Закономерности и механизм функционирования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса и разработка метода определения оптимального времени осеменения

Баковецкая, Ольга Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Закономерности и механизм функционирования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса и разработка метода определения оптимального времени осеменения
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Закономерности и механизм функционирования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса и разработка метода определения оптимального времени осеменения"

На правах рукописи

БАКОВЕЦКАЯ Ольга Викторовна

Закономерности и механизм функционирования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса и разработка метода определения оптимального времени осеменения

03.00.13 - физиология АВТОРЕФЕРАТ

Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук

Рязань-2006

Работа выполнена в ФГУО ВПО «Рязанская государственная сельскохозяйственная академия им. П.А. Костычева»

Научный консультант: доктор с.-х. наук, профессор

Тупиков Геннадий Михайлович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Чомаев Азрет Мудалифович

Защита состоится 14 июня 2006 года в 10.00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.057.01 в Рязанской государственной сельскохозяйственной академии.

Адрес академии: 390044 г. Рязань, ул. Костычева, д.1 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан « /Л » мая 2006г.

Ученый секретарь

доктор ветеринарных наук, профессор Володнн Владимир Алексеевич

доктор биологических наук, профессор Ко$лов Сергей Анатольевич

Ведущее учреждение: ГНУ ВНИИ племенного дела

Н.И. Морозова

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ 1.1. Актуальность работы. Эффективное воспроизводство - важнейшая составляющая рентабельного животноводства. Статистика показывает, что экономический ущерб от бесплодия и яловости превышает потери, наносимые животноводству всеми заразными и незаразными болезнями. Яловость коров и прохолост кобыл зачастую достигает 30-40%.

На показатели воспроизводства влияет большой комплекс внешних и внутренних факторов (Шипплов B.C.. 1977; Тупиков Г.М., Калашников В.В., Захаров В.А.. 1996; Володин В.А., 2001;Чомаев A.M., 2001, 2004; Джапаридзе Т.Г.. 2004). Воспроизводство - одна из наиболее сложных и наукоемких отраслей, биотехника которой базируется на глубоком знании репродуктивной функции. Несмотря на давние традиции и ценное научное наследие изучения физиологии размножения животных, заложенные выдающимися учеными, ряд вопросов по-прежнему остается актуальными и значимыми. Поэтому становится очевидной потребность в дополнении базовых теорий, их уточнение и подтверждение с позиций современных знаний и методов.

Учение о половом цикле сельскохозяйственных животных складывалось поэтапно. Хорошо известны специфические поведенческие реакции самок в период осеменения, особенности проявления половой охоты, продолжительность течки и время наступления овуляции, преобразования в половых органах, видовые особенности (Хип У., 1908; Студен но в А.П.,1953; Милованов В.К.. 1972; Животков Х.И., 1952; Хантер Р.Х.Ф.. 1982; Солсбери Г.У., Ван Демарк 11. J1., 1969). Согласно современным представлениям, основу нормального полового цикла составляют периодически повторяющиеся циклические изменения в функциональной деятельности системы гипогаламус-гипофиз-яичники, связанные с ростом и созреванием фолликулов, овуляцией, формированием желтого тела. Составляющим компонентом изменений являются также циклические преобразования в половом тракте, многообразные физиологические сдвиги в функционировании других систем организма и поведении животных. Мы использовали именно этот подход в наших исследованиях, в методике, обосновании полученных результатов, а также как основу при разработке нового метода определения функционального состояния половой системы животных и оптимального времени осеменения.

руюшее влияние иммунной системы в процессах гаметогенеза. капаиита-ю.1111 спермиев, оплодотворении, эмбриогенезе. Этот огромный вклад и сегодня остается базисом данного направления в физиологии. Однако до конца не выяснено влияние Т- и В-лимфоцитарных систем, неспецифических факторов системного и местного иммунитета в обеспечении регуляции подготовки организма и половой системы самки к осеменению и оплодотворению.

Гормональное влияние - как основа регуляции общепризнанно. Благодаря исследованиям В.П. 1Ельчанинова (1972), Ю.Д. Клинского (1977), М.И. Прокофьева (1979) сегодня мы обладаем схемой эндокринных регуля-торных процессов в организме животных, обеспечивающей реализацию половой функции. Однако пока остается мало известно о влиянии гормонов, особенно овзрпальных, на биохимические, иммунные, физико-химические процессы в организме и половой системе коров и кобыл, свойства их половых секретов. В результате не достаточно изучены механизмы функциональных преобразований в половой системе, а также ограничена возможность разработки прогностических тестов для опосредованного изучения уровня гормонов по доступным показателям.

Половые секреты обладают большим информативным потенциалом. Органолептнческие признаки впервые послужили основанием для использования вагинальной слизи в диагностике половой охоты и беременности животных, что с успехом было принято специалистами на производстве. В настоящее время появилась возможность изучения сложных показателен: электролитного состава слизи, ферментативной активности, факторов естественной резистентности, физических свойств современными методами. Такой широкий спектр исследований способствует пониманию сущности физиологических преобразований в половой системе и открывает перспективы разработки диагностических тестов и приборов.

Во всем мире существует проблема определения оптимального времени осеменения сельскохозяйственных животных. За давнюю историю этого вопроса предложено немало разных методов: рефлексологический метод с использованием самцов-пробников, ректальная пальпация и УЗИ -диагностика фолликулов, гормональное обследование, инструментальные методы, визуальный контроль. Однако в силу низкой объективности или больших материальных затрат большинство методов не имеют применения. Такое положение оставляет спецпаписта один на один с вопросом «Когда осеменять?». В результате наиболее распространенный визуальный контроль за поведением животных и внешних признаков половых выделений имеет низкую эффективность, всего 60-70%.

Обозначенные научные и практические проблемы, современный ком-

плексныП подход к исследованиям определяют актуальность нашей работы. 1.2. Цель работы: изучить функциональные особенности репродуктивной системы коров н кобыл по показателям крови и вагинальной слизи в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике, определить закономерности и механизм физиологических процессов, разработать прибор и научно обосновать доступный на производстве метод определения оптимального времени осеменения.

В связи с целью работы были поставлены задачи:

• Изучить особенности функционирования организма и половой системы коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула по комплексу показателей

• Выяснить механизм влияния иммунных специфических (Т- и В-лимфоцитарных систем крови, иммуноглобулинов) и неспецифических (функциональная активность нейтрофилов, бактерицидная активность, лизоцим) факторов на функциональное состояние половой системы, в создании оптимальных условий для оплодотворения

• Выяснить особенности обменных процессов в период эструса по биохимическим показателям крови н слизи (общий белок, его фракции, активность ферментов)

• Изучить физиологическую роль электролитов (натрия, калия, хлора, кальция) крови и вагинальной слизи в обеспечении оптимальных условий в половой системе для осеменения и оплодотворения

• Провести анализ изучаемых показателей в связи с уровнем основных ова-риальных гормонов — эстрадиола-17(3 и прогестерона в сыворотке крови в период эсгруса по стадиям развития фолликула

• Изучить влияние функционального состояния половой системы коров и кобыл в период эструса fia физико-химические свойства вагинальной слизи по показателям кристаллизации и электропроводности, а также органо-лептические признаки

• Разработать новый прибор и методику для определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл, дать научное обоснование и определить возможности использования, провести производственную проверку

1.3 Научная новизна работы

• Впервые проведены комплексные исследования показателей крови и вагинальной слизи по изучению функциональных особенностей репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула. Установлены новые закономерности и предсгаален механизм физиологических преобразований при подголовке к осеменению и

о п л од отво рению.

• [^первые определена взаимосвязь показателей Т- и В- лимфоцптарных систем крови коров и кобыл в период эструса с функциональным состоянием половой системы. Так,'предовуляторное повышение, а затем частичное их торможение и перераспределение к овуляции обусловливает развитие иммунной толерантности как важного механизма, обеспечивающего осеменение и оплодотворение.

• Установлены новые закономерности проявления функциональной активности нейтрофилов крови коров и кобыл по НСТ-тесту в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула.

• Впервые определены закономерности формирования местной естественной резистентности в половой системе коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула и определены механизмы ее влияния в создании оптимальных условий для осеменения и оплодотворения.

• Впервые установлена физиологическая роль ферментов вагинальной слизи коров и кобыл, как показателей, характеризующих течение цитохимических процессов в половой системе. Повышение активности а-амилазы. щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы в вагинальной слизи указывает на интенсивный углеводный обмен, что связано с активным функциональным состоянием репродуктивной системы в период эструса.

• Выявлена физиологическая роль электролитов в создании оптимальных условии для оплодотворения. Впервые установлено соотношение электролитов в слизи, которое определяет создание оптимальных физико-химических и осмотических свойств вагинальной слизи, проницаемости клеточных мембран в плане подготовительных процессов к осеменению и оплодотворению.

• Впервые установлена связь кристаллизации вагинальной слизи кобыл и коров с уровнем эстрадиола-17р в период эструса по стадиям развития фолликула в яичнике, разработаны критерии оценки кристаллизации мазков для определения оптимального времени осеменения.

• Разработан новый прибор «Репротест» (патент № 2241375) для определения оптимального времени осеменения, основанный на проводимости вагинальной слизи в неоднородном электрическом поле. Показатели электропроводности у коров и кобыл закономерно меняются в связи со степенью зрелости фолликула.

1.4. Практическая значимость и реализация результатов

В работе дано современное научное представление о функциональных особенностях репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса, в связи с развитием фолликула в яичнике. Доказано, что по вагинальной слизи -(кристаллизации, электропроводности, органолептическим признакам), можно определить функциональное состояние половой системы, степень зрелости фолликула и время осеменения. На этом основании разработан прибор, методика и алгоритм действий по определению времени осеменения коров и кобыл.

Разработан принципиально новый прибор «Репротест» (патент на изобретение способа для определения периода овуляции и устройство для его реализации МПК 7 А 61 В5/05 10/10 per. номер заявки 2003109461, патент № 2241375 от 13.12.2004, Бюллетень № 34 2004г.). С помощью прибора по электропроводности вагинальной слизи можно быстро и точно определять время осеменения коров или случки кобыл, тем самым повысить оп-лодотворяемость животных.

Для специалистов по воспроизводству разработаны «Рекомендации по определению оптимального времени осеменения коров и кобыл» (Баковец-кая О.В., Рязань, 2006), утверждены Областным управлением сельского хозяйства и продовольствия Рязанской области и ОАО «Рязанское» по племенной работе.

Научные положения диссертационной работы и практические предложения нашли отражение в монографии «Концепция функционирования репродуктивной системы коров в период эструса и биотехнологический контроль воспроизводства».- Рязань, 2005.

1.5.Апробация работы. Материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на Всероссийских координационных совещаниях во ВНИИ коневодства, (Дивово, 1998-2003); Всероссийской конференции молодых ученых «Молодые ученые — сельскому хозяйству России» (ТСХА, Москва, 2004); Международной научно-практической конференции молодых ученых «Вклад молодых ученых в развитие АПК России» (Рязань, 2004); Международной научно-практической конференции «Роль и значение метода искусственного осеменения сельскохозяйственных животных в прогрессе животноводства XX и XXI веков» (ВИЖ, Дубровицы, 2004); Международной научно-практической конференции «Биотехнология воспроизведения животных» (Харьков.2005); III между народной научно-практической конференции «Современные технологические и селекционные аспекты развития животноводства России» (ВИЖ. Дубровицы, 2005); Международном форуме по проблемам науки, техники и образования «III Тысячелетие - Новый мир» (Москва, 2005); научных конференциях профессорско-

преподавательского состава Рязанской государственной сельскохозяйственной академии (Рязань, 1997-2005).

1.6. Публикашш. Материалы диссертации опубликованы в 33 научных работах, в том числе в статьях, 1 патенте на изобретение, научно-практических рекомендациях и отражены в 4 отчетах по хоздоговорной работе, объемом 157 листов компьютерного текста.

1.7. Объем н структура работы. Диссертация изложена на 286 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы, приложений. Список литературы включает 426 источников, в том числе 196 зарубежных авторов. Материал иллюстрирован 32 таблицами и 41 рисунком.

2. МАТЕРИАЛ II МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИИ

Исследования проводили в 3 этапа: 1- физиологические исследования крови п вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула, 2- разработка прибора «Репротест» и методики определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл, 3-производственная проверка прибора и методики в хозяйствах Рязанской области (рис. 1).

Объектами исследований были коровы и кобылы, так как эти животные моноплодные с длительным периодом беременности, поэтому трудности с воспроизводством стоят в этих отраслях особенно остро. Кроме того, эти животные с разным типом осеменения, что позволило наиболее полно выявить механизмы и видовые особенности функционирования репродуктивной системы.

1 этап. Физиологические исследования проводили на протяжении 19962005 г.г. В опыте использовали кобыл опытной конюшни ВНИИ коневодства Старожиловского конного завода. Кобылы были русской верховой и тракененской пород. Физиологические исследования на коровах проводили в племзаводе «Авангард». Коровы черно-пестрой породы подобраны по принципу аналогов с учетом породности, продуктивности (средний удой за лактацию 6000-6500 кг), возраста (3-5 лактации) и живой массы (620-650 кг). В опытах использовали гинекологически здоровых животных. Уровень кормления лошадей и коров соответствовал нормам, разработанным ВНИИ коневодства и ВИЖа в соответствии с продуктивностью. Содержание отвечало зоогигиеническим требованиям.

Состояние охоты у кобыл определяли жеребцом-пробником ("ручным" методом). Степень зрелости фолликула - ректальной пальпацией с ультразвуковым контролем на ультрасонаре 8САО-92Ю.

СХЕМА ОПЫТА 1 этап. Физиологические исследования крови и вагиначьной слизи коров и кобыл

К О Р о в ы 1

•) С Г 1'У с

КОБЫ Л Ы 1

Э CT Р У с

ф-

КРОВЬ

коров и кобыл

ОбшиП бело Белковые фракции

а - амилаза

ф z ф ob

Половая охота

ВАГИНАЛЬНАЯ СЛИЗЬ

коров |< кобыл

Обший белок Белковые фракции

ЛД1 Фепменты ' ШФ

Ьнохнмпчсскне исследования

а - амилаза

К+

(а П

-Электролиты

Гемограмма

срмеиты —ЛДГ

ЧИ1Ф к+

Т - и В - лимфоциты 11С Г - leer

БАСК-

Лизоним

Эстрадпол -17

Прогестерон

Na" 2-t

(Т

' Г^ 2+

Ч а

Иммунологические исслелопаннн

Гормональные мсглелоняннн

Физнко-хи мнческне показатели

Opi аио.зситичсские пока taicjui

Электролиты ;

^ Лизоцим ^ БАС

Эегралиол-17ß

— Электропроводность

— Кристаллизация Количество Цвет

Растяжимость

Корреляционный анали)

II этап. Разработка нового прибора «Репротест» и методики (алгоритма) на его основе

для определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл.

III этап. Производственная проверка методики на основе прибора «Репротест» для определения отималыюго времени осеменения.

Пробы вагинальной слизи и сыворотки крови у кобыл отбирали в следующие стадии (на основании изменений, происходящих в яичниках):

- начальный период охоты (фолликул на 1-й и 2-й стадиях развития. ФЧ>2);

- предовуляторный период (фЗ-4);

- период овуляции (OB).

У коров состояние половой охоты определяли визуальным контролем по степени выраженности «рефлекса неподвижности». Стадии развития фолликула в яичнике устанавливали ректальной пальпацией. Пробы слизи и крови у коров в период эструса отбирали по тем же стадиям.

Искусственное осеменение коров проводили мано-цервикальным способом. На кобылах применяли «ручную случку» с жеребцом.

Содержание эстрадиола-17ß и прогестерона в сыворотке крови коров и кобыл, а также эстрадиола-17^ в вагинальной слизи кобыл изучали методами РИА и ИФА. Метод ИФА на автоматизированном иммунохп-мическом анализаторе "АМХ" (модуль системы версии 6,0 и модуль "Репродуктивная эндокринология''), с использованием реактивов фирмы "Эббот лабораториз".

Т- и В- лимфоциты определяли методами Е-РОК и ЕАС-РОК («Иммунологические методы исследования в животноводстве». Метод, рекомендации, 1987). Определение числа Т-лимфоцитов общих у животных проводили методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК - эритроциты розеткообразующие). Субпопуляции Т-лимфоцитов с помощью нагрузочного теста с теофиллином. В-лимфоциты определяли методом ЕАС-РОК - розеткообразование с эритроцитами барана в системе ЕАС.

Определение общей окислительно-восстановительной активности нентрофилов в тесте восстановления нитросинего тетразолня (НСТ-тест). Реакцию спонтанного НСТ-теста проводили на основе готового реактива нитро-синего тетразолня (фирмы «Лахема» - Чехия). Стимулированный НСТ-тест определяли с взвесью зимозана. Иммуноглобулины в крови коров анализировали рефрактометрическим методом (Методические указания по лечению и профилактике гипогаммаглобулинемии, 1985). Концентрацию лизоцима и бактерицидную активность определяли по методу О.В. Бухарина (1972).

Активность а-амилазы, щелочной фосфатазы и лактатдегидрогена-зы (ЛДГ) изучали кинетическим фотометрическим методом с помощью наборов реактивов фирмы «Днаком» (Россия). Использовали фотометр Hospitex diagnostics Clin Check Plus LIHD 102.

Калий и натрий в сыворотке крови и вагинальной слизи определяли методом пламенной фотометрии (Меньшиков В.В., 1987). Хлор в сыворотке крови и вагинальной слизи у кобыл - колориметрическим методом без депротеинизации с использованием реактивов фирмы «Ольвекс Ди-агностикум» (Санкт-Петербург). Хлор у коров определяли меркуримет-рическим методом с индикатором дифенилкарбозоном. Кальций в крови и вагинальной слизи коров и кобыл - унифицированным колориметрическим методом (Колб В.Г., Камышников B.C., 1982, Меньшиков В.В., 1987).

Содержание общего белка в сыворотке крови и в вагинальной слизи определяли биуретовым методом. Белковые фракции (альбумины, а-, Р- „у- глобулины) - нефелометрическим методом (Антонов Б.И.,1991).

Клетки крови анализировали общепринятыми методами, лейко-грамму определяли в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Гемоглобин определяли унифицированным гемоглобинцианидным методом с использованием гемоглобинометра Минигем-540, реактивами фирмы «Ренам».

Электрическую проводимость вагинальной слизи в неоднородном электрическом поле определяли на приборе «Репротест».

Кристаллизацию вагинальной слизи у коров и кобыл оценивали при помощи светового микроскопа. Использовали только биоматериал без применения базисного кристаплообразующего вещества.

Пенетрационный тест (слизь+сперма). На предметное стекло наносили каплю вагинальной слизи и каплю размороженной спермы быка. Смешивали стеклянной палочкой и сразу, а затем через 3 минуты определяли жизнеспособность и подвижность спермиев в среде. Результат оценивали в баллах. При взятии проб вагинальной слизи фиксировали ее количество. Растяжимость вагинальной слизи определяли по длине нити, которая тянется между пальцев, в сантиметрах. Проводили учет реакции среды вагинальной слизи (рН) при помощи экспресс-метода индикатором бромтимоловым синим.

2 этап. Разработка прибора «Репротест» и методики определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл

Па основе многолетних физиологических исследований по биохимическим, физико-химическим свойствам вагинальной слизи животных в соавторстве разработан прибор «Репротест» (рис.2).

Принцип работы прибора. Прибор основан на проводимости вагинальной слизи в неоднородном электрическом поле, что связано с изменением тонкой структуры белковых молекул. Данные «Репротеста» соответствуют степени зрелости фолликула в яичнике. Цифровое значе-

ние на мониторе считали единицами (ед.). Небольшое количество слизи наносили на датчик и снимали показания. Все исследование занимает несколько секунд. 3 этап. Производственная проверка прибора н методики п хозяйствах Рязанской области

В Старожиловском конном заводе, в ООО «Авангард», учебном хозяйстве «Стенькино», ОПХ «Подвязье», СПК «Новоселки» была проведена

производственная проверка по

эффективности разработанной нами методики определения оптимального времени осеменения коров и кобыл.

Она заключалась в том, что в обычных производственных условиях в хозяйстве техник искусственного осеменения коров или специалист по воспроизводству в конном заводе определял время осеменения но нашим рекомендациям, действовал согласно алгоритму и проводил осеменение коров и случку кобыл с жеребцом в пик показателей прибора.

У кобыл половую охоту выявляли на 5-9 день после выжеребки с помощью «пробы» в манеже утром и вечером, с последующим установлением степени зрелости фолликула ректальной пальпацией и времени покрытия прибором «Репротест».

Статистическую обработку полученных данных проводили на персональном компьютере по программе "Биометрическая обработка", основанной на методах, изложенных Е.К. Меркурьевой (1983).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ 3.1. Содержание опариальпых гормонов у коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике Эстрадиол-1713 в сыворотке крови коров и кобыл в начале эструса был относительно низким 7,59 иг/мл у кобыл и 4,54 пг/мл- у коров. Затем по мере роста и созревания фолликула до фЗ-4 возрастал в несколько раз и достигал у кобыл 62.3 пг/мл, у коров 21.42 пг/мл (рис.3). Такой повышенный эстрогенный фон определяет специфическое поведение самок в этот период- «половая охота», «рефлекс неподвижности», что указывает на готовность к спариванию. Овуляция проходила при низких значениях эстрадиола-17В.

