Влияние стресса на активность карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла

Бардинова, Жанна Сергеевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние стресса на активность карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние стресса на активность карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла"

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

Бардинова Жанна Сергеевна

ВЛИЯНИЕ СТРЕССА НА АКТИВНОСТЬ КАРБОКСИПЕПТИДАЗ В ТКАНЯХ САМОК КРЫС НА РАЗНЫХ СТАДИЯХ ЭСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА

03.00.04-Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург 2004

Работа выполнена на кафедре химии и биохимии Пензенского государственного педагогического университета им. В.Г. Белинского

Научный руководитель:

кандидат биологических наук, доцент

Вернигора Александр Николаевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор

Кокряков Владимир Николаевич

доктор биологических наук, профессор

Арутюнян Александр Вартанович

Ведущая организация:

Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН

Защита состоится << >> С^С^с^/и^- 2004 г. в часов на заседа-

нии Диссертационного совета Д 212.232.09 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора биологических наук при Санкт-Петербургском государственном университете по адресу: 199034, г. Санкт-Петербург, Университетская набережная, д. 7/9, ауд. 90.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке им. A.M. Горького Санкт-Петербургского государственного университета.

Автореферат разослан <<

cwsZ/ui

2004 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

З.И. Крутецкая

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Проблема влияния стресса на репродуктивную систему является одной из наиболее актуальных тем для исследований в области биохимии, нейрохимии и медицины. Стрессорное воздействие приводит к нарушению синтеза и секреции половых гормонов, эстрального цикла, прекращению овуляции, развитию бесплодия (Бабичев В.Н., 1994; Fi-gueiredo H.F., 2002).

В развитие стресс-реакции прежде всего вовлекаются пептиды гипофиза и гипоталамуса: адренокортикотропный гормон (АКТГ), кортикотропин-рилизинг фактор (КРФ), Р-эндорфин, пролактин, вазопрессин (Слепушкин В.Д., 1988; Лишманов Ю.Б., 1994), а также энкефалины, вещество Р и др. (Бондаренко Т.И. и соавтр., 1990; Юматов Е.А., 1983; Oehme P., 1988). Стрессорная активация • гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы с увеличением концентрации вышеперечисленных пептидов вызывает угнетение образования половых гормонов в организме животных и человека, что, возможно, и вызывает нарушение эстрального цикла (Бабичев В.Н., 1994; Fi-gueiredo H.F., 2002).

Различия в содержании гонадотропных гормонов (Бабичев В.Н., 1994), половых стероидов и глюкокортикоидов (Бабичев В.Н., 1994; Michael E. et. al., 1999), опиоидных пептидов (Бабичев В.Н., 1994; Тинников А.А., 1990), вещества Р (Potargowicz E. et. al., 1999) у самцов и самок могут обуславливать половые особенности ответа на стресс. Кроме того, у женских особей в течение эстрального цикла изменяется уровень гонадотропинов, опиодных пептидов и других регуляторных пептидов (Бабичев В.Н., 1994; Potargowicz Е. et. al., 1999 и др.), что вероятно и определяет различия в стресс-реакции и устойчивости к стрессу у самок на разных стадиях эстрального цикла.

Биологически активные пептиды синтезируются в виде неактивных высокомолекулярных предшественников, в конечной стадии процессинга которых участвуют ферменты со специфичностью карбоксипептидазы В, катализирующие отщепление остатков основных аминокислот - аргинина и лизи-на—с С-конца предшественников биологически активных пептидов (Steiner D.F., 1991; Skidgel R.A. et. al., 1998 и др.). Одним из ферментов, участвующих в метаболизме многих нейропептидов является карбоксипептидаза Н (КПН) (КФ 3.4.17.10) (Fricker L.D., 1991; Вернигора А.Н., Генгин М.Т., 1995; Smyth D.G. et. al., 1989 и др.). В инактивацию или модулирование активности некоторых пептидов до или после их взаимодействия с рецепторами вовлекается карбоксипептидаза М (КПМ) (КФ 3.4.17.12) (Skidgel R.A. et. al., 1998). Вместе с тем предполагают, что функции недавно обнаруженной ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы (ФМСФ-КП) сходны с таковыми КПН (Вернигора А.Н., Генгин М.Т. 2003). Однако роль этого фермента мало изучена. ■ ,'ЪС. ХА^.'.СШЛЛЬМАЙ!

На настоящий момент не изучена роль КПМ и ФМСФ-КП в ответе на стресс. Отсутствуют сведения о половых особенностях изменения активности основных карбоксипептидаз при остром стрессорном воздействии. Влияние стресса на активность основных КП у самок крыс на разных стадиях эст-рального цикла также не изучено.

Целью нашей работы было изучение роли основных карбоксипептидаз в механизмах развития острого эмоционально-болевого стресса взависимости и от пола животных и стадии эстрального цикла.

При выполнении работы были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать активность карбоксипептидаз Н, М и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла в норме.

2. Провести сравнительный анализ влияния стресса на активность кар-боксипептидаз Н, М и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы у животных разного пола.

3. Изучить влияние острого эмоционально-болевого стресса разной продолжительности на активность карбоксипептидаз Н, М и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в головном мозге, надпочечниках и половых железах самок крыс на разных стадиях эстрального цикла.

Научная новизна и практическая ценность работы. Впервые изучено распределение активности основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла. Показано влияние острого эмоционально-болевого стресса на активность КПН, ФМСФ-КП и КПМ в гипотала-мо-гипофизарно-надпочечниково-гонадной системе (ГГНГС) крыс. Обнаружены половые отличия-стрессорного изменения активности КПП, ФМСФ-КП, КПМ. Показано, что изменения активности КПН и ФМСФ-ингибируемой КП у самок крыс зависят от стадии эстрального цикла. Установлено, что стресс наиболее выраженно влияет на активность КПН и ФМСФ-КП на стадиях эструса и проэструса.

Полученные результаты представляют интерес для понимания механизмов функционирования пептидергических систем и роли основных карбок-сипептидаз в регуляции эстрального цикла в норме и при стрессорном воздействии, а также молекулярных механизмов влияния стресса на эстральный-(менструальный) цикл и развитие бесплодия. Полученные данные могут быть использованы при разработке фармакологических средств для лечения нарушений менструального цикла и бесплодия.

Положения, выносимые на защиту;

1. У интактных самок крыс активность КПН в гипофизе, стриатуме и ФМСФ-ингибируемой КП в гипофизе, половых железах выше, чем у самцов. Стадия эстрального цикла оказывает влияние на активность КПН в гипофизе, стриатуме, на активность ФМСФ-КП — в яичниках и не влияет на активность КПМ.

2. Острый эмоционально-болевой стресс оказывает более сильное влияние на активность КПН и ФМСФ-КП, чем на активность КПМ; эти различия выражены в тканях самок в большей мере, чем у самцов.

3- Эмоционально-болевой стресс вызывает существенное изменение активности КПН и ФМСФ-КП у самок крыс на стадиях эструс и проэструс.

Апробация и публикации. Материалы диссертации представлены на научных конференциях Российской Академии Естествознания (Дагомыс, октябрь, 2003 г., Египет, февраль, 2004 г.), итоговых научных конференциях профессорско-преподавательского состава Пензенского Государственного Педагогического Университета (2002, 2003 г.г.). По результатам исследования опубликовано 5 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из 6 разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты, обсуждение, выводы. Работа изложена на 145 страницах машинописного текста, иллюстрирована 21 рисунком и 15 таблицами. Список литературы содержит 276 наименований на русском и иностранных языках.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В работе использовали гипоталамус, стриатум, гипофиз, надпочечники и половые железы самок на разных стадиях эстрального цикла (проэструс, эструс, диэструс) и самцов белых беспородных крыс массой 180—250 г. Стадию цикла определяли по влагалищным мазкам (Серая крыса, 1990).

Для моделирования острого эмоционально-болевого стресса крысам в течение 0,5 ч (непродолжительный стресс) или 2 ч (продолжительный стресс) через каждые 10 с в беспорядочном режиме подавали один из трех сигналов длительностью 1 с: вспышка света (лампа накаливания мощностью 200 Вт, расстояние 0,5 м), звук (90 Дб), электрокожное раздражение (сила тока 2 мА).

Животных декапитировали непосредственно после воздействия (0 ч), через 0,5, 4 и 18 часов после стресса. При этом контролировали, чтобы самки находились на той же стадии цикла, что и при воздействии стресса.

Активность ферментов определяли флюорометрическим методом (Fricker L.D., Snyder S.H., 1983): КПН— с использованием высокоспецифичного ингибитора фермента — гуанидиноэтилмеркаптоянтарной кислоты (ГЭМЯК) и дансил-Phe-Ala-Arg в качестве субстрата, рН 5,6 (Supattapone S. et al., 1983), ФМСФ-ингибируемой КП - с использованием ингибитора фермента — фенилметилсульфонилфторида (ФМСФ) и субстрата дансил-Phe-Leu-Arg, рН 5,6 (Вернигора А.Н. и соавтр., 1995). КПМ - с использованием ингибитора фермента— гуанидиноэтилмеркаптоянтарной кислоты (ГЭМЯК) и дансил-Phe-Ala-Arg в качестве субстрата, рН 7,4 (Deddish P.A. et al., 1990). Содержание белка в пробах определяли методом Lowry (Lowry, 1951).

Экспериментальные данные обрабатывали статистически с использованием t-критерия Стьюдента (Лакин Г.Ф., 1990).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Распределение акивности основных карбоксипептидаз в тканях интактных крыс. У интактных самок крыс в гипофизе активность КПН была наиболее высокой в проэструсе, наиболее низкой — в диэструсе и промежуточной — в эструсе, а в стриатуме в проэструсе и эструсе выше, чем в диэструсе (табл. I). В гипофизе и стриатуме обнаружены существенные половые отличия в уровне ферментативной активности.

Табл. 1. Активность КПН, ФМСФ-КП и КПМ в тканях самок крыс на разных стадиях астрального цикла и самцов (нмоль продукта, образовавшегося за I мин инкубации на 1 мг белка; М ± т; п = 5+6; " — р < 0,05, ""— р < 0,01, 1ХК' - р < 0,001 относительно диэструса; 4 - р < 0,05,- р < 0,01, 444 - р <

0,001 относительно эструса; * — р < 0,05, *— р < 0,0), "* — р < 0,001 относительно самцов).

Самки

Отдел Стадии эстрального цикла Вся вы- Самцы

Проэструс Эструс Диэструс борка

Активность карбоксипептидазы Н

Гипофиз 0,69+0,05 0,45±0,04 0,79+0,08" 0,46±0,04

Гипоталамус 0,21 ±0,01 0,25±0,01 0,24±0,02 0,23±0,01 0,23±0.02

Стриатум 0,17±0,02"' 0,19±0,01°" * 0,15±0,01 0,17±0,01 * 0,16±0,02

Надпочечники 0,07±0,01 0,07±0,01 0,09±0,01 0,08±0,01 0.07±0,01

Гонады 0,08±0,03 0,04±0,03 0,03±0,02 0,05±0,01 0,03±0,01

Активность ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы

Гипофиз 0,53± 0,03' 0,62±0,0б" 0,65+0,09 • 0,60±0,03' 0,37+0,05

Гипоталамус 0,20± 0,03 0,22± 0,02 0,22± 0,03 0,21 ±0,01 0,20±0,01

Стриатум 0,20± 0,01 0,22± 0,03 0,17± 0,02 0,20±0,01 0,20±0,01

Надпочечники 1,01 ±0,08 1,07± 0,19 0,81 ±0,09 • 0,98±0,07 1,15±0,13

Гонады 0,44+0,03,и" 0,48±0,05'"" 0,26+0,04** 0,41+0,03*** 0,12±0,02

Активность карбоксипептидазы М

Гипофиз 0,06±0,01 0,04+0,01 0,05±0,01 0,05±0,01 0,07±0,03

Гипоталамус 0,10±0,0Г 0,11 ±0,01 0,11 ±0,01 0,11 ±0,01 0,13±0,01

Стриатум 0,07±0,01 0,07±0,01 0,05±0,01 0,06±0,01 0,07±0,01

Надпочечники 0,005+ 0,001°°44" 0,014± 0,002"' 0,013± 0,002"' 0,011± 0,001'" 0,057± 0,007

Гонады 0,027± 0,003 0,033± 0,006"°" 0,015± 0,00 Г" 0,025± 0,002'" 0,183± 0,037

В гипофизе и половых железах активность ФМСФ-ингибируемой КП у всей выборки самок превышала активность у самцов (табл. 1). Активность ФМСФ-КП зависела от стадии эстрального цикла только в яичниках. На стадиях проэструса и эструса активность фермента в яичниках значительно превышала активность в диэструсе.

В надпочечниках и половых железах активность КПМ у самцов была выше, чем у всей выборки самок. Активность КПМ в надпочечниках на стадии проэструс была ниже, чем в эструсе и диэструсе, а в яичниках в проэст-русе и эструсе активность КПМ превышала таковую в диэструсе.

2. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность КПН, ФМСФ-ингибируемой КП и КПМ в тканях самцов и самок крыс. В гипофизе самцов крыс в условиях острого эмоционально-болевого стресса активность КПН повышалась (рис. 1). При длительном стрессе (2 ч) в гипоталамусе наблюдалось сначала повышение активности фермента, а затем -снижение, а непродолжительное воздействие приводило только к снижению уровня ферментативной активности. В стриатуме активность КПН уменьшалась после стресса длительностью 30 мин, в то время как при продолжительном стрессировании не наблюдалось изменений активности. В надпочечниках отмечено увеличение активности КПН.

В гипофизе самок крыс в условиях продолжительного стресса уровень активности КПН снижался в большей степени, чем при кратковременном воздействии. Повышение активности КПН после стрессорного воздействия наблюдалось в гипоталамусе и надпочечниках самок.

Наиболее выраженные половые отличия в изменении активности КПН при действии острого эмоционально-болевого стресса выявлены в гипофизе (рис. 1). В условиях кратковременного стресса отмечено незначительное снижение активности КПН у самок, существенное повышение у самцов и более быстрая-нормализация активности фермента после стресса у женских особей, чем у мужских. При продолжительном стрессе наблюдалось более существенное и длительное уменьшение активности КПН у самок, и небольшое повышение активности у самцов.

При кратковременном стрессе отмечено повышение активности ФМСФ-КП в гипофизе самцов крыс и понижение - в семенниках, а продолжительное воздействие не вызывало достоверных изменений в уровне ферментативной активности в этих отделах в постстрессорный период (рис. 2). При длительном воздействии стрессорных факторов, в отличие от непродолжительного стресса, в гипоталамусе активность ФМСФ-КП повышалась. В стриатуме наблюдалось понижение активности фермента в условиях продолжительного стресса и повышение после кратковременного воздействия. В надпочечниках эмоционально-болевой стресс вызывал снижение активности ФМСФ-КП.

Существенное повышение активности ФМСФ-ингибируемой КП в условиях острого стресса у самок крыс обнаружено в гипоталамусе, надпочечниках и яичниках (рис. 2).

ГИПОФИЗ

ГИПОТАЛАМУС

р с <1 14ЧКИ самим

0 20

«0 15

| 0 10 1

5 от

НАДПОЧЕЧНИКИ

i" ••• •• '. ml riff rHI

О 12 7 tl IV § 0 0* I «Oft = О 04 f «I 02 ООО

ПОЛОВЫЕ ЖЕЛЕЗЫ

Рис. I. Активность КПН в тканях крыс после воздействия стресса длительностью 0,5 ч.

Примечание. Здесь и на рис. 2-6: М±ш; п=5-6; * - р < 0,05, * * - р < 0,01, *** - р < 0,001 относительно нормы; "-р < 0,05, р < 0,01, - р <

0,001 относительно диэструса; 4 - р < 0,0544 — р < 0,0 Р44 — р < 0,001 относительно эструса;' — р < 0,05 и — р < 0,0I — р < 0,001 относительно самцов;' — р < 0,05 " — р < 0,01"" — р < 0,001 относительно крыс стрессированных в течение 0,5 ч.

Наиболее выраженные половые отличия в изменении активности ФМСФ-ингибируемой КП в условиях острого эмоционально-болевою стресса отмечены в надпочечниках и половых железах животных. При кратковременном стрессе наблюдалось повышение активности фермента у самцов и понижение - у самок в этих отделах. Продолжительное воздействие вызывало снижение уровня активности ФМСФ-КП в надпочечниках у самцов и повышение в яичниках у самок, в то время как в надпочечниках самок и в семенниках самцов в этих же условиях активность не изменялась.

Более продолжительное воздействие острого стресса вызывало снижение активности КПМ в гипоталамусе и стриатуме самцов крыс (рис. 3). У самок крыс острый эмоционально-болевой стресс приводил к повышению активности КПМ в гипоталамусе и стриатуме, причем продолжительное воздействие, в отличие от кратковременного стресса, вызывало повышение активности в гипоталамусе. В стриатуме при стрессе в течение 2 ч наблюдалось сначала повышение, а затем снижение активности КПМ, в то время как непродолжительное воздействие приводило только к увеличению активности.

Выявлены половые отличия в изменении активности фермента. В стриа-туме при действии кратковременного стресса у самок отмечено повышение активности КПМ, а у самцов не наблюдалось каких-либо изменении. В гипоталамусе у животных разного пола в условиях продолжительного стресса изменение активности фермента было разнонаправленным. 2-х часовой стресс в стриатуме у самцов крыс вызывал снижение уровня ферментативной активности, а у самок активность КПМ сначала повышалась, а затем снижалась по отношению к интактным животным.

3. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность основных карбоксинептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях остального цикла. Воздействие продолжительного острого эмоционально-болевого стресса приводило к снижению активности КПН на стадии проэструс в гипофизе в большей степени, чем при кратковременном стрессе (рис 1). В гипоталамусе, стриатуме и надпочечниках на стадии проэструс острое стрессирую-шее воздействие длительностью 2 ч вызывало повышение активности КПН, в отличие от непродолжительного стресса. Во время эструса в гипофизе, гипоталамусе и стриатуме наблюдалось уменьшение уровня ферментативной активности, а в надпочечниках — повышение при действии стресса различной длительности. В диэструсе при продолжительном стрессе активность КПН незначительно увеличивалась в гипоталамусе и стриатуме, существенно - в гипофизе и не изменялась в надпочечниках, в отличие от кратковременного воздействия.

Кратковременный стресс вызывал понижение активности ФМСФ-КП в гипофизе на стадии проэструс, а продолжительный - в эсгрусе (рис. 2) В гипоталамусе на стадии диэструс в условиях кратковременного стресса

ГИПОФИЗ

Рис. 2. Активность ФМСФ-КП в тканях крыс после воздействия стресса длительностью 0,5 ч.

активность фермента снижалась, а продолжительный стресс вызывал повышение активности ФМСФ-КП. В яичниках при 30 минутном стрессе активность ФМСФ-КП увеличивалась на каждой стадии после воздействия, а в условиях 2-х часового стресса на стадии эструс уровень ферментативной активности снижался. В надпочечниках увеличение активности фермента наблюдалось в эструсе и диэструсе при кратковременном стрессе, в диэструсе -в условиях длительного воздействия.

При продолжительном стрессе активность КПМ снижалась па стадии эструс в гипоталамусе и стриатуме, в то время как кратковременный стресс не вызывал изменений активности на этой стадии цикла (рис. 3). 30-минутное стресс-воздействие, в отличие от 2-х часового, приводило к увеличению активности фермента в диэструсе в гипоталамусе и в проэструсе в стриатуме.

Таким образом, у интактных самок крыс активность КПН была выше, чем у самцов в гипофизе и стриатуме, ФМСФ-КП - в гипофизе и половых железах. У самцов в семенниках активность карбоксипептидазы М превышала таковую у самок в яичниках. Активность КПП у интактных самок крыс зависела от стадии эстрального цикла в гипофизе и стриатуме, ФМСФ-КП -только в яичниках, КПМ — в надпочечниках и яичниках. Выраженные половые различия в изменении активности КПН при стрессе отмечены в гипофизе, ФМСФ-КП — в надпочечниках и половых железах, КПМ — в гипоталамусе и стриатуме. Существенное влияние стадии эстрального цикла на активность КПН в условиях стресса наблюдалось в гипофизе и надпочечниках, ФМСФ-

Рис. 3. Активность КПМ в тканях крыс после воздействия стресса длительностью 0,5 ч.

КП - в гипофизе и яичниках. Активность КПМ при стрессе не зависела от стадии эстрального цикла.

Более высокий уровень активности КПН и ФМСФ-КП у интактных самок по сравнению с самцами хорошо согласуется с большим содержанием нейропептидов у самок, чем у самцов (Бабичев В.Н., 1994; Тинников А.А., 1990). Динамика изменения активности КПН на разных стадиях эстрального цикла в гипофизе совпадает с динамикой изменения уровня секреции гона-дотропных гормонов (Бабичев В.Н., 1984). Уровень энкефалинов и вещества Р в различных отделах головного мозга зависит от стадии эстрального цикла (Potargowicz E. et. al., 1999). Так как КПН участвует в процессинге предшественников гонадотропных гормонов, энкефалинов, вещества Р (Bruni J.F. et. al., 1977; Krieger D.T., 1983; Nagae A. et. al., 1992), то полученные результаты позволяют предположить, что КПН участвует в регуляции циклических изменений уровня гонадотропинов, энкефалинов, вещества Р.

Активность ФМСФ-КП во всех исследованных тканях самок крыс, за исключением яичников, не зависит от стадии цикла, поэтому маловероятно, что фермент вовлекается в регуляцию образования гонадотропных гормонов в течение эстрального цикла. Известно, что пептидгидролазы яичников вовлекаются в деградацию фолликулов. Максимальная активность ФМСФ-КП в яичниках обнаружена в эструсе, когда происходит разрыв фолликула. Поэтому не исключено, что ФМСФ-ингибируемая КП может участвовать в деградации фолликулов. Активность КПМ зависела от стадии эстрального цикла только в тех тканях, которые являются мишенью для тропных гормонов гипофиза. Вероятно, циклические изменения активности фермента в надпочечниках и яичниках связаны с тем, что фермент принимает участие в деградации некоторых пептидов в этих органах на разных стадиях цикла.

Динамика изменения активности КПН и ФМСФ-КП хорошо коррелирует с литературными данными о динамике изменения уровня нейропептидов в условиях воздействия стрессорных факторов (Тигранян Р.А., 1986; Anthony L. et al., 1998 и др.), что подтверждает предположение о вовлечении этих ферментов в ответ на стресс (Вернигора А.Н., Генгин М.Т., 1995). Отличия в изменении активности этих ферментов при стрессе различной длительности могут быть связаны с различными механизмами изменения уровня стресс-пептидов при кратковременном и длительном воздействии (Reisine T.D., Ах-elrod J., 1987; Engler D., Redei E., Kola I., 1999). Существенные изменения активности карбоксипептидазы М в условиях острого эмоционально-болевого стресса в гипоталамусе и стриатуме согласуются с имеющимися данными об участии этого фермента в модификации некоторых секретируемых форм биологически активных пептидов, которые вовлекаются в ограничение размаха стресс-реакциии и развитие адаптации к стрессу (Слепушкин В.Д. и со-автр., 1985; Вернигора А.Н., Генгин М.Т., 1993; Skidgel R.A. et al., 1998).

Разнонаправленный характер изменения активности КПН в гипофизе и ФМСФ-КП в надпочечниках и половых железах у животных разного пола

при воздействии острого стресса позволяет предположить участие этих ферментов в формировании половых особенностей ответа на стресс и в определении половых отличий в устойчивости к стрессу.

Зависимость изменений активности изучаемых ферментов при стрессе от стадии эстрального цикла, вероятно, связано с различным характером изменения уровня нейропептидов на разных стадиях астрального цикла, что и обуславливает различную устойчивость животных к воздействию стрессовых факторов в течение астрального цикла (Акоев И.Г., Алексеева Л.В., 1985).

Суммируя полученные результаты и литературные данные можно предложить следующую схему участия КПН и ФМСФ-КП в функционировании гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы (ГТНС) и гипогаламо-гипофизарно-гонадной системы (ГГГС) при стрессе (рис. 4).

Стресс вызывает увеличение синтеза и секреции КРФ в гипоталамусе, в образовании которого из проКРФ участвует КПН. КРФ приводит к повышению синтеза проопиомеланокортина (ПОМК) и КПН в гипофизе путем увеличения уровня их мРНК (Rodriguez С. et. al., 1989; Mains R.E. et. al., 1984). Из ПОМК при участии КПН образуется адренокортикотропный гормон (АКТГ), который стимулирует синтез и секрецию глюкокортикоидов корой надпочечников. Глюкокортикоиды регулируют синтез и секрецию КРФ и АКТГ по механизму обратной связи. В надпочечниках при стрессе повышается уровень энкефалинов и нейропептида Y, в образование которых из их предшественников вовлекается ФМСФ-КП.

В гипоталамусе образуется ГТ-Рг, который индуцирует синтез и секрецию лютеинизирующего (ЛГ) и фолликулостимулирующего (ФСГ) гормонов гипофизом. В образовании гонадотропинрилизинг гормона (ГТ-Рг), ЛГ и ФСГ участвует КПН. Л Г и ФСГ активируют биосинтез половых стероидов. Половые стероидные гормоны в свою очередь регулируют образование ГТ-Рг и гонадотропинов.

Стресс влияет на репродуктивную систему вследствие того, что она на всех уровнях регуляции подвержена влиянию гормонов ГТНС (Бабичев В.Н., 1985; Figueiredo H.F., 2002; Laatikainen T.J., 1991 и др). Кортикостероидные гормоны, секреция которых возрастает при стрессе, угнетают выработку половых стероидов гонадами, снижают секрецию гонадотропинов гипофизом. КРФ тормозит секрецию ГТ-Рг, что приводит к угнетению образования ЛГ, ФСГ, половых стероидных гормонов. Стероидные гормоны (глюкокортикои-ды, эстроген) снижают уровень экспрессии гена КПН (Rodriguez С. et. al., 1989; Mains R.E. et. al., 1984), что и вызывает снижение активности фермента. Поскольку КПН и ФМСФ-КП, вероятно, принимают участие в регуляции уровня ЛГ, ФСГ и гипоталамического ГТ-Рг, то изменение их активности при стрессе приводит к нарушению синтеза и секреции ГТ-Рг, гонадотропи-нов и нарушению астрального цикла.

Таким образом, вероятно, исследуемые ферменты участвуют в формировании гипоталамо-гипофизарно-надночечниковых и гипоталамо-гипофи-

СТРЕССОР

ггнс гггс

ЭСТРАЛЬНЫЙ

цикл

Рис. 4 Схема участия КПН и ФМСФ-ингибируемой КП в регуляции ответа на стресс.

зарно-гонадных связей в условиях стресса. Стрессорные изменения активности основных карбоксипептидаз могут приводить к нарушению синтеза и секреции половых гормонов, эстрального цикла, прекращению овуляции (Бабичев В.Н., 1985; Figueiredo H.F., 2002) и развитию бесплодия.

ВЫВОДЫ

1. В гипоталамо-гипофизарно-надпочечниково-гонадной системе крыс наиболее высокая активность карбоксипептидазы Н обнаружена в гипофизе, гипоталамусе и стриатуме, активность ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы - в яичниках и надпочечниках, а карбоксипептидазы М - в гипоталамусе и стриатуме.

2. Стадия эстрального цикла оказывает влияние на активность карбок-сипептидазы Н в гипофизе и стриатуме, а ФМСФ-ингибируемой карбокси-пептидазы — в яичниках. Активность карбоксипептидазы М не зависит от стадии эстрального цикла.

3. Стресс оказывает существенное влияние на активность исследуемых ферментов, более выраженное - на активность карбоксипептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы, чем на активность карбоксипеп-тидазы М. Наиболее существенные изменения активности карбоксипептида-зы Н в условиях стресса отмечены в гипофизе, а ФМСФ-ингибируемой кар-боксипептидазы - в надпочечниках у животных обоего пола.

4. Изменения активности исследуемых ферментов у самок были более продолжительными и более выраженными (особенно в половых железах), чем у самцов. Острый эмоцинально-болевой стресс в ряде случаев вызывает разнонаправленное изменение активности исследуемых ферментов у животных разного пола: повышение активности карбоксипептидазы Н в гипофизе у самцов и понижение у самок, увеличение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в надпочечниках и половых железах и карбоксипептида-зы М в гипоталамусе у самок и понижение у самцов.

5. Стадия эстрального цикла достоверно влияет на изменение активности карбоксипептидазы Н при стрессе в гипофизе, ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы — в гипофизе и яичниках. Активность карбоксипептида-зы М при воздействии стресса не зависит от стадии эстрального цикла.

6. Активность карбоксипептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбокси-пептидазы в гипофизе в условиях стресса снижается на стадиях проэструс и эструс; в диэструсе активность карбоксипептидазы Н повышается, а ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы - не изменяется. Острый стресс вызывав понижение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в яичниках самок крыс на стадии эструс.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Бардинова Ж.С., Сметанин В.А., Пет-рушова О.П. Активность основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла // Украинский биохимический журнал. -2003. - Т. 75, № 5, - С. 99-102.

2. Бардинова Ж.С., Сметанин В.А., Петрушова О.П. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы N в сыворотке

крови крыс // Вестник молодых ученых ПГПУ им. В.Г. Белинского. - Пенза, 2003. - Ч. I: Сб. науч. ст. студентов и аспирантов ун-та. - С. 10-11.

3. Сметании В.А., Бардинова Ж.С., Правосудова НА Влияние острой алкогольной интоксикации на активность карбоксипептидазы N в сыворотке крови крыс // Вестник молодых ученых ПГПУ им. В.Г. Белинского. - Пенза, 2003. — Ч. I: Сб. науч. ст. студентов и аспирантов ун-та. — С. 39-41.

4. Бардинова Ж.С., Сметанин В.А., Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Влияние эстрального цикла активность карбоксипептидазы Н, М и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в гипоталамо-гипофизарно-гонадной системе самок крыс // Тез. Докл. научной конференции Российской Академии Естествознания — Дагомыс, 2003. - С. 43.

5. Бардинова Ж.С., Сметанин В.А., Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы Н в тканях самок крыс // Тез. Докл. научной конференции Российской Академии Естествознания - Египет, 2004. - С. 25.

ООО «Даймонд» г. Пенза, пр. Победы 124, тел.: 553-555 подписано в печать 01.07.04 г. Тираж 100 экз.

# 15 920

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Бардинова, Жанна Сергеевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.И

1.1. Основные карбоксипептидазы.

1.1.1. Карбоксипептидаза Н.

1.1.2. Карбоксипептидаза М.

1.1.3. ФМСФ-ингибируемая карбоксипептидаза.

1.2. Роль пептидергических систем в регуляции эмоционально-болевого стресса.

1.2.1. Стресс и нейропептиды.

1.2.2. Активность ферментов обмена регуляторных пептидов при стрессе.

1.3. Роль пептидергических систем в регуляции эстрального цикла.

1.3.1. Нейропептиды на разных стадиях эстрального цикла.

1.3.2. Ферменты обмена регуляторных пептидов на разных стадиях эстрального цикла.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Моделирование острого эмоционально-болевого стресса.

2.2.2. Методы определения активности основных карбоксипептидаз.

2.2.3. Статистическая обработка результатов исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Активность карбоксипептидазы Н в гипоталамо-гипофизарнонадпочечниково-гонадной системе крыс в норме и при воздействии острого эмоционально-болевого стресса.

3.1.1. Распределение активности карбоксипептидазы Н в тканях интактных крыс.

3.1.2. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы Н в тканях самцов крыс.

3.1.3. Активность карбоксипептидазы Н у самок крыс при эмоциональноболевом стрессе.

3.1.4. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы Н в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла.

3.2. Активность ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в гипоталамо-гипофизарно-надпочечниково-гонадной системе крыс в норме и при воздействии острого эмоционально-болевого стресса.

3.2.1. Распределение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в тканях интактных крыс.

3.2.2. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность ФМСФингибируемой карбоксипептидазы в тканях самцов крыс.

3.2.3. Активность ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы у самок крыс при эмоционально-болевом стрессе.

3.2.4. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность ФМСФингибируемой карбоксипептидазы в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла.

3.3. Активность карбоксипептидазы М в гипоталамо-гипофизарнонадпочечниково-гонадной системе крыс в норме и при воздействии острого эмоционально-болевого стресса.

3.3.1. Распределение активности карбоксипептидазы М в тканях интактных крыс.

3.3.2. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы М в тканях самцов крыс.

3.3.3. Активность карбоксипептидазы М у самок крыс при эмоциональноболевом стрессе.

3.3.4. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбокси-пептидазы Н в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние стресса на активность карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла"

Проблема влияния стресса на репродуктивную систему является одной из наиболее актуальных тем для исследований в области биохимии, нейро-химии и медицины. Стрессорное воздействие приводит к нарушению синтеза и секреции половых гормонов, параметров функционирования рецепторов гипофиза и гонад, астрального цикла, прекращению овуляции [143, 192, 204] развитию бесплодия. Эффекты стресса опосредуются экстренной активацией стресс-реализующих и стресс-лимитирующих систем [71]. Ведущая роль в центральных нейрохимических механизмах эмоционально-болевого стресса принадлежит нейропептидам - веществам, выступающим в организме в роли нейромедиаторов, нейромодуляторов и гормонов [78, 87, 170, 191, 257].

В развитие стресс-реакции прежде всего вовлекаются пептиды гипофиза и гипоталамуса: адренокортикотропный гормон (АКТГ), кортикотропин-рилизинг фактор (КРФ), Р-эндорфин, пролактин, вазопрессин и другие [88]. Стрессорная активация гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы с увеличением концентрации вышеперечисленных веществ вызывает угнетение образования половых гормонов в организме животных и человека, что, возможно, и вызывает нарушение эстрального цикла [143, 192, 204].

Важную роль в адаптации организма к стрессорному воздействию играют эндогенные биологически активные пептиды — компоненты стресс-лимитирующих систем: энкефалины, вещество Р, пептид, вызывающий дельта сон [14, 15, 60, 69, 70, 88, 105, 218]. Различия в содержании гонадотропных гормонов [9, 16], половых стероидов и глюкокортикоидов [5, 9], опиоидных пептидов [206], вещества Р [230] у самцов и самок могут обуславливать половые особенности ответа на стресс. Кроме того, у особей женского пола в течение эстрального цикла изменяется уровень гонадотропинов, опиодных пептидов и других регуляторных пептидов [9, 16, 45], что вероятно и определяет различия в стресс-реакции и устойчивости к стрессу у самок на разных стадиях эстрального цикла.

Уровень активных нейропептидов в организме зависит от соотношения скоростей их синтеза и распада [182, 187]. Биологически активные пептиды синтезируются в виде неактивных высокомолекулярных предшественников, которые активируются при ограниченном расщеплении пептид-гидролазами (процессинге) [127, 170, 182, 187, 205, 246, 250, 263]. В конечной стадии про-цессинга участвуют ферменты со специфичностью КПВ, катализирующие отщепление остатков основных аминокислот - аргинина и лизина — с С-конца предшественников биологически активных пептидов [26, 146, 154, 265, 268]. Одним из основных ферментов, участвующих в биосинтезе таких нейропептидов как АКТГ [109], энкефалины [106, 108], вазопрессин [110], окси-тоцин [111], вещество Р [112], атриальный натрийуретический фактор [90] является карбоксипептидаза Н (КПН) (КФ 3.4.17.10). Известно также, что в обмен энкефалинов и других нейропептидов в организме вовлекается карбоксипептидаза М (КПМ) (КФ 3.4.17.12) [133, 252]. Она участвует в инактивации или модулировании активности пептидных гормонов до или после их взаимодействия с рецепторами [252]. Вместе с тем предполагают, что функции недавно обнаруженной ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы (ФМСФ-КП) сходны с таковыми КПН [28]. Однако роль этого фермента мало изучена.

На настоящий момент не изучена роль КПМ и ФМСФ-КП в ответе на стресс. Отсутствуют сведения о половых особенностях изменения активности основных карбоксипептидаз при остром стрессорном воздействии, а также об изменениях активности этих ферментов в условиях кратковременного стресса у самок крыс в зависимости от стадии эстрального цикла.

Целью нашей работы было изучение роли основных карбоксипептидаз в механизмах развития острого эмоционально-болевого стресса в зависимости от пола и стадии эстрального цикла.

При выполнении работы были поставлены следующие задачи:

2. Провести сравнительный анализ влияния стресса на активность карбоксипептидаз Н, М и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы у животных разного пола.

Научная новизна и практическая ценность работы. Впервые изучено распределение активности основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла. Показано влияние острого эмоционально-болевого стресса на активность КПН, ФМСФ-КП и КПМ в ГГНГС крыс. Обнаружены половые отличия стрессорного изменения активности КПН, ФМСФ-КП. Показано, что изменения активности КПН и ФМСФ-ингибируемой КП у самок крыс зависят от стадии эстрального цикла. Установлено, что стресс наиболее выраженно влияет на активность КПН и ФМСФ-КП на стадиях эструса и проэструса.

Полученные результаты представляют интерес для понимания механизмов функционирования пептидергических систем и роли основных карбоксипептидаз в регуляции эстрального цикла в норме и при стрессорном воздействии, а также молекулярных механизмов влияния стресса на эстральный (менструальный) цикл и развитие бесплодия. Полученные данные могут быть использованы при разработке фармакологических средств для лечения нарушений менструального цикла и бесплодия.

Положения, выносимые на защиту:

1. У интактных самок крыс активность КПН в гипофизе, стриатуме и ФМСФ-ингибируемой КП в гипофизе, половых железах выше, чем у самцов. Стадия эстрального цикла оказывает влияние на активность КПН в гипофизе, стриатуме, на активность ФМСФ-КП - в яичниках и не влияет на активность КПМ.

2.0стрый эмоционально-болевой стресс оказывает более сильное влияние на активность КПН и ФМСФ-КП, чем на активность КПМ; эти различия выражены в тканях самок в большей мере, чем у самцов.

3. Эмоционально-болевой стресс вызывает существенное изменение активности КПН и ФМСФ-КП у самок крыс на стадиях эструс и проэструс.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Бардинова, Жанна Сергеевна

ВЫВОДЫ

2. Стадия эстрального цикла оказывает влияние на активность карбоксипептидазы Н в гипофизе и стриатуме, а ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы — в яичниках. Активность карбоксипептидазы М не зависит от фазы эстрального цикла.

3. Стресс оказывает существенное влияние на активность исследуемых ферментов, более выраженное - на активность карбоксипептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы, чем на активность карбоксипептидазы М. Наиболее существенные изменения активности карбоксипептидазы Н в условиях стресса отмечены в гипофизе, а ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы - в надпочечниках у животных обоего пола.

4. Изменения активности исследуемых ферментов у самок были более продолжительными и более выраженными (особенно в половых железах), чем у самцов. Острый эмоцинально-болевой стресс в ряде случаев вызывает разнонаправленное изменение активности исследуемых ферментов у животных разного пола: повышение активности карбоксипептидазы Н в гипофизе у самцов и понижение у самок, увеличение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в надпочечниках и половых железах и карбоксипептидазы М в гипоталамусе у самок и понижение у самцов.

5. Стадия эстрального цикла достоверно влияет на изменение активности карбоксипептидазы Н при стрессе в гипофизе, ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы - в гипофизе и яичниках. Активность карбоксипептидазы М при воздействии стресса не зависит от стадии эстрального цикла.

6. Активность карбоксипептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбокси-пептидазы в гипофизе в условиях стресса снижается на стадиях проэструса и эструса; в диэструсе активность карбоксипептидазы Н повышается, а ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы - не изменяется. Острый стресс вызывает понижение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в яичниках самок крыс на стадии эструса.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Бардинова, Жанна Сергеевна, Пенза

1. Азарян A.B. Пептидгидролазы нервной системы и их биологические функции. — Ереван: Айастан, 1989. - 208 с.

2. Акоев И.Г., Алексеева JI.B. Пол, реактивность, резистентность. М.: Знание, 1985.-64 с.

3. Андреев Б.В., Игнатов Ю.Д., Никитина З.С., Сытинский И.А. Антистрес-сорная роль ГАМК-эргической системы мозга // Журн. высш. нервн. де-ят. 1982. - Т. 32, № 3. - С. 511-519.

4. Анищенко Т.Г. Половые аспекты проблемы стресса и адаптации // Успехи совр. биол. 1991. — Т. 111,№3.-С. 460-475.

5. Анищенко Т.Г., Буршина С.Н., Шорина JI.H. Половые различия динамики ответных реакций на эмоциональные стрессорные воздействия у белых крыс // Физиол. журн. им. Сеченова. 1991. - Т. 77, № 1. - С. 14-20.

6. Ашмарин И.П. Малые пептиды в норме и при патологии // Пат. физиол. и эксперим. терапия. — 1982. № 4. С. 13-27.

7. Ашмарин И.П., Каразеева Е.П. Нейропептиды // в кн."Нейрохимия" под ред. Ашмарина И.П., Стукалова П.В. — М.: Издательство института биомедицинской химии РАМН, 1996. С. 296-333.

8. Ашмарин И.П., Обухова М.Ф. Содержание опиоидных пептидов в коре головного мозга и их центральная активность // Журн. высш. нервн. деят. 1985. - Т. 36, вып. 2. - С. 211-222.

9. Бабичев В.Н. Нейрогормональная регуляция овариального цикла. М.: Медицина, 1984. - 240 с.

10. Бабичев В.Н. Нейроэндокринный контроль процессов пубертации // Усп. совр. биол. 1994. - Т. 114, № 3. - С. 330-344.

11. Беляев H.A., Генгин М.Т., Годына C.B., Калихевич В.Н., Панченко Л.Ф. Активность энкефалинконвертазы в отделах мозга крыс при алкогольной интоксикации // Вопр. мед. химии. 1988. - Т. 34, № 4. - С. 118-122.

12. Белякова Е.И. Взаимодействие симпатоадреналовой и гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы в инициальном периоде стресса // дис. . канд. биол. наук / Е.И. Белякова. Ростов Н/Д, 1984.

13. Блехман Г.И. Синтез и распад макромолекул в условиях стресса // Усп. совр. биол. 1992. - вып. 2. - С. 281-297.

14. Бондаренко Т.И., Кричевская A.A., Шейкина И.В., Кирюхина Е.В. Влияние ПВДС на содержание адреналина в тканях крыс в норме и при действии холодового стресса // Укр. биохим. журн. — 1990. Т. 62, № 5. - С. 34-37.

15. Бондаренко Т.И., Милютина Н.П., Михалева Н.И., Носкова Н.В. Мем-браностабилизирующий эффект дельта-сон индуцирующего пептида при стрессе // Бюл. экспер. биол. и мед. 1990. - № 9. - С. 325-327.

16. Боровая Т.Г., Назаренко А.И., Волкова О.В., Адамская Е.И. Математическая модель физиологического эстрального цикла беспородных крыс // Морфология.-1993.-Т. 105, № 11-12. С. 114-125.

17. Боярский К.Ю. Фолликулогенез и современная овариальная стимуляция // Проблемы репродукции. 2002. — № 3. - С. 36-42.

18. Брагин Е.О. Нейрохимические механизмы регуляции болевой чувствительности. М.: Издательство университета дружбы народов, 1991. -248 с.

19. Бэйрд Д.Т. Яичник / Гормональная регуляция размножения у млекопитающих. М.: Мир. - 1987. - С. 118-144.

20. Буров Ю.В., Ведерникрва H.H. Нейрохимия и фармакология алкоголизма.-М.: Медицина, 1985.-23 с.

21. Вакулина О.П. Содержание опиоидных пептидов в различных тканях животных при экстремальных воздействиях // дис. . канд. биол. наук / О.П. Вакулина. М., 1984.

22. Вакулина О.П. Эндогенные пептидные лиганды бензодиазепиновых рецепторов // Успехи совр. биол. 1992. - Т. 112, № 4. - С. 591-600.

23. Вальдман A.B., Арефолов В.А., Дмитриев А.Д. Изменение содержания опиоидных пептидов в надпочечниках крыс при иммобилизационном стрессе // Бюл. экспер. биол. и мед. 1985. - Т. 99, № 4. - С. 404-406.

24. Вальдман A.B., Медведев О.С., Рожанская Н.И. Анализ роли эндогенных опиоидных пептидов при экспериментальной гипертензии // Физиол. журн. им. Сеченова. 1982.-№ 8.-С. 1091-1095.

25. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Протеолитические ферменты: субклеточная локализация, свойства и роль в обмене нейропептидов // Биохимия. -1996. Т. 61, № 5. - С. 771-785.

26. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Механизмы регуляции активности и биологическая роль карбоксипептидазы Н фермента процессинга нейропептидов//Биохимия. - 1995.-Т. 60, № 12.-С. 1491-1497.

27. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Выделение, частичная очистка, характеристика и тканевое распределение фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы кошки // Биохимия. — 2003. Т.68, вып 1.-С. 96-102.

28. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Субклеточная локализация карбоксипептидазы Н в сером веществе головного мозга кошки // Укр. биохим. журн. -1992. Т. 64, № 5. - С. 113-116.

29. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Свойства и роль основных (отщепляющих остатки аргинина и лизина) карбоксипептидаз в функционировании биологически активных пептидов // Укр. биохим. журн. — 1993. Т. 65, № 1.-С. 3-12.

30. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Макарова В.В. Влияние стрессовых факторов на активность карбоксипептидазы Н в отделах головного мозга крыс // Укр. биохим. журн. 1992. - Т. 64, № 2. - С. 45-49.

31. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Никишин H.H. Об участии некоторых ферментов обмена нейропептидов в механизмах эмоционального стресса //Физиол. журн. им. Сеченова. 1995.-Т. 81, № 5. - С. 103-112.

32. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Никишин H.H. Множественность молекулярных форм растворимых карбоксипептидазо-В-подобных ферментов головного мозга кошки // Укр. биохим. журн. 1993. - Т. 65, № 4. -С. 17-21.

33. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Никишин H.H. Очистка и физико-химические свойства растворимой карбоксипептидазы Н из серого вещества головного мозга кошки // Биохимия. — 1992. — Т. 57, № 11. С. 17121719.

34. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Салдаев Д.А., Щетинина Н.В. Распределение активности фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы в нервной ткани котов // Нейрохимия 1997. - Т. 14, № 4. - С. 423-425.

35. Вернигора А.Н., Никишин H.H., Генгин М.Т. Влияние глюкокортикои-дов на активность растворимой и мембраносвязанной форм карбоксипептидазы Н in vivo // Укр. биохим. журн. 1995. - Т. 67, № 6. - С. 99104.

36. Вернигора А.Н., Никишин H.H., Генгин М.Т. Частичная характеристика фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы из головного мозга кошки // Биохимия. 1995. - Т. 60, № 11. - С. 1860-1866.

37. Вернигора А.Н., Никишин H.H., Генгин М.Т. Протеолитические ферменты и регуляция уровня активности нейропептидов // Биохимия. 1995. -Т. 60,№ 10.-С. 1575-1579.

38. Вернигора А.Н., Щетинина Н.В., Генгин М.Т. Исследование активности основных (отщепляющих остатки аргинина и лизина) карбоксипептидаз у крыс разного возраста // Биохимия. 1996. - Т. 61, № 10. - С. 18481856.

39. Вернигора А.Н., Щетинина Н.В., Генгин М.Т. Распределение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в тканях и отделах головного мозга ежа европейского (Erinaceus europaeus) // Укр. биохим. журн. -1996.- Т. 68, №5.-С. 118-121.

40. Вернигора А.Н., Щетинина Н.В., Салдаев Д.А., Генгин М.Т. Распределение активности основных карбоксипептидаз в тканях лабораторных животных разных видов // Ж. эволюц. биохим. физиол. — 2002. — Т. 38, № 1. -С. 25-27.

41. Виру A.A. Динамика реакции гипоталамо-гипофизарно-надпочечнико-вой системы при стрессе // Успехи совр. биол. 1979. — Т. 87, № 2. — С. 271-285.

42. Вундер П.А. О механизмах тормозного и стимулирующего влияния женского полового гормона на секрецию гонадотропинов // Успехи совр. биол. 1992. - Т. 112, № 4. - С. 609-625.

43. Вундер П.А., Андронов Е.В., Андронова Т.А. Стрессорные реакции и роль пола в их осуществлении // Успехи совр. биол. 1999. - Т. 119, № 4. -С. 335-344.

44. Генгин М.Т., Вернигора А.Н. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы Н фермента процессинга нейропеп-тидов головного мозга крыс // Физиол. журн. им. Сеченова. - 1994. - Т. 80, №3.-С. 23-27.

45. Генгин М.Т., Вернигора А.Н. Влияние этанола на активность карбоксипептидазы Н в мозге крыс // Укр. биохим. журн. 1993. - Т. 65, № 1. - С. 100-103.

46. Генгин М. Т., Вернигора А. Н. Влияние эмоционально-болевого стресса и этанола на карбоксипептидазо-Н-подобную активность в гипофизе и сыворотке крови крыс // Вопр. мед. химии. 1994. - Т. 40, № 1. - С. 5254.

47. Генгин М.Т., Вернигора А.Н. Новая карбоксипептидаза процессинга эн-кефалинов нервной ткани животных // Укр. биохим. журн. — 1989. Т. 61, №3.- С. 62-66.

48. Генгин М.Т., Вернигора А.Н. Ферменты процессинга опиоидных пептидов и методы определения их активности // Укр. биохим. журн. 1994. -Т. 66, №2.-С. 3-17.

49. Генгин М.Т., Вернигора А.Н., Никишин H.H., Керимов В.Ю. Эффект эмоционального стресса на активность карбоксипептидазы Н в отделах головного мозга крыс с различной к нему устойчивостью // Вопр. мед. химии. 1995. - Т. 41, № 4. - С. 8-9.

50. Генгин М.Т., Вернигора А.Н., Никишин H.H., Щетинина Н.В. Активность карбоксипептидазы N и ангиотензинпревращающего фермента в сыворотке крови крыс в норме и при эмоциональном стрессе // Укр. биохим. журн. 1994. - Т. 66, № 2. - С. 139-142.

51. Гомазков O.A. Функциональная биохимия регуляторных пептидов. М.: Наука, 1993.-160с.

52. Гомазков O.A., Григорьянц О.О. Регуляция биосинтеза энкефалинов: биохимические и физиологические аспекты // Успехи совр. биол. 1989. -Т. 108, № 1 (4).-С. 109-124.

53. Григорьянц О.О., Гомазков O.A. Энкефалинобразующие ферменты // Вопр. мед. химии. 1986. - Т. 32, № 3. - С. 15-20.

54. Дворцин Г.Ф., Шаталов В.Н. Антистрессорный эффект даларгина при иммобилизационном стрессе у крыс // Бюл. экспер. биол. и мед. 1991. -Т. 111, №6.-С. 617-619.

55. Еремина С.А., Белякова Е.И., Кондрух Т.В. Роль катехоламинов различных классов в центральной регуляции гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы // Физиол. журн. им. Сеченова. 1988. - № 9. - С. 1316-1320.

56. Еропкин М.Ю. Роль протеолиза в процессинге и инактивации нейропеп-тидов: его возможная роль в некоторых функциях мозга // Усп. совр. биол. 1983. - Т. 95, № 1. - С. 65-67.

57. Ерошенко Т.М. Физиологические свойства регуляторных пептидов // Итоги науки и техн. ВИНИТИ. Сер. Физиол. Чел. Жив. 1989. - № 51. -С. 1-164.

58. Исмайлова Х.Ю., Гасанов Г.Г. и др. Исследовательское поведение в открытом поле и норковой камере крыс с различной предрасположенностью к стрессу // Бюл. экспер. биол. и мед. 1992. - Т. 114, № 8. - С. 130132.

59. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

60. Лишманов Ю.Б., Маслов П.Н. Опиоидные нейропептиды, стресс и адаптационная защита сердца. Томск, 1994. - 295 с.

61. Лишманов Ю.Б., Маслова Л.В., Цибин А.Н., Трифонова Ж.А. Опиоидные пептиды и нейрогормональные реакции при стрессе и адаптации // Пат. физиол. 1987. - № 6. - С. 51 -53.

62. Лишманов Ю.Б., Трифонова Ж.В., Цибин А.Н. и др. Бета-эндорфин и стресс-гормоны плазмы крови при состояниях напряжения и адаптации // Бюл. экспер. биол. и мед. 1987. - Т. 53, № 4. - С. 422-424.

63. Лысенко A.B. Протеолитические процессы в мозге крыс при стрессе и адаптации, влияние ô-сон индуцирующего пептида// дис. . канд. биол. наук / A.B. Лысенко. Ростов Н/Д, 1993.

64. Малышенко Н.М., Ерошкин C.B. К механизму антистрессорного действия ПДС // Стресс, адаптация и функциональные нарушения. Кишинев.: Штиинца, 1984. - С. 84-85.

65. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс, профилактика. М.: Наука, 1981. -278 с.

66. Меерсон Ф.З. Физиология адаптационных процессов. Руководство по физиологии. М.: Наука, 1986. - 638 с.

67. Меерсон Ф.З., Пшенников М.Г. Адаптация к стресс-ситуации и физиологической нагрузке. М.: Медицина, 1988. - 25 с.

68. Менджерицкий A.M., Маклецова М.Г. и др. Антистрессорный эффект 5-сон индуцирующего пептида при гипокинетическом стрессе // Укр. био-хим. журн. 1991. - Т. 63, № 1. - С. 34-37.

69. Подвигина Т.Т., Богданова Т.С., Филаретов A.A. Значение нейропепти-дов в изменении свойств гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы после стресса // Физиол. журн. им. Сеченова. 1992. - Т. 78, №4.-С. 149-154.

70. Позднев В.Ф., Варламов O.JL, Григорьянц О.О., Гомазков O.A. Новый флюорогенный субстрат карбоксипептидазы Н о-кумароил-фенилаланил-аланил-аргинин // Биоорган. Химия. - 1994. - Т. 20, № 4. -С. 406-412.

71. Пшенникова М.Т. Роль опиоидных пептидов в реакции организма на стресс // Пат. физиол. и экспер. терапия. 1987. - вып. 3. - С. 85-90.

72. Раевский К.С. Эндогенные опиоидные пептиды как возможные нейропе-редатчики // в кн. "Опиоидные пептиды и их рецепторы". Итоги науки и техники ВИНИТИ. - 1982. - № 13. - С. 185-200.

73. Ростовцев А.П., Григорьянц О.О., Гомазков O.A. Субстраты для исследования энкефалинобразующей карбоксипептидазы в мозге и надпочечниках крысы // Вопр. мед. химии. 1988. - Т. 34, № 1. - С. 126-129.

74. Салдаев Д.А. Активность основных карбоксипептидаз в тканях мышей при введении тестостерона и прогестерона: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Д.А. Салдаев. СПб., 2001. - 20 с.

75. Салиева P.M., Коплик Е.В., Каменов З.А., Полетаев А.Б. Влияние бета-эндорфина и пептида, вызывающего дельта сон, на устойчивость к эмоциональному стрессу // Бюл. экспер. биол. и мед. 1988. - Т. 56, № 9. -С. 464-465.

76. Салиева P.M., Коплик Е.В., Каменов З.А., Полетаев А.Б. Пептид, вызывающий дельта сон, в крови и гипоталамусе у крыс с различной устойчивостью к эмоциональному стрессу // Бюл. экспер. биол. и мед. — 1989. -Т. 58, № 10.-С. 264-266.

77. Салиева P.M., Яновский К.В. и др. ПВДС, как фактор повышающий содержание вещества Р в гипоталамусе и устойчивости крыс к эмоциональному стрессу // Журн. высш. нервн. деят. 1991. - Т. 41, № 3. -С. 558-563.

78. Селье Г. Стресс без дистресса. М.: Прогресс, 1979. - 124 с.

79. Серая крыса: Систематика, экология, регуляция численности. М.: Наука, 1990.-456 с.

80. Середенин С.Б., Бледнов Ю.А. Влияние феназепама на содержание АКТГ в плазме крови инбредных мышей при стрессовых воздействиях // Бюлл. экспер. Биол. и мед. 1986. - Т. 102, № 12. - С. 724- 726.

81. Слепушкин В.Д., Золоев Г.К., Виноградов В.А., Титов М.И. Нейропепти-ды, их роль в физиологии и патологии. Томск.: Изд-во Томского ун-та, 1988.- 143 с.

82. Слепушкин В.Д., Лишманов Ю.Б., Золоев П.К., Прум И.А. Современные преставления о некоторых нетрадиционных механизмах стресса // Усп. физиол. наук. 1985. - Т. 16, № 4. - С. 422-424.

83. Судаков К.В. Нейрохимическая природа "застойного" возбуждения в структурах мозга при эмоциональном стрессе // Пат. физиол. и экспер. терапия. 1995. - № 1. - С. 3-8.

84. Сухоруков B.C., Тарабрин С.Б. Роль пролактина в регуляции функций мужской гонады // Усп. совр. биол. 1993. - Т. 113, № 3. - С. 366-376.

85. Тигранян P.A. Гормонально-метаболический статус организма при экстремальных воздействиях. М.: Наука, 1990. - 228 с.

86. Тигранян P.A. Реакция опиоидной системы головного мозга на стресс и ее зависимости от состояния катехоламинэргической системы // Нейро-химия.- 1987.-Т. 6, № 1. С. 63-71.

87. Тигранян P.A., Вакулина О.П. Содержание энкефалинов и эндорфинов в различных отделах головного мозга крыс при стрессе // 9 Всесоюзн. конф. по биохимии нервной системы, Ереван, 1983. С. 321-372.

88. Тинников A.A. Роль гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы в регуляции полового развития // Усп. совр. биол. 1990. - Т. 110, № 3. -С. 419-430.

89. Ткаченко JI.H. Отражение индивидуально-типологических свойств вегетативной нервной системы в характере вегетативных и поведенческих реакций при эмоционально-болевом стрессе /ДБюл. экспер. биол. и мед. -1998.-Т. 126, № 12.-С. 621-625.

90. Тонких A.B. Роль гипоталамо-гипофизарной области в реакциях организма при экстремальных (стрессорных) ситуациях // Усп. физиол. наук. 1976.-Т. 7, №2.-С. 3-12.

91. Филаретов A.A. Принципы и механизмы регуляции гипофизарно-адренокортикальной системы. Л., 1987. - 166 с.

92. Фирстова Н.В. Влияние предшественника лей-энкефалина на активность ферментов обмена регуляторных пептидов головного мозга и периферических органов крыс в норме и при эмоционально-болевом стрессе // дис. . канд. биол. наук / Н.В. Фирстова. Пенза, 1999.

93. Фур дуй Ф.И. Современные представления о физиологических механизмах развития стресса. // в кн. "Механизмы развития стресса". Кишинев.: Штиинца, 1987. - С. 8-33.

94. ЮО.Фурдуй Ф.И. Физиологические механизмы стресса и адаптации при остром действии стресс-факторов // дис. . доктора биол. наук / Ф.И. Фур-дуй.-Л., 1987.

95. Хип Р., Флинт А. Гормональная регуляция размножения у млекопитающих. М.: Мир, 1987. - С. 193-244.

96. Чирков A.M., Чиркова С.К., Старцев В.Г. Эмоциональный стресс у обезьян. Л.: Наука, 1987. - 156 с.

97. Щетинина Н.В., Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Активность основных карбоксипептидаз у крыс разного пола // Укр. биохим. журн. 1997. - Т. 70, №3.-С. 110-113.

98. Щетинина Н.В., Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Фирстова Н.В. Тканевое и региональное распределение активности фенилметилсульфонилфтори-динигибируемой карбоксипептидазы и других карбоксипептидаз у крыс // Укр. биохим. журн. 1997. - Т. 70, № 3. - С. 23-28.

99. Юматов Е.А., Гехт К., Скоцеляс Ю.Г. Субстанция Р как фактор устойчивости к эмоциональному стрессу // Журн. выс. нервн. деят. 1984. -Т. 34, №4.-С. 771-777.

100. Ahmad S., Ward Р.Е. Depressor action of bradykinin agonists relative to metabolism by angiotensin-converting enzyme, carboxypeptidase N, and amin-opeptidase P // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1992. - V. 200, N 1. - P. 115-121

101. Alvarez-Bolado G., Fairen A., Douglass J., Naranjo J.R. Expression of the prodynorphin gene in the developing and adult cerebral cortex of the rat: an in situ hybridization study // J. Сотр. Neurol. 1990. - V. 300, N 3. - P. 287300.

102. Bader M.F., Simon J.P., Sontag J.M,. Langley K., Aunis D. Role of calcium in secretion and synthesis in bovine adrenal chromaffin cells // Adv. Exp. Med. Biol. 1990. - 269. - P. 93-97.

103. Beitins S.Z. Decreased hypothalamic gonadotropin-releasing hormone secretion in male marathon runners. // New Engl. J. Med. 1998. — 315. — P. 411417.

104. Bielert C., Busse C. Influences of ovarion hormone on the food intake and feeding of captive and wild female Chocnia Baboons (Papio Ursinus) //Physiol and Behav. 1983.-V. 30, N 1.-P. 103-108.

105. Biologically active peptides: design, synthesis and utilization / W.V.Williams, D.B.Weiner, Eds. Lancaster: Technomic, 1993. - 360 p.

106. Bondy C.A., Whitnall M.H., Brady L.S. Regulation of carboxypeptidase H gene expression in magnocellular neurons: response to osmotic stimulation // Mol. Endocrinol. 1989. - V. 3, N 12. - P. 2086-2092.

107. Bruni J.F., Vugt D., Marshall S., Meites J. Effects of naloxone, morphine and methionine-enkephalin on serum prolactin, LH, FSH, TSH and GH // Life Sci. 1977.-N21.-P. 461-466.

108. Castro M.G., Morrison E. Posttranslational Processing of Proopiomelanocortin in the Pituitary and in the Brain. // Crit Rev Neurobiol. 1997. - V. 11, N 1. -P. 35-57.

109. Cerdareverter J.M., Larhammar D. Neuropeptide-Y Family of Peptides -Structure, Anatomical Expression, Function and Molecular Evolution // Bio-chem. Cell. Biol. 2000. - V. 1 78, N 3. - P. 371-392.

110. Charnning C.P., Andersen L.D., Hoover D.J. Hormonal control of granulosa cell secretion of oocyte maturation inhibitor and inhibin-F activity // Follicular maturation and ovulation: Exp. Med. Intern. Congr. Amsterdam. 1982. -N5.-P. 219-236.

111. Che F. Y., Yan L., Li H., Mzhavia N., Devi L. A., Fricker L. D., Identification of peptides from brain and pituitary of Cpe(Fat)/Cpe(Fat) mice. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2001. - V. 98, N 17. - P. 9971 -9976.

112. Chesselet M.F., Hook V.Y. Carboxypeptidase H-like immunoreactivity in the striatum of cats and monkeys // Regul. Pept. 1988. - V. 20, N 2. - P. 151159.

113. Cheung S., Hammer R.P. Gonadal-steroid hormone regulation of proopiomelanocortin gene-expression in arcuate neurons that innervate the medial preoptic area of the rat // Neuroendocrinology. 1995. - V. 62, N 3. - P. 283-292.

114. Chretien M., Seidah N.G. Precursor polyproteins in endocrine and neuroendocrine systems // Int. J. Peptide Protein Res. 1984. -N 23. - P. 335-341.

115. Chisari A., Carino M., Perone M., Gaillard R.C., Spinedi E. Sex and strain variability in the rat hypothalamo-pituitary-adrenal (HPA) axis function // J. Endocrinol. Invest. 1995. - V. 18, N 1. - P. 25-33.

116. Davidson H.W., Hutton J.C. The insulin-secretory-granule carboxypeptidase H. Purification and demonstration of involvement in proinsulin processing // Biochem. J. 1987. - V. 245, N 2. - P. 575-582.

117. Degandarias J.M., Irazusta J., Fernandez D., Gallego M., Silio M., Casis L. Membrane-Bound Tyrosine Aminopeptidase Activities in the Rat-Brain Throughout the Estrous-Cycle // Life Sciences. 1996. - V. 59, N 13. -P. 1097-1101.

118. Degandarias J.M., Irazusta J., Echevarria E., Casis L. Neutral aminopeptidase activity levels during the estrous cycle and the pregnancy in the hypothalamus and the pituitary of the rat // Life Sci. 1993. - V. 52, N 20. - P. 1629-1632.

119. Degandarias J.M., Irazusta J., Fernandez D., Echevarria E., Casis L. Brain Lys- aminopeptidase activity changes during cycle and pregnancy // European Journal of Endocrinology. - 1994. - V. 130, N 4. - P. 373-377.

120. Dochetry K., Hutton J.C. Carboxypeptidase activity in the insulin secretory granule//FEBS Lett. 1983. - V. 162, N l.-P. 137-141.

121. Drolet G., Dumont E.C., Gosselin I., Kinkead R., Laforest S., Trottier J.F. Role of Endogenous Opioid System in the Regulation of the Stress-Response // Prog. Neuro-Psych. Biol. Psych. 2001. - V. 25, N 4. - P. 729-741.

122. Eiden L.D., Ruth J.A. Enkephalins modulate the responsiveness of rat atria in vitro to norepinephrine // Peptides. 1982. - N 3. - P. 271-281.

123. Feng Y., Reznik S. E., Fricker L. D. Distribution of proSAAS derived peptides in rat neuroendocrine tissues. // Neurosci. 2001. - V. 105, N 2. - P. 469-478.

124. Fiedorek F.T., Parkinson D. Carboxypeptidase H processing and secretion in rat clonal beta-cell lines // Endocrinology. 1992. -V. 131, N 3. - P. 10541062.

125. Figueiredo H.F., Dolgas C.M., Herman J.P., Stress activation of cortex and hippocampus is modulated by sex and stage of estrus // Endocrinology. -2002. V. 143, N 7. - P. 2534-2540.

126. Fricker L.D. Carboxypeptidase E // Ann. Rev. Physiol. 1988. - N 50. -P. 309-321.

127. Fricker L.D. Activation and membrane binding of carboxypeptidase E // J. Cell. Biochem. 1988. - N 38. - P. 279-289.

128. Fricker L.D. Neuropeptide biosynthesis: focus on carboxypeptidase processing enzyme // Trends Neurosci. 1985. - V. 8, N 5. - P. 210-214.

129. Fricker L.D., Adelman J.P., Douglass J., Thompson R.C., Strandmann R.P., Hutton J. Isolation and sequence analysis of cDNA for rat carboxypeptidase E EC 3.4.17.10., a neuropeptide processing enzyme // Mol. Endocrinol. -1989. V. 3, N 4. - P. 666-673.

130. Fricker L.D., Das B., Angeletti R.H. Identification of the pH-dependent membrane anchor of carboxypeptidase E (EC 3.4.17.10) // J. Biol. Chem. 1990. -V. 265, N5.-P. 2476-2482.

131. Fricker L.D., Das B., Klein R.S., Greene D., Jung Y.K. Regulation of carboxypeptidase E (enkephalin convertase) // NIDA Res. Monogr. 1991. -N 111.-P. 171-187.

132. Fricker L.D., Herwert E. Comparision of a carboxypeptidase E-like enzyme in human, mouse, Xenopus, shark and Aplysia neural tissue // Brain Res. 1988. -V. 453, N 1-2. - P. 281-286.

133. Fricker L.D., Plummer T.HJr., Snyder S.H. Enkephalin convertase: potent, selective and irreversible inhibitors // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1983. V. 11, N 3. - P. 994-1000.

134. Fricker L.D., Reaves B.J., Das B., Dannies P.S. Comparison of the regulation of carboxypeptidase E and prolactin in GH4C1 cells, a rat pituitary cell line // Neuroendocrinology. 1990. - V. 51, N 6. - P. 658-663.

135. Fricker L.D., Rigual R.J., Diliberto E.J Jr., Viveros O.H. Reflex splanchnic nerve stimulation increases levels of carboxypeptidase E mRNA and enzymatic activity in the rat adrenal medulla // J. Neurochem. 1990. - V. 55, N2.-P. 461-467.

136. Fricker L.D., Snyder S.H. Enkephalin convertase: purification and charasteri-zation of a specific enkephalin-synthesizing carboxypeptidase localized to adrenall chromaffin granules // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1982. - N 79. -P. 3886-3890.

137. Fricker L.D., Snyder S.H. Purification and characterization of enkephalin con-vertase, an enkephaline-synthesizing carboxypeptidase // J. Biol. Chem. -1983.-V. 258,N 18.-P. 10950-10955.

138. Fricker L.D., Supattapone S., Snyder S.H. Enkephalin convertase: a specific enkephalin synthesizing carboxypeptidase in adrenal chromaffin granules, brain and pituitary gland // Life Sci. 1982. -N 31. -P. 1841- 1844.

139. Friishansen L., Lacourse K.A., Samuelson L.C., Hoist J.J. Attenuated processing of proglucagon and glucagon-like peptide-1 in carboxypeptidase E deficient mice. // J. Endocrinol. 2001. - V. 169, N 3. - P. 595-602.

140. Gainer H., Russel J.T., Loh Y.P. The enzymology and intracellular organization of peptide precursor processing: the secretory vesicle hypothesis // Neu-roendocrinology. 1985. - V. 40, N 1. - P. 171 -184.

141. Garcya A., Marty O., Valleis A., Dal-Zotto S., Armario A. Recovery of the hypothalamic-pituitary-adrenal response to stress. Effect of stress intensity, stress duration and previous stress exposure // Neuroendocrinology. — 2000. — N72.-P. 114-125.

142. Gerendai I. Modulation of testicular functions by testicular opioid peptides // J. Physiol. Pharmacol. 1991. - V. 42, N 4. - P.427-437.

143. Gindoff P.R., Ferin M. Endogenous opioid peptides modulate the effect of corticosterone-releasing factor on gonadotrophin release in the primate // Endocrinology. 1987. - N 121. - P. 837-842.

144. Gore A.C., Oung T., Yung S., Flagg R.A., Woller M.J. Neuroendocrine mechanisms for reproductive senescence in the female rat: gonadotropin-releasing hormone neurons//Endocrine. 2000. - V. 13, N 12.-P. 315-323.

145. Gregg D., Goedken E., Gaikin M., Wendell D., Gorski J. Decreased expression of carboxypeptidase E protein is correlated to estrogen-induction of rat pituitary tumors // Mol. Cell. Endocrinol. 1996. - V. 117, N 2. - P. 219-225.

146. Grigoriants O., Devi L., Fricker L.D. Dopamine antagonist haloperidol increases carboxypeptidase E mRNA in rat neurointermediate pituitary but not in various other rat tissues // Mol. Brain Res. 1993. - N 19. - P. 161-164.

147. Grine P., Gianoulakis C., Sedan N. Biosynthesis of beta-endorphin from beta-lipotropin and a larger molecular weight precursor in rat pars intermedia // Proc. Nath. Acad. Sci. USA. 1978. - V. 75, N 10. - P. 4719-4723.

148. Guest P.C., Arden S.D., Rutherford N.G., Hutton J.C. The posttranslational processing and intracellular sorting of carboxypeptidase H in the islets of Langerhans // Mol. Cell. Endocrinol. 1995. - V. 113, N 1. - P. 99-108.

149. Guest P.C., Ravazzola M., Davidson H.W., Orci L., Hutton J.C. Molecular heterogeneity and cellular localization of carboxypeptidase H in the islets of Langerhans // Endocrinology. 1991. - V. 129, N 2. - P. 734-740.

150. Hansen L. F., Rehfeld J. F. Impaired feedback of gastric functions in carboxypeptidase E deficient mice // Biochem. and Biophysic. Res. Comm. -2000. V. 267, N 2. - P. 638-642.

151. Harmar A. J. Neuropeptides // Transm. Mol. In the brain. 1987. - N 2. -P. 17-26.

152. Hook V.Y.H. Carboxypeptidase B-like activity for the processing of enkephalin precursors in the membrane component of bovine adrenomedullary chromaffin granules // Neuropeptides. 1984. - V. 4, N 2. - P. 117-126.

153. Hook V.Y. Arginine and lysine product inhibition of bovine adrenomedullary carboxypeptidase H, a prohormone processing enzyme // Life Sci. 1990. -V. 47,N 13.-P. 1135-1139.

154. Hook V.Y. Regulation of carboxypeptidase H by inhibitory and stimulatory mechanisms during neuropeptide precursor processing. Review. // Cell. Mol. Neurobiol. 1988. - V. 8, N 1. - P. 49-55.

155. Hook V.Y.H., Affolter H.U. Identification of zymogen and mature forms of human carboxypeptidase H. A processing enzyme for the synthesis of peptide hormones // FEBS Lett. 1988. -V. 238, N 2. - P. 338-342.

156. Hook V.Y.H., Affolter H.U., Palkovits M. Carboxypeptidase H in the hypo-thalamo-neurohypophysal system: evidence for processing of a prohormone-processing enzyme during axonal transport // J. Neurosci. 1990. — V. 10, N 10.-P. 3219-3226.

157. Hook V.Y.H., Eiden L.E. Two peptidases that convert 125J-Lys-Arg-(Met)r 1 ^^enkephalin and J-enkephalin-Arg , respectively, to J-(Met)-enkephalin in bovine adrenal medullary chromaffin granules // FEBS Lett 1984. - V. 172, N2.-P. 212-218.

158. Hook V.Y.H., Eiden L.E. (Met)-enkephalin and carboxypeptidase processing enzyme are co-released from chromaffin cells by cholinergic stimulation // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1985. -N 128. - P. 563-570.

159. Hook V.Y.H., Eiden L.E., Pruss R.M. Selective regulation of carboxypeptidase peptide hormone-processing enzyme during enkephalin biosynthesis in cultured bovine adrenomedullary chromaffin cells // J. Biol. Chem.- 1985-V. 260, N 10.-P. 5991-5997.

160. Hook V.Y.H., LaGamma E.F. Product inhibit of carboxypeptidase H // J. Biol. Chem. 1987. -V. 262, N 26. - P. 12583-12588.

161. Hook V.Y.H., Loh Y.P. Carboxypeptidase B-like converting enzyme activity in secretory granules of rat pituitary // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. -N81.-P. 2776-2780.

162. Hook V.J.H., Mezey E., Fricker L.D., Pruss P.M., Siegel R.E., Brownstein M.J. Immunochemical characterization of carboxypeptidase B-like peptide-hormone-processing enzyme // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - N 82. -P. 4745.4749.

163. Hsueh W.A. Proteases in hormon production and metabolism // Int. Symp. "Proteases: Potent Role in Health and Disease" (Wursburg, 1982): Proc. -New York, London, 1984.-P. 141-151.

164. Johansson G.B., Skidgel R.A. Carboxypeptidase M (cpm) converts epidermal growthfactor (EGF) to Des-Arg53-EGF // FASEB J. 1994. - V. 8, N 5. -P. 930-935.

165. Jung Y.K., Kunczt C.J., Pearson R.K., Dixon J.E., Fricker L.D. Structural characterization of the rat carboxypeptidase E gene. // Mol. Endocrinol. -1991.-V. 5,N9.-P. 1257-1268.

166. Jung Y.K., Kunczt C.J., Pearson R.K., Fricker L.D., Dixon J.E. Expression of the rat carboxypeptidase-E gene in neuroendocrine and nonneuroendocrine cell lines // Mol. Endocrinol. 1992. - V. 6, N 12. - P. 2027-2037.

167. Kaynard A.H., Low K.G., Melner M.H. Differential regulation of anterior pituitary prodynorphin and gonadotropin-subunit gene expression by steroid hormones // Mol. Cell. Endocrinol. 1992. - V. 88, N 1-3. - P. 67-75.

168. Khanna A.S., Waisman D.M. Metabolism and intracellular processing of protein hormones//Hormon. Act. 1988. -N 1.-P. 117-132.

169. Kimura A., Takahashi T. cDNA cloning of rat prolyl oligopeptidase and its expression in the ovary during the estrous cycle // J. Exp. Zool. 2000. -N5.-P. 656-665.

170. Klein R.S., Das B., Fricker L.D. Secretion of carboxypeptidase E from cultured astrocytes and from AtT-20 cells, a neuroendocrine cell line: implications for neuropeptide biosynthesis // J. Neurochem. 1992 - V. 58, N 6.-P. 2011-2018.

171. Kling J. Carboxypeptidase E a surprise player in protein sorting // Nat. Bio-techn. - 1997. - V. 15, N2.-P. 128-129.

172. Krieger D.T. Brain peptides: what, where, and why? // Science. 1983. - V. 222, N4627.-P. 971-985.

173. Krulich L., Hefco E., Illner P., Read C.B. The effects of acute stress on the secretion of LH, FSH, prolactin and GH in the normal male rat, with comments on their statistical evaluation // Neuroendocrinology. 1974. - N 16. - P. 293311.

174. Krysiak R., Obuchowicz E., Herman Z.S. Interactions between the neuropep-tide-Y system and the hypothalamic-pituitary-adrenal axis // EUR. J. Endocrinology. 1999. - V. 140, N2.-P. 130-136.

175. Laatikainen T.J. Corticotropin-releasing hormone and opioid peptides in reproduction and stress // Ann. Med. 1991. - N 23. - P. 489-496.

176. Laslop A., Tschernitz C. Effects of nerve growth factor on the biosynthesis of chromogranin A and B, secretogranin II and carboxypeptidase H in rat PC 12 cells // Neuroscience. 1992. - V. 49, N 2. - P. 443-450.

177. Lowry O.H., Rosebrought N.J., Farr A.G., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - V. 193, N 1. - P. 265275.

178. Lynch D.R., Braas K.M., Hutton J.C., Snyder S.H. Carboxypeptidase E (CPE): immunocytochemical localization in the rat central nervous system and pituitary gland// J. Neurosci. 1990. - V. 10, N 5. - P. 1592-1599.

179. Lynch D.R., Venable J.C., Snyder S.H. Enkephalin convertase in the heart: similar disposition to atrial natriuretic factor // Endocrinology. 1990. -V. 122,N6.-P. 2683-2691.

180. MacCumber M.W., Snyder S.H., Ross C.A. Carboxypeptidase E (enkephalin convertase): mRNA distribution in rat brain by in situ hybridization // J. Neurosci. 1990. - V. 10, N 8. - P. 2850-2860.

181. Mains R.E., Eipper B.A. Secretion and regulation of two biosyntetic enzyme activities, peptidyl-glycine a-amidating monooxygenase and a carboxypeptidase, by mouse pituitary corticotropic tumor cells // Endocrinology. 1984. -V. 115, N5.-P. 1683-1690.

182. Makara G.B., Palkovits M., Szentagothai J. The endocrine hypothalamus and the hormonal response to stress // Selyes guide to stress research / Ed. H. Se-lye. New York. 1980. - P. 280-337.

183. Manser E., Fernandez D., Loo L., Goh P.Y., Monfries C., Hall C., Lim L. Human carboxypeptidase E. Isolation and characterization of the cDNA, sequence conservation, expression and processing in vitro // Biochem. J. 1990. - V. 267, N2.-P. 517-525.

184. Matsuzaki H., Ueno H., Hayashi R., Liao T.H. Bovine spleen cathepsin A -characterization and comparison with the protective protein // J. Biochem. -1998. V. 123, N 4. - P. 701-706.

185. Matteri R.L., Watson J.G., Moberg G.P. Stress and acute adrenocorticotrophin treatment suppresses LHRH-induced LH release in the ram // J. Endocrinol. -1984.-N72.-P. 385-393.

186. Meunier J.C. The opioid peptides and their receptors // Biochimie. — 1986. -N68.-P. 1153-1158.

187. Millan M.J., Emrich H.M. Endorphinegric system and the response to stress // Psychother. Psychosomat. 1981. - V. 3, N 1. - P. 43-56.

188. Miller J.J., Changaris D.G., Levy R.S. Purification, subunit structure and inhibitor profile of cathepsin A // J. Chromatography. 1992. - V. 627, N 1-2. -P. 153-162.

189. Mitra A., Song L.X., Fricker L.D. The C-terminal region of carboxypeptidase E is involved in membrane-binding and intracellular routing in Att-20 cells // J. Biol. Chem. 1994. -V. 269, N 31. - P. 19876-19881.

190. Morton D.B. The occurrence and function of proteolytic enzymes in the reproductive tract of mammals // Proteinases in Mammalian Cells and Tissue/Barrett A.J. (ed.). Amsterdam: Elsevier/North Holland Biomedical Press, 1977.-P. 445-500.

191. Moss R.L., Dudley C.A. Sexual function and brain peptides// Brain Peptides: A New Endocrinology/Gotto A.M., Peck E.J., Boyd A.E. (ed.). New York: North Holland Biomedical Press, 1979. - P. 325-346.

192. Nagae A., Deddish P.A., Becker R.P., Anderson C.H., Abe M., Tan F., Skidgel R.A., Erdos E.G. Carboxypeptidase M in brain and peripheral nerves //J. Neurochem.- 1992.-V. 59, N6.-P. 2201-2212.

193. Nakashima A., Koshiyama K., Uozumi T. Effect of general anesthesia and severity of surgical stress on serum LH and testosterone in males // Acta endo-crinol. 1975. - V. 78, N 2. - P. 258-263.

194. Nalamachu S.R., Song L.X., Fricker L.D. Regulation of carboxypeptidase E -effect of Ca2+ on enzyme-activity and stability // J. Biol. Chem. 1994. -V. 269,N15.-P. 11192-11195.

195. Norenberg U., Richter D. Processing of the oxytocin precursor: isolation of an exopeptidase from neurosecretory granules of bovine pituitaries // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1988. - V. 156, N 2. - P. 898-904.

196. Normant E., Loh Y.P. Carboxypeptidase E acts as a sorting receptor for routing proinsulin and proenkephalin but not chromogranin A to the regulated secretory pathway // FASEB Journal. 1997. - V. 11, N 9. - P. 431 -431.

197. Parkinson D. Two soluble forms of bovine carboxypeptidase H have different NH2-terminal sequences // J. Biol. Chem. 1990. - V. 265, N 28. - P. 1710117105.

198. Parkinson D. Carboxypeptidase H in bovine pituitary gland: soluble forms are not processed at the C-terminus // Mol. Cell. Endocrinol. 1992. - V. 86, N3.-P. 221-233.

199. Patterson T.A., Schulteins G., Alvarado M.C., Martinez J.L.-J.R., Bennet E.L., Rossenzweig M.R., Hruby V.Y. Influence of opioid peptides on learningand memory process in the chick // Behav.-Neurosci. 1989. - V. 103, N 2. -P. 429-437.

200. Perloff M.D., Kream R.M., Beinfeld M.C. Reduced levels of substance P in the brains of Cpe(Fat)/Cpe(Fat) Mice // Peptides. 1998. - V. 19, N 6. P. 1115-1117.

201. Philips J.G., Poolsonguan W. A method to study temporal changes in adrenal activity in relation to sexual status in the female laboratory rat // J. Endocrinol. 1978. - V. 77, N 2. - P. 283-285.

202. Pickel V., Joh R.S., Lawman S.E., Miller R.G. Electron microscopic localization of substance P and enkephalin in axon terminals related to dendrites of catacholaminergic neurons // Brain Res. 1979. -N 160. - P. 397-400.

203. Pierce J.G., Parsons T.F. Glycoprotein hormones: Structure and function // Annu. Rev. Biochem. 1981. - N 50. - P. 465-469.

204. Porcelli G., Raffaelli R., Sacchi A., Volpe A.R., Miani C. Localization and characterization of human salivary kininases // Agents Actions Suppl. -1992. V. 3 8, N 1. - P. 401 -406.

205. Pshezhetsky A.V., Potier M. Direct affinity purification and supramolecular organization of human lysosomal cathepsin A // Arch. Biochem. Biophys. -1994. V. 313, N 1. - P. 64-70.

206. Pucell A.G., Bumpus F.M., Husain A. Rat ovarian angiotensin II receptors. Characterization and coupling to estrogen secretion // J. Biol. Chem. 1987. -V. 262, N 15.-P. 7076-7080.

207. Reisine T.D., Axelrod J. Regulation of ACTH secration and synthesis // Horm. Proteins Peptides. 1987.-N 13.-P. 173-196.

208. Reznik S.E., Salafia C.M., Lage J.M., Fricker L.D. Immunohistochemical localization of carboxypeptidase-E and carboxypeptidase D in the human placenta and umbilical-cord // J. Histochem.and Cytochem. 1998. - V. 46, N 12.-P. 1359-1367.

209. Rivier C., Rivier J., Vale W. Stress-induced inhibition of reproductive functions: role of endogenous CRF // Science. 1986. - N 231. - P. 607-610.

210. Rodriguez C., Brayton K.A., Brownstein M., Dixon J.E. Rat preproear-boxypeptidase H. Cloning, characterization, and sequence of the cDNA and regulation of the mRNA by corticotropin releasing factor // J. Biol. Chem. -1989.-V. 264, N 10. P. 5988-5995.

211. Ropert J.F., Quigley M.E., Yen S.S.C. Endogenous opiates modulate pulsative luteinizing hormone release in humans // J. Clin. Endocrinol. Met. 1981. -N52.-P. 583-585.

212. Rossier J., Barres E., Hutton J.C., Ricknell R.J. Radiometric assay for carboxypeptidase H (EC 3.4.17.10) and other carboxypeptidase B-like enzymes // Anal. Biochem. 1989. - V. 178, N 1. - P. 27-31.

213. Roth W.W., Mackin R.B., Spiess J., Goodman R.H., Noe B.D. Primary structure and tissue distribution of anglerfish carboxypeptidase H // Mol. Cell. Endocrinol . 1991.-V. 78, N 3.-P. 171-178.

214. Rovere C., Viale A., Nahon J., Kitabgi P. Impaired processing of brain proneurotensin and promelanin concentrating hormone in obese fat/fat mice // Endocrinology. 1996. - V. 137, N 7. - P. 2954-2958.

215. Satake A., Itoh K., Shimmoto M., Saido T.C., Sakuraba H., Suzuki Y. Distribution of lysosomal protective protein in human tissues // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994. - V. 30, N 205. - P. 38-43.

216. Schams. The Expression of Angiotensin and Endothelin System Members in Bovine Corpus Luteum During Estrous Cycle and Pregnancy // Endocrine. -2002.-N 19.-P. 305-312.

217. Schlamp C.L., Nickells R.W. Light and dark cause a shift in the spatial expression of a neuropeptide processing enzyme in the rat retina // J. Neurosci. -1996.-V. 16, N7.-P. 2164-2171.

218. Schwyzer R. Peptides and new endocrinology //Naturwissenschaften. 1982. -N69.-P. 15-20.

219. Shen F.S., Loh Y.P. Intracellular Misrouting and Abnormal Secretion of Adrenocorticotropin and Growth Hormone in Cpe (Fat) Mice Associated with a Carboxypeptidase E Mutation // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1997. - V. 94, N 10.-P. 5314-5319.

220. Shimamori Y., Kumagai Y., Watanabe Y., Fujimoto Y. Human placental carboxypeptidase M is anchored by a glycosyl-phosphatidylinositol moiety // Biochem. Int. 1990. - V. 20, N 3. - P. 607-613.

221. Silberring J., Lason W., Przewlocka B., Przewlocki R. Enkephalin convertase in the rat spinal cord // Neuropeptides. 1986. - V. 8, N 4. - P. 367-376.

222. Simon E.J. Opioid recptors and endogenous opioid peptides // Med. Res. Rev. 1991. - V. 11, N 11. - P. 357-374.

223. Skidgel R.A., Davis R.M., Tan F. Human carboxypeptidase M. Purification and characterization of a membrane-bound carboxypeptidase that cleaves peptide hormones // J. Biol. Chem. 1989. - V. 264, N 4. - P. 2236-2241.

224. Skidgel R.A., Erdos E.G. Cellular carboxypeptidases // Immunol. Rev. 1998. -V. 161, N 2. -P. 129-141.

225. Skidgel R.A., Johnson A.R., Erdos E.G. Hydrolisys of opioid hexapeptides by carboxypeptidase N. Presence of carboxypeptidase in cell membranes // Bio-chem. Pharmacol. 1984. -V. 33, N 21. - P. 3471-3478.

226. Skidgel R.A., Tan F.L., Deddish P.A., Li X.Y. Structure, function and membrane anchoring of carboxypeptidase M // Biomed. Biochim. Acta. 1991. — V. 50,N4-6.-P. 815-820.

227. Smith D.R., Pallen C.J., Murphy D., Lim L. Pituitary-specific transcriptional initiation sites of the rat carboxypeptidase-H gene and the influence of thyroid hormone status//Mol. Endocrinol. 1992.-V. 6, N5.-P. 713-722.

228. Snyder S.H. Brain peptides as neurotransmitters // Science. 1980. - N 209. — P. 976-983.

229. Song L., Fricker L.D. Calcium- and pH-dependent aggregation of carboxypeptidase E // J. Biol. Chem. 1995. - V. 270, N 14. - P. 7963-7967.

230. Song L.X., Fricker L. Processing of procarboxypeptidase E into carboxypeptidase E occurs in secretory vesicles // J. Neurochem. 1995. - V. 65, N 1. — P. 444-453.

231. Stack C., Fricker L.D., Snyder S.H. A sensitive radiometric assay for enkephalin convertase and other carboxypeptidase B-like enzymes // Life Sci. -1984. V. 34, N 2. - P. 113-121.

232. Stanisz A.M., Scicchitano R., Payan D., Bienestock J. In vitro studies of immunoregulation by substance P and somatostatin // Second Intern. Workshop on NIM: Scientific Programme and Abstracts. Dubrovnik, 1986. - P. 37.

233. Stein C., Hassan A.H., Przewlocki R., Gramsch C., Peter K., Herz A. Opioids from immunocytes interact with receptors on sensory nerves to inhibit nociception in inflammation // Proc. Natl. Acad. Sci.-USA. 1990. - V. 87, N15.-P. 5935-5939.

234. Steiner D.F. The biosynthesis of biologically active peptides: a perspective // Peptide Biosynthesis and Processing (Fricker L.D., ed.). CRC Press, Boca Raton, Florida, 1991. - P. 1-16.

235. Strittmatter S.M., Lynch D.R., Snyder S.H. (3H)guanidinoethyl-mercaptosuccinic acid binding to tissue homogenates. Selective labeling of enkephalin convertase // J. Biol. Chem. 1984. - V. 259, N 19. - P. 1181211817.

236. Supattapone S., Fricker L.D., Snyder S.H. Purification and characterization of membrane-bound enkephalin-forming carboxypeptidase, "enkephalin convertase" // J. Neurochem. 1984. - V. 42, N 4. - P. 1017-1023.

237. Thiele E.A, Eipper B.A. Effect of secretagogues on components of the secretory system in AtT 20 cells // Endocrinology. 1990. - V. 126, N 2. - P. 809817.

238. Turner A.I. Neuropeptide processing enzymes // Trends. Neurosci. 1984. -V. 7, N 7. — P.258-260.

239. Turner A.I., Canny B.J., Hobbs R.J., Bond J.D., Clarke I.J., Tilbrook A.J. Influence of sex and gonadal status of sheep on Cortisol secretion in response to

240. ACTH and on Cortisol and LH secretion in response to stress: importance of different stressors // J. Endocrinol. 2002. - N 1. - P. 113-122.

241. Vinson G.P., Hinson J.P., Toth I.E. The neuroendocrinology of the adrenal cortex // J. Neuroendocrinol. 1994. - N 6. - P. 235-246.

242. Vernicos-Danellis J., Heyback J.P. Psychophysiologic mechanismus regulating the hypothalamic-pituitary-adrenortical response to stress / Selyes guide to stress research /Eds. Selye H. — New York: Van Nostrand Reinhold Co., 1980.-P. 206-251.

243. Weber E., Voigt K., Martin R. Concomitant storage of ACTH- and endorphin-like immunoreactivity in cekretory granules of anterior pituitary corticotropins // Brain Res. 1978. - N 157. - P. 385-390.

244. Yamamoto T., Nishiyama M., Naka A. Role of epidermal grouwth factor in reproduction // Acta. Obstetr. Gynaecol. Jap. 1988. - V. 40, N 5. - P. 649654.

245. Yoshioka S., Fujiwara H., Yamada S., Nakayma T., Higuchi T., Inoue T.,

246. Mori T., Maeda M. Membrane-Bound Carboxypeptidase-M Is Expressed on Human Ovarian Follicles and Corpora-Lutea of Menstrual-Cycle and Early-Pregnancy // Molecular Human Reproduction. 1998. - V. 4, N 7. - P. 709717.

Информация о работе

Бардинова, Жанна Сергеевна
кандидата биологических наук
Пенза, 2004
ВАК 03.00.04

Диссертация

Влияние стресса на активность карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы