышал 1:4.

Таблица 2. Показатели гуморального иммунитета у вакцинированных голубей против ортомиксвирусной инфекции

Труп Количество положительных проб в РТГА

па Предельный титр антител

птиц 0 2 4 8 | 16 | 32 I 64 | 128 256 1 512 1024

До вакцинации

80% 20% | - - 1 - 1 - - 1 - - 1 -

1 14 дн. после вакцинации

57,1% + + 42,9% | - | - - 1 - - -

28 дн. после вакцинации

57,1% + | + 42,9% | - | - ' - I - . 1 -

42 дн. после вакцинации

57,1% + | 42,9% - 1 - 1 - - -

До вакцинации

80,0% 20,0%| - - 1 - 1 - - - - 1

14 дней после вакцинации

44,44% + 11,1% 44,4% | - | - - 1 - -

2 28 дн. после вакц инации

44,4% + 55,6% - 1 - 1 - - 1 - 1 - 1 - 1

42 дн. после вакц инации

44,4% + 55,6% - 1 - 1 - -1.1-1-1

До вакцинации

70,0% зо,о%! - - 1 - 1 - - 1 - - 1 - -

14 дн. после вакцинации

3 28,6% + : + + 1 + 1 + 57,1% + + 1 + 14,3%

28 дн. после вакцинации

14,3% + + + | + | + 57,1% + 28,6% + +

42 дн. после вакцинации

+ + | + + | + | + + 1100%] + 1 + +

Вакцина экспериментальной серии ГНУ ВНИВИП отличалась выраженной иммуногенностью. Так, через 14 дней после вакцинации, титр антител у 57,1% голубей достигал уровня 1:64, т.е. 6 \og2- Предельно высокий уровень антителообразования 1:1024 (10 \о%2) наблюдался у 14,3% голубей. Через 28 дней титр поствакцинальных антител находился на уровне 1:64-1:256 у 85,7% голубей; после 42 дней снизился до 1:128, что свидетельствует об активном иммуногенезе (рис. 1).

При использовании вакцины инактивированной бивалентной против гриппа птиц подтипов Н5 и Н7 экспериментальной серии ГНУ ВНИВИП к 42 дню после иммунизации достигается равномерный иммунитет, характеризующийся высокими титрами антител.

фон 14 28 42

день исследований Рис. 1. Антигенные свойства вакцин против гриппа птиц

Использование исследованных вакцин голубям ограничивается реак-тогенностью и не может быть рекомендовано к применению.

Эпизоотическая ситуация по парамиксовирусной инфекции голубей в Москве и Московской области

До 2003 года вакцинирование птицепоголовья на голубятнях Москвы и Московской области против болезни Ньюкасла практически не проводилось, хотя вспышки болезни отмечались ежегодно.

В течение последних лет стихийно, нескоординированно применялись вакцины из живых штаммов «La Sota», «ГАМ-61» и инактивированных зарубежных «Salmavir» и «Paramyxo».

Голубеводы не проводили карантинные мероприятия, что провоцировало новые случаи ньюкаслской болезни, особенно среди молодняка.

Для мониторинга парамиксовирусной инфекции голубей типа 1 в 2008 году мы провели выборочные исследования в Р'ГГА сыворотки крови от невакцинированных голубей разных пород и возраста из голубятен различных районов г. Москвы и Московской области, где отмечались случаи заболеваемости голубей с признаками парамиксовирусной инфекции.

Титры антител к парамиксовирусу типа 1 составили от 5-6 до 11 log2. Выделенный от голубей вирус этой инфекции был патогенен для кур. При этом во всех случаях отмечали отсутствие титров антител к парамиксовирусной инфекции типа 2.

Обобщая результаты мониторинговых исследований 19 голубятен в г. Москве и Московской области, где отмечалась заболеваемость и гибель голубей от болезни Ньюкасла, мы можем заключить, что эпизоотия данной болезни голубей имеет место в Центральных регионах России и проблема ее специфической профилактики в голубеводстве чрезвычайно актуальна.

Характеристика вакцины «Виросальм»

Ассоциированная инактивированная вакцина «Виросальм» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц была создана на основе штаммов Salmonella typhimurium М-5в t - ДЕП, Salmonella typhimurium Д-1в t - ДЕП, Salmonella enteritidis 25Яв e, (депонированы в ФГУ ВГНКИ 16.10.07) и штамма вируса ньюкаслской болезни «Н» и выпускается на биокомбинате ООО «Торговый дом «БиАгро».

Безвредность вакцины определяли на мышах и голубях. Десяти белым мышам вакцину вводили подкожно - 5 мышам в дозе 0,3 см3 и 5 - в дозе 0,5 см3 на гол. Учет результатов проводили на 1, 2,10 сутки.

Все мыши оставались клинически здоровыми.

Беспородным взрослым голубям в количестве 5 голов, 3-х месячным 5 голубям и 4-х месячным 5 голубям породы «Синий» вакцину вводили внутримышечно в дозе 0,5 см3; 1,0 см3; 2,0 см3, соответственно. Учет результатов проводили на 1, 2,10 сутки. Все голуби оставались живы.

Однако при введении вакцины 4-х месячным голубям породы «Синий» в дозе 2,0 см3 наблюдали угнетение и снижение аппетита с увеличением потребления воды. Изменения физиологического состояния у голубей восстанавливались в течение суток.

Через 14 дней вакцинированных мышей и голубей умерщвляли и вскрывали для изучения возможных проявлений местной реакции в точке введения. В рекомендуемых дозах вакцина «Виросальм» была безвредна и ареактогеннна для голубей. При использовании вакцины в повышенной дозе у молодняка голубей наблюдаются временные незначительные изменения физиологического состояния.

Антигенные свойства средств специфической профилактики парамиксовирусной инфекции у голубей

Изучение антигенных свойств вакцин против парамиксовирусной инфекции проводили на голубях, используя живые вирусвакцины из штаммов «La Sota», «ГАМ-61», «Бор-74 ВГНКИ», применяющихся в птицеводстве, и вакцины «Виросальм» ассоциированной инактивированной против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц.

Были сформированы 5 групп беспородных ранее невакцинированных голубей старше 1 года по 10 голов в каждой, полученных из благополучного района Липецкой области. Голубей I группы вакцинировали интра-назально вакциной из штамма «La Sota». Голубей II опытной группы вакцинировали интраназально вакциной «Гам-61». Голубей III группы вакцинировали интраназально вакциной из штамма «Бор-74 ВГНКИ». Голубям IV группы инъецировали внутримышечно вакцину «Виросальм» двукратно. Голуби V контрольной группы не вакцинировались.

7

го с о 6

ь

о

-ЛаСота-ГАМ-61 Бор-74 ——Виросальм мшКонтроль

Рис. 2. Динамика титров антител к вирусу ньюкаслской болезни у голубей при использовании различных вакцин

После начала эксперимента наблюдение за птицей проводили в течение 10 месяцев. До эксперимента, а также на 5, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270 и 300 сутки наблюдения проводили взятие крови у всех птиц группы и исследование в РТГА к вирусу болезни Ньюкасла, а также

дни исследований

на 30, 60,120 и 300 сутки - к парамиксовирусу типа 2 (рис. 2).

При вакцинации живыми вакцинами из штаммов «La Sota» и «ГАМ-61» у голубей отмечали угнетение, снижение аппетита и одышку в течение 12 ч. Поствакцинальный иммунитет у голубей I-Ш групп начинал формироваться через 5 сут. после вакцинации и через 15 сут. был выражен высоким титром антител (более 5 log2). Пик антигенной активности живых вакцин против болезни Ньюкасла при применении их голубям приходился на 30-90 сутки, после чего держался на уровне защитных до 120-150 дней (отмечено, что титры 1:16 и даже, 1:8, в РТГА к вирусу болезни Ньюкасла у голубей являются защитными в 80-75% случаев).

Применение живых вакцин против болезни Ньюкасла обеспечивает защитные иммунобиологические реакции, характеризуемые умеренным антигенным ответом, с 15 суток после применения на срок 4-5 месяцев, затем средний уровень антител на введение вакцины снижается менее, чем на 1 log2, что не гарантирует защиты от инфекции.

Антигенные свойства вакцины «Виросальм» на 15 сут. после первого введения характеризовались появлением минимального уровня антител в 2 log2, имеющего неустойчивые тенденции. Однако после второго введения вакцины через 15 дней титр антител возрастал до 6,4 log2, т.е. к 45 суткам после начала эксперимента. Уровень антител после применения вакцины «Виросальм» через 5 месяцев с начала постановки опыта был в 1,5 раза выше, чем при использовании голубям живых вакцин из штаммов «La Sota», «ГАМ-61» и «Бор-74 ВГНКИ» и составил 6,5 log2. Через 10 месяцев с начала постановки опыта уровень антител против вируса болезни Ньюкасла у голубей, иммунизированных вакциной «Виросальм», составил 3,8 log2, что в 1,73 раза выше, чем при использовании других испытуемых вакцин, что свидетельствует о напряженном иммунном ответе при применении вакцины «Виросальм» в течение не менее 10 месяцев.

Антигенные свойства вакцины «Виросальм» при болезни Ньюкасла голубей в сравнении с аналоговой вакциной «Salmavir»

Для сравнительного анализа антигенных свойств инактивированных

вакцин против болезни Ньюкасла голубей были использованы аналоговые вакцины «Виросальм» и «Salmavir» (Польша).

Были сформированы по принципу аналогов 2 опытные группы голубей типлеров, по 10 голов в возрасте 6-8 месяцев, ранее не вакцинированные. Голубей I опытной группы вакцинировали вакциной «Виросальм». Голубей II опытной группы вакцинировали вакциной «Salmavir».

Наблюдение за птицей вели в течение 10 месяцев. Сыворотку крови голубей исследовали до вакцинации, на 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270 и 300 дни после первой вакцинации (начало эксперимента в РТГА к парамиксовирусу типа 1).

6

8>5

Г 4

I 3

фон 15 30 60 90 120 150 180 200 240 270 300 дни исследований

—♦—Виросальм -«—Salmavir

Рис. 3. Антигенные свойства инактивированных вакцин против ньюкаслской болезни

Вакцина «Виросальм» вызвала более напряженный иммунный ответ, чем аналоговая вакцина. К 30 дню исследований разница в средних титрах антител к пармиксовирусу типа 1 в РТГА была максимальна и составляла более 3 log2. На 90-е сутки после начала эксперимента средний титр антител в крови голубей I опытной группы был выше на 0,9 log2 (Р=0,029, что < 0,05, т.е. разница достоверна), на 120-е сутки - на 1,2 log2, на 150-е сутки -на 1,8 log2, на 180-е и 210-е сутки - на 1,4 log2, на 270-е сутки - на 1,2 log2 также при достоверной разнице, на 240-е сутки - на 1,0 log2 (Р=0,117,

что > 0,05, т.е. разница не достоверна), на 300-е сутки на 0,4 log2 (без достоверной разницы).

Таким образом, в течение десятимесячного периода наблюдения после вакцинации голубей против болезни Ньюкасла антигенные свойства вакцины «Виросальм» были более выражены, чем у аналоговой вакцины иностранного производства «S alma vir», выполненной на основе штамма пара-миксвируса 1-го типа «La Sota».

i Изучение антигенных свойств вакцины «Виросальм» на основе парамиксовируса типа 1 голубиного варианта «PN-T»

Для сравнительного анализа антигенных и иммуногенных свойств вакцины «Виросальм» в двух вариантах - с антигеном штамма «Н» (исходный вариант) и с антигеном штамма «PN-T» (новый вариант) были изучены в динамике титры антител у голубей (по 10 в каждой группе) в возрасте 6-8 месяцев, вакцинированных по 0,5 см3 внутримышечно, дважды, с интервалом 30 дней.

8 7

Е 6 | 5

I 4 i 3

I 2 * 1 О

фон 15 30 60 90 120 150 180 200 240 270 300 дни исследований

—♦—Виросальм штамм "Н" —»■—Виросальм штамм "PN-T"

Рис. 4. Динамика среднего титра антител в сыворотках крови голубей при использовании вакцины «Виросальм» в исходном и новом вариантах

После второй вакцинации при использовании нового варианта вакцины с антигеном штамма «PN-T» титры антител в РНГА к вирусу болезни

19

Ньюкасла были выше, во всех последующих исследованиях за период наблюдения. Через 1 мес. после повторной вакцинации разница составила 1,6 log2 при Р=0,024, что < 0,05, т.е. разница достоверна (рис. 4).

Полученные данные свидетельствуют о более высокой антигенной активности ассоциированной инактивированной вакцины «Виросальм» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративной птицы, если в препарат в качестве антигена парамиксовирусной инфекции типа 1 включен инактивированный штамм «PN-T».

Применение вакцины «Виросальм» на неблагополучных голубятнях

Антигенные и протективные свойства вакцины «Виросальм» изучали в условиях голубятен ЗАО г. Москвы.

Исследования титров антител в 16 пробах сыворотки крови голубей разных возрастных и групп к вирусу болезни Ньюкасла проводили в РТГА через 14, 60, 90,150, 210 дней после повторной вакцинации.

В течение периода наблюдения у вакцинированных голубей отмечали стабильно высокие титры антител к вирусу ньюкаслской болезни - 4-7 log2, средний титр составил 7,115 log2 на 14 день после второй инъекции вакцины и держался на уровне 4,5-6,7 log2 более 7 месяцев дальнейшего наблюдения. В период комиссионного наблюдения в течение 10 месяцев и далее после ревакцинации в течение 1 года заболеваемость среди вакцинированных голубей не отмечалась.

Таким образом, ассоциированная инактивированная вакцина «Виросальм» обладает протективными свойствами при парамиксовирусной инфекции типа 1 голубей.

ВЫВОДЫ

1. Московская область и г. Москва являются зоной повышенного риска возникновения и распространения ортомиксо- и парамиксовирусной инфекции птиц. К факторам наибольшего риска относятся климато-географические и экологические особенности региона, высокая плотность объектов птицеводства и голубеводства, отсутствие системной иммуниза-

ции против гриппа птиц и болезни Ньюкасла на голубятнях, несовершенство нормативной базы, регламентирующей профилактические мероприятия в личных приусадебных, фермерских, голубеводческих и иных объектах птицеводства.

2. Применение голубям вакцин против гриппа птиц - инактивирован-ной эмульгированной на основе штамма H5N1, инактивированной эмульгированной ФЛУ ПРОТЕКТ Н5 и инактивированной бивалентной против гриппа птиц подтипов Н5+Н7 сопровождалось системными реактогенны-ми реакциями и падежом голубей в течение первых 5 суток после вакцинации. Летальность среди вакцинированных голубей составила около 30%.

3. При мониторинговых исследованиях в РТГА сывороток крови больных голубей из неблагополучных голубятен г. Москвы и Московской области установлена этиологическая роль возбудителя парамиксовирусной инфекции типа 1 (болезнь Нькасла). Титры антител составили от 6 до 11 log2. Картина болезни характеризовалась сверхострым и острым течением, доминированием признаков поражения головного мозга и желудочно-кишечного тракта голубей. Выделенный от голубей вирус болезни Ньюкасла был патогенен для кур.

4. Вакцина «Виросальм» на основе инактивированного штамма вируса «Н» является эффективным средством специфической профилактики болезни Ньюкасла у голубей и обладает безвредностью, ареактогенностью и высокой антигенностью. Титр антител к вирусу болезни Ньюкасла голубей после двукратного применения вакцины составляет в динамике от 6,4 до 2,6 log2 и поддерживает напряженность иммунитета в течение не менее 270 суток.

5. В течение десятимесячного периода наблюдения после вакцинации голубей против болезни Ньюкасла антигенные свойства вакцины «Виросальм» были более выражены, чем у аналоговой вакцины иностранного производства «Salmavir», выполненной на основе инактивированного штамма парамиксвируса 1-го типа «La Sota». В сравнение с живыми вак-

цинами из штаммов «La Sota», «ГАМ-61», «Бор-74 ВГНКИ» период напряженного иммунитета у голубей после применения вакцины «Виро-сальм» был продолжительнее не менее чем на 150 суток.

6. Введение инактивированного штамма вируса «PN-T» в состав вакцины «Виросальм» вместо инактивированного штамма вируса «Н» болезни Ньюкасла повысило антигенные и иммуногенные свойства вакцины. Достоверную разницу титров антител в РТГА равную 1,6 log2 отмечали на 60,90,120,150 и 180 сутки исследований.

7. Вакцина «Виросальм» на основе инактивированного штамма вируса «PN-T» обладает протективными свойствами при парамиксовирусной инфекции типа 1 голубей. У вакцинированных голубей в условиях неблагополучных голубятен на 14 день после вакцинации отмечали высокий титр антител к вирусу болезни Ньюкасла, равный 7,1 log2. В течение 7 месяцев титр антител держался на уровне 4,5-6,7 log2. В период комиссионного наблюдения в течение 10 месяцев и далее после ревакцинации в течение 1 года заболеваемость болезнью Ньюкасла среди вакцинированных голубей не отмечалась.

СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Результаты исследований включены в «Методические рекомендации по недопущению распространения гриппа птиц и болезни Ньюкасла голубей в частных подворьях, птицеводческих хозяйствах и голубятных» (Москва, 2011).

2. Результаты, полученные при исследовании антигенных свойств вакцин против гриппа птиц и болезни Ньюкасла на голубях внедрены в ветеринарную практику голубеводства.

3. По результатам исследований разработаны рекомендации по совершенствованию мер профилактики гриппа птиц в Московском регионе, одобренные Комитетом ветеринарии г. Москвы (2008 г.).

4. Результаты исследований иммунобиологических свойств ассоции-

рованной инактивированной вакцины «Виросальм» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц в лабораторных условиях и в условиях голубятен использованы при составлении нормативной документации и отчетов о доклинических и производственных испытаниях вакцины, представленной в ФГУ ВГНКИ для регистрации.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1. Ветеринарным специалистам, заводчикам голубей и другой птицы рекомендуется проводить мониторинг ортомиксо- и парамиксвирусной инфекций, организовать содержание голубей в режиме предприятия закрытого типа, систематизировать профилактические обработки и противо-эпизоотические мероприятия с проведением иммунизации голубей против гриппа птиц и болезни Ньюкасла.

2. Научным работникам рекомендуется провести дополнительные исследования на реактогенность вакцин против гриппа птиц при использовании их голубям и разработать вакцину против гриппа голубей, не вызывающую местного и системного реактогенного действия.

3. Для профилактики ньюкаслской болезни рекомендуется применение ассоциированную инактивированную вакцину «Виросальм» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц с 20-дневного возраста внутримышечно дважды с интервалом 28-30 дней каждые 10-11 месяцев.

4. Данные по иммунобиологическим свойствам вакцины «Виросальм» в новом варианте с включением антигена инактивированного штамма «РМ-Т» рекомендуется использовать для дальнейшего совершенствования средств специфической профилактики парамиксовирусной инфекции голубей типа 1.

5. Материалы исследований по специфической профилактике гриппа птиц и болезни Ньюкасла у голубей рекомендуется использовать в учебном процессе в ВУЗах РФ по специальности «Ветеринария».

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Зотова З.В. Показатели гуморального иммунитета у голубей, вакцинированных против гриппа //Ветеринария.- 2008.- № 8.- С.13-14.

2. Зотова З.В. Грипп птиц и факторы риска возникновения эпизоотии: монография - М.: Юго-Восток-Сервис.- 2009. -111 с.

3. Пименов Н.В., Зотова З.В. Конструирование вакцины «Виросальм» на основе парамиксовируса типа 1 голубиного варианта штамма «PN-T" //Ветеринарный врач.- 2011.- № 4.- С. 2-4.

4. Зотова З.В., Пименов Н.В. Проблема ньюкаслской болезни голубей и пути ее решения // Ветеринария и кормление.- 2011.- № 5.- С. 35-36.

5. Зотова З.В., Пименов Н.В. Факторы риска распространения эпизоотии ортомиксовирусной и парамиксовирусной инфекции птиц в Московской области //Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии: Сб. науч. тр. молодых ученых,- М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ,- 2011.- Вып. 7.- С. 145151.

6. Пименов Н.В., Зотова З.В. Иммунобиологические свойства вакцины "Виросальм" в сравнении с живыми вакцинами против ньюкаслской болезни у голубей // Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии: Сб. науч. тр. молодых ученых.- М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ.- 2011.- Вып. 1С. 164- 168.

Отпечатано в ООО «Компания Спутник+» ПД № 1-00007 от 26.09.2000 г. Подписано в печать 23.11.2011 Тираж 100 экз. Усл. п.л. 1,0 Печать авторефератов (495)730-47-74,778-45-60

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Зотова, Зоя Витальевна

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ,

СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Этиологические особенности ортомиксовирусной инфекции у голубей.

1.1.1. Характеристика возбудителя.

1.1.2. Эпизоотологические данные.

1.1.3. Патогенез и сведения о болезни у голубей.

1.2. Этиологические особенности парамиксовирусной инфекции у голубей.

1.2.1. Характеристика возбудителя.

1.2.2. Эпизоотологические данные.

1.2.3. Патогенез.

1.2.4. Клинические признаки и патологоанатомические изменения при парамиксвирусной инфекции у голубей.

2. Аспекты диагностики.

3. Принципы противоэпизоотической борьбы при ортомиксовирусной и парамиксовирусной инфекциях птиц.

4. Специфическая профилактика ортомиксовирусной инфекции - гриппа птиц.

5. Специфическая профилактика парамиксовирусной инфекции - ньюкаслской болезни у голубей.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2.1. Особенности эпизоотического процесса и клинической картины гриппа птиц в период эпизоотии 2007 года в г. Москве и Московской области.

2.2.2. Патологоанатомические признаки при гриппе птиц в период эпизоотии 2007 года в г. Москве и Московской области.

2.2.3. Совершенствование мер общей профилактики гриппа птиц и ньюкаслской болезни в Москве и Московской области.

2.2.4. Специфическая профилактика гриппа птиц.

2.2.5. Факторы риска распространения эпизоотии ортомиксовирусной и парамиксовирусной инфекции птиц в Московской области.

2.2.6. Антигенные свойства вакцин против гриппа птиц, используемые для вакцинации голубей.

2.2.7. Эпизоотическая ситуация по парамиксовирусной инфекции у голубей в Москве и Московской области.

2.2.8. Характеристика вакцины «Виросальм».

2.2.9. Антигенные свойства средств специфической профилактики парамиксовирусной инфекции у голубей.

2.2.10. Антигенные свойства вакцины «Виросальм» при ньюкаслской болезни голубей в сравнении с аналоговой вакциной «Salmavir».

2.2.11. Изучение антигенных свойств вакцины «Виросальм» на основе парамиксовируса типа 1 голубиного варианта «PN-Т».

2.2.12. Применение вакцины «Виросальм» на неблагополучных голубятнях.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.

6. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ

НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Антигенные свойства средств специфической профилактики ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей"

Актуальность темы. Ортомиксо- и парамиксовирусные инфекции у голубей недостаточно изучены. Грипп птиц, возбудитель которого относится к ортомиксовирусам, и болезнь Ньюкасла, ньюкаслская болезнь, возбудитель которой относится к парамиксовирусам, классифицированы МЭБ, ВОЗЖ (OIE) в группу А наиболее контагиозных инфекционных болезней животных, приводящих к значительным ущербам.

Из статистических данных следует, что в Европе, Азии, Америке регистрируются пандемические штаммы вируса гриппа (6,47,52,56,70,162,169). Реассорция вирусов свидетельствует о возможном проявлении в природных условиях новых штаммов ( 10,27,36,56,98,108,109,117,126,167,168).

Обоснован риск болезней голубей, которые представляют собой угрозу распространения инфекта среди сельскохозяйственных птиц. Деева Э.Г. указывает на эпизоотию гриппа голубей как на манифестацию пандемии. Есть данные о субклинической инфекции гриппа птиц у голубей и ее предупреждении применением вакцины (59,96,134,146). Противоэпизоотические мероприятия по ликвидации и предупреждению распространения гриппа птиц в нашей стране требовали вакцинообработки голубей, однако применение вакцин против гриппа птиц на голубях не было научно обоснованно. Использование биопрепаратов на голубях имеет свои особенности, связанные с видовыми, породными и индивидуальными анатомо-физиологическими, иммунологическими, генетическими и другими особенностями семейства Columbi-dae - собственно голуби.

Болезнь Ньюкасла является одной из основных проблем современного голубеводства. Участились эпизоотические вспышки «вертячки» голубей. При этом системы специфической профилактики ньюкаслской болезни в голубеводстве не предложено, применения вакцин носят спонтанный характер (67,69). Таким образом, изучение иммунобиологических свойств средств специфической профилактики ортомиксовирусных и парамиксовирусных инфекций у голубей является необходимостью для совершенствования и систематизации профилактических мероприятий в голубеводстве.

Цель и задачи исследований. Цель работы - изучить особенности проявления ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей и определить антигенные свойства вакцинных препаратов против гриппа птиц и ньюкасл-ской болезни голубей.

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить факторы риска распространения ортомиксо- и парамик-совирусной инфекций птиц в Москве и Московской области.

2. Изучить особенности эпизоотического процесса и клинического проявления гриппа птиц и болезни Ньюкасла у голубей в условиях г. Москвы и Московской области.

3. Изучить реактогенные и антигенные свойства аттенуированных и инактивированных вакцин против гриппа и болезни Ньюкасла птиц на голубях в сравнительном аспекте.

4. Изучить на голубях безвредность и антигенность ассоциированной инактивированной вакцины «Виросальм» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц в сравнительном аспекте с аналоговой вакциной «8а1таут> и при введении в антигенный состав вакцины «Виросальм» нового штамма вируса ньюкаслской болезни «Р1Ч-Т».

5. Провести исследования протективных и антигенных свойств вакцины «Виросальм» в условиях неблагополучных голубятен.

6. Разработать методические рекомендации по специфической профилактике ортомиксо- и парамиксовирусной инфекций у голубей.

Научная новизна. Впервые установлены особенности эпизоотического процесса и факторы риска распространения ортомиксовирусных и парамиксовирусных инфекций у голубей в г. Москве и Московской обл.

От больных голубей разных пород в голубятнях г. Москвы и Московской области выделен возбудитель ньюкаслской болезни типа 1, вызывающий поражение головного мозга и желудочно-кишечного тракта у голубей при сверхостром и остром течении болезни.

Впервые в сравнительном аспекте изучены антигенные свойства и безвредность применения для голубей 8 вакцин: против гриппа птиц - инактиви-рованная эмульгированная на основе штамма H5N1, инактивированная эмульгированная ФЛУ ПРОТЕКТ Н5, инактивированная бивалентная против гриппа птиц подтипов Н5+Н7; против ньюкаслской болезни птиц - ассоциированные инактивированные вакцины «Виросальм» и «Salmavir», живая лиофилизированная вирусвакцина из штамма «La Sota» , вирусвакцина сухая против ньюкаслской болезни из штамма «Бор-74 ВГНКИ», вирусвакцина из штамма «ГАМ-61».

Доказано, что введение в состав вакцины «Виросальм» штамма вируса ньюкаслской болезни голубиного варианта - «PN-T» вместо штамма «Н», достоверно повышает антигенность вакцины в 1,6 раза и поддерживает напряженность иммунитета у голубей в течение не менее 10 мес.

Практическая значимость. Результаты исследований по особенностям течения эпизоотических процессов ортомиксо- и парамиксовирусной инфекций у голубей, изучение факторов риска возникновения гриппа птиц и ньюкаслской болезни, а также эффективности вакцинных препаратов включены в комплекс противоэпизоотических мероприятий в голубеводстве и птицеводстве в Москве и Московской области.

Разработаны методические рекомендации по специфической профилактике ортомиксо- и парамиксовирусной инфекций у голубей.

Для повышения антигенности вакцины «Виросальм» предприятию-изготовителю ООО «Торговый дом «БиАгро» даны рекомендации о замене вакцинного штамма «Н» на новый штамм вируса болезни Ньюкасла голубиного варианта - «PN-T».

Результаты исследований антигенных и реактогенных свойств вакцины «Виросальм» были использованы при составлении нормативной документации с целью регистрации модифицированной вакцины «Виросальм» для применения на территории РФ (инструкция по применению, СТО), а также в регламенте производства вакцины и в 2 отчетах по испытанию вакцины на голубях.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе в ФГБОУ ВПО МГАВМиБ при изучении студентами дисциплин «Эпизоотология» и «Болезни птиц».

Личный вклад соискателя. Автору принадлежит непосредственное осуществление исследований по мониторингу за гриппом птиц и ньюкасл-ской болезнью у голубей, изучение антигенных и реактогенных свойств вакцин против ортомиксо- и парамиксовирусных инфекций у голубей, а также анализ и обобщение полученных результатов.

Апробация результатов диссертации. Основные результаты исследований доложены на научно-практической конференции, посвященной памяти академика Коровина Р.Н. (Санкт-Петербург - Ломоносов, 2008), на Международной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Молодежь. Наука. Будущее: технологии и проекты» (Казань, 2011), на научной конференции молодых ученых «Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии» (Москва, 2011).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 6 научных работ, в т.ч. 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Материалы диссертации изложены на 173 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, данные о практическом использовании результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы, включающий 173 источника, в т.ч. 71 иностранных авторов. Работа содержит 19 таблицы, 5 рисунков, 20 страниц приложений.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Зотова, Зоя Витальевна

4. ВЫВОДЫ

1. Московская область и г. Москва являются зоной повышенного риска возникновения и распространения ортомиксо- и парамиксовирусной инфекции птиц. К факторам наибольшего риска относятся климато-географические и экологические особенности региона, высокая плотность объектов птицеводства и голубеводства, отсутствие системной иммунизации против гриппа птиц и болезни Ньюкасла на голубятнях, несовершенство нормативной базы, регламентирующей профилактические мероприятия в личных приусадебных, фермерских, голубеводческих и иных объектах птицеводства.

2. Применение голубям вакцин против гриппа птиц - инактивированной эмульгированной на основе штамма Н51Ч1, инактивированной эмульгированной ФЛУ ПРОТЕКТ Н5 и инактивированной бивалентной против гриппа птиц подтипов Н5+Н7 сопровождалось системными реактогенными реакциями и падежом голубей в течение первых 5 суток после вакцинации. Летальность среди вакцинированных голубей составила около 30%.

3. При мониторинговых исследованиях в РТГА сывороток крови больных голубей из неблагополучных голубятен г. Москвы и Московской области установлена этиологическая роль возбудителя парамиксовирусной инфекции типа 1 (болезнь Ньюкасла). Титры антител составили от 6 до 11 log2. Картина болезни характеризовалась сверхострым и острым течением, доминированием признаков поражения головного мозга и желудочно-кишечного тракта голубей. Выделенный от голубей вирус болезни Ньюкасла был патогенен для кур.

4. Вакцина «Виросальм» на основе инактивированного штамма вируса «Н» является эффективным средством специфической профилактики нью-каслской болезни голубей и обладает безвредностью, ареактогенностью и высокой антигенностью. Титр антител к вирусу болезни Ньюкасла голубей после двукратного применения вакцины составляет в динамике от 6,4 до 2,6 log2 и поддерживает напряженность иммунитета в течение не менее 270 суток.

5. В течение десятимесячного периода наблюдения после вакцинации голубей против ньюкаслской болезни иммуногенные свойства вакцины «Виросальм» были более выражены, чем у аналоговой вакцины иностранного производства «Salmavir», выполненной на основе инактивированного штамма парамиксвируса 1-го типа «La Sota». В сравнение с живыми вакцинами из штаммов «La Sota», «ГАМ-61», «Бор-74 ВГНКИ» период напряженного иммунитета у голубей после применения вакцины «Виросальм» был продолжительнее не менее чем на 150 суток.

6. Введение инактивированного штамма вируса «PN-T» в состав вакцины «Виросальм» вместо инактивированного штамма вируса «Н» болезни Ньюкасла повысило антигенные и иммуногенные свойства вакцины. Достоверную разницу титров антител в РТГА равную 1,6 log2 отмечали на 60, 90, 120, 150 и 180 сутки исследований.

7. Вакцина «Виросальм» на основе инактивированного штамма вируса «PN-Т» обладает протективными свойствами при парамиксовирусной инфекции типа 1 голубей. У вакцинированных голубей в условиях неблагополучных голубятен на 14 день после вакцинации отмечали высокий титр антител к вирусу ньюкаслской болезни, равный 7,1 log2. В течение 7 месяцев титр антител держался на уровне 4,5-6,7 log2. В период комиссионного наблюдения в течение 10 месяцев и далее после ревакцинации в течение 1 года заболеваемость ньюкаслской болезнью среди вакцинированных голубей не отмечалась.

5. СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Результаты исследований включены в «Методические рекомендации по недопущению распространения гриппа птиц и болезни Ньюкасла голубей в частных подворьях, птицеводческих хозяйствах и голубятных» (Москва, 2011).

2. Результаты, полученные при исследовании антигенных свойств вакцин против гриппа птиц и болезни Ньюкасла на голубях внедрены в ветеринарную практику голубеводства.

3. По результатам исследований разработаны рекомендации по совершенствованию мер профилактики гриппа птиц в Московском регионе, одобренные Комитетом ветеринарии г. Москвы (2008 г.).

4. Результаты исследований иммунобиологических свойств ассоциированной инактивированной вакцины «Виросальм» против сальмонеллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц в лабораторных условиях и в условиях голубятен использованы при составлении нормативной документации и отчетов о доклинических и производственных испытаниях вакцины, представленной в ФГУ ВГНКИ для регистрации.

6. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1. Ветеринарным специалистам, заводчикам голубей и другой птицы рекомендуется проводить мониторинг ортомиксо- и парамиксвирусной инфекций, организовать содержание голубей в режиме предприятия закрытого типа, систематизировать профилактические обработки и противоэпизоотиче-ские мероприятия с проведением иммунизации голубей против гриппа птиц и болезни Ньюкасла.

2. Научным работникам рекомендуется провести дополнительные исследования на реактогенность вакцин против гриппа птиц при использовании их голубям и разработать вакцину против гриппа голубей, не вызывающую местного и системного реактогенного действия.

3. Для профилактики ньюкаслской болезни рекомендуется применение ассоциированную инактивированную вакцину «Виросальм» против сальмо-неллеза и болезни Ньюкасла голубей и декоративных птиц с 20-дневного возраста внутримышечно дважды с интервалом 28-30 дней каждые 10-11 месяцев.

4. Данные по иммунобиологическим свойствам вакцины «Виросальм» в новом варианте с включением антигена инактивированного штамма «РИ-Т» рекомендуется использовать для дальнейшего совершенствования средств специфической профилактики парамиксовирусной инфекции голубей типа 1.

5. Материалы исследований по специфической профилактике гриппа птиц и болезни Ньюкасла у голубей рекомендуется использовать в учебном процессе в ВУЗах РФ по специальности «Ветеринария».

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Зотова, Зоя Витальевна, Москва

1. Абрамова, Л.Ю. Особенности гриппа у разных видов птиц в экспериментальных условиях и эффективность методов выявления возбудителя: Автореф. дисс. канд. вет. наук / Л.Ю. Абрамова. М.: ФГУ ВНИИЗЖ, 2011. -22 с.

2. Алтухов, Н.М. Краткий справочник ветеринарного врача / Н.М. Алтухов, В.И. Афанасьев, Б.А. Башкиров и др. Сост. A.A. Кунаков, В.В. Филиппов. М.: Агропромиздат, 1990. - 120 с.

3. Аралов, В.В. Высоколетные голуби в Туле / В.В. Аралов. Тула: Приок. кн. изд-во, 1989. - 97 с.

4. Байдевлятов, А.Б. Грипп / А.Б. Байдевлятов // Справочник по болезням сельскохозяйственных птиц. Под ред. А.Б. Байдевлятова. Киев: Урожай, 1993.-С. 42.

5. Бакулин, В.А. Грипп и другие вирусные инфекции птиц. / В.А. Ба-кулин и соавт. С.-Пб.: ИАТЦ «Время», 2005. - 24 с.

6. Бакулин, В.А. Эпизоотолого-эпидемиологические аспекты гриппа птиц / В.А. Бакулин // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2006. - № 8. - С. 4-12.

7. Бароян, О.В. Очерки по мировому распространению важнейших заразных болезней / О.В. Бароян. М., 1962. - 207 с.

8. Барханова, Г.И. Голуби / Г.И. Барханова // Серия «Домашняя энциклопедия». Ростов н/Д: Феникс, 2000. - 179 с.

9. Бессарабов, Б.Ф. Болезни голубей: Монография / Б.Ф. Бессарабов. -М.: ФГОУ РосАКО АПК, 2004. С. 158.

10. Бессарабов, Б.Ф. Болезни певчих и декоративных птиц / Б.Ф. Бессарабов. М.: КолосС, 2006. - 83 с.

11. Бессарабов, Б.Ф. Практикум по болезням птиц / Б.Ф. Бессарабов, Ф.И. Василевич, И.И. Мельникова и др. // М.: КолосС, 2007. 190 с.

12. Башинский, В.В. Голуби: Профилактика заболеваний и особенности лечения / B.B. Башинский. М.: ACT; Донецк: Сталкер, 2006. - С. 77.

13. Болезни домашних и сельскохозяйственных птиц / Под ред. Б.У. Келнека и X. Джона Барнса, Ч.У. Биэрда, J1.P. Макдугалда, И.М. Сэйфа. Пер. с англ. М.: «АКВАРИУМ БУК», 2003. - 1232 с.

14. Борисов, A.B. Конструирование и иммунобиологические свойства экспериментальных вакцин против гриппа птиц: Дисс. канд. вет. наук / A.B. Борисов. М.: ФГУ ВГНКИ, 2009. - 149 с.

15. Борисов, В.В. Грипп птиц в Новосибирской области: особенности его течения / В.В. Борисов, С.К. Старов // Ветеринарная жизнь. 2006. -Спецвыпуск. Ноябрь. - С. 7.

16. Букринская, А.Г. Вирусология: Учебник / А.Г. Букринская. М.: Медицина, 1986. - 267 с.

17. Вакцинопрофилактика гриппа: Информационный сборник. М. - С.-Пб.: Изд-во АН РФ. - 1997. - 34 с.

18. Венгеренко, JI.A. Ветеринарно-санитарные мероприятия по защите птицеводческих хозяйств от заноса возбудителя / JI.A. Венгеренко // Мат-лы II Междунар. вет. конгресса по птицеводству, 21-23 марта 2006 г. М.: МСХ,2006. С. 23-29.

19. Ветеринарная вирусология / Р.В. Белоусова, Э.А. Преображенская, И.В. Третьякова / Под ред. Р.В. Белоусовой. М.: КолосС, 2007. - С.424.

20. Вирусы животных / Н.В. Фомина, Р.В. Белоусова, В.В. Соболев, В.Н. Сюрин / Под ред. Н.В. Фоминой. М.: МВА, 1991. - С. 338.

21. Виткова, О.Н. Повышение эффективности специфической профилактики против гриппа птиц / О.Н. Виткова, М.В.Калмыков // Ветеринария.2007. -№ 10.-С. 14-16.

22. Власов, H.A. Высокопатогенный грипп птиц. Текущая ситуация и меры контроля / Н.А.Власов, В.Н. Ирза, A.B. Варкетин и др. // Ветеринария, 2010.-№1.-С. 3-7.

23. Голубев, Д.Б. Биологические и молекулярные аспекты антигенной изменчивости вируса гриппа / Д.Б. Голубев, В.К. Константинов, М.С. Парамонова // Этиология, эпидемиология, лечение и профилактика гриппа и других респираторных инфекций. Л., 1978. - С.5-13.

24. Гребенникова, Т.В. Разработка средств молекулярной диагностики гриппа А / Т.В. Гребенникова, Д.Е. Киреев, А.Д. Забережный, Т.И. Алипер // Ветеринария. 2006. - № 5. - С.30-33.

25. Грошева, Г.А. Справочник по инфекционным болезням птиц специализированных промышленных предприятий, мелкотоварных ферм и приусадебных хозяйств / Г.А. Грошева, З.В. Тихонова. М.: ИзографЪ, 2007. -48 с.

26. Гулюкин, М.И. Основные задачи борьбы с гриппом птиц / М.И. Гу-люкин, Г.А. Грошева, З.В. Тихонова // Мат-лы науч.-практ. конф. «Грипп птиц: профилактика и меры борьбы». М.: ГУП «Юго-Восток-Сервис», 2007. - С.80-82.

27. Дорошенко, Е.М. Медицинские проблемы, требующие решения / Е.М. Дорошенко // Сб. Мат-лов научно-практ. конф. «Грипп птиц: профилактика и меры борьбы». М.: 2007. - С. 144.

28. Ельников, В.В. Диагностика и вакцинопрофилактика болезни Ньюкасла / В.В. Ельников // Российский Ветеринарный журнал. 2007. - №1. -С. 22-23.

29. Жалпанова, Л.Ж. Голуби / Л.Ж. Жалпанова. М.: Вече, 2006. - 229с.

30. Жданов, В.М. Проблемы гриппа и генная инженерия / В.М. Жданов // Молекул, генетика, микробиол. и вирусология. 1984. - № 7. - С. 3-6.

31. Жуматов, К.Х. Антигенная композиция гемагглютининов вирусов гриппа / К.Х. Жуматов // Биология вирусов гриппа: Тр. Инст. Микр. и Виру-сол. АН КазССР. Казахстан, 1987. - Т.32. - С.74-90.

32. Закстельская, JI.Я. Изменчивость вирусов гриппа А и ее значение в эпидемическом процессе / Л.Я. Закстельская, М.А. Яхно, В.А. Исаченко, И.В. Антонов // Актуальные вопросы общей и медицинской вирусологии. М., 1986.- С.104-115.

33. Зотов, В.Б. Грипп птиц: роль органов власти в ликвидации эпизоотического очага в г. Москве / В.Б. Зотов // Мат-лы науч.-практ. конф. «Грипп птиц: профилактика и меры борьбы». М.: ГУП «Юго-Восток-Сервис», 2007. -С. 8-19.

34. Зотов, В.Б. Продовольственная безопасность России / В.Б. Зотов // М.: Издательский Дом НП, 2006. 224 с.

35. Иванова, В.Т. Изменчивость гемагглютинина штаммов вируса гриппа А (H3N2), изолированных в России с 1989 по 1999 г. / В.Т. Иванова, Е.И. Бурцева, Т.А. Оскерко, Р.В. Вартанян, А.Н. Слепушкин // Вопр. вирусол. 2000. Т. 3.- С. 28-31.

36. Каверин, Н.В. Межвидовая трансмиссия вирусов гриппа А и проблема пандемий / Н.В. Каверин, Ю.А. Смирнов // Вопросы вирусологии. -2003.-№3.-С. 4-10.

37. Калета, Е.Ф. Делеголь высокоэффективное средство против вируса птичьего гриппа. / Е.Ф. Калета, Йылмаз А. // М-лы науч.-практ. конф. «Грипп птиц: профилактика и меры борьбы». - М.: ГУП «Юго-Восток-Сервис», 2007.-С. 199-201.

38. Карпухин, Г.И. Грипп: Руководство / Г.И. Карпухин. М.: Медицина, 1996.-395 с.

39. Киреев Д.Е. Современные методы диагностики и профилактики гриппа птиц / Д.Е. Киреев // Вестник ветеринарии. 2006. - №38, (3/2006). -С. 24.

40. Ковалевская, A.A. Мониторинг вируса гриппа среди дикой и синан-тропной птицы на территории Омской области в 2006 г. / A.A. Ковалевская, Н.Ф. Хатько, В.И. Околелов и др. // Ветеринарный консультант. 2007. №5.1. С. 7.

41. Ковалевская, A.A. Экспериментальная инфекция вируса гриппа А (H5N1) у представителей вида felis catus / A.A. Ковалевская, В.И. Околелов, А.М. Шестопалов и др. / Ветеринария. 2010. - №3. - С. 28.

42. Коломыцев, A.J1. Современные средства борьбы при болезни Ньюкасла в странах мира, использованные в 2004-2005 гг. / AJI. Коломыцев, В.А. Филоматова, A.A. Орлов, A.B. Книзе //Ветеринарная патология. 2007. - №2. - С. 77-78.

43. Коренберг, Э.И. Происхождение возбудителей природноочаговых инфекций / Э.И. Коренберг // Природа. 2006. - № 10. - С. 33-40.

44. Крюков, C.B. Грипп птиц: производство и испытание инактивиро-ванных вакцин / C.B. Крюков, Б.В. Соловьев, Д.А. Лозовой и др. // Мат-лы науч.-практ. конф. «Грипп птиц: профилактика и меры борьбы» М.: ГУП «Юго-Восток-Сервис», 2007. - С. 82-95.

45. Кузьмин, В.А. Эпизоотология с микробиологией. Учебник / В.А. Кузьмин, Л.Н. Соколова, П.Ф. Сонин и др. Под ред. В.А. Кузьмина, A.B. Святковского. М.: Академия, 2005. - 429 с.

46. Инфекционные болезни животных / Б.Ф. Бессарабов, A.A. Ватутин, Е.С. Воронин и др. Под ред. А. А. Сидорчука. М.: КолосС, 2007. - С. 671.

47. Лагуткин, H.A. Непредсказуемость гриппа А / H.A. Лагуткин, В.И. Лутовинов // Птицеводство. 2001. - №6. - С. 27-30.

48. Лагуткин, H.A. Грипп А птиц опасный зооноз / H.A. Лагуткин, Д.В. Колбасов//Ветеринария.-2005.- № 10.- С.16-18.

49. Лагуткин, H.A. Грипп «А» и его последствия. / H.A. Лагуткин // Мат-лы междунар. юб. науч.-практ. конф. С.-Пб. - Ломоносов, 2004. - С. 72-74.

50. Львов, Д.К. Значение вновь возникающих инфекций в биобезопасности / Д.К. Львов // Вопросы вирусологии. 2002. - №5. - С. 4-7.

51. Львов, Д.К. Межпопуляционное взаимодействия в системе: вирусы гриппа А животные - человек / Д.К. Львов, С.С. Ямникова, А.Д. Забереж-ный, Т.В. Гребенникова // Вопросы вирусологии. - 2005. - №50(4). - С. 4-11.

52. Львов, Д.К. Получение рекомбинантов, антигенно идентичных циркулирующим в природе штаммам вируса гриппа / Д.К. Львов, Р.Я. Подчерня-ева, Р. Вебстер // Вопросы вирусологии, 1979. № 5. - С. 493-497.

53. Львов, Д.К. Экология вирусов / Ред.: Д.К.Львов // В кн.: Медицинская вирусология. Руководство. М.: МИА, 2008. - С. 101-118.

54. Львов, Д.К. Эпидемиологические особенности гриппа последних лет / Д.К. Львов, И.Г. Маринич // Вопр. Вирусологии. 1998. - №2. - С. 59-62.

55. Макаров, В.В. Высокопатогенный грипп птиц / В.В. Макаров // Ветеринария в птицеводстве. С.-Пб. - Ломоносов, 2004. - № 2. - С.4-9.

56. Макротт, X. Голуби: Содержание и разведение / X. Макротт. Пер. с нем. 2-е изд., доп. - М.: ООО «Аквариум - Принт», 2005. - 86 с.

57. Миллер, П.Г. О гриппе голубей / Пол Г. Миллер, БУМ. Пер. с англ. Пенсильвания, США, 2010. - 7 с.

58. Новикова, И.Н. Болезни домашней птицы / Н.И. Новикова // Серия "Домашний ветеринар". М.:"Вече", 2006. - 235 с.

59. Обухов, И.Л. ПЦР тест-системы для диагностики гриппа птиц / И.Л. Обухов, Г.А. Шипулин, С.Б. Яцышина, Смоленский В.И., Панин А.Н. // Ветеринария. 2006. - №7. - С. 25-30.

60. Осидзе, Н.Г. Грипп животных и птиц / Н.Г. Осидзе // Достижения сельскохозяйственной науки и практики. М.: Агропромиздат, 1980. - С. 42.

61. Пахмутов, В.М. Грипп птиц, меры защиты и профилактики / В.М. Пахмутов // Ветеринарный консультант. 2006. - № 15. - С.3-9.

62. Перейра, М.С. Использование моноклональных антител для антигенного анализа вирусов гриппа А / М.С. Перейра, П. Чакраверти, П. Кан-нингам, Р.Д. Уэбстер // Бюлл. ВОЗ. 1985. - Т. 63. - № 2. - С.30-35.

63. Пименов, Н.В. Диагностика, профилактика и меры борьбы с основными инфекциями в голубеводстве / Н.В.Пименов // Монография. М.: Колос, 2010.-С. 8-26.

64. Пименов, Н.В. Распространенность инфекционных болезней в голубеводстве / Н.В. Пименов // Мат-лы Междунар. науч.-практ. конф. мол. уч. и специал. «Вопросы ветеринарии и биотехнологий», 11-13 ноября 2009 г. -Ветеринария и кормление. 2009, №6. - С. 69-70.

65. Пименов Н.В. Создание и необходимость применения инактивиро-ванной вакцины против сальмонеллеза и болезни Нью-Касла голубей / Н.В. Пименов // Ветеринарная медицина. 2008, №2-3. - С. 11-12.

66. Проку дин, A.B. Результаты изучения вируса гриппа среди диких птиц на Таймыре / A.B. Прокудин, А.Ю. Алексеев, К.А. Лайшев и др. // Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных. -М.: ИзографЪ, 2006. С.348.

67. Рахмахов, А.И. Голуби и профилактика их заболеваний / А.И. Рахманов, Б.Ф. Бессарабов. М.: Россельхозиздат, 1987. - С. 280.

68. Резков, Г.И. Птичий грипп / Г.И. Резков И.: РИПОЛ классик, 2006. - 192 с.

69. Рождественский, И.К. Меры по профилактике гриппа птиц в Российской Федерации / И.К. Рождественский // Мат-лы науч.-практ. конф. "Грипп птиц: профилактика и меры борьбы" М.: ГУП «Юго-Восток-Сервис», 2007. - С. 24.

70. Романов, В.А. Голубеводство / В.А. Романов, O.K. Разбесов. М.: Агропромиздат, 1987. - 199 с.

71. Романов, В.А. Голуби / В.А. Романов. М.: Колос, 1993. - 62 с.

72. Рудницкий, J1.B. Птичий грипп. Мифы и реальность / JI.B. Рудницкий. С.-Пб.: Изд. «Питер», 2006. - 1 изд. - 96 с.

73. Сидоров, М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов: Справочник / М.А. Сидоров, Д.И. Скородумов, В.Б. Федотов. Под ред. Сидорова М.А. М.: Колос, 1995. - 319 с.

74. Сидорчук, A.A. Общая эпизоотология. Учебник для вузов. / A.A. Сидорчук, Е.С. Воронин, A.A. Глушков. М.: КолосС, 2005. - 176 с.

75. Сизов, П.В. Руководство по болезням птиц / П.В. Сизов. М.: Сель-хозиздат, 1931. - 150 с.

76. Скородумов, Д.И. Микробиологическая диагностика бактериальных болезней животных: Справочник / Д.И. Скородумов, В.В. Субботин, М.А. Сидоров, Т.С. Костенко. М.: ИзографЪ, 2005. - 656 с.

77. Скотникова, Т.А. Совершенствование технологии производства и способов применения вакцин против ньюкаслской болезни: Автореф. дисс. докт. биол. наук / Т.А. Скотникова. Щелково: ГНУ ВНИТИБП, 2010. - 44 с.

78. Смирнов, Ю.А. Общий антигенный эпитоп в гемагглютинине вирусов гриппа А (HI, Н2, Н5, Н6) / Ю.А. Смирнов, A.C. Липатов, И. Окуно, А.К. Гительман // Вопр. вирусол. 1999. - Т. 44. - С. 111-115.

79. Соловьев, Б.В. Грипп птиц: производство и испытание вакцин / Б.В. Соловьев, C.B. Крюков, Д.А. Лозовой, Н.В. Мельник, О.М. Чуйко, О.С. За-харченко. М., 2007. - 221 с.

80. Суранова, Т.Г. Актуальные вопросы эпидемиологии инфекционных болезней / Т.Г. Суранова // ВЦМК «Защита» Росздрава. Сборник научных трудов. М., 2006. - вып. 8. - С. 175-180.

81. Сюрин, В.Н. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Са-муйленко, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомина // М.: ВНИИТиБП, 1998. 928 с.

82. Сюрин, В. Н. Псевдочума птиц (ньюкаслская болезнь) / В. Н. Сюрин. М.: Сельхозиздат, 1963. - 304 с.

83. Таунбенбергер, Дж. Реконструкция вируса убийцы / Дж. Таунбен-бергер, Э. Рид, Т. Фаннинг // В мире науки. 2005. - № 4. - С. 56-65.

84. Тихонова, З.В. Роль мониторинговых исследований в системе профилактики птичьего гриппа / З.В. Тихонова, A.A. Сидорчук // Российский ветеринарный журнал. 2007. - № 1. - С. 21-22.

85. Третьяков, А.Д. Ветеринарное право. Ветеринарный устав СССР, положения, инструкции, наставления, правила по ветеринарному делу / Под общ. ред. А.Д. Третьякова. М.: Колос, 1981. - Т. 3. - 640 с.

86. Туник, А.Н. Грипп птиц: профилактика и меры борьбы в условиях мегаполиса. / А.Н. Туник // Мат-лы науч.-практ. конф. «Грипп птиц: профилактика и меры борьбы» М.: ГУЛ «Юго-Восток-Сервис», 2007. - С.35-42.

87. Фролов, A.B. Особенности клинического проявления гриппа птиц в Российской Федерации в 2005 г. / A.B. Фролов, A.B. Борисов, В.В. Борисов, В.Н. Ирза, С.К. Старов, C.B. Фролов // Ветеринарная жизнь. 2006. - № 5-6. - С.2.

88. Хукемейер, Ф. Биобезопасность страусов / Ф. Хукемейер // Птицеводство. 2006. - №7. - С. 8-9.

89. Чалмерс, Г. Восприимчивость голубей к гриппу / G. Chalmers, DVM. Пер. с англ. Летбридж, Альберта, Канада, 2009. - 8 с.

90. Четверикова, Л.К. Теоретический и прикладные аспекты молеку-лярно-биологического анализа структуры вируса гриппа А / Л.К. Четверикова, А.А. Смородинцев // Проблемы медицинской вирусологии. Л.: НИИЭМ им. Пастера, 1982. - С. 94-106.

91. Шипулин Г.А. Эпидемиологический мониторинг за циркуляцией высокопатогенного вируса гриппа птиц: Автореф. дисс. канд. мед. наук / Г.А. Шипулин. М: ФГУН ЦНИИЭ, ФГУ ВГНКИ, 2008. - 24 с.

92. Шумский, Н.И. Основы профилактики болезней голубей / Н.И. Шумский. Воронеж: ГУ ВорОВЛ, 2005. - С. 48.

93. Яковлев, С.С. Эпизоотическая ситуация по гриппу птиц в Российской Федерации / С.С. Яковлев // Сб. мат-лов науч.-практ. конф. "Грипп птиц: профилактика им меры борьбы". М.: ГУП «Юго-Восток-Сервис», 2007. - С. 27.

94. Ямникова, С.С. Циркуляция вирусов гриппа на территории СССР (1980-1981 гг.) / С.С. Ямникова, И.А. Мясникова // Экология вирусов. -1982. -С. 119-123.

95. Alexander, D.J. A review of avian influenza in different bird species / D.J. Alexander // Vet. Microbiology. 2000. - №74. - P. 3-13.

96. Alexander, D.J. An overview of the epidemiology of avian influenza / D.J. Alexander // Vaccine. 2007. - №25. - P. 5637-5644.

97. Alexander, D. J. Avian paramyxoviruses / D. J. Alexander // Proc 34 th West Poult Dis Conf. 1985.-Vol. 28.-P. 121-125.

98. Alexander, D. J. Historical aspects. Newcastle Disease / D. J. Alexander // Boston: Kluwer Acad Publ. 1988. - 38 p.

99. Alexander, D.J. Newcastle disease cutbreaksin fowi in Great Britain during 1984 / D.J. Alexander, G.W. Wilson, P.H. Russell, S.A. Lister, G. Parsons //

100. Veterinary Record. 1985. - №117. - P. 429-434.

101. Bano, S. Evaluation of pathogenic potential of avian influenza virus serotype H9N2 in chickens / S. Bano, K. Naeem, S.A. Malik // Avian Diseases. №47. -P. 817-822.

102. Beard, C.W. To vaccinate or not to vaccinate. In Proceedings of the Second International Symposium on Avian Influenza / C.W. Beard, // United States Animal Health Association. Athens. - GA. - 1987. - P. 258-263.

103. Burger, R.M. Avian Superior Olivaiy Nucleus Provides Divergent Inhibitory Input to Parallel Auditory Pathways / R.M. Burger , K.S. Cramer, J.D. Pfeiffer, E.W. Rubel // J. Comparative Neurology. 2005. - P. 6-18.

104. Chalmers, G.A. Avian Influenza («Bird Flu») and Pigeons / Dr Gordon A Chalmers // Alberta, Canada. US Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. An Australian expert's view. 2005. - P. 4.

105. Cross, G.M. Paramyxovirus-1 Infection (Newcastle Disease) of pigeon / G.M. Cross // Seminars in Avian and Exotic Pet Medicine. 1995. - №4(2). - P. 92-95.

106. Englund, L. Avian influenza A virus causing an outbreak of contagious interstitial pneumonia in mink / L. Englund, B. Klingeborn, T. Mejerland // Acta Vet Scand. 1986. - №27(4). - P. 497-504.

107. Fang R., Complete structure of A/Duck/Ukraine/63 unfluenza hemagglutinin gene: animal virus as progenitor of human H3 Hong Kong 1968 influenza hemagglutinin / W. Min Jou, D. Huylebroeck, R. Devos, W. Fiers // Cell. 1981. -Vol. 25.-P. 315-323.

108. Fouchier, R.A.M. Characterization of influenza a virus hemagglutinin subtype (HI6) or tained from black-headed gulls / R.A.M. Fouchier, V. Munster, A. Wallensten, T.M. Bestebroer et al. // J. Virology. 2005. - P. 2814-2822.

109. Geraci, J.R. Mass mortality of harbor seals: pneumonia associated with influenza A virus / J.R. Geraci, DJ. St. Aubin, I.K. Barker, R.G. Webster, V.S. Hinshaw, W.J. Bean, et al. // Science. 1982. -№215. -P. 1129-1131.

110. Ghuman, J. S. In vitro DNA synthesis in lymphfocytes from turkey vaccinated with LaSota, TC and inactivated Newcastle disease vaccines / J. S. Ghu-man, R. A. Bancovski // Avian Dis. 1975. - №20. - P. 18-31.

111. Guo, Y. Characterization of a new avian-like influenza A virus from Horses in China / Y. Guo, M. Wang, Y. Kawaoka, O. Gorman, T. Ito, T. Saito, R.G. Webster // Virology. 1992. - Vol. 188. - № 2. - P. 245-255.

112. Hanson, R. P. Newcastle disease. Isolation and Identification of Avian Pathogens / R. P. Hanson // Amer Ass Avian Pathologists. Kennett Square. 1980. -P. 63-66.

113. Hatta, M. The continued pandemic threat posed by avian influenza viruses in Hong Kong / M. Hatta, Y. Kawaoka // Trends in Microbiology. Vol. 10. -№.7. - July 2002. - P. 340-345.

114. Hinshaw, V.S. Characterization of two influenza A viruses from a pilot whale / V.S. Hinshaw, W.J. Bean, J.R. Geraci, P. Fiorelli, G. Early, R.G. Webster //J. Virology. 1986.-№58.-P. 655-656.

115. Hinshaw, V.S. Genetic reassortment of viruses in the untesinal tract ofducks / V.S. Hinshaw, W.J. Bean, R.G. Webster, G. Sriram // J. Virology. 1980. -Vol. 102.-P. 413-419.

116. Hirst G.K. Newcasle diseases and influenza / G.K. Hirst // Science, 1941. v. 94. - P. 22; J. exp. Med., 1942. -v. 76. - P. 195.

117. Horimoto, T. Direct Reverse Transcriptase PCR To Determine Virulence Potential of Influenza A Viruses in Birds / T. Horimoto, Y. Kawaoka // J. of Clinical Microbiology. Mar. 1995. - Vol. 33. - №3. - P.748-751.

118. Horimoto, T. Influenza: Lessons from past pandemics, warnings from current incidents / T. Horimoto, Y. Kawaoka // Nat. Rev. Microbiol. Vol. 3. -2005.-P. 591-600.

119. Horimoto, T. Origin and molecular changes associated with emergence of a highly pathogenic H5N2 influenza virus in Mexico / T. Horimoto, E. Rivera, J. Pearson, D. Senne, S. Krauss, Y. Kawaoka, et al // Virology. 1995. - №213. - P. 223-230.

120. Kaleta, E.F. The first isolation of the PMV-1 virus responsible for the current panzootic in pigeons / E.F. Kaleta, D.J. Alexander, P.H. Russell // Avian Pathology. 1985. - №14. - P. 553-557.

121. Kawaoka Y. Molecular characterization of a new hemagglutinin, subtype HI4, of influenza A virus / Y. Kawaoka, S. Yamnikova, T. M. Chambers, D.K. Lvov, R.G. Webster // J. Virology. 1990. - Vol. 179. - P. 759-767.

122. Kodihalli S. DNA Vaccine Encoding Hemagglutinin Provides Protective Immunity against H5N1 Influenza Virus Infection in Mice / S. Kodihalli, H. Goto, D.L. Kobasa, S. Krauss, Y. Kawaoka, R.G. Webster // J. Virology. 1999. -Vol.73. - №3. - P. 2094-2098.

123. Lancaster, J. E. Newcastle disease. Virus Disease of Food Animals / J. E. Lancaster // 1981. Vol. 11. - P. 433-465.

124. Laver, W.G. Preparation and immunogenecity of an influenza virus hemagglutinin and neuraminidase subunit vaccine/ W.G. Laver, R.G. Webster // J. Virology. 1976. - Vol. 69. - P. 511-515.

125. Mayo, M.A. Virus Taxonomy / M.A. Mayo // Archives of Virology. -2002.-№147.-P. 1071-1076.

126. Mohammadi, A. Serological and RT-PCR assays for detection of avian influenza of domestic pigeons in Kavar area (Fars provins, Iran) / A. Mohammadi, M. Masoudian, Y. Nemati, S. Seifi // Bulg. J. Vet. Med. 2010. - 13. - №2. - P. 117-121.

127. Nansy, J. Scherer Hospital in Pigeon after a long battle with cancer / J. Nansy // Grant Township. 2007. - P. 206-239.

128. Nerome, K. Isolation of a new avian paramixovirus from a budgerigar /

129. M. Nakayama, М. Ishida, Н. Fukumi, A. Morita // J. Gen. Virol. 1978. - Vol.38. -P. 293-301.144.0benauer J.C., et al. Наука 10.1126/science.l 121586 (2006).

130. Olsen, S. J. Poultry-handling practices during avian influenza outbreak, Thailand. / S. J. Olsen et al. // Emerging infections Disease. 2005. - Vol. 11. - № 10.-P. 217.

131. Panigrahy, B. Susceptibility of pigeons to avian influenza / B. Panigrahy, D.A. Senne, J.C. Pedersen J.C., Shafer A.L., Pearson J.E. // Avian Dis. 1996. -№40.-P. 600-604.

132. Riberdy J.M. Protection against a Lethal Avian Influenza A Virus in a Mammalian System / J.M. Riberdy, KJ. Flynn, J. Stech, R.G. Webster, J.D. Alt-man, P.C. Doherty // Journal of Virology. 1999. - Vol. 73. - №2. - P. 14531459.

133. Rohm, C. Characteriation of a novel influenza hemagglutinin, HI 5: criteria for determination of influenza A subtypes / C. Rohm, N. Zhou, J. Suss, J. Mackenzie, R. Webster // J. Virology. 1996. - Vol. 217. - P. 508-516.

134. Scholtissek, C. Genetic relatedness of hemagglutinins of the HI subtype of influenza A viruses isolated from swine and birds / C. Scholtissek, H. Burger, P.A. Bachmann, C. Hannoun // Virology. 1983. - №129. - P.521-523.

135. Schultze, I.T. The structure of influenza virus. II. A model based on the morfology and composition of subviral particles / I.T. Schultze // J. Virology. -1972.-Vol. 47.-P. 181-196.

136. Seo S.H. Cross-Reactive, Cell-Mediated Immunity and Protection of Chickens from Lethal H5N1 Influenza Virus Infection in Hong Kong / S.H. Seo, R.G. Webster // Poultry Markets. J. Virology. - Mar. 2001. - Vol. 75. - №6. - P.2516-2525.

137. Skehel, J. Studies, M. On the primary structure of the influenza virus hemagglutinin / J. Skehel, M. Waterfield // Procl Natl. Acad. Sci. USA. 1975. -№72.-P. 93-97.

138. Suarez D.L. Evolution of avian influenza viruses / D.L. Suarez // Vet. Microbiology. 2000. - №74. - P. 15-27.

139. Suarez, D.L. Immunology of avian influenza virus: a review, Developmental and Comparative Immunology / D.L. Suarez, S. Schultz-Cherry // 2000. -Vol. 24.-P. 269-283.

140. Swayne, D.E. Efficacy of recombinant fowl poxvirus vaccine in protecting chickens against a highly pathogenic Mexican-origin H5N2 avian influenza virus / D.E. Swayne, J.R. Beck, T.R.Mickle // Avian Dis . 1997. - № 41(4) . - P. 910-922.

141. Swayne, D.E. Pathogenicity and diagnosis of H5N2 Mexican influenza viruses in chickens. / D.E. Swayne, M.L. Perdue, M. Garcia et.al. // Avian Dis. -1997. Vol. 4 (2). - P. 335-346.

142. Swayne, D.E. Pathogenicity of avian influenza viruses in poultry / D.E. Swayne, Pantin-Jackwood. // Dev.Biol.(Basel). 2006. - P. 61-67.

143. Timms, L. Cell-mediated immune response of chickens to Newcastle disease vaccines / L. Timms, D. J. Alexander // Avian Pathol. 1977. - №6. - P. 5159.

144. Toro, H. Pigeon Paramyxovirus: Association with Common Avian Pathogens in Chickens and Serologic Survey in Wild Birds / H. Toro, F.J. Hoerr, K. Farmer, C.C. Dykstra, S.R. Roberts, M. Perdue // Avian Dis. 2005. - №49. - P. 92-98.

145. Wang, P. The NPI-l/NPI-3 (Karyopherin) binding site on the influenza A virus nucleoprotein NP is a Nonconventional nuclear localisation signal / P. Wang, P. Palese, R. 0'Neil//J. Virology. 1997.-Vol. 71.-P. 1850-1856.

146. Webby, R. Emergence of influenza A viruses / R. Webby, Webster R. // Phil. Trans. Roy. Soc. bond.-2001.-Vol. 356.-P. 1818-1828.

147. Webster, R. Influenza: An Emerging Disease / Webster R. // Emerging Infectious Diseases. 1998. - №4. - P. 436-441.

148. Webster, R. Intestinal influenza: replication and characterization of influenza viruses in ducks / R. Webster, M. Yakhno, V. Hinshaw, W. Bean, K. Murti // J. Virology. 1978. - Vol. 84. - P. 268-278.

149. Weekly Disease Information OIE. URL: http:// www.oei.int/wahis/public.

150. Xiuhua, L. Model for the Evaluation of Pathogenesis and Immunity to Influenza A (H5N1) Viruses Isolated from Humans. / L. Xiuhua, T. Tumpey, T. Morken, S. Zaki, N. Cox, J. Katz, A. Mouse // J. Virology. July 1999. - Vol. 73. -№7. - P. 5903-5911.

151. Zebedee, S. Lamb, R. Influenza A virus M2 protein: monoclonal antibody restriction of virus growth and detection of M2 in virus / S. Zebedee, R. Lamb // J. Virology. 1988. - Vol. 62. - P. 2762-2772.

152. Zhirnov, O.P. Solubilization of matrix protein Ml/M from virions occurs at different pH for orthomyxo-and paramyxoviruses / O.P. Zhirnov // J. Virology. -1990. Vol. 176. - P. 274-279.

153. Zitzow L.A. Pathogenesis of Avian Influenza A (H5N1) Viruses in Ferrets / T. Rowe, T. Morken, W. Shieh, S. Zaki, J.M. Katz // J. Virology. May 2002. - Vol. 76. - №. 9. - P. 4420-4429.