Ф1 Ф2 ФЗ-4 ОВ

Период эструса (стадии развития фолликула)

• Кровь кобыл "'ОКровь коров

Рис.З . Динамика содержания жтрадиола-17Ц в крови коров и кобыл в период эструси в связи со степенью зрелости фолликула

Корреляционный анализ между эстрадиолом— 17Р и общим белком, электролитами, активностью ферментов в слизи коров и кобыл показал высокую связь (г= + 0,9; 0,7; 0,6 соответственно). На этом основании можно считать эстрадиол-17р регулятором преобразований в период эструса.

Важно отметить, что по сравнению с коровами уровень эстрадиола-17В у кобыл в сыворотке крови почти в 3 раза выше. Это можно объяснить продолжительностью периода эструса и половой охоты. У кобыл половая охота продолжается 2-12 суток (в среднем 5-6) отсюда и необходимость существенной гормональной поддержки в организме.

Концентрация прогестерона в сыворотке крови была низкой на протяжении всего эструса, а к овуляции снижалась до 0,Инг/мл у кобыл, 0,31нг/мл - у коров. Это не только не противоречит сущности механизма, но и указывает на полноценность полового цикла.

3.2.Иммунные показатели крови н естественная резистентность вагнналыши слизи коров и кобыл в период эструса 3.2.1. Т- и В-лнмфоиптарные системы крови кобыл н коров в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула Иммунная система, наряду с нервной и гормональной, участвует в регуляции всех жизненных функций организма, включая воспроизведение. Для объяснения особенностей протекания эструса, подготовительных механизмов и процесса оплодотворения у коров и кобыл мы изучили комплекс показателей специфического иммунитета крови в период

эструса в связи с развитием фолликула в яичнике и овуляцией. В результате проведенных исследований нами установлено, что в содержании иммунокомпетентных клеток крови коров и кобыл существует определенная динамика. Т-хелперы и Т-супрессоры - это основные субпопуляции Т-лимфоцитов, они имеют принципиальное значение при характеристике иммунного статуса, так как являются главными регуляторами иммунной системы.

Так, в крови кобыл Т-общие от начала охоты достоверно возрастали и при Ф^"4 достигали 42,26±1,17%, Т-хелперы повышались до 29,33±1,04-28,67±0,95% (табл.1). Важно отметить, что Т-супрессоры в предовуляторный период повышались резко, более чем в 2 раза-до 13,58±0,82%.

Таблица 1

Иммунологические показатели крови кобыл в период эструса (п= 38)

Иммунологические показатели Концентрации иммунологических показателей но стадиям развития фолликула в период ктруса, %

Ф1 Ф1 Ф^ ОН

Т-общие 29.14 ±0,55 36, П±0,9* 42,26±1,17* 32,18±0,95*

Т-хелперы 23,43±1.08 29.33±1,04* 28,67±0,95 23,39±1,01*

Т-еунрессоры 6.28±0.64 6.7810,41 l3.5Si0.82* 10,1±0,72*

В-лимфоцпты 32,14±2,88 33,78±1,74 36,55±2,38 31,87±3,05

* - Р < 0.05-0,00 I, достоверная рашпца между покупателями в начале зет руса и предонуля-ториом периоде.

У коров достоверно возрастала концентрация Т-обших до 55,62±0,86%, Т-хелперов до 42,01:0,92%. Т-супрессоры, в свою очередь, поднявшись в начале эструса (ф2), оставались при фЗ-4 пока на прежнем уровне - 12,95±0,60% (табл.2).

Таблица 2

Иммунологические показатели крови коров в период эструса (п= 71)

Иммунологические показатели Концентрация иммунологических показателен но стадиям развития фолликула п период эструса, %

Ф1 Ф2 Фн О В

Г-обшпе 48,7±1,10 50.94 ± 1,07 55,62 ±0,86* 46,52 ±1,16*

Т-хелперы 38.85 ±0,77 39,67 ±1,01 42,0 ±0,92 30,05 ±0,98*

Т-супресеоры 9,21 ±0,62 12,44±0,64* 12,95±0,60 17,79±0,74*

И- лимфоциты 51,21±1,41 48,5±1,11 48,14± 1,38 49,72±1,01

Такие факты указывают на мобилизацию специфических факторов иммунитета в крови в предовуляторныи период. Связав это с оптимальным временем для осеменения можно утверждать о необходимости усиления защиты от любых чужеродных агентов в программе поддержания генетического гомеостаза в организме, а также создания оптимальных условии для капацитации спермиев в половых путях самки.

К овуляции и у коров и у кобыл происходит перераспределение фракции Т-лимфоцитов, при этом отмечено снижение Т-хелперов, отвечающих за активацию В-лимфоцитов и выработку антител. Это связано с повышением синтеза Т-супрессоров, препятствующих активации Т-хелперов и развитием супрессорной толерантности. Действие Т-лимфоцитов - супрессоров позволяет ограничить силу иммунного ответа биологической потребностью, достаточной для восстановления гомеостаза, предотвратить избыточную продукцию иммуноглобулинов.

В-лпмфоциты были относительно стабильны - у коров 48,14%-51,21%, у кобыл-31,87-36,55%. Но вместе с тем, снижение к овуляции концентрации глобулинов в сыворотке крови коров до 42,60±1,44 г/л, у кобыл до 35,86±1,42г/л и иммуноглобулинов у коров до 40,49±0,8г/л, указывает на подавление активности гуморального звена иммунитета.

Поскольку спермин быка и жеребца в большей степени гистоне-совместимы с организмом самок своего вида, а зигота и эмбрион в пре-и постимплатационных стадиях несут значительное количество трансплантационных антигенов, то момент оплодотворения должен сопровождаться своеобразным иммунологическим конфликтом. С этих позиций можно объяснить частичное торможение клеточных и гуморальных иммунных факторов в период овуляции — как один из важнейших физиологических механизмов, обусловливающих нормальное оплодотворение и в последствие имплантацию генетически чужеродной зиготы.

При нарушении иммунного механизма в организме самки образуется большое количество спермоантител, что губительно для спермиев и оплодотворение становится не возможным. Такое состояние может являться результатом многократных перекрытий, бесконтрольного несвоевременного осеменения, что нередко встречается в хозяйствах. В результате это приводит к сенсибилизации спермиев в половых путях самки. Такая непреднамеренная иммунизация является основной причиной иммунного бесплодия. Точное определение оптимального времени осеменения поможет решить данную проблему.

Фагоцитоз занимает особое место, играет важную роль, являясь первичным барьером на пути любых микроорганизмов. В конечном итоге после нейтрализации антигена антителом разрушение происходит

только после включения неспецифических механизмов фагоцитоза. Мы провели постановку НСТ-теста, основанную на выявлении у нейтрофи-лов способности к метаболическому «взрыву», что связано с осуществлением фагоцитоза. HCT - тест - показатель, характеризующий клеточный фактор неспецифического иммунитета. Установлено, что у коров и кобыл показатели НСТ-теста закономерно менялись на протяжении эс-труса в связи с развитием фолликула в яичнике. У кобыл в предовуля-торный период повышалась функциональная активность нейтрофилов крови, так НСТ-тест спонтанный составлял 13,5±1,86%. В период овуляции показатель НСТ-теста спонтанного достоверно снижался. У коров значения НСТ-теста стимулированного, наоборот, подвергались более выраженной динамике, возрастая в предовуляторный период до 47,9±1,63%. В свою очередь уровень НСТ-теста спонтанного у коров был практически стабилен. Ко времени овуляции у коров функциональная активность нейтрофилов также снижалась.

Концентрация лизоцима и бактерицидная активность сыворотки крови коров и кобыл была повышенной на всем протяжении эструса, но изменение по стадиям развития фолликула были не значительными. Достоверное увеличение этих показателей у коров было выявлено только к предовуляторному периоду- лизоцима - до 12,08±0,66 мкг/мл, бактерицидной активности сыворотки - до 70,65±1,03%. Содержание лизоцима в сыворотке крови кобыл достоверно поднималось при приближении к овуляции до 16,30±0,38 мкг/мл. У кобыл бактерицидная активность сыворотки крови постепенно повышалась в период эструса по стадиям развития фолликула и к овуляции составляла 59,14±0,36%.

Таким образом, неспеиифические показатели иммунитета крови коров и кобыл, на наш взгляд, менее связаны с воспроизводительными процессами, и в большей степени их роль направлена на создание общей противомикробной резистентности, особенно в период эструса, половой охоты и при оплодотворении, что также биологически целесообразно.

Естественная резистентность слизистых и их выделений крайне важна в создании местного иммунитета. Важным гуморальным фактором неспецифического звена местной защиты половой системы является лизоцим. Это понятно, так как он обладает опсонирующими свойствами, усиливает захватывающую активность фагоцитов и принимает участие во внутриклеточном переваривании фагоцитированных бактерий.

Установлено, что в вагинальной слизи коров и кобыл динамика концентрации лизоцима более четкая, рельефная, по сравнению с сывороткой крови(рис. 4). По мере развития фолликула содержание лизоцима в слизи повышалось и достигало максимальных значений в предовуля-

торный период при фЗ-4 - у коров- 22,45 мкг/мл, у кобыл-15.8мкг/мл. Существенное повышение лизоцима в вагинальной слизи животных может быть вызвано стимулирующим действием эстрогенов.

Ф1 Ф2 . ФЗ-4 ОВ

Период эструса (стадии развития

Лиэоцим ,мкг/мл ' ■ "Бактерицидная активность.%

Рис. 4. Показатели естественной резистентности вагинальной слизи кобьи

в период эструса

На это указывают высокие коэффициенты корреляции между уровнем эстрадиола-17р сыворотки крови и лизоцима слизи г = 0,72 — 0,85. Бактерицидная активность вагинальной слизи коров и кобыл была самой высокой также в нредовуляторный период - у коров - 15,88% , у кобыл-26,5%. Это указывает на повышение защитных свойств слизи в стадию зрелого фолликула, что связано с напряженностью местного иммунитета в половой системе. Такие условия важны для капацитации спермиев, их иммуноподготовки и, возможно, селекции. Также это может служить аргументом в пользу осеменения именно в предовуляторный период, когда мощная местная защита не позволит патогенной микрофлоре попасть в матку. К овуляции у коров и кобыл защитные свойства слизи заметно слабеют, что проявляется в снижении концентрация лизоцима и бактерицидной активности. Вероятно, это также биологически целесообразно для предотвращения преждевременной избыточной гибели спермиев в половых путях самки.

3.3. Биохимические показатели крови н вагинальной слизи коров и

кобыл в период эструса 3.3.1. Биохимические показатели крови и вагинальной слизи коров и кобыл » период эструса в связи со степенью зрелости фолликула

Установлено, что у кобыл уровень белка в сыворотке крови был относительно стабилен и находился на уровне 65,83± 1,62-72,97± 1,61 г/л. Постоянство концентрации общего белка в сыворотке крови можно объяснить видовой особенностью кобыл, отличающей их от коров. У коров концентрация общего белка в сыворотке крови существенно возрастала в предовуляторный период до 83,48 ±1,19%, что можно связать с активизацией обмена веществ в период осеменения. В период эструса уровень альбуминов в сыворотке крови менялся незначительно и находился у коров на уровне - 30,73-38,81 г/л, у кобыл- 32,65-35,02г/л. Наиболее показательна динамика содержания глобулинов. Постепенно возрастая, в предовуляторный период при хорошо развитом флюктуирующем фолликуле был отмечен пик у коров - 52,54±2,48 г/л, у кобыл -39,61±1,29г/л. Повышенные данные глобулинов в крови коров и кобыл связаны с другими факторами иммунитета, что указывает на напряженность иммунного статуса у животных в предовуляторный период.

Концентрация гемоглобина была высокой в период эструса, более того, она возрастала по мере роста и развития фолликула в яичнике и в предовуляторный период достигала у коров - 109,91 ±2,52г/л, у кобыл-141,78±3,98 г/л. Все это свидетельствует об усилении интенсивности окислительно-восстановительных процессов в организме коров и кобыл в период, оптимальный для осеменения.

Таким образом, нами установлен высокий уровень обмена веществ в организме коров и кобыл, что указывает на функционально активное состояние организма в период эструса. Повышение интенсивности метаболизма способствует проявлению всего большого комплекса процессов (синтез иммунных факторов, транспорт гормонов, формирование пластического и энергетического ресурса) в подготовке к осеменению и оплодотворению. На этом основании выявленные нами биохимические показатели крови служили фоном нормального физиологического и клинического состояния опытных животных.

Определенный научный интерес представляет содержание общего белка в вагинальной слизи коров и кобыл. Играя важную роль в жизнедеятельности организма, белки постоянно метаболизируются, а, следовательно, их количественный и качественный состав обладает информацией о направленности обменных процессов.

Вагинальная слизь кобыл имеет определенное количество общего белка, причем оно не постоянно, а подвержено динамическим изменениям. Так, резкий подъем концентрации общего белка в предовуляторный период до 10,20±0,32 г/л можно связать с усилением биосинтетических процессов в репродуктивной системе на клеточном уровне. У коров в вагинальной слизи содержится гораздо меньше белка, чем у кобыл, но повышенное его содержание до 1,88±0,39г/л было выявлено так же в предовуляторный период.

Белок - это преимущественно муцин, который определяет структурно-механические свойства внутренней среды репродуктивного тракта. Можно полагать, что в период, оптимальный для осеменения, слизь представляет не аморфную массу (пробку), а тяжи, при этом формируются своеобразные «коридоры». По ним спермин могут без механических препятствий передвигаться в достаточно плотной среде полового тракта.

Установлено, что повышение содержания общего белка, особенно значительное в слизи, в предовуляторный период вызвано стимулирующим действием эстрадиола-17Р и может быть важным механизмом местных подготовительных процессов к оплодотворению. На этом основана продукция местных и системных иммунных факторов, а также депонирование важнейших органических и неорганических веществ в половом тракте. Но вместе с тем, очевидно, что на показатели белка в вагинальной слизи, как одной из биологических жидкостей, влияет уровень обменных процессов в организме в целом.

3.3.2. Содержание электролитов в сыворотке крови и вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи с развитием фолликула

При изучении функционирования биологических жидкостей важен вопрос о содержании в них электролитов. Основные электролиты в организме млекопитающих - это калий, натрий, хлор и кальций.

В сыворотке крови коров и кобыл уровень калия, натрия, хлора и кальция был стабильным и не менялся по стадиям развития фолликула, что можно считать физиологической нормой. В первую очередь это связано с их участием в важнейших клеточных процессах, что определяет жизнеспособность организма. Совсем другая картина выявлена в вагинальной слизи.

ТаблицаЗ.

Содержание электролитов в вагинальной слизи корон в период эструса (п= 58)

Электролиты вагинальной СЛ1Ш1 Содержание электролитов по стадиям развития фолликула, мм ол ь/л

ф' Ф2 О В

Натрий 132,1 ±26,3 103.19± 10.59 138,28±13.58* 118.2±7,64

Калий 9,54±0,84 10,67±0,75 7,82±Ц22* 9,52±0,46

Хлор 119,06± 10,29 123,6±3,87 131,3±2.91** 110,5±5,54

Кальций - 1,67±0,10 1,30±0,05* 2,99±0,29*

* - Р < 0.05-0,001, ** достоверная разница между показателями в начате эструса и предовуля-торном периоде.

Установлено, что по мере роста и созревания фолликула концентрация натрия и хлора в вагинальной слизи коров и кобыл достоверно возрастала и в предовуляторный период достигала самых высоких значений (табл. 3,4).

Таблица 4.

Содержание электролитов в вагинальной слизи кобыл в период эструса (п= 34)

Электролиты вагинальной слизи Содержание электролитов по стадиям развития фолликула, мм оль/л

Ф1 Ф2 Фм О В

Натрий 134,67±2,91 174,26±5,88* 234,98±7,24* 134,49±7,10*

Калий 12,79±0,73 16,39±0,78* 11,49±0.32* 9,25±1.57

Хлор 111,9±6,76 121.3±3,98 188.8U9.50* 107.54±3.41*

Кальций 2,39±0,25 1,23±0,15* 1,43±0.16 1,14±0.13

* - Р < 0,05-0,001

Натрий и хлор способствуют разрыхлению и набуханию клеток, делают более проницаемыми оболочки. Это отражается на внешних признаках слизи - она становиться к предовуляторному периоду более рыхлой с пустотами, заполненными воздухом. Такой признак - слизь с пузырьками воздуха, хорошо знаком специалистам как показатель времени осеменения. Вместе с белком ионы натрия и хлора формируют особую структуру слизи, проницаемой для спермиев.

Тенденция в динамике калия иная. Так, важно отметить, что в от-

личие от натрия и хлора концентрация калия в слизи сразу была высокой, у коров при ф1-ф2 10,67±0,75 ммоль/л, у кобыл - 16,39±0,78 ммоль/л, а в предовуляторный период снижалась и к овуляции оставалась низкой. Можно связать такое опережающее повышение калия в слизи с его биологическим значением. Калий может возбуждающе влиять на клетки-мишени репродуктивного тракта. Это очень важно при эс-трогенной стимуляции в эструс, но ее активное воздействие произойдет позже, в предовуляторный период. К этому времени клетки-мишени будут уже подготовлены и воспримут влияние высокой концентрации эст-радиола-17р быстро и эффективно.

Проведенный корреляционный анализ между электролитами и эст-радиолом-17р, показал высокую связь. Так, эстрадиол-17ß с калием у коров г=+0,821, у кобыл +0,777, с натрием - у коров г=+ 0,922, у кобыл +0,468, с хлором г=+ 0,787 и +0,830 соответственно. На этом основании регулятором динамики электролитов в предовуляторный период можно считать эстрадиол-17ß.

Уровень кальция в вагинальной слизи коров и кобыл был низким на протяжении эструса. Это можно объяснить тем, что кальций, являясь антагонистом калия, уплотняет, делает менее проницаемыми клеточные стенки, что нежелательно в период эструса при подготовке к оплодотворению. Кроме этого, кальций обладает вяжущим действием на жидкости и ограничивает благодаря этому транссудацию через стенки полового тракта. Следовательно, снижение его уровня в слизи является непременным условием нормальной течки в результате усиления секреции железистого эпителия шейки и самой матки, а также транссудации на уровне влагалища. Добавим, что кальций активен в кислой среде, которая в половом аппарате создается уже после оплодотворения, тем самым создается вязкая слизь, защитная пробка.

Таким образом, определенный баланс электролитов вагинальной слизи способствует созданию оптимальных условий осмотических и физико-химических условий в среде репродуктивного тракта для осеменения и оплодотворения.

3.3.3. Активность ферментов в сыворотке крови н вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула

Ферментативный анализ биологических жидкостей позволяет изучить метаболические процессы на элементарном клеточном уровне, понять механизмы сложных функциональных преобразований. Это определяет современный подход в познании физиологии репродуктивной системы. Нами впервые установлены показатели активности а-амилазы,

щелочной фосфатазы (ЩФ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике. Этот комплекс ферментов был выбран нами не случайно, не только по их локализации, но и биологическому значению в клетке, они участвуют в углеводном обмене, следовательно, несут информацию об энергетических процессах. Эти ферменты содержатся в секрете предстательной железы самцов, компоненте эякулята. Поэтому есть основание полагать об их важной роли для спермиев, что можно сопоставить с условиями для их капацитации и пенетрации в среде полового тракта самок.

Активность ферментов сыворотки крови, в отличие от слизи была стабильной и менялась не значительно. В вагинальной слизи кобыл и коров существенное повышение активности а-амплазы отмечено в пре-довуляторный период 25,01±1,54ед и 32,64±3,24ед соответственно (рис. 5,6). Повышение активности щелочной фосфатазы в слизи мы также наблюдали в период фЗ-4 у коров -290.37±34,65ед., у кобыл-227,46±18,57ед.

250 п 200 И

1 150 Н

100 -50 0

Ф1

11.08

1 г5101_

233,14

122,83

12.72

ОВ

Ф2 ФЗ-4

Период эструса (развитие фолликула) а-амилаза,ед. ■ щелочная фосфотаза.ед. 'лактатдегидрогеназа.ед

Рис.5. Динамика активности ферментов вагинальной слизи кобыл в период эструса

Есть основание полагать, что ЩФ и а-амилаза в слизи имеют свое происхождение из крови, однако в клетках репродуктивного тракта не исключена возможность их аккумулирования.

Повышение ферментативной активности слизи указывает на активное функциональное состояние половой системы, усиление интенсивности обменных процессов на клеточном уровне. В результате десквама-ции эпителия и увеличения проницаемости мембран в ответ на действие эстрогенов и простогландинов, ферменты в активированном состоянии поступают в слизь. Благоприятствует повышению их активности в слизи

щелочная рН среды до 7,8-8,2.

Высокая ферментативная активность и щелочная среда слизи положительно влияет на ацидофобные спермин, помогает им быстрее справиться с последствиями температурного шока при размораживании и активировать их дыхание, движение и жизнедеятельность в целом.

ЛДГ — гликолитический фермент, катализирующий обратимую реакцию восстановления ПВК в молочную кислоту, проявляя обратную тенденцию, активизировался в слизи в начале эструса и к овуляции. Обмен лактата и пирувата приводит к выделению энергии.

350

зоо

»■250

|гоо -

■8-150 -

gioo Н

1 50

Ф1

155,51

132,82

_17.57_

32,64 - .

299,19

192,27

23,85

Ф2

ОВ

ФЗ-4

Период эструса (развитие фолликула)

■а -амилаза,ед. —Я— щелочная фосфотаза.ед. * лактатдегидрогенаэа.ед

Рис.6. Динамика активности ферментов вагинальной слизи коров в период эструса

Усиление активности ЛДГ является показателем интенсивных энергетических процессов в клетках репродуктивного тракта в период эструса, связанных с усиленной пролиферации эпителия, активности железистых клеток, секретирующих много слизи, в результате десква-мании непрерывным процессом деления клеток.

3.4. Клетки крови коров и кобыл в период эструса Кровь играет важную многообразную роль, и ее показатели имеют большое значение для оценки функционального и клинического состояния организма. Показатели крови отличаются постоянством, то есть являются гомеостатическими. Однако сегодня гомеостаз понимают как динамическое постоянство показателей внутренней среды при условии стабильности протекания основных функций в организме. Это значит, что кровь реагирует на воздействия факторов внешней и внутренней среды, при этом ее показатели могут меняться, однако в определенном интервале.

Отметим, что в эструс, в предовуляторный период концентрация

эритроцитов в крови была у коров выше 5х10|2/л, а у кобыл - более 8 и даже 9х10,2/л. Это указывает на повышенный уровень метаболических процессов в период активного функционального состояния половой системы.

В крови коров в период эструса зафиксирован лейкоцитоз, что позволяет судить об активизации иммунных процессов. Так, концентрация лейкоцитов у коров в начале эструса была на уровне 6,67±0,29х109/л, нейтрофилы- 31,25+0,25%, лимфоциты - 58,12±1,93%. В предовулятор-ный период содержание лейкоцитов возрастало до 8,39+0,85x109/л (Р<0,05), а нейтрофилов до 33,54 ±0,72 %(Р< 0,05) и лимфоцитов до 59,09+1,66%(Р<0,05). Лимфоциты-самая многочисленная группа агра-нулоцитов, это Т- и В- клетки, формирующие специфический иммунитет. Содержание моноцитов мало менялось в течение всего эструса, находилось в пределах 3,54±0,43 - 4,12+0,29%. Эозинофилы были на уровне - 5,58-6,66%.

У кобыл гемограмма характеризовалась особенностями. Лейкоциты, их общее количество на протяжении всей стадии эструса было относительно высоким до 8,9±0,59 х109/л. Отмечены также высокие значения моноцитов от 4,87±0,87 до 5,87±1,27%, что указывает на интенсивный фагоцитоз и определяет повышение бактерицидной активности сыворотки крови. Такая картина связана с напряженностью процессов специфического и неспецифического иммунитета в эструс и, особенно во время хорошо выраженной половой охоты. Эозинофилы в крови кобыл несколько поднимались к предовулягорному периоду, и к овуляции их уровень достоверно возрастал до 7,12+0,81%. В данном случае, возможно, проявляется роль эозинофилов в устранении последствий напряженности иммунных процессов, которые сопровождают процесс осеменения, особенно это выражено у кобыл при покрытии жеребцом. Концентрация сегментоядерных нейтрофилов была на уровне 42,5+2,72 -48,89±2,36%.

Таким образом, клетки крови коров и кобыл (особенно лейкоциты) характеризовались определенной динамикой, прежде всего в иредовуля-торный период и к овуляции, следовательно, это доказывает нейрогумо-ральную природу гемопоэза. Однако, в целом, форменные элементы крови в период эструса менялись в пределах физиологической нормы и зачастую незначительно. Такое постоянство мы связываем с тем, что, во-первых, коровы и кобылы были правильно выбраны с позиции здоровья, а также с существованием в организме сложных регуляторных механизмов гемопоэза, обеспечивающих стабильность реализации глав-

ных функциональных задач крови, в частности обеспечение транспорта газов, иммунитета. Изучение гемограммы коров и кобыл в период эст-руса показало взаимосвязь процессов метаболизма и иммунитета с воспроизводительной функцией.

3.5. Физико-химические, органолентнческие свойства и структурно-функциональная характеристика вагинальной слизи коров и кобыл

в период эструса

3.5.1. Характеристика кристаллизации вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула

Кристаллизация (арборизация) - процесс фазового перехода из жидкости в кристаллическую фазу зависит от функционального состояния органа. Несмотря на его сложную детерминацию определять этот показатель очень просто в производственных условиях, что является основанием для рекомендации практического применения.

У коров и кобыл мазки отличались особенностями рисунка кристаллизации в зависимости от функционального состояния половой системы в период эструса и степени зрелости фолликула. Так, в начале эт-руса в мазке коров и кобыл кристаллизация практически отсутствовала, а слизь при высыхании представляла гомогенную массу клеток.

Но уже заметными были преобразования при фолликуле второй степени зрелости, в этот период вместе с клеточной массой обнаружены кристаллы. При этом у кобыл появлялись мелковетвпстые кристаллы, напоминающие снежинок. Только к предовуляторному периоду, к третьей — четвертой степени зрелости фолликула, был зафиксирован характерный признак - кристаллические структуры в виде «листа папоротника». В мазках слизи коров и кобыл такие структуры имели прямой угол между «основным стеблем» и «боковыми ветвями» (рис.7.8). Именно этот признак был отмечен при высоком содержании эстрадиола в крови, так что феномен «листа папоротника», имеющий прямой угол.

Рис. 7. Кристаллический рисунок вагииаль- Рис 8. Кристаллический рисунок

ной слизи коров (фЗ-4) вагинальной сипи кобыл (фЗ~1)

Период овуляции характеризовался деструкцией кристаллов, обратными процессами, которые можно описать как «локальный взрыв» кристаллической картины. В мазке на всем его протяжении можно отметить отдельные фрагменты «листьев папоротника», появившуюся изогнутость линий в виде неправильных крестов, а также гомогенную аморфную массу клеток.

Кристаллизация связана с высоким уровнем электролитов, особенно натрия и хлора, общего белка, то есть определяется изменением биохимического состава слизи. В ходе исследований обнаружена взаимосвязь результатов кристаллизации слизи с содержанием эстрадиола-17(3 в крови. Поэтому, есть основание считать, что кристаллоскопический "портрет" вагинальной слизи коров и кобыл указывает на протекание конкретных изменений на цитологическом уровне, что позволяет установить происходящие метаболические сдвиги, в зависимости от физиологического состояния. То есть, этот метод может использоваться в качестве теста по определению оптимального времени осеменения, а также превентивной диагностики.

3.5.2 Электрическая проводимость вагинальной слизи коров и

кобыл в период эструса

Биоэлектрические явления формируются в результате жизнедеятельности живой системы и непрерывно сопровождают ее. Электропроводность или электрическая проводимость- физическое явление, сопровождающееся способностью биоматериалов проводить слабый электрический ток.

Электропроводность вагинальной слизи определяли на приборе «Репротест». В результате проведенных исследований установлено, что вагинальная слизь коров и кобыл обладает электропроводностью, которая менялась в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике. Так, электропроводность достигала максимальных значений в предову-ляторный период (рис.9,11). У коров в стадию фЗ-4 в среднем показатель «Репротеста» составлял — 725ед, у кобыл — 716 ед.

Мы считаем, что повышение электрической проводимости слизи способствует продвижению отрицательно заряженных спермпев в достаточно плотной среде полового тракта, что важно в создании оптимальных условий для оплодотворения. Нами установлена тесная корреляционная связь показателей электропроводности слизи с содержанием эстрадиола-1713 в сыворотке крови, у коров г= + 0,763, у кобыл г= + 0,920. Это указывает на влияние развивающегося фолликула посредством секреции эстрогенов на повышение электропроводности вагинальной слизи.

716,49

370,87

301,77

15,91

Ф1 Ф2 ФЗ-4

Стадии развития фолликула

ОВ

Рис. 9. Динамика показателей электрической проводимости вагинальной слизи кобыл на приборе « Репротест »

и си

I-

о о. с си а.

800 700 600 500 400 300 200 100 0

460,48

396,12

Ф1

Ф2 ФЗ-4

Стадии развития фолликула

ОВ

Рис. 10. Динамика показателей электрической проводимости вагинальной слизи коров на приборе «Репротест»

Вполне обоснованна и понятна взаимосвязь с уровнем электролитов в слизи, ведь электропроводность должна обеспечиваться веществами, ионами, способствующими проведению электрического тока. Так, с натрием в слизи у коров г= + 0,918, у кобыл- г= +0,561, с калием -г= + 0,487 и 0,801, с хлором - г= +0,837 и 0,904 соответственно. Установлена тесная положительная корреляционная связь между показателями

«Репротест» м содержанием общего белка в вагинальной слизи коров г = -+0,980, кобыл - г = +0,942. Так, повышение содержания общего белка в слизи способствует возрастанию электропроводности в период эструса.

Все это доказывает неслучайный характер полученных данных, обосновывает выявленную тенденцию. Таким образом, прибор «Репротест» имеет все научные основания использования для определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл.

4. Разработка метода определения оптимального времен» осеменения коров и случкн кобыл

На основе проведения большого объема исследований по изучению воспроизводительной функции коров и кобыл с позиции иммунологии, эндокринологии, биохимии мы разработали комплексную методику с использованием нового прибора «Репротест» для определения оптимального времени осеменения животных.

Метод на основе «Репротеста» предназначен для специалистов на производстве и использования в личных хозяйствах. Он поможет опытному специалисту, но особенно не заменим начинающим техникам искусственного осеменения, ветврачам, зоотехникам. Его применение не усложнит, а наоборот, упростит работу, сделает ее более эффективной, результативной и творческой на современном уровне.

Наш метод не отменяет действующую инструкцию по технике искусственного осеменения и ведения случной компании, он дополняет и уточняет ее. На практике, особенно в зимне-стойловый период очень сложно установить начало охоты, отсюда неточности расчета времени осеменения, его пропуски, перекрытие коров и кобыл и большие экономические потери.

Ключевым моментом для выбора времени плодотворного осеменения является активное функциональное состояние половой системы, что отражают такие показатели как степень зрелости фолликула, оптимальные свойства слизистых выделений как среды для оплодотворения, близость к овуляции с учетом необходимого времени для капацитации спермиев.

Нами разработан алгоритм для специалистов по воспроизводству по определению времени осеменения коров и случки кобыл. Основным показателем мы рекомендуем считать интервал показателей «Репротеста», а также учитывать дополнительные признаки, как хорошо знакомые специалистам (поведение животных, внешнее состояние половых органов и выделений), так и новые - пенетрационный тест (слизь+сперма), кристаллизацию слизи. Весь комплекс исследований занимает не более 5 минут и непосредственно на месте, имея под рукой

прибор, световой микроскоп, сам техник искусственного осеменения может принять решение не только о времени осеменения, но и провести превентивную диагностику функционального и клинического состояния половой системы животных. И самое главное, методика с использованием «Репротеста» неинвазивна и безболезненна, не вызывает стресс у животных, это очень важно для реализации полноценного полового цикла.

В 4 хозяйствах Рязанской области проведена производственная проверка результатов однократного осеменения коров при определении оптимального времени по разработанной нами методике. Она заключалась в том, что в обычных производственных условиях в хозяйстве техник искусственного осеменения коров или специалист по воспроизводству в конном заводе определял время осеменения по нашим рекомендациям, действовал согласно алгоритму и проводил осеменение в пик электропроводности по прибору 650-900 ед.

В среднем по всем хозяйствам при определении оптимального времени осеменения с использованием прибора «Репротест» и комплекса признаков половой охоты, оплодотворяемость достигла 92%, что на 11% выше, чем при обычном визуальном контроле. Это позволяет судить о высокой эффективности определения оптимального времени осеменения коров по нашей методике с использованием прибора «Репротест». Использование этого метода позволяет значительно снизить расход семени на одно оплодотворение. Если при обычном двукратном осеменении в хозяйствах он составил 3,8-4 дозы, то при однократном — 1,4-1,5 доз.

Производственная проверка в Старожиловском конном заводе но использованию метода определения оптимального времени случки кобыл показала также высокую эффективность. Так, при использовании методики и прибора «Репротест» за ряд случных сезонов (2000-2005 г.г.) зажеребело 87% кобыл. Па методику и прибор получены положительные отзывы специалистов.

Таким образом, только за счет определения оптимального времени осеменения коров и кобыл можно повысить эффективность воспроизводства, а также улучшить работу специалистов и искусственное осеменение сделать современным биотехнологическим процессом.

5. ВЫВОДЫ

1. Установлено, что по мере роста и развития фолликула в яичнике в период эструса повышалось содержание эстрадиола-17р в сыворотке крови. В предовуляторный период, при фЗ-4 содержание гормона существенно возрастало до 21,42 пг/мл у коров, до 62,5 пг/мл у кобыл. Эстради-ол-17[3 служит регулятором преобразований в организме и половой системе в процессе подготовки к осеменению и оплодотворению. Уровень

прогестерона в сыворотке крови был низким на протяжении всего эстру-са, а к овуляции снижался до 0,Инг/мл у кобыл и до 0,31нг/мл у коров, что указывает на полноценность полового цикла.

2. Уровень показателей Т- и В- лимфоцитарных систем крови коров и кобыл в период эструса взаимосвязан с функциональным состоянием половой системы. В предовуляторный период у коров и кобыл повышалось содержание Т-обших лимфоцитов и Т-хелперов. содержание у-глобулинов и иммуноглобулинов, что указывает на активацию специфического клеточного и гуморального иммунитета и связано с усиленной защитой организма от любых чужеродных агентов во время осеменения. К овуляции отмечено перераспределение субпопуляцнй Т-лимфоцитов: достоверно снижались Т-обшие, Т-хелперы, а Т-супрессоры существенно возрастали у коров, а у кобыл несколько снижались, но были выше, чем в начале эструса. Динамика Т-супрессоров указывает на развитие иммунной толерантности, что является важнейшим условием для оплодотворения и раннего эмбриогенеза.

3. Фагоцитарная активность нейтрофилов (НСТ-тест), бактерицидная активность сыворотки крови, лизоцнм были на высоком уровне в период эструса, что свидетельствует об активации клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности в организме коров и кобыл в эст-рус. Их роль в большей степени направлена на создание общей противо-микробной защиты при осеменении и оплодотворении, что также биологически целесообразно.

4. Выявлены закономерности формирования местной естественной резистентности в половой системе. В предовуляторный период происходило повышение бактерицидной активности вагинальной слизи у коров до 15,88%, у кобыл - 26.50%, уровня лизоцима у коров - до 22.49мкг/мл, у кобыл-15,80 мкг/мл. Это обеспечивает необходимое усиление местной противомикробной защиты во время осеменения, а также для создания оптимальных условий для пенетрации и капацитации спермиев в половых путях. К овуляции бактерицидная активность и лизоцнм в вагинальной слизи существенно снижались. Снижение местной естественной резистентности в половой системе в период овуляции биологически оправдано, так как создает благоприятные условия для выживания спермиев и оплодотворения.

амилазы у коров до 32,64ед., у кобыл -25,01 ед., щелочной фосфатазы у коров- 290,37 ед., у кобыл-227,46 ед.. Активность ЛДГ была высокой в начале эструса и к овуляции. Такой закономерной динамикой показателей активности ферментов вагинальной слизи можно объяснить вклад цитохимических процессов углеводного обмена в создание оптимальной внутренней среды репродуктивного тракта в период благоприятный для осеменения.

6. Выявлена физиологическая роль электролитов в создании оптимальных условий для оплодотворения. В крови коров и кобыл уровень калия, натрия, хлора и кальция был относительно стабилен. 13 вагинальной слизи характеризовался определенной динамикой. В связи с развитием фолликула уровень калия, натрия, хлора в вагинальной слизи возрастал, а кальция снижался. С особенностями электролитного состава связано создание особых физико-химических и осмотических свойств вагинальной слизи, проницаемости клеточных мембран в плане подготовительных процессов к осеменению и оплодотворению.

7. В эструс в предовуляторный период у коров и кобыл повышалась интенсивность метаболизма. Возрастало содержание общего белка в сыворотке крови у коров до 81,48 г/л, у кобыл- 72,97 г/л. Концентрация альбуминов в крови мало менялась в связи со степенью зрелости фолликула, у коров она составляла -30,73-38,81 г/л, у кобыл- 32,65-35,02 г/л. Уровень глобулинов достоверно возрастал в предовуляторный период у коров до 52.54г/л. у кобыл — 39,61 г/л. Повышалось содержание гемоглобина в крови у коров до 109,91 г/л, у кобыл-141,78г/л.

8. Динамика содержания общего белка в вагинальной слизи коров и кобыл более выражена, чем в сыворотке крови. В предовуляторный период (фЗ-4) в слизи его уровень достоверно повышался у кобыл до 10,20 г/л, у коров - 1,88г/л. Это связанно с созданием особых структурно-механических свойств слизи, проницаемой для спермнев.

9. Концентрация клеток крови у кобыл и коров в период эструса характеризуется определенной стабильностью, как результат гомеостаза и гемостаза. В предовуляторный период было высокое содержание эритроцитов: в крови коров-Ь, 06х1012/л, кобыл-9,31х1012/л, что связано с активизацией окислительно-восстановительных процессов в организме. У коров и кобыл в крови концентрация лейкоцитов, нейтрофплов и лимфоцитов была на высоком уровне, что указывает на закономерный лейкоцитоз и активизацию иммунных факторов в период эструса.

зовывать яркие, четкие кристаллы в виде «листа папоротника» с ветвями под прямым углом. Это связано с высокой эстрогенной насыщенностью организма, что указывает на готовность к осеменению.

11. Органолептические показатели слизи коров и кобыл закономерно менялись в связи со степенью зрелости фолликула. С появлением признаков эструса резко возрастало количество вагинальной слизи, постепенно повышалась ее растяжимость, появлялись пузырьки воздуха. Биологическое значение возрастания растяжимости слизи (снижение вязкости) в предовуляторный и овуляторный периоды - важное условие для облегчения продвижения спермиев. Реакция среды вагинальной слизи (рН) у кобыл и коров в период эструса находилась в пределах 7,0-7.6 до 8,2. Наивысший балл пенетрационного теста (слизь+сперма) (ПТ=4) был отмечен у коров в предовуляторный период, что характеризует благоприятные условия для осеменения и оплодотворения.

12. Разработан принципиально новый прибор «Репротест». основанный на проводимости вагинальной слизи в неоднородном электрическом поле. Показатели электропроводности у коров и кобыл закономерно менялись в связи со степенью зрелости фолликула. В начале эструса значения «Репротеста» низкие - у коров 396ед., у кобыл —116ед. В предовуляторный период резко возрастали, достигая в среднем у коров 725ед.. у кобыл 71 бед, что характеризует высокую электропроводность вагинальной слизи. Овуляция происходила при низких значениях прибора «Репротест» у коров-460 ед., у кобыл - 371 ед.

13. Установлены высокие коэффициенты корреляции между показателями электропроводности и содержанием эслрадиола-17р в крови, уровнем электролитов и обшего белка в слизи. Это представляет научное обоснование объективности полученных данных и определяет возможность оценки степени зрелости фолликула, овуляторной и гормональной функции яичников, физиологического состояния репродуктивной системы коров и кобыл по прибору «Репротест».

14. Разработана комплексная методика определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл на основе прибора «Репротест». Проведен научно-хозяйственный опыт и производственная проверка метода в 4 хозяйствах Рязанской области и Старожиловском конном заводе. Установлено снижение сервис-периода у коров на 21-25 дней, оп-лодотворяемость от первого осеменения составила 60-62.5%. Оплодотво-ряемость коров в среднем по хозяйствам повысилась до 92%, у кобыл — до 87%.

6. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

Целесообразно применять разработанные «Рекомендации по определению оптимального времени осеменения коров и кобыл» (Баковец-кая О.В., Рязань, 2006), утвержденные Областным управлением сельского хозяйства и продовольствия Рязанской области, ОАО «Рязанское» по племенной работе.

Для определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл, повышения их оплодотворяемости рекомендуем:

- использовать прибор «Репротест», при этом интервал высоких значений электропроводности 650-900 ед. следует считать тестовым для проведения осеменения

- алгоритм действии, в основе которого лежит интервал значений «Репротеста», а также комплекс дополнительных показателей (поведение животных, состояние половых органов, органолептические признаки, кристаллизация слизи, пенетрационный тест). Это позволит специалисту непосредственно на месте быстро и безболезненно для животных определять время плодотворного осеменения коров и кобыл.

3. Результаты исследований по активности ферментов вагинальной слизи коров и кобыл, электролитного состава, ее естественной резистентности рекомендуем учитывать в биотехнологии воспроизведения животных при разработке оптимальных сред для культивирования эмбрионов, криоконсервации гамет, совершенствовании методов диагностики и лечения в ветеринарной гинекологии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Е^аковеикая O.IÎ. Возможности использования вагинальной слизи кобыл в диагностических исслслонаииях // Биологические основы повышения эффективности коневодства: Сб. науч.тр. ВНИИ коневодства.-Дивово, 1996.-С. 16-22

2. Баковецкая 0.13.. Храброва Л.А. Новый способ опенки функционального состояния репродуктивной системы кобыл // Сб. науч.тр. аспирантов, соискателей и сотрудников РГСХД. Рязань,-1997.-С. 142-145

3. Баковецкая О.В. Роль лизоцима в оплодотворении кобыл // Сб.науч.тр. аспирантов, соискателей и сотрудников РГСХА. Рязань.-1998.-С.78-79.

4. Баковецкая О.В. Взаимосвязь иммунологических и гормональных показателей вагинальной слизи и сыворотки крови кобыл в динамике полового цикла/7 Науч.-течи, прогресс и резервы повышения эффективности коневодства России и стран ближнего зарубежья в новых экономических условиях. -Дивово, 1998. - С. 31-32.

5. Баковецкая О.В. Изучение иммунологических показателен вагинальной слизи и сыворотки крови кобыл в динамике полового цикла // Новые селекционные, физиологические, биотехнологпческне методы в коневодстве. -Дивово. 1999,- С. 222-225.

6. Баковецкая О.В., Сидорова И.В. Гормональный контроль функционирования половой

системы у кобыл // Перспективы коневодства России в ХХ1веке: Мат-лы координационного совещания, Дпвово.-2000.-С.71-73.

7. Баковецкая 0.13. Биохимические показатели крови кобыл в динамике полового никла //Перспективы коневодства России в ХХ1веке: материалы координационного совещания, Днвово.-2000.-С. 73-75.

8. Баковецкая О.В. Научно - практические основы определения овуляции у лошадей /7 Коневодство на пороге XXI века: материалы Всероссийской конференции молодых ученых, Дивово.-2001 .-С.67-69.

9. Баковецкая О.В. Новое в определении овуляции у лошадей // Страта пя развития животноводства России XXI век (секция коневодства) н координационного совещания по научно-исследовательской работе в коневодстве: Мат-лы научной сессии Россель-хозакадемин.-Дивово.-2001 .-С.89-91.

10. Баковецкая О.В. Местный иммунитет и его роль в процессах воспроизводства у кобыл // Современное состояние и стратегия развития АПК Рязанской области на рубеже XXI столетия: Маг-лы региональной научно-практической конференции. Рязань.-2001.-С.179-180.

11.Баковецкая О.В. Контроль воспроизводства сельскохозяйственных живошых /! Сб.науч.тр. аспирантов, соискателей и сотрудников РГСХА, Рязань.-2002.-С.54-56.

12. Баковецкая О.В. Биологический контроль воспроизводства лошадей // Проблемы сохранения генофонда, повышения племенных п продуктивных качеств заводских и местных лошадей: Мат-лы Всероссийского координационного совещания по коневодству, Дивово.-2003.-С. 58-60.

13. Баковецкая О.В. Гормональная регуляция воспроизводительных процессов у коров /7 Сб. науч.тр.. посвященный 55 -летию РГСХА.-2004. -С.65-67.

14.Баковецкая О.В. Гемограмма коров в период эструса // Вклад молодых ученых в развитие АПК России: Мат-лы международной научно-практической конференции молодых ученых,- РГСХА.-2004.-С.76-77.

15. Баковецкая О.В. Физиологические основы определения оптимального времени осеменения коров // Молодые ученые -сельскому хозяйству России: Сб. мат-лов Всерос. конф.-М.: ФГНУ «Росииформа! ротех» (ТСХА).-2004.-С.302-305

16. Баковецкая О.В., Храброва Л.Л. Изменение иммунологических показателей вла!а-дишной слизи кобыл в динамике полового цикла // Роль и значение метода искусственною осеменения сельскохозяйственных животных в прогрессе животноводства XX и XXI веков: Мат-лы межд\народной научно-практической конференции.-ВИЖ. Дубровины.-2004.-С. 237-240.

17. Баковецкая О.В. Уровень эстрад иола-17В в крови и функциональное состояние воспроизводительной системы кобыл в период эструса'/ Искусственное осемснеиие лошадей - истоки биотехнологии в животноводстве. -Дивово. 2004. - С. 54-56.

18.Баковецкая О.В. Прибор «Репрогест» и повышение эффективности воспроизводства сельскохозяйственных животных //' Сельский механизатор.-№ 10.-2004,- С. 30-31.

19.Баковецкая О.В. Теория и практика разработки методов определения оншмадьного времени осеменения коров: история и перспективы // Вестник агарной науки Причерноморья, Николаевский ГЛУ.- выи.4(28).-2004.-С.179-185.

20. Патент № 2241375 МГ1К 7 А 61 В5/05 10/10 на изобретение способа для определения периода овуляции и у стройство для его реализации/ Андрианов Г.В.. Баковецкая О.В.. . Ляпушкпн Н.Н.. Кпракосян М.Э.. Васильев Г..В.. Беркетейм М.Л. Опубликовано Бюл. №34 2004 г.

21.Тупиков Г.М., Баковецкая О.В. Влияние некоторых биохимических показателей крови па воспроизводительные функции у коров // Молочное и мясное скотоводство.-.\1'2 -

2005.-С. 26-28.

22. Баковецкая О.В., Родина Е.В. Электролиты в биологических жидкостях у коров И Сб. научных трудов молодых ученых РГСХА. Рязань.- 2005.- С. 63-66.

23. Баковецкая О.В. Влияние иммунологических показателей на воспроизводитель«)ю функцию кобыл П Мат-лы международной научно-практической конференции к юбилею проф. Буфова «Биотехнология воспроизведения животных», Харьков. - 2005,-С.35-37.

24. Баковецкая О.В. Концепция функционирования репродуктивной системы коров в период эструса и бнотехнологнческий контроль воспроизводства. — Рязань: ИРИЦ ГО У ВПО РГСХА, 2005 -110с.

25. Баковецкая О.В. Т- и В- лимфотп арные системы крови коров » период эсгруса // Be- V^ теринария.-№8.-2005.-С. 34-35

26. Баковецкая О.В. Ферменты биологических жидкостей кобыл и их роль в репродуктивной функции // Современные технологические и селекционные аспекты развития животноводства России: Мат-лы 111 международной научно-практической конференции.-ВИЖ- Дубровины. 2005. -С. 241-242.

27. Баковецкая О.В. Крнсталлоскоппчсский "портрет" вашнальнон слизи кобыл в период эструса // Наука о копсподсгве на рубеже веков / ВНИИ коневодства.-Дивово. 2005. -С. 463-467.

28. Баковецкая О.В. Новый метод определения оптимальною времени осеменения коров // Между народ, форум III Тысячелет ие - Новый мир, Москва.-2005. -С. 82-84.

29. Баковецкая О.В. Методические рекомендации но определению оптимального времени , осеменения корон и случки кобыл.- Рязань, 2006.-27с.

30. Баковецкая О.В., Тупиков Г.М. Показатели специфического иммунитета кобыл в период эструса и их связь с воспроизводительной функцией // Коневодство и конный спорт,- №• I. С. 11-12

31. Баковецкая О.В., Тупиков Г.М. Содержание и динамика клеток крови кобыл в период \у половой охоты // Коневодство и конный спорт .- №1 .-С.28-29.

32. Баковецкая О.В. Физиологическая роль электролитов биологических жидкостей в ^ воспроизводи!ельных процессах кобыл // Коневодство и конный спорт,- № 2.-С. 16-17 ,

33.Баковецкая О.В. Электропроводность вагинальной слизи коров и определение опти- ^ мального времени осеменения // Зоотехния,- №5.-2006. — С. 29.

Буммя офсетная. Гаритура! инее. Печа\ь рию! рафическая. Усл. меч.л. 2 Тираж 100 экч. 'Закат №40

Государственное обраюкнельное учреждение высшею профессионально! о образования «Рязанская юсуларо венная сельскохсняйственная академия им. проф. П.Л.Косшчена» З'ЮО.М г. Рязань, ул. Костычева, I

Ошечапшо в информационном релакционно-ишпельском центре ГОУ ВПО РГСХА 390044 г. Рязань, ул. Костычева, 1

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Баковецкая, Ольга Викторовна

Введение.

2. Обзор литературы.

2.1 Особенности полового цикла коров и кобыл.

2.2. Современное состояние и перспективы разработки методов определения оптимального времени осеменения коров и кобыл.

2.3. Органолептические и физико-химические свойства вагинальной слизи коров и кобыл.

2.4. Цитологическая структура вагинальной слизи коров и кобыл в динамике полового цикла.

2.5. Биохимические показатели крови и половых секретов в связи с функциональным состоянием половой системы.

2.5.1. Биохимические показатели крови в связи с воспроизводительной функцией.

2.6. Иммунные показатели крови и половых секретов в период эструса в связи с функциональным состоянием половой системы.

2.6.1. Иммунные свойства крови в связи с функциональным состоянием половой системы.

2.6.2. Иммунные свойства секретов полового тракта.

3. Материал и методика исследований.

4. Результаты экспериментальных исследований и их обсуждение.

4.1. Содержание овариальных гормонов у коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике.

4.1.1. Содержание овариальных гормонов в сыворотке крови коров в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике.

4.1.2. Содержание эстрадиола-17р и прогестерона в сыворотке крови и вагинальной слизи кобыл в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике.

4.2. Иммунные специфические и неспецифические показатели крови и естественная резистентность вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса.

4.2.1. Т- и В-лимфоцитарные системы, неспецифические иммунные показатели крови коров и кобыл в период эструса в связи с развитием фолликула в яичнике.

4.2.2. Естественная резистентность вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула.

4.3. Биохимические показатели крови и вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике.

4.3.1. Биохимические показатели крови коров и кобыл в период эструса.

4.3.2. Биохимические показатели вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике.

4.3.3. Содержание электролитов в сыворотке крови и вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи с развитием фолликула.

4.3.4. Активность ферментов в сыворотке крови и вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике.

4.4. Клетки крови (гемограмма) коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике.

4.5. Физико-химические и органолептическне свойства вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса.

4.5.1. Кристаллизация вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике.

4.5.2. Электрическая проводимость вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса.

4.5.3. Органолептическне свойства вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула.

4.6. Разработка метода определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл.

4.6.1. Новая комплексная методика определения оптимального времени осеменения коров на основе прибора «Репротест».

4.6.2. Методика определения оптимального времени случки и осеменения кобыл с использованием «Репротеста».

4.6.3. Производственная проверка методики на основе прибора «Репротест» по определению оптимального времени осеменения коров и кобыл в хозяйствах Рязанской области.

4.7. Концепция функционирования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса (Заключение).

5. Выводы.

6. Предложения производству.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Закономерности и механизм функционирования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса и разработка метода определения оптимального времени осеменения"

Актуальность работы

Эффективное воспроизводство - важнейшая составляющая рентабельного животноводства. Статистика показывает, что экономический ущерб от бесплодия и яловости превышает потери, наносимые животноводству всеми заразными и незаразными болезнями. Яловость коров и прохолост кобыл зачастую достигает 30-40%.

На показатели воспроизводства влияет большой комплекс внешних и внутренних факторов (Шипилов B.C., 1977; Туников Г.М., Калашников В.В., Захаров В.А., 1996; Володин В.А., 2001; Чомаев A.M., 2001, 2004; Джапаридзе Т.Г., 2004). Воспроизводство - одна из наиболее сложных и наукоемких отраслей, биотехника которой базируется на глубоком знании репродуктивной функции. Несмотря на давние традиции и ценное научное наследие изучения физиологии размножения животных, заложенные выдающимися учеными, ряд вопросов по-прежнему остается актуальными и значимыми. Поэтому становится очевидной потребность в дополнении базовых теорий, их уточнение и подтверждение с позиций современных знаний и методов.

Учение о половом цикле сельскохозяйственных животных складывалось поэтапно. Хорошо известны специфические поведенческие реакции самок в период осеменения, особенности проявления половой охоты, продолжительность течки и время наступления овуляции, преобразования в половых органах, видовые особенности (У. Хип,1908; А.П. Студенцов,1953; В.К. Милованов 1972; Х.И. Животков, 1952; Р.Х.Ф. Хантер 1982; Г.У. Солсбери, H.JI. Ван Демарк, 1969). Согласно современным представлениям, основу нормального полового цикла составляют периодически повторяющиеся циклические изменения в функциональной деятельности системы гипоталамус-гипофиз-яичники, связанные с ростом и созреванием фолликулов, овуляцией, формированием желтого тела. Составляющим компонентом изменений являются также циклические преобразования в половом тракте, многообразные физиологические сдвиги в функционировании других систем организма и поведении животных. Мы использовали именно этот подход в наших исследованиях, при разработке методики, обосновании полученных результатов, а также как основу при разработке нового метода определения функционального состояния половой системы животных и оптимального времени осеменения.

По последним научным данным, в регуляции всех жизненных функций, наряду с нервной и гормональной системами важное место занимает иммунная. Стоявшими у истоков нового в 60-х годах и перспективного сегодня направления - иммунология воспроизведения - И.И. Соколовской, А.В. Бронской (1985), А. Братановым (1975) было выявлено регулирующее влияние иммунной системы в процессах гаметогенеза, капацитации спермиев, оплодотворении, эмбриогенезе. Этот огромный вклад и сегодня остается базисом данного направления в физиологии. Однако до конца не выяснено влияние Т- и В-лимфоцитарных систем, неспецифических факторов системного и местного иммунитета в обеспечении регуляции подготовки организма и половой системы самки к осеменению и оплодотворению.

Гормональное влияние - как основа регуляции общепризнанно. Благодаря исследованиям Ю.Д. Клинского (1977), В.В. Ельчанинова (1972), М.И. Прокофьева (1979) сегодня мы обладаем схемой эндокринных регуляторных процессов в организме животных, обеспечивающей реализацию половой функции. Однако пока остается мало известно о влиянии гормонов, особенно овариальных, на биохимические, иммунные, физико-химические процессы в организме и половой системе коров и кобыл, свойства их половых секретов. В результате не достаточно изучены механизмы функциональных преобразований в половой системе, а также ограничена возможность разработки прогностических тестов для опосредованного изучения уровня гормонов по доступным показателям.

Половые секреты обладают большим информативным потенциалом. Органолептические признаки впервые послужили основанием для использования вагинальной слизи в диагностике половой охоты и беременности животных, что с успехом было принято специалистами на производстве. В настоящее время появилась возможность изучения сложных показателей: электролитного состава слизи, ферментативной активности, факторов естественной резистентности, физических свойств современными методами. Такой широкий спектр исследований способствует пониманию сущности физиологических преобразований в половой системе и открывает перспективы разработки диагностических тестов и приборов.

Во всем мире существует проблема определения оптимального времени осеменения сельскохозяйственных животных. За давнюю историю этого вопроса предложено немало разных методов: рефлексологический метод с использованием самцов-пробников, ректальная пальпация и УЗИ -диагностика фолликулов, гормональное обследование, инструментальные методы, визуальный контроль. Однако в силу низкой объективности или больших материальных затрат большинство методов не имеют применения. Такое положение оставляет специалиста один на один с вопросом «Когда осеменять?». В результате наиболее распространенный визуальный контроль за поведением животных и внешних признаков половых выделений имеет низкую эффективность, всего 60-70%.

Обозначенные научные и практические проблемы, современный комплексный подход к исследованиям определяют актуальность нашей работы.

Цель работы: изучить функциональные особенности репродуктивной системы коров и кобыл по показателям крови и вагинальной слизи в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике, определить закономерности и механизм физиологических процессов, разработать прибор и научно обосновать доступный на производстве метод определения оптимального времени осеменения.

В связи с целью работы были поставлены задачи:

• Выяснить особенности обменных процессов в период эструса по биохимическим показателям крови и слизи (общий белок, его фракции, ферментативная активность)

• Выяснить механизм влияния иммунных специфических (Т- и B-лимфоцитарных систем крови, иммуноглобулинов) и неспецифических (функциональная активность нейтрофилов, бактерицидная активность, лизоцим) факторов на функциональное состояние половой системы, в создании оптимальных условий для оплодотворения

• Провести анализ изучаемых показателей в связи с уровнем основных овариальных гормонов - эстрадиола-17[3 и прогестерона в сыворотке крови коров и кобыл в период эструса по стадиям развития фолликула

• Изучить влияние функционального состояния половой системы коров и кобыл в период эструса на физико-химические свойства вагинальной слизи по показателям кристаллизации и электропроводности, а также органолептические признаки

• Разработать новый прибор и методику для определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл, дать научное обоснование его показателям и определить возможности использования, провести производственную проверку

Научная новизна работы

Впервые проведены комплексные исследования показателей крови и вагинальной слизи по изучению функциональных особенностей репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула. Установлены новые закономерности и представлен механизм физиологических преобразований при подготовке к осеменению и оплодотворению.

Впервые определена взаимосвязь показателей Т- и В- лимфоцитарных систем крови коров и кобыл в период эструса с функциональным состоянием половой системы. Так, предовуляторное повышение, а затем частичное их торможение и перераспределение к овуляции обусловливает развитие иммунной толерантности как важного механизма, обеспечивающего осеменение и оплодотворение.

Установлены новые закономерности проявления функциональной активности нейтрофилов крови коров и кобыл по НСТ-тесту в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула.

Впервые определены закономерности формирования местной естественной резистентности в половой системе коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула и определены механизмы ее влияния в создании оптимальных условий для осеменения и оплодотворения.

Впервые установлена физиологическая роль ферментов вагинальной слизи коров и кобыл, как показателей, характеризующих течение цитохимических процессов в половой системе. Повышение активности ос-амилазы, щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы в вагинальной слизи указывает на интенсивный углеводный обмен, что связано с активным функциональным состоянием репродуктивной системы в период эструса.

• Выявлена физиологическая роль электролитов в создании оптимальных условий для оплодотворения. Впервые установлено соотношение электролитов в слизи, которое определяет создание оптимальных физико-химических и осмотических свойств вагинальной слизи, проницаемости клеточных мембран в плане подготовительных процессов к осеменению и оплодотворению.

• Впервые установлена связь кристаллизации вагинальной слизи кобыл и коров с уровнем эстрадиола-17(3 в период эструса по стадиям развития фолликула в яичнике, разработаны критерии оценки кристаллизации мазков для определения оптимального времени осеменения.

• Разработан принципиально новый прибор «Репротест» (патент № 2241375) для определения оптимального времени осеменения, основанный на проводимости вагинальной слизи в неоднородном электрическом поле. Показатели электропроводности у коров и кобыл закономерно менялись в связи со степенью зрелости фолликула. Дано научное обоснование его результатов и определена возможность оценки степени зрелости фолликула, овуляторной и гормональной функции яичников, физиологического состояния репродуктивной системы коров и кобыл.

• Разработана комплексная методика определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл на основе прибора «Репротест». Методика научно обоснованна, объективна, безболезненна и не вызывает стресс у животных, доступна на производстве. Ее применение позволило быстро и достоверно определять оптимальное время осеменения коров и случки кобыл, с учетом индивидуальных особенностей животных и добиваться повышения оплодотворяемости.

Практическая значимость и реализация результатов

В работе дано современное научное представление о функциональных особенностях репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса, в связи с развитием фолликула в яичнике. Доказано, что по вагинальной слизи - (кристаллизации, электропроводности, органолептическим признакам), можно определить функциональное состояние половой системы, степень зрелости фолликула и время осеменения. На этом основании разработан прибор, методика и алгоритм действий по определению времени осеменения коров и кобыл.

Для специалистов по воспроизводству разработаны «Рекомендации по определению оптимального времени осеменения коров и кобыл» (Баковецкая О.В., Рязань, 2006), утверждены Областным управлением сельского хозяйства и продовольствия Рязанской области и ОАО «Рязанское» по племенной работе.

2. Обзор литературы

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Баковецкая, Ольга Викторовна

5. Выводы

На основании комплексного изучения биохимических, гормональных, иммунных, физико-химических показателей крови и вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула были выявлены особенности функционирования организма и половой системы, определены механизмы физиологических преобразований. Полученные новые данные позволили научно обосновать определение оптимального времени осеменения, разработать прибор и объективную, доступную на производстве методику определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл.

1. Установлено, что по мере роста и развития фолликула в яичнике в период эструса повышалось содержание эстрадиола-17(3 в крови. В предовуляторный период, при фЗ-4 содержание гормона существенно возрастало до 21,42 пг/мл у коров, до 62,5 пг/мл у кобыл. Эстрадиол-17(3 служит регулятором преобразований в организме и половой системе в процессе подготовки к осеменению и оплодотворению. Уровень прогестерона был низким на протяжении всего эструса а к овуляции снижался до 0,11 нг/мл у кобыл и до 0,31нг/мл у коров, что указывает на полноценность полового цикла.

2. Уровень показателей Т- и В- лимфоцитарных систем крови коров и кобыл в период эструса взаимосвязан с функциональным состоянием половой системы. В предовуляторный период у коров и кобыл повышалось содержание Т-общих лимфоцитов и Т-хелперов, содержание у-глобулинов и иммуноглобулинов, что указывает на активацию специфического клеточного и гуморального иммунитета и связано с усиленной защитой организма от любых чужеродных агентов во время осеменения. К овуляции отмечено перераспределение субпопуляций Т-лимфоцитов: достоверно снижались Т-общие, Т-хелперы, а Т-супрессоры существенно возрастали у коров, а у кобыл несколько снижались, но были выше, чем в начале эструса. Высокий уровень

Т-супрессоров указывает на развитие иммунной толерантности, что является важнейшим условием для оплодотворения и раннего эмбриогенеза.

3. Фагоцитарная активность нейтрофилов (НСТ-тест), бактерицидная активность сыворотки крови, лизоцим были на высоком уровне в период эструса, что свидетельствует об активации клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности в организме коров и кобыл в эструс. Их роль в большей степени направлена на создание общей противомикробной защиты, особенно в период эструса, при осеменении и оплодотворении, что также биологически целесообразно.

4. Выявлены закономерности формирования местной естественной резистентности в половой системе. В предовуляторный период происходило повышение бактерицидной активности вагинальной слизи у коров до 15,88%, у кобыл - 26,50%, уровня лизоцима у коров - до 22,49мкг/мл, у кобыл-15,80 мкг/мл. Это обеспечивает необходимое усиление местной противомикробной защиты во время осеменения, а также для создания оптимальных условий для пенетрации и капацитации спермиев в половых путях. К овуляции бактерицидная активность и лизоцим в вагинальной слизи существенно снижались. Снижение местной естественной резистентности в половой b системе в период овуляции биологически оправдано, так как создает благоприятные условия для выживания спермиев и оплодотворения.

5. Установлена физиологическая роль ферментов вагинальной слизи коров и кобыл. В крови коров и кобыл активность а-амилазы, щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы (ЛДГ) была относительно стабильна и менялась лишь в некоторые стадии. В то же время в вагинальной слизи существенно повышалась в предовуляторный период активность а-амилазы у коров до 32,64ед., у кобыл -25,01 ед., щелочной фосфатазы у коров- 290,37 ед., у кобыл-227,46 ед. Активность ЛДГ была высокой в начале эструса и к овуляции. Такой закономерной динамикой показателей активности ферментов вагинальной слизи можно объяснить вклад цитохимических процессов углеводного обмена в создание оптимальной внутренней среды репродуктивного тракта в период благоприятный для осеменения.

6. Выявлена физиологическая роль электролитов в создании оптимальных условий для оплодотворения. В крови коров и кобыл уровень калия, натрия, хлора и кальция был относительно стабилен. В вагинальной слизи характеризовался определенной динамикой. В связи с развитием фолликула уровень калия, натрия, хлора в вагинальной слизи возрастал, а кальция снижался. С особенностями электролитного состава связано создание оптимальных физико-химических и осмотических свойств вагинальной слизи, проницаемости клеточных мембран в плане подготовительных процессов к осеменению и оплодотворению.

7. В эструс в предовуляторный период у коров и кобыл повышалась интенсивность метаболизма. Возрастало содержание общего белка в сыворотке крови у коров до 81,48 г/л, у кобыл- 72,97 г/л. Концентрация альбуминов крови мало менялась в связи со степенью зрелости фолликула, у коров она составляла -30,73-38,81 г/л, у кобыл- 32,65-35,02 г/л. Уровень глобулинов достоверно возрастал в предовуляторный период у коров до 52,54г/л, у кобыл - 39,61 г/л. Повышалось содержание гемоглобина в крови у коров до 109,91 г/л, у кобыл-141,78г/л.

9. Концентрация клеток крови у кобыл и коров в период эструса характеризуется определенной стабильностью, как результат гомеостаза и гемостаза. В предовуляторный период было высокое содержание эритроцитов: в крови коров - 5,06x1012/л, кобыл- 9,31х1012/л, что связано с активизациеи окислительно-восстановительных процессов в организме. У коров и кобыл в крови концентрация лейкоцитов, нейтрофилов и лимфоцитов была на высоком уровне, что указывает на закономерный лейкоцитоз и активизацию иммунных факторов в период эструса.

10. Установлены закономерности кристаллизации вагинальной слизи коров и кобыл в связи со степенью зрелости фолликула. В предовуляторный период, при фЗ-4 слизь коров и кобыл обладает способностью образовывать яркие, четкие кристаллы в виде «листа папоротника» с ветвями под прямым углом. Это связано с высокой эстрогенной насыщенностью организма, что указывает на готовность к осеменению.

11. Органолептические показатели слизи коров и кобыл закономерно менялись в связи со степенью зрелости фолликула. С появлением признаков эструса резко возрастало количество вагинальной слизи, постепенно повышалась ее растяжимость, появлялись пузырьки воздуха. Биологическое значение возрастания растяжимости слизи (снижение вязкости) в предовуляторный и овуляторный периоды - важное условие для облегчения продвижения спермиев. Реакция среды вагинальной слизи (рН) у кобыл и коров в период эструса находилась в пределах 7,0-7,6 до 8,2. Наивысший балл пенетрационного теста (слизь+сперма) (ПТ=4) был отмечен у коров в предовуляторный период, что характеризует благоприятные условия для осеменения и оплодотворения.

12. Разработан принципиально новый прибор «Репротест» (патент №2241375), основанный на проводимости вагинальной слизи в неоднородном электрическом поле. Показатели электропроводности у коров и кобыл закономерно менялись в связи со степенью зрелости фолликула. В начале эструса значения «Репротеста» низкие - у коров 396ед., у кобыл -11 бед. В предовуляторный период резко возрастали, достигая в среднем у коров 725ед., у кобыл 71 бед, что характеризует высокую электропроводность вагинальной слизи. Овуляция происходила при низких значениях прибора «Репротест» у коров-460 ед., у кобыл - 371 ед.

13. Установлены высокие коэффициенты корреляции между показателями электропроводности и содержанием эстрадиола-17(3 в крови, уровнем электролитов и общего белка в слизи. Это представляет научное обоснование объективности полученных данных и определяет возможность оценки степени зрелости фолликула, овуляторной и гормональной функции яичников, физиологического состояния репродуктивной системы коров и кобыл по прибору «Репротест».

14. Разработана комплексная методика определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл на основе прибора «Репротест». Проведен научно-хозяйственный опыт и производственная проверка метода в 4 хозяйствах Рязанской области и Старожиловском конном заводе. Установлено снижение сервис-преиода у коров на 21-25 дней, оплодотворяемость от первого осеменения составила 60-62,5%. Оплодотворяемость коров в среднем по хозяйствам повысилась до 92,2%, у кобыл - до 87%.

6. Предложения производству

1. Для определения оптимального времени осеменения коров и кобыл применять рекомендации «Рекомендации по определению оптимального времени осеменения коров и кобыл» (Баковецкая О.В., Рязань, 2006). Утверждены Областным управлением сельского хозяйства и продовольствия Рязанской области, специалистами ОАО «Рязанское» по племенной работе.

2. С целью повышения оплодотворяемости коров и кобыл рекомендуем использовать прибор «Репротест». При этом интервал высоких значений электропроводности 650-900 ед. следует считать тестовым для проведения осеменения.

3. Для специалистов по воспроизводству разработан алгоритм действий по определению оптимального времени осеменения коров. В основе алгоритма лежит интервал значений «Репротеста», а также комплекс дополнительных показателей (поведение животных, состояние половых органов, органолептические признаки, кристаллизация слизи, пенетрационный тест). Это позволит специалисту непосредственно на месте определять время плодотворного осеменения коров и кобыл.

4. Результаты исследований по ферментативной активности вагинальной слизи коров и кобыл, электролитного состава, ее естественной резистентности рекомендуем учитывать в биотехнологии воспроизведения животных при разработке оптимальных сред для культивирования эмбрионов, криоконсервации гамет, совершенствовании методов диагностики и лечения в ветеринарной гинекологии.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Баковецкая, Ольга Викторовна, Рязань

1. Акназаров Б.Н. Гуморальные факторы местной защиты матки у коров/ Б.Н. Акназаров// Ветеринария. 1988. - N 8. - С.41-42.

2. Аксенов, Н.С. Цитологическая картина влагалищных мазков и ее значение в определении стадий полового цикла у свиней/ Н.С. Аксенов//Труды Семипалатинского зоовет. ин-та. 1971. - T.V. - С. 200-202.

3. Алиев А.А. Оптимальные сроки осеменения кобыл/ А. Алиев, Д. Овечкин// Коневодство и конный спорт.- 1979.-№3.-С.27

4. Алиев, А.А. Динамика концентрации лютеинизирующего гормона, прогестерона, эстрадиола 17 (3 в крови коров в периоды полового цикла и начальных стадий стельности / А.А. Алиев, И.И. Костомахин // Доклады ВАСХНИЛ. -1991.- №9. - С.36-39.

5. Андреева, А.В. Т- и В- системы иммунитета и их коррекция при эндометритах коров/ А.В. Андреева, Р.Т. Маннапова // Сб.науч. тр.: Современные имуноморфологические проблемы развития животных при инфекционно-инвазивных заболеваниях. -М., 2001.- С.3-9.

6. Антонов, Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии: биохимические и микологические/ Б.И. Антонов.-М.: Агропромиздат. 1991. - 287 с.

7. Антонова Л.В. и др. Иммуноглобулины в секрете желез цервикального канала женщин при воспалительных заболеваниях внутренних половых органов/ Л.В. Антонова// Акушерство и гинекология. 1977. -N 4. - С. 8 - 11.

8. Антонова, Л.В. и др. Значение иммунологических исследований в акушерстве и гинекологии/ Л.В. Антонова.-Ташкент: Медицина, 1981.- С. 176.

9. Антропова И. П., Кристаллизация биологических жидкостей человека/ И. П, Антропова, Я. Л. Габинский // Клин. лаб. диагн-ка.-1997.-N8.-С. 36-38.

10. Ю.Арсеньева, М.Т. Кольпоцитологические исследования в динамике и терапии эндокринных гинекологических заболеваний./ М.Т. Арсеньева.- М.: Медицина, 1977. 230с.

11. П.Артюх, В.М., Сроки осеменения высокопродуктивных коров после отела / В.М. Артюх, A.M. Чомаев // Зоотехния. 2004. - № 6. - С. 24-26.

12. Бабышева Л.Б. Содержание иммуноглобулинов в плазме крови свиней в разные фазы полового цикла/ Л.Б. Бабышева // Бюл. ВНИИ физиологии, биохимии, питания сельскохозяйственных животных. -1984. Вып.2 -С. 48-50.

13. Бабышева, Л.Б. Связь имунных и гормональных факторов в регуляции воспроизводительной функции свиноматок/ Л.Б. Бабышева: Автореф. дисс. канд.биол.наук. Боровск. - 1985. - 23 с.

14. Баландин А.Д. О комплексном микроскопическом исследовании вагинальных мазков/ А.Д. Баландин, Н.П. Несмеянова // Акушерство и гинекология. 1955. - N 4 - С. 73-76.

15. Баталии, Е.Ю. Способы выявления оптимального времени осеменения коров и телок / Е.Ю. Баталин.- Омск, 1993. 46 с.

16. Бахитов К.Н. Особенности проявления воспроизводительной функции коров на молочном комплексе // Зоотехния.-1995.-№8.-С. 24-27

17. Белов, А.Д. Применение радиоиммунологического метода определения прогестерона в молоке и сыворотке крови для ранней диагностики стельности у коров: Метод, указания / А.Д. Белов.- М: MB А, 1988.-28 с.

18. Бобылев И.Ф. Концентрация прогестерона в сыворотке крови кобыл/ И.Ф. Бобылев //Ветеринария. 1985. - N 8 - С. 58-59.

19. Братанов, К. Теория и практика воспроизведения животных / К. Братанов.- М.: Колос, 1984.-272 с.

20. Бриль Э.Е. Диагностика и терапия нарушений половой функции коров с использованием гормонов/ Э.Е. Бриль //Сельхоз. биология. -1988. -N6.-С. 35-37.

21. Буйко, А.Н. Условия среды половых проводящих путей кобыл при созревании фолликула, после овуляции и во время жеребости/ А.Н. Буйко // Труды ВНИИК: Работы по физиологии лошади. 1960 (1961). - Т.23. - 57-67.

22. Бухарин, О.В. Иммунологические лабораторные методы исследования/ О.В. Бухарин. Оренбург, 1972 - 97 с.

23. Васильева, К.Н. Физико-химические изменения слизи у коров в период охоты и связь их с оплодотворенностью / К.Н. Васильева: Автореф. дисс. канд.биол.наук. Москва - Кузьминки, 1957. - 15 с.

24. Васильева, К.Н. Физико-химические изменения слизи у коров в период охоты / Васильева К.Н. // Повышение плодовитости сельскохозяйственных животных. М.: Сельхозиздат, 1959. - С. 7079.

25. Велиток, И.Г. Воспроизводство. Ликвидация яловости / И.Г. Велиток.- М.: ВДНХ, 1990,- 17с.

26. Вершигора, А.Е. Общая иммунология / А.Е. Вершигора// Высшая школа: Киев, 1990.-523с.

27. Володин, В. А. Лечение коров при задержании последа и эндометритах / В.А. Володин// Сб.науч. тр. РСХИ, 1970.- вып.21.-С.115-118.

28. Володин В.А. Особенности проявления возбуждения у свиней / В.А. Володин//Свиноводство.-1978.-№12.-С. 21-23.

29. Володин В.А. Влияние сроков сервис-периодана физиологическое состояние и воспроизводительные свойства коров/ В.А. Володин, М.В. Саликова// Сб. науч. тр.- Рязань, 1995.- С. 18-20.

30. Володин В.А. Сроки осеменения коров после отела / В.А. Володин // Молочное и мясное скотоводство.-2001.-№6.-С. 25-26.

31. Волосков, П. А. Борьба с бесплодием сельскохозяйственных животных/ П.А. Волосков. М.: Сельхозгиз, 1940. - 224 с.

32. Волосков П.А. Клинико-цитологический метод определения фаз полового цикла кобыл/ П.А. Волосков // Советская ветеринария. -1939. N4-C. 59-64.

33. Волосков П.А. Охота у кобыл и методы определения овуляции/ П.А. Волосков // Коневодство. 1936. - N 10. - С. 47-54.

34. Волосков П.А. Физико-химические свойства слизи/ П.А. Волосков // Проблемы животноводства. 1940. - N 3. - С. 48-52.

35. Волосков, П.А. Основы борьбы с бесплодием рогатого скота / П.А. Волосков М: Сельхозгиз, 1960.-65 с.

36. Волынцев, А. Воспроизводство сельскохозяйственных животных и пути его улучшения / А. Волынцев // Наше племдело. 2000. - № 3-4.-С. 42-44.

37. Габриэлян, М. Изменение биохимических и морфологических показателей крови коров в зависимости от физиологического состояния / М. Габриэлян // Зоотехния. 2001. - № 7.- С .42-44.

38. Газенсон Л. Б. О механизме действия секреторных иммуноглобулинов А-антител / Л.Б. Газенсон // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1980. - №11. - С. 37-42.

39. Галочкин В.А. Иммунобиотехнологический подход к регуляции репродуктивной функции, обмена веществ и продуктивности животных / В.А.Галочкин //Сельскохозяйственная биология. -1944.-№ 2. С.3-19.

40. Генес С.Г. Современные данные о механизме действия половых гормонов / С.Г. Генес // Акушерство и гинекология. 1971. - №7. -С. 7-12.

41. Герасимов И.Г. Некоторые биохимические показатели крови в динамике менструального цикла женщин / И.Г. Герасимов // Акушерство и гинекология. 1994. - Т. 20 - № 5. - С. 166-168.

42. Говалло, В.И. Иммунология репродукции / В.И. Говалло. М.: Медицина, 1987. - 358 с.

43. Гончаров В.П. Влияние иммунологических факторов на плодовитость кобыл / В.П. Гончаров // Сб.н.тр. МВА, 1978. Т.99. -С. 34-37.

44. Гончаров, В.П. Влияние кратности осеменения в период охоты и время овуляции на оплодотворяемость коров / В.П. Гончаров //Сб. науч. тр.: Актуальные проблемы ветеринарной науки. М, 1999. -С.31-32

45. Гордон, А. Контроль воспроизводства сельскохозяйственных животных /А. Гордон М.: Агропромиздат, 1988. - 415 с.

46. Горев, Э.Л. Восстановление репродуктивной функции и аспекты ее регуляции у коров после родов / Э.Л. Горев.-Душанбе: Дониш, 1981.-339с.

47. Горевит, Р.К. Оценка напряженности иммунного ответа у крупного рогатого скота/ Р.К. Горевит // Доклады ВАСХНИЛ.-1991.- №9. -С.39-42.

48. Горбунов Ю.А. Рефрактометрический способ определения оптимального срока осеменения у коров/ Ю.А. Горбунов // Животноводство. 1995. -№ 9. - С. 12-14.

49. Гофман Г.Е. О группоспецифических особенностях выделений влагалища / Г.Е. Гофман, М.Г. Колмеровский //Акушерство и гинекология. 1960. - № 4 - С. 110-112.

50. Григо Э. Н. Послеродовая реабилитация коров / Э. Н.Григо // Вестник ветеринарии.- 1990.-№4.- С. 23-28.

51. Грищенко В.И. Роль цервикального фактора в репродукции человека / В.И. Грищенко //Акушерство и гинекология. 1981. - N 10.-С. 3-10.

52. Губанова, В.П. Иммунология воспроизведения / В.П.Губанова, Н.М. Решетникова,- София, 1978.-572с.

53. Гугушвили Н.Н. Иммунобиологическая реактивность коров и методы ее коррекции/ Н.Н. Гугушвили//Ветеринария.-2003.-№12.-С. 28-30.

54. Денисенко В.Н. Активность лизоцима в биологических жидкостях крупного рогатого скота в норме и при патологии / В.Н. Денисенко // Сельскохозяйственная биология. 1995 - № 6. - С. 129-135.

55. Денисенко В.Н. Бактерицидная активность сыворотки крови телят в онтогенезе / В.Н. Денисенко // Ветеринария. 1976. - № 10. - С.38-40.

56. Денисенко В.Н. Показатели местного иммунитета и факторы естественной резистентности верхних дыхательных путей крупного рогатого скота при инфекционном ринотрахеите / В.Н. Денисенко // Сельскохозяйственная биология. 1991. - № 6. - С. 125-129.

57. Денисенко В.Н. Специфические и неспецифические факторы защиты при инфекционном ринотрахеите и аденовирусной инфекции телят / В.Н. Денисенко //Докл. ВАСХНИЛ. 1990. - N 3 -С. 48-51.

58. Денисова С.В. Характеристика и биологическая роль секретов половых путей самок / С.В. Денисова: Автореф. дис. канд.биол.наук. Витебск. - 1968. - 23 с.

59. Дмитриева Л.В. Изменение величины рН в половых органах мышей в течение эстрального цикла и ранних сроков беременности / Л.В. Дмитриева Л.В. //Акушерство и гинекология. 1971. - N 1. - С.69-70.

60. Добротина Н.А. Лизоцим как модулятор иммунологических реакций / Н.А. Добротина // Вопр. мед.химии. 1987. - Т.ЗЗ. - Вып.4.- С.63-66.

61. Дозорцева, Г.Л. Биологические и биохимические защитные факторы влагалища. Минск, 1948. - 120 с.

62. Дубоссарская З.М. Взаимосвязь иммунного, гормонального гомеостаза и системы гемостаза при нормальном менструальном цикле / З.М. Дубоссарская // Акушерство и гинекология. 1981. - N 7. - С. 63-65.

63. Дьяконов, Е.Ф. Содержание гонадотропных гормонов в сыворотке крови коров в течение полового цикла, после обработки СЖК и электростимуляции / Е.Ф. Дьяконов: Автореф. дис. канд. биол.наук.- Л.- Пушкин, 1967,- 18 с.

64. Ельчанинов, В.В. Регуляция репродуктивной функции у коров и телок / В.В. Ельчанинов: Автореф.дис. докт. биол. наук. ВИЖ, 1972.-45 с.

65. Жаркин В.В. Изучение процессов воспроизводства крупного рогатого скота в связи с овуляцией и секрецией половых путей / В.В. Жаркин: Автореф. дисс. канд.биол.наук. ВНИИЖ, Дубровицы. - 1967. - 23 с.

66. Жаркин, В.В. Инструментальный метод определения оптимального срока осеменения коров в период течки и охоты /В.В. Жаркин // Труды Белорусского НИИ животноводства Жодино ,1968. - Т. 6. -С. 49-53.

67. Животков, Х.И. Основы осеменения лошадей / Х.И. Животков. М.: Сельхоз- гиз, 1952. - 368 с.

68. Животков, Х.И. Основы повышения плодовитости коров / Х.И. Животков, М: Колос, 1970.- 83с.

69. Жильцов, Н.З. Новое в биологии воспроизведения сельскохозяйственных животных / Н.З. Жильцов // Зоотехния.-№ 111999,- с.31-32

70. Жуковская Н.А. К вопросу о неспецифическом защитном действии лизоцима / Н.А. Жуковская, Т.Н. Ликина //Антибиотики. 1966. -Т.Н.-N10.-С. 920-924.

71. Игумнов, Г.А. Некоторые гистоморфологические и гистохимические показатели полового тракта небеременных кобыл / Г.А. Игумнов, В.Г. Черных // В кн. Физиология продуктивности животных в условиях Забайкалья. -Улан-Удэ, 1982. С. 131-136.

72. Кабак, Я.М. Практикум по эндокринологии / Я.М. Кабак. МГУ, 1968.-275с.

73. Казеев, Г. Учение о половом цикле теоретическое обоснование организации искусственного осеменения коров / Г. Казеев // Животновод для всех. - 2002,- № 7-8.- С. 10-12.

74. Калашников Н.П. Регуляция обмена воды и электролитов в организме телок / Н.П. Калашников: Автореф. дис. канд. биол.наук.-Боровск,1985.- 18с.

75. Каликштейн Д. Б. Методы изучения кристаллизации жидкостей / Д. Б. Каликштейн // Клин мед.- 1990,- N 4,- С. 28-31.

76. Камакин Н. Ф .Закономерности кристаллизации в патодиагностике / Н. Ф. Камакин // Клин. лаб. диагн-ка.- 2002.- N 10.- С. 3.

77. Карташова, Г.Н. Значение микроструктуры цервикальной слизи коров как фактора готовности матки к осеменению и защитного биологического барьера/ Г.Н. Карташова: Автореф. дис. канд. биол. наук.- Воронеж,1992.- 25с.

78. Качанов Н.Е. Показатели ионного состава цервиковагинального секрета у коров / Н.Е. Качанов //Тр. Коми филиала АН СССР. -1982.-N55.-С. 84-91.

79. Кедров, В.К. Борьба с яловостью и бесплодием сельскохозяйственных животных./ В.К. Кедров,- М: Колос, 1956. -126 с.

80. Ключникова, Н.Ф. Гибель эмбрионов причина перегулов у коров / Н.Ф. Ключникова // Труды Дальневосточного НИИСХ. - Хабаровск, 2002.-20с.

81. Козлов С.А. Коневодство/ С.А.Козлов, В.А. Парфенов,- Санкт-Петербург, 2004.-365с.

82. Козлов С.А. Влияние возраста на репродуктивные способности кобыл владимирской породы/ С.А. Козлов, С.С. Маркин// Искусственное осеменение лошадей истоки биотехнологии в животноводстве. -Дивово, 2004. - С. 87-88.

83. Козлов, Г.Г. Определение факторов местной защиты матки и влияние на них препаратов, применяемых внутриматочно при лечении эндометритов у коров/ Г.Г. Козлов, Б.А. Акназаров //Метод.указания. М. - 1989.

84. Кононенко А.П. Оценка состояния гонад по активности лизоцима во влагалищном транссудате / А.П. Кононенко, JI.T. Волкова // Вопр.охр.матер. и детства. 1984. - N 10. - С. 48-49.

85. Корнеев Г.И. Морфология местной иммунной системы слизистых оболочек различного строения и патологических процессов / Г.И. Корнеев //В кн. Актуал. вопросы теор. и клин, мед., 1974. С. 52-56.

86. Костомахин Н.М. Биохимический и иммунологический статус КРС в госплемзаводе «Нижнеиртышский» / Н.М. Костомахин// Проблемы сельского хозяйства Сибири, Омск.- 2000.- вып. 3.- С.55-57.

87. Костомахин Н.М. Возрастная динамика иммунокомпетентных клеток у телок черно-пестрой породы / Н.М. Костомахин, З.И. Фролова // Проблемы сельского хозяйства Сибири, Омск.- 1996.-вып. 2.-С.81-83.

88. Крейдина Х.М. Определение овуляции кобыл по вагинальным мазкам / Х.М. Крейдина, В.К. Кедров //Тр. лаб. искус, осем. жив., ВИЖ. 1940. -Т.1.-С.270-277.

89. Крукнер Н.И. Протеинкеназные системы плаценты при физиологической и осложненной беременности / Н.И. Крукнер, Т.Н. Погорелова// Акушерство и гинекология.-№ 1.-2005.-С.6-8.

90. Кудряшов А.Г. Картина крови и некоторые физиологические показатели у кобыл в период полового цикла / А.Г. Кудряшов, А.В. Шилова//Доклады ТСХА. 1969. - Вып. 151. - С. 203-208.

91. Кузнецов Е.В. Взаимосвязь иммунобиологического статуса мясных коров с их репродуктивными способностями/ Е.В. Кузнецов: Автореф. дис.канд.биол. наук. -Троицк 2002.- 19 с.

92. Кульберг, А. Я. Иммуноглобулины как биологические регуляторы / А.Я. Кульберг. М.: Медицина, 1975.- 123 с.

93. Курочкин Б.И. Об антимикробных свойствах цервикальной слизи беременных женщин / Б.И. Курочкин //Антибиотики. 1969. - N 10. - С. 929-930.

94. Лабинская, А.С. Микробиология / А.С. Лабинская //М.: Медицина. 1972. -545 с.

95. Лабинская, А.С. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / А.С. Лабинская// М.: Медицина.-2004 -. 576 с.

96. Ларсен Б. Репродуктивное здоровье / Б. Ларсен // М.: Медицина, 1988. 125с.

97. Лаукс, Л. Некоторые биохимические показатели крови коров в зависимости от функционального состояния половой системы / Л. Лаукс : Автореф. дис.канд.биол. наук. -Тарту 1972. - 19 с.

98. Лебедев С.Г. О сезонности размножения лошадей / С.Г. Лебедев //Сб.н.тр.: Пути повышения племенных, спортивных, рабочих и продуктивных качеств лошадей. ВНИИК. 1992. - С. 140-152.

99. Лебедев С.Г. Применение хорионического гонадтропина для повышения эффективности осеменения в коневодстве/ С.Г. Лебедев: Автореф. дис. канд. биол.наук. 1977. - 19 с.

100. Левин М.Я. Активность лизоцима, В-лизинов, бактерицидная активность сыворотки крови и спонтанная миграция лейкоцитов у спортивных лошадей в связи с возрастом и полом / М.Я. Левин // Сб.н.тр. ЛВИ. 1989. - N 98. - С. 17-21.

101. Леонова, И.Ф. Оптимизация времени осеменения коров / И.Ф. Леонова // Наука производству.- Гродно - 2001. - Ч. 2. - С. 132134.

102. Логвинов Д.Д. Полисахаридные соединения секреторных элементов влагалища коров / Д.Д. Логвинов, В.П. Бирюков // Ветеринария. 1973. - N 3. - С. 84-85.

103. Лонская И.А. Изучение факторов неспецифической защиты лошадей в возрастном аспекте / И.А. Лонская: Автореф. дис.канд.биол. наук. Санкт-Петербург. - 1993. - 19 с.

104. Макаров Н.В. Влияние препарата РИАЛ на организм лошади / Н.В. Макаров //Ветеринария. 1994.-N 1.- С. 48-50.

105. Марцишевская Р.Л., Исследование вагинального отделяемого / Р.Л. Марцишевская, И.П. Шабалова //Лаб. дело. 1990. - N 6. - С. 38-43.

106. Маслянко, Р.П. Формирование и биохимические характеристики иммунной системы крупного рогатого скота / Р.П. Маслянко: Автореф. доктор. биол.наук.-Львов, 1986.-32с.

107. Маслянко, Р.П. Иммунологические методы исследования в животноводстве / Р.П. Маслянко.- Львов, 1987.-45с.

108. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский //Новосибирск : Наука. 1983. - 38 с.

109. Медведев Б.И. Местный противоинфекционый иммунитет половой системы женщины / Б.И. Медведев, В.Ф. Долгушина //Акушерство и гинекология. 1993. - N 4. - С. 7-9.

110. Меньшиков, В.В. Лабораторные методы исследования в кинике/ В.В. Меньшиков, Л.Н. Делекторская, Р.П. Золотницкая.-М.: Медицина, 1987.-368 с.

111. Милованов, В.К. Биология воспроизведения сельскохозяйственных животных. / Милованов В.К. М: Сельхозгиз, 1962. - 567 с.

112. Мирская Л.М., Охота и овуляция у кобыл / Л.М. Мирская, А.А. Зальцман//Успехи зоотехн. науки. 1935. -N 1. - С. 157-168.

113. Митрофанов М.Д. Содержание лизоцима у здоровых беременных женщин / М.Д. Митрофанов // Акушерство и гинекология. 1974. N 2. - С.61-62.

114. Михайленко Е.В. Специфические и неспецифические иммуномодуляторы в повышении эмбриональной выживаемости крупного рогатого скота/ Е.В. Михайленко: Автореф. канд. биол.наук.-Дубровицы.- 2000.-19с.

115. Меркурьева Е.К. Генетика с основами биометрии / Е.К. Меркурьева, Г.Н Шангин-Березовский.- М.: Колос, 1983. 400 с.

116. Мутовин В.И., Определение естественной резистентности организма животных / В.И. Мутовин, В.И. Митюшников // Ветеринария. 1973. - N 2. - С. 103-104.

117. Назаренко Т.А. Принципы и схемы стимуляции овуляции при бесплодии, обусловленном нарушением функции гипоталамогипофизарной системы / Т.А. Назаренко //Акушерство и гинекология. 1996. - N 5. - С. 46-49.

118. Назаров И.Н. Химия стероидных гормонов/ И.Н. Назаров, Л.Д. Бергельсон М.: Изд. АНН СССР, 1955. - 428 с.

119. Науменков А.И. Исследование шеечного секрета кобыл / А.И. Науменков // Тезисы докладов Всесоюзного научного совещания ВНИИК. 1989.

120. Науменков, А. Как определить момент осеменения кобылы/ А. Науменков// Коневодство и кон.спорт.- 1999.- N 4. С. 8-9

121. Нежданов А.Г. Эндокринная функция яичников и щитовидной железы у коров после родов/ А.Г. Нежданов, К.А. Лободян// Ветеринария.-№3.-2005 .-С.З 6-3 9.

122. Неустроев М.П. Оценка естественной резистентности лошадей / // М.П. Неустроев.- Метод.рекоменд.НИИСХ Якутии. Новосибирск, 1995. - 13 с.

123. Новиков Б.В. Основные параметры иммунного статуса клинически здоровых свиней / В.В. Дмитриенко, Б.В. Новиков //Ветеринария. 1993. - N 2. - С. 22-25.

124. Павлов, A.M. Изобретения по искусственному осеменению / A.M. Павлов // Зоотехния. 2000. - № 8. - С. 28-29.

125. Паршутин Г.В. О переживаемости сперматозоидов в матке кобыл / Г.В. Паршутин // Коневодство. 1952. - N 9,- С.13-15.

126. Паршутин Г.В. Размножение / Г.В. Паршутин //В кн.: Книга о лошади. М.: Сельхозгиз, 1960. - Т. У. - С. 244-280.

127. Петров, Р.В. Иммунология / Р.В. Петров // М: Медицина, 1982.-416с.

128. Петрова А.Т. Изменение электролитов крови коров в зависимости от физиологического состояния/ А.Т. Петрова: Автореф. дис.канд.биол.наук. Киев. - 1970. - 20 с.

129. Петрова Е.Н. Диагностическое значение цитологического метода исследования влагалищного содержимого при дисфункции яичников / Е.Н. Петрова //Лабораторное дело. 1955.- N 4. -С. 3-6.

130. Петруша, Е.З., Воспроизводительные функции коров при повышенном уровне освещения / Е.З. Петруша, // Научно-технический бюллетень Укр. НИИ животноводства. Харьков.-1988.- № 50.-С. 53-55

131. Подвалюк, Д. Использование ультразвука для контроля за фолликулогенезом у кобыл с целью определения оптимальноговремени их осеменения / Подвалюк Д. //Вет. мед. Украины. 2001. -№2.-С. 42-43.

132. Покровский, Б.В. Регуляция обменных процессов в организме / Б.В. Покровский.- М.: Медицина, 1969.-250с.

133. Полищук, В.П. Физиологические, цитологические и некоторые биохимические изменения шеечно-влагалищной слизи у коров в норме и патологии / В.П. Полищук: Автореф. дис.канд.биол.наук. -Киев. 1966. - 20 с.

134. Полянцев Н.И. Применение гормонов в борьбе с бесплодием коров / Н.И. Полянцев , В.И. Максимов; П.Б. Цыганков // Животноводство.- 1984.- Т. И. С. 58-60.

135. Полянцев Н.И. Формирование биоритма воспроизводительной функции коров после отела/ Н.И. Полянцев // Зоотехния.- 1990.- Т. 9.- С. 60-61.

136. Полянцев Н.И. Проблемы диагностики и устранения нарушений овуляции у коров/ Н.И. Полянцев // Материалы Всерос.науч.и учеб.-метод.конф. по акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных. -Воронеж, 1994. С. 118-120.

137. Помаз, И.И. Связь между феноменами полового цикла и оптимальным временем осеменения коров/ И.И. Помаз: Авотреф. дис. канд.биол. наук.- Киев, 1979,- 27с.

138. Попков В.П. Изменение лейкоформулы крови клеток секрета слизистой родополовых желез при созревании фолликулов у кобыл/ В.П. Попков //Коневодство. 1952. - N 10. - С. 28-31.

139. Прокофьев, М. И. Регуляция размножения сельскохозяйственных животных / М. И. Прокофьев.- JI: Наука ,1983.-264с.

140. Пронин Б.Г. Клиника неполноценных половых циклов при климатическом и алиментарном бесплодии у лошадей / Б.Г. Пронин: Автореф.дис.канд.ветер.наук. Казань, 1960. - 45 с.

141. Растяпин И.Т. Ранняя диагностика жеребости по вагинальным мазкам / И.Т. Растяпин, Н.М. Рязанцева //Коневодство и конный спорт,- 1961.-N4.-С. 16-17.

142. Ройт, А. Основы иммунологии/ А. Ройт.-М.: Мир, 1990.-327с.

143. Савельева, Г.М. и др. Значение иммунологических исследований в акушерстве и гинекологии / Г.М. Савельева. Ташкент: Медицина, 1981.-176с.

144. Самбуров Н.В. Воспроизводительная функция, иммунологический статус черно-пестрого скота голштинской популяции: контроль и коррекция/ Н.В. Самбуров: Автореф.дис.докт.биол.наук. -Дубровицы, 2004-46с.

145. Свечин, К.Б. Коневодство./ К.Б. Свечин М.: Колос, 1992-271с.

146. Сеидов, М.К. Проблемы воспроизводства животных / М.К. Сеидов, М.-1953.-32с.

147. Сивожелезова, Н.А. Биоэлектрическая активность матки, некоторые показатели крови и свойства шеечной слизи у овец в период половоготракта / Н.А. Сивожелезова: Автореф.дис.канд.биол.наук. Троицк,1974-23с.

148. Скаткин, П.Н. Половая цикличность лошадей/ П.Н. Скаткин //Коневодство,- 1948. N 4. - С. 7-13.

149. Скаткин, П.Н. Размножение лошадей / П.Н. Скаткин // Коневодство. -М.: Сельхозгиз, 1954.-С.200-240.

150. Скопец, Б.Г. Эффективность воспроизведения коров в связи с состоянием иммунной системы в период, предшествующий осеменению/ Б.Г.Скопец// Профилактика незараз, болезней у коров. Таллин,1988,с.126-127

151. Скотт, Р.С. Механизм действия ингибина/ Р.С. Скотт, Х.Г. Бергер. -М, 1985.- 25 с.

152. Слободяник В.И. Локальные факторы защиты молочной железы коров от инфекции / В.И. Слободяник // Ветеринария.- 1998,- N 11. -С. 32-34

153. Смирнова, Л.Л. Воспроизводительные способности высокопродуктивных коров в связи с оптимальными сроками осеменения / Л.Л. Смирнова: Автореф. канд. биол.наук.-Дубровицы, 1987.-28с.

154. Смородинцев А.А. Теория и практика индукции интерферона / А.А. Смородинцев: Автореф.дис.кан.мед.наук. Л., - 1969. - 19с.

155. Соколовская И.И. Гематогенитальные барьеры и воспроизведение сельскохозяйственных животных / И.И. Соколовская // Животноводство. -1976.-N 17- С.52-61.

156. Соколовская И.И. Генетическая обусловленность и регуляция иммунного ответа в воспроизводстве / И.И. Соколовская // Животноводство,- 1985.-N 7.-С.41-43.

157. Соколовская И.И. Изменение состава и свойств цервикального секрета у коров / И.И. Соколовская //Сб. науч. тр. ВНИИ животноводства, 1962.- Т.ХХ1У,- С. 312-331.

158. Соколовская И.И. Иммунная система регулятор воспроизведения/ И.И. Соколовская //Зоотехния.-1994.-N 1.- С.24-26.

159. Соколовская, И.И. Детектор охоты у коров / И.И. Соколовская // Сельское хозяйство. 1971. - № 1,- С. 28-29.

160. Соколовская, И.И. Иммунология воспроизведения животных / И.И. Соколовская, В.К. Милованов,- М: Колос, 1981.- 264с.

161. Соколовская, И.И. Методические рекомендации по иммунологии воспроизведения/ И.И. Соколовская, А.В. Бронская, А.Д. Субботин.-Дубровицы.- 1985.-79с.

162. Соколовская, И.И. Методические рекомендации по определению оптимального для осеменения периода охоты у коров и телок посвойствам цервикального секрета / И.И. Соколовская. Дубровицы, 1991.-24 с.

163. Соловьев, Н.А. Гормональная регуляция полового цикла у коров / Соловьев Н.А.: Автореф. дис.канд.биол.наук .- Воронеж, 1989.-21 с.

164. Солсбери, Г.У. Теория и практика искусственного осеменения коров в США / Г.У. Солсбери, Н.Л. Ван-Демарк- М: Колос, 1966.-482с.

165. Сопельник В.М. Изучение некоторых свойств цервикального секрета коров с целью совершенствования метода определения оптимального времени осеменения/ В.М. Сопельник : Автореф. канд. биол.наук.-Полтава, 1971.-18с.

166. Сохин, А.А. Прикладная иммунология / А.А. Сохин.- Киев: Здоровье, 1984.-315с.

167. Старцева Н.В. Изменение активности Т- и В- лимфоцитарных систем в течение менструального цикла / Н.В. Старцева, Ю.И. Шилов//Акушерство и гинекология.- 1998.-№ 5.-С. 18-20.

168. Степанов Г.С. Особенности гормональных взаимоотношений у кобыл на разных этапах цикла воспроизводства / Г.С. Степанов, Е.Л. Фомина, //Мат. XXIII конф. ЕАЖ.- Ленинград, 1982.-4с.

169. Степанова М.А. Содержание лизоцима и каталазы в молоке коров, больных лейкозом / М.А. Степанова, И.Ю. Маркевич //Ветеринарная наука производству. Т.21.- 1983.- С. 66-69.

170. Стефани Д.В. Секреторные иммуноглобулины и проблема местного иммунитета / Д.В. Стефани // Микроб.,эпидем., иммунобиол.- 1973.-N 12- С.7-12.

171. Строев Е.А. Биологическая химия / Е.А. Строев,- М.: Медицина, 1984.-С. 124-128.

172. Студенцов, А.П. Борьба с яловостью и бесплодием сельскохозяйственных животных / А.П. Студенцов. М: Сельхозгиз, 1956. - 158 с.

173. Студенцов А.П. Ветеринарное акушерство и гинекология / А.П. Студенцов. М.: Колос, 1970. - 520 с.

174. Субботин А.Д. Практика работы лучших операторов искусственного осеменения коров в Подмосковье/ А.Д. Субботин // Зоотехния,- 2001.-№5.-С.29-31.

175. Субботин, А.Д. Иммунобиологические закономерности и совершенствование технологии воспроизведения сельскохозяйственных животных / А.Д. Субботин: Автореферат дис. док. биол. наук. Дубровицы, 1998. - 53 стр.

176. Субботин, А.Д. Научно-практическое руководство по улучшению результативности искусственного осеменения коров и телок / А.Д. Субботин. ВНИИЖ. - Дубровицы, 2003. - 46 с.

177. Сухих В.Ф. Нервно-гуморальном регулировании полового процесса у коровы (эндокринные исследования): Автореф. канд. биол.наук.- Ленинград-Пушкин, 1966.-32 с.

178. Сысоев А.А. Влияние водного и солевого обмена на оплодотворяемость коров/ А.А. Сысоев, С.М. Подъяблонский // Научные труды Курского СХИ, 1972.- С.-22-25.

179. Сысоев, А.А. Основы физиологии репродуктивной системы коров/ А.А. Сысоев,-Харьков, 1968.-253с.

180. Сысоев, А.А. Физиология размножения сельскохозяйственных животных / А.А. Сысоев-М: Колос, 1978. 360 с.

181. Тарасевич А.Ю. Бесплодие сельскохозяйственных животных /

182. A.Ю. Тарасевич. М.: Сельхозгиз, 1936.-156с.

183. Трунова Л.А. Иммунология репродукции / Л.А. Трунова. -Новосибирск: Наука, 1984 158 с.

184. Туников Г.М. К вопросу ветеринарии сельскохозяйственных животных/ Г.М.Туников, В.В. Коченов// Сб. науч. тр. РГСХА.-Т2.-Рязань, 1997.-С.13-16.

185. Туников Г.М. Перспективы развития животноводства в Рязанской области в начале 21 века/ Г.М. Туников // Современное состояние и стратегия развития АПК Рязанской области на рубеже 21 века.-Рязань,- 2001.-С. 11-13.

186. Туников, Г.М. Теория и практика скотоводства / Г.М. Туников,

187. B.В. Калашников, В.А. Захаров. Рязань, 1996.-211 с.

188. Уорд A.M. Иммунохимия в клинической лабораторной практике / . A.M. Уорд М.: Медицина, 1981. - С. 238.

189. Усманов, А. Оценка различных способов выбора времени искусственного осеменения коров / Усманов А.: Автореферат дис. канд. биол. наук.- Харьков, 1998.-25 с.

190. Утянов, A.M. Роль иммуноглобулинов крови в репродуктивной функции коров/ A.M. Утянов, И.А. Заманбеков // Вестник с.х.науки Казахстана. 1994.-N 6.-С. 117-121.

191. Утянов, A.M. Корреляция естественной резистентности и воспроизводительной функции коров с применением овариоцито токсической сыворотки (ОСЦ) / A.M. Утянов . Семипалатинск, 1992. - 50 с.

192. Фомина, Е.Л. Воспроизводительная функция орловских и русских кобыл в условиях Дубровского конного завода / Е.Л. Фомина // Сб.науч.тр.: Интенсификация селекции и технологии выращзивания лошадей. ВНИИК. - 1988. - С.190-201.

193. Фомина E.JI. Осеменение на ипподроме/ E.JI. Фомина, С.С. Сергеенко, JI. Кострюкова //Коневодство и конный спорт.-№ 5.-С.25-26.

194. Фомина Е.Л. Физиологические концентрации прогестерона в сыворотке крови кобыл на разных стадиях нормального цикла воспроизведения / Е.Л. Фомина, М.Ю. Алексеев // Сб.науч.тр.ВНИИК. 1986. - С.55-56.

195. Фримель, X. Основы иммунологии/ X. Фримель, И.Брок//М: Мир, 1986.- 254с.

196. Фугасова И.П. Диагностика и лечение высокопродуктивных коров, больных скрытым эндометритом / И.П. Фугасова: Автореф. дис.канд.вет. наук. М. - 1990. - 17 с.

197. Хантер, Р.Х.Ф. Физиология и технология воспроизводства домашних животных / Р. Хантер. М: Колос, 1984.- 364с.

198. Храброва Л.А. Цитологическая картина влагалищной слизи в период жеребости / Л.А. Храброва // Сб.науч.тр. ВНИИК: Биологические основы повышения эффективности коневодства. -1996.-С. 11-16.

199. Храброва Л.А. Цитологический мониторинг влагалищной слизи кобыл в динамике полового цикла / Л.А. Храброва // Сб.науч.тр. ВНИИК: Биологические основы повышения эффективности коневодства. 1996. - С. 5-11.

200. Чернов В.И. Изучение течкового цикла по влагалищным мазкам / В.И. Чернов //Проблемы животноводства. 1933. - N 5. - С. 102-104.

201. Чернохвостова, Е.В. Количественное определение иммуноглобулинов / Е.В. Чернохвостова. М.: Медицина, 1975. - 25 с.

202. Черных В.Г. Гистоморфология полового тракта кобыл (при различных физиологических состояниях) / В.Г. Черных //В кн.:

203. Исследования по морфологии и физиологии сельскохозяйственных животных. Благовещенск, 1981. - С. 49-52.

204. Черных В.Г. Гистохимия лизина и гистидина в слизистой полового тракта кобыл / В.Г. Черных //Науч.-техн. бюл. ин-та экспер.вет.Сибири и Дальнего Востока. 1990. - N 1. - с.28-30.

205. Черных В.Г. Содержание общего белка в тканях полового тракта кобыл / В.Г. Черных // В кн.: Исследования по морфологии и физиологии сельскохозяйственных животных. Благовещенск. -1981.

206. Чернышов И.Л. Пути совершенствования отбора и осеменения кобыл доноров эмбрионов / И.Л. Чернышов: Автореф.дис.канд.биол. наук. Дивово. - 1990.-19 с.

207. Чомаев, A.M. Молочная продуктивность и сроки осеменения коров / A.M. Чомаев// Зоотехния. 2001. - № 7. - С. 25-26.

208. Чумаченко В.Е. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных / В.Е. Чумаченко.- М.: Урожай, 1990. 135 с.

209. Шабалин В.Н., Аутогенные ритмы и самоорганизация биологических жидкостей / В.Н. Шабалин, С.Н. Шатохина //Бюл. эксп. биол. и мед. 2001. - N 10. - С. 364-371.

210. Шаталов П.И. К вопросу о половом цикле у лошадей и коров по микроскопической картине влагалищного отделимого / П.И. Шаталов //Вет. зоотехн.вестник. - 1930. -Вып 2. - N 10. - С.18-26.

211. Шварцман, Я.С. Местный иммунитет / Я.С. Шварцман, Л.Б.Хазенсон. -Л.: Медицна, 1978. 224 с.

212. Шипилов B.C. Интенсификация воспроизводства сельскохозяйственных животных/ B.C. Шипилов // Животноводство. 1985. -N 10. - С. 27-29.

213. Шипилов B.C. Рациональный способ искусственного осеменения ремонтных телок /B.C. Шипилов, И. Шевякова //Молочное и мясное скотоводство. -1991. N 2. - С. 27-28.

214. Шипилов, B.C. Физиологичекие основы профилактики бесплодия коров / B.C. Шипилов М: Колос, 1977,- 486 с.

215. Шипилов B.C. Основы повышения плодовитости животных/ B.C. Шипилов, Копытин В.К.- Смоленск: DELO, 1994. 159 с.

216. Эпштейн Н.А. Свободный иммунореактивный 17в- эстрадиол в молозиве кобыл / Н.А. Эпштейн //Ветеринария. 1977. - N 4. - С. 89-90.

217. Эрнст, Л.К. Промышленное производство молока / Л.К. Эрнст. -Л: Колос, 1978.-235с.

218. Юдин М.Ф. Физиологическое состояние организма коров в разные сезоны года / М.Ф. Юдин // Ветеринария.-2001.-№2.-С.38-40.

219. Adams G.P. Reproductive physiolody of the nonpregnat mare : ar overview and update / G.P. Adams, W.T.K. Bosu //Veter. Clin. N. America: Eguine Pract. 1988. - V.4. - N 2. - P. 161-176.

220. Alexander S.L. Radioimmunoassay and invitro biossay of serum LH throughout the eguine oestrous cycle / S.L. Alexander, C.H.G. Jrvine //J.Reprod.Fert. 1992. - Suppl.23. - P.253-260.

221. Alexander S.L. Secretion rates and chortterm patterns of gonadotrophin-relisihg hormone, FSHand LH throughout the perioerilatory period in the mare / S.L. Alexander, C.H.G. Jrvine //J.Endocr.- 1987. N 114. - P.351-352.

222. Allen N.E. Peripherae bood levels of progesterore in pony maves during the oesbrus cycle and larly pregnancy / N.E. Allen, J.C. Hadrey //Vet.Rec. 1973. - N 93. - P.74.

223. Allen W.R. The use of synthetic analogues of prostaglandins for inducing luteolysis im mares / W.R. Allen, M.J. Cooper //Ann.Biol.Anim.Bioch.Biophys. 1975. - N 15. - P.461-469.

224. Allmers, E. Brunkstmerkmale und ultrasonoqraphisch fesgestellte Ovulation zur Ermittlung des optimalen Besamungs zeitpunktes / E. Allmers Hannover, 1999.-143 s.

225. Anderson, G.W. Column chromatography and electrophoresis of bovine uterine lumenal proteins collected during the estrous cycle/ G.W.Anderson, F.C.Gwazdauskas, M.B.Guise // Anim. Reprod. Sc,1985.- T. 9. N 1, p. 11-24.

226. Andrews, F.N. Estrus, oirilabion and related phenomena in the mare /

227. F.N. Andrews, F.F. Mckenzie // Bull.MO.Agric.exp.Sth.- 1941.-N 329.-p.61-64.

228. Anon, J. "Wired" Cows teli estrous / J. Anon // Farm Jnd. News.1986.-T. 19.-№ 2.-P. 66.

229. Arthur, G.H. Cinical observations on reproduction in a pony stud /

230. G.H. Arthur, W.E. Allen //Eguine Veterinary J. 1972. - N 4. - p. 109117.

231. Arya, S.P. Total ash content of cervico-vaginal mucus during heat and early pregnancy in Jersey cows/ S.P.Arya, Y.CJain // Indian J. anim. Sc,1987.- T. 57.-N8.-p. 831-833

232. Asbury, A.C. .Immunoglobulins in uterine secretions of mares with differing resistonce to endometritis / A.C.Asbury // Theriogenology.-1980.-V.14.-N3.-p.299-308.

233. Bade, R. On repeat breeding in dairy heifers / R. Bade // Uppsala. -2002, 120c.

234. Baruah, P.M.Studies on the effect of serum protein and its fractions on anoestrous heifers/P.M.Baruah,J.C.Dutta,C.K.Rajkonwar // Indian J. anim. Res, 1988.- T. 22. -N 2. P. 65-68

235. Bazala, E. Vyusziti pristroje estral prodeteka rije u stout / E. Bazala // Naschov. 1987.- T. 47. - № 11.- S. 453.

236. Belling Т. H. Jr. Postovulation breeding and related reproducktive phenomena in the mare / Т. H. Jr Belling //Eguine Ргакйсе.-1983в.- N 6.-P.12-19.

237. Belling Т.Н.Jr. Reproduction of the mare : A compenlium of published data / Т. H. Jr. Belling //Eguine Praktice. 1983a. - N 5. -P.13-17.

238. Belling, T.H.Jr. Surgery of the vulva madifications of the traditional Caslik's operation / Т. H. Jr. Belling //Veterinary. Medicine : Small Animal Linical. 1987.- N 78.-P.870-878.

239. Benson, M. Biotech may allow production of "super" breeds of animals/M. Benson//DVM, 1988,- T. 19. -N2. P. 23- 29.

240. Bergfelt, D.R. Circulating concentrations of immunorlactive inhibin and FSH during the estrous cycle of mares / D.R. Bergfelt //J.Eguine Vet.Sci. 1991. - V.l 1. - P.319-322.

241. Bienerstosk J. Mucosal immunity / J. Bienerstosk //Jn : The Mucosal immune sustem. Eg.by. F.J. Bourne. Martinus nighoff publiohers. -1981.-P.5-27.

242. Biggar, W.P. Hole of lysozyme in the microbicidal activity of rat alvcobar macrophades / W.P. Biggar, J.M. Sturgess //Jnfect. Jmmunol. -1977.-N 16-P.974-982.

243. Bishnoi, B.L. Some studies on the physical characters of bovine cervical mucus during oestrus/ B.L. Bishnoi, K.K. Vyas, P.K. Dwaraknath// Indian veter. J, 1983.-T. 60. -N 9. P. 731-734.

244. Blue E. Chemotactic properties and protein of eguine uterine fluid / E. Blue //Am. J.Vet.Res. 1984. - N 45. - P.1205-1208.

245. Bratanov, K. Studies on the immunoglobulins in sec-retion of the female genital tract / K. Bratanov //Jmmunology of Reproduction. Pnoc.3 rd.int.Symp.-1978.- P.386-388.

246. Britt, J.H. Endocrinological screening of embryo donors and embryo transfer recipients: A review of research with cattle / J.H.Britt, L.C Holt.// Theriogenology, 1988; T. 29. N 1, P. 189-202.

247. D.K. Cytological and bacteriolodical examination of the maves endometrium / D.K. Brook //Eguine Vet.Set.-1985.- V 5. N 1,- P.16-22.

248. Bugalia, N.S. Biochemical studies on oestrual cervical mucus of fertile and infertile cows/ N.S. Bugalia, D.R. Sharma // Indian veter. J,1988,- T. 65.-N 2. -p.150-152.

249. C.H. van Niekerk Relationship between the morphology of and progesterone production by the corpus luteum of the mare / C.H. van Niekerk // J.Reprod.Fert.-1975.-Suppl.23.- P. 171-175.

250. Carcia, A. Monitoring follicular development in cattle by real time ultrasonography: a revieur / A.Carcia // Veterinary Record. Vol. 18. -1999.-P. 335-336.

251. Channing C.P. Levels of inhibin activity and an atretogenic factor (s) in follicular fluid harvested from viable and atretic mare follicles/ C.P. Channing //Jn.N.B.Schwartz et.al.: Dynamics of ovarian function. Raven Press.New York.-1981.- S.73-78.

252. Chipperfield, E. Effect of local infection and oral controception on immunoglobulin levels in cervical mucus / E. Chipperfield, B. Evans //Jnfect.a.immunol.-1975.-V 11.- N 2,- P.215-221.

253. Clapper, J.A. Estrual rise in body temperature in the bovine. 1.Temporal relationships with serum patterns of reproductive hormones/J.A. Clapper, J.S. Ottobre, A.C.Ottobre, D.L.Zartman // Anim. Reprod. Sc, 1990,- T. 23. -N 2. P. 89-98

254. Couto, M.A. Klinische, microbiologische und zytologische Untersuchung des Genitaltraktes bei der Stute im Pmrperium / M.A.Couto, D. Hughes //Dis.,Hannover.- 1987,- 76 c.

255. Covers, J. Some immunological propehties of human cervical and vaginal secretions / J. Covers, J. Girrard //Gynes.Jnvest.-1972.-V.3.- N 5-6.- P.184-194.

256. Cushman, R.A., Alteration of activation, grow and atresia of bovine preantral follicles by long term treatment of cows with estradiol / R.A.Cushman // Biol. Reprod. - 2001. - Vol. 65. - № 2. - P. 581-586.

257. Darwash, A.O. Oestrus in relation to peak oestradiol levels in ovariectomized Galloway/A.O. Darwash, G.E. Lamming, L.M. Hicking// Anim.Sc., 2001,- Vol.72.-pt2. P. 401-405.

258. Delwiche, M. Proc. of 39lh Annie dairy cattle day / M. Delwiche // Davis (Calif).-2000.-P. 11-16.

259. Das P. Mikronutrient status of dairy cattle / P. Das, S. Biswas// Indian J.anim.Sc.-2002.-Vol.72. N 2. - P. 171-173.

260. Day M.L. The strategic use of estradiol to enchance fertility / M.L. Day // J.anim.Sc., 2000.-Vol.78.- N3,- P.523-529/

261. Dev, S. Effect of biochemical characteristics of buffalo oestrual mucus on in vitro sperm migration/ S. Dev, G.R. Pangaonkar, R.K. Sharma, V.K. Gandotra // Indian J.anim.Sc.-1999.-Vol.69. N 5. - P. 313-315.

262. Diekman, M.A. Seasonal serum concentrations of melatonin in cycling and noncycling mares/ M.A. Diekman, W. Braun, D. Peter, D.Cook// J.anim.Sc.- 2002.-Vol.80,- N11.-P.2949-2952.

263. Dohi, H. Application of anautomatic recorder on standing behaviors to esttmate estrus period and optimum in semination time / H. Dohi // Anim. Sc. Techol. 2002. - Vol, 68. - № 8. - P. 774-779.

264. Donar В., et.al. Zpusob zystovani optimalniho udobi estru progrovideni inseminace plemenic a zazizeni kyeho provadeni //Пат.ЧССР., кл.45 п.,29/00 (AOIK), N 134121 1969.

265. Donar, B. Zpusob zystovani optimalniho udobi estru progrovideni inseminace plemenic a zazizeni kyeho provadeni / B. Donar // Пат.ЧССР., кл.45 п.,29/00 (AOIK), № 134121 -1969.

266. Donat, H. Estimation of immunoglobulins in the cerical mucus / H. Donat.// Immunology of Reproduction. Proc. 3rd. int.Symp.-1978.-P.398-402.

267. Dransfield, M. B. G. Short communication: electronic probe versus mille progesterone asaids for reproductive management of small dairy herds / M. B. G. Dransfield //Dairy Sc. 1999. - Vol. 82. - № 8.-P. 1742-1745.

268. Duszewska, A.M. Od inseminacjido klonovania bydla / A.M. Duszewska // Przegl. hodowl. 2000. - R. 68. - № 8. - S. 18-20.

269. Dutta, A. Micro mineral profiles during cyclic, postpartum anoestrus and repeat breeding cows in Lower Brahmaputra Valley of Assam/ A.

270. Dutta, В. Baruah, B.C. Sarmah, K.K. Baruah, D.N. Sarma, J.C. Dutta // Indian J.anim.Sc., 2000.- Vol.70.-N 7. P. 712-713

271. Elstein H. Cervical mucus changes and urinary hormone excretion patters in progestogen-treapatterns patients / H. Elstein //S.Afr. y.Obstet. Gynaec.-1970.-V.8.-P.2-9.

272. Elze, K. Ursachen und Vorbeuge von Fruchtbarkeit sstoruhgen bei der Stute / K. Elze //Monatsch. Veterinarmed.-1989.- V.44.-N 13.-S.466-468.

273. Engle, C.C. Free amino acids and protein concentrations in reprodictive tract fluids of the mare / C.C. Engle //Theriogenology -1984.-V.21.- N 6.- p.919-930.

274. Erhardt,G. Relations between milk production and parameters of the defence systems in the mammary gland of cows/ G. Erhardt, F. Meyer,

275. B. Senft//Vol. 1.- 1984.-p. 5-35.

276. Espey, L.L. Current Ststus of the Hypothesis That Mammalian ovulation Is Comparable to an Inflamatory Reaktion / L.L. Espey // Biology of Reproduktion.-1994.-N 50.-P. 233-239.

277. Evans, M.J. Serum concentration of FCH,LH and progesterone during the cestrous cycle and early pregnancy in the mare/ M.J. Evans,

278. C.H.G. Jrvine //J.Reprod.Fert.-1975.-Suppl. N 23.- P. 193-200.

279. Fitzgerald, B.P. Changes in LH pulse freguency and amplitude in intact during the transition into the breeding season/ B.P. Fitzgerald //J.Reprod. Fert.-1987.-N 19.- P.485-493.

280. Foster, J.P. Differential release of LH and FSH in cycle mares in nesponse to synthetic GHRH / J.P. Foster //J.Reprod.Fert.-1979.-N 56.-p.567-572.

281. Geschwind I.I. Dynamics of pituitary gonadotropin secretion/ Geschwind I.I.//Biol. Reprod. 1975. - Vol. 36. - № 2. - P. 19-34.

282. Ginther, O.J. Selection of the dominant follicle in cattle role of estradiol / O.J. Ginther // Biol. Reprod. 2000. - Vol. 63. - № 2. - P. 383-389.

283. Grae J.K. Klinische, mikrobiologische und zytologische Utersuchund des Genitaltraktes bei der Stute im Puerperium / J.K. Grae : Diss., Hannover.-l987.-76 c.

284. Gustafsson, H. Has a repeat bredder cow in the present lactatijn a hightr risk to become a htpeat breeder in the next lactatijn / H. Gustafsson // Abstr/14th. Jntern. congr. on animal reproduction. Stockholm. - 2000. -Vol. 2.-P. 100.

285. Haghes J.P. The relation of infection to infertility in the mare and stallion / J.P. Haghes, R.G. Loy // Eguine vet.J.-1975.- N 7.-p.l55-159.

286. Hansel, W. Control of ovarian function in domestic animals / W. Hansel, S. Echterkamp // Amer. Zool.-1972. P. 225-230

287. Hansel, W. Ovulation control in cattle / W. Hansel, W.Beal // In.Beltsville Symp.Agric. Res.3 Anim. Reprod.-1979.-Vol.3-P.91-l 10

288. Henricks, D.M. Plasma estrogen and progesterone levels in cows prior to and estrus / D.M. Henricks // Endocrinology.- 1984.- Vol.89.- P. 1350-1355.

289. Henson, P.M. The immunologic release of constituents from neutroplie leikocytes / P.M. Henson // J.Jmmunol.-1971.-N 107-P.1547.

290. Hughes D. The oestrous cycle of the mare / D. Hughes //J.Rep-rod.Fert.-1975.-Suppl.N 23.- P.161-168.

291. Hulka, J. The uterine cervix as a potential local anti body secretor / J. Hulka, J. K. Omran //Am.J.Obstet Gynes.-1969.-V.-104,- N 3 P.440-442.

292. Hurley, W.L. Estrous behaviour and endocrine status of dairy heifers with varied intakes of phosphorus/ W.L.Hurley, L.A. Edgerton, D. Olds, R.W.Hemken // J. Dairy Sc, 1982; T. 65. N 10, p. 1979-1986.

293. Hussein, A. M. Assey of lysozyme in the genital secretions of the female pig/ A. M.Hussein //Acta Veter.-1983.-T. 33.-№5/6.-P.277-285.

294. Jahn, J. Transvaginale Ultraschalluntersuchungen des bovinen Corpus luteum: Beziehungen zwischen sonographischem Befund und Funktionszustand sowie Lage von Graafschem Follikel und daraus resultierendem Gelbkorper / J.Jahn.- Hannover,1998.-160c.

295. Janal, P. The association betwcor changes in the in inrtravaginal electrical resistence and the in vitro measuremtts of vaginal mucus electrical resistvity in cattec / P. Janal // Anim. Reprod. Sc. 1993. - T.5. -P. 323-328.

296. Jaskowski J.M. Jnterrelationship beetween vaginal mucus resistance, rectal and vaginal temperature and preovulatory LH peak and ovulation in cows / J.M. Jaskowski // Bull.vet. Jnst.Pulawy.-1995.-V.39.-P.43-47.

297. Jarczyk, K. Przydatnosc oznaczania opornosci slusu / K. Jarczyk// Med. Vet.- .-1993.- № 49.- V.12.- C. 559-561.

298. Jolles P. Wat's new in lysozyme researh / P. Jolles, J. Jolles // Mol. Cell.Biol.-1984.-V.65-P. 165-189.

299. Joy R.C. Effect of progesterone on heproductive bunctions in postpartum mares / R.C. Joy//J.Anim.Sci.- 1967.-N.26.-P.947.

300. Irvine C.N. Endocrinology of the estrous cycle of the mare applikaton to Embryo transfer / C.N. Irvine //Theriogenology.-1981.- N . -P.85-96.

301. Itoh, T. Growth, antrum formation, and estradiol production of follicles / T. Itoh// Biol. Reprod.- 2002.-Vol.67.-№ 4.-P. 1099-1105.

302. Kaeoket, К. Infiltration by cells of the immune system in the sow endometrium / K. Kaeoket // With spec. ref. to different stages of the oestrous cycle and after pre- and post-ovulatory insemination: Doctoral thesis.- Uppsala, 2002. 180 c.

303. Kaneko, H. Perturbation of estradiol feedback control luteinizing hormone secretion of follicular cysts in cattle / H. Kaneko // Biol.Reprod.- 2002.-V.67.-№ 6,- P. 1840-1845.

304. Kenney, R.M. Bacteriostatic fktivity of the mare uferus: A progress report on immunoglobulins / R.M. Kenney, S.A. Khaleel //reprod.Fest.Suppl.-l 975.-V.23.-P.357-358.

305. Kiddy, C.A. Estrus detection in dairi cattle. / C.A. Kiddy // In.Beltsville Symp.Agric.- Res.3 Anim. Reprod.-1979.- Vol .3- P.77-89.

306. Костов, И. Електронии индикатори за определяне на оптималния момент за осеменяеване на крови и овце / И. Костов // Ветер, мед. -№ 6.-1984.-С.23-25.

307. Krakowski, L. The creating of cellular and humoral immunity the estrus cycle/ L. Krakowski // Anim. Reprod. Sc. 1998. - V21. - P. 218221.

308. Krzyzanowski, I.; Ocena wybranych metod rozpoznawania ciazy u klaczy / Krzyzanowski I., Krakowski L., Wrona Z.// Med.weter., 1995,- R.51.-N 9,- S. 528-530.

309. Lincoln G. Melatonin as a seasonal teim-cul: a commercial story / G. Lincoln //Nature.-1983.-V.302.-N 5911-P.755.

310. Liu I.K.M. Immunological defense machanisms of the uterus in the mare /I.K.M. Liu //Proc.Soc.Theriogenology.-1981.-P.265-267.

311. Lopez H. Estrogen concentrations in milk at estrus and ovulation in dairi cows/ H. Lopez // Anim. Reprod. Sc.-2002- Vol .72- № '/2.- P.37-46.

312. Mahmoudzader, A.R. Effect of abnorinal vaginal discharge at estrus on conception rate after artificial insemination in cows / A.R. Mahmoudzader // Anim. Sc. 2001. - Vol. 72. - P. 535-538.

313. Macmillan K. L. Oestradiol concentrations during spontanions end ovulating cows/ K. L. Macmillan// Abstr /14th. Jntem. congr. on Animal Reproduction.- Stockholm. 2000. - Vol. 2. - P. 54-58.

314. Martiner, F. Effect of interval onset of estrus insemitation on sex ratio in bovine / F. Martiner // Abstr/14th. Jntem. congr. on animal reproduction. - Stockholm. - 2000. - Vol. 2. - P. 91.

315. Mc. Caugheny, W.J. Astudy of heat detection in beeffeifers / Mc. Caugheny W.J. // Jrichveter J. 1984. - T. 38. -№ 6. - P. 105.

316. Mc. Dougall, S., Detectijn of a corpus luteum in apparehtly anoestrous cows by manual palpation, ultrasonography and plasma progesterone concentration / Mc. Dougall S.// Veter. J. 1999. - Vol. 49. - № 2. - P. 47-52.

317. Medici, E.B. Vergleich verschidener diagnostischer Nilfsmitter zur Feststellung von Endometritiden beim Pferd anhand der dunakologischen Untersuchung / E.B. Medici // Hannover, 1990.- 131 c.

318. Merkt H. Die Zyklusdiagnose beim landurintschaftlichen Nutztier / H. Merkt //Pferd.-Tierzuuchter.-1970. -Jg.22.-N.8.- S.220-221.

319. Metrger E. Gezat zur Messung derelektrschen Leit-fahigkeif des Brunstfeststellung beim Rind / E. Metrger //Zuchthygiene.-1972.-N 2,-S.56-61.

320. Michel T. LH sekretionsdynamik im Zyklus der Stute // Hannover, Tierarztliche Hochschule,Diss.-1989.-140 s.

321. Miller, K.F. Concentrations of circulating gonadotropins during various reproductive states in mares / K.F. Miller // Biol.Reprod.-1980.-V.22.-S.744-750.

322. Mitchell G. Preferential production and secretion of immunoglobulins by the eguihe endometrium / G. Mitchell //АУМАД19 th ann meet. JAVMA.-1982.-V.181.-N 3.

323. Mitchell G. Preferential production and secretion of immunoglobulins by the eguine endometrium-a mucosae immune system / G.Mitchell //J.Reprod.Fert.-l 982.-N 32 P. 161-168.

324. Moghissi, K. Composition and propertios of human cervical mucus / K. Moghissi, 0. Neuhaus // Am. J. Obstet.Gynes.- 1962.-N 83.- P. 149155.

325. Morelli F. Jmmunoglobuline net contenuto servocovaginal di donne con infezione da trichomones, Candida о batteri / F. Morelli //Nuovi.ann.ig.e microbiol.-1974.-T.25.-N 3.-P.206-213.

326. Morris, C.A. Effects of ovulation status and stage of oestrous cycle on plasma progesterone concentrations in cattle with or without a history of twin calvings/ C.A. Morris, A.M. Day, A.J. Peterson//Anim. Product, 1987,- T. 45. N2.-P. 205-209.

327. Munoz, A. Relationship between systemic adaptation to physical effort and plasma potassium in untrained and trained horses/ A. Munoz // J. Equine Sc., 2003,- Vol. 14. -№ 1,- p. 13-22.

328. Musci, J. Ajuhok huwelykepenek, valaminta hulevinialka elektromos vezetokepessenek asszehasonlito vizsgalata at ivarzas korukli idoszakbar /J.

329. Musci , T. Takatsy // Magyar allatorv. Japja.- 1984. T. 39. - № 6. -P. 349-351.

330. Muylle, E. Determination of red blood cell potassium content in horses // E. Muylle, J. Nuytten // Equine veter. J. , 1984.- Т. 1.- №5.-P. 450-452.

331. Nebel, R. L., Automatic electronic system for the denection of oestrus and timing of AJ in cattle / R. L. Nebel // Anim. Reprod. Sc. 2000. -Vol. 60/61.-P. 713-723.

332. Newcombe, J.R. Spontaneous oestrous behaviour during pregnancy associated with luteal regression, ovulation and birth of a live foal in a part Thoroughbred mare / J.R. Newcombe // Equine veter.Educat., 2000.-Vol.12.-N2.-P. 85-87

333. Niezgoda, J. Hormonalna aktywnosc tarczycy w okresie zimowego anestrus oraz wybranym cylclu plciowym sezonu rozrodczego klaczy/ J.Niezgoda, M. Tischner, D.Wronska-Fortuna // Med.weter., 2002.-R.58.-N 11.-S. 877-880

334. Noden, P.A. The cycle of oestrous, ovulation and plasma levels of hormones in the mare/ P.A. Noden //J.Reprod.Fert.- 1975.-Suppl.23.-P. 189-192.

335. Oba, E. Progesterone and LH serum concentration in adult mares during oestrous/ E. Oba, A.F. Moreira, M.J. Mamprim// Proc. of the 12.Intem.congr.on animal reproduction. -S.L, 1992,- Vol.4. P. 19001902

336. Osborn V.E. An analysic of the pattern of ovulation as in occurs in the annual reproductive cycle of the mare in Australia / V.E. Osborn //Aust.vet.j.-1966.-N.42-P. 149-154.

337. Paleologou A.A. Study of the cervico-vaginal secretion of cows durihg the different phases of the estrus cycle / A.A. Paleologou // j.inst.Anim.Technicihs.-1979.-V.30.-N 2,- P.83-94.

338. Palmer, E. Different techniques for synchronization of ovulation in the mare / E. Palmer // Proc. of the 8.Intern.congr.on animal reproduction. -Vol.3.- 1975,-P. 191-195.

339. Peter, A.T. Postpartum ovarian activity in dairy cows: con-elation between behavioral estrus, pedometer measurements and ovulations / A.T Peter, W.T.K. Bosu // Theriogenology, 1986.-T. 26.-N l.-P. 111-115.

340. Peterson, F.B. Studies on the pathogenesis of endometritis in the mare /F.B. Peterson //Proc. 15th.Am.Assoc.Eg.Pract.- 1969.-P.279-287.

341. Plourd, R. Your gide to reproprograms / R. Plourd // Dairy Herd Manag. 2000. - Vol. 37. - № 9. - P. 96-97.

342. Петков, П. Някои основни препорчки за открывание и осеменяване на разгоненити крови / П. Петков Земледелие плюс: (НРБ).- 1993.-№9.-31-33.

343. Pugh, M.J. The use of a vaginal conductivityprobe to estrous / M.J. Pugh, M. Pence // AS / Jowa Stabe Univ. Coop. Extens. Serv. Ames (Jowa). 1999. - № 64. - P. 112-120.

344. Rabiee, A.R. Plasma, milk and faecal progesterone concentrations during the oestrous cycle of lactating dairy cows with different milk yields/ A.R. Rabiee, K.L. Macmillan, F. Schwarzenberger// Anim. Reprod. Sc., 2002.- Vol.74.-N 3/4 P. 121-131.

345. Radhakrishnan, B. Effect of induced single or multiple ovulations on biochemical and enzyme constituents of oestrous mucus in cows/ B. Radhakrishnan, S.R.P. Raman // Indian veter. J, 1987.- T. 64. -N 2,- P. 142-145.

346. Rajakoski, E. The ovarian follicular system in sexually mature heifers with specialreference to cyclical / E. Rajakoski //Acta endocrinol.- 1960.-S. 52.-P.7-62.

347. Rajamahendran, R. Characterization of ovarian activity in postpartum dairy cows using ultrasound imaging and progesterone profiles / R. Rajamahendran, C. Taylor // Anim. Reprod. Sc, 1990, T. 22.- N 3. -P.171-180.

348. Ramadan, A.A. Regulation of uterine immune function during the estrous cycle and in response to infectious bacteria in sheep/ A.A. Ramadan, G.L. Johnson, G.S. Lewis // J.anim.Sc., 1997,- Vol.75.-N 6,-P. 1621-1632.

349. Reilae Т. Intrauterine fluid accumulation in oestrous mares / T. Reilae // Acta vet.Scand.-1997.-V.38.-N l-P.69-78.

350. Roche J.F. Synchronization of oestrus in cattle / J.F. Roche //World Rev.Anim.Prod.-1976.-N 2.-P.79-88.

351. Roszel J.F. Eguine endometrial cytology / J.F. Roszel, K.P. Fruman //Vet.North.Am.-1988.-V.4.-N 2.-P.247-264.

352. Roychoudhury, P.N. Studies on some chemical constituents of cervical mucus of cattle / P.N. Roychoudhury, Razdan M.N. //Jnd. Vet. J.-1965.-N.42.-P.502-505.

353. Saacke, P.G. Relationship of seminal traits and insemination time to fertilization rate and embryo duality / P.G.Saacke // Anim. Reprod. -2000.-Vol. 60/61.-S. 63-67.

354. Sahukar, C.S. Electrolytes during various reproductive phases in crossbred cows/ C.S. Sahukar, R.K. Pandit, P.A.S. Chauhan, M.L. Porwal//Indian J. anim.Sc., 1984. T.54.-N10.-P.993-995.

355. Sasaki, K. Relationship among the propentis of cervical mucus, the concentration of plasma progesterone level and pregnancy rate and cows / K. Sasaki // Animal. Sc. J. 2001. - Vol. 72. - № 7,- P. - 28-33.

356. Schnurrbusch U. The protein and glycogen contents and activiti of six enzymes in the endometrium ofgilts durring oestrous cycle / U. Schnurrbusch //Proc.VIII th.Jnt.Condr Anim. Reprod.Art.Jnsem.Krakow.-1976.-P.196-199.

357. Schultz R.H. A chemical study of uterine fluid and Blood serum of normal sows during the oesfrous cycle / R.H. Schultz //J.Reprod.Fert.-1971.-V.27.-N 3.-P.355-367.

358. Scipioni, R. Short communication: an electronic probe versus milk progesterone as aids for reproductive management of small dairy herds / R. Scipioni, R. Foote//J. Dairy Sc. 1999. - Vol. 82.-P. 1742-1746.

359. Scott, M.A. A glimpse at sperm function in vivo: sperm transport and epithelial interaction in the female reproductive tract / M.A. Scott // Animal reproduct.: research and practice. Amsterdam ect. - 2000. - №2.-P. 337-348.

360. Selaive Villarroel, A.B. Fertility studies in young and mature merino ewes. 1. Cervical mucus production. 2. Sperm transport / A.B. Selaive-Villarroel, J.P. Kennedy // Theriogenology, 1983.- T. 20. -N 5. - P. 537547.

361. Selvaraju, S. SInfluence of GnRH and eCG on oestrus response and progesterone profile in norgestomet primed postpartum anoestrus cows/ S.Selvaraju, R.C. Rajasundaram // Indian J.anim.Sc., 2001.- Vol.71.- N3.-P. 241-244.

362. Семков, M. Откриване на разгоненатта и най подходящия момент за заплождане / Семков М. // Земледелие плюс. - 1999. - № 9. - С. 25-26 (НРБ).

363. Singh L.P. Effect of protein concentration and ferning pattern of bovinecervical mucus on sperm penetration./ L.P. Singh R. Agrawal // Indian J.anim.Sc., 2000.- Vol.70.-N 10.- P. 1067-1068.

364. Skolimowska, A. Diagnozowanie i monitorowanie ciazy u klaczy poprzez oznaczanie estrogenow w kale / A. Skolimowska, T. Janowski, M. Golonka // Med. weter. -2004. Vol. 60.- N 5.-S. 512-515.

365. Sguires E.L. The effect of sterones on reproduction / E.L. Sguires //The Horsemen's J.-1970.-N 7,- P.68-72.

366. Shellenberg, D. Lysozyme localisation in the calf abomasum / D. Shellenberg, J.J. Pahud //Jnt.J.Vet.: Neutr.Res.-1982.-V.52,- N 2.-P.224-226.

367. Shilova, A.V. The use of human Chorionic Gonadotropin Ovulation Date Redulation in Mares / A.V. Shilova //Proc.8 Jnt.Cong.Anim.Reprod.and Artif.Jnsem.Krakow. -12-16 July 1976.-P.331.

368. Short, R.V. Steroid concentrations in the follikular fluid of the mare at vanious stages of the reproductur cycle / R.V. Short // J.Endocr.-1961 .-N.22-P. 153-163.

369. Small, J.A. Serum mineral concentrations in relation to estrus and conception in beef heifers and cows fed conserved forage/ J. A. Small, E. Charmley, A.V. Rodd, A.H. Fredeen// Canad.J.anim.Sc., 1997.- Vol.77.-N1.-P. 55-62.

370. Smith J.D. Prodesterone concentrations in the peripheral plasma of nhe mare during the oestrus cycle / J.D. Smith //J.Endocr.-1970.-N 47-P.523-524.

371. Srivastav, S.K. Seasonal variation in progesterone concentration during oestrus cycle in Murrah buffaloes / S.K. Srivastav, K.L Sahni., U.

372. Shanker, P.C Sanwal, V.P.Varshney // Indian J.anim.Sc.- 1999.- Vol.69. -N9. P. 700-701.

373. Svanson, L.V. LH and prolaktin in blood serum from estrus / L.V. Svanson, J.S. Hafs // Animal. Sc. J. 1971. - Vol. 33. - № 7,- P. - 10381041.

374. Stabenfeldt , G.H. Jvarian activity during the oestrus cycle of the mare / G.H. Stabenfeldt//Endocrinology.- 1972.-V.90.-P.1379-1384.

375. Stabenfeldt, G.H. Reprodustion in horses / G.H. Stabenfeldt, Hyghes J.P. //Jn Reproduction in Domestig Animals.-1977.- P.401-431.

376. Stremienski, P.J. Antibacterial aktivity of mare uterine fluid / P.J. Stremienski, D.D. Kenney //Biol.of Reprod.-1984.- V.31.-P.303-311.

377. Szymanska, A.M. Ruja u Krow / A.M. Szymanska // Nowoczecne Roln. 1999. - R6. - № 4. - c. 16-17.

378. Thatcher, W.W. Use and economical impact of timed insemination as a reproductive management tool for lactating dairy cows / W.W. Thatcher //

379. Memorial de la Conf. interr. sobre ganaderia in los tropicos. -Gainesville. 1997. - P. 187-199.

380. Tepicht, W. Przydatnosc oznaczania opornosci sluzu pochwowego u loch w wykrywaniu rui oraz zblizajacego sie porodu / W. Tepicht, T. Baranski // Bull.Veter.Inst.in Pulawy, 2002.- Vol. 46.- N. 1. P. 79-86.

381. Thibier, M. Word statistics fonartifical insemination in cattle / M.Thibier, H.-G.Wagner // Abstr. 4 Jntern. congr. on animal reproduct. -Stockholm. 2000. - Vol. 2. - P. 76- 79.

382. Thompson D.L.J. Secretion of luteinizing hormone and follicle stimulating hormone in infact and ovariectomized mares in summer and winter / D.L.J. Thompson//J.Anim.ci.-1987.-V.64.-N 1,- P.247-253.

383. Thomson, P.P. Transducers for capture of activity data / P.P. Thomson // Automation in Daurying Simposium Proceeding. 1983. - P. 115-126.

384. Tomasi T.B. Structure and function of immunogobulin A / T.B. Tomasi, H.M. Grey // Progr.Allergy.-1972.-N 16,- P.81-213.

385. Umemura, K. Sources of odor related estrous cows/ K. Umemura, S. Kusibiki, T.Terada, K. Sugawara, I. Ito// Proc./7 World conf.on animal production. -S.L, 1993; Vol.3, P. 354-355

386. Varner D.D., An update on uterine defense mechonismus in the mare / D.D. Varner, T.J. Blanchavd // Eguine Vet.Sci.- 1990.-V.10.-N 3.-P.169-174.

387. Vinkler, A. The effect of experimental metabolic stresses on ovulation and progesterone levels in cows/ A.Vinkler, R.Dvorak, E. Kudlac// Veter.Med. Praha, 1996; Vol.41,N 3, S. 65-69.

388. Waelchli R.O. Jmmunohistochemical evaluation of the eguine endometrium during the oestrous cycle / R.O. Waelchli, N.C. Winder //Eguine vet.J.-1987.-V.19.-P.299-302.

389. Waelchli R.O., Winder N.C. Distribution of histological Risions in the eguine endometrium / R.O. Waelchli, N.C. Winder // Vet.Rec.-1989.-N 124,- P.274-276.

390. Waldman R. Spert migration-inhibiting antibody in human cervicovaginal secretions / R. Waldman // Clin.a.Exp. immunol.-1972b.-V.12.-N 1.-P.49-54.

391. Waldman, R. Jntravaginal immunization of humans with Candida albicans / R. Waldman // J.Immunology.-1972a.- V.109.-N 4.-P.662-664.

392. Wanqler, A. Messung der Bewegungsaktivitat bei Kuhen / A. Wanqler, J. Wolf// New Land witsch. - 2000. - № 3. - S. 76-79.

393. Watson E.D. The influence of estrogen and prodesterone on antibody synthesis by the endometrium of the mare / E.D. Watson //Proc. Sth.Jnt.Conf.Eguine Jnfect Dis.Lexington, Kentucky impress 1987.

394. Watson E.D. Cellular and humoral defence mechanisms in mares susceptible and resistant to persistense endometrititis / E.D. Watson //Veter,immunology and immunofathology.-1987.- V.16.-N 102.-P.107-121.

395. Watson, E.D. MHC Class П expressionand lymphoid tissue in the endometrium of the mare / E.D. Watson, C.E. Dixon//Proc. 12-ch Jnter. Congr. Anim.Reprod.-1992.-N 3 .-P. 1225-1227.

396. Watson, E.D. Post-breeding endometritis in the mave / E.D. Watson // Anim. Reprod. Sc. 2000. - Vol. 60/61. - P. 221-232.

397. Watson, P.F. The causes of reduced fertility with cryopresved semen / P.F. Watson // Anim. Reprod. Sc. 2000. - Vol. 60/61. - P. 481-492.

398. Wert N.E. Reproductive problems in broodmares Yoon Beats /

399. N.E.Wert//Anim. Reprod. Sc.-1987.-N 12.-P.80-112.

400. Widders P.R. Effect of cycle stade on immunoglobulinconcentrationes in reproductive tract secretions of the mare / P.R. Widders//J.Perpod. Immunol.-1985B.-V.7.-P.233-242.

401. Widders P.R. Jmmunohistological studies of the local inmune system in the reproductive tract of the mare/ P.R. Widders //Rec.Vet.Sci.-1985a.-V.38-P.88-95.

402. Widders P.R. Quantitation of the immunoglobulins in reproductive trast secretions of the mare / P.R. Widders //Research in Vet.Sci.-1984.-N.37.- P.324-330.

403. Williamson P. Immunoglobulin protein concentrations and alkaline phosphatase activity in uterine flushings from mares with endometitis / P. Williamson//Theriogenology.- 1983.-V.19.-N 3.-P.441-447.

404. Wingpield-Digby N.J. The technigue and clinical application of endometrial cytology in the mare / N.J. Wingpield-Digby //Eguine Vet.J.-1978.~V.10.-P. 167-170.

405. Wright, I.A. Female-female influences on the duration of the postpartum anoestrous period in beef cows/ I.A.Wright, S.M.Rhind, A.J Smith, T.K.Whyte // Anim.Product, 1994,- Vol.59.- pt 1. P. 49-53

406. Yalle G.R. Efeito do bimestre demtro da estacao de monta sobre a fertilidade de eguas inseminadas con semen diluido, res/riadoc transplontado / G.R. Yalle // Arg. brasil. Med. veter. zootech. 2000. -Vol. 58. -№ 4. -P. 410-416.

407. Yamada, K. Jnfluense of numbers of past calving days, pavity, and season on reproductive performance in anest dairy cows / K. Yamada // J. Japan Veter. Med. Assn. - 2000. - Vol. 53. - № 9. - P. 582-585.

408. Yong, Lai E.V. Steroid content of the eguine ovary during the reproductive cycle /E.V. Lai, Yong//J.Enocr.-1971.-V.50.-P.589-597.

409. Zajac, S. Mechanizmy odpomosci macicy klaszy/ S. Zajac// Med. Veter.-2000.-R.56.-N8,- S.490-494.

410. Zamond, D.R. Chevical changes in cervical mucus from normal and ovariectomised Freated with Hormones / D.R. Zamond, A.G. Chanohan //Biol.of Reprod.-1969.-T.l.-P.335-343.

411. Zdunczy, S. Plasma progesterone levels and clinical findings in dairy cows with post-partum anoestrus/ S. Zdunczyk, E.S. Mwaanga, J. Maleck, W. Baranski, T. Janowski // Bull.Veter.Inst.in Pulawy, 2002,-Vol. 46.-N. 1-P. 79-86.

Информация о работе

Баковецкая, Ольга Викторовна
доктора биологических наук
Рязань, 2006
ВАК 03.00.13

Диссертация

Закономерности и механизм функционирования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса и разработка метода определения оптимального времени осеменения - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы