Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Антигенно-активные компоненты CANDIDA ALBICANS для выявления повышенной чувствительности немедленного типа

ВАК РФ 03.00.24, Микология

Автореферат диссертации по теме "Антигенно-активные компоненты CANDIDA ALBICANS для выявления повышенной чувствительности немедленного типа"

министерство здравоохранения ссср ленинградские государственный ордена ленина и ордена октябрьской революции институт усовершенствования врачей

ип.с.м.кирова

на правах рукописи

зуева елена викторовна

УЦК 616-056.43-07:616.155.36

антигенно-активные компоненты candida albicans для выявления пооыиенноп чувствительности немедленного типа

оз.оо.24-ииколпгия

автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

ЛЕНИНГРАД 1990

работа выполнена в ленинградском ордена ленина и ордена октябрьской революции институте усовершенствования врачей имени с.м.кирова из ссср

научный руководитель:

доктор медицинских наук 3-0.караев

официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор н.п.елинов

кандидат медицинских наук, доцент в.п.кубась

ведущее учреждение:

ленинградский санитарно-гигиеническии медицинскии

институт нэ рсфср

защита состоится __й___1990 года ы /_3_ час

на заседании специализированного ученого совета < д 074.16.03) по защите диссертации на соискание ученой степени доктора наук при ленинградском государственном ордена ленина и ордена октябрьской революции институте усовершенствования врачей имени с.м.кирова мз ссср <193015, ленинград. ул.салтыкова-щедрина д.41)

с диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института

автореферат разослан

ученый секретарь специализировнного совета кандидат медицинских наук

А.В.СОБОЛЕВ

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. РОСТ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ АЛЛЕРГИЕЙ НАБЛЮДАЕМЫЙ В ПОСЛЕДНИЕ ДЕСЯТИЛЕТИЯ, ДЕЛАЕТ АКТУАЛЬНЫМ ВОПРОС РАЗРАБОТКИ СРЕДСТВ И МЕТОДОВ СПЕЦИФИЧЕСКОЕ ДИАГНОСТИКИ ЭТИХ СОСТОЯНИИ. ДРОЖЖЕПОДОБНЫЛ ГРИБ CANDIDA ALBICANS, КАК ОСНОВНОЙ ВОЗБУДИТЕЛЬ КАНДИДОЗА, ОБЛАДАЕТ ТАКЖЕ ВЫРАЖЕННЫМ АЛЛЕРГИЗИРУКНЦИМ СВОЙСТВОМ. ОСНОВНАЯ РОЛЬ В СОПУТСТВУЮЩИХ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЯХ КАНДИДОЗА, КАК И ПРИ ЛЮБОЙ ИНФЕКЦИОННО-ЗАВИСИМОИ АЛЛЕРГИИ, ПРИНАДЛЕЖИТ, ГЛАВНЫМ ОБРАЗОМ, РЕАКЦИЯМ КЛЕТОЧНО-ОПОСРЕДОВАННОГО ТИПА. ОДНАКО, В ОТЛИЧИИ ОТ РЕАКЦИИ НА ТУБЕРКУЛИН, БРУЦЕЛЛИН И ДРУГИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫЕ АНТИГЕНЫ, К КДНДИДИНУ ГОРАЗДО ЧАЩЕ НАБЛЮДАЮТСЯ АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ НЕМЕДЛЕННОГО ТИПА. НЕМЕДЛЕННЫЙ КОМПОНЕНТ ПОВЫШЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ (ГНТ) ВЫЯВЛЯЕТСЯ У БОЛЬНЫХ РАЗНЫМИ ФОРМАМИ КАНДИДОЗА, А ТАКЖЕ ЧАСТИЧНО У ПРАКТИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ / КАРАЕВ 3.0. и др., 1986, АДО Д.Д., 1978, TOROK. J.,1976./. СУЩЕСТВУЕТ ТАКЖЕ МНЕНИЕ, ЧТО С.ALBICANS ЯВЛЯЕТСЯ ОДНИМ ИЗ ГЛАВНЫХ АЛЛЕРГЕНОВ, ОКРУЖАЮЩИХ ЧЕЛОВЕКА, ВЫЗЫВАЮЩИХ БРОНХИАЛЬНУЮ АСТМУ / EDGE В, PEPU3 J.,1900, TANIZAKI Б.et al.,19a5/.

КАНДИДИНЫ, ВЫПУСКАЕМЫЕ РАЗЛИЧНЫМИ ЗАРУБЕЖНЫМИ ФИРМАМИ, КАК ПРАВИЛО, ИСШЛОЗУЮТСЯ для ТЕСТИРОВАНИЯ РЕАКЦИИ ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА. АЛЛЕРГЕННЫЕ ПРЕПАРАТЫ ИЗ С.ALBICANS ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ РЕАКЦИИ ГНТ IN VIVO ОТСУТСТВУЮТ КАК В НАШЕЙ СТРАНЕ, ТАК И ЗА РУБЕЖОМ. ПРОБЛЕМА РАЗРАБОТКИ ТАКОГО ПРЕПАРАТА СВЯЗАНА ПРЕЖДЕ ВСЕГО, С ВОПРОСОМ ЕГО СОСТАВА. ОБЩЕПРИНЯТОЕ ТОЧКОЙ ЗРЕНИЯ / ЕЛИНОВ Н.П., 1975, ТОМ-SIKOW A- et al.,19BD. , КАВЕ Л. 1977. , ELLSWORTH J.N. , 1977./ ЯВЛЯЕТСЯ СПОСОБНОСТЬ МАННАНОВОГО КОМПОНЕНТА С.ALBICANS ВЫЗЫВАТЬ РЕАКЦИИ ГНТ. ВМЕСТЕ С ТЕМ, ИССЛЕДОВАНИЯМИ ПОСЛЕДНИХ ЛЕТ ВЫЯВЛЕНА ИМ-МУНОМОДЕЛИРУМШДЯ И МИТОГЕННАЯ АКТИВНОСТИ МАННАНПРОТЕИНОВ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ ГРИБА /PICOLELLA Е.П. et al.,1985, CASSDNE A. et al., 1988, DOMER J.E. et al., 1908./. В ТО ЖЕ ВРЕМЯ, ПРАКТИЧЕСКИ ОТСУТСТВУЮТ СВЕДЕНИЯ О ДЕЙСТВИИ КОМПОНЕНТОВ ГРИБА НА КЛЕТКИ-МИШЕНИ АЛЛГРГИИ. ИМЕЮЩИЕСЯ В ЛИТЕРАТУРЕ ДАННЫЕ О СПОСОБНОСТИ АНТИГЕНОВ С.ALBICANS ИНДУЦИРОВАТЬ РЕАГИНОВЫИ ОТВЕТ ИМЕЕТ РАЭНОРЕЧИВЫИ ХАРАКТЕР. ПОЭТОМУ, ПРЕДСТАВЛЯЕТСЯ НЕОБХОДИМЫМ ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИГЕН-НО—АКТИВНЫХ КОМПОНЕНТОВ ГРИБА ДЛЯ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ВЫСОКОСПЕЦИфИЧНОГО 'И ЧУВСТВИТЕЛЬНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ МИК0ГЕНН0Р1 АЛЛЕРГИИ.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: ИЗУЧИТЬ СПОСОБНОСТЬ ИЗОЛИРОВАННЫХ КОМПОНЕНТОВ С.ALBICANS ВЫЯВЛЯТЬ АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ НЕМЕДЛЕННОГО ТИПА, А ТАКЖЕ ВОЗМОЖНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ ИХ НА КЛЕТКИ-МИШЕНИ АЛЛЕРГИИ.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

- ИЗУЧИТЬ КОМПОНЕНТНЫЙ СОСТАВ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ЭКСТРАКТОВ КЛЕТКИ С.ALBICANS;

- ОПРЕДЕЛИТЬ СПЕЦИФИЧНОСТЬ И ТИПЫ РЕАГИНОВЫ>; АНТИТЕЛ, ИНДУЦИРУЕМЫХ С.ALBICANS;

- ИССЛЕДОВАТЬ СЕКРЕТОРНУЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК-МИШЕНЕИ АЛЛЕРГИИ ПОД ДЕЙСТВИЕМ АНТИГЕННЫХ КОМПОНЕНТОВ С.ALBICANS

- УСТАНОВИТЬ ВОЗМОЖНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ АНТИГЕНОВ С.ALBICANS ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ПОВЫШЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ НЕМЕДЛЕННОГО ТИПА В КЛИНИЧЕСКИХ УСЛОВИЯХ.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. РАЗДЕЛЕНИЕ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ЭКСТРАКТОВ КЛЕТОК С.ALBICANS ВОЗМОЖНО ПО ПРИНЦИПУ ИХ ИЗОЭЕКТРИЧЕСКОГО ФОКУСИРОВАНИЯ С ОПРЕДЕЛЕНИЕМ ИЗОТОЧЕК И МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАСС КОМПОНЕНТОВ, ВХОДЯЩИХ В ИХ СОСТАВ.

