Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ВЛИЯНИЕ ПОЛИОВУЛЯЦИИ И НЕХИРУРГИЧЕСКОГО ИЗВЛЕЧЕНИЯ ЭМБРИОНОВ НА ПОСЛЕДУЮЩУЮ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНУЮ СПОСОБНОСТЬ КОРОВ-ДОНОРОВ ЧЕРНО-ПЕСТРОЙ ПОРОДЫ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ВЛИЯНИЕ ПОЛИОВУЛЯЦИИ И НЕХИРУРГИЧЕСКОГО ИЗВЛЕЧЕНИЯ ЭМБРИОНОВ НА ПОСЛЕДУЮЩУЮ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНУЮ СПОСОБНОСТЬ КОРОВ-ДОНОРОВ ЧЕРНО-ПЕСТРОЙ ПОРОДЫ"

всесоюзный ордена трудового красного эдакщи научао-жавдоштельашй институт ивогновсщства сми)

На правах доошюх ОВЧИННИКОВ Анатолий Владимиром*

УДК 612.646.02

ВЛИЯНИЕ ПОЛИСВУЛНЦИИ И НКЕИРУРГИЧЕСКОГО ИЖЛЕЧШИ ЭМБРИОНОВ НА ПОСЛЕДОЩП) воспроизвсдагЕльнл) СПОСОШОСТЬ КОРФ-ДШОРОВ "ЧЕНЮ-ПКГГРСЙ ПОРОДЫ

03.00.13 - |ягжохогхя человека в хявогцьа.

(4южшли сельскоховяйотвеншсс

АВТОРЕФЕРАТ

диссертация на ооаскаяие ученой степей* кацдвдата биологических неук

I

Дубровицы, Московской области 1965 год

Работа выдал к ии в лаборатории техника получения, переоадкж И криоконоервнрования «ыбрКОИОВ ОвЛЬСКОЮЗЯЙОТМИНЫХ живюшос Воеооювного научыо-иоследоветедьокого института животноводства.

Научный руководитель; доктор биологических щук Сергеев Н.И.

Официальные оппоненты: доктор бнологжчеоких наук

A.Д. Бугров;

кандидат бнологачвоких наук

B.В. Даровских.

Ведудее учреждение: Воесоюаный иаучно-ивследовахеяьодай

институт рваведения и генетики животных.

Зацита состоится

"Х" ысишриь 1985 г. в часов

на ваоедании опецяалнвированног© Оовета Л.020.16.02 при Вое-о<"- маучно-ноадвдоввтедьоком институте животноводства.

Адрео института: 142012, Дубровины, Подольского района, довокой области.

С диссертацией можно овнакоыитьоя в .библиотеке ВИЖа.

Автореферат равоола* 1985 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета кандидат биологичеокях наук

И.И. шшгин

I. Облея характеристика работы

Актуальность теш заключается в той* что она направлена на реиенве задач, поставленных ХХУ1 въездом ШГСС, Продовольственное программой СССР на период до 1990 года. одобренной. Майский (1982) Пленумом ЦК КПСС, определивших как неотложную необходимость повышения уровня селекционной работы по совершенствованию племенных и продуктивных качеств животных.-Важной и актуальной задачей явлаетоя ускорение темпов воспроизводства животных желательного генотипа» полученных от высокопродуктивных коров, осе'-мененных спермой выдаюадхся быков*

Традиционные методы воспроизводства выдающихся по продуктивности животных не обеспечивают существенного.влияния на их большие-популяции племенного и.пользователыюго скота. Широкое применение метода трансплантации вибрионов открывает большие возможности для интенсификации животноводства.

Разработка эффективных схем гормональной стимуляции явля- . ется главным направлением совершенствования метода трансплантации, обеспечивающим получение максимального числа полноценных: зародышей с желательным генотипом.

В литературе имеется мало экспериментальных данных с влиянии гормональных обработок и нехирургического извлечения.зародышей на дальнейшую воспроизводительную способность животных-доноров.

Цель и задачи исследований. Цель исследований заключалась в усовершенствовании и разработке более аффективных методов гормонального вызывания суперовудяции у коров-доноров, вехирургя-ческого извлечения и пересадки эмбрионов, в определении наиболее приемлемых доз и типов.гшмотррпинов для этих целей, а также в выяснении вдрянйЯ^^^Тй^^пга-яолучвния адбрионов

НАУЧНЕЕ'-БЛИОТЕКЛ Мое«, сэльою-;-)-'. пхад^ии

им. К. л. , и.,)иряазла Инп. №...... ............

на воспроизводительную способность коров-доноров.

Исхода из кого били поставлены следующие задачи;

^.Усовершенствовать и разработать новые:методы-гормонального вызывания оуперовуляцин:путем применения наиболее эффективных гормональных препаратов в сочетании с прост ахяандинаад в другими биологически активными веществами.

2. Освоить и усовершенствовать технику и'технологии получения и:пересадки.вибрионов.с использованием устройств разной конструкции.

3. Изучить уровень оуперовуляцни» опдодотворяевдсть яйцеклеток и качество вибрионов в зависимости от дозы и типа гонадотро-пинов,

4. На основе полученных результатов дать оценку влияния гормональных обработок и нехирургического извлечения вибрионов на воспроизводительную функцию коров-доноров.

Научная новизна работы.заключается в той, что впервые разработана технологая.вызывавля сушрэвуляции путем комплексного применений гонадотропина (СХК), витаминов А и В и йодистых препаратов,, что позволило повысить уровень овуляции и увеличить выход полноценных вибрионов на.обработанного донора*

Изучены факторы, влияющие на уровень суперовуляции, отшодо-творяеыомь яйцеклеток и качеотво.эибрионов. Усовершенствована техникаи методы хирургического и нехирургического извлечения.и пересадка аароДывей;- Сконструированы устройства для этих целей.' Новизна исследований подтверждена авторским свидетельством.

Практическая ценность работы.состоит в том,;что для получения достаточного числа однотипных потомков от высокопродуктивных животных усовершенствована технология трансплантация эмбрионов. Разработанные методические и.технологические условия пересадки 2-х Ьмбрионо» или пересадка одного эмбриона ооемененному реци-

паеигу позволяют получать высокой процент стелъиости в отелов

. ф

двойнями до 90%.

,Внед£евзв. Основные яолозешв диссертации реализованы в трех методических рекомендациях по гормональному вызыванию суперовудя-ции, хирургическому и пехирургичесхоцуиевл«ч«вив и п_ересадке вибрионов ■ крупного ро.гатаго скота и Инструкции по трансплантации эмбрионов крупного рогатого окота (1984).

Объем работы. Диссертация нахожена на 1X2 страницах мавиво-писного.текста, иллсотрировааа 24 таблицами,йрисунками. Список литературывключает 206 источников, втомчисде 1£Г иностранных: авторов.

¿ Материал в методика исследований

Исследования были проведены втечвыие 1979-1983 гг. на молочных фермах ОПХ "Наново" .к лаборатории травагааатавли вибрионов ВИа. Опыты .по изучению эффективности-гормонального шэнва— ше оусеро^уляции проведены на коровах и 68 телках. Влияли« факторов на уровень суперовуляции, опдодогворяемость яйцеклеток и качеотво вибрионов на 179 донорах..Синхронизация охоты у доноров в реципиентов проведены на 74 хивотных.Технология хирургического и нехирургического извлечения и^ересадгагаародышейна 371 коровах-донорах и телнах-рецнпиентвх. Одаты по изучвншо влияния.гормональных: обработок и нехирургического:извлечения эмбрионов на последующую плодовитость проведена на;49 коровах-донорах.

Вызывание суперовуляции различили гормональными препаратами ■ проводили-на коровах щ. телках' черно-пестрой, породы а нормальным состоянием половых органов и: цикличностью воопроивводител^* ной функции. Коровы Сшш в возрасте 3-6 лет о хивой массой —з—

500-5S0 кг.

Под опыт животныг подбирала о учетом зозраога, жиной масс» и состояния гениталий. Выявление охоты у жиьотеых-доноров проводили в стойловый период один pas в сутки в загонах во время прогулки,,s летний- на пастбище Z раза, утром ивечером, по наличию хорошо выраженного рефикоа^неподвижности. При-втом определяли состояние натки а яичников, для исключения из эксперимента животных, имеющих отклонения от нормы.

При разработке новых способов вызывания суперовудации,в день проявления охоты животным-донорам внутримышечно : вводили ви-гамины.д и Б, а о кормом.pas в оутяи в течение 18-25 дней:давали Иэдиотый кадий. В деньоСраОоиш доноров гонадотропином инъекции витаминов , повторяли в половинной дозе от г первоначальной, вводимой в период прошения охоты.

Нроведены.также исследования по определению аффективное тя гормонального вызывания суперовуадщии ; стандартными - препаратами высокой очистки (интергонан, маротропин, фоллигон) и гипо^зар--ныы гормоном ФСГ-л;

Для синхронизации * охоты,чер es 48 -часов ловле инъекции ГСХК внутримышечно вводили'простагаандин (лютализ) в дозе 30 мг коровам и 25 мг телкам или "астрофан1* в дозе ЗХ) мкг..

Животных-доноров ооеыевши .эаморо*енио-оттаяадам семенем одного быха хрихды с интервалом между осеменениями 10-12 часов. Первый день охоты лринималоа га ноль. Для оценки. стимулирующего _ действия говадэтропина:аа сутки до извлечения ембрионов (Ç-7-й день) ректальной пальпацией определяли и размер яичников,.подсчитывали число желтых тел и неовулировавших фолликулов (1,0 см в диаметре и долее}..Извлечение зародышей.осуществляла-на 7-8-Я день.

В акспериментах по хирургическое извлечению вибрионов при-

мендаи три оперативок* метода: через разрез верхнего свода влагалища о использование)! вффешнатора и без него, лапэротошге по белой линии кивота под наркозом, через разрез в области лвмбаль-еой (голодной) емки под местной анестезией*

Для нехирургичесного извлечения зародышей использовали 5 конструкций катетеров: двухкавальвые■катетеры-фоллея и три вашей конструкции. В качестве промывной среды попользовали фосфатко-буффернув среду Дюльбекко. Оценка конструкция катетеров давалась по продолжительности введения их в рога матки,.объему введенной и удаленной среды,.удобству в работ««.числу извлеченных эародыией.

В день, пойле извлечения зародышей,, для ускорения нормали-зацин физиологического состояния яичников и метки:после суперову-ляцип, одной группе животных в нутримыве чно вводили- простагааядин в дозе 30 мг, второй - простагдандин не вводили(контроль). При етом учитывали число дней от введения прост агаанди на до начала ветруса,. от извлечения зародышей до последующей стельноотидоно- -ров,-продолжительность сервис-периода.. Осеменение доноров.проводили два раза, в начале и в конце охоты*

При нехирургической'пересадке : зародышей использовали катетер "Нойитадт" (Ф?Г) и прибора навей конструкции*

Трансплантировали-вибрионы в основном телкам на 7-8-й день астрального цикла. Половые циклы реципиентов были синхронны о донорами и в отдельных случаях*.расходились во времени:*. 12.часов.. Перед пересадкой вибрионов у тедок-реципиентов определяли наличие и состояние желтого тела в одном иа яичников.

При переоадке ембрионЫ помещали в верхуткурэга метки на стороне йгнкцдонируищего желтого' тела.в яичнике. При билатеральной пересадке вибрионы.помещали по одному в каждый рог-матки» Коровам-реципиентам» предварительно оземенешшм, зародыши ашпшодровали в

контряатеральный желтому телу рог матки. Черев 60 дней после траио-

—■

плантации адбривнов определяли стельностьу рвдапиентов_ ректаль-в»И пальпацией. Конечные.реаулматы оибриопересядок учатьпаалн па от «ем.

3. Результаты собственных исследований

3,1* Влияние гонадотрошна (СХК) в сочетания с про от агпендивои и бимогачеокя* активными веществами на уровень суперовупя-"вди, число и яачеЬтвоэарэдышей у коров-доноров

С шлю выявления возможности использования бнодогачеоки активных вецеств при гормональной обработке животных-доноров была проведены »копериыенты о включением в общую схему гормонального вызывания суверовудяции витаминов "А", "Е" и препаратов йодяотаго вядия..

Анализ полученных данных показал, что двукратное введение витамина;"А? в дозе 135 тыо. и.«, (первая инъекция) и 70 тыс* ' и.е. (вторая) к витамина "Е" соответственно SO л 45мг при ежедневном; ска рыляваннаокормом в течение трех недель-100 иг йодистого кадия способствовало, по сравнению о контролен« повышению уровня овуляции на 12,9$, та ала извлеченных выбрионов ка 15,2«, нормальных вибрионов в 2,2 pasa tt снижение чиода дегенерирован-ных вибрионов и неоплодотворешшг яйцеклеток (табл. I).

Тведпчеуиедозы витаминов "А" и "К* до I5D-75 тыо, и.е. а 100-Я ыг, йодиотого калля до 200 мг незначительно повышало'уро-веньсуявровупяцниакачеотво эмбрионов по сравнению о контрольной группой. _ Наилучшие результаты были получены при двукратном применении витамина-"А" в дозе 135-70 тыо. и.*., витамина "Б* -$0-45 мг и йодаотого квлия - 100 ыг.

Аналогичные результаты были подучены в научно-производственном епате (табл* 2).

Уровень суперовудяади и качество выбрнояову коров-доноров прк введении витаминов и йодистого калия

Показатель

Т 4-

Группы

Г~!

I

Опытные I виг.А-13 5-70}1Е0-?5 тыс.

I тыс.н.е. ;н.е. _ 1внт.£-90-45 ¡100-ЭХ иг) !(мг) {Йодиотый -

(йодисты! ка-{ кадий (кг) !ли! (мг) 1001 200-

Число животных 29 30 30 Количество овуляций

на донора . 8,440,4 11,£*0,6 9»$£М

вибрионов и яйцеклеток 4,8+0,6 -7,3+0,8 5,4+0,8 В том числе:

нормальных 2,8+0,5 6,2+0,4 4,3+0,8

дсгенерированных 0,8+0,3- 0,6+0,4 0,6Ю^ неошодотворенных

яйцеклеток 1.3+1»! 0,6Ю,4 0,5+0,6

После введения проотаглаидана большинство коров (107-95,$) и телок (№-94,1$) проявили признаки полноценной охоты через 43,4+0,4 часа, то есть Четкая синхронизация охоты у доноров яв- ■ ляется характерной оообенностьп етой схемы обработки.

Показателями • эффективности гормонального вызывания суперовуляции является процент овуляций созревших фолликулов, который по группе лактирующих коров составил 82,4$, по группе телок 86,1$, а также число хивотных, ох которых получены ембрионы, В ■ данном опыте этот показатель был высокий и составил в среднем 90,4$.

Относительно высокую реакции яичников, особенно в группе телок, мокко, вероятно, объяснить повышенной реактивностью доноров на ГСХК под влиянием биологически активных веществ.

■ —7 —

Уровень суперовуляции и чясло вибрионов у животных-доноров при введении.витаминов и йодистого кадия

. Показатель У Коровы ¡Телки

Обработано животных П2 68

Проявили признаки охоты (п-^) 107-95,5. 64-94,1

Реагировало полиовуляций (п-%) 97-81,2 60-88,2

Число овуляций,на донора 7,7+0,52 13,9+1,21

Процент от числа.фолликулов 82,4 86,1

Положительных доноров по извлечению зародышей' 75-в 6,2 3-94,6

Получено эмбрионов на донора; 6,440,30 8,3+0,96

В том чиоле:.~ нормальных 3,4+0,20 3,9+0;3

дегенерированных; 1,2+0,15 1,510,23

неошодотворенных яйцеклеток 1,8 +0,15 3,8+1,02

Индивидуальная овулидоющая реакция яичниковна введение го— иадотропинов обладает большой-иэыенчнвостыо, которая,.вероятно, обуславливается физиологическими особенностями доноров и стадией развития фолдиедлов,в момент их.стимулирования гонадотропином. Экспериментальные данные вызывания, суперовуляции.с применением одинаковой дозы ГСХК подтверждают такое,заключение (табл. 3)*-

• Укоров о.наличием от 4 до:6 овуляций было извлечено в среднем 2,2, от 10 до 18 - 12,5, от 23 до 30 -1С,5 зародышей и яйцеклеток. С увеличением чиола овуляций более 10 выход нормальных эмбрионов уыеньшалоя от 6,4 до 2,0 на донора. Наиболее подходящий уровень множественной овуляции следует считать до 15, при котором можно получать около нормальных эмбрионов.

Оплодотворяемооть яйцеклеток, число вародывей к нормальных вибрионов в зависимости от уровня овуляции