Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние алкогольной интоксикации на активность основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия
Автореферат диссертации по теме "Влияние алкогольной интоксикации на активность основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла"
На правах рукописи
Сметании Владимир Анатольевич
ВЛИЯНИЕ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ НА АКТИВНОСТЬ ОСНОВНЫХ КАРБОКСИПЕПТИДАЗ В ТКАНЯХ САМОК КРЫС НА РАЗНЫХ СТАДИЯХ ЭСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА
03.00.04. - Биохимия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Москва 2004
Работа выполнена на кафедре химии и биохимии естественно-географического факультета Пензенского государственного педагогического университета им. В.Г. Белинского
Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор
ГЕНГИН МИХАИЛ ТРОФИМОВИЧ
Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Коничев Александр Сергеевич
доктор медицинских наук, профессор Ивков Николай Николаевич
Ведущая организация:
Ростовский государственный педагогический университет
Защита состоится " _2004 г. в /Учасов
на заседании Диссертационного Совета Д 212.154.17 при Московском педагогическом государственном университете по адресу: Москва, ул. Кибальчича, д.6, корп.5, ауд.506.
С диссертацией можно ознакомится в библиотеке Московского педагогического государственного университета по адресу: 119992, Москва, ГСП-2, ул. МЛироговская, д.1.
Автореферат разослан"
2004г.
Ученый секретарь Диссертационного Совета
Холмогорова Н.В.
Актуальность проблемы. Проблема алкоголизма является крайне актуальной для человечества как с социальной, так и с медицинской точки зрения. Одним из важных аспектов проблемы алкоголизма является исследование нарушений, происходящих в организме женских особей при алкогольной интоксикации. Однако при этом необходим учет особенности женского организма, которая определяется наличием полового цикла, сопровождающегося комплексом физиологических и биохимических происходящих во всем организме. Клинические наблюдения указывают на то, что под действием этанола в организме женщины возникают нейроэндокринные расстройства, нарушения генеративных функций и полового цикла (Кирпиченко Ан.А и Кирпиченко А.А., 2002; Скосырева А.М и соавт., 1993). При алкоголизме существенно меняется уровень целого ряда нейропептидов, многие из которых играют важную роль в этиологии и патогенезе данного заболевания (Буров Ю.В. и Ведерникова К.М., 1985; Шабанов П.Д. и Калишевич С.Ю., 1998). Кроме того, острая алкогольная интоксикация изменяет уровень гонадотропин-рилизинг-фактора и гонадотропинов (Rivier С. et ah, 1992; Цыганков Б.Д. и Яковлев В.А., 2002), которые оказывают существенное воздействие на функционирование половой системы (Бабичев В.Н., 1984).
Уровень биологически активных пептидов во многом определяется основными карбоксипептидазами — пептидгидролазами, отщепляющими остатки аргинина и лизина с С-конца пептидов (Dochetry К. and Hutton J.C., 1983; Hook V.Y., 1984). Известно, что карбоксипептидаза Н (КПН) участвует в биосинтезе многих нейропептидов (Smyth D.G. et al., 1989; Supattapone S. et al., 1984). Физико-химические свойства, субстратная и тканевая локализация ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы (ФМСФ-КП) также позволяют предположить ее участие в биосинтезе нейропептидов (Вернигора и соавт., 1995). Предполагают, что карбоксипептидаза М (КПМ) может инактивировать или модулировать пептидные гормоны перед или после взаимодействия последних с рецепторами (Вернигора А.Н. и Генгин М.Т., 1998). Стоит отметить, что если физико-химические свойства КПН, ФМСФ-КП и КПМ изучены достаточно хорошо, то биологическая роль данных ферментов, в том числе их участие в различных физиологических и патологических процессах исследованы значительно хуже. Поэтому представляется весьма интересным изучение их активности при различных процессах в организме, в том числе при острой алкогольной интоксикации.
Целью настоящей работы было изучение активности основных карбоксипептидаз (КПН, ФМСФ-КП и КПМ) в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла при острой алкогольной интоксикации.
При выполнении работы были поставлены следующие задачи; 1. Изучить активность исследуемых карбоксипептидаз на разных стадиях эстрального цикла в тканях интактных
ЧрРОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ
БИБЛИОТЕКА СПетср)! 09
2. Исследовать активность КПН, ФМСФ-КП и КПМ у самок крыс на разных стадиях эстрального цикла при введении этанола через различные промежутки времени.
3. Сравнить активность исследуемых ферментов у самцов и самок при острой алкогольной интоксикации.
Научная новизна и практическая ценность работы. Впервые изучено влияние острой алкогольной интоксикации на активность КПН, ФМСФ-КП и КПМ в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла. Для определения половых отличий в течении и развитии алкогольной интоксикации исследована активность этих ферментов в тканях самцов крыс. Установлена зависимость изменения активности исследуемых ферментов от стадии эстрального цикла, пола, дозы этанола и времени после его введения. Полученные результаты представляют интерес для понимания механизмов функционирования пептидэргических систем и способствуют выяснению роли основных карбоксипептидаз в норме, а также при алкогольной интоксикации и могут быть использованы для разработки эффективных методов профилактики и лечения алкоголизма.
Положения, выносимые на защиту.
1. Закономерности изменения активности исследуемых карбоксипептидаз на разных стадиях эстрального цикла.
2. Особенности изменения активности КПН, ФМСФ-КП и КПМ при острой алкогольной интоксикации на разных стадиях эстрального цикла в тканях самок крыс.
3. Закономерности изменения активности изучаемых ферментов при введении этанола у самок и самцов крыс.
Апробация работы. Материалы диссертации представлены на IV научной конференции Российской Академии Естествознания (Дагомыс, 2003), на научной конференции Российской Академии Естествознания "Гомеостаз и эндоэкология" (Египет, 2004) и на итоговых научных конференциях ПГПУ (2002, 2003 гг.). По теме диссертации опубликовано 5 работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из 6 разделов: введение, обзор литературы по теме диссертации, материалы и методы исследований, результаты, обсуждение, выводы. Работа изложена на 162 страницах, иллюстрирована 6 рисунками, 21 таблицей и 2 схемами. Список литературы содержит 268 наименований на русском и иностранных языках.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объектом исследования служили гипофиз, гипоталамус, стриатум, надпочечники и половые железы самцов и самок белых беспородных крыс массой 150-200 г. В работе использовали четыре группы животных. У самок крыс определяли стадию эстрального цикла по влагалищному мазку (Дыбан А.П. и соавт., 1975), при цитологическом исследовании которого животных
разделяли на три группы. Животные первой группы находились в стадии диэструса,. второй - в стадии проэструса, третьей - в стадии эструса, четвертую группу составляли самцы. При изучении влияния этанола на КПН, ФМСФ-КП и КПМ in vivo животным вводили внутрибрюшинно 5% раствор этанола в дозе 1 г на кг тела, либо 20% раствор этанола в дозе 4 г на кг веса. Контрольным животным вводили эквивалентное количество физиологического раствора.
Активность ферментов определяли флюорометрическим методом: КПН и КПМ — с использованием гуанидиноэтилмеркаптоянтарной кислоты и дансил-фен-ала-арг при рН 5,6 и 7,4 соответственно (Flicker L.D., Snyder S.H, 1983); ФМСФ-КП - с использованием ФМСФ и субстрата дансил-фен-лей-арг (Вернигора А.Н. и соавт., 1995). Концентрацию белка в пробах определяли по методу Lowry и соавт.
Достоверность отличий между средними определяли с использованием t-критерия Стьюдента. Корреляционный и дисперсионный анализы проводили с помощью программы Statgraphics (версия 3.0) ("STSC, Inc." США) в режимах Simple Correlation, One-Way ANOVA и Multifactor ANOVA. Принадлежность подгрупп животных к разным гомогенным группам оценивали с помощью Multiple range analysis (Statgraphics (версия 3.0) ("STSC, Inc." США)).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1. Распределение активности основных карбоксипептидаз в тканях интактных самок крыс.
Активность КПН в тканях интактных самок крыс зависела от стадии эстрального цикла в гипофизе, гипоталамусе, стриатуме и яичниках (рис. 1). В гипофизе наиболее высокая активность фермента зафиксирована на стадии проэструса. Известно, что именно на этой стадии регистрируется наиболее высокий уровень ФСГ, ЛГ и пролактина в гипофизе и крови по сравнению с другими стадиями эстрального цикла. Кроме того, именно в проэструсе уровень эстрадиола в крови выше, чем в диэструсе и эструсе (Бабичев В.Н., 1984; Боровая Т.Г и соавт., 1993). Установлено, что эстрадиол вызывал увеличение внутриклеточного уровня КПН в культуре клеток передней доли гипофиза - GH4C1 (Fricker L.D. et al., 1990). Вероятно, повышение уровня эстрадиола на стадии проэструса, может приводить к увеличению активности фермента в гипофизе. Эти данные позволяют предположить, что КПН, вероятно, участвует в регуляции уровня гонадотропных гормонов в гипофизе в ходе эстрального цикла, а активность фермента, по-видимому, регулируется уровнем половых стероидных гормонов в организме.
Изменение активности КПН в зависимости от стадии эстрального цикла в стриатуме, гипоталамусе и яичниках позволяет предположить возможность вовлечения этого фермента в циклические изменения уровня биологически активных пептидов в этих органах.
Активность ФМСФ-КП зависит от стадии эстрального цикла только в яичниках, где на стадии диэструса она почти в 2 раза ниже по сравнению с проэструсом и эструсом (рис. 2). Именно в проэструсе и эструсе происходит разрыв и деградация фолликула, а затем развитие прогестативного тела (Бабичев В.Н., 1984), возможно, что ФМСФ-КП вовлекается в эти процессы.
Активность КПМ в гипоталамусе и стриатуме самок не зависит от стадии эстрального цикла (рис. 3). По всей видимости, в этих отделах мозга КПМ участвует в регуляции базального уровня биологически активных пептидов, но, вероятно, не влияет на циклические изменения уровня нейропептидов в ходе полового цикла.
2. Активность исследуемых ферментов при внутрибрюшинном введении физиологического раствора в тканях самок на разных стадиях эстрального цикла и самцов.
У самок крыс введение физиологического раствора приводило к снижению активности КПН в гипофизе через 0,5 и 4 часа в проэструсе и эструсе, такие же изменения регистрировались в гипоталамусе самцов и самок крыс через 4 часа после инъекции (рис. 1). Вероятно, это связано с особенностями воздействия внутрибрюшинной инъекции физраствора, при которой в организм поступает дополнительное количество жидкости. Понижение активности КПН может способствовать ускорению высвобождения жидкости из организма благодаря уменьшению образования вазопрессина. У самок обнаружено снижение активности КПН в надпочечниках, чего не наблюдалось у самцов. Вероятно, это обусловлено половыми отличиями в ответной реакции организма на стресс, которым можно считать инъекцию физраствора (Виноградова Е.П. и Чаадаева Е.В., 1994).
У самок в гипофизе после введения физиологического раствора активность ФМСФ-КП уменьшалась на стадии эструса, оставаясь на прежнем уровне на других стадиях эстрального цикла, в то время как у самцов наблюдалось увеличение активности фермента в этом отделе (рис. 2). У самцов введение физраствора вызывало изменение активности ФМСФ-КП также в гипоталамусе через 0,5 часа после воздействия, а у самок - и в других исследованных отделах. Принимая во внимание то, что уровень нейропептидов зависит от активности ферментов их обмена, можно предположить, что выявленные половые отличия в изменении активности ФМСФ-КП способствуют различной секреции биологически активных пептидов у самцов и самок при стрессе (Вернигора А.Н. и соавт., 1995).
Наиболее значительно активность ФМСФ-КП при введении физраствора изменялась в яичниках, причем, как правило, она увеличивалась, что возможно, может частично объяснить нарушения эстрального цикла, прекращение овуляции под действием стресса (Скосырева A.M. и соавт., 1993; Хоха A.M., 1994). Интересно отметить, что на стадии диэструса в большинстве отделов после введения физраствора активность ФМСФ-КП
увеличивалась, а в эструсе, напротив, снижалась. Так как этот фермент, по всей видимости, вовлекается в процессинг нейропептидов, а, следовательно, может определять их уровень, от чего, в свою очередь, зависит устойчивость организма к стрессу, можно предположить, что эти результаты указывают на различную устойчивость к стрессирующему воздействию крыс на разных стадиях эстрального цикла.
Следует отметить, что активность обоих ферментов у самок изменялась более существенно, чем у самцов, что хорошо согласуется с имеющимися в литературе сведениями о том, что гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система (ГГНС) у самок более подвержена воздействию стресса, чем у самцов (Анищенко Т.Г. и соавт., 1989).
Введение физраствора приводит к снижению активности КПМ в гипоталамусе через 4 часа после воздействия у самок крыс на стадии проэструса и эструса и через 0,5 часа у самцов (рис. 3). Известно, что а-неоэндорфин, динорфин 1-13 в качестве С-концевой аминокислоты содержат лизин, следовательно, они могут выступать в качестве субстратов для КПМ (Skidgel R.A. et в1., 1989). Выявленное уменьшение активности КПМ, возможно приводит к замедлению разрушения этих пептидов, обладающих способностью проявлять седативное действие, снижать исследовательскую активность и коррелирует с данными о снижении подвижности крыс в тесте "открытое поле" через 4 часа после инъекции физраствора и частичном восстановлении активности через 24 часа после воздействия (Вернигора А.Н. и соавт., 1995). В стриатуме через 0,5 часа после инъекции активность КПМ на стадии диэструса повышалась, а в проэструсе снижалась; через 4 часа снижение активности наблюдалось только в диэструсе. Известно, что КПМ участвует в модуляции и инактивации нейропептидов, тем самым, влияя на их уровень в организме, от которого во многом зависит устойчивость к стрессу. Поэтому разнонаправленные изменения активности КПМ в стриатуме у самок могут также свидетельствовать, о различной устойчивости к стрессу самок крыс на разных стадиях эстрального цикла. Отсутствие изменений в активности фермента после инъекции физраствора у самцов и их наличие у самок, по-видимому, свидетельствует о различной устойчивости крыс разного пола к стрессирующему воздействию.
3. Активность КПН, ФМСФ-КП и КПМ при алкогольной интоксикации в тканях самок на разных стадиях эстрального цикла и самцов.
Введение этанола приводит к увеличению активности КПН в гипофизе на стадии эструса (доза 1 г на кг) и диэструса (доза 4 г/кг), что согласуется с представлениями об активации ГГНС и увеличении секреции и образования АКТГ, р-эндорфина, пролактина при острой алкогольной интоксикации (ОАИ) (Буров Ю.В. и Ведерникова К.М., 1985) (рис. 1). Однако в проэструсе и через 4 часа после инъекции этанола в диэструсе активность КПН была ниже по сравнению с контрольными животными. Принимая во внимание
g
диэструс
1 4
i 1 2
? 1
i 08
í OS
2 04 n
! Q 2 • II
норма
контроль 1 Г/КГ 4Г/КГ
0 45
1
I 03
»
í 015
03 1 0 25
г ог
i 015
1 01 « 0 05
О
эетрус
1 4
; 1 2 <<
4 1 A
i 08
■í 06
04
02 0
1 4
I 12 ! 1 i 08
I 06
| 04
* ог
о
самцы + *»... XXX*
и
диэструс
4г/кг
Гипоталамус
0 45
контроль 1 Г/КГ 4Г/КГ
проэструс
контроль 1 Г/КГ 4Г/КГ
эструс
самцы
I
! 03 i а
| О 15
норма контроль
диэструс
4Г/КГ
Стриатум
норма контроль 1 г/кг 4Г/КГ
эструс
норма контроль 1 г/кг проэструс
норма контроль 1 Tint 4г/кг
самцы
I
4г/кг
норма контроль 1 г/кг
Рис. 1 (продолжение на стр. 9)
контроль 1 г/кг 4Г/КГ
Рис. 1. Активность КПН в норме, при введении физраствора и этанола в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла и самцов (нмоль продукта, образовавшегося за 1 мин инкубации на 1 мг белка, М±а, п=6-8). Здесьинарис. 2,3: Ш -0,5 ч. ■ -4 ч. D-18 ч. Достоверность отличий:
* - р < 0,05, **-р<0,01,%**-р< 0,001 относительно нормы; + - р < 0,05, ++-р<0,01, +++-р< 0,001 относительно контроля; Л - р < 0,05,лл - р < 0,01,ллл - р < 0,001 относительно проэструса; <- р < 0,05, « - р < 0,01, «< - р < 0,001 относительно диэструса.
возможное участие КПН в биосинтезе гонадотропных гормонов, становятся понятными нарушения полового цикла за счет изменений в активности КПН, которые приводят к изменению уровня гонадотропинов.
У самок введение этанола приводило к увеличению активности КПН в гипоталамусе через 0,5 часа в диэструсе и эструсе и через 4 часа в диэструсе,
и коррелирует с данными о возрастании концентрации ß-эндорфина в гипоталамусе, что связывают с проявлением эмоционально позитивных свойств этанола. Однако введение этанола в дозе 4 г/кг приводит к снижению активности фермента в эструсе через 4 часа и в диэструсе через 18 часов, что, вероятно, ведет к уменьшению синтеза ß-эндорфина и проявлению эмоционально негативных свойств этанола в больших дозах (Буров Ю.В., Ведерникова К.М., 1985). В проэструсе, когда в организме фиксируется высокий уровень эстрадиола, изменения активности КПН отсутствовали. Эти данные подтверждаются сведениями о снижении уровня опиоидных пептидов в гипоталамусе овариоэктомированных самок при совместном введении этанола и эстрадиола, что, по-видимому, свидетельствует о возможной модификации ответной реакции опиоидэргической системы на действие этанола эстрадиолом (Carter A., Soliman M.R., 1996).
У самцов в гипоталамусе через 0,5 и 4 часа после инъекции этанола также наблюдается повышение активности КПН. Однако через 18 часов после внутрибрюшинного введения этанола происходит снижение активности КПН по отношению к контрольной группе животных, что, возможно, является результатом действия компенсаторных механизмов, направленных на нормализацию функционального состояния пептидэргических систем гипоталамуса, а следовательно, гипофиза и периферических желез внутренней секреции.
Введение этанола самцам вызывало в большинстве случаев менее существенные изменения активности КПН в гипофизе и гипоталамусе по сравнению с самками, что согласуется с данными о более существенном изменении уровня плазматических гонадотропинов, АКТГ и кортикостероидов у самок по сравнению с самцами (Ogilvie K.M., Rivier С, 1996).
Инъекция этанола самкам крыс в дозе 1 г/кг на стадии диэструса и эструса приводит к увеличению активности КПН в надпочечниках. При инъекции этанола в дозе 4 г/кг у самок в проэструсе и самцов происходит увеличение активности фермента через 0,5 часа после инъекции и снижение активности через 4 часа, что согласуется с динамикой изменения уровня энкефалинов при ОАИ (Беляев Н.А. и Колесанова Е.Ф., 1990).
Введение этанола в дозе 1 г/кг приводит к возрастанию активности КПН в яичниках у самок на стадии диэструса через 4 часа после инъекции, в дозе 4 г/кг - к увеличению активности КПН в диэструсе через 0,5 часа и проэструсе через 4 часа и к уменьшению активности фермента в эструсе через 18 часов после инъекции - все это, вероятно, приводит к нарушению синтеза биологически активных пептидов в яичниках в ходе эстрального цикла.
В половых железах самцов через 0,5 часа после введения этанола в любой из двух доз активность КПН уменьшается по сравнению с контролем. Однако через 4 активность фермента достоверно не отличается от таковой у животных контрольной группы. Вероятно, это связано с тем, что этанол способен вызывать значительное снижение уровня тестостерона (Badr F.M et.
al., 1979), экзогенное введение которого приводит к увеличению активности КПН в семенниках (Салдаев Д. А., 2001). В то же время, после однократной инъекции алкоголя уровень тестостерона достаточно быстро нормализуется. Следовательно, снижение уровня тестостерона и возвращение его к исходным значениям, вызванные инъекцией этанола, по-видимому, объясняет происходящие изменения в активности КПН.
Известно, что введение этанола является стрессом для самцов и самок (Шабанов П.Д. и Калишевич С.Ю., 1998), об этом свидетельствуют сходные изменения активности КПН при введении этанола и физраствора в гипофизе по сравнению с интактными животными, заключающиеся в активации ГГНС. Однако необходимо заметить, что введение этанола в дозе 1 г/кг в гипофизе на стадии эструса, в гипоталамусе и в стриатуме и инъекция этанола в дозе 4 г/кг в стриатуме не приводит к изменению активности КПН относительно нормы, хотя при введении физиологического раствора сдвиги в активности фермента наблюдались. Это, вероятно, можно объяснить тем, что этанол в определенных условиях может выступать в роли антистрессорного фактора. Результаты нашего эксперимента указывают на то, что меньшая доза этанола нормализует активность фермента в большем числе органов и находят свое подтверждение в литературе, где приводятся сведения о том, что более выраженный анксиолитический, антистрессорный эффект присущ малым дозам этанола (Буров Ю.В. и Ведерникова К.М., 1985).
Интересно отметить, что введение этанола в дозе 1 г/кг у самок на стадии эструса не вызывает изменения активности КПН относительно нормы, а в надпочечниках она повышается. Это, вероятно, связано с тем, что в гипофизе и надпочечниках синтезируются качественно разные пептиды в ответ на острую алкогольную интоксикацию: из гипофиза в кровяное русло в числе прочих нейропептидов поступает АКТГ (Gianoulakis С, 1989; Rivier С, 1993), который способствует развитию стресс-реакции в организме, а из надпочечников в кровь выделяется мет-энкефалин, который обладает стресспротективным действием (Беляев Н.А. и Колесанова Е.Ф., 1990). Таким образом, возможно, что введение этанола в малой дозе на стадии эструса подавляет развитие стресс-реакции благодаря совместному действию двух вышеназванных факторов и, по-видимому, обладает более выраженным стресспротекторным действием, чем на других стадиях эстрального цикла.
Введение самкам крыс этанола в дозе 1 г/кг приводило к увеличению активности ФМСФ-КП в гипофизе на стадиях эструса и диэструса, что согласуется с данными об изменении уровня многих нейропептидтов при ОАИ (Mello N.K. et al., 1986; Adams M.L., Cicero T.J, 1991; Колупаев Г.П. и Яковлев В.А., 1984) (рис. 2). Введение этанола вызывало изменения активности ФМСФ-КП и у самцов, однако, как правило, эти изменения были менее выражены. Наши данные, по-видимому, могут подтверждать предположение о роли ФМСФ-КП как фермента, участвующего в процессинге регуляторных пептидов (Вернигора А.Н. и Генгин М.Т., 1998).
норма контроль 1 г/кг Дг.'кг
Рис. 2. Активность ФМСФ-КП в норме, при введении физраствора и этанола в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла и самцов (нмоль продукта, образовавшегося за 1 мин инкубации на 1 мг белка, M±m, п=6-;-8).
Однако введение этанола на стадии проэструса приводит к снижению активности фермента более чем в 2 раза (подобные изменения обнаруживаются и для КПН), что, возможно, приводит к уменьшению биосинтеза гонадотропных гормонов и отсутствию их пика в периовуляторный период (Ogilvie К.М., Rivier С, 1997).
В гипоталамусе и стриатуме у особей обоего пола через 4 и 18 часов после инъекции этанола в дозе 1 г/кг активность ФМСФ-КП повышается, увеличивается она и после инъекции этанола в дозе 4 г/кг через 4 часа после воздействия. Эти данные могут указывать на вовлечение ФМСФ-КП в
образование энкефалинов, дельта-сон-индуцирующего пептида, уровень которых также возрастает при ОАИ, тем более, что изменение активности КПН не полностью согласуется с изменением уровня нейропептидов после введения этанола.
Разнонаправленные изменения активности фермента, наблюдаемые в надпочечниках и в других отделах на разных стадиях астрального цикла, могут приводить к изменению уровня нейропептидов (некоторые из которых определяют развитие влечения к алкоголю). Это может свидетельствовать о различном уровне алкогольной мотивации крыс на разных стадиях эстрального цикла. Так в литературе имеются данные о дифференцированной динамике изменения уровня пролактина, АКТГ, Р-эндорфина, мет-энкефалина при введении этанола у крыс с различной предрасположенностью к алкоголю (Буров Ю.В. и Ведерникова К.М., 1985).
Обращает на себя внимание очень сильное изменение активности ФМСФ-КП в яичниках при введении этанола по отношению к контрольной группе животных, причем более выраженное в эструсе. В ряде случаев повышение активности фермента после инъекции этанола превышало на 400% контрольные значения, при сравнении активности ФМСФ-КП в яичниках самок крыс, испытавших ОАИ, с интактной группой животных это увеличение было еще большим и превосходило активность в последней группе почти на 1200%. Что, вероятно, принимая во внимание возможное участие ФМСФ-КП в процессах деградации фолликула и формировании, а затем и в регрессии желтого тела, а также роль фермента в биосинтезе нейропептидов, может объяснять нарушения эстрального цикла, ановуляцию и другие патологические процессы, наблюдаемые при алкоголизме.
Внутрибрюшинное введение этанола приводит к увеличению активности КПМ в гипоталамусе у самок на стадии диэструса через 0,5 часа после введения этанола в дозе 1 г/кг (рис. 3). Увеличение активности фермента наблюдается также в стриатуме у самок в проэструсе через 0,5 часа после инъекции этанола в дозе 4 г/кг и на стадии диэструса при введении этанола в любой из двух доз. Эти данные согласуются со сведениями о том, что под влиянием ОАИ увеличивается уровень многих нейропептидов, которые обладают эйфоризирующим, антистрессорным, анксиолитическим действием, а также нейропептидов, активирующих систему негативного подкрепления (проконвульсанты, пептиды, индуцирующие страх, агрессию, дисфорию). Вероятно, увеличение активности КПМ связано с инактивацией большого количества пептидов, секретируемых из клетки в ответ на введение этанола. Кроме того, увеличение активности КПМ может усиливать деградацию эндозепина, повышенный уровень которого вызывает беспокойство, проконфликтное поведение. Таким образом, видимо, влияя на активность КПМ, этанол может понижать уровень этого нейропептида, что, вероятно, может частично объяснить анксиолитический, антистрессорный эффект этилового спирта.
Рис. 3. Активность КПМ в норме, при введении физраствора и этанола в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла и самцов (нмоль продукта, образовавшегося за 1 мин инкубации на 1 мг белка, М±т, п=6-г8).
Однако в ряде случаев активность КПМ снижается под влиянием инъекции этанола, что, по-видимому, может способствовать проявлению таких свойств этанола, как анальгезирующий и седативный эффекты, способность вызывать чувство эйфории за счет уменьшения инактивации динорфина А 1-13 и а-неоэндорфина. Вероятно, механизм, посредством которого этанол проявляет свои специфические эффекты, частично определяется стадией эстрального цикла, в которой пребывает животное.
Стоит отметить, что зависимость активности КПН от времени у самцов прослеживается только в гипофизе и надпочечниках, а у самок в гипофизе и гипоталамусе, причем она имеет сходный характер у самцов и самок: активность, как правило, повышалась через 0,5 часа после инъекции,
понижалась к 4 часам, а к 18 часам увеличивалась. Эти данные подтверждают представление о том, что ОАИ приводит к активации многих пептидэргических систем. Стадия активации затем сменяется стадией, на которой активность КПН уменьшается, что, вероятно, способствует нормализации пептидэргических систем. Однако далее активность фермента вновь, подвергается изменениям, что согласуется с данными о долговременном изменении уровня нейропептидов после алкогольной интоксикации (Шабанов П.Д. и Калишевич С.Ю., 1998).
После введения физраствора или этанола также обнаруживалась зависимость активности ФМСФ-КП от времени, причем характер этих изменений, по-видимому, определялся полом животного, стадией эстрального цикла, а также органом, в котором проводилось определение активности фермента. В отличие от КПН, сходства в изменении активности ФМСФ-КП у особей разного пола, а также у самок на разных стадиях эстрального цикла, было меньше. Это позволяет предположить, что, возможно, ФМСФ-КП принадлежит более важная роль в дифференцированной реакции пептидэргических систем на ОАИ на различных стадиях полового цикла и в зависимости от пола. Обнаружено также наличие зависимости активности КПМ от времени после воздействия у самок крыс. Интересно отметить, что у самцов активность этого фермента не зависела от времени, вероятно, этим также можно частично объяснить половые различия в течении и развитии алкогольной интоксикации.
Возможно, что изменение активности КПН, ФМСФ-КП и КПМ, которые участвуют в обмене нейропептидов, у крыс с ОАИ отражает один из механизмов опосредованного нарушения содержания регуляторных пептидов на разных стадиях эстрального цикла, а также играет роль в этиологии и патогенезе алкоголизма. Наблюдающееся в некоторых тканях при ОАИ различное и/или разнонаправленное изменение активности КПН, ФМСФ-КП и КПМ или изменение активности только одного из ферментов, может быть одной из причин нарушения соотношения уровня разных нейропептидов в этих отделах. В частности, имеются сведения об избирательном изменении содержания энкефалинов в разных регионах мозга, об изменении соотношения АКТГ/р-эндорфин в плазме крови и спинномозговой жидкости (вепа^ш А.Я. й а1., 1983; Бега^ег Б.Я. й а1., 1983).
В норме наблюдаются половые отличия активности КПН и ФМСФ-КП в мозге и в периферических тканях. ОАИ, зачастую по-разному изменяя активность изучаемых ферментов, приводит к нарушению этого соотношения. Так активность КПН и ФМСФ-КП в гипофизе выше у самок, однако после алкогольной интоксикации активности ферментов у особей разного пола выравниваются, либо у самцов активность КПН и ФМСФ-КП становится выше. Кроме того, в тех тканях, в которых не было половых отличий и зависимости от стадии эстрального цикла, они появляются после инъекции этанола.
Интересно отметить, что после введения этанола в дозе 1 г/кг и 4 г/кг активность исследуемых ферментов на стадии проэструса была, как правило, ниже, чем в эструсе и диэструсе, хотя в норме чаще наблюдалось обратное соотношение активности, что также можно рассматривать как один из механизмов негативного влияния этанола на половую систему самок крыс. Вероятно, это связано с тем, что в ходе эстрального цикла меняется уровень половых стероидных гормонов, которые могут оказывать влияние на активность КПН, ФМСФ-КП и, возможно, КПМ.
Для более полного понимания биологической роли ФМСФ-КП, которая является менее изученным ферментом, чем КПН и КПМ, мы провели корреляционный анализ (табл. 1,2).
Таблица 1. Коэффициенты корреляции между активностью основных карбоксипептидаз в тканях и отделах мозга самок крыс при острой алкогольной интоксикации (* - р<0,05, *** - р<0,001). _
Ткань, отдел мозга КПН и ФМСФ-КП КПН и КПМ КПМ и ФМСФ-КП
Гипофиз 0,202* - -
Гипоталамус 0,472"* 0,310'" 0,083
Стриатум 0,518"' 0,005 0,009
Надпочечники -0,063
Яичники 0,137
Таблица 2. Коэффициенты корреляции между активностью основных карбоксипептидаз в тканях и отделах мозга самцов крыс при острой алкогольной интоксикации (** - р<0,01).
Ткань, отдел мозга КПН и ФМСФ-КП КПНиКПМ КПМ и ФМСФ-КП
Гипофиз 0,246 - -
Гипоталамус 0,254) 0,383" -0,05
Стриатум 0,017 0,377" -0,139
Надпочечники 0,003 - -
Семенники 0,192 - -
У самок отмечена высокая положительная корреляция между активностью КПН и ФМСФ-КП в гипофизе, гипоталамусе и стриатуме, но не в надпочечниках и яичниках. Это может быть связано с тем, что ФМСФ-КП, вероятно, выполняет разные функции в мозге и периферических тканях, например, в мозге вовлекается в процессинг, а в тканях в деградацию нейропептидов. Возможно также существование нескольких форм фермента, различающихся тканевой и региональной локализацией. Не исключено, что в мозге и тканях ФМСФ-КП представлена разными ферментами с близкими физико-химическими свойствами. Однако у самцов положительной корреляции между активностью КПН и ФМСФ-КП не обнаружено ни в одном из изученных отделов. Известно, что активность ферментов, вовлекающихся в обмен нейропептидов различна у самцов и самок
(Вернигора АН. и соавт., 1996; De Gandarias J.M. et ah, 1989; Prieto I. et al., 2002). Поэтому, возможно, что ФМСФ-КП по-разному функционирует у самцов и самок и/или вовлекается в разные процессы, связанные с ответом на ОАИ. Интересно отметить, что между КПН и КПМ обнаруживается статистически значимая положительная корреляция у самок в гипоталамусе, а у самцов - в гипоталамусе и стриатуме. Возможно, что изменение интенсивности биосинтеза нейропептидов под действием КПН влечет за собой соответствующее изменение скорости их инактивации и модификации при участии КПМ.
Весьма важным является вопрос о механизмах изменения активности основных карбоксипептидаз под влиянием внутрибрюшинного введения этанола. Ген КПН содержит достаточно большое количество регуляторных участков, которые отличаются у разных типов клеток, что позволяет предположить возможность различной регуляции экспрессии гена фермента в разных типах клеток и возможность регуляции экспрессии различными агентами (Jung Y.K. et al., 1992; Laslop A., Tschernitz C, 1992; Smith D.R. et al., 1992), которыми могут быть, например, продукты метаболизма этанола. Аналогичные механизмы регуляции можно предположить для ФМСФ-КП и КПМ. Для КПН и ФМСФ-КП показана зависимость активности от стероидных гормонов (Салдаев ДА, 2001). Возможно, что этанол, изменяя уровень тестостерона, прогестерона, эстрадиола, кортикостерона, приводит к изменению интенсивности транскрипции мРНК данных ферментов.
В проведенных нами опытах in vitro этанол в концентрациях, соответствующих дозам при введении in vivo не влиял на активность ФМСФ-КП, КПН и КПМ.
Таким образом, вероятно, активность КПН, ФМСФ-КП и КПМ регулируется на уровне экспрессии гена. Однако, наличие существенных изменений в активности изучаемых ферментов уже через 0,5 часа после воздействия указывает на возможность и других способов регуляции активности фермента: на уровне процессинга проформы ферментов, который осуществляется эндопептидазами субтилизинового семейства (Fricker L.D., Devi L., 1993), а также регуляция активности зрелой формы энзима за счет конформационных изменений молекулы, и как следствие, изменение свойств активного центра фермента (Lyon R., Goldstein D., 1982; Barry R.E., McGivan J.D., 1989 и др.).
Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о вовлечении основных карбоксипептидаз: КПН, ФМСФ-КП и КПМ в ответную реакцию организма на ОАИ Эти ферменты участвуют в формировании и поддержании влечения к этанолу, развитию толерантности и зависимости. Кроме того, КПН и ФМСФ-КП, по-видимому, посредством измененения уровня нейропептидов, регулирующих содержание половых стероидных гормонов, вовлекаются в формирование полового диморфизма и в контроль эстралыюго цикла. В свою очередь, изменение гормонального статуса
животных вследствие острой алкогольной интоксикации, осуществляемое отчасти исследуемыми ферментами, может приводить к нарушениям репродуктивного процесса.
На основании полученных нами данных, которые частично раскрывают роль основных карбоксипептидаз в патогенезе алкоголизма, могут быть, вероятно, определены основные пути поиска средств для профилактики и лечения алкоголизма и бесплодия путем целенаправленного поиска лекарственных средств среди регуляторов активности ферментов.
ВЫВОДЫ
1. Активность КПН у самок крыс зависит от стадии астрального цикла в гипофизе, гипоталамусе, стриатуме и яичниках. Активность ФМСФ-КП определяется стадией астрального цикла только в яичниках. Зависимости активности КПМ от стадии полового цикла в гипоталамусе и стриатуме не обнаружено.
2. Введение физраствора приводило к изменению активности КПН и ФМСФ-КП в ГТНС у самцов и самок, а также КПМ в гипоталамусе и стриатуме у самок. Активность исследуемых ферментов более значительно изменяется у самок по сравнению с самцами.
3. Инъекция физиологического раствора вызывала разнонаправленные изменения активности ферментов на разных стадиях астрального цикла, что может указывать на различную устойчивость к стрессирующему воздействию крыс на разных стадиях астрального цикла.
4. Введение этанола вызывало наиболее существенные изменения активности КПН и ФМСФ-КП в гипофизе и половых железах у особей обоего пола и КПМ в стриатуме у самок. Более значительные изменения активности ферментов обнаружены у самок.
5. Механизм, посредством которого острая алкогольная интоксикация проявляет свои эффекты, определяется стадией астрального цикла, в которой пребывает животное.
6. Более существенные изменения активности КПН и ФМСФ-КП в гипофизе и половых железах свидетельствуют о том, что ОАИ существенно изменяет функционирование гипофизарно-гонадальной системы.
7. При ОАИ отмечается нарушение динамики изменения активности изучаемых ферментов в ходе астрального цикла.
8. Различный характер изменений активности КПН, ФМСФ-КП и КПМ у самок и самцов свидетельствует о половых отличиях в ответной реакции организма на ОАИ.
9. Динамика изменения активности КПН у самок в мозге при ОАИ коррелирует с динамикой изменений активности ФМСФ-КП, у самцов такой закономерности не обнаружено.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Бардинова Ж.С., Сметании В.А., Петрушова О. П. Активность основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных
стадиях астрального цикла // Украинский биохимический журнал. - 2003. - Т. 75, № 5. - С. 99-102. (0,4 п.л., доля авторского участия 25%).
2. Сметании В.А., Бардинова Ж.С., Правосудова Н.А. Влияние острой алкогольной интоксикации на активность карбоксипептидазы N в сыворотке крови крыс // Вестник молодых ученых ПГПУ им. В.Г. Белинского: сб. науч. статей студентов, аспирантов и молодых сотрудников университета. Ч.П. -Пенза: ПГПУ, 2003. - С. 39-41. (0,1 п.л., доля авторского участия 50%).
3. Бардинова Ж.С., Сметанин В А, Петрушова О.П. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы N в сыворотке крови крыс // Вестник молодых ученых ПГПУ им. В.Г. Белинского: сб. науч. статей студентов, аспирантов и молодых сотрудников университета. Ч.П. - Пенза: ПГПУ, 2003. - С. 10-11. (0,1 п.л., доля авторского участия 40%).
4. Бардинова Ж.С., Сметанин ВА, Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Влияние астрального цикла на активность карбоксипептидазы Н, М и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в гипоталамо-гипофизарно-гонадной системе самок крыс. Тезисы докладов научной конференции Российской Академии Естествознания, секция медико-биологические науки (Россия, Дагомыс, октябрь 2003 г.) М.: Успехи современного естествознания. - 2003. -№ 11. - С. 43. (0,1 п.л., доля авторского участия 50%).
5. Бардинова Ж.С., Сметанин В.А., Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы Н в тканях самок крыс. Гомеостаз и эндоэкология: Тезисы докладов научной конференции Российской Академии Естествознания, секция медико-биологические науки (Египет, Хургада, 20-28 февраля 2004 г.) - М.: Успехи современного естествознания. - 2004. - № 2. - С. 25. (0,1 п.л., доля авторского участия 50%).
Подл, к печ. 19.05.2004 Объем 1,25 п.л. Зак.№198 Тир.100экз. Типография МПГУ
»12938
Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Сметанин, Владимир Анатольевич
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Биологическая роль нейропептидов и их обмен.
1.2. Функционирование пептидэргических систем на разных стадиях эстрального цикла.
1.2.1. Уровень нейропептидов на разных стадиях эстрального цикла.
1.2.2. Ферменты обмена нейропептидов на разных стадиях эстрального цикла.
1.3. Этанол и его влияние на пептидэргические системы.
1.3.1. Влияние этанола на уровень нейропептидов в организме.
1.3.2. Влияние этанола на активность ферментов обмена нейропептидов.
1.4. Карбоксипептидаза Н.
1.5. ФМСФ-ингибируемая карбоксипептидаза.
1.6. Карбоксипептидаза М.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материалы исследования.
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Метод определения активности карбоксипептидазы Н и карбоксипептидазы М.
2.2.2. Метод определения активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы.
2.2.3. Статистическая обработка результатов исследования.
2.3. Схема эксперимента.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
3.1. ИССЛЕДОВАНИЕ АКТИВНОСТИ ОСНОВНЫХ
КАРБОКСИПЕПТИДАЗ В ТКАНЯХ САМОК КРЫС НА РАЗНЫХ
СТАДИЯХ ЭСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА.
3.1.1. Изучение активности карбоксипептидазы Н в тканях самок крыс на разных стадиях астрального цикла. а) Распределение активности карбоксипептидазы Н в тканях 44 интактных самок крыс. б) Активность карбоксипептидазы Н при внутрибрюшинном введении физиологического раствора в тканях самок. в) Исследование активности карбоксипептидазы Н при внутрибрюшинном введении этанола в тканях самок крыс.
3.1.2. Изучение активности ФМСФ-КП в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла. а) Распределение активности ФМСФ-КП в тканях интактных самок крыс. б) Активность ФМСФ-КП при внутрибрюшинном введении физиологического раствора в тканях самок. в) Исследование активности ФМСФ-КП при внутрибрюшинном введении этанола в тканях самок крыс.
3.1.3. Активность карбоксипептидазы М в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла. а) Определение активности карбоксипептидазы М у интактных самок крыс. б) Активность карбоксипептидазы М при внутрибрюшинном введении физиологического раствора в тканях самок. в) Исследование активности карбоксипептидазы М при внутрибрюшинном введении этанола в тканях самок крыс.
3.2. ИССЛЕДОВАНИЕ АКТИВНОСТИ ОСНОВНЫХ
КАРБОКСИПЕПТИДАЗ В ТКАНЯХ САМЦОВ КРЫС.
3.2.1. Изучение активности карбоксипептидазы Н в тканях самцов крыс а) Распределение активности карбоксипептидазы Н в тканях интактных самцов крыс. б) Активность карбоксипептидазы Н при внутрибрюшинном введении физиологического раствора в тканях самцов. в) Исследование активности карбоксипептидазы Н при внутрибрюшинном введении этанола в тканях самцов крыс.
3.2.2. Изучение активности ФМСФ-КП в тканях самцов крыс. а) Распределение активности ФМСФ-КП в тканях интактных самцов крыс. б) Активность ФМСФ-КП при внутрибрюшинном введении физиологического раствора в тканях самцов. в) Исследование активности ФМСФ-КП при внутрибрюшинном введении этанола в тканях самцов крыс.
3.2.3. Активность карбоксипептидазы М в тканях самцов крыс. а) Определение активности карбоксипептидазы М у интактных самцов крыс. б) Активность карбоксипептидазы М при внутрибрюшинном введении физиологического раствора в тканях самцов. в) Исследование активности карбоксипептидазы М при внутрибрюшинном введении этанола в тканях самцов крыс.
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ВЫВОДЫ.
Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние алкогольной интоксикации на активность основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла"
Проблема алкоголизма, особенно женского, является крайне актуальной для человечества, как с социальной, так и с медицинской точки зрения. Клинические наблюдения указывают на то, что под действием этанола в организме женщины возникают существенные изменения в эндокринной системе, что сопровождается нарушениями половой функции [2, 81].
При алкоголизме существенно меняется уровень целого ряда нейропептидов, многие из которых играют существенную роль в этиологии и патогенезе данного заболевания [19, 61, 74, 88]. Изменение уровня биологически активных пептидов при алкогольной интоксикации во многом определяется ферментами их обмена, к которым, в частности, относятся карбоксипептидаза Н, фенилметилсульфонилфторид-ингибируемая кар-боксипептидаза и карбоксипептидаза М - основные карбоксипептидазы, катализирующие отщепление остатков аргинина и лизина с С-конца пептидов [28, 41, 144, 212].
Интерес к этим ферментам вызван тем, что они участвуют в процессинге, модуляции и инактивации биологически активных пептидов [28, 41, 144]. В связи с тем, что нейропептиды выполняют функции нейромедиаторов, нейромодуляторов и гормонов, они участвуют в регуляции практически всех функций: организма, в том числе и в регуляции функционирования полового цикла [11, 72], а также вовлекаются в развитие многих патологических состояний, среди которых для современной биологии и медицины особую значимость представляет алкоголизм [19, 74, 88]. Прогресс в изучении природы этого заболевания неотделим от понимания нейробиологических процессов, лежащих в его основе [80]. В этой связи представляется очень важным исследование активности основных карбоксипептидаз при острой алкогольной интоксикации. Чем глубже будут наши представления об энзимопатологии, о роли протеолитических ферментов в гомеостазе, тем более целенаправленным будет поиск лекарственных средств для лечения алкоголизма среди регуляторов активности ферментов.
Одним из важных аспектов проблемы алкоголизма является исследование нарушений, происходящих в организме женских особей при алкогольной интоксикации. Однако при этом необходим учет особенностей женского организма, связанных с наличием полового цикла, который сопровождается комплексом физиологических, биохимических и других изменений, происходящих во всем организме. В ходе эстрального цикла наблюдаются значительные изменения в функционировании пептидэргических систем [11], что, несомненно, связано с изменением активности ферментов участвующих в обмене биологически активных пептидов [28, 41] и в свою очередь, вероятно, определяет особенности ответной реакции женского организма на острую алкогольную интоксикацию на разных стадиях эстрального цикла [101, 164].
Кроме того, известно, что некоторые аспекты проявления острой алкогольной интоксикации определяются в значительной степени полом. Предполагают, что это связано с различиями в гормональном статусе самцов и самок [44]. Различный уровень нейропептидов, определяемый активностью ферментов их обмена, у особей разного пола приводит к появлению отличий в количестве потребляемого этанола, в скорости развития зависимости, а также появлению различий в течение алкогольной интоксикации у особей противоположного пола [5, 19, 64, 65].
Изучение активности карбоксипептидазо-В-подобных ферментов при острой алкогольной интоксикации может способствовать уточнению биологической роли этих ферментов, а также выяснению механизмов функционирования пептидэргических систем при данном патологическом состоянии.
Целью нашей работы было изучение активности основных карбоксипептидаз (карбоксипептидазы Н, фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы и карбоксипептидазы М) в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла при острой алкогольной интоксикации.
При выполнении работы были поставлены следующие задачи:
1. Изучить активность исследуемых карбоксипептидаз на разных стадиях эстрального цикла в тканях интактных самок крыс.
2. Исследовать активность карбоксипептидазы Н, фенилметил-сульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы и карбоксипептидазы М у самок крыс на,разных стадиях эстрального цикла при введении этанола через различные промежутки времени.
3. Сравнить активность исследуемых ферментов у самцов и самок при острой алкогольной интоксикации.
Научная новизна и практическая ценность работы. Впервые изучено влияние острой алкогольной интоксикации на активность карбоксипептидазы Н, фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы и карбоксипептидазы Н в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла. Для определения половых отличий в течении и развитии алкогольной интоксикации исследована активность этих ферментов в тканях самцов крыс. Установлена зависимость изменения активности исследуемых ферментов от стадии эстрального цикла, пола, дозы этанола и времени после его введения. Полученные результаты представляют интерес для понимания механизмов функционирования пептидэргических систем и проясняют роль основных карбоксипептидаз в норме, а также при алкогольной интоксикации и могут быть использованы для разработки эффективных методов профилактики и лечения алкоголизма, нарушений полового цикла и бесплодия.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научных конференциях Российской Академии Естествознания (Россия, Дагомыс, октябрь 2003 г. и Египет, Хургада, февраль 2004 г.) и на итоговых научных конференциях ПГПУ (2002, 2003 гг.). По теме диссертации опубликовано 5 работ.
Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Сметанин, Владимир Анатольевич
выводы
1. Активность карбоксипептидазы Н у самок крыс зависит от стадии эстрального цикла в гипофизе, гипоталамусе, стриатуме и яичниках. Активность ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы определяется стадией эстрального цикла только в яичниках. Зависимости активности КПМ от стадий полового цикла в гипоталамусе и стриатуме не обнаружено.
2. Введение физраствора приводило к изменению активности карбоксипептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системе у самцов и самок, а также карбоксипептидазы М в гипоталамусе и стриатуме у самок. Активность исследуемых ферментов более значительно изменяется у самок по сравнению с самцами.
3. Инъекция физиологического раствора вызывала разнонаправленные изменения активности ферментов на разных стадиях эстрального цикла, что может указывать на различную устойчивость к стрессирующему воздействию крыс на разных стадиях эстрального цикла.
4. Введение этанола вызывало наиболее существенные изменения активности карбоксипептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в гипофизе и половых железах у особей обоего пола и карбоксипептидазы М в стриатуме у самок. Более значительные изменения активности ферментов обнаружены у самок.
5. Механизм, посредством которого острая алкогольная интоксикация проявляет свои эффекты, частично определяется стадией эстрального цикла, в которой пребывает животное.
6. Более существенные изменения активности карбоксипептидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в гипофизе и половых железах свидетельствуют о том, что острая алкогольная интоксикация существенно изменяет функционирование гипофизарно-гонадальной системы.
7. При острой алкогольной интоксикации отмечается нарушение динамики изменения активности изучаемых ферментов в ходе эстрального цикла.
8. Различный характер изменений активности карбоксипептидазы Н, ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы и карбоксипептидазы М у самок и самцов свидетельствует о половых отличиях в ответной реакции организма на острую алкогольную интоксикацию.
9. Динамика изменения активности КПН у самок в мозге при острой алкогольной интоксикации коррелирует с динамикой изменений активности ФМСФ-КП, у самцов такой закономерности не обнаружено.
Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Сметанин, Владимир Анатольевич, Пенза
1. Аккер J1.B. Гормональные изменения и биологически активные вещества у женщин репродуктивного возраста, страдающих алкголизмом // Акушерство и гинекология. 1991. -№ 10.-С. 50-52.
2. Алиев И.А. Нейрогормоны и алкоголизм // Патол. физиология и эксп. терапия. 1989. - № 5. - С. 85-90.
3. Аминджанов С.А., Барашкова Г.М. Содержание пептидов при хронической алкогольной интоксикции // Клиническая медицина. 1987. - № 3. - С. 134136.
4. Андронова Л.М. Биологические механизмы и фармокотерапия экспериментального алкоголизма в зависимости от половых отличий // дис. на соиск. степени докт.мед.наук. — Москва, 1989.
5. Анищенко Т.Г., Буршина С.Н., Шорина Л.Н. К анализу факторов, детерминирующих половые различия в стрессовых реакциях у белых крыс // Бюлл. эксперим. биол. медицины. 1989. - Т. 108, № 11. - С. 616-618.
6. Афендикова А.П., Боднар П.Н. Влияние алкоголя на развитие эндокринных нарушений: обзор литературы // Врачебное дело. 1987. - № 6. С. 16-20.
7. Ашмарин И.П., Каменская М.А. Нейропептиды в симпатической передаче // Итоги Н. и Т. (ВИНИТИ. Сер. Физиология человека и животных). 1988. -34.-184 с.
8. Бабич Л.Г., Шлыков С.Г., Борисова Л.А. Влияние этанола на внутриклеточный обмен Са2г// Укр. биохим. журн. 2002. - Т. 74, № 1. - С. 19-26.
9. Бабичев В.Н. Нейро-гуморальная регуляция овариального цикла. М.: Медицина, 1984.-240 с.
10. Балбатун О.А., Слободская Н.С., Троян Э.И. Р50 и уровень эстрадиола в различные фазы эстрального цикла у крыс. Материалы международной научной конференции, посвященной 35-летию Гродненского медицинского института. Гродно, 1993. - ч.1. — С.9-10.
11. Беляев Н.А., Генгин М.Т., Годына С.В., Калихевич В.Н., Панченко Л.Ф. Активность энкефалинконвертазы в отделах мозга крыс при алкогольной интоксикации // Вопр. мед. химии. 1988. - Т. 34, № 4. - С. 118122.
12. Беляев Н.А., Колесанова Е.Ф. Динамика содержания мет-энкефалина в надпочечниках и плазме крови крыс при острой алкогольной интоксикации // Вопросы мед. химии. 1990. - Т. 36, № 3. - С.86-87.
13. Божко Г. X., Волошин П. В. Действие этанола на белки тканей и сыворотки крови человека и животных. // Усп. совр. биол. 1989. - Т. 108, № 1 (4).-С. 52-65.
14. Боровая Т.Г., Назаренко А.И., Волкова О.В., Адамская Е.И. Математическая модель физиологического эстрального цикла беспородных крыс.//Морфология.- 1993.-Т. 105, № 11-12, С. 114-125.
15. Боярский К.Ю. Фолликулогенез и современная овариальная стимуляция (обзор литературы) // Проблемы репродукции. 2002. - № 3. - С. 36-43.
16. Буров Ю.В., Ведерникова К.М. Нейрохимия и фармакология алкоголизма. М.: Медицина, 1985. - 240 с.
17. Бэйрд Д.Т. Яичник / Гормональная регуляция размножения у млекопитающих. М.: Мир, 1987. - С. 118-144.
18. Васильева Ю.В., Макарова Т.М. Независимость некоторых форм поведения самок крыс от фаз эстрального цикла // Журн. высш. нерв, деятельности им. П.И. Павлова. 1994. - 44, № 2. - С. 368-369.
19. Ведерникова Н.Н., Майский А.И. Опиаты и эндогенные морфиноподобные пептиды: системный подход к оценке их роли в интеграции нервной и эндокринной регуляции в организме // Усп. совр. биол. -1981.-19,№3.-С. 380-382.
20. Вернигора А.Н., Бардинова Ж.С., Сметанин В.А., Генгин М.Т. Активность основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла // Укр. биохим. журн. 2003. - 75, № 5. - С. 99102
21. Вернигора А.Н. Карбоксипептидаза Н мозга животных в норме и при действии стресс-факторов // дис. на соиск. степени канд. биол. наук. -Днепропетровск, 1991.
22. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Влияние эмоционально-болевого стресса и этанола на карбоксипептидазо-Н-подобную активность в гипофизе и сыворотке крови крыс // Вопр. мед. химии. 1994. - Т. 40, № 1. - С. 54-56.
23. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Влияние этанола на активность карбоксипептидазы Н в гипофизе и некотрых отделах головного мозга крыс при различных стрессирующих воздействиях // Физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 1993. - Т. 79, № 3. - С. 34-38.
24. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Механизмы регуляции активности и биологическая роль карбоксипептидазы Н фермента процессинга нейропептидов // Биохимия. - 1995. - Т. 60, № 12. - С. 1491 -1497.
25. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Основные (Отщепляющие остатки аргинина и лизина) металлокарбоксипептидазы тканей млекопитающих:структура, свойства и функции // Укр. биохим. журн. 1998. - Т. 70, № 4. -С. 16-24.
26. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Протеолитические ферменты: субклеточная локализация, свойства и роль в обмене нейропептидов // Биохимия. 1996.-Т. 61, №5.-С. 771-785.
27. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Макарова В.В. Влияние стрессовых факторов на активность карбоксипептидазы Н в отделах головного мозга крыс // Укр. биохим. журн. 1992. - Т. 64, № 2. - С. 45-49.
28. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Никишин Н.Н. Влияние этанола, диазепама и резерпина на активность ангиотензинпревращающего фермента и карбоксипептидазы Н в норме и при стрессе // Вопр. мед. химии. 1996. -Т. 42, №2.-С. 127-130.
29. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Никишин Н.Н. Множественность молекулярных форм растворимых карбоксипептидазо-В-подобных ферментов головного мозга кошки // Укр. биохим. журн. 1993.- Т. 65, № 4. -С. 17-21.
30. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Никишин Н.Н. Об участии некоторых ферментов обмена нейропептидов в механизмах эмоционального стресса // Физиол. журн. 1995.-Т. 81, №5.-С. 103-112.
31. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Никишин Н.Н. Очистка и физико-химические свойства растворимой карбоксипептидазы Н из серого вещества головного мозга кошки // Биохимия. 1992. - Т. 57, № 11.-С. 1712-1719.
32. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Салдаев Д. А., Щетинина Н.В. Распределение активности фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы в нервной ткани котов // Нейрохимия. 1997. - Т. 14, № 4.-С. 423 -425.
33. Вернигора А.Н., Михайлова О.Е., Генгин М.Т., Рыжкова Ю.А., Мухина Е.С. Влияние хронического потребления этанола на активность основных карбоксипептидаз в отделах мозга крыс // Укр. биохим. журн. 2002. - Т. 74, №6.-С. 128-130.
34. Вернигора А.Н., Мухина Е.С., Балыкова Н.В., Генгин М.Т. Влияние хронического потребления этанола на активность основных карбоксипептидаз в отделах мозга пренатально алкоголизированных крыс // Нейрохимия. 2003. - Т. 20, № 1.-С. 56-59.
35. Вернигора А.Н., Никишин Н.Н., Генгин М.Т. Влияние внутрибрюшинного введения физиологического раствора на поведение крыс в тесте "открытое поле" и активность ферментов обмена нейропептидов // Физиол. журн.- 1995.-Т. 81, № 12.-С. 121-125.
36. Вернигора А.Н., Никишин Н.Н., Генгин М.Т. Влияние глюкортикоидов на активность растворимой и мембраносвязанной форм карбоксипептидазы Н in vivo // Укр. биохим. журн. 1995. - Т. 67, № 6. - С. 93-98.
37. Вернигора А.Н., Никишин Н.Н., Генгин М.Т. Влияние этанола, диазепама и резерпина на активность ангиотензинпревращающего фермента и карбоксипептидазы Н в норме и при стрессе // Вопр. мед. химии. — 1996. -Т. 42, № 2. С.127-130.
38. Вернигора А.Н, Никишин Н.Н, Генгин М.Т. Протеолитические ферменты и регуляция уровня активности нейропептидов // Биохимия. -1995.-Т. 60, № 10. С. 1575-1579.
39. Вернигора А.Н., Никишин Н.Н., Генгин М.Т. Частичная характеристика основной фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы из головного мозга кошки // Биохимия. — 1995. Т. 60, № 11.-С. 1860-1866.
40. Вернигора А.Н., Щетинина Н.В., Генгин М.Т. Исследование активности основных (отщепляющих остатки аргинина и лизина)карбоксипептидаз у крыс разного возраста // Биохимия 1996. - Т. 61, № 10. -С. 1848-1856.
41. Виноградова Е.П., Чаадаева Е.В. Изменение уровня тревожности у самок белых крыс в течение эстрального цикла и в зависимости от хэндлинга // Журн. высш. нервн. деят. им. И.П. Павлова. 1994. - Т. 44, № 2. - С. 277282.
42. Вундер П.А. О механизмах тормозного и стимулирующего влияния женского полового гормона на секрецию гонадотропинов // Успехи современной биологии. 1992. - Т. 112, № 4. - С. 609-626.
43. Генгин М.Т. Особенности структурно-функциональной организации и физико-химические свойства нелизосомальных пептидгидролаз мозга животных//дис. на соискание ученой степени д.б.н. Москва, 2002.
44. Генгин М.Т., Вернигора А.Н. Влияние эмоционально-болевого стресса на активность карбоксипептидазы Н фермента процессинга нейропептидов головного мозга крыс // Физиол. журн. - 1994. - Т. 80, № 3. - С. 23-27.
45. Генгин М.Т., Вернигора А.Н. Влияние этанола на активность карбоксипептидазы Н в мозге крыс // Укр. биохим. журн.- 1993. Т. 65, № 1. -С. 100-103.
46. Генгин М.Т., Вернигора А.Н. Ферменты процессинга опиоидных пептидов и методы определения их активности // Укр. биохим. журн. 1994. -Т. 66, №2.-С. 3-17.
47. Гомазков О.А. Функциональная биохимия регуляторных пептидов.-М: Наука. 1993.- 160 с.
48. Гомазков О.А. Энзимологические основы физиологического действия регуляторных пептидов // Биол. науки. 1986. - № 2. - С. 13-23.
49. Гомазков О.А., Григорьянц О.О. Регуляция биосинтеза энкефалинов: биохимические и физиологические аспекты // Усп. совр. биол. 1989. - Т. 108, № 1(4).-С. 109-124.
50. Гормонотерапия: Пер. с нем. / Под ред. Шамбаха X., Кнаппе Г., Карола
51. B.-М.: Медицина, 1988.-416 с.
52. Држевецкая И.А. Основы физиологии обмена веществ и эндокринной системы. М.: Высш. шк., 1994. - 256 с.
53. Дыбан А.П., Пучков В.Ф., Баранов B.C. // Объекты биологии развития. М.: Наука, 1975. - С. 505-566.
54. Замятнин А.А. Общие функциональные особенности эндогенных регуляторных олигопептидов // Физиол. ж. 1992. - Т. 78, № 9. - С. 39-49.
55. Зилов В.Г., Рогачева С.К., Иванова Л.И. Субстанция и устойчивость биологических мотиваций к этанолу // Физ. журнал. 1992. - Т. 78, № 12.1. C. 22-29.
56. Каюшева И.В. Алкоголизм и эндокринная система: (обзор) // Сов. медицина. 1979. - № 7. - С. 87-91.
57. Келешева Л.Ф. Ренин-ангиотензиновая система в механизмах алкогольной мотивации // Вестник Российской АМН. 1994. -№ 10. - С. 4045.
58. Кирпиченко Ан.А., Кирпиченко А.А. Алкогольная зависимость у женщин // Мед. новости. 2002. - № 11. - С. 23-28.
59. Ковалев А.А. Это интересно: Особенности алкоголизма у женщин // Глав. Врач. 2000. - № 5. - С.77-83.
60. Колупаев Г.П., Яковлев В.А. Гормональные нарушения при хронической интоксикации алкоголем //Жури, невропатологии и психиатрии им. Корсакова. 1984. - Т. 84, № 11. - С. 1712-1714.
61. Колупаев Г.П., Яковлев В.А. Функциональное состояние гипоталамо-гипофизарно-гонадных систем у больных с хронической алкогольной интоксикацией // Журнал невропатологии и психиатрии им. Корсакова. -1987.-Т. 87, № 11.-С. 1723-1725.
62. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.
63. Локшина Л.А., Былинкина B.C. Протеолитические ферменты в процессинге белков // Успехи совр. биол. 1990. - Т. 109, № 2. - С. 219-237.(19)
64. Медведев В.И., Миролюбов А.В. Проблема управления функциональным состоянием // Физиология человека. 1984. — Т. 10, № 5. -С. 761-765.
65. Меерсон Ф.З., Пшенников М.Г. Адаптация к стресс-ситуации и физиологической нагрузке. М.: Медицина, 1988. - 25 с.
66. Нейрохимия / Под ред. Ашмарина И.П., Стукалова П.В. М.: Изд-во Института биомед. химии РАМН, 1996. - 470 с.
67. Никитин А.И., Китаев Э.М., Слозина Н.М., Неронова Е.Г. Нарушение формирования женских гамет и пренатальная патология // Акушерство и гинекология. 1990. 1. - С. 45-48.
68. Новиков Алкоголизм и гипофизарно-надпочечниковая система. М.: "Антидор", 2001.-290 с.
69. Оболенская Н.Е. Некоторые особенности образования нейропептидов // Успехи совр. биол. 1989.-Т. 108, № 3(5). - С. 337-341.
70. Панченко Л.Ф., Брусов О.С., Беляев Н.А. Исследование механизма действия этанола на активность энкефалиназы А мозга крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1984. -№ 6. - С.691-692.
71. Раевский К.С. Эндогенные опиоидные пептиды как возможные нейропередатчики // Итоги науки и техники ВИНИТИ. Фармакол. химиотерапевт, средства. 1982. - № 43. - С. 185-213.
72. Салдаев Д.А. Активность основных карбоксипептидаз в тканях мышей при введении тестостерона и прогестерона // дис. на соискание ученой степени канд. биол. наук. СПб., 2001.
73. Салдаев Д.А., Вернигора А.Н. Активность карбоксипептидазы Н в гипофизе и гипоталамусе самок мышей при введении тестостерона // Физиология и биомедицина, клеточная биология: MaT.IV Путинской конф. Молодых ученых (Пущино, 1999). Пущино, 1999.-С.13.
74. Семке В.Я., Мельникова Т.Н., Бохан Н.А. Нейробиологические механизмы алкоголизма // Журнал неврологии и психиатрии им. Корсакова. -2002. Т. 102, № 8. - С.61 -66.
75. Скосырева A.M., Балика Ю.Д., Кочиева С.К., Рудницкая С.Я. Влияние злоупотребления алкоголем на состояние здоровья женщин и их потомства // Акушерство и гинекология. 1993. -№ 2. - С. 48-52.
76. Степанов М.Г., Секретарева Е.В., Проймина Ф.И., Савченко О.Н. Отрицательная и положительная фазы реакции гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы самок крыс на введение половых гормонов // Физиол. журн.- 1991.-Т. 77, №3.-С. 108-115.
77. Тигранян Р.А. Гормонально-метаболический статус организма при экстремальных воздействиях. М.: Наука, 1990. — 228 с.
78. Физиология человека / Под ред. Косицкого Г.И. М.: Медицина, 1985. - 544 с.
79. Хип Р., Флинт А. Беременность / Гормональная регуляция размножения у млекопитающих. М.: Мир, 1987.-С. 193-244.
80. Хоха A.M. Угнетение этанолом биосинтеза половых гормонов и гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система // Успехи современной биологии. 1994.-Т. 114, №5.-С. 573-580.
81. Цыганков Б.Д., Яковлев В.А. Значение исследований гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы в изучении патогенеза и прогноза алкогольной зависимости // Профилактика и реабилитация в наркологии. — 2002.-№ 1.-G.30-35.
82. Шабанов П.Д., Калишевич С.Ю. Биология алкгоголизма. СПб.: "Лань", 1998.-272 с.
83. Щетинина Н.В. Активность основных карбоксипептидаз в тканях и отделах мозга крыс в онтогенезе // дис. на соиск. ученой степени кандидата биол. наук. -Спб., 1997.
84. Щетинина Н.В., Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Активность основных карбоксипептидаз у крыс разного пола // Укр. биохим. журн. 1997. - Т. 70, № 3. - С. 110-113.
85. Щетинина Н.В., Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Фирстова Н.В. Тканевое и региональное распределение активности фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы и других карбоксипептидаз у крыс // Укр. биохим. журн. 1997. - Т. 70, № 3. - С. 23-28.
86. Эндорфины: пер. с англ./ Под ред. Э. Коста, М. Трабукки. Перевод Панова М.А.; под ред. и с предисл. Розена В.Б. М.: Мир, 1981. - 368с.
87. Юхананов Р.Ю., Рожанец В.В., Майский А.И. // Бюллетень эксп. биол. и мед. 1989.-Т. 108, № 10. - С.455-457.
88. Adams M.L., Cicero T.J. Effects of alcohol on beta-endorphin and reproductive hormones in the male rat // Alcohol. Clin. Exp. Res. 1991. - V. 15, № 4. p. 685-92.
89. Angelogianni P., Gianoulakis C. Chronic ethanol alters proopiomelanocortin gene expression in the rat hypothalamus // Alcohol.Clin, and Exp.Res. 1992. — V. 16, №2. -P. 411.
90. Azaryan A.V., Hook V.Y.H. Distinct properties of prohormone thiol protease compared to cathepsin B, cathepsin L, and cathepsin H evidence for Ptp as a novel cysteine protease // Arch. Biochem. Biophys. - 1994. - V. 3 14, № 1. -P. 171-177.
91. Azaryan A.V., Hook V.Y.H. Unique cleavage specificity of prohormone thiol protease related to proenkephalin processing // FEBS Lett. 1994. - V. 341, №2-3.-P. 197-202.
92. Badr F.M., Smith M., Dalterio S., Bartke A. Role of pituitary and the adrenals in mediating the effects of alcohol on testicular steroidogenesis in mice. // Steroids. 1979. - V. 34, № 4. - P.477-482.
93. Barry R. E., McGivan J.D. Acetaldehyde alone may initiate hepatocellular damage in acute alcoholic liver disease // Gut. 1985. - V. 26, № 10. - P. 10651069.
94. Baumann M.N., Rabii J. Inhibition of suckling-induced prolactin release by mu- and k-opioid antagonists // Brain Res. 1991. - V. 567, № 2. - P. 224-230.
95. Befler R.L., Snader R.K. Premenstrual factors as determinants of alcoholism in women. In M. Greenblatt, Schucki M.A. "Alcoholism problems in women and children", N.Y., Grune,Stratton, 1976.
96. Blum K., Briggs A.U., Elston S.F. Reduced leucine-enkephalinlike immunoreactive substance in hamster basal ganglia after long-term ethanol exposure. // Science. 1982. - № 216. - P. 1425-1427.
97. Bondy C.A., Whitnall M.H., Brady L.S. Regulation of carboxypeptidase H gene expression in magnocellular neurons: response to osmotic stimulation // Mol. Endocrinol. 1989.-V. 3,№ 12.-P. 2086-2092.
98. Boyadjieva N., Dokur M., Advis J.P., Meadows G.G., Sarkar D.K. Chronic ethanol inhibits NK cell Cytolytic activity: role of opioid peptide P-endorphin // The Journal of Immunology. - 2001, - № 167.-P. 5645-5652.
99. Brooks A.N., Lamming G.E., Lees P.D., Haynes N.B. Opioid modulation of LH secretion in the ewe // J. Reprod. Fertil. 1986. - V. 76, № 2. - P. 693-708.
100. Caligioni C.S., Franci C.R. Oxytocin secretion induced by osmotic stimulation in rats during the estrous cycle and after ovariectomy and hormone replacement therapy // Life Sci. 2002. - V. 71, №24.-P. 2821-2831.
101. Carter A., Soliman M.R. Estradiol alters ethanol-induced effects on beta-endorphin and met-enkephalin levels in specific brain regions of ovariectomized rats // Pharmacology. 1996. - V. 53, № 3. - P. 143-150.
102. Chapin R.E., Breese G.R., Mueller R.A. Possible mechanisms of reduction of plasma luteinizing hormone by ethanol // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1980. - V. 212,№ I.-P. 6-10.
103. Charnning C.P., Andersen L.D., Hoover D.J. Hormonal control of granulosa cell secretion of oocyte maturation inhibitor and inhibin-F activity // Follicular maturation and ovulation: Exp. Med. Intern. Congr. Amsterdam. 1982. - P. 219236.
104. Cheng S.S., Tseng L.F. Chronic administration of ethanol on pituitary and hipotalamic р-endorphin in rats and golden hamsters // Pharmacol. Res. Commun. 1982.-V. 14, № 10.-P. 1001-1008.
105. Chesselet M.F., Hook V.Y.H. Carboxypeptidase H-like immunoreactivity in the striatum of cats and monkeys // Regul. Pept. 1988.- V. 20, № 2. - P. 151-159.
106. Chin J., Goldstein D. Effects of low concentrations of ethanol on the fluidity of spin-labeled erythrocyte and brain membranes // Mol. Pharmacol. 1977. - № 13.-P. 435-441.
107. Chisari A., Carino M., Perone M., Gaillard R.C., Spinedi E. Sex and strain variability in the rat hypothalamo-pituitary-adrenal axis function // J. Endocrinol. Invest. 1995.-V. 18,№ l.-P. 25-33.
108. Chretien M., Seidah N.G. Precursor polyproteins in endocrine and neuroendocrine systems // Int. J. Peptide Protein Res. 1984. - № 23. - P. 335341.
109. Cicero T.Y., Bernard Y.D., Newman K. Effects of castration and chronic morphine administration on liver alcohol dehidrogenase and the metabolism of ethanol in the male, Spraque-Dawley rat // J. Pharmacol, exp. ther. 1980. - № 215.-P. 317-324.
110. Cicero T.J., Bernstein D., Badger T.M. Effects of acute alcohol administration on reproductive endocrinology in the male rat // Alcohol. Clin. Exp. Res. 1978. - V. 2, № 3. p. 249-254.
111. Cicero T.J., Meyer E.R., Bell R.D. Effects of ethanol on the hypothalamic-pituitary-luteinizing hormone axis and testicular steroidogenesis // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1979. - V. 208, № 2. - 210-215.
112. Cool D.R., Loh Y.P. Carboxypeptidase E is a sorting receptor for prohormones binding and kinetic studies // Mol. Cell. Endocrinol. - 1998. - V. 139, № 1-2.-P. 7-13.
113. Crews F., Morrow A.L., Criswell H., Breese G. Effects of ethanol on ion channels // Int.Rev.Neurobiol. 1996. -№39. p. 283-367.
114. Daud A.I., Bumpus F.M., Husain A. Characterization of angiotensin I-converting enzyme (ACE)-containing follicles in the rat ovary during the estrous cycle and effects of ACE inhibitor on ovulation // Endocrinology. 1990. - 126, № 6.-P. 2927-2935.
115. Davidson H.W., Hutton J.C. The insulin-secretory-granule carboxypeptidase H. Purification and demonstration of involvement in proinsulin processing // J. Biochem. 1987. - V. 245, № 2. - P. 575-582.
116. De Gandarias J.M., Echevarria E., Irazusta J., Casis L. Cyclic changes of exopeptidase activities in the rat brain: a regional study // Exp Clin Endocrinol. — 1992. V. 99, № 2. - P. 64-67.
117. De Gandarias J.M.; Irazusta-J.; Echevarria-E.; Casis-L. Neutral aminopeptidase activity levels during the estrous cycle and the pregnancy in the hypothalamus and the pituitary of the rat // Life Sci. 1993. - V. 52, № 20. - P. 1629-1632.
118. De Gandarias J.M., Irazusta J., Gil J., Fernandez D., Casis L. Brain soluble and membrane-bound Tyr-aminopeptidase activities during the stages of estrous and proestrous in the female rat // Brain Res. 1993. - V. 620, № 1. - P. 146-148.
119. De Gandarias J.M., Irazusta J., Fernandez D., Echevarria E. Casis L. Brain Lys-Aminopeptidase Activity Changes During Cycle and Pregnancy // European journal of endocrinology. - 1994. - V. 130, № 4. - P. 373-377.
120. De Gandarias J.M., Ramirez M., Echevarria E., Irazusta J., Casis L. Serum and brain aminopeptidase activities in cyclic rat //. Gen. Physiol. Biophys. 1990. -V. 9,№4.-P.385-389.
121. De Gandarias J.M., Ramirez M., Zulaica J., Casis L. Aminopeptidase (arylamidase) activity in discrete areas of the rat brain: sex differences // Horm. Metab. Res. 1989. - V. 5, № 21. - P. 285-286.
122. De Vito E., Guardia D.C., Cabrera R.R. Cyclical changes in plasma renin during the oestrous cycle in the rat: synchronized effect of oestrogen and progesterone //J. Endocrinol. 1989. - V. 121, № 2. - P. 261-267.
123. Devi L. Tissue distribution of a dynorphin-processing endopeptidase // Endocrinology. 1993. - V. 132, № 3. - P. 1139-1144.
124. Dochetry K., Hutton J.C. Carboxypeptidase activity in the insulin secretory granule//FEBS Lett. 1983. - V. 162, № 1.- P. 137-141.
125. Eipper B.A., Green C.B., Mains R.E. Expression of prohormone processing enzymes in neuroendocrine and non-neuroendocrine cells // Monogr. Natl. Cancer. Inst. 1992. -№ 13.-P. 163-168.
126. Ellingboe J. Acute effects of ethanol on sex hormones in non-alcoholic men and women//Alcohol. 1987. -№ l.-P. 109-116.
127. Ehlers C.L., Li Т.К., Lumeng L. Neuropeptide Y (NPY) levels in ethanol-naive alcohol preffering and nonpreferring rats in Wistar rats following ethanol exposure // Alcohol Clin. Exp. Res. 1998. - № 22. - P. 1778-1782.
128. Ehlers C.L., Somes C., Clontier D. Are some of the effects of ethanol mediated through NPY? // Pscychopharmacology. -1998. -№ 139. P. 136-144.
129. Ferriero D.M., Sheldon R.A., Messing R.O. Somatostatin enhances nerve growth factor induced neurite outgrowth in PC 12 cells // Dev. Brain Res. 1994. -V. 80, № 1-2.-P. 13-18.
130. Fiedorek F.T.Jr., Parkinson D. Carboxypeptidase H processing and secretion in rat clonal beta-cell lines // Endocrinology. 1992. - V. 131, № 3. - P. 10541062.
131. Figueroa C.D., Chacon C., Corthorn J., Ehrenfeld P., Muller-Esterl W., Valdes G. Temporospatial changes of kinin b2 receptors during the estrous cycle and pregnancy in the rat uterus // Pharmacol. Res. Commun. 1986. - 18, № 1. -P. 49-60.
132. Frette C., Pezet S., Nabout R.A., Bertrand J.P., Pham Q.T., Kauffmann F., Lafuma C. Relationship of serum neutral endopeptidase E.C.3.4.24.11 activity to alcohol consumption // Alcohol. Clin. Exp. Res. 1998. - V. 22, № 7. - P. 14051408.
133. Fricker L.D. Activation and membrane binding of carboxypeptidase E // J. Cell. Biochem.- 1988. № 38. - P. 279-289.
134. Fricker L.D. Carboxypeptidase E // Ann. Rev. Physiol. 1988. - № 50. - P. 309-321.
135. Fricker L.D. Neuropeptide biosynthesis: focus on carboxypeptidase processing enzyme //Trends Neurosci. 1985. - V. 8, № 5. - P. 210-214.
136. Fricker L.D., Das В., Angeletti R.H. Identification of the pH-dependent membrane anchor of carboxypeptidase E (EC 3.4.17.10) // J. Biol. Chem. 1990. -V. 265, №5.-P. 2476-2482.
137. Fricker L.D., Das В., Klein R.S., Greene D., Jung Y.K. Regulation of carboxypeptidase E (enkephalin convertase) // NIDA Res. Monogr. 1991. - № 111.-P. 171-187.
138. Fricker L.D., Devi L. Posttranslational processing of carboxypeptidase E, a neuropeptide processing enzyme, in AtT 20 cells and bovine pituitary secretory granules//J. Neurochem. 1993.-V. 61, №4.-P. 1404-1415.
139. Fricker L.D., Plummer Т.Н., Snyder S.H. Enkephalin convertase: potent, selective and irreversible inhibitors // Biochem. and Biophys. Res. Commun. -1983.-V. 11,№3.-P. 994-1000.
140. Fricker L.D., Reaves B.J., Das В., Dannies P.S. Comparison of the regulation of carboxypeptidase E and prolactin in GH4C1 cells, a rat pituitary cell line. // Neuroendocrinology. 1990. - V. 51, № 6. - P. 658-663.
141. Fricker L.D., Rigual R.J., Diliberto E.J.Jr., Viveros O.H. Reflex splanchnic nerve stimulation increases levels of carboxypeptidase E mRNA and enzymatic activity in the rat adrenal medulla // J. Neurochem. 1990. - V. 55, № 2. - P. 461467.
142. Fricker L.D., Snyder S.H. Enkephalin convertase: purification and charasterization of a specific enkephalin-synthesizing carboxypeptidase localized to adrenall chromaffin granules // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1982. -№ 79. - P. 3886-3890.
143. Fricker L.D., Snyder S.H. Purification and characterization of enkephalin convertase, an enkephaline-synthesizing carboxypeptidase // J. Biol. Chem. -1983. V. 258, № 18,- P. 10950-10955.
144. Fricker L.D., Supattapone S., Snyder S.H. Enkephalin convertase: a specific enkephalin synthesizing carboxypeptidase in adrenal chromaffin granules, brain and pituitary gland //Life Sci. 1982.- V. 31.-P. 1841-1844.
145. Funabashi Т., Brooks P.J., Kleopoulos S.P., Grandison L., Mobbs C.V., Pfaff D.W. Changes in preproenkephalin messenger RNA level in the rat ventromedial hypothalamus during the estrous cycle // Brain. Res. Mol. Brain Res. 1995.-V. 28, № l.-P. 129-134.
146. Gainer H., Russel J.T., Loh Y.P. The enzymology and intracellular organization of peptide precursor processing: The secretory vesicle hypothesis // Neuroendocrinology 1985. - № 40. - P. 171-184.
147. Genazzani A.R., Faechinetti F., Petraglia F., Pintor C., Bagnoli F., Puggioni R., Corda R. Correlations between plasma levels of opioid peptides and adrenal androgens in prepuberty and puberty // J. Steroid. Biochem. 1983. - V. 19, № 1. -P. 891-895.
148. Gianoulakis C. The effect of ethanol on the biosynthesis and regulation of opiod peptides // Experentia. 1989. -V. 45, № 5. - P. 428-435.
149. Gianoulakis C., Barcomb A. Effect of acute ethanol in vivo and in vitro on the р-endorphin system in the rat// Life Sci. 1987. - V. 40, № l.-P. 19-28.
150. Guest P.C., Pipeleers D., Rossier J., Rhodes C.J., Hutton J.C. Co-secretion of carboxypeptidase H and insulin from isolated rat islets of Langerhans // J. Biochem. 1989. - V. 264, № 2. - P. 503-508.
151. Guest P.C., Ravazzola M., Davidson H.W., Orci L., Hutton J.C. Molecular heterogeneity and cellular localization of carboxypeptidase H in the islets of Langerhans // Endocrinology. 1991. - V. 129, № 2. - P. 734-740.
152. Hammer R.P. Jr. Mu-opiate receptor binding in the medial preoptic area is cyclical and sexually dimorphic // Brain Res. 1990. - V. 515, № 1-2. - P. 187192.
153. Hammer R.P. Jr., Zhou L., Cheung S. Gonadal steroid hormones and hypothalamic opioid circuitry//Horm. Behav. 1994.-V. 28, № 4. - P.431-437.
154. Harmar A.J. Neuropeptides // Transmitter Molecules in the Brain. 1987. -№ l.-P. 17-26.
155. Ho K.S., Rossi N. Suppression of ethanol consumption by metenkephalin in rats // J. Pharm. Pharmacol. 1982. - V. 34, № 2. - P .118-119.
156. Hollt V. Multiple endogenous opioid peptide // Trend. Neurosci. 1983, -V. 6,№ 1. - P.24-26.
157. Hook V.Y. Carboxypeptidase B-like activity for the processing of enkephalin precursors in the membrane component of bovine adrenomedullary chromaffin granules //Neuropeptides. 1984. - V. 4, № 2. - P. 117-126.
158. Hook V.Y.H., Affolter H.U. Identification of zymogen and mature forms of human carboxypeptidase H. A processing enzyme for the synthesis of peptide hormones // FEBS Lett. 1988. - V. 238, № 2. - P. 338-342.
159. Hook V.Y.H., Affolter H.U., Palkovits M. Carboxypeptidase H in the hypothalamo-neurohypophysal system: evidence for processing of a prohormone-processing enzyme during axonal transport // J. Neurosci. 1990. - V. 10, № 10. P. 3219-3226.
160. Hook V.Y.H., Eiden L.E., Pruss R.M. Selective regulation of carboxypeptidase peptide hormone-processing enzyme during enkephalin biosynthesis in cultured bovine adrenomedullary chromaffin cells // J. Biol. Chem. 1985.-V. 260, № 10.-P. 5991-5997.
161. Hook V.Y.H., Eiden L.E. (Met)-enkephalin and carboxypeptidase processing enzyme are co-released from chromaffin cells by cholinergic stimulation // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1985. -№128. - P. 563-570.
162. Hook V.Y., Loh Y.P. Carboxypeptidase B-like convertasing enzyme activity in secretory granules of rat pituitary // Cell Biol. 1984. -№ 81. - P. 2776-2780.
163. Jin D.F., Muffly K.E., Okulicz W.C., Kilpatrick D.L. Estrous cycle- and pregnancy-related differences in expression of the proenkephalin and proopiomelanocortin genes in the ovary and uterus//Endocrinology. 1988. - V. 122, №4.-P. 1466-1471.
164. Johansson G.B., Skidgel R.A. Carboxypeptidase M converts epidermal growthfactor to Des-Arg53-EGF // FASEB J. 1994. - V. 8, № 5. - P. 930.
165. Joshi D., Billiar R.B., Miller M.M. Modulation of hypothalamic mu-opioid receptor density by estrogen: a quantitative autoradiographic study of the female C57BL/6J mouse // Brain Res. Bull. 1993. - V. 30, № 5-6. - P .629-634.
166. Jung Y.K., Kunczt C.J., Pearson R.K., Fricker L.D., Dixon J.E. Expression of the rat carboxypeptidase-E gene in neuroendocrine and nonneuroendocrine cell lines // Mol. Endocrinol. 1992. - V. 6, № 12. - P. 2027-2037.
167. Kaminski J., Kozuchowski J., Malinowska L. The activity of cathepsin A and cathepsin D in the serum of persons acutely intoxicated with ethanol and chronic alcoholics // Rocz. Akad. Med. Bialymst. 1995. - V. 40, № 1. - P. 209212.
168. Ogilvie K.M., Rivier C. Effect of Alcohol on the Proestrous Surge of Luteinizing Hormone and the Activation of LH-Releasing Hormone Neurons in the Female Rat // Society for Neuroscience. 1997. - V. 17, № 7. - P. 2595-2604.
169. Kenney W. C. Formation of Schiff base adduct between acetaldehyde and rat liver microsomal phosphatidylethanolamine. // Alcohol. Clin. Exp. Res. 1984. - V. 8, №6.-P. 551-555.
170. Khanna A.S., Waisman D.M. Metabolism and intracellular processing of protein hormones//Hormon. Act. 1988.-№ 1. - P. 117-132.
171. Klein R.S., Das В., Fricker L.D. Secretion of carboxypeptidase E from cultured astrocytes and from AtT-20 cells, a neuroendocrine cell line: implications for neuropeptide biosynthesis // J. Neurochem. 1992. - V. 58, № 6. - P. 20112018.
172. Klein R.S., Fricker, L.D. Differental effects of a phorbol ester on carboxypeptidase E in cultured astrocytes and AtT-20 cells, a neuroendocrine cell line//J. Neurochem.- 1993.-V. 60, № 5.-P. 1615-1625.
173. Kimura A, Takahashi T. cDNA cloning of rat prolyl oligopeptidase and its expression in the ovary during the estrous cycle // J. Exp. Zool. 2000. — V. 286, № 6. - P. 656-665.
174. Knox R.V., Vatzias G., Naber C.H., Zimmerman D.R. Plasma gonadotropins and ovarian hormones during the estrous cycle in high compared to low ovulation rate gilts // J. Anim. Sci. 2003. - V. 81, № I. - P. 249-260.
175. Kopelman M.D. The Korsakoff syndrome // Brit. J. Psychiatry. 1995. - V. 166, №2. -P. 154-173.
176. Kuhl H., Rosniatowski C., Taubert H.D. Effect of sex hormones on LH-RH-degrading hypothalamic enzyme system during estrus cycle in rats // Endocrinol. Exp. 1979.-V. 13, № l.-P. 29-38.
177. Laslop A., Tschernitz C. Effects of nerve growth factor on the biosynthesis of chromogranin A and B, secretogranin II and carboxypeptidase H in rat PC 12 cells // Neuroscience. 1992. - V. 49, № 2. - P. 443-450.
178. Leppaluoto J., Rapeli M., Varis R., Ranta T. Secretion of anterior pituitary hormones in man: effects of ethyl alcohol // Acta Physiol. Scand. 1975. - V. 95, № 4. - 400-406.
179. Lew R.A., Cowley M., Clarke I.J., Smith A.I. Peptidases that degrade gonadotropin-releasing hormone: influence on LH secretion in the ewe // J. Neuroendocrinol. 1997. - V. 9, № 9. - P. 707-712.
180. Li X.F., Ahmed A. Compartmentalization and cyclic variation of immunoreactivity of renin and angiotensin converting enzyme in human endometrium throughout the menstrual cycle // Hum. Reprod. 1997. - V. 12, № 12.-P. 2804-2809.
181. Lipperheide C., Otto K. Improved purification and some properties of bovine lysosomal carboxypeptidase В // Biochim. Biophys. Acta. 1986. - V. 880, №2-3.-P. 171-178.
182. Loh Y.P., Birch N.P., Castro M.G. Pro-opiomelanocortin and pro-vasopressin converting enzyme in pituitary secretory vesicles // Biochimie. 1988 .-V. 70, № l.-P. 11-16.
183. Lowry O.H., Rosebrought N.J., Farr A.G., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent//J. Biol. Chem.- 1951.-V. 193,№ i.p. 265-275.
184. Lynch D.R., Braas K.M., Hutton J.C., Snyder S.H. Carboxypeptidase E: immunocytochemical localization in the rat central nervous system and pituitary gland//J. Neurosci.- 1990.-V. 10, № 5.p. 1592-1599.
185. Lynch D.R., Venable J.C., Snyder S.H. Enkephalin convertase in the heart: similar disposition to atrial natriuretic factor // Endocrinology. V. 122, № 6. - P. 2683-2691.
186. Lynch D.R., Venable J.C., Strittmatter S.M., Snyder S.H. Enkephalin convertase: charasterization and localization using 3H. guanidinoethylmercaptosuccinic acid // Biochimie. 1988. — V. 70, № l.-P. 5764.
187. Lyon R., Goldstein D. Changes in synaptic membrane order associated with chronic ethanol treatment in mice // Molec. Pharmacol. 1982. - № 23. - P.86-91.
188. Mahata S.K., Mahata M., Steiner H.J., Fischer-Colbrie R., Winkler H. In situ hybridization: mRNA levels of secretogranin II, neuropeptides and carboxypeptidase H in brains of salt-loaded and Brattleboro rats // Neurosci. -1992. V.48, № 3. p. 669-680.
189. Mains R.E., Eipper B.A. Secretion and regulation of two biosyntetic enzyme activities, peptidyl-glycine a-amidating monooxygenase and a carboxypeptidase, by mouse pituitary corticotropic tumor cells // Endocrinology. 1984. - V. 115, № 5.-P. 1683-1690.
190. Mateo A.R., Hijazi M., Hammer R.P. Jr. Dynamic patterns of medial preoptic mu-opiate receptor regulation by gonadal steroid hormones // Neuroendocrinology. 1992.-V. 55, № 1.-C.51-58.
191. Matsumoto-H., Mori T. Changes in cystine aminopeptidase (oxytocinase) activity in mouse serum, placenta, uterus and liver during pregnancy or after steroid-hormone treatments // Zoological Science. 1998, - V. 15, № 1. - P. 111115.
192. Matsuzaki H., Ueno H., Hayashi R., Liao Т.Н. Bovine spleen cathepsin A -characterization and comparison with the protective protein // J. Biochem. — 1998. -V. 123, №4.-P. 701-706.
193. Mayas M.D., Ramirez-Exposito M.J., Garcia M.J., Ramirez M., Martinez-Martos J.M. Influence of alcohol on brain aminopeptidases. An in vitro study // Rev Neurol. 2001.-V. 32, № 11.-P. 1031-1040.
194. Mendelson J. H., Mello N. K., Ellingboe J. Effects of acute alcohol intake on pituitary-gonadal hormones in normal human males // J. Pharmacol. Exp. Ther. -1977. V. 202, № 3. - P. 676-682.
195. Mendelson J.H., Mello N.K., Teoh S.K., Ellingboe J. Alcohol effects on * luteinizing hormone releasing hormone-stimulated anterior pituitary and gonadal hormones in women //J. Pharmacol. Exp. Ther. 1989. - V. 250, № 3. - P. 902909.
196. Mitra A., Song L.X., Fricker L.D. The C-terminal region of carboxypeptidase E is involved in membrane-binding and intracellular routing in Att-20 cells//J. Biol. Chem. 1994.-V. 269,№31.-P. 19876-19881.
197. Morlev J.E. Neuropeptide, behavior and aging // Ger. Biosci. 1986. - V. 34, № 1. - P. 52-62.
198. Muffly K.E., Jin D.F., Okulicz W.C., Kilpatrick D.L. Gonadal steroids regulate proenkephalin gene expression in a tissue-specific manner within the female reproductive system // Mol.Endocrinol. 1988. - V. 2, № 10. - P. 979985.
199. Nagae A., Deddish P.A., Becker R.P., Anderson C.H., Abe M., Tan F., Skidgel R.A., Erdos E.G. Carboxypeptidase M in brain and peripheral nerves // J. Neurochem. 1992. - V. 59, № 6. - P. 2201-2212.
200. Nalamachu S.R., Song L.X., Fricker L.D. Regulation of carboxypeptidase E effect of Ca2t on enzyme-activity and stability // J. Biol. Chem. - 1994. - V. 269, № 15.-P. 11192-11195.
201. Norenberg U., Richter D. Processing of the oxytocin precursor: isolation of an exopeptidase from neurosecretory granules of bovine pituitaries // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1988. - V. 156, № 2. - P. 898-904.
202. Normant E., Loh Y.P. Carboxypeptidase E acts as a sorting receptor for routing proinsulin and proenkephalin but not chromogranin A to the regulated secretory pathway // FASEB Journal. 1997. - V. 11, № 9. - P. 431.
203. Ogilvie K.M., Rivier C. Gender difference in alcohol-evoked hypothalamic-pituitary-adrenal activity in the rat: ontogeny and role of neonatal steroids // Alcohol. Clin. Exp. Res. 1996. - V. 20, № 2. - P. 255-261.
204. Orskov C., Buhl Т., Rabenhoj L., Kofod H., Hoist J.J. Carboxypeptidase-B-like processing of the C-terminus of glucagon-like peptide-2 in pig and human small intestine//FEBS Lett. 1989. - V. 247, № 2. - P. 193-196.
205. Ostrowski N.L., Hill J.M., Pert C.B., Pert A. Autoradiographic visualization of sex differences in the pattern and density of opiate receptors in hamster hypothalamus//Brain. Res. 1987.-V. 421, № 1-2. - P. 1-13.
206. Parkinson D. Two soluble forms of bovine carboxypeptidase H have different NH2-terminal sequences // J. Biol. Chem. 1990. - V. 265, № 28. - P. 17101-17105.
207. Parkinson D. Carboxypeptidase H in bovine pituitary gland: soluble forms are not processed at the C-terminus // Mol. Cell. Endocrinol. 1992. - V. 86, № 3. -P. 221-233.
208. Patel V.A., Pohoresky L.A. Acute and chronic ethanol treatment on P-endorphin and catecholamin levels // Alcohol. 1989. - V. 6, № 1. - P. 59-63.
209. Porcelli G., Raffaelli R., Sacchi A., Volpe A.R., Miani C. Localization and characterization of human salivary kininases // Agents Actions Suppl. 1992. - V. 38, № i.p. 401-406.
210. Potargowicz E., Traczyk W.Z. Role substance P in central control of ovulation in female rats // Endocrine regulations. 1999. - № 33. - P. 161-167.
211. Prieto I., Arechaga G., Ramirez-Exposito M.J., De Gasparo M., Martinez-Martos J.M., Ramirez M. Aminopeptidases in the gonads of male and female rats // Fertil. Steril. 2002. - V. 77, № 4. - P. 802-804.
212. Proteinases in Mammalian Cells and Tissues / Barrett A.J. (ed.). -Amsterdam: Elsevier/North Holland Biomedical Press, 1977.
213. Redei E., Brunch B.J., Gholami S., Lin Y.R., Taylor A.N. Effects of ethanol on CRF-release in vitro // Endocrinology. 1988. — V. 123, .№ 6. - P. 2736-2743.
214. Redei E., Brunch J.B., Taylor A.N. Direct effect of ethanol on adrenocorticotropin (ACTH) release in vitro // J. Pharmac. Exp. Ther. 1986. - № 237.-P. 59-64.
215. Rettori V., Skelley C.W., McCann S.M., Dees W.L. Detrimental effects of short-term ethanol exposure on reproductive function in the female rat // Biol. Reprod.- 1987.-V. 37, № 5. P. 1089-1096.
216. Rivier C. Female rats release more corticosterone than males in response to alcohol: influence of circulating sex steroids and possible consequences for blood alcohol levels // Alcohol Clin. Exp. Res. 1993. - V. 17, № 4. - P. 854-859.
217. Rivier С., Rivest S., Vale W. Alcohol-induced inhibition of LH secretion in intact and gonadectomized male and female rats: possible mechanisms // Alcohol Clin. Exp. Res. 1992.-V. 16, №5.-P. 935-941.
218. Roth W.W., Mackin R.B., Spiess J., Goodman R.H., Noe B.D. Primary structure and tissue distribution of angelerfish carboxypeptidase H // Mol. Cell Endocrinol. 1991.-V. 78, № .3. - P.171-178.
219. Rubattu S., Quimby F.W., Sealey J.E. Tissue renin and prorenin increase in female cats during the reproductive cycle without commensurate changes in plasma, amniotic or ovarian follicular fluid. // J. Hypertens. 1991. - V. 9, № 6. -P. 525-535.
220. Ryder S., Straus E., Lieber C.S., Yalow R.S. Cyolecystocinin and enkephalin levels following ethanol administration in rats // Peptides. 1981. - № 2. — P.223-226.
221. Saito Т., Lee J.M., Tabacoff B. Ethanol's effects on cortical adenilate cyclase activity // J. Neurochem. 1985. - № 44. - P. 1037-1044.
222. Salonen I., Huhtaniemi I. Effects of chronic ethanol diet on pituitary-testicular function of the rat // Biology of Reproduction. 1990. - № 42 - P. 55-62.
223. Schauser K.H., Nielsen A.H., Dantzer V., Poulsen K. Angiotensin-converting enzyme activity in the bovine uteroplacental unit changes in relation to the cycle and pregnancy // Placenta. 2001. - V. 22, № 10. - P. 852-862.
224. Schauser K.H., Nielsen A.H., Winther H., Dantzer V., Poulsen K. Localization of the renin-angiotensin system in the bovine ovary: cyclic variationof the angiotensin II receptor expression // Biol. Reprod. 2001. - V. 65, № 6. - P. 1672-1680.
225. Schulz R., Wuster M., Duka D., Herz A. Acute and chronic ethanol treatment changes endorphine levels in brain and pituitary. — Psychopharmacologia (Berl.), 1980.-P. 221-227.
226. Seidah N.G., Chretien M. Proprotein and prohormone convertases of the subtilisin family recent developments and future perspectives // Trends Endocrinol. Met. - 1992.-3, №4.-P. 133-140.
227. Seizinger B. R., Bovermann K., Maysinger D. Differential effects of acute and chronic ethanol treatment on particular opioid peptide systems in discrete regions of rat brain and pituitary // Pharmacol. Biochem. Behav. 1983, - V.18, № l.-P. 1-9.
228. Shen F.S., Loh Y.P. Intracellular Misrouting and Abnormal Secretion of Adrenocorticotropin and Growth Hormone in Cpe (Fat) Mice Associated with a Carboxypeptidase E Mutation // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1997. - V. 94, № 10. -P. 5314-5319.
229. Shimamori Y., Kumagai Y., Watanabe Y., Fujimoto Y. Human placental carboxypeptidase M is anchored by a glycosyl-phosphatidylinositol moiety // Biochem. Int. 1990.-V. 20, №3.-P. 607-613.
230. Simerly R.B., Young B.J., Carr A.M. Co-expression of steroid hormone receptors in opioid peptide-containing neurons correlates with patterns of gene expression during the estrous cycle // Brain Res. Mol. Brain Res. 1996. - V. 40, № 2. - P. 275-284.
231. Simpson K.B., May D. Some effects of the oestric cicly in the female rats // J.of the Institute of Animal Technicions. 1973. - № 24. - P. 25.
232. Skidgel R.A., Davis R.M., Tan F. Human carboxypeptidase M. Purification and characterization of a membrane-bound carboxypeptidase that cleaves peptide hormones//J. Biol. Chem 1989.- V. 264, № 4.- P. 2236-2241.
233. Skidgel R.A., Erdos E.G. Cellular carboxypeptidases // Immunol. Rev. -1998. V. 161, № 2. - P. 129-141.
234. Skidgel R.A., McGwire G.B., Li X.Y. Membrane anchoring and release of carboxypeptidase M: implications for extracellular hydrolysis of peptide hormones // Immunopharmacology. 1996. - V. 32, № 1-3. - P. 48-52.
235. Skidgel R.A., Tan F.L., Deddish P.A., Li X.Y. Structure, function and membrane anchoring of carboxypeptidase M // Biomed. Biochim. Acta. 1991. -V. 50, №4-6.-P. 815-820.
236. Slamecki C.J., Somes C., Ehlers C.L. Effects of chronic ethanol exposure on neurophysiological responses to corticotropinreleasing factor and neuropeptide Y // Alcohol and Alcoholism. 1999. - № 34. - P. 289-299.
237. Smith D.R., Pallen C.J., Murphy D., Lim L. Pituitary-specific transcriptional initiation sites of the rat carboxypeptidase-H gene and the influence of thyroid hormone status // Mol. Endocrinol. 1992. - V. 6, № 5. - P. 713-722.
238. Smyth D.G., Maruthainar K., Darby N.J., Fricker L.D. Catalysis of slow С terminal processing reactions by carboxypeptidase H // J. Neurochem. — 1989. — V. 53, №2.-P. 489-493.
239. Song L., Fricker L.D. Calcium- and pH-dependent aggregation of carboxypeptidase E//J. Biol. Chem. 1995.-270, № 14.-P. 7963-7967.
240. Steiner D.F. The biosynthesis of biologically active peptides: a perspective // Peptide Biosynthesis and Processing (Fricker L.D., ed.).- CRC Press, Boca Raton, Florida, 1991.-P. 1-16.
241. Supattapone S., Fricker L.D., Snyder S.H. Purification and characterization of membrane-bound enkephalin-forming carboxypeptidase, "enkephalin convertase" // J. Neurochem. 1984. - V. 42, № 4.- P. 1017-1023.
242. Tabakoff В., Hoffman P.L. Biochemical pharmacology of alcohol // Psychopharmacology: The third generation of progress/Ed. By H.Y. Meltzer. New.York: Raven Press. 1987. - P. 1521-1526.
243. Thiagarajan А.В. Mefford I.N., Eskay R.L. Single dose ethanol administration activities the hypotalamus-pituitary-adrenal axis:exploration of the mechanism of action // Neuroendocrinology. 1989. - V. 50. № 4. - P .427-432.
244. Uhleman E.R., Robberecht P., Gardner J.D. Effects of alcohols on the actions of VIP and secretin on acinar cells from guinea pig pancreas // Gastroenterology. 1979. - № 76. - P.917-925.
245. Walsh J.P., Rao A. Thompson R.C., Clarke l.J. Proenkephalin and opioid mu-receptor mRNA expression in ovine hypothalamus across the estrous cycle /< Neuroendocrinology. 2001. - V. 73, № 1. - P. 26-36.
246. Wardlow S.L. Regulation of P-endorphin, corticotropin-like intermediate lobe peptide, and a-melanotropin-simulating hormone in the hypothalamus by testosterone // Endocrinology. 1986. - V. 119, № 1. - P. 19—24.
247. Yamamoto Т., Nishiyama M. Naka A. Role of epidermal grouwth factor in reproduction // Acta Obstetr. Gynaecol. Jap. 1988. - V. 40, № 5. - P. 649-654.
-
Сметанин, Владимир Анатольевич
-
кандидата биологических наук
-
Пенза, 2004
-
ВАК 03.00.04
- Влияние стресса на активность карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла
- Арбоксипептидаза Н (энкефалиновразующая карбоксипептидаза) мозга и надпочечников при различных функциональных состояниях организма
- Влияние психолептиков на активность основных карбоксипептидаз в тканях самцов крыс
- Активность пептид-гидролаз плаценты в норме и при патологии
- Активность основных карбоксипептидаз в тканях пренатально алкоголизированных крыс