2. КОМПОНЕНТЫ КЛЕТКИ С.ALBICANS ОБЛАДАЮТ АЛЕРГЕННОИ АКТИВНОСТЬЮ, ПРОЯВЛЯЮЩЕЙСЯ В СПОСОБНОСТИ ВЫЯВЛЯТЬ РЕГИНОВЫЕ АНТИТЕЛА, А ТАКЖЕ И ПРЯМЫМ ГИСТАМИН-ВЫСВОБОЖДАН1ШИМ И ЭффЕКТОРНЫМ ДЕЙСТВИЕМ НА КЛЕТКИ-МИШЕНИ АЛЛЕРГИИ.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. ВПЕРВЫЕ УСТАНОВЛЕНА БИОХИМИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА ВОДОРАСТВОРИМЫХ ЭКСТРАКТОВ С.ALBICANS НА ОСНОВЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИЗОТОЧЕК В СОПОСТАВЛЕНИИ С МОЛЕКУЛЯРНЫМИ МАССАМИ КОМПОНЕНТОВ, ВХОДЯЩИХ В ИХ СОСТАВ. ПОКАЗАНО, ЧТО ВОДОРАСТВОРИМЫЕ ЭКСТРАКТЫ КЛЕТОК ГРИБА СОДЕРЖАТ ШЕСТЬ ОСНОВНЫХ КОМПОНЕНТОВ: ДВА МАННАНПРОТЕИНА (МП-1, МП-2), КИСЛЫЕ ГЛИКОПРОТЕИНЫ (КГЦ), НЕЙТРАЛЬНЫЙ ПРОТЕИН (НП) , ПЕПТИД <П> И БЕЛКИ ЦИТОПЛ(\;)МЫ <ЦЕ> .

ВПЕРВЫЕ ВЫЯВЛЕНА ПРЯМАЯ ГИСТАМИН-ВЫСВОБОЖДАмШАЯ АКТИВНОСТЬ ПЕПТИДА ПО ОТНОШЕНИЮ К ТУЧНЫМ КЛЕТКАМ <ТК>. ПРИВЕДЕНЫ ДОКАЗАТЕЛЬСТВА ЭНЕРГОЭАВИСИ1ЮГО (НЕЦИТОТОКСИЧЕСКОГО) ХАРАКТЕРА ГИСТАМИН-ВЫ-СВОБОЖДАШЩЕГО ДЕЙСТВИЯ (ГВД) ПЕПТИДА.

ВПЕРВЫЕ ПОКАЗАНА НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ АНАФЛАКТСЭИДНАЯ АКТИВНОСТЬ МП-1, СВЯЗАННАЯ С АКТИВИРУЮЩИМ ВОЗДЕЙСТВИЕМ НА ЕАЗОфИЛЫ (Цф) ЧЕЛОВЕКА, АНАЛОГИЧНЫМ ТАКОВОМУ КОНКАНАВАЛИНА-А CKQH-A).

ВПЕРВЫЕ ВЫЯВЛЕНА СПОСОБНОСТЬ НП И МП-1 МОДУЛИРОВАТЬ ВЫСВО-

ВОЖДЕНИЕ ГИСТАМИНА (ГА) ИЗ ТК, ВЫЗВАННОЕ ИЗБИРАТЕЛЬНЫМ ЛИБЕРА-ТОРОМ ВЕЩЕСТВОМ 18/80.

В ЭКСПЕРЕМЕНТЕ НА ЖИВОТНЫХ ПОКАЗАНО, ЧТО С. ALBICANS ИНДУЦИРУЕТ В ОРГАНИЗМЕ НАКОПЛЕНИЕ РЕАГИНОВЫХ АНТИТЕЛ СПЕЦИФИЧНЫХ К ЦБ И КГП.

ВПЕРВЫЕ УСТАНОВЛЕНА СПОСОБНОСТЬ ЦБ ВЫЗЫВАТЬ ЗАВИСИМОЕ ОТ ДОЗЫ ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА ИЗ Бф БОЛЬНЫХ КАНДИДОЗОМ И КАНДИДОЛЛЛЕРГИЕИ ПРИ ОТСУТСТВИИ ДЕЙСТВИЯ НА Бф ЗДОРОВЫХ ЛИЦ.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ И ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ. РАБОТА НОСИТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ И ПРИКЛАДНОЙ ХАРАКТЕР. ИССЛЕДОВАНИЕ ПОЗВОЛИЛО СИСТЕМАТИЗИРОВАТЬ КОМПОНЕНТНЫЙ СОСТАВ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ЭКСТРАКТОВ КЛЕТОК С.ALBICANS ПО ИХ ИЗОТОЧКАМ В СОПОСТАВЛЕНИИ С МОЛЕКУЛЯРНЫМИ МАССАМИ. ВЫДЕЛЕНИЕ КОМПОНЕНТОВ В ИЗОЛИРОВАННОМ ВИДЕ ДАЛО ВОЗМОЖНОСТЬ ОХАРАКТЕРИЗОВАТЬ АЛЛЕРГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ ПЯТИ КОМПОНЕНТОВ КЛЕТКИ ГРИБА, ОПРЕДЕЛИТЬ С КАКИМИ ИЗ НИХ СВЯЗАНО ДЕЙСТВИЕ ОБУСЛОВЛЕННОЕ ИММУНОЛО-ГИЕСКИМИ МЕХАНИЗМАМИ, А КАКИЕ ОБЛАДАЮТ НЕСПЕЦИФИЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ. ЭТИ ДАННЫЕ ПОЗВОЛЯЮТ ДАТЬ БОЛЕЕ УГЛУБЛЕННУЮ ХАРАКТЕРИСТИКУ АНТИГЕННЫМ ПРЕПАРАТАМ ИЗ С.ALBICANS, ИСПОЛЬЗУЕМЫМ В НАСТОЯЩЕЕ ВРЕМЯ В МЕДИЦИНСКОЙ ПРАКТИКЕ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ПОВЫШЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К ГРИБАМ РОДА CANDIDA, А ТАКЖЕ ИНТЕРПРИТИРОВАТЬ РЕЗУЛЬТАТЫ РЕАКЦИИ ГНТ ПРИ КОЖНОМ ТЕСТИРОВАНИИ С ГЛИКОПРОТЕИНОВЫМИ ПРЕПАРАТАМИ.

В ХОДЕ РАБОТЫ ПРОВЕДЕНА АПРОБАЦИЯ ОЧИЩЕННОГО ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕС-КОГО АНТИГЕНА В КАЧЕСТВЕ ПРЕПАРАТА ДЛЯ КОЖНОГО ТЕСТИРОВАНИЯ МЕТОДОМ УКОЛА И РЕАКЦИИ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГИСТАМИНА ИЗ Бф НА БОЛЬНЫХ КАН-ДИДОИНфЕКЦИЕИ И КАНДИДОАЛЛЕРГИЕИ.

В РЕЗУЛЬТАТЕ ПРОВЕДЕННОЙ РАБОТЫ, ПРЕДЛОЖЕНО ПРИМЕНЕНИЕ ЦБ ДЛЯ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ АЛЛЕРГИИ К С.ALBICANS.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ ПРЕДСТАВЛЕНЫ НА МЕЖДУНАРОДНОМ СИМПОЗИУМЕ "АКТУАЛЬНЫЕ BUHPOCU МЕДИЦИНСКОМ МИКОЛОГИИ" / ЛЕНИНГРАД, 1987 Г/, НА КОНФЕРЕНЦИИ ФРАНЦУЗСКОГО НАУЧНОГО ОБЩЕСТВА МИКРОБИОЛОГОВ / ПАРИЖ, 1988/, ДОЛОЖЕНЫ НА НАУЧНО-МЕДИЦИНСКОИ КОНФЕРЕНЦИИ " НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКАЯ ПРОГРЕСС И ЗДОРОВЬЕ НАСЕЛЕНИЯ" /КАЛУГА, 1983 Г/, НА ПЛЕНУМЕ ПРОБЛЕМНОЙ КОМИССИИ "АЛЛЕРГОЛОГИЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ" / ВИТЕБСК, 1989 Г/, НА ВСЕСОЮЗНОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ КОНФЕРЕНЦИИ " ПРОИЗВОДСТВО И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КОРМОВОГО БЕЛКА! СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ" / ТОМСК, 1989/. ДИССЕРТАЦИОННАЯ РАБОТА АПРОБИРОВАНА НА НАУЧНОМ ЗАСЕДАНИИ ВСЕСОИЗ-

наго ЦЕНТРА ПО ГЛУБОКИМ МИКОЗАМ МЗ СССР / МАЙ 1990 Г/.

ПУБЛИКАЦИИ. ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ ОПУБЛИКОВАНО 4 РАБОТЫ. ПОЛУЧЕНО УДОСТОВЕРЕНИЕ НА РАЦИОНАЛИЗАТОРСКОЕ ПРЕДЛОЖЕНИЕ N1132 ОТ 23.11.S9 Г.

О Б'Е М И СТРУКТУРА РАБОТЫ. ДИССЕРТАЦИЯ ИЗЛОЖЕНА НА СТРАНИЦАХ МАШИНОПИСНОГО ТЕКСТА И СОСТОИТ ИЗ ВВЕДЕНИЯ, ОБЗОРА ЛИТЕРАТУРЫ, 4 ГЛАВ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИИ, ОБСУЖДЕНИЯ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЯ, А ТАКЖЕ СПИСКА ЛИТЕРАТУРЫ, ВКЛЮЧАЮЩЕГО РАБОТ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ АВТОРОВ И ЗАРУБЕЖНЫХ. РАБОТА ИЛЛЮСТРИРОВАНА 23 РИСУНКАМИ И 16 ТАБЛИЦАМИ ДИССЕРТАЦИЯ ВЫПОЛНЕНА В НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОМ ОТДЕЛА ГЛУБОКИМ МИКОЗОВ С КЛИНИКОЙ t3AB.-ft.M-H. З.О.КАРАЕВ) ЛЕНИНГРАДСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО ИНСТИТУТА УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ВРАЧЕЙ ИМ.С.М.КИРОВА.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В РАБОТЕ ИСПОЛЬЗОВАЛИ С.ALBICANS, ШТАММ S46, ПОЛУЧЕННЫЙ ИЗ ВСЕСОЮЗНОЙ КОЛЛЕКЦИИ ЖИВЫХ ГРИБОВ Р13 СССР. С.ALBICANS ВЫРАЩИВАЛИ НА ЖИДКОЙ СРЕДЕ САБУРО В ОДНОЛИТРОВОМ ФЕРМЕНТЕРЕ <ВЮТЕС> ПРИ 28 С В ТЕЧЕНИЕ 48 ЧАСОВ. ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМОГО ЭКСТРАКТА ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ, БИОМАССУ ГРИБА НАГРЕВАЛИ В ДИСТИЛЛИРОВАННОЙ ВОДЕ ПРИ 10Q С В ТЕЧЕНИЕ 3D МИН. ЭКСТРАКТ КЛЕТОЧНЫХ

СТЕНОК ПОЛУЧАЛИ ГИДРОЛИЗОМ БИОМАССЫ ДИСТИЛЛИРОВАННОИ ВОДОЙ ПРИ о

0,5 АТИ, ISO С В ТЕЧЕНИЕ 30 МИН. ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИИ ЭКСТРАКТ ПОЛУЧАЛИ ДЕЗИНТЕГРАЦИЕИ КЛЕТОК ГРИБА С ПОМОЩЬЮ БУС БАЛЛОТИНИ В ПРИСТАВКЕ Л—17 ДЛЯ ЦЕНТРИФУГИ ЦЛР-1 ПРИ 2-4 С В ТЕЧЕНИЕ ЧАСА. ЭКСТРАКТЫ ОТДЕЛЯЛИ ОТ КЛЕТОК ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕМ И ЛИОфИЛЬНО ВЫСУШИВАЛИ. В СУХИХ ПРЕПАРАТАХ И ФРАКЦИЯХ ОПРЕДЕЛЯЛИ КОЛИЧЕСТВО БЕЛКА /LOWRU О.Н., 1935/ И УГЛЕВОДОВ АНТРОПОВЫМ МЕТОДОМ.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИЗОЭЛЕКТРИЧЕСКИХ ТОЧЕК КОМПОНЕНТОВ, ВХОДЯЩИХ В СОСТАВ ПРЕПАРАТОВ ПРОВОДИЛИ МЕТОДОМ ИЗОЭЛЕКТРИЧЕСКОГО ФОКУСИРОВАНИЯ В СЛОЕ АГАРОЗНОГО ГЕЛЯ В ДИАПАЗОНЕ РН=3,5-9,0 С ИСПОЛЬЗОВАНИ ЕМ АППАРАТУРЫ, МЕТОДИКИ И РЕАКТИВОВ ФИРМЫ LKB /ШВЕЦИЯ/. ОКРАСКУ НА БЕЛКИ ОСУЩЕСТВЛЯЛИ КУМАСИ ГОЛУБЫМ, НА ГЛИКОПРОТЕИНЫ - ТОЛЛУИ-ДИНОВЫМ синим.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАСС КОМПОНЕНТОВ ПРЕПАРАТОВ И ФРАКЦИИ ПРОВОДИЛО МЕТОДОМ ГЕЛЬфНЛЬТРАЦИИ НА КОЛОНКЕ С УЛЬТРОГЕЛЕМ АсА -44 С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ В КАЧЕСТВЕ МАРКЕРОВ РИБОНУКЛЕАЗЫ А (К-м=13,7 кйа) , ХИМОТРИПСИНОГЕНА А (Г).м=2Ъ кДа) , ОВАЛЬБУМИНА <М.м=43 кДа) ,

АЛЬБУМИНА (М.м=Ь7 кДа). ЭЛЮЦИЮ ОСУЩЕЩЕСТВЛЯЛИ 0,457. ХЛОРИДОМ НАТРИЯ СО СКОРОСТЬЮ ПОТОКА 7 МЛ/ЧАС. ВЕЛИЧИНУ АБСОРБЦИИ ЭЛЮИРУЕМЫХ С КОЛОНКИ ФРАКЦИИ ЗАПИСЫВАЛИ НА АБСОРБЦИОМЕТРЕ УВИКОРД /LKB, ШВЕЦИЯ/ ПРИ 280 ИМ.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОВОДИЛИ НА МЫШАХ ЛИНИИ СБА (300), БЕСПОРОДНЫХ МЫШАХ (250) МАССОИ 1В-20 Г И БЕСПОРОДНЫХ КРЫСАХ (30D) МАССОЙ 200-250 Г.

С ЦЕЛЬЮ ИНДУКЦИИ СИНТЕЗА РЕАГИНОВЫХ АНТИТЕЛ, МЫШЕИ СБА ИММУНИЗИРОВАЛИ ТРЕХКРАТНО ВНУТРИБРЮШИННЦ ГОМОГЕНАТОМ КЛЕТОК С.ALBICANS В ДОЗЕ 50О ПКГ С 5 МГ ГИДРООКИСИ АЛЛКМИНИЯ КАК АД'ЮВАНТА. СПЕЦИФИЧНОСТЬ ИНДУЦИРУЕМЫХ ГРИБОМ РЕАГИНОВЫХ АНТИТЕЛ ОПРЕДЕЛЯЛИ В РЕАКЦИЯХ ПАССИВНОЙ КОЖНОЙ АНАФИЛАКСИИ (ПКА) ПО ОБЕРИ /OVERU 2. et al-,1975 /. СЫВОРОТКИ ОТ ИММУННЫХ ЖИВОТНЫХ ПОЛУЧАЛИ НА 7-Е, 14-Е, 21-Е И 2В-Е СУТКИ ПОСЛЕ КАЖДОЙ МН'ЕКЦИИ АНТИГЕНА. ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕАГИНОВЫХ IgG-АНТИТЕЛ, ДВУХКРАТНЫЕ РАЗВЕДЕНИЯ ПУЛА СЫВОРОТОК ОТ ИММУННЫХ ЖИВОТНЫХ ВВОДИЛИ ВНУТРИКОЖНО БЕСПОРОДНЫМ МЫШАМ В ОБ-EME О.1 МЛ. РАЗРЕШАЮЩУЮ ДОЗУ ИССЛЕДУЕМОГО АНТИГЕНА ВВОДИЛИ ЧЕРЕЗ 2 ЧАСА ВНУТРИВЕННО В КОНЦЕНТРАЦИИ ЮОО МКГ/МЛ В 0,2 МЛ 0,57. РАСТВОРЕ ЭВАНСА ГОЛУБОГО.

ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ IgE-АНТИТЕЛ, ДВУХКРАТНЫЕ РАЗВЕДЕНИЯ ПУЛА СЫВОРОТОК ОТ ИММУННЫХ ЖИВОТНЫХ ВВОДИЛИ ВНУТРИКОЖНО БЕСПОРОДНЫМ КРЫСАМ В ОБ'EME 0,1 Mil. РАЗРЕШАЮЩУЮ ДОЗУ АНТИГЕНА ВВОДИЛИ ЧЕРЕЗ 24 ЧАСА В КОНЦЕНТРАЦИИ 500 МГ/МЛ В 1 МЛ 0,57. РАСТВОРА ЭВАНСА ГОЛУБОГО.

НАЛИЧИЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ОПРЕДЕЛЯЛИ ВНУТРИКОЖНЫМ ВВЕДЕНИЕМ ДЕСЯТИКРАТНЫХ РАЗВЕДЕНИИ ИССЛЕДУЕМЫХ АНТИГЕНОВ В ОБ'EME 0,1 МЛ С ОДНОВРЕМЕННЫМ ВНУТРИВЕННЫМ ВВЕДЕНИЕМ 0,5 МЛ 0,5"/. РАСТВОРА ЭВАНСА ГОЛУБОГО.

РЕАКЦИИ ОЦЕНИВАЛИ ЧЕРЕЗ 30 МИН ПО ПОЯВЛЕНИЮ ОКРАШЕННОГО ПЯТНА В МЕСТЕ '-.frnii! СЫВОРОТКИ С ВНУТРЕННЕЕ СТОРОНЫ КОЖИ ЖИВОТНЫХ, ДИмМЕТРИМ НЕ МЕНЕЕ 4-Х СМ.

ТК ВЫДЕЛЯЛИ ИЗ КЛЕТОЧНОЙ ВЗВЕСИ, ПОЛУЧЕННОЙ ИЗ EPIÚffiHOH И ГРУДНОЙ ПОЛОСТЕЙ ИНТАКТНЫХ КРЫС, ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕМ ЕЕ В ГРАДИЕНТЕ ПЛОТНОСТИ ФМКОЛЛА <30% И 4ОУ. РАСТВОР) / THON I.L., UVNALÍ В., 1967 /. ПОСЛЕ ВЫДЕЛЕНИЯ, ТК ИНКУБИРОВАЛИ ПРИ 37 С В 200 MKJ5 СОЛЕ ВОГО РАСТВОРА, СОДЕРЖАЩЕГО NACL (145/nM), KCL (2,7mM>, CACL ( 1тМ> И ЧЕЛОВЕЧЕСКИЙ СЫВОРОТОЧНЫЙ АЛЬБУМИН (1МГ/11Л) С ДОБАВЛЕНИЕМ 10'/. (ОБ/ОБ) ФОСФАТНОГО БУФЕРА (<Ь7мМ> , РН РАСТБПРА-7,0.

ГА ОПРЕДЕЛЯЛИ В НАДОСАДОЧНОИ ЖИДКОСТИ И ЭКСТРАКТЕ KjiLlUK

СПЕКТРОфЛЮОРИМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ / SHORE P.A. et al., 1959/. ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА ВЫРАЖАЛИ В У. К ЕГО ОБЩЕМУ СОДЕРЖАНИЮ С ПОПРАВКОЙ НА СПОНТАННОЕ ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА.

ИЗУЧЕНИЕ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГА ИЗ Б® КРОВИ ПРОВОДИЛОСЬ У БОЛЬНЫХ РАЗЛИЧНЫМИ ФОРМАМИ КАНДИДОЗА (19 ЧЕЛ), У БОЛЬНЫХ АТОПИЕЙ, ПРОЖИВАЮЩИХ В ЗОНЕ РАЗМЕЩЕНИЯ ПРЕДПРИЯТИИ ПО ПРОИЗВОДСТВУ БЕЛКОВО ВИТАМИННОГО КОНЦЕНТРАТА (20 ЧЕЛ), БОЛЬНЫХ НЕ МИКОТИЧЕСКОИ ПАТОЛОГИЕЙ <20 ЧЕЛ) И ПРАКТИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ (И ЧЕЛ). ДЛЯ ЭТОГО НАМИ БЫЛ ИСПОЛЬЗОВАН МЕТОД МИКРОСПЕКТРОфЛЮОРИМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГА В ОСАДОЧНЫХ ПОРЦИЯХ БЕЗ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОМ ЭКСТРАКЦИИ / SKOV et al., 1979 ). МОНОНУКЛЕАРНЫЕ КЛЕТКИ ВЫДЕЛЯЛИ ИЗ ПЕРЕфЕРИЧЕСКОИ КРОВИ ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕМ НА ОДНОСТУПЕНЧАТОМ ГРАДИЕНТЕ ФИКОЛЛА-УРОГРАвИНА (ПЛОТНОСТЬЮ 1,080 Г/СМ3), ОТМЫВАЛИ ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕМ ПРИ 107д И 65д В БУФЕРЕ СЛЕДУЮЩЕГО СОСТАВА: HEPES-SmM, РН=7,6, NACL-120 л»М, KCL-5mM, ЧЕЛОВЕЧЕСКИЙ СЫВОРОТОЧНЫЙ АЛЬБУМИН-Q, ЗМГ/МЛ (HEPES-A). ПОЛУЧЕННУЮ ВЗВЕСЬ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК, СОДЕРЖАЩИХ 247. БАЗОфИЛОВ, ИНКУБИРОВАЛИ БЕЗ ИЛИ В ПРИСУТСТВИИ ИСПЫТУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ В КРУГЛОДОННЫХ СТЕКЛЯННЫХ ПРОБИРКАХ В ТЕЧЕНИЕ НЕОБХОДИМОГО ИНТЕРВАЛА ВРЕМЕНИ ПРИ 37°С В 400 МКЛ БУФЕРА HEPES-AMC, ОТЛИЧАЮЩЕГОСЯ ОТ HEPES-A НАЛИЧИЕМ MgCL -1,15 гаМ, CACL -0,6 тМ, ГЛЮКОЗЫ-

г) 2

5тМ. РЕАКЦИЮ ОСТАНАВЛИВАЛИ ОХЛАЖДЕННЫМ HEPES-A БУФЕРОМ И ПЕРЕНЕСЕНИЕМ ПРОБИРОК НА ЛЕД. КЛЕТКИ ОСАЖДАЛИ ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕМ, НАДО-САДКИ ОТБРАСЫВАЛИ И СОДЕРЖАНИЕ ГА ОПРЕДЕЛЯЛИ В ОСАДОЧНЫХ ПОРЦИЯХ БЕЗ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЙ ЭКСТРАКЦИИ НА СПЕКТРОФЛШРИМЕ ГРЕ HITACHI-F9 /ЯПОНИЯ/ ПРИ ЭМИССИИ-450 И ЭКСТИНЦИИ-357 НМ.

СТАТИСТИЧЕСКУЮ ОБРАБОТКУ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ ПРОВОДИЛИ, ИСПОЛЬЗУЯ МЕТОДЫ ВАРИАЦИОННОЙ СТАТИСТИКИ. ДОСТОВЕРНОСТЬ РАЗЛИЧИИ

2

УСТАНАВЛИВАЛИ ПРИ ПОМОЩИ КРИТЕРИЯ^ / АШМАРИН И.П. и др., 1975/.

МАТЕРИАЛЫ: ФИКОЛЛ, HEPES, НАБОР КАЛИБРОВОЧНЫХ БЕЛКОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ВЕСОВ (PHARMACIA, ШВЕЦИЯ), АМфОЛИНЫ, АГА-РОЗА EF, УЛЬТРОГЕЛЬ АсА-44 (LKB, ШВЕЦИЯ), ОРТОфТАЛИЕВЫИ АЛЬДЕГИД, ВЕЩЕСТВО 48/80, ИОДАЦЕТАТ НАТРИЯ (SIGMA, США), УРОГРАфИН (LE1RA3, ФИНЛЯНДИЯ), ЧЕЛОВЕЧЕСКИЙ СЫВОРОТОЧНЫЙ АЛЬБУМИН, ЭВАНС ГОЛУБОЙ, КУМАСИ ГОЛУБОЙ R-250 (REANAL, ВЕНГРИЯ). ОСТАЛЬНЫЕ РЕАКТИВЫ - ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРОИЗВОДСТВА.

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

НА ПЕРВОМ ЭТАПЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ИЗУЧИЛИ СОСТАВ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ЭКСТРАКТОВ КЛЕТОК С.ALBICANS. ДЛЯ ЭТОГО ПОЛУЧЕНО ТРИ ТИПА ЭКС-

РАКТОВ: X -СОДЕРЖАЩИЙ ЛАБИЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ КЛЕТОЧНОЙ ПОВЕРХНОСТИ ГРИБА, II -СОДЕРЖАЩИМ КОМПОНЕНТЫ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ И III -СОДЕРЖАЩИЙ ТЕРМОЛАЕИЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ ЦИТОПЛАЗМЫ. ХРОМАТОГРАФИЯ ЧЕРЕЗ КОЛОНКУ С УЛЬТРОГЕЛЕМ АсА—44 ПРЕПАРАТОВ ЭТИХ ЭКСТРАКТОВ, ВЫЯВИЛА НАЛИЧИЕ ДВУХ ПИКОВ В ЭКСТРАКТАХ I И II. ПРИЧЕМ, ПЕРВЫЕ ПИКИ ИМЕЛИ В СВОЕМ СОСТАВЕ ПРЕИМУЩЕСТВЕННОЕ СОДЕРЖАНИЕ УГЛЕВОДОВ < С ОТНОШЕНИЕМ УГ ЛЕВОДЫ:БЕЛОК У/Б=7> , ТОГДА КАК ВТОРОЙ ПИК БЫЛ ПРЕИМУЩЕСТВЕННО БЕЛКОВОЙ ПРИРОДЫ <У/Б=0,3). ЭКСТРАКТ III ФРАКЦИОНИРОВАЛСЯ НА ТРИ ПИКА, ПРИЧЕМ ФРАКЦИИ ИМЕЛИ СМЕШАННЫЙ СОСТАВ И СОДЕРЖАЛИ ПРИМЕРНО ОДИНАКОВОЕ КОЛИЧЕСТВО БЕЛКОВ И УГЛЕВОДОВ (У/Б=1+0.3>. ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАСС КОМПОНЕНТОВ, ВХОДЯЩИХ В СОСТАВ ПЕРВОГО УГЛЕВОДНОГО ПИКА ЭКСТРАКТОВ I И II, БЫЛА ПРОВЕДЕНА РЕХРО-МАТЕЗГРАФИЯ ПРЕПАРАТОВ, СООТВЕТСТВУЮЩИХ ЭТИМ ПИКАМ. ПРИ ЭТОМ ВЫЯВЛЕНА ИДЕНТИЧНОСТЬ ИХ ПРОФИЛЕН ЭЛЮЦ.ИИ, КОТОРЫЕ ИМЕЛИ ПО ТРИ ПИКА СООТВЕТСТВУЮЩИХ П.м = ШС1, 45 И 20 кДа. КОМПОНЕНТЫ ЭТИХ ПЕРВЫХ ДВУХ ПИКОВ ИМЕЛИ Г ЛИКОПРОГЕМНОЕ;УМ ПРИРОДУ, С ПРЕИМУЩЕСТВЕННЫМ СО— ДЕРЖАНИЕ УГЛЕВОДОВ <У/Б=8,3 И 9,3). УСТАНОВЛЕНО, ЧТО УГЛЕВОДНАЯ ЧАСТЬ »ТИХ ГЛИКОПРОТЕИНОВ СОСТОЯЛА ЦЕЛИКОМ ИЗ МАННОЗЫ, ЧТО ДАЛО ОСНОВАНИЕ СЧИТАТЬ ИХ МАННАНПРОТЕИНАМИ. ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОМПОНЕНТНОГО СОСТАВА ВТОРЫХ БЕЛКОВЫХ ПИКОВЭКСТРАКТОВ I И II, БЫЛО ПРОВЕДЕНО ФРАКЦИОНИРОВАНИЕ ПРЕПАРАТОВ, СООТСЕТСТВУЮЩИХ ЭТИМ ПИКАМ С ПОМОЩЬЮ ИЗОЭЛЕКТРИЧЕСКОГО ФОКУСИРОВАНИЯ В ГРАДИЕНТЕ РН=3,3~9,0. ВЫЯВЛЕНО, ЧТО ОБА ПРЕПАРАТА СОДЕРЖАЛИ ФРАКЦИИ, ФИКСИРУЮЩИЕСЯ В ЗОНЕ РН=9,0 И НЕ ОКРАШИВАЮЩИЕСЯ ИСПОЛЬЗОВАННЫМИ КРАСИТЕЛЯМИ НА БЕЛКИ И ГЛИКОПРОТЕИНЫ, НЦ ВИЗУАЛЬНО ЧЕТКО РАЗЛИЧИМЫМИ В НЕОКРАШЕННОМ ГЕЛЕ В ВИДЕ ПОЛОС ПРЕЦИПИТАЦИИ. ОКРАСКА НА БЕЛКИ ЭЛЕКТРОфОРЕТИЧЕСКИХ РАЗГОНОК ОБОИХ ПРЕПАРАТОВ БЫЛА ОТРИЦАТЕЛЬНОЙ. У ПРЕПАРАТА ВТОРОГО ПИКА ЭКСТРАКТА II ВЫЯВЛЕНО НЕСКОЛЬКО БЛИЗК0Г1РИЛЕГАЮЩИХ ФРАКЦИИ ГЛПКОПРОТЕИНОВ С Р1=3,5-3,8 И 4,0-4,3 ПРИ ОТСУТСТВИИ ТАКОВЫХ У АНАЛОГИЧНОГО ПРГПАРАТА ЭКСТРАКТА I. ПРИ ХРОМАТОГРАФИИ ФРАКЦИИ, -..'|<..Л'иьАНгии но I 1.ЛЯ В ОБЛАСТИ РН=3,5-4,5, СООТВЕТСТВУЮЩЕЙ ОКРАШЕННЫМ ГЛИКОПРОТЕИНАМ, ВЫЯВЛЕН ПИК С М. м=35 кДа. ХРОМАТОГРАФИЯ ФРАКЦИИ, ЭЛЮИРОВАННЫХ ИЗ ГЕЛЯ В ОБЛАСТИ НЕЙТРАЛЬНЫХ ЗНАЧЕНИИ РН ПОСЛЕ ЭЛЕКТРОФОКУСИРОВАНИЯ ОБОИХ ПРЕПАРАТОВ, ВЫЯВИЛА 111) ДВА ПИКА. ПЕРВЫЙ ПИК СОСТОЯЛ ПРЕИМУЩЕСТВЕННО ИЗ УГЛЕВОДОВ И СООТВЕТСТВОВАЛ МП-1. ВТОРОЙ ПИК БЫЛ БЕЛКОВОЙ ПРИРОДЫ И ИМЕЛ М. м.=;Я) кДо. ХРОМА-ТОГРОЦИЯ ФРАКЦИИ ЭЛМИРОВЛННЫХ ИЗ ГЕЛЯ В ОБЛАСТИ РН=8, 0-9,1) ВЫЯВИЛА ДВ£,ИНОЙ ПИК, СООТВЕТСIВУЮЩИЙ М.м=20 И 10 КДЙ. БИОХИМИЧЕСКИИ АНАЛИЗ ФРАКЦИИ ДВОЙНОГО ПИКА ПОКАЗАЛ, ЧТО ОНИ БЫЛИ I ¡',1, и.ИЛ ПРИ-

РОДЫ. НО ПОСКОЛЬКУ, ПРИ ИЗОЭЛЕКТРОфОКУСИРОВАНИИ ЭТА ФРАКЦИЯ БЫЛА ГОМОГЕННОЙ, НО НЕ ОКРАШИВАЛАСЬ НА БЕЛКИ, МОЖНО ПРЕДПОЛОЖИТЬ, ЧТО ОНА ИМЕЛА ПЕПТИДНУЮ ПРИРОДУ И СОСТОЯЛА ИЗ ДВУХ СУБ'ЕДИНИЦ. ПРИ ИЗОЭЛЕКТРОФОКУСИРОВАНИИ ЭКСТРАКТА III ВЫЯВЛЕНО, ЧТО ОН СОДЕРЖАЛ ГРУППУ БЕЛКОВ, ОКРАШИВАЕМЫХ КУМАСИ ГОЛУБЫМ И ИМЕНВДИХ РХ В ДИАПАЗОНЕ 4,8-5,ß. ХРОМАТОГРАФИЯ ЭТИХ БЕЛКОВ ПОЗВОЛИЛА ОПРЕДЕЛИТЬ ИХ М.м, КОТОРАЯ СОСТАВИЛА ВЕЛИЧИНУ ПОРЯДКА 47 к:Да.

ТАБЛИЦА 1

ОСНОВНЫЕ ВОДОРАСТВОРИМЫЕ КОМПОНЕНТЫ С.ALBICANS.

КОМПОНЕНТ ОБОЗНАЧЕНИЕ ЛОКАЛИЗАЦИЯ В КЛЕТКЕ М.м. кДа PI

I. МАННАН-ПРОТЕИН I МП-1 ПОВЕРХНОСТЬ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ 100 7,0

2. МАННАН-ПРОТЕН II МП-II - " - 45 Н.Д.

3. БЕЛКИ ЦИТОПЛАЗМЫ ЦБ ЦИТОПЛАЗМА 47 4.&-S а

4. КИСЛЫЕ ГЛИКОПРОТЕИНЫ КГП КЛЕТОЧНАЯ СТЕНКА 35 3,5-4- -5

5. НЕЙТРАЛЬНЫЙ ПРОТЕИН НП ПОВЕРХНОСТЬ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ 30 7,0

6. ПЕПТИД П - •• - 20 И 10 9,0

ИЗУЧЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ ИЗОЛИРОВАННЫХ КОМПОНЕНТОВ НА ИНТАКТНЫЕ ТК КРЫС ПОКАЗАЛО, ЧТО НИ ОДИН ИЗ КОМПОНЕНТОВ В ШИРОКИХ ПРЕДЕЛАХ КОНЦЕНТРАЦИИ (0,25-25мкМ),ЗА ИСКЛЮЧЕНИЕМ ПЕПТИДА, НЕ ОБЛАДАЛ ГИСТА-МИН—ВЫСВОБОЖДАЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ. ВНЕСЕНИЕ В СРЕДУ СВЕЖЕЙ СЫВОРОТКИ КРЫС, КАК ИСТОЧНИКА КОМПЛЕМЕНТА, В РАЗЛИЧНЫХ КОНЕЧНЫХ РАЗВЕДЕНИЯХ НЕ ПРИВОДИЛО К ГВЦ НИ ОДНОГО ИЗ КОМПОНЕНТОВ ГРИБА. ФРАКЦИЯ ПЕПТИДА ВЫЗЫВАЛА ЗАВИСИМОЕ ОТ ДОЗЫ ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА ИЗ ТК. ДЕЙСТВИЕ ПЕПТИДА ДОСТИГАЛО СВОЕГО МАКСИМИУМА, СООТВЕТСТВОВАВШЕГО 357. ВЫСВОБОЖДЕНИЮ ГА, СОДЕРЖАЩЕГОСЯ В КЛЕТКАХ ПРИ КОНЦЕНТРАЦИИ 31,25мкМ. ПО-ВИДИМОМУ, ПЕПТИД НЕ ВЫЗЫВАЛ ПОЛНОГО ИСТОЩЕНИЯ ЗАПАСОВ ГИСТАМИ-НА В КЛЕТКАХ. ЭТО ПОДТВЕРДИЛИ ДАННЫЕ ПОЛУЧЕННЫЕ НАМИ В СЛЕДУЮЩИХ ЭКСПЕРИМЕНТАХ: ПРЕИНк'УБАЦИЯ ТК С ПАПАВЕРИНОМ В УСЛОВИЯХ (В ОТСУТСТВИИ ГЛЮКОЗЫ), ПРИ КОТОРЫХ ОН ВЫЗЫВАЛ ИСТОЩЕНИЕ ЗАПАСОВ АТф В КЛЕТКАХ ЗА СЧЕТ ТОРМОЖЕНИЯ КЛЕТОЧНОГО ДЫХАНИЯ Г ГУЩИН И.С. и др.,

1975/, ПРИВОДИЛО К ЗАВИСИМОМУ ОТ ДОЗЫ ПАПАВЕРИНА ТОРМОЖЕНИЮ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГА, ВЫЗВАННОГО ДЕЙСТВИЕМ ПЕПТИДА. ТОРМОЗЯЩЕГО ДЕИСТВИЯ НЕ НАБЛЮДАЛОСЬ ПРИ НАЛИЧИИ В ИНКУБАЦИОННОМ БУФЕРЕ СУБСТРАТА ГЛИКОЛИЗА ГЛЮКОЗЫ <Ю мкМ) , Т. К. В ДАННЫХ УСЛОВИЯХ АТф В КЛЕТКАХ ВОССТАНАВЛИВАЕТСЯ ГЛИКОЛИТИЧЕСКИМ ПУТЕМ. ДОБАВЛЕНИЕ ЯОДАЦЕТАТА (13 мкП! , УГНЕТАЮЩЕГО ГЛИКОЛИЗ /PETERSON, 1974 /, ТОРМОЗ ИТ В ПРИСУТСТВИИ ПАПАВЕРИНА И ГЛЮКОЗЫ ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА, ВЫЗВАННОЕ ДЕИСТ-

ВИЕМ ПЕПТИДА. КРОМЕ ТОГО, ВЫЯВЛЕНО, ЧТО ПРИ НИЗКОИ ТЕМПЕРАТУРЕ о

(4 С) НАБЛЮДАЛОСЬ ТОРМОЖЕНИЕ ДЕИСТВИЯ ПЕПТИДА. ТАКИМ ОБРАЗОМ, ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА, ВЫЗВАННОЕ ПЕПТИДОМ ЯВЛЯЕТСЯ АКТИВНЫМ ЭНЕРГОЗАВИСИМЫМ ПРОЦЕССОМ, ЧТО ХАРАКТЕРНО ДЛЯ НЕЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ИЗБИРАТЕЛЬНОГО ДЕИСТВИЯ ЛИБЕРАТОРОВ ГА.

ИЗВЕСТНО, ЧТО КЛЕТКАМИ-МИШЕНЯМИ АЛЛЕРГИИ ЯВЛЯЮТСЯ ТАКЖЕ БШ. ПОСКОЛЬКУ МОРФОЛОГИЯ, ПРОИСХОЖДЕНИЕ И ЛОКАЛИЗАЦИЯ ТК И Бф РАЗЛИЧНЫ / GALLI S.et al., 1985/, МЫ СОЧЛИ ЦЕЛЕСООБРАЗНЫМ ИСПЫТАТЬ ДЕЙСТВИЕ КОМПОНЕНТОВ ГРИБА НА КЛЕТКИ-МИШЕНИ АЛЛЕРГИИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.

ОКАЗАЛОСЬ, ЧТО ТОЛЬКО МП-I ВЫЗЫВАЛ ЗАВИСИМОЕ ОТ ПРИСУТСТВИЯ ИОНОВ 2+

С а В СРЕДЕ ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА ИЗ ЕЮ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ В ПРЕДЕЛАХ КОНЦЕНТРАЦИИ 0,62-5.0 мкМ. ПРИ ИЗУЧЕНИИ ВОЗДЕЙСТВИЯ ПАПАВЕРИНА И ИОДАЦЕТАТА НА ЭТОТ ПРОЦЕСС БЫЛИ ПОЛУЧЕНЫ ДАННЫЕ СВИДЕТЕЛЬСТВУЮЩИЕ О ТОМ, ЧТО ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА ИЗ Бф ЧЕЛОВЕКА ПОД ДЕЙСТВИЕМ МП-1 ТРЕБУЕТ ЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ ЗАТРАТ, ОБЕСПЕЧИВАЕМЫХ ЭНЕРГИЕЙ ГИДРОЛИЗА АТф. ОДНАКО, ЭТИ ДАННЫЕ ЕЩЕ НЕ ПОЗВОЛЯЮТ СУДИТЬ О ТОМ, ОБУСЛОВЛЕНО ЛИ ДЕЙСТВИЕ МП-I ИММУНОЛОГИЧЕСКИМИ МЕХАНИЗМАМИ ИЛИ НЕТ, Т.К. И У ЗДОРОВЫХ ЛЮДЕЙ НЕЛЬЗЯ С УВЕРЕННОСТЬЮ ИСКЛЮЧИТЬ СЕНСИБИЛИЗАЦИЮ БФ НА ФОНЕ ТАКОГО ДОВОЛЬНО РАСПРОСТРАНЕННОГО ЯВЛЕНИЯ КАК НОСИ-ТЕЛЬСТВО ГРИБОВ CANDIBA В ОРГАНИЗМЕ. ПОЭТОМУ ПРЕДСТАВЛЯЛО ИНТЕРЕС ИЗУЧЕНИЕ ДЕИСТВИЯ ЭТОГО КОМПОНЕНТА ГРИБА НА Бф БОЛЬНЫХ. ИСПЫТАНИЕ ПРОВОДИЛИ В ДВУХ ГРУППАХ БОЛЬНЫХ: I. БОЛЬНЫХ АТОПИЕИ, ПРОЖИВАЮЩИХ В ЗОНАХ ПРЕДПРИЯТИИ ПО ПРОИЗВОДСТВУ БВК, п=9 2. БОЛЬНЫХ XPDHH-KMiiViAULiLili КОЖИ И СЛИЗИСТЫХ (ХККС) , п=10 И ГРУППЕ ПРАКТИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ, п—11. В КАЧЕСТВЕ ПРЕПЕРАТА СРАВНЕНИЯ ИСПОЛЬЗОВАЛИ ЛЕКТИН КОН-А, ИЗВЕСТНОГО СПОСОБНОСТЬЮ К НЕСПЕЦИФИЧЕСКОМУ СВЯЗЫВАНИЮ ДРУГ С ДРУГОМ РАСПОЛОЖЕННЫХ НА КЛЕТКАХ МОЛЕКУЛ IgE / SIR AGAIN I AM П.P. ,1975/, В РЕЗУЛЬТАТЕ ЧЕГО ПРОИСХДИТ ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА ПРИ ДЕЙСТВИИ ЕГО НА Бф ЧЕЛОВЕКА. В ТАБЛ,2 ПРИВЕДЕНЫ РЕЗУЛЬТАТЫ ЭТОГО ИСПЫТАНИЯ.

СТЕПЕНЬ МАКСИМАЛЬНОГО ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГА, ВЫЗВАННОГО MI1-I И КОН-А, А ТАКЖЕ ДОЗЫ ЭТИХ ПРЕПАРАТОВ, ДОСТАТОЧНЫЕ ДЛЯ йГ.УЩ-"СШЛЕ-

ТАБЛИЦА 2

ХАРАКТЕРИСТИКА ОТВЕТНЫХ РЕАКЦИИ Бф, ОЦЕНИВАЕМЫХ ПО ВЫСВОБОЖДЕНИЮ ГА ПРИ ДЕЙСТВИИ МП-1 И КОН-А У РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП БОЛЬНЫХ.

ГРУППА ОБСЛЕДОВАННЫХ ДЕИСТЕ МАКСИМАЛЬНЫЙ ОТВЕТ 7. *ИЕ МП-1 ДОЗА,ВЫЗЫВАЮЩАЯ МАКСИМА ЛЬН. ОТВЕТ мкМ ДЕИСТБИ1 МАКСИМАЛЬНЫЙ ОТВЕТ '/. КОН-А ДОЗА,ВЫЗЫВАВШАЯ МАКСИМ А ЛЬН. ОТВЕТ мкМ

БОЛЬНЫЕ АТРОПИЕИ 34,8+2,8 2,63+0,35 41,8+5,9 13,л+а,2

БОЛЬНЫЕ ХККС 22,6+3,1 3,00+0,55 30,7+4,8 20,2+S,1

ПРАКТИЧЕСКИ ЗДОРОВЫЕ 31 ,0+3 ,6 2,71+0,50 37,0+4,1 16,0+4,2

В ТАБЛИЦЕ ДАНЫ ЗНАЧЕНИЯ М+т

НИЯ ТАКОГО ДЕЙСТВИЯ СУЩЕСТВЕННО НЕ РАЗЛИЧАЛИСЬ <Р>0,05> В ГРУППА!; ЗДОРОВЫХ И БОЛЬНЫХ АГОПИЕИ. Б ТО ЖЕ ВРЕМЯ, В ГРУППЕ БОЛЬНЫХ ХККС ЭТИ ПОКАЗАТЕЛИ ОТЛИЧАЛИСЬ <Р<0,03> ОТ ТАКОВЫХ У БОЛЬНЫХ С АГОПИЕИ. ПРИ СОПОСТАВЛЕНИИ ОТВЕТНЫХ РЕАКЦИЙ Ыр НА МП-1 И КОН-А В ПРЕД-ЛАХ ОДНОЙ И ТОЙ ЖЕ ГРУППЫ, НЕ НАБЛЮДАЛОСЬ ДОСТОВЕРНО ЗНАЧИМЫХ НАЛИЧИИ МЕЖДУ НИМИ <Р>0,05>. КРОМЕ ТОГО, ВЫЯВЛЕНА ПРЯМАЯ СВЯЗЬ г=0,75 <Р<0,05> МЕЖйУ ИХ УРОВНЯМИ МАКСИМАЛЬНОГО ВЫСВОБОЖДЕНИЯ. ЭТО МОЖЕТ СВИДЕТЕЛЬСТВОВАТЬ О ПРИНЦИПИАЛЬНОМ СОВПАДЕНИИ СТЕПЕНИ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ КЛЕТОК-ИИШЕНЕИ К КОН-А И МП-1, Т.Е. О НЕСПЕЦИфИ-ЧЕСКОИ АКТИВНОСТИ МП-1.

СЛЕДУЮЩИЙ ЭТАП РАБОТЫ ЗАКЛЮЧАЛСЯ В ИССЛЕДОВАНИИ ВЛИЯНИЯ ФРАКЦИЯ С.ALBICANS НА СЕКРЕТОРНЫЕ ПРОЦЕССЫ ТК, АКТИВИРОВАННЫХ ВЕЩЕСТВОМ 48/80. ОКАЗАЛОСЬ, ЧТО ФРАКЦИЯ НП ВЫЗЫВАЛА ЗАВИСИМОЕ ОТ ДОЗЫ УСИЛЕНИЕ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГА ВЫЗВАННОГО МИНИМАЛЬНО« И СУБОПТИ-МАЛЬНОИ ДОЗАМИ ВЕЩЕСТВА 48/80. В ТО ЖЕ ВРЕМЯ, МП-1 ВЫЗЫВАЛ ОБРАТНОЕ ДЕЙСТВИЕ, А ИМЕННО, ЗАВИСИМОЕ ОТ ДОЗЫ ТОРМОЖЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ СУСОПТИМАЛЬНЫХ ДОЗ ВЕЩЕСТВА 43/80 <РИС.1>. ИЗУЧЕНИЕ КИНЕТИКИ ТОРМОЖЕНИЯ СЕКРЕТОРНОГО ПРОЦЕССА ПОКАЗАЛО, ЧТО СТЕПЕНЬ ТОРМОЖЕНИЯ ЗАВИСЕЛА ОТ ВРЕМЕНИ ПРЕИНКУБАЦИИ ТК С МП-1 И ЧТО МАКСИМАЛЬНОЕ ТОРМОЖЕНИЕ, СОСТАВЛЯЮЩЕЕ 637. ПО ОТНОШЕНИЮ К ИСХОДНОМУ УРОВНЮ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ПОД ДЕЙСТВИЕМ СУЩЕСТВА 48/80, НАСТУПАЛО ЧЕРЕЗ 12 МИН.

рис.1. действие нп и мп-1 на высвобождение гнстлмина из тк,вызванное веиествсм 43/ео.

ПО ОСИ АБСЦИСС -- КОНЦЕНТРАЦИЯ ЬЕЦЕСТВА 48/80 (МКГ/мл) ПО ОСИ ОРДИНАТ - ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГИСТДМИНА В 7. 2 - КОНТРОЛЬ; С. ПРИСУТСТВИИ НП В КОНЦЕНТРАЦИИ 3,125 мкП (2), 6,25 м^М (3), В ПРИСУТСТВИЯМИ-I В КОНЦЕНТРАЦИИ О,¿25 мкм <4>, 1,25 мкм (5).

ПРЕИНКУБАЦИИ. ВНЕСЕНИЕ В СРЕДУ ИНКУБАЦИИ ГЛЮКОЗЫ, КАК СУБСТРАТА ГЛИКОЛИЗА, НЕ УСТРАНЯЛО ХАРАКТЕРА ТОРМОЗЯЩЕГО ДЕЙСТВИЯ МП-1. ЭТО НОЖЕ Г СВИДЕТЕЛЬСТВОВАТЬ О ТОМ, ЧТО ИНГИЕИРУЮЦИИ ЭФФЕКТ МП-1 НЕ СОПРЯЖЕН С БЛОКАДОЙ ЭНЕРГОЗАЕИСИМОГО ЭТАПА СЕКРЕЦИИ ГИСТАМИНА / ГУЩИН И.С.и др., 1975 /. ТАКОЙ ХАРАКТЕР ДЕЙСТВИЯ МП-1 НА ТК ПРИНЦИПИАЛЬНО отличен ОТ ЭНЕРГОЗАВИСИМОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ЭТОЙ ФРАКЦИИ НА С.ф ЧЕЛОВЕКА. ИТАК, ПОЛУЧЕННЫЕ ДАННЫЕ СВИДЕТЕЛЬСТВУЮТ О ТОМ, ЧТО МП-1 МОЖЕТ ОКАЗЫВАТЬ ДВОЙНОЕ ДЕЙСТВИЕ НА КЛЕТКИ-МИШЕНИ АЛЛЕРГИИ, А ИМСНгО, ЭФФЕКТОРНОЕ И АКТИВИРУЮЩЕЕ.

С С^.д/щщил ЭКСПЕРИМЕНТАХ ИЗУЧАЛИ СПЕЦИФИЧЕСКУЮ АЛЛЕРГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ КОМПОНЕНТОВ КЛЕТКИ ГРИБА НА МОДЕЛИ ГШ К С.АШ1САыа.

ПОМОЩЬ)« РЕАКЦИИ ПкА ВЫЯВЛЕНО, ЧТО СПОСОБНОСТЬЮ ВЫЯВЛЯТЬ 1дЕ-АН-Ti.iT ЕЛА ОБЛАДАЛА ТОЛЬКО ФРАКЦИЯ ЦБ. ПРИ ЭТОМ, БЕЛОК В ШИРОКИХ ПРЕДЕЛАХ ДОЗ (10-2000 Ж;Г> НЕ ВЫЗЫВАЛ НЕСПЕЦИфИЧЕСКИС РЕАКЦИИ ПП ПРИ ВНУТРИКОЖНОН ВВЕДЕНИИ ИХ ИНТАКТНЫМ КРЫСАМ. ИЗУЧЕНИЕ ^'¡НАМИКИ НАКОПЛЕНИЯ 1дЕ~АНТИТЕЛ, СПЕЦИФИЧНЫХ К ЦБ ВЫЯВИЛО, ЧТО ОНИ ОСНАРУ-

жиьдлись ухе с ранние сроки после перешл иммунизации и лш.тигали

МАКСИМУМА К ТРЕТЬЕЙ НЕДЕЛИ ПОСЛЕ ВТОРОЙ ИММУНИЗАЦИИ. ! •ЕяГинОЬые.

IдБ-АНТИТЕЛА В НАШИХ ОПЫТАХ БЫЛИ СПЕЦИФИЧНЫ К ДВУМ КОМПОНЕНТАМ: ЦБ И КГП. ПРИЧЕМ, НАКОПЛЕНИЕ ЭТИХ АНТИТЕЛ,СПЕЦИФИЧНЫХ К ЦБ НАБЛЮДАЛОСЬ УЖЕ ПОСЛЕ ПЕРВОЙ ИММУНИЗАЦИИ, ТО АНТИТЕЛА, СПЕЦИФИЧНЫЕ К КГП ОБНАРУЖИВАЛИСЬ ЛИШЬ ПОСЛЕ ПОВТОРНОЙ ИММУНИЗАЦИИ. РЕАГИНОВЫЕ АНТИТЕЛА СПЕЦИФИЧНЫЕ К МП-Г И НП В НАШИХ ОПЫТАХ ВЫЯВЛЕНЫ НЕ БЫЛИ, НО ПРИ ЭТОМ МП-1 В ДОЗЕ 13+3, ОЬ МКГ И ВЫШЕ ВЫЗЫВАЛ АНАфИЛАКТОИД-НЫЕ КОЖНЫЕ РЕАКЦИИ У ИНТАКТНЫХ ЖИВОТНЫХ.

ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СПОСОБНОСТИ ОТДЕЛЬНЫХ КОМПОНЕНТОВ КЛЕТКИ ГРИБА ИНДУЦИРОВАТЬ РЕАГИНОВЫИ ОТВЕТ, В СЛЕДУН1ШЕИ СЕРИИ ОПЫТОВ МЫШАМ СВА ВВОДИЛИ ВНУТРИБРЮШИННО 200 МКГ ПРЕПАРАТА ИЗУЧАЕМОЙ фракЦИИ В СМЕСИ С 5 МГ ГИДРООКИСИ АЛЛЮМИНИЯ. ИНТЕНСИВНОСТЬ РЕАГИНОВО-ГО ОТВЕТА ОЦЕНИВАЛИ В РЕАКЦИЯХ ПКА, ИСПОЛЬЗУЯ ДЛЯ РАЗРЕШАЮЩЕГО ВВЕДЕНИЯ АНТИГЕНА В КАЖДОМ СЛУЧАЕ СООТВЕТСТВУЮЩУЮ ФРАКЦИИ ГРИБА. В РЕЗУЛЬТАТЕ, ИММУНОГЕННАЯ АКТИВНОСТЬ БЫЛА ВЫЯВЛЕНА ТОЛЬКО У ФРАКЦИИ ЦБ. ПРИ ЭТОМ, ХАРАКТЕР И ДИНАМИКА НАКОПЛЕНИЯ IgE И IgO-PEA-ГИНОБЫХ АНТИТЕЛ ПРИ ИММУНИЗАЦИИ РАСТВОРИМЫМ ОЧИЩЕННЫМ ЦБ БЫЛИ СХОЖИ С ТАКОВЫМИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ВАКЦИНЫ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ СОБОЙ ГОМОГЕНАТ КЛЕТОК С.ALBICANS.

ПОЛУЧЕННЫЕ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТА РЕЗУЛЬТАТЫ ПОЗВОЛИЛИ С ДОСТАТОЧНОЙ УВЕРЕННОСТЬЮ ПРЕДПОЛОЖИТЬ О ПРЕИМУЩЕСТВЕ ФРАКЦИИ ЦБ, ПО СРАВНЕНИЮ С ДРУГИМИ ИССЛЕДОВАННЫМИ НАМИ КОМПОНЕНТАМИ ГРИБА, В ИСПОЛЬЗОВАНИИ ЕГО КАК ДИАГНОСТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА. ДЛЯ ПОДТВЕРЖДЕНИЯ ТАКОГО ПРЕДПОЛОЖЕНИЯ НАМИ БЫЛА ПРОВЕДЕНА АПРОБАЦИЯ ЦБ КАК АЛЛЕРГЕННОГО ПРЕПАРАТА В КОЖНОМ ПРИК-ТЕСТЕ И РЕАКЦИИ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГИСТАМИНА ИЗ БАЗОфИЛОВ ЧЕТЫРЕХ ГРУПП БОЛЬНЫХ И здоровы;; ЛИЦ. РЕЗУЛЬТАТЫ ПРЕДСТАВЛЕНЫ В ТАБЛИЦЕ 3.

Б ГРУППЕ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ РЕАКЦИИ ГНТ НА ЦБ БЫЛИ ОТРИЦАТЕЛЬНЫМИ КАК IN VIVO ТАК И IN VITRO. РЕЗУЛЬТАТЫ КОЖНЫХ ПРОБ ПО ГНТ И РЕАКЦИИ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГА СОВПАДАЛИ ТАКЖЕ В ГРУППЕ БОЛЬНЫХ ВИСЦЕРАЛЬНЫМИ ФОРМАМИ КАНДИДОЗА. ОДНАКО, ДОСТОВЕРНО ЗНАЧИМОГО СОВПАДЕНИЯ (Р>0,05) ЭТИХ РЕАКЦИИ НЕ НАБЛЮДАЛИ В ГРУППАХ БОЛЬНЫХ ХККС И КАНДИ ДВЗСМ ГЕНИТАЛИИ. У «ТОПИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОЖНЫЕ РЕАКЦИИ НА 20 МИН НАБЛЮДАЛИ У ПОЛОВИНЫ ОБСЛЕДОВАННЫХ, В ТО ВРЕМЯ КАК РЕАКЦИИ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГА БЫЛИ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫМИ ЛИШЬ В 20"/. СЛУЧАЕВ. МОЖНО ПРЕДПОЛОЖИТЬ, ЧТО В БОЛЬШИНСТВЕ СЛУЧАЕВ, КОЖНЫЕ РЕАКЦИИ БЫЛИ ОБУСЛОВЛЕНЫ IgS -РЕАГИНОВЫМИ АНТИТЕЛАМИ, КОТОРЫЕ В УСЛОВИЯХ IN VITRO ПРИ ВЫДЕЛЕНИИ БАЗОфИЛОВ СМЫВАЮТСЯ С ИХ ПОВЕРХНОСТИ / PARISH W.Е.,1931/. У БОЛЬНЫХ С РАЗЛИЧНЫМИ ФОРМАМИ КАНДИДОЗА НЕ БЫЛО ВЫЯВЛЕНО ЗНАЧИМЫХ РАЗЛИЧИИ <P>Q,QS) В КОЛИЧЕСТВЕ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ РЕ-

ТАБЛИЦА 3

сравнительные результаты испытания цб аля выявления специфических

РЕАКЦИИ ГНГ

! • . 1 группа кол-во число положительных реакции

' обследованных 1 1 1 1 ♦ 1

в прик-тесте I всего ! в т.ч.гнт в реакции 1 высвобож- ! дения га '

■ ! 1. больные хккс 1 9 I 5 ! 0 б 1

• 2. вольные ВИСЦЕ- 1

1 ральнуми формами 7 У ! 3 5 !

! кандидсза 1

' 3. больные канди- с • дозом гениталии 1 5 1 4 ? 1 • * 3 !

! 4. сольные ат0г1иеи 1 20 1 12 ! 10 4 I

1 ; 5. практически 1 1 1 1 ' 0 0 1

1 здоровые > 1 1

АКЦИИ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГА НА АЛЛЕРГЕН, В 10 XX ВРЕМЯ, ИХ ЧИСЛО В ГРУППЕ АТОНИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ БЫЛО ЗНАЧИТЕЛЬНО НИЖЕ (Р<0,05) ЧЁМ У БОЛЬНЫХ КАНЯИДОЗОМ. СТЕПЕНЬ МАКСИМАЛЬНОГО ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГА и дозы АЛЛЕРГЕНА, ДОСТАТОЧНЫЕ ДЛЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ТАКОГО ДЕЙСТВИЯ ВО ВСЕХ ГРУППАХ РОЛЬНЫХ СУЩЕСТВЕННО НЕ РАЗЛИЧАЛИСЬ И РАБОЧАЯ ДОЗА ЦБ В ЕАЗОфИЛЬНОМ ТЕСТЕ СОСТАВИЛА 125 «КГ/МЛ.

ПИ МАТЕРИАЛЫ СВИДЕТЕЛЬСТВУЮТ ОБ ОДНОТИПНОМ И ОД-

ИОЛНАЧНОМ ВОЗДЕЙСТВИЙ ЦБ НА БФ ЧЕЛОВЕКА, МЕХАНИЗМ КОТОРОГО ОПОСРЕДУЕТСЯ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕМ АЛЛЕРГЕНА СО СПЕЦИФИЧЕСКИМИ 1дЕ, ФИКСИРОВАННЫМИ НА ПОВЕРХНОСТИ ЭТИХ КЛЕТОК. ТАКИМ ОБРАЗОМ, ЦБ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ЕГО В КАЧЕСТВЕ АЛЛЕРГЕНА ДЛЯ ПОСТАНОВКИ КОЖНЫХ ПРОБ УКОЛЬНЫМ МЕТОДОМ, ДАВАЛ ВОЗМОЖНОСТЬ ВЫЯВЛЯТЬ РЕАКЦИИ ГНТ ОПОСРЕДОВАННЫЕ КАК 1дЕ, ТАК, ПО-ВИДИМОМУ, И 1уВ -АНТИ1ЕЛАМИ. БА'ЗОфИЛЬ

4

НЫИ ТЕСТ ВЫЯВЛЯЛ ТОЛЬКО I(}Е-ОПОСРЕДОВАННЫЕ РЕАКЦИИ.

выводы

1. ОСНОВНЫМИ КОМПОНЕНТАМИ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ЭКСТРАКТОВ С.ALBICANS, РАЗДЕЛЕННЫХ ПО ПРИНЦИПУ И30ЭЛЕКТРИЧЕСК0Г0 ФОКУСИРОВАНИЯ, ЯВЛЯЮТСЯ МАННАНПРОТЕИН С М.м=ШО «Да И Р1=7,0; МАННАНПРОТЕИН С М.м-45 кДа; НЕЙТРАЛЬНЫЙ ПРОТЕИН С М.м=30 кйа И Р1=7,0; КИСЛЫЕ ГЛИКОПРОТЕИНЫ С М.м= 35 кДа И Р1=3,5-4,5; ПЕПТИД С М.м=- 20 И 10 кДа И Р1=9,0; ЦИ-ТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ БЕЛКИ С М.м= 47 кДа И Р1=4,8-5,8.

2. КОМПОНЕНТЫ С.ALBICANS НЕ ОБЛАДАЮТ ЦИТОТОКСИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ НА КЛЕТКИ-МИШЕНИ АЛЛЕРГИИ.

3. ПЕПТИД КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ ГРИБА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ДОЗЫ ВЫСВОБОЖДАЕТ ГА ИЗ ТК КРЫС. ЕГО ГВД ТОРМОЗИТСЯ В УСЛОВИЯХ ТОРМОЖЕНИЯ ЭНЕРГОЗАВИСИМОГО ЭТАПА СЕКРЕЦИИ ПОСРЕДСТВОМ ПАПАВЕРИНА И ИОДАЦЕ-ТАТА.

4. МАННАНПРОТЕИН С М.м=ЮО кДа ОБЛАДАЕТ АНАфИЛАКТОИДНОИ АКТИВНОСТЬЮ, ОПОСРЕДУЯ ЛОЖНОПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОЖНЫЕ РЕАКЦИИ НЕМЕДЛЕННОГО ТИПА И ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ГА ИЗ Бф ЧЕЛОВЕКА.

5. МАННАНППРОТЕИН В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ДОЗЫ ТОРМОЗИТ, А НЕЙТРАЛЬНЫЙ ПРОТЕИН УСИЛИВАЕТ СЕКРЕЦИЮ ГА ИЗ ТК КРЫС, ВЫЗВАННУЮ ВЕЩЕСТВОМ

4в/аа.

6. АЛЛЕРГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ ОБЛАДАЮТ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ БЕЛКИ, СПОСОБНЫЕ ИНДУЦИРОВАТЬ И ВЫЯВЛЯТЬ РЕАГИНОВЫЕ АНТИТЕЛА Igt. И JgG, А ТАКЖЕ КИСЛЫЕ ГЛИКОПРОТЕИНЫ, СПОСОБНЫЕ ВЫЯВЛЯТЬ РЕАГИН01;ЫЕ IgG-АНТИТЕЛА ИНДУЦИРОВАННЫЕ ГРИБОМ С.ALBICANS.

7. ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИИ БЕЛОК МОЖЕТ БЫТЬ РЕКОМЕНДОВАН ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КАЧЕСТВЕ АЛЛЕРГЕННОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ГНТ К С.ALBICANS В РЕАКЦИЯХ IN VIVO И IN VITRO.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1.АЛЛЕРГЕННЫЕ СВОЙСТВА КОМПОНЕНТОВ КЛЕТОК CANDIDA ALBICANS/J АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ МЕДИЦИНСКОИ МИКОЛОГИИ:ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ МЕЖДУНАРОДНОГО СИМПОЗИУМА.-ЛЕНИНГРАД, 1987.-С. 52 (СОАВТОР.ПОЛЯНСКИЙ.Е.В)

2. ТЕСТ УКОЛОМ В ДИАГНОСТИКЕ АЛЛЕРГИИ К ГРИБАМ РОДА CANDIDA/i НАУЧНО-МЕДИЦИНСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ "НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКИИ ПРОГРЕСС I ЗДОРОВЬЕ НАСЕЛЕНИЕ" ТЕЗИСЫ ДОКЛАДА.-КАЛУГА, 1987.-С.33-34 «СОАВТОР.КАРАЕВ 3.0., СОБОЛЕВ A.B., ИГНАТЬЕВА С.М.).

3.КАНЦИДОАЛЛЕРГИЯ СРЕДИ РАБОЧИХ ПРЕДПРИЯТИИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО СИНТЕЗА И НАСЕЛЕНИЯ СЕЛИТЕБНОИ ЗОНЫ // X ВСЕСОЮЗНАЯ КОНфЕ-

РЕНЦИЯ "ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИЗУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ ОБ'ЕКГОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ" МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ.-МОСКВА, 19ва,-С.24-25 (СОАВТОР. КАРАЕВ 3.0., БАБЕНКО Г.А.).

4.ПОВЫШЕННАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ОРГАНИЗМА К АНТИГЕНАМ ГРИБОВ f-4 1,1.A CANDIDA // ВСЕСОЮЗНАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ "ПРОИЗВОДСТВО И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КОРМОВОГО ЬЕЛкА: СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ" ТЕЗИСЫ ДОКЛАДА,- ТОМСК, 19Я9.-С.9Ь-93 «СОАВТОР. ФРОЛОВА Е.В., Ь APAEfi 3.Q.).