Защитные эффекты белка теплового шока 70 кДа при депривации сна и эндотоксемии

Лапшина, Ксения Валерьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Защитные эффекты белка теплового шока 70 кДа при депривации сна и эндотоксемии
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Защитные эффекты белка теплового шока 70 кДа при депривации сна и эндотоксемии"

На правах рукописи

Лапшина Ксения Валерьевна

ЗАЩИТНЫЕ ЭФФЕКТЫ БЕЛКА ТЕПЛОВОГО ШОКА 70 кДа ПРИ ДЕПРИВАЦИИ СНА И ЭНДОТОКСЕМИИ

03.03.01. - физиология

4845461

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 2 МАЙ 2011

Санкт-Петербург 2011

4845461

Работа выполнена в лаборатории сравнительной термофизиологии Учреждения Российской академии наук Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН

Защита диссертации состоится «10» мая 2011 года в 11 часов на заседании диссертационного совета (Д 002.127.01) при Учреждении Российской академии наук Институте эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН по адресу: 194223, г. Санкт-Петербург, пр. М. Тореза, 44

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения Российской академии наук Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН по адресу: 194223, г. Санкт-Петербург, пр. М. Тореза, 44.

Научный руководитель: кандидат биологических наук, доцент

Екимова Ирина Васильевна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук Аристакесяи Евгения Аветиковна

доктор медицинских наук, профессор Клименко Виктор Матвеевич

Ведущая организация:

Санкт-Петербургский Государственный Университет

Автореферат разослан

Ученый секретарь

Диссертационного совета

доктор биологических наук, профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Человек около третьей части своей жизни тратит на сон. Продолжительное лишение сна несовместимо с жизнью. Большинство взрослых хотя бы однажды испытывали проблемы со сном, более четверти людей имеют те или иные его нарушения. Среди нарушений сна наиболее часто встречается инсомния, которая характеризуется затруднением засыпания или сокращением времени сна. К развитию инсомнии могут приводить нарушения режима сна, стрессовые факторы, чрезмерные умственные и физические нагрузки, различные неврологические заболевания [Левин, 2007, 2008]. В свою очередь, инсомния может провоцировать развитие неврозов, ослабление иммунитета, нарушение терморегуляции и других физиологических функций [Mullington et al., 2009]. Большая социальная значимость инсомнии определила разработку моделей, имитирующих нарушение сна. Одной их таких моделей является делривация (лишение) сна, сопровождающаяся эмоциональным стрессом и физическим напряжением. По наблюдениям клиницистов, нарушение режима сна и увеличение длительности бодрствования во время эндотоксемии, вызванной бактериальной или вирусной инфекцией, значительно затягивают процесс выздоровления. Особенности нарушений сна и терморегуляции, вызванные депривацией сна в условиях эндотоксемии, не изучались. Наиболее интересным объектом для этого исследования могут оказаться птицы, температура тела которых составляет 40-41 °С и при эндотоксемии может повышаться еще на 1-1.5 °С, достигая "красной" черты перегревания [Веселкин, 1963; Nomoto, 1997]; кроме того, они имеют ряд особенностей в организации сна [Rattenborg et al., 2009].

сятилетие накапливаются данные о вовлечении шаперона Hsp70 в многофакторные механизмы контроля сна. Рядом авторов во время депривации сна обнаружено увеличение экспрессии Hsp70 в различных структурах мозга мыши, крысы и белоголовой овсянки [Terao et al., 2003; Naidoo et al., 2005; Jones et al., 2008]. Выяснено, что увеличение содержания Hsp70 в мозге (путем его микро-инъеций в ликвор) вызывает увеличение медленного сна, снижение мышечной активности и температуры мозга у теплокровных животных [Пастухов и др., 2005, 2008]. Защитный (стресс-лимитирующий) эффект экзогенного Hsp70 обнаружен в модели стресса "заложника": введение Hsp70 в третий желудочек мозга ускоряет восстановление цикла сон-бодрствование и снижает уровень кортикостерона в плазме крови [Пастухов, Екимова, 2005]. Данные о защитном эффекте Hsp70 при нарушениях сна и терморегуляции в модели депривации сна отсутствуют.

Другой, не менее серьезной проблемой является эндотоксемия, которая вызывается попаданием в кровь эндотоксина грамотрицательных бактерий ли-лополисахарида (ЛПС). При эндотоксемии развиваются лихорадочная реакция, тахикардия, лейкоцитоз, нарушаются сон и функционирование иммунной, нервной и др. систем организма [Веселкин, 1963; Krueger et al., 1991; Яковлев, 2003; Клименко, 2005]. Избыточная концентрация в крови ЛПС может приводить к развитию тяжелейшего патологического процесса - сепсиса, смертность от которого в течение последних десятилетий варьирует от 25 до 80% [Angus, Wax, 2001]. Высокий уровень смертности свидетельствует о недостаточной эффективности имеющихся терапевтических средств. Согласно данным литературы, шаперон Hsp70 способен модулировать иммунный ответ [Asea, 2005; Мар-гулис, Гужова, 2009] и защищать от эндотоксинового сепсиса. Тепловое прс-кондиционирование, приводящее к экспрессии и накоплению Hsp70 в клетках периферических органов, уменьшает синтез провоспалительных цитокинов и смертность крыс при введении летальных доз ЛПС [Hotchlciss et al., 1993; Villar et al, 1994]. Системное введение Hsp70 крысам корректирует некоторые гемо-динамические показатели, снижает продукцию NO макрофагами и частично нормализует апоптоз нейтрофилов в модели эндотоксинового сепсиса [Kustanova et al., 2006; Rozhkova et al., 2010]. Однако остается не изученным, способен ли экзогенный Hsp70 ослабить лихорадочную реакцию и уменьшить нарушения сна и количественно-функциональных характеристик крови, вызванных эндотоксемией. Наиболее перспективным является проведение срав-. нительного исследования защитных эффектов Hsp70 при эндотоксемии у млекопитающих и птиц, которое позволит выяснить общие закономерности повышения резистентности организма к действию эндотоксина.

Цель исследования - определить, какие нарушения терморегуляции, сна и клеток крови, вызванные депривацией сна и эндотоксемией, поддаются коррекции с помощью белка теплового шока 70 кДа.

Основные задачи исследования

1. Определить изменения показателей терморегуляции и состояний сна и бодрствования у голубей при депривации сна.

2. Изучить изменения показателей терморегуляции и состояний сна и бодрствования у голубей при депривации сна в условиях эндотоксемии, вызванной липополисахаридом.

3. Выяснить, какие нарушения терморегуляции и временной организации состояний сна и бодрствования, вызванные депривацией сна у голубей, поддаются коррекции с помощью центральных микроинъекций Нзр70.

4. Сопоставить влияние периферических инъекций Нзр70 на показатели терморегуляции и состояний сна и бодрствования у голубей и крыс при эндотоксемии.

5. Изучить влияние периферических инъекций Нзр70 на число клеток крови и устойчивость мембран эритроцитов при эндотоксемии у крыс.

Научная новизна

Впервые установлено, что депривация сна у голубей приводит к развитию гипертермии, а также к полному преобладанию бодрствования и повышению уровня сократительной активности мышц; изменения двух последних показателей сохраняются в течение первого часа после депривации; в последующие часы отмечается уменьшение времени бодрствования и "отдача" медленного, а затем быстрого сна. Впервые показано, что депривация сна в условиях эндотоксемии, вызванной бактериальным эндотоксином ЛПС, усиливает гипертермию, продлевает нарушения сна и сократительной активности мышц, характерные для первого часа после депривации сна, и отодвигает проявление "отдачи" медленного сна у голубей. Впервые установлено, что введение Нзр70 в третий желудочек мозга вызывает в период после депривации сна продолжительное снижение температуры мозга, ускоряет наступление медленного сна и восстановление структуры сна, а также способствует усилению эффекта "отдачи" медленного сна и поддержанию низкого уровня сократительной активности мышц у голубей. Впервые показано, что у голубей и крыс ЛПС- индуцированная эн-дотоксемия вызывает сходные изменения в терморегуляции (увеличение температуры мозга, уменьшение теплоотдачи и усиление сократительного термо-генеза) и временной организации цикла сон-бодрствование (увеличение медленного сна и уменьшение быстрого сна). Впервые выявлено, что введение №р70 в вену оказывает противовоспалительное действие в модели эндотоксемии, о чем свидетельствуют снижение температуры мозга и уровня сократительной активности мышц, раннее восстановление структуры сна у голубей и крыс, отсутствие тахикардии у голубей, а также возвращение к контрольным значениям числа лейкоцитов и увеличение резистентности мембран эритроцитов у крыс.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Депривация сна вызывает у голубей нарушение терморегуляции, а в период после депривации - существенные изменения временных и спектральных характеристик состояний сна и бодрствования. ЛПС- индуцированная эндоток-семия усиливает нарушения терморегуляции и структуры цикла сон-бодрствование, вызванные депривацией сна у голубей.

2. Увеличение содержания Hsp70 в мозге (путем введения в третий желудочек мозга) ослабляет нарушения терморегуляции и структуры цикла сон-бодрствование, вызванные депривацией сна: в период после депривации сна ускоряет снижение уровня сократительной активности мышц, времени бодрствования и наступление медленного сна и увеличивает его "отдачу".

3. Белок теплового шока 70 кДа оказывает противовоспалительное действие у голубей и крыс в модели эндотоксемии, вызванной ЛПС: увеличение его содержания в крови (путем введения в вену) ослабляет лихорадочную реакцию, ускоряет восстановление цикла сон-бодрствование, нормализует число лейкоцитов в крови и повышает резистентность мембран эритроцитов.

Теоретическая и практическая значимость работы

Работа имеет фундаментальное значение для понимания защитной роли белков теплового шока семейства 70 кДа при нарушении сна и эндотоксемии. Полученные в работе данные о способности экзогенного Hsp70 корректировать нарушения в системе терморегуляции и цикле сон-бодрствование, вызванные депривацией сна, могут служить основанием для апробации в клинике физических способов прекондиционирования (посещение сауны, прием теплых ванн) и известных лекарственных средств, увеличивающих содержание Hsp70 и других шаперонов в мозге и тканях организма, при лечении инсомнии и других расстройств сна. Данные о противовоспалительном действии экзогенного Hsp70 в модели эндотоксемии указывают на перспективность применения препаратов на основе Hsp70 при политерапии эндотоксемии, эндотоксического шока и сепсиса. Результаты исследования могут быть использованы в курсах лекций по физиологии для студентов биологических и медицинских факультетов университетов и медицинских вузов.

Апробация работы

Результаты исследования были представлены и обсуждены на 4-6-й и 810-й Всероссийских конференциях молодых ученых "Человек и его здоровье" (Санкт-Петербург, 2002-2004, 2006-2008); Всероссийской конференции "Механизмы терморегуляции и биоэнергетики" (Иваново, 2002); Всероссийской конференции молодых исследователей "Физиология и медицина" (Санкт-Петербург, 2005); 4-й Всероссийской конференции "Актуальные проблемы со-мнологии" (Москва, 2004); на 2-4-й Всероссийских школах-конференциях (с международным участием) "Sleep as a window to the world of wakefulness" (Москва, 2003, 2007; Ростов-на-Дону, 2005); па 8-12-й Международных конференциях "Stress and behavior" (Санкт-Петербург, 2004, 2005, 2007-2009); на 19-21-м Съездах физиологического общества им. И.П. Павлова (Екатеринбург, 2004;

Москва, 2007; Калуга, 2010), на Scandinavian Physiological Society Annual Meeting, (Oulu, Finland, 2008) и Joint Meeting of the Scandinavian and German Physiological Societies (Copenhagen, Denmark, 2010).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 25 работ, из которых статьи в рецензируемых журналах - 2, статьи в сборниках научных работ - 2, тезисы докладов -21.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, четырех глав, содержащих результаты исследования и их обсуждение, выводов и списка литературы, включающего 60 отечественных и 202 зарубежных источника. Работа изложена на 170 страницах машинописного текста, иллюстрирована 11 таблицами и 40 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Электрофизиологические опыты выполнены на 20 взрослых голубях (Columba livia) обоего пола и 6 крысах-самцах линии Вистар. Исследования количественных характеристик крови и кислотной резистентности мембран эритроцитов выполнены на 92 крысах-самцах линии Вистар.

Хирургические операции выполнялись под общим нембуталовым наркозом (30 мг/кгдля голубей, 50 мг/кг для крыс, внутрибрюшинно) за 7-10 дней до начала электрофизиологических экспериментов. Для идентификации состояний сна и бодрствования голубям и крысам вживляли электроды для регистрации электроэнцефалограммы, электроокулограммы и электромиограммы. Для осуществления центральных микроинъекций голубям имплантировали проводящую канюлю в 3-й желудочек мозга по следующим координатам: 6.5 мм рост-ральнее нулевой точки и 5.5 мм ниже поверхности черепа [Karten, Hodos, 1967]. Измерения температуры мозга и температуры кожи (неоперенной части ноги у голубей и хвоста у крыс) проводились с помощью предварительно откалибро-ванных минитермисторов (BetaTherm cat 2К7 MCD1, США). Точность измерения температур составляла 0.01 °С. У голубей все провода от термисторов и электродов подводились подкожно к "рюкзачку" на спине птицы, который закреплялся проволокой под каждым крылом. У крыс все провода шли к разъему, размещенному на голове и зафиксированному самотвердеющей пластмассой Протакрил-М. Переключение сигналов на кабель, идущий к предварительному усилителю, осуществлялось через подвижный коммутатор. Далее сигналы через блок аналоговой обработки и оцифровки поступали в компьютер для архивирования данных. Для регистрации и анализа электрофизиологических параметров использовали компьютерную систему SASR 8800 (США).

Для изучения числа эритроцитов и лейкоцитов, а также устойчивости мембран эритроцитов при эндотоксемии, у крыс брали кровь из хвостовой вены через 1 час и через 5 часов. Определение суммарного пула циркулирующих в крови эритроцитов и лейкоцитов осуществляли с использованием стандартной методики подсчета в камере Горяева. Анализ гемолитической резистентности

эритроцитов производили по методу И.И. Гительзона и И.А. Терскова (1959) с использованием фотоэлектроколориметра КФК-2. Используемая длина волны составляла 670 нм. В качестве гемолитика использовали 0.004 Н раствор HCl.

Тотальную депривацию сна у голубей проводили с помощью тактильных и звуковых стимулов в течение 5-и часов (4 часа светлой фазы и 1 час темной фазы).

Эндотоксемию у голубей вызывали с помощью внутривенного введения бактериального эндотоксина ЛПС (Escherichia coli Olli:В4, Sigma Aldrich) за 4 часа до наступления неактивной фазы суток в дозе 5 мкг/кг и 100 мкг/кг. Крысам ЛПС вводили в начале неактивной фазы суток в дозе 100 мкг/кг.

В опытах использовали экзогенный Hsp70, состоящий из индуцибельной (Hsp70i) и конститутивной (Hsc70) изоформ в соотношении 3:2, полученный в лаборатории защитных механизмов клетки Института цитологии РАН. Hsp70 выделяли из тканевых лизатов красных (медленных) волокон тазобедренной мышцы быка с использованием комбинации хроматографических процедур [Margulis, Welsh, 1991]. Степень очистки препарата (не менее 99%) проверяли с помощью электрофореза в полиакриламидном геле. Для очистки от ЛПС препарат Hsp70 пропускали через колонку с полимиксин В-агарозным гелем (Sigma, США). Для проверки качества очистки Hsp70 от ЛПС использовали общепринятый LALA-тест (Limulus polyphemus amebocyte lysate assay). Препарат Hsp70 вводили голубям в 3-й желудочек мозга в дозе 1.5 мкг/0.5-0.7 мкл в момент окончания депривации сна. Микроинъекции производили с помощью шприца объемом 5 мкл (Hamilton Company). Внутривенное введение Hsp70 голубям и крысам осуществляли в дозе 85 мкг/кг за 15 минут до инъекции ЛПС. В контрольных экспериментах использовали апирогенный физиологический раствор в объеме 0.2 мл и фосфатный буфер (pH 7.4) в объеме 0.5 мкл. Для исключения влияния примеси контаминантов в используемом препарате Hsp70 в экспериментах применялся термоденатурированный Hsp70 (Нзр70ден). Его получали посредством нагревания Hsp70 до 100°С в течение 5 мин на водяной бане.

При статистической обработке показателей терморегуляции (температуры мозга, температуры кожи ноги и уровня сократительной активности мышц), мощности спектра и кислотной резистентности эритроцитов использовали непараметрический метод Вилкоксона. Временные характеристики состояний бодрствования и сна анализировали с помощью параметрического t-критерия Стьюдента и двухфакторного дисперсионного анализа ANOVA (LSD тест). Для анализа изменений числа лейкоцитов и эритроцитов использовали критерий Манна-Уитни для двух несвязанных выборок.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Влияние депривации сна на показатели терморегуляции и временные характеристики состояний бодрствования и сна у голубей

Опыты показали, что тотальная депривация сна у голубей вызывала повышение температуры мозга в течение 4-го и 5-го часов (рис. 1 а) и кожи ноги на

1.1±0.2 °С (р<0.05) в течение 5-го часа с момента начала эксперимента. В течение всего периода депривации сна наблюдалось увеличение уровня сократительной активности мышц (в среднем на 211%, р<0.05) (рис. 1 б).

период после депривациисна

Й я

т *

СО

300 250 200 150 100 ^ 50 0 ■50

■100 -I

□ депривация сна __##_

Часы

депривация сна 12 3 4

период после депривации сна 5 6 7 8

Рис. 1. Изменение температуры мозга (а) и уровня сократительной активности грудной мышцы (б) во время депривации сна н после депривации сна у голубей.

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05, двумя решетками - при р<0.001. На рисунке нулевая линия соответствует контролю.

Депривация сна практически полностью устраняла дремоту, медленный и быстрый сон по сравнению с контролем. Общее время (ОВ) бодрствования в течение каждого часа составляло в среднем 95 % (р<0.001). В течение 1-го часа после депривации сна выявлено усиление сократительной активности мышц (рис. 1 б) и преобладание бодрствования (рис. 2 а); латентный период медленного сна увеличивался в среднем на 14±5 мин (р<0.05), а ОВ этого состояния уменьшалось (рис. 2 б). Восстановление медленного сна происходило с эффектом компенсаторного увеличения его ОВ (рис. 2 б) (за счет увеличения длительности эпизодов с 47±2 с до 60±3 с, р<0.05) и представленности волн дельта-диапазона на ЭЭГ на 10% (р<0.05). В последующие часы ОВ медленного сна не отличалось от контрольных значений (рис. 2 б), однако, наблюдалось увеличение мощности волн дельта-диапазона на ЭЭГ во время медленного сна в среднем на 9.6% (р<0.05) до 8-го часа, что свидетельствовало об увеличении интенсивности сна. "Отдача" быстрого сна начиналась на 1 час позже по сравнению с медленным сном, в период с 3-го по 6-й час, и проявлялась увеличением ОВ быстрого сна за счет увеличения числа его эпизодов.

Результаты проведенного исследования свидетельствуют, что развитие гипертермии во время депривации сна связано с увеличением сократи тельного термогенеза. Нарушения сна (инсомния) и терморегуляции, выявленные в этих опытах, могут быть связаны с активацией гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, вызванной процедурой депривации сна. Увеличение активности этих систем приводит к повышению уровня гормонов стресса (ка-техоламинов и кортикостерона) [Меег1о е! а!., 2008], обладающих калориген-

ным эффектом [Пастухов, Хаскин, 1979] и участвующих в механизмах поддержания бодрствования [Vazquez-Palacios et al., 2001]. Компенсаторное увеличение OB медленного сна и его интенсивности, а также "отдача" быстрого сна, наблюдаемые со 2-го часа после депривации сна, могут указывать на снижение уровня кортикостерона и катехоламинов. По мнению клиницистов, глубокий сон является мощным антистрессовым фактором [Ekstedt, 2005; Вейн и др., 2001; Левин, 2007] и способствует восстановлению физиологических функций организма после перенесенного стрессорного воздействия. Именно во время медленного сна снижается в крови уровень гормонов стресса [Born, Horst, 2000].

Рис. 2. Изменение общего времени бодрствования (а) и медленного сна (б) в период после депривации сна у голубей.

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05, двумя решетками - при р<0.001.

2. Изменение показателей терморегуляции и временных характеристик состояний бодрствования и сна при депривации сна в условиях эндоток-семии у голубей

Проведение депривации сна при эндотоксемии, вызванной внутривенным введением ЛПС в дозе 5 мкг/кг, вызывало усиление гипертермии у голубей, которая сохранялась и в течение 1-го часа после депривации (рис. 3 а). В этих экспериментах отмечено также более длительное увеличение уровня сократительной активности мышц (на 1 час) (рис. 3 б) и периферической вазодилатации (на 2 часа) по сравнению с одной депривацией сна. Проведение депривации сна во время эндотоксемии продлевало нарушения в цикле сон-бодрствование, характерные для 1-го часа после депривации сна. Преобладание бодрствования и уменьшение ОВ медленного сна и быстрого сна сохранялось на 1 час дольше, чем после одной депривации сна (рис. 4 а, б). В этих опытах обнаружена более поздняя (на 2 часа) и более продолжительная "отдача" медленного сна (рис. 4 б). Увеличение ОВ медленного сна в этот период происходило за счет увеличения длительности его эпизодов (в среднем с 45±3 с до 61±2 с р<0.05). Эффекта "отдачи" быстрого сна после проведения депривации сна в условиях эндоток-

семии не наблюдалось, напротив, в период со 2-го по 6-й час ОБ быстрого сна уменьшалось за счет уменьшения числа его эпизодов по сравнению с одной де-привацией сна.

д физ. раствор + депривация сна

-•— ЛПС + депривация сна

400 -,

□ физ. раствор + депривация сна

■ ЛПС + депривация сна

8 о

депривация сна

период после депривации сна

1-5

-100 -Г

депривация

сна

период после депривациисна

Рис. 3. Изменение температуры мозга (а) и уровня сократительной активности мышц (б) при депривации сна в условиях эндотокеемии у голубей.

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05, двумя решетками - при р<0.001; звездочкой обозначены достоверные изменения при проведении депривации сна во время эндотокеемии по сравнению с одной депривацией сна при р<0.05. На рисунке нулевая линия соответствует контролю.

3 а

ю о

70 60 -50 -40 -30 20 -10 -О

-О- контроль

-¿г- физ. р-р +

депривация сна -♦-ЛПС + депривация сна

З5 70

X о 60

о 50

0> 5 40

2 30 -

20 -

10 -

5 7 Часы

1 2

- контроль

г-физ. раствор + депривация сна — ЛПС + депривация сна

I ' I ' I ' I 1 I 1

3 4 5 6 7

Часы

Рис. 4. Изменение общего времени бодрствования (а) и медленного сна (б) в период после депривации сна в условиях эндотокеемии у голубей.

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05, двумя решетками - при р<0.001; звездочкой обозначены достоверные изменения при проведении депривации сна во время эндотокеемии по сравнению с одной депривацией сна при р<0.05, двумя звездочками - при р<0.001.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что эндотоксемия усугубляет нарушения показателей терморегуляции и сна, вызываемые депривацией сна. Усиление гипертермии в этих экспериментах, по-видимому, связано с сум-мацией температурных эффектов депривации сна и эндотоксемии. Увеличение латентного периода восстановления показателей терморегуляции и цикла сон-бодрствование, вероятно, связаны с более сильной активацией гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы при проведении депривации сна в условиях эндотоксемии.

3. Влияние Нэр70 на изменение показателей терморегуляции и временных характеристик состояний сна и бодрствования в период после депривации сна

Введение Нзр70 в третий желудочек мозга в момент окончания процедуры депривации сна предотвращало повышение уровня сократительной активности мышц, характерное для 1-го часа после депривации сна. Сократительная активность мышц после введения Нзр70 снижалась ниже контрольных значений уже в 1-й час после депривации и сохранялась на низком уровне в течение последующих часов (рис. 5 б). Кроме того, №р70 вызывал длительное снижение температуры мозга (рис. 5 а) и ускорял восстановление цикла сон-бодрствование, нарушенного депривацией сна (рис. 6 а, б). Об этом свидетельствовало, во-первых, резкое снижение ОВ бодрствования (рис. 6 а) (в связи с уменьшением длительности его эпизодов с 89±3 с до 48±4 с (р<0.001)) и восстановление до контрольных значений ОВ медленного и быстрого сна в течение 1-го часа после депривации сна; во-вторых, уменьшение в 3.7 раза латентного периода наступления первого эпизода медленного сна.

Рис. 5. Влияние Шр70 на изменение температуры мозга (а) и уровня сократительной активности грудной мышцы (б) в период после депривации сна у голубей.

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05, звездочкой обозначены достоверные изменения при введении Нэр70 по сравнению введением фосфатного буфера при р<0.05, двумя звездочками - при р<0.001. На рисунке нулевая линия соответствует контролю.

1 2 3 4 5 6 7 8 Часы

Рис. 6. Влияние Hsp70 на изменение общего времени бодрствования (а) и медленного сна (б) в период после депривации сна у голубей.

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05, двумя решетками - при р<0.001 ; звездочкой обозначены достоверные изменения при введении Hsp70 по сравнению введением фосфатного буфера при р<0.05, двумя звездочками - при р<0.001.

Введение Hsp70 вызывало усиление эффекта "отдачи" медленного сна, о чем свидетельствовало более продолжительное увеличение ОВ медленного сна (за счет увеличения длительности его эпизодов с 50±4 с до 72±5 с, р<0.05 ) по сравнению с депривацией сна (рис. 6 б). В этих опытах отмечено ослабление феномена "отдачи" быстрого сна. В период с 3-го по 8-й час после депривадии сна выявлено уменьшение ОВ быстрого сна, которое происходило за счет уменьшения числа его эпизодов.

Для того, чтобы исключить возможность влияния контаминантов в препарате Hsp70 на изучаемые показатели, были выполнены эксперименты с денатурированным Hsp70 (№р70ден). Выяснено, что введение НБр70ден в третий желудочек мозга после окончания депривации сна не корректировало нарушения сна и терморегуляции, вызванные депривацией сна. Эти данные свидетельствуют, что защитные эффекты Hsp70 при депривации сна не связаны с его контаминацией ЛПС или другими примесями.

Проведенные эксперименты показали, что введение Hsp70 в третий желудочек мозга в момент окончания депривации сна вызывает у голубей в сравнении с контролем более быстрое наступление медленного сна и увеличение его "отдачи", что сопровождается характерным для медленного сна длительным снижением уровня сократительной активности мышц и температуры мозга. Увеличение "отдачи" медленного сна, вероятно, связано с суммированием со-многенного эффекта Hsp70 и эффекта "отдачи" медленного сна в ответ на длительное бодрствование, и может отражать усиление стресс-лимитирующей функции медленного сна. Сомногенный эффект Hsp70 связан со способностью Hsp70 преодолевать ликвороэнцефалический барьер, проникать в нейроны и

синапсы преоптической области гипоталамуса, участвующей в контроле медленного сна и терморегуляции [Еклтоуа ег а1., 2010]. Хорошо известно, что активация ГАМК(А)- рецепторов способствует сну. Предшествующее введение антагониста ГАМК(А)- рецепторов бикукуллина в вентро-латеральную преоп-тическую область гипоталамуса у голубей приводит к угнетению сомногенного и терморегуляторного эффектов №р70 и увеличению бодрствования [Пастухов, Екимова, 2005]. Можно полагать, что реализация сомногенного эффекта Нвр70 в наших опытах достигается за счет ГАМК(А)- опосредованного растормажи-вания "сон-позитивных" популяций нейронов в преоптической области гипоталамуса. Раннее наступление сна в постдепривационный период при введении Нэр70 может быть связано со способностью экзогенного №р70 снижать в крови уровень гормонов стресса. В пользу этого предположения свидетельствуют данные о том, что введение Нзр70 в 3-й желудочек мозга крысам сразу после иммобилизационного стресса вызывает значительное снижение содержания кортикостерона в плазме крови в сравнении с контрольной группой [Маньков-ская, Пастухов, 2005].

4. Сравнительное исследование эффектов Шр70 на терморегуляцию, сон и клетки крови при эндотоксемии у голубей и крыс

4.1. Изменения показателей терморегуляции и временных характеристик состояний сна и бодрствования при эндотоксемии у голубей и крыс

У голубей при эндотоксемии, вызванной введением ЛПС в дозе 85 мкг/кг, наблюдалось повышение температуры мозга (рис. 7 а), а также развитие периферической вазоконстрикции в течение первых 3-х часов после начала опыта. В течение 7-го и 8-го часов вазоконстрикция сменялась на вазодилатацию.

1.4 3 1.4-г -О-ЛПС —♦— НврУО+ЛПС

Рис. 7. Влияние Шр70 на изменение температуры мозга при эндотоксемии у голубей (а) и крыс (б)

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05; звездочкой обозначены достоверные изменения при введении Нзр70 по сравнению с действием одного эндотоксина при р<0.05. На рисунке нулевая линия соответствует контролю.

пЛПС Т ■ Нвр70+ЛПС

4 5 6 7

1 2 3 4 5 6 7

Рис. 8. Влияние Шр70 на изменение уровня сократительной активности мышц при эн-дотоксемии у голубей (а) и крыс (б).

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05; звездочкой обозначены достоверные изменения при введении Шр70 по сравнению с действием одного эндотоксина при р<0.05. На рисунке нулевая линия соответствует контролю.

В период с 1-го по 5-й час с момента введения ЛПС наблюдалось увеличение сократительной активности мышц в среднем на 62 % (р<0.05) (рис. 8 а), а с 1-го по 6-й час - увеличение частоты сердечных сокращений на 22.5% (р<0.05).

При эндотоксемии у крыс температура мозга повышалась раньше, чем у голубей (рис. 7 б). Как и у голубей, у крыс наблюдалось бифазное изменение периферической вазомоторной реакции, проявляющееся сначала развитием ва-зоконстрикции, а затем - вазодилатации. Эндотоксемия у крыс также приводила к усилениию сократительной активности мышц (в среднем на 78 %, р<0.05) в течение 5-и часов (рис. 8 б).

У голубей в течение 5-и часов с момента начала эндотоксемии наблюдалось уменьшение ОВ бодрствования (за счет снижения длительности эпизодов с 114±5 с до 79±3 с, р<0.05) и увеличение ОВ медленного сна (рис. 9 а) за счет увеличения числа эпизодов. В период с 4-го по 9-й час происходило уменьшение ОВ быстрого сна за счет уменьшения числа эпизодов.

При эндотоксемии у крыс уменьшение ОВ бодрствования (за счет уменьшения длительности с 85±4 с до 55±3 с, р<0.05) и увеличение ОВ медленного сна (за счет увеличения числа эпизодов) (рис. 9 б) происходило на 1 час позже, чем у голубей, и наблюдалось в период со 2-го по 5-й час. Со 2-го по 6-й час происходило уменьшение ОВ быстрого сна за счет уменьшения длительности его эпизодов (с 82±3 с до 55±5 с, р<0.05).

1234567 1234567

Рис. 9. Влияние №р70 на изменение общего времени медленного сна у голубей (а) и крыс (б) при эндотоксемии.

Достоверные изменения по сравнению с контролем обозначены решеткой при р<0.05; звездочкой обозначены достоверные изменения при введении Н8р70 по сравнению с действием одного эндотоксина при р<0.05.

Таким образом, сравнительное изучение изменений показателей лихорадочной реакции во время эндотоксемии у голубей и крыс выявило как общие черты, так и ряд особенностей. Показано, что повышение температуры мозга при эндотоксемии у голубей происходит позже, чем у крыс. И у голубей, и у крыс повышению температуры мозга способствует усиление сократительной активности мышц и уменьшение теплоотдачи. Эндотоксемия у голубей характеризуется более ранним увеличением ОВ медленного сна и более длительным уменьшением ОВ быстрого сна по сравнению с крысами. Увеличение ОВ медленного сна при эндотоксемии и у голубей, и у крыс реализуется путем увеличения числа его эпизодов.

4.2. Влияние №р70 на показатели терморегуляции и временные характеристики состояний сна и бодрствования при эндотоксемии у голубей и крыс

Введение голубям №р70 в вену за 15 мин до введения эндотоксина ЛПС предотвращало повышение температуры мозга (рис. 7 а) (этому способствовало значительное снижение уровня сократительной активности мышц (рис. 8 а)), а также устраняло развитие вазодилатации и приводило к восстановлению частоты сердечных сокращений до контрольных значений. Однако, периферическая вазоконстрикция в период с 1-го по 3-й час сохранялась.

У крыс, в отличие от голубей, предварительное введение №р70 уменьшало повышение температуры мозга (рис 7 б) и продолжительность периода вазодилатации (на 3 часа) при эндотоксемии. Восстановление уровня сократительной активности мышц после введения НБр70 происходило на 2 часа раньше, чем при действии одного ЛПС (рис. 8 б).

Эксперименты показали, что у голубей после введения №р70 не наблюдалось значимых изменений ОВ бодрствования и медленного сна (рис. 9 а) по

сравнению с действием одного ЛПС. Исключение составило лишь более раннее (на 1 час) восстановление ОВ быстрого сна. Увеличение ОВ медленного сна после введения Hsp70 происходило за счет увеличения длительности эпизодов в среднем на 15±3 с (р<0.05) по сравнению с действием одного ЛПС, а число эпизодов медленного сна восстанавливалось до контрольных значений.

У крыс предварительное введение Hsp70 способствовало более раннему восстановлению ОВ бодрствования и медленного сна (рис. 9 б) (на 1 час) и ОВ быстрого сна (на 2 часа), чем в условиях одной эндотоксемии. Как и у голубей, ОВ медленного сна у крыс после предварительного введения Hsp70 возрастало за счет увеличения длительности эпизодов медленного сна в среднем с 96±6 с до 122±4 с (р<0.05), а число эпизодов восстанавливалось до контрольных значений. Восстановление ОВ быстрого сна происходило за счет увеличения длительности эпизодов с 73±2 с до 104±5 с (р<0.05).

Для исключения влияния контаминантов в препарате Hsp70 на физиологические показатели при эндотоксемии у голубей и крыс были выполнены эксперименты с использованием Нзр70ден. Опыты показали, что введение в вену №р70ден не корректировало лихорадочную реакцию и нарушенную структуру сна, вызванные эндотоксемией. Эти данные свидетельствуют, что защитные эффекты Hsp70 при эндотоксемии не связаны с его контаминацией.

Таким образом, полученные данные указывают на способность Hsp70 ослаблять системную воспалительную реакцию у голубей и крыс, вызванную ЛПС- индуцированной эндотоксемией. Об этом свидетельствуют снижение температуры мозга, уровня сократительной активности мышц и нормализация частоты сердечных сокращений, а также появление более длительных эпизодов медленного сна и более раннее восстановление до контрольных значений временных характеристик состояний сна и бодрствования. Можно предположить, что защитное действие экзогенного Hsp70 на показатели терморегуляции и цикл сон-бодрствование обусловлено его способностью взаимодействовать с рецепторными комплексами мембран иммунокомпетентных клеток (нейтрофи-лов и макрофагов), такими как CD 14, TLR2/4, CD1 lb/CD 18 и др. [Dybdahl et al., 2002; Calderwood et al., 2007; Rozhkova et al., 2010]. Вероятно, это взаимодействие может приводить к модулированию активности этих клеток и ослаблению провоспалительного сигнала. Раннее восстановление структуры сна и появление более длительных эпизодов медленного сна у голубей и у крыс при введении Hsp70 могло быть результатом снижения активности гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, возрастающей при эндотоксемии [Гриневич и др., 2003; Маньковская, Пастухов, 2005].

4.3. Влияние Hsp70 на количественные характеристики крови и кислотную резистентность мембран эритроцитов при эндотоксемии у крыс.

Опыты показали, что введение бактериального эндотоксина ЛПС вызывало у крыс увеличение суммарного пула циркулирующих в крови эритроцитов с (7.3±0.3)-1012 1/л до (9.5±0.2)1012 1/л (р<0.05) и с (7.6±0.2)-1012 1/л до (9.9±0.1)-1012 1/л (р<0.05) через 1 час и через 5 часов, соответственно. Число лейкоцитов через 1 час после введения ЛПС повысилось с (6.3±0.2)-109 1/л до

(10.7±0.3)-109 1/л (р<0.05), а через 5 часов - с (6.5±0.2)-109 1/л до (11.8±0.3)-109 1/л (р<0.05). Кроме того, при эидотоксемии наблюдалось снижение устойчивости мембран эритроцитов. Об этом свидетельствует более раннее наступление пика их распада (через 1 час на 47±5 с раньше, р<0.05; через 5 часов на 44 ±3 с раньше, р<0.05) по сравнению с контролем (введение физиологического раствора).

Введение Hsp70 вызывало уменьшение количества эритроцитов по сравнению с действием одного ЛПС, и через 1 час, и через 5 часов, однако, число этих клеток продолжало превышать контрольные значения. Число лейкоцитов через 1 час уменьшалось по сравнению с действием одного ЛПС, а через 5 часов достигало контрольного уровня. Изучение кислотной резистентности эритроцитов через 1 час после введения Hsp70 выявило увеличение устойчивости их мембран, о чем свидетельствовал тот факт, что пик распада эритроцитов в этих условиях наступал в то же время, что и в контроле. Через 5 часов у половины крыс также наблюдалось отчетливое увеличение кислотной резистентности эритроцитов, однако, у другой половины достоверного улучшения этого показателя не происходило.

Увеличение числа эритроцитов во время эндотоксемии является, по-видимому, стресс-реакцией на действие ЛПС и процедуру инъекции и может реализовываться за счет выброса эритроцитов из депо или уменьшения объема плазмы крови [Maslova et al., 2005, 2007; Леонова и др., 2009]. Менее значительное увеличение числа эритроцитов после предварительного введения Hsp70, возможно, связано со способностью Hsp70 ослаблять активность гипо-таламо-гипофизарно-надпочечниковой системы [Маньковская, Пастухов, 2005]. Увеличение числа лейкоцитов является одним из важнейших маркеров воспалительного процесса [Aird, 2003]. В наших опытах Hsp70 предотвращал развитие лейкоцитоза, вызванного эндотоксемией. Это указывает на способность Hsp70 ослаблять системную воспалительную реакцию, вызванную эндотоксемией. Уменьшение резистентности мембран эритроцитов при эндотоксемии связано с тем, что ЛПС, попадая в кровь, встраивается в мембрану эритроцита и нарушает её структуру [Strycková, 1978]. Данные литературы свидетельствуют, что Hsp70 может включаться в мембраны лизосом и способствовать их стабилизации [Petersen et al., 2010]. Не исключено, что в наших опытах повышение устойчивости мембран эритроцитов при введении Hsp70 может быть обусловлено стабилизацией структурно-функциональных свойств мембраны при встраивании в неё шаперона Hsp70. Кроме того, повышение устойчивости мембран пула эритроцитов, циркулирующих в крови, наблюдается при увеличении в ней молодых форм эритроцитов, обладающих более "прочной" мембраной, чем старые эритроциты [Maslova et al., 2005, 2007]. Способен ли Hsp70 мобилизовать в кровь молодые формы эритроцитов пока не ясно. Это требует отдельного изучения.

Таким образом, результаты проведенных экспериментов показывают, что тотальная депривация сна у голубей приводит к нарушению терморегуляции (развивается гипертермия), а в период после депривации - нарушению сна. В течение 1-го часа после депривации обнаружено преобладание активного бодрствования и уменьшение сна, а в последующие часы - компенсаторное увеличение ОВ и интенсивности медленного сна, а затем ОВ быстрого сна. Эндотоксе-мия усиливает нарушения в терморегуляции и цикле сон-бодрствование, вызванные депривацией сна у голубей. В ходе исследований выяснено, что экзогенный Нзр70 способен корректировать нарушения в терморегуляции и цикле сон-бодрствование, вызванные депривацией сна у голубей. Введение Нзр70 в 3-й желудочек мозга сразу после депривации сна устраняет нарушения в организации цикла сон-бодрствование (уже в первый час после микроинъекции) и способствует усилению эффекта "отдачи" медленного сна и поддержанию низкого уровня сократительной активности мышц. Характер физиологических эффектов №р70 в период после депривации сна позволяет предполагать, что Нзр70 обладает сомногенным и стресс-лимитирующим действием. Проведенный сравнительно-физиологический анализ эффектов ЛПС у голубей и крыс показал, что ЛПС-индуцированная эндотоксемия вызывает сходные изменения терморегуляторных показателей лихорадочной реакции (вазоконстрикция периферических сосудов, увеличение сократительной активности мышц и температуры мозга) и архитектуры сна (увеличение медленного сна и угнетение быстрого сна) у этих животных. Выяснено, что увеличение содержания НБр70 в крови при эндотоксемии ослабляет лихорадочную реакцию и ускоряет восстановление структуры сна у крыс и голубей, а также приводит к нормализации числа лейкоцитов в крови и стабилизации мембран эритроцитов у крыс. Эти данные указывают на то, что №р70 оказывает противовоспалительное действие при эндотоксемии. Можно полагать, что механизмы реализации противовоспалительного действия Шр70 при эндотоксемии являются общими для представителей млекопитающих и птиц.

ВЫВОДЫ

1. В период депривации сна у голубей происходит почти полная замена сна активным бодрствованием, развитие гипертермии и повышение сократительной активности мышц; в течение первого часа после депривации преобладает бодрствование и сохраняется повышенный тонус мышц, а в последующие часы компенсаторно увеличиваются общее время и интенсивность медленного сна, а затем общее время быстрого сна ("отдача" сна).

2. Депривация сна в условиях эндотоксемии вызывает у голубей усиление гипертермии, продлевает нарушения в цикле сон-бодрствование и тонусе мышц, характерные для первого часа после депривации сна, задерживает "отдачу" медленного сна и подавляет "отдачу" быстрого сна.

3. Введение 1Ьр70 в третий желудочек мозга в момент окончания депривации сна вызывает у голубей в сравнении с контролем более быстрое наступление

медленного сна и увеличение его "отдачи", что сопровождается характерным для медленного сна длительным снижением уровня сократительной активности мышц и температуры мозга.

4. Эндотоксемия вызывает сходные изменения терморегуляторных показателей лихорадочной реакции (развитие периферической вазоконстрикции, повышение уровня сократительной активности мышц и температуры мозга) и структуры сна (увеличение общего времени медленного сна и уменьшение времени быстрого сна) у голубей и крыс; отмечен ряд особенностей эндоток-семии у голубей — раннее увеличение медленного сна, позднее повышение температуры мозга и продолжительное подавление быстрого сна.

5. Введение Hsp70 в вену значительно ослабляет системную воспалительную реакцию, вызванную эндотоксемией, на что указывают снижение температуры мозга, уменьшение уровня сократительной активности мышц, раннее восстановление цикла сон-бодрствование у голубей и крыс, а также отсутствие тахикардии у голубей и нормализация числа лейкоцитов в крови и повышение устойчивости мембран эритроцитов у крыс. У крыс отмечено менее выраженное снижение температуры мозга и сократительной активности мышц при действии Hsp70.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи в рецензируемых журналах

1. Лапшина К.В., Екимова И.В. Влияние депривации сна на показатели лихорадочной реакции и процесс восстановления сомато-висцеральных функций и сна в условиях эндотоксемии // Рос. физиол. журн. им. И.М.Сеченова. - 2009. - Т. 96. -№2.-С. 161-171.

2. Лапшина К.В., Екимова И.В. Исследование защитных эффектов экзогенного белка теплового шока 70 кДа в модели депривации сна у голубя Columba livia // Журн. эвол. биохим. и физиол. - 2010. - Т. 46. - № 5. - С. 387-394.

Статьи в сборниках научных работ

1. Лапшина К.В., Екимова И.В. Взаимоотношение между сном и терморегуляцией при эндотоксемии у голубей // Проблемы термофизиологии в биологии и медицине. - Мн: ПЧУП "Бизнесофсет". - 2004. - С. 79-84.

2. Лапшина К.В., Екимова И.В., Пастухов Ю.Ф. Влияние экзогенного белка теплового шока 70 кДа на сомато-висцеральные показатели и сон после эмоционального стресса // Проблемы термофизиологии в биологии и медицине. - Мн: ПЧУП «Бизнесофсет».,-2005. - С. 84-87.

Тезисы

1. Лапшина К.В. Влияние депривации сна на развитие лихорадки у голубей // Тез. конф. "Человек и его здоровье". - Санкт-Петербург. - 2002. - С. 143-144.

2. Лапшина К.В., Екимова И.В. Лишение сна вызывает усиление лихорадки // Тез. конф. "Механизмы терморегуляции и биоэнергетики: взаимодействие функциональных систем". - Иваново. - 2002. - С.35.

3. Лапшина К.В. Влияние депривации сна на температуру мозга и организацию цикла бодрствование-сон в условиях действия эндотоксина // Тез. конф. "Человек и его здоровье". - Санкт-Петербург. - 2003. - С. 96-97.

4. Ekimova I.V., Lapshina K.V., Pastukhov Iu.F., Hudik K.A., Andreeva L.I., Margulis

B.A. Somnogenic effects of heat shock protein 70 during period after stress caused by sleep deprivation // Тез. конф. "Con - окно в мир бодрствования". - Москва. - 2003. -

C.39.

5. Маргулис Б.А., Новоселова Т.В., Батюк A.M., Гужова И.В., Пастухов Ю.Ф., Екимова И.В., Лапшина К.В., Худик К.А., Маньковская Т.Н., Андреева Л.И., Шабанов П.Д., Морозова С.И. Защитные белки и пептиды как средство реабилитации от тяжелого эмоционального и физического стресса: разработка препаратов и проверка их эффективности в эксперименте // Тез. конф. "Фундаментальные науки - медицине". - Москва.-2003.-С. 154-156.

6. Лапшина К. В. Влияние белка теплового шока 70 кДа на временные характеристики состояний сна и бодрствования у голубей после депривации сна // Тез. конф. "Человек и его здоровье". - Санкт-Петербург. - 2004. - С. 156-157.

7. Lapshina K.V., Mankovskaja T.N., Hudik К.А. Effect of HSP70 kDa on somato-visceral charakteristics before and after stress // Психофармокология и биологическая наркология. - Санкт-Петербург. - 2004. - С. 699-700.

8. Лапшина К. В. Влияние белка теплового шока 70 кДа на показатели терморегуляции после депривации сна у голубей // Тез. XIX Съезда физиол. Общества им. И.П. Павлова.- Екатеринбург. - 2004. - Т. 90,- № 8. - С. 46.

9. Екимова И.В., Лапшина К.В., Маньковская Т.Н., Худик К.А., Пастухов Ю.Ф. Со-многенное действие белка теплового шока 70 кДа и его значение для процесса реабилитации после стресса // Тез. конф. "Актуальные вопросы сомнологии". - Москва. - 2004. С. 24.

10. Лапшина К.В. Изменение температуры мозга и временных характеристик цикла бодрствование-сон у голубей с различной устойчивостью к стрессу. Тез. конф. "Физиология и медицина". - Санкт-Петербург. -2005,- С.66.

11. Hudik К.А., Lapshina K.V., Eram S.Yu., Mankovskaja T.N. Effects of HSP70 kDa on spectral characteristics of non-rapid-eye-movement sleep in rats and pigeons // Психофармакология и биологическая наркология. - Санкг-Пегербург. - Т. 2. - 2005. - С. 699-700.

12. Lapshina K.V., Ekimova I.V. Effect of intravenous injection of heat shock protein 70 KDA on the temporal characteristics of sleep-wake cycle in pigeons // Тез. конф. "Сон -окно в мир бодрствования",- Ростов-на-Дону. - 2005.- С.58-59.

13. Лапшина К.В. Влияние белка теплового шока 70 кДа на изменение показателей терморегуляции при эндогоксемии у голубей // Тез. конф. "Человек и его здоровье". - Санкт-Петербург. - 2006. - С. 179-180.

14. Лапшина К.В. Эффекты белка теплового шока при экспериментальной эндоток-семии // Тез. XX Съезда физиол. Общества им. И.П. Павлова. - М., 2007. - С.302.

15. Лапшина К.В. Влияние белка теплового шока 70 кДа на изменение показателей лихорадочной реакции у крыс // Тез. конф. "Человек и его здоровье". - Санкт-Петербург. - 2007. - С. 235-236.

16. Lapshina K.V., Ekimova I.V. Effect of heat shock protein 70 kDa on thermoregulatoryory characteristics during the intoxication stress in rats and pigeons H Abstr. of the 10th Jubilee Multidisciplinary International Conference of Biological Psychiatry "Stress and behavior". - St.-Petersburg. - 2007. - P. 25-26.

17. Лапшина К.В. Влияние белка теплового шока 70 кДа на кислотную резистентность эритроцитов и показатели терморегуляции при эндотоксемии у крыс // Тез. конф. "Человек и его здоровье". - Санкт-Петербург. - 2008. - С. 192-193.

18. Lapshina K.V. Exogenous Hsp70 affects sleep and thermoregulation after the sleep deprivation in pigeons. Abstr. of the Scandinavian Physiological Society's Annual Meeting. -Oulu. - 2008. - V.193. - Suppl. 664. - РЛ31.

19. Lapshina K., Khudik K. Effects of inducible and constitutive isoforms of heat shock protein 70 on thermoregulatory characteristics in pigeons 11 Abstr. of the 12th Multidisciplinary International Conference of Biological Psychiatry "Stress and behavior".- St.-Petersburg. - 2009. - P. 41.

20. Lapshina K.V. Exogenous heat shock protein 70 kDa affects sleep and thermoregulatory characteristics during endotoxaemia in pigeons // Abstr. of the Joint Meeting of the Scandinavian and German Physiological Societies. - Copenhagen. - 2010. - P. 81-82.

21. Лапшина К.В. Белок стресса HSP70 в восстановлении физиологических функций после насильственного лишения сна и при эндотоксемии // Тез. XXI съезда Физиологического общества им. И.П.Павлова. - Калуга. - 2010. - С.343.

Лапшина К.В. Защитные эффекты белка теплового шока 70 кДа при депривации сна и эндотоксемии//Автореф. дис. канд. биол. наук: 03.03.01 - СПб., 2011.-22 с.

Подписано в печать 01.04.2011. Формат 60*84 1/16. Бумага офсетная. Печать офсетная. Печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ , Отпечатано с готового оригинал-макета. ЗАО «Принт-Экспресс» 197101, С.-Петербург, ул. Большая Монетная, 5 лит. А

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Лапшина, Ксения Валерьевна

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Влияние депривации сна на функционирование нервной, эндокринной, иммунной и терморегуляторной систем и на изменение архитектуры сна у млекопитающих и птиц

1.2. Эндотоксемия у млекопитающих и птиц: влияние бактериального эндотоксина на морфо-функциональные показатели клеток крови, терморегуляцию и цикл сон-бодрствование

1.3. Изменения физиологических функций и сна при депривации сна в условиях эндотоксемии у млекопитающих и птиц.

1.4. Белок теплового шока 70 кДа, его структура, функции и защитные свойства.

1.4.1. Общие представления о белках теплового шока.

Белок теплового шока 70кДа и его защитные свойства.

1.4.2. Влияние депривации сна (покоя) на экспрессию белка теплового шока 70кДа в мозге теплокровных животных и насекомых. Белок теплового шока 70кДа в модуляции сна.

1.4.3. Белок теплового шока 70кДа в модуляции иммунного ответа при эндотоксемии и сепсисе.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Процедура депривации сна.

2.3. Индукция эндотоксемии у голубей и крыс.

2.4. Характеристика препарата белка теплового шока 70кДа.

2.5 Регистрация электрофизиологических показателей у голубей и крыс.

2.5.1. Вживление электродов и термисторов голубям и крысам.

2.5.2. Технические характеристики используемого оборудования.

2.5.3. Регистрация электрофизиологических показателей и программное обеспечение для их анализа.

2.6. Методы определения общего числа эритроцитов и лейкоцитов.

2.7. Метод определения кислотной резистентности эритроцитов.

2.8. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Результаты исследования и их обсуждение.

3.1. Влияние депривации сна на терморегуляцию и цикл сон-бодрствование у голубей.

3.1.1. Изменения показателей терморегуляции и временных характеристик состояний сна и бодрствования у голубей в период депривации сна.

3.1.2. Изменения показателей терморегуляции и временных характеристик состояний бодрствования и сна в период после депривации сна.

3.1.3. Обсуждение.

3.2. Влияние депривации сна при эндотоксемии на терморегуляцию и цикл сон-бодрствование у голубей.

3.2.1. Изменения показателей терморегуляции и временных характеристик состояний сна и бодрствования у голубей при депривации сна в условиях эндотоксемии, вызванной липополисахаридом.

3.2.2. Сопоставление действия липополисахарида с эффектами депривации сна при эндотоксемии на показатели терморегуляции и временные характеристики состояний сна и бодрствования.

3.2.4. Обсуждение.

3.3. Влияние белка теплового шока 70кДа на терморегуляцию и цикл сон-бодрствование у голубей после депривации сна.

3.3.1. Влияние микроинъекций белка теплового шока 70кДа на показатели терморегуляции и временные характеристики состояний сна и бодрствования после депривации сна.

3.3.2. Влияние микроинъекций термоденатурированного белка теплового шока 70кДа на показатели терморегуляции и временные характеристики состояний 101 сна и бодрствования после депривации сна.

3.3.3. Обсуждение.!.

3.4. Исследование эффектов белка теплового шока 70кДа на терморегуляцию, цикл сон-бодрствование и показатели периферической крови при эндотоксемии у голубей и крыс

3.4.1. Влияние внутривенных инъекций белка теплового шока 70кДа на показатели терморегуляции и временные характеристики состояний бодрствования и сна в контрольных условиях у голубей и крыс.

3.4.2. Изменения показателей терморегуляции и временных характеристик состояний сна и бодрствования при эндотоксемии у голубей и крыс.

3.4.3. Влияние внутривенных инъекций белка теплового шока 70кДа на показатели терморегуляции и временные характеристики состояний сна и бодрствования при эндотоксемии у голубей и крыс.

3.4.4. Влияние внутривенных инъекций белка теплового шока 70кДа на количественные показатели крови и кислотную резистентность мембран эритроцитов при эндотоксемии у крыс.

3.4.5. Влияние внутривенных инъекций термоденатурированного НБр70 на показатели терморегуляции, цикла сон-бодрствование и периферической крови у голубей и крыс.^^

3.4.6. Обсуждение.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Защитные эффекты белка теплового шока 70 кДа при депривации сна и эндотоксемии"

Актуальность проблемы

Человек около третьей части своей жизни тратит на сон. Продолжительное лишение сна несовместимо с жизнью. Большинство взрослых хотя бы однажды испытывали проблемы со сном, более четверти людей имеют те или иные его нарушения. Среди нарушений сна наиболее часто встречается инсомния, которая характеризуется затруднением засыпания или сокращением времени сна. К развитию инсомнии могут приводить нарушения режима сна, стрессовые факторы, чрезмерные умственные и физические нагрузки, различные неврологические заболевания [Левин, 2007, 2008]. В свою очередь, инсомния может провоцировать развитие неврозов, ослабление иммунитета, нарушение терморегуляции и других физиологических функций [МиИт^оп е1 а1., 2009]. Большая социальная значимость инсомнии определила разработку моделей, имитирующих нарушение сна. Одной их таких моделей является депривация (лишение) сна, сопровождающаяся эмоциональным стрессом и физическим напряжением. По наблюдениям клиницистов, нарушение режима сна и увеличение длительности бодрствования во время эндотоксемии, вызванной бактериальной или вирусной инфекцией, значительно затягивают процесс выздоровления. Особенности нарушений сна и терморегуляции, вызванные депривацией сна в условиях эндотоксемии, не изучались. Наиболее интересным объектом для этого исследования могут оказаться птицы, температура тела которых составляет 40-41 °С и при эндотоксемии может повышаться еще на 1-1.5 °С, достигая "красной" черты перегревания [Веселкин, 1963; ЫотоШ, 1997] кроме того, они имеют ряд особенностей в организации сна [КдйепЬо^ et а!., 2009].

Лечение расстройств сна является одной из наиболее актуальных проблем сомнологии, поскольку успешность терапевтической коррекции этого нарушения ограничена рядом побочных эффектов снотворных препаратов и привыканием к ним [Pleuvry, 2001; Lemmer, 2007; Остроумова, 2010]. Поэтому в настоящее время особое внимание уделяется поиску природных соединений, обладающих сомногенными и стресс-лимитирующими свойствами. Перспективным в данном направлении может оказаться белок теплового шока с молекулярной массой 70 кДа (Heat shock proteins, Hsp70). Шаперон Hsp70 является одной из наиболее древних защитных систем клеток и организмов от действия различных повреждающих факторов [Маргулис, Гужова, 2000; Пастухов и др. 2010]. Шаперонная функция, лежащая в основе его уникальных защитных свойств, заключается в способности контролировать укладку новосинтезированных белков и восстанавливать правильную пространственную структуру поврежденных белков. Несмотря на свою большую молекулярную массу, Hsp70 может выходить из клеток во внеклеточное пространство, а также в кровь и ликвор [Tytell et all., 1986; Guzhova et al., 1998; Campisi et al., 2003; Steensberg et al., 2006]. Показано, что экзогенный Hsp70, введенный в третий желудочек мозга, также способен пересекать мембрану клеток и проникать в нейроны, терминали и синапсы структур мозга, ответственных за регуляцию сна и сомато-висцеральных функций у крыс и голубей [Ekimova et al., 2010]. В последнее десятилетие накапливаются данные о вовлечении шаперона Hsp70 в многофакторные механизмы контроля сна. Рядом авторов во время депривации сна обнаружено увеличение экспрессии Hsp70 в различных структурах мозга мыши, крысы и белоголовой овсянки [Terao et al., 2003; Naidoo et al., 2005; Jones et al., 2008]. Выяснено, что увеличение содержания Hsp70 в мозге (путем его микроинъеций в ликвор) вызывает увеличение медленного сна, снижение мышечной активности и температуры мозга у теплокровных животных [Пастухов и др., 2005, 2008]. Защитный (стресс-лимитирующий) эффект экзогенного Hsp70 обнаружен в модели стресса "заложника": введение Hsp70 в третий желудочек мозга ускоряет восстановление цикла сон-бодрствование и снижает уровень кортикостерона в плазме крови- [Пастухов, Екимова, 2005]. Данные о защитном эффекте

Hsp70 при нарушениях сна и терморегуляции в модели депривации сна отсутствуют.

Другой, не менее серьезной проблемой является эндотоксемия, которая вызывается попаданием в кровь эндотоксина грамотрицательных бактерий липополисахарида (ЛПС). При эндотоксемии развиваются лихорадочная реакция, тахикардия, лейкоцитоз, нарушаются сон и функционирование иммунной, нервной и др. систем организма [Веселкин, 1963; Krueger et al., 1991; Яковлев, 2003; Клименко, 2005]. Избыточная концентрация в крови ЛПС может приводить к развитию тяжелейшего патологического процесса -сепсиса, смертность от которого в течение последних десятилетий варьирует от 25 до 80% [Angus, Wax, 2001]. Высокий уровень смертности свидетельствует о недостаточной эффективности имеющихся терапевтических средств. Согласно данным литературы, шаперон Hsp70 способен модулировать иммунный ответ [Asea, 2005; Маргулис, Гужова, 2009] и защищать от эндотоксинового сепсиса. Тепловое прекондиционирование, приводящее к экспрессии и накоплению Hsp70 в клетках периферических органов, уменьшает синтез провоспалительных цитокинов и смертность крыс при введении летальных доз ЛПС [Hotchkiss et al., 1993; Villar et al, 1994]. Системное введение Hsp70 крысам корректирует некоторые гемодинамические показатели, снижает продукцию NO макрофагами и частично нормализует апоптоз нейтрофилов в модели эндотоксинового сепсиса [Kustanova et al., 2006; Rozhkova et al., 2010]. Однако остается не изученным, способен ли экзогенный Hsp70 ослабить лихорадочную реакцию и уменьшить нарушения сна и количественно-функциональных характеристик крови, вызванных эндотоксемией. Наиболее перспективным является проведение сравнительного исследования защитных эффектов Hsp70 при эндотоксемии у млекопитающих и птиц, которое позволит выяснить общие закономерности повышения резистентности организма к действию эндотоксина.

Цель исследования — определить, какие нарушения терморегуляции, сна и клеток крови, вызванные депривацией сна и эндотоксемией, поддаются коррекции с помощью белка теплового шока 70 кДа.

Основные задачи исследования

4. Сопоставить влияние периферических инъекций №р70 на показатели терморегуляции и состояний сна и бодрствования у голубей и крыс при эндотоксемии.

Научная новизна

Впервые установлено, что депривация сна у голубей приводит к развитию гипертермии, а также к полному преобладанию бодрствования и повышению уровня сократительной активности мышц; изменения двух последних показателей сохраняются в течение первого часа после депривации; в последующие часы отмечается уменьшение времени бодрствования и "отдача" медленного, а затем быстрого сна. Впервые показано, что депривация сна в условиях эндотоксемии, вызванной бактериальным эндотоксином ЛПС, усиливает гипертермию, продлевает нарушения сна и сократительной активности мышц, характерные для первого часа после депривации сна, и отодвигает проявление "отдачи" медленного сна у голубей. Впервые установлено, что введение Нзр70 в третий желудочек мозга вызывает в период после депривации сна продолжительное снижение температуры мозга, ускоряет наступление медленного сна и восстановление структуры сна, а также способствует усилению эффекта "отдачи" медленного сна и поддержанию низкого уровня сократительной активности мышц у голубей. Впервые показано, что у голубей и крыс ЛПС- индуцированная эндотоксемия вызывает сходные изменения в терморегуляции (увеличение температуры мозга, уменьшение теплоотдачи и усиление сократительного термогенеза) и временной организации цикла сон-бодрствование (увеличение медленного сна и уменьшение быстрого сна). Впервые выявлено, что введение Нзр70 в вену оказывает противовоспалительное действие в модели эндотоксемии, о чем свидетельствуют снижение температуры мозга и уровня сократительной активности мышц, раннее восстановление структуры сна у голубей и крыс, отсутствие тахикардии у голубей, а также возвращение к контрольным значениям числа лейкоцитов и увеличение резистентности мембран эритроцитов у крыс.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Депривация сна вызывает у голубей нарушение терморегуляции, а в период после депривации - существенные изменения временных и спектральных характеристик состояний сна и бодрствования. ЛПС-индуцированная эндотоксемия усиливает нарушения терморегуляции и структуры цикла сон-бодрствование, вызванные депривацией сна у голубей.

2. Увеличение содержания Нзр70 в мозге (путем введения в третий желудочек мозга) ослабляет нарушения терморегуляции и структуры цикла сон-бодрствование, вызванные депривацией сна: в период после депривации сна ускоряет снижение уровня сократительной активности мышц, времени бодрствования и наступление медленного сна и увеличивает его "отдачу". 3. Белок теплового шока 70 кДа оказывает противовоспалительное действие у голубей и крыс в модели эндотоксемии, вызванной ЛПС: увеличение его содержания в крови (путем введения в вену) ослабляет лихорадочную реакцию, ускоряет восстановление цикла сон-бодрствование, нормализует число лейкоцитов в крови и повышает резистентность мембран эритроцитов.

Теоретическая и практическая значимость работы

Работа имеет фундаментальное значение для понимания защитной роли белков теплового шока семейства 70 кДа при нарушении сна и эндотоксемии. Полученные в работе данные о способности экзогенного Нзр70 корректировать нарушения в системе терморегуляции и цикле сон-бодрствование, вызванные депривацией сна, могут служить основанием для апробации в клинике физических способов прекондиционирования (посещение сауны, прием теплых ванн) и известных лекарственных средств, увеличивающих содержание Нэр70 и других шаперонов в мозге и тканях организма, при лечении инсомнии и других расстройств сна. Данные о противовоспалительном действии экзогенного НБр70 в модели эндотоксемии указывают на перспективность применения препаратов на основе Нзр70 при политерапии эндотоксемии, эндотоксического шока и сепсиса. Результаты исследования могут быть использованы в курсах лекций по физиологии для студентов биологических и медицинских факультетов университетов и медицинских вузов.

Апробация работы

Результаты исследования были представлены и обсуждены на 4-6-й и 8-10-й Всероссийских конференциях молодых ученых "Человек и его здоровье" (Санкт-Петербург, 2002-2004, 2006-2008); Всероссийской конференции "Механизмы терморегуляции и биоэнергетики" (Иваново, 2002); Всероссийской конференции молодых исследователей "Физиология и медицина" (Санкт-Петербург, 2005); 4-й Всероссийской конференции "Актуальные проблемы сомнологии" (Москва, 2004); на 2-4-й Всероссийских школах-конференциях (с международным участием) "Sleep as a window to the world of wakefulness" (Москва, 2003, 2007; Ростов-на-Дону, 2005); на 8-12-й Международных конференциях "Stress and behavior" (Санкт-Петербург, 2004, 2005, 2007-2009); на 19-21-м Съездах физиологического общества им. И.П. Павлова (Екатеринбург, 2004; Москва, 2007; Калуга, 2010), на Scandinavian Physiological Society Annual Meeting, (Oulu, Finland, 2008) и Joint Meeting of the Scandinavian and German Physiological Societies (Copenhagen, Denmark, 2010).

Публикации

Структура и объем диссертации

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Лапшина, Ксения Валерьевна

ВЫВОДЫ

3. Введение Нзр70 в третий желудочек мозга в момент окончания депривации сна вызывает у голубей в сравнении с контролем более быстрое наступление медленного сна и увеличение его "отдачи", что сопровождается характерным для медленного сна длительным снижением уровня сократительной активности мышц и температуры мозга.

4. Эндотоксемия вызывает сходные изменения терморегуляторных показателей лихорадочной реакции (развитие периферической вазоконстрикции, повышение уровня сократительной активности мышц и температуры мозга) и структуры сна (увеличение общего времени медленного сна и уменьшение времени быстрого сна) у голубей и крыс; отмечен ряд особенностей эндотоксемии у голубей — раннее увеличение медленного сна, позднее повышение температуры мозга и продолжительное подавление быстрого сна.

5. Введение Нзр70 в вену значительно ослабляет системную воспалительную реакцию, вызванную эндотоксемией, на что указывают снижение температуры мозга, уменьшение уровня сократительной активности мышц, раннее восстановление цикла сон-бодрствование у голубей и крыс, а также отсутствие тахикардии у голубей и нормализация числа лейкоцитов в крови и повышение устойчивости мембран эритроцитов у крыс. У крыс отмечено менее выраженное снижение температуры мозга и сократительной активности мышц при действии Нзр70.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, результаты проведенных экспериментов показывают, что тотальная депривация сна у голубей приводит к нарушению терморегуляции (развивается гипертермия), а в период после депривации - к нарушению сна. В течение 1-го часа после депривации обнаружено преобладание активного бодрствования и уменьшение сна, а в последующие часы - компенсаторное увеличение ОВ и интенсивности медленного сна, а затем ОВ быстрого сна. Эндотоксемия усиливает нарушения в терморегуляции и цикле сон-бодрствование, вызванные депривацией сна у голубей. В ходе исследований выяснено, что экзогенный НБр70 способен корректировать нарушения в терморегуляции и цикле сон-бодрствование, вызванные депривацией сна у голубей. Введение Нзр70 в 3-й желудочек мозга сразу после депривации сна устраняет нарушения в организации цикла сон-бодрствование (уже в первый час после микроинъекции) и способствует усилению эффекта "отдачи" медленного сна и поддержанию низкого уровня сократительной активности мышц. Характер физиологических эффектов Нзр70 в период после депривации сна позволяет предполагать, что НБр70 обладает сомногенным и стресс-лимитирующим действием. Проведенный сравнительно-физиологический анализ эффектов ЛПС у голубей и крыс показал, что ЛПС-индуцированная эндотоксемия вызывает сходные изменения терморегуляторных показателей лихорадочной реакции (вазоконстрикция периферических сосудов, увеличение сократительной активности мышц и температуры мозга) и архитектуры сна (увеличение медленного сна и угнетение быстрого сна) у этих животных. Выяснено, что увеличение содержания Нзр70 в крови при эндотоксемии ослабляет лихорадочную реакцию и ускоряет восстановление структуры сна у крыс и голубей, а также приводит к нормализации числа лейкоцитов в крови и стабилизации мембран эритроцитов у крыс. Эти данные указывают на то, что НБр70 оказывает противовоспалительное действие при эндотоксемии. Можно полагать, что механизмы реализации противовоспалительного действия

НБр70 при эндотоксемии являются общими для представителей млекопитающих и птиц.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Лапшина, Ксения Валерьевна, Санкт-Петербург

1. Андреева Л.И., Шабанов П.Д., Маргулис Б.А. Экзогенный белок теплового шока 70 с молекулярной массой кДа изменяет поведение белых крыс // Доклады РАН. 2004. Т. 394. N. 6. С. 835-839.

2. Аниховская И. А., Опарина О. Н., Яковлева M. М., Яковлев М. Ю. Кишечный эндотоксин как универсальный фактор адаптации и патогенеза общего адаптационного синдрома // Физиология человека. 2006. Т. 32. N. 2. С. 87-91.

3. Аполлонин А. В., Яковлев М. Ю., Рудик А. А., Лиходед В. Г. Эндотоксинсвязывающие системы крови // Журн. микробиологии. 1990. N. 11. С.100-106.

4. Афанасьева Г.А., Чеснокова Н.П., Понукалина Е.В., Дальвадянц С.М. Сравнительная оценка цитопатогенных эффектов токсических факторов вакцинных штаммов Y.pestis и V.Cholerae // Успехи современного естествознания. 2003. N. 3. С. 53.

5. Барабанова C.B., Зубарева O.E., Клименко В.М. Изменение структуры поведения, обусловленное введением ИЛ-lb // Успехи физиол. 1994. Т. 25. N. 2. С. 50-51.

6. Борбели А. Тайна сна // М.: Знание, 1989. 190 с.

7. Вейн A.M., Судаков К.В., Левин Я.И. Стадии сна после психоэмоциональных воздействий: индивидуальность изменений // Рос. Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 2001. Т. 87. N. 3. С. 289-295.

8. Веселкин П.Н. Лихорадка. // М.: Медгиз, 1963. 375 с.

9. Гительзон И.И., Терсков И.А Эритрограммы как метод клинического исследования крови // Красноярск, 1959. 233 с.

10. Гриневич В.В., Оганесян Г.А., Элиава М.И. Активность гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы и цикл бодрствование-сон при остром системном воспалении у крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. N. 8. С.128-131.

11. Гужова И.В., Ласунская Е.Б., Нильсон К. Влияние теплового шока на процессы дифференцировки и апоптоза в клетках U-937 // Цитология. 2000. Т. 42. N. 7. С. 653-658.

12. Гужова И.В. Механизмы работы шаперона №р70 в нормальных клетках и при клеточной патологии // Автореферат дисс. д-ра биол. наук. СПб., 2004. -40 с.

13. Гужова И.В., Маргулис Б.А. Индукция и накопление БТШ70 приводит к формированию его комплексов с другими клеточными белками // Цитология. 2000. Т. 42. С. 647-652.

14. Турин A.B. Ингибиторы протеиназ и цитокины крови в механизмах гипертермии при стрессе // Мн. Издательство "Технопринт", 2003. 124 с.

15. Турин В.Н. Механизмы лихорадки // Мн.: Навука i тэхшка, 1993. -250 с.

16. Гусельникова Е.А., Пастухов Ю.Ф. Микроинъекции белка теплового шока 70 кДа в ретикулярное оральное ядро моста вызывают угнетение быстрого сна у голубей // Рос. физиол. журн. 2008. Т. 94. N. 3. С. 301311.

17. Евдонин А. Л., Медведева Н. Д. Внеклеточный белок теплового шока 70 и его функции //Цитология. 2009. Т. 51. N. 2. С. 130-137.

18. Карманова И.Г. Эволюция сна. Этапы формирования циклабодрствование-сон" в ряду позвоночных // Л.: Наука, 1977. 176 с.

19. Карманова И.Г., Оганесян Г.А. Физиология и патология цикла бодрствование-сон. Эволюционные аспекты // СПб.: Наука, 1994. 200 с.

20. Клименко В.М. Цитокины и нейробиология поведения больного // Основы нейроэндокринологии / под ред. В.Г. Шаляпиной и П.Д. Шабанова. СПб.: Элби-СПб, 2005. 472 с.

21. Клименко В.М., Зубарева O.E. Нейробиология цитокинов: поведение иадаптивные реакции // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1999. Т. 85. N. 9. С. 1244-1254.

22. Ковальзон В.М., Сеспульо Р., Жуве М. Эмоциональное напряжение исон: изучение у дреналэктомированных крыс // Журн. Высш. нервн. деят. 1997. Т. 47. N. 3. С.584-591

23. Кабанов Д.С. Изменение поверхностных характеристик мембраны эритроцитов при встраивании липополисахаридов грамотрицательных бактерий // автореф. дисс. канд. биол. наук. Пущино, 2006. 22 с.

24. Кустанова Г.А., Евгеньев М.Б., Карпов В.Л., Маргулис Б.А. и др. Влияние экзогенного белка теплового шока 70 кДа на биохимические параметры крыс Wistar при эндотоксиновом шоке // Доклады РАН. 2007. Т. 415. N. 1.С. 125-128.

25. Левин Я. И. Сон. Стресс. Инсомния // Лечащий врач. N. 5. 2007. С. 2327.

26. Левин Я.И. Радости и печали сна // РМЖ. Болевой синдром. 2008. Специальный выпуск. С. 27-31.

27. Леонова Е.В., Чантурия A.B., Висмонт Ф.А. Патофизиология системы крови: учебное пособие // Мн.: БГМУ, 2009. 128 с.

28. Малов В.А., Пак С.Г. Эволюция взгляда на роль бактериальных липополисахаридов в патологии человека // Вестник РАМН. N. 8. 1997. С. 33-38.

29. Маньковская Т.Н., Пастухов Ю.Ф. Влияние стресса и белка теплового шока на содержание кортикостерона в плазме крови у крыс // Стресс и висцеральные системы. Мн., Издательство "Технопринт". 2005. С. 9699.

30. Маргулис Б.А., Гужова И.В. Белки стресса в эукариотической клетке // Цитология. 2000. Т. 42. С. 323-339.

31. Маргулис Б.А., Гужова И.В. Двойная роль шаперонов в ответе клетки и всего организма на стресс // Цитология. Т. 51. N. 3. 2009. С. 219-228.

32. Маслова М.Н. Молекулярные механизмы стресса // Рос. Физиол. журн. 2005. Т. 91. N. 11. С. 1320-1328.

33. Маслова М.Н., Казенное A.M., Катюхин JI.H., Новожилов A.B., Скверчинская Е.А., Тавровская Т.В. Изменения физиологических и биохимических характеристик эритроцитов крыс после кровопотери // Журн. эвол. биохим. и физиол. 2007. Т.43. N. 5. С. 414-418.

34. Мокрушин A.A., Павлинова Л.И., Гужова И.В. Маргулис Б.А. Эффекты экзогенного белка теплового шока (Hsp70) на глутаматную передачу в обонятельной коре мозга крыс in vitro // Доклады РАН. 2004. Т. 395. С. 551-553.

35. Мюльберг A.A. Фолдинг белка: учебное пособие // СПб: Издательство СПбГУ, 2004. 156 с.

36. Оганесян Г.А., Романова И.В., Аристакесян Е.А., Артамохина И.В., Белова В.А. Дофаминергическая нигростриатная система» в условиях депривации сна у крыс // Рос. Физиол. Журн. 2007. N. 12. С. 1344-1354.

37. Остроумова О.Д. Снотворные средства (гипнотические средства) в практике врача-терапевта//РМЖ. 2010. Т. 18. N. 18. С. 1122-1126.

38. Пастухов Ю.Ф. Классификация организмов по типу терморегуляции. Эволюция представлений // Термофизиология. 1994. Т. 3. С. 6-17.

39. Пак С.Г., Белая О.Ф., Малов В.А., Волчкова Е.В., Еровиченков A.A. Изучение синдрома интоксикации в инфекционной патологии // Журн. Инфектологии. 2009. Т. 1. N. 1. С. 9-17.

40. Пастухов Ю.Ф: Екимова И.В., Гужова И.В. Основной белок стресса обладает пирогенным действием // Доклады РАН. 2003. Т. 388. С. 837841.

41. Пастухов Ю.Ф., Екимова И.В. Молекулярные, клеточные и системные механизмы протективной функции белка теплового шока 70 кДа // Нейронауки. 2005. Т. 2. N. 2. С. 3-25.

42. Пастухов Ю.Ф., Екимова И.В., Худик К.А., Гужова И.В. Белок 70 кДа в контроле сна и терморегуляции // Журн. эвол. биохим. и физиол. 2008. Т. 4.N 1. С. 65-71.

43. Пастухов Ю.Ф., Екимова И.В., Худик К.А., Гужова И.В. Белок теплового шока 70 кДа, свободный от липополисахарида, обладает гипотермическим и сомногенным действием // Доклады РАН. 2004. Т. 402. С. 275-278.

44. Пастухов Ю.Ф., Поляков Е.Л., Чепкасов И.Е., Рашотт М.Э., Хендерсон Р.П. Парадоксальный сон индикатор разных форм гипометаболизма у млекопитающих и птиц//ДАН. 1998. Т. 358. N. 1. С. 131-133.

45. Пастухов Ю.Ф., Хаскин В.В. Адренергический контроль термогенеза при экспериментальной и природной адаптации животных к холоду // Успехи физиол. наук. Т. 10. N. 3. 1979. С. 121-142.

46. Пастухов Ю.Ф., Худик К.А., Екимова И.В. Шапероны в регуляции и восстановлении физиологических функций // Рос. Физиол. Журн. Им. И.М. Сеченова. 2010. Т. 96. N. 7. С. :708-725.

47. Пермяков Н.К., Яковлев М.Ю. Сердце при эндотоксиновом шоке // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1990. N. 2. С.45-48.

48. Ромер А., Парсонс Т., Анатомия позвоночных, т.2 // М.: Мир,1992.-334 с.

49. Сазонов В.С., Пастухов Ю.Ф. Внутрисуточная организация цикла бодрствование-сон и энергетический метаболизм у крыс при действии низкой температуры среды // Физиол. журн. СССР. N. 71. 1985. С. 342346.

50. Седунова Е.В. Температурный гомеостаз и его регуляция в классе птиц. //Ж. эвол.биохим. и физиол. 1996. Т. 32. N. 2. С. 129-140.

51. Таболин В.А., Лиходед В.Г., Яковлев М.Ю., Ильина А.Я., Лазарева С.И. Патогенические механизмы и клинические аспекты действия термостабильного эндотоксина кишечной микрофлоры (обзор литературы) // Русский медицинский журнал. 2003. N. 1. С. 126-128.

52. Черешнев В. А., Юшков Б.Г., Климин В.Г., Лебедева Е.В. Иммунофизиология // Екатеринбург : УРО РАМ, 2002. 257 с.

53. Шмидт-Нильсен К. Размеры животных: почему они так важны? // М.,1987.-215 с.

54. Элиава М.И. Эффекты 6-часовой депривации сна у морской свинки Cavia porcellus // Журн. эвол. биохим. и физиол. 1998. Т. 34. N. 4. С. 525529.

55. Элиава М.И., Аристакесян Е.А. Эффекты шестичасовой тотальной депривации сна на цикл бодрствование-сон крыс в разные сроки онтогенеза. // Журн. эвол. биохим. и физиол. 1998. Т. 34. N. 2. С. 202211.

56. Яковлев М.Ю. "Эндотоксиновая агрессия" как предболезнь или универсальный фактор патогенеза заболеваний человека и животных // Успехи современной биологии. 2003. Т. 123. N. 1. С. 31-41.

57. Яковлев М.Ю. Кишечныйлипополисахарид: системная эндотоксинемия— эндотоксиновая агрессия SIR-синдром и полиорганная недостаточность, как звенья одной цепи // Бюллетень ВНЦ РАМН. 2005. N. 1. С.15-18.

58. Aird W. The hematologic system as a marker of organ dysfunction in sepsis // Mayo Clin. Proc. 2003. Vol. 78. P. 869-881.

59. Akarsu E.S., Mamuk S. Escherichia coli lipopolysaccharides produceserotype-specific hypothermic response in biotelemetered rats // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Сотр. Physiol. 2007. Vol. 292. N. 5. P. 1846-50.

60. Alfoldi P., Rubicsek G., Cserni G., Obal F.Jr. Brain and core temperaturesand peripheral vasomotion during sleep and wakefulness at various ambient temperatures in the rat // Pflugers Arch. 1990. Vol. 417. N. 3. P. 336-341.

61. Amici C., Sistonen L., Santoro M.G., Morimoto R.I. Antiproliferative prostaglandins activate heat shock transcription factor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. Vol. 89. N. 14. P. 6227-31.

62. Andersen M.L., Martins P.J., D'Almeida V., Bignotto M., Tufik S. Endocrinological and catecholaminergic alterations during sleep deprivation and recovery in male rats // J. Sleep Res. 2005. Vol. 14. N. 1. P. 83-90.

63. Angus D.C., Wax R.S. Epidemiology of sepsis: an update // Crit. Care Med. 2001. Vol.29. P. 109-116.

64. Arispe N., Doh M., Simakova O., Kurganov В., De Maio A. Hsc70 and Hsp70 interact with phosphatidylserine on the surface of PC 12 cells resulting in a decrease of viability // FASEB J. 2004. Vol. 18. N. 14. P. 1636-1645.

65. Arnold-Schild D., Hanau D., Spehner D., Schmid C., Rammensee H.G., de la Salle H., Schild H. Receptor-mediated endocytosis of heat shock proteins by professional antigen-presenting cells // J. Immunol. 1999. Vol. 162. P. 37573760.

66. Asea A. Heat Shock Proteins and Toll-Like Receptors // Handbook of Experimental Pharmacology (eds S. Bauer, G. Hartmann). Springer-Verlag Berlin Heidelberg. 2008. P. 111-183.

67. Asea A. Stress proteins and initiation of immune response: chaperokine activity of hsp72 // Exerc. Immunol. Rev. 2005. Vol. 11. P. 34-45.

68. Bausinger H., Lipsker D., Ziylan U., Manié S., Briand J.P., Cazenave J.P., Muller S., Haeuw J.F., Ravanat C., de la Salle H., Hanau D. Endotoxin-free heat-shock protein 70 fails to induce APC activation // Eur. J. Immunol. 2002. Vol. 32. P. 3708-3713.

69. Bechtold D.A., Rush S.J., Brown I.R. Localization of the heat-shock protein Hsp70 to the synapse following hyperthermic stress in the brain. // J. Neurochem. 2000. Vol. 2. N. 74. P. 641-646.

70. Becker T., Hartl F.U., Wieland F. CD40, an extracellular receptor for binding and uptake of Hsp70-peptide complexes // J. Cell. Biol. 2002. Vol. 158. P. 1277-1285.

71. Beere H.M., Wolf B.B., Cain K. Heat-shock protein 70 inhibits apoptosis by preventing recruitment of procaspase-9 to the Apaf-1 apoptosome // Nat. Cell. Biol., 2000. Vol. 8. N. 2. P. 469-475.

72. Berger R.J., Phillips N.H. Constant light suppresses sleep and circadian rhythms in pigeons without consequent sleep rebound in darkness // Am. J. Physiol. 1994. Vol. 267. P. 945-952.

73. Bergmann B.M., Everson C.A., Kushida C.A., Fang V.S., Leitch C.A.,

74. Schoeller D.A., Refetoff S., Rechtschaffen A. Sleep deprivation in the rat, V. Energy use and mediation // Sleep. 1989. Vol. 12. P. 31-41.

75. Bernheim H.A., Block L.H., Atkins E. Fever: pathogenesis, pathophysiology, and purpose // Ann. Intern. Med. 1979. Vol. 91. P. 261-270.

76. Bertolotti A., Zhang Y., Hendershot L. M., Harding H. P., Ron D. Dynamic interaction of BiP and ER stress transducers in the unfolded-protein response //Nat. Cell. Biol. 2000. Vol. 2. P. 326-332.

77. Binder R.J., Srivastava P.K. Essential role of CD91 in re-presentation of gp96-chaperoned peptides // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004. Vol. 101. P. 6128-6133.

78. Borbely A.A., Achermann P. Sleep homeostasis and models of sleep regulation // In: Principles and Practice of Sleep Medicine / Ed. by Kryger M.H., Roth T., Dement W.C. Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2005. P. 405417.

79. Borbely A. A., Tobler I., Hanagasioglu M. Effect of sleep deprivation on sleep and EEG power spectra in the rat // Behavioural brain research. 1984. Vol. 14. P. 171-182.

80. Born J., Horst L. F. The neuroendocrine recovery function of sleep // Noise Health. 2000. Vol. 2. P. 25-37.

81. Bruemmer-Smith S., Stuber F., Schroeder S. Protective functions of intracellular heat-shock protein (HSP) 70-expression patient with severe sepsis // Intensive Care Med. 2001. Vol. 27. N. 12. P. 1835-1841.

82. Buguet A. Sleep under extreme environments: effects of heat and cold exposure, altitude, hyperbaric pressure and microgravity in space // J. Neurosci. 2007. Vol. 262. P. 145-152.

83. Cabanac M., Aizawa S. Fever and tachycardia in a bird (Gallus domesticus) after simple handling // Physiol. Behav. 2000. Vol. 69. P. 541-545.

84. Cajohen C., Foy R., Dijk D.J. Frontal predominance of a relative increase in delta and theta EEG activity after sleep loss in humans // Sleep Res. Online. 1999. Vol. 2. N 3. P.65-69.

85. Campisi J., Leem T.H., Fleshner M. Stress-induced extracellular Hsp72 is a functionally significant danger signal to the immune system // Cell Stress Chaperones. 2003. Vol. 8. № 3. p. 272-286.

86. Cannon B., Houstek J., Nedergaard J. Brown adipose tissue. More than an effector of thermogenesis? // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1998. Vol. 29. P. 171187.

87. Caprioli J., Ishii Y., Kwong J.M. Retinal ganglion cell protection with geranylgeranylacetone, a heat shock protein inducer, in a rat glaucoma model // Trans. Am. Ophthalmol. Soc. 2003. Vol. 101. P. 39-50.

88. Charloux A., Gronfier C., Chapotot F., Ehrhart J., Piquard F., Brandenberger G.J. Sleep deprivation blunts the night time increase in aldosterone release in humans // Sleep Res. 2001. Vol. 10. P. 27-33.

89. Chen H.C., Guh J.Y., Tsai J.H. et al. Induction of heat shock protein 70 protects mesangial cells against oxidative injury // Kidney Int. 1999. Vol. 4. N. 56. P. 1270-1273.

90. Chen H.W., Hsu C., Lue S.I., Yang R.C. Attenuation of sepsis-induced apoptosis by heat shock pretreatment in rats // Cell Stress Chaperones. 2000. Vol. 5. N. 3.P. 188-195.

91. Chen S., Brown I.R. Translocation of constitutively expressed heat shock protein hsc70 to synapse-enriched areas of the cerebral cortex after hyperthermic stress // J. of Neurosci. Res. 2007. Vol. 85. P. 402^109.

92. Cirelli C. The genetic and molecular regulation of sleep: from fruit flies to humans // Nat. Rev. Neurosci. 2009. Vol. 10. N. 8. P. 549-560.

93. Cirelli C., Faraguna U., Tononi G. Changes in brain gene expression after long-term sleep deprivation // J. Neurochem. 2006. Vol. 98. N. 5. P. 16321645.

94. Cirelli C., Tononi G. Gene expression in the brain across the sleep—waking cycle // Brain Res. 2000. Vol. 885. P. 303-321.

95. Conrad A., Bull- D.F., King M.G., Husband A.J. The effects of lipopolysaccharide (LPS) on the fever response in rats at different ambient temperatures //Physiol. Behav. 1997. Vol. 62. N. 6. P. 1197-1201.

96. Diks S.H., van Deventer S.J., Peppelenbosch M.P. Lipopolysaccharide recognition, internalisation, signalling and other cellular effects // J. Endotoxin Res. 2001. Vol. 7. P. 335-348.

97. Ding X.Z., Fernandez-Prada C.M., Bhattacharjee A.K., Hoover D.L. Overexpression of hsp-70 inhibits bacterial lipopolysaccharide-induced production of cytokines in human monocyte-derived macrophages // Cytokine. 2001. Vol. 16. N. 6. P. 210-219.

98. Dinges D.F., Douglas S.D., Zaugg L. et al. Leukocytosis and natural killer cell function parallel neurobehavioral fatigue induced by 64 hours of sleep deprivation. //J. Clin. Invest. 1994. Vol. 93. P. 1930-1939.

99. Dokladny K., Lobb R., Wharton W., Ma T.Y., Moseley P.L. LPS-induced cytokine levels are repressed by elevated expression of HSP70 in rats: possible role of NF-kappaB // Cell Stress Chaperones. 2010. Vol. 15. P. 153163.

100. Dreher D., Vargas J.R., Hochstrasser D.F., Junod A.F. Effects of oxidative stress and Ca2+ agonists on molecular chaperones in human umbilical vein endothelial cells//Electrophoresis. 1995. Vol. 16. P. 1205-1214.

101. Dybdahl B., Wahba A., Lien E. et al. Inflammatory response after open heart surgery. Release of heat-shock protein 70 and signaling through toll-like receptor-4 // Circulation. 2002. Vol. 105. P. 685-690.

102. Eksted M. Burnout and sleep // Doctoral thesis. Department of Public Health.

103. Sciences. Division of Psychosocial Factors and Health. Karolinska Institute. Stocholm, 2005. 89 pp.

104. Ellis R.J. Proteins as molecular chaperones //Nature. 1987. Vol. 328. P. 378379.

105. El-Samalouti V.T. Hamann L., Flad H.-D., Ulmer A. The biology of endotoxin // In: Bacterial endotoxins: methods and protocols / Ed. by Hoist O. Totowa: Humana Press, 2000. P. 287-379.

106. Evdonin A.L., Martynova M.G., Bystrova O.A., Guzhova I.V., Margulis B.A., Medvedeva N.D. The release of Hsp70 from A431 carcinoma cells is mediated by secretory-like granules // Eur. J. Cell Biol. 2006. Vol. 85. N. 6. P. 443-455.

107. Everson C.A. Functional consequences of sustained sleep deprivation in the rat // Behav. Brain Res. 1995. Vol. 69. N. 1-2. P. 43-54 .

108. Everson C.A., Gilliland M.A., Kushida C.A. et al. Sleep deprivation in the rat: IX. Recovery // Sleep. 1989. Vol. 12. N. 1. P. 60-67!

109. Everson-C. A., Smith C.B., Sokoloff L. Effects of prolonged sleep deprivation on local rates of cerebral energy metabolism in freely moving rats // Am. J. Physiol. 1994. Vol. 266. P. 688-695.

110. Everson C.A., Toth L.A. Systemic bacterial invasion induced by sleep deprivation // AJP Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 2000. Vol. 278. N. 4. P. 905-916.

111. Fadda P., Fratta W. Stress-induced sleep deprivation modifies corticotropin releasing factor (CRF) levels and CRF binding in rat brain and pituitary // Pharmacol. Res. 1997. Vol: 35. N. 5. P. 443-446.

112. Febbraio M.A., Ott P., Nielsen H.B., Steensberg A., Keller C., Krustrup P.,

113. Secher N.H., Pedersen B.K. Exercise induces hepatosplanchnic release ofheat shock protein 72 in humans // J. Physiol. 2002. Vol. 544. N. 3. P. 957962.

114. Fewell J.E., Ricciuti F., Kondo C.S., Dascalu V. Fever in young lambs: temperature, metabolic and cardiorespiratory responses to a small dose of bacterial pyrogen // J. Dev. Physiol. 1991 Vol. 15. N. 4. P. 229-235.

115. Fincato G., Polentarutti N., Sica A., Mantovani A., Colotta F. Expression of a heat-inducible gene of the HSP70 family in human myelomonocytic cells: regulation by bacterial products and cytokines // Blood. 1991. Vol. 77. N. 3. P. 579-586.

116. Fleshner M., Campisi J., Amiri L., Diamond D.M. Cat exposure induces both intra- and extracellular Hsp72: the role of adrenal hormones // Psychoneuroendocrinology. 2004. Vol. 29.N. 9. P. 1142-1152.

117. Florez-Duquet M., Peloso E., Satinoff E. Fever and behavioral thermoregulation in young and old rats // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2001. Vol. 280. N. 5. P. 1457-1463.

118. Franken P., Dijk D., Tobler I., Borbely A. Sleep deprivation in rats: effects on EEG power spectra, vigilance states, and cortical temperature // Am. J.

119. Physiol. 1991. Vol. 261. P. 198-208.i

120. Franken P., Tobler I., Borbely A.A. Cortical temperature and EEG slow-wave activity in the rat: analysis of vigilance state related changes // Pflugers Arch. 1992. Vol. 420. P. 500-507.

121. Freedman N.S., Kotzer N., Schwab R.J. Patient perception of sleep quality and etiology of sleep disruption in the intensive care unit // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1999. Vol. 159. P. 1155-1162.

122. Frossard J.L. Heat shock protein 70 (HSP70) prolong survival in rats exposed to hyperthermia // European J. of Clin. Invest. 1999. Vol. 29. P. 561-562.

123. Gary K.A., Winokur A., Douglas S.D., Kapoor S., Zaugg L., Dinges D.F. Total sleep deprivation and the thyroid axis: effects of sleep and waking activity // Aviat. Space Environ Med. 1996. Vol. 67. N. 6. P. 513-519.

124. Goodman I.J. The study of sleep in birds. Birds, Brain and Behavior // New York: Academic Press. 1974. P. 133-152.

125. Graener R., Werner J. Dynamics of endotoxin fever in the rabbit // J Appl. Physiol. 1986. Vol. 60. 5. P. 1504-1510.

126. Gray D.A., Maloney S.K., Kamerman P.R. Restraint increases afebrile body temperature but attenuates fever in Pekin ducks (Anas platyrhynchos) // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2008. Vol. 294. N. 5. P. 1666-1671.

127. Gross C., Hansch D., Gastpar R., Multhoff G. Interaction of heat shock protein 70 peptide with NK cells involves the NK receptor CD94 // Biol. Chem. 2003. Vol. 384. P. 267-279.

128. Guo J.S. Over-expression of inducible heat shock protein 70 in the gastric mucosa of partially sleep-deprived rats. / J.S. Guo, J.F. Chau, X.Z. Shen, C.H: Cho, J.M. Luk, M.W. Koo // Scand. J. Gastroenterol. 2004.-Vol. 39. N. 6. P. 510-515.

129. Guzhova I., Margulis B. Hsp70 chaperone as a survival factor in cell pathology // Int. Rev. Cytol. 2006. Vol. 254. P. 101-149.

130. Guzhova I.V., Kislyakova K., Moskaliova O. In vitro studies show that Hsp 70 can be released by glia and that exogenous Hsp 70 can enhance neuronal stress tolerance // Brain Res. 2001. Vol. 914. P. 66-73.

131. Haas I.G. BiP (GRP78), an essential hsp70 resident protein in the endoplasmic reticulum // Experientia. 1994. Vol. 50. P. 1012-1020.

132. Hansen M.K., Krueger J.M. Subdiaphragmatic vagotomy does not block sleep deprivation-induced sleep in rats // Physiol. Behav. 1998. Vol. 64. N. 3. P. 361-365.

133. Harding H.P., Calfon M., Urano F., Novoa I., Ron D. Transcriptional and translational control in the Mammalian unfolded protein response // Ann. Rev. Cell Dev. Biol. 2002. Vol. 18. P. 575-599.

134. Hartl F.U. Molecular chaperones in cellular protein folding // Nature. 1996. Vol. 381. P. 571-579.

135. Heller H.C. Temperature, thermoregulation and sleep. In: Principals and Practice of Sleep Medicine. Vol. 4.,Ed. by M. K. Kryger, T. Roth, W. C. Dement // Elsevier Saunders. Philadelphia. 2005. P. 292-304.

136. Heller H.C., Graf R., Rautenberg W. Circadian and arousal state influences on thermoregulation in the pigeon // Am. J. Physiol. 1983. Vol. 245. P. 321-328.

137. Hotchkiss R., Nunnally I., Lindquist S., Taulien J., Perdrizet G., Karl I. Hyperthermia protects mice against the lethal effects of endotoxin // Am. J. Physiol. 1993. Vol. 265. N. 6. P. 1447-1457.

138. Huber R., Deboer T., Tobler I. Topography of EEG dynamics after sleep deprivation s mice // J. Neurophysiol. 2000. Vol. 84. N. 4. P. 1888-1893.

139. Hunt C., Morimoto R.I. Conserved features of eukaryotic hsp70 genes revealed by comparison with the nucleotide sequence of human hsp70 // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. Vol. 82. N. 19. P. 6455-6459.

140. Hunter-Lavin C., Davies E.L., Bacelar M.M., Marshall M.J., Andrew S.M., Williams J.H. Hsp70 release from peripheral blood mononuclear cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2004. Vol. 324. N. 2. P. 511-517.

141. Imeri L., Opp M.R. How (and why) the immune system makes us sleep // Nat. Rev. Neurosci. 2009. Vol. 10. 3. P. 199-210.

142. Irwin M., Thompson J., Miller C. et al. Effects of sleep and sleep deprivation on catecholamine and interleukin-2 levels in humans: clinical implications // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1999. Vol. 84. N. 6. P. 1979-1985.

143. Jaattela M., Wissing D. Heat-shock proteins protect cells from monocyte cytotoxicity: possible mechanism of self-protection // J. Exp. Med. 1993. Vol. 177. N. l.P. 231-236.

144. Johnson J. D., Fleshner M. Releasing signals, secretory pathways, and immune function of endogenous extracellular heat shock protein 72 // J. Leukoc. Biol. 2006. Vol. 79. N. 3. P. 425-434.

145. Johnson J.D., O'Connor K.A., Hansen M.K., Watkins L.R., Maier S.F. Effects of prior stress on LPS-induced cytokine and sickness responses // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2003. Vol. 284. N. 2. P. 422-432.

146. Johnson R.W., Curtis S.E., Dantzer R., Bahr J.M., Kelley K.W. Sickness behavior in birds, caused by peripheral or central injection of endotoxin // Physiol. Behav. 1993. Vol. 53. N. 2. P. 343-348.

147. Jones S., Pflster-Genskow M., Benca R., Cirelli C. Molecular correlates of sleep and wakefulness in the brain of the white-crowned sparrow // J. Neurochem. 2008. Vol. 105. P. 46-62.

148. Karten H.J., Hodos W. A stereotaxic atlas of the brain of the pigeon (Columba livia) // Baltimore: Johns Hopkins Press, 1967.

149. Kato K., Ito H., Kamei K., Iwamoto I. Stimulation of the stress-induced expression of stress proteins by curcumin in cultured cells and in rat tissues in vivo // Cell Stress Chaperones. 1998 Vol. 3. P. 152-160.

150. Kaiser P., Rothwell L., Avery S., Balu S. Evolution of the interleukins // Dev. Comp. Immunol. 2004. Vol. 3. P. 375-394.

151. Kaufman R. J. Orchestrating the unfolded protein response in health and disease // J. Clin. Invest. 2002. Vol. 110. P. 1389-1398.

152. Kawai T., Akira S. TLR signaling // Cell Death Differ. 2006. Vol. 13.N. 5. P.816.825.

153. Kelty J.D., Noseworthy P.A., Feder M.E., Robertson R.M., Ramirez J.M. Thermal preconditioning and heat shock protein 72 preserve synaptic transmission during thermal stress // J. Neurosci. 2002. Vol. 22. N. 1. P. 193.

154. King Y.T., Lin C.S., Lin J.H. Whole-body hyperthermia-induced thermotolerance is associated with the induction of Heat Shock Protein 70 in mice // The J. of Exp. Biol. 2002. N. 205. P. 273-278.

155. Krueger J.M., Majde J.A. Microbial products and cytokines in sleep and fever regulation // Crit. Rev. Immunol. 1994. Vol. 14. P. 355-379.

156. Kustanova G.A., Murashev A.N., Karpov V.L., Margulis B.A., Guzhova I.V., et al. Exogenous heat shock protein 70 mediates sepsis manifestations and decreases the mortality rate in rats // Cell Stress & Chaperones. 2006. Vol. 11.N.3.P. 276-286.

157. Lancaster G.I., Febbraio M.A. Mechanisms of stress-induced cellular HSP72 release: implications for exercise-induced increases in extracellular HSP72 // Exerc. Immunol. Rev. 2005. Vol. 11. P. 46-52.

158. Lemmer B. The sleep-wake cycle and sleeping pills // Physiol. Behav. 2007. Vol. 90. N. 2-3. P. 285-293.

159. Lendrem D.W. Sleeping and vigilance in birds, II. An experimental study of the Barbary dove (Streptopelia risoria) // Animal Behaviour. Vol. 32. N. 1. 1984. P. 243-248.

160. Leshchinsky T.V., Klasing K.C. Divergense of the inflammatory response in two types of chickens // Dev. Comp. Immunol. 2001. Vol. 25. N. 7. P. 629638.

161. Loones M.T., Chang Y., Morange M. The distribution of heat shock proteinsin the nervous system of the unstressed mouse embryo suggests a role in neuronal and non-neuronal differentiation // Cell Stress Chaperones. 2000. Vol. 5. N. 4. P. 291-305.

162. Mackiewicz M., Shockley K.R., Romer M.A., Galante R.J., Zimmerman J.E., Naidoo N., Baldwin D.A., Jensen S.T., Churchill G.A., Pack A.I. Macromolecule biosynthesis: a key function of sleep // Physiol. Genomics.2007. Vol. 31. N. 3. P. 441-457.

163. Madden L.A., Sandstrom M.E., Lovell R.J., McNaughton L. Inducible heatshock protein 70 and its role in preconditioning and exercise // Amino Acids.2008. Vol. 34. N. 4. P. 511-516.

164. Malhotra V., Wong H.R. Interactions between the heat shock response and the nuclear factor-kappa B signaling pathway // Crit. Care Med. 2002. Vol. 30. P. 89-95.

165. Maloney S.K., Gray D.A. Characteristics of the febrile response in Pekin ducks // J. Comp. Physiology B. 1998. Vol. 168. N. 3. P. 177-182.

166. Manzerra P., Rush S.J., Brown I.R. Tissue-specific differences in heat shock protein hsc70 and hsp70 in the control and hyperthermic rabbit // J. Cell Physiol. 1997. Vol. 170. P. 130-137.

167. Margulis B.A., Welsh M. Isolation of hsp70-binding proteins from bovine muscle // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1991. Vol. 178. N. 1. P. 1-7.

168. Matsumoto Y., Mishima K., Satoh K. et al: Total sleep deprivation induces an acute and transient increase in NK cell activity in healthy young volunteers // Sleep. 2001. Vol. 24. N. 7. P. 804-809 .

169. McEwen B.S. Sleep deprivation as a neurobiologic and physiologic stressor: Allostasis and allostatic load // Metabolism. 2006. Vol. 55. P. 20-23.

170. McGinty D., Szymusiak R. Keeping cool: a hypothesis about the mechanisms and functions of slow wave sleep // Trends neurosci. 1990. Vol. 13. P. 480487.

171. Meerlo P., Koehl M., van der Borght K., Turek F.W. Sleep restriction alters the hypothalamic-pituitary-adrenal response to stress // J. Neuroendocrinol. 2002. Vol. 14. N. 5. P 397-402.

172. Meerlo P., Sgoifo A., Suchecki D. Restricted and disrupted sleep: effects on autonomic function, neuroendocrine stress systems and stress responsivity // Sleep Med. Rev. 2008, Vol. 12. N. 3. P. 197-210.

173. Meng X., Brown J.M., Ao L., Nordeen S.K., Franklin W., Harken A.H., Banerjee A. Endotoxin induces cardiac HSP70 and resistance to endotoxemic myocardial depression* in rats // Am. J. Physiol. 1996. Vol. 271. P. 13161324.

174. Menoret A., Chaillot D., Callahan M., Jacquin C. Hsp70, an immunological actor playing with the intracellular self under oxidative stress // Int. J. Hyperthermia. 2002 Vol. 18. N. 6. P. 490-505.

175. Morairty S.R., Szymusiak R., Thomson D., McGinty D.J. Selective increases in non-rapid eye movement sleep following whole body heating in rats // Brain Res. 1993. Vol. 617. N. 1. P. 10-16.

176. Morimoto R.I., Kline M.P., Bimston M.P., et al. The heat-shock response: regulation and function of heat shock proteins and molecular chaperones // Essays Biochem. 1997. Vol. 32. P. 17-29.

177. Morimoto R.I., Tissieres A., Georgopoulos C. The biology of heat shock proteins and molecular chaperones // Cold Spring Harbor. New York: Cold Spring Harbor Lab. Press. 1994. 610 p.

178. Mullington J.M., Haack M., Toth M., Serrador J.M., Meier-Ewert H.K. Cardiovascular, inflammatory, and metabolic consequences of sleep deprivation // Prog. Cardiovasc. Dis. 2009. Vol. 51. N. 4. P. 294-302.

179. Multhoff G. Heat shock protein 70 (Hsp70): membrane location, export and immunological relevance //Methods. 2007. Vol. 43. N. 3. P. 229-237.

180. Naidoo N., Casiano V., Cater J., Zimmerman J., Pack A.I. A role for the molecular chaperone protein BiP/GRP78 in Drosophila sleep homeostasis // Sleep. 2007. Vol. 30. N. 5. P. 557-565.

181. Naidoo N., Ferber M., Master M., Zhu Y., Pack A.I: Aging Impairs the Unfolded Protein Response to Sleep Deprivation and Leads to Proapoptotic Signaling // J. of Neurosci. 2008. Vol. 28. N. 26. P. 6539-6548.

182. Naidoo N., Giang W., Galante R.J., et al. Sleep deprivation induces the unfolded protein response in mouse cerebral cortex // J. Neurochem. 2005. Vol. 5.N. 92. P. 1150-1157.

183. Nakanishi H., Sun Y., Nakamura R.K., et al. Positive correlation betweencerebral protein synthesis rates and deep sleep in Macaca mulata // J. Neurosci. 1997. Vol. 9. P. 271-279.

184. Newman S.M., Paletz E.M., Obermeyer W.H., Benca R.M. Sleep deprivationin pigeons and rats using motion detection // Sleep. 2009. Vol. 32. N. 10. P. 1299-1312.

185. Newman S.M., Paletz E.M., Rattenborg N.C., Obermeyer W.H., Benca R.M.

186. Sleep deprivation in the pigeon using the Disk-Over-Water method // Physiol. Behav. 2008. Vol. 93. N. 1-2. P. 50-58.

187. Njemini R., Lambert M., Demanet C., Mets T. Elevated serum heat-shock protein 70 levels in patients with acute infection: use of an optimized enzyme-linked immunosorbent assay // Scand. J. Immunol. 2003. Vol. 58. N. 6. P. 664-669.

188. Nomoto S. Diurnal variations in fever induced by intravenous LPS injectionin pigeons // Pflugers Arch. 1996. Vol. 431. N. 6. P. 987-9891

189. Obermeyer W., Bergmann B.M., Rechtschaffen A. Sleep deprivation in the rat: XIV. Comparison of waking hypothalamic and peritoneal temperatures // Sleep. 1991. Vol. 14. N. 4. P. 285-293.

190. Ohtsuka K., Suzuki T. Roles of molecular chaperones in the nervous system // Brain Res. Bull. 2000. Vol. 2. N. 53. P. 141-146.

191. O'Malley K., Mauron A., Barchas J.D., Kedes L. Constitutively expressed rat mRNA encoding a 70-kilodalton heat-shock-like1 protein // Mol. Cell Biol. 1985. Vol. 5. N. 12. P. 3476-3483.

192. Opp M.R., Krueger J.M. Interleukin-1 is involved in responses to sleep deprivation in the rabbit // Brain Res. 1994. Vol. 639. N. 1. P. 57-65.

193. Owen-Ashley N., Wingfield J. Acute phase response of passerine birds: characterization and seasonal variation // J. Ornithol. 2007. Vol. 148. P. 583591.

194. Paxinos G., Watson C. The rat brain in stereotaxic coordinates // San Diego: Academic Press. 1998.

195. Petersen NH, Kirkegaard T, Olsen OD, Jaattela M. Connecting Hsp70, sphingolipid metabolism and lysosomal stability // Cell Cycle. 2010. Vol. 9. N. 12. P. 2305-2309.

196. Piano A., Valbonesi P., Fabbri E. Expression of cytoprotective proteins, heat shock protein 70 and metallothioneins, in tissues of Ostrea edulis exposed to heat and heavy metals // Cell Stress Chaperones. 2004. Vol. 9. N. 2. P. 134142'.

197. Pleuvry B. Anxiolytics and hypnotics // Anaesthesia and intensive care medicine. 2001. Vol.5. P. 252-256.

198. Pockley A.G. Heat shock proteins in health and disease: therapeutic targets or therapeutic agents? //Exp. Rev. Mol. Med. 2001. P. 1-21.

199. Pollmacher T., Schuld A., Kraus T., Haack M., Hinze-Selch D., Mullington J. Experimental immunomodulation, sleep, and sleepiness in humans // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2000. Vol. 917. P. 488-499.

200. Pratt W.B., Morishima Y., Murphy M., Harrell M. Chaperoning of glucocorticoid receptors // Handb. Exp. Pharmacol. 2006. Vol. 172. P. 111138.

201. Quabbe H.J., Gregor M., Bumke-Vogt C., Hardel C. Pattern of plasma Cortisol during the 24-hour sleep/wake cycle in the rhesus monkey // Endocrinology. 1982. Vol. 110. N. 5. P. 1641-1646.

202. Ramanathan L., Gulyani S., Nienhuis R., Siegel J.M. Sleep deprivation decreases superoxide dismutase activity in rat hippocampus and brainstem // Neuroreport. 2002. Vol. 13. N. 11. P. 1387-1390.

203. Ramm P., Smith C.T. Rates of cerebral protein synthesis are linked to slow wave sleep in the rat // Physiol. Behav: 1990. Vol. 48. P. 749-753.

204. Rashotte M., Pastukhov Iu., Poliakov E., Henderson R. Vigilance states and body temperature during the circadian cycle in fed and fasted pigeons (Columba livia) //Am. J. Physiol. 1998. Vol. 275. P. 1690-1702.

205. Rattenborg N.C., Amlaner C.J., Lima S.L. Behavioral, neurophysiological and evolutionary perspectives on unihemispheric sleep // Neurosci. Biobehav. Rev. 2000. Vol. 24. N. 8. P. 817-842.

206. Rattenborg N.C., Martinez-Gonzalez D., Lesku J.A. Avian sleep homeostasis: convergent evolution of complex brains, cognition and sleep functions inmammals and birds //Neurosci. Biobehav. Rev. 2009. Vol. 33. N. 3. P. 253270.

207. Rechtschaffen A., Bergmann B.M., Everson C.A., Kushida C.A., Gilliland M.A. Sleep deprivation in the rat: X. Integration and discussion of the findings // Sleep. 1989. Vol. 12. N. 1. P. 68-87.

208. Rechtschaffen A., Bergmann B.M., Gilliland M.A., Bauer K. Effects of method, duration, and sleep stage on rebounds from sleep deprivation in the rat//Sleep. 1999. Vol. 22. N. 1. P. 11-31.

209. Ritossa F. A new puffing induced by heat shock and DNP in Drosophila // Expirientia. 1962. Vol. 18. P. 571-573.

210. Romanovsky A.A., Almeida M.C., Aronoff D.M., Ivanov A.I., Konsman J.P., Steiner A.A., Turek V.F. Fever and hypothermia in systemic inflammation: recent discoveries and revisions // Front. Biosci. 2005. Vol. 10. P. 21932216.

211. Romanovsky A.A., Kulchitsky V.A., Akulich N.V., Koulchitsky S.V.,

212. Simons C.T., Sessler D.I., Gourine V.N. First and second phases of biphasic fever: two sequential stages of the sickness syndrome? // Am. J. Physiol. 1996. Vol. 271. P. 244-253.

213. Saper C.B., Scammell T.E., Lu J. Hypothalamic regulation of sleep and circadian rhythms //Nature. 2005. Vol. 437. N. 27. P. 1257-1263.

214. Schiffelholz T., Lancel M. Sleep changes induced by lipopolysaccharide in rat are influenced by age // Am. J. Physiology. 2001. Vol. 280. P. 398-403.

215. Schroder M., Kaufman R.J. The Mammalian unfolded protein response // Annu. Rev. Biochem. 2005. Vol. 74. P. 739-789.

216. Sedger L, Ruby J. Heat shock response to vaccinia virus infection // J. Virol.1994. Vol. 68. N. 7. P. 4685-4689.

217. Shaw P.J., Tononi G., Greenspan R.J., et al. Stress response genes-protect against lethal effects of sleep deprivation in Drosophila // Nature. 2002. N. 417. P. 287-291.

218. Singh R, Kiloung J, Singh S, Sharma D. Effect of paradoxical sleep deprivation on oxidative stress parameters in brain regions of adult and old rats // Biogerontology. 2008. Vol. 9. N. 3. P. 153-162.

219. Srivastava P.K. Heat shock protein-based novel immunotherapies // Drug. News Perspect. 2000. Vol. 13. P. 517-522.

220. Srivastava P.K. Immunotherapy for human1 cancer using heat shock protein-peptide complexes // Curr. Oncol. Rep. 2005. Vol. 7. P. 104-108.

221. Steensberg A., Dalsgaard M.K., Secher N.H., Pedersen B.K. Cerebrospinal fluid IL-6, HSP72, and TNF-alpha in exercising humans // Brain. Behav. Immun. 2006. Vol. 20. P. 585-589.

222. Szelenyi Z., Szekely M. Comparison of the effector mechanisms during endotoxin fever in the adult rabbit // Acta Physiol. Acad. Sci. Hung. 1979. Vol: 54. P: 33-41.

223. Szymczak J.T., Helb H.W., Kaiser W. Electrophysiological and behavioral correlates of sleep in the blackbird (Turdus merula) // Physiol. Behav. 1993. Vol. 53. N. 6. P. 1201-1210.

224. Stryckova T. Effect of lipopolysaccharides on the morphology of erythrocyte membranes // Folia Microbiologica. 1978. Vol. 23. N. 6. P. 465-468.

225. Takahashi S., Fang J., Kapas L., Wang Y., Krueger J.M. Inhibition of brain interleukin-1 attenuates sleep rebound after sleep deprivation in rabbits // Am. J. Physiol. 1997. Vol'. 273. P. 677-682.

226. Tavaria M., Gabriele T., Kola I., Anderson R.L. A hitchhiker's guide to the human Hsp70 family // Cell Stress Chaperones. 1996. Vol. 1. P. 23-28.

227. Terao A., Greco MIA;, Davis R.W., et al. Region-specific changes in immediate early gene expression ' in response to sleep deprivation and recovery sleep in the mouse brain // Neuroscience. 2003. Vol. 4. N. 120. P. 1115-1124.

228. Terao A., Wisor J.P., Peyron C., Apte-Deshpande A., Wurts S.W., Edgar D.M., Kilduff T.S. Gene expression in the rat brain during sleep deprivation and recovery sleep: an Affymetrix GeneChip study // Neurosci. 2006. Vol. 137. P. 593-605.

229. Thompson t-LS., MaynardE.B., Morales E.R., Scordilis S.P. Exercise-induced HSP27, HSP70 and MAPK responses in human skeletal muscle // Acta Physiol. Scand. 2003. Vol. 178. N. 1. P. 61-72.

230. Tobler I. Phylogeny of sleep regulation. Kryger M.H., Roth T. Ill, Dement W.C. (Eds.) Principles and practice of sleep medicine // Elsevier/Saunders. Philadelphia. 2005. P. 77-90.

231. Tobler I., Borbely A.A. Sleeps and EEG spectra in the pigeon (Columbia livia) under baseline conditions and after sleep deprivation. // J. Comp. Physiol. A 1988. Vol. 163. P. 729-738.

232. Tononi G., Cirelli C. Sleep and-synaptic homeostasis: a hypothesis // Brain Res. Bull. 2003. Vol, 62. P. 143-150.

233. Toth L.A., Opp M.R., Mao L. Somnogenic effects of sleep deprivation and Escherichia coli inoculation in rabbits // J. Sleep Res. 1995. Vol. 4. N. 1. P. 30-401

234. Toth: L.A., Tolley E.A., Krueger J:M. Sleep as a prognostic indicator during infectious disease in rabbits;// Proc. Soc. Exp. Biol. Med:, 1993. Vol. 203. N. • 2. P. 179-192.

235. Triantafilou K., Triantafilou M:, Dedrick R.L. A CD14-independent EPS receptor cluster//Nat. Immunol. 2001. Vol. 2. N. 4. P. 338-345.

236. Tsai L., Bernard M.B., .Rechtschaffen A. Sleep deprivation in the rat: XVI. Effects in a Light-Dark Cycle // Sleep. 1992. Vol. 15. N. 6. P. 537-544.

237. Tsan M.F., Gao B. Cytokine function of heat shock proteins // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2004. Vol. 286. N. 4. P. 739-744.

238. Tsan M.F., Gao B. Heat shock proteins and immune system // J. Leukoc. Biol. 2009. Vol. 85. N. 6. 905-910.

239. Tytell M., Greenberg S.G., Lasek R.G. Heat shock-like protein is transferred from glia to axon // Brain Res. 1986. Vol. 363. P. 161-164.

240. Vázquez-Palacios G., Retana-Márquez S., Bonilla-Jaime H., Velázquez-Moctezuma J. Further definition of the effect of corticosterone on the sleep-wake pattern in the male rat // Pharmacol. Biochem. Behav. 2001. Vol. 70. N. 2-3. P. 305-310.

241. Wada T. Geranylgeranylacetone, an inducer of HSP 70, attenuates REM sleep rebound after sleep deprivation. / T. Wada, H. Sei, K. Kusumoto, K. Kitaoka, S. Chikahisa, K. Rokutan, Y. Morita // Brain Res. Bull. 2006. Vol. 69. N. 4. P. 388-392.

242. Walker M.P. Cognitive consequences of sleep and sleep loss // Sleep Med. 2008. Vol. 9. N. l.P. 29-34.

243. Walsh D., Grantham J., Zhu X.O., Wei Lin J., van Oosterum M., Taylor R., Edwards M. The role of Heat shock proteins in mammalian differentiation and development // Environ. Med. 1999. Vol. 43. N. 2. P. 79-87.

244. Wehr T.A. A brain-warming function for REM sleep // Neurosci. Biobehav. Rev. 1992. Vol. 16. N. 3. P. 379-397.

245. Weinhouse G.L., Schwab R.J. Sleep in the critically ill patient // Sleep. 2006. Vol. 29. N. 5. P. 707-716.

246. Wulff K., Porcheret K., Cussans E., Foster R.G. Sleep and circadian rhythm disturbances: multiple genes and multiple phenotypes // Curr. Opin. Genet. Dev. 2009. Vol. 19. N. 3. P. 237-246.

247. Xi X., Toth L.A. Lipopolysaccharide effects on neuronal activity in rat basal forebrain and hypothalamus during sleep and waking // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2000. Vol. 278. N. 3. P. 620-627.

248. Yekimova I.V., Pastukhov Iu.F. Brain, body and muscle temperatures, peripheral vasomotion and contractile muscle activity in pigeons during fasting and LPS-induced fever // Recent advances in thermal biology. Minsk. 1999. P. 132-137.

249. Yo Q., Kent C.R., Tytell M. Retinal uptake of intravitreally injected Hsc/Hsp70 and its effect on susceptibility to light damage // Mol. Vis. 2001. Vol. 7. P. 48-56.

250. Zaric J., M. Lusic, A. Burkovic, V. Glisin and Z. Popovic Hsp70 protein is membrane bound in red blood cells of human hereditary haemolytic anaemias // Comparative Haematology International. Vol. 8. N 4. 1998.

251. Zhang Y.H., Takahashi K., Jiang G.Z. In vivo production of heat shock protein in mouse peritoneal macrophages by administration of lipopolysaccharide // Infect. Immun. 1994. Vol. 62. N. 10. P. 4140-4144.

Информация о работе

Лапшина, Ксения Валерьевна
кандидата биологических наук
Санкт-Петербург, 2011
ВАК 03.03.01

Диссертация

Защитные эффекты белка теплового шока 70 кДа при депривации сна и эндотоксемии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы