Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Влияние сроков хранения криоконсервированной спермы быков-производителей на её качество

ВАК РФ 06.02.04, Частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства

Автореферат диссертации по теме "Влияние сроков хранения криоконсервированной спермы быков-производителей на её качество"

УДК 636.082.453.51/.54

На правах рукописи

ПЛЕШАКОВ ВЛАДИМИР АЛЕКСАНДРОВИЧ

ВЛИЯНИЕ СРОКОВ ХРАНЕНИЯ КРИОКОНСЕРВИРОВАННОЙ СПЕРМЫ БЫКОВ-ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ НА ЕЁ КАЧЕСТВО

06.02.04 - частная зоотехния, технология производства продуктов

животноводства

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук

Барнаул 2006

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Алтайский государственный аграрный университет» (ФГОУ ВПО АГАУ).

Научный руководитель - кандидат биологических наук, профессор Коростелёва Наталья Ивановна

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук, Клименок Иван Иванович;

кандидат биологических наук, доцент Кудряшова Ирина Васильевна

Ведущая организация - Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Новосибирский государственный аграрный университет»

Защита диссертации состоится 28 февраля 2006 года в /¿> часов на заседании диссертационного совета Д 220.002.04 при ФГОУ ВПО «Алтайский государственный аграрный университет» по адресу: 656049, Алтайский край, г. Барнаул, пр-т Красноармейский, 98.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Алтайский государственный аграрный университет».

Автореферат разослан » января 2006 г.

Учёный секретарь диссертационного совета,

кандидат технических наук, доцент

А.К. Бец

Т^о

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Значение для практики сельского хозяйства метода криоконсервации спермы быков, открытого В. Миловано-вым, И. Смирновым и др. более 40 лет назад, трудно переоценить. Благодаря этому селекционеры располагают богатейшим генетическим материалом. В банках-хранилищах страны накоплены сотни миллионов доз спермы от высокоценных быков-производителей и других видов животных. Длительное хранение спермы в жидком азоте приобретает всё возрастающее значение в связи с возможностью сохранения пород, типов и линий животных, находящихся под угрозой исчезновения. Создание банка генов малочисленных и исчезающих пород является составной частью мероприятий по охране природных богатств планеты (Курбатов А.Д., 1988). Развитие и совершенствование методов хранения замороженной спермы животных невозможно без глубокого познания теоретических вопросов криобиологии. Однако недостаточное количество научных работ о влиянии времени хранения спермы в жидком азоте на её качество и оплодотворяющую способность, а в ряде случаев их разноречивость (Смирнов И.В., 1974; Ющенко Н.П., 1976; Варнавский А.Н., 1989; Столповский Ю., 1999), вызывает возникновение ряда вопросов. В связи с этим наши исследования, направленные на изучение некоторых биологических и хозяйственных параметров биопродукции в зависимости от сроков хранения, должны ответить на вопросы о возможности целесообразности её использования в селекционном процессе совершенствования чёрно-пёстрого скота Алтайского края. До наших исследований комплексная оценка криоконсервированной биопродукции различного срока хранения в о!крытом акционерном обществе (ОАО) «Барнаульское» по племенной работе, в банке которого сосредоточено более 4 млн спер-модоз от производителей отечественной и импортной селекции, не проводилась. Поэтому изучение морфобиологических показателей спермы длительного хранения в жидком азоте и её оплодотворяющей способности актуально и представляет большой научный и практический интерес.

Цель исследований - дать комплексную оценку качества криоконсервированной спермы крупного рогатого скота чёрно-пёстрой породы, хранившейся длительное время в жидком азоте.

В соответствии с этим нами были поставлены следующие задачи:

1. Провести зоотехническую оценку быков-производителей, биопродукция которых была комплексно исследована.

2. Изучить органолептические, физические, биологические и морфологические свойства криоконсервированной спермы.

3. Провести микробиологические и биохимические исследования глубокозамороженной спермы.

4. Изучить коррелятивные связи между некоторыми количественными и качественными показателями криоконсервированной спермы разных сроков хранения в жидком азоте.

5. Изучить влияние биохимического состава сыворотки крови быков-производителей на качество их криоконсервированной спермы.

6. Определить оплодотворяющую способность спермы разного срока хранения.

7. Рассчитать экономическую эффективность использования биопродукции, хранившейся в жидком азоте на ОАО «Барнаульское», при искусственном осеменении тёлок.

Научная новизна. Впервые в Алтайском крае была проведена комплексная оценка криоконсервированной спермы крупного рогатого скота чёрно-пёстрой породы в зависимости от сроков хранения в жидком азоте, где исследованы и охарактеризованы органолептические, морфологические, биологические, биохимические и микробиологические свойства спермиев. Выявлена коррелятивная взаимосвязь между некоторыми количественными и качественными показателями глубокозамороженных гамет. Установлено влияние биохимического состава сыворотки крови быков на качество их глубокозамороженной биопродукции.

Практическая значимость. Проведённый анализ глубокозамороженной спермы позволяет использовать её без ограничения в Алтайском крае для искусственного осеменения коров и тёлок в процессе селекционной работы по совершенствованию алтайской популяции чёрно-пёстрой породы скота.

В результате исследования была выявлена коррелятивная взаимосвязь между количественными и качественными показателями глубокозамороженной спермы. Её использование в практической селекции позволяет оперативно оценить состояние биопродукции и эффективно использовать в воспроизводстве крупного рогатого скота. Данные о йлиянии биохимического состава сыворотки крови быков-про-

изводителей ОАО «Барнаульское» на качество криоконсервированной спермы позволят делать оперативную корректировку их рационов.

Основные положения, взносимые ня защиту:

- результаты исследований по органолептическйм, физическим, морфобиологическим, биохимическим свойствам криоконсервированной спермы;

- влияние времени хранения на коэффициент осмотической резистентности спермиев и их дегидрогеназную активность;

- оплодотворяющая способность спермы различного срока хранения в жидком азоте;

- взаимосвязь между некоторыми количественными и качественными показателями глубокозамороженной спермы разных сроков хранения.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на научно-практических конференциях по итогам научно-исследовательской работы зооинженерного факультета АГАУ (2003, 2004, 2005 гг.), юбилейной Международной научно-практической конференции «Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве» (Барнаул, 2003), II научно-теоретической и практической конференции, посвященной 60-летнему юбилею АГАУ (Барнаул, 2003), VII региональной научно-теоретической и практической конференции, посвященной 50-летию освоения целинных и залежных земель (Барнаул, 2004).

Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 132 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, выводов, предложений, включает 15 таблиц, 15 рисунков и 5 приложений. Библиографический список состоит из 210 источников, в том числе 59 на иностранных языках.

Основные положения диссертации опубликованы в 4 научных статьях.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Научные исследования проведены в период с 2001 по 2005 гт. на кафедре «Генетики и разведения сельскохозяйственных животных» в ФГОУ ВПО «Алтайский государственный аграрный университет» на базе ОАО «Барнаульское» и молочного комплекса КГУП «Прутской» Павловского района Алтайского края в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ. Выполненная работа являет-

ся составной частью комплексной темы №01.83.0.060806 «Совершенствование чёрно-пёстрого скота Алтайского края», входящей в региональную программу «Совершенствование существующих и выведение новых высокопродуктивных типов, линий, стад чёрно-пёстрого, красного и палево-пёстрого скота, пригодных к разведению в зонах Сибири».

Материалом для исследования являлась сперма быков, разбавленная лактозо-желточно-глицериновой средой, замороженная в необли-цованные гранулы по 0,2 мл и хранившаяся в жидком азоте при температуре -196°С в течение 18, 16, 8 и 4 лет (рис. 1).

Рис. 1. Схема исследований

Сперма была получена от 12 быков чёрно-пёстрой породы, по 3 головы в каждой группе. Отбор быков-производителей проводили по возрасту, породной и линейной принадлежности.

Лабораторные исследования проводились в лаборатории ОАО «Барнаульское» по племенной работе на основании нормативных документов: ГОСТ 20909.2-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы микробиологических исследований»; ГОСТ 20909.3-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы морфологических исследований»; ГОСТ 20909.4-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы биологических исследований»; ГОСТ 20909.5-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы испытаний физических свойств»; ГОСТ 20909.6-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы биохимических исследований»; ГОСТ 26030-83 «Сперма быков замороженная, технические условия»; ГОСТ 27777-88 «Сперма быков замороженная. Методы биологических исследований».

Всего было исследовано лабораторными методами 780 замороженных гранул спермы.

Оплодотворяющую способность спермиев проверяли на тёлках молочного комплекса государственного краевого унитарного предприятия «Прутское» Павловского района Алтайского края.

Анализ результатов оплодотворяющей способности спермиев осуществляли по данным зоотехнического учёта.

Экономическую эффективность определяли по изменению себестоимости спермодоз разных сроков хранения и прибыли от её реализации.

Коррелятивную связь между количественными и качественными показателями спермы считали по формуле для малых выборок.

Результаты исследований обработаны методами вариационной статистики (Плохинский Н.А., 1970) на персональном компьютере с использованием программы «Microsoft Excel».

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Характеристика быков-производителей, сперма которых была комплексно исследована

В результате собственных исследований нами было установлено, что быки, сперма которых была получена 18 и 16 лет назад, имели наибольшую живую массу (760-780 кг), глубину груди (76,7-84,7 см),

длину туловища (173,7-177,3 см), обхват груди (207,7-216,3 см) и обхват пясти (22,7-23 см) по сравнению с быками, биопродукция от которых была получена 8 лет и 4 года назад (табл. 1).

Выше всех в холке были быки-производители, сперму от которых получали 16 лет назад (146,3 см), а ниже всех - быки, работающие 18 лет назад (136,3 см).

Таблица 1. Промеры быков производителей (X ± ш), см

Группа Живая масса, кг Высота в холке Глубина груди Длина туловища Обхват груди Обхват пясти

I 760±0,0 136,3±1,19 76,7*0,54 177,3±6,71 216,3*8,97 22,7+0,27

II 780±37,7 146,3±3,57 84,7±0,98 173,7±3,21 207,7*6,69 23,0*0,47

III 740*6,2 140,3±0,72 64,0±0,47 162,3*1,19 197,0±0,82 21,0*0,47

IV 743±9,7 141,0±0,47 63,3*0,72 162,3*0,72 198,7*0,72 21,0*0,47

Все эти животные записаны в государственную книгу племенных животных (том 74, 95) и имели комплексный класс элита-рекорд.

Продуктивность материнских предков у быков всех изучаемых групп, составляла от 5526 кг до 9176 кг молока за 305 дней лактации с содержанием жира 3,97-4,61%. Всё это подтверждает племенную ценность быков-производителей.

3.2. Качество криоконсервированной спермы

Качество спермы - основной показатель воспроизводительной способности племенных производителей. На качественные показатели спермопродукции влияют многие факторы, в том числе и время хранения в жидком азоте.

3 2 1 Органолептические и физические свойства замороженно-оттаянной спермы

Оценка органолептических свойств показала, что вся оттаянная сперма соответствовала ГОСТу 26030-83 «Сперма быков замороженная, технические условия». Она имела лёгкий специфический запах, который тождествен запаху жиропота. Внешний вид всех размороженных гранул имел однородную жидкую консистенцию белого, жёлтого или светло-жёлтого цвета (табл. 2).

Таблица 2. Цвет замороженно-оттаянной спермы быков-производителей

Группа Цвет оттаянной спермы

I Жёлтая непрозрачная

II Светло-жёлтая с зелёным оттенком, прозрачная

III Молочно-белая с жёлтым оттенком, непрозрачная

IV Молочно-белая, непрозрачная

На различные оттенки влияет содержание меланина и каротина в одном из компонентов разбавителя - курином желтке.

Концентрация спермиев в криоконсервированных дозах находилась от 39,4 до 52,5 млн шт. Наибольшее количество гамет было в гранулах, хранившихся 18 лет (52,5 млн шт.), что превосходит аналогичный показатель в сперме, хранившейся 4 года, 8 и 16 лет на 9,5; 13,1 и 12,2 млн шт. соответственно. Различия между последними и вышеназванной группой статистически достоверны (р < 0,001). Причиной этому может служить погрешность в кормлении и в режиме содержания производителей. Вместе с тем полученные результаты во всех четырёх периодах находятся в пределах допустимых норм.

3.2.2. Морфобиологические свойства криоконсервированной спермы

При оценке морфологических свойств в образцах биопродукции были обнаружены спермин, имеющие аномальное строение: карликовые, с неправильной формой головки (круглая, микроскопическая, укороченная, без тела и хвоста), без головки, с изогнутым и петлеобразным телом, без кончиков на хвосте, а также с двумя хвостами.

Установлено, что содержание гамет с патологическими формами было меньше всего в образцах, хранившихся 16 лет - 10,4%, и больше всего в сперме, хранившейся 4 года - 17,4% (р < 0,01) (рис. 2).

Причиной образования уродливых форм служит нарушение режима кормления, содержания производителей и процесс криоконсер-вации.

По количеству патологических гамет все образцы соответствовали требованию ГОСТ 26030-83 «Сперма быков замороженная, технические условия».

4 8 16 18

Сроки хранения в жидком азоте, лет

Ш Количество

патологических спермиев Ш Количество мёртвых спермиев

Рис. 2. Количество патологических и мёртвых спермиев в криоконсервированной сперме

Наибольшее количество мёртвых спермиев содержалось в глубо-козамороженной сперме 8 (68,2%) и 16 (62,6%) лет хранения. В сперме наиболее длительного срока хранения (18 лет) их только 40,1%. Различия между последней и вышеназванными группами быков статистически достоверны (р < 0,001). Это связано с тем, что в первую очередь погибают спермии, имеющие аномальное строение, при этом количество их в дозе уменьшается, что мы и наблюдаем в сперме, хранившейся 8 и 16 лет. Наши данные полностью совпадают с приведёнными в различных литературных источниках (40-70%).

В результате измерения гамет было установлено, что размер за-мороженно-оттаянных спермиев быков чёрно-псстрой породы находится в пределах 52-58 мкм, что несколько меньше, чем в нативной сперме (рис. 3). Это связано с тем, что при замораживании клеток наблюдается их дегидратация и уменьшение в объёме. На объём спермиев также влияет и концентрация глицерина в среде. В.К. Милованов (1962) считает, что причиной уменьшения размеров спермиев служит отламывание хвостика у спермиев при микроманипуляциях в процессе охлаждения и замораживания.

Размер половых клеток в дозе, хранившейся 18 лет, на 6 мкм (10%, р < 0,01) больше, чем спермиев, которые хранились 4 года.

Причиной этого служит ухудшение условий кормления в последние годы, что повлияло на размер спермиев и их химический состав.

60,0 -.51,5 50,0

Ш Общая длина спермиев, мкм

I Длина головки спермиев, мкм

4 8 16 18 Сроки хранения в жидком азоте, лет

Рис. 3. Размер спермиев в замороженно-оттаянной сперме

Длина головки криоконсервированных спермиев находится в пределах 7,0-7,6 мкм, что согласуется с данными других авторов (Паршу-тин Г.В., 1959; Викторов K.P., 1960; Милованов В.К., 1962; Шипи-лов B.C., 1986).

При оценке биологических свойств криоконсервированной спермы разных сроков хранения были обнаружены неподвижные спермии, спермии с прямолинейно-поступательным, манежным и колебательным движением.

Установлено, что наибольшую активность имела сперма, хранившаяся 8 лет (4 балла), чуть меньше - 4 года (3,8 балла) и меньше всех - сперма, хранившаяся в течение 16 и 18 лет в жидком азоте (3,5 балла) (табл. 3). Различия между I, И, IV и III группами статистически достоверны (р < 0,01). По-видимому, сроки хранения и размер спермиев оказали влияние на их активность. Лучшую же абсолютную выживаемость при +5°С и время выживаемости при той же температуре имели спермии, хранившиеся 18 лет - 158,8 и 96 часов соответственно.

Таблица 3. Активность и выживаемость спермиев ( X ± гп )

Группа Срок хране ния, лет Активность спермиев, баллов Выживаемость спермиев, баллов Абсолютная выживаемость Время выживаемости, часов

I 18 3,5±0,12 0,8±0,06 158,8±11,42 96,0±4,38

II 16 3,5±0,12 0,5±0,06 140,8*6,13 91,2±4,64

III 8 4,0±0,0 0,6±0,06 145,8±9,87 91,2+4,64

IV 4 3,8±0,09 0,8±0,06 141,0±7,87 84,0±4,38

Образцы, хранившиеся 18 лет, имели больший размер спермиев (57,5 мкм) и, соответственно, больший запас питательных веществ, необходимых для их жизнедеятельности, а также меньшую активность, при которой расход питательных веществ в гаметах снижен. Всё это сказалось на повышенной абсолютной выживаемости в сравнении со спермиями меньшего размера, имевшими большую активность.

Выживаемость спермиев в течение пяти часов при температуре +38°С была большей в сперме, хранившейся в жидком азоте 4 года и 18 лет - 0,8 баллов. На 37 и 25% меньше был получен результат по этому показателю во II и III группах соответственно (р < 0,01).

Причиной пониженной выживаемости при +38°С в течение пяти часов во II и III группах послужило повышенное количество мёртвых спермиев (68,2 и 62,6%) в этих партиях. Однако все полученные результаты были в пределах нормы и соответствовали ГОСТ 26030 «Сперма быков замороженная, технические условия» и ГОСТ 27777-88 «Сперма быков замороженная. Методы биологических исследований».

Наибольшее количество спермиев с прямолинейным поступательным движением содержится в образцах, хранившихся 18 лет в жидком азоте - 18,4 млн штук, что на 13% (р < 0,05), 15% (р < 0,01) и на 22% (р < 0,01) больше, чем в сперме, хранившейся 4, 8 и 16 лет соответственно (табл. 4). Мы связываем это с объёмом спермиев в биопродукции, хранившейся 18 лет (52,5 млн штук) и с количеством мёртвых спермиев (40,1%).

Таблица 4. Биологические показатели криоконсервированной спермы

(Х±ш)

Группа Срок хранения, лет Колич. спермиев с прямол.-поступ. движением, млн Коэффициент осмотической резистентности, Як Дегидрогеназная активность, часов

I 18 18,4±0,76 0,27±0,007 1,04±0,025

II 16 14,3±0,61 0,25±0,009 1,23±0,067

III 8 15,6±0,28 0,26±0,009 3,87±0,211

IV 4 16,0*0,41 0,35±0,011 0,95±0,041

По данным наших исследований, коэффициент осмотической резистентности больше у спермы, хранившейся 4 года - 0,35, что на^26% (р < 0,001), 29% (р < 0,001) и на 23% (р < 0,001) больше, чем у спермы, хранившейся 8, 16 и 18 лет соответственно. Причина этого явления -старение липопротеидного покрова у спермиев, который в результате хранения становится менее устойчивым к раствору хлористого натрия.

В результате исследований было установлено, что спермии, хранившиеся 4 года в жидком азоте, обладают большей интенсивностью дыхания (обесцвечивание метиленовой сини проходило за 0,95 часа) и меньшим временем выживаемости (84,0 часа). Это связано с тем, что при более интенсивном дыхании в сперме быстро накапливаются токсины, полученные в результате жизнедеятельности спермиев, которые губительно действуют на них. В сперме 16-летнего срока хранения дегидрогеназная активность увеличилась на 0,18 часа по сравнению со спермой 4-летнего срока хранения, а в сперме 18-летнего срока эта разница составляла 0,09 часа. Наиболее высокая активность дегидро-геназы была в образцах, хранившихся 8 лет в жидком азоте (3,87 часа). Различия между всеми группами, кроме 1 и IV, статистически достоверны (р < 0,001).

Такая длительная активность дегидрогеназы связана с наименьшей концентрацией и наибольшим количеством мёртвых спермиев, а также старением в результате хранения липопротеидной оболочки, через которую протекают все биохимические процессы.

3 2 3 Микробиологические и биохимические свойства замороженно-оттаянной спермы

При микробиологических исследованиях спермы во всех изучаемых группах роста бактерий не обнаружено. Реакция на коли-титр была отрицательной.

Кетоновых тел в криоконсервированной сперме различных сроков хранения содержалось до 0,0019%, что находится в пределах требований ГОСТ 20909.6-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы биохимических исследований».

3.3. Коррелятивная связь между некоторыми качественными показателями криоконсервированной спермы

Корреляция между основными показателями замороженно-оттаянной спермы представлена в таблице 5.

Таблица 5. Корреляционная связь между качественными показателями замороженно-оттаянных спермиев (г ± ш)

Корреляционные признаки Срок хранения криоконсервированной спермы, лет

18 16 8 4

Концентрация - Кппд 0,53X0,235 0,61±0,220 0,93*0,100 0,25*0,269

Яо - количество патологических спермиев -0,13*0,275 -0,36*0,256 -0,19*0,272 -0,13*0,275

Активность - Яо 0,13*0.275 0,25*0,269 0 -0,62*0,218

Активность - количество мёртвых спермиев 0,0 7*0 Д 77 -0,17*0,273 0 -0,32*0,263

Концентрация - количество мёртвых спермиев -0,02±0,277 -0,15*0,274 -0,54+0,233 0,21*0,271

Кшщ - Яо 0,16*0,274 0,11*0,276 0,17*0,273 -0,61*0,221

Яо - количество мёртвых спермиев -0,57±0,227 -0,25*0,269 0,11*0,276 0,21*0,271

Кппд — количество спермиев с прямолинейным поступательным движением; Яо - коэффициент резистентности.

Коэффициент корреляции между концентрацией и количеством спермиев с прямолинейным поступательным движением в сперме, хранившейся 8 лет, превосходит таковой в сперме, хранившейся 4 года, на 0,68 (р < 0,05). Следовательно, в результате длительного хранения в жидком азоте количество спермиев с прямолинейным поступательным движением в большей степени зависит от концентрации гамет в дозе.

Корреляция между активностью и коэффициентом резистентности в сперме, хранившейся 4 года, была отрицательной (-0,62), в то время как корреляция между этими признаками в сперме, хранившейся 16 и 18 лет, имела слабую прямую связь (0,25 и 0,13). Различия статистически достоверны (р < 0,05).

Аналогичная тенденция прослеживается в зависимости количества спермиев с прямолинейным поступательным движением и коэффициента резистентности в сперме, хранившейся 4 года. Она была отрицательная, средней величины (-0,61), а корреляция этих же признаков в сперме, хранившейся 8, 16 и 18 лет, была слабоположительной (0,17; 0,11 и 0,16 соответственно). Различия между последними и вышеназванной группой статистически достоверны (р < 0,05) Это объясняется ухудшением коэффициента резистентности и его усиливающимся влиянием в процессе хранения на количество спермиев с прямолинейным поступательным движением.

Таким образом, длительные сроки хранения биопродукции (16-18 лет) не оказали существенного негативного влияния на корреляционные связи между количественными и качественными показателями глубокозамороженной спермы.

3.4. Влияние биохимических показателей сыворотки крови быков-производителей на качество их криоконсервированной биопродукции

Анализ биохимических показателей сыворотки крови быков-производителей показал, что в 1998 г. содержание резервной щёлочности, сахара и кальция в сыворотке крови быков резко снижено на 13 об.%, 165 г/л, 0,5 ммоль/л соответственно по сравнению с 1984 г. (р< 0,01) (табл. 6).

Таблица 6. Биохимические показатели сыворотки крови быков-производителей

Результаты анализов крови, год

Показатель Нормативы 1984 1986 1994 1998

группа [1 группа III группа IV группа

N Х±ш N Х±ш N X ±ш N Х±т

Об. белок, г/л 75-95 23 78,7± 1,04 35 80,9±0,51 9 82,5±1,33 13 84,0±0,83

Сахар, г/л 450-600 23 491 ±4,1 35 507±4,5 9 473±4,8 13 326±13,8

Фосфор, ммоль/л 1,6-2,2 23 2,2±0,03 35 2,3±0,02 9 2,3±0,04 13 1,8±0,02

Кальций, ммоль/л 2,4-3,4 23 2,6±0,01 35 2,4±0,01 9 2,3±0,03 13 2,1±0,02

Магний, ммоль/л 1,0-1,6 23 1,1 ±0,02 35 1,2±0,02 9 1,1±0,04 13 1,1 ±0,03

Рез. щёлоч., об.% 46.0-66,0 23 40,3±0,96 35 36,6±0,71 9 44,5±2,71 13 27,3±2,30

Кет. тела, г/л отр. 23 отр. 35 отр. 9 отр. 13 отр.

Каротин, мг% 0,4-2,3 23 0,4±0,02 35 0,5±0,02 9 0,1 ±0,01 13 0,3±0,02

Вит. Е, мкмоль/л 9,3-46,4 23 5,3±0,35 35 7,2±0,44 9 4,9±0,72 13 7,7±0,58

Причиной этого послужило значительное ухудшение в качестве кормления животных в эти годы.

Кальций, фосфор входят в состав спермы, и снижение их соотношения (по системе СИ) в сыворотке крови у быков ниже 1,2 приводит к ацидозу и в конечном итоге некроспермии. В нашем опыте соотношение кальция к фосфору ниже нормы отмечено во II и III группах. Именно в сперме этих быков обнаружено повышенное количество мёртвых спермиев, и снижена выживаемость гамет при +38°С в замо-роженно-оттаянной биопродукции.

3.5. Оплодотворяющая способность глубокозамороженной спермы разного срока хранения

Главным показателем, характеризующим качество криоконсерви-рованной спермы, является её оплодотворяющая способность (табл. 7).

Таблица 7. Оплодотворяющая способность криоконсервированной спермы

Срок хранения спермы, лет Группа Оплодотворяемость тёлок от первого осеменения

п %

18 I 18 88,9

16 II 19 84,2

8 III 15 86,7

4 IV 16 87,5

Оплодотворяющая способность спермы разного срока хранения варьировала от 84,2 до 88,9%. Полученные результаты выше требования ГОСТа 23745-79 «Сперма быков неразбавленная свежеполучен-ная. Технические требования и методы испытаний».

Мертворожденных телят и животных с какими-либо физиологическими отклонениями не было.

Следовательно, хранение спермы в жидком азоте до 18 лет не оказало негативного влияния на её оплодотворяющую способность.

3.6. Экономическая эффективность использования биопродукции, хранившейся в жидком азоте на ОАО «Барнаульское»

Результат исследования показывает, что сроки хранения биопродукции в жидком азоте от 4 до 18 лет не оказали отрицательного влияния на её оплодотворяющую способность. Однако прибыль от реализации одной спермодозы, хранившейся 18, 16 и 8 лет, оказалась, соответственно, на 1,34; 1,15 и 0,39 рублей меньше по сравнению со спермой, находящейся в жидком азоте в течение 4 лет (табл. 8). Все стоимосные показатели представлены в сопоставимых ценах к 2005 г.

Таблица 8. Экономическая эффективность использования глубокозамороженной биопродукции

Показатель Группа

I II III IV

Стоимость реализации одной спермодозы, руб. 20,54 20,54 20,54 20,54

Себестоимость 1 гранулы, руб. в т.ч.: затраты банка на хранение, руб. 11,24 11,05 10,29 9,90

1,72 1,53 0,77 0,38

Прибыль от реализации 1 спермодозы, руб. 9,30 9,49 10,25 10,64

Уровень рентабельности, % 82,7 85,9 99,6 107,5

Увеличение себестоимости в основном связано с затратами на расход жидкого азота в результате его испарения.

Учитывая снижение экономической эффективности работы плем-предприятия при увеличении времени хранения биопродукции, вопрос об объёмах сохраняемой криоконсервированной спермы должен решаться индивидуально по каждой партии с учётом генетической ценности производителя и на основе перспективных планов племенной работы с породой.

Таким образом, прибыль от реализации глубокозамороженной спермы зависит от продолжительности её хранения. Уровень рентабельности 4-летнего срока хранения на 7,9; 21,6 и 24,8% выше, чем у биопродукции 8, 16 и 18-летнего срока хранения.

ВЫВОДЫ

1. В результате исследований было установлено, что быки, работающие на племпредприятии «Барнаульское» 18 и 16 лет назад, имели наибольшую живую массу (760-780 кг), глубину груди (76,7-84,7 см), длину туловища (173,7-177,3 см), обхват груди (207,7-216,3 см) и обхват пясти (22,7-23 см).

2. Длительные сроки хранения до 18 лет в жидком азоте не оказали негативного влияния на органолептические, биохимические, микробиологические и морфологические свойства криоконсервиро-ванной спермы. Количество патологических спермиев в замороженно-оттаянной сперме составляет 10-17%, а количество мёртвых - 40-68%. Все показатели находились в пределах ГОСТа 20909.6-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы биохимических исследований» и ГОСТа 26030-83 «Сперма быков замороженная. Технические условия».

3. Наибольшую активность имели гаметы, хранившиеся 8 лет в жидком азоте (4 балла), что на 12,5% выше, чем спермин, которые находились в состоянии криоконсервации в течение 16 и 18 лет (3,5 балла).

4. Лучшую абсолютную выживаемость и время выживаемости имели спермии, находящиеся в жидком азоте 18 лет - 159 и 96 часов соответственно. Образцы этого же периода хранения имели наибольшее количество половых клеток с прямолинейным поступательным движением (18,4 млн штук), что на 13, 15 и на 22% больше, чем в сперме, хранившейся 4, 8 и 16 лет соответственно.

5. Концентрация спермиев в дозе, количество патологических и мёртвых гамет, размер спермиев и их выживаемость в большей степени зависят от качества кормеления, чем от сроков её хранения.

6. Хранение глубокозамороженной спермы в жидком азоте до 18 лет оказывает незначительное влияние на коэффициент осмотической резистентности спермиев и на их дегидрогеназную активность. Коэффициент осмотической резистентности снизился с 0,35 в сперме, хранившейся 4 года, до 0,25 в сперме 16-летнего срока хранения и до 0,27 в сперме 18-летнего стока хранения. Дегидрогеназная активность увеличилась с 0,95 часа в сперме 4-летнего срока хранения до 1,04 часа в сперме, хранившейся 18 лет в жидком азоте.

7. При длительном хранении спермы в жидком азоте увеличивается коэффициент корреляции между концентрацией и количеством

спермиев с прямолинейным поступательным движением с +0,25 в образцах 4-летнего срока хранения до +0,93; +0,61; +0,53 в биопродукции, хранившейся 8, 3 6 и 18 лет соответственно. Коэффициент корреляции между активностью половых клеток и их коэффициентом резистентности увеличился с -0,62 до 0,13 в процессе 18-летнего срока хранения.

8. Оценка оплодотворяющей способности спермы не установила достоверных различий в степени оплодотворяемости от первого осеменения (84,2-88,9%) тёлок, что отвечает требованию ГОСТ 23745-79 «Сперма быков неразбавленная свежеполученная. Технические требования и методы испытаний».

9. Прибыль от реализации глубокозамороженной спермы зависит от продолжительности её хранения. Уровень рентабельности 4-летнего срока хранения на 7,9; 21,6 и 24,8% выше, чем у биопродукции 8, 16 и 18-летнего срока хранения.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Для искусственного осеменения коров и тёлок использовать глубокозаморожениую сперму высокоценных быков-производителей, хранившуюся в жидком азоте до 18 лет, без ограничений в регионах реализации программы «Совершенствование существующих и выведение новых высокопродуктивных типов, линий, стад чёрно-пёстрого скота, пригодных к разведению в зонах Сибири».

2. Объёмы и длительность хранения криоконсервированной спермы должны решаться индивидуально по каждой партии биопродукции с учётом генетической ценности производителей и на основе перспективных планов племенной работы с породой.

3. При замораживании спермы, предназначенной для длительного хранения в жидком азоте, ввести дополнительный контроль за коэффициентом осмотической резистентности спермиев.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Коростелёва Н.И. Морфологические показатели глубокозамороженной спермы разного срока хранения быков чёрно-пёстрой породы / Н.И. Коростелёва, В.А. Плешаков // Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве: юбил. Междунар. науч.-практ. конф. - Барнаул, 2003. - С. 152-156.

2. Коростелёва Н.И. Биологические показатели глубокозаморо-женной спермы разного срока хранения быков чёрно-пёстрой породы / Н.И. Коростелёва, В.А. Плешаков // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - Барнаул, 2003. - № 2. - С. 238-241.

3. Плешаков В.А. Коррелятивные связи некоторых качественных показателей спермы быков-производителей разного срока хранения в жидком азоте // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - Барнаул, 2004 - № 3. - С. 316-319.

4. Плешаков В.А. Оплодотворяющая способность спсрмиев, хранившихся длительное время в жидком азоте // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - Барнаул, 2004. - № 3. -С.319-321.

_JIP № 020648 от 16 декабря 1997 г._

Подписано в печать 24.01.2006 г. Формат 60x84/16. Бумага для множительных аппаратов. Печать ризографная. Гарнитура «Times New Roman». Усл. печ. л. 1. Тираж 100 экз. Заказ № 4 .

Издательство АГАУ 656049, г. Барнаул, пр. Красноармейский, 98 62-84-26

¿M£¿± л^о

2 5 9 ö

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Плешаков, Владимир Александрович

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Цитологические основы сперматогенеза

1.2. Характеристика спермы

1.2.1. Составляющие спермы и её химический состав

1.2.2. Строение спермиев

1.2.3. Энергетика спермиев

1.2.4. Агглютинация и антигены спермиев

1.2.5. Влияние осмотического давления, микробной и грибковой загрязнённости на качество спермиев

1.3. Криоконсервация спермы быков

1.3.1. Физико-химические основы замораживания и оттаивания биологических объектов

1.3.2. Морфологические и биохимические изменения в сперме при её охлаждении и оттаивании

1.4. Качество спермы и её оплодотворяющая способность

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 50 Ф 3.1. История образования ОАО Племпредприятия

Барнаульское»

3.2. Характеристика быков-производителей, сперма которых была комплексно исследована 52 3.2.1. Получение криоконсервированной спермы на

ОАО Племпредприятии «Барнаульское»

3.3. Качество криоконсервированной спермы 64 3.3.1. Органолептические и физические свойства замороженно-оттаянной спермы

3.3.2. Морфологические и биологические свойства криоконсервированной спермы

3.3.3. Микробиологические и биохимические свойства замороженно-оттаянной спермы

3.4. Влияние биохимического состава сыворотки крови быков-производителей на качество их криоконсервированной биопродукции

3.5. Коррелятивная зависимость между некоторыми качественными показателями криоконсервированной спермы

3.6. Оплодотворяющая способность спермы разного срока хранения

3.7. Экономическая эффективность использования биопродукции, хранившейся в жидком азоте на ОАО «Барнаульское»

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

ВЫВОДЫ

ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Влияние сроков хранения криоконсервированной спермы быков-производителей на её качество"

Биологическая наука в XX веке внесла в технологию животноводства высокоэффективный метод искусственного осеменения животных. Этот метод открыл широкую возможность для ведения планомерной и эффективной системы племенной работы в животноводстве и получения практически неограниченного числа потомков от выдающихся племенных производителей (Милованов В. К., 1962).

Трудно переоценить значение для практики сельского хозяйства и расширения селекционно-племенной работы метода криоконсервации спермы быков, открытого В. Миловановым и И. Смирновым более 40 лет назад (Соколовская И. И., 2003). Благодаря этому открытию селекционеры располагают сейчас богатейшим генетическим материалом: накоплены сотни миллионов доз спермы от высокоценных быков.

Развитие животноводства невозможно без хорошо организованного селекционного процесса. Одним из основных методов селекции животных является повышение воспроизводительных качеств животных с сохранением генетического материала на уровне клетки длительное время.

За последние годы достигнуты значительные успехи в разработке методов криоконсервации спермы не только быков (Vomer I., 1983; Stolla R., 1985; Делеу В. Г., 1985; Devis А. Р., 1987 и др.), но и хряков (Курбатов А.Д., 1983; Aalbers I. G., 1985; Зверева А. П., 1986; Корбан Н. В., 1987 и др.), баранов (Ашимов Ж., 1984; Sramek С., 1985; Наук В. А., Борончук Г. В., 1985; Цекова Е., 1986 и др.), жеребцов (Платов Е. М., Фомина Е. Л., 1973; Kosiniak К., 1987 и др.) и сельскохозяйственной птицы (Царенко Р. Г., 1979; Tai J. J. L., 1983; Булига A. E., 1984; Каркач П. M., 1984; Schramm G. P., 1986; Wishart G. J., 1986; Maeda Т., 1986; Stove - Schimmelpfennig K., 1987; Андреев В. И., 1987; Нарубина JI. Е., 1988; Мацкова Л. И., 1990 и др.). Длительное хранение спермы приобретает всё большее значение в связи с тем, что большое число пород и линий животных находится под угрозой исчезновения. Создание банка генов ценных исчезающих пород свиней, овец, лошадей, птицы является составной частью мероприятий по охране природных богатств нашей планеты (Курбатов А. Д., 1988).

Дальнейшее развитие и совершенствование методов длительного хранения замороженной спермы животных невозможно без глубокого познания теоретических вопросов криобиологии. К основным криогенным повреждениям спермиев относят: разобщение дыхания и окислительного фосфорили-рования спермиев, разрушение их липопротеидной мембраны, нарушение липоидного обмена с образованием мембранного яда - лизолецитина, разрушение акросомы, распад или связывание простагландинов. Однако эти криогенные повреждения нельзя считать первопричиной снижения подвижности и оплодотворяющей способности оттаянной спермы. В цепи взаимосвязанных явлений, происходящих при замораживании, эти повреждения являются следствием физико-химических изменений, которые имеют место при замерзании спермы (Платов Е. М., 1978).

Согласно литературным данным, существуют различные мнения о сроках и качестве биопродукции, хранившейся длительное время в жидком азоте (Ющенко Н. П., 1963, 1976; Столповский Ю., 1999 и др.). По данным А. Н. Варнавского (1989), сперма сельскохозяйственных животных в замороженном состоянии может храниться 25 лет и более. Однако после оттаивания замороженной спермы быка, в ней сохранялось только 21—30 % акро-сом, которые являются носителями ферментов (гиалуронидазы, акрозина, андрогормонов и др.), необходимых для первого взаимодействия спермиев с яйцеклеткой и проникновения сквозь прозрачную оболочку.

Актуальность темы. В Алтайском крае, в результате голштинизации, постепенно вытесняется генофонд местной популяции чёрно-пёстрой породы и теряется её наследственность, обуславливающая приспособительные качества этого скота к природно-климатическим условиям региона (Коро-стелёва Н. И., Кладова JI. А., Трушников В. А., 2003). В конечном итоге возникает необходимость использования для возвратного скрещивания сперму сперму быков чёрно-пёстрой породы со сроками хранения до 20 лет. Крио-консервированная сперма - это органическое вещество, обладающее свойством распада, разложения, и время в этом процессе играет не последнюю роль. В регионе имеется значительный запас криоконсервированной спермы от животных, представляющих племенную ценность. Качество биопродукции различного срока хранения в Алтайском крае до сих пор не было изучено. Поэтому вопросы длительного хранения спермы производителей в жидком азоте актуальны и представляют большой научный и практический интерес.

Цель исследований. Дать комплексную оценку качества криоконсервированной спермы крупного рогатого скота чёрно-пёстрой породы, хранившейся длительное время в жидком азоте.

В соответствии с этим нами были поставлены следующие задачи:

1. Провести зоотехническую оценку быков-производителей, биопродукция которых была комплексно исследована.

2. Изучить органолептические, физические, биологические и морфологические свойства криоконсервированной спермы.

3. Провести микробиологические и биохимические исследования глубо-козамороженной спермы.

4. Изучить коррелятивные связи между некоторыми количественными и качественными показателями криоконсервированной спермы в зависимости от сроков хранения в жидком азоте.

5. Изучить влияние биохимического состава сыворотки крови быков-производителей на качество их криоконсервированной спермы.

6. Оценить оплодотворяющую способность спермы разного срока хранения.

7. Рассчитать экономическую эффективность от использования биопродукции, хранившейся в жидком азоте на ОАО «Барнаульское», при искусственном осеменении тёлок.

Научная новизна. Впервые в Алтайском крае была проведена комплексная оценка криоконсервированной спермы крупного рогатого скота чёрно-пёстрой породы в зависимости от сроков хранения в жидком азоте, где исследованы и охарактеризованы органолептические, морфологические, биологические, биохимические и микробиологические свойства спермиев. Выявлена коррелятивная взаимосвязь между некоторыми количественными и качественными показателями глубокозамороженных гамет. Всё это позволит определить качество криоконсервированной спермы и использовать высококачественную биопродукцию в программе «Совершенствование существующих и выведение новых высокопродуктивных типов, линий, стад чёрно-пёстрого, красного и палево-пёстрого скота, пригодных к разведению в зонах Сибири», а также повысить процент оплодотворяемости животных и эффективность племенной работы.

Установлено влияние биохимического состава сыворотки крови быков на качество их глубокозамороженной биопродукции.

Практическая значимость. Проведённый анализ глубокозамороженной спермы позволяет использовать её без ограничения в Алтайском крае для искусственного осеменения коров и тёлок в процессе селекционной работы по совершенствованию алтайской популяции чёрно-пёстрой породы скота.

В результате исследования была выявлена коррелятивная взаимосвязь между количественными и качественными показателями глубокозамороженной спермы. Её использование в практической селекции позволит оперативно оценить состояние биопродукции и эффективно использовать её в воспроизводстве крупного рогатого скота. Данные о влиянии биохимического состава сыворотки крови быков-производителей ОАО «Барнаульское» на качество криоконсервированной спермы, позволят делать оперативную корректировку их рационов.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на: научно-практических конференциях по итогам научно - исследовательской работы зооинженерного факультета АГАУ (2003, 2004, 2005 гг.); юбилейной международной научно-практической конференции «Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве» (Барнау, 2003 г.); II научно-теоретической и практической конференции, посвящённой 60-летнему юбилею АГАУ (Барнаул, 2003 г.); VII региональной научно-теоретической и практической конференции посвящённой 50-летию целинных и залежных земель (Барнаул, 2004 г.).

Публикация результатов исследований. Материалы диссертационной работы опубликованы в 4 научных статьях.

Реализация результатов исследований. Результаты исследований включены в план селекционно-племенной работы Департамента племенного животноводства администрации Алтайского края по корректировке процесса голштинизации местной популяции чёрно-пёстрой породы. Полученные данные применяются для контроля качества криоконсервированных гамет во время замораживания нативной спермы. Материалы экспериментов используются в учебном процессе на зооинженерном факультете Алтайского государственного аграрного университета при проведении занятий по курсу «Акушерство, гинекология и биотехнология животных» и «Разведение сельскохозяйственных животных».

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты исследований по органолептическим, физическим, морфобио-логическим, биохимическим свойствам криоконсервированной спермы;

- влияние времени хранения на коэффициент осмотической резистентности спермиев и их дегидрогеназную активность;

- оплодотворяющая способность спермы различного срока хранения в жидком азоте;

- взаимосвязь между некоторыми количественными и качественными показателями глубокозамороженной спермы разных сроков хранения.

Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 132 страницах, в том числе текстовая часть - 108 страниц и состоит из введения, об

Заключение Диссертация по теме "Частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства", Плешаков, Владимир Александрович

105 ВЫВОДЫ

На основании проведённых исследований по выявлению влияния сроков хранения в жидком азоте на качественные показатели оттаянной спермы можно сделать следующие выводы:

1. В результате исследований было установлено, что быки, работающие на племпредприятии «Барнаульское» 18 и 16 лет назад, имели наибольшую живую массу (760-780 кг), глубину груди (76,7-84,7 см), длину туловища (173,7-177,3 см), обхват груди (207,7-216,3 см) и обхват пясти (22,7-23 см).

2. Длительные сроки хранения до 18 лет в жидком азоте не оказали негативного влияния на органолептические, биохимические, микробиологические и морфологические свойства криоконсервированной спермы. Количество патологических спермиев в заморожено-оттаянной сперме составляет 10-17%, а количество мёртвых - 40-68%. Все показатели находились в пределах ГОСТа 20909.6-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы биохимических исследований» и ГОСТа 26030-83 «Сперма быков замороженная. Технические условия».

3. Наибольшую активность имели гаметы, хранившиеся 8 лет в жидком азоте (4 балла), что на 12,5% выше, чем спермии, которые находились в состоянии криоконсервации в течение 16 и 18 лет (3,5 балла).

4. Лучшую абсолютную выживаемость и время выживаемости имели спермии, находящиеся в жидком азоте 18 лет - 159 и 96 часов соответственно. Образцы этого же периода хранения имели наибольшее количество половых клеток с прямолинейным поступательным движением (18,4 млн. штук), что на 13%, 15% и на 22% больше, чем в сперме, хранившейся 4, 8 и 16 лет соответственно.

5. Концентрация спермиев в дозе, количество патологических и мёртвых гамет, размер спермиев и их выживаемость в большей степени зависят от качества кормеления, чем от сроков её хранения.

6. Хранение глубокозамороженной спермы в жидком азоте до 18 лет оказывает незначительное влияние на коэффициент осмотической резистентности спермиев и на их дегидрогеназную активность. Коэффициент осмотической резистентности снизился с 0,35 в сперме, хранившейся 4 года, до 0,25 в сперме, 16-летнего срока хранения и до 0,27 в сперме, 18-летнего стока хранения. Дегидрогеназная активность увеличилась с 0,95 часа в сперме, четырёхлетнего срока хранения, до 1,04 часа в сперме, хранившейся 18 лет в жидком азоте.

7. При длительном хранении спермы в жидком азоте увеличивается коэффициент корреляции между концентрацией и количеством спермиев с прямолинейным поступательным движением с +0,25, в образцах 4-летнего срока хранения, до +0,93, +0,61, +0,53 в биопродукции, хранившейся 8, 16 и 18 лет соответственно. Коэффициент корреляции между активностью половых клеток и их коэффициентом резистентности увеличился с -0,62 до 0,13 в процессе 18-летнего срока хранения.

8. Оценка оплодотворяющей способности спермы не установила достоверных различий в индексе осеменений (2,3-2,5) и в степени оплодотворяе-мости от первого осеменения (84,2-88,9%) тёлок, что отвечает требованию ГОСТ 23745-79 «Сперма быков неразбавленная свежеполученная. Технические требования и методы испытаний».

9. Прибыль от реализации глубокозамороженной спермы зависит от продолжительности её хранения. Уровень рентабельности 4-летнего срока хранения на 7,9%, 21,6% и 24,8%, выше соответственно, чем у биопродукции 8, 16 и 18-летнего срока хранения.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Для искусственного осеменения коров и тёлок использовать глубоко-замороженную сперму высокоценных быков-производителей, хранившуюся в жидком азоте до 18-ти лет, без ограничений в регионах реализации программы «Совершенствование существующих и выведение новых высокопродуктивных типов, линий, стад чёрно-пёстрого скота, пригодных к разведению в зонах Сибири».

2. Объёмы и длительность хранения криоконсервированной спермы должны решаться индивидуально по каждой партии биопродукции с учётом генетической ценности производителей и на основе перспективных планов племенной работы с породой.

3. При замораживании спермы, предназначенной для длительного хранения в жидком азоте, ввести дополнительный контроль за коэффициентом осмотической резистентности спермиев.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата сельскохозяйственных наук, Плешаков, Владимир Александрович, Барнаул

1. Ал-Ханак X. Криопротективни качества на някси съставки на раз-редители за семена течност от бик / X. Ал-Ханак, 3. Захариев, Д. Спа-сова, Г. Стойчев, П. Гецковски // Ветеринарно-медицинские науки. -1985.- Т. 22. № 8. - С. 66- 73.

2. Андреев В. И. Особенности криоконсервации спермы селезней // Науч.- техн. бюл. / Укр. НИИ птицеводства. 1987. - Т. 22. — С. 15 — 17.

3. Анисов А. А. Влияние половых рефлексов на качество спермы быков / А. А. Анисов, С. Н. Костив // Зоотехния. 1989. - № 8. - С. 64 -65.

4. Ашимов Ж. Криоконсервация и использование семени баранов австралийский полварс. / Ж. Ашимов, М. Г. Джумагалиева, С. М. Ча-нашпаева // Воспроизводство и выращивание молодняка в овцеводстве.-1984.-С. 125- 129.

5. Батанов С. Взаимосвязь состава крови помесных телят с интенсивностью роста // Молочное и мясное скотоводство. 2003. — № 8. — С. 35-37.

6. Бегма JI. А. Криоконсервация спермы быков с использованием мелкодисперсных пирогенных кремнеземов // Применение биотехнологий в животноводстве, растениеводстве и ветеринарной медицине: Тез. докл. Всесоюз. науч.- техн. конф. М., 1988. - С. 16-17.

7. Бугров А. Д. Критические зоны при оттаивании спермы быков и их влияние на выживаемость спермиев / А. Д. Бугров, Т. И. Олексеенко // Сельскохозяйственная биология. 1977. - Т. 13. - № 3. - С. 368 - 370.

8. Булига А. Е. Криоконсервация спермы при селекции птицы // Генетические основы селекции с.-х. растений и животных. / Филиал Молдавского НИИЖиВ по птицеводству. Дубоссары, 1984. - С. 146.

9. Варнавский А. Н. Новые среды для замораживания спермы баранов// Зоотехния. 1989. - № 9. - С. 46 - 49.

10. Васильева К. Н. Влияние фруктозы и окислительно-восстановительных ферментов на оплодотворяющую способность спермиев быка// Акушерство, гинекология, искусственное осеменениеи болезни молочной железы с.-х. животных: Сб. науч. тр. Д., 1976. -С. 291 -292.

11. Ветеринарное акушерство и гинекология / Под ред. В. С. Шипило-ва. 6-е изд., испр. и доп. - М.: Агропромиздат, 1986. - 480 с.

12. Викторов К. Р. Физиология сельскохозяйственных животных. М.: Высшая школа, 1960. -439с.

13. Вишняков С. И. Обмен макроэлементов у сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1967. - 254с.

14. Волосевич А. П. Применение биостимуляторов при искусственном осеменении / А. П. Волосевич, Р. А. Татузян // Новое в племенном деле и искусственном осеменении сельскохозяйственных животных: Материалы международного семинара. М., 1963. - С. 320 - 325.

15. Гавриков А. М. Эффективность режимов замораживания и оттаивания эмбрионов // Зоотехния. 1989. - № 7. - С. 54 - 55.

16. Гончаров В. П. Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных. М.: Колос, 2004. 322с.

17. ГОСТ 20909.1 75, ГОСТ 20909.2 - 75. Сперма быков неразбавленная. Методы отбора проб и микробиологических исследований. Введ. 01.07.76. до 01.07.91. - М.: Изд-во стандартов, 1989.- 14с.

18. ГОСТ 20909.3 75 - ГОСТ 20909.6 - 75. Сперма быков неразбавленная. Методы испытаний. Введ. 01.07.76. до 01.07.81. - М.: Изд-во стандартов, 1975. - 49с.

19. ГОСТ 26030 83. Сперма быков замороженная. Технические условия. Введ. 01.01.85. до 01.01.90. - М.: Изд-во стандартов, 1985. - 5с.

20. ГОСТ 27777 88. Сперма быков замороженная. Методы биологических исследований. Введ. 01.07.89. до 01.07.94. - М.: Изд-во стандартов, 1988. - 6с.

21. Демесинов Б. Технологические особенности хранения спремы быков производителей в условиях жаркого климата Туркмении // Акушерство, гинекология, искусственное осеменение и болезни молочной железы с.-х. животных: Сб. науч. тр. - JI., 1976. - С. 294 — 295.

22. Деряженцев В. И. Новая среда для замораживания спермы быка в соломинках при больших степенях разбавления // Биология воспроизводства и биотехнологические методы разведения с.-х. животных. -М., 1989.-С. 18-24.

23. Детлаф Т. А. Известия АН СССР // Т. А. Детлаф, Т. М. Турпаев.-Серия биологических наук. М., 1957. - № 5. - 572 с.

24. Жильцов Н. 3. Влияние кормления и содержания быков на их се-мяпродукцию / Н. 3. Жильцов, В. П. Белоножкин, В. Ф. Ковалёва, JI. С. Березова // Животноводство. 1977. - № 2. - С. 55 - 57.

25. Завертяев Б. П. Биотехнология в воспроизводстве молочного скота- современное состояние и перспективы развития // Воспроизводство с.-х. животных и криоконсервация гамет и эмбрионов: Рубрика ГРНТИ.-Л., 1986.-С. 5- 11.

26. Завертяев Б. П. Генетические методы оценки племенных качеств молочного скота. Л.: Агропромиздат, 1986. - 255 с.

27. Завертяев Б. П. Повышение многоплодия в скотоводстве. М.: Россельхозиздат, 1987. - 188 с.

28. Захариев 3. Активност на някои ензими в семенна течност от бик след дълбоко замразяване и инкубация при 39°С / 3. Захариев, М. Ио-това // Ветеринарно-медицинские науки. 1986. - Т. 23. - №10. - С. 65-68.

29. Захаров П. Г. Практические рекомендации по воспроизводству крупного рогатого скота / П. Г. Захаров, Е. П. Захарова, Н. И. Петрова, Р. С. Сираждинова. Санкт-Петербург: Петролазер, 2001. - 60с.

30. Заянчковский И. Ф. Практикум по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1975. - 270с.

31. Зверева А. П. Эффективность замораживания нативного эякулята хряка и его густой фракции // Науч.- техн. бюл. / НИИ животноводства Лесостепи и Полесья УССР. 1986. - Т. 45. - С. 31 - 33.

32. Зверева Г. В. Некоторые вопросы морфологии спермиев быка / Г. В. Зверева, Л. А. Черномаз // Новое в племенном деле и искусственном осеменении сельскохозяйственных животных: Материалы международного семинара. М., 1963. - С. 378 - 388.

33. Зверева Г. В. Ферментативная активность спермы и подвижность быков / Г. В. Зверева, Б. Н. Чухрий // VIII Междунар. конгресс по размножению и искусственному осеменению животных. Мюнхен, 1972.-С. 473.

34. Иванков М. Ф. Коррелятивные связи некоторых качественных показателей семени быков разного возраста ,/ М. Ф. Иванков, В. А. Буров// Животноводство. 1973. - № 8. - С. 82 ^ 84. .

35. Ильинская Т. П. О результатах замораживания семени быков в Белоруссии // Новое в племенном деле и искусственном осеменении сельскохозяйственных животных: Материалы международного семинара. М.,1963.-С. 389 - 397. 1 > ; •1

36. Ионов П. С. Лабораторные исследования в ветеринарной клинической диагностике / П. С. Ионов, В. Г. Мухин, А. И. Федотов, И. Г. Шарабрин: Лабораторные исследования в ветеринарной клинической диагностике. - М.: Гос. изд-во с.-х. лит-ры; 1953. - 252ci

37. Ионова А. В.* Биологические механизмы производственного брака в биотехнологии получения спермопродукции у быков-спермодоноров: Автореф. дис. .канд. с.-^х. наук 06.02:01. --Ульяновск, 2001. 16с.

38. Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных / Ф. В. Ожин, И. И. Родин, Г. В. Паршутин, и др. / Под ред. Г. В. Паршути-на.- 2-е изд., перераб. и доп. М.: Сельхозгиз, 1959. - 428с.

39. Каркач П. М. Влияние различных способов криоконсервации на оплодотворяющую способность спермы индюков // Науч.- техн. бюл.-Укр. НИИ птицеводства. Киев, 1984. - Т. 17. - С. 41 - 43.

40. Козло Н. Е. Воспризводство животных. М.: Колос, 1984. - 224с.

41. Козло Н.Е. Учебная книга техника по искусственному осеменению животных / Н. Е. Козло, А. Н. Варнавский, Р. И. Пихооя. Учебная книга техника по искусственному осеменению животных. - М.: Агро-промиздат, 1987. - 256с.

42. Кононов В. П. Достижения и перспективы замораживания семени в свиноводстве: Обзорн. информ. М., 1983. - 75 с.

43. Корбан Н. В. Выделение ДНК из спермы хряков / Н. В. Корбан, В. И. Шаробайко // Биохимические методы исследования спермы сельскохозяйственных животных: Методические рекомендации. Пушкин, 1973.-С. 36 - 40.

44. Корбан Н. Метод замораживания спермы хряка / Н. Корбан, JI. Мороз, И. Шапиев // Свиноводство. 1977. - №12. - С. 29.

45. Корбан Н. В. Методические рекомендации по низкотемпературной консервации спермы хряков / Н. В. Корбан, JI. Г. Мороз, И. Ш. Шапи-ев. Методические рекомендации по низкотемпературной консервации спермы хряков. - JI., 1980. - 61 с.

46. Корбан Н. В. О смешивании спермы хряков при криоконсервации / Н. В. Корбан, Г. П. Коваленко // Бюл. ВНИИ разведения и генетики с.-х. животных. Л., 1987. - Т. 94. - С. 3 - 4.

47. Коростелёва Н. И. Учебное пособие по биометрии для студентов и аспирантов зооинженерного и ветеринарного факультетов. Барнаул, 1992.- 104 с.

48. Костюлин Н. П. Племсельхозпредприятие «Барнаульское» / Н. П. Костюлин, Е. П. Рабинович, Н. М. Бондарчук. Барнаул, 1987. - 25 с.

49. Кузнецов М. П. К вопросу сохранения семени барана при температуре -79°С / М. П. Кузнецов, Л. П. Купрпиянова // Сб. науч. тр. / ВИЖ. 1959. - Вып. 23. - С. 171 - 191.

50. Кузнецов М. П. Опыты глубокого охлаждения и длительного хранения семени барана // Новое в племенном деле и искусственном осеменении сельскохозяйственных животных: Материалы международного семинара. М., 1963. - С. 227 - 235.

51. Курбатов А. Д. Влияние экзо- и эндоцеллюларных криопротекто-ров на сперму хряков / А. Д. Курбатов, JL Г. Мороз // Бюл. ВНИИ разведения и генетики с.-х. животных. 1983. - Т. 65. - С. 5 - 7.

52. Курбатов А. Д. Криоконсервация спермы сельскохозяйственных животных / А. Д. Курбатов, Е. М. Платов, Н. В. Корбан, JI. Г. Мороз, В. А. Наук. Л.: Агропромиздат, 1988. - 255 с.

53. Кушнер X. Ф. Наследственность сельскохозяйственных животных.-- М.: Колос, 1964. 485с.

54. Лозино Лозинский Л. К. Очерки по криобиологии. - Л.: Наука, 1972.-287с.

55. Малайшкайте Б. Оценка рационов быков-производителей / Б. Ма-лайшкайте, Ю. Радишаускас, М. Арлинскайте // Животноводство. — 1982.-№6.-С. 45-47.

56. Малышев А. А. Влияние кормления на качество семени быков — производителей // Наше племенное дело. 2003. - №3. - С. 18 - 19.

57. Мамзина Е. А. Энергетическое обеспечение оплодотворяющих свойств спермы петухов / Е. А. Мамзина Е. А., В. В. Комаров // Вопросы искусственного осеменения кур: Сб. науч. тр. / ВНИИРГЖ. -Л., 1970.-Вып. 16.-С. 76-84.

58. Мамзина Е. А. Исследование сперматогенеза у петухов методом радиоактивных индикаторов // Биохимические методы исследования спермы сельскохозяйственных животных: Методические рекомендации. -Пушкин, 1973 -С. 75-81.

59. Манасян А. О. Новые среды для разбавления спермы баранов // Зоотехния. 1989. - № 10. - С. 61 - 63.

60. Маринов П. И. Проучване на влиянието на различии протектори върху чувствителността на овчине сперматозоиди при криоконсервация / П. И. Маринов, Ч. Н. Грудова // Biol. Immunol, reprod. София, 1984.-Т. 9.-С. 26-31.

61. Маринов П. И. Исследование холестерола сперматозоидов барана при их криоконсервации / П. И. Маринов, Ч. Н. Грудова, Э. М. Мари-нова // Biol. Immunol, reprod. София, 1985. - Т. 11. - С. 64 - 69.

62. Мацкова JL И. Использование криоконсервированной спермы петухов при воспроизводстве кур мясного направления продуктивности: Автореф. дис. канд. с.-х. наук 06.02.01. JT.-Пушкин., 1990. - 16с.

63. Меркурьева Е. К. Биометрия в животноводстве. М.: Колос, 1964.-311с.

64. Меркурьева Е. К. Генетика с основами биометрии / Е. К. Меркурьева, Г. Н. Шангин Берёзовский. - Генетика с основами биометрии. -М.: Колос, 1983.-398 с.

65. Методы научных исследований в животноводстве / Под ред. Я. JI. Глембоцкий. М.: Колос, 1975. - 275с.

66. Милованов В.К. Биология воспроизводства и искусственное осеменение животных. М.: Сельхозиздат, 1962. - 696 с.

67. Милованов В. К. Свойство живчиков млекопитающих сохранить биологическую полноценность после быстрого замораживания / В. К. Милованов, И. И. Соколовская, И. В. Смирнов // Диплом на открытие № 103 от 28 ноября 1972 г. С. 28.

68. Милованов В. К. Среда для глубокого охлаждения семени / В. К. Милованов, В. А. Варнавская, И. П. Шайдулин // Животноводство. -1985.-№7.-С. 39-41.

69. Мисостова Н. В. Влияние степени разбавления семени на оплодотворяющую способность // Новое в племенном деле и искусственном осеменении сельскохозяйственных животных: Материалы международного семинара. М., 1963. - С. 335 - 337.

70. Морозов В. А. Применение для хранения семени баранов гипертонических сред // Новое в племенном деле и искусственном осеменении сельскохозяйственных животных: Материалы международного семинара. М., 1963. - С. 236 - 246.

71. Нарижный А. Влияние состава сред и степени чистоты компонентов на качество спермы // Свиноводство. 2003. - № 2. - С. 30 - 31.

72. Наук В. А. Адаптационно компенсаторные реакции гамет при криоконсервировании семени сельскохозяйственных животных // Адаптивные системы сельского хозяйства. - Кишинёв, 1983. - С. 77 -78.

73. Наук В. А. Криоконсервация семени быков-производителей техническая основа проведения селекционно-племенной работы в молочном скотоводстве / В. А. Наук, В. Г. Делеу // Достижения науки в животноводстве. - Кишинёв, 1984. - С. 35 - 44.

74. Наук В. А. Криоконсервация семени сельскохозяйственных животных техническая основа современной селекции // Генетические основы селекции с.-х. растений и животных. - Кишинёв, 1984. - С. 154 — 155.

75. Наук В. А. Структурные и функциональные изменения семени баранов при криоконсервации / В. А. Наук, Г. В. Борончук, Г. Е. Дарий и др. // Науч. основы адаптивной системы ведения животноводства: Тезисы докладов. Кишинёв, 1985. - С. 48 - 49.

76. Никуленко В. В. Использование интерференционной микроскопии для определения веса сухого вещества в сперматозоидах быков // Биохимические методы исследования спермы сельскохозяйственных животных: Методические рекомендации. Пушкин, 1973. - С. 64 - 67.

77. Осташко Ф. И. Глубокое замораживание и длительное хранение спермы производителей. Киев: Урожай, 1978. - 254с.

78. Пакенас П. И. Исследования сперматогенеза и усовершенствование технологии взятия и обработки семени: Автореф. дис. .д-ра биол. наук 06.02.01. Таллин, 1972. - 57с.

79. Панфилов В. П. Использование быков — производителей в Ленинградской области / В. П. Панфилов, А. Р. Рустенов, В. М. Столбов// Зоотехния. 1989. - № 9. - С. 43 - 45.

80. Платов Е. М. О предохранении спермиев от холодового удара // Молочное и мясное скотоводство. 1969. - №8. - С. 23 - 24.

81. Платов Е. М. Использование метода длительного хранения спермы жеребцов/ Е. М. Платов, Е. Л. Фомина, Н. К. Романькова и др.// Животноводство- 1973. № 7. - С. 85 - 87.

82. Платов Е. М. Замораживание семени барана в синтетической поли-сахаридной среде / Е. М. Платов, В. А. Малиновская // Животноводство. 1977.-№ 7. - С. 54-57.

83. Платов Е. М. Некоторые теоретические аспекты замораживания спермы // Животноводство. 1978. - №10. - С. 64 - 67.

84. Плохинский Н. А. Биометрия. М: Издательство московского университета, 1970. - 367 с.

85. Полянцев Н. И. Воспроизводство в промышленном животноводстве. М.: Росагропромиздат, 1990. - 240 с.

86. Полянцев Н. И. Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных. Ростов на Дону: Феникс, 2001. - 480 с.

87. Полянцев Н. И. Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных / Н. И. Полянцев, В. В. Подберезный. Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных. - М.: Колос, 2003. -354 с.

88. Попов Н. Ф. Обмен кальция и фосфора // Ветеринария. 1959. -№8. - С.67 - 72.

89. Практикум по эмбриологии / Под ред. В. А. Голиченкова и М. JL Семёновой. М.: АСАДЕМ1А, 2004. - 201 с.

90. Практические рекомендации по воспроизводству крупного рогатого скота / П. Г. Захаров, Е. П. Захарова, Н. И. Петров, Р. С. Сиражди-нов. С.-Пб.: Петролазер, 2001. - 60 с.

91. Прокопцев В. М. Технология искусственного осеменения свиней. — Л.: Колос, 1981.- 160с.

92. Римарова Л. Д. Криогенные изменения спермы быков родственных групп// Акушерство, гинекология, искусственное осеменение и болезни молочной железы с.-х. животных: Сб. науч. тр. Л., 1976. - С. 314— 315.

93. Римарова Л. Д. Фосфолипиды спермы быков родственных групп/ Л. Д. Римарова, В. Б. Дмитриев // Генетические и биохимические основы повышения воспроизводительной способности сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр. №27. - Л., 1979. - С. 13 — 15.

94. Родин И. И., Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных / И. И. Родин, Л. Н. Смирнов, Н. А. Флегматов. Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. - М.: Колос, 1973.-366 с.

95. Рослановский К. Методы хранения семени, применяемые в Польше// Новое в племенном деле и искусственном осеменении сельскохозяйственных животных: Материалы международного семинара.- М., 1963.-С. 162- 169.

96. Ростовцев К. Л. Воспроизводительная способность быков-производителей молочных пород в зоне Южного Урала: Автореф. дис.канд. с.-х. наук 06.02.01. Оренбург, 1998.-25с.

97. Сахно В. Ф. Методы хранения семени хряка // Новое в племенном деле и искусственном осеменении сельскохозяйственных животных: Материалы международного семинара. М., 1963. - С. 278 - 283.

98. Семаков В. Г. Содержание циклических нуклеотидов (ЦАМФ и ЦГМФ) в сперме быков и хряков при криоконсервации // Сельскохозяйственная биология. 1984. - №2. - С. 81 - 83.

99. Сергиенко А. И. Интенсификация воспроизводства крупного рогатого скота. М.: Колос, 1978. - 254 с.

100. Сирацкий И. 3. Возрастная изменчивость морфологических и биохимических показателей крови и спермы быков производителей// Доклады Российской академии с.-х. наук. - 1994. - № 3. - С. 37 - 38.

101. Смирнов И. В. Сохранение спермы с.-х. животных при температуре 78°С// Социалистическое животноводство. 1951. - №1. - С. 94 - 95.

102. Смирнов И. В. К теории глубокого охлаждения спермы // Животноводство. 1974. - №11. - С. 65 - 70.

103. Смит О. Биологическое действие замораживания и переохлаждения. М.; Д.: Изд-во иностр. лит-ры, 1963. - 503с.

104. Соколовская И. И. Метод искусственного осеменения животных// Зоотехния. 2003. - № 11.-С. 28-31.

105. Справочник по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных / Сост. Ф. В. Ожин. М.: Россельхозиздат, 1973. - 208с.

106. Справочник по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных / Ф. В. Ожин, Г. В. Паршутин, И. И. Родин и др. 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Россельхозиздат, 1983. - 270 с.

107. Старожилов П. М. Организация искусственного осеменения в Алтайском крае. М.: Изд-во с.-х. лит-ры журналов и плакатов, 1962. -94с.

108. Старожилов П. Опыт пунктов искусственного осеменения животных. Барнаул: Алтайское кн. изд-во, 1963. - 58с.

109. Степанов А. Т. Качество спермы и оплодотворяемость / А. Т. Степанов, А. А. Степанов // Зоотехния. 1982. - № 6. - С. 48 - 49.

110. Столповский Ю. Хорошее семя дорого стоит // Племенное дело. -1999.-№10.-С. 10-13.

111. Стоянов Т. Влияние на някои лекарствении средства, добавяни към средата за размразяване на семенна течност от бик, върху качествени-те и показатели / Т. Стоянов, Д. Загорски // Ветер, сб. 1990. - Т. 88. -№2.-С. 40-43.

112. Стоянов В. К. Ультрафиолетовое облучение быков-производителей / В. К. Стоянов, И. Н. Земляной // Зоотехния. 1991. -№4.-С. 53.

113. Студенцов А. П. Ветеринарное акушерство и гинекология. М.: Агропромиздат, 1961. -523 с.

114. Суллер И. J1. Правила работы с замороженным семенем КРС / И. J1. Суллер, Р. С. Сираждинов // Практик. 2002. - № 7 - 8. - С. 74 - 76.

115. Ткаченко Т. Е. Связь биохимических показателей крови с молочной продуктивностью коров // Зоотехния. 2003. - № 4. - С. 17 - 20.

116. Цекова Е. Влияние на криоконсервацията върху активността на ак-розомалните ензими на сперматозоиди от коч / Е. Цекова, X. Спасова, М. Ангелова, Г. Георгиев // Ветер. мед. науки. - 1986. - Т. 23. - №1. -С. 73-76.

117. Четвертакова Е. В. Репродуктивный потенциал и генотипические особенности репродуктивной системы быков-спермодоноров в Красноярском крае: Автореф. дис. .канд. с.-х. наук 06.02.01. Красноярск, 2004. - 16с.

118. Шарыгина JI. Влияние качества спермы на оплодотворяющую способность и продуктивность потомства // Молочное и мясное скотоводство. 2003. - № 2. - С. 33 - 34.

119. Шергин Н. П. Биохимия сперматозоидов сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1967. - 255с.

120. Шергин Н. П. Биохимия спермы сельскохозяйственных животных.-М., 1967.-239 с.

121. Шундулаев Р. Влияние разных систем летнего содержания и кормления на здоровье и продуктивность коров // Молочное и мясное скотоводство. 2003. - № 8. - С. 28 - 32.

122. Щербаков Е. С. Дискретное строение хроматина в головках сперматозоидов gallus Domesticus / Е. С. Щербаков, В. Я. Лавренчук // Генетика. 1968. - №2. - С. 117-123.

123. Ющенко Н. П. Значение колебаний температуры в замороженном семени // Животноводство. 1976. - № 1. - С. 64 - 66.

124. Яблонский В. А. Видовые особенности обмена веществ в сперме быка, барана и хряка // Сельскохозяйственная биология. 1973. - Т.8.-№ 1.-С. 100- 103.

125. Aalbers I. G. Motility, akrosome norphology, and fertilizing capacity of boar spermatozoa frozen in pellets and straws /1. G. Aalbers, L. A. Johnson, J. H. M. Rademaker, J. H. A. Brake // Proceedings. 1985. - P. 277 -281.

126. Almquist J. O. Effect of cold shock after thawing on acrosomal maintenance and motility of bovine spermatozoa frozen in plastic straws // J. Dairy Sci. 1976. - №59. - P. 1825 - 1829.

127. Al-Taha T. J. Kriobiochemiczne zmiany plemnikow buhajow w wa-runkach technologii mrozenia nasienia stosowanej w zakladzie unasien-niania / T. J. Al-Taha, J. Strzezek // Plodnosc i nieplodnosc zwierzat do-mowych. Warszawa, 1986.-T. 12. - S. 199 - 216.

128. Amann R. P. Reproductive capacity of dairy bulls. III. The effect of ejaculation frequency, unilateral vasectomy and age on spermatogenesis. -New York, 1962.- 110 p.

129. Barer R. Determination of dry mass, thickness, silid and water concentration in living cells // Nature. 1953. - P. 172.

130. Colas G. Fertility in the ewe after. A. I. with fresh and frozen semen at the induced oestrus, and influence of the photoperiod on the semen quality of the ram // Livest. Prod. Sci. 1979. - №6. - P. 153 - 166.

131. Colas G. Suggested international standards for ram semen exchange // Proc. 9th Int. Congr. Anim. Reprod. A. I. / Madrid, 1980. № 2. - P. 287296.

132. Cole H. H. Reproduction in Domestic Animals / H. H. Cole, P. T. Cupps. Reproduction in Domestic Animals. - New York: Academic Press, 1959.-224p.

133. Col win L. H. Membrane function in relation to spermegg association in fertilization / L. H. Colwin, A. L. Colwin. Membrane function in relation to spermegg association in fertilization. - New-York, 1967. - 295 p.

134. Davis A. P. Relationship of sire fertility to acrosome reacted and motile spermatozoa after treatment with liposomes / A. P. Davis, R. H. Foote// Dairy Sc. - 1987. - T. 70. - № 4. - P. 850 - 857.

135. Deka В. C. Effect of extenders on freezability of buck semen / В. C. Deka, A. R. Rao // Indian J. anim. Sc. 1985. - T. 55. - № 12. - P. 1038 -1040.

136. Drevius L.O. Osmotic swelling of mammalian spermatozoa / L. O. Drevius, H. Eriksson. Osmotic swelling of mammalian spermatozoa. -New-York, 1966.- 136 p.

137. Graham E. F. Fertility studies with frozen boar spermatozoa / E. F. Graham, A. H. J. Rajamannan, M. K. L. Schmehl // A. I. Dig. 1971. - V. 19-№ 19.-P. 6-8.

138. Grudova C. Influence of some cryoprotectors of the atp concentration in ram spermatozoa at different stages of cryoconservation / C. Grudova, T. Kaludina, D. Dacheva, L. Okoliiska // Congress proceedings. 1988. -Vol. 3.-P. 249-249a.

139. Hazarika H. Freezability of buffalo semen in tris series extenders / H. Hazarika, V. B. Saxena, S. S. Tripathi // Indian J. anim. Sc. 1989. - T. 59.-№1.-P. 97-99.

140. Hubbert K. G. Bovine embryo transfer. Present and future / K. G. Hub-bert, S. M. Hopkins // Iowa State Univ. Veter. 1984. - T. 46 - № 2. - P. 113-117.

141. Johnson L. A. Use of boar spermatozoa for artificial insemination / L. A. Johnson, L. G. Aalbers, J. A. M. Arts // J. Anim. Sci. 1982. - V. 54. -№ l.-P. 126-131.

142. Khaznadar N. Untersuchungen zur Verkurzung der Aquilibrierungszeit bei der Produktion von Bullenspermapellets / N. Khaznadar, W. Hartwig // Mh. Veter.- Med. 1988. - T. 43. - № 16. - S. 572 - 574.

143. Khaznadar N. Versuche zur Reduzierung von Membranschaden bei der Kryokonservierung von Bullensperma / N. Khaznadar, W. Hartwig, G. Matthes, E. Richter // Mh. Veter. Med. - 1986. - T. 41. - № 7. - S. 232 -235.

144. Kosiniak K. Hodnoceni zmrazitelnosti spermatu hrebcu // Biol. Chem. Zivocisne Vyroby. Veter., 1987. - № 23. - P. 442 - 445.

145. Lake P. E. Preservation of fowl semen in liquid nitrogen an improved method / P. E. Lake, J. M. Stewart // Brit. Poultry Sci. - 1978. - V.19. -№2.-P. 187- 194.

146. Luyet M. J. The vitrification of organic colloids and of protoplasm // Biodinamica. 1937. - V.l. - №29. - P. 1 - 14.

147. Maeda T. Studies of the factors causing abnormal acrosomes and crooked necks in fowl spermatozoa during freezing and thawing / T. Maeda, T. Terada, Y. Tsutsumi // Brit. Poultry Sc. - 1986. - T. 27. - № 4.-P. 695 - 702.

148. Mann T. The biochemistry of semen and of the male reproductive tract London, 1964. - 390 p.

149. Mika. J. Vliv sezony a veku na obsah testosteronu a estrogenu v se-menne a krevni plazme kancu / J. Mika, F. Louda, F. Jilek, J. Picha // Zivocisna Vyroba. 1985. - № 9. - P. 817 - 818.

150. Miljkovic V. Prikaz rezultata rada na beskrnoj transplantacijj Oplo-denik jajnih celija krava u 1981 godini // Vetr. Glasnik. 1983. - T. 37. -№ 9. - S. 681 -685.

151. Monji Y. Studies on deep freezing storage of bull, goat and boar semen. Comparative studies on viability and metabolic activity of sperm among a few species // Nogyo Daigaku. - Tokyo, 1988. - № 3. - P. 213 -223.

152. Muller-Schlosser F. Pillen und Pailletten // Dt. Schwarzbunte. 1988. -T. 12.-№ l.-S. 16-20.

153. Nagase H. Deep freezing bull semen in concentrated pellet form / H. Nagase, T. Niwa // V-th Intern. Congr. Anim. Reprod. Trento, 1964. -№4. - P. 410 - 415.

154. Ortavant R. Le cycle spermaU^tique chez le Belier // Thesis, University of Paris. France, 1958. - P. 125 - 129.

155. Ortavant, R. Photoperiodic regulation of reproduction in the sheep // Proc. Symp. Manage, of Reprod. in Sheepand Goats / Univ. Wisconsin. — Madison, 1977.-P. 58-71.

156. Paquignon M. Freezing and thawing extenders for boar spermatozoa // Proceedings. Upsala. - 1985. - P. 129 - 145.

157. Polge C. Fertilizing capacity of frozen boar semen following surgical insemination / C. Polge, S. Salamon, I. Wilmut // Vet. Rec. 1970. - V. 87.-№ 15.-P. 424-428.

158. Roosen Runge E. C. The process of spermatogenesis in mammals. -Biol. Rev., 1962-343 p.

159. Saacke R. G. Ultrastructure of bovine spermatozoa / R. G. Saacke, S. O. Almouist // Amer. J. Etnat. 1964. - P. 115.

160. Salisbury G. W. The validity of van Duijn's formula for head area of bovine spermatozoa / G. W. Salisbury, van C. G. Dongen The validity ofvan Duijn's formula for head area of bovine spermatozoa. New-York, 1963.- 144 p.

161. Salisbury G. W. A comparison of several methods of estimating nuclear size of bovine spermatozoa / G. W. Salisbury, van C. G. Dongen. A comparison of several methods of estimating nuclear size of bovine spermatozoa. - New-York, 1964. - 1098 p.

162. Schramm G. P. Flussig und Gefrierkonservierung von Putersperma // Mh. Veter. Med. - 1986. - T. 41. - № 13. - S. 460 - 463.

163. Slaweta R. The effect of glutathione on the motility and fertility of frozen bull sperm / R. Slaweta, T. Laskowska // Anim. Reprod. Sc. 1987-T. 13.-№4.-P. 249-253.

164. Smigielska J. Aktywnosc inhibitorow akrosyny w plazmie nasienia bu-haja jako wskaznik oceny stanu blon akrosomu / J. Smigielska, J. Strzezek// Plodnosc I nieplodnosc zwierzat domowych. Warszawa, 1986.-T. 12.-S. 185- 197.

165. Sramek C. Zmena obsahu proakrozinu behem konzervace semena ber-ana / C. Sramek, D. Cechova, B. Zelezna, J. Kozumplik, J. Petelikova // Veter. Med. (Praha). 1985. - T. 30. - № 4. - S. 231 - 237.

166. Stojik V. A study of seasonal variation of serum testosterone levels and its possible correlation with semen quantity in bulls / V. Stojik, D. Djurd-jevic, S. Petrovic // Acta Veter. 1986. - № 2 - 3. - P. 77 - 83.

167. Stolla R. Unentbehrlich fur Zucht und Zuchthygiene / R. Stolla, W. Leidl // Tierzuchter. 1985. - T. 37. - № 11. - S. 475 - 477.

168. Stove Schimmelpfennig K. Wo liegen die besonderen Probleme in der Technik der KB // Osterr. Geflugelwirtsch. - 1987. - T. 26. - № 5. - S. 176- 178.

169. Swidomicz К. Einfluss des Bullenalters und der Jahreszeit aut kryobiochemische Veranderungen der + spermien / K. Swidomicsz, J. Strzezek// Zuchthygiene. 1986. - № 5. - S. 247 - 256.

170. Swierstra E. E. Cytology and kinetics of spermatogenesis in the rabbit. / E. E. Swierstra, R. H. Foote. . Cytology and kinetics of spermatogenesis in the rabbit. - New-York, 1963.-309 p.

171. Swierstra E. E. Structural composition of Shorthorn bull testes and daily spermatozoa production as determined bv quantitative testicular histology. -New-York, 1966- 107 p.

172. Swierstra E. E. Cytology and duration of the cycle of the seminiferous epithelium of the boar; duration of spermatozoan transit through the epididymis. New-York, 1968. - 171 p.

173. Tai J. J. L. Studies on the cyopreservation of drake semen / J. J. L. Tai, C. Tai, J. M. Su // New strategies for improving animal production for human welfare. Tokyo, 1983. - Vol. 2. - P. 183 - 184.

174. Terada T. Effects of cryoprotective agents on the freeze thaw cell volume of cock spermatozoa / T. Terada, H. Hashimoto, M. Watanabe, Y. Tsutsumi // 17th World"s poultry congr. and exhib. - 1984. - P. 214 -216.

175. Thanawala A. J. Feasibility of using hard gelatin capsules for the packaging and deep freezing of bull semen / A. J. Thanawala, S. A. Sona-wane, C. R. Sane // Theriogenology. - 1988. - T. 29. - №4. - P. 921 - 929.

176. Van Duijn C. Mensuration of the heads of bull spermatozoa. New-York, 1960.-265 p.

177. Vomer I. Stimulacija reprodukcije njeno mjesto I uloga u unapredenju stocarske proizvodnje / I. Vomer, C. Petac // Veter. Glasnik. - 1983.- T. 37.-№12.-S. 915-923.

178. Westendorf P. L. Zur Tiefgefrierung Ebersperma Labor und Be-samungsergebnisse mit dem Hulsenberger Pailleten / P. L. Westendorf, L.

179. Richter, H. Treu. // Verfahren. Dtsch. Tierarztl. Wschr. 1975. - B.82. -№7.-S. 261 -267.

180. Wishart G. J. The effect of cryopreservation at -196 С on the viability of fowl and turkey spermatozoa assessed in vitro / G. J. Wishart, F. H. Palmer // Anim. Reprod. Sc. 1986. - Т. 10. - № 4. - P. 317 - 324.

181. Zlotnic J. The cytoplasmic components of germ cell during spermatogenesis in the domestic fowl // Quart J. Microscop. Sci. - 1947. - №8 - P. 353 -355.