Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние пробиотиков в комплексе с адсорбентом на физиологический статус телят, их рост и развитие

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние пробиотиков в комплексе с адсорбентом на физиологический статус телят, их рост и развитие"

На правах рукописи

ВЛИЯНИЕ ПРОБИОТИКОВ В КОМПЛЕКСЕ С АДСОРБЕНТОМ НА ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС ТЕЛЯТ, ИХ РОСТ И РАЗВИТИЕ

03.00.13 - Физиология

Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук

Белгород - 2005

Работа выполнена на кафедрах паразитологии, эпизоотологии, микробиологии и вирусологии ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Семенютин Владимир Владимирович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Шапошников Андрей Александрович; кандидат биологических наук Посохов Алексей Викторович

Ведущая организация: Всероссийский научно - исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных

а ¿Г

Защита состоится » 2005 г. в /7~ часов на заседании

диссертационного совета Д 220.004.01 при Белгородской государственной сельскохозяйственной академии по адресу: 308503, Россия, Белгородская область, Белгородский район, пос. Майский, Вавилова, 1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии

Автореферат разослан «2- ^ » февраля 2005г.

Учёный секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент

Литвинов Ю.Н.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В ранний постнатальный период основными факторами, предопределяющими статус нормы и патологии, являются уровень естественной резистентности организма, обсеменённость окружающей среды микрофлорой, воздействие стресс-факторов, характер питания, эффективность трансформации питательных веществ корма и др. Последняя во многом определяется метаболической активностью и составом заселяющей желудочно-кишечный тракт микрофлоры (Т.А. Николичева, Б.В. Тараканов, 1982; И.А. Бойко, Г.А. Водяницкий, 1992; Б.В. Тараканов, Т.А. Николичева, 1992 и др.). Простейшие и микроорганизмы заселяются в преджелудки молодняка жвачных естественным путём при контакте со взрослыми животными. Промышленная технология сводит его к минимуму или исключает вообще. Альтернативным решением в данном направлении является искусственная фаунизация желудочно - кишечного тракта рубцовым содержимым и (или) применение пробиотиков.

Антропогенное воздействие на окружающую среду приводит к её загрязнению и накоплению в ней токсических веществ. Вовлекаясь в биологический круговорот, они надолго удерживаются живыми организмами и неизбежно попадают в молоко, а затем и в организм новорожденного, вызывая токсикоз. Другим источником небезразличных для его организма токсикантов служит патогенная, а при определённых условиях и условно-патогенная микрофлора.

Всасыванию токсикантов из пищеварительного тракта препятствуют энтеросорбенты. Одним из таковых является аморфный высокодисперсный диоксид кремния (препарат авикан). Так, его эффективность показана на разных видах животных: цыплятах, курах - несушках, утках, свиньях и лактирующих коровах (Н.Г. Габрук, 1996; A.A. Шапошников, H.A. Мусиенко и др. 1996, 1998 и др). Препарат безвреден, обладает высокой адсорбционной способностью, в нём отсутствуют посторонние примеси.

Рабочей гипотезой нашей рабетвг-ч комплексное воздействие пробиот ikob i

южение о том, что iK же благоприятно

отразится на организме новорожденных телят. Это позволит свести к минимуму применение антибиотиков и на их основе создать препараты, исключающие отрицательные последствия воздействия медикаментозных средств.

В связи с этим изучение влияния пробиотиков раздельно и в комплексе с адсорбентами на физиологический статус организма телят в раннем онтогенезе является актуальным.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является физиологическое обоснование возможности эффективного выращивания телят профилакторного периода с помощью добавок в виде смеси различных штаммов микроорганизмов, входящих в состав пробиотиков биосана и лактобифа, а также в сочетании с авиканом.

Для достижения цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить оптимальную композицию из сочетания культур микроорганизмов и энтеросорбента по критерию стимуляции роста телят;

2. изучить переваримость питательных веществ и азотистый обмен;

3. изучить характер преджелудочной ферментации;

4. выявить возможность повышения неспецифической резистентности путём заселения желудочно-кишечного тракта молочнокислыми бактериями, содержащимися в пробиотических препаратах;

5. определить витаминную обеспеченность и антиоксидантный статус.

Научная новизна исследований. Впервые в условиях интенсивного животноводства изучено влияние лактобифа, биосана и их комплекса с авиканом на некоторые показатели азотистого обмена и неспецифической резистентности, преджелудочную ферментацию, переваримость и использование питательных веществ корма, а также, антиоксидантный и витаминный статус телят-молочников. Показано, что с помощью этих препаратов можно повысить усвояемость корма и резистентность организма, нормализовать обмен вен|йЛ-Ь и, как следствие, увеличить интенсивность

» * и.""' !■

роста.

Выявлено преимущество раннего заселения желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота композицией различных видов симбионтных микроорганизмов в составе пробиотиков и их комплекса с сорбентом. В итоге доказана возможность эффективного совместного использования названных препаратов в качестве кормовой добавки.

Практическая значимость работы. Разработаны режимы применения пробиотических препаратов на основе лактобацилл, а также определено оптимальное их сочетание между собой и авиканом для оздоровления телят.

Предлагается система корригирующей профилактики нарушений пищеварения и обмена веществ препаратами симбионтной микрофлоры и сорбента.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Использование в кормлении телят-молочников профилакторного периода (1-21 сутки) лактобифа и биосана, их комплекса и смеси с авиканом в качестве кормовой добавки;

2. Преджелудочная ферментация, переваримость и усвояемость питательных веществ рациона;

3. Изменение показателей крови, характеризующих состояние неспецифической резистентности;

4. Азотистый обмен у телят;

5. Антиоксидантный статус и витаминная обеспеченность. Апробация работы. Материалы диссертационной работы были

представлены на IV, V и VII международных научно-практических конференциях «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 2000, 2001, 2003), а также на расширенном заседании кафедры паразитологии, эпизоотологии, микробиологии и вирусологии Белгородской государственной сельскохозяйственной академии (2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано пять статей в материалах научных конференций и две в журналах центральных издательств

«Животноводство России» и «Зоотехния».

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 97 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения. Работа иллюстрирована 21 таблицами и 10 рисунками. Список литературы включает 143 источника, в том числе 42 зарубежных авторов.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Научно-производственные опыты проводили на телятах черно-пестрой голштинской породы в условиях колхоза-племзавода им. Фрунзе, Белгородской области. Экспериментальные группы формировали по принципу аналогов с учетом происхождения, возраста, физиологического состояния и живой массы при рождении.

Было проведено три эксперимента. В каждом опыте из новорожденных телят были сформированы опытные и по одной контрольной группе. Кормление осуществляли согласно детализированным нормам, разработанным для телят со среднесуточным приростом живой массы 750850 г. Во всех опытах телята I-контрольных- групп получали общий рацион, опытным - ежедневно в утренюю и вечернюю порции молока добавляли исследуемые препараты. В качестве кормовых добавок использовали препараты - лактобиф, содержащий смесь молочнокислых бактерий (Streptococcus bovis, Bifidum bacterium, Lactobacillus plantarum), выделенных из рубца, и Lactobacillus acidophilus, выделенный из кала телят, и биосан, содержащий два штамма молочнокислых бактерий - Lactobacillus plantarum и Lactobacillus buchneri.

Введение в рацион препаратов начинали сразу после рождения и продолжали до 21-суточного возраста.

Первый опыт посвящён изучению влияния раздельного скармливания пробиотиков на рост и некоторые показатели обмена веществ. Схема опыта приведена в таблице 1.

Таблица 1 - Схема первого опыта

Группы п гол. Длительность применения препаратов, сут. Дозы препаратов, млрд микр. тел/гол ./сут.

I 10 - -

II (лактобиф) 10 21 0,75

III (биосан) 10 21 1,00

Были изучены преджелудочная ферментация, переваримость рациона (жира, клетчатки, безазотистых экстрактивных веществ), баланс азота, кальция, фосфора, а также азотистые метаболиты крови (свободные аминокислоты, общий белок, мочевина). В учетный период у телят брали кровь, рубцовое содержимое, в конце эксперимента провели балансовый опыт.

Во втором опыте изучали влияние скармливания комплекса лактобифа и биосана в сочетании друг с другом и в смеси с авиканом на те же показатели, что и в первом опыте. Схема опыта представлена в таблице 2.

Таблица 2 - Схема второго опыта

Группы п гол. Длительность применения препаратов,сут. Дозы препаратов, млрд микр. тел/гол./сут.

I 10 - -

II (лактобиф +биосан) 10 21 0,75 1,00

III (лактобиф+ биосан+ авикан) 10 21 0,75 1,00 2,5 (мг/кг)

В третьем опыте изучали влияние пробиотиков раздельно, в комплексе друг с другом, а также в смеси их с авиканом на антиоксидантный статус, витаминную обеспеченность и морфофункциональные характеристики крови телят (табл. 3).

Объектами для биохимических и зоотехнических исследований служили кровь, корма, рубцовое содержимое (РС), экскременты.

Таблица 3 - Схема третьего опыта

Группы п гол. Длительность применения препаратов,сут. Дозы препаратов, млрд микр. тел/гол./сут.

I 10 - -

II (лактобиф) 10 21 0,75

III (биосан) 10 21 1,00

IV (лактобиф +биосан) 10 21 0,75 1,00

V (лактобиф+ биосан+ авикан) 10 21 0,75 1,00 2,5 (мг/кг)

В крови общепринятыми методами исследовали показатели:

а) неспецифической резистентности - содержание в крови гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, в сыворотке - иммуноглобулинов, альбуминов, глобулинов: альфа-, бета-, гамма-фракций;

б) витаминного и антиоксидантного (АО) статуса - уровни витаминов А, Е, С; активности АО ферментов: ппотатионпероксидазы (ГП), глютатионредуктазы (ГР), ппотатионтрансферазы (ГТ), катал азы, супероксиддисмутазы (СОД), малонового диальдегида (МДА), диеновых конъюгатов (ДК);

в) азотистого обмена - содержание свободных аминокислот (САК) в плазме крови, общего белка, мочевины в крови.

В РС определяли активную кислотность (рН), концентрации ЛЖК, аммиака и общего азота. В кале анализировали содержание протеина, жира, клетчатки, БЭВ, сухого вещества, кальция и фосфора. В моче - общий азот, азот мочевины, кальций, фосфор. Использовали общепринятые методы исследования, согласно справочному изданию по клинической лабораторной диагностике в ветеринарии (С.П.Кулаченко, Э.С.Коган, 1979; И.П.Кондрахин,

Н.В.Курилов и др., 1985).

Переваримость питательных веществ кормов, баланс азота, кальция и фосфора определяли по результатам обменного опыта (А.И. Овсянников,

1976).

Интенсивность роста учитывали путем индивидуального взвешивания телят при рождении, в начале и в конце балансового опыта, в 3-недельном возрасте (конец профилакторного периода). Для выявления эффекта последействия добавок взвешивание проводили также в 45 - суточном возрасте.

Цифровой материал подвергали математической обработке в описании H.A. Плохинского (1987). Достоверность оценивали с использованием критерия Стъюдента. Степени достоверности различий показаны: *- Р>0.95; **- Р>0.99; ***- Р>0.999.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1.Интенсивность роста телят

Контроль за среднесуточным приростом живой массы телят показал, что все испытуемые препараты, а также их сочетания между собой оказали стимулирующее влияние на рост молодняка.

Расчет интенсивности прироста живой массы показал, что в первом опыте у телят II группы среднесуточный прирост живой массы за первые три недели жизни превышал контроль на 4 (Р<0,95), а в третьей - на 8% (Р>0,95). При переходе к растительным кормам разница в приростах живой массы искусственно фаунизированных телят в возрасте 45 суток по отношению к контролю осталась такой же (рис 1).

1й опыт 21 сутки

□ I гр

45 сутки 2й опыт 21

сутки

периоды опытов (сут.)

III гр б III гр

45 сутки

Рис 1 - Влияние исследуемых в двух опытах добавок на рост

телят.

Из рисунка видно, что исследуемые в качестве кормовых добавок препараты оказали ростостимулирующее действие, причём наиболее эффективной показала себя смесь пробиотиков с сорбентом.

Результаты таких же расчётов по второму опыту показали аналогичные изменения. На рисунке 1 видно, что среднесуточные приросты живой массы у телят И и III групп одинаковы и превышают таковой в контроле в возрасте 21 суток на 7% (Р>0,95), а в 45 - суточном возрасте - на 5 (Р>0,95) и 9% (Р>0,95) соответственно группам.

3.2. Потребление корма

Использование пробиотиков закономерно отразилось на поедаемости телятами сена и концентратов. В I опыте телята контрольной группы были более индифферентны к кормам растительного происхождения по сравнению с телятами, получавшими пробиотические препараты, то есть, у последних отмечено более активное потребление растительных кормов - сена и концентратов. Так, поедание концентратов было выше в первые три недели на 14% (Р>0,95) у телят И-ой и на 21,5% (Р>0,99) - П1 группы по сравнению с контролем, потребление сена телятами III группы увеличилось на 80% (Р>0,999). Во втором опыте телята II и III групп в среднем в течение суток съедали сена больше на 12 (Р>0,99) и 19% (Р>0,999), концентратов на 8 (Р>0,95) и 17% (Р>0,99) соответственно.

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что фаунизация молочнокислыми микроорганизмами ускоряет начало потребления растительных кормов и, следовательно, активизирует полигастричный тип пищеварения.

3.3. Рубцовая ферментация

Анализ PC позволяет характеризовать течение процессов ферментации потреблённого корма, образования метаболитов, их всасывание и использование животными.

При исследовании PC оказалось, что показатель концентрации водородных ионов у телят в первом и втором опытах был характерным для данного возраста и типа питания (табл. 4).

Концентрация аммиака в PC у телят II и III групп в первом опыте была ниже по сравнению с контролем на 30,0% (Р>0,99) и 4.8% (Р<0,95) соответственно. Количество общего азота в рубцовой жидкости телят II и III групп было выше на 15,0% (Р>0,999) и 22,2% (Р>0,99) соответственно.

Таблица 4 - Рубцовая ферментация у телят 21 - суточного возраста

Показатели Группы

I I II I III

Первый опыт

pH 6,10 ±0,14 6,35 ±0,04 6,00 ±0,15

ЛЖК мМоль/100мл 3,93±0,17 4,77±0,08* 5,95+0,16***

Аммиак, мг/100мл 24,98±0,80 17,50±1,50 23,80±0,67**

Общий азот, мг/100мл 1 14,33±3,82 128,00± 1,67 13 5,6 7±1,05**

Второй опыт

рн 6.56±0,14 7,23±0,10* 6.35±0,10

ЛЖК, мМоль/100мл 2,94±0,03 3,14±0,07* 3,35±0,12*

Аммиак, мг/100мл 35,33 ±3,40 25,42±0,81 * 24,43±1,88*

Общий азот, мг/100мл 50,20 ±5,21 66,47±3,07* 72,33±1,75*

Как видно из таблицы, более высокое содержание ЛЖК в PC животных опытных групп (во II на 21%, Р>0,95, и III на 52%, Р>0,999), видимо, вызвано активизирующим действием комплекса веществ, синтезированных иннокулированной микрофлорой, о чём свидетельствует более высокое содержание общего азота (на 12%, Р>0,95, и 19%, Р>0,99 соответственно).

Потребление телятами комплекса пробиотиков и их смеси с авиканом во втором опыте увеличило уровни ЛЖК в рубце телят 21-суточного возраста на 6,6 (Р>0,95) и 13,8% (Р>0,95) соответственно в сравнении с контролем, что свидетельствует о лучшем протекании процессов ферментации в рубце.

В свою очередь, увеличение концентрации общего азота во II и III группах по отношению к контролю на 32,4 (Р>0,95) и 44,1% (Р>0,95) и снижение аммиака на 28,1 (Р>0,95) и 30,9% (Р>0,95) соответственно, очевидно, связанно с более интенсивным использованием аммиака для синтетических целей микрофлорой, заселённой в ЖКТ телят-молочников

3.4. Показатели азотистого обмена

Расчет баланса азота по данным обменных опытов показал, что в I опыте процент использования азота рациона телятами II и III групп был выше, чем в контроле на 4,1 (Р>0,99) и 6,1% (Р>0,999) от принятого и на 2,0 (Р>0,95) и 3,5% (Р>0,99) от переваренного соответственно. Во втором опыте у телят II и III групп нами отмечена такая же направленность различий по сравнению с контролем по переваримости азота: на 2,0 (Р>0,999) и 2,5 % (Р>0,999) соответственно (табл. 5).

Таблица 5 - Переваримость и усвоение азота рациона, %

Показатели группы

I II III

Первый опыт

Переваримость, 85,6±0,3 87.3±0,1** 87,7 ±0,1***

Усвоено от: принятого 57,5±0,4 59,9 ±0,2** 61,0 ±0,1**

переваренного 67,2 ±0,4 68,6 ±0,1* 69,6 ±0,1**

Второй опыт

Переваримость, 87,3 ±0,4 94,5 ±0,3** 94,4 ±0,1**

Усвоено от: принятого 54,9 ±0,1 61,0 ±0,5** 60,2 ±0,2**

переваренного 62,8 ±0,2 64,6 ±0,6* 63,8 ±0,2*

\

Анализ крови показал, что концентрация САК и мочевины у телят опытных групп была ниже по сравнению с контролем во всех опытах (табл. 6). Таблица 6 - Показатели азотистого обмена у телят 21-суточного возраста

Показатели Группы

I (контр.) | II | III

Первый опыт

САК мкМоль/л 504,9±17,3 370,8±15,5** 331,2±19,6**

Мочевина,мг/100мл 19,7±1,0 13,0±1,8* 13,8±1,3*

Общий белок, г/100мл 5,7±0,1 5,9±0,3 5,6±0,1

Второй опыт

САК мкМоль/л 504,9± 17,3 319,7±8,4* 336,4±51,0*

Мочевина, мг/100мл 19,7±1,0 12,9±0,9** 12,7±0,7**

Общий белок, г/100мл 5,7±0,1 5,6±0,2 5,9±0,1

Концентрация общего белка в крови телят опытных групп по

анализа полученных в двух опытах данных по изменению концентрации общего белка, мочевины и САК в крови телят, использование пробиотиков благоприятно отразилось на азотистом обмене. Подтверждением этому служит больший прирост живой массы у телят опытных групп.

3.5. Неспецифическая резистентность

Анализ крови показал, что все морфофункциональные показатели находились в пределах физиологических норм. Результаты анализа представлены на рис. 2. Из рисунка видно повышенное количество эритроцитов по сравнению с контролем у телят всех опытных групп, степень достоверности Р>0,99. Однако количество гемоглобина изменилось по-разному. У телят II и III групп на фоне применения биосана и лактобифа соответственно его содержание в крови было ниже, чем у телят I, IV и V групп.

200%-

I' ■■■Игр 1'***ч III гр ШШПП11\/гр ■ гр ♦ I гр

31 Рис. 2 - Морфофункциональные показатели крови телят, % к контролю.

Повышение содержания эритроцитов в крови телят опытных групп оказывало соответствующее влияние на показатель гематокрита, который также достоверно повысился Расчёт кислородной ёмкости свидетельствует о

существенных её изменениях у телят III группы. Важно заметить, что на фоне применения смеси препаратов в V группе, кислородная ёмкость была самой высокой. Анализ иммуноглобулинов показал повышение количества иммуноглобулинов во II, III, IV и V опытных группах на 6, 15, 9, 11% (р>0,95) соответственно по сравнению с контролем, что говорит об улучшении гуморальной резистентности организма опытных телят

На основании полученных результатов можно сделать вывод о положительном влиянии пробиотиков на некоторые показатели неспецифической резистентности телят. Но резистентность организма зависит не только от перечисленных показателей, но и от уровня антиоксидантного статуса организма (Семенютин В.В, 1993).

3.6. Антиоксидантный статус и витаминная обеспеченность.

Изученные показатели, характеризующие активность АО системы защиты организма от повреждающего действия свободно-радикального окисления в тканях животных, представлены в таблице 7.

Таблица 7 - Показатели антиоксидантного и витаминного статуса организма телят _

Показатели Группы

I II III IV V

ГП, ЕД активн. 4,75 ±0,12 4,68±0,07 5,10±0,18 3,07±0,08*** 2,70±0,20*"

ГР, ЕД активн. 4,46 ±0,21 3,70±0,16 3,18±0,18** 3,07±0,Ю** 2.70±0,22

ГТ, ЕД активн. 20,87±1,14 16,08±0,95* 19,81±1,45 17,77±1,37 14,71±1,25*

Катапаза, ЕД активн 85,00 ±3,33 82,68±2,41 60,53±1,26»* 62,25±5,25** 56,19±3,02"

СОД, ЕД активн. 34,34 ±2,14 34,79 ±1,45* 33,07 ±2,14 32,07 ±2,27 29,05±1,14

МДА(Ре), мкмоль/л 223,2± 10,2 221,3±5,2 243,5±14,7 178,5±13,7 162,7±Ю,1*

МДА св, мкмоль/л 42,5 ±1,4 35,8 ±2,2 40.5±3,1 38,7 ±2,4 33,4±2,3*

ДК, мкмоль/л 12,5 ±1,0 10,8 ±0,6 12,9 ±0,7 11,8 ±0,9 11,6 ±0,8

витамин С, мг/ЮОмл 1,54 ±0,21 1,89 ±0,16 2,31 ±0,21 2,21 ±0,26 2,08±0,31*

витамин А, мг/ЮОмл 4,8 ±0,1 5,3 ±0,1 4,9 ±0,1 5,2±0,1 5,9 ±0,2

витамин Е, мг/ЮОмл 2,54±0,10 2,78±0,04* 2,68±0,14 2,78±0,09** 3,01±0,12*

Из таблицы 7 видно, что в плазме крови телят всех опытных групп существенных изменений в концентрации ДК по сравнению с контролем не наблюдается.

МДА на 16%. Стимулированное железом образование МДА прооксидантной системой существенно не изменилось, что указывает на сравнительно высокий потенциал АО у животных. При этом следует отметить, что в эритроцитах практически не изменилась активность СОД, каталазы, ГП, хотя активности ГТ и ГР несколько понизились с достоверностью Р>0,95 на 17 и 23 % соответственно. Обнаружено увеличение содержания витамина Е на 9% (Р>0,95), а также тенденция к повышению уровней витаминов А и С в крови.

Введение биосана не привело к существенным изменениям активностей ГП, ГТ и СОД в эритроцитах телят. Однако отмечается снижение активности ГР на 29% (Р>0,99) и каталазы на 29% (Р>0,99) у этих же животных. Тем не менее, в плазме крови телят не отмечается повышения концентрации ДК, МДА(св) и МДА(Ре). Уровни витаминов С и А в крови существенно не изменились. Концентрация витамина Е увеличилась на 5%(Р>0,99) по сравнению с контролем. Именно этим повышением уровня природного антиоксиданта мы объясняем неизменность уровня пероксидации в плазме крови при снижении в эритроцитах активности ГР и каталазы.

В IV группе активности ГП и ГР снизились по отношению к контролю на 35 (Р>0,999) и 31% соответственно. Активности ГТ и СОД достоверно не изменились по сравнению с контролем, а каталазы - снизилась на 27% (Р>0,99). Обращает на себя внимание существенное снижение накопления МДА(Ре) по сравнению с контролем. Уровень ДК практически не изменился. Показаны тенденции к увеличению уровней витаминов А, С и существенное накопление витамина Е на 44% (Р>0,99).

У телят V группы по сравнению с контролем нами были отмечены увеличение концентрации витаминов С и Е на 24 (Р>0,95) и 35% (Р>0,95) соответственно, снижение в эритроцитах активностей АО ферментов: ГП на 43% (Р>0,999), ГР - 39% (Р>0,99), ГТ - 30% (Р>0,95) и каталазы - на 34% (Р>0,99), что не означает снижения уровня АО защиты, поскольку в этой группе впервые обнаруживается максимальное снижение накопления МДА(Ре) и МДА(св) на 27% (р>0,95) и 21% (Р>0,95) соответственно.

Итак, проведённые нами исследования различных вариантов

использования пробиотиков лактобифа и биосана раздельно, в комплексе и в смеси с сорбентом авиканом в качестве кормовой добавки в профилакторный период (1-21 сутки) показали положительное влияние смеси пробиотиков с сорбентом на переваримость питательных веществ рациона, азотистый обмен, неспецифическую резистентность, АО статус и витаминную обеспеченность телят-молочников и, как следствие, рост телят. Полученные физиолого-биохимические предпосылки легли в основу нижеприведенных выводов и практических рекомендаций, а также могут служить отправной точкой для создания препаратов на их основе.

ВЫВОДЫ

1. Применение пробиотиков в профилакторный период выращивания телят способствовало более раннему потреблению растительных кормов и лучшей их поедаемости. За первые три недели выращивания потребление концентратов существенно повышалось: на фоне применения лактобифа

- на 14,0, биосана - 21,5, комплекса лактобифа с биосаном - 8,0 и смеси этих пробиотиков с авиканом - на 17,0%. Увеличилось также потребление сена в первом, третьем и четвёртом вариантах - на 8,0, 12,0 и 19,0% соответственно.

2. Пробиотики активизировали преджелудочную ферментацию. Так, уровни ЛЖК и общего азота достоверно повышались при добавках к молоку лактобифа - на 21,0 и 12,0%, биосана - 52,0 и 19,0%, их комплекса

- 6,6 и 32,4% и смеси пробиотиков с авиканом - 13,8 и 44,0% соответственно. Напротив, концентрация аммиака в рубцовом содержимом снижалась достоверно при скармливании комплекса пробиотиков и их смеси с авиканом.

3. По данным балансового опыта, усвоение азота статистически значимо увеличилось у телят, получавших лактобиф и биосан или смесь этих пробиотиков с авиканом, Такие же по характеру различия наблюдаются и по степени усвоения азота от переваренного.

4. Лучшее использование организмом телят азота на фоне изученных

добавок подтверждалось более низкой концентрацией в их крови мочевины и свободных аминокислот. У телят, получавших комплекс биосана с лактобифом содержание мочевины и САК снижалось максимально на 33,4 и 35,0%, смесь пробиотиков с сорбентом способствовала уменьшению их содержания на 36,7 и 30,0% соответственно, и в меньшей мере (на уровне тенденции) проявили себя пробиотики при инокуляции их раздельно

5. Применение пробиотиков положительно сказалось на содержании в крови эритроцитов. Их число достоверно увеличилось на фоне применения лактобифа на 20,0, биосана - 38,0, их сочетаний - 55,0, их смеси с авиканом - 63,0%.

6. Показано увеличение активности АО защиты организма телят при скармливании изучаемых добавок, о чём свидетельствуют повышенные уровни АО витаминов (А, С, Е) и снижение накопления продуктов перекисного окисления липидов (МДА и ДК) в крови. Так, уровень токоферолов в плазме крови опытных телят был выше, чем в контроле: при скармливании лактобифа - на 23,0, биосана - 50,0, их сочетания -43,0 и смеси их с авиканом - 35,0%. Повышение содержания АО витаминов нивелирует отмеченное нами снижение активностей АО ферментов в эритроцитах.

7. Исследуемые препараты оказали ростостимулирующее действие на телят-молочников. Скармливание лактобифа показало увеличение прироста живой массы на 4%; биосан, его комплекс с лактобифом и их смесь с авиканом оказали больший эффект (7-8% при Р>0,95). В период последействия (спустя 24 сут.) наиболее эффективной была смесь пробиотика с адсорбентом (9,2%, Р>0,95 )

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:

Для повышения уровня естественной резистентности, АО статуса и витаминной обеспеченности телят, а также оптимизации азотистого обмена и

улучшения переваримости питательных веществ рациона предлагается добавлять к выпаиваемому молоку комплекс препаратов, включающих 0,375 млрд/микр. тел лактобифа и 1,0 млрд/микр. тел биосана два раза в сутки на голову в течение первых 3 недель выращивания.

При неудовлетворительной экологической обстановке, а также для снижения последствий возможного наличия в молозиве, молоке и потребляемых телёнком кормах токсикантов рекомендуется добавлять к комплексу пробиотиков адсорбент авикан из расчёта 2,5 мг/кг массы тела в сутки.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИСЕРТАЦИИ

1. Шумский В.А. Влияние пробиотиков отдельно и в комплексе с адсорбентом авиканом на неспецифическую резистентность телят - молочников/ Семенютин В.В., Шумский В.А., Шевченко А.И., Боронос С.А., Чертов A.A. // Проблемы с.-х. произ-ва на совр. этапе и пути их решения: мат - лы V междунар. научно-производств. конф,- Белгород, 2001. - С.76-77.

2. Шумский В.А. Некоторые показатели углеводно-жирового обмена при использовании пробиотических препаратов и их комплекса с авиканом / Семенютин В.В., Шевченко А.И., Шумский В.А., Боронос С.А., Чертов A.A. // Проблемы с.-х произ-ва на совр. этапе и пути их решения: мат-лы V междунар. научно-производств. конф.- Белгород, 2001. - С.77-78.

3. Шумский В.А. Морфофункциональные свойства эритроцитов у телят на фоне применения пробиотиков /Семенютин В.В., Кулаченко В.П., Кулаченко И.В., Шумский В.А. // Проблемы с.-х. произ-ва на совр. этапе и пути их решения: мат-лы VII междунар. научно-производств. конф.- Белгород, 2003. -С 128.

4. Шумский В А. Влияние пробиотиков и их комплекса с адсорбентом на антиоксидантный статус телят-молочников / Шумский В.А., Семенютина С А., Семенютин В.В., Ключников Ю А., Артюх В.М., Ионов И.А. // Проблемы с.-х произ-ва на совр. этапе и пути их решения: мат - лы VII междунар. научно-производств. конф.- Белгород, 2003. - С.95-96.

5 Шумский В А. Азотистый обмен у молодняка крупного рогатого

скота при скармливании лактобифа и биосана / Семенютин В.В., Шумский В.А., Грязное В.М , Шевченко А.И. // Проблемы с.-х. произ-ва на совр. этапе и пути их решения: мат - лы IV междунар. научно-производств. конф.- Белгород, 2000. - С. 118-119.

6 Шумский В.А. Профилактируем диспепсию у телят / Мерзленко P.A., Шумский В.А., Владимиров И.Д. // Животноводство России. - 2004.- № 11.-С.26-27.

7. Шумский В.А. Применение бетацинола, лактобифа и авикана в рационах телят-молочников / Мерзленко P.A., Шумский В.А. // Зоотехния. -2004.-№ 10.-С. 15-16.

Формат 60x84, 1/16. Усл. печ. л. 1,0. Заказ № 1867. Тираж 100 экз. Типография БВЦ

»-3243

РНБ Русский фонд

2006-4 14145

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шумский, Виталий Александрович

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Роль микрофлоры, заселяющей желудочно-кишечный тракт телят, в норме и патологии.

1.2. Попытки искусственной фаунизации

1.3.Пробиотики

1.3.1.Определение. Первые упоминания и первоначальные попытки использования

1.3.2. Влияние на макроорганизмы

1.3.3. Формы выпуска и примеры применения

1.3.4. Состав исследуемых препаратов. Продуцируемые пробиотиками биологически активные вещества и оказываемый ими эффект на макрои микроорганизмы.

1.4. Использование адсорбентов в комплексе с пробиотиками.

1.4.1. Экологический фактор

1.4.2. Производные диоксида кремния как адсорбирующие добавки

1.4.3. Авикан - разновидность аэросила

1.5. Антиоксидантная система защиты организма.

2. Объекты, материалы и методы исследования.

2.1. Объект исследований.

2.2. Схемы и условия проведения опытов

2.3. Материалы исследования

2.4. Изучаемые показатели и методы их определения

2.4.1. Химические, биологические и другие методы исследования

2.4.2. Балансовые опыты

2.4.3. Зоотехнические методы исследования

3. Результаты исследований.

3.1. Искусственная фаунизация преджелудков телят

3.1.1. Опыт 1. Эффективность инокуляции телятам пробиотических препаратов лактобифа и биосана в кочестве кормовых добавок

3.1.2. Опыт 2. Комплексное использование пробиотических препаратов лактобифа, биосана и адсорбирующей добавки авикана

3.1.3. Опыт 3 Антиоксидантный статус,витаминная обеспеченность и морфо-функциональные показатели и крови телят при использовании пробиотических препаратов раздельно, в комплексе а также смеси с адсорбирующей добавкой - авиканом.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние пробиотиков в комплексе с адсорбентом на физиологический статус телят, их рост и развитие"

Актуальность темы. В ранний постнатальный период основными факторами, предопределяющими статус нормы и патологии, являются уровень естественной резистентности организма, обсеменённость окружающей среды микрофлорой, воздействие стресс-факторов, характер питания, эффективность трансформации питательных веществ корма и др. Последняя во многом определяется метаболической активностью и составом заселяющей желудочно-кишечный тракт микрофлоры (Т.А. Николичева, Б.В. Тараканов, 1982; И.А. Бойко, Г.А. Водяницкий, 1992; Б.В. Тараканов, Т.А. Николичева, 1992 и др.). Простейшие и микроорганизмы заселяются в преджелудки молодняка жвачных естественным путём при контакте со взрослыми животными. Промышленная технология сводит его к минимуму или исключает вообще. Альтернативным решением в данном направлении является искусственная фаунизация желудоч-но - кишечного тракта рубцовым содержимым и (или) применение пробиоти-ков.

Антропогенное воздействие на окружающую среду приводит к её загрязнению и накоплению в ней токсических веществ. Вовлекаясь в биологический круговорот, они надолго удерживаются живыми организмами и неизбежно попадают в молоко, а затем и в организм новорожденного, вызывая токсикоз. Другим источником небезразличных для его организма токсикантов служит патогенная, а прк определённых условиях и условно-патогенная микрофлора.

Всасыванию токсикантов из пищеварительного тракта препятствуют энте-росорбенты. Одним из таковых является аморфный высокодисперсный диоксщ кремния (препарат авикан). Так, его эффективность показана на разных видах животных: цыплятах, курах - несушках, утках, свиньях и лактирующих коровах (Н.Г. Габрук, 1996; А.А. Шапошников, Н.А. Мусиенко и др. 1996, 1998 и др). Препарат безвреден, обладает высокой адсорбционной способностью, в нём отсутствуют посторонние примеси.

Рабочей гипотезой нашей работы являлось предположение о том, что комплексное воздействие пробиотиков с адсорбентом так же благоприятно отразится на организме новорожденных телят. Это позволит свести к минимуму применение антибиотиков и на их основе создать препараты, исключающие отрицательные последствия воздействия медикаментозных средств.

В связи с этим изучение влияния пробиотиков раздельно и в комплексе с адсорбентами на физиологический статус организма телят в раннем онтогенезе является актуальным.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является физиологическое обоснование возможности эффективного выращивания телят профилакторного периода с помощью добавок в виде смеси различных штаммов микроорганизмов, входящих в состав пробиотиков биосана и лактобифа, а также в сочетании с авиканом.

Для достижения цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить оптимальную композицию из сочетания культур микроорганизмов и энтеросорбента по критерию стимуляции роста телят;

2. Изучить переваримость питательных веществ и азотистый обмен;

3. Изучить характер преджелудочной ферментации;

4. Выявить возможность повышения неспецифической резистентности путём заселения желудочно-кишечного тракта молочнокислыми бактериями, содержащимися в пробиотических препаратах;

5. Определить витаминную обеспеченность и антиоксидантный статус.

Научная новизна исследований. Впервые в условиях интенсивного животноводства изучено влияние лактобифа, биосана и их комплекса с авиканом на некоторые показатели азотистого обмена и неспецифической резистентности, преджелудочную ферментацию, переваримость и использование питательных веществ корма, а также антиоксидантный и витаминный статус телятмолочников. Показано, что с помощью этих препаратов можно повысить усвояемость корма и резистентность организма, нормализовать обмен веществ и, как следствие, увеличить интенсивность роста.

Выявлено преимущество раннего заселения желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота композицией различных видов симби-онтных микроорганизмов в составе пробиотиков и их комплекса с сорбентом. В итоге доказана возможность эффективного совместного использования названных препаратов в качестве кормовой добавки.

Практическая значимость работы. Разработаны режимы применения пробиотических препаратов на основе лактобацилл, а также определено оптимальное их сочетание между собой и авиканом для оздоровления телят.

Предлагается система корригирующей профилактики нарушений пищеварения и обмена веществ препаратами симбионтной микрофлоры и сорбента.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Использование в кормлении телят-молочников профилакторного периода (1-21 сутки) лактобифа и биосана, их комплекса и смеси с авиканом в качестве кормовой добавки;

2. Преджелудочная ферментация, переваримость и усвояемость питательных веществ рациона;

3. Изменение показателей крови, характеризующих состояние неспецифической резистентности;

4. Азотистый обмен у телят;

5. Антиоксидантный статус и витаминная обеспеченность.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Шумский, Виталий Александрович

ВЫВОДЫ

1. Применение пробиотиков в профилакторный период выращивания телят способствовало более раннему потреблению растительных кормов и лучшей их поедаемости. За первые три недели выращивания потребление концентратов существенно повышалось: на фоне применения лактобифа - на 14,0, биосана - 21,5, комплекса лактобифа с биосаном — 8,0 и смеси этих пробиотиков с авиканом — на 17,0%. Увеличилось также потребление сена в первом, третьем и четвёртом вариантах-на 8,0, 12,0 и 19,0% соответственно.

2. Пробиотики активизировали преджелудочную ферментацию. Так, уровни ЛЖК и общего азота достоверно повышались при добавках к молоку лактобифа - на 21,0 и 12,0%, биосана — 52,0 и 19,0%, их комплекса — 6,6 и 32,4% и смеси пробиотиков с авиканом - 13,8 и 44,0% соответственно. Напротив, концентрация аммиака в рубцовом содержимом снижалась достоверно при скармливании комплекса пробиотиков и их смеси с авиканом.

3. По данным балансового опыта, усвоение азота статистически значимо увеличилось у телят, получавших лактобиф и биосан или смесь этих пробиотиков с авиканом, Такие же по характеру различия наблюдаются и по степени усвоения азота от переваренного.

4. Лучшее использование организмом телят азота на фоне изученных добавок подтверждалось более низкой концентрацией в их крови мочевины и свободных аминокислот. У телят, получавших комплекс биосана с лактобифом содержание мочевины и САК снижалось максимально на 33,4 и 35,0%, смесь пробиотиков с сорбентом способствовала уменьшению их содержания на 36,7 и 30,0% соответственно, и в меньшей мере (на уровне тенденции) проявили себя пробиотики при инокуляции их раздельно

5. Применение пробиотиков положительно сказалось на содержании в крови эритроцитов. Их число достоверно увеличилось на фоне применения лактобифа на 20,0, биосана — 38,0, их сочетаний — 55,0, их смеси с авиканом — 63,0%. $ Показано увеличение активности АО защиты организма телят при скармливании изучаемых добавок, о чём свидетельствуют повышенные уровни АО витаминов (А, С, Е) и снижение накопления продуктов перекисного окисления липидов (МДА и ДК) в крови. Так, уровень токоферолов в плазме крови опытных телят был выше, чем в контроле: при скармливании лактобифа - на 9 биосана - 5,5, их сочетания — 9 и смеси их с авиканом — 18,5%. Повышение содержания АО витаминов нивелирует отмеченное нами снижение активностей АО ферментов в эритроцитах.

Исследуемые препараты оказали ростостимулирующее действие на телят-молочников. Скармливание лактобифа показало увеличение прироста живой массы на 4%; биосан, его комплекс с лактобифом и их смесь с авиканом оказали больший эффект (7-8% при Р>0,95). В период последействия (спустя 24 сут.) наиболее эффективной была смесь пробиотика с адсорбентом (9,2%, Р>0,95 )

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

Для повышения уровня естественной резистентности, АО статуса и витаминной обеспеченности телят, а также оптимизации азотистого обмена и улучшения переваримости питательных веществ рациона предлагается добавлять к выпаиваемому молоку комплекс препаратов, включающих 0,375 млрд/микр. тел лактобифа и 1,0 млрд/микр. тел биосана два раза в сутки на голову в течение первых 3 недель выращивания.

При неудовлетворительной экологической обстановке, а также для снижения последствий возможного наличия в молозиве, молоке и потребляемых телёнком кормах токсикантов рекомендуется добавлять к комплексу пробиотиков адсорбент авикан из расчёта 2,5 мг/кг массы тела в сутки.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведённые нами исследования различных вариантов использования пробиотиков лактобифа и биосана раздельно, в комплексе и в смеси с сорбентом авиканом в качестве кормовой добавки в профилакторный период (1-21 сутки) показали положительное влияние смеси пробиотиков с сорбентом на переваримость питательных веществ рациона, азотистый обмен, неспецифическую резистентность, АО статус и витаминную обеспеченность телят-молочников и, как следствие, рост телят.

В первые дни жизни и в течение молочного периода основная микрофлора ЖКТ жвачных животных представлена молочнокислыми бактериями. При потреблении грубых кормов и с развитием преджелудков появляются другие физиологические группы микроорганизмов, и к 2-3-х месячному возрасту микробное население рубца становится более или менее постоянным (S. Peach, 1979).

Благоприятный эффект от воздействия препарата из симбионтных микроорганизмов достигается за счет антагонизма с патогенными бактериями, участия в процессах пищеварения и обмена, поступления витаминов, особенно группы В, синтезируемых микробами, а также других биологически активных веществ с антитоксическими свойствами. Антитоксическое действие лактофло-ры проявляется в защите эпителия, устранении или нейтрализации гистамино-генных микроорганизмов, повышении порога резистентности организма эндотоксину Е. colli. (Gros М.,1968).

В данной диссертационной работе обсуждаются результаты исследований проведённых в колхозе-племзаводе имени Фрунзе, лаборатории биологических исследований БГСХА, Всероссийском научно-исследовательском институте физиологии, биохимии питания сельскохозяйственных животных, институте птицеводства Украинской академии аграрных наук.

По результатам анализа трёх опытов на телятах 1-45 суточного возраста мы изучали влияние названных препаратов на белковый обмен, неспецифическую резистентность, антиоксидантный и витаминный статус, физиологическое состояние организма, потребление кормов характер их пред желудочной ферментации и интенсивность роста животных.

В диссертационной работе исследованы и выявлены закономерности азотистого обмена в результате акселерации заселения ЖКТ телят - молочников с первых суток их жизни симбионтной микрофлорой с использованием заведомо известных штаммов микроорганизмов, входящих в используемые пробиотиче-ские препараты.

Интенсивность роста телят.

Анализ индивидуальных взвешиваний и расчёт интенсивности прироста живой массы по результатам первого и второго опытов представлен на рисунке 4. Контроль за ростом телят показал ростостимулирующий эффект исследуемых в качестве кормовых добавок препаратов.

На рисунка 4 видно, что у телят всех групп, получавших добавки к рациону, среднесуточные приросты живой массы существенно превышают таковые в контроле.

МО -Г

21 суток 45 суток 21 суток 45 суток группы, первый опыт второй опыт периоды опыта (сут.)

Рис. 4- Среднесуточный прирост живой массы телят при скармливании пробио-тиков раздельно, в комплексе и смеси их с адсорбентом, контроль - 100%

Наиболее яркие различия по этому показателю наблюдались во втором опыте у телят III группы, получавших смесь пробиотиков с адсорбентом. Среднесуточный прирост живой массы у них превышал контроль на 8% в 21- суточном возрасте и 9% в 45 суток.

Потребление корма

Использование пробиотиков положительно отразилось на поедаемости телятами сена и концентратов. Телята контрольной группы были более индифферентны к кормам растительного происхождения после начала опыта (рис. 5).

На рисунке 5 видно, что в трехнедельном возрасте (21 сутки) телята опытных групп потребляли грубых кормов достоверно больше своих контрольных сверстников, как в первом, так и во втором опытах, причём наиболее интенсивное потребление отмечено нами у телят, получавших препарат биосан (сена на 80%, комбикорма на 23% ).

180 т%

135 -

90 I т

Концентраты Сено первый опыт

Концентраты второй опыт группы. Сено периоды опыта (сут.)

Рис. 5 - Лоедаемость кормов телятами 21 - суточного возраста при скарм-ливаниии пробиотиков раздельно, в комплексе и смеси с адсорбентом, % к контролю.

Показатели азотистого обмена

Результаты балансовых опытов, позволившие нам изучить некоторые аспекты азотистого обмена у телят, потреблявших пробиотики и адсорбент в различных вариантах, показали, что в двух опытах названные добавки способствовали большему отложению азота.

Анализ крови показал, что уровни общего белка в плазме крови телят опытных групп по отношению к контролю по результатам обоих опытов отличались незначительно (рис. 6). Суммарная концентрация САК в крови телят опытных групп с разной степенью достоверности была ниже, чем в контроле в обоих опытах.

Концентрация мочевины в крови телят, получавших добавки по результатам обоих опытов была также ниже по сравнению с контрольными группами. Нами отмечено наиболее существенное снижение уровня мочевины в крови телят,

100 -

50

I I

Ш,

САК мочевина. Общий белок первый опыт Ю II гр III гр гр группы,

САК мочевина. Общий белок опыты второй опыт

Рис. 6 - Азотистые метаболиты в крови телят 21-суточного возраста при скарм-ливаниии пробиотиков раздельно, в комплексе и смеси их с адсорбентом, % к контролю. получавших комплекс пробиотиков - разница с контролем составляет 35% и смесь пробиотиков с сорбентом ( 36% по отношению к контролю).

Из литературных данных известно, что концентрация мочевины в определённой мере отображает степень деградации аминокислот, в частности, чем меньше мочевины в крови, тем, с одной стороны, возможно, меньше распадается аминокислот или, с другой стороны, активнее идут процессы синтеза белка в организме. Так, исходной ступенью при катаболизме большинства аминокислот является обмен аминогрупп по одной из трёх реакций: дезаминирования, пере-аминирования и трансаминирования. Аминный азот, выделяющийся при деза-минировании аминокислот, выводится из организма в виде аммиака или мочевины. Последняя синтезируется из двух молекул аммиака через орнитиновый цикл в почках, сердце, тканях печени или стенке желудочно-кишечного тракта (М.В. Ненцкий, 1892; А.А. Алиев, 1966) и затем через кровь выводится из организма или включается в румено-гепатическую систему циркуляции.

Таким образом, судя по изменениям концентрации общего белка, мочевины и свободных аминокислот в крови телят, использование пробиотиков и адсорбента в качестве кормовых добавок благоприятно отразилось на азотистом обмене. Особенно наглядно это проявилось при скармливании пробиотиков в комплексе, а не раздельно.

Переваримость питательных веществ кормов

Данные по переваримости азота, жира, клетчатки, БЭВ показывают, что телята опытных групп были лучше обеспечены не только пластическими, но и энергетическими веществами (рис. 7). клетчатка БЭВ жир азот клетчатка БЭВ жир азот группы, периоды опыта (сут.) первый опыт второй опыт

Рис 7 - Отношение переваримости питательных веществ у теляттелятами 21 суточного возраста при скармливаниии пробиотиков раздельно, в комплексе и смеси их с адсорбентом, % к контролю.

Интересно отметить, что во втором опыте показатели переваримости клетчатки, БЭВ и жира были ниже, чем в контроле. Что возможно связано с большим потреблением телятам опытных групп грубых кормов, что и отразилось на проценте переваримости.

Метаболиты рубцовой ферментации

Результаты анализов рубцового содержимого, интегрированные по двум опытам, представлены на рисунке 8. Из рисунка видно, что количество ЛЖК, i общего азота в рубцовом содержимом телят трёхнедельного возраста, получавших добавки, достоверна выше, чем у телят в контроле, что, естественно, согласуется и с отмеченной выше лучшей поедаемостью растительных кормов телятами этих групп. к

Q. 100 ж X о о

Рис. 8 Рубцовая ферментация у телят 21-суточного возраста при скармливании пробиотиков раздельно, в комплексе и смеси с адсорбентом, % к контролю.

В свою очередь, снижение уровня аммиака у телят опытных групп по отношению к контролю, как в первом, так и во втором опытах наводит на мысль о более интенсивном использовании аммиака микрофлорой на синтетические нужды в целях построения своих клеток и, следовательно, анаболическом влиянии исследуемых препаратов на организм телят.

Резистентность организма телят

Чтобы объяснить и теоретически обосновать получаемый положительный эффект от использования пробиотиков и сорбента, необходимо было исследовать их на резистентность организма телят. Одной из составляющей общей резистентности организма является неспецифическая резистентность. Анализ кро-вителят 21-суточного возраста показал, что все морфофункциональные показатели находились в пределах физиологических норм. Результаты анализа представлены на рисунке 8.

200 т%

150 -

100 эритроциты лейкоциты

III ф

Е5ХЯ1И Ф [1ШШЛ1IV ф

ЗУф ф

Рис. 8 - Морфофункциональные показатели крови телят 21-суточного возраста, % к контролю.

На рисунке 8 видны повышенные уровни эритроцитов по сравнению с контролем у телят всех опытных групп. Степень достоверности высокая, Р>0,99. Однако количество гемоглобина изменилось по-разному. У телят II и III групп на фоне применения биосана и лактобифа соответственно его содержание в крови было ниже, чем у телят I, IV и V групп.

Повышение содержания эритроцитов в крови телят опытных групп оказывало соответствующее влияние на показатель гематокрита, который также достоверно повысился. Важно заметить, что кислородная ёмкость была самой высокой на фоне применения смеси препаратов телятам V группы.

Анализ иммуноглобулинов показал повышение количества иммуноглобулинов во II, 111, IV и V опытных группах на 6, 15,9, 11% (р>0,95) соответственно по сравнению с контролем, что говорит об улучшении гуморальной резистентности организма телят, получавших все исследуемые добавки.

На основании полученных результатов можно сделать вывод о положительном влиянии пробиотиков на некоторые показатели неспецифической резиfемоглобин группы гематокрит иммуноглобулины стентности телят. Но резистентность организма зависит не только от перечисленных показателей, но и от уровня антиоксидантного статуса организма (В.В. Семенютин, 1993).

В свою очередь, антиоксидантный статус определяется активностью антиоксидантной системы защиты организма от повреждающего действия процессов свободнорадикального окисления в тканях животных, которое, со своей стороны, является одним из фундаментальных механизмов снижения резистентности.

Антиоксидантный статус и витаминная обеспеченность.

Изученные показатели, характеризующие активность АО системы защиты организма показали, что существенных изменений в концентрации первичных продуктов ПОЛ диеновых конъюгатов по сравнению с контролем не наблюдается по всем опытным группам (рис 9).

160 т

140 -и ill IV v

Рис 9 - Антиоксидантный статус и витаминная обеспеченность телят 21-суточного возраста при скармливании пробиотиков раздельно, в комплексе и смеси с адсорбентом, % к контролю.

Это свидетельствует о том, что, во- первых, уровень свободнорадикального перекисного окисления существенно регулируется высоким потенциалом анти-оксидантной защиты, что зависит от наличия соответствующих незаменимых или, эссенциальных, компонентов в корме, а во- вторых, от генетически установленных данных организма.

При определении конечных продуктов ПОЛ -малоновых диальдегидов, мы наблюдаем несколько иную ситуацию. Так, при скармливании лактобифа намечается тенденция к снижению уровня МДА(св). Стимулированное железом образование МДА np(Fe) ооксидантной системой существенно не изменилось, что указывает на сравнительно высокий потенциал АО у животных получавших лактобиф. При этом следует отметить, что в эритроцитах практически не изменились уровни активности антиоксидантных ферментов СОД, каталазы, ГП, хотя активности ГТ и ГР несколько понизились. Обнаружено увеличение содержания витамина Е, а также тенденция к повышению уровней витаминов А и С в крови.

Введение биосана не привело к существенным изменениям активностей ГП, ГТ и СОД и снижению активностей ГР и каталазы у этих же животных и повышению концентрация витамина Е по сравнению с контролем. Именно этим фактором повышения уровня природного антиоксиданта мы объясняем неизменность уровня пероксидации в плазме крови при снижении в эритроцитах активности ГР и каталазы. Уровни витаминов С и А в крови существенно не изменились.

В IV группе активности ГП и ГР снизились по отношению к контролю. Активности ГТ и СОД достоверно не изменились, а активность каталазы снизилась. Обращает на себя внимание существенное снижение накопления МДА(Ре) по сравнению с контролем. Уровень ДК практически не изменился. Показаны тенденции к увеличению уровней витаминов А, С и существенное накопление витамина Е.

Можно полагать, что именно повышение содержания токоферола является тем фактором, который, во-первых, сдерживает развитие пероксидов в плазме крови, а во-вторых, нивелирует снижение активности отдельных антиоксидант-ных ферментов в эритроцитах.

Тем не менее можно полагать, что снижение активности глютатионре-дуктазы в эритроцитах может быть связанно не только с торможением её синтеза в переживающих эритроцитах и возможном выходе из разрушающихся эритроцитов в сыворотку крови.

При добавлении к двум пробиотикам адсорбента авикана (V группа) можно предположить определённое регуляторное влияние на снижение активности антиоксидантных ферментов в эритроцитах, которое отнюдь не приводит к увеличению концентрации первичных и вторичных продуктов ПОЛ в плазме крови, что объясняется накоплением в крови двух мощных антиоксидантов (витаминов С и Е), обладающих синергичным механизмом действия, причём си-нергист антиоксиданта витамин С неферментативно регенерирует токоферол из окисленной формы в восстановленную. Возможно, адсорбируя в кишечнике экзогенные токсины адсорбент способствует накоплению в крови витаминов Е и С, за счёт сберегающего эффекта, что приводит к существенному снижению концентрации в плазме крови продуктов пероксидации, и это, в свою очередь, обусловливает снижение активности антиоксидантных ферментов эритроцитов.

Итак, проведённые нами исследования различных вариантов использования пробиотиков лактобифа и биосана раздельно, в комплексе и в смеси с сорбентом авиканом в качестве кормовых добавок в профилакторный период (1-21 сутки) показали положительное влияние смеси пробиотиков с сорбентом на переваримость питательных веществ рациона, азотистый обмен, неспецифическую резистентность, АО статус и витаминную обеспеченность телят-молочников и, как следствие, рост телят. Полученные физиолого-биохимические предпосылки легли в основу нижеприведенных выводов и практических рекомендаций, а также могут служить отправной точкой для создания препаратов на их основе.

80

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шумский, Виталий Александрович, Белгород

1. Айлер Р. Химия кремнезема/Р. Айлер М.: Мир, 1982. - 123 с.

2. Алиев А.А. Обмен веществ у жвачных животных /А.А. Алиев -М.: НИЦ "Инженер", 1997. 564 с.

3. Аманов Н. И. Антибиотики и химиотерапия /Н.И. Аманов -М.,1989.-176 с

4. Антипов В.А. Биологические препараты симбионтных микроорганизмов и их применение в ветеринарии /В.А. Антипов // Сельское хозяйство за рубежом. -1981.- С.43-47.

5. Антипов В.А Эффективность и перспективы применения про-биотиков/В.А. Антипов, В.М. Субботин // Ветеринария. -1980.- № 12- С. 5557.

6. Аржиков К. Оценка действия in vitro сочетаний антибиотиков на патологические микроорганизмы/ К. Аржиков. // Эпозоотология и иммунопрофилактика болезней с. х. животных. Новосибирск, 1983. - С. 59-64.

7. Балаж Ю.Ю. Применение биологически активных веществ в кормлениии крупного рогатого скота/Ю.Ю.Балаж // Международный с.-х. журнал. -1980.- № 2 С. 75-78.

8. Беккера Г.О. Введение в фотохимию органических соединений / Под ред.Г.О. Беккера -Д.: Химия, 1976. 456 с.

9. Беленький Н.Г. Проблема иммуноактивизации организма./Н.Г. Беленький М, 1958.- 278 с.

10. Бойко И.А. Содержание хлорорганических пестицидов, нитратов и нитритов в мясе и субпродуктах/И.А. Бойко, Г.А. Водяницкий. // Экология с.-х. производства: Материалы межвузовской конференции. Белгород, 1995.-С. 12-13.

11. Бойко И.А. А.С. 1715283 Способ выращивания телят/И.А. Бойко, Г.А.Водяницкий , Ю.П. Лихолетов // Открытия. Изобретения.- 1992.- 8. — С.56.

12. Борисенко О.Н. Влияние нитратов и нитритов на физиологическое состояние животных и качество молока. Совершенствование технологии производства молока и мяса/О.Н. Борисенко // Сб. научн. тр. / Благовещенский СХИ. Благовещенск, 1988. - С. 89-95.

13. Брусов О.С. Влияние природных ингибиторов радикальных реакций на автоокисление адреналина/О.С. Брусов, A.M. Герасимов, Л.Ф. Пан-ченко //Бюлл. эксп. биол. и мед. -1976.-N1.-C.33-35.

14. Бурлакова Е.Б. Кинетические особенности токоферолов как ан-тиоксидантов./ Е.Б. Бурлакова, С.А. Крашаков , Н.Г. Храпова. -Черноголовка, 1992. -22 с.

15. Ван-Соест П. Роль кремния в питании растений и животных/П. Ван-Соест//Сельское хозяйство за рубежом. -1971.-N11. С. 19-20.19. . Витин В.Г. Теоретические и практические проблемы гното-биологии./ В.Г. Витин и др.- М.: Агропромиздат, 1986. 178 с.

16. Владимиров В.Л. Определение тяжелых металлов и металлоидов в животноводческой продукции/В .Л. Владимиров // Зоотехния. 1995. -N 11.-С. 22.

17. Владимиров Ю.А Перекисное окисление липидов в биологических мембранах./Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. - С. 236.

18. Воробьев Е.С. Уровень нитратов в рационах и метаболизм у жвачных животных/ Е.С. Воробьев, А.И. Фицев. //Ветеринария. 1994. - N 2. -С. 42-45.

19. Воронков М.Г. Кремний и жизнь/М.Г. Воронков //Наука и человечество: Международный ежегодник. М.: Знание, 1988. - С. 145-157.

20. Воскресенский О.Н. Влияние природных антиоксидантов на патологические процессы, связанные со старением/О.Н. Воскресенский. // Итоги науки и техники. Общие проблемы биологии. М., 1986. - Т. 5. - С. 163 -201.

21. Воскресенский О.Н Биоантиоксиданты облигатные факторы питания/О.Н. Воскресенский, В.Н. Бобырев // Вопр. мед. химии. - 1992. - N 4. -С. 21 -26.

22. Воскресенский О.Н. Хроническая полиантиоксидантная недостаточность как модель старения / О.Н. Воскресенский, В.Н. Бобырев, В.Ф. Павленко и др. //Докл. АН СССР. -1983. Т. 268. - N 2. - С. 18 - 23.

23. Воскресенский О.Н. Ангиопротекторы /О.Н. Воскресенский, В.А. Туманов. Киев: Здоровье, 1984.- 342с.

24. Гайдук Б.С Гастроинтестинальная сорбция аэросилом при лечении желудочно-кишечных заболеваний телят /Б.С. Гайдук, А.М.Стадник // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Тез. докл. 1-ой межвузовской научно-практ. конф. Ленинград, 1989.- С. 17-18.

25. Голиков А.В Чувствительность к антибактериальным препаратам/ А.В. Голиков, В.Д. Духанов // Бюллетень ВНИИЭВ -1985.-№ 60.- С.42-45.

26. Готшалк Г. Метаболизм бактерий /Г. Готшалк.-М.: Мир, 1982.

27. Данилевская Н.В. Лактобиф для стимуляции продуктивности дойных коров / Н.В. Данилевская, В.В. Суботин, В.В.Вашурин и др. // Ветеринария. 2003.- №2. - С. 50.

28. Долгов И.А. Микрофлора и метаболические процессы в рубце откармливаемых бычков при содержании их на рационах с добавлением омо-мицина / И.А.Долгов, Т.В. Тоноян, Н.Г. Макарцев // Бюлл. ВНИИФБиП с.-х. животн.- Боровск.-1991.- С. 16-20.

29. Донченко Г.В. Витамин Е и процессы биологического окисления //Витамины. Биохимия витамина Е и селена /Г.В. Донченко -Киев: Науко-ва думка. -1975.- Вып.8. -С.43-60.

30. Дубинина Е.Е. Процесс перекисного окисления липидов в клетках, органах и тканях человека и животных / Е.Е. Дубинина, И.Ю. Таланова, Бурмистров С.О. // Украинский биохимический журнал -1997.- Т 69.- № 4. — С. 22-24.

31. Журавлев А.И. Спонтанная биохемилюминесценция животных тканей/А.И. Журавлев //Биохемилюминесценция. -М.:Наука, 1983. -С.3-29.

32. Зайцева Л. Д. Эффективность аэросила при желудочно-кишечных заболеваниях новорожденных телят /Л.Д. Зайцева, А.П. Бакшеев // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Тез. докл. 1-й межвузовской научно-практ. конф. Ленинград, 1989. - С.20-21.

33. Иванов И.И. Эстафетные механизмы в процессах перекисного окисления липидов биологических мембран/И.И. Иванов //Успехи биологической химии. М.:Наука, 1984.-Т.25.-С.110-124.

34. Ильницкий А.П. Нитраты, как новый средовой фактор, оказывающий влияние на здоровье населения/А.П. Ильницкий // Тезисы докл. Всесоюзной конф. (10-13 октября 1989 г.) Пущино, 1989. - С. 130.

35. Интизаров М.М. Возможности гнотобиологического эксперимента при изучении механизмов бактериального антагонизма и симбиоза./М.М. Интизаров // Теоретические и практические проблемы гнотобиоло-гии.- М.,1986.-С. 22-29.

36. Кения М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе/М.В. Кения, А.М.Лукаш, Е.П.Гуськов //Успехи современной биологии. -1993. -Т. 13.- Вып.4. -С.456-470.

37. Кондрахина И.П. .Справочное издание по клинической лабораторной диагностики в ветеринарии: Сост.: И.П. Кондрахина и др. М.: Агро-промиздат, 1985.-287 с.

38. Кононский А.И. Бихимия животных /А.И. Кононский.-М.:Колос, 1992.-543 с.

39. Косова О. Ускорение воспроизводства стада крупного рогаторо скота /О. Косова. М., 1986.-321 с.

40. Кошаров А.Н. Содержание нитратов в рационах жвачных./А.Н. Кошаров , Н.В.Курилов // Бюлл. ВНИИ физиол. и питания с.-х. животных. -1973.-Вып. 3(29). С. 36-38.

41. Куваева И.Б. Обмен веществ организма и кишечная микрофло-ра/И.Б. Курилов Н.В. -М.: Медицина, 1976.- 384 с.

42. Кулебякин Е.И. О предельно допустимых концентрациях нитратов в кормах для скота /Е.И. Кулебякин //Зоотехния. 1989. - N 5. - С. 36-40.

43. КуриловН.В. Физиология и биохимия пищеварения жвачных./ Н.В.Курилов, А.П. Кроткова. М.: Колос, 1971. - 174 с.

44. В.З.Ланкин. Роль перекисного окисления липидов в этиологии и патогенезе атеросклероза/ В.З.Ланкин, А.М.Вихерт, А.К.Тихадзе и др. // Вопр. мед. химии. 1989. - N 3.- С. 11-13.

45. Любимов Ю.В. Проблемы животноводства и как их ре-шать/Ю.В. Любимов // Тез. докл. научно-практ. конф.- Новосибирск ,1990. -С. 12.

46. Мандрик Ф.И. Загрязнение природной среды нитратами, нитритами, и профилактика нитроинтоксикации животных / Ф.И.Мандрик, М.Ф.Кондырева. Кишинев, 1990,- 96 с.

47. Маянская Н.Н. Образование активного кислорода в норме и патологии // Н.Н. Маянская, Л.Е. Панин, Ю.А. Николаев, С.Д. Маянская: Вопр. мед. химии. -1990. N 6. - С. 5 - 8.

48. Межевич Д.В. Канцерогенные и N-нитрозосоединения и их предшественники образование и определение в окружающей среде /Д.В. Межевич. - Таллинн, 1984. - 150 с.

49. Меньшикова Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов / Е.Б.Меньшикова, Н.К.Зенков //Успехи современной биологии. -1993. -Т.113.- Вып.4. -С.442-453.

50. Асонов Н.Р. Микробиология. / Н.Р.Асонов.-М.: Агропромиз дат, 1989. -496 с.

51. Николичева Т.А. Становление микрофлоры телят при раннем включении в рацион растительных кормов/Т.А. Николичева, Б.В.Тараканов // Биохимия питания и кормления молодняка с/х животных при раннем откорме: Сб. науч. тр. Боровск, 1982.- С. 140-150.

52. Носков Н.М. Основы выращивания телят./Н.М. Носков. М.: Госуд. изд. с. - х. лит., 1956. - 295 с.

53. Обухова JI.K. Свободно-радикальные механизмы старения в биологической эволюции / Л.К.Обухова // Итоги науки и техники. Общие проблемы биологии. М., 1986. - Т. 5. - С. 36 - 68.

54. Овсяников А.И. Основы опытного дела в животноводстве /А.И. М. Овсяников. М.:Колос, 1976. 539 с.

55. Опполь Н.И. Нитраты /Н.И.Опполь, Е.В.Добрянская. Кишинев: Штиинца, 1976. - 35 с.

56. Пара1ч А.В. Молекулярш та <|нзюлопчш мехашзми дп вггамшу Е :Автореф. дис. докт. бюл. наук. Кшв, 1996. -47 с.

57. Пенегин П.В. Дисбактериоз кишечника./ П.В.Пенегин, В.П.Мальцев, В.М.Коршунов. М.: Медицина, 1984.-285 с.

58. Корма и кормовые добавки: Справочник: Сост.:И.В. Петрухин. М.: Росагропромиздат, 1989. -684 с.

59. Пивняк И.Г. Успехи микробиологии /И.Г. Пивняк. М., 1976.369 с.

60. Пивняк И.Г. Микробиология пищеварения жвачных./ И.Г.Пивняк, Б.В.Тараканов.- М.:Колос, 1982.-371 с. N

61. Покровская С.Ф. Накопление некоторых тяжелых метал- лов в с.-х. продукции и меры по его предотвращению /С.Ф. Покровская М., 1984. -152 с.

62. Полонская М.С. Способ получения ацидофильного препарата / М.С.Полонская, Л.Ф.Абызова, В.В.Леонович. М.,1987.- 56 с.

63. Садовникова И.П. Влияние геропротекторов-антиоксидантов на иммунные реакции/И.П. Садовникова // Итоги науки и техники. Общие проблемы биологии. М., 1986. - С. 69 - 109.

64. Сальникова Л.А. Действие тиреоидных гормонов на каталазную активность эритроцитов in vitro и in vivo./Л.А. Сальникова. Деп. в ВИНИТИ 16. 07. 82, №3833-82

65. Селиванова А.С. Антибиотики для практики /А.С. Селиванова, А.П.Морозов, В.Ф.Ковалев и др. // Ветеринария.- 1984. № 4,- С.53-56.

66. Семенютин В.В. Становление полигастричного типа метаболизма у молодняка крупного рогатого скота под влиянием нетрадиционных факторов питания. // Афтореферат на соискания доктора биологических наук.1993. -С.8.

67. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д.Стальная, Т.Г.Гаришвили.//Современные методы в биохимии. -М.'Медицина, 1977. -С.66-68.

68. Субботин В.В.Основные элементы профилактики желудочно-кишечной патологии новорожденных животных/ В.В.Субботин, М.А.Сидоров.// Ветеринария.- 2004.- №1.- С.3-6.

69. Тараканов Б.В. Использование микробных препаратов и продуктов микробиологического синтеза в животноводстве. /Б.В. Тараканов. -М.,1987.- 263 с.

70. Тараканов Б.В. Динамика становления микрофлоры в рубце телят на ограниченной выпойке цельного молока./Б.В. Тараканов ,Т.А.Николичева , М.А.Ткачёв // Микроорганизмы в сельском хозяйстве: Тез. докл. 4 всесоюзной научн. конф.- Пущино, 1992.- С. 192.

71. Телямейстер Э.Т. Микробиология./ Телямейстер Э.Т. и др.-М.,1977- 397 с.

72. Тернер Ч.У. Использование сухих микроорганизмов рубца при кормлении скота/Ч.У. Тернер // Сельское хозяйство за рубежом 1957. - № 12.- С.121-126.

73. Тимошко М.А. Микрофлора пищеварительного тракта молодняка с/х животных./М.А. Тимошко. Кишинёв: Штинца, 1990.- 361 с.

74. Тиунов Jl. А. Основные механизмы метаболизма ксенобиотиков в организме животных и человека/Л.А. Тиунов //Итоги науки и техники. Сер. Токсикология -М, 1981. -Т12.- С.64.

75. Томчук В.А. Перекисное окисление липидов телят, больных диспепсией/ В.А.Томчук, Д.А.Мельчук // Ветеринария.- 2003.- №8 .- С.35-37

76. Тузова Р.В. Микроорганизмы на службе животноводства./Р.В. Тузова. Минск: Ураджай,1985.- 274 с.

77. Тутельян В.А. Питание и процессы биотрансформации чужеродных веществ/ В.А.Тутельян, Г.И.Бондарев, А.Н.Мартинсон.//Итоги науки и техники. Сер. Токсикология. -М., 1987. -Т.15. -С.212.

78. Федотов В. Чувствительность микрофлоры циплят к антибиотикам при пуллорозе тифе птиц/В. Федотов, Е.Останина // Профил. и терапия болезней животных Алтая с учётом изменения морфологии. -Барнаул, 1981.- С.110-111.

79. Халмурадов А.Г. Механизмы транспорта аскорбиновой кислоты через биологические мембраны/ А.Г.Халмурадов, В.Н.Тоцкий //Украинский биохимический журнал. -1982. -T.54.-N1.-C.96-107

80. Хмельницкий Г.А.Ветеринарная токсикология./Г.А. Хмельницкий, В.Н.Локтионов. М.: Агропромиздат, 1987.-381 с.

81. Хоменко А.С. Лечебно профилактические свойства комплексных препаратов содержащих нитрофураны./А.С. Хоменко, А.О.Погорелый . // Ветеринария. - 1984.- № 7. - С. 64-65.

82. Цебрджинский О.И. Некоторые аспекты антиоксидантного ста-туса/О.И. Цебрджинский // Физиология и патология перекислого окисления липидов, гомеостазов и имуногенеза.- Полтава, 1992.- С. 120-155

83. Чахаева О.В. Гнотобиология Учение о микромире организма хозяина/О.В. Чахаева. // Теоритические и практические праблемы гнотобиоло-гии.- М.,1986.- С.14-19.

84. Чахаева О.В. Гнотобиология./О.В. Чахаева.- М.:Медицина, 1972.- 284 с.

85. Шапошников А.А. Распределение токсичных веществ в молочных продуктах /А.А.Шапошников, Н.Г. Габрук //Молочная промышленность. 1994.-N 6.-С. 26-28.

86. Шапошников А.А.Сорбенты для снижения уровня токсичности веществ в организме животных и их продукции/ А.А.Шапошников , Н.А. Мусиенко //Зоотехния. 1996. - №8. - С. 17-19.

87. Шарманов Т.М. Аскорбиновая кислота (витамин С) /Т.М. Шар-манов //Экспериментальная витаминология: Справочное руководство. -Минск: Наука и техника, 1979. -С.481-500.

88. Яковлев JI.A. Трактаты Саратовского зооветеринарного института/Я. А. Яковлев, П.Я.Сорокин. -Саратов, 1971.-259 с.

89. Axelsson L.T. //Microb.Ecol.Health and Disease.-1989.-V.2.-P. 2.

90. Balais J. Redokivonat hatasa borjak es malaidc emeszto renderere /J.Balais // Allattenyezrtes. -1974. - T. 23, P.79-89.

91. Bandyopadhyay Commas. Effect of ascorbate deficiency on liver glycogen metaboliam in guinea pig. Lachehidananda /Commas Bandyopadhyay ,E.Banerje // Indian J. Exp. Bid. -1982. -V.20.- N1.-P.44-47.

92. Banhegue G.Ascorbate metabolism and its regulation in animals /G.Banhegue,L.Braun,M.Csala//Free Radical Biology and Medicine. -1997. -V.23.-N5.-P.33-37.

93. Barefoot S.F., Klaenhammer T.R. // Appl. Environ. Microbiol. 1983.-V.45.-P.56-64.

94. Bekker A. Growth and development of catves/ A.Bekker,N.Heing //Cattle breebing. 1981. -V.46. -P.47-53.

95. Blokma N., Ettekoven H.,Hothius F.M. //Med.Microbiol. Immunol.-1981.-V.170.-P.112 -118.

96. Bogdanov I.G., Dalev P.G., Gurevid A.I. // FEBS Lett.-1975.-V.57.-P.33-35.

97. Bogdanov I.G., Popkhirstov P., Marinov L. // Abst.Vet. In-ter.Cancer Congress.-1962.-P.67-69.

98. Camarer W.// Mchm. Med.Wchr.-1961 .-V.41 .-P.75-77.

99. CargG. Ptective Role of Natural Antioxdants/ .Carg,J.Wilmott,A.Znaiden// osmetics-&Toi- letries. 1987. - Vol.102.- №2. - P.37-46.

100. Cerguiglini S.// Rass. Clin. Sci.- 1974.-V.50.-P.4-5.

101. Daeshel M.A. // ASM Bacteriol. Proc. Abstr.-1986.-V.14.-P.34-36.

102. Feske A.//Rass. Clin. Sci.-1974-V.50-P.4-5.

103. Flouteaux J. Et ai. Bull. Soc. Med. Veter.-1968.-V.17.- P.144.

104. Freter R.//Amer. J.Clin, nutrition. -1974.-V.14.-P.13-14.

105. Fuller R.// Appl.Bacteriol.-1989. -V.66.- P.5-7.

106. Gellinck P.H. Peroxidase as a marker enzyme on estrogen respon-sivetissues/P.H.Gellinck,A.Newcombe,H.I.Keeping//Adv.Enzyme Regul. -1979. -V.17. -P.325-342.

107. Gililand S.E.//FEMS Microbiol.Rev.-1990.-V.87.-P.24-26.

108. GonzalesB.//Appl. and Environ. Microbiol.-1994.-V.60-P.6-11.

109. GrishannM.B.Cytotoxicproperties of salivary oxidants/ B.Grishann,M.Elizabeth //Amer. J. Physiol. -1990.-V.258.- N1.- Pt.l. -P.I15-121.

110. Gros M., Thieulin G.//Rec.Med.Veter. -1968.-V.144.-№9.-P. 877889.

111. Gros M.,Jhielin G.// Le laut.-1997.-V.15.- P.493-494.

112. Hungate R.E. Studies on cellolose decompositing bacterial from rumen of cattle/R.E.Hungate// J. Bacterial. 1967. -V.53.- P. 631 - 639.

113. Iler R.K. The chemistri of Silica/R.K.Iler//Ed. by Willey.-1979. N l.-P. 23.

114. JenssonH.Rat glutatione transferase 8-8, an enzyme efficiently de-toxifying4-Hydroxyalk-2-enals/H.Jensson,C.Guthenberg,P.Alin//FEBS Lettr.-1986.-V.203.- N2. -P.207-209

115. KempA.Grassland production and nitrate poisoning in cattle/A.Kemp,J.H.Genrink,A.Melestein.- Rep. Proc. 7th General Meeting of Europ. Grassland Feder. Belgium.- 1978. V.9 - P. 1-15.

116. Konler B. Aufgaben fur die Praxis und Ergebnisse bei bakte-riologrischen, mykologischen und toxikologischen Untersuchungen / B.Konler,E.Hoernicke,W.Frick// Monat. Veter. 1984.-Vol.39.-N 1-2.- S.39-44.

117. KrausP.Particle-Bound Glutatione-s-Transferases/P.Kraus,B.Gross // Enzyme. 1979.- V.24.- № 3.- P. 205-208.

118. Lisons R.J.Observations on the alimen- tary tract of gnotobionic lambs/ R.J.Lisons//Rec.Vet. Sci. 1976. - V.20. - № 1. -P.70-74.

119. Logani M.K. Lipid Oxidation: Biologic Effects and Antioxidants-AReview.-Lipids/M.K.Logani,R.E.Davies //Rec.Vet.Sci. 1980. - Vol.15.- N 6. -P. 485 - 495.

120. Marais J.P. Effect of nitrate and its reduction products on growth and activity of the rumen microbial population / J.P.Marais //British J. of Nutrition. 1988. - V.59. -P. 301-313.

121. Marsh W., Fingerhut В., Miller H.// Clin. Chem. -1965.-V.il.- P.624.

122. Mills G.C. The Purificaton of Glutatione Peroxidase of Erythrocytes /G.S.Mills //J.Biol. Chem. -1954. -V.234.- N3. -P.502-506.

123. Niki E. Membrane damage from lipid oxidation induced by free radicals and sigaret smoke /E.Niki // Chem Abst.- 1993. V.l 19.-P.686.

124. Packker J.E. Direct observation of a free radical interaction between vitamin E and vitamin С /J.E.Packker,T.F.Slatler,R.L.Willison //Natur. -1979. -V.278.- N 57. -P.737-738.

125. Peach S. Intestinal bacterial flora in normal adults/S.Peach // Ann. Inst. Sup. Sanit.- 1979.- Vol.15.-Nl.- P.9-18.

126. Rammelsberg M., Raider F.// J.Appl.Bfcteriol.-1990.-V.69.- P.2.

127. Schuler R. // Milchwissenshaft.- 1968.-V.23.-S.9-11.

128. Upreti G.C.,Hindsdill R.D.// Antimicrobiol. Agents Chemoter.-1975.-V.7.-P.43-51.

129. Van der Waaji D. Colonization resistance of the digestive tract; mechanism and clinical consequences/ D.Van der Waaji,H.G.Vries-Hospers//Ann. 1st. Super. Sanita.-1986.-Vol.22.-№ 3.- P.875 882.

130. Ziolecki A. The effect of stabilized rumen extract on growth and development of calves. Effect of the microflora of the gut/ J. Ziolecki //Anim. Phisiol. a. Anim. Nutr. 1989. - V.62. - № 1-2. - P. 62-74.

131. Р СФС Р Министерство селкс*-1"! хтянств*

132. ВЕТЕР!" ЧАЯ J1 Е Ч Е " 1 И Аордена Тру л. красного3 н ;i i' " и колхоза ■'■• • • Фрунзе Белгород о района Белгороде»tii. 'бластис » 19 Г

133. УТВЕРЖДАЮ Председатель колхоза им «Фрунзе»1. Горин1. Василий Яковлевич1. Vo1. АКТ