Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние различных гонадотропинов на реакцию суперовуляции коров-доноров, качество и жизнеспособность зародышей

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние различных гонадотропинов на реакцию суперовуляции коров-доноров, качество и жизнеспособность зародышей"

\ ) о

- 3 № «97

УДК 619:616

На правах рукописи —089.843:591.32/636.2

АВДЕЕВА Татьяна Алексеевна

ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ГОНАДОТРОПИНОВ НА РЕАКЦИЮ СУПЕРОВУЛЯЦИИ КОРОВ-ДОНОРОВ, КАЧЕСТВО И ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ ЗАРОДЫШЕЙ

03.00.13 — физиология человека и животных

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук"

ОМСК 1997

' Работа юто/шош в ка£г>грэ ахунорства, гпнонологпр и биотехнологии газ!,!но;.;о!!1:л cerj>cxoxco:itcTnewiux тавотных института во-торзнарвой игшвдки ОлГА/ и вдвхтах гроясплангаош зарошгаюЯ Ш "ОжыТ и Oiß СвбШИШи

Научные nyi;oL'o2:?Tcтл;:

2ao;y;.:oiiH'ji: деятель науг.и росдубшги Татарстан, доктор ватарг<> иарих наук, профессор Миролибов Ч.Г.,

какгятат Еа"оринар::их наук, доцопг Еагалин Ю.Е.

Официальныо оапонэнга Лэктор биологических uayi;, профессор Льянов и.Д. Дэгтср оио.чотичосках наук Хосго;.;ахнв K.M.

Оппонирующая организация: ЗоронэаоякЙ аграрнай униворсвтет

^Заадга шссортеции состоится: ¿2 J997 r. в

/4 чаоов m засоваиви гшссортаэдонпого совота К ЕЮ. 19.01 при Ci-oicoM государственном аграрном университета по апросу:

644007, г, Омск, ул.Охтябрюкая, 22

С шюовргащюй üosbo ознакомиться я библиотеке института аоторишраоЛ ивигцпны

Автореферат разослан ^ed/z^ScScii IS57 г_

JHOimii сековтарь лиссертацяокиого совета поцент

Рогалонкс Л.Д.

ОЩИГ .ЧЛРЛлТПРХ'ПКЛ. VMCT.Í

Актуальность тегн Еноодртацги. Трааспяаятачкя загов'Дзй oiT.pi'-ьаот огромшо возио.'.июотя при раэрошэипи л го б лам разпекошя в оалекции крупного рогатого скота.

ВивОГО с ТОМ, несмотря !!Д ЗИаЧИТОЛЬНие УСПОХЯ 0TC4eCT20Hn0Í': п завубохяой яауки, миогпо попроси в ого!: области остаптся сегодня, недостаточно язучошк.и :: норо^оиш.'аи. .'.'стон трансплантация запоиятсЯ яэляэгея дорогостоящим, слойкам и г'робуот научного поиска п практической отработка всех зеощсв "ох!;олоп;п с цолыз его удодовлопил, хгоишеная 3ííe:íi;:ni¡o2its, упрощен::я работы, с учогом новых знаш!; ¿гзкологячосгах процессов и ncíípo-oí¡-Еокрипной регуляция организма sieosühx.

Для визкваиия шюиост&энно" опукяцни. используя» различите гориональнио пропарагц, обялпавдио «¡олтулостику.чирувдсй активности). Несмотря на постигнуто успеха в стямуяяции супорос?ля- • цин у коров, решения яячникоп ка гоиасотропяш остаотся копроя-сказуекоЯ. Еярокоо внедрение метода в практику зависит от изыскания наиболее эКэктявних препаратов, шзшзкдах супоровуляция.

Большое янишнле удоллит отбору коров-доноров. Особо обрачуг-dt внвманио па с ос юл; по половых органов л обцоо здоровье яогго-ра. Коровы с наполиоцешшыа полов«!.:» циклами я кпетатл ядчшксоп к использованию в качества доноров считаются г.олрягоаик. Однако, в условиях Cntínpii. со споцис.яческсЯ кормово:'. базой а прт;род-но-г.ляматичасклми условиями, боеллояхе коров, обладавших гысо -ким генетическим потенциалом, обусловленное различии;.::! Гунгцяо-пальными отклонениями в яичниках я катка, широко распространено.

:'з ?ункциональних paccrpoücrn нал боло о Часто диагностируется гипофункция яичников, 'iaiaie «ивотеио, в спязя с «ногокрагоиып , неплодотворными осемононпя?.:и, аибракоэигоютол пз orara пr:i зсо'Л важности п' необходимости получения от них наибольаего количества потомства.

Поэтому исследования в области тгансплагг.'ачп:: ззпожгпзи -актуальны. Внедрение в скотоводство Омской области этого мотона позволит в 5-10 раз сократить сроки получения Di'cov.o'iporiynvnrtnix племошшх яивотннх.

Howqp государетвошюп регистрация 0I.9I.C03S7O;:

Поль и задачи ясолсцоташ'Й. Целюо гагах ассл?дозг>г:»: я?лт1-

ся !;з.'л:о!.\:о разг.пчнвх гоют.стропипсв на суперову ляцип,

ло^чоглво, "глоо'х-во, ''".]3!'оспосоСяооть зародкж! il разработка способов кспсльзотняя вто::ол?одугсгавиюс коров с гвпогТункцясй п1чпк:ов г. сглчегзо разсг'г юиоров.

г/:о.. бгад лсс"спда;:и слосукаре залрчи:

- ¿як. cpaj;:.::ïc;:ii.;:yD харагл'орксглгу гокссотролаих препаратов, копом.пуо:.:ьтс в ::par.i::i;o трапсплантачии зароэтпоЛ. и язучягь за-b::c::;.:ccv-> еуисровуглдип, количества в качества зародипеЗ от ro-па^стролпого лропарата я врадош качала обрабона:.

- i'anpadcvaTb метод опропслспяя -дзвоспособшсги заропзляой.

- ¡.'зуч:: п. плишкпу обтлоьиах процессов у коров-допоров роаги-rrrai::-. ¡1. кс рзакц::с;1 супоровуляцив на гормональную обработку.

- Разработан потоп: предварительно" си.ь.'уляцпи воспроизводл-толь:;о:". ryrsiaçK! коров с гопо£упкдоовалыодз отклонениями в яич-шша:: им ;:спользования их и качество разових допоров.

- Устанодагь влияние сгаиугдцай воспроизводительной ууншш коров-разовнх дапопов па обменные процессы в организма.

Научная иогязна. Уссаповясни наиболее совершенные варианты янье.-адц гоиааогршавх пропарагоз. Нзуюио соотношение количества -.делзих тел, вкшта заропшей (в том час до пркгоашх для по -посадки), когсиаоЕрованиюс и неодлодотворешшх яйцеклеток по веем вариантам сутюровуляцид. Усовершенствован способ определения гдзноспособносзи зародила!!. Разработав способ стимуляция воспроизводительной £уг.квда bu бракованных. високоцроЕГкгивиих коров для вспоп>зоваизя tir в качества разовых доноров зародышей.

Практическая заачя?.;ост» полученных гезтлт.татоа. Усовершенствованы могопи суперовулкторной обрабоиа: для использования лучших «аркаиюв в регионе ЕаладооЙ Сзбири. Способ опредядоияя жизнеспособности зародшзй по э ла кт роо en no v и п яяомос ге прозрачно:"} ободочки позволяет выявить зарозшши ие способные к далькеГяёку развитию я ескратигь раипга эмвриошимуи смертность при пересадке. Слособ стимуляция воспроизводительной ^уивдив коров с ги-лс^ункцкоиакышаа отклонениям:! в яичниках монет шроко прк.;энятьг ся в хозяйствах. ЗТ.^октквность способа составляет 05?!. Материала рао'огц нело.чьзудгея в учебном процессе Омского института петери-napuoi; медицин я ГСазспсдой государственной академия ветеринар-

ной мопицинн при преподавании курса " Акупорство, л;токология в биотехнология размползнпя '.звотних" и "Оязкология и этология ая-вотпих".

Ссноэпю попог.ония диссертации виноси.'.ио па затиту:,

1. Сравнительная характеристика отвчествоншх и зарубежных гонадотроппых препаратов и их влияние на ■ количос тпо и качество зародшой, получотшх от короз-дсиороа.

2. Нотод определения киз!юспособг.осга зародгасЗ по элоктро-сопромвляеыозти програчной оболочки

3. Хинамика обмоиа веществ у коров-доноров, рвагирукгрх и не реагирующих реакцией супвровуяяция

4. Способ стимуляции воспроизводительной функция вибракован-ннх висскопродуктивних коров для использования их в качество разовых доноров и вмшнга стимуляции на обкевныа прсяосси в орга- • :шз:.19.

Адробацпя результатов диссертация. Ссшдашо полоза нея диссор-тации доложены и обсу:шени на Всесоюзном совещании по трансплантации зародышей (Алма-Ата, II,СО), Республиканской научно-практн-чо с кой конференции (Семипалатинск, 1291), ХШ7 научной конференция (Екатеринбург, 1993), 1-ой Международной научно-практичос-кой конференции по аграрным вопросам (Алма-Ата, 1394), Всероссийской научной конференции по акудоэрству, гинекологии и биотехнике размножения клвотних (Зороноа, 1394), на научних конференциях преподавателей и аспирантов Омского института вотаринарноИ медицины (1322,1993,К&4,1035), освещены в трех информационных листках Омского центра научно-тохаичоско!! информации.

Публикации. По темо г.иосортацкв опубликовано И работ.

Структура и объем ячооотяации. Дюсоргацпл излокона на 125 страницах шшнописного гака та, соевой I из' еводсшя, обзора литературы, собственных исследований, обсуяиопая, вгаодов. практических предложений и прплояений, Иллюстрирована 25 таблица"-:;: и 19 рисунками. Список литоратурн впллчаот 22С источников, в том число 74 иностранных авторов.

ШЕК1АЛ И 1.Ш0Д1 ИСС;ШД03Л1ь1::

3 настоящей работе обобщен материал собственных исследований за период 1988-1034 г.г. Зксперимеяталъыив исследования внполня- "

лвсь » госкло;.:еплог.э "Омо:смЛ" е опытном хозяйство Сибирского ¡'аучно-иослзасза^елтлкого института сельского хозяйства на базе лукятоэ по транецлактации зародшоД крупного рогатого c:toîa, a "arc.-a г учхозе П1й.7гппопокоо" Омского института ветеринарной мо-цэтцш с пепог.ьзевагием ьцзиод.отлчоских, годатологических, <5ио-хямеч2с:2:х могоппк псслосошыС.

Б гса-ксг'ао шюроа зспользоаела кдзпичоскя здоровых норов (л=54) no:J3Cî3o:t (гожтш:о-{ризсжоЛ и чорпо-лострая) и голатгло-(Гризской попсе, "ь'зай масоо2 550-600 кг, продуктивностью В-0 тис.кг иояоха и хзрпессь» 3,6-4,2?. •

Отбор, lozrorraicy, пормловио и содержание коров-ионоров проводили по ¡шозиша а нормам L'a.

Супоровуляот у гмиоров визжала глпо^кпащшя гормонами отечественного и запубз:.:г!ого производства. Лропарат £СГ-п (СЕЛ) ваоетп! в об:г.ол нозо '10 кг. 5олля тропик (Литва) и ОСГ-Сугсер (АС СоцзЛгро;.!ог.) - позах 1200 Ед и 5Се.а,с соответственно. Препарат Долейте (Россия) применяй в разных .юзах. ГлпосТязарнио препараты ¡¡нъедароваот ра 0-12 сакь толового цикла доноров в течение 4 зшеЗ, EBar.su в пень с ипюрзатоа шаеу обработками 12 часов. Простогдзшвин Од - альт; а (эстро£ан) в дозо 500 мкг ввошлв на 3 ÎOHL обработки.

Ксров-аоноров ссемоияля двойной дозой оттаянной спорый рвк-тоцорвккалышм метоьом 2-3 раза, с тате риалом мэяау оссшененпя-мп 12 часов, в зависимости от продожягольности охотп. Для осэ-иения короп-лонороп вспояьзов&тась спорна бшеов-произвоиите-ло2 гсггктияо-Сгжзс'.со^ порош, проверенных по качеству потомства и признаиних улучеатоляка по селекционируем».! признакам.

Контроль реакции яичников провопим! рокталыю, на 7 лень после осеменения, при этом ограничивала до мгкимума все манипуляции с матке;: и яичниками. Пвпосросствонно перед вютвапвом заро-шлаой проводили поссчзт желтых тол и ноосулпровшпнх ('оялккулов.

Зароваши у коров вимиваля на 7-G дзкь от начала охоты. Для святая напряжения прямой кишки проводили сакральную атстезив

растЕором новокаина в поза о мл. Ддя выдеання пароле"! использовали среду Дильбокко. Извлечение зг.роютоП проводила по мгтодико

качество заротлзе:: оценивали по стали;; их развитая, постоянен

км точной массы п оболочек, характеру овдав ичиЛ бдатсмзраш, прозрачности гюреоитолялнового пространства. ^аре;ил£;т хлиосг?::-цвропалп как нормально развито, о частично Л ¿огопорацкоЯ, ео-гояариропаннио я подлолавдо внб^исовтст. Отдольио вселял;: неон-

ловогвероньио я^цоклоткн.

Хромо мор^ологичосзоЛ оценки зарошлмй онромлл.тл рх гдзно-способпость по элокгросопрогивлягмосгв прозрачной оболочки па методу Л.М.тупзамагшева в напой (рач.продло^оипо

.'?322 от 1-1.01.95). 3 качество взморягольного прябора кримоаяи! нультвмотр 37-35.

3 качестве рэздпвенюп кслользовали голо:: (и=300) и воздаоха 15-18 мосяцав, ¡липой массой ЗСО--1СО кг. Лолгоюзку, отбор ?, синхрошпадао полового цикла звяон-роуппиекгшз, лолгогоэуу их к первсапкэ и поросаяку км зароидао* провопили по м топикам ЗГГа.

¿ивоттс с имплактяровантагд зарамзани лорки Л1 и сомр^аля в обцчикх условиях, но вопуекзя травмирования и стгяоссаи* си:уаци£.

На СО конь после перосагеи зарогшаай, ::етотних ясс.тоноваяп на Зорэ.мо.чиосгь штспон регстгугыю'л пальпация. У голлт, рояшгпях-

ОЯ ОХ ТОЛОК-рСЦИНИОНГОВ, В 2 МОСЯЦа ПООЛС ТОГ^ОПКЯ бУ-ГЗ Г'рОЕЬ

и а иммунологичоскоМ лаборатории просо-члп гомт.ччис.чий контроль ярокоха'.аоиия путем сравнивания групп хрозн поцямдо:^ с группоид крови потомков, контроль за росзон з глэзитиои толя? проводи-И! по результатам о'.'сакесячшк эзвзшнпаг«:::.

При мор^озогвчоскок исадэгяЕакли крови (п=Т8) проводил;! пое-счог орятрочитон I! лойкощ-'Юз, иияоаилп лен'кограгм.у по общеприняты г.отоникам. При гфопо^ошш биохимических исслос.оыаннЛ (п=34) определяли гоиоглобяи по плоду Саля. Спродолокш каротина пропоем;! эгкпросс-мзтоиоы по Порошке;.огу, тгалпг.'я по Проате-чонскому, Гос^ора по Явакопсясму, обзого аех'л -на р.>?1шюмегро Гг'Л-1, белковых но Госсу в иодя.!акации Герзетовочого и

аолочно!! р.эзерп - шайуздаи но годом с помоп;:.» сулоаяих колб по И.П/'Ъиаракину.

¿.ля спита, по земо&ьзоранм» ппсоколродуктгшш:-: ко роз 2 ::ачэо?-ва разопик допоров, после идояэпдатахьпАЦ стимуляции, бклв отобрана ксрояи (п=15), ни0ракооо;г.!1.'" из осномого ета::.а о И'агнозом гипо?уикцая яичпшеон. -¿гаошм раздало пи на .? г:>упг.и; ют-яро яь-

- g -

ную и три опитпиэ (по 3 коропы в кседоЯ).

Нами била разработала методика восстановления половой функции коров с использованием "Злоктростимулятора EAT". С помощью этого прибора проводили поиск биологически активных точек с учетом индивидуальной вариабельности и электропроводимости тканой, а та&.ю их стимуляцию постоянным и импульсным током ".'toan in". lian удалось, при многократном испытании прибора, найти ранее но извостяш биологически активные точки, реакция которых била наилучлой при лечении гипофункции яичников. Прошксенпий нами способ восстановления половой функции коров экологически чистш, обладает виоокой специфичностью, прост в применении, исключает применение меднкамонтозпнх средств.

Поело восстановления половой функции, по предложенному кш.!и способу, у г.лвотних опытной в контрольной групп стимулировали наступлонао половой охогк и, па 10 день полового цикла проводили гормональную обработку по чогырезс^шеаной схеме.

На содмой вепь посла осомошвия у хэзотвих, убитых на мясокомбината, извлекали зародшш, предложенном нами способом (рац. предложение !' 310 от 10.01.94). Определяли линейные размеры яичников, количество в них келтых тал и неону ли ровавших фолликулов. Для обнаружения колдагоновнх волокон срезы яичников окрашивали по Еан-Гизону, а для гистохимических исследований - по Г^убичу и Стадмену.

Математическая обработка цифрового материала проведена с попользованном ЭВМ.

резульхШ соягшшх деошшпя

Получение стабильных результатов, при сулеровуляторной обработке животных гонадотропинаыи, является основной задачой, от решения которой зависит эффективность применения метода трансплантации зародышей в практике скотоводства.

Вахныы моментом при вызывании суперовуляции является выбор оптимальной дозы гормона.

3 исследованиях, лроведонпых на четырех группах коров, было изучоно влияние различных доз гонадотропного препарата фолдикгс. Проводилось испытание чогырэх доз гормона: 20,30,40,50 нг (табл.1).

Вдияиио различных доз ^.олликгса па урогопъ сулор -овуляции в качосгв^ зародтзл

показатели 2С : 30 : : 30

Обработано коров П Ii Ii IT

Реагировал:: супе pony ляциои, C.3.G ICO ICO r> г r> д., _»

Число овулпцпИ на до- . нора 2,2^0,5^ 10,liO.3х

"олпчостео зародшо"; на донора е,з±о,?4х G, I.£Ç,.Î 0х

пз них пр:гогешх к па росадка 4,CÍO,е:х 5,5-0,3?.:c C, r¿0,51х 'i, liO ,45х

дегонорипогапнне п отстаяппё в развитии I,3¿0,33 I,'i¿0,3G 1,о±о,з: r.s-o.-ic

аоопло;:отзого;1ш;о яГ.цогслоид! r,0Í0,30 O.'JÍO.Sñ о.гДо.с^ 0,7±0,32

X Разл1чя«-: достоверны Р<0,С5

Достоверных: разлгшЛ по овуляций ¡:n донора з записи -

мости от il03!; препарата но установлено. Паблюдаотсл снижение количества короз, роагирувдих супе розу ляц:: cri: при с :;:::: и уэо-гачотга сози npoaapaïa в I а 4 группах (03,G в 31,'^).

Число зародила" нормальных эмбрионов на донора било па -емонш:;,! в I в 4 группах. По чиоду догонорирояапанх загоипга;'! и ноопдодотворопких лйцоклош; суцоствоиних различи:; но зиявло-но.

'х'акяи образом, поза (оллпкгса 40 мг э^сктивноо по двум наиболее ва'.анш показателям: выходу зарспгае:; па донора (8,7) и количеству зарсгшке;! дркгошшх к поресатпсо (С,С).

В последующих исследованиях била опрэлолэла эЙокгивность обработки коров различит: гонадотропннаии: ССГ-п, Солллтрошш, £олл:п-:гс, ССГ-Супор (табл.2).

Ii группа коров, обработанных ОСГ-Супор, било болта г.ивот -них, реагировавших супорозуляцио'! (100«) по сравпониа с 3 и А rpynnai.ii: (03,3 и 70,соответственно). Однако лологлиолышх по извлечению папоаш£ допоров оказ . .ось болиде в 3 группе

о -

Табдща 2

Злиятао гопадотропинов на уровень суперовуляции ц качество зародыша

Показатели

Гонадотпопння

ССГ-п : Оо л ли кто

: ОСГ-Супер

Обработано короа

Реагировало сушр-овуляцпей, %

Число овуляций на покора

ПоЕОГ.ятвльнкх до извлечении запори по£ доноров, %

Количество зародило]; на донора

из нех прягодних к па росалке

догеверарованнпх

неоплодотворешшх яйцеклеток

15 24 15 10

100 70,8 53,3 100

11,6^0,36х 2,2-0,80х 10,2±0,50х 9,9±0,5GX

100 81,2 Я2,8 90,0

8,7±0,46х 5,7±0,33х 7,5^0,30к 7,7±0166х

6,<£0,47х ' 3,2*0,22х '5,4*0,43х 5,ГД'0,?7Х

0,73±0,24 1,06+0,24 1.3*0.34 0.67*0,32

I.06±0,26 1,46*0,33 0,93*0,20 1,0*0,30

х Разница достоверна Р<0,01

(22,8$) по сравнению со 2 и 4 (88,2 и 90,0£). По числу овуляций существенных различий но выявлено. Выход общего числа зародаей и нормальных эмбрионов был выше в 3 и 4 группах по сравнению со 2 (7,5 и 7,0 против 5,7 и 5,4 в 5,8 против 3,2 соответственно). По количеству дегенорировашшх зарошпей и неоплодотворонных яйце клеток существенных различий не выявлено.

Прнвешзннш даяние показывают, что отечественные препарат Солликгс п ОСГ-Супер по своему биологическому действии но уступают импортному ССГ-п. Результат применения ^оллитропина, по всей ооповкым показателя:.',, оказаиюъ достоверно низкими.

При обработке попоров различиимя гонадатропними препаратами, в зависимости от¡дня начала стимуляции, существенных различий по уровню овуляции и качеству получении зародшдой на наблюдалось. Однако, полоти тельных доноров по извлечению зарошпей было больше при обработке норов на 0-10 чень.полового цикла.

Качество, стадия развития и аизпеспособиость зародшлей при применения различных гонапотропипов

От оценки качества и яизнеспособнооти получении* зародисоС во многом зависит эффективность трансплантации.

В результате морфологических наследовании ¿ародилоЯ было установлено, ■что нал большее количество из них приходилось па стадии поздней моруян и ранней бластоцистп (табл.3).

Ранее било отмечено, что качество зарэдшел зависит от гонадо-тропного лропарата, которпм проводилась обработка (табл.4).

При обработке :лизотних ССГ-п, фоллякгсом и ССГ-Супер существенных различий в качестве цзвлочошшх зародикоП но вияэкопо, хотя, паименыпиЙ процент удовлетворительных (7,0) ц догенериро-вшганх зародшлей (7,0) бил при обработка ОСГ-п.

Морфологическая оценка качества зарошшо:! имеет пирокое распространение в практике трансплантация. Однако, она не всегда выявляет тонтае, структурное изменения в бластомерах, что по позволяет судить о глзнсспособцости зародша, как одном из ведунах факторов, влияющих на прияпвляекость зародшеЕ.

Таблица 3 • • Стадия развития извлеченных заподлееЛ

Показателя

ОСГ-п

____Гонадотпопинп

Г^ЩР?0 : ооллияге

:ОСГ-Сунеп

Исследовано зародышей Боего 113

65

Морули ранние (п-£) 10-0,5 . 20-30,8 Модули поздние (П-£) 64-54,2 23-35,4

Еластоцвсты ранние (п-З)

Еластоцпоти поздние

и-%) ..

36-30,5 16-27,7 8-6,8 4-6,2

ат 0-2,1 40-45,5

36-40,9

4-4,5

62 '3,С 27-43,5

25-40,3

0-12,5

11ат предлагается метод определения жизнеспособности зароди-еэй путом измерения электросопротивляоиости его прозрачной оболочки. Нами определена этктросопротивляомость прозрачной оболочки зародышей в различию стадия развития. Результата исследований показывают, что чем выше мзнэспоообность зарошпой, тем вы- ,

- 30 -

. оло:;т:кхюпрот;:влдо::ос2ь их прозрачной ободочки.

Таблица 4

'лг'ологлческоя оценка пзвлпчэншгх зародшдец в зависимости от гонадотролпиа

!ог.аг

Гопадотропиш:

Г-Л

'.^З*90' ¡'Толлпкгс

: ССГ-Супор

гг-нм;!, г; 127 05 С7 55

'Лз них:

ОТЛИЧИЛО, * 23,0 7.0 10,5 21,5

хороаио, г 51,4 47,0 55,7 ПО, 4

удов ЛО ГЛ30"Н толь-пго, 2 7 г 1 оп о | о II,3 15,3

5огонерцрога:пшо, 7,0 23,5 о 2 3,0

Сародт::, ко тори о но морСокогяческоЗ оцепко били относопп к "уСОЕЛЭтворз50ЯЬИШ" И, П:.:0ЭДИ!,1 сопротившэмость НЙГ.С 15 ПОМ, проверяли методом культивировался. Оценка пооло' такого кратковременного культивирования показала, что состояние зародыша:! ос-таотся, приблизительно, на исходной стыдил. При этом о а: о чао тс я газрихдоняо клеточного комплекса, разграничение бластомеров'усиливалось .

"ог.'.но пред1ю.ю:;;;:ть, что зароднпя по .морфологическим прпзна -ка/.1р отваооннио к условно пригопиш для пересадки, но им'евпве сопротивляомость прозрачно;'; оболочки ннг;е 15 КОм- ножзнеспособ-!Ш.

3 процессе окспорямантальних исследований била установлена ин-кш:: дуальная особенность иокоюрих коров производить зародыш с высоким процентом ккзноспособпостя и последующей пригДЕЛЯОМОСТЫО

Влияние уровня обмена веществ у коров-доноров на реакции •супоровуляции

При биохимичоскгос исследованиях сыворотки кровя коров, реагирующие я, по реагирующих1 супоровудяторноХ реакцией, вист доны одедув:г,яс различия: для :.:пеотннх, отрицательно реагируэдях па горлональнул обработку, характерно наличие обменного ацидоза (грлечго:; гооога - .13,7*0,44 об/лЮо против 5И,6*С,62 обЖСо

Таблица 5

Гематологический профиль коров-доноров .реагирующих и не реагирующих

коровы с отрицательной реакцией ---------коровы-доноры с положительной реакцией

Таблица 6

Гематологический профиль коров • доноров по сезонам года

январь июль

апрель октябрь

у положительно реагирующих), возможно нарушение процессов $ос--$ораянрования (содорпаняа неорганического $ос$ора 2,0^0,57 ммоль/л против 1,66±0,52 шоль/л), повышение оодеряания общего белка (10,0 т/% против 7,6 r/f<). Однако, все изменения происходят в пределах рзиологической нормы и различия не достоверна (Р70.05).

Наиболее высокая реакция супаровуляцпи отмечалась при содор-дании общего белка 7,6 т/%, щелочного резерва 51,7 об^С02 и неорганического ïocQopa 1,'67 шголь/л.

При морфологическом исследовании крови, в лейкограмме коров-доноров, отмечалось увеличение эозииофилов до 12,0 против '7,0 сегментоядерннх нойтрорюв дс 34,0 против 23,0 и спизенио лпм-<7оцлтов до 48,0 против 60,0 процентов нормальной лейкограммы (табл.5).

Анализ сезонных изменений биохимических показателей крова показа* достоверность различий наиболее внра.~еишх колебаний в содержании каротина (зимой - 0,4, воспой - 0,2, пз'том - 0,9 и осеню - 1,6 ыг/£). Уровень ноорганического £ос£ора оставался достаточно достоянным, а содержание кальция было низким в течение всего года, хотя, в летний период, отмечалось незначительное его повисшие, до 2,50 ымоль/л. Щелочной резорв в весенний период находился за шш;ей границей нормы, а наиболее высокий отмечался в летнее время (Р<0,С5).

Стабильность уровня обмана веществ у коров-доноров, по нашим наблюдениям отмечалась в осенний период, который явился наиболее оптимальным для трансплантации зародышей..

Рост и развитие тэляг-трансплантатов

При изучении роста и развития телят-трансплантатов (табл.7) за весь пориод выращдвапия (1-365 день) но установлено четких закономерноетаЯ прироста айвой массы. К 12-месячному возрасту • . телята-трансплантаты несколько опережали в кипой мае со своих сверстников опытной группы, но без достоверных различий.

Один раз в -квартал, начиная с 3-масячпого возраста, у бычков брали промеры зуловиада и вычисляли основные индексы телосложения. ЕЬчки-трансплаятаты по показателям промеров несхюлько превосходили своих сверстников опытной группы, но .азница была по-

доотоворной. 3 индексах талоедогоняя разница но отмечалась, что гопорит о сходство типа телосложения бычков огалиой я контрольной групп..

Таблица 7

Возрастная щшамшса ;.'лвол кассн толят-транспланта-тов к ях аналогов

Возраст : ОТГГ1Т : коя? гота

(мес) О^ЧлИ п=Л . тая?.:; • ,i=I0 . окч::и • п=0 те лкп • гт=Г0

При рождении 3C¿0,D 32-0,'í 34±0,С 31*0,0

3 104*4,1 Г; С+9 1 58¿2,3 9G±2,8

6 IS£¿3.-4 1?0-ьЗ,2 IC0Í3.7 I65±4,I

О 270¿4,I' 24?±3,0 25CÍ5,4 238*5,3

12 350Í5.I 320*4,2 324±i,S 312*4,7

Сосзояшю здоровья коров о гипос[уша;яей яичников

Соотоянм воспроизводительной способности янвотних находится й определенно!: зависимости от сбмешкх процессов в организма. Нарушила обмена воцоохв приводяI, кро.мо других измононий, к спяг.мшя воспроизводительной способноети и и большинстве случаев к гипофункции яичников.

. Лля ошха были отобраны аысокопродуктишшо »'вотпые (удо« 5000 кг и болао). ¡1а спорно, гпо содержались опыпшо коровн, применяли концонгратний тип кормления. ориаитироЕашшй на получение 'максимальных удооп. Умановяонноо у это кик низкое содеркаппо каротина СО,ЗЭ±0,02 гх/%) указиваег на вирахэпшй дефицит витамина Л. Отчается сосгояние компенсированного ацидоза. Содор-ианио общего балка понижено, при этом отмечается снижение уровня альбуминов с одиовраменним повшоняои уровня глобулинов, что Н0Г.ЗТ обуславливать депрессии функциональной активности яичников.

У кивотннх о тго чаются иарупоняя ритма по лоз ого цикла, мпопа-ствошша. неплодотворное осеменения. При роктальнон исследовании регистрировались слабая ригидность ыашз, незначительное умент,-иоипо в размерах одного ияа обоих яичников, отсутствие гелгих

тел и фолликулов.

Макроскопически установлено, что у этих коров яичника икели пебольаие размеры и злипсоидную $орму. На разрезе обнаруживается не более 4-5 калл их фолликулов. Желтые тела и зролио ('оллику-ли отсутствуют.

Микроскопические исследования яичников показывают, что наряду с возрастными изменениями, такими как умеренная коллагенизадия соодииатольнопсаиной основы отромы, содержание большого количества клеточных элементов, наличие в цитоплазме "нбробластов, отмечается изменения характерные дот гипофункции яичников. Наблюдается явления склероза соединительнотканной основы коркового вещества. У большинства кровоносних сосудов просвети спавпаася, вонулк рас'лпре¡ш. Попобнио изменения связаны с нарушением обменных процессов, а наличие в этих участках тканових базо£ялов указывает на интоксикацию.

Характерным является то, что в процессе атрозии вовлечены, практически, все типы фолликулов. Ото толю указывает на выраженный ш$ицит вита'/зпа Л, который проявляется повыионпой атрозией фолликулов.

Использование выбракованных коров в качестве разовых дояоров зародыш;*!

У коров о гипофункцией яичников без предварительного лечения, ответная реакция на сулеровуляцию отмечалась у 33,3% хивотних. У этих коров регистрировались фолликулярные кисти, большое количество неов/лироваяпях фолликулов, отсутствие желтых тел, выход нсоплодотвореяних яйцеклеток, значительное снижение количества и качества зародшей и большая вариабельность в сроках их развития.

Поело нормализации половой функции у разовых коров-доноров, разработанным нами способом, сулеровуляцию вызывали тремя гормо^ наш: §оллитропином, йолликгсом и ФСГ-Супэр (табл.8).

Фоллитропин вызывал сулеровуляцию у 66,6^ коров, от которых било получено 3,1 зародила на донора, из них 1,2 нормальных по развитии. При этом количеотво неовуларовавших фолликулов было. наибольшим (7,2). . ,

При применении <*олликгса и ССГ-Супер существенных различий в супэровуляцяп не отмечалось, яо неовулировавпих <Толли!сулов было -

больпо поело пришивная {олли:сгса (4,7).

Таблица 8

Уровень супоровуляции а качество зародышой коров-разоввх доноров

Показатели .Контроль СЬлллтро-: пин '.Оолликгс .ОТ-Супер

Обработано иавотпых п 3 3 3 3

Отреагировало суперовуляцией, % 33,3 66,6 100,0 100,0

Фолликулярных кист 2 I _ -

Ноовулдровавших $ол-ллкулов на донора. 9.9 7,2 4,7 3,4

Число овуляций на до нора 2,0' 8,3 0,2 10,С

Получено зародышей на донора 2,3 зд ' 5,4 6,2

из них нормальных 0,3 1,2 5,1

дегенерпрованных 1.0 1.9 0,9 0,6

нооплодотворенных яйцеклеток 1.3 1.0 0,4 0,5

В результате проведенных исследований по выявлению эффективности использования различных гонадотропинов для вызывания суперовуляции, нами било установлено, что использовании о л ли тропика и фоллшсгса не целесообразно, так как создается опасность образования фолликулярных киот, длительная заде раит овуляции и ЛЕтеппизацип яичников, что сниааот выход качественных зародышей и делает обработку экономически невыгодной.

Наилучшие результаты были получены при обработке короп ССГ-Супер. При применении этого препарата было получено 10,6 овуляций на донора и 5,1 нормальных зародила.

Результаты макроскопических исследований подтвердили благоприятное воздействие на мойологвчо'скую структуру яичников предварительной стимуляции и последующей гормональной обработки. Отмечались преобладание в зачатковом эпителии клеток кубической $огш, в" кровеносных сосудах застойных яелоний но наблюдалось, з кровоиосних сосудах мозгового вещества не отмечалось ни <?.ибро-ьтде изменений, ни гиалиноза.

Отмечаются изменения в биохимических показателях крови (табл. 9). Ко проведения лочабних мероприятия и поело дугяцоП гормональной- обработки содержание обгого бога«, и альбуминов било понит.о-но на (Jone повышения уровня глобулинов.

Пооло лечения а гормональной стимуляция концентрация общего болка повышается, количественное отношение болкових £ракцн1} нормализуется. Отмечаются повьтлэнио соьор-ланяя каротина и цепочного резерва, Наблюдается тондонцпя к повышению содержания кальция.

Анализ. результатов исследований указывает на возможность использования коров с гипофункцией яичников в качестве разовых доноров, посла предварительной стимуляции воспроизводятльпой £уысцкг и использовании в качества гормонального препарата ОСГ-Супэр.

В И В О Д И

1. Отечественные препарата Толлинге и ССГ-Супэр, испытанные па коровах-донорах, обладает хорошо ввраяонным iолликулоститулиру пли м действием. Их использование позволило вызывать у доноров созревание я овуляцию 0,0-10,2 (Толлакулов и подучоня'е 5,4-5,0 нормальных зародышей, Доза иолликгса в 40 иг является наиболее оптимальнса1 при яримэнонии которой модно получать 11,0 овуляций на донора, 8,5 зародыше!! из которых 6,8 нормальных.

2. Гормональную обработку доноров лучше начинать на 0-10 день полового цикла, а не на 11-12 дэнь, тогда доля получения нормальных, жизнеспособных зародьллой повышается, а качество зародышей зависит от гонадотронного препарата. •

3. ПредлокешшЗ нами метод определения хизнеспособности заро-дшое2 по злектросопротивляомостя прозрачной оболочки позволяет выявить при оценке непригоднее зародыши и этим предупредить раннюю змбриокальнуп смертность при пересадка.

4. Изменения состава крова н;ивотшх, реагирующих и не реаги- '. рувдах на гормональную обработку происходят п пределах Си зи о логической поркы и из могут слуяагь самос тоятвльнш теотом качества оупяровуляцйи.

Однако изменения показателей общего бэлка, щелочного резерва, неорганического ioefopa и морфологического состава крови в комплексе о другими методами дают возможность прогнозировать уро -

Гематологический профиль коров до и после стимуляции воспроизводительной функции

Таблица 5

\

\

12,9 66 8,6 1,94 2,8 +Зо

12,4 62,6 8,3 3.0 1,86 2,4 +20

11,9 59,3 8,1 2,9 1,78 2,0 +1а

пивгяЬм \.,4 рщумт ■ль—1««»» 56 ОбимА 7,9 КыыМ 2,82 1.7 Кяртю* 1,6 М

1Ф.9 \ 2,7 1,61 1,2 -1а

10,4 49,3 у--7.4 \ 2,6 1,53 0,8 -2а

9,9 \."'46 7,2 2.У 1,45 /. 0,4 -За

0,5 3.3 0,2 0,1 \ ¡т 0,4 а

03 I

до стимуляции после стимуляции

пень сударов;\'Шщ;я.

5. Разработанный нами способ стимуляции половой 'упгцип коров, заклшавцнйся в применения ''Олектростямулятора ¿.Vi", вя-таминно- я гомотерапия оЗ^октивен, но даот побочных язлепяП,

но требуот применения МОДЯКеШНТОЗПИХ средств, прост в применении, нормализует обионнво процессы в организме я морфологическую структуру яачпиков.

6. При дефиците доноров могло использовать выс(. -«продуктивных коров с неглубокими нарушениями функция яичников у которых, после применения метода стимуляции, разработанного нами, nopva-лизуотся половая (функция, В качестве гормонального препарата для них лучше использовать йСГ-Супор, послз чего мо::но подучить от них по 10,6 озуляциИ и по 5,1 нормальных зародышей.

пр.тлчЕсгсп тдахззш

1. Разработанный наш способ стимуляции воспроизводительной функции коров, рекомендуется для оирокого прзмопоркя в хопяйст-вах при лечении коров с функциональными отклонениями в яичниках.

2. Животных после восстановления у них половой (функции слодуот осеменять во 2-3-п стадия возбузаония полового цикла.

3. Результаты наших ксскодованяй могут быть использованы при чтении лекций а проведения лабогйторно-пракхческях. занятий со студентами, а также при написании учебных пособи!} по курсу "Акушерство, гинекология и биотехнология размножения тавотник" и "сязвологии и этологии янеотнмс".

СШСОК (ШБЛЯ03Л1П£.Ж РАБОТ 10 тжз даяйртАТк

1. Снротянпп A.A., Алдаяров Т.Ш., Авдрева Т.А. Качество гормональной обработка при траксплаятацрп эмбрионов в ТПЗ "Слоте«"" //Тез.докл. Всесопз.совэщ. по трансплантации эмбрко«од с.-х. гшвоткых. - Алма-Ата, 1080. - С.43.

2. Хлталин К.2., Авдеева Т.А. Звишю .фолликгса ка коляоЕудя-цию дачников коров-доноров //Научные достижения молодых ученых

и специалистов- животноводству : Тез. док л. Респубг.науч.-практ. кошф. - Семипалатинск, ID0I. - С.3D.

3. Баталии E.-L., Авдеева I.A. Способы вызывания, супоровуляции с использованием различных схем и гормонов //Про?няактл.'са и ло-чонио козарозннх болезней с.-х. аиаотнвх; Сб.пауч.тр./СмСХЛ.-

Смак, I0S2. - С.42-44.

4. Авдеева '¿.А,. Пдаядаа ОСГ-Супор на суперовуяяториую реакцию яичаиков копон-г.спороа //Тиз.докя. ХШУ "ауч.кон£,- Зсате-ргнбург, 1053, - с. 78. •

5. Авдеева i'.A., Гатапш ¡D.S. влияние гопадотрошшоп на уровень супоровуляики, качоство к стакан развития эмбрионов крупного рогатого «tosa //Диагностика,' лочетае и профилактика незаразных и :jii;]o:c:scuiwx болеп.чей с.-х.. аивотиых Западной Сибири: Сб. иауч.sp./CMvTüi.- Оцск ДЬО-', - С.62-64. •

С. Авдеева i.A. Сравнительная характеристика мор'олопичоских я биохимических показателей крови у коров-доноров //Диагностика, хочопав и прсх;>:лаМЕка незаразных и внГекционнис болезной с.-х. кгаотнЕХ Западной Сибири: Сб.науч.тр./СмСХИ.- 0мзк,19?4.- С.С4-Су.

7. Авдеева Т.А. Действие различных гонадотропних препаратов

на яичники коров-ноноров и качество омбрзоноз //"шиичокпе, мор-Сологачеокво и й'шодюпальные проблемы современной ветеринарии и' яивотновоастза Дэз.яокл.гауч.коиЗ;.аспирантов и прел. 013;.5.-Омск, ICS4. - C.65-G7.

8. Багалш; ¡D.E., Авдеева I.A. Наиользоваизо выбраковаиных поров в качество разовых доноров эмбрионов /Л'атер.Псэроссвйснзй науч.дон?. по апукоротву, гинекологии я биотехнике размноядапия r.y,BOTiti:x. - Вороная, ICC4. - С, Г32.

9. Еатахш J0. П., Авдеева Х.А. Способ ошшуяяцр:: полово!! функции высокопродуктивных коров /ЛЬТошацЕошшй да с ток Ом.^ГП!.-.'■'ЗС-ПС.

■ Ю.'Еатаизн 10.2., Авдеева 'Г.Л. Морфологическая характеристика лячштков коров о пто;1уккщ}о«лльн1е:я отклонениями до и поел:' сга-ауллега воспроизводительной сункцпн //¡'^{ор.чациошшй листок Он, j; зз-сс.

11./ддезва 'i.A. Сравнителькая характеристика гоаадотропних препаратов отечественного и зарубежного производства //ПкТорма-циоянь'Й листок Om.UÍIüL- J'45-CG.

12. Авдеева 'i.A. Оцонка качества получе.чшх ¡эмбрионов /Лео- • ротич.-и практвч.разработки некоторых проблемных задач современно.! ветеринария г животноводства: Матер.науч.кон£./0мГА7, Омск, ISSC. - С.4-5.

13. Авдеева i.A. Пзискаиие способа подбора и восстановления

воспроизводительна^ функции высокоценных коров для использования их в качестве доноров эмбрионов //Проблему с.-х. Сибири: Сб. науч.тр.аспирантов, молодая учешх /Омск, ОмГЛТ, - ID9G. - в.1,-С.33-37.

И. Авдеева Т. А., £абиа H.H., Ей та лип D.H. Электропунктурная

горапкя высокопродуктивных коров при пшо^ункщш яичников //про-

блеми о.-х. Сдбиря.: Сб.науч.тр.аспирантов, молодих ученых / ОмДО.- Омск,IC0G. - в.2.-С.31-40.

Сдано в печать 6.02.97. Формат 60x84 1/16. Бум.тип. X 3. Печать офсетная. Уч.-изд.л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ 7.

Типография ОмГАУ, Омск-8, Сибаковская, 4