Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Вопросы резистентности некоторых видов сальмонелл к антибиотикам и дезинфектантам

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Вопросы резистентности некоторых видов сальмонелл к антибиотикам и дезинфектантам"

!ЯВДСГ£РСХЗ> аЛРАВООХГАПЗЗЖ РС1-СР Гостокскяй ордена Дружбч пародов медицинский институт

На правах рукописи

Филипченко Сзргей Николаевич

ВОПРОСЫ РЕЗИСТЕНТНОСТИ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ САлЬШНШ К АНТИБИОТИКАМ И ДЕЗШФЕКТАНТАН

03.00„07 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертация ;;а соискание ученой стейени кандидата медицинских наук

Ростов-на-Дону - 1991 год

Работа выполнена в Харьковском научно-исследовательском институте микробиологии и кмлунологии.

Научный руководитель - доктор медицинских наук,

про^е ссор Н. С. Моро зова.

Официальные оппоненты; доктор медицинских наук,

профессор П.П.Дярскяй; доктор медицинских наук Н.В.Карницкая.

Ведущая организация - Московский НИК вакцин к

сывороток ям.И.И.Мечникова.

Защита состоится " у^ " иь£> 1391 г. ь час.

на заседаний специализированного совета Д -0Ь4. 53. 01. при Ростовском медицинском институте / 344700, Ростов-на-Дону, Нахичеванский пер,,29 /.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ростовского медицинского института.

Автореферат разослан , С.1ЛЛ _ г.

Ученый секретарь

специализированного совета, доцент

Н.Я.КОРГЛПОЕ

- з -

Актуальность проблемы.

Актуальность и социальная значимость проблемы сальмонеллезоь определяется их широким распространением среди людей и животных, высоким и все возрастающим уровнем заболеваемости, увеличением и»5ииировзн;юсти сальмонеллами различных объектов окружающей среды.

Научные исследования в этой области проводятся в большинстве стран мира, в том числе и СССР. Большой вклад в развитие знаний о сальмонсллезах внесли работы отечественных и зарубежных авторов - Блюгер А.Ф., Зарицкий A.M., Килессо Б.А., Рожнова С.Ш., Iciyio^ f fTlOiCL/l и Другие. Обобщение и анализ данных литературы позволяет отметить существенные изменения в настоящее время в характере проявления эпидемического процесса при сальминелле-зах, особенностью которого является определенная тенденция к изменению этиологической структуры возбудителей в сторону разнообразия их видового состава.

Согласно официальным данным / Килессо В.А., Рожнова С.Ш. 19Ь5 г./ несмотря на определенные различия на отдельных территориях, в целом этиологическая структура салылонеллезов имеет значительное сходство. В число доминирующих возбудителей в последние годы помимо 5 i^jpkirriuiium- вошли i. in-Jct/i ii'Ji f 6, oiicfbocDt ¿. ßiai-fa .

Б связи с этим для своевременного осуществления надлежащих мер по профилактике сальмонеллезов помимо систематического слежения за этиологической структурой и серотиповым пейзажем сальмонелл, выделенных из различных объектов внешней сроды, необходимо проводить динамическое наблюдение за биологическими свойства!«: микроорганизмов.

Как полагает большинство исследователей, в числе биологи-

ческих особенностей сальмонелл особого внимания заслуживает их резистентность к антибиотикам и дезинфектантам, поскольку наделенный такими свойствами возбудитель, обладает селективными преимуществами. Подобные изменения документированы в основном у & {урАспш-и'ит. . Появилась сообщения, что подобные свойства приобретают и другие серовары сальмонелл ¿. -^¿^с^кх-сд in-fcuti ii / Зарицкий A.M. IS85 г./

Кроме тсто режимы обеззараживания различных объектов, применяемые при сальмонеллезах, разработаны с использованием лабораторного штамма кишечной палочки /штамм Ж312/, устойчивость которого к дезинфицирующим средствам ниже устойчивости сальмонелл / В.Ф.Буранова, В.К.Вашков, 1Э72г./. Данные о чувствительности сальмонелл к дезинфицирующим средствам не многочисленны, разноречивы и-касаются только штаммов 6. iyphtniuiturrt / А.Ф.Блюгер,1975г., В.А.Килессо,1976г.,Е.В.Войтенкова,1382г., А.Г.Котова,1980г.,A.M.Зарицкий,19Ь5г.,Н.$.Соколова,1936г./ Это диктует необходимость изучения резистентности доминирующих видов сальмонелл к широко применяемым дезинфицирующим средствам, в частности, являющимся эталоном хлорсодержащей группы препаратов хлорамина Б, выяснения степени изменения биологических свойств культур сальмонелл, подвергшихся воздействию дезинфек-тантов.

Устойчивость к дезинфицирующим препаратам чаще регистрируется у антибиотикорезистенгных штаммов сальмонелл, что ставит на обсуждение вопрос о корреляции указанных признаков. Следовательно,' в период четко наметившейся тенденции к изменению этиологической структуры саяьмонеллезов особое значение приобретает информация о фактическом диапазоне, условиях и механизме формировали? резистентности к антибактериальным препаратам у доминирующих штаммов сальмонелл.

Целью настоящей, работы явилось - изучить резистентность доминирующих сероваров сальмонелл к антибиотикам и хлорсодержащим дезинфектантам, ее генетическую природу, взаимосвязь признаков, особенности биологических свойств резистентных вариантов, в аспекте их значения для бактериологической, диагностики, эпидемиологического анализа и усовершенствования мероприятий по профилактике сальконеллезоз.

йадачи работы - изучить изменение пейзажа сероваров сальмонелл в этиологической структуре сальмонеллезов;

- изучить биологические свойства штаммов различных видов сальмонелл, выделенных из различных объектов окружающей среды /ферментативные, серологические свойства, антибиотикорезистент-ность, устойчивость к действию обеззараживающих агентов/;

- изучить взаимосвязь признаков"антибиотике- и хлорамино-резистентности;

- изучить вариабельность биологических свойств различных "видов сальмонелл, подвергшихся воздействию хлорсодсржащих дезин-фектантов;

- обосновать основные направления усовершенствования неспецифической профилактики при сальмонеллезах в современных условиях.

Научная новизна работы.В работе представлены следующие данные, полученные впервые :

-на осноье сравнительной оценки уровня и спектра резистентности к антибиотикам и дезинфицирующим препаратам, доминировавший в последнее десятилетие б.^рРигпиЛ^ит. и приобретающих этиологическое значение <5. А.

-показано отсутствие генетической взаимосвязи между признаками антибиотике- и хлорашшорезистенткостя;

- экспериментально установлено влияние хлорал«? на на биоло-

установлено преимущество

и

гические свойства сальмонелл, проявляющееся в повышении резистентности к антибиотикам и изменении метаболической активности;

- выявлена чувствительность хлораминсрезистентных штаммов к хлорсодерзкащей композии - хлордезин.

Практическая значимость.

Разработан ряд новых практических рекомендаций, имеющих значение для усовершенствования мероприятий неспецифической: профилактики сальмонеллезов;

- внесены коррективы в критерии оценки качества дезинфекционных мероприятий в очагах сальмонеллезов;

- разработан ускоренный лабораторный метод выделения сальмонелл;

- обоснован путь повышения эффективности дезинфекционных мероприятий в очагах сальмонеллезов, основанный на принципе чередования дезинфекционных препаратов. Показана "икшшяальная возможность чередования традиционных хлорсодеру.., :их препаратов и хлорсодержащих композиций.

Внедрение результатов исследования. I! результатам работы изданы следующие методические материалы, угверзденнке МЗ УССР :

1. Информационное письмо "Критерии оценки дезинфекционных мероприятий и меры по их усовершенствованию в очагах острых кишечных инфекций-", Киев, 1985 г.

2. Информационное письмо "Унифицированный метод выделения и идентификации возбудителей острых кишечных инфекций в очагах", Киев, 1988 г,

Аппробация диссертации,- Работа апробирована на заседании Ученого совета ХЭДШМИ им.И.И.Мечникова 21.12.89г. протокол № 19.

Основные положения диссертации доложены: на Харьковском медицинском обществе / 1987,1988,1989 г.г./, Всесоюзной конференции в г. Одессе в 1987 г.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 7 статей.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 3-х глав собственных исследований, заключения, выводов. Объем диссертации с таблицами, рисунками, указателем литературы составляет Г41 страница машинописного текста. Работа иллюстрирована 24 таблицами и I рисунком. Список использованной литературы включает 1СЗ отечественных и 167 иностранных работ. ■

Седержание работы.

' В обзоре литературы предстазлены основные сведения об этиологической структуре сальмонеллезов. Приведены микробиологические аспекты сальмонеллезов, обусловленных ¡>. ур-Ригпы((¿т. ,

¿^¿Ъ.&кшВ^ $ . Обсуддсвы данные о резис-

тентности доминирующих серовароь сальмонелл к антибиотикам и дезинфицирующим препаратам.

. Изложены основные сведения о влиянии антибиотиков и дезин-фектантов ¡1а биологические свойства сальмонелл, определяющих их эпидемиологическую значимость.

Проведен критический анализ сведений о генетических механизмах формирования резистентности сальмонелл к дезинфицирующим препаратам, антибиотикам и корреляции данных признаков. Освещены возможности и перспективы изучения условий и факторов формирования резистентности к антибактериальным препаратам и пути её преодоления.

Материалы и методы исследований.

Для решения основных задач работы использованы разнообразные методы микробиологических, эпидемиологических и генетических исследований. Всего проведено 5312 бактериологических анализов, материала ог больных / кровь на гемокультуру - 31 анализ, кал-

1353 анализов, моча - 476 анализов/, смывов с предметов внешней среды вочагах,/ 2816/, пищевых продуктов /203 анализа/, изучено 428 штаммов, полученных для идентификации из Харькова и Харьковской области.

- При проведении исследований использовано 487 культур микро-

и 120 редкоЕстречакэдихся штаммов, выделенных в 1386-1083 г.г. щ.я -спорадической заболеваемости из клинкческого материала ст .людей и с объектов окружающей среда.

Бее штаммы были типичны по своим морфологическим, культураль-ншл и биохимическим свойствам.

Антигенную (формулу штаммов сальмонелл определяли в реакции агглютинации /РА/ на стекле с комерческими 0- и Ы- сыворотками. Вирулентность ыташов сальмонелл изучали при внутрибрюшин- '

иск заражении мы;ие£ и расчета по методу Кербера / вирулеят-

7 7

нке до 4°10 микробных тел; слабо-вирулентными 4*10 -

р ^

1*10 микрооиых тел; авирулентнымя - 1Д ^ свище 3,5*10 микробных те."./ и в кератоконъюнктивальной пробе по методике А / в дозе около 2*10^ бактерий/.

Бактериологическое исследование с целью выявления сальмонелл проводили в соответствии с"инструкцией по микробиологической диагностике кишечных заболеваний вызванных шигеллаш, сальмонеллами и энтерспатогенными палочками" N3 СССР №629- 160 ст II.05.66г. и " Методические указаниями по. микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями" МЗ СССР Ж 04-23/3^ - от 17.12.84 г,

Лля выделения сальмонелл применяли среды накопления /10 % желчный бульон, селенитовый бульон, магниевую среду/, а для не-

ресева среда Плоскирева, Эндо, висмутсульфит агар, Олькеницксгс, Рессела.

Определение чувствительности к антибиотикам проводили методой диффузии в агар с применением бумажных дисков и методом серийных разведений в соответствии с Приказом МЗ СССР $ 250 1975 г.

•Устойчивость сальмонелл к химическим дезинфицирующим препараг там изучали при воздействии дезинфицирующих растворов на тест-культуру, фиксированную на батистовых-тест-объектах согласно "Инструкции по определению бактерицидных свойств новых* дезинфицирующих средств" / Й739-68 от 6.05,68 г./

Наличие трансмиссивных Е - плазмид изучали в опытах конъюгации с использованием в качестве штамма-реципиента £• сои! К12 С 600 М^2"^ Са.с.^тР по методу Нещадкма Г.II. и

Мороз А.Ф.

Все результаты, исследований подвергали статистичес-

кой обработке с использованием методов вариационной статистики:.

В результате изучения этиологической структуры сальмонелле-зов в Харьковской области установлено, что в период 13а0-1981 годов преобладали штаммы 3 1Ц,т_ . которые составили 79,0 % в 1980 г. и 80,3 % в 1981 году от всех обнаруженных сальмонелл. 3 последующие годы удельный вес Л Л удД/'ггш к^'и в общей сумме выделенных сальмонелл заметно снизился с 56,8> в 1382 го.ду до 35,6 % в 1988 году. Б то же время в этот период возрос удельный вес ^ьси'^/а. ) которая практически до 1964 г. на территории Харьковской Области не регистрировалась-. Кроме этого в доминирующую группу стал входить серовар 6- ЗМе-ЬшТ, динамика которого отмечается периодами подъема и'спада /'16,6 % в 1882 Г, - 28,0 % в 1084 Г. И 9,6 % - 1988 г./.'

Одним из важных аспектов слеьсения за динамикой серотипового пейзаж?, сальмонелл явились вопросы, связанные с инфицированностью

" - 10 -

• сальмонеллами различных объектов внешней среды. В серии проведенных нами исследований обращает на себя -внимание, наиболее частое выделение из пищевых продуктов 5. bcii ■j-CL и i. Ot / 46,5 - 13,2 % соответственно/ по сравнению с ъЛ^-ркигш^и-ггь /1,9 %/. Б подавляющем большинстве случаев сальмонеллы выделялись из мяса и мясопродуктов - основных факторов распространения сальмонелл у людей. При этом отмечено значительное сходство серо-варов, выделенных в указанный период из мясопродуктов и. у людей, что свидетельствует в пользу экологических связей возбудителей выделенных из разных источников.

Таким образом, следует отметить, что в рассматриваемый период в отличие от данных прошлых лет, увеличилось число случаев выделения у людей _5. ¡гси£~&, и ¿. l/i'^c-hauJ » которые занимают следующее после i i^fpfiu/пи-itц/тг- ранговое положение.

В перечне биологических особенностей штаммов;сальмонелл большинство исследователей делает акцент на их резистентности к антибиотикам и дезинсекционным препаратам. Сообщения о значительном увеличении удельного веса i-'^jp^imuliüm с '''Шокествен-н \ лекарственной устойчивостью появились в конце .'1-х годов, тс есть в период активизации ii-'i^'-utnulium как атиологическо-го фактора. Так," А.К.Зарицкий привел данные о выделении резистентных штаммов в 88,0 - 98,0 -J> случаев в 1977-1978 г.г. по сравнению с 20,0 - 60,0 % в 1972-1973 годах.

Поэтому особый интерес представляют результаты сравнительного изучения антибиотиксрезистенгных 6. licc/n и штаммов, только приобретающих доминирующее положение в этиологической структуре сальмоиоллезов.

В плане поставленной задачи была изучена резистентность к антибиотикам 437 штаммов сальмонелл, из которых 24,6 % составили Li^^irrvtfUum , 21,8 % -4. fiicu-fa- , 1ь,7 % - i, . zk\eLctt) 10,3 io - -&■ ii-fctHsii-^ и ¿4,6 % - редковстречаю,диеся серовары

сальмонелл на территории Харьковской области.

Анализ уровня и спектра резистентности проведен в отношении 10 антибиотиков, выбор которых был основан на отсутствии' у сальмонелл конститутивной устойчивости и наиболее частом использовании их для лечения, сальмонеллезов. Установлено, что среди всех изученных сероваров преобладали штаммы с множественной устойчивостью более чем к 5 антибиотикам./ 92,3 -98,0 % /.

Интерес представляют данные, указывающие,. что среди -1 рЬл ггшЛ.('(/Пт, резистентных к гентамицину и пслжйксину. .

зарегистрировано 24,2 - 28,3 % соответственно. То-есть показатели резистентности к указанным антибиотикам совпадает с таковыми в 70-80-е годы. В то же время среди других доминирующих сероваров сальмонелл, процент их в 2-3 раза выше. Отмечено, что среди резистентных к гентамицину и полимиксину сальмонелл, выделенных с объектов окружающей среды, регистрировали в 1,5 - 2 раза чаще, чем среди штаммов выделенных от больных / 47»7 - 7ъ,8 •% и 28,044,2 % соответственно /.

Таким образом, полученные данные дают основание полагать, что резистентность к антибиотикам сальмонелл является не-столько результатом "госпигализма", сколько общей тенденцией эволюции микробных популяций под действием научно-технического прогресса. Такое широкое, использование в последние годы антибиотиков в ветеринарной практике, пищевых добавках при откорме скота явилось ^толчком к формированию тожественно устойчивых штаммов среди сальмонелл зоонозного происховдения. По мнению ряда авторов не менее решающее значение в формировании резистентных популяций имеет обмен Я - плазмидами.

73 ,т,„™ ------------------------ПО О <И » / Р • . . ПТ Г и/

•С&Соб в конъюгациошшх экспериментах передачи множественной

' - 12

•' лекарственной устойчивости, была доказана ее плазмидная природа.

Важно отметить, что по частоте обнаружения множественной . лекарственной,устойчивости ведущее место заняли штаммы, несущие трансмиссивные' плазмиды с маркерами / 32,5 .

' Значительное место также' заняли штаммы с маркерами резис-

' 'тентности Рт 22,4 %. Штаммы с детерминантами &т ¿>т

^п^'Сгп ^пт1 Рпт1 &гп, (гт !е ^ составили в сред-

Р Т $

* нем .6,7 - 7,3 - 12,0.^. А штаммы с детерминантами ^¿п <£ Д^Ст I^ были документированы лишь в 5,6 -5,9

'Приведенные данные заслуживают-внимание в том аспекте, что у всех.серсваров,регистрируется значительный процент штаммов, устойчивых к. ампициллину. Важно отметить, что ампициллин относится к числу резервных антибиотиков'и для лечения больных сальмонелле зами широко в данном регионе не применялся.

В отношении остающегося дискутабельным и до настоящего времени вопроса о корреляции признака антибиотиксрезистентнссти плазмидной; природы и вирулентности, наши опыты дают основание для-однозначного ответа о её отсутствии. Такой вывод основан на том,'что И+ штаммы характеризовались слабой вирулентностью.

К категории других проявлений эволюции сальмонелл в современных условиях относится их-устойчивость к хлоратам. В связи с этим представляют интерес данные об отношении к широко применяемым в мел",-".ине* и ветеринарной-практике дезинфектантам. Тем более

такиесве,гелия в литературе-шеюгея только относительно штаммов ? * ' *

¿- ^рА* пъи\ли.гп.

Поэтому задачей наших исследований явилось изучение резистентности доминирующих серсваров сальмонелл к широко используемому в СССР и являющемуся эталоном для хлорссдергшщих дезинфек-тантов. хпог^.му Б и ¿¡овому хлорсодеркащему композиционному препарату - хлорцезину.

В результате проведенных исследований был выявлен значктель-

- ГЗ - ' ■.

ный процент штаммов сальмонелл устойчивых к воздействию 0,5 %

раствора хлорамина. При этом отмечено, что наибольший процент :

из них составили штаммы ¿. ixcu-fci. -.17,9 % ± 3,72 % и .

iJi\&fwu) - 16,5 % +'3,89 %. Среди штаммов - ■

tnulîum их выявлено несколько меньше - 14,2 + 3,10 %, а

in-jooM.'i.ib всего 8,0+3,84 %. Такая же тенденция прослежена и.'

в группе средиеустойчивых штаммов, где -¿- 'fuCu fù^ и i- m- '

.alc(J составили 11,3 + 3,07 % и 11,0 + 3,28 %■.ссответст-"

венно, a i i^pkîmu^'a/n. . ~ 7>5 ± 2»40 %•'■'.

Иные данные получены при изучении,чувствительности сальмонелл к хлордезину. Устойчивые к. данному препарату штаммы. регистрировались в пределах 0,9 + 0,22 % - 4,4 + 2,15"$.. Причем .самый', низкий процент устойчивых штаммов составили ' Ao^'^.à. .

В связи с выявлением среди циркулирующих в настоящее время сероваров устойчивых к хлорсодержащим препаратам, заслуживают внимания данные od отношении к этой группе дезинфектантов культур, характеризующихся шно.т.есгвенной лекарственной устойчивостью. Это явилось основанием для сопоставления признаков антибиотике- и хлораминорезистентнссти у различных сероваров сальмонелл.

Проведенные исследования позволили сделать вывод о том, что подавляющее большинство устойчивых к действию различных концентраций хлорамина штаммов сальмонелл / 27,4 - 35,3 %/ характеризовались наличием трансмиссивной лекарственной устойчивостью.

Среди резистентных к хлорамину культур число штаммов, облагающих К - плазмвдаш было в 2 - 3 раза больше, чем среди чувствительных к'отому дезинфектанту.

Полученные результаты поставили на обсуждение вопрос о генетической природе взаимосвязи признаков антибиотике- и хлораминорезистентнссти.

С этой цельно была проведена серия экспериментов в которых с передачей трансмиссивных £ - пдазмид путем конъюгации была

■ предпринята попытка передачи от штаммов-доноров штамму-реципиенту устойчивости к хлорамину.

Штаммами-донорамд были 4 штата . $. 1и ты и и т.> 3 шт. ^. 7)1\&1ъоиГ и 3 ¡атамма <5 -Аси/1)с сохранившие .жизнеспособность в 3,0 % растворе хлорамина, а штаммом-реципиентом £. &&£(' К12С600 Сае*..* Чувствительность 'к различным

концентрациям хлорамина определяли у 30 -50 колоний каждого трансконъюганга.

В результате проведенных экспериментов у 8 из 10 штаммов сальмонелл осуществлена передача. В - плазмид и только у двух из них документирована одновременная передача хлораминсрезистент-' тоста." ';

Однако различие в уровнях,устойчивости к хлорамину у реципиентов -и трансконъюгантов, нестабильность признака хлорашнре-зистентности / утрачивается через 1-2 пассажа на питательных средах при сохранении антибиотикорезистентности/ позволяют сделать вывод об отсутствий генетической связи указанных признаков.

В следующей серии экспериментов было проведено изучение влияния дезинфицирующих препаратов на биологические свойства сальмонелл.'Эти исследования представляют интересе в теоретическом ' и практическом отношении, поскольку изменение биологических свойств микробных клеток мояет усложнять бактериологическую диагностику приводя к затруднениям при идентификации таких культур.

В имеющихся по этому вопросу единичных публикациях сообщается, что-у культур, сохранивших жизнеспособность в растворах дезинфектантов повышалась вирулентность, устойчивость к антибиотикам, происходили различные нарушения метаболической активности / Когова А.Л. 1987, 1988 г.г./.

Исследования проведены на 48? штаммах сальмонелл различ-

ных сероваров, типичных по морфологическим, ояохимическим и серологическим свойствам которые подвергали воздействию 0,1 % раствора хлорамина. Бысев производили через 30 минут экспозиции. После воздействия хлорамина в такой постановке опыта 76 /15,6 %¡ штаммов сальмонелл сохранили в среднем ясизнеспосойнссть 340^-

о

2*10° микробных клеток из 2-х млрд. исходной взвеси.

У 10,5 - 52,6 % штаммов сальмонелл резистентных к дезинфек-танту микробных клеток документировано снижение биохимической активности. При пассировании их в желчном бульоне па 10 - 21 пассажах были в 10,5 % случаев отселекционировааы колонии, восстановите биохимическую активность.

У штаммов, подвергшихся воздействию дезипфектанта, были отмечены изменения и в актигинной структуре. Так, у штаммов ¿

tnufuurrb- Ь2,А % сохранили антиген 0-5 и 94,1 %

антиген 0-12, Н антиген 94,1 % и 83,8 % Г и 2 фазы соответственно. У штаммов \Jih<s.fuíu) в 80,0 % случаев документированы антигены с-е и С-7. У 50,0 % ihjcwé(\ па регистрировался Н антиген 1,5.

При изучении вирулентности сальмонелл, выживших после воздействия растворов хлорамина, различий у исходных штаммов и после воздействия дезинфектанта - не выявлено.

Особого внимания заслуживают данные о повышении устойчивости к антибиотикам у особей, сохранивших жизнеспособность в хлорамине. Так, после обработки хлорамином, количество устойчивых к гентамицину по сравнению с исходными культурами возросло на 44,3 %, к канамицину на 19,7 %. К остальным антибиотикам повышение резистентности документировано в пределах 1,3-2,6 %.

В опытах трансконъюгации, где донорами явились штаммы сальмонелл / 3 шг. лЛ^р fomvhJu m . 2 шт. &. ¿bCLf/a- » I шт. ■í injcttsi{í'¿ и I шт. ¿ Ti^cíxOtd / У 5 штаммов / 2 шт.

^^рАлтиЛ/'ит , 2 шт. 4. Ьси , и I шт гГг$ексс$ /

подтвервдена плазмвдная природа антибиотикорезистенткости.

Полученные данные явились основанием для внесения соответствующих корректив и дополнений в существующие критерии оценки дезинфекционных мероприятий в очагах сальмонеллезов, основные положения которых отражены в информационном письме " Критерии оценки дезинфекционных мероприятий и меры по их усовершенствовании в очагах острых кишечных инфекций," Киев, 1985 г.

Определены параметры вариабельности биологических свойств сальмонелл, которые необходимо учитывать при лабораторном контроле качества дезинфекционных мероприятий.

Для выделения и идентификации измененных вариантов сальмонелл разработана селективная среда с антибиотиками по методике А.Б.Чериомордика с внесением корректив, основанных на спектре антибиотикорезистентности циркулирующих в настоящее время сальмонелл» Антибиотики вносят в обычные коммерческие среды:. Предлагаемый метод дает возможность выделить возбудителя из ассоциации в чистой культуре, в том числе с измененной ферментативной активностью, что приводит к повышению высевасмости в 2 раза и сроков идентификации на 1-2 дня.

Указанные материалы, обобщены в информационном письме "Усовершенствованный метод выделения и идентификации возбудителей острых кише^их инфекций в очагах", Киев, 1988 г.

В целом, результаты проведенных исследований легли в основу разработок, направленных на усовершенствование противоэпидемических мероприятий при сальмонеллезах.

Апробация полученных результатов и практической ценности работы.

Основные положения диссертации долоконы на Харьковском ме~

дицинском обществе в 1987,1988 и IS89 г.г.,'Всесоюзной конференции в г. Одессе в IS87 г.

Выводы

1. В этиологической структуре салшонеллезов, зарегистрированных в г.Харькове и области в 1980-1988г.г. преобладала 6 ■ уи.'muUUm. Л9,0 - 35,6 %J. В 1985-1986 г.г. увеличилось число случаев выделения у людей и с объектов окружающей среды; i.tfilcAcu) /16,1 - II.6 % и 28,0 - 13,2 % соответственно/i <4. (гш ^-Cl, до 27,8 % и 22,0 - 46,5 % соответственно, которые заняли следующее после mx'i^îs/r? ранговое положение.

Перечень сероваров сальмонелл, выделенных из пяшевых продуктов зитотного происхождения, проявляет значительное сходство с таковыми у людей, что характеризует некоторые стороны: экологии сальмонелл.

2. Результаты сравнительного анализа спектра антибиотико-резистентности, доминирующих в этиологической структуре сальмо-неллезов сероваров сальмонелл, позволили отметить преимущественное распространение среди них штаммов с множественной лекарственной устойчивостью / 84,2 - 99,2 %/. У 73,9 % штаммов р1ипшЛ,<игуъ- ; 81,6 %- i-AciifiL} 71,4 %- i. Ihj'ctn ét-6 ; 85,9 % - £. i/z'i, E/fiouf ; экспериментально подтверждено наличие трансмиссивных 2 - плазмид.

■ 3. Особенностью изученных сероваров сальмонелл явилось различие, в показателях их резистентности к гентамицину. У штаммов' i ;tîjp<hi mtt и ni , доминирующих с 70-х годов, сна документирована в 24,2 % .случаев, а у ¿. LaJ^CL , i- '^{■i.oJbDt.^ . £ b( jiXhÂiA , удельный вес которых в этиологической структур^ салшонеллезов возрос в 1986 - 1988 г.г. в 45,0 -82,4- Э0,0;t случаев соответственно.

4. Среди ijeex изученных сроваров сальмонелл преобладали

штамма чувствительные к хлорамину / 70,8 - 84,0 хлордезину / 30,0 - 94,0 % /. Из числа хлораминорезистентных штаммов наибольший процент составили штаммы 4. Хси 17,9 %; 4. ск&сд- 16,5 & %. Из числа устойчивых к

хлордезину большинство составили штаммы Ъ.-дт-Ъе^'Л-ьд - 4,4$;

,0 %, Подавляющее большинство хлораминорезистентных штаммов проявляли чувствительность к хлордезину.

5. На основании экспериментов, проведенных на разливных серологических вариантах сальмонелл, показано отсутствие генетической взаимосвязи между признаками антибиотике- и хлораминорезке-тентяоетью.

6. Получены, новые данные о биологических особенностях популяций сальмонелл, получивших свое начало из выживших после воздействия хлореодержащих дезинфектантов особей, отличающихся резистентностью к антибиотикам, изменением метаболической активности.

7. С учетом возможных изменений биологических свойств микробных клеток, поврезденных дезинфектантами, усовершенствован метод выделения и идентификации сальмонелл, что в совокупности открывает перспективы к повышению качества дезинфекционных мероприятий и их лабораторного контроля в очагах-сальмонеллезов.

8. Стратегия противоэпидемических и профилактических мероприятий по борьбе с сальмонеллезами должна учитывать тенденцию к изменению зоологической структуры, сальмонеллезов и доминирований в серотяповом пейзаже сальмонелл, широко распространенных среди людей и животных.

Работы, опубликованные по теме диссертации :

I. Экспериментальное обоснование методических подходов к оценке биологического воздействия дезинфектаитов./ Морозова Н.С., Емельянова О.И.Даршнова Г.И./.-/'/XI Украинский Республиканский

съезд микроб,.эпидемиол..паразит.-Тезисы докладов.- Одесса, 1985, С.

2. Критерии оценки дезинфекционных мероприятий и меры по их усовершенствованию в очагах острых кишечных инфекций. /Кармано-ва Г.И..Кибарлина H.H..Емельянова 0.И..Морозова Н.С„/.-Информаци-рнное письмо.-Киев, 1985, 4с.

3. Экспериментальное изучение механизма устойчивости брюшнотифозных бактерий, к дезннрцирущим средства«. / Емельянова О.И., Карманова Г.И./.-//Актуальные вопросы дезинфекции и стерилизации.-Республиканская научно практическая конференция посвященная 100-летию Одесской дезстанции.-Тезисы: докладов.-Одесса,1387.С,69-70.

4. Чувствительность к хлорамину различных видов сальмонелл, выделенных при госпитальных инфекциях. /Кябардина Н,Н..Волошен-ко П.Г./.-//Актуальные вопросы: дезинфекции и стерилизации.-Республиканская научно-практическая конференция посвященная 100-ле-тиго Одесской дезстакции.-Тезисы: докладов.-Одесса,1387.С.71-72.

5. Оценка резистентности к антибиотикам и хлорсодержащим дезинфектантам у некоторых видов сальмонелл./КоваленкоА.В..Волошенко П.Г./.-//Межинститутская научно-практическая конференция молодых ученых.-Тезисы докладов.-Харьков,ISS7.С.12.

6. Клинико-зпидемиологические особенности сальмонеллеза Хайфа. /Волошенко П.Г..Кибардина H.H..Морозова Н.С./.-//Микробиология, эпидемиология и клиника инф.болезней. -Харьков,1988.С.14-16.

7. Усовершенствованный метод выделения и идентификации возбудителей острых кишечных инфекций в очагах. /Кибардина H.H., Морозова Н.С..Карманова Г.И..Волошенко П.Г..Инютина Е.Г./.- Информационное письмо,- Киев, 1988. 3 с.