Взаимодействие Candida albicans с нейтрофилами и эпителиоцитами в экспериментальных системах

Заславская, Майя Исааковна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Взаимодействие Candida albicans с нейтрофилами и эпителиоцитами в экспериментальных системах
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Взаимодействие Candida albicans с нейтрофилами и эпителиоцитами в экспериментальных системах"

00346392G На правах рукописи

J/friUtf^

ЗАСЛАВСКАЯ МАЙЯ ИСААКОВНА

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ CANDIDA ALBICANS СНЕЙТРОФИЛАМИ И ЭПИТЕЛИОЦИТАМИ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ СИСТЕМАХ

03.00.07 - микробиология

14.0036 - аллергология и иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

1 ! " г п "ГГ"

1 U^'ü

Москва-2009

003463926

Работа выполнена на кафедре микробиологии и иммунологии государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Нижегородская государственная медицинская академия Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию РФ»

Научный консультант:

Доктор медицинских наук, Маянский Андрей Николаевич

профессор

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, Шендеров Борис Аркадьевич

профессор

Доктор медицинских наук, Бондаренко Виктор Михайлович

профессор

Доктор медицинских наук, Пинегин Борис Владимирович

профессор

Ведущая организация:

Научно-исследовательский институт медицинской микологии им. П. Н. Кашкина Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования

Защита состоится « о£- » 2009 года в ¡0 "Часов на заседании

диссертационного совета Д 20S.046.01 при Федеральном Государственном учреждении науки «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей н благополучия человека» по адресу: 125212, Москва, ул. Адмирала Макарова, 10.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского

Ученый секретарь диссертационного совета, д.б.н.

Комбарова С. Ю,

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИССЕРТАЦИИ

Актуальность проблемы

В настоящее время наблюдается рост грибковых оппортунистических инфекций, среди которых значительную часть составляет кандидоз (Рахманова А.Г. и соавт., 2000; Блинов Н. П., 2001; Сергеев А. Ю., Сергеев Ю.В., 2001, Лебедева Т.Н., 2004; Лесовой B.C., Липницкий А.В. 2008), вызываемый, преимущественно, Candida albicans (Бурова С.А., Воинова Г.В., 1997; Сергеев А. Ю., Сергеев Ю.В., 2001, Лесовой B.C. и соавт., 2003; Cannon RJD.et al., 1995). Развитие инфекции зависит от вирулентности кандид, состояния колонизируемой ткани и выраженности иммунных реакций (Cannon R.D.et al., 1995). В то же время, остается открытым вопрос о пусковых механизмах кандидоза и взаимодействии различных звеньев иммунитета в ходе заболевания.

Достаточно хорошо изучен спектр факторов патогенности, которые обеспечивают адгезию и инвазию С.albicans (Сергеев А. Ю., Сергеев Ю.В., 2001, Tronchin G. et al., 1991; Chaffin W.Z. et al., 1998; Cannon R.D., Chaffin W.L., 1999). Более патогенной принято считать мицелиальную форму гриба (Odds F.S.,1988), однако не вполне ясно, что способствует ее большей вирулентности по сравнению с дрожжевой формой. Недавно были представлены данные о формировании возбудителем биопленки - резистентной ассоциации С. albicans, состоящей из ги-фальных (мицелиальных) и дрожжевых элементов, а также об устойчивости клинических изолятов кандид к антагонистическому действию лактосодержащих пробиотиков (Рыбальченко О.В., Бондаренко В.М., Добрица В.П., 2008).

Первую линию защиты при кандидозной инвазии обеспечивают факторы слизистых оболочек и опсонофагоцитарные реакции (Махрова Т.В. и соавт., 2003; Гасанова Ф.М., Караев З.О., 2008; Challacombe S. J., 1994; Cannon R.D. et al., 1995; Vazquez-Torres, A. et al., 1997; Kozel, T. R., 1999; Peltroche-Llacsahuanga H. et al., 2000; Romani L.,2000;). Однако, несмотря на значительное число работ, посвященных адгезии и колонизации кандид на слизистых оболочках, недостаточно изучены механизмы регуляции адгезивной фазы инфекционного процесса и роль

отдельных факторов слизистых оболочек. Существуют противоречивые данные о влиянии микрофлоры (Falleiros de Pádua R.A. et al., 2008; Elahi S. et al., 2005; Diebel L.N. et al. , 1999; Nair R.G., Samaranayake L.P., 1996; Holmes A.R., 1995; Bagg J., Silverwood R.,1986; Kennedy M.J., Volz P.A., 1985) и действии эффекторов воспаления (Симбарская М.Л. и др., 2008) на адгезивные реакции кандид. Необходимо также упомянуть и о биологически активных продуктах нейтрофилов (миелопероксидаза, катионные белки, кислые гидролазы, щелочная фосфатаза, простагландины, лизоцим, низкомолекулярные пептиды и др.), входящих в состав мукозальных секретов (Долгушин И.И., Бухарин О.В., 2001; Witko-Sarsat V. et al., 2000; Murav'ev R.A. et al., 2003) и потенциально способных оказывать влияние на прикрепление кандид к эпителию слизистых оболочек.

Кандиды, подобно другим микроорганизмам, способны стимулировать клетки макроорганизма, вызывая синтез цитокинов (Steele С., Fidel P.L.,2002; Schaller М. et al., 2004). Цитокины играют существенную роль при инфекциях, обеспечивая кооперацию между эффекторами клеточного и гуморального иммунитета (Ярилин A.A., 1999, Маянский А.Н., 2003). Несмотря на многочисленные публикации, характеризующие цитокиновую сеть при кандидозной инфекции, мало внимания уделяется цитокинам, которые продуцируются нейтрофилами. В то же время показано, что данные регуляторные молекулы важны для взаимодействия различных звеньев иммунитета на начальном этапе развития инфекции (Долгушин И.И., Бухарин О.В., 2001; Witko-Sarsat V., 2000).

Немаловажную роль в элиминации С. albicans играет биоцидность нейтрофилов, которая усиливается после прямых и опсонин-опосредованных взаимодействий фагоцитов с кандидами, в частности, с участием опсонинов альтернативного пути активации комплемента (АПАК) (Ройт А. и соавт., 2000). Отсюда представляется важным изучение эффективности А ПАК-зависимой опсонизации С. albicans и ее функциональных последствий в системе с нейтрофилами.

В настоящее время акцент в изучении патогенеза кандидоза сместился на исследование механизмов регуляции иммунного ответа при инфекции. Особый интерес представляют внутриклеточные сигнальные пути, такие как система нук-

леарного фактора kB (NF-kB) и группа митоген-активированных киназ. Они играют важную роль в регуляции активности генов, отвечающих за адаптивные реакции клеток человека, и вовлечены в продукцию иммунорегуляторных и био-цидных факторов (Маянский А.Н. и соавт., 2007; Tian W. et al., 2000; Так P.P., Firestein G.S., 2001; Tato С. M., Hunter С. A., 2002; Tang N. et al., 2004).

Таким образом, исследование механизмов и факторов, влияющих на взаимоотношение С.albicans с эффекторами первого уровня защиты (мукозальные эпителиоциты, нейтрофилы, система комплемента) позволит расширить представления о причинах развития кандидозной инфекции и возможных путях ее регуляции.

Широкое распространение штаммов С. albicans, обладающих резистентностью к антибиотикам (Выборнова И.В., и др., 2008; Анкирская A.C., и др., 2006; Арзуманян В.Г., Семенов Б.Ф., 2001; Cualco L. et al., 2007; Baddly J.W., Moser S.A., 2004), выдвигает еще одну задачу: поиск фунгицидных (биоцидных) средств, позволяющих преодолеть лекарственную устойчивость кандид.

Цель настоящего исследования

Определить условия и факторы, влияющие на взаимодействие С.albicans с эпите-лиоцитами слизистых оболочек, нейтрофилами и комплементом, и изучить механизмы их действия.

Задачи исследования

1. Сравнить нешрофил - стимулирующую активность дрожжевой и мицелиальной форм С.albicans.

2. Оценить активность C.albicans в системе альтернативного пути активации комплемента.

3. Изучить функциональные последствия внутрисосудистой дестабилизации крови, индуцированной С. albicans, в системе нейтрофильного фагоцитоза.

4. Охарактеризовать набор факторов и условий, влияющих на адгезию С. albicans к эпителиоцитам слизистых оболочек.

5. Определить значимость активации внутриклеточных сигнальных путей, сопряженных с нуклеарным фактором кВ и системой митогенактивированных киназ для нейтрофилов и буквальных эпителиоцитов при взаимодействии с С. albicans.

6. Оценить эффект некогерентного импульсного излучения на C.albicans в экспериментальных системах in vitro и in vivo.

Научная новизна

Получены новые сведения о патогенности кандид, реализуемой в системах с нейтрофилами, комплементом и мукозальными эпителиоцитами.

Впервые показано, что мицелиальная форма С. albicans обладает большей вирулентностью, чем дрожжевая, реализуемой в системах с нейтрофилами. Мицелиальная форма слабее индуцирует биоцидность фагоцитов и активнее способствует продукции нейтрофилами молекул, дестабилизирующих гомеостаз.

Установлена антиопсоническая активность C.albicans в системе альтернативного пути активации комплемента и определены функциональные последствия данного эффекта при опсонин-опосредованных взаимодействиях кандид с нейтрофилами.

Выявлен и впервые исследован феномен «острой мобилизационной блокады» нейтрофилов, проявляющийся в снижении миграции полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЛ) в зону воспаления в условиях, имитирующих состояние кан-дидемии (внутрисосудистая дестабилизация крови).

Установлено, что адгезия С. albicans к эпителиоцитам зависит от интенсивности метаболизма, синтеза белка и реактивности цитоскелета буккальных клеток. Показано, что эффективность адгезии С. albicans на эпителиоцитах зависит от интенсивности синтеза белка клетками кандид. Определен вклад различных компонентов мукозальных секретов и эффекторов воспалительного процесса в реализацию адгезии С. albicans на клетках эпителия слизистых оболочек. Показано ингибирующее влияние секреторных метаболитов Staphylococcus aureus на адгезивность С. albicans.

Определен вклад внутриклеточных сигнальных путей, связанных с нуклеар-ным фактором кВ и митогенактивированными киназами (ERK1/2 и р38), в реализацию функционального потенциала нейтрофилов и эпителиоцитов при их взаимодействии с С. albicans.

Впервые выявлен фунгицидный эффект некогерентного импульсного излучения в отношении С. albicans. Определены основные факторы и механизмы био-цидного эффекта некогерентного импульсного излучения.

Практическая значимость

Оптимизирована экспериментальная тест-система для изучения адгезии С. albicans на эпителиальных клетках. Определен ряд факторов, влияющих на адгезию в системе «С. albicans - буккальные эпителиоциты». Снижение адгезивной активности кандид под действием ингибирующих факторов позволит вносить коррективы в комплексное лечение кандидозов.

Создана экспериментальная модель для изучения функционального потенциала экссудативных нейтрофилов на фоне внутрисосудистой дестабилизации крови. Определено влияние внутрисосудистой циркуляции С. albicans на кислород-зависимую биоцидность нейтрофилов в очаге острого воспаления.

Разработана методика изучения нейтрофилов крови с помощью атомной силовой микроскопии.

Результаты проведенных исследований позволили обосновать применение высокоэнергетических импульсных воздействий как средство для дезинфекции и антисептики, которое обладает фунгицидным действием и не влияет на базовые показатели гомеостаза макроорганизма. Получено положительное решение о выдаче патента «Способ дезинфекции биологических субстратов и эпителиальных покровов» от 28.03.2008; № заявки 2007118899/15 (020587).

Результаты испытаний, проведенных совместно с инженерами РФЯЦ ВНИИЭФ (г. Саров), легли в основу устройства для генерации некогерентного импульсного излучения «БРИГ», разработанного в 2004 году.

Внедрение результатов работы

Разработанные методы и экспериментальные тест-системы используются при проведении научных исследований, а также в лабораторно-клинической практике ФГУ «Нижегородский научно-исследовательский кожно-венерологи-ческий институт Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Устройство для генерации некогерентного импульсного излучения «БРИГ», применяют в медико-биологических и электрохимических исследований в РФЯЦ ВНИИЭФ (г. Саров), НИИ им. Скобельцина при МГУ (г. Москва), а также НИИ ПФМ при ГОУ ВПО НижГМА Росздрава (г. Нижний Новгород).

Результаты исследования используются при обучении студентов на кафедре микробиологии и иммунологии и в процессе преподавания на циклах повышения квалификации на кафедре профилактической медицины ЦПК и ППС ГОУ ВПО НижГМА Росздрава (г. Нижний Новгород).

Положения, выносимые на защиту

1. Дрожжевая и мицелиальная форма С. albicans обладают различной способностью активировать нейтрофилы. Мицелиальная форма слабее, чем дрожжевая, индуцирует кислород-зависимую биоцидность нейтрофильных гранулоцитов и вызывает более выраженную продукцию нейтрофилами провоспалительных медиаторов (ИЛ-8, ИЛ-6) и иммунорегуляторов (sHLA-I), дестабилизирующих гомеостаз.

2. C.albicans обладают антиопсонической активностью в системе альтернативного пути активации комплемента, которая детерминируется термолабильными компонентами клеточной стенки грибов. Присутствие кандид в кровяном русле приводит к торможению направленной миграции нейтрофилов в очаги воспаления.

3. С. albicans и эпителиоциты слизистых оболочек активно взаимодействуют друг с другом на этапе адгезии кандид. Контакт С. albicans с буккальными клетками зависит от белоксинтезирующей активности кандид, а также усили-

вается при различных видах метаболической и цитоскелетной активности эпи-телиодитов. Существенный вклад в антиадгезивный эффект ротовой жидкости и сыворотки крови вносят антитела, а также температурозависимые факторы, вызывающие необратимые изменения адгезинов С. albicans.

4. Активация в нейтрофилах внутриклеточных сигнальных путей, связанных с нуклеарным фактором kB и митогенактивированными киназами (ERK1/2 и р38), опосредуется специфическими контактами с C.albicans и ведет к увеличению продукции активных форм кислорода фагоцитами. Кандида-индуцированная активация нуклеарного фактора kB в эпителиоцитах усиливает их адгезивность в отношении C.albicans.

5. Высокоэнергетические импульсные искровые разряды миллисекундной длительности, сопровождающиеся некогерентным излучением (НКИ), вызывают дестабилизирующий эффект, приводящий к гибели C.albicans. Деструктивный эффект НКИ селективен: он более выражен в отношении кандид, чем в отношении клеток макроорганизма.

Апробация материалов диссертации

Диссертация апробировалась на расширенном заседании кафедры микробиологии и иммунологии ГОУ ВПО НижГМА Росздрава (г. Нижний Новгород) 6 ноября 2008г.; протокол № 3.

Основные результаты диссертации докладывались и обсуждались на: IV всесоюзном совещании «Люминесцентный анализ в медицине и биологии и его аппаратурное обеспечение» (Москва, 1992), 5-й Пущинской конференции молодых ученых (Пущино, 2001), международной конференции "Proceeding of the Scanning Probe Microscopy-2001 Workshop" (Нижний Новгород, 2001), 1-м, 2-м, 3-м и 4-м Всероссийских конгрессах по медицинской микологии (Москва, 2003; 2004; 2005; 2006), III конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004); 3-м съезде биофизиков России (Воронеж, 20Ö4), научной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы инфекционной патологии человека, клини-

ческой и прикладной иммунологии» (Уфа, 2004), международном научном семинаре «Высокоинтенсивные физические факторы в биологии, медицине, сельском хозяйстве и экологии» (Саров, 2004), VI Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Озон в биологии и медицине» (Нижний Новгород, 2005), симпозиуме национального альянса дерматологов и косметологов (Санкт-Петербург, 2007),VI, VII, VIH, IX и XI научно-практической конференции по медицинской микологии (Кашкинские чтения) (Санкт-Петербург, 2003; 2004; 2005; 2006; 2008), Первом и Втором съездах Микологов России «Современная микология в России» (Москва, 2002; 2008).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 55 печатных работ, в том числе 19 - в изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки, в материалах съездов, конгрессов, симпозиумов, Всероссийских, международных и региональных конференций и совещаний. Издано 3 учебно-методических пособия для студентов медицинских ВУЗов, рекомендованных УМО. Одна работа выполнена на уровне изобретения (получено положительное решение о выдаче патента РФ).

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 253 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 6 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы. Диссертация иллюстрирована 39 таблицами и 40 рисунками. Библиографический указатель включает 432 источника литературы, в том числе 106 отечественных и 326 зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

Материалы и методы исследования

Использовали живые культуры Candida albicans - штаммы 44lt 67/846, 201, 258, 290, 601, 852, Candida kefyr 17 и Candida guillermondii 6530-2055, Staphylococcus aureus (штаммы 86M, 66M, 7H, 1971) и Staphylococcus epidermidis (51-1, 310-2, 178, CCM 885), Escherichia coli штамм 18M (из коллекций кафедры микробиологии и иммунологии ГОУ ВПО НижГМА Росздрава, НИИ гигиены и проф-патологии МЗ РФ (г. Нижний Новгород) и Всесоюзного центра глубоких микозов (г. С.-Петербург)). Свежевыделенные клинические изоляты (19 штаммов) получали из бактериологических лабораторий НИИ детской гастоэнтерологии МЗ РФ (г. Нижний Новгород) и Нижегородской областной клинической больницы.

Эксперименты выполнены на 593 белых беспородных крысах, самках и самцах, массой 230 ± 30 г и на 104 самках линии Wistar массой 200 ± 10 г, полученных из питомника «Моховая» (Московская обл.). Животные содержались в стационарных условиях вивария на стандартном рационе. Все манипуляции с животными проводили с применением эфирного наркоза.

В работе были исследованы нейтрофилы 523 крыс и 81 человека, а также эпителиоциты слизистых оболочек 254 человек. Секрет ротовой полости/слюну и сыворотку крови получали от здоровых доноров-добровольцев 18-25 лет (415 человек). Проведено свыше 3000 анализов с использованием различных методов изучения реактивности клеток (табл.1)

Культуру С. albicans получали в дрожжевой фазе на агаре Сабуро (24 часа, 37°С) (ННПЦ ГИП, г. Оболенск). Посевы смывали, дважды отмывали (1000g, 15 мин) десятикратным объемом забуференного (рН 7,2-7,4) физиологического раствора (ЗФР), удаляли клеточные агрегаты центрифугированием (40 g, 2 мин) и ре-суспендировали в ЗФР в концентрации 107 - 109 клеток/мл (в зависимости от эксперимента). Концентрацию кандид определяли спектрофотометрически.

Мицелиальную форму кандид получали по методу Заславской М.И. и со-авт. (2006) (рис. 1а). Гифалыше элементы и дрожжеподобные клетки С. albicans использовали в концентрации, эквивалентной по сухому весу.

Таблица 1.

Методы оценки реактивности / функциональной активности клеток, использованные при выполнении диссертационной работы

Метод Автор / техника исследования Объем исследований

1 2 3

Оценка люминол-зависимой хемшпоминесценции нейтро-филов крови или экссудата Tono-Oka T. et al.; 1983; Маянский А. Н., Пикуза О.И.,1993; Заславская М.И., Маянский А.Н, 2006 56 серий исследований

Определение концентрации ин-терлейкинов (ИЛ-8, ИЛ-6) методом ИФА Маянский Н.А. и соавт., 2000; Заславская М.И. и соавт. 2006 Набор реагентов для ИФА (НПО «Цитокин», г. С.-Петербург) 9 серий исследований

Определение растворимых молекул НЬА-1 методом ИФА Заславская М.И. и соавт. 2006 Новиков ВЗ., 1996 Набор реагентов для ИФА (ННИЭМ, Нижний Новгород) 7 серий исследований

Определение рецепторзависи-мой (СЗЬ/ ¡СЗЬ-, ^в-) и неспецифической адгезии нейтрофи-лов на гранулах искусственных сорбентов (рис. 16) Чеботарь И.В. и соавт., 1991 325 экспериментов

Оценка активности кандид в системе альтернативного пути активации комплемента Заславская М.И. и соавт., 2004 16 серий исследований

Оценка интраплантарного воспаления у крыс Заславская М.И., Маянский А.Н.; 2006 3 серии исследований

Оценка спонтанной миграции нейтрофилов David J.R. et al.; 1964 20 экспериментов

1 2 3

Определение индекса естественной колонизации буккаль-ных эпителиоцитов Маянский А.Н. и соавт., 1999 273 препарата

Определение искусственной колонизация кандид на эпите-лиоцитах Сох F., 1983; Darwazeh A.M. et al.; 1991; Маянский А.Н. и соавт.,2002 1548 препаратов

Оценка прочности адгезии кандид на эпителиоцитах Маянский А.Н. и соавт.; 2003 11 экспериментов

Выделение чистой фракции нейтрофилов крови проводили по методу Подо-синникова И.С. и соавт. (1981).

Первичную 18-часовую чистую культуру нейтрофилов крови получали при культивировании в среде ДМЭМ ранее описанным способом (Маянский Н.А., Заславская М.И., Маянский А.Н, 2000).

Рис.1, а - мицелиальная форма С. albicans штамм 601. Окраска азуром А. Увеличение х 600.

б - адгезия нейтрофилов на гранулах СЗЬ-сефадекса. Увеличение х80.

Опсонизацию кандид и зимозана проводили цельной сывороткой, а также в режиме сорбции СЗЬЛСЗЬ- и IgG-молекул (Маянский А.Н. и соавт., 1989; Заславская М.И., Маянский А.Н.; 2006)

Топографию нейтрофилов исследовали с помощью сканирующего зондово-го микроскопа TopoMetrix SPMLab (США) в НИОЦ СЗМ (Н.Новгород). Работа на сканирующем зондовом микроскопе выполнена совместно с научным сотрудником центра - Гущиной Ю.Ю.

Изучение активности кандид и зимозана в системе альтернативного пути активации комплемента (АПАК) проводили с сывороткой, где был возможен только альтернативный путь активации (Kozel Т. R, et al., 1987).

Искусственную колонизацию кандид на эпителиоцитах осуществляли способом, описанным ранее (Маянский А.Н. и соавт.,2002). Определяли индекс адгезии, т.е. среднее количество кандид в пересчете на один эпителиоцит (канд/эп) после просмотра 100 эпителиальных клеток. Эксперименты по оценке адгезивных реакций в системе «Candida albicans - эпителиоциты» выполнены совместно с сотрудниками ГОУ ВПО НижГМА Росздрава (г.Нижний Новгород): асс. Махровой Т.В., доц. Салиной Е.В., асс. Луковой О.А. (каф. микробиологии и иммунологии) и асс. каф. госпитальной педиатрии Абаджиди М.А. при непосредственном участии автора.

Оценку влияния различных факторов на адгезию в системе «C.albicans-буккальные эпителиоциты» определяли после предварительной обработки клеток соответствующими реактивами с последующей отмывкой ЗФР. Нековаленто связанные компоненты удаляли с поверхности клеток раствором 0,1% додецилсуль-фата натрия (ДЦС) (Kozel T.R. et al., 1987).

Экстракт нейтрофилов, стандартизованный по миелопероксидазе, получали, используя обработку клеток 0,1% тритоном Х-100 (Suzuki К. et al., 1983).

Сыворотку и слюну, истощенные по антителам к кандидам получали способом, описанным ранее (Махрова Т.В. и соавт.; 2005). Полноту истощения субстрата (слюны, сыворотки) по антителам к кандидам оценивали в реакции энзим-меченых антител по методу Астафьева Д.Г. (1987).

Оценку естественной колонизации проводили путем подсчёта бактериальных клеток, адгезированных на эпителиоцитах. Для этого из суспензии эпителио-цитов готовили мазки, фиксировали метанолом (10 мин) и окрашивали 0,25% водным раствором азура A ("Sigma", США). Индекс естественной колонизации оценивали по числу бактериальных клеток в пересчёте на один эпителиоцит (бакт/эп). Учитывали средний результат после подсчета 100 эпителиоцитов.

Блокаду NF-kB и внутриклеточных митоген-активированных киназ ERK1/2 и р38 в нейтрофилах и эпителиоцитах проводили путем инкубации клеток с соответствующими ингибиторами (Заславская М.И., 2005; Заславская М.И., Маян-ский А.Н., 2007).

Моделирование орального кандидоза у крыс осуществляли по методу Sa-maranayake Y.H. et al. (2001).

Некогерентное импульсное излучение (НКИ) инфракрасного, видимого и ультрафиолетового диапазона получали с помощью генератора высокоэнергетических импульсов (ВНИИЭФ, г. Саров) (Спиров Г.М., и соавт., 2005). Напряженность электромагнитного поля между электродами достигала 100 кВ/м, ток в канале искрового разряда - 1 кА. Источник генерации искровых разрядов работал с заданным распределением импульсов во времени в режиме с частотой 1 Гц (1 имп/сек). Длительность каждого разряда составляла 5-20 мсек, энергия - 5Дж в одном разряде. Объекты помещали в зоне излучения на расстоянии 2,0-2,5 см от электродов генератора НКИ. В экспериментах in vitro (16 серий экспериментов) использовали суспензию кандид (5-Ю4 кл/мл) или эпителиоцитов в ЗФР. Толщина слоя клеточной суспензии при обработке НКИ составляла 2-3 мм. Жизнеспособность клеток после воздействия НКИ определяли по трипановому тесту, а также сравнивая количество КОЕ кандид, выросших при посеве из опытных и контрольных образцов. Для оценки эффекта НКИ in vivo были проведены испытания (5 серий исследований) на лабораторных крысах линии Wistar.

Подсчет лейкоцитарной формулы крови осуществляли по общепринятой методике (Меньшиков В.В.; 1987).

Уровень сиаловых кислот в суспензии клеток определяли с помощью набора реагентов «Сиалотест-100» (НПО Экосервис, С.-Петербург) согласно рекомендациям фирмы-производителя.

Уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ) мембран клеток С. albicans эритроцитов и плазмы крови человека определяли методом хемилюминесценции (Кузьмина Е.И., 1983).

Статистическую обработку данных проводили по общепринятой методике (Реброва О.Ю., 2003). Рассчитывали среднюю арифметическую и ее стандартную ошибку (М ± ш). Достоверность различий оценивали при помощи критериев Стьюдента (t) или Вилкоксона-Манна-Уитни. Различия расценивали как статистически значимые при р<0,05. Взаимосвязь параметров оценивалась методом корреляционного анализа, определяя коэффициент ранговой корреляции Спирме-на (rs). Результаты исследования обрабатывались с использованием прикладных программ EXEL и «STADIA 4.51».

Результаты исследования и их обсуждение

Нейтрофил-стимулирующая активность дрожжевой и мицелиальной форм Candida albicans

Сравнивали способность дрожжевой и мицелиальной форм C.albicans стимулировать продукцию нейтрофилами активных форм кислорода, цитокинов (ИЛ-8, ИЛ-6) и образование растворимых форм мембранных антигенов HLA-I класса.

Все тест-культуры C.albicans (штаммы №№ 258, 290, 852,601) в дрожжевой фазе вызывали более сильную люминол-зависимую хемилюминесценцию (ХЛ) нейтрофилов по сравнению с мицелиальными элементами (табл.2).

Таблица 2

Показатели кандида-индуцированной ХЛ нейтрофилов в системах с дрожжевой и мицелиальной формами Candida albicans, М ±m

Штаммы С. albicans ХЛ в системах с дрожжевой формой (ХЛ-ДФ) (103 имп/мин) ХЛ в системах с мицелиальной формой (ХЛ-МФ) (103 имп/мин) Отношение ХЛ-МФ/ ХЛ-ДФ (количество раз)

258 179,5 ±12,8 153,2 ± 8,9 1,17 ±0,03

290 247,8 ± 96,8 116,4 ± 42,6* 1,91 ±0,13

601 156,8 ± 18,4 124,9 ±11,8 1,76 ±0,23

852 126,1 ± 10,3 97,6 ±4,6 1,69 ±0,17

* - достоверные отличия относительно дрожжевой формы (р <0,05)

Так как уровень индуцированной ХЛ нейтрофилов коррелирует со способностью фагоцитов вступать в адгезивные реакции (Bellavite P. et. al., 1994), была исследована вовлеченность специфических и неспецифических адгезинов разных морфологических форм в стимуляцию кислород-зависимых реакций нейтрофилов. После термической обработки (70°С, 40 мин) дрожжевые элементы тест-культуры C.albicans штамм 601 значительно слабее, чем мицелиальные, индуцировали ХЛ нейтрофилов (0,6 ± 0,2-103 имп/мин против 9,6 ± 3,2-103 имп/мин; р<0,05). Это указывало на то, что С. albicans в дрожжевой фазе обладают более широким набором термолабильных адгезинов (предположительно, белковой при-

роды), обеспечивающих контакт с нейтрофилами. Белковую природу адгезинов подтверждало и то, что после обработки кандид трипсином (1мг/мл, 1ч, 37°С; "Spopha",Чехия) наблюдалось снижение нейтрофил-стимулирующей активности дрожжевой формы в 1,3 ± ОД раза (р<0,05); такая же обработка не влияла на ней-трофил-стимулирующую активность псевдомицелия.

Формирование нейтрофилами псевдоподий после контакта с кандидами исследовали с помощью атомного силового микроскопа TopoMetrix SPMLab (США). Было показано, что образование псевдоподий нейтрофилами наступало через 5 мин после контакта с С. albicans, и не зависело от морфологической формы кандид.

Ингибирование активности микротрубочек нейтрофилов колхицином (1мкг/мл, 30 мин, 37°С; "Sigma", США) приводило к достоверному (р<0,05) снижению нейтрофил-стимулирующей активности С. albicans - в 1,71 ± 0,03 для дрожжевой формы и в 1,44 ± 0,04 раз для псевдомицелия. Подавление активности микрофиламентов цитохалазином В (1мкг/мл, 30 мин, 37°С; "Sigma", США) не меняло реактивности (йХЛ) нейтрофилов по отношению к обоим морфологическими формами кандид. Это означало, что дрожжевая форма сильнее, чем мице-лиальная, влияет на перестройку элементов цитоскелета (микротрубочек), задействованных в фагоцитозе.

Сравнивали способность нейтрофилов активироваться опсонизированными дрожжевыми и гифальными элементами кандид. Дрожжевую или мицелиальную форму С. albicans штамм 601 обрабатывали цельной сывороткой, а также в режиме сорбции СЗЬЛСЗЬ-компонента комплемента или молекул IgG (Заславская М.И., Маянский А.Н.,2006). После обработки цельной сывороткой или ее субкомпонентами (iC3b/C3b-, IgG-) мицелиальная и дрожжевая формы индуцировали сходную XJI нейтрофилов (р>0,05).

Была исследована способность дрожжевых элементов и псевдомицелия С. albicans вызывать продукцию провоспалительных цитокинов ИЛ-8 и ИЛ-6 нейтрофилами in vitro (Заславская М.И., Маянский А.Н., 2006). Отмечен более высо-

кий синтез ИЛ-8 и ИЛ-6 в системах с мицелиальной формой С. albicans штамм 601 (р<0,05) (табл.3).

Таблица 3

Продукция нейтрофилами ИЛ-8, ИЛ-6 и sHLA-1 в системах с дрожжевыми (ДФ) или мицелиальными (МФ) формами Candida albicans штамм 601, М±ш

Кандиды в системе ИЛ-8 (пкг/мл) ИЛ-6 (пкг/мл) зНЬА-1(усл.ед/мл)

Контроль (без кандид) 208,8 ± 23,2 66,9 ± 12,2 43,2 ±4,1

живые ДФ 505,0 ±113,4* 165,3 ± 17,8* 111,6 ±34,5*

живые МФ 934,0 ± 127,8*' ** 221,3 ±28,4*'** 219,7 ±47,8*'**

инактивированные ДФ 392,9 ± 68,8* 141,3 ±32,6* 81,5 ±9,5 *

инактивированные МФ 643,1 ±102,I*'*** 148,2 ±19,4* 191,1 ±20,3*'***

* - достоверные отличия относительно контроля (р <0,05)

** - достоверные отличия относительно системы с живыми ДФ (р <0,05)

*** - достоверные отличия относительно инакивированных ДФ (р <0,05)

Инактивация кандид (70°С, 40 мин) не влияла на лидирующие позиции ги-фальных элементов по синтезу ИЛ-8, но нивелировала их различие в способности индуцировать ИЛ-6. Можно предположить, что более интенсивная продукция нейтрофилами провоспалительных цитокинов в присутствии псевдомицелия может служить дополнительным механизмом сдерживания инвазии и диссеминации кандид.

Инкубация нейтрофилов с различными морфологическими вариантами С.albicans in vitro вызывала увеличение концентрации растворимых форм мембранных антигенов HLAI класса (sHLA-I) (р<0,05). При этом как нативные, так и инактивированные гифы сильнее стимулировали поступление sHLA-I в инкубационную среду, чем дрожжевые элементы (р<0,05) (см. табл.3). Это может указывать на более сильный дестабилизирующий эффект мицелиальной формы С. albicans на Т-зависимые реакции макроорганизма.

Таким образом, гифальные элементы С. albicans слабее, чем дрожжеподоб-ные клетки, стимулирует кислород-зависимую биоцидность фагоцитов, но активнее индуцируют синтез нейтрофилами молекул, дестабилизирующих гомеостаз. Это означает, что мицелиальная форма С. albicans, по сравнению с дрожжевой, обладает большей вирулентностью, реализуемой в системах с нейтрофилами.

Активность С albicans в системе альтернативного пути активации

комплемента

Оценивали вклад альтернативного пути активации комплемента (АПАК) в опсонин-зависимые взаимодействия нейтрофилов с C.albicans. Использовали кандиды в дрожжевой фазе - нативные или опсонизированные в системе АПАК (Заславская М.И., и соавт., 2004). Для сравнения использовали зимозан ("Sigma", США), представляющий собой полисахарид клеточных стенок Saccharomyces cerevisiae, сходный с углеводными компонентами клеточных стенок кандид (Vazquez-Torres A., Balish Е., 1997; Cannon R.D., Chaffin W.L.,1999) и известный как классический активатор АПАК (Pillemer L. et al., 1956). Зимозан использовали в концентрации, эквивалентной сухому весу С. albicans.

Нативные С. albicans сильнее стимулировали XJI нейтрофилов, чем зимозан. Для разных штаммов C.albicans показатели варьировали от 8,7 ± 1,4 -104 имп/мин (штамм 44i) до 30,8 ± 4,1- 104 имп/мин (штамм 67/846). Нейтрофил-стимулирующая активность С. kefyr и С. guillermondii была соответственно 11,3 ± 4,3 • 104 имп/мин и 6,6 ± 3,0 ■ 104 имп/мин. В системе с неопсонизированным зи-мозаном XJI нейтрофилов была самой слабой - 5,5 ± 0,7 • 104 имп/мин.

После опсонизации в системе АПАК живые кандиды имели более низкую (р<0,05) нейтрофил-стимулирующей активность по сравнению с зимозаном, оп-сонизированными в том же режиме (табл.4). Это не было связано с различием в поглощении C.albicans и зимозана нейтрофилами, разрушением опсонических молекул комплемента экзоферментами кандид или различной способностью исследуемых субстратов запускать АПАК (р>0,05).

Опсонизация гретых (убитых) культур С. albicans, приводила к значительному усилению активности нейтрофилов (см. табл. 4). Это указывало на то, что термолабильные компоненты клеточной стенки кандид ответственны за низкую эффективность АПАК-зависимой опсонизации и могут блокировать сорбцию опсонических молекул на поверхности кандид или вызывать деградацию опсонинов системы комплемента.

Таблица 4

Опсоиическая активность кандид и зимозана в системе АПАК, М ± m

Субстраты Кратность усиления ХЛ нейтрофилов в системах с субстратами после опсонизации в системе АПАК (количество раз)

Зимозан 18,8 ±6,9

Кандиды (виды/штаммы): Живая (нативная) Убитая (гретая)

культура культура

C.albicans 601 1,2 ±0,4* 12,0 ±1,8**

C.albicans 67/846 0,9 ±0,3* -

C.albicans 441 3,1 ±0,6* 20,5 ± 2,4**

C.albicans 201 1,3 ±0,4* -

С. kefyr 17 2,4 ± 1,0* -

С. guillermondii 6530-2055 4,9 ± 1,6* 22,0 ± 5,0**

* - достоверность различий относительно зимозана (р<0,05)

** - достоверность различий между живыми и убитыми кандидами (р<0,05)

Острая воспалительная реакция на фоне дестабилизации внутрисосудистого гомеостаза, индуцированного Candida albicans

Процесс нарушения внутрисосудистого гомеостаза был смоделирован внутривенным введением белым беспородным крысам зимозана (10 мг/мл; "Sigma", США) или живых C.albicans штамм 601 (5-108 кл/мл) в 0,2 мл ЗФР (Заславская М.И., Маянский А.Н., 2004; 2006). Спустя 0,5-1-4-24 ч у крыс вызывали асептическое воспаление путем введения в брюшную полость 5 мл стерильного изотонического 10% раствора пептона. Через 4 часа после внутрибрюшинной инъекции (время максимального накопления нейтрофилов в экссудате) животных декапитировали, промывали брюшную полость 20 мл ЗФР, отбирали перитоне-альное содержимое и оценивали гистологические показатели.

Обнаружен феномен, который был обозначен как «острая мобилизационная блокада» нейтрофилов. Он проявлялся в резком сокращении количества нейтрофилов, эмигрировавших в брюшную полость спустя 30-60 мин после внутривенного введения зимозана или C.albicans по сравнению с контролем ( инъекция ЗФР) (р<0,05). Феномен не зависел от природы индуктора местного воспаления:

он был также воспроизведен при введении в брюшную полость лиофилизирован-ных клеточных стенок Staphylococcus aureus, штамм ССМ 885 (5мг/мл) в 5 мл ЗФР (р<0,05).

Для проверки системности реакции была изучена миграционная активность нейтрофилов при моделировании острой воспалительной реакции в подушечках лап у крыс. В качестве раздражителя использовали агрегированный (63°С, ЗОмин) иммуноглобулин человека. Наблюдали снижение интенсивности острой интра-плантарной воспалительной реакции в 1,5 раза в на фоне внутрисосудистой дестабилизации крови (р>0,05).

Феномен «мобилизационной блокады» нейтрофилов не был связан с сокращением внутрисосудистого пула циркулирующих нейтрофилов (р>0,05). Кроме того, на фоне внутрисосудистой дестабилизации нейтрофилы сохраняли способность прикрепляться к объектам, несущим специфические (C3b/iC3b-, IgG-) и неспецифические лиганды, а также способность к спонтанной миграции in vitro.

Поведена оценка функционального состояния очага острого воспаления на фоне нарушения внутрисосудистого гомеостаза, индуцированного С.albicans. Сокращение притока нейтрофилов в очаг воспаления не сопровождалось изменением общего уровня спонтанной и латекс-индуцированной ХЛ (иХЛ) перитонеаль-ного экссудата. В то же время спонтанная ХЛ (сХЛ) отдельных нейтрофилов в экссудате резко усиливалась: 11,1 ± 4,9 -103 имп/мин у экспериментальных крыс и 2,9 ± 0,1 '103 имп/мин в контрольной группе животных (р<0,05). Уровень удельной иХЛ эксудативных нейтрофилов также повышался и составлял 36,9 ± 13,2 •103 имп/мин в контроле и 151,9 ± 69,8 -103 имп/мин в опыте (р<0,05). Повышение иХЛ отдельных фагоцитов говорило о том, что внутрисосудистая циркуляция кандид оказывает стимулирующий эффект на нейтрофилы, усиливая их реактивность (кислород-зависимую биоцидность).

Адгезивные реакции в системе «Candida albicans - эпителиоциты»

На предварительном этапе была разработана экспериментальная тест-система для изучения адгезии С. albicans на эпителиоцитах. Эксперименты пока-

зали отсутствие достоверных различий адгезивных реакций с буккальными эпи-телиоцитами человека между музейными культурами С. albicans и штаммами, выделенными из разных источников (язык, кишечник, влагалище). Для проведения дальнейших исследований был выбран штамм С. albicans 601, который отличался средними, но наиболее постоянными показателями адгезии (рис.2). Была определена оптимальная экспозиция кандид с эпителиоцитами (37°С, 30 мин), при которой результаты эксперимента не зависели от жизнеспособности С. albicans, не давали ко-адгезии кандид и обеспечивали прочность связывания по фи-колл-верографиновому тесту 60,8 ± 9,0 %.

Значение метаболической активности клеток для реализации адгезии в системе «Candida albicans-буккольные эпителиоциты». Опыты проводили с ■ подавлением метаболизма буккальных клеток (4°С), блокадой гликолиза (фторид натрия; 200мМ, 15 мин, 37°С) , ингибированием синтеза белка (циклогексимид, "Sigma", США; 16 мкг/мл, 30 мин, 37°С), при выключении реакций цитоскелета (микротрубочек или микрофиламентов) колхицином или цитохалазином В ("Sigma", США; 1 мг/мл, 30 мин, 37°С). Эксперименты выявили снижение адге-зивности эпителиоцитов на холоду, при торможении гликолиза, подавлении синтеза белка и реакций цитоскелета, что говорило об активной роли эпителиальных клеток при взаимодействии с кандидами (табл.5).

Рис.2. Искусственная колонизация C.albicans штамм 601 на буккальном эпите-лиоците. Окраска азуром А. Увеличение х 1350.

Таблица 5

Уровень адгезии C.albicans штамм 601кандид на эпителиоцитах при различных вариантах метаболической активности клеток, М ± m

Функции эпителиоцитов, подвергавшиеся ингибированию Кандиды в системе Контроль: адгезия кандид наинтактных эпителиоцитах (канд/эп) Адгезия кандид на фоне блокады функции эпителиоцитов

абсолютное значение (канд/эп) % адгезии относительно контроля

Общая метаболическая активность живые 12,2 ±1,3 6,2 ±0,4* 52,2 ± 1,7*

убитые 10,9 ±1,3 5,7 ±0,7* 52,0 ±2,9*

Гликолиз живые 10,1+0,7 4,7 ±0,3* 52,2 ±2,4*

Синтез белка живые 10,2 ±0,6 3,7 ±0,1 * 36,6 ±1,9*

Активность микротрубочек живые 9,5 ±0,6 5,7 ± 1,0 * 60,3 ± 2,2*

убитые 9,6 ± 1,1 8,3 ± 1,2 ** 85,8 ±2,8**

Активность микрофиламентов живые 9,7 ±2,0 5,6 ±1,5* 57,9 + 2,9*

убитые 9,4 ±0,8 8,6 ±1,7** 90,7 ± 4,5**

* - достоверность различий относительно контроля (интактные эпителиоциты) (р<0,05)

' ** - достоверность различий относительно эксперимента с живыми кандидами (р<0,05)

Установлено, что адгезия кандид на буккальных клетках складывается из двух механизмов. Один из них не зависит от уровня метаболической и цитоске-летной активности эпителиоцитов. Взаимодействие между эпителиальными клетками и кандидами, в этом случае носящее пассивный характер, не связано с рецепторами кандид, а определяется неспецифическим механизмами, такими как: гидрофобные, вандерваальсовы и электростатические взаимодействия. Второй механизм является результатом взаимодействия метаболически активных клеток и лучше всего проявляется в физиологичных условиях (37°С).

Эксперименты позволили установить, что блокада цитоскелета эпителиоцитов не меняла уровень адгезии убитых кандид на буккальных клетках, но, в то же время, вызывала существенное снижение адгезии живых кандид в системе (см. табл.5). Это позволило думать о том, что сам процесс закрепления живых кандид способен усиливать адгезивность эпителиоцитов через изменение реактивности элементов цитоскелета буккальных клеток.

Значение метаболической активности кандид для реализации адгезии в системе «Candida albicans-буккольные эпителиоциты». Исследовали значение метаболической активности C.albicans для реализации их адгезии на эпите-лиоцитах. В отличие от клеток человека, адгезивная активность кандид снижалась только при ингибировании синтеза белка. В этом случае, предварительная обработка живых кандид циклогексимидом уменьшала показатель адгезии почти наполовину (42,1 ± 5,2% от контроля с нативными кандидами). Это указывало на то, что адгезивные реакции C.albicans могут определяться как механизмами, не зависящими от метаболизма клеток, так и связанными с белок-синтезирующей активностью самих кандид.

Влияние факторов слюны на адгезивные реакции в системе «Candida albicans-буккольные эпителиоциты». Слюна/ротовая жидкость вызывала снижение адгезии кандид на буккальных клетках в 2,8 раза (р<0,05) (табл.6). Это показывало, что адгезия кандид включает два компонента, один из которых блокируется слюной, а другой не подвержен ее влиянию.

Таблица 6

Влияние цельной и истощенной по антителам к кандидам слюны /сыворотки на адгезию C.albicans штамм 601 к буккальным эпителиоцитам, М ± m

Субстрат для обработки кандид Режим инкубации кандид с субстратом % адгезии относительно контроля Антиадгезивный эффект субстрата (%)

Контроль (нативные кандиды) 37°С - -

Цельная слюна 37°С 36,0 ±3,1* 64,0 ± 8,4*

4°С 45,4 ± 3,6* 55,5 ±3,9*

Истощенная (по антителам) слюна 37°С 75,7 ±11,5 24,3 ±9,4

4°С 90,9 ±0,9** 9,1 ±0,1**

Цельная сыворотка 37°С 26,5 ±1,6* 73,5 ±1,4*

4°С 45,4 ±2,3*/** 54,6 ± 2,7 */**

Истощенная (по антителам) сыворотка 37°С 44,2 ±4,2* 55,8 ± 2,2 *

4°С 87,7 ±1,6** 12,3 ±1,4**

* - достоверность отличий относительно контроля (р<0,05)

** - достоверность различий относительно эксперимента при 37°С (р < 0,05)

После обработки каидид в обычном режиме (37°С, 30 мин) слюной, истощенной по антикандидозным антителам, наблюдали ослабление антаадгезивного эффекта (р<0,05). Следовательно, антитела слюны вносят существенный вклад во взаимоотношения кандид с буккальными клетками, обеспечивая 62% от общего антиадгезивного эффекта ротовой жидкости.

При обработке C.albicans слюной, истощенной по антителам к кандидам, антиадгезивный эффект слюны при 4°С был меньше, чем при 37°С (р< 0,05) (см. табл.6). Обработка кандид 0,1% раствором ДЦС не приводила к восстановлению исходного уровня адгезии. Таким образом, в слюне имеются факторы, отличные от антител, действие которых на кандиды проявляется, во-первых, только при 37°С и, во-вторых, не экранируется нековалентно связанными молекулами. Показано, что температурозависимые антиадгезины слюны не имеют отношения к муцину (р>0,05). Предположительно, речь идет о факторах ферментной природы, которые способны вызывать структурные изменения поверхностных компонентов кандид.

Влияние эффекторов воспаления на адгезивные реакции в системе «Candida albicans-буккольные эпителиоциты». Обработка кандид (30 мин, 37°) экстрактом нейтрофилов (концентрация 30-Ю6 кл/мл) вызывала незначительное повышение уровня адгезии С. albicans на эпителиальных клетках - 136,5 ± 8,0% (р=0,05). Тот же экстракт при обработке СЗЬ-сефадекса G50, Fine (Pharmacia, Швеция), вызывал почти полное снижение СЗЬ-зависимой адгезии нейтрофилов на гранулах сефадекса, что указывало на его выраженную протеолитическую активность.

Экссудат, принимающий участие в воспалении, включает антитела, комплемент и другие элементы, способствующие или препятствующие воспалительной реакции. Это определило круг задач, связанных с изучением сывороточных факторов на адгезивные реакции кандид.

Пул сыворотки вызывал снижение адгезии кандид на буккальных эпителио-цитах в 3,6±0,2 раз (р<0,05). После обработки С. albicans сывороткой, истощенной

кандидами на холоду (удаление антител без активации комплемента) адгезивный эффект снижался в 2,0 ± 0,1 раз (р<0,05). Это говорило о том, что антитела вносят существенный вклад во взаимоотношения кандид с эпителиальными клетками, отвечая примерно за 24% общего антиадгезивного эффекта сыворотки.

Для изучения природы антиадгезивных факторов, не связанных с антителами, проводили обработку С. albicans при 37°С или 4°С сывороткой, истощенной по антителам к кандидам. При 4°С антиадгезивный эффект сыворотки был значительно ниже, чем при 37°С (р<0,05) (см.табл.6). Обработка 0,1 % ДДС не устраняла антиадгезивного эффекта истощенной сыворотки. Следовательно, в сыворотке содержатся факторы, действие которых на кандиды проявляется, во-первых, только при 37°С и, во-вторых, не экранировано нековалентно связанными молекулами. Установлено, что данные факторы не относятся к системе комплемента, поскольку при полной блокаде комплемента (Kozel Т. R, et al., 1987) не менялась антиадгезивная активность сыворотки (р>0,05). Можно предположить, что темпе-ратурозависимое антиадгезивное действие сыворотки связано с другими факторами (возможно, ферментами), структурно модифицирующими адгезины кандид.

Влияние бактериальных факторов на адгезивные реакции в системе «Candida albicans-буккольные эпителиоциты». Кандидоз может протекать как смешанная инфекция, в связи с этим нами изучено влияние метаболитов золотистого и эпидермального стафилококка на взаимоотношения кандид с буккальны-ми клетками.

Метаболиты S. aureus (штаммы 86М, 66М, 7Н, 1971), но не S. epidermidis (штаммы 51-1, 310-2, 178) снижали адгезию кандид на буккальных эпителиоци-тах. При инкубации (60 мин, 37°С) кандид с супернатантами суточных культур золотистого стафилококка (выращенных на жидкой среде ДМЕМ; ГУЛ ИПВЭ, г.Москва) таким действием обладали все четыре штамма стафилококка. Максимальное снижение адгезии (в 2,6 ±0,1 раз) наблюдалось под действием метаболитов штамма 86М. Эффект был необратимым (обработка 0,1% раствором ДДС не возвращала исходной адгезивной активности С. albicans) и предположительно

объяснялся ферментативным действием секреторных продуктов золотистого стафилококка на адгезины кандид. Об этом косвенно свидетельствовало ослабление адгезивной активности кандид при их обработке проназой (комплекс бактериальных протеаз) ("Fluka", Швейцария; 1мг/мл; 1 ч ,37°С).

В то же время, обработка буккальных клеток метаболитами золотистого стафилококка не влияла на жизнеспособность и адгезивность самих эпителиоци-тов.

Адгезивные реакции С. albicans и эпителиоцитов, полученных от доноров разного возраста и из различных источников. Уровень искусственной колонизации С. albicans буккальных эпителиоцитов у взрослых (11,2 ± 2,6) не отличался существенно от показателей у детей 6-8 лет (16,0 ± 5,1). В то же время естественная колонизация нормальной микрофлорой того же эпителия была почти в три раза выше в детском возрасте: 14,3 ± 6,9 у взрослых и 40,6 ±19,0 у детей (р>0,05). Это показывает, что возрастные различия в естественной колонизации буккальных клеток не затрагивают их чувствительности к искусственному заселению факультативной микрофлорой, в частности кандидами.

Эксперименты показали наличие сходной адгезивности мукозальных клеток, взятых из разных биотопов - буккального и вагинального эпителия (р>0,05). Наличие прямой корреляции между показателями искусственной колонизации С. albicans у обоих типов эпителиальных клеток говорит о сходстве их рецептор-ного аппарата, взаимодействующего с кандидам.

Функциональный и морфологический статус эпителиоцитов способен меняться на фоне патологических состояний (Рыжавский Б.Я., Холодок Г.Н., 1995; Хусаинова И.С. и соавт. ,1997; Маянский А.Н. и соавт.,1999; Цепов JI.M. и соавт., 1999). Мы исследовали изменение адгезивных реакций эпителиоцитов слизистых оболочек при поверхностном кандидозе (кандидозный онихомикоз, вагинальный кандидоз) и хронической некандидозной патологии (бронхиальная астма). Уровень естественной колонизации буккальных эпителиоцитов в группе детей (6-12 лет) с кандидозным онихомикозом (17 человек, проходящие лечение в ФГУ «Ни-

жегородский кожно-венерологический научно-исследовательский институт Росз-драва») был вьиде, чем у здоровых (25 человек): 83,6 ± 23,5 бакт/эп и 40,7 ± 16,2 бакт/эп соответственно (р>0,05). Показатели искусственной колонизации были сходными у здоровых детей (14,0 ± 5,1 бает/эп) и у детей с кандидозными поражениями (11,6 ± 4,3 бакт/эп) (р>0,05).

Под наблюдением находилось также 19 детей в возрасте 4-12 лет в периоде обострения бронхиальной астмы (проходившие лечение в стационаре ГУ «Нижегородская областная детская клиническая больница»). Контрольную группу составили 36 практически здоровых детей 5-12 лет. Было обнаружено увеличение адгезивности эпителиоцитов по отношению к С. albicans у детей с бронхиальной астмой. Так, у 30 из 36 здоровых детей показатели адгезии С. albicans на буккаль-ных эпителиоцитах были ниже 10 и в среднем составили 6,8 ± 0,9 канд/эп. Иная картина наблюдалась в группе детей с бронхиальной астмой: лишь в одном из 19 случаев результат оказался ниже 10 при среднем показателе 15,3 ± 2,8 канд/эп (р < 0,05).

Изучение естественной и искусственной колонизации вагинальных эпителиоцитов у здоровых небеременных женщин (15 человек), здоровых беременных женщин (17 человек) и беременных с кандидозом (13 человек), получавших консультации на кафедре акушерства и гинекологии ГУ ВПО «НижГМА Росздрава» (на базе МЛПУ ГКБ №40, Н.Новгород), дало следующие результаты.

У здоровых беременных женщин уровень естественной колонизации (16,6±8,1 бакт/эп) был несколько ниже, чем аналогичные показатели у здоровых небеременных женщин (23,2±10,5 бакт/эп) (р>0,05). Наличие кандида-зависимого воспалительного процесса во влагалище у беременных ассоциировалось с еще более низкими показателями естественной колонизации вагинального эпителия (13,8±6,2 бакт/эп) (р>0,05). Показатели кандида-индуцированной искусственной колонизации у здоровых беременных (7,6±1,3 канд/эп) и больных кандидозом (6,3 ± 1,6 канд/эп) не отличались от показателей у здоровых небеременных женщин (8,4 ± 2,5 канд/эп) (р>0,05).

Причиной такого «расщепления» адгезивных реакций эпителиоцитов у пациентов разных групп может быть изменение морфологии или интенсивности экспрессии рецепторов под влиянием медиаторных (например, цитокиновых) воздействий или ферментов мукозальных секретов на фоне перестройки системного гомеостаза и/или на уровне слизистых оболочек (Weinmeister R.D., Dal Nogare A.R.,1994).

Участие внутриклеточных сигнальных путей во взаимодействии нейтрофнлов и эпителиоцитов с Candida albicans

Изменение реактивности клеток человека в ответ на внеклеточные стимулы опосредуется через внутриклеточные сигнальные пути, осуществляющие передачу активирующего сигнала с поверхности клетки на их генетический аппарат. Показано, что основную транслирующую функцию в клетках выполняют внутриклеточные регуляторы генной транскрипции, такие как нуклеарный (транскрипционный) фактор-кВ (NF-кВ) (Barnes P.J., Karin М., 1997; Jobin Ch., Sartor R.B., 2000; Baldwin A.S., 2001) и митоген-активированные протеинкиназы (MAP-киназы) (Tian W. et al., 2000; Zarubin Т., Han J., 2005).

Для определения значения NF-kB при взаимодействии клеток человека с С. albicans проводили исследования в режиме его подавления путем инкубации (90 мин, 37°С, 100 цМ) нейтрофилов или эпителиоцитов с протеасомным ингибитором - ALLN ("Sigma",США) (Dahan S. et al.,2002; Carlson D.L. et al., 2003). Контролем служили интактные клетки.

Блокада NF-kB приводила к снижению уровня адгезии С. albicans штамм 601 на буккальных эпителиоцитах в 1,7 ± 0,6 раза (р<0,05), что указывало на участие NF-kB в регуляции процессов, обеспечивающих контакт между эпителиоци-тами и кандидами.

На фоне блокады NF-kB отмечено увеличение уровня спонтанной хемилю-минесценции нейтрофилов в 4,6 ± 2,1 раза (р< 0,05). Это указывало на сопряженность NF-kB с базовым уровнем окислительного метаболизма клеток.

Ингибирование NF-kB приводило к уменьшению уровня индуцированной

XJI (иХЛ) нейтрофилов в системах с нативными кандидами в 1,7 ± 0,4 раза по сравнению с контролем (р<0,05). При разрушение белковых составляющих ре-цепторного аппарата С. albicans (прогревание 70°С, 40 мин) иХЛ нейтрофилов при ингибировании NF-kB не отличалась от контроля. Уровень иХЛ снижались также при инкубации фагоцитов (на фоне блокады NF-kB) с кандидами, опсони-зированными IgG (рХ),05). Все это указывало на то, что специфические взаимодействия нейтрофилов с С. albicans находятся под позитивным контролем NF-kB. В то же время, контакт нейтрофилов с кандидами, опосредованных через СЗЬЛСЗb-молекулы, приводил к повышению иХЛ в 1,2 + 0,3 раза (р< 0,05). Мы предположили, что подобный эффект связан с тем, что С. albicans используют уникальный механизм связывания C3b/iC3 b-молекул, после чего последние утрачивают способность к взаимодействию с CR1 и CR3 рецепторами на нейтрофи-лах (Gilmore B.J. et al., 1988). В пользу этого свидетельствовали эксперименты с другим объектом, опсонизированным в режиме АПАК: блокада NF-kB снижала способность СЗЬЛСЗ b-опсонизированного зимозана стимулировать нейтрофилы (р< 0,05).

Для определения роли внутриклеточных MAP- киназ (ERK1/2 и р38) проводили исследования в режиме их блокады в нейтрофилах и эпителиоцитах путем прединкубации клеток (60 мин, 37°С, 20цМ) со специфическими ингибиторами U0126 ("Sigma", США) (Tian W. et al.,2000) и SB203580 ("Sigma", США) (Jiang Y. et al., 1996; Terada L. S. et al., 1999). В контроле использовали интактные клетки.

Блокада р38 и ERK1/2 существенно не меняла уровня адгезии C.albicans на буккальных эпителиоцитах и спонтанной ХЛ нейтрофилов (р>0,05), но приводила к снижению кандвда-индуцированной ХЛ (иХЛ) нейтрофилов. Снижение уровня иХЛ наблюдалось при инкубации нейтрофилов с нативными кандидами (р<0,05), а в экспериментах с блокадой ERKl/2-киназы - также и с C.albicans, опсонизиро-ванными цельной сывороткой, iC3b- или IgG- молекулами (р<0,05). Разрушение термолабильных протеиновых компонентов рецепторного аппарата C.albicans (прогревание 70°С, 40 мин) не меняло уровня иХЛ фагоцитов в системах с ингибиторами МАР-киназ (р>0,05).

Фунгицидный эффект некогерентного импульсного излучения в системах с Candida albicans

В связи с появлением штаммов С. albicans, обладающих устойчивостью к антибиотикам (Анкирская A.C. и соавт 2006; Выборнова И.В. и соавт., 2008; Bad-dly J.W., Moser S.A.,2004; Cualco L. et al, 2007) несомненный интерес представляет поиск агентов и факторов, обладающих выраженной фунгицидной активностью и не приводящих к формированию резистентных клонов.

Действие некогерентного импульсного излучения на Candida albicans и буккальные клетки in vitro. При воздействии НКИ (1Гц) миллисекундной длительности диапазона 180-800 нм (режим 300 секунд) на посевы кандид на агаре Сабуро (в чашках Петри) нами был обнаружен биоцидный эффект в отношении тест-культур С. albicans (штаммы 601, К101/99, 440 и С. kefyr штамм 17 (рис.3). Биоцидный эффект НКИ был неспецифичен и наблюдался также в отношении бактериальных тест-культур: S. epidermidis штамм 51-1 и Е. coli штамм 18М. |

Рис. 3. Фунгицидный эффект НКИ (300 секунд воздействия) при облучении посевов культур С. albicans штамм 601 и С. kefyr штамм 17.

Эксперименты с суспензией С. albicans показали, что биоцидный эффект отмечался, начиная с минимальных доз облучения (25 секунд) и был сильно выражен в режимах от 200 секунд и более (р <0,05).

Установлено, что действующим фактором НКИ, обеспечивающим фунги-цидный эффект, является УФ-излучение (около 59,6 %). Кроме того, 40,4% активности НКИ зависит от иных факторов, не связанных с тепловым воздействием, предположительно, свободных радикалов и активных форм кислорода, образующихся в зоне газового разряда (Базелян Э.М., Ражанский И.М.,1988; Буранов С.Н. и соавт. 1995; Иванова И.П. и соавт., 2004).

Изучено влияние некогерентного импульсного излучения на С. albicans и изолированные клетки организма человека - буккальные эпителиоциты. Эксперименты показали, что НКИ в режиме 300 секунд снижает более чем в 2 раза адгезию кандид на эпителиоцитах (р<0,05) при обработке обоих компонентов системы. При воздействии НКИ на отдельные компоненты системы более сильное снижение адгезии наблюдалось при обработке С. albicans, чем при воздействии на эпителиоциты (р>0,05).

НКИ влияло не только на функционирование, но и на структуру рецептор-ного аппарата изучаемых клеток. Так, при действии НКИ на культуру C.albicans штамм 601 или на буккальные эпителиоциты оба типа клеток сбрасывали в среду сиалированные компоненты рецепторов. Динамика накопления свободных сиа-ловых кислот в суспензии кандид значительно опережала аналогичный процесс у эпителиоцитов. Сравнительная оценка выживаемости C.albicans и буккальных эпителиоцитов после экспозиции с НКИ (в диапазоне 150-600 секунд) показала, что процент жизнеспособных (не окрашенных трипановым синим) клеток в эксперименте всегда был более низким у кандид, чем у эпителиоцитов (р>0,05).

Действие некогерентного импульсного излучения при экспериментальном оральном кандидозе крыс. Облучение ротовой полости НКИ (в режимах 100 или 300 секунд) у инфицированных кандидами животных проводили через 60 мин после инокуляции кандид на слизистую зева, а затем через каждые 24

ч в течение 6 суток после заражения. Контролем служили интактные (не зараженные кандидами) животные, а также крысы с оральным кандидозом, без воздействия НКИ. Каждая группа животных состояла из 14-16 особей. Выявляли наличие и количество кандид в ротовой полости крыс на 1-й и 7-й день после заражения.

После воздействия НКИ количество кандид в ротовой полости инфицированных животных снижалось до 130,3 ± 72,8 КОЕ (режим 100 секунд) и 143,3 ± 97,3 КОЕ (режим 300 секунд) по сравнению с контрольной 1руппой (427,8 ± 228,6 КОЕ). Показатели спонтанной и латекс-индуцированной ХЛ нейтрофилов крыс, подвергавшихся воздействию НКИ существенно не менялись у интактных (неза-раженных) животных (р>0,05). В то же время, облучение ротовой полости крыс с оральным кандидозом приводило к снижению изначально высоких показателей cXJI (р<0,05) нейтрофилов на фоне инфекции, что могло быть связано со снижением интенсивности воспалительного процесса, вызванного присутствием С. albicans в организме животных.

Результаты показали отсутствие существенных изменений в функциональной активности фагоцитов крови, уровне ПОЛ плазмы и лейкоцитарной формулы у интактных (незараженных) крыс после их облучения НКИ (режим 300 секунд). Сохранение этих базовых параметров гомеостаза указывало на то, что воздействие искровым разрядом миллисекундной длительности (в исследуемом нами интервале времени воздействия) не оказывает заметного влияния на структурно-функциональное состояние внутренних органов и систем организма животных.

ВЫВОДЫ

1. Дрожжевая форма Candida albicans в большей мере, чем мицелиальная, взаимодействует с нейтрофилами через термолабильные рецепторы, индуцирует перестройку элементов цитоскелета (микротрубочек) и стимулирует продукцию фагоцитами активных форм кислорода. Мицелиальная и дрожжевая форма С. albicans обладают сходной способностью сорбировать на себе различные опсонические молекулы.

2. Мицелиальная форма С. albicans, по сравнению с дрожжевой, активнее стимулирует нейтрофилы к синтезу ИЛ-8, ИЛ-6 и продукции растворимых HLA-I. Термолабильные контакты между кандидами и нейтрофилами вносят дополнительный вклад в образование цитокинов и высвобождение молекул главного комплекса гистосовместимости.

3. Установлена антиопсоническая активность C.albicans в системе альтернативного пути активации комплемента, которая определяется термолабильными структурами клеточной стенки грибов. Данные структуры не препятствуют активации АПАК кандидами, но снижают эффективность опсонизации при взаимодействии с нейтрофилами.

4. Внутрисосудистая дестабилизация крови, индуцированная С. albicans, вызывает острое снижение направленной миграции нейтрофилов в очаг воспаления, и, в то же время, усиливает кислород-зависимую реактивность дискретных нейтрофилов экссудата. Феномен «мобилизационной блокады» нейтрофилов не зависит от природы раздражителя, индуцирующего воспалительную реакцию, и носит системный характер. Снижение притока нейтрофилов в очаг воспаления не связано с уменьшением их числа в крови, ослаблением общей миграционной активности и адгезивных реакций (СЗЬ-, IgG-зависимых и неспецифических) полиморфноядерных лейкоцитов циркулирующего пула.

эпителиоциты» является активность белок-синтезирующего аппарата кандид. Адгезия С. albicans на буккальных эпителиоцитах находится под негативным контролем секреторных продуктов Staphylococcus aureus.

6. Антитела слюны являются основным фактором, препятствующим адгезии кандид на буккальном эпителии. Дополнительный эффект обеспечивают тем-пературозависимые факторы слюны, обладающие ферментативной активностью, а также прочие компоненты. Антиадгезивный эффект сыворотки в большей степени обеспечивается неспецифическими температурозависимыми факторами, не связанными с системой комплемента, и в меньшей степени -антикандидозными антителами.

7. Установлено отсутствие существенных различий между адгезией кандид на эпителиальных клетках взрослых и детей, а также у эпителиоцитов из разных биотопов (буккальные, вагинальные). Отсутствует корреляция между уровнем естественной обсемененности и искусственной колонизации С. albicans эпителиальных клеток. Наличие местной кандидозной инфекции (кандидомикоз, вагинальный кандидоз) не сопровождается изменением адгезивности мукозаль-ных эпителиоцитов для С. albicans, но может меняться в отношении бактерий нормальной микрофлоры. Выявлено усиление адгезивности эпителиоцитов к С. albicans при бронхиальной астме у детей.

8. Контакты с C.albicans определяют активацию в нейтрофилах внутриклеточных сигнальных путей, связанных с нуклеарным фактором кВ и митогенактивиро-ванными киназами (ERK1/2 и р38). Это ведет к образованию нейтрофилами активных форм кислорода. Адгезивность эпителиоцитов в системах с C.albicans усиливается после индуцированной кандидами активации нуклеар-ного фактора кВ, но не меняется при активации митогенактивированных ки-наз.

9. Некогерентное импульсное излучение миллисекундной длительности обладает доза-зависимым фунгицидным эффектом в отношении C.albicans. Деструктивный эффект НКИ селективен: он более выражен в отношении кандид, чем в отношении клеток макроорганизма.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Буккальные и вагинальные эпителиоциты можно взаимозаменяемо применять при изучении естественной и искусственной колонизации клеток слизистых оболочек. Показатель искусственной колонизации C.albicans на эпителиоцитах может быть использован в качестве одного из индикаторов гомеостаза при соматических патологиях.

Рекомендуется применение некогерентного импульсного излучения милли-секундной длительности в течение 5-10 минут (частота 1 Гц) с целью локальной дезинфекции рабочих поверхностей, биологических субстратов и эпителиальных покровов.

Экспериментальная тест-система «искусственная колонизация C.albicans на буккальных эпителиоцитах» может применяться для оценки антиадгезивного эффекта, биоцидности, селективной токсичности физических факторов и дезинфек-тантов в отношении клеток грибов и человека.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Чеботарь И.В, Заславская М.И., Конышкина Т.М., Маянский А.Н, IgG- и СЗЬ- зависимая адгезия нейтрофилов в системах с аллогенными и ксеноген-ными лигандами // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1991.-№ 10.-С. 403-404.

2. Маянский А.Н., Заславская М.И., Невмятуллин A.JL, Конышкина Т.М. Люминолзависимая хемшпоминесценция в оценке эволюции и эффекторных возможностей воспалительного процесса // Люминесцентный анализ в медицине и биологии и его аппаратурное обеспечение: сборник тезисов докладов IV всесоюзного совещания. - М., 1992. - Вып. 4. - С. 74-75.

3. Маянский H.A., Заславская М.И, Маянский А.Н. Апоптоз экссудативных нейтрофилов человека // Иммунология. - 2000. - № 2. - С. 11-13.

4. Заславская М.И., Зеленова Е.Г. Иммунопатогенетические аспекты кандидоза новорожденных и детей раннего возраста // Состояние здоровья и организация медицинского обслуживания детей, подростков, учащейся и рабочей молодежи: сборник научных трудов Нижегородской медицинской академии / Под ред. H.A. Камаева. - Нижний Новгород, 2001. - С. 240-245.

5. Заславская М.И., Плескова С.Н., Миронов A.A., Гущина Ю.Ю. Определение структурно-функционального состояния цитоплазматической мембраны клеток крови человека методом сканирующей зондовой микроскопии в системах in vitro // Биология-наука-XXI века: сборник тезисов докладов 5-й Пущинской конференции молодых ученых, 16-20 апреля 2001. - Пущино, 2001.-С. 129.

6. Pleskova S.N., Zaslavskaja M.I., Guschina Yu.Yu., Koksharov I.A., Erastova Yu.G. Morphological investigation of human blood neutrophil phagocytosis in vitro by AFM // Physics of Low-Dimentional Structures. - 2001. - № 3/4. - P. 229-236. -ISSN 0204-3467.

7. Зеленова Е.Г., Заславская М.И., Махрова T.B. Кандиды: экология, морфо-функциональные особенности и факторы патогенности // Нижегородский

медицинский журнал. - 2002. - № 1. - С. 73-84. - ISSN 0869-0936.

8. Махрова Т.В., Заславская М.И. Штаммовая характеристика Candida albicans в адгезивных реакциях с буккальными эпителиоцитами II Современная микология в России: тезисы докладов первого съезда микологов России. - М., 2002.-С. 368.

9. Маянский А.Н., Заславская М.И., Салина Е.В., Абаджиди М.А., Ашкинази В.И., Махрова Т.В. Феномен избирательного ослабления колонизационной (адгезивной) резистентности в системе «Candida albicans - буккальные эпителиоциты» // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2002. - № 4.-С. 17-20.

10. Маянский А.Н., Салина Е.В., Абаджиди М.А., Ашкинази В.И., Заславская М.И. Адгезивные реакции буккальных эпителиоцитов на Candida albicans у детей с бронхиальной астмой и гастродуоденитом // Педиатрия. - 2002. - № 3. -С. 41-43.

11. Абаджиди М.А., Махрова Т.В., Маянская И.В., Заславская М.И., Маянский А.Н. Буккальные эпителиоциты как инструмент клинико-лабораторных исследований // Нижегородский медицинский журнал. - 2003. - N. 3-4. - С. 105-110.-ISSN 0869-0936.

12. Заславская М.И., Махрова Т.В., Салина Е.В., Маянский А.Н. Адгезивные реакции Candida albicans в условиях кондиционирования метаболической активности эпителиоцитов // Успехи медицинской микологии: материалы первого всероссийского конгресса по медицинской микологии. - М., 2003. -Т. 1.-С. 358.

13. Махрова Т.В., Заславская М.И., Маянский А.Н. Антиадгезивный эффект слюны в системе «Candida albicans - буккальные (щечные) эпителиоциты» // Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов VI научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2003. - Т. 5. - № 2. - С. 44-45.

14. Маянский А.Н., Салина Е.В., Заславская М.И. Способ оценки прочности адгезии Candida albicans на эпителиоцитах // Клиническая лабораторная диагностика. - 2003. - № 2. - С. 53-54. - ISSN 0869-2084.

15. Заславская М.И., Иванова И.П., Спиров Г.М. Влияние некогерентного импульсного излучения на реактивность нейтрофилов и перекисное окисление липидов крови крыс с оральным кандидозом // Актуальные проблемы биологии: сборник научных работ Сибирского государственного университета. - Томск, 2004. - Т. 3. - № 1. - С. 78-79.

16. Заславская М.И., Иванова И.П., Спиров Г.М. Фунгицидный эффект некогерентного импульсного излучения видимого диапазона света в системах с Candida albicans II Вестник Санкт-петербургской медицинской академии им. И.И. Мечникова - 2004.-№ 3.-Вып. 5. - С. 54-56. - ISSN 0371-9367.

17. Заславская М.И., Махрова Т.В., Маянский А.Н. Механизм антиадгезивного эффекта сыворотки крови в системе «кандиды-буккальные эпителиоциты» // Естествознание и гуманизм: сборник научных работ Сибирского государственного университета. - Томск, 2004. - Т. 4. - № 1. - С. 68.

18. Заславская М.И., Махрова Т.В., Маянский А.Н. Реактивность Candida albicans в системе альтернативного пути активации комплемента // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2004. - № 5. - С. 80-84.

19. Заславская М.И., Маянский А.Н. Мобилизационная блокада нейтрофилов на фоне внутрисосудистой дестабилизации крови, индуцированной Candida albicans II Успехи медицинской микологии: материалы второго всероссийского конгресса по медицинской микологии. - М., 2004 - Т. 4. - С. 83-84.

20. Заславская М.И., Маянский А.Н. Нейтрофилзависимая воспалительная реакция на фоне внутрисосудистой дестабилизации крови, индуцированной Candida albicans II Проблемы медицинской микологии. - 2004. - Т. 6. - № 4. -С. 24-25.

21. Заславская М.И., Маянский А.Н. Элиминационные ресурсы очага воспаления на фоне внутрисосудистой дестабилизации крови, индуцированной Candida albicans // Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов VII научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2004. - Т. 6. - № 2. -С. 80.

22. Заславская М.И., Строгова Ю.Ю., Поляшова А.С., Махрова Е.В. Естественная и Candida-зависимая колонизация буккального эпителия взрослых в системах in vitro // Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов VII научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2004. - Т. 6. -№ 2.-С. 80-81.

23. Заславская М.И. Функциональный резерв очага острого воспаления на фоне внутрисосудистой дестабилизации крови // Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии: сборник научных работ Сибирского государственного университета. - Томск, 2004. - Т. 4. - № 1. - С.106.

24. Зеленова Е.Г., Заславская М.И., Салина Е.В., Рассанов С.П. Микрофлора полости рта: норма и патология: Учебное пособие. Лекции для студентов стоматологического факультета // Нижний Новгород : НГМА, 2004. - 158 с. Утверждено: УМО-248 от 24.04.03.

25. Иванова И.П., Заславская М.И., Зуймач Е.А. Влияние некогерентного импульсного излучения на активность фагоцитоза и ПОЛ крови крыс с оральным кандидозом // Материалы 3-го съезда биофизиков России, 24-29 июня 2004. - Воронеж, 2004. - С. 650-651.

26. Иванова И.П., Заславская М.И. Оральный кандидоз крыс на фоне некогерентного импульсного излучения // Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов VII научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2004. - Т. 6. - № 2. - С. 82-83.

27. Махрова Т.В., Заславская М.И., Маянский А.Н. Влияние метаболитов стафилококка на адгезивные реакции в системе «Candida albicans -буккальные эпителиоциты» // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2004. - № 5. - С. 4-7.

28. Махрова Т.В., Заславская М.И., Маянский А.Н. Участие цитоскелета буккальных эпителиоцитов в адгезивных реакциях с Candida albicans II Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов VII научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2004. - Т. 6. - № 2. -С. 100.

29. Махрова Т.В., Маянский А.Н., Шмелева Е.А., Заславская М.И. Влияние TLR-рецепторов на адгезивные реакции в системе «Candida albicans - буккальные эпителиоциты» // Актуальные вопросы инфекционной патологии человека, клинической и прикладной иммунологии: материалы научной конференции молодых ученых. - Уфа, 2004. - С. 252-253.

30. Маянский H.A., Абаджиди М.А., Маянская И.В., Заславская М.И., Махрова Т.В. Реактивность буккальных эпителиоцитов: индикация местных и общих нарушений гомеостаза // Клиническая лабораторная диагностика. - 2004. - № 8. - С. 31-34. - ISSN 0869-2084.

31.Строгова Ю.Ю., Махрова Е.В., Поляшова A.C., Заславская М.И. Влияние нормальной микрофлоры буккального эпителия взрослых и детей на адгезивные реакции Candida albicans в системах in vitro // Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины: материалы III конференции молодых ученых России с международным участием, 20-24 января 2004. - М.,

2004.-С. 167-168.

32. Заславская М.И., Иванова И.П. Фунгицидный эффект некогерентного импульсного излучения при экспериментальном оральном кандидозе крыс // Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов VIII научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2005. - Т. 6. - № 2. -С. 285.

33. Заславская М.И. Роль митоген-активированных киназ в адгезивных взаимодействиях нейтрофилов и буккальных эпителиоцитов человека с Candida albicans (Robin) Berkhout Н Проблемы медицинской микологии. -

2005.-Т.7.- №3.-С.30-33.

34. Иванова И.П., Заславская М.И. Кандидацидный эффект некогерентного импульсного света // Успехи медицинской микологии: материалы третьего всероссийского конгресса по медицинской микологии. - М., 2005. - Т,5. -С.298-300.

35. Иванова И.П,, Заславская М.И. Механизм фунгицидного эффекта высокоэнергетического импульсного излучения // Проблемы медицинской

микологии: тезисы докладов VIII научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2005. - Т. 6. - № 2. - С. 286.

36. Иванова И.П., Заславская М.И. Озон и активные формы кислорода высокоэнергетических импульсных разрядов II Нижегородский медицинский журнал. Приложение. Озонотерапия. - 2005. - С. 30. - ISSN 0869-0936.

37. Иванова И.П., Заславская М.И. Озон и ультрафиолетовое излучение как биоцидные факторы высокоэнергетического импульсного некогерентного излучения И Нижегородский медицинский журнал. Приложение. Озонотерапия. - 2005. - С. 29. - ISSN 0869-0936.

38. Иванова И.П., Заславская М.И., Спиров Г.М., Шлепкин С.И. Бактерицидные свойства высокоэнергетических импульсных разрядов // Высокоинтенсивные физические факторы в биологии, медицине, сельском хозяйстве и экологии: труды международной конференции, 26-28 апреля 2004. - Саров: РФЯЦ-ВНИИЭФ., 2005.-С. 144-148.

39. Махрова Т.В., Маянский А.Н., Заславская М.И. Некоторые механизмы антиадгезивного эффекта секрета ротовой полости в системе «Candida albicans - буюсальные эпителиоциты» // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2005. - № 2. - С.11-14.

40. Маянский А.Н., Заславская М.И., Зеленова Е.Г., Салина Е.В., Строгова Ю.Ю., Рассанов С.П., Малышева Э.Ф. Адгезивные реакции буккальных эпителиоцитов в индикации нарушений местного и общего гомеостаза // Нижегородский медицинский журнал. - 2005. - № 1. - С. 158-161. - ISSN 0869-0936.

41. Zaslavskaya M.I. Applied microbiology and immunology. Textbook for the international English speaking medical students - Nizhny Novgorod: NSMA, 2005. - 60 p. Утверждено: УМО-49 от 21.06.06.

42. Заславская М.И., Воронова Н.Ю. Нейтрофил-зависимая продукция ИЛ-8, индуцированная дрожжевой и гифальной формами Candida albicans Н Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов IX научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2006. - Т. 8. - № 2. - С. 41-42.

43. Заславская М.И., Каткова Н.Ю. Адгезивные реакции эпителиоцитов у беременных женщин с вагинальным кандидозом // Успехи медицинской микологии: материалы четвертого всероссийского конгресса по медицинской микологии. - М., 2006. - Т. 7. - С. 46-47.

44. Заславская М.И., Крыжанова М.А., Новиков В.В. Уровень растворимых молекул гистосовместимости I класса при взаимодействии нейтрофилов крови человека с дрожжевой и гифальной формами Candida albicans // Успехи медицинской микологии : материалы четвертого всероссийского конгресса по медицинской микологии. -М., 2006. - Т. 7. - С. 48-49.

45. Заславская М.И., Махрова Т.В., Зеленова Е.Г., Салина Е.В. Прикладная микробиология и иммунология: руководство к практическим занятиям для студентов высшего сестринского образования. - Нижний Новгород : НГМА, 2006. -112 с. Утверждено: УМО-411 от 21.06.06.

46. Заславская М.И., Маянский А.Н. Нейтрофилзависимое воспаление на фоне дестабилизации внутрисосудистого гомеостаза // Цитокины и воспаление. -2006.-Т. 5.-№ 1.-С. 50-52.

47. Заславская М.И., Маянский А.Н. Нейтрофил-стимулирующая активность дрожжевой и гифальной форм Candida albicans (Robin) Berkhout // Проблемы медицинской микологии. - 2006. - Т. 8. - № 3. - С. 40-44.

48. Заславская М.И., Новиков В.В. Продукция нейтрофилами растворимых HLA-I при взаимодействии с дрожжевой и гифальной формами Candida albicans // Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов IX научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2006. - Т. 8. - № 2. - С. 42.

49. Иванова И.П., Заславская М.И. Действие некогерентного импульсного излучения на сиаловые кислоты и адгезивные свойства в системе «Candida albicans - буккальные эпителиоциты» // Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов IX научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2006. - Т. 8. -№ 2. - С. 43-44.

50. Заславская М.И., Маянский А.Н. Роль нуклеарного фактора-кВ в обеспечении взаимодействий нейтрофилов и клеток эпителия слизистой полости рта

человека с Candida albicans II Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2007. - № 5. - С. 61-65.

51. Заславская М.И., Мишина Ю.В. Адгезивные реакции буккальных эпителиоцитов у пациентов с кандидозным онихомикозом // Материалы научных трудов симпозиума национального альянса дерматологов и косметологов, 21-23 ноября 2007. - СПб., 2007. - С. 66-67.

52. Маянский А.Н., Маянский H.A., Заславская М.И. Нуклеарный фактор-кВ и воспаление // Цитокины и воспаление. - 2007. - Т.6. - № 2. - С. 61-65.

53. Заславская М.И., Лукова O.A. Роль нуклеарного факгора-кВ в обеспечении контакта эпителиоцитов с Candida albicans II Проблемы медицинской микологии: тезисы докладов XI научно-практической конференции по медицинской микологии. - 2008. - Т. 10. - № 2. - С. 44.

54. Заславская М.И., Мишина Ю.В., Лукова O.A. Адгезивные реакции буккальных эпителиоцитов у пациентов детского возраста с онихопатиями // Современная микология в России: материалы второго съезда микологов России,- М., 2008. - С. 429.

55. Иванова И.П., Заславская М.И., Спиров Г.М. Способ дезинфекции биологических субстратов и эпителиальных покровов // Положительное решение о выдаче патента: от 28.03.2008, № заявки 2007118899/15 (020587).

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АПАК альтернативный путь активации комплемента

ДЦС додецилсульфат натрия

ЗФР забуференный физиологический раствор

ИЛ интерлейкин

ИФА иммуноферментный анализ

КОЕ колониеобразующая единица

НКИ некогерентное импульсное излучение

ПМЛ полиморфноядерный лейкоцит (нейтрофил)

ПОЛ перекисное окисление липидов

РЭМА реакция эюим-меченных антител

УФ ультрафиолетовое излучение

ХЛ хемилюминесценция

иХЛ индуцированная хемилюминесценция

сХЛ спонтанная хемилюминесценция

CR cell receptor - клеточный рецептор

MAP митогенактивированные протеинкиназы

NF-kB нуклеарный фактор кВ

sHLA-I растворимые (внеклеточные) молекулы главного комплекса гистосовместимости человека I класса

Подписано в печать Заказ № SM9& Формат бумаги 60 х 84/16. Тираж 150 экз. Объем £ усл.п.л. Бумага офсетная. ООП ВВАГС 603950, г. Н.Новгород, пр. Гагарина, 46

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Заславская, Майя Исааковна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Экология, морфо-функциональные особенности и факторы патогенности Candida albcans.

1.2. Адгезивные контакты нейтрофилов с Candida albicans и их функциональные последствия.

1.3. Реактивность эпителиоцитов к Candida albicans и способы ее индикации.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Глава 3. НЕЙТРОФИЛ-СТИМУЛИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ

ДРОЖЖЕВОЙ И МИЦЕЛИАЛЬНОЙ ФОРМ CANDIDA ALBICANS.

3.1. Фагоцитарная активность нейтрофилов в системах с различными морфологическими вариантами Candida albicans

3.2. Продукция нейтрофилами ИЛ-8 и ИЛ-6 в реакциях с неопсонизированными Candida albicans.

3.3. Продукция нейтрофилами растворимых форм HLA I в реакциях с неопсонизированными Candida albicans

Глава 4. АКТИВНОСТЬ CANDIDA ALBICANS В СИСТЕМЕ АЛЬТЕРНАТИВНОГО ПУТИ АКТИВАЦИИ КОМПЛЕМЕНТА.

4.1. Нейтрофил-стимулирующая активность Candida albicans, опсонизированных в системе АПАК.

4.2. Факторы, определяющие особенности АПАК-активности Candida albicans.

Глава 5. ОСТРАЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ НА ФОНЕ

ДЕСТАБИЛИЗАЦИИ ВНУТРИСОСУДИСТОГО ГОМЕОТАЗА, ИНДУЦИРОВАННОГО CANDIDA ALBICANS.

5.1. Моделирование острого локального воспаления на фоне дестабилизации внутрисосудистого гомеостаза.

5.2. Функциональный резерв очага острого воспаления на фоне внутрисосудистого введения Candida albicans.

5.3. Механизм острой мобилизационной блокады нейтрофилов на фоне внутрисосудистой дестабилизации крови.

Глава 6. АДГЕЗИВНЫЕ РЕАКЦИИ В СИСТЕМЕ «CANDIDA ALBICANS

ЭПИТЕ ЛИОЦИТЫ».;.

6.1. Общая характеристика адгезивной активности С. albicans в системах с эпителиоцитами in vitro.

6.2. Значение функциональной активности клеток для адгезивных взаимодействий в системе «Candida albicans -буккальные эпителиоциты.

6.3. Влияние секрета ротовой полости на адгезивные реакции в системе «Candida я/Ысшад-буккальные эпителиоциты».

6.4. Влияние продуктов нейтрофилов на взаимодействие

Candida albicans с, эпителиальными клетками.

6.5. Влияние сывороточных факторов на адгезивную активность Candida albicans в реакциях с буккальными эпителиоцитами.

6.6. Влияние продуктов стафилококков на адгезивные реакции в системе «Candida albicans - буккальные эпителиоциты».

6.7. Соотношение показателей естественной и искусственной колонизации эпителиоцитов.

6.8. Адгезивные реакции в системе «буккальные эпителиоциты — Candida albicans» при некоторых патологиях.

Глава 7. УЧАСТИЕ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫХ СИГНАЛЬНЫХ ПУТЕЙ ВО ВЗАИМОДЕЙСТВИИ НЕЙТРОФИЛОВ И ЭПИТЕЛИОЦИТОВ С CANDIDA ALBICANS.

7.1. Нуклеарный фактор-kB.

7.2. Митоген-активированные киназы р38 и ERK1/2.

Глава 8. ФУНГИЦИДНЫЙ ЭФФЕКТ НЕКОГЕРЕНТНОГО ИМПУЛЬСНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ В СИСТЕМАХ С CANDIDA ALBICANS.

8.1. Влияние некогерентного импульсного излучения на

Candida albicans in vitro.

8.2. Факторы и механизмы фунгицидного эффекта некогерентного импульсного излучения.

8.3. Влияние некогерентного импульсного излучения на компоненты системы «С. albicans- буккальные эпителиоциты» in vitro.

8.4. Фунгицидный эффект некогерентного импульсного излучения при экспериментальном оральном кандидозе крыс.

8.5. Влияние некогерентного импульсного излучения на функциональные показатели гомеостаза крыс с экспериментальным оральным кандидозом.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Взаимодействие Candida albicans с нейтрофилами и эпителиоцитами в экспериментальных системах"

В настоящее время наблюдается рост грибковых оппортунистических инфекций, среди которых значительную часть составляет кандидоз [17, 37, 35, 46, 50, 51, 69, 73, 95] вызываемый, преимущественно, Candida albicans [12, 48, 92, 312]. Развитие инфекции зависит от вирулентности кандид, состояния колонизируемой ткани и выраженности иммунных реакций [312]. В то же время, остается открытым вопрос о пусковых механизмах кандидоза и взаимодействии различных звеньев иммунитета в ходе заболевания.

Достаточно хорошо изучен спектр факторов патогенности, которые обеспечивают адгезию и инвазию C.albicans [92, 151, 155, 200]. Более патогенной принято считать мицелиальную форму гриба [309], однако не вполне ясно, что способствует ее большей вирулентности по сравнению с дрожжевой формой.

Первую линию защиты от кандидозной инвазии обеспечивают факторы слизистых оболочек и опсонофагоцитарные реакции [24, 55, 157, 184, 238, 262, 301, 312, 323, 343, 344, 406]. Однако, несмотря на значительное число работ, посвященных адгезии и колонизации кандид на слизистых оболочках, недостаточно изучены механизмы регуляции адгезивной фазы инфекционного процесса и роль отдельных факторов слизистых оболочек. Существуют противоречивые данные о влиянии микрофлоры [8, 112, 127, 189, 219, 220, 259, 299, 372] и действии эффекторов воспаления [76] на адгезивные реакции кандид. Необходимо также упомянуть и о биологически активных продуктах нейтрофилов (миелопероксидаза, катионные белки, кислые гидролазы, щелочная фосфатаза, простагландины, лизоцим, низкомолекулярные пептиды и др.), входящих в состав мукозальных секретов [29, 297,302] и потенциально способных оказывать влияние на прикрепление кандид к эпителию слизистых оболочек.

Кандиды, подобно другим микроорганизмам, способны стимулировать клетки макроорганизма, вызывая синтез цитокинов [327, 367]. Цитокины играют существенную роль при инфекциях, обеспечивая кооперацию между эффекторами клеточного и гуморального иммунитета [65,106]. Несмотря на многочисленные публикации, характеризующие цитокиновую сеть при кандидозной инфекции, мало внимания уделяется цитокинам, которые продуцируются ней-трофилами. В то же время показано, что данные регуляторные молекулы важны для взаимодействия различных звеньев иммунитета на начальном этапе развития инфекции [29,302].

Немаловажную роль в элиминации С. albicans играет биоцидность ней-трофилов, которая усиливается после прямых и опсонин-опосредованных взаимодействий фагоцитов с кандидами, в частности, с участием опсонинов альтернативного пути активации комплемента (АПАК) [88]. Отсюда представляется важным изучение эффективности АПАК-зависимой опсонизации С. albicans и ее функциональных последствий в системе с нейтрофилами. В настоящее время акцент в изучении патогенеза кандидоза сместился'на исследование механизмов регуляции иммунного ответа при инфекции. Особый интерес представляют внутриклеточные сигнальные пути, такие как система нуклеарного фактора кВ и группа митоген-активированных киназ. Они играют важную роль в регуляции активности генов, отвечающих за адаптивные реакции клеток, и вовлечены в продукцию иммунорегуляторных и биоцидных факторов [59, 241, 374,377, 391].

Таким образом, исследование механизмов и факторов, влияющих на взаимоотношение C.albicans с эффекторами первого уровня защиты (мукозаль-ные эпителиоциты, нейтрофилы, система комплемента) позволит расширить представления о причинах развития кандидозной инфекции и возможных путях ее регуляции.

Широкое распространение штаммов С. albicans, обладающих резистентностью к антибиотикам [4, 22, 70, 82, 121, 126], выдвигает еще одну задачу: поиск фунгицидных (биоцидных) средств, позволяющих преодолеть лекарственную устойчивость кандид. г

Цель настоящего исследования

Определить условия и факторы, влияющие на взаимодействие С. albicans с эпителиоцитами слизистых оболочек, нейтрофилами и комплементом, и изучить механизмы их действия.

Задачи исследования

1. Сравнить нейтрофил-стимулирующую активность дрожжевой и мицелиальной форм С. albicans.

2. Оценить активность С.albicans в системе альтернативного пути активации комплемента.

4. Охарактеризовать набор факторов и условий, влияющих на адгезию С. albicans к эпителиоцитам слизистых оболочек.

5. Определить значимость активации внутриклеточных сигнальных путей, сопряженных с нуклеарным фактором кВ и системой митогенактивированных киназ для нейтрофилов и буккальных эпителиоцитов при взаимодействии с С. albicans.

6. Оценить эффект некогерентного импульсного излучения на С.albicans в экспериментальных системах in vitro и in vivo.

Научная новизна

Установлена антиопсоническая активность С.albicans в системе альтернативного пути активации комплемента и определены функциональные последствия данного эффекта при опсонин-опосредованных взаимодействиях кандид с нейтрофилами.

Выявлен и впервые исследован феномен «острой мобилизационной блокады» нейтрофилов, проявляющийся в снижении миграции полиморфноядер-ных лейкоцитов (ПМЛ) в зону воспаления в условиях, имитирующих состояние кандидемии (внутрисосудистая дестабилизация крови).

Определен вклад внутриклеточных сигнальных путей, связанных с нукле-арным фактором кВ и митогенактивированными киназами (ERK1/2 и р38), в реализацию функционального потенциала нейтрофилов и эпителиоцитов при их взаимодействии с С. albicans.

Впервые выявлен фунгицидный эффект некогерентного импульсного излучения в отношении С.albicans. Определены основные факторы и механизмы биоцидного эффекта некогерентного импульсного излучения.

Практическая значимость

Оптимизирована экспериментальная тест-система для изучения адгезии С. albicans на эпителиальных клетках. Определен ряд факторов, влияющих на адгезию в системе «С. albicans — буккальные эпителиоциты». Снижение адгезивной активности кандид под действием ингибирующих факторов позволит вносить коррективы в комплексное лечение кандидозов.

Разработана методика изучения нейтрофилов крови с помощью атомной силовой микроскопии.

Результаты испытаний, проведенных совместно с инженерами федерального государственного унитарного предприятия «Российский Федеральный ядерный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной физики» (РФЯЦ ВНИИЭФ, г. Саров), легли в основу устройства для генерации некогерентного импульсного излучения «БРИГ», разработанного в 2004 году.

Внедрение результатов работы

Разработанные методы и экспериментальные тест-системы используются при проведении научных исследований, а также в лабораторно-клинической практике Федерального государственного учреждения «Нижегородский научно-исследовательский кожно-венерологический институт Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (ФГУ ЛЖВНИИ Росздрава, г.Н.Новгород).

Устройство для генерации некогерентного импульсного излучения «БРИГ», применяют в медико-биологических и электрохимических исследований в лабораториях РФЯЦ ВНИИЭФ (г. Саров), НИИ им. Скобельцина при МГУ (г.Москва), а также а также научно-исследовательском институте прикладной и фундаментальной медицины при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Нижегородская медицинская академия Росздрава» (НИИ ПФМ при ГОУ ВПО НижГМА Росздрава, г. Нижний Новгород).

Результаты исследования используются при обучении студентов на кафедре микробиологии и иммунологии и в процессе преподавания на циклах повышения квалификации на кафедре профилактической медицины Центра повышения квалификации и профессиональной переподготовки специалистов (ЦПК и ППС) ГОУ ВПО «НижГМА Росздрава» (г. Нижний Новгород).

Положения, выносимые на защиту

1. Дрожжевая и мицелиальная форма С. albicans обладают различной способностью активировать нейтрофилы. Мицелиальная форма слабее, чем дрожжевая, индуцирует кислород-зависимую биоцидность нейтрофильных гра-нулоцитов и вызывает более выраженную продукцию нейтрофилами про-воспалительных медиаторов (ИЛ-8, ИЛ-6) и иммунорегуляторов (sHLA-I), дестабилизирующих гомеостаз.

2. С.albicans обладают антиопсонической активностью в системе альтернативного пути активации комплемента, которая детерминируется термолабильными компонентами клеточной стенки грибов. Присутствие кандид в кровяном русле приводит к торможению направленной миграции нейтрофилов в очаги воспаления.

3. С. albicans и эпителиоциты слизистых оболочек активно взаимодействуют друг с другом на этапе адгезии кандид. Контакт С. albicans с буккальными клетками зависит от белок-синтезирующей активности кандид, а также усиливается при различных видах метаболической и цитоскелетной активности эпителиоцитов. Существенный вклад в антиадгезивный эффект ротовой жидкости и сыворотки крови вносят антитела, а также температурозависи-мые факторы, вызывающие необратимые изменения адгезинов С. albicans.

4. Активация в нейтрофилах внутриклеточных сигнальных путей, связанных с нуклеарным фактором кВ и митогенактивированными киназами (ERK1/2 и р38), опосредуется специфическими контактами с С.albicans и ведет к увеличению продукции активных форм кислорода фагоцитами. Кандида-индуцированная активация нуклеарного фактора кВ в эпителиоцитах усиливает их адгезивность в отношении C.albicans.

Вклад автора

Диссертация представляет собой обобщение результатов, полученных автором лично. Отдельные эксперименты (Глава 6. Адгезивные реакции в системе «Candida albicans - эпителиоциты») выполнены совместно с сотрудниками ГОУ ВПО НижГМА Росздрава (г. Нижний Новгород): асс. Махровой Т.В., доц. Салиной Е.В., асс. Луковой О.А. (каф. микробиологии и иммунологии), асс. каф. госпитальной педиатрии Абаджиди М.А., при непосредственном участии автора.

Работа на сканирующем зондовом микроскопе TopoMetrix SPMLab (США) в Научно-исследовательском образовательном центре сканирующей зондовой микроскопии (НИОЦ СЗМ, Нижний Новгород) выполнена совместно с научным сотрудником центра — Гущиной Ю.Ю.

Автор благодарен доц. каф. акушерства и гинекологии ГОУ ВПО Ниж-ГМА Катковой Н.Ю., а также м.н.с. отделения дерматомикологии ФГУ НКВНИИ Росздрава (г. Н.Новгород) Мишиной Ю.В. за предоставление клинического материала для исследований. Автор признателен сотрудникам РФЯЦ ВНИИЭФ (г. Саров): нач. отд. Спирову Г.М. и ведущему инженеру Шлепкину С.И. за предоставление импульсного устройства «БРИГ» для проведения научно-исследовательских изысканий и зав. научной проблемной группой НИИ ПФМ при ГОУ ВПО НижГМА Ивановой И.П. за помощь в организации проведения экспериментов с источником некогерентного импульсного излучения.

Выражаю искреннюю благодарность научному консультанту, д.м.н., проф. Маянскому А.Н. за ценные советы на различных этапах выполнения работы.

Вклад коллег отражен в соавторстве ряда работ, опубликованных в центральной печати.

Апробация материалов диссертации

Основные результаты диссертации докладывались и обсуждались на: IV всесоюзном совещания «Люминесцентный анализ в медицине и биологии и его аппаратурное обеспечение» (Москва, 1992), 5-й Пущинской конференции молодых ученых (Пущино, 2001), международной конференции "Proceeding of the Scanning Probe Microscopy-2001 Workshop" (Нижний Новгород, 2001), 1-м, 2-м, 3-ми 4-м Всероссийских конгрессах по медицинской микологии (Москва, 2003; 2004; 2005; 2006), III конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004); 3-м съезде биофизиков России (Воронеж, 2004), научной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы инфекционной патологии человека, клинической и прикладной иммунологии» (Уфа, 2004), международном научном семинаре «Высокоинтенсивные физические факторы в биологии, медицине, сельском хозяйстве и экологии» (Саров, 2004), VI Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Озон в биологии и медицине» (Нижний Новгород, 2005), симпозиуме национального альянса дерматологов и косметологов (Санкт-Петербург, 2007),VT, VII, VIII, IX и XI научно-практической конференции по медицинской микологии (Кашкинские чтения) (Санкт-Петербург, 2003; 2004; 2005; 2006; 2008), Первом и Втором съездах Микологов России «Современная микология в России» (Москва, 2002; 2008).

Публикации

Объем и структура диссертации

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Заславская, Майя Исааковна

ВЫВОДЫ

IgG-зависимых и неспецифических) полиморфноядерных лейкоцитов циркулирующего пула.

5. Адгезия С. albicans на буккальных клетках зависит от уровня метаболической, белок-синтезирующей и цитоскелетной активности эпителиоцитов. Необходимым условием для реализации адгезивных контактов в системе «С. albicans — эпителиоциты» является активность белок-синтезирующего аппарата кандид. Адгезия С. albicans на буккальных эпителиоцитах находится под негативным контролем секреторных продуктов Staphylococcus aureus.

6. Антитела слюны являются основным фактором, препятствующим адгезии кандид на буккальном эпителии. Дополнительный эффект обеспечивают температурозависимые факторы слюны, обладающие ферментативной активностью, а также прочие компоненты. Антиадгезивный эффект сыворотки в большей степени обеспечивается неспецифическими температурозависи-мыми факторами, не связанными с системой комплемента, и в меньшей степени — антикандидозными антителами.

7. Установлено отсутствие существенных различий между адгезией кандид на эпителиальных клетках взрослых и детей, а также у эпителиоцитов из разных биотопов (буккальные, вагинальные). Отсутствует корреляция между уровнем естественной обсемененности и искусственной колонизации С. albicans эпителиальных клеток. Наличие местной кандидозной инфекции (кандидомикоз, вагинальный кандидоз) не сопровождается изменением ад-гезивности мукозальных эпителиоцитов для С. albicans, но может меняться в отношении бактерий нормальной микрофлоры. Выявлено усиление адге-зивности эпителиоцитов к С. albicans при бронхиальной астме у детей.

8. Контакты с C.albicans определяют активацию в нейтрофилах внутриклеточных сигнальных путей, связанных с нуклеарным фактором кВ и митогенак-тивированными киназами (ERK1/2 и р38). Это ведет к образованию нейтрофилами активных форм кислорода. Адгезивность эпителиоцитов в системах с C.albicans усиливается после индуцированной кандидами активации нуклеарного фактора кВ, но не меняется при активации митогенактивирован-ных киназ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Буккальные и вагинальные эпителиоциты можно взаимозаменяемо применять при изучении естественной и искусственной колонизации клеток слизистых оболочек. Показатель искусственной колонизации C.albicans на эпителио-цитах может быть использован в качестве одного из индикаторов гомеостаза при соматических патологиях.

Рекомендуется применение некогерентного импульсного излучения мил-лисекундной длительности в течение 5-10 минут (частота 1 Гц) с целью локальной дезинфекции рабочих поверхностей, биологических субстратов и эпителиальных покровов.

Тест-система «искусственная колонизация C.albicans на буккальных эпи-телиоцитах» может применяться для оценки антиадгезивного эффекта, биоцид-ности, селективной токсичности физических факторов и дезинфектантов в отношении клеток грибов и человека.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Заславская, Майя Исааковна, Нижний Новгород

1. Адгезивные реакции буккальных эпителиоцитов в индикации нарушений местного и общего гомеостаза / А.Н Маянский, М.И. Заславская, Е.Г. Зеле-нова, и др.. // Нижегородский медицинский журнал. - 2005. - № 1. - С. 2328.

2. Адгезия различных видов микроорганизмов в экспериментальной системе «буккальный эпителиоцит-бактерии» / Зеленова Е.Г., Е.В. Салина, А.Н. Маянский и др. // Нижегородский медицинский журнал. 1993. — № 3. — С. 24-28.

3. Акатов, Ф.К. Стафилококки / Ф.К. Акатов, B.C. Зуева.- М. : Медицина, 1983.-256 с.

4. Арзуманян, В.Г. Чувствительность дрожжей рода Candida, выделенных от больных аллергическими заболеваниями, к противогрибковым препаратам. В.Г. Арзуманян, Б.Ф. Семенов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2001. - № 4. - С. 346-349.

5. Астафьев Д.Г. Иммунологическая характеристика антител человека к пеп-тидогликану золотистого стафилококка: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.36 / Астафьев Дмитрий Георгиевич. Горький, 1987. -271с.

6. Базелян, Э.М., Искровой разряд в воздухе / Э.М. Базелян, И.М. Ражанский. Новосибирск : Наука, 1988. - 164 с.

7. Барабой, В.А. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, И.И. Брехман, В.А. Чеботарев. СПб. : Наука, 1992. - 148 с.

8. Брок, И. Выделение иммуноглобулина G (IgG) / И. Брок //Иммунологические методы / под ред. Фримеля X. : пер. с нем. М. : Мир, 1979. -Гл. 33.-С. 264-273.

9. Брудастов, Ю.А. Биологическое значение антикомплементарной активности бактерий / Ю.А. Брудастов, Д.Г. Дерябин // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. Приложение. 1994. - С. 28-32.

10. Бурлакова, Е.Б. Роль антиокислителей в физико-химических процессах в регулировании и размножении клеток / Е.Б. Бурлакова // Физико-химические основы авторегуляции в клетках. — М. : Наука, 1968. С. 1525.

11. Бурова, С.А. Клинические разновидности и лечение кандидоза / С.А. Бурова, Г.В. Воинова // Вестник дерматологии и венерологии. 1997. - № 4. -С. 24-28.

12. Быков, В Л. Динамика инвазивного роста Candida albicans в тканях хозяина / B.JI. Быков // Вестник дерматологии и венерологии. 1990. - № 4. — С. 25-28.

13. Быков, B.JI. Изменения адгезии грибов Candida к эпителию в течение менструального цикла / B.JI. Быков, З.О. Караев, Е.В. Величко // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1987. - № 8. - С. 13 -15.

14. Быков, B.JI. Функциональная морфология эпителиального барьера слизистой оболочки полости рта / B.JI. Быков // Стоматология. — 1997. № 3. -С. 12-16.

15. Быков, B.JI. Экспериментальное изучение влияния кортикостероидных препаратов на адгезию грибов рода Candida к эпителиоцитам слизистых оболочек / B.JI. Быков, Е.В. Величко // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.- 1988 № 8. - С. 115-118.

16. Вагинальный кандидоз / В.Н. Прилепская, А.С. Анкирская, Г.Р. Байрамова, В.В. Муравьева. М., 1997. - 40 с.

17. Владимиров, Ю.А. Биологические мембраны и патология клетки / Ю.А. Владимиров. М. : Наука, 1979. - 47 с.

18. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И Арчаков. М. : Наука, 1972. - 259 с.

19. Владимиров, Ю.А. Хемилюминесцентный метод при обследовании животных, подвергшихся воздействию ионизирующего излучения / Ю.А. Владимиров, М.П. Шерстнев, Н.В. Грудина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996.- № 1. —С. 39-41.

20. Владимиров, Ю.А. Хемилюминесценция клеток животных / Ю.А. Владимиров, М.П. Шерстнев. М. : ВИНИТИ, 1989. - 170 с.

21. Выборнова, И.В. Мониторинг чувствительности штаммов дрожжей, выделенных от больных в Санкт-Пертербурге, к флуконазолу и вориконазолу / И.В. Выборнова, Н.В.Васильева, Т.С. Богомолова // Проблемы медицинской микологии. 2008. - Т. 10, № 2. - С. 32-33.

22. Высокий конститутивный уровень NF-kB необходим для жизнеспособности клеток аденокарциномы мыши-возможная роль р53 / А.С. Смирнов, А.В. Буданов, А.С. Рузов и др. // Молекулярная биология. 2000. -Т. 34. - № 5. — С. 775-782.

23. Гасанова, Ф.М. Естественная резистентность слизистых оболочек полости рта у больных оральным кандидозом и кандидоносителей / Ф.М.Гасанова, З.О. Караев // Проблемы медицинской микологии. 2008. - Т. 10, № 2. -С.11-13.

24. Гемонов, В.В. Защитные свойства поверхностных слоев эпителия слизистой оболочки полости рта / В.В. Гемонов, M.JT. Могильный // Стоматология. -1996.-№3.-С. 4-6.

25. Герасимов, И.Г. Динамика клеточных параметров буккального эпителия в течение менструального цикла у женщин / И.Г. Герасимов, О.А. Калютская //Цитология. 1996.-№ 11. - С. 1152-1157.

26. Гусев, Н.Б. Протеинкиназы: строение, классификация, свойства и биологическая роль / Н.Б. Гусев // Соросовский образовательный журнал. 2000. -Т. 6, №12.-С. 4-13.

27. Диагностическая ценность показателя естественной колонизации буккального эпителия при стоматологических заболеваниях / Е.Г. Зеленова, JT.M. Лукиных, Т.В. Присада, Е.В. Салина // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. - № 11. - С. 37.

28. Долгушин, И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В. Бухарин. Екатеринбург : УрО РАН, 2001. - 284 с.

29. Блинов, Н.П. Резистентность грибов к антимикотикам частный случай биологической закономерности, касающейся стабильности открытых биосистем / Н.П. Блинов // Проблемы медицинской микологии - 2004. - Т. 6, № 4. - С. 3-8.

30. Естественная колонизация буккального эпителия у детей с аллергическими заболеваниями / А.Н. Маянский, М.А. Абаджиди, И.В. Маянская, А.П. Разживин // Российский педиатрический журнал. 1999. - № 3. - С. 47-49.

31. Кандидоз и кандидоносительство в акушерстве / Н.Н. Каплин, Я.С. Жерновая, С.Н. Сердюк, В.Н. Голубничая // Проблемы медицинской микологии— 2002.-Т. 4,№3.-С. 31-33.

32. Кандидоз кожи и слизистых оболочек / А.А. Антоньев, JT.A. Бульвахтер, JI.K. Глазкова, И.И. Ильин. М. : Медицина, 1985. - 155 с.

33. Кандидоз при Вич-инфекции / А.Г. Рахманова, О.Х. Гяургиева, В.К. Пригожина, Е.Е Воронин // Проблемы медицинской микологии. 2000. -Т. 2,№. З.-С. 19-24

34. Караев, З.О. К вопросу о биологической активности Candida albicans / Караев З.О., Лебедева Т.Н. // Микотическая инфекция и сенсибилизация : сб. науч. тр. Ленинград, 1982. - С. 14-17.

35. Кашкин, К. П. Белки системы комплемента: свойства и биологическая активность / К. П. Кашкин, Л. Н. Дмитриева // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. - № 7. - С. 25 - 32.

36. Кольман, Я. Наглядная биохимия / Я. Кольман, К.-Г. Рем. М. : Мир, 2000.- 496 с.

37. Конышев, В.А. Методы выделения и концентрирования сывороточных иммуноглобулинов и антител // Лабораторные методы исследования в неинфекционной иммунологии / под ред. О.Е. Вязова. М. : Медицина, 1967.- С.317-328.

38. Конышкина, Т.М. Влияние стафилококков на проявление опсонической кооперации в системе комплемента / Т.М. Конышкина // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1989. №11. — С. 67-71.

39. Кузьмина, Е.И. Применение индуцированной хемилюминесценции для оценки свободно-радикальных реакций в биологических субстратах / Е.И.

40. Кузьмина, А.С. Нелюбин, М.К. Щенников // межвузовский сборник «Биохимия и биофизика микроорганизмов». Горький, 1983. - С. 179-183.

41. Кэбот, Е. Экспериментальная иммунохимия / Е. Кэбот, М. Мейер. М. : Медицина, 1968. - 683 с.

42. Панкина, М.В. Микрофлора зева человека как показатель определения резистентности организма / М.В. Панкина // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2002. - № 3. - С. 97-99.

43. Лебедева, Т.Н. Иммунитет при кандидозе (обзор) / Т.Н. Лебедева // Проблемы медицинской микологии. 2004. - № 4. - С. 8-16.

44. Лебедева, Ю.В. Реактивность нейтрофилов в системах с пептидогликана-ми различных видов стафилококка / Ю.В. Лебедева, Д.Г. Астафьев, А.Н. Маянский // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1989. — № 6. С.57-61.

45. Лесовой, B.C. Кандидоз ротовой полости / B.C. Лесовой, А.В. Липницкий, О.М. Очкурова // Проблемы медицинской микологии. — 2003. Т. 5, № 1. -С. 21-26.

46. Лесовой, B.C. Микозы и СПИД: некоторые особенности их клинического течения, лабораторной диагностики и лечения / B.C. Лесовой, А.В. Липницкий, О.М. Очкурова // Проблемы медицинской микологии 2000. - Т. 2, № 3. — С. 12-18.

47. Лесовой, B.C. Микозы пищеварительного тракта (обзор) / B.C. Лесовой, А.В. Липницкий, О.М. Очкурова // Проблемы медицинской микологии. -2004.-Т. 6, №2.-С. 19-23.

48. Лесовой, B.C. Микозы центральной нервной системы (обзор) / B.C. Лесовой, А.В. Липницкий // Проблемы медицинской микологии. -2008. Т. 10, № 1. -С. 3-7.

49. Лифшиц, В.М., Медицинские лабораторные анализы. Справочник / В.М. Лифшиц, В.И. Сидельникова. М. : «Триада-Х», 2007. - 304 с.

50. Лойда, 3. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы / 3. Лойда, Р. Госсару, Т. Шиблер. М. : Мир, 1982.- 256 с.

51. Лукиных, Л.М. Значение колонизационной резистентности и местного иммунитета полости рта при кариесе зубов / Л.М. Лукиных, Е.Г. Зеленова // Нижегородский медицинский журнал. 1999. - № 4. - С. 23-27.

52. Махрова, Т.В. Антиадгезивный эффект слюны в системе «C.albicans буккальные (щечные) эпителиоциты» / Т.В. Махрова, М.И. Заславская, А.Н. Маянский // Проблемы медицинской микологии. - 2003. - Т. 5, № 2. - С. 4445.

53. Маянский, А.Н. Дисбактериоз: иллюзии и реальность / А.Н. Маянский // Педиатрия. 2000. - № 4. -С.80-88.

54. Маянский, А.Н. Естественная колонизация буккального эпителия у больных с пародонтитом / А.Н. Маянский, Л.П. Пичугина, Э.Ф. Малышева // Нижегородский медицинский журнал. 1991. - № 3. - С. 20-22.

55. Маянский, А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А.Н. Маянский, О.И. Пикуза. Казань : Магариф, 1993. - 192 с.

56. Маянский, А.Н. Нуклеарный фактор кВ и воспаление / А.Н. Маянский, Н.А. Маянский, М.И. Заславская // Цитокины и воспаление. -2007- Т. 6, № 2. С.3-9.

57. Маянский, А.Н. Опсоническая функция альтернативного пути активации комплемента: способ определения и клиническая характеристика / А.Н. Маянский, М.С. Куравская, О.И. Пикуза // Иммунология. 1982. - № 3. -С. 84-87.

58. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге/ А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск : Наука, 1989. - 344 с.

59. Маянский, А.Н. Патогенетическая микробиология: руководство / А.Н. Маянский. -Н.Новгород : НГМА, 2006. 520 с.

60. Маянский, А.Н. Реактивная хемилюминесценция в системе фагоцитоза / А.Н. Маянский, A.JI. Невмятуллин, И.В. Чеботарь // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1987. -№ 7. - С.109-115.

61. Маянский, А.Н. Реактивность и медиаторные функции интестинальных эпителиоцитов в системе мукозального гомеостаза / А.Н. Маянский, И.В. Маянская // Иммунология. 2004. - № 3. - С. 185-192.

62. Маянский, А.Н. Цитокины и медиаторные функции уроэпителия в воспалительных реакциях мочевыводящей системы / А.Н. Маянский // Цитокины и воспаление. 2003. -Т. 2, № 4. -С. 3-10.

63. Меньшиков, В.В. Лабораторные методы исследования в клинике : справочник / В.В. Меньшиков, Л.Н. Делекторская, Р.П. Золотницкая / под ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. - 368 с.

64. Метод определения хемотаксической активности лейкоцитов / И.С. Подо-синников, Л.Г. Нилова, И.В. Бабиченко и др. // Лабораторное дело. -1981.-№. 8. С. 468-470.

65. Микрофлора буккального эпителия у детей, часто болеющих респираторными инфекциями / М.А. Абаджиди, С.А. Молодцов, В.И. Ашкинази и др. // Российский педиатрический журнал. 2002. - №1. - С. 56-57.

66. Мирзабалаева, А.К. Кандидоз гениталий и бактериальный вагиноз в практике акушера-гинеколога / А.К. Мирзабалаева, Ю.В. Долго-Сабурова // Проблемы медицинской микологии.- 2004. Т. 6, № 3. - С. 18-24.

67. Мюллер, Э. Микология / Э. Мюллер, В. Лёффлер. М. : Мир; 1995. 343 с.

68. Новиков, В.В. Растворимые формы дифференцировочных антигенов гемо-поэтических клеток /В.В. Новиков // Гематология и трансфузиология. -1996.-№6.-С. 40-43.

69. Нозокомиальный кандидоз дыхательных путей новая проблема в лечении раненых и пострадавших / В.В. Бояринцев, П.И. Огарков, С.В. Гаврилин и др. // Проблемы медицинской микологии. -2004. — Т. 6, № 3. - С. 5-8.

70. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Ланкин, Н.К Зенков и др.. М. : 2006. - 556 с.

71. Основы биохимии / А.А Анисимов, А.Н. Леонтьева, И.Ф. Александрова и др.; под ред. А.А. Анисимова. М.: Высшая школа, 1986. - 551 с.

72. Особенности иммунного ответа клеток слизистой оболочки влагалища при ■ хроническом рецидивирующем кандидозном вульвовагините / М.Л. Симбарская, Н.В. Шабашова, А.К. Мирзабалаева и др. // Проблемы медицинской микологии. -2008. Т. 10, № 2. - С.78.

73. Пикуза, О.И. Естественная колонизация буккального эпителия у новорожденных детей / О.И. Пикуза, Ф.И. Сигбатуллина, А.Н. Маянский // Педиатрия. 1993. -№ 4. -С. 5-9.

74. Пикуза,О.И. Характеристика колонизационной резистентности микрофлоры ротовой полости при применении препарата томицид /О.И. Пикуза, И.Г. Шошина, В .Б. Гервазиева// Педиатрия. 1999. -№ 3. -С.101-104.

75. Пинегин, Б.В. Нейтрофилы: структура и функция / Б.В. Пинегин, А.Н. Маянский // Иммунология. 2007. -№ 6. - С. 374-382.

76. Пискарев, И.М. Выходы продуктов химических реакций под действием электрического заряда в среде воздуха, азота и кислорода / И.М. Пискарев // Химия высоких энергий. 2000. -Т. 34, № 6. - С. 475-476.

77. Плескова, С.Н. Принципы стандартизации и оценки функциональной активности АПАК / С.Н. Плескова, А.Н. Маянский // Иммунология.- 2000.-№ 4. С. 61-62.

78. Поиск биологических средств против грибов рода кандида / И.Д. Авдиенко Н.Ф. Рябченко, Г.М. Волгарева и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2000. - № 6. - С. 79-80.

79. Райзер, Ю.П. Физика газового разряда / Ю.П. Райзер. М. : Наука, 1992. -536 с.

80. Рацюк, М.М. Индекс естественной колонизации буккального эпителия в клинико-терапевтической стоматологии. // М.М. Рацюк, JI.M. Лукиных, Е.Г.Зеленова // Нижегородский медицинский журнал. Приложение : Стоматология. 2003. - С. 65-66.

81. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. М. : Медиа-Сфера, 2003.-312 с.

82. Реброва, Р.Н. Грибы рода Candida при заболеваниях негрибковой этиологии / Р.Н. Реброва.- М.: Медицина, 1989. 128 с.

83. Ройт, А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. М. : Мир, 2000. - 592 с.

84. Рыжавский, Б.Я. Изменения буккального эпителия при некоторых заболеваниях у детей / Б.Я. Рыжавский, Г.Н. Холодок // Клиническая лабораторная диагностика. -1995. -№ 2. -С. 39-40.

85. Самсыгина, Г. А. Кандидоз новорожденных и детей раннего возраста. Дифлюкан в лечении и профилактике кандидоза / Г. А. Самсыгина, Г.Н. Буслаева, М.А. Корнюшин. М., 1996. - 40 с.

86. Саттон, Д. Определитель патогенных и условно патогенных грибов / Д. Саттон, А. Фотергилл, М. Ринальди. М. : Мир, 2001. - 486 с.

87. Сергеев, А.Ю. Кандидоз / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев. М: Триада-Х, 2001.-472 с.

88. Тотолян, А.А. Клетки иммунной системы /А.А. Тотолян, И.С. Фрейдлин. -СПб. : Наука, 2000. 231 с.

89. Удельный вес микозов в структуре вторичных заболеваний у больных Вич/ СПИДом / А.Г. Рахманова, Ю.В. Лобзин, Е.В. Степанова и др. // Проблемы медицинской микологии. 2004. - Т. 6, № 1. - С. 9-12.

90. Уровень растворимых антигенов классов в сыворотке крови ВИЧ-инфицированых лиц / Н.Е.Худякова, В.В. Новиков , Г.А. Кравченко и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2004. -№ 1. - С. 42-45.

91. Хаитов, М.Р. Острые респираторные вирусные инфекции и бронхиальная астма. Клеточные и молекулярные аспекты проблемы / М.Р. Хаитов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 2002. -№ 4. -С. 84-93.

92. Хаитов, P.M. Современные подходы к оценке основных этапов фагоцитарного процесса / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. — 1995. № 4. -С. 3-8.

93. Хаитов, P.M. Физиология врожденного иммунитета / P.M. Хаитов // Российский физиолог. -2006. Т. 92, № 6. -С. 649-659.

94. Хусаинова, И.С. Оценка цитологических показателей буккального эпителия для диагностики функционального состояния человека / И.С. Хусаинова, И.Ю. Варулева, Н.А. Кожина // Клиническая лабораторная диагностика.-1997.-№ 3.-С. 10-12.

95. Цитогенетические показатели и электрокинетическая подвижность ядер клеток буккального эпителия в оценке состояния пародонта / JI.M. Цепов, Н.С. Левченкова, О.Н. Золотарева и др. // Стоматология. — 1999. № 3. -С. 7-8.

96. Частная медицинская микробиология с техникой микробиологических исследований: учебное пособие / под ред. А.С. Лабинской, Л.П. Блинниковой, А.С. Ещиной. М. : ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 600 с.

97. Шахбазов, В.Г. Новый метод определения биологического возраста человека / В.Г. Шахбазов, Т.В. Колупаева, А.Л. Набоков // Лабораторное дело. -1986.-№7.-С. 404-407.

98. Ярилин, А.А. Основы иммунологии / А.А. Ярилин. М. : Медицина, 1999. -608 с.

99. A novel function for chemokines: downregulation of neutrophil migration / K. Lang, H. Hatt, B. Niggemann et al. // Scand. J. Immunol. -2003. Vol.57, N 4. - P.350-361.

100. A novel method to studio the hyphal phase of Candida albicans and to evaluate its hydrophobicity / H. Nikava, H. Nishimura, T. Yamamoto, Y.H

101. Samaranayake // Oral. Microbiol. Immunol. 1995. -N 10.- P. 110-114.

102. A protein kinase involved in the regulation of inflammatory cytokine biosynthesis / J.C. Lee, J.T. Laydon, P.C. McDonnell et al. // Nature. -1994.- Vol. 372.-P. 739-746.

103. A role of complement recepor-like molecules in iron acquisition by Candida albicans / M.A. Moors, T.I. Stull, K.J. Blank et al. // J. Exp. Med. 1992. -Vol.175.-P.1643-1651.

104. Adherence of Candida albicans to oral epithelial cells differentiated by Papanicolaou staining / D.W. Williams, R. Walker, M. Lewis et al. // J. Clin. Pathol.-1999.- Vol. 52.- P. 529-531.

105. Adherence of Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans to urinary catheters / R.A. Falleiros de Padua, M.F. Norman Negri, A.E.Svidzinski et al. // Rev. Iberoam. Micol.- 2008 Vol. 25, N 3.- P.173-175.

106. Adhesion of Candida albicans to epithlial cells- effect of nikkomycin / E. Segal, S. Gottlieb, Z. Altboum et al. // Mycoses. -1997.- Vol. 40.- P. 33-39.

107. Almstahl, A. Lactoferrin, amylase and mucin MUC5B and their relation to the oral microflora in hyposalivation of different origins / A.Almstahl, M. Wik-strom, J.Groenink // Oral Microbiol Immunol 2001.- Vol. 6.- P. 345-352.

108. Altered adherence in strains of Candida albicans harbouring null mutations in secreted aspartic proteinase genes / H.J. Watts, F.S.H. Cheah, D. Yube et al. //. FEMS Microbiol. Lett. 1998. - Vol. 159. - P. 129-135.

109. Alviano, C.S. Sialic acids in fungi: a minireview. / C.S Alviano, L.R Travassos, R. Schauer // Glycoconj J. 1999.- N. 9- P. 545-554.

110. An experimental model for study of Candida survival and transmission in human volunteers / M.S. Rangel-Frausto, A.K. Houston, M.J. Bale et al. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect Dis. 1994. - Vol. 13. - P. 590-595.

111. An iC3b receptor on Candida albicans: structure, function, and correlates for pathogenicity / B.J. Gilmore, E.M. Retsinas, J.S. Lorenz, M.K. Hostetter // J. Infec. Dis.- 1988.-Vol. 157, N 1.-P. 38-46.

112. Angel, C.R. Degradation of C3 by Streptococcus pneumoniae / C.R. Angel, M. Ruzec, M.K. Hostetter // J. Infect. Dis. 1994. - Vol. 170. - P. 600-608.

113. Antifungal resistance in Candida spp. isolated in Italy between 2002 and 2005 from children and adults / L. Cualco, E.A. Debbia, R. Badenttini, L. Pescetto // Int. J. Antimicrob. Agents. 2007. - Vol. 29, N 2. - P. 179-184.

114. Aratani Y. Role of myeloperoxidase in the host defense against fungal infection / Y. Aratani // Nippon. Ishinkin. Gakkai. Zasshi.- 2006.- Vol. 47, N 3. P. 195199.

115. Arendorf, T.M. Oral candidal polulations in health and disease / T.M. Arendorf, D.M. Walker// Br. Dent. J. 1979. - Vol. 147. - P. 267-272.

116. Atomic force microscopy in histology and cytology / T. Ushiki, J. Hitomy, S. Ogura et al. // Arch. Histol. Cytol. 1996.- Vol. 59, N 5. - P. 421-431.

117. Autocrine/paracrine modulation of polymorphonuclear leukocyte survival after exposure to Candida albicans / J.F. Sweeney, P.K. Nguyen, G.M. Omann, D.B. Hinshaw // Shock. 1998. - Vol. 9, N 2. - P. 146-152.

118. Baddly, J.W. Emerging fungal resistance / J.W. Baddly, S.A. Moser // Clin. Lab. Med. 2004. - Vol. 24. - P. 721-735.

119. Bagg, J. Coagglutination reactions between Candida albicans and oral bacteria / J. Bagg, R. Silverwood // J. Med. Microbiol. 1986. - Vol. 22, N 2. - P. 65-69.

120. Baggiolini, M. Interleukin-8 and related chemotactic cytokines-CXC and CC chemokines / M. Baggiolini, B. Dewald, B. Moser // Advances Immunol. -1994.-Vol. 55.-P. 97-179.

121. Bailey, A. Adherence of Candida albicans to human buccal epithelial cells: host-induced protein synthesis and signaling events /А. Bailey, E. Wadsworth, R. Calderone // Infect. Immun. 1995. - Vol. 63, N 2. - P. 569-572.

122. Baillie, G.S.Jr. Effect of growth rate on resistance of Candida albicans biofilms to antifungal agents/ G.S. Baillie, L. Douglas // J. Antimicrob. Agents Chemother. 1998. - Vol. 42, N 8. - P. 1900-1905.

123. Baillie, G.S.Jr. Role of dimorphism in the development of Candida albicans biofilms / G.S.Jr. Baillie, L.J. Douglas // J. Med. Microbiol. 1999. - Vol. 48, N 7. -P. 671-679.

124. Baldwin, A.S. Ir. Series introduction: the transcription factor NF-кВ and human disease / A.S. Baldwin // J. Clin. Invest. 2001 -. Vol. 107. - P.3-6.

125. Baldwin, A.S.Jr. The NF-kappa В and I kappa В proteins: new discoveries and insights / A.S.Jr. Baldwin // Annu. Rev. Immunol. 1996. - Vol. 14. - P.649-683.

126. Barnes, P.J. Nuclear Factor-B A Pivotal Transcription Factor in Chronic Inflammatory Diseases/ P.J. Barnes, M. Karin // The new England Journal of medicine. - 1997. - Vol. 336, N 15. - P. 1066-1071.

127. Bendel, C.M. Distinct mechanisms of epithelial adhesion for Candida albicans and Candida tropicalis / C.M. Bendel, M.K. Hostetter // J.Clin. Invest. 1993.-Vol. 92.-P. 1840-1849.

128. Bergen, M.S. Switching at the cellular level in the white-opaque transition of Candida albicans / M.S. Bergen, E. Voss , D.R. Soli // J. Gen. Microbiol. 1990. - Vol. 136, N 10. - P. 1925-1936.

129. Biofilm formation by the fungal pathogen Candida albicans: development, architecture, and drug resistance / J. Chandra, D.M. Kuhn, P.K. Mukherjee et al. // J. Bacteriol. 2001. - Vol. 183, N 18. - P. 5385-5394.

130. Braude, A. Candida. Infectious diseases and medical microbiology. 2nd ed./ A. Braude. 1986.-571 p.

131. Busscher, Y.S. Adhesion to silicone rubber of yeast and bacteria isolated from voice prostheses: influence of salivary conditioning films /Y.S. Busscher, G.G. Geertsema-Doornbusch, H.C. van der Mei // J. Biomed. Mat. Res. 1997. - Vol. 34.-P. 201-209.

132. Caamano, J. NF-кВ family of transcription factors: central regulators of innate and adaptive immune functions / J. Caamano, C.A. Hunter // Clin. Microbiol. Rev. -2002. -Vol. 15. P. 414-429.

133. Calderone, R.A. Adherence and receptor relationship of Candida albicans/ R.A. Calderone, P. Braun // Microbiol. Rev. 1991. - Vol. 55. - P. 1-20.

134. Cameron, B. J. Blood group glycolipids as epithelial cell receptors for Candida albicans / B. J. Cameron, L. J. Douglas // Infect. Immun. 1996. - Vol. 64. - P. 891-896.

135. Candida albicans and Candida krusei differentially induce human blood mononuclear cell interleukin-12 and gamma interferon production / J. Xiong, K. Kang, L. Liu et al. // Infect. Immun.- 2000. Vol. 68, N 5. - P. 2464-2469.

136. Candida albicans mannoprotein influences the biological function of dendritic cells / D. Pietrella, G. Bistoni , C. Corbucci et al. // Cell. Microbiol.- 2006. -Vol. 8.-N4.-P. 602-612.

137. Candida albicans phospholipomannan is sensed through toll-like receptors / T. Jouault, S. Ibata-Ombetta, O. Takeuchi et al. // J. Infect. Dis.- 2003. Vol. 188, N 1. - P. 165-172.

138. Candida albicans-secreted aspartic proteinases modify the epithelial cytokine response in an in vitro model of vaginal candidiasis / M. Schaller, H.C. Korting, C. Borelli et al. // Infect. Immun. 2005. - Vol. 73, N 5. - P. 2758-2765.

139. Candida and mycotic infections / M.M. Coogan, P.L.Jr. Fidel, M.C. Komesu et al. // Adv. Dent. Res. 2006. - Vol. 19, N 1. - P. 130-138.

140. Candida attachment to oral epithelium / L. Vitkov, W.D. Krautgartner, M. Hannig et al. // Oral. Microbiol. Immunol. 2002. - Vol. 17, N 1. - P. 60-64.

141. Cannon, R.D. Oral colonization by Candida albicans/ R.D. Cannon, W.L. Chaffin // Crit. Rev. Oral. Biol. -1999.- Vol.10, N.3.-P.359-383.

142. Cassone, A. Cell wall of Candida albicans: its functions and its impact on the host / A. Cassone // Curr. Top. Med. Mycol.- 1989.-Vol.3.-P.248-314.

143. Cell extracts of Candida albicans block adherence of the organisms to endothelial cell / J.E. J. Edwards, C.L. Mayer, S.D. Filler et al. // Infect. Immun. -1992.-Vol.60.-P. 3087-3091.

144. Cell surface hydrophobicity-associated adherence of Candida dubliniensis to human buccal epithelial cells / M.A Jabra-Rizk, W.A. Jr. Falkler, W.G. Merz, et al. // Rev. Iberoam. Micol. 2001.- Vol.18, N 1.- P. 17-22.

145. Cell wall and secreted proteins of Candida albicans: identification, function and expression / W.L. Chaffin, J.Z. Lopez-Ribot, M. Casanova et al. // Mocrobiol. Mol. Biol. Rev.- 1998. -Vol.62. P. 130-180.

146. Chaffin, W.L. Candida albicans cell wall proteins / W.L. Chaffin // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2008.- Vol.72, N 3. - P. 495-544.

147. Challacombe, S.J. Immunologic aspects of oral candidiasis / S.J.Challacombe // Oral. Surg. Oral. Med.Oral. Pathol. -1994. -Vol. 78, N 2. -P.202-210.

148. Characterization of Candida albicans mannan-induced, mannan-specific delayed hypersensitivity suppressor cells / R.E. Garner, A.M. Childress, L.G. Human,

149. J.E. Domer // Infect. Immun.- 1990.- Vol. 58, N 8.- P.2613- 2620.

150. Characterization of switch phenotypes in Candida albicans biofilms / Y. Jin, Y.H. Samaranayake, H.K. Yip, L.P. Samaranayake // Mycopathologia. 2005.-Vol.160, N 3.-P. 191-200.

151. Characterization of the structure and function of the fourth member of p38 group mitogenactivated protein kinases, p38delta / Jiang Y., Gram H., Zhao M. et al. // J. Biol. Chem. -1997. -Vol. 272.- P. 30122-30128.

152. Chemokine regulation of neutrophil function in surgical inflammation / M.A. Williams, C.M. Cave, G. Quaid, J.S. Solomkin // Arch. Surg. 1999. - Vol. 134, N 12. - P.1360-1366.

153. Chemoprophylaxis of fungal deterioration of the Provox in post-Iaryngectomy patients / R. van Weissenbruch, S. Bouckaert, J.P. Remon et al. // Ann. Oto. Rhinol. Laryngol. -1997.- Vol. 106.- P. 329-337.

154. Clinical profile and risk factors for oral candidosis in sick newborns / P.Gupta, M.M. Faridi, S. Rawat, P. Sharma // Indian. Pediatr. 1996. - Vol. 33, N 4. -P.299-303.

155. Cole, G.T. The role of gastrointestinal tract in hematogenous candidiasis: from the laboratory to the bedside / G.T. Cole, A.A. Halawa, E.J. Anaissie // Clin. Infect. Dis.- 1996. Vol.22. - P.73-88.

156. Colgan, S.P. Lipid mediators in epithelial cell-cell interactions / S.P. Colgan // Cell. Mol. Life Sci. 2002. -Vol. 59. - P. 754-760.

157. Contact sensing in Candida albicans: a possible aid to epithelial penetration / J. Sherwood, N.A.R. Gow, G.M. Gooday et al. // J. Med. Vet. Mycol.- 1992.-Vol. 30.- P. 461-469.

158. Cookson, W. The immunogenetics of asthma and eczema: a new focus on the epithelium / W. Cookson // Nat. Rev. Immunol. -2004. Vol.4, N 12. - P. 978988.

159. Cox, F. Adherence of Candida albicans to buccal epithelial cells in children and adults / F. Cox // J. Lab. Clin. Med. 1983. - Vol. 102. - P. 960-972.

160. Critchley, I. A. Isolation and partial characterization of an adhesin from Candida albicans / I. A. Critchley, L.J. Douglas // J. Gen. Microbiol.- 1987. -Vol.133.- P. 629-636.

161. Cronstein, B.N. The adhesion molecules of inflammation / B.N. Cronstein, G. Weissmann// Arthritis Rheum.- 1993.-Vol.36, N.2.-P.147-157

162. Cytoke involvement in immunoregulatory activity affected by C. albicans man-nan / Y. Wang, S.P. Li, S.A. Moser et al. // Infect. Immun. -1998,- Vol. 66, N 4.-P. 1384-1391

163. Delayed hypersensitivity in vitro. I. The specificity of inhibition of cell migration by antigens / J.R. David, S. Al-Askari, H.S. Lawrence, L. Thomas // J. Immunol. 1964. - Vol. 93, N 2. - P.264 -273.

164. Diamond, R.D. Interaction of phagocytic cells with Candida and other opportunistic fungi / R.D. Diamond // Arch. Med. Res.-1993.- Vol.24.-P.361-369.

165. Differences in Candida albicans adhesion to intact and denatured type I collagen in vitro / S. Makihira, H. Nikawa, M. Tamagami et al. // Oral. Microbiol. Immunol. -2002.- Vol.17, N 2.- P. 129-131.

166. Differential adherence of hydrophobic and hydrophilic Candida albicans yeast cells to mouse tissues / K.C. Hazen, D.L. Brawner, M.H. Riesselman et al.// Infect. Immun.- 1991.-Vol.59, N.3.-P.907-912.

167. Direct modulation of human neutrophil behaviour by Candida albicans / V. Vuddhakul, W.K. Seow, J.G. McCormack, Y.H. Thong // Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. 1989.- Vol. 90, N 3.- P. 291-296.

168. Domachowske, J.B. Gene expression in epithelial cells in response to pneumovi-rus infection / J.B. Domachowske, C.A. Bonville, H.F.Rosenberg // Respir. Res. -2001. Vol.2.-P.225-9.

169. Dongari-Bagtzoglou, A. Candida albicans triggers interleukin-6 and interleukin-8 responses by oral fibroblasts in vitro / A. Dongari-Bagtzoglou, K. Wen , I.B. Lamster // Oral. Microbiol. Immunol.- 1999.- Vol.14,N.6.-P.364-370.

170. Dongari-Bagtzoglou, A. Candida albicans triggers interleukin-8 secretion by oral epithelial cells / A. Dongari-Bagtzoglou, H.Kashleva // Microb. Pathog. -2003.- Vol.34, N.4.-P. 169-77.

171. Dongari-Bagtzoglou, A. Candida albicans-infected oral epithelial cells augment the anti-fungal activity of human neutrophils in vitro / A. Dongari-Bagtzoglou, C.C.Villar, H.Kashleva // Med. Mycol.- 2005. Vol.43, N 6. - P. 545-549.

172. Edgerton, M. Salivary histatin 5 and its similarities to the other antimicrobial proteins in human saliva / M. Edgerton, S.E. Koshlukova // Adv. Dent. Res. -2000.-Vol. 14.-P. 16-21.

173. Effect of neutropenia and treatment delay on the response to antifungal agents in experimental disseminated candidiasis / W.W.Hope, G.L. Drusano, C.B. Moore et al. // Antimicrob Agents Chemother. -2007/- Vol.51, N 1.- P.285-295.

174. Effective phagocytosis and killing of Candida albicans via targeting FcgammaRI (CD64) or FcalphaRI (CD89) on neutrophils / A.B. van Spriel, I.E. van den He-rik-Oudijk, N.M. van Sorge et al. // J. Infect. Dis. 1999. - Vol.179, N 3. - P. 661-669.

175. Ellmerich, S. Production of cytokines by monocytes, epithelial and endothelial cells activated by Streptococcus bovis / S. Ellmerich, N. Djouder, M. Scholler // Cytokine. 2000. -Vol. 12. -P.26-31.

176. El-Maghrabi, E.A. Characterization of Candida albicans epidennolytic proteases and their role in yeast-cell adherence to keratinocytes / E.A. El-Maghrabi, D.M. Dixon, J.W. Burnett // Clin. Exp. Dermatol. -1990. Vol.15, N.3. - P. 183191.

177. Enhanced clearance of Candida albicans from the oral cavities of mice following oral administration of Lactobacillus acidophilus / S. Elahi, G. Pang, R. Ashman, R.Clancy // Clin Exp Immunol. -2005. Vol.141, N 1. - P.29-36.

178. ERK6, a mitogen-activated protein kinase involved in C2C12 myoblast differentiation / C. Lechner, M.A. Zahalka, J.F. Giot et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1996. -Vol. 93. P. 4355-4359.

179. Evidence for expression of the C3d receptor of Candida albicans in vitro and in vivo obtained by immunofluorescence and immunoelectron microscopy / T. Kanbe, R.K. Li, E. Wadsworth et al. // Infect. Immun.- 1991.- Vol.59, N 5.-P.1832-1838.

180. Expression and function of Toll-like receptors 2 and 4 in human keratinocytes / A. Pivarcsi, L. Bodai, B.R6thi et al. // Int. Immunol. 2003. - Vol.15, N 6.-P.721-730.

181. Expression of vitronectin and fibronectin binding by Candida albicans yeast cells / Jakab, E., M. Paulsson, F. Ascencio, A. Ljungh // APMIS.- 1993.-Vol.101.-P. 187-193.

182. Fichorova, R.N. Response to Neisseria gonororhoeae by cervicovaginal epithelial cells occours in the absence of toll-like receptor 4-mediated signaling/ R.N. Fichorova, A.O. Cronin, E. Lien // J.Immunol.- 2002.-Vol.168, N.5.-P. 24242432.

183. Fidel, P.L.Jr. Candida glabrata: review of epidemiology, pathogenesis, and clinical diseases with comprison to C. albicans / P.L. Jr. Fidel, J.A. Vazquez, J.D. Sobel // Clin. Microbiol. Rev.- 1999.- Vol. 12.- P.80-96.

184. Fimbria-mediated adherence of Candida albicans to glycosphingolipid receptors on human buccal epithelial cells / L. Yu, K.K. Lee, H.B. Sheth et al. // Infect. Immun. -1994.- Vol. 62, N 7.- P. 2843-2848.

185. Fitzgerald, D.H. Susceptibility of Candida dubliniensis to salivary histatin 3 / D.H. Fitzgerald, D.C. Coleman, B.C. O'Connell // Antimicrob. Agents Chemother. -2003. -Vol. 47, N. 1. -P. 70-76.

186. Fungal cell adhesion molecules in Candida albicans / G. Tronchin, J.P. Boucha-ra, V. Annaix et al. // Eur. J. Cell. Biol. 1991. - Vol. 7, N 1. - P. 23 - 33.

187. Ge, B. MAPKK-independent activation of p38alpha mediated by TAB1-dependent autophosphorylation of p38alpha / B. Ge, H. Gram, F. Di Padova // Science. -2002. -Vol. 295.- P. 1291-1294.

188. Gilbert, P. Biofilm susceptibility to antimicrobials / P. Gilbert, J. Das, I. Foley // Adv. Dent. Res. -1997. -Vol.11, N.l- P. 160-167.

189. Godaly, G. Neutrophil recruitment, chemokine receptors, and resistance to mucosal infection / G. Godaly, G. Bergsten, L.Hang // J.Leukos Biol. -2001.-Vol. 69.-P. 899-906.

190. Granulocyte govern the transcriptional response, morphology and proliferation of Candida albicans in human blood / C. Fradin, P. De Groot, D. MacCallum et al. // Mol. Microbiol. -2005. Vol. 56.- P.397-415.

191. Growth inhibition of Candida albicans by vaginal cells from naive mice / C. Steele, H. Ozenci, W. Luo et al. // Med. Mycol.- 1999. Vol.37, N 4.-P.251-259.

192. Growth inhibition of Candida by human oral epithelial cells / C. Steele, J. Leigh, R. Swoboda, P.L. Jr. Fidel // J. Infect. Dis.- 2000.-Vol.182.-P. 1479-1485.

193. Hagewald, S. Salivary IgA subclasses and bacteria-reactive IgA in patients with aggressive periodontitis / S. Hagewald, J.P. Bernimoulin, E. Kottgen // J. Periodontal Res.- 2002. Vol. 37, N 5.- P. 333-339.

194. Hallman, M. Toll-like receptors as sensors of pathogens / M. Hallman, M. Ramet, R.A. Ezekowitz // Pediat. Res. 2001. - Vol. 50. - P.315-321.

195. Han, Y. Antibody response that protects against disseminated candidiasis / Y. Han, J.E.Cutler // Infect. Immun.- 1995.- Vol. 63, N.7.- P.2714-2719.

196. Hanks, S.K. The eukaryotic protein kinase superfamily: kinase (catalytic) domain structure and classification / S.K. Hanks, T. Hunter // FASEB J.- 1999. -Vol. 9.- P. 576-596.

197. Harler, M.B. Increased neutrophil motility by beta-glucan in the absence of chemoattractant / M.B. Harler, J.Reichner // Shock. 2001. - Vol.16, N.6. -P. 419-424.

198. Hawser, S.P. Biofilm formation by Candida species on the surface of catheter materials in vitro / S.P. Hawser, L.J. Douglas // Infect. Immun. -1994. Vol.62, N.3.-P. 915-921.

199. Heindereich, F. Candida albicans and Candida stellatoidea, in contrast to other Candida species, bind iC3b and C3d but not C3b / F.Heindereich, M.P. Dierich // Infect. Immun.-1985. Vol.50. - P. 598-600.

200. Helicobacter pylori activates the cyclin D1 gene through mitogen-activated protein kinase pathway in gastric cancer cells / Y. Hirata, S. Maeda, Y. Mitsuno et al. // Infection and Immunity. 2001.- Vol. 69, No. 6. - P. 3965-3971.

201. Histatin 3- mediated killing of Candida albicans: effect of extracellular salt concentration on binding and internalization /Y. Xu, I. Ambudkar, H. Yamagishiet al. // Antimicrobial Agents and Chemoterherapy. -1999. -Vol. 9, N. 43. -P.2256-2262.

202. Hoffman, M.P. Analysis of Candida albicans adhesion to salivary mucin / M.P. Hoffman, C.G. Haidaris // Infect Immun.- 1993.-Vol.61, N 5.- P. 19401949.

203. Hogan, D.A. Pseudomonas-Candida interactions: an ecological role for virulence factors / D.A. Hogan, R. Kolter // Science. 2002. -Vol. 296 - P. 22292232.

204. Holgate, S.T. The bronchial epithelium as a key regulator of airway inflammation and remodeling in asthma / S.T. Holgate, P.M. Lackie, D.E. Davies // Clin. Exp. Allergy. 1999. - Vol. 29 (suppl. 2). - P. 90-95.

205. Holmes, A.R. Candida albicans binding to the oral bacterium Streptococcus gordonii involves multiple adhesin-receptor interactions / A.R. Holmes, R. McNab, H. Jenkinson // Infect. Immun. 1996. -Vol.64, N 11. - P. 46804685.

206. Holmes, A.R. Interactions of Candida albicans with bacteria and salivary molecules in oral biofilms / A.R. Holmes, R.D. Cannon, H.F. Jenkinson // J. Ind. Microbiol. 1995. -Vol.15, N 3. - P. 208-213.

207. Horan, T.D. Association of neutrophil chemiluminscence with microbicidal activity / T.D. Horan, D. English, T.A. McPherson // Clin. Immunol. Immunopha-tol. 1982. - Vol.22. - P.259-269.

208. Hostetter, M.K. Adhesins and ligands involved in the interaction of Candida spp. with epithelial and endothelial surfaces / M.K. Hostetter // Clin. Microbiol. Rev. -1994. Vol. 7, N 1. - P. 29-42.

209. Hostetter, M.K. Integrin-like proteins in Candida spp. and other microorganisms / M.K. Hostetter // Fungal. Genet. Biol. -1999. Vol.28, N 3. - P. 135-145.

210. Human beta-defensins 2 and 3 demonstrate strain-selective activity against oral microorganisms / S. Joly, C. Maze, P.B.Jr. McCray, J.M. Guthmiller // J. Clin. Microbiol.- 2004.- Vol. 42, N 3.- P. 1024-1029.

211. Human epithelial cells establish direct antifungal defense through TLR4-mediated signaling / G. Weindl, J.R. Naglik, S. Kaesler et al. // J. Clin. Invest. -2007. Vol.117, N 12. - P. 3664-3672.

212. IB overexpression in cardiomyocytes prevents NF-B translocation and provides cardioprotection in trauma / D.L. Carlson, J.D. White, D.L. Maass et al. // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2003. - Vol. 284, N 3. - P. 804-814.

213. Identification of a novel inhibitor of mitogen-activated protein kinase kinase / M.F. Favata, K.Y. Horiuchi, E.J. Manos et al. // J. Biol. Chem.- 1998. Vol. 273. - P. 18623-18632.

214. Identification of C3d receptors on Candida albicans / R.A. Calderone, L. Line-han, E. Wadsworth, A. L. Sandberg // Infect. Immun.- 1988. Vol.56.-P.252-258.

215. Identification of sialic acids on the cell surface of Candida albicans / R.M. Soares, de A. Soares RM, D.S. Alviano et al. // Biochim. Biophys. Acta. -2000. Vol.1474, N 2. - P. 262-268.

216. IL-4 controls the selective endothelium-driven transmigration of eosinophils from allergic individuals / R. Moser, J. Fehr, L. Piet, B. Bruijnzell // J. Immunol. 1992. -Vol.149, N 4. - P. 1432-1438.

217. Immobilized IL-8 triggers progressive activation of neutrophils rolling in vitro on P-selectin and intercellular adhesion molecule-1 / J.A. Di Vietro, M.J. Smith, B.R.E. Smith et al. // J.Immunol. 2001. -Vol. 167. - P. 4017-4025.

218. Immunolocalization of cytokines and growth factors in oral submucous fibrosis / M.F. Haque, M. Harris, S. Meghji, A.W. Barrett // Cytokine. 1998.- Vol. 10, N9.- P. 713-719.

219. In vivo effects of C3a on neutrophils and its contribution to inflammatory lung processes in a guinea pig model / T. Hoffman, E.C. Bottger, H.P. Baum. et al. // Clin. Exp. Immunol.- 1988.- Vol.71.- P.486-492.

220. Induction of human neutrophil chemotaxis by Candida albicans-derived beta-1,6-long glycoside side-chain-branched beta-glucan / T. Sato, K. Iwabuchi, I. Nagaoka et al. // J. Leukocyte. Biol. 2006. - Vol.80, N 1. - P. 204-11.

221. Influence of aging on murine neutrophil and macrophage function against Candida albicans / C, Murciano, A. Yanez, J.E. O'Connor et al. // FEMS Immunol. Med. Microbiol. -2008.- Vol. 53, N 2.- P. 214-221.

222. Infusion of zymosan-activated plasma affects neutrophils in peripheral blood and bone marrow in sheep / D.L. Rosolia, P.J. McKenna, M.H. Gee, K.H Alber-tine // J.Leukoc. Biol.- 1992. Vol. 52. - P. 501-515.

223. Inhibition of leukocyte emigration induced during the systemic inflammatory reaction in vivo is not due to IL-8 / B. Schleiffenbaum, J. Fehr, B. Odermatt, R. Sperb//J. Immunol. 1998.-Vol.161.- P.3631-3638.

224. Inhibition of monocytic interleukin-12 production by Candida albicans via selective activation of ERK mitogen-activated protein kinase / N. Tang, L. Liu, K. Kang et al. // Infect. Immun.- 2004. Vol. 72, N. 5. - P. 2513-2520.

225. Intravascular IL-8. Inhibitor of polymorphonuclear leukocyte accumulation at sites of acute inflammation / D.H. Hechtman, M.I. Cybulsky, H.J. Fuchs et al. // J.Immunol. 1991. -Vol.147, N 3. - P. 883-892.

226. Invasion of Candida albicans correlates with expression of secreted aspartic proteinases during experimental infection of human epidermis / M. Schaller, C. Schackert, H.C. Korting et al. // J. Invest. Dermatol. 2000.- Vol.114, N 4.-P. 712-717.

227. Investigation of the sequence of colonization and candidemia in nonneutropenic patients / A. Voss, R.J. Hollis, M.A. Pfaller et al. // J. Clin. Microbiol. -1994. Vol. 32. - P. 975-980.

228. Isolation and biochemical characterization of the iC3b receptor of Candida albicans / S. Alaei C. Larcher, C.Ebenbichler et al. // Infect. Immun.-1993. -Vol.61.-P. 1395-1399.

229. Jacob, H. S. Complement-induced granulocyte aggregation / H.S. Jacob, P.R. Craddock, D.E. Hammerschmidt // N. Engl. J. Med.-1980. Vol.302, N 14.- P.769-794.

230. Janssen, S. Role of Toll-like receptors in pathogen recognition / S. Janssen, R. Beyaert // Clin. Microbiol. Rev.- 2003.- Vol. 16, N 4.- P. 637-646.

231. Jensen, J. The role of phagocytic cells in resistance to disseminated candidiasis in granulocytopenic mice / J. Jensen, T. Warner, E. Balish // J. Infect. Dis.-1994. Vol.170, N 4.-P.900-905.

232. Jerez, N.C. Prerigor infection using glycolytic inhibitors in low-quality beef muscules / N.C. Jerez, C.R. Calkins, J. Velazco // J.Anim. Sci. -2003. Vol.81.-P. 997-1003.

233. Jiang, Y. Characterization of the structure and function of a new mitogen-activated protein kinase (p38b) / Y. Jiang, C. Chen, Z. Li // Biol. Chem. -1996. -Vol. 271.-P. 17920-17926.

234. Jobin, Ch. The IkB/NF-kB system: a key determinant of mucosal inflammation and protection / Ch. Jobin, R.B. Sartor // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2000. -Vol. 278.-P. C451-C462.

235. Johansson, I. Adhesion of Candida albicans, but not Candida krusei, to salivary statherin and mimicking host molecules/1. Johansson, P. Bratt, D.I. Hay // Oral Microbiol. Immunol. -2000.-Vol. 15, N. 2.-P.112-118.

236. Kagnoff, M.F. Epithelial cells as sensors for microbial infection/ M.F. Kagnoff, L. Eckmann // J.Clin. Ivest. 1997. -Vol.100. -P.6-10.

237. Kavanagh, K. Histatins: antimicrobial peptides with therapeutic potential / K. Kavanagh, S. Dowd // J. Pharm. Pharmacol. 2004. -Vol. 56, N 3. - P. 285289.

238. Kawahara, T. Helicobacter pylori lipopolysaccharide from type I, but not type II strains, stimulates apoptosis of cultured gastric mucosal cells/ T. Kawahara, Y. Kuwano, S. Teshima-Kondo // J. Med. Invest. -2001. Vol. 48.- P.167-174.

239. Kozel, T. R. Activation and binding of C3 by Candida albicans / T. R. Kozel, R. R. Brown, G. S. Pfrommer // Infect. Immun. -1987. Vol. 55. -P.l890-1894.

240. Kozel, Т. R. Distinct characteristics of initiation of the classical and alternative complement pathways by Candida albicans / T.R. Kozel, L.C. Weinhold, D.M. Lupan // Infect. Immun. -1996. -Vol. 64. -P. 3360-3368.

241. Kozel, T.R. Activation of the complement system by pathogenic fungi / T.R. Kozel // Clin. Microbiology Review. -1999. Vol. 9. - P 34-46.

242. Kraehenbuhl, J.P. Transepithelial transport and mucosal defence II: secretion of IgA / J.P. Kraehenbuhl, M.R. Neutra // Trends Cell. Biol. -1992. Vol.2, N 6. -P. 170-174.

243. Kumar, S. Novel homologues of CSBP/p38 MAP kinase: activation, substrate specificity and sensitivity to inhibition by pyridinyl imidazoles / S. Kumar, P.C. McDonnell, R.J. Gum // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1997. Vol. 235. -P. 533-538.

244. Kunkel, E. J. Leukocyte arrest during cytokine-dependent inflammation in vivo / E. J. Kunkel, J. L. Dunne, K. Ley // J. Immun.- 2000. -Vol. 164. P.3301-3308.

245. Kuznetsov, Y.G. Atomic force microscopy studies of living cells: visualization of motility, division, aggregation, transformation, and apoptosis/ Y.G. Kuznetsov, J.M. Malkin, A. McPherson // J. Struct. Biol.-1997. Vol. 120.-P.180-191.

246. Lavigne, L.M. Beta-glucan is a fungal determinant for adhesion-dependent human neutrophil functions / L.M. Lavigne, J.E. Albina, J.S. Reichner // J. Immunol. -2006. Vol.177, N 12. - P.8667-8675.

247. Leucotriene A (4)-hydrolase expression and leucotriene В (4) levels in chronic inflammation of bacterial origin: immunohistochemistry and reverse-phase high-performance liquid chromatography analysis of oral mucosal epithelium /

248. J. Eberhard, S. Jepsen, M. Tiemann et al. // Virchows Arch. 2002. - Vol. 440.- P.627-634.

249. Li, Z. A new member of the I kappaB protein family, I kappaB epsilon, inhibits RelA (p65)-mediated NF-kappaB transcription / Z. Li, G.J Nabel // Mol. Cell. Biol. -1997. -Vol. 17. P. 6184-6190.

250. Lin, A.L. Further characterization of human salivary anticandidal activities in a human immunodeficiency virus-positive cohort by use of microassays / A.L. Lin, Q. Shi, D.A. Johnson // Clin. Diagn. Lab. Immunol. -1999. -Vol. 6, N 6. -P. 851-855.

251. Lindholm, C. Mucosal vaccination increases endothelial expression of mucosal addressin cell adhesion molecule 1 in the human gastrointestinal tract / C. Lindholm, A. Naylor, E.L. Johansson // Infect. Immun. 2004. - Vol. 72, N 2. -P. 1004-1009.

252. Liu, B. The recombinant N-terminal region of human salivary mucin MG2 (MUC7) contains a binding domain for oral Streptococci and exhibits candida-cidal activity/ B. Liu, S.A. Rayment, C. Gyurko // Biochem. J. 2000. -Vol. 345, N. 3.-P. 557-564.

253. Luminol-dependent chemiluminescence microassay for phagocytic function / V.L. Thomas, B.A. Sanford, M.S. Driscoll et al. // J.Immunol. Methods. -1988.- Vol.3, N.2.-P.227-233.

254. Macrotte, H. Oral microbial ecology and the role of salivary immunoglobulin A / H. Macrotte, M.C. Lavoie // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998. - Vol. 62. - P. 71- 109.

255. Magee, P.T. Genome mapping and gene discovery in Candida albicans / P.T. Magee, S. Scherer // ASM News.- 1998. Vol. 64, N 9. - P. 505-511.

256. Maianskii, A.N. Lectures in immunology / A.N. Maianskii, S.M. Belotsky. -N. Novgorod : Publising house NSMA, 2004.- 256 p.

257. Manns, J.M. Production of a hemolytic factors by Candida albicans / J.M. Manns, D.M. Mosser, H.R. Buckley // Infect. Immun.- 1994. Vol. 62. - P. 5154-5156.

258. Mansour, M.K. Interections of fungi with phagocytes / M.K. Mansour, S.M. Levitz // Curr. Opin. Microbiol. 2002. - N 5.- P.359-365.

259. Mardh, P.A. Adherence of bacteria to vaginal epithelial cells / P.A. Mardh, L. Westrom // Infect. Immun.- 1975. Vol. 13, N 3.- P. 661-666.

260. Mattoli, S. Allergen-induced generation of mediators in the mucosa / S. Mattoli // Environ Health Perspect. 2001. - Vol. 109. - P. 553-557.

261. Maza, J.L. Candida albicans adherence to resin-composite restorative dental material: influence of whole human saliva / J.L. Maza, N. Elguezabal, C. Prado // Med. Oral. Pathol. Oral. Radiol. Endod. 2002. -Vol. 94, N.5. - P. 589-592.

262. McDonald, P.P. Activation of NF-kappaB pathway by inflammatory stimuli in human neutrophils / P.P. McDonald, A. Bald, M.A. Cassatelia // Blood. 1997. -Vol. 89.-P. 3421-3433.

263. Medzhitov, R. A human gomologue of the Drosofila Toll protein signals activation of adaptive immunity / R. Medzhitov, P. Preston-Hurlburt, C.A. Janeway // Nature. -1997. -Vol. 388. P. 394-397.

264. Messina, M.S. Changes in mucociliary clearance during acute exacerbations of asthma / M.S. Messina, T.G. O'Riordan, G.C. Smaldone // Am. Rev. Respir. Dis. -1991. Vol.143, N 5 (Pt.l)-P. 993-997.

265. Meyric, B.O. The effect of a single infusion of zymosan-activated plasma on the pulmonary microcirculation of sheep. Structure-function relationships / B.O. Meyric, K.L. Brigham // Am. J. Pathol. 1984. - Vol. 114.- P. 32-45.

266. Microbial compounds induce the expression of pro-inflammatory cytokines, chemokines and human beta-defensin-2 in vaginal epithelial cells / A. Pivarcsi,

267. Nagy, A. Koreck et al. // Microbes Infect. 2005. - Vol.7, N 9-10.- P.l 1171127.

268. Mills, P.R. Airway epithelial cells, cytokines, and pollutants / P.R. Mills, R.J. Davies, J.L. Devalia // Am. J. Resp. Crit. Care Med. 1999. - Vol. 160, N 5 (Pt.2).-P. 38-43.

269. Miyakawa, V. Role of specific determinant in mannan of Candida albicans serotype A in adherence to human buccal epithelial cells / V. Miyakawa, T. Kuribayashi, K. Kagaya // Infect. Immun.- 1992. -Vol.60.- P.2493-2499.

270. Modulation of endotoxin-induced endothelial activity by microtubule depolyme-rization / J. Cuschieri, D. Gourlay, I.Garcia et al. // Trauma. 2003.- Vol. 54, Nl.-P. 104-112.

271. Modulation of polymorphonuclear cell interleukin-8 secretion by human monoclonal antibodies to type 8 pneumococcal capsular polysaccharide / T. Burns, Z. Zhong, M. Steinitz, L.A. Pirofski // Infect. Immun.- 2003.- Vol. 71, N 12.-P.6775-6783.

272. Molecular mimicry in Candida albicans / K.S. Gustafson, G.M.Vercellotti, C.M. Bendel, M.K. Hostetter // J. Clin Invest. 1991. - Vol. 87. - P. 1896-1902.

273. Moragues, M.D. A monoclonal antibody directed against a Candida albicans cell wall mannoprotein exerts three anti-C.albicans activities / M.D. Moragues, M.J. Omaetxebarria, N. Elguezabal // Infect Immun. -2003. -Vol. 71, N 9. P. 52735279.

274. Muller-Eberhard, H.Y. Molecular biology and chemistry the alternative pathway of complement / H.Y. Muller-Eberhard, S.O. Schreiber // Adv. Immunol. -1980. -Vol. 29,-P. 1-53.

275. Murav'ev, R.A. Gelatinase granules of the neutrophil granulocytes V R.A. Murav'ev, V.A. Fomina, V.V. Rogovin // Izv. Akad. Nauk. Ser. Biol. 2003. -N 4.- P. 389-394.

276. Nair, R.G. The effect of oral bacteria on Candida albicans germ-tube formation / R.G. Nair, S. Anil, L.P. Samaranayake // APMIS.- 2001.- Vol.109, N 2.- P.147-154.

277. Nair, R.G. The effect of oral commensal bacteria on candidal adhesion to human buccal epithelial cells in vitro / R.G. Nair, L.P. Samaranayake // J. Med. Microbiol. -1996. Vol. 45. - P. 179-185.

278. Neutrophil activation and arthritis induced by C. albicans water-soluble manno-protein-beta-glucan complex (CAWS) / A. Ishida-Okawara, N. Nagi-Miura, T.Oharaseki et al. // Exp. Mol. Pathol.- 2007. Vol.82, N 2. - P. 220-226.

279. Neutrophils and the adaptive immune response to Candida albicans / L Romani, A. Mencacci, E. Cenci et al. // Res. Immunol. 1996.-Vol.147, N.8-9- P.512-518.

280. Neutrophils: molecules, functions and pathophysiological aspects / V. Witko-Sarsat, P. Rieu, B. Descamps-Latscha et al. // Laboratory Investigation.-2000.-Vol. 80,- P. 617-653.

281. New insights into the role of nuclear factor-kappaB, a ubiquitous transcription factor in the initiation of diseases / F. Chen, V. Castranova, X. Shi, L.M. Demers // Clin. Chem.- 1999.- Vol. 45.- P.7-17.

282. Newman, S.L. Candida albicans is phagocytosed, killed, and processed for antigen presentation by human dendritic cells / S.L. Newman, A. Holly // Infect. Immun. -2001. -Vol. 69, N 11. P. 6813-6822.

283. Nosocomial acquisition of Candida albicans: an epidemiologic study / J.A. Vazquez, V. Sancher, C. Dmuchowski et al. // J. Infect. Dis. -1993. Vol.168, N 1. - P. 195-201.

284. O'Neill, L.A.G. Toll-like receptor signal transduction and the tailoring of innate immunity: a role for Mai? / L.A.G. O'Neill // Trends Immunol. 2002. -Vol. 23. N3.-P. 296-300.

285. Ол Sullivan, J.M. Adhesion of Candida albicans to oral streptococci in promoted by selective adsorption of salivary proteins to the streptococcal cell surface / J.M. O'Sullivan, H.F. Jenkison, R.O. Cannon // Microbiology.-2000.- Vol. 146.-P. 41-48.

286. Odds, F.C. Candida species and virulence / F.C. Odds // ASM News.- 1994.-Vol. 60.- P. 313-318.

287. Odds, F.S. Candida and candidosis. 2nd ed./ F.S. Odds London: Bailliere Tindall, 1988- 253 p.

288. O'Flaherty, J.T. Leukocyte aggregation induced by chemotactic factors / J.T. O'Flaherty, P.A. Ward // Inflammation.- 1978.- Vol.3, N. 2. P. 177-194.

289. Ollert, M.W. Reduction expression of the functionally active complement receptors for iC3b but not C3d on an avirilent mutant of Candida albicans / M.W. Ollert, E. Wadsworth, R.A. Calderone // Infect. Immun.- 1990.- Vol.58, N 4.-P.909-913.

290. Oral Candida: clearance, colonization, or candidiasis? / R.D. Cannon, A.R. Holmes, A.B. Mason, ВС. Monk // J. Dent. Res.- 1995.- Vol. 74, N.5.- P.l 1521161.

291. O'Riordan, T.G. Mucociliary clearance in adult asthma / T.G. O'Riordan, J. Zwang, G.C. Smaldone // Am. Rev. Respir. Dis. -1992.- Vol.146, N 3.- P.598-603.

292. Osselaer, N.V. Dextran sulphate inhibits neutrophil emigration and neutrophil-dependent plasma leacage in rabbit skin / N.V. Osselaer, A.G. Herman, M. Rampart// Agents and Actions.- 1993. Vol. 38.- P. 51-53.

293. Parker, C.G. Identification of stathmin as a novel substrate for p38 delta / C.G. Parker, J. Hunt, K. Diener // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1998. -Vol. 249. P. 791-796.

294. Partial characterization of a Candida albicans fimbrial adhesion / L. Yu, K.K. Lee, K. Ens et al. // Infect. Immun. -1994. Vol. 62, N 7.- P. 2834-2842.

295. Pawderly, W.G. Molecular epidemiology of recurrent oral candidiasis in human immunodefency virus-positive patients: evidence for two patterns of recurrence / W.G. Pawderly, R. Robinson, E.J. Keath // J. Infect. Dis.- 1993. Vol.168.- P. 463-466.

296. Pendrak, M.Z. Adherence of Candida albicans to host cells / M.Z. Pendrak, S.A. Klotz // FEMS Microbiology letters. -1995. Vol. 129. - P. 103-114.

297. Pereiro, M. Adherence of Candida albicans strains isolated from AIDS patients. Comparison with pathogenic yeasts isolated from patients without HIV infection / M. Pereiro, A.Losada, S.Toribo // Br. J. Dermatol. 1997. - Vol.137.- P. 7680.

298. Perumal, P. Role for cell density in antifungal drug resistance in Candida albicans biofilms / P. Perumal, S. Mekala, W.L. Chaffin // Antimicrob. Agents Chemother. 2007. - Vol. 51, N 7. - P. 2454-2463.

299. Phagocytosis by neutrophils induce an amino acid deprivation response in Sac-charomyces cerevisiae and Candida albicans / I. Rubin-Bejerano, I. Fraser, P. Grisafi, G.R. Fink // Proc. Natl. Acad. Sci. USA -2003. Vol. 100. - P. 11007-11012.

300. Phagocytosis of Candida albicans induces apoptosis of human neutrophils / D. Rotstein, J. Parodo, R. Taneja, J.C. Marshall // Shock. 2000.- Vol.14, N 3. - P. 278-283.

301. Phagocytosis, oxidative burst, and killing of Candida dubliniensis and Candida albicans by human neutrophils / H. Peltroche-Llacsahuanga, N. Schnitzler, S. Schmidt et al. // FEMS Microbiol. Lett. 2000. -Vol.191, N 1. - P. 151-155.

302. Pillemer, L. The properdin system and immunity. III. The zymosan assay of properdin / L. Pillemer, L. Blum, J.H. Lepon // J. Exp. Med.- 1956. Vol.103, N l.-P. 1-13.

303. Pivarcsi, A. Innate immune functions of the keratinocytes / A. Pivarcsi, L. Кетёпу, A. Dobozy // Acta. Microbiol. Immunol. Hung. -2004. Vol. 51, N 3-P.303-310.

304. Polito, A.J. Epithelil cells as regulators of airway inflammation / A.J. Polito, D. Proud // J Allergy Clin Immunol. 1998. -Vol.102. - P.714-718.

305. Polymorphonuclear leukocytes (PMNs) induce protective Thl-type cytokine epithelial responses in an in vitro model of oral candidosis / M. Schaller, U. Boeld, S. Oberbauer et al. // Microbiology. 2004. - Vol. 150.- P. 2807-2813.

306. Potent inhibitor of neutrophil migration by cryptococcal mannoprotein-4-induced desensitization / F.E. Coenjaerts, A.M. Walenkamp, P.N. Mwinzi et al. // J. Immunol. 2001. - Vol.167, N.7.- P. 3988-3995.

307. Production of interleukin-8 by human neutrophils stimulated with Trichomonas vaginalis / J.S. Ryu, J.H. Kang, S.Y. Jung et al. // Infect. Immun. -2004. -Vol.72, N3.-P.1326-1332.

308. Protein measurement with the folin phenol reagent / O.H. Lowry, N.I. Rosen-brought, A.L. Farr, R.I. Randall // J. Biol. Chemistry. 1951. - Vol. 193. - P. 265-267.

309. Pseudomonas aeruginosa hemolytic phospholipase С suppresses neutrophil respiratory burst activity / L.S. Terada, K.A. Johansen, S. Nowbar et al. // Infect. Immun.- 1999. Vol. 67, N. 5. - P. 2371-2376.

310. Quinn, M.O. Increased salivary exoglycosidase activity during critical illness / M.O. Quinn, V.E. Miller, A.R. Dal Nogare // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1994.-Vol. 150.-P. 179-183.

311. Radi, Z.A. Cell adhesion molecules, leukocyte trafficking, and strategies to reduce leukocyte infiltration / Z.A. Radi, M.E.Jr. Kehrli, M.R. Ackermann // J. Vet. Intern. Med. -2001. Vol.15, N 6. - P. 516-529.

312. Rastogi, D. Host-bacterial interactions in the initiations of inflammation / D. Rastogi, A.G. Rather, A. Prince // Paediatr. Respir. Rev. 2001. - Vol. 2. - P. 245-252.

313. Ray, T.L. Adherence of Candida species to human epidermal corneocytes and buccal mucosal cutaneous pathogenicity / T.L. Ray, C.D. Payne // J.Invest. Dermatol. 1984. - Vol. 83.- P. 37-41.

314. Reactivity of Candida albicans germ tubes with salivary secretory IgA / J. Ponton, J. Bikandi, M.D. Moragues et al. // J. Dent. Res. -1996.- Vol.75.- P. 1979-1985.

315. Regulation of Candida albicans growth and adhesion by saliva / E. Ueta, T. Ta-nida, S. Doi, T. Osaki // J. Lab. Clin. Med.- 2000. Vol. 136, N 1. - P. 66-73.

316. Regulation of chemokine gene expression in human peripheral blood neutrophils phagocytosing microbial pathogens / M. Hachicha, P. Rathanaswami, P.H. Naccache, S.R. McColl // J. Immunol. 1998. - Vol.160, N 1. - P. 449-454.

317. Relationship between the cell surface hydrophobicity and adherence of Candida krusei and Candida albicans to epithelial and denture acrylic surfaces / Y.H. Samaranayake, P.C. Wu, L.P. Samaranayake, M. So // APMIS. 1995. - Vol. 103, N10.-P. 707-713.

318. Rhee, K.J. Role of commensal bacteria in development of gut-associated lymphoid tissues and preimmune antibody repertoire / K.J. Rhee, P. Sethupathi, A. Driks // J. Immunol. -2004. -Vol. 172, N. 2. -P. 1118-24.

319. Rodier, M.H. Immunoglobulins G could prevent adherence of Candida albicans to polystyrene and extracellular matrix components / M.H. Rodier, C. Imbert, C. Kauffmann-Lacroix // J. Med. Microbiol. -2003. -Vol. 52 (Pt 5). P. 373377.

320. Romani, L. Initiation of T-helper cell immunity to Candida albicans by IL-12: the role of neutrophils / L Romani, F Bistoni, P Puccetti // Chem. Immunol.-1997.-N8.-P.110-135

321. Romani, L. Innate and adaptive immunity in Candida albicans infection and saprophytism/ L. Romani // Leukoc. Biol. -2000.-Vol. 68.-P. 175-179.

322. Rouabhia, M. Interleukin-18 and gamma interferon production by oral epithelial cells in response to exposure to Candida albicans or lipopolysaccaride stimulation / M. Rouabhia, G. Ross, N. Page // Infect. Immun. 2002. - Vol. 70. -P.7073-7080.

323. Rouse, J. A novel kinase cascade triggered by stress and heat shock that stimulates MAPKAP kinase-2 and phosphorylation of the small heat shock proteins / J. Rouse, P. Cohen, S.Trigon // Cell. 1994. - Vol. 78.- P. 1027-1037.

324. Ruhn, D.M. Candida biofilms: antifungal resistance and emerging therapeutic options / D.M. Ruhn, M.A. Ghannoum // Curr. Opin. Investig. Drugs.- 2004.-Vol. 5, N 2 P.186-197.

325. Ruissen, A.L. Internalisation and degradation of histatin 5 by Candida albicans / A.L. Ruissen, J. Groenink, P.Krijtenberg // Biol. Chem. -2003. -Vol. 384, N 1. -P. 183-190.

326. Samaranayake, Y.H. Experimental Oral Candidiasis in Animal Models / Y.H. Samaranayake, L.P. Samaranayake // Clinical Microbiology Reviews. 2001. -Vol. 14, N 2.- P. 398-429.

327. San Millan, R. Effect of salivary secretory IgA on the adhesion of Candida albicans to polystyrene / R. San Millan, N. Elguezabal, P. Regulez // Microbiology. -2000. -Vol. 146. -P. 2105-2112.

328. Schmalz, G. Release of prostaglandin E2, IL-6 and IL-8 from human oral epithelial culture models after exposure to compounds of dental materials/ G. Schmalz, H. Schweiki, K.A.Hiller // Eur. J. Oral Sci. 2000. - Vol. 108. - P.442-448.

329. Schmid, J. Computer-assisted methods for assessing strain relatedness in Candida albicans by fingerprinting with the moderately repetitive sequence Ca3 / J. Schmid, E. Voss, D.R. Soli // J. Clin. Microbiol. 1990. - Vol.28, N 6.- P. 1236-1243.

330. Segal, E. Correlative relationship between adherence of Candida albicans to human vaginal epithelial cells in vitro and candidal vaginitis / E. Segal, A. Soroka, A. Schecter// Sabouraudia. -1984. -Vol. 22. P. 191-200.

331. Segal, E. Inhibitors of Candida albicans adhesion to prevent candidiasis / E. Segal // Adv. Exp. Med. Biol. -1996. Vol. 408. - P. 197-206.

332. Separation of immunomodulatory effects of mannan from Candida albicans into stimulatory and suppressive components / J.E. Domer, P.W. Stashak, K. Elkins et al. // Cell. Immunol. -1986. Vol.101, N 2. - P. 403-414.

333. Serologic response to cell wall mannoproteins and proteins of Candida albicans / J.P. Martinez, M.L. Gil, J.L. Lopez-Ribot, W.L. Chaffin // Clinical Microbiology Reviews. -1998. Vol. 11.- P. 121-141.

334. Signal-induced site-specific phosphorylation targets I kappa В alpha to the ubi-quitin-proteasome pathway / Z. Chen, J. Hagler, V. J. Palombella et al. // Genes Dev.- 1995. Vol.9. - P. 1586-1597.

335. Simon, L. Is phagocytosed killed and processed for antigen presentation by human dendritic cells/ L. Simon, H. Angela // Infect Immun. -2001. Vol. 69, N. 11. - P.6813-6822.

336. Simultaneous assay for oxidative metabolism and adhesion of human neutrophils: evidence for correlation's and dissociation's of the two responses / P. Bellavite, S.Chirumbolo, C. Mansoldo et al. // J. Leukoc. Biol.- 1992. Vol. 51, N4.-P. 329-335.

337. Smith, J.K. Effect of interferon alpha on HLA-DR expression by human buccal epithelium / J.K. Smith, D.S.Chi, G. Krishnaswamy //Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). 1996. -Vol. 44. - P.83-88.

338. Smith, J.K. Oral use of interferon-alpha stimulates ISG-15 transcription and production by human buccal epithelial cells / J.K. Smith, A.A. Siddiqui, G.A. Krishnaswamy //J. Interferon Cytokine Res. 1999. - Vol. 19. - P.923-928.

339. Soil, D.R. High-frequency switching in Candida albicans / D.R Soil //Clin. Microbiol. Rev.- 1992.-Vol. 5, N 2.- P. 183-203.

340. Springer, T.A. Adhesion receptors of the immune system / T.A Springer // Nature.- 1990.- Vol. 346.- P.425-434.

341. Stadnyk, A.W. Cytokine production by epithelial cells / A.W. Stadnyk // FASEB J. -1994. Vol. 8. -P. 1041-1047.

342. Steele, C. Cytokine and chemokine production by human oral and vaginal epithelial cells in response to Candida albicans/C. Steele, P.L. Fidel// Infect. Immun. 2002. - Vol. 2. -P.577-583.

343. Sturtevant, J. Candida albicans adhesins: biochemical aspects and virulence / J. Sturtevant, R. Calderone // Rev. Jberoam. Micol. 1997.- Vol.14.- P. 90-97.

344. Suzuki, K. Assay method for myeloperoxidase in human polymorphonuclear leukocytes / K. Suzuki, H. Ota, S. Sasagawa // Anal Biochem. -1983. -Vol. 132, N. 2. -P.345-352.

345. Svanborg, C. Cytokine responses during mucosal infections: role in disease pathogenesis and host defence / C. Svanborg, G. Godaly, M. Hedlund // Curr. Opin. Microbiol. 1999. - Vol. 2. -P.99-105.

346. Synergistic effects of Candida and Escherichia coli on gut barrier function / L.N. Diebel, D.M. Liberati, C.A. Diglio et al. // J. Trauma.- 1999. Vol. 47, N 6.-P.1045-1050.

347. Systemic fluconazole therapy and in vitro adhesion of Candida albicans to human buccal epithelial cells / A.M. Darwazeh, P.J. Lamey, M.A. Lewis, L.P. Samaranayake // J. Oral Pathol. Med. 1991. - Vol.20. - P. 17-19.

348. Так, P.P. NF-B: a key role in inflammatory diseases / P.P. Так, G.S. Firestein // J Clin Invest. -2001. -Vol. 107, N 1.- P. 7-11.

349. Takizawa, H. Airway epithelial cells as regulators of inflammation / H.Takizawa // Int. J. Mol. Med. -1998. -Vol. 1. P. 367-378.

350. Tanida, T. Decreased excretion of antimicrobial proteins and peptides in saliva of patients with oral candidiasis / T. Tanida, T. Okamoto, A. Okamoto // J. Oral. Pathol. Med. -2003. -Vol. 32, № Ю. -P. 586-594.

351. Tato, С. M. Host-pathogen interactions: subversion and utilization of the NF-kB pathway during infection/ C.M. Tato, C.A. Hunter // Infect. Immun.- 2002.-Vol. 70, N. 7.-P. 3311-3317.

352. The complement system / K. Rother, G.O. Till, G.V. Hansch et al.. Springer, 1998.-594 p.

353. The contribution of the toll-like/IL-1 receptor superfamily to innate and adaptive immunity to fungal pathogen in vivo / S. Bellocchio, C. Montagnoli, S. Bozza, et al. // J. Immunol. 2004. - Vol.172, N.5. - P. 3059-3069.

354. The frequency of integrative transformation at phase-specific genes of Candida albicans correlates with their transcriptional state / T. Srikantha, B. Morrow, K. Schroppel, D.R. Soil // Mol. Gen. Genet. -1995.- Vol.246, N 3.- P. 342-352

355. The gyphal and yeast forms of Candida albicans bind the complement regulator C4b-binding protein / T. Meri, A.M. Blom, A. Hartmann et al. // Infect. Im-mun.- 2004. Vol. 72, N 11. - P. 6633-6641.

356. The in vitro lysozyme susceptibility of Candida albicans cultured in carbohydrate-supplemented media / Y.H. Samaranayake, T.W. MacFarlane, T.C.

357. Aitchison, L.P. Samaranayake //.Oral. Microbiol. Immunol. 1993.- Vol. 8, N 3.- P. 177-181.

358. The neutrophil as a cellular source of chemokines / P. Scapini, J.A. Lapinet-Vera, S. Gasperini et al. // Immunol. Rev.- 2000. Vol. 177. - P. 195-203.

359. The opsonic fragment of the third component of human complement (C3) / T.P. Stossel, RJ. Field, J.D. Gitlin et al. // J Exp. Med. -1975. Vol.141, N 6.-P.1329-1347.

360. The primary structure of p38 gamma: A new member of p38 group of MAP kinase / Z. Li, Y. Jiang, R.J. Ulevitch, J. Han // Biochem. Biophys. Res. Comm.- 1996. Vol. 228. - P. 334-340.

361. The role of toll-like receptor (TLR) 2 and TLR4 in the host defense against disseminated candidiasis / M.G. Netea, C.A. Van Der Graaf, A.G. Vonk et al. // J. Infect. Dis.- 2002. Vol. 185, N 10. - P. 1483-1489.

362. The yeast Candida albicans binds complement regulators factor H and FHL-1/ T. Meri, A. Hartmann, D. Lenk et al. // Infect. Immun. 2002. - Vol.70, N 9. -P.5185-5192.

363. Theaker, E.D. The possible influence of the menstrual cycle on the adherence of Candida albicans to human buccal epithelial cells in vitro / E.D. Theaker, D.B. Drucker, A.C. Gibbs // Arch. Oral. Biol. 1993. - Vol. 38. - P.353-355.

364. Theofilopoulos, A.N. The biology and detection of immune complexes / A.N. Theofilopoulos, F J. Dixon // Advances in immunology. : Academic press, N.Y., 1979.-Vol. 28. P. 89-221.

365. Tian, W. МАРК signaling and the kidney / W. Tian, Z. Zhang, D. M. Cohen // Am. J. Physiol. Renal. Physiol.- 2000.- Vol. 279.- P. 593-604.

366. Topley and Wilson's. Microbiology and Microbial Infections. Vol. Medicalth

367. Mycology. 9 ed. 1999 (Online version).

368. TOS9 regulates white-opaque switching in Candida albicans / T. Srikantha, A.R. Borneman, K.J. Daniels et al. // Eukaryot. Cell. -2006. Vol.5, N 10. -P.1674-1687.

369. Tosh, F. D. Characterization of a fucoside-binding adhesin of Candida albicans / F. D. Tosh, L. J. Douglas // Infect. Immun.- 1992. Vol. 60.- P. 4734-4739.

370. Tosi, V.F. Neutrophil elastase cleave iC3b on opsonized pseudomonas as well as CR1 on neutrophils to create a functionally important opsonin receptor mismatch / V.F. Tosi, H. Zacem, M. Berger // J. Clin. Invest. 1990. - Vol. 86.-P.300-308.

371. Triantafilou, M. Lipopolysaccharide recognition: CD 14, TLRs and the LPS-activation cluster / M. Triantafilou, K. Triantafilou // Trends Immunol. -2002. -Vol. 23. -P. 301-305.

372. Tsang, C.S. Factors affecting the adherence of Candida albicans to human buccal epithelial cells in human immunodeficiency virus infection/C. S. Tsang, L.P. Samaranayake // J. Dermatol. 1999. - Vol. 141. - P.852-858.

373. Umazume, M. Reduced inhibition of Candida albicans adhesion by saliva from patients receiving oral cancer therapy / M. Umazume, E. Ueta, T.Osaki // J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33. - P. 432-439.

374. Underbill, D.M. Toll-lice receptors: key mediators of microbe detection / D.M. Underhill, A. Ozinscy // Curr. Opin. Immunol. -2002. -Vol. 14. -P.103-110.

375. Urban, C.F. How do microbes evade neutrophil killing? / C.F. Urban, S. Lourido, A. Zychlinsky // Cellular Microbiology. 2006.- Vol. 8. N 11 - P. 1687-1696.

376. Vaahtoniemi, L.H. The age-dependence of bacterial presence on oral epithelial surfaces in vivo / L.H. Vaahtoniemi, S. Raisanen, L.E. Stenfors // Oral. Microbiol. Immunol. 1992. - Vol. 7. - P.263-266.

377. Vaginal and oral epithelial cell anti-Candida activity / F. Nomanbhoy, C. Steele, J. Yano, P.L. Jr. Fidel //Infect. Immun.- 2002.- Vol. 70, N 12.- P.7081-7088.

378. Vasselon, T. Toll-receptors: a central element in innate immune responses/ T. Vasselon, P.A. Detmers // Inf. Immun. -2002. -Vol. 70. -P. 1033-1041.

379. Vazquez-Torres, A. Macrophages in resistance of candidiasis / A. Vazquez-Torres, E. Balish // Microbiol. Mol. Biol. Rev.- 1997. Vol.61, N 2. - P. 170192.

380. Verstrepen, K.J. Flocculation, adhesion and biofilm formation in yeasts / K.J. Verstrepen, F.M. Klis //Mol. Microbiol.- 2006.- Vol.60, N l.-P. 5-15.

381. Viljoen, B.C. Yeast associated with Chedda and Gouda making / B.C. Viljoen, T. Grey ling //Int. S. Food. Microbiol. -1995.- Vol. 28.- P.79-88.

382. Villar, C.C. Role of Candida albicans polymorphism in interactions with oral epithelial cells / C.C. Villar, H. Kashleva, A.Dongari-Bagtzoglou //Oral. Microbiol. Immunol. -2004. Vol.19, N 4.- P. 262-269.

383. Walter, M.J. Interleukin 12 p40 production by barrier epithelial cells during airway inflammation / M.J. Walter, N. Kajiwara, P. Karanja // J. Exp. Med. 2001. -Vol. 193.-P. 339-351.

384. Ward, P.A. The acute inflammatory response and its regulation / P.A. Ward // Arch. Surg. -1999. -Vol.134. P. 666-669.

385. Wehkamp, J. Innate immunity and colonic inflammation: enhanced expression of epithelial alpha-defensins / J. Wehkamp, B. Schwind, K.R. Herrlinger // Dig. Dis. Sci. 2002. - Vol. 47. - P. 1349-1355.

386. Weinmeister, K.D. Buccal cell carbohydrates are altered during critical illness / K.D. Weinmeister, A.R. Dal Nogare // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1994. -Vol. 150.-P.131-134.

387. Wellmer, A. Adherence on buccal epithelial cells and germ tube formation in the continuous flow culture of clinical Candida albicans isolated / A. Wellmer, H. Berhardt //Mycoses. -1997. Vol.40. - P. 363-368.

388. White, T.C. Candida albicans secreted aspartyl proteinases: isoenzyme pattern is determined by cell type, and levels are determined by environmental factors / T.C. White, N. Agabian//J. Bacterid.- 1995.-Vol. 177. P.5215-5221.

389. Woods, D.E. Role of salivary protease activity in adherence of gram-negative bacilli to mammalian buccal epithelial cells in vivo / D.E. Woods, D.C. Straus, W.G. Johanson // J. Clin. Invest. 1981. -Vol. 68. -P. 1435-1440.

390. Wu, S. Effects of systemic fluconazole therapy on in vitro adhesion of Candida albicans to buccal epithelial cells and changes of cell surface proteins of the epithelial cells / S. Wu, N. Guo, Y. Hou //Chin. Med. Sci. J. 1996. - Vol. 11.-P.45-48.

391. Wunder, D. Human salivary histatin 5 fungicidal action does not induce programmed cell death pathways in C. albicans / D. Wunder, J. Dong, D. Baev // Antimicrob. Agents Chemother. 2004. - Vol. 48, N 1. - P. 110-115.

392. Xythalis, D. Inhibition of IL-8-mediated МАРК activation in human neutrophils by betal integrin ligands / D. Xythalis, M.B. Frewin, P.W. Gudewicz // Inflammation. -2002. Vol. 26, N 2. - P. 83-88.

393. Yabe, T.I. Neuroprotective effects of pigment epithelium- derived factor (PEDF) on cerebral granule neurons / T.I. Yabe, D. Wilson, J.P. Schwartz // J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276, N 46. - P. 43313-43319.

394. Yamaoka, S. Complementation cloning of NEMO, a component of the IkappaB kinase complex essential for NF-kappaB activation / S. Yamaoka // Cell. 1998. -Vol. 93.-P. 1231-1240.

395. Yanagita, M. IL-15 up-regulates iNOS expression and NO production by gingival epithelial cells / M. Yanagita, Y. Shimabucuro, T. Nozaki // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. - Vol. 297. - P. 329-334.

396. Yang, Y.L. Virulence factors of Candida species / Y.L. Yang // J. Microbiol. Immunol. Infect. 2003. - Vol. 36, N 4. - P. 223-228.

397. Yeast adhesion in the pathogenesis of endocarditis due to Candida albicans: studies with adherence-negative mutants / R.A. Calderone, R.L. Cihlar, D.D.

398. Lee et al. // J. Infect. Dis. 1985. - Vol. 152, N 4. - P. 710-715.

399. Zarubin, T. Activation and signaling of the p38 MAP kinase pathway / T. Zarubin, J Han // Cell. Research. 2005. - Vol. 15, N 1. - P. 11-18.

400. Zhang, M. X. Mannan-specific IgG antibodies in normal human serum mediate classical pathway initiation of C3 binding to Candida albicans / M.X. Zhang, D.M. Lupan, T.R. Kozel // Infect. Immun. 1997. - Vol. 65, N 9. - P. 38223827.253

401. Zhang, M. X. Mannan-specific immunoglobulin G antibodies in normal human serum accelerate binding of C3 to Candida albicans via the alternative complement pathway / M. X. Zhang, T. R. Kozel // Infect. Immun. -1998. Vol. 66, N 10.-P. 4845-4850

402. Zigelboim, J. Polymorphonuclear leukocyte Fc receptors in antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC) / J. Zighelboim, R.P. Gale, E. Kedar // Transplantation. 1976. - Vol. 21, N 6. - P. 524-526.

Информация о работе

Заславская, Майя Исааковна
доктора биологических наук
Нижний Новгород, 2009
ВАК 03.00.07

Диссертация

Взаимодействие Candida albicans с нейтрофилами и эпителиоцитами в экспериментальных системах - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы