Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние ряда биогенных и физических факторов на динамику функционально-структурного восстановления поврежденных тканей в эксперименте и в клинике

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние ряда биогенных и физических факторов на динамику функционально-структурного восстановления поврежденных тканей в эксперименте и в клинике"

АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ АРМЕНИЯ ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИИ Ш.АКДД.Л.А.ОРБЕШ

На правах рукописи

УДК 612.843+612.819.2+612.83+616.833-003.93: 616.8.091.8+616.832-091.8:612.813+612.822. 3:577.156:617.002.3+611.001.4:618.8.085.83

НАГАШШШ ХАЧИК 0ВСШ0Ш1Ч

ШШИЕ РЯДА ЕЮГЕННЫХ И ФИЗИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА ДИ-1ШКУ ФУИКЩЮИАЛЬНО-СТРУКГУРНОГО ВОССТАНОВЛЕНИЯ ГЮВ-РЕЗДЕННЫХ ТКАНЕЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ И В КИШКЕ

(03.00.13 - физиология человека и давоттсс)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соксклтто ученой степени доктора биологических наук

EPEBAH-I99I

Работа выполнена в Институте физиологии им.акад.Л.А.Орбели АН Республики Армения (директор - член-корреспондент АН СССР В.В.Фанардяян).

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Л.А.МАТИНЯН

Официальные онлоненты:доктор медицинских наук, профессор В.П.ПОДАЧЩ

доктор медицинских наук, профессор Н.Н.ЛЮБИМОВ

доктор биологических наук,профессор Г.М.ЧИЛИНГАРЯН

Ведущая организация: Ереванский Государственный медицинский институт им.М.Гераци

Защита состоится "/(?" К_ 1991г. в

часов на заседании Саециализдрованного ученого совета Д 003.10.01 п]зи Институте физиологии им.акад.Л.А.Орбе-ли АН Респ} блики Армения (375023, Ереван, ул.бр.Орбели, 22)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института физиологии им.Л.А.Орбали АН Республики Армения

Автореферат разослан " Ь "„

// 1991г.

Учений оокретгчръ

;'.|П;Г|1Г-!Л'.ГЛ11ЬПБа11НОГи Совета,

, - /

>,|«и'.»т М'^щ-лнокич наук . /;, ,,, ( / К. 1'.БЛГДАСАР>ЧI

I. ОНЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблем». Разработка методов,способствующих пол-юценному а ускоренному восстановлению физиологической (функцио-1Шгьной) и морфологической (структурной) целостности повраэденных :каней,бшга и остается одной из самых актуальных и сложных проблем 5иологической науки и медицинской, в частности.Изучение этой проб-[еш, пошшо теоретического, шеет и большое практическое зпаченпв, •ак как знание тонких механизмов, лежащих в основе репаративных :рсцессов повреждениях тканей, может позволять управлять mm в жв-аемом направлении и, тем самым, способствовать активному и цело-аправленному протеканию компенсаторно-восстановительных процессов, связи с этим интерес к этой проблеме возрастает, так как прэд-гавленля о раневом процессе и, соответственно, принципах лечения in, по мере развития медицинской науки, постоянно видоизменяются становятся более совершенными.

При разработке методов воздействия на репаратявные процессы лзревденных тканей особое внимание следует обратить на поиск s вменение веществ, способствупцах ускорению очищения поврежден-гх тканей от некротических масс, ранней ликвидации отечнснвоста-игельных явлений в рана и микрофлоры, стимуляция роста грануляци-iHoiî ткани. В этом плане большое внимание уделяется применению .зличных ферментных препаратов, в частности ,прогеолЕСТчеокях sh-V.CB животного и микробного происхождения (Воусчоеико К.1Г., ISS7; ручков В .И. с соавт., 1970,75; Стручков В Л.-, IS75g Вишневский А. п соавт», 1975; Фоячеи K.M., 1979; Гостпщев В.К. с соавт.,

00.65,BS; Взромеепко К.Н. с соавт,, IS8I; Abderhalden п., 1351 ; rdan p., I9S7 и др.), которые успоано прлмзпяетсь и при пзучзппп гстпчностп поврежденного спинного мозга (Матяпяп I.A., Аядреасян

1973; Матпнян Л.A.t 1978 л др.).

Новы:.! этапом фермсптотерашш явилось нспользовашо протзади-юекпх энзимов растения carica papaya (папайя, химопапаии, л о ко -

1, лекопапн), которые проявляет активность в большом диапазоне вюгочая а кислую область. Крема того, зтззл энзимам свойственна

:ал избирательность как по действию на яздикпдуаяькно белки, так ;ри расщеплении поптцдтсс связей (Удод D.M. о соавт., 1901,34;

Kreut J. et al., 1968; Huaain S. et al., 1968; Barel A. et al., 1969 И др.).

В репаративной медицине особо важным является разработка ¡эффективных методов воздействия на пластичность поврежденной центральной и периферической нервной системы (Несмеянова Т.Н., 1968, 71; Матинян Л.А., Андреасян A.C., 1973; Подачин В.П., 1974; Мати-нян Л.А., 1978; Матинян I.A., Наганетян Х.О. с соавт., 1981¡Подачин В.П. с соавт., 1983; Наганетян Х.О. с соавт., 1983,87,88,89, 89а; Любимов H.H., I987,90;Ramon Y Cyjal s.,1928,59; windle w. et al.,1950,52; Windle W., 1956; Levi Montalcini R., 1964,76; Katinirm L., 1982 и др.). Учитывая особенности морфо-физиологичес-ких процессов, происходящих в поврежденной центральной и периферической нервной системе при разработке методов воздействия на ро-паративные процессы, особое внимание следует уделить поиску и применению таких веществ, которые, с одной стороны, могли бы инициировать рост рубцовой соединительной ткани .как основного барьера на пути регенерирущих нервных волокон, а с другой - создавать благоприятные условия для стимулирования роста аксонов.

Известно, что многие лекарственные препараты, в тем число Е ферменты, при длительном применении могут отрицательно влиять на i мушую систему организма и быть источником аллергических реакций Исходя из положительных результатов, показавших, что гелий-неоновый лазер ( А =£32,8 ли) оказывает мягкое стимулирующее действие на организм и эффективно влияет на регенеративные процессы поврежденной нервной системы (Аджималаев Т.А;, 1976; Рахшпов А.Р.,1976,1 Рохкинд С.Э., 1978; Гусатинский В.Н. с соавт., 1983; Нагапетян X. 0. с соавт., 1987,88; Мкртчян С.Р., 1989 к др.),и с цедыз преодоления указанных вше недостатков,наш было использовано также лазерное излучение как в отдельности, так и в комплексе с ферментами.

В последние десятилетия широко разрабатываются и успешно применяются методики фораза лекарственных препаратов, в том числе и ферментов. Однако в литбратурэ отсутствуют работы по применение растительных протеслитичзских ферментов с помощью даацинамофореза Е фонофореэа. Исходч из wort), при изучении реяаративнчх процессов позревдоннух тайной, дкя введшим указанных феризнтов.нами при доанндасъ такао диадинамичоские toiui (ДДТ) и ультразвук (УЗ).

[1шм. и .ргщ.а.'п; цсг^ы,оппищ. Иачью настоящей работ» явилась разработка оффокшкшх, наиболоэ фдзиолога-ишх и научно-обоснован

ных методов воздействие: на репаративнче процессы поврежденных тканой в эксперименте и в клинике, в -частности: I. изучение динамики пластичности поврежденных тканей под воздействием протеолитичеоких ферментов (ПФ) растительного,микробного и животного происхождения; 2. разработка методов повышения эффективности знзимотерапии с помощью их совместного применения с лазерным излучением (ЛИ), ДЦТ и УЗ; 3. разработка эффективных рекомендаций дая внедрения в нейрохирургическую, неврологическую, хирургическую, офтальмологическую, косметологическую и др. клиники.

В соответствии с целью исследования в работе были поставлены задачи изучить влияние: I. лекоцаина (папаика) и трипсина на вос-становительныо процессы поврежденного зрительного нерва и сетчатки глаза животных (лягушки, крысы, кролики); 2. лекопакна, различных доз коллализина и ЛИ на динамику зосстановления функции и структуры поврежденного седалищного нерва у крыс; 3. оптимальных доз кшг-лализина, папаина, ЛИ и их сочетаний на состояние функциональко-структурного восстановления поЕражденного сшпшого мозга у ярко; 4. гсмогената спинного мозга крысиного эмбриона и ЛИ на восстано-витаньные процессы и некоторые обменные показатели поврежденного -спинного мозга у крыс; 5. лекопаина (папаика)- ка динамику репара-тивных процессов экспериментальных ран у кроликов; 6. ДДТ, антизеп-тихса диметилсульфоксида (димексид, ДМСО) и раневого эксудата на ферментативную активность папаша и глубину его проникновения в тол-игу неповрежденной кояи морских свинок; 7. даадинамофорзза (ДДФ) на динамику заживления экспериментальных ран у морских свинок; 8. отдельного и совместного применения папаина.с ДДТ, УЗ и ДОСО на ре-паративные процессы гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей и травматических поврездений-периферических нервов. Разрабс-гать методичесие рекомендации по применению папаина к его сочетаем с физическими факторами в клинической практике.

Основные положения, выносимые на заготту:

I. Регенеративные возможности центральной нервной системы СЦНС) велики, однако формирование соединительнотканного плотного рубца опережает восстановление повроаденинх аксонов* Это приводит I сдавливании нервных волокон и блокированию путей их роста, пре-хятствуя функционально-структурному восстановлению поврезденной шрвной ткани. Ингибнрование роста соединительной ткани в ВДС при ховрездениях может создавать благоприятные условия для регенерации шрвных элементов с восстановлением их функции и структуры;

2. Применение протеолитических энзимов растительного, микробного и животного происхождения в оптимальных дозах и сочетаниях вызывает ингибирование образования плотного соединительнотканного рубцового регенерата в поврезденных участках ЩС и нервных стволах, обладает противовоспалительными и стимулирушцими рост нервной ткани свойствами, что создает благоприятные условия для функционально-структурной регенерации;

3. Раневой процесс во всех своих этапах сопровождается активацией определенных ферментных систем, способствущих функционально-структурному восстановлению поврежденных тканей. В фазе воспаления активируются ферменты, способствующие некролизу,отторжению некротических масс и очищению раны; в фазе регенерации -росту грануляционной ткани; в заключительной фазе - рубцеванию и завершению раневого процесса. В первой фазе определенную роль играют протеолитические ферленты, которые способствуют усилению некролиза нежизнеспособных тканей, ускоряют процессы очищения раневой' поверхности от некротических масс, гнойного эксудата, что создает благоприятные условия для бурного роста грануляционной ткани и сокращения сроков репарации 'ран в целом. Применение проте олитических энзимов в последней фазе раневого процесса (фаза ре-ыоделирования) способствует формированию более физиологичного и малозаметного рубца с хорошей эпителизацией ее поверхности;

4. ЛИ ( Л =632,8 нм) обладает противовоспалительными свойствами, оказывает стимулиругацее влияние на репаративные процессы поврезденных тканой, способствует рассасыванию грубых Рубцовых регенератов. Совместное применение ЛИ и протеолитических энзимов способствует более быстрому очищению поврежденных тканей от некротических масс и гнойного эксудата, ускоряет репаративные процес сы, обладает антибактериальными свойствами, благодаря этому создаются оптимальные условия для ингибирования роста соединительнотканных Рубцовых элементов и ускорения процессов более полноценного функционально-структурного восстановления поврежденных элементов центральной нервной системы (ЦНС), нервных стволов, а также репарации других поврезденных тканей;

5. Так как местное применение протеолитических энзимов обладает некоторыми недостатками - кратковременность действия из-за ферментативного автолиза и метаболизма, отсутствие избирательного влияния на околораневую зону, возможные аллергачесгаш реакции и т.д., то применение ДДФ и фонофоретнчаского. (<14<) методоп вводе-

ния этих энзимов (особенно в сочетании с антисептиком ДМСО) позволяет избежать этих недостатков и является более эффективным, перспективным методом терапии поврежденной ЦНС, периферических нервов и гнойно-воспалитодъных процессов других тканей. При этом очень быстро нормализуется общее состояние больных, картина крови, сокращаются сроки очищения раны, создаются хорошие условия для бурного и свободного роста грануляционной ткани, формирования более физиологичного рубца; »

6. На основании полученных экспериментальных данных и клинических наблюдений протеолитические ферментные препараты расти-тольного, микробного и животного происхождения как в отдельности, так и в разных сочетаниях, п особенно с физическими факторами (ЛИ, ДДТ, УЗ), рекомендуются дая внедрения в широкую медицинскую практику в комплексе лечения неврологических (корешковый синдром,остаточные явления поврежденной центральной и периферической нервной системы» базальный и оятсхиазмальный арахноидит и т.д.^нейрохирургических (травматические повреждения нервной системы),офтальмологических (ожоги, травмы глаза, сетчатки и зрительного нерва)а косметологических (гселлоидкые рубцы и др.), ортопедических (остеохондроз позвоночника, повреждения межпозвоночных дисков), хирургических (инфицзрованныэ и гнойные ранн,послоопераци-'ошшо инфильтраты, ожоги) и других бальных.

Научная новизна. С учетом механизмов, лежащих в основе раневого процесса»разработаны новые методы и подходы, способствующие ускоренному и более полноценному функционально-структурному ' восстановлению повревдэнной нервной а других тканей.^

Впервые применением протеолитическах знзшов растительного, микробного и животного происхождения, ЛИ (Л =632,8 нм), ДДТ, УЗ, их сочетаний и различных способов воздействия на модели с экспериментальными повреждениями нервной системы, других тканей, а также на больных с повреждениями периферической нервной системы (ПНС) а гкойновоспалитеяькшн заболеваниями выявлены новые эффективные методы стимуляции функционально-структурного восстановления повреаденных структур.

Впервые показало, что применение растительных и микробных протэолитичеегшх ферментных препаратов в определенных дозах а сочетаниях ннгибирует рост рубцовой ткаяи при повреждениях нервной системы, создавая благоприятные условия для свободного адсо-яальпого роста. Выявлено, что ЛИ, ДДТ, УЗ стимулируют и ускоряют

регенеративные процессы в поврежденных нервных структурах и других тканях, обладают противовоспалительными, антимикробными и противоотечныма свойствами и не вызывают аллергических реакций. Впервые показано, что наилучший эффект восстановления функций и структуры поврежденных тканей наблюдается при сочетании ферменто-тератш с лазеротерапией, а также при введении в организм ферментов посредством ДДТ и УЗ в сочетании с антисептиками ДМСО.В этих условиях процессы функционально-структурного восстановления поврежденных нервных и других структур протекают в среднем в 1,5-2 раза быстрее по сравнению с контрольными наблюдениями.

Впервые показано, что растительный ферментный препарат папайя под воздействием ЛДТ, при 30 мин экспозиции, сохраняет энзи-мативную активность, а при ДЦФ - проникает в толщу кожи интактных животных на глубину до 2 мм и более, сохраняя активность свыше 24 часов.

Впервые показано, что прогэолитические ферменты растения саг с& papaya и их комбинированное применение с физическими факторами (Ж, ДДТ,- УЗ), ускоряя процессы очищения ран и ликвидируя интоксикацию, способствуют быстрой нормализации общего состояния организма, стимуляции фагоцитоза, раннему исчезновению дегенеративных форм полиморфноядерных нейтрофилов,появлению моноцитов (макрофагов) и лолибластов, а также нормализации рН раневого эксудата и температуры околораневых зон.

