Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Взаимодействие альбумина и иммуноглобулинов при образовании циркулирующих иммунных комплексов

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Взаимодействие альбумина и иммуноглобулинов при образовании циркулирующих иммунных комплексов"

го

РГ6 од

0 СЕ!!міЇп'СЇЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ'Я УКРАЇНИ харківський медичний інститут

На правах рукопису

ЛУЗІНА ІРИНА ГЕННАДІЄВНА

ВЗАЄМОВІДНОШЕННЯ АЛЬБУМІНУ ТА ІМУНОГЛОБУЛІНІВ ПРИ УТВОРЕННІ ЦИРКУЛЮЮЧИХ ІМУННИХ КОМПЛЕКСІВ

03.00.04 — біохімія

АВТОРЕФЕРАТ дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук

ХАРКІВ — 1993

Робота виконана в Кримському медичному інституті.

Науковий керівник: доктор біологичних наук, члел-кореспондент АН

' України, заслужений діяч науки України,

професор Г. В. Троїцький.

Офіційні опоненти: доктор біологичних наук А. К. Гулевський,

доктор медичних наук І. Л. Дикий.-

Провідна встанова: Київський інститут біохімії ім„ А. В. Палладіна.

Захист дисертації відбудеться « ■ 1993 р. на за-

сіданні спеціалізованої вченої ради Д 088.23.04 в Харківському медичному інституті за адресою: 310022. Харків, 22, пр. Леніна, 4.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Харківського медичного інституту.

Автореферат розісланий « .. . » . . . . 1993 р.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради.

Загальна характеристика роботи

Дктудьність проСшгик. За останні роки все Сіільта увага приділяється .роді ікуннкх комплексів у патогенезі захворювань. Прогрес 7 вивчені ролі імуйних коюгаексів пов'язаний з-широкій! ззпоовапиенням матодіЕ, шо дозволяють виявляти комплекси ааті-ген - антитіло в біологічних- рідша*. Утвореная тх коплєксів є іізиологічним механізмом., який забезпечує-постійність внутрішнього середовища. Однак в деяких випадках пей процес отримує патологічний-характер, гіризводячи до розвитку тяжких запальних рєакиій - васкуліта, нєфрига, артрігга, ш творять класичну’-триаду імунококплексної патології. Зараз також широко обговористься питання про могшший імунокомядєксний неханізм діабетичних ачгіопатій і інших патологічних етанів неінфекпій-кзг природі! ГСакало.1389,- Чукзсва, 1981, КорочкШ; 1990). Лосі розв'язується питачня про причини виникнення локальних станів, пов'язаних- із ШКІДЛИВОЮ'ДІЄЮ ШФКУДШЧИЇ імунних - комплексів. -З .цієї точки зору дуже важливим є .вивчення -фізико - хімічних властивостей - комплексів антиген -'-зеїктіло і умов , за кких імунні комплекси ш утворпнгься, можуть проявляти свої патогенні властивості. .

В організмі в багато мезинизмів. спрямованих па знищення Різноманітних .ушкоджуючих агентів. Байбільп ранньою захкснсв решшією ВІД ЗЯИОЛ*У«ЗКОЇ ДІЇ ТОКСИНІВ поруч З ПРСДУКЦІЕВ білків теплового шоку, біосинтезом рОЗЧ'ИНІЇХ ЛЄКТШІЗ Б'герето-г&кний конаормаційній перехід, властивий сироватковому альбуміну людини (Троїцький, 19911. . Було показано, ио уЕлгодгупчіїй вплив викликас гетерогенний конформній йний перехід е альбуміні. Під час взаємодії з реактивним лігандом частіша альбуміну

мопааікувться і ніби "зертеується" заради збереження другої частини, од s натизкош та повноцінно® у функціональному відношенні. Гетерогенний конформаційний перехід можна віднести so одної а примітивних 4»рм імунітету (Троїцький, 1387). - ’

Ділі та задані дасяіднвзша. Робота є частяноа комплексних

" ’ ■ - . " а

досліджень в галузі вивчення різноманітних Функцій альбуміну,

' • .

а такая з'ясування характеру модифікації білків при патології,

зо проводяться на кафедрі біохімії КШ. Дослідження виконувались в рамках проблеми No 01. 87.0055734 ДКЕГ України. Було показано, що альбумін одним з-перших рєагув нарізні, уакодзцуяиі Фактори. Альбумін, що є складовою частиною циркулюючих імунних комплексів fZhen,1983, Eilat, 1981)', ' вірогідно, може грати., роль ' бар'єра на пшяху ушкоддутаоі дії.на тканини. . Виходячи з вите сказаного і спираючись на наявну методичну базу,. ми вивчали можливу функціональну роль альбуміну, який є одним з компонентів імунних комплексів, щз утворюються. • . •

- Були встановлені наступні задачі дослідження:

1. Встановити, чи є альбумін, виявлений у ПЕГ - преципітатах, складовоа частиною імунного, кошдекса, а не продуктом Неспецифічної осаджуючої дії полі етиленгліколі.

2. Під час дослідження стабілізуючої дії різних препара-

тів альбуміну на стійкість циркулюючих, імунних комплексів у розчині спробувати пояснити, чим викликана різниця такої дії в залежності від різних вживаних'зразків сироваткового альбуміну лкшши., . •

3. Вивчити можливу взаємодію імуногдобулія - альбумін при

утворенні .імунного комплексу, вживаючи, агрегований теплотою імуноглобуяін G за моделі. ' "

Ежугпва тдгтести- Б робот і • вперше показано, по сироватковий альбумін лїшіеіі підзиаує стійкість диркужігоих імунних комплекс: і з У РОЗЧКНЄЯОЬСУ СТЕНІ. - ' .

Піл час вивчення стабілізуючої дії різних ■препаратів альбуміну на імунні комплекси вперше показано, шо більш відбитий вплив мають конаюрмзри меркапгальбуміну. Долання йодаїктаміду до альбуміну суттєво зкюкув утворення конфсрмерів ПІД впливом теплової обробки та стабілізуючу дію такого альбуміну на цір-кулкгочі ІМУННІ комплекси. '

‘ Маючи за модель імуняюс комплексів ггрзговаЕий імукогло-булін 3. вперше показано, из, змінюючись під впливом теплової обробки, імуноглобулін Б і альбумін -дапгь -утворення, високості йке до дії полієтиленгліколя. '

Основні ішдогокіЕа. ео гнаасзкі па агззгдт.

1. Сироватковий'альбумін людшпі стабілізуй стійкість іатр-кулюючкх імунних комплексів у розчині, /ш може мата гначєнаа на шляху улкоддуичої дії останніх. '

2. Умовою такої стабілізуючої дії в наязність в альбуміні ВИГ;ОКОрЄаКЦІЙНОЇ вільної БН-групи, го .обумовлює-виникнення гетерогенності. Зміни, обуювлені тіол-дісудьфідаим обміном, характеризують появу конформзрів як -функціонально активних, ваютівкх в патогенетичному плані білків. ’

3. Взаємодія альбумін-імуноглобулін не г> достатньою для появи стабілізуючої дії альбуміну на модельні імунні комплекси, за зразок яких вжито агрегований імуноглобудін. £3.

Практична цінність. Розроблено новий критерій оцінки

лкзси комерційних препаратів альбуміну, та тлх, іцр використо* ■зукгьей для інфузійаах терапії, одержані результати при пс-дадьгій розроби; шжуть бути в перспективі вжиті а ■діаі’.ностит захаорввааь, т. супровеащуюгся йіукокомялекеяим •позавизгеьшш таяв:і2, га .для■ «зпзгенетично * норекаїї -уакоадіуяиої ди. імунних комплексів. - ' ■ ■ . . ■

Апробація робота результат» дослідження докладались яа ? Українському біохімічному-з'гаді,: XII конференції молодих вчених та спеціалістіз Краму, засіданнях.Кримськога біохімішого товариства. - •

ТІублікаці і. За шгепішшшГ.лйсвоташ.2. опубліковано-б наукових публікацій- ■

Сб’єм і .структура дисертаці ї. • Дйсартаща викладена на ЮС сторінках, друкованого тексту і складається з ■ вступу, двох глаз огляду літератури, огіхсу матеріалів і методів досліджень, викладу йтртіалих. результатів і- їх обговорення,. і засновків. список літератури мигтить в собі 122 .зазви. Робота-про і даетрозан;

10 малшкамй. іа 4 таблицями.- ... . ,

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ-'ЖХШДЖЕННй

Для вивчання стійкості шшкушаяиг- імунних комплексів д дії подйетилБНГДіиалшЧІЖГ) зливана метод, -.'ас запропонована Наексуа. 127В, під час якого аналізуються•приріст мутвосп ех •созатки- крові 2. ігрисутності. П2Г. з. молекулярною масою . 60С0, кінцевій вснаезтрат ї -3,752. Прн цьому на отримувані результг 'лн не вплііЗсі£ концєнтр-зшя оідкіз, ідо мають максимальне сві^з

впогяккашій'при ловягш хвилі 2SO км, і неспеїшйічна мутність лровзтки. Жо вйбнєння-впливу альбуміну на вже сформовані мукні комплекси - вгашали той-яв изтод у власній могкіїкаиі:. й послі закутаної.• сироватки лоззвали .розтали: 'альбуміну різко: гкпентрзіїії, зберігаючи-вихідне розведення сироватки,, за 20 зивии ло додання ПЕГ і інкубували суміш при кімнатній температур;. - Вимір"оптичного світлопсглинаиня-проводиш на спектро-ктоиетрі Speccrd-ii40 при ловкиві хзклі 450 нхі Піл час роботи ;а даною методикою були враховані методична аспекти визначення Зфкулкшчих імунних комплексів СПІЮ в зливанням ПЕГ СБасоїгов, .9371. В робот і вжито сироватковий альбумін лпдини Í САП), ст-жмакий з комерційних препаратів сстоваткоЕОго альбуміну, і ільбумін, ю'виділяється з'пула сироваток донорів (в серззньс-гу 20 - 50 сироваток}. Альбумін з .пула сироваток локорів одержували .препаративним електрофорезом в гелі аг ара Перевірка ’огагеяігссті альбуміну проводилася ss. допомогою аналітичного пкк-елекіроівреаа у подіакриламідкзму гелі, а тзкозг. ва .гепз-■огою-імунопреішпіталіг по Duchterlcnv ,3357 і імуноелзктрзфо-зетичко (Grabar, Burt in, 1S55). •' .

З метою вапоб і гнути тіол-дисульфідному обміну, ер каталізується вільною ЗН-групою, остання оброблялась -монойолонетат-I0D кислотою’ за метолом Crestіeld , 1953. .

■ Для створення : гегерогенност і у препаратах САЛ провозили інкубацію при pH.7.4, . ирк 53.rpas.C- протягом 20 хвилин. Пі гмовк передбачають нєкшлиеість . рК^зрлегзност: переходів, за їких утворюються ізомари альбуміну. .

-Вживані препарати САЛ аналізували за-.даними іаоелеягри'ч-їогб фокусування у тонкому пласті 3.5S поліа.чрилашдного гелю, імукоелектройоретично, спектрофотометрично, методом градієнт-

кого ПААГ-електройореаа, матодаш дисперсії оптичного обертання (ZOO). Дослідження ДОО прозодтапса за допомогою приладу "С5іекттзойстсподя5іштр-24иС". Параметри аО, вО, Хе розраховувалася граоічням способом за- графі каш Шсйііта' - Янга і Д.УЯЄ для ксгазго оілка_ Розрахунки проводили за фзраудами,-*запрсго-. кованими Гроіцькгм,, 1365. ■ ,

Дія ммаливаяяя іійунних комплексів взивали метод тепловоі агрегації імукоглсбуліну G (0стрейкп,1387). - Ша модель.молна вдавати як для вивчення, патогенезу імуноксшлєксноі патології, так і для досдідяення ígQ б і о логічних, тканин, шр містять в собі імунні комплекси, різної молзкуляриаї маси (Ковстантинова, 1386). Імуноглсбулін G виділяли з сироватки крові здорових лв-дай методом іонообмінної хроматограйі ї і' гадь - фільтращезо, у колонці з Л2АЕ ixsjmzaacm або з "Улатрогелем- АсА202'\ . Шсля елвдіх IgG проводили контроль чистоти отримуваних препаратів білка. З козвому випадку реєструвала спагсгри поглинання нагив-ного igS, концентрації)' визначзла при 28а нм спектрофстадатриз-. но. . - ■ • ■ '

Фівико-хімічні властивості імуяоглобулінів сироватки крові яри системних хворобах сполучної тканини вивчали методом і зоєлзктричногс фокусування, запропонованого Valraet, удосконалений на.каЬедрі біохімії КМІ. Для створення природного граді-знта рН вживали амсоліки с&ірм LKB, по дають можливість створення градієнта рЯ в межаз від 3,0 ‘до 11,0..

Рівень імунаглобудінів А, М та G в сироватці крозі■ людина вивчали методом, простої радиальног імуноджрузі ї. '

- 9 -

РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕННЯ I IX ОБГОВОРЕННЯ Фізкко-хімічні властивості імувсглобудкнів сироватки крові пж системних хворобах сполучної тканини Визнали сЬізико - хімічні особливості, сщхшнткобкх ікупог-добудінів і імунаглобузіків, -да входять в газд імунних комплекс і з при захворюваннях сполучної .тканини системного характеру. Визначеним аакгором ушкодження органів і тканин за дано: патології е імунні комплекси різного стаду,' ги'визначають широку гаму клініко - імунолог і чшіх проявів '(Dongal.1985, Theorilopolus, 19BG). Важливо відмітити, по властивості ПІК пр;і даній, патології поруч з іншими йзкторзет еєликоо'шроз залежать від йюрмугчкх їх їмуноглобудішв.

. Вшикували дсляігженнн сироватки крові дітей і дорослих з системною червонои возчанков, ревматоїдним артритом і склеродермією. Продовження захворкізання б від кільках місяців до 12 Років. Практично у всіх хворих в період загострення визначено Підвішений порівняно З трупов здорових ЛЕД9Й рівень' IgG прк зміні IgA та IgM в досить-широких ыэлзх. Ікуноглобудін S доходив ДО РІВНЯ 37 t/jL '

1 Визначення Фізико-хішчног стійкості- ікуноглобудшів після прогрівання-сироваток при 55 град-С протягом ЗО хвилин, показало, шо для IgG у 9DX клінічних випадків шє шспэ висока термостабільність С 85 - 95% їло де ¡гул.). ...Еля IgM у 60S та IgA у 40% випадків характерна низька температурна стійкість його молекул до ЗО - 50 Z. Виявити будь-яку закономірність термостабільності імуноглобулінід з рівнем .ЇХ, в крові чи з плином хвороби не вдалося. - .

. Кількість ПІК для 90% сироваток крові виявилась - дузгв високою: в середньому, до 500 ум. од. ОП 450 ніг, проти в середньому

;CG j>i. СД. GIL Б КОНТРОЛЬНІЙ ГРУПІ ДСНСріВ. У кільках хворих НІІ були виявлені на початку ‘заіворшааня, адв ке виявлялися далі.

Лля 757. зив'-аяих.сиссватак ¡sosaa говорите про-високу чуйність імунних комплексів зо дії прогрівання протягом ЗО XL'/JHE при 55 град. С - зони практично повністю розкладалися,- • їїе меж олуйити v підтвєрдзеяням тізжо-хімічної гетерсгєнностt імушас комплексів і того, ш їх (формування йда за рахуном некавалент-

НС Г 33SSM03Í Г. *■ ' - . ■ „

Іооедегсгричні спектри імуБСГлооуліка й у сироватці Кран: хворих кс рі івзяь хзядьсвиднай-заракгер у. динададі роавіїк: патолог і «ного процесу. ■ 3 період різкого загострення - хвороб; ссектр 1^6 стає вкрай нгзаичайшіс ааЕшаоться їідьки 2-3 . іракці ї зі значенням-рЯ 8.-S - 9.5. Важлива, пшфеслиги, аш сама ті фракції igG входять зо складу ЦІК у цих хзорих. -

Еигілані препаративно ЯІХ хворих ревмагоїдшш- - артрит» крім igG, містили в собі igM, а.при склеродермії - IgA. їзое-дєкхойчким Фокусуванням- вихідних сироваток крові; хворих- ревна-тоїдним артритом і ЛІН з.них. одержано, наступні результати; крива ізаспєктру IgQ однакова для .всіх, зразків, характері-зувться Основною.фракцією у слабо-луговій області рН-градієнт а лейками малими, додатковими, у дуговій області рН. В. област рїї 6.6 - 7.0 завжди при фокусуванні цільної сироватки-кров зкзйачагт:ьея одна чітка фракція, і&ксішуш Фракцій IgS з осадків ІК розміщувалися в ціх гв-воках. У всіх випадках, досдід-:гзнна. в зоні кислих значень рН.вкязлєно наявність їеМ поруч ;

Т.~і~ . - '

-<£Ur. . - - _

Склад головних ізоедєктричких сракяійшувклх комплексі: ьивчали методом і.муновлєкгрофореза з подіпрешшітушою, ан-ти-IgM і аяти-ígG сироватками; При цьому у фракції з. ізоточко:

- и - .

pi 5,7 - 6,7 у всіх випадках виявляли l?G та IgM.

■ Важливо відмітити. ш Фокусування імунних комплексів, отриманих- з крсві хворих імувокамплеисЕОО патологією, завлта виявляло іракці» в інтервалі pH 4,Е5 - 5,0, з той час як за склеродермії ця фракція зсовувалась до рК 5.2 - 5.3. Пілчас ідйяявьіканіі даних-йракаїй яскааяво, яз еони обумовлені альбуміном. .

' Ааьбуііін; по виявлено у ІВЗ ікунзих коісідєксіз, модв сути їх кс.'яшкентсц. айо епзіййічиа птіешсіітуватися разом з НІК під

зі є» ЯЕГ. 22н .викзику: можливої! явспєєжЬічної преципітації альбуміну та іІІЯ проведено серю лослідаваь, в яких л-зешліту-завг аій'поліетядєягліксдвм при . різних розчиненнях, в .тому числі і великих (у 3, 10, '.20 та S0 разів). . ’

Звичайно,-. ,ш-ври таких евликих розчиненнях-як 20 та Ьи pasia,.. ймовірність .неспеш-мзічшї сшвагреґгщї альбуміна з ПІК лр»- ïz.ссаддєнні ЕЕГ.незначна Seoctvj вілштитя, -го при -ваш-' ваній концентрації П2Г 3,75% не прициштує молсмарний IgS, а також альбунін (Donçal-iSBS; '■ Ссорег, 19БЗ). У роботі вказано сироватка, донор із і хворих- сиетешогз червоною всвчашсоп. Яос-лідагякя ПЕГ преципітатів, отриаааяг при різних розведеннях, імукозлвктройоретично було виявлено наявність альбуміна у всіх зразках. Припустили, на альбумін включається до складу ПІК підчас процесу їх '¿армування. -

Приязний у крові з великій. КІЛЬКОСТІ' • альбумін МОЯ . 32'я-STsaiacs -з : імунними- ксшаексач®' і сояобідізувагя• їх через властиву йому вжаку.стійкість у розчиненому ейглепі. Альбумін може стабілізуюче діяти-на створені'. ІК. Показано, so с;фОЕат-козий'-альбумін б компонентом ПІК (Eiiat,13Sî; Zlien. 19S3). .

З . роботі ■ влито ліссЬідізоваНх прзпарати сироваткового

• - fS -

альбуміну "Reanal", отриманого аяиртовиьг осадженням по Еону (Фракція II), і власні препарати , скршдаі в сироваток здорових докер іе. -

Звичайне додання сироваткового альбуміну до кінцевої концентрації 45 г/г до сироватки крові, со містять в собі іьг/нкі комплекси, ПІДВІІЕУЕ ЇХ СТІЙКІСТЬ 2D ОСЗДКУКТССЇ ДІЇ ПОДІЄТИ-денглікслю. Підчас даедідквкня сироваток-sew груп донорів а вживання« різких препаратів САЛ показано, шо у всіх, вішалках додання альбуміна призводили до підвиавння стійкості- ікзш комплексів у розчиненому стані (табд.1)',

Хабхі. Вплив альбуміну ка оптичну платність за 45Q ни СЕСОЕ£ТКЙ крові Е ПРИСУТНОСТІ 3.75% БЕГ

Іанори Альбумін Кількість ШК ПІК+САЛ

І груда fisanaj 25 0,203+0,GD9 0,100+0,005 •

II група фракція 2 33 0,230+0,00? 0,ЩЗ+0,005

(по Коку) : ' • • ■ . ■

о

Ерк Цьому BifflBKSDca, ш стабілізуюча дія різних .предзра-Тів адьбуиіна неоднакова.

Ми накагадися вишити, щш обумовлена неоднакова дія рівних препаратів САЛ ш оті&:іс?ь іадтгнкх комплексів. Вживані препарати САЛ порівнювали за параметрами 2100 та І ЕФ у . тонкому пласті 2.5Z падіакриламідного геде, аа молекулярною.масою, а також ікукзяшічко. Jura роботи вживано сироватки донорі б. і хвориг в імунагезьалексною патологією.

Всі вживані препарати альбуміна за результати дослідження S00 відповідали нативнокуадьбуміку. людини; аО 290 - 320, еО

250 - 270. Хе 260 - 2С5. Не різнилися зони і за молекулярною массл, а також і муках і мі чно.

Значну різницю між s раз тат адьбуміна виявлено піл час їх ізселектричного иХжусузанЕЯ, Ряд препаратів, крім головних зон а області pH 4,9 - 5,2 має додаткові полюси з інтервалі pH 5,3

- 5,5. ПЬичсму, прапаратя САЛ, зо шлк такі ж додатком яаласй Зідьш стабілізуюче зіяли на Яій-(лан.і). Наявність цих зозат-лзвих полос моле бути пояснена по різному. 7Яо.це заСруднюті Ділки, ш. не s альбуміном, або ця. результат шхрогегэрогеннос-їі альбуміну, шр як відомо, а?являється б результаті різних йесвешфічних- впливів на нього. Такими йсигтсрами т:хуть бути зенатурутаг агента, лігаали і.навіть обробта теплом (Троїцький 19013.

Мал: 1 Ізоелектричні спектри стандарту pi Test Міх 9 "Serva” (1) і сироваткового альбуміну людини: 2~'4!?eartal": 3-по Кону, фракція 2: 4-одерасаний електрофоретично:5-він

ї£8 ПІСЛЯ ТЄЯЛОБОІ Обробки; 6-він яз після додання йодоцетаміду

і тейлсвоі обробки

ТТг.япягдти TT.fVw.f і it pi . ^ VJiii отримані о ДОНОРСЬКИХ сирова-

ток. практично не мали мі крогєтерогенніст і і слабо Ешпшаш ка ЗІК (всі результат:.! щзивсшшк до стакаазтнаго кое&іціекту). ■

Ун викликали шляу гетерогенності у гомогенних препаратах зльб^іну ішуйаціЕв при 63 трал. С'протягом 20 хвилин. Післе такої обробки альбумін демонструє в 12$ наявність духг'Велико: кількості фракцій в інтервалі рЕ.5.3 -5.5, а імтЕоєдєетросво-ретичао was мі сиг подовження звичайної полоси прешишхаїїі ї.

Оброблений теплом, альбумін, ао того слабо стабілізуючий ДІЙ , лри доданні до сироватка кроні як здорово: донорів, t?Jv ; ХВОРИХ ЛШЄЙ, значно СІДЕИПуБ СТІЙКІСТЬ ІЕ- ДО .ДІ ї . ШЛіЄГИ-лекглі кала, дія ойрабл&лого т&плом .альбуміка не залежала лрпн-uauoso ВІД ТОГО, ЯКБ .згаре ло ШХ бузо вжите. Однак ВІШЛЦИЙ рівень імунних комдлакгав txpv; рівних захворшвааЕКХ і у - різних лвсрж коливається в якрскоиу діапазоні, але в середньому зни-ггЗпК?. оптично і плоте от піа діев альбушна, ш оброблений теплом, проходять н з гостовіркосїю, .-видаю 95% (табл.2) Та5л.2 иіткчка платність sa 450- еи скраватки крові,

■ обрсбленной ІЕ? у ■ присутності 2Z альоуміка

. . . mom , . ' ' ; ■

Г’-іп 'Ч * ТТ wwi - . . - 20 S1‘ -tpi 4ІМІ 1S3 173 175 . 233 302

»• А» - 1С0 100 100' 100 100 - 100 100 O O

йагивкий tjiwl . 01 £0 . 105 . 108 142 120 172 260

н. . ■ S5,7 93,0 35,0 81,2. 82, Г 68,2. 72,3 S5.1

САЛ оор. Т 'єплом 56 . 73 .78 67 87 93 • 113 145

Г!f> *4 so.o 64,5 , 50.4 ijC, 3 55,2 47,5 ■4б;з

ЗіДСМО,- шо значку роль у-зинийнеяйі гетерогенності грає тіол-дісудьйідйий'.обмін, ллй якого згзшлза наявність в зльпт-міні- вїдзної- 2Я-груйи. 2еи доданні аззашгаміда до албумичу в сігіБЕїдігагзнні 1С:1 моль/моль значна гяидузться утвосекня кся-свсмерів-під ліга teaíOBOf обтобкя і етайідізужча з::і тайго адьбушна. зз 2ІК. ' ;

Отримані. далі, тзшво могрггь поясняга різну стабілізуючу дію алабуміна на імунні коюшвкеи. .Яаягяють яоишорнеріа бутса заяагвна- у-Щіепарагах СДД "Reanal" і. я« аисли нього глгоадана лія-на.стхіШсть ПЙ у розчині поаівтизаяглікслг. Так. жсзс зйхідайй рівень ПІД.складав 230+0,009 yst.oa.an 450-чи. то а присутності САЯ- і10+0,005 - ум. од; СЯ 460 нм. В -гоя ж чає. вихідно препаратам САЛ,. отриманих-■ .cnacíosiftt осадаенням .¡то 2ану, не властива наявність гетерогенності і. сїзйілізлиз дія на ПІК. ала після теплової'обробки-ці зластйзссч'ч казані. '

Показано. ш альбумін, який додане re ase сйррмсззкого

и.іуяного’кокзлв«са.- дів стзбілізутсу®. -

УЮШШВіШІ. І«3 - АЛЬБУМІНОВИХ ЗШЖЦІЖ Еаз*4аля стяйілхзуйчу дій гиьбуміяа на І«Н. агрогсзатсі Г9ШШ при, 63 град. С. протягом ¿В гзкаин. 7акяй йілск мсзе Су-ти'вяигий sa модель'-імунних газмпівкеїа (Оогреако. 1987).. йгог-різання білка ■ зризвозигь до гсздазу заутрюазо-мслєкудашхх •зоднввах і гілосйобнях зв'язків, з результаті чого упгятзка модекул- І$б стає іг/хксю, при цьому ка поверглі «акссмодекуда sкоронуються додаткові датесмінантаї го>тли psHire гагпвзш sceDSÄKHi молекули. Нативка макгсшлеісула тасга *пком nepsrso-%*озтьея на активовану.

Звичайне додавання- альбуміва до сформованих теплових а: регатів igS к<? зализало етабілігутаз на їх стій-::ста до .ai полі етиленгліколь. Потрібно відмітите, ш даний ^икошн епос тер-гався незалежно від чого, чи був вжитій вихідний чи тіопе регзі'О оброблений теплом альбумін.

Однак відоьр, по наявність альбушна у розтані IgS гаа ir/є кого arpsrauiB (Eaiifftnsn,l973). І дійсно, гри сяібшхкс шекні 1:7 агрєгатоутворевЕЯ не споетрегалося. Навіть якшо вя сформовані теплові агрегати IgG вдруге, обробляти тзплом sa Є rps.2. С д:д час 20 зшклин, але ваг в присутності аабуг'ікз спостерігаються пониження ступеню кутністі у присутності ПСЛІ е-ткденгліксля. , , ,

Тшда чином, зкіншг-еісь одночасно під дією теплової сб PDDке ІеЗ І алібум'ін роблять ВИСОКОСТІйке ДО ДІЇ SET утвсренв

Ба підставі отриманих результатів мата щшпустЕтк. и альйушн не тільки стабілізує ПІК, але і; зніжує включення но вкх молекул IçG до них. Основну активність при ЦЬОМУ ВКНВЛЯІСТ Юаисригври альбуміна, як функціонально активні білга. вагаз Пат ОГЄНЄТКЧНи ( тро ІНЬКЗІЙ. і 3S7 ).

З '

Поага лих йори альбуміна може грати властиву роль бар'єр ка оляху уптоджутоі дії ЛІК на тканини. Це спогоджується : к’оїщепш.єа бар'єрної -функції альбуміну як важливої частині греікзгнігету. •

' жсюзки

1. Сироватковий альбумін людини стабілівувче діє на стійкість циркушзвчих ivyinrax комплексів у розчині, аз ймовірне

І л "/їигГи¿ГГХЗ,гК7Цу И і Ю.

С. Умоезв такої стобі лі зугазї дії є наявність з альбуміні іілької 5Н-групи. яка грає зйш пальну. роль в Функціонуванні іЛ£.бУМіКа 1 и.бу?ЛСЗЛЗОо ВЇШЇїКНсгКНЯ Г^Т^-рОГ^ККСО'ГІ» ЗМіКЦ, ооу-ивлені тіол * дисульФігнам сСміеои,. харакгвризутаті появу кзк-хзрмері-н як іукиі знали ас активних білкіз, зажшзкх пзтогене-'ИЧНО. . .

■ 3. Різні комерційні препарати САД 'чиннт стабілізуючу ліз

;а стійкість імунних комплексів з різній міоі. хс пов'язано з ¡асібом їх одеряання та зберіганая. і -ль-ачзіть. з різним вмі-:тсм кошЬор.черів.

А. Взаємодії альбумін- імунОі-лсбуаін Є ге достатньо для ¡провадження стабілізуючої дії альбуміну ка модельні Іл, одер-ені з ІеС, що буз агрзгований гешгом. .. •

5. їізико-хімічні властивості імунсгдоеулгіяіз 3 сшзоЕатгег :рсві при .системних вахворнваннях"сполучної тканини змінені в юрівнянні а нормою, іїі- зміни корєдгать з ззакісїів аатологич-;ого процесу, зникають лід час рамісіг і можуть використовувавсь як об'єктивний критерій успіху дікувааза.

\^П*лСОК СГТУиЛІНлЗ дсіНЇЇХ іТ

1. йЕОзлектричєсг-сго спектры иммуноглобулинов 'СЬЕОВОЇКЯ срови яри иммунизации я различно» патологии / Косяк 0. Г. . Зайцева P.íL , Бэлый С. Ф. , Лузина И. Г., ГСуаяа Л. Д. // йггекулярвая

_ ГГ-Г(-п НПЭ« - T>rs-r ОО — П ОС — СО .

JnQ-iUt <i/j, £urMdf -».du/it.» L*«

2. Иммуноглобулины сызорстки кровм при хтзоничастсм ГНО-Д-їом зпйтимгганите- / Ксс-ик О. Г.. Зуев Е. Е , Балабакцав- С. Р, , iy-

ЗИНЗ У- Г. // С5. "йизиологкя к патология систем -кроки к кроиооб-. галениЕ". - Симферополь. - 1983. - Т. 95 '

3. СЙеетрЭПС'2ЛрИМВгрИЧ«СКйё особенности 1еЗ ИЗ . СЫВрРОТГО:

крож Сольных люлер. после тиреоивэкгомни / Кдскк О:Т., Лувикг ЯГ., Троицкий Г. 5. / Тег,., вока;-V йсесоюн. гсонш. по секгроокс-“

ПШ! биополимеров. - Харьков, 1684. - С. 117 - не.

4.' Скзяко - химические особенности иммуноглобулина ■ Б Ис

сыеоготки-крови жней больща: • •диййуэвш токсичеаэ&г забои -во I после хирургического■лечения / Косик 0. Г., Взйелич А, Е. , Лузина И. Г. , Фесенко В. И // -Тез. доке. V Укр. -биах. сьезле. - .'Киев, Наук, думка, 1987. -4 2. - С. ¿2 -'-42. ' • ,

5. Дувика' К. г., Гроикий - Г. в. Влияние альбумина на устой-

чивость иммунных комплексов б раетЕО&е // Докл. . АН Украины. -1991. -N12. - С. 111 - 112. ' '

■ Б. Трокцккй Г. в. , .йузийз К. Г., Атгшзвь' С. П. Вааимолзйо-твке альоумкна с- шф^лирута^*-иммунным* комплексами и ъН вэашкяаг: шуЕкциокадькая рода // 2окл. АН Украины. - 1933/-