Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Закономерности эмбриогенеза и формирование семян сосны сибирской (Pinus Sibirica Du Tour) IN VIVO и в культуре IN VITRO

ВАК РФ 03.00.05, Ботаника

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Новоселова, Наталья Валерьевна

Введение.

Глава 1. Особенности формирования зародышей и классификация их типов у покрытосеменных и голосеменных растений in vivo и in vitro.

Классификация эмбриональных типов у покрытосеменных растений

Классификация эмбриональных типов у голосеменных растений.

Культивирование эксплантов в культуре in vitro.

Глава 2. Характеристика района работ, объекты и методы исследования.

Характеристика территории.

Объекты исследования.

Методы исследования.

Цитоэмбриологические исследования.

Морфометрия женских побегов и почек.

Оценка семенной продуктивности.

Стратификация семян.

Культивирование эксплантов в культуре in vitro.

Глава 3. Особенности эмбриогенеза сосны сибирской in vivo.

Эмбриогенез в семяпочках 2-го года развития на прививочной плантации сосны сибирской на сосну обыкновенную в

Красноярской лесостепи.

Эмбриогенез в семяпочках 2-го года развития у типичных деревьев сосны сибирской из Западного Саяна.

Глава 4. Развитие эмбриональных структур у «аномальных» деревьев сосны сибирской с однолетним циклом развития женской шишки.

Морфогенез женских побегов.

Структура урожая женских шишек.

Цитоэмбриологические исследования.

Глава 5. Особенности внутрисемейного роста зародышей у сосны сибирской при стратификации.

Глава 6. Культивирование мегагаметофитов и изолированных зародышей сосны сибирской в культуре in vitro.

Культивирование изолированных семяпочек и мегагаметофитов.

Культивирование изолированных зиготических зародышей.

Образование адвентивных почек.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Закономерности эмбриогенеза и формирование семян сосны сибирской (Pinus Sibirica Du Tour) IN VIVO и в культуре IN VITRO"

Одной из главных проблем эмбриологии растений является исследование процессов образования и развития зародыша, который уже несет в себе организацию взрослого растения. К концу XX века накопились обширные данные по эмбриогенезу многих покрытосеменных и голосеменных растений.

Эмбриогенез у сосны сибирской (Pinus sibirica Du Tour) - одного из основных лесообразователей Южной Сибири, единственного вида продуцирующего орехи в данном регионе до сих пор изучен очень слабо (Третьякова, 1990). Исследование генеративных органов были направлены на изучение закономерностей формирования урожаев (Ирошников, 1974, 1978; Некрасова, 1981, 1983; Воробьев, 1974, 1984) и на анализ физиологических процессов, лежащих в основе формирования репродуктивных структур (Минина, Ларионова, 1979). При этом, выявлено, что для семян сосны сибирской характерны: высокая полиэмбриония, недоразвитость зародышей и даже полное выпадение стадии эмбриогенеза из цикла развития, отмеченное у «аномальных» особей с признаками акселерации репродуктивного процесса.

Для изучения закономерностей эмбриогенеза сосны сибирской и регуляции эмбриональных процессов большие перспективы открываются при использовании методов культуры тканей и органов, хорошо разработанных для покрытосеменных и значительно слабее для хвойных. Для регуляции эмбриональных процессов, направленных на преодоление стерильности семян и выращивание полноценных сеянцев у сосны сибирской, перспективным методом является культивирование мегагаметофитов и зародышей in vitro.

Этот метод: обеспечит возможность слежения за новообразованием элементов структуры зародыша, его морфогенезом, может способствовать снятию покоя зародыша семян, вызвать пролиферацию клеток; позволит понять процесс дифференциации ткани и будет способствовать получению соматических эмбриоидов.

Цель и задачи исследования. Цель работы заключалась в изучении особенностей роста и развития мегагаметофитов и зародышей у сосны сибирской in vivo и в культуре in vitro. Задачи исследования: сравнительное изучение морфогенеза зародыша в семяпочках прививок сосны сибирской на сосну обыкновенную и типичных деревьев сосны сибирской в условиях in vivo; исследование морфогенеза побегов, женских шишек и эмбриологических структур «аномальных» особей с однолетним циклом развития мегастробилов; выявление особенностей внутрисемейного роста зародыша в условиях стратификации; исследование процессов роста и развития эмбрионов в мегагаметофитах и изолированных зародышей в культуре in vitro; индукция адвентивного почкообразования и получение растений-регенерантов.

Научная новизна. Впервые проведено сравнительное исследование особенностей эмбриогенеза женской шишки у прививок сосны сибирской на сосну обыкновенную, типичных (двухлетний цикл развития) и «аномальных» (однолетний цикл развития) деревьев in vivo; изучены эмбриональные процессы в мегагаметофитах и изолированных зародышах на ранних стадиях их онтогенеза в контролируемых условиях in vitro; получен органогенный каллус и индуцировано образование адвентивных почек в культуре in vitro сосны сибирской.

Практическое значение работы заключается в разработке методов микроклонального размножения при помощи культуры зародышей и индукции адвентивного почкообразования для плантационного выращивания ценных и уникальных генотипов сосны сибирской.

Защищаемые положения.

1. Завершение эмбриогенеза и формирование проростков у сосны сибирской в культуре in vitro зависят от стадии зрелости мегагаметофитов и воздействия определенных гормонов.

2. Акселерация эмбриональных процессов в женских шишках «аномальной» сосны сибирской обусловлена спецификой развития побегов женской сексуализации.

Апробация результатов. Материалы, составляющие основу диссертации, были представлены и докладывались на следующих региональных, всероссийских и международных конференциях: XXXVI Международная научная студенческая конференция «Студент и научно-технический прогресс» (Новосибирск, 1998), II Всероссийская научно-практическая конференция «Плодоводство, семеноводство, интродукция древесных растений» (Красноярск, 1999), II Всероссийская научная конференция студентов и молодых ученых «Агроэкология и устойчивое развитие регионов» (Красноярск, 2000), I межрегиональная научно-практическая конференция «Сохранение биологического разнообразия Приенисейской Сибири» (Красноярск, 2000), X международный симпозиум «Концепция гомеостаза: теоретические, экспериментальные и прикладные аспекты» (Красноярск, 2000), международная конференция «Классификация и динамика лесов Дальнего Востока» (Владивосток, 2001), конференция молодых ученых Института леса СО РАН "Исследования компонентов лесных экосистем Сибири" (Красноярск, 2001), Всероссийская научно-практическая конференция «Химико-лесной комплекс: проблемы и решения»

Красноярск, 2001, 2002), II Всероссийская научно-практическая конференция «Проблемы экологии и развития городов» (Красноярск, 2001), III Российская конференция «Флора и растительность Сибири и Дальнего Востока» (Красноярск, 2001), симпозиум «Tree seed technology, Physiology and tropical silviculture» (Филиппины, 2001), международная научная конференция «Биологические ресурсы и устойчивое развитие» (Пущино, 2001), международный симпозиум «Молекулярные механизмы генетических процессов и биотехнология» (Москва-Минск, 2001), международный симпозиум "Biotechnology approaches for exploitation and preservation of plant resources" (Yalta, Ukraine, 2002), международная конференция «Boreal Forests and Environment: Local, Regional and Global Scales» (Красноярск, 2002), II Международная конференция по анатомии и морфологии растений (Санкт-Петербург, 2002), научно-практическая конференция «Кедровые леса Западной Сибири: современное состояние, использование и восстановление» (Томск, 2002), XI Съезд русского ботанического общества (Новосибирск, 2003), VIII Международная конференция «Биология клеток растений in vitro и биотехнология» (Саратов, 2003), XII Мировой лесной конгресс (Квебек, Канада, 2003)

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 20 работ и 1 статья находится в центральной печати.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 6 глав, выводов и списка литературы, включающего 161 название, а также приложения. Работа изложена на 132 страницах и включает 17 таблиц и 50 рисунков.

Заключение Диссертация по теме "Ботаника", Новоселова, Наталья Валерьевна

Выводы

1. Процесс эмбриогенеза у сосны сибирской так же, как у других видов сосен состоит из 3 микроскопических стадий: проэмбриогенеза, стадий раннего и позднего эмбриогенеза. Проэмбриогенез идет по USE-типу и продолжается 7 дней. Стадия раннего эмбриогенеза включает внедрение инициалей эмбрио в зародышевый канал, их кливаж (через 7 дней после оплодотворения). Стадия позднего эмбриогенеза начинается с дифференциации оси зародыша (через 30 дней после оплодотворения) и включает внутрисеменной рост зародыша в мегагаметофитах в процессе формирования и в период его стратификации.

2. Оплодотворение и эмбриогенез у деревьев с прививочных плантаций и у деревьев из естественных древостоев сосны сибирской идет однообразно. Наблюдаются лишь различия в сроках прохождения эмбриональных событий.

3. Значительные отклонения в развитии эмбриологических структур происходят у отдельных «аномальных» форм сосны сибирской с однолетним циклом развития женской шишки. У данных особей через 30-40 дней после опыления происходит появление архегониев. Однако оплодотворения не происходит из-за потери активности мужского гаметофита: медленного роста пыльцевых трубок и отсутствия образования мужских гамет в них. «Аномальные» формы сосны сибирской не способны к размножению in vivo из-за отсутствия зародыша.

4. Акселерация эмбриональных процессов в женских шишках сосны сибирской с однолетним циклом развития обусловлена спецификой женских побегов, рост и развитие которых, направлено на путь женской сексуализации

5. Культивирование мегагаметофитов сосны сибирской с двухлетним циклом (типичные формы) и однолетним циклом развития женских шишек («аномальные» формы) в культуре in vitro показало, что ход эмбрионального процесса зависит от стадии зрелости мегагаметофитов и воздействия определенных гормонов. Введение в культуру цитокининов на стадии зиготы, проэмбрио и раннего эмбрио и ауксинов на более поздних стадиях развития способствует завершению эмбриогенеза и формированию проростков.

6. Эксперименты по культивированию in vitro незрелых зародышей показали, что недоразвитость зародышей у сосны сибирской является вынужденным феноменом. При создании благоприятных условий недоразвитые эмбрио могут формировать проростки без стратификации.

7. Экспланты эмбрионов сосны сибирской в культуре in vitro могут формировать адвентивные почки. Субкультивирование адвентивных почек на среде MS с 6-БАП приводит к образованию меристематических очагов и затем проростков.

8. В целом, при культивировании мегагаметофитов сосны сибирской были выявлены гормональные и трофические зависимости развития эмбриональных структур и определенно влияние стадии зрелости мегагаметофитов на развитие этих структур, а также индуцировано развитие адвентивных побегов, с помощью которого возможно проводить массовое размножение улучшенных форм сосны сибирской.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Новоселова, Наталья Валерьевна, Красноярск

1. Аратанян JI.A. Цитогенетические эффекты фитогормонов. Ереван: АН Арм.ССр, 1989. 137 с.

2. Банникова В.П., Хведынич O.A. Основы эмбриологии растений. Киев: Наук, думка, 1981. 164 с.

3. Батыгина Т.Б. Эмбриоидогения // Эмбриология цветковых растений. Терминология и концепция. /Под ред. Батыгиной Т.Б., СПб.: Мир и семья-95. Т. 2, 1997. С. 628-635.

4. Батыгина Т.Б. Эмбриогенез и морфогенез половых и соматических зародышей // Физиология раст. Т. 46, № 6, 1999. С. 884-898.

5. Батыгина Т.Б., Васильева В.Е., Маметьева Т.Б. Проблемы морфогенеза in vivo и in vitro (эмбриоидогенез у покрытосеменных) // Ботан. журн. Т. 63, N 1, 1978. С. 87-111.

6. Биотехнология растений. М.: Наука, 1989.

7. Бутенко Р.Г. Дифференциация и морфогенез в культуре тканей, клеток и протопластов // Биология развития растений. М.: Наука, 1975. С. 4865.

8. Бутенко Р.Г. Индукция морфогенеза в культуре тканей растений // Гормональная регуляция онтогенеза растений. М., 1984. С. 42-54.

9. Бутенко Р.Г. Состояние и перспективы изучения морфогенеза растений // Всесоюз. об-во физиологов раст., вып. 8, 1990. С. 5-8.

10. Бутенко Р.Г. Клеточные и молекулярные аспекты морфогенеза растений in vitro II I Чайляхян. чтение. Пущино: Пущинский НЦ, 1994. С. 7-26.

11. Воробьев В.Н. Особенности плодоношения кедра сибирского в горных условиях // Биология семенного размножения хвойных Западной Сибири. Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1974. С. 15-69.

12. Воробьев В.Н. Структура женского яруса крон кедра сибирского // Экология семенного размножения хвойных Сибири. Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1984. С. 5-13.

13. Горожанкин И.Н. О корпускулах и половом процессе у голосеменных растений // Учен. зап. имп. Моск. ун-та, отд. естествоиспытателей. 1880. выпЛ.С. 1-174.

14. Грушвицкий И.В. Семейство ароидных и некоторые биологические особенности его представителей. // В кн.: Материалы к изучению женьшеня и других лекарственных растений. Д. В., 1963. С. 5-10.

15. Дерфлинг К. Гормоны растений. Системный подход. М.: Мир, 1985. 304 с.

16. Дженсен У. Ботаническая гистохимия. М.: Мир, 1965. 377 с.

17. Земляченко Я.В., Каравайко H.H., Маслова Г.Г., Кулаева О.Н. Новый подход к изучению зависимости между структурой и функцией цитокининов // Докл. РАН. Т. 353, № 2, 1997. С. 261-263.

18. Жукова Г.Я. Хлорофиллоносность зародыша покрытосеменных растений: Автореф. дис. канд. биол. наук. Д., 1968. 24 с.

19. Жукова Г.Я. О форме хлоропластов зародыша некоторых видов покрытосеменных и ее значение. // Ботан. журн., № 3, 1972. С. 290-298.

20. Иванов В.Б. Активные красители в биологии. М.: Наука, 1982. 214 с.

21. Иванов В.Б., Литинская Т.К. Одновременная окраска белков и углеводов проционовыми красителями // Цитология Т.9, № 9, 1967. С. 58-64.

22. Ивановская Е.В. Использование метода выращивания зародышей на искусственной среде в работах по отдаленной гибридизации. — В кн.: Отдаленная гибридизация растений. М.: Колос, 1970. С. 317-325.

23. Ивановская Е.В. Дифференцировка таней и клеточные деления // Изв. АН СССР, серия биол., 1975. С. 237-252.

24. Ирошников А.И. Изменчивость некоторых морфологических признаков и эколого-физиологических свойств кедра сибирского // Изменчивость древесных растений Сибири. Красноярск: ИЛиД СО АН СССР, 1974. С. 77-103.

25. Ирошников А.И. Плодоношение кедра в Западном Саяне // Тр. ин-та ИЛиД СО АН СССР. М.: Изд-во АН СССР, Т.67, 1963. С. 104-197.

26. Кашин А.С, Блюднева Е.А., Седлецкая О.В., Григорьева В.В. Особенности развития мегагамет апомиктичных и половых форм Asteraceae в культуре неоплодотворенных завезей in vitro II Физиология растений, том 47, № 4, 2000. С. 548-554.

27. Кострикова Л.Н. Хлоропласты зародыша и эндосперма некоторых представителей мотыльковых. // Бюл. Гл. ботан. сада АН СССР, вып. 96, 1975. С. 49-54.

28. Кузнецова Г.В. Особенности роста и развития кедровых сосен на лесосеменных объектах Средней Сибири: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Красноярск: ИЛ СО РАН, 2001. 25 с.

29. Марченко А.О. Реализация морфогенетического потенциала растительных организмов // Успехи соврем, биологии. Т. 116, № 3, 1996. С. 306-319.

30. Матвеева Р.Н., Алешева J1.E., Исаева Н.Ф., Емельянова H.A. Предпосевная обработка семян кедра сибирского стимуляторами роста. в кн.: Лесное хоз-во: матер, конф. по итогам н.-и. работ, Красноярск, 1971.

31. Машкина О.С., Табацкая Т.М., Бурдаева Л.М., Исаков Ю.Н. Методы культуры ткани в лесной генетике и селекции // Тезисы докладов научно-практ. конф., Воронеж, 2001. С. 18.

32. Минина Е.Г., Ларионова H.A. Морфогенез и проявление пола у хвойных. М.: Наука, 1979. 215 с.

33. Модилевский Я.С., Оксиюк П.Ф., Худяк М.И, Дзюбенко Л.К., Бейлис-Выровая Р.Н. Цитоэмбриология основных хлебных злаков. Киев: Изд-во АН УССР, 1958.336с.

34. Момот Т.С. Клональное микроразмножение у различных представителей хвойных пород // Физиол. и биох. культ, растений. Т. 20, №2, 1988. С. 181-189.

35. Муромцев Г.С. Фузикокцин новый фитогормон? // Физиол. раст. Т. 43, №3, 1996. С. 478-492.

36. Некрасова Т.П. Биологические основы семеношения кедра сибирского. Новосибирск.: Наука. Сиб. отд-ние, 1972. 272 с.

37. Некрасова Т.П. Пыльца и пыльцевой режим хвойных Сибири. Новосибирск.: Наука. Сиб. отд-ние, 1983. 169 с.

38. Никитичева З.И. Эмбриология паразитных представителей семейств Scrophulariaceae и Orobanchaceae в связи с их образом жизни: Автореф. дис. канд. биол. наук. Л., 1970. 24 с.

39. Николаева Е.С. О позеленении зародышй некоторых Angiospermae II Ботан. журн., № 4, 1975. С. 517-522.

40. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений М.: Колос, 1980. 340 с.

41. Поддубная-Анольди В.А. Общая эмбриология покрытосеменных растений. М.: Наука, 1976. 507 с.

42. Полевой В.В. Фитогормоны. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та. 1982. 248 с.

43. Поликарпов Н.П., Назимова Д.И. Темнохвойные леса северной части Западного Саяна // Лесоводственные исследования в лесах Сибири. Красноярск, Т 57, 1963. С. 103-147.

44. Поликарпов Н.П., Чебакова Н.М., Назимова Д.И. Климат и горные леса Южной Сибири. Новосибирск.: Наука, Сиб. отд-ние, 1986. 226 с.

45. Прозина М.Н. Ботаническая микротехника. М.: Высшая школа, 1960. 206 с.

46. Протопопов В.В. Биоклимат темнохвойных лесов Южной Сибири. М.: Наука, 1965. 86 с.

47. Путенихин В.П. Популяционная структура и сохранение генофонда хвойных видов на Урале: Автореф. дис. . док. биол. наук. Красноярск: ИЛ СО РАН, 2000. 48 с.

48. Родина Е.А. Экспериментальный морфогенез в культуре тканей хвойных пород: Автореф. дис. . канд. биол. наук. М.: ИФР АН СССР, 1989. 26 с.

49. Савина Г.И. Развитие половых элементов и процесс оплодотворения у некоторых видов Orchis II Ботан. журн., № 1, 1965. С. 96-103.

50. Сайб Л.Р., Карабаев М.К. Фитогормональная регуляция регенерации растений: качественная модель // Изв. АН КазССР. Серия биол. № 3, 1991. С. 15-22.

51. Сидорский А.Г. Влияние фитогормонов на работу супергена цветка покрытосеменных растений // Генетика. Т. 30, прилож. 1994. С. 144

52. Скрипаченко В.В. Использоание методов геносистематики для исследования лиственницы Сиибири. Автореф. дис. . канд. биол. наук. Красноярск, 1985. 23 с.

53. Скрипаченко В.В. Культура in vitro опухолевых тканей сосны обыкновенной из Южного Забайкалья // Проблемы физиологии и биохимии древесных раст.: Тез. докл., Петрозаводск, 1989. С. 192-193

54. Смирнов М.П. Почвы Западного Саяна. М.: Наука, 1970. 236 с.

55. Терехин Э.С. Эмбриология грушанок и вертляниц в связи с их биологией и систематическим положением: Автореф. дис. канд. биол. наук. JL, 1973.42 с.

56. Терехин Э.С. Закономерности эволюционных преобразований эмбриональных и репродуктивных структур паразитных Angiospermae: Автореф. дис. д-ра биол. наук. JL, 1973. 42 с.

57. Тренин В.В. Введение в цитоэмбриологию хвойных. Петрозаводск. Карельский филиал АН СССР, Институт леса, 1988. 152 с.

58. Третьякова И.Н. Эмбриология хвойных: физиологические аспекты. Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1990. 157 с.

59. Третьякова И.Н., Новоселова H.B. Особенности развития мегагаметофитов и зародышей сосны кедровой сибирской в культуре in vitro II Онтогенез, T. 34, № 4, 2003. С. 282-291.

60. Третьякова И.Н., Новоселова Н.В., Иванова А.Н. «Анатомо-морфологические особенности раннего онтогенеза сибирских видов хвойных в культуре in vitro» II международная конференция по анатомии и морфологии растений, Санкт-Петербург, 2002. С. 188

61. Третьякова И.Н., Филиппова И.П. Особенности морфогенеза зиготических зародышей Picea obovata в культуре in vitro. В кн. "Билогия клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда". Тез. докл. VII Междунар. конф. Москва, 1997 С. 173.

62. Хмара К.А., Катаева Н.В. Влияние генотипа материнского растения и веществ цитокининового типа действия на способность тканей зародыша ели обыкновенной {Picea abies L.) к органогенезу in vitro II Физиол. раст. Т.40, № 5, 1993. С. 802-805.

63. Чайлахян М.Х. Гормональная регуляция роста и развития высших растений // Успехи соврем, биологии. Т. 95, вып. 1, 1982. С. 23-34.

64. Эсау К. Анатомия растений. М.: «Мир», 1969. 564 с.

65. Яковлев М.С. Структура эндосперма и зародыша злаков, как систематический признак // Тр. Ботан. ин-та АН СССР. Сер. 7, вып. 1, 1950. С. 121-219.

66. Яковлев М.С. О единстве эмбриогенеза покрытосеменных и голосеменных растений // Тр. Ботан. ин-та АН СССР. Сер. 7, вып. 2, 1951а, С. 356-364.

67. Яковлев М.С. О некоторых характерных чертах морфогенеза у высших растений // Тр. Ботан. ин-та АН СССР, Сер. 7, вып. 2, 19516. С.243-268.

68. Яковлев М.С. Принципы выделения основных эмбриональных типов и их значение для филогении покрытосеменных // Пробл. ботаники, №3, 1958. С. 168-195.

69. Яковлев М.С. Эмбриогенез и его значение для филогении растений. М.; Л.: Изд-во АН СССР, 1960. 40 с.

70. Яковлев М.С. Основные задачи в области изучения эмбриогенеза // В кн.: Проблемы эмбриологии. Киев: Наук, думка, 1971. С. 152-169.

71. Яковлев М.С., Жукова Г.Л. Хлорэмбриофиты и лейкэмбриофиты // В кн.: IV Моск. совещ. по филогении растений (Москва, 1971 г.): Тез. докл. М., 1971. С. 124-129.

72. Яковлев М.С., Жукова Г.Я. Покрытосеменные растения с зеленым и бесцветным зародышем. Л.: Наука, 1973. 103 с.

73. Aderkas P., Bonga J.M., Klimaszewska K., Owens J. Comparison of larch embryogeny in vivo and in vitro II Woody Plants Biotechnology. Series A: Life Sciences. V. 210, 1991. P. 139-155.

74. Ammirato P.V. Hormonal control of somatic embryo development from cultured cells of caraway: Interactions of abscisic acid, zeatin and gibberellic acid // Plant Physiol. V. 59,1977. P. 579-586.

75. Arnold S. Factors Influencing Formation, Development and Rooting of Adventitious Shoots from Embryos of Picea abies (L.) Karst. // Plant Sci. Lett. V. 27, N3, 1982. P. 275.

76. Arnold S., Hakman I. Effect of sucrose on initiation of embryogenic callus cultures from mature zygotic embryos of Picea abies (L.) karst. (Norway spruce)//J. Plant Physiol. 1985. V.122. N 3. P.261-265.

77. Arnold S., Hakman I. Regulation of somatic embryo development in Picea abies by abscisic acid (ABA) // J. Plant Physiol. V.132, N. 1, 1988. P. 164169.

78. Attree S.M., Dunstan D.I., Fowke L.C. Plantlet regeneration from embryogenic protoplasts of white spruce {Picea glauca). II Biotech., 1988, V 7. P. 1060-1062.

79. Becwar M.R., Nagmani R., Wann S.R. Initiation of embryogenic cultures and somatic embryo development in loblolly pine {Pinus taeda) II Can. J. For. Res. V. 20, N. 6, 1990. P. 810-817.

80. Behrendt U., Zoglauer K. Boron controls suspensor development in embryogenic cultures of Larix decidua II Physiol. Plant. V.97, N 3, 1996. P. 321-326.

81. Calixto F., Pais S.M. Adventitious shoot formation and plant regeneration from Pinus pinaster Sol. ex Aiton // In vitro cellular & Devel. biol. V.33, N2, 1997. P. 119-124.

82. Chamberlain C.J. Gymnosperme: structure and evolution. Chicago, 1935. 484 p.

83. Crete P. Embryo. In: Recent advances in the embryology of Angiosrerms // Ed. Maheshwari P. Delhi, 1963. P. 171-188.

84. Drake P.M.W., John A. Cytokinin pulse-mediated shoot organogenesis from cotyledons of Sitra spruse Picea sitchensis (Bong.) Carr. and high frequency in vitro rooting of shoots // Plant cell tissue and organ culture V. 50, N2, 1997. P. 147-151.

85. Egertsdotter U., Arnold S. Development of somatic embryos in Norway spruce. //Journal of Experimental Botany, V.49, N 319, 1998. P. 155-162.

86. Ferguson M. Contributions to the life history of Pinus with special reference to sporogenesis, the development of gametophytes and fertilization. // Proc. Wash. Acad. Sci. V. 6, 1904. 1-202.

87. Fernando D.D., Owens J.N. Development of resistance to White pine blister rust through in vitro fertilization // Internat. conference "Breeding and genetic resources of five-needle pines". Oregon. USA: JUFRO. Working party: 2001. P. 112.

88. Fernando D.D., Owens J.N., Aderkas P. In vitro fertilization from co-cultured pollen tubes and female gametophytes of Douglas fir (Pseudotsuge menziesii) //Theor. Applied Genet. V. 10, N 4, 1998. P. 1057-1063.

89. Finer J.J., Kriebel H.B., Becwar M.R. Initiation of embryogenic callus and suspension cultures of eastern white pine {Pinus strobus L.) // Plant Cell Rep. V. 8, N. 2, 1989. P. 203-206.

90. Gupta P.K., Dursan D.J. Somatic polyembryogenesis and plantlet regeneration in loblolly pine. //Biotechnology, N 5, 1985. P. 147-151.

91. Hakman I., Arnold S. Somatic embryogenesis and plant regeneration from suspension cultures of Picea glauca (white spruce) // Physiol. Plant. V. 72, N. 3, 1988. P. 579-587.

92. Hakman I., Fowke L.C. Somatic embryogenesis in Picea glauca (white spruce), and P. mariana (black spruce) // Can. J. Bot. V. 65, N. 4, 1987. P. 656-659.

93. Hakman I., Fowke L.C., Arnold S., Eriksson T. The development of somatic embryos in callus cultures initated from immature embryos of Picea abies II Plant Sci. V. 38, N. 1, 1985. P. 53-59.

94. Havel L., Dursan D.J. Apoptosis during diploid parthenogenesis and early somatic embryogenesis of Norway spruce // Internat. J. Plant Sci. V.157, N 1, 1996. P. 8-16.

95. Hofmiester W. Lehre von der Pflanzenzelle. Leipzig, 1867.

96. Johansen D.A. A critical survey of the present status of plant embryology // Bot. Rev., London, V. 11, 1945. P. 87-91.

97. Johansen D.A. Plant embryology. Waltham. Mass., 1950. 305 p.

98. Johnson M.A. The shoot apex in gymnosperms // Phytomorphology, V.l, 1951. P. 188-204.

99. Jourdain I., Lelu M. A., Label P. Hormonal changes during growth of somatic embryogenic masses in hybrid larch // Plant Physiol. Biochem. V. 35, N9, 1997. P. 741-749.

100. Klein S., Ben-Shaul V. Changes in cell fine structure of fine bean axes during early germination // Can. J. Bot., 1966. P.331-336.

101. Klimaszewska K., Smith D.R. Maturation of somatic embryos of Pinus strobus is promoted by a nigh concentration of gellan gum // Physiol. Plant. V. 100, N4,1997. P. 949-957.

102. Konar R.N. and Ramchandani S. The morphology and embryology of Pinus wallichiana Jack // Phytomorphology, 1958. P. 328-346.

103. Lelu M.A., Bastien C., Klimaszewska K., Ward C., Charest P.J. An improved method for somatic plantlet production in hybrid larch (Larix leptoeuropaea): Part 1. Somatic embryo maturation // Plant cell tissue and organ cult. V. 36, 1994. P. 107-115.

104. Liao Y. K., Amerson H.V. Slash pine (Pinus elliottii Engelm.) somatic embryogenesis I. Initiation of embryogenic cultures from immature zygotic embryos//New For. V. 10, N2, 1995. P. 145-163.

105. Lill B. Ovule and seed development in Pinus radiata: postmeiotic development fertilization and embryogeny // Can. J. Bot. V. 54, N 18, 1976. P. 2141-2154.

106. Lu C.Y., Thorpe T.A. Somatic embryogenesis and plantlet regeneration in cultured immature embryos of Picea glauca II Plant Physiol. V. 128, N. 4, 1987. P.297-302.

107. Maheshwari P., Rangasnamy W.S. Embryology in relation to physiology and genetics // Adv. Bot. Res. N 2, 1965. P. 219-321.

108. McVeigh I. Regeneration in Crassula multicava II Amer. Jour. Bot. V. 25, 1938. P. 7-11.

109. Mehra P.D., Dogra P.D. Embryogeny of Pinaceae I. Proembryogeny // Proc. Indian. Nat. Sci. Acad. V. 41, N 5, 1976. P. 486-497.

110. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures // Physiol, plant. V. 15, N 4, 1962. P. 473-497.

111. Nagmani R., Bonga J.M. Embryogenesis in subcultured callus of Larix decidua II Can. J. For. Res. V. 15, N. 5, 1985. P. 1088-1091.

112. Nieuwdorp P. J. Electron microscopic structure of the epithelial of the sentellum of barley // Asta bot. neer., N 12, 1963. P. 295.

113. Nougaréde A Premieres observation sur l'infrastructure et sur l'évolution des cellules des jeans êbanches foliaires embryonnafres du Tropaeolum majus L. cytologia de la dèshydration de maturation. // C. r Acad. Sei., 1963. P. 1335.

114. Novoselova N.V. Biotechnology of megagametophytes and embryos of Siberian pine and formation of adventive buds //Abstract of international conference Boreal forests and environment: local, regional, "and global scales. Krasnoyarsk, 2002. - P. 61-62.

115. Ogita S., Kubo T., Fushitani M. Anatomical characteristics in early embryogenesis from immature embryos of Larix leptolepis II For. Res.Environment. Tokyo. N 35, 1997. P. 45-51.

116. Perner E. Elektronenmikroskopische Untersuchungen an Zellen von Embiyonen im Zustand völliger Samenruhe. I. Mitteilung. Die Zelluläre Strukturordnung in der Radikula luftockner Samen von Pisum sativum // Planta, N4,1965. P. 334-357.

117. Roberts D.R., Webster F.B., Flinn B.S. et al. Application of somatic embryogenesis to clonal propagation of interior Spruce // Woody Plant Biotechnol. Series A: Life Sciences. V. 210, 1991. P. 157-169.

118. Roy Chowdhury Ch. The embryogeny of conifers: a review // Phytomorphology V. 12,N3, 1962. P. 313-338.

119. Salaj J. Salajova T. Histological observations of adventitious bud development in Pinus nigra II Biología V.53, N1, 1998. P. 107-110.

120. Salopen B., Milakovic T.T., Mihaljevic S., Jelaska S. Storage product accumulation during the maturation of Picea omorika (Pane.) Purk. Somatic embryos // Perodic. Biol. V. 99, N 1, 1997. P. 117-124.

121. Schnarf K. Die Embryologie der Liliaceae und ihre systematische Bedeutung. Sitzungsber. Akad. Wiss. Wien, № 1, 1929. S. 271-288.

122. Schulz R., Jensen W. A. Capselea embryogenesis the synergids before and after fertilization // Amer. J. bot., № 5, 1968. P. 541-552.

123. Sethi M. L. Contributions to our knowledge of the life history of Pinus longifolia II J. Indian Bot. Soc. V. 7, 1928. P. 105-151.

124. Setterfield G., Stern H., Johnston F.B. Fine structure in cells of pea and wheat embryos // Can. J. Bot. 1959 P. 65.

125. Singh H. Embryology of gymnosperms. Gebrüder Borntraeger. Berlin. 400 P

126. Singh A.K., Chand S., Pattnair S., Cnand P.K. Adventiouns shoot organogenesis and plant regeneration from cotyledons of Dalbergia sissoo Roxb., a timber yielding tree legume // Plant cell tissue and organ cult. V. 62, N 2, 2002. P. 203-209.

127. Singh H., Johri B.M. Development of gymnosperms seeds // Seed biology Ed T.T. kozlowski. Academic Press. V. 1, 1972. P. 21-75.

128. Sommer H.E., Brown C.L., Kormanik P.P. Differentiation of plantlets in longleaf pine {Pinus palustris Mill) tissue cultured in vitro II Bot. Gaz. V. 136, 1975. P. 196-200.

129. Soueges R. Embryogénie et classification. 2-od fasc. Essai d'un système. La lois du développement. Paris, 1937.

130. Soueges R. Embryogénie et classification. 1-er fasc. Léspèce et les classifications actuelles. Paris, 1938. 653 p.

131. Soueges R. Embryogénie et classification. 3-eme fasc. Essai d'un système embryogénigues. Partie speciale: 1-er periode du système. Paris, 1948

132. Soueges R. Embryogénie et classification. 4-eme fasc. Essai d'un système embryogénigue Partie speciale. Deuxième période du système. Paris, 1951.

133. Skoog F. Aspects of growth factor interaction in morphogenesis of tobacco tissue cultures // Les cultures de tissus de plantes. Paris, 1971. P. 115.

134. Skoog F., Miller C.O. Chemical regulation of growth and organ formation in plant tissues cultured in vitro II Sympos. Soc. Exp. Biol. V. 11, N 2, 1957. P. 118.

135. Steffen K. Einschüsse. Handb.// Pflanzenphysiol. V. 1, 1955. P. 401-412.

136. Strasburger E. Die Angiospermen und die Gymnospermen. Jena, 1879. P. 1173.tf

137. Street H.E., Opik H. The phisyology of flowering plants: their growth and development. London, 1970. 263 p.

138. Tang W., Ouyano F., Guo Z.C. Plant regeneration through organogenesis from callus induced from mature zygotic embryos of loblolly pine // Plant Cell Reports. V.17, N 6/7, 1998. P. 557-560.

139. Thomas M.J. Etude cytologique de 1'embryogenese du Pinus silvestris L. I. Du proembryon cellulaire su clivage embryonnaire // Rev. cytol. et biol. veg. V. 36, N3/4, 1973. P. 165-223.

140. Thomas MJ. Etude cytologique de Pembryogenese du Pinus silvestris L. II. Du clivage embryonnaire a la graine mure II Jbig. V. 1, N 4, 1978. P. 313322, 355-373.

141. Thomas M.J. Etude cytologique de l'embryogenese du Pinus silvestris L. II. Contributions recentes de la cytology et de la cytochemie a 1'etude de l'embryogenese des spermaphytes // Bull. Soc. bot France. V. 127, N 3, 1982. P. 5-18.

142. Wardlaw C. W. Embryogenesis in plants. New York, 1955. 381 p.

143. Vagner M., Vondrakova Z., Strnadova Z., Eder J. Mones during early stages of somatic embryogenesis of Picea abies // Adv. Horticult. Sci. V.12, N 1, 1998. P. 11-18.

144. Yatsu L. W. The ultrastructure of cotyledonary tissue from Gossypium hrsutum L. seeds// J. Cell Biol., 1965. P. 193.