Впервые показано, что при знзимотерапии ран формируется нежный, более физиологичный и малозаметный рубец, что не наблвдается при общепринятых методах лечения ран. Установлена возможность совместного применения ферментных препаратов растения carica papaya о антисептиком широкого спектра действия ДМСО, ЛИ, ДДТ и УЗ. Предложена композиция на основе патина для лечения гнойных ран с помощью фонофореза.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований по изучению закономерностей пластичности поврежденной нервной и других тканей в норме и в условиях воздействия различных факторов (1И, ЛИ, ДД'Г, УЗ, а также различные их сочетания) расширяют и углубляют наши представления о тонких мэ-хашзиах, лежащих в ссаоъэ ралззого процесса. В частности, полу- • чанные данные проливав сьет ¡щ. понимание механизмов последова- ' гельаого ау.тиви решали, л определенных форлентных систем организма в различных фазах раненого процесса.

Учитывая, что ПФ, в частности.растительного и микробного роисходдекия способствуют очищению ран от некротических масс, ■юйного эксудата, обладают противовоспалительными, антиотечными зойствами, ингибируют рост рубдовой ткани, они могут быть реко-зндованы для терапии поврежденных тканей в первой и третьей фа-IX раневого процесса, т.е. в фазах воспаления и ремоделирования.

Полученные данные могут быть использованы в неврологичес-IX, нейрохирургических, офтальмологических и других клиниках в эмплексе лечения различных повреждений и заболеваний нервной ютемы, зрительного аппарата (травмы ЦНС и ПНС, радикулиты, ко-зшковый синдром, воспалительные заболевания оболочек мозга,опто-1азмальные и базальнне арахноидиты и др.), а также в хирургичес-IX клиниках при лечении гнойно-воспалительных заболеваний. Пред-мен эффективный метод лечения гнойных ран с помощью сошестного вменения папаина с ДМСО, ДДТ и УЗ.

Внедрение в практику здравоохранения;. Разработаны и внедре-1 в практику здравоохранения три методические рекомендации: "Лешие гнойных ран растительным ферментным препаратом лекопаином"; 1рименение диадинамофореза папаина на больных с гнойно-воспали-зльными заболеваниями"; "Влияние фонофореза папаина с димексвдом i гнойно-воспалителыше процессы". Полученные данные внедрены в эактику лечения бальных о травматическими повреждениями ПНС нев-злогического отделения Института курортологии и физиотерапии Мин-фава Армении; в Республиканской офтальмологической клинической иьнице Минздрава Армении при лечении некоторхЕ заболеваний позднего отдела глаза, стекловидного тела и сетчатки.. По теме дис-зртации получено удостоверение на рационализаторское предложение Способ повышения эффективности диадинамофореза протеоят.тических эрлентов с помощью димексида". Разработана композиция для лече-ш гнойных ран, содержащая папаин, ДМСО и фурацшшш, используе-ш как в виде раствора, так и в состазе иази.

Апробация работы. Основные результаты диссертации дологоны: i Международном симпозиуме "Применение протеоллтачоских энзимов ютетая carica papaya (лекозим, лекопаин) з широкой медицинской :актякем, Москва, 1978; на У Всесоюзной конференция по проблеме Сомпенсаторяоэ восстановление функций при повреждениях централь-)й нервной системы", Ереван, 1979; на Х1У Закавказской конфореп-ш педагогических ВУЗ-ов, посвященной современным проблемам $з-[слогии человека а животных, Кнровакан, 1981; па У Закавказской

научной конференции патофизиологов, Баку, 1982; на Республиканской конференции "Ферменты, металлы и металлоферменты в диагностике и лечении", Ивано-Франковск, 1982; на Х1У съезде Всесоюзного физиологического общества им. И.П.Павлова, Баку, 1983; на У1 Всесоюзной конференции "Механизмы динамической локализации и компенсации функций центральной нервной системы", посвященной 80-летию сс дня рождения члена-корр. АЕ СССР, акад. АН Арм.ССР Э.А. Асратяна, Ереван, 1983; на научной сессии Института физиологии им. акад.Л.А.Орбели АН Ары.ССР, посвященной 40-летию организации института, Ереван, 1984; на Всесоюзной конференции, посвященной 100-летию со дня роздения акад.И.С.Бераташвили, Тбилиси, 1985;на Всесоюзной конференции, посвященной 50-%летию Института физиологии им.акдд.И.С.Бериташвили АН Груз.ССР, Тбилиси, 1986; на П Всесоюзной конференции "Раны и раневая инфекция", Москва, 1986; на научной сессии Института физиологии ам.акад.Л.А.Орбели АН Арм.ССР, посвященной памяти 60-лстию со дня рождения члона-корр. АН Аш. ССР С.А.Бакупца,"Физиологические механизмы деятельности нервно! и мышечной систем", Ереван, 1986; на 1У съезде Армянского физиологического общества, Ереван, 1987; на ХУ съезде Всесоюзного физиологического общества им. И.П.Павлова, Кишинев, 1987; на 4-ом выездном. заседании научного совета по планированию и координации иалекулярно-биологических исследований в области медицины при Президиуме АМН СССР, Научного совета АН и АМН СССР "Механизмы повреждения и восстановления целостного мозга", Иркутск, 1987; на научной конференции к 60-летию Ереванского зоовет.института, Ереван, 1988; на Всесоюзной конференции "Регуляция сенссмоторных функций", Винница, 1989; на 5-ом выездном заседании экспертного совета по монокулярной биологии и медицинской биотехнологии АМН СССР по физиологии человека и Президиума Восточно-Сибирского филиала СО АМН СССР, посвященного памяти В.М.Бехтерева "Восстановительная неврология", Иркутск, 1990; на годичных сессиях Института физиологии им.акад.Л.А.Орбели АН Армении, I977-I990; на заседании лаборатории иейро-эндокринннх взаимоотношений Института физиологии им. акад.Л.А.Орбели АН Армении, Ереван, 1990; на заседании ученого совета Института физиологии им.акад.Л.А.Орбаш АН Армении, Ереван, 1991.

Структура и объем ди^оортопт;. Диссертация состоит из введения, обпора литературы, описания мотодсн исслодованпя, результатов собстэншшх исследований и их об сужения, заключения, внво-

доз,списка литературы и приложения (3 методические рекомегщашш,свидетельство на рацпредложение).

Диссертация изложена на 382 страницах машинописного текста,ил-яюстирована 32 таблицами, 132 рисункам! ,:шстограшаш .диаграммами и микрофотографиями.Список литературы включает 517 источников,из них 224 на иностранных языках.

МАТЕРИАЛ И 'МЕТОДИКА. ИССЛЕДОВАНИЯ

CtaíTH проводились на 115 лягушках (Rana Temporarias ) ,500 белых крысах,40 крысиных эмбрионах,55 морских свинках,107 кроликах (породы шиншилла),а клинические наблюдения велись на 874 больных с гной-:ш!.ш ранами и гиойно-воспалительнк.га процессами,а таете на 37 бальзах с травматическими псзреддешизш периферических нервов.

Изучение пластичности поврежденного зрительного нерва проводи-юсь на 115 лягушках и 45 кроликах.После одно-ила двухстороннего ювредцення зрительного нерва (переразка с частичным сохранением обо-гочка или внутриоболочочное сдавливание,приводящее к расгшаиваяяю i расхождению размозженных аксонов) лягушки распределялись на 4 эко-юримэнталышэ и I контрольную группы,а кролнки-на 2-эксперимзнталь-гуа и контрольнуп.Лягушкам I опытна! группы в область позрелдешщ злседневио вводился свежеприготовленный 0,5% растзор лекопаина из рас-шта I мг/кг; Л-0,5% р-р лекопаина,в начало ежедневно,а после 15-го (ня через день;Ш-р-р трипсина из расчета 0,7 глг/кг,в начале ояеднов-ю,а после 15-го дня через день;1У-р-р трипсина и лекопаина в выте-тазанных дозах (день трипсин,слздугаций лекопата),а контрольным ля-•ушкям-рянгороБский р-р .Процедуры прозодились в течение 30 дноЗ .Кромкам опытной группы в область поврзлдеппого зрительного нерва раз в ;ень вво1дили 10 мг папаина,разведенного з I мл физ.р-ра,а контрольны- ТОЛЬКО фИЕ . р-р.

Лекопаантрастительнкй комплексный ферментный препарат,зарогист-арованный в СССР в 1977 г.под названием "Локозим',' представляэт со-ой смесь трех протеолитичоских (палаин,хи1лопапаии,лизоци.м),муколи-ического энзимов,хлорида натри, цистеипа и ЭДТА.Препарат выпускает-я хлшео-фармацевтпчоекпи заводом ЛЕК (С5РЮ) во флаконах о протео-итической актдзпостью 14, 35 и 70 FIP и, т.е. 2, 5 и 10 глг).

Изучение пластичности повродцоняой сетчатки глаза проводилооь з 12 взрослых кроликах.Для локального повреждения сетчатки,после родваратольной атропинизацил,глаза кроликов облучались вспышками чпульсного рубинового лазера марки ЛТ1Ш-7 (длина зол1ш-1,06 v.го/., тотальность х\"дуз:ьса-12 ?лс,моцпость-1 могаватг, шютяость-iCO :«ега-

ватт/см^,частота 12,5 Гц).Затем кролики разбивались на две группы-экспершлентальвая и контрольная.Глаза экспериментальных кроликов д раза в день иястиллировались свежеприготовленным раствором палаина а контрсльных-физ.р-ром.До и в разные срою; после повревдешш сетч ки регистрировались эяектроретинограммы (ЭРГ) и ВП зрительного моз В диншаке'фотографировалось глазноэ дно,а спустя 6 месяцев после повравдешя сетчатки вырабатывались условные рефлексы на белый,кра ный и зеленый свет.

Изучений плаогачности поврелиешого седалищного норва провода лось на 220 белых крысах 30-45 дневного возраста.Под нембуталовш наркоз ал у 70 крыс проводилась полная перерезка седалищного нерва на уровне верхней трети бедра,а у 150-раздавливание и размозжение на тем ье уровне,что иакяе приводило к лсишоцу разобщшош культей нерва о частичным сохранением ободочка. Затем ждаотчые разбивались на дев воптрояьтае и ш®сть эисяертлшталышх груша.Первая кшгрсщ пая гругта ооотояяа из 10 ирш о перерезкой седашцного нерва, а втор&я-иа 30 о размоаешшш.У этих крыс восстановительные процеоеь протенлдш без вмешательства .В нервую и вторую экспарш.'.емтальще группы вошли кривы о перерезкой седалищяого нерва,с третьей по neci -о рашовжшш (по 30 твотнш; в кавдой) .У крыв первой опытней rpçrnau воостешшатадыш« вродаосы протекала под воздействием Ж; вторсй-ЛИ в сочетаний с лвкошином (1мг/кг) ;третьей-коллали211на в доев 10 КЕ/кг;чвт5вртай-ксииализиш в дозе 5 КЕ/кг;пятой-колла1гизш: б до:-е 2,5 К^/кг;нвстой-ксшилизмтв дозе 10 К^/кг в сочетавши с Ж.Растворы »тих препаратов гаодндись в область поврежденного H®pi чере» день (10 инъекций).Вспышками ЛИ облучались область сшшасгс мозга (СМ) на уровне поясничных позвонков„повреждения и концевые активные точки (ладонные поверхности пальцев и стоп).Ежедневно,в ï некие 10 дней,на каждую область додавались вепшки Ж с частотой 25 Гц,длительностью 3 мин.В качестве источника ЛИ использовался щ бор лазеропунктуры РИ1М-6 (выходная мацность-0,6±0,3 мВт,Я =632,8 нм,частота модуляции -1,5, 10, 25 и 50 Гц).

Коллализил Ш-протеолитичвекий фермент микробного происхожд« 1шя,получаемый из культуры бактерии Clostridium Hyatoliticum, одобрен фармкештетам МЗ СССР (per.Jê 83/914/5) .обладает способное! вызывать разрушение келлагена соединительной ткани.Выпускается в лиофшшзнровшшш виде в ашулах по 100 и 600 КЕ.

Изучении пластичности повпекпонноро СМ проводилось на 200 саг,! ках белых крыс 30-45 дневного возраста.Под нембуталовш наркозем (40 кг/кг) провед'.'лнсь литералы ии тиисскция UI между 'IV- Тг поз-

зонкаш, включая сшиЮмозговой канал.Через 24 часа животные делились за пять групп (по 40 в каждой): одна контрольная и четыре экспериментальные. Спустя 3 суток после повреждения сначала ежедневно,а затем терез день в область повреждения крысам контрольной группы вводился 3,5 ш физ .р-ра, первой экспериментальной группы-10 КЕ К,второй 10 КЕ С с облуче!шем зоны повреждения вспышками. Ж,третьей-одан день 10КБ С,а слодунций-0,5 мл 0,5% р-ра папаина с облучением зоны повреждения Ш,у крыс четвертой группы-.облучалась зона повреждения Ж (частота 25 Гц,экспозиция Змия).Во всех сериях было проведено по 10 процедур. С вводился из расчета 10 КЕ,а папаш-0,5 мл 0,5$ р-ра на 100 г веса.

Динамика восстановления функций и структуры поврежденного зри-;ального и седалищного нервов,а также СМ изучалась методами юшня-сеского наблюдения, алектрофизиологического и морфологического (в тш теле морфомоттрического, тонко- и ультратонкоструктурного) исслодо-1шшя.Регистрация потенциалов велась на осциллографах С1-29,С8-2 и ta 8-ми канальном алектроэяцефалографе,после предварительного успле-шя о помещью усилителя УЕП2-03 (частотная полоса 50-40000 Гц,посто-лшоо врсмя-0,003-1,5 сек).

Изучптта пгпястит гг-ототта CT крнсиного эмбриона на обменные тоцессн поврежденного СИ у кто проводалооь на 80 белых крысах самск 0-45 дневного возраста.Посла полней транссекцип СМ животные разби-элись на одну контрольную п три экспериментальные грушш (по 20 в аящой) .Крксам контрольной серии сразу после операции в зону позреж-ония вводилось 0,2-га физ.р-ра,первой экспериментальной группо-0,2 л гомог.спата эмбрионального СМ.У крыс второй .экспериментальной rpytr-ы зона повреждения и концевые актявнно точка со второго дня хордо-омиа облучались ЛИ,а крысам третьей экспериментальной грушш в зону оврездения вводшюсь0,2 мл гомогената.а со второго дня она облучаясь Ж.В разные сроки после введения гсмогената,в краниальном и кау-альнсм отделах СМ опытных и контрольных крыо (а такяэ знтактных) оп-здолллась активность v/a+ и 1С*" АТФ-азн, оцотгафосфатази, глпкогопфос-орилазн и паршштрофенялфосфатазы.

Для получения гоиогеиата эмбрионального СМ изолировались СМ 173 дневных вибрионов,а затеа,после добавления 3 мл физ.р-ра на I гр ассн,гсмогопязнроз&гась в точепио 3 мий голсгсппзатсрс:* КР-302.

Изучение шнового процесса у кроликов проводилось на 50 ллвотннх эроды йинншлла.Под постной повокалновой аностезией.бэз соблюдения решил асептики,в залалаточноЗ области наносилась рана размортал 4,5 2,0x1,5 см.Затем животнио раабивалиоь на четыре группн-две контроль-

ние и две экспериментальные.У первой группы контрольных кроликов (10 животных) раневая поверхность с первого дня нагноения.дважды в день орошалась физ.р-ром,а после четвертой процедуры покрывалась тонким слоем нейтрального вазелина,а у второй (10 животных)-в первые дни гипертоническим р-ром антисептика,а затем мазью Вишневско-го.В первой группе экспериментальных животных (20 кроликов) раневая поверхность с первого дня нагноения дважды в день орошалась свежеприготовленным р-ром лекопаина (14 МРи на 2,0 дестшшированной водила через 3-4 дня покрывалась лекопаиновой мазью (14Р1Р1Г на 2,0 вазелина).Во второй экспериментальной группе кроликов (10 животных) рана с первого дня нагноения подвергалась воздействию лекйпаина в сочетании с антибиотиками {сначала рана орошалась р-ром антибиотика, затем лекопаина,а с 3-4 дня покрывалась мазью лекопаина.

Скорость заживления тонн определялась планиметрическими измерениями .ее поверхности по формуле ■ ,хде 5 2-ш1СЩаДь Раш ПРИ данном намерении, 5-[-пра предыдущем,а я-число дней между измерениями.Цитологический анализ раневых отпечатков проводилоя по методам, предложенным Покровской М.,Макаровым М.(1342) и Камаевш М.(19б4), а бактериологический-по Кузину М с соавт.( 1980).Кислотность раневого. эксудата определялась при помсщи рН-метра рН-340.Статистический анализ проводился по Ствденту.Температурная реакция околораневых зон и симметричных интактннх областей определялась при помсщи злек-тротермометра ТП3,1-1.

Определение глубины проникновения папаина в толщу неповрежденной кожи при Ш1Ф введении проводилось на 15 морских свинках .На освобожденную от волос кожу мвжлопаточной области наносились две лекарственные прокладки,пропитанные физ.р-ром для контрольной группы (Бовинок) ,0,5% р-ром папаина для животных первой (5 свинок) и 0,5$ р-ром папаина из среды 20$ ДМСО-второй (5 свинок) экспериментальны) групп.На прокладки помещались свинцовые пластинчатые электроды.При помсщи аппарата СНИМ-1 подавался ток,силой 5 мА,модулированный короткими периодами с изменением полярности через 5 мин (всего 10 мин).Сразу после ДЦФ.а также через 24 часа животные наркотизировались,и из зоны воздействия папаша брались кусочки кожи с подлежащими тканями площадью 100 мм2,и на заморачсивакщем микротоме изготовлялись срезы толщиной 0,35 мм.В супернатантах калдого сроза определялась протеоггатическая активность папаина.Для этих целей использовались также методы ядерно-мягпптного резонанса (ШР) и ИК спектроскопии.

Определение влияния ДДТ на ферментативную активность паладна (лвкопаина и др.) осуществлялось при помощи камеры Улаидака В. (1976)» Центральная ячейка камеры заполнялась свежеприготовленным 0,5$ раствором папаина, а боковые - физ. р-ром.К электродам боковых ячеек при помощи аппарата СНИМ-1 подавался ток,модулированный короткими периодами, силой 5 мА, длительностью 30 мин. Энзиматив-ная активность в жидкостях ячеек определялась по методу Акоруап г., ВагсЬис1агуап N. ,АгиЪгщуап А, ей а1.(1979)«

Измерение влияния ДДФ папаина на заживление ран в эксперименте проводилось на 40 взрослых морских свинках. В матлопатсчной области, под местной новокаиновой анестезией наносились раны круглой формы и одинакового размера: удалялась ката » подкожный жировой слой с раздавливанием и размозжением глубоких тканей. Рапа заражалась культурой стандартного штамма золотистого стафилококка $ 906. Экспериментальные животные делились на 4 группы по 10 в '.саждой. Через 2 дня после накзсения ран применялись слэдушие мо-годы воздействия: I) ДЦФ с физиологическим раствором; 2) ДДФ о ),5% р-рогл папаина; 3) ДДФ папаина с 20/1 ДМСО; 4) ДДФ с 20% ДМСО. Гечение раневого процесса оценивалось с покощъю клинического наблюдения, планиметрического, электротермомотрического, бактериологического, цитологического и морфологического' методов исследования.

,Методика лечения гнойно-воспалитольннх процессов лекапаином л общая характеристика больных. В поликлинических условиях под габлвденнем и лечением находилось 303 бальных с гнойными ранами, которые по тяжести процесса и методу лечения распределялись на гетыре группы: в первую группу вопыш 100 больных с мало выраженными, а во вторую - 103 - с наличием' ярко выраженных гнойно-воспалп-гельных процессов, которым была назначена лекопаинотерапия. В гретью группу ^ошли 50 больных, которым назначалась лекопаино-ан-лбиотикотерапия, а в четвертую (контроль) - 50 больных, лечение соторых проводилось общепринятыми методами.

Лечение хан проводилось следущим образом: один раз в день, [осле хирургической обработки раневой поверхности, рана орошалась ¡вежеприготовленпым раствором лекопаина,' а затем покрывалась ствольной салфеткой, смоченной в растворе лекопаина, поверх которой [вкладывалась повязка. После 2-3 процедур на раневую поверхность ¡замен примочек накладывалась неповреждаэдая'гралуляциошую ткань, вежепрпготовлеияая лекопаиновая мазь. На одну процедуру расходовалось 14-70 ргр и препарата, в зависимости от площади раны и вы-аженности гиойно-воспзлительншс процессов.

В динамике репарации ран наблвдения велись за общим состоянием больных,состоянием картины крови,течением раневого процесса,гистологической картиной раневого содержимого.температурной реакцией околораневых зон по сравнению с симметричной противоположной областью, кислотностью раневого эксудата.

Методика ДДФ папаина и общая характеристика бальных.Под наблюдением и лечением находились 418 больных с гнойно-воспалительными заболеваниями и 37- с травматическими повреждениями периферической нервной системы (ПНС).Из этого числа больных 121 лечились ДЩФ 0,5$ р-ром папаина из среды 20$ ДГЛСО (первая группа) ,49-ДЦФ 0,5$ р-рш папаина (вторая группа),55-0,5% р-ром папаина в виде местной аппликации и орашения (третья группа), ЗЗ-получили только ДЦТ (четвертая группа),а остальные 160-лечились общеприняты™ методами (пятая труп па) .Больше с повреждениями ПНС лечились ДДФ 0,5$ р-ра папаина.

ДДФ папаина проводился с помощью аппарата СНИМ-1 по вышеуказанной методике.Курс лечения обычно состоял из 6-8 процедур.

Методика Фоно^ореза папаина и об»дая характеристика больных ^Под наблюдением и лечением находились 153 бальных с различными гнойно-воспалительными заболеваниями,из которых 72 лечились фонофорезсм папаина,а 81-общепринятыми методами.Для проведения фонофорева лапая на готовилась мазь следующего состава:папаин-1,О,ДМС0-20,0,ланолин-вазелиновая основа-80,0,После обработки гнойных ран антисептиками указанная мазь тонким слоем наносилась на окат ораневуга зону на расстоянии 1-2 см от краев раны ш на поверхность воспалительного инфильтрата .Для фонофорева (ФФ) папаина использовался аппарат УТП-1. Ш проводился в непрерывном ражим® но лабильной методике при интенсивности УЗ-0,6-1 Вт/см^,частот@-830 кГц и длительности 5 мин.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛБДСВАШЙ

3.1. Пластичность поврезденного зрительного нерва и сетчатки глаза при энзимотерапии Состояние восстановительных процессов поврежденного зрительного норна и других тканей в условиях энзиглотерапии. Опыты показали, что локопаин в дозе I мг/кг при введении с интервал ал 48 часов ¡шляется оптимальным, обеспечиващим условия наиболее физиологичного восстановления поврежденных тканой у лягушек.При этом затавле-нио происходило первичным натяжением,без формирования грубых рубцои.как зго шел о место у контрошилс животных.

'а/1;!1:?р!.ф1К1ИС№:итмчеоы;о пссяодопшюя показали,что у лягушек,

получавших лекопашотерашта, спустя 35 дней после перерезки зрительного нерва световоо раздражение глаза приводило к возникновению ВП в шеи- и контралатералышх зрительных мозговых структурах.Однако амплитудные величины этих ответов оказались,в среднем, в два раза меньше таковых,регистрированных у интактных шшотннх, а ЛП несколько удлиненными.Спустя 50-60 дней ВП среднего и конечного мозга по своим амплитудно-временным характеристикам не отличались от ответов, полученных у интактных лягушек.У контрольных особей к этим срокам в зрительных мозговых структурах ВП в отвот на световое раздражение глаза не возникали.

При палнш внутрноболочечном размозжении зрительного нерва у лягушек наступало исчезновение подвижности глаза и век.Елвотныа с повроздзнием обоих зрительных нервов теряли способность ориентации л пространстве,задевали на пути установленные предметы,не убегали от преследования.Лягушки,получавшие энзимотераптэ,в отличие от контрольных, спустя 35-60 дней свободно ориентировались в пространство, легко обходили установлешшэ на пути движения предметы,стремились в темноту,убегали от преследования. Отмечалось полное восстановление подвижности и светочувствительности глаз. Изучение двигательно-за-щитных условных рефлексов показало,что у лягушек,получавших энзимо-торалию,спустя 2-3 мес.удавалось выработать условный рефлекс на красный свет.тоэда как у контрольннх-в эти сроки но выявились какие -либо признаки зрительного восприятия.

Злоктрофизислогические исследования показали,что двухсторонная впутриоболочечная перерезка (размозжонием) обоих зрительных нервов всегда приводила к псянсму исчезновению ВП в средаем,прсмэжуточиом и конечном мозге лягушки в отвот на световое раздражение глаза.Они не возникали и через 15 дней.Спустя 40-60 дней у лягушек подопытных групп со всех уровней зрительной'системы регистрировались выраженные ВП,тогда как в эти и более поздние сроки у контрольных лягушек зрительные мозговые структуры продолжали оставатьоя еще "немили". Анализ ВП выявил некоторое удлинение ЛПи уменьшение амплитуды ответов.Так,если ЛП ответов среднего мозга у штктнше лягушек составлял в среднем 45,2±Т,9 мо, а амгиитуда-200,,5 мкВ,в промежуточном мозге-83,1±2,7 мс и 175,2±13,7 мкВ.в переднем мозге-Ю8,1±1,9 мс и 145,7±12,5 мкВ,соответственно,то спустя 45 дней поело перерезки зрительного нерва и энзимотерапип величина Ш ВП сократилась ло 69,5±0,3 мс-в среднем,120,8*0,1 мс-в прсмеяуточясм и 165,Т±0,1 мо-в конечна,1 мозге, а величина амплитуды ответов доходила до 145,

9,7, I20,I±I7,5 и I25,4±0,7 мкВ,соответственно.:/ лягушек,получавших лекопаин в комбинации с трипсином,.эти величины равнялись 65,2 мс, 200,1 мкВ-в среднем,105,5 мс и 175,4 мкВ-в промежуточном и 140,7 мс, Г75,9 мкВ-в переднем мозге «Спустя 2,5-4 ыес. после размозжения зрительного нерва и энзимо^ерапии ВП зрительной системы становились уже стабильными, по форме и аишштудно-временнш характеристикам приближались к нсрю.У контрольных животных (без лечения) к 75-му дню ВП в зрительном мозге в ответ на световое раздражение глаза не возникал!",а к IIO-му дню с разных уровней зрительной системы удавалось регистрировать нестойкие,слабо выраженные ВП,которые исчезали при повторных стимуляциях и вновь возникали лишь после темновой адаптации.

Морфологические исследования,проведенные спустя 10-15 дней,у всех групп животных котазапи отсутствие восстановлена ■ структуры поврежденного ярительного нерва.У лягушек,получавших лекопаин,а так-35в леконаш и трипсину эти сроки размозженные концы нерва быки разобщенными,без наличия рубцовой ткани между ними.У лягушек,получавших один трипсин,свободная между культями поврежденного нерва область частично,а у контрольных-полностыо оказалась заполненной воспалительным инфильтратом.Спустя 40-60 дней у лягушек,получавших ле-копаин на месте повреждения наблюдалось слияние центрального и периферического отрезков зритального нерва и наличие весьма нежного руб-ца.Ла местах наиболее разряженного рубца наблюдалось тотальное прорастание волокон оптического нерва через зону повравдения.Близкая картина наблкдалась и у лягушек,получавших леколаин в сочетании с трипсином. У лягушек,получавших только трипсин.участок повреждения был окружен Рубцовыми тканями и отмечалось только частичное прорастание волокон оптического нерва через зону повреждения, а у контрольных животнцх-наличие мсшного соединительнотканного рубца,полностью препятствующего прорастанию оптического нерва от заглазной культи в' оторону мозгового отрезка .находящегося в состоянии дегенерации.

К 75-100 дням у лягушек,получавших лекопаин, или лекопаия в сочетании о трипсином,одновременно с восстановлением функции зрения, установленной в поведенческих наблюдениях и алектрофизиалогических исследованиях, наблвдалось восстановление нормальной структуры поврежденного зрительного нерва, а у контральных-^пыгь частичное прорастание небольшого катачботаа волокон через мощный и ллопшй рубец, аапоянящий поврачэдешпй участок нерва.

Анализ проведенных данных позволяет заключить,что всиокна нов-рождшшсто ситлчиского нерва у лягушек ойлацал/г определенной pero-

неративной способностью.Однако более быстрый и бурный рост грубой и плотной рубцовой ткани преграждает пути их роста.Протеоллтичес-1Ш9 энзимы ингибируют рост соединительной ткани,благодаря чему ро-генерирумцие аксоны оптического нерва свободно преодолевают зону повреждения,прорастают в сторону зрительных мозговых структур и восстанавливают морфологическую,следовательно и функциональную целостность зрительной системы.

Влияние папаина на восстановительные процессы поврежденной сетчатки глаза у кроликов.После лазерного облучения глаза наблюдалось повреждение слизистых оболочек,склерн»радужной оболочки,хрусталика, стекловидного тела и сетчатки.В стекловидном тело появились очаги обширного помутнешш.Через 3 дня обнаруживалась выраженная воспалительная реакция и отек слизистых оболочек,роговицы,склерн о их помутнешгам и резким суженном зрачхса.Спустя 10-15 дней у кроликов, получавших энзшотерапш!, наблюдалось восстановление прозрачности стекловидного тела и рассасывание поврежденного хрусталика. 7 контрольных кроликов хрусталик и стекловидное тало продолжали оставаться мутными,что имело место и в более поздние сроки исследования, наблюдалось дальнейшее развитие воспалительных процессов.

При офтапьмоскопировании глаза (по возможности), в первые два дня после лазерного облучения,область поврежденной сетчатки опытных л контрольных кроликов была резко гипорекирозана с множествен-щ"1 кровоизлияниями и инъецированием сосудов,наблюдалось отслаивание сетчатки с очагами некроза.На 7-10 дни в зоне облучения определялись обширные разрушения кровеносных сосудов сетчатки и ее слоев, очаговые кровоизлияния,которые более ярко были выражены в оетчатке контрольных кроликов .На 20-й донь у кроликов, получавших знзимотерапию,наблюдалось некоторое,а к 50-60 дням-зкачительное сужение поврежденных участков сетчатки о восстановлением сосудистого рисунка.В контрольных опытах в эти сроки вся поверхность пев-, реэденней зоны сетчатки и смежных областей была лишена сосудов п представляла собой гшогепный участок.

Эяектрофязиалогическае исследования показали,что в пэрвые дпи после лазерного повреждения сетчатки наблюдается полное подавление ЭРГ и отсутствие ВП в зрительной коре.Начиная с 10-го дня у тавотных,получавших знзимотералию,начинается постепенное,а к 45-*ту дао-полное восстановление компонентов ЭРГ и ВП.У контрольных кроликов к 45-му дню ЭРГ продолжала оставаться подавленной,а ВЦ в зритель-нем мозге не возникали.

Применением условнорефлекторной методики исследования у кроликов удавалось выработать устойчивый условный рефлекс на белый, красный и зеленый свет,У интактных кроликов условный рефлекс на с лый свет вырабатывался после 255-300,заленый-500-550,а красшй-500-600 сочетаний условного и безусловного раздражителей.У яивот-получавших энзимотерапшэ, значения этих величин колебались в преде лах 350-400 на белый,600-650-3еяеный и 700-750-красный свет,а у контрольных - 560-800, 700-800 и 800-300 сочетаний,соответствен!«

Анализ приведенных данных позволяет считать,что: 1,лекопаинс терапия повреадешшх лазерным облучением светопроводящих сред и сетчатки глаза кролика в определенной степени иншбирует отечно-Е целительные процессы,ускоряет их стихание и спустя 45-50 дней прк водит к значительному функционально-структурнсму восстановлению поврежденных структур; 2.В противоположность литературным данным, можно полагать,что сетчатка глаза кролика обладает значительно вь раженным цветовым зрением.

Влияние папаина на пластичность поврежденного зрительного не ва у кроликов.ЗлектросЕизиологдческие исследования показали,что у контрольных кроликов (без лечения) в течение 2-х и более месяцев после повреждения обоих оптических нервов ВП в зрительной 'коре,в ответ на световое раздражение глаза,не возникают.У кроликов,получавших энзшотерапшо.спустя 50-70 дней после повреждения (размозд ш1р.) оптических нервов, наблвдалось некоторое, а 80-90 дней-значи-тельное восстановление амплитудно-временных характеристик ЭРГ и ч тичное-ВП зрительной коры.

Гистоморфологическяй анализ поврежденного зрительного нерва показал,что у кроликов,получавших папаинотерапию,пространство меж ду культями к 20-му дню сзободно от рубцовой ткани и воспалительного инфильтрата,а к40-му дню отмечается сближение концов нерва. Спустя 3-4 мее.наблвдалось заполнение свободного пространства меж культями нерва растущими аксонами и их проростание в тошцу центральной культи нерва.У контрольных крыс во все сроки исследована наблюдался распад аксонов и заполнение межкультевого пространства соединительнотканным рубцом.На основании полученных данных,можно полагать,что папаин в доза 10 мг/кг,введенный в область повреждения в виде дарабульбарных инъекциЕ,избирательно действуя на кодга ген соединительной ткшш,вызывает оо деструкцию и, тем самым,зов-диет оптимальные услошш для роста поврежденных аксонов зрительно го нерва.

3.2. Пластичпость поврежденного седалищного нерва у крыс в условиях воздействия энзимолазеротерапии

Пластичность поврежденного седалищного нерва у крыс в условиях воздействия лазерного излучения и лекопаинд. После полной перерезки седалищкого нерва у крыс возникали локомоторно-чувстви-тельные нарушешл-свисание лапы,скричиваниэ пальцев.неспособность опираться на конечность при передвижениях.Спустя 10 дней наблюдалась частичная компенсация функций пораженной конечности:жпвотныо с большим трудом опирались на нее внутренней стороной лапы.У контрольных крыс,в отличив от опытных,конечность била цианотичная и отечна,а к 30-му дни на разгабатачьных поверхностях суставов образовывались трофические язвы.Эти нарушения сохранялись в течение 6 мес. и более.В отличио от контрольных,у крыс.получавших лазеротерапию,а также лекопаинолазеротерапшэ,спустя 1-3 мес.,пораженную конечность невозможно было отличить от здоровой-животные свободно опирались на нее,трофические нарушения отсутствовали.Элоктрофизио-логические исследования показали,что у экспериментальных крыс в эти сроки отмечалось восстановление проводящей функции поврежден--пого седалищного нерва,о чем свидетельствовало возникновение Ш в соматосенсорной коре при электрическом раздражении седалищного нерва ниже места перерезки.У опытных крыс порог возбуждения составлял 0,3-0,5 В, Ш Ш. - 20-23 мс,у интактных - 0,25-0,5 В и 15-17 мс,соответственно.

Макроскопические исследования при забоэ животных показали отсутствие заметного рубца у экспериментальных и наличие плотного, спаянного с подлежащими тканями, рубид у контрольных групп крыс.Изучение микроструктуры перерезанного нерва,спустя 3 мес., показало, что у крыс опытной группы наблюдался рост аксонов от центрального отрезка пэрла через участок повреждения по ходу периферического нерва. У контрольных крыс к этим срокам регенерация аксонов носила ограниченный характер вследствие бурного формирования Рубцовых тканей, мешающих аксстальному росту.

Приведенные данные позволяют считать,что лазеротерапия и,особенно, лазеротерапия в комбинации с лекопаияотераплей создают оптл-мально-<5яагоприятпые условия для функционально-структурного восстановления периферических перзов при површхдони ас.

Пластичность поврежденного седалтдного яорва у ,??.усло-возлеДстппя различных яоз коллализина я лазерного излутзпря^

В первые дни после размозжения седалищного нерва у крыс всех групп возникало нарушение локоьюторно-чувствктельных функций-свисание лапы, волочение конечности при перемещениях.К 10-му дню крысы,получавшие К в дозе 10 КЕ,а также К в сочетании с лазеротерапией (ДТ), опирались на поврездЬпную конечность при стоянии и передвижении. Эти же явления,но в меньшей степей.,набладались и у крыс,получавших К в дозе 5 КЕ и 2,5 КЕ.Крысы контрольной группы к этому времени при передвижениях волочили пораженную конечность,которая была отечна,цианотичка,со снижением температуры на 0,25±0,06°С, а у экспериментальных - 0,21±0,05°С.

К 25-му дню функции пораженной конечности у контрольных крыс оставались ыарушенныш.Конечность была цианотична и отечна,на пальцах и разгибательных поверхностях суставов образовались трофические язвы,температура на 0,25i0,05°c ниже интактной.У крыс опытных сери! пораженная конечность внешне не отличалась от интактной.хотя лаяа слегка отставала при передвижениях,чувствительность бала восстановлена, а температура снижена на 0,15±0,05°С по сравнению с интактной.Электрофизиологические исследования показали,что раздражение седалищного нерва, дистальнее места повреждения, и моторной зоны коры импульсами тока интенсивностью 1-20 В и длительностью 0,5 мсек не приводило к возникновению Ш и ЭКГ. ¡(Макроскопические исследования показали,что у контрольных крыс па месте разреза кожи формировался рубец,кожа била спаяна с подлежащие! тканями,мышцы рубцово изменены,а седалищный нерв в месте размозжения утолщен и ао-ружен рубцовой соединительной тканью и спаян с ней.У экспериментальных крыс кожный рубец отсутствовал,седалищный нерв был свободен от спаек и рубцоЕых изменений.Изучение микроструктуры показало, что у контрольных крыс в зоне повреждения иорв бил утолщен,склеро-аирован и спаян с окружатдеш ткяшшй.Наблюдалось проникновение оболочечной грануляционной ткани в зону повреждения, которая была заполнена воспалитаяькым инфильтратом.У крыс,получавших К (10 КЕ и б КС),а также К (10 КЕ) с ЛИ,пространство между концами нерва былс свободно от инфильтрата я заполнено растущими аксонами.

Через 45 дкой у контрольное лшотннх наолвдалась атрофия шищ и небольшие трофические нарушения,конечность частично провола-квдллисъ у. гм-ставама при ход1.бе.Ятк явления,хотя и d меньшой степени .ипйлгщ^лиох н на a IIC «ни.К 60-;лу дню отмечалось полное восстановление чувствительности.У опытных крыс (получагших К 10 Кй и К с ЛТ),к '15~(Ю-му дням и далее,в порайонной конечности движения

и чувствительность были восстановлены в полном обт.еме.

Елоктрофншюлогические исследования на 40-60 дни после повреждения седалищного нерва показали, что БП у контролышх крнс возникали пря интенсивности стимула 4 Б в виде отрицательного колебания с амплитудой 45,7-2,5 шсВ,длительностью 45,1-2,1 мс и ЛП-38,5 0,5 мс.При иятепснвности 10 В возникали Ш с положитэльно-от-ргшдтольнкл колебанием (ЛП - 25,1^0,5 ыс.амплктуда положительной волны - 35^2,3 !лкВ,отрицательной -112,3^3,1 мкЗ.длительность отрицательной вешни - 30,3±1,3 мс).ЭЕГ седалищного нерва контрольных животных возпикала при интенсиБности стимула 12 В и состояла только из паяонигальгю-отрицательпого колебания без дополнительных компонентов с амплитудой положительного колебания 55,3^3,5 мкВкотрицательного - 64,1±3,7 мкВ,а при 15 3 - 73,^2,7 мкВ и 115,317,1 ыкВ, соответственно.У оксперименталмшх животных (получаЕших К 10 КЗ и Г. ЮКЕ с ЛТ) наблюдалось стойкое восстановление ЕЛ соматооонсорной области коры и ЭНГ повровденного седалищного нерва.У опытных, крыс стойкие Ш регистрировались при интенсивности 2 Б, а у интактных -I В. ЛП ВП прп интенсивности стимула в 2 В шлея величину 30,Я±0,3 мс при раздражении поврежденного и. П,9±0,2 мс - лнтактнего седалищного нерва,амплитуда положительной волны составляла 20,з£1',7мкВ. К'40,4±2,7 мкВ,длительность - 12,3±1,7 мс и 13,7£3,0 мс,отрицательная волна тлела амплитуду 91,2£2,7 мкВ и 202,0£3»7 мкВ,длительность — 32,7±3,7 мс и 28,1-1,9 несоответственно. Подобная динаг,лика наблюдалась и при регистрации ЭНГ седалищного нерва,которая начинала регистрироваться при интенсивности стимула 10 В в повраж-денном и 5 В в интактном нервах .ЛП ЭНГ при интенсивности 10 В составлял 8,9£о,3 мс как в поврежденном,так и в иатактногл нервах,амплитуда положительной волны - 39,б£5,7 мкВ и 175,^2,7 мкВ,отрицательной - 132,^,7 мкВ и 165,0^3,7 !лкВ, общая длительность - 43,Й 0,9 мс и 49,3±1,8 мс, соответственно.

Анализ приведенных данных показал,что спустя 45-60 дней после повреждения седалищного нерва и воздействия знзимолазэрогерапи-ей наступает полное восстановление моторно-чувствительных нарушений,а также значительное восстановление амплитудно-временных характеристик Ш и ЭНГ,предельное восстановление которых,б отличие от контрольных крыс.наблвдалось через 3 мое.

Морфологические исследования показали,что у крыс контрольной серии в зоне повреждения наблюдалось значительное утолщениз,грубое склерозирование седалищного нерва с утолщением оболочка и проникновением соединительнотканных тяжей в структуру нервного ствола.В

периферически.! отделе нерва аксоны вблизи Рубцовых тяжей были гомогенизированы, частично расплавлены,их контуры не выявлялись.Растущие от центральной культи аксоны часто образовывали булавовидное утолщение, по типу ампутационной неврош.У экспериментальных крыс наблвдалось псиное восстановление морфологической целостности седалищного нерва с некоторым его утолщением в зоне повреждена

Исследования,проведенные к исходу 3-х мео. после повреждения,установили отсутствие каких-либо локомоторно-чувствительчых нарушений у крыс,получивши энзимолазеротерапию и наличие атрофии мышц и локомоторного дефицита (проволакивание лапы) у контрольных Изучение ЕЛ у опытных крыс показало,что они одинаково хорошо возникали как в правой,так и в левой соматосонсорных зонах коры мозга при интенсивности стимула 1В и ниже и имели вид положительво-отрацатешьного колебания.ЛП ВП при интенсивности стимула I В составляли 9,9±0,3 мо в правой и 10,3±0,3 мо-в левой соматосенсорных областях коры,амплитуда положительной волны - 28,б£з,7 мкВ и 56,14,7 мкВ.длительность - 16,7±0,3 ыс и 15,2^0,7 мс,амплитуда отрицательной волны - 182,0*13,7 мкВ и 143,0*14,3 мкВ,ддительность -38,1*1,3 мс и 30,3*1,3 мс,соответственно.Изучение ЭНГ также показало, что она одинаково возникала как в поврежденном,так и в нн-тактном седалищных нервах.Однако ее фор,1а и компонентный состав в поврежденном нерве (слабая выраженность второго положительно-отрицательного колебания и последующих осциллядай) отличались от ин-тактного.ЛП ЭИГ при интенсивности стимула 10 В и длительности 0,25 ыс составлял в поврежденном нерве 8,1*0,3 мс и 9,3*1,2 мс-в ин-тактном,аш1литуда положительного колебания составляла 17,1*0,4чкВ и 84,1*1,8 мкВ,отрицательного - 196,5*7,3 мкВ и 251,3*3,2 мкВ при общей длительности 13,2*2,7 мс и 13,1*2,7 мс,соответственно.Элев-трофиэиологические исследования, проведенные спустя 90-110 дней после повреждения,показали восстановление проводящей функции поврежденного седалищного нерва до нормы.

Морфологические исследования выявили нормализацию структуры седалищного нерпа в зоне повреждения,которая наилучшим образом проявлялась у крнс,получивших К (10 КЕ) и К (10 КЕ) с Л'Г.В контрольных огштах.в эти сроки,отмечалось утолщение оболочек нерва в зоне повреждения с явлениями фиброза и врастшшя рубцовой ткани в толщу норшюго ствола.Центральная область поврежденной зоны инел-но кмола гит плотного рубца.

Анализ морфологического исследования rce.ro экепоршлонтально-

го материала позволяет сделать следуыцие обобщения:при воздействии К (10 КЕ) л К (10 КЕ) с IT в поврежденном седалищном нерве отечно-воспалительные явления первых дней выражались но так интег.-сивно.и отмечалось быстрое сближение концов размозженного нерва.В центральном участке начиналось утолщите нервных вэ локон с последующим их бурным ростом в сторону дисталыюго отрезка.Через 30 дней растущие нсрв1ше волокла заполняли поврежденную область,имели несколько беспорядочное распределение и прорастали чорез центральную зону в толщу периферического отдела нерва.В дальнейшем рост нервных волокон принимал сплошной характер ц, спустя 90-110 дней,наблюдалось восстановление нормальной структуры седалищного нерва.Зта данные свидетельствуют о положительном влиянии коллализипо-лазоро-терапии на динамику восстановления морфологической целостности поврежденного седалищного нерва и согласуются с результатами,полученными во время клинических наблюдений и злектрофизиологичоекдх исследований.

3.3. Пластичность поврежденного спинного мозга у крыс при энзимолазеротерагаш

Клинические наблкщендя через 24 часа после латеральной геми-секции спинного мозга у более чем 80$ животных выявили полный паралич задней конечности со стороны повреждения с сохранением чувствительности^ в противоположной лапке - выпадение чувствительности и сохранение моторики (синдром Броун-Секара).У остальных крыс наблюдалось выпадение моторной функции обеих лап,но на иктакг-ной стороне все же отмечалось частичное сохранение моторных реакций. К исходу вторых суток у животных с полным параличем левой задней конечности появились симптомы слабости и в правой.На 5-ые сутки отмечалось полное восстановление моторной функции интактной конечности у опытных и небольшой дефицит-у контрольных животных.У опытных крыс наблюдалось значительное восстановление движений в поврежденной конечности (способность держать тяжесть тела,совершать хаотичные быстрые движения и возможность сделать 1-3 шага,значительное расслабление скрюченности пальцев).В условиях усложненного тестирования (г,ale K.at al,, 1985),т.е. при свисшши задней части тела с опоры, наблюдалась безрезультатлвная попытка подтянуть левую лапу на опору.Температура внутренних поверхностей бедер была ниже но{ыйл1.ной:слепа-35,60с, спраяа-оо,30С, темпи[«тура тела -38,3°С.У контрачьних кипоткик восст&нопмнио моторной Функции

ней конечности оо стороны гемисегацш не наблюдалось.

К 15-20 дням более 70$ крыс опытных групп свободно пользовались задними конечностями,расположение лапки и пальцев было почти нормальным.При свлсании задней части тела с опоры наблюдался энергичный рефлекс подтягивания,но крысы сначала ставили на опору правую лапу, а затек,с некоторым затруднением,левую.У большинства животных наблюдалось почти полное восстановление чувствительности (болеЕой и тактильной) правой лапы.У контрольных крыс наблюдалось ненормальное расположение пальцев и лапы при перемещениях,приволакивание конечности после нескольких шагов.Болевая и тактильная чув ствительность левой лапы била сохранена,а в правой наблюдалось вое становление болевой чувствительности при сохранности тактильной. У опытных крыс полное и стойкое восстановление моторики и чувстви- • тольностл пораженной конечности наблюдалось к исходу 30 суток,а у контрольных - 2 месяцев.Спустя 12 мес у части контрольных крыс пое торно возникал небольшой двигательный дефицит (частичное приволакивание лапы с некоторой скрюченностью пальцев).

Анализ полученного материала показал, что у крыс после латеральной гемисекции спинного мозга и воздействия энзимолазеротзра-шш,процессы восстановления локомоторно-чувствительных нарушений, по сравнению с контрольными наблюдениями,протекали в 1,5-2 раза быстрее и балл более стойкими.

Вышеуказанныо результаты получили свое подтверждение и в оле: трофпзпойогичеекпх исследования,усредненные результаты математпчес кой обработки которых показали,что амшштудно-времешшо характерце тики ВП ссматосенсорной области коры мозга и ЭНГ седалищного нервг у экспериментальных крыс имели близкие к норме значения к 30-60 дням после гемисекции СМ (для Ш:при интенсивности стимула 2-ЗВ у крыс,получавших К,Л! составлял 12,0±0,6 мс,амплитуда от пика до ш ка - 483,7±27,1 мкВ; К и ЛТ - П,5±0,9 мс и 457,0±26,9 мкВ; К.пшк ин и ЛТ - 10,4±0,7 мс и 463,5*36,3 мкВ,соответственно.Для ЭНГ: при интенсивности 10 В у крыс,получавших К,ЛП составлял 7,5^1,2 мс,аь шштуда от пика до пика - 392,7±16,0 мкВ; К и ЛТ - 7,0±0,7 ыс и 342,7±И,0 ыкВ; К,папайя п ЛТ - 6,8±0,3 мс и 497,7±26,5 мкВ .соответственно) и стабилизировалась к 90-110 дням (для ЕП:при интенеш ности 2-3 В у крыс,получавших К,Ш составлял 9,7±0,3 ыо,амплитуда от пика до пика 562,7±34,4 мкВ; К и ЛТ - 8,0±0,2 мс и 482,7±31,5 мкВ; К,папайи и ЛТ - 8,5±0,1 ыс и 437±28,3 мкВ .соответственно. Дщ ЗНГ:прп интенсивности 10 В у крыс, получавших К,ЛП составлял 7,2± О,9ыс,амплитуда от пика до пика 4I2,7il5,7 ыкВ; К и ЛТ - 5,6±0,&лс

[ 382,0*11,3 мкВ; К.папаин и JIT - 5,6*0,4 мс и 437,7*27,3 мкВ.со->тветственно),тогда как у контрольных животных в указанные сроки иш были вариабельными,лабильными,возникали при более сильных ин-■енсивностях стимуляции после длительного перерыва ыезду импульсдаи.

Морфологические исследования,проведанные на 5-ый день повреж-;ения,у контрольных крыс выявили расплавление мозгового вещества в оне гемпсекцпи с кровоизлияниями,отеком,полнокровием сосудов.гли-льной пролиферацией и гипертрофией нервных клеток,а у зкепершен-'альных - ускорение нроцессов очищения зоны повреждения от неяиз-еспособных тканей,слабую выраженность отеков,подавление роста оо~ дапительной ткани с одновременной активацией кл от очной пролифора-ди.На ЗО-mt день у крыс контрольной серии наблюдалось склерозиро-ание и утолщише оболочек спинного мозга с врастанием грубой грану-яционной соединительно]! ткани в мозговое вещество.Рост нервных во-окон.в основном,отмечался по краям повреждения.У крыс экспернмоя-альных серий л области повреждения наблвдалось проникновение неких .соединительнотканных тяжей оболочки в мозговую ткань.Растущие толщенные нервные волокна свободно проходили через зону повракде-ия и заполняли ео.На 90-120 дни исследования у контрольных крыс цновременно с грубым рубцеванием обнаруживались чистозныэ измене-ия.Рост и прорастание грубых толстых пучков беспорядочно располо-ешшх нервных волокон происходили вблизи от интактной полсешш пинного мозга.У крыс,получавших энзимотералию и энзимолазеротера-ию на фоне небольшого вклинивания утолщенных мозговых оболочек в кань спинного мозга¡отмечалось некоторое разрожение мезговой тка-а и рост утолщенных,извитых нервных волокон.свободно проникающих квозъ нежные соединительнотканные пучки.

С цельа болзе точного количественного анализа структур пов-звденного спинногс мозга нами был применен мор^юметричеокий метод зследования.ко'Горь.-а вался на 3-х крысах,пелучкншх К и 3-х кон-рольных, спустя 3,5 мес, посла гомиезкцпи спинного мозга между Tg-2 позвошеами.Усредненные результаты ыоррометричаскоги иоследоЕа-ал по изучения объема болого и серого веществ краниального и кау-алыюго отдало в G!i (данной I шл от центра гадисекции) показали, гге ля билого вещества краниального отдола правой (и1|т£.ьтцой)по;ютишы И СООТ'ДВЛЯП 1,143 у CMIU'f'HiX крнс II 1,066 ММ1 - у контрольны/, леъсй - 0,515 мм3 и 1,143 мм", соответственно; да; серою ьадест-правой ничогашы - 0,4Ь2 мм3 у опытных крыс и 0,206 мм3 - у кон-рольшх.п лепий-О,З12мм3 и 0,074 Н'Л3, соотвотсттлшо.Об'ькп болы'О

вещества каудального отдела правой половины составлял 1,109 мм3 у . опытных и 1,139 мм3 - у контрольных крыс,а левой - 0,623 мм3 и 0,176 мм3,соответственно;серого вещества правой половины - 0,450 мм3 п 0,169 мм3,левой - 0,351 ш3 и 0,123 ш3,соответственно.11ряводенныо данные свидетельствовали о том, что объем белого и серого веществ в краниальном и в каудальном направлениях от зоны повреждения почти в 1,5 раза больше у опытных крыс, чем у контрольных. У контрольных крыс сероз веществг в срезах зоны повратодепия почти отсутствовало, тогда как у экспериментальных оно занимало значительную площадь,пос-тепонно увеличиваясь в краниальном направлении,а площадь белого вещества как у экспериментальных,так и у контрольных крыс на интактной стороне была в 2-2,5 раза больше,по сравнению с белый веществом пов-регдонной стороны.У контрольных крыс в срезах центральной зоны ге-. мисекции отмечалась наименьшая площадь белого вещества.

Морфологический анал1!з поперечных срезов центральной зоны темпе екции спинного мозга контрольных крыс выявил наличие значительной, а у экспериментальных - частичной гипертрофии интактной половины со смещением центрального канала в область повреждения.У опытных крыс в сером веществе,вблизи центрального капала,на интактной стороне наблвдаллсь гипертрофированные нейроны,а поврежденной - небольшое количество серого вещества,гипертрофированные и сморщенные нейроны. Белое вещество в зоне ге,мисекции было значительно восстановлено.Отмечалось неглубокое прорастание оболочечного рыхлого соединительнотканного рубца в зону повреждения.В контрольных наблюдениях,в sono центрального канала, определялись огромные касты.Серое вещество в левой половина отсутствовало,белое сохранялось участками.Вся остальная часть серого и белого вещества была замопопа плотным соединительнотканным оболочечным рубцом.

Исследования топкой и ультратонкой структур регенерировавших тканей поврезденного спинного мозга,проведенные спустя 4,5 мес.после внзимолазеротерапш, показали, что у контрольных крыс в зоне гешеек-цки белое вещество,в основном,замещено фиброзной соединительной тканьг.а у крыс, получивших К в сочетании с M и,особенно,в сочетании с папаином и ЛИ,определялось равномерное,достаточно плотное распределение аксонов, имещих сравнительно одинаковый размер с хороазЗ ьаелпнизацаей.Анализ електронномакроскопической картины белого ве-цестаа Ш показа- ■ сравнительную однотипность регенеративных процессов у завотных различных серий,однако,у крыс,подвергнутых внзимола-верот0рщган,8тн процессы протекали значительно интенсивнее.

Изучение влияния гоыогената СМ крысиного эыбраона л ЛИ на об-

менно-восстановительные процессы у хордотомированных крыс показало, что одновременно с возникновением параплегии,большие изменения возникают и в обменных процессах,в частности,резко изменяется активность АТФ-азы,ацетилфосфатазы,гликогенфосфорилазы,паранитроф еншг-фосфатазы и других энзимов,принимающих активное участие в энергетическом обмене репаративных процессов .Под влияниал гомогената эмбрионального СМ и,особенно,его сочетания с Ж у опытных крыс,в отличие от контрольных,наблюдалась значительно быстрая нормализация активности указанных ферментных систем,а спустя 3-4 мес.- восстановление локомоторно-чувствительных нарушений.

3.4. Динамика пластичности поврежденных тканей под воздействием протеолитических ферментов растения carica papaya и их совместного применения с физическими факторами

Динамика репарации окспериментальннх ран у кроликов под воздействием лекопаина.У кроликов экспериментальных груш (получавших лекопаин или лекогхаин совместно с антибиотиками) заживление ран обычно протекало без внешне заметных отечно-воспалительных явлений и спустя 3-4 дня после лечения происходило полное очищение раневой поверхности от некротических тканей и гнойного эксудата.На раневой поверхности,особенно по ее периферии,отмечался рост свежей грануля-циошюй ткани с уменьшением раны в среднем на 25-30$.У животных контрольных групп (без лечения или при лечении общепринятым методами) в этот период наблюдалась значительно выраженная воспалительная реакция с отечными явлениями,раневая поверхность была покрыта некротическими лсанями и гнойным эксудатом.На 5-6 день у опытных кроликов наблюдалось сглаживание раневой поверхности с уменьшением размеров на 50$.В контрольных опытах,в эти сроки,раневая поверхность была покрыта гнойным эксудатом и струпом темнокоричнезого цвета,с уменьшением ее размеров в среднем на 25-30$.

К 11-12 дням лечения у экспериментальных групп кроликов вся раневая поверхность обычно покрывалась эпителиальной тканью с заверяет! ем раневого процесса и формированием нежного,малозаметного рубца.Б контрольных наблюдениях завершение раневого процесса происходило к 17-10 дням при лечении ран обычными методами я 19-21 дням -при самозаживлении с формированием грубого и плотного рубца.

Изучение "раневых отпечатков" по методу,прзддожекисиу Пакроа-скоИ МЛ. и Макароны:,1 М.С. (I94¿) л оказало, что при локопаннотерапии

или лекопаино-антибиотикотерапип рая наблюдается сравнительно быстрое уменьшение и исчезновение количества псишморфноядерных нейтрс филов (на 7-й день-у опытных и 14-й - у контрольных кроликов),а тг же раннее появление моноцитов (макрофагов) и фибробластов.

Определение pH раневого эксудата выявило наличие умеренного ацидоза (рН=6,8-6,9) у кроликов,раны которых лечились лекопаияом или лекопаином в сочетании с антибиотика!®,и выраженного ацидоза (рН-6,2) - у контрольных.Умеренно выраженная кислотность в ране,ве роятно,способствует определенным защитно-приспособительным реакциям, направленным на ускорение излечения раны,а выраженное ее сниже-!ше свидетельствует об усилении инфекционно-вослалитаяьных процессов (Руфанов И.Г., 1957; Какаев М.Ф., 1970; Фенчин K.M., 1979 и др.

Электротермоыетрические исследования показали, что теглперату ра околоранэвых зон у кроликов экспериментальных групп на 0,3-0,6°< выше температуры симметричной противоположной области, а у контрольных - I,5-1,7°С.Выравнивание температурных значений окслораневых зон п соответствующих сишетричных им участков у опытных групп кроликов происходило к 6-9,а у контрольных - к 12-15 дням повреждения.

Влияние ДДТ на активность падаиш.Одной из задач настоящей работы была разработка методики совместного применения папална сДД Не исключено,что при совместном использовании электрического тока е фермента,последний может разрушиться под воздействие?,! ИТ.С этой целью наш изучено влияние ДДТ на активность папаина.Исследования, проведенные при помощи камеры Улащлка В. (1976),показали,что яапа-ин под воздействием ДЦТ,в определенных условиях (при наличии цало-фан0Е0й прокладки между лекаре твешшглз прокладками и электродами), в течение 30 мин экспозиции не разрушается,а его перенос через мембрану резко возрастает.Количественные исследования выявили наибольшую концентрацию палаипа в жидкости боковых ячеек камеры при исполь зовапии ДДТ,модулированных короткими периодами с изменением полярности через 5 мин при силе тока 5 ыА.

Проникновение ггапаина в толшт кожи под воздействием ДДТ аШ Важным вопросом лекарственного электрофореза является изучение прохождения препарата через кожу и его дальнейшее действие в организме, Определение активности папаина в срезах кожи морских свинок показало,что последний,под воздействием ДДТ (особенно из среды 20$ ДО.СО), хоршо проникает в толщу неповрежденной кожи морских свинок,и достаточное его количество обнаруживается на глубине до 2 ш и более. При этш проникащая способность палаипа возрастала в 2-2,5 раза,а ахтагаость сохранялась спустя 24 часа после ДДФ.В экстрактах срезов,

зучешшх ЯМР и ИК спектроскопией, наш были обнаружены комплексы tfCO-белок.Этот факт свидетельствует о том,что повышение прошка-цей способности папаипа обусловлено влиянием ДМСО на клеточные змбраш.

Динамика пластичности повреждении тканей пол влиянием ДДФ тайна и ДМСО в условиях эксперимента ка морских свинках Лерзз 2 ш после нанесения раны у морских свинок развивался выраженный юйный процесс:полость раны заполнялась некротическими тканями,помялась гиперемия и отек околораневых областей.После 4-5-дневного зчения рал ДдФ папаина с ДУ.СО признаки воспаления купировались -аеньшались отек,гиперемия и болезненность околорановых областей, жращалась и очлщ?лась раневач яоБсрхность,уменывалась гнойная зк-дация.В этот период.параллельно пзкролкзу, шло интенсивное обра-)вание грануляционной тканя.У этих .тавотных краевая эпителизация миналась с 7-3 для,тогда как у животных контрольной группы грану-щия появлялась на II-I-'3,a эплтелизация-на 13-15 дни.Полное зажившие ран с формированием нежного и малозаметного рубца у животных, мучивших ДЦФ папаина с ДМСО,завершалось через 22 дня.У животных, яучиших ДЦФ с цапанном, а также ДЦФ с ДМСО, купирование воспали-1льных процессов,полное очищение ранзвой поверхности от нскротя-юких тканей и гнойного эксудата происходило в более поздние сроки, i сравнению с животными,получившими ДДФ папаина из среды 20;?Д!«1С0. к,некролиз завершался на 7-S день после воздействия на рану ДДФ лаина или ДМСО.Появление грануляционной ткани наблвдалось на 9-Iü ль,краевая эпителизащя начиналась с 10—II дня.Полное завершение левого процесса происходило к 24-23 дню от повреждения.У животных нтрольной группы (получивших только ДЦФ) завершение раневого про-сса,с формированием плотного и грубого рубда,наступало на 42 день ченпя.

Исследование рубцовой ткани показало, что у животных, лечивших -ДДФ папаина,а также ДДФ папаипа с 7JJIC0,формируется незаметной, жный рубец с равномерно развитым эпителием и соединительной tkchuj. бцк образуй складки,что позволяет им растянуться.При забое жиж)т--х кока зоны бывшего повреждения свободно отделялась о-г подяазащих ак(Л1.Хак на ее внутренней поз&рхностн,так и в подлряащкх тканях, Tíu'OBJiTb участки бывшего ловралдонш: было невозможно.

3,5. Применение протеолигических еязиуов растения carica paptjа » клинических уСЛОЛИЯХ

lh :'M»';;ot;no лвкспакна в гнойло-Ессгьуштечьной гыды'гл В>

линическнх условиях.Изучение динамики репарации ран у больных с рано начатым лечением лекопаином или лекопаином в сочетании о антибиотиками показало,что раневой процесс обычно протекал без заметных-воспалиталышх явлений,которые на 2-4 день терапии исчезали с полным очищением раневой поверхности и уменьшением ее площади на 25-30$ У.этих больных к 4-6 дшо лечения по всей раневой поверхности наблюдался рост грануляционной ткани с элителизацаей и уменьшением поверз ности на 75-80$,а спустя аце 1-3 дня рапевой процесс завершался формированием нежного рубца.Средние сроки завершешя раневого процесса инфицированных ран при их лекопаинотерашш составляли 7,6 дня.

У бальных с запоздавшим обращением за помощью и при наличии выраженных гнойных выделений из раны после первой ее аппликации локс паином или лекопаином 'в сочетании с антибиотиками эти явления почта прекращались, а после второй или (в тяжелых случаях) третьей -раневая поверхность освобождалась от нежизнеспособных тканей и гнойного эксудата. Спустя 4-5 дней лечения воспалительно-гнойные явления в ране обычно полностью ликвидировались,и наблюдался бурный рост грануляциопной ткани. В эти сроки размеры раны в среднем уменьшались на 25-30^. Через 6-7 дней можно было наблюдать полное сглаживание раневой поверхности с уменьшением ее площади на 50$ и более, а еще через 2-4 дня вся раневая поверхность покрывалась эпителиальной тканью с формированием малозаметного рубца-. Средние сроки репарации при этом составляли 8,1-8,2 дня. При лечении .аналогичных ран общепринятыми методами первая фаза, как правило.сопровождалась более или менее выраженными гнойно-воспалительными явлениями, которые только после 6-7-дневного лечения начинали ■ стихать, а рановая поверхность к этим срокам была покрыта струпом темно-коричневого цвета, под которым наблюдался рост грануляционной ткани. За этот период лечения раневая поверхность в среднем уменьшалась на 25-30$, т.е. репаративные процессы в ране при обычных методах лечения протекали в 1,5 раза медленнее, чем при леко-паинотерапии ели лекопаинотерашш в комбинации с антибиотикотера-пией. Для полной репарации ран при этом в среднем требовалось 13,5 дня: В "раневых отпечатках" на 3-й день лечения ран обычными методами было установлено наличие значительного количества по-лзгаорфноядерпых нейтрофилов П и Ш стадии дегенерации без явлений фагоцитоза. На ?-й день обнаруживались нейтрофилы I и П стадии дегенерации, а также моноциты с явлениями фагоцитоза.На 7-й день появляюсь фибробласты и пояибласты при одновременном уменьшении

:оличества нейтрофилов .На 9-й день отмечалось значительное уменьшено количества полиморфноядерных лейкоцитов с наличием выраженного агоцитоза.На Ц-цй день лечения наблюдалось дальнейшее уменьшение :оличества нейтрофилов при наличии множества фибробластов и макро-агов.В последущие дни,в связи с резким уменьшением размеров раны, отпечатки" не брались.

При лечении гнойных .ран лекопаином или лекопаином в комбина-ди с антибиотиками,на 3-й день лечения в "отпечатках" обнаруживать значительное количество лейкоцитов и явление фагоцитоза.На 5-й ,ень фагоцитоз был сильно выражен со стороны нейтрофилов при налили моноцитов и полибластов.На 7-й день наблюдалось значительное менышние количества полиморфноядерных нейтрофилов с сохранением х нормальной формы.Еосле этого "отпечатки" не брались из-за эпито-изации раны и фо|мирования рубца.

Изучение 1ШСЛОТНОСТИ раневого эксудата показало, что ацидоз ыл более выражен и продолжителен у бальных,у которых гнойныэ раны :ечились обычными методами,и менее выражен и продолжителен при лече-ии аналогичных ран лекопаином или лекопаином в сочетании с анти-иотиками.

Изучение температуры околораневых зон и симметричных им проти-юположных областей показало, что при лекопаинотерапии ран за 3-4 ;ня происходило их выравнивание, тогда как при обычных методах лече-мя они отмечались в более поздние сроки.

Оценка эффективности ДДФ папаина в сепаративных; ппоцв<?сад ■нойно-воспалитальиых 'заболеваний, Наблвде!шя показали,что как в ■аловиях ДЦТ папаина из среды ДМСО (1-я группа),так и ДДФ паиаина ;з среды физ.р-ра (2-я группа) стихание воспалительных процессов ! очищение ран от некротических тканей и гнойного эксудата прсис-:одили на 3-4-й день терапии, а при местном (наружном) применении [апаина (3-я группа) на 6-7-й день,в то время, как у больных,полу-[авших только ДЦТ (4-я группа) и общепринятые методы лечения (5-я 'руппа),- спустя 12-13 дней после начала терапии.

Рост грануляционной ткани у больных 1-й и 2-й групп обычно [роисходил нашего быстрее, она становилась полноценной к 5ч*у дню :ечения. В 3-й груше формирование зрелой грануляционной ткани [аблкщатось к 7-Я-му дню лечения,а в 4-й и 5-й- к 14-16-му дню.

Раневой процесс (формирование рубпа и эпитализация раны) у ¡с&ьннх 1-й и 2-й групп завершался на 5-6 дней раньше,чем у бель-па 3-й грушго, и на Г4»15 дней раньше,чем у больных 4-Й и 5-П '■рушг.

При лечении послеоперационных инфильтратов ДДФ папаина и, ос< бонно, ДЦФ папаина из среды антисептика ДМСО, отечно-воспалительные явления очень быстро стихали и в 60$ наблюдений процесс закан-;чивался без абсцидирования и повторных хирургических вмешательств Следует отметить, что наибольший процент суточного сокращения размеров ран и воспалительных инфильтратов наблюдался в первые дни т< рапии, и этот процесс наиболее интенсивно был выражен у больных первой группы, затем - второй. Математический анализ показал,что сокращение размеров патологического процесса составляло в среднем 9,5% у 1-й, 8,9% - 2-й, 7,2$ - 3-й, 5,1$ - 4-й и 3,9% - 5-й групп больных в сутки.

Микробиологические исследования раневого эксудата показали отсутствие патогенной микрофлоры через 6-7 дней после начала лечения раны ДЦФ папаина из среды ДМСО пли ДЦФ папаина,тогда как в контрольных наблюдениях - через 13-15 дней.

Цитологические исследования показали, что начиная с 3-4 дня в"раневых отпечатках" больных,получавших ДДФ папаина и,особенно, ДЦФ папаина из среды ДМСО, отмечалось увеличение количества макрофагов, гистиоцитов, наличие фагоцигирушцих лейкоцитов. На 9-10 день наблюдалось наличие единичных нейтрофилов,лимфоцитов,появление мо-ноцитов,отсутствие микрофлоры. У больных» получавших только ДЦТ или общепринятые методы лечения, уменьшение количества нейтрофиль-пых лейкоцитов,появление фибробластов и гистиоцитов наблюдалось на Т5-16 день лечения.

Измерения рН и буферной емкости раневого эксудата показали более быстрое уменьшение буферной емкости и появление умеренного ацидоза у больных 1-й и 2-й групп, по сравнении с остальными.Эти данные свидетельствуют о тот,что воспалительный процесс вдет на спад.

Анализ приведенных данных показал, что при лечении гнойно -воспалительных процессов протеслитическиш энзимами, сроки их заживления в среднем сокращается в 1,5 раза по сравнению с общепринятыми методами лечения.Эффект от применении энзимотерапии резко возрастает,если ферменты вводятся в область раны с помощью ДДТги, особенно,из среды ДМСО.Прн этом сроки завершения раневого процесса сокращаются почти в 2 раза.

Влияние бонобопеза папаина на гнойно-воспалительные пропэооы. Поело фонофораза папаина обычно наблюдалось значительное усиление

ксудации,что проявлялось обильным пропитыванием повязки раневым ксудатом,а со 2-3-го дня отмечалось заметное рассасывание и раз-ягчение инфильтрата.У 32$ бальных основной группы (палучавших онофорез папаина) полное рассасывшше воспалительных инфильтратов роисходило после 2-4 процедур, у оаталышх. - после 6-7 процедур, аким образом, полное исчезновение инфильтратов и восстановление изиалогической целостности инфильтрированных тканей у бальных ос-овной группы наступало через 9,7 дня. У больных контрольной груп-ы (обычные методы лечения) эта же картина наблюдалась в среднем ерез 17,6 дня.Сравнение этих данных показывает,что при лечении оспалит&льных инфильтратов фонофорезом папаина полная реабилита-ия поврежденных тканей происходит в 1,8 раза быстрее.Кроме того, о сравнешш с контрольными наблюдениями.абсцидированиа воспглп-ельных инфильтратов в условиях фонофореза папаина наблюдалось в 2 аза реже,а суточное сокращение поверхности инфильтратов ооставля-о в среднем 10-12 см2 у больных основной группы и 6-8 см2-в конт-'Оде.Установлено,что в условиях фонсфореза папаина патогенная мик-офлора в ране исчезала на 7 день лечения,в то время как при исполь-овании общепринятых методов лечения значительно позже - на 11-12 ень.

Анализ динамики заживления гнойных ран выявил следущее: редние сроки очищения раневой поверхности от гнойного эксудата ри фонофорезе папаина составляли '3,3 дня, появления грануляцион-:ой ткани - 4,6 дня, завершения раневого процесса - 12,7 дня.тог-;а как при обычных методах лечения - соответственно 7,8, 8,9, ИЗ,6 ,ня. Сравнение этих данных показывает, что заживление гнойных ран | условиях фонофореза папаша происходит в 1,8 раза быстрее по равнению с контрольными наблюдениями.

4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

I.Изучение состояния функционально-структурного восстановления [овредденного зрительного нерва у лягушек показало,что под воз-[ействием лекопанна.лри определенных дозах, спустя 35-60 дней от-шчается восстановление функций проведения в нам, а также зрл-•ального восприятия.Поглигло этого,у лягушек,получавших знзимотеряпяю, ) отличие от контрольных,спустя 2-3 месяца удалось выработать даф-юренциальннй уоловный рефлекс на красный свет.Эта данные подтверждаются и морфалогачоеккш исследопшптазд,установивши наличие сли-шия центрального и и периферического отрезков зритолъпого нертда.

к 35-60 после полной его перерезки у животных,получавших энзимоте-рапию и формирование модного соединительнотканного рубца,преграадг пцего пути роста поврежденных аксонов,у контрольных.

Согласно данным одних авторов,у млекопитающих регенерация зрительного нерва при повреждениях не возникает (Telio F. , 1901 Poliak S ., 1941 И др.),а Других (Ramon Y Cajal S., 1928; Rossi 0., 1952; Windle W ., 1956; demente С., 1964; Kirche К., 1965 др.) - из проксш.альной культии возникает рост аксонов,которые не состоянии преодгиеть рубцовые барьеры и вступить в морфологическух связь с зрительным мозгом.На этом пути важно было найти средства способы,которые,с одной стороны,могли бы ингибировать рост рубцовоВ ткани,а с другой - благоприятно влиять на процессы стимуляции рост Нервных волокон.Наши исследования показали,что такими свойствами-обладают протеолитические форленты растительного (папаин,лекопаин, лекозим)»микробного (коллализин) п животного (трипсин и др.) проис хождения,которые,вызывая протеолпз,ингибнруют рост и формирование соединительнотканного рубца,благодаря чему регенерирующиеся.аксонн оптического нерва свободно могут преодолевать зону повреждения,вое станавливая морфологическую и функциональную целостность поврежден ешх нервных структур.

При анализе приведенных данных возникает вопрос: каким образа после перерезки оптического нерва восстанавливается строго упо рядоченпая система связей между растущими аксонами ганглиозных кле ток сетчатки и вышележащими нэйроналышми организация!® зрительног анализатора? Сперра Р. (1974) для объяснения этого вопроса приводит два возмсшшх механизма: I.Можно полагать,что множество растущих волокон оптического верва,вероятно,расходятся по вешу мозгу однозначно,а животное путем опыта научается использовать то из новых связей,которые случайно оказываются правильными; 2. Вероятно, каадое нервное волокно обладает специфическими свойствами,помогавдкми им каким-то образсы достигать места своего назначения в мозгу и вновь образовывать тал связь.Для этого,по-видимому.требуется особого род средство (вероятно,химической природы), обеспечивпцее контакт каздо го волокна оптического нерва с соответствующий нейронами вылележа Ejcro отдала.В этом отношении,в работах Вартапяна Г.А; и соавт.(198 указывается о важней значепин эпдогеняых химических факторов мозга в механизмах 4 оргаровашш я компенсации функциональных расстройств прз травматических повреждениях ЦЕС.

В опытах с поврездением сетчатки глаза кролика вспышками ла-

зерного излучения нами было показано,что под влиянием лекопанна быстро купируются отечно-воспалительные процессы с значительным сужением зоны поражэния.Кроме того,у опытных кроликов нагл удалооь значительно быстрее, по сравнению с контрольными,получить дифференцированный условный рефлекс на белый,красный и зеленый свет,что,вопреки данным других авторов,отрицащих возможность цветоощущения у этих животных (Педхем Ч. с соавт., 1934 и др.)«свидетельствует о наличии цветого зрения у кроликов.

В опытах по изучению влияния, лекопаина на пластичнозть поврежденного зрительного нерва у кроликов,нами было установлено,что аксоны последнего в определенных условиях обладают регенеративной способностью и что осноеным барьером на пути их роота язшютея бурное форсирование соединительнотканного рубца,

2. Сравнительное изучение весот-ановдаелышх провесов, irpoas-ходящих в еедалищном нерве у крыс пэ®ле его псшзай переросла оотрш инструтлентом или размозжекля на значи-тельпсм раестатат.петгззшзэ.ч'ро в условиях размозаения опи протекали в 1,5-2 раза бггетрез.Прз елалз-зе этого явления,до-видимому,необходим учитывать возможогаь еущеои-вования двух механизмов:с одной сторона эта дашвдо подтвсрггегзэ мнэ-пы® Полетаева М.Д.(1958,19<58) о тем, что чем тяг&дез повркадааю.теа интенсивнее выражены рэгенеративные нроцосон,которые овязывазззгя с образованием в этом случае большого количества н®крогормонов,способствующих стимулировании регенеративных процессов;с другой стороот, необходигло учитывать,что в условиях размоетеиия нврза сохранитазевя участки поврежденной его оболочки могут сыграть определенную роль в ускорении регенеративных процессов,а также могут служить в качестве путеводителя для растущих аксонов.

Анализ механизмов.лежащих в основе регенеративных процессов, показал,что ЛИ стимулирует и ускоряет рост молодых аксонов и миели-низацию осевых цилиндров .Для реализации энергии лазерного излучения клетками организма,вероятно,существуют специальные биоструктуры,ответственные за восприятие и селективную реализацию этого излучения. Установлено, что под влиянием лазерной энергии увеличивается проницаемость плазматических мембран (Финин B.C., 1982).Избыточная энергия от ЛИ,вероятно,передается в эндопространство клетки,где и реализуется в процессе метаболизма (Казаков И.В., 1982 и др.).Считают также,что реакция организма на лазерное облучение может быть обусловлена хромофорами клегок и доглащавднми свет ксьшсненташ кро-ш (Узденаслй A.B., 1983 и др.).Центральное место в реализации лазераой

энергии в организме,вероятно,принадлежит первичным фотопродуктаы, выступающим в роли носителей фотобиологической информации.Образова ние первичных фотопродуктов и активацию шли системы фагоцитов рассматривают как трагерный механизм фогобисдогической регуляции защитно-приспособительных реакций целостного организма (Демяненко В. С. с соавт., 1983 и др.).

3. Проведенные клинические наблвдения и электрофизиологические исследования показали, что восстановительные процессы в поврок денном спинном мозге у крыс в условиях энзимолазеротерашш ускорялись в среднем в 1,5-2 раза,по сравнению с контрольными наблюдениями,были более стойкими и полноценными.Эти данные подтверждались также гистоморфологическшли,морфометрическими, тонко- и ультратонко-структурными исследованиями установившими,что у животных,получавши: энзимотерадив пли знзимолазеротерапаю,имело место более полноценно! восстановление структуры тканей СМ (формирование нежного оболочеч-ного рубца,не проникающий в толщу СМ,свободный рост,равномерное, .плотное распределение и миеяинизация аксонов, значительный объем белого и серого веществ в зоне повреждения) ¡чем у контрольных, (формирование плотного оболочечного рубца,внедренный в ткань СМ,приводящий к его деформации,весьма незначительное количество белого и отсутствие серого веществ в зоне поврездааия).

4. Проблема лечения гнойных ран является необычайно актуаль-ной.В современных условиях происходит значительное.увеличение раневой инфекции,появляются лекарственноустойчпвые формы,Это побудило исследователей прибегнуть к поиску и разработке новых методов и сродств лечения гнойно-воспалительных процессов.В настоящее Бремя патогенетическая направленность ферментотерадил гнойных ран не вызывает сомнений.Из эффективных препаратов нами использовались энзимы дындого дерева,которые более интенсивно разрывает пептидные связи в белках,чем многие известные протеалитические ферменты.Исходя из этого свойства ферментов,нами изучалась возможность совместного применения папаина с таким денатурирующим агентом,каким является антисептик ДЛСО.

В числа задач настоящей работы была разработка методики совместного применения папаша с ДЦГГ при лечении гнойяо-воспалытедьпш процессов.Исследования показали, что экспозиция тока в точение 10 гаи приводит к ее снижению па 12^,а при 30 шн экспознцпи-па 23,2. Причиной падения активности папаипа,очевидно,является разрушение и гпзглежо болг.овой ыолекулы га эдектроде'Для предотвращэняя втого процесса парад влекгродом устанавливалась цолофяновая меыбрана,пре~

ятствущая контакту белковой молекулы с электродом.Эксперименты, роведенные с использованием целофановых мембран,показали,что дей-твительно при 30 мин экспозиции не наблвдается понижения активнос-я фермента.Это послужило основанием при ДЦФ папаина между матерча-ой тканью и фильтровальной бумагой вложить целофановую прокладку.

Важным вопросом лекарственного электрофореза является изучено прохождения препарата.через кожу и его дальнейшее действие.Наболев информативным является метод прямой детекции активности фар-ента непосредстве1шо в тоща кожи_и подкожных тканях после злектро-ореза.При определении активности папаина в срезах кожи морских сви-ок было обнаружено,что наибольшую проникащую способность папаин роявляет в сочетании с ДМСО.При этом,по сравнению с контрольными актами (папаин без ДМСО),проникающая способность фермента возраста-г в 2-2,5 раза.В экстратах кожных срезов,изученных ЯМР и инфракрас-эй (ИК) спектроскопией,нами был обнаружен комплекс ДМСО-белок.Этог экт свэдетельствует о том,что повышение проникащей способности шаина обусловлено влиянием ДМСО на клеточные мембраны.

Наши исследования показали, что при лечении экспериментальна гнойных ран ДЦФ папаина с ДМСО, через 2 дня наступаот полное всцение гнойных ран от некротических ткал ей.Спустя 4-5 дней ку-лрукхгся признаки воспаления,значительно сокращается раневая по-эрхность,уменьшается или полностью прекращается гнойная эксуда-1я.В этот-период, параллельно некролизу идет интенсивное образо-шие грануляционной ткани.

' Клинические,планометр1чес1ше,злектротермометрические,бакте-лологические и пр.исследования указывают на то, что папаин в со-эташш с ДМСО при ДДФ введении способствует более полноценному биологическому восстановлению функций и структуры поврежденных саней.Одной из особенностей заживления ран при ДЦФ папаина явля-гся образование нежных,малозаметных,хорсш аштелизированных руб-зв,что имеет большое значение в косметическом и социальном отно-зпии .

При лечении ран папашом положительные результаты набдвда-юь как от местного применения,в виде аппликации и примочек под )вязку,так и при введетш посредство?.! ДДФ и Ф6.Однако,несмотря 1 положиталыше результаты от местного применения папаина и др., 1 Ш-Л взгляд, оно является менее перспективным, так !£ак имеет оп-здплешаьз Н5дсстатки;к недостаткам относятся кратковременность Жстепя из-за формонтапишого автолиза и метаболией, отсутствие -лии-го мкянкл на сжаноранвьую зону,возмогли« а/и^ршчгее-

кие реакции и т.д.В этом отношении с целью ликвидации указанных недостатков,как показали результаты наших клинических наблюдений,наиболее аффективным оказалось применение палаина с помощью ДДТ и УЗ. ' Особенно положительные результаты отмечались при растворении палаина в 20% ДМСО и введении с помощью ДЦТ и УЗ.При этих методах лечения сроки завершения раневого процесса составляли 12,7 дней при ФФ и 17,0 дней - ДЦФ введении папаина,тогда как при местном применении эти сроки равнялись 23 дням.Местное применение одного папаина (леко паина.лекозима) Т1кке является эффективным методом лечения гнойно-воспалительных процессов по сравнению с общепринятыми методами.

Указанные положительные результаты получили свое подтверждение и при лечении больных с повревдениями периферической нервной системы ДЦФ-ом папаина.

: Резшируя вышеизложенное,можно заключить,что использование папаина как в отдельности,так и совместно с ДЦТ и УЗ,наряду с су-ществупцими методами лечения ран,может найти широкое применение в медицине.

5. ВЫВОДЫ

1. Центральная и периферическая нервная система обладает регенеративной способностью при повреждениях,однако.быстрое и бурное развитие соединительнотканного плотного рубна опережает восстановление нервной ткани,приводит к сдавливанию молодых нервных волокон и блокированию путей роста аксонов.ПФ растительного,микробного и животного происхождения в оптимальных дозах и сочетаниях пнгйбирузтг образование соединительнотканного рубцового регенерата,чем создают благоприятные условия для функционально-структурного восстановления нервной ткани при повреждениях.

2. Клиническими наблюдениями, клштко-лабораторными,электро-фпзиологическиыи,морфологическими (в том числе морфометрическими и алектроннсыикроскопическими).биохимическими,физико-химическими и другими методами исследования установлено положительное влияние Ш..> - папаина (лекопаин,локозим),коллализина и трипсина, физических факторов - ЛИ, ДЦТ, УЗ и их различных сочетаний на восстановительные процессы поврежденного спинного мозга, седалищного и зрительного нервов, сетчатки глаза, а также на репарацию гнойных ран и гнойно-воспалдтадьные процессы у животных в эксперименте и па больных в поди клинических и клинических условиях.

3. Изучение восстановительных процессов, протекапцих в седалищном нерве у крьгс, при различных методах повреждения (перерезка

звием или размозжение с частичным сохранением оболочки),показало, э в условиях размозжения, т.е. при более тяжелой травме,регенера-зные процессы протекают в 1,5-2 раза быстрее.Сроки функциональ--структурного восстановления поврежденного седалищного нерва у ¿о,получавших энзимотерапию,составляли 2-3 мес при перерезке и 5 мес -при размозжении, а у контрольных - 5-6мес и 3-4 мес ,со-зетственно.

4. Сравнительное изучение влияния различных доз К на восста-зитольные процессы поврежденного- седалищного нерва у крыо показа-,что лучший результат отмечается при введении препарата в дозо KE/IOOr, с интервалом 48 часов.Оптимальный эффект наблюдался при [ользовании К в сочетании с ЛИ. В этих условиях восстановитель-

I процессы протекали в 1,5-2 раза быстрее по сравнению с конт-:ьными наблюдениями.

5. Возникновение ВП в среднем,промежуточном и конечном мозге ■ушки в ответ на световое раздражение глаза свидетельствует о на-ии зрительного представительства не только в среднем,но и в бо-

•ростральных отделах головного мозга у лягушек.По постепенному личению ЛП ВП от сетчатки до переднего мозга (15,2^-2,5 мс в сетке, 45,6^3,5 мс в среднем, 83,0±2,1 ыс в промежуточном и 118,1± мс в переднем мозге) можно судить о пути распространения импуль-возбуждения от сетчатки до конечного мозга.

6. У лягушек, получавших энзимотерапию, в отличии от контроль-,спустя 35-60 дней после перерезки зрительного нерва,одновремен-и восстановлением ого. структурной целостности и возникновением йких ВП в зрительном анализаторе, наблюдается возникновение тельных ощущений, а к ПО днкьдифференциальнсго условного реф-са на красный свет,что свидетельствует о определенном восста-лении первоначальной упорядоченной системы проводящих связей,

7. Лекопаинотералия поврежденных лазерным облучение« глазных ц и сетчатки кролика в определенной степени ингибирует развитие що-аоспалитольных процессов и ускоряет их сгибание,чтц спустя 50 дней,приводит к значительному восстаповлеыш функцдональнс-рктурного ссстояннля поврежденных структур,тоцца кад в контроль-

опытах в эти сроки определяйся выраженные отечлз-восдслитедь-явления.Установлено,что сетчатка глаза кролика обладает доста-jo выраженнш цветовш зрением.

.8. У крыс после латеральной гемясекциа сшшного мозга, и )тералии (особэнно в комплексе с лазеротерапией).спустя 5 сугСй

наблюдалось частичное,15-20-значительное,а 30-полное восстановл нив локомоторно-чувствительннх нарушений,которое сохранялось и более поздние сроки (до 12-месяцев и более).У контрольных живот это восстановление отмечалось к 60-му дню,но в более поздние с] повторно возникал частичный,стойкий локомоторный дефицит.

9. Восстановление амплитуд,ншс величин и временных пара»« ров ВП соматосенсорной области коры мозга и ЭНГ седалищного не! после латеральной гемисекции спинного мозга «у экспериментальны} крыс отмечалось к 30-60 дням исследования и сохранялось спустя НО дней.У контрольных крыо, хотя ВП и ЭНГ регистрировались к с 60 дням,однако,их амплитудно-временные характеристики значител! отличались от ответов интактных и опытных крыо (высокий порог I драяения,большой Ж,низкая амшгатута) .Эти различия сохранялись 90-110 дням исследования.

10. Гисто-морфологическае,морфомэтрические исследования, чение тонкой и ультратонкой структуры тканей поврежденного опт мозга показали,что у животных,получавших энзимотералию.наблвда; более полноценное восстановление структурных элементов (нежный лочечный рубец,не проникающий в мозговую ткань,свободный рост,! номерное, плотное распределение и шэлиназация аксонов, значит ел I объем и плацадь серого и белого веществ в зоне повреждения) ,чег, контрольных (плотный обояочечный рубоц,внедренный в ткань мозгг приводящий к его деформации,незначитальное количество белого и оутствие серого веществ в зоне гемисекции).

11. ЛИ, ДДТ и УЗ стимулируют и ускоряют регенеративные г пессы в поврежденных тканях,обладают противовоспалительными,ант микробными,противоотечнымк свойствами и не вызывают аллергнчесв роакций .Наилучший эффект терапии ран отмечался щи сочетанием в ызпенки ферментов с ЛИ,а также ппа их введении посредством ДЦГ УВ из среда антисептика ДМСО.В этих условиях процессы восстанов нкя поврезденных структур протекали в 1,5-2 раза интенсивнее п сравнению с обычными методами лечения.

12. Одновременно с возникновением докомоторно-чувствител ных нарушений,полная поперечная перерезка спинного мозга у крыс ьызчзазт изменение активности АЗФ-азы,ацет2лфосфатазы,гликогепф форалазы и других ферментных систем,играодих важную роль в сбме ао-Бостансвиталызых процессах.Псд воздействием гсмогеката спинн

иозхг* крысиного амбрисш и,осг,бедно,при его" комбинации с ЛИ,одш у.энко с ускорением процессов функционально-структурного восстав л?;,успеглаг ся г процессы нормализации активности этих фэрмен

13. Под воздействием ДДТ папаин при.30-и минутной экспози-

;i сохраняет активность,а его перенос через мембрану розко возрас-эт.При ДЦФ введении иалаин хорошо проникает б толщу неповрежден-i ком на глубину до 2 мм и более,а ферментативная активность íkoctii,экстрагированной из кожньк срезов сразу после ДДФ почти в 3-2 раза выше по сравнению с жидкостью контрольных срезов.Нали-э активности папаина отмечено и через 24 часа после ДЦФ введения.

14. Экспериментальные исследования и клинические наблюдения лазали,что энзимы расгешш carica papaya и,особенно их сочетанное лгленение с Ж,ДЦТ и УЗ,способствуют ускорению ликвидации инток-хации,быстрой нормализации общего состояния организма,картины эви,очищению раны от некротическх масс,гнойного эксудата,лигази-даи воспалительной реакции,созданию благоприятных условий для гивации роста грануляции, стимуляции фагоцитоза,раннему исчезно-яию дегенеративных форм полиморфноядерных нейтрофилов,появлению поцитов (макрофагов) и пслибластов,нормализации рН раневого эк-цэта, сокращению сроков раневого процесса.

15. Сравнительные характеристики динамики заживления гной-с ран у бальных,получавших разные методы лечения показали, что тучший эффект отмечается при введении папаина путем фоно- и диа-¡амофороза из среды ДМСО:средние сроки суточного сокращения ра-зой поверхности составляли при фонофорезй,9,5# при ДДФ вво-ши,7,2%-при местном применении и 5,2%-при лече]ши общеприняты:® содами.Сроки завершения раневого процесса составляли соответст-шо 12,7, 17,0, 23,0 и 23,4 дня.

16. Полученные данные проливают свет на понимание маханиз-

з последовательного активирования определенных ферментных систем ганизма в разных фазах раневого процесса.Учитывая,что протеояи-шские ферменты папаш и другие обладают лротивовоспалитолькими, этивоотечными свойствами,способствуют очищении рановаЧ поверхлос--от некротических масс.ингибировашш роста соединительной тглнл йормированию нежного,физиологичного и малозаметного рубид.иш ре-«ондуются для пршленения в первой и третьей фазах раневого про-¡са.т.е. в '[азах воспаления и ремодалирования.

■17. Протеслитичоские ферменты растительного (шшпнн.лвко-ш,локозим).микробного (коллализин) и .у.;шотлсго (трипсин л лр.) шсхождения как в отдал ьн ости, так и п разных ось-тын* п.особеи-,с физичоспши .^акторат (ЛИ,ДДТ,УЗ) и антас'чгогшлл UvwC0),^¿o-

мендуются для внедрения в широкую медицинскую практику в комплекс лечения ряда неврологических,нейрохирургических,офтальмологически ортопедических,хирургических,косметических и других заболеваний.

6. практические првддошшя

1. Протеолитические ферменты растительного,животного и микробного происхождения как в отдельности,так и в различных сочетаниях и,особенно с ЛИ, ДДТ и УЗ, могут быть использованы в комплев се лечения неврологических и нейрохирургических (корешковый син-дром.остаточнно явления повреждений 1ЩС и ПНС.базаяьный и оптохиа мальный арахноидиты), офтальмологических и косметояогических (oeoi травмы глаза,сетчатки,зрительного нерва,келлоидные рубцы),ортопед ческихи хирургическихСостеохондроз позвоночника,повреждения межпо боночных дисков,инфицированные и гнойные раны,послеоперационные инфильтраты,ожоги) бальных.

2. При ДДФ папаина (лекопаика и др.),с целью увеличения про никашцей способности и повышения эффективности,в состав раствора можно вносить антисептик ДМСО.

3. Для ДЦФ и ® папаина желательно использовать композицию, ! содержащую папаин ДМСО как в виде раствора,так и в составе мази.

4. Для хирургических клиник рекомендованы и внедрены в прак тику -следущие методические рекомендации: ГЛечение гнойных ран растительны::. ферментным препаратом л окопанном"; 2. "Применение дна динаыофореза папаина на больных с гнойно-воспалительными заболева-ниямп"; 3."Влияние фонофореза папаина с димексидоы па гнойно-воспалительные процессы".

5. При энзиыотерапни (папаин и др.) гнойных ран и гнойдо-во< палительпых процессов целесообразным является использование фермента о антибактериальными препаратами,не действущими на активность энзима.Из таких препаратов оптимальным является использование ДМСО,который усиливает лизис белков под действием папаина,-

7. СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ШУШШВАННЫХ ПО TIME ДИССЕРТАЦИИ

I.Влияние лекопаива на проводимость повревденного зрительног нерва.-Сб.докл.слмп. "Применение протеолитичеоких энзимов растения carica papaja (лексзии.лекопаин) в широкой медицинской практике", М..1978.С.Ш-116 (СоавтЛатинян Л.А.,ЬЬрзоян B.C.).

2.Восстановительные процессы в повреждением зрительном нерве { лягушек под воздействием лекопаша (сообщение I)// Журн.зксяер. 1 клшшч.мед.АН Арм.ССР,1980,т.ХХ,№ 3.С.241-246 (Соавт.1,!атинян Л. 1.,Мирзояи В.С.,Найдин В.Л. и др.).

3.Восстановительные процессы в повреждением зрительном нерве j лягушек под воздействием комбинированного введения лекопаина и трипсина (сообщение 2)//Нурн.экспер.и юпшич.мед.АН Арм.ССР,1981, г.XXI,6.С,585-589 (Соавт.Матинян Л;А.,|,1ирзоян B.C. и др.).

4.0 роли лекопаина в процессах; лечения поврежденных тканей у лягушек// Тез.докл.Закавказской Х1У конференции пед.ВУЗ~ов,посв. современным проблема!,! физиологии человек и животных—Ереван-Киро-вакан,1981. С.54-56 (Соавт.Багдасарян Р.В.,Мирзоян B.C.).

5.Лечение нестерильных ран лекопаином (лекозш.!ом)/Д1ат. У Закавказской научн.конф.патофшиологез.-Баку,1982.С.51-53 (Соавт. Багдасарян Р.В.,Матинян Л.А., Мирзоян B.C.).

6 „Динамика заживления ран при применении лекопаина в условиях эксперачента//Арохчалаутюн,научно-лрактич.,орг.методич. нурн. шн-арава Арм.ССР,1981,Js 6.С.13-16 (Соавт.Багдасарян Р.В.,Матинян Л.А., лрзоян B.C., на армянском языке).

7.Фермонтотерапия при повреждениях нервной системы//Мат.респ. энф. Ферменты,металлы и металлоферменты в диагностике и лечении. Явано-Франковск,1982.С. 143 (соавт.Матинян Л.А.,Аллаверцян А.Г., ганесян С.С.и др.).

8.Роль комплексного ферментного препарата лекопаина в процес-ах функционально-структурного восстановления поврежденного зри-эльного нерЕа у лягушек//Цонтральныэ механизмы компенсаторного воо-гановления функций.Изд.АН Ар:/..ССР.-Ереван, 1983.С. 153-157 (соавт. арзоян В.С.,Григорян Ш.В.).

9.Пластичность нервной систа-лы при воздействии ферментов//НУ ьезд Всесоюзн.физиал.общ.им.И.П.ПаЕлгва:Тез. научн.сообщ.-Еаку, Э83. С.41 (Соавт.Матинян I.А.,Ал.>твэддян А. Г, и др.).

10.Динамика репарации экспериментальных ран у кроликов иод воз-эйствием ле1;опшша//Яурн.экснер.и клкяичллед.АН Аш.ССР, 1984, т. ПУ,Л 4. С.313-319 (Соавт.Багдасарян Р.В..Мг.тнннн Л.А. и др.).

11.Пластичность норвной счетами при некоторых воздействия:г// свр. проблем Г-изч'ллог,ш норзной i; 'лшочней системы:'''си.Всесощзи. онФ.,нссвящ.100~^ет!1Ю со дня роэд.акад. И.СЛ:орита!1>ьили.-Тбилиси, 965.0.106-107 (Соавт.Матинян Л.А..Алхазердян А.Г. и др.).

12.Лечение гнойных ран растительным ферментным препаратом ле-копашогл//Методические рекомендации .-Ереван ,1985. 7с. (Соавт .Матинян! .А., Ананикян П.П. и др.).

13.Способ повышения эффективности диадинамофороза протеолити-ческих энзимов с помощью дшлексида//Удост.на рац.предложение J& 248 вцд.Ереванским мед.институтом им.М.Гераци 29 П.1985 г.

14«Применение диадинаглофореза папаина на больных с гнойно-вос-палителыщми забол-жашшяи мягких ткаией/Детодическпе рекомендацш -Ереван,1986. 7 с.;Соавт.Матинян Л.А.,Авакян A.B. и др.).

15.Лечение гнойных ран лекопашом в поликлинических условиях// Курн.Хирургия юл.Н.И.Пирогова,1986, Js 6. С.17-21 (Соавт.Багдасарян Р.В.,Матинян Л.Л.,Мирзоян B.C.).

16.Effect of Locopaina on the Ргосеазов of Purulent Wound Ее-paring in Experiments and Clinical Cases// J.Acta physiolocica ot pharEacolocica Bulgarica,Sofia,1986,v.12, N 1.P.76-82 (CoaBT .Mati„ nian L.A.,Mirzoyan V.S.,Bagdascarian R.V.)

17.Физиологические характеристики диадлнамофореза папаина // ДАН Арм.ССР,1986,т. ХШ,№ 5.С.228-231 (Соавт«Матинян Л.А.,Аыирян С.С.,Мпрзоян B.C. и др.).

18. Выработка зрительных условных рефлексов у кроликов при повреждениях сетчатка глаза до и после воздействия лекопаансм // ТеЗоВсессвзн.конф. ,посвящ.50-летш института физиологии им. акад. И.С.Беритадшшш.-Тбилиси, 1986.С.226-227 (Соазт.Ыатишш Л.А., Мир-зсян B.C.).

19.0 выработке зрительных условных рефлексов у крсляксо при повреждениях периферического отдала зрительного анализатора до к поело воздействия лекопапнаУДЛохашшьш данамическсй локализации и компенсации функций центральной корвной система.'-Ереван, 1986.С. I38-I4I (Соавт,Мирзоян В.С»,Матинян Л.А-. и др.).

20.Применение папаина в гнойно-воспалительной хирургпи/Драх-чапаутЕя,паучно-пршстич., орг.методач.Еурн,Минздрава Арм.ССР,1906, ß 6.G.II-I4 (Соавт.Акиряп С.С,,Матшшн Л.А. и др.,на армянской языка).

21 .Применение диадинамофороза папаина в хирургии// П Всесоюзн. . конф.Таны и ролевая инфекция":Тез,докл.-М.,1986.С. 180-181 (соавт. Матинян Л.А,,Ампрян С.С.,Мирзоян B.C.).

22.Характеристика диадинамофороза папаина из среды неводного растворителя даметилсульфоксида (димоксд,даС0)//Журн.эг.спер,и клл-ют»мзд.ДН Ари.ССР,1986,т.ХШ,К 6.С.525-529 (Соавт.Матинян Л. А.,

мирян С.С. и др.).

23.Динамика репарации экспериментальных ран под воздействием [адиламофореза папаина//2урн.экспер.и клинич.ыед.АН Арм.ССР, 1987, ,ХХУП,№ 2.С.130-137 (Соавт.Ашрян С.С.,1,!атинян Л.А.и др.).

24.Пластичность поврежденного спинного мозга у крыс при неко-)рых воздействиям/Четвертый съезд Армянского физиол. общества: !3.докл.,1987.С.64 (Соавт.Матинян Л.А.,Мирзоян Б.С.и др.).

25.Пластичность нервной и других тканей при некоторых воз-¡йс'твиях/ДУ съезд Всесоюзл.физиол.общества им.И.П.Павлова:Тез. 1учн.сообщ.-Кишинев, т.2,1907.С.184 (Соавт.Мирзоян B.C. и др.).

26.Роль некоторых факторов в восстановительных процессах поведенного спинного мозга/механизмы повреждения и восстановления 1лостного мозга:Тез.докл. 4-го выездного заседания Научного со-¡та по планированию и координации молекулярно-биологических иссле-шаний в области медицины при Президиума АМН СССР,Научного совета

t и АМН СССР по физиологии человека и Президиума СО АМН СССР.-Ир-гтск,1987.С.89-90 (Соавт.Матинян Л.А.,Аллавердян А.Г. и др.).

27.Репарация гнойных ран под воздействием диадинамофореза па-тна//Журн«Хирургия игл.Н.И.Пирогова,1987,JS 10.С.83-86 (Соавт. Ма-янян Л.А.,Амирян С.С. и др.). _________

28.Восстановительные процоссы в поврежденной нервной систогле и некоторых воздействиях// П съезд невропатологов и психиаторов мении.-Ереван,1987.С.121-122(Ссавт.МатиНян Л.А..Аллавердян А.Г.).

29.Состояние восстановительных процессов поврежденного седа-щлого нерва у крыс в условиях воздействия лазерного излучения и !КОпаина//Актуалыше вопросы нейрофизиологии.-Ереван,1988. С.188-'6 (Соавт.Мирзоян B.C..Романова Э.А..Григорян Iii.В.).

30.Динамика пластичности поврезу;енных тканей при диадшшмо-'резе папаина//Физиологичес.'{ио механизмы деятельности нервной и шечной систем.-Изд.АН Арм.ССР,Ереван,1989. C.I94-2II (Соавт. .тинян Л.А.,Аллавердян А.Г.,Ашрян С.С.,Мирзоян B.C.).

31.Состояние двигательной активности у крыс после повреяде-я седалищного нерва и воздействия некоторыми факторами//Зсе-юзк.сиг.ш."Регуляция сспсомоторннх функций":Тез.докл.-Винница, 89.С.ПО (Соавт.Матинян Л.А.,Млрз0)Ш B.C.. Григорян Щ.И.и др.).

32.Влияние фонофороза папаша о дамексидсм на гнойно-воспа-тольшш процесси/ДЫтодичоекио рекомендации.-Ереван,I9&9. 7 с. оавт.Мнтинян Я.А.,Галстлп С.'<1. и пр.).

33. ;,!<![>! ,.,/1. i'j,;: if3,;r.(.'i ачучйнлс iE.i!a«.)H4ili«'-r:i mupC-WiHHOI-O CK.'.-

ного мозга у крыс в условиях воздействия каллализиногд// Журн. зкспер.и клинич.мед.АН Арм.ССР, 1989.т.ШХ.гё 6.С.563-569(Соавт. Матинян Л.А..Мкртчян O.P. и др.).

34.Влияние папаина на динамику функционально-структурного восстановления поврежденного зрительного нерва кроликов//Восста-новительная невродогия:Тез.докл.5-го выездного заседания эксперт ного совета по молекулярной биологии и медицинской биотехнологии АМН СССР,научн.совета АН и АМН СССР по физиологии человека и Про-звдиума Восточно-Сибирского филиала СО АМН СССР,поев.памяти В.М. Бохтарева.-Иркутск. 1990.С.188-189 (Соавт Латинян Л.А.,Мнрзоян BJ Антонян М.В.).

Зб.фонофорез папаина в лечении гнойных ран и воспалительных процоссов/Дурн.Хирургия зш.Н.И.Пярогова,1990,й 9.С.74-76 (Со-авт.Матинян Л.А.,Амирян С.С.,Мкртчян O.P. и др.).

36.Лазерное повреждение сетчатки глаза кроликов и ее лечение папайня^/йршенение биологически активных веществ в живот-новодствэгТруды Ереванского зоовет.института,вып.63,1990.С.64-70 (Соавт.Шатннян Л.А.,Мярзояя В.С.,Азизбекян Л.А.и др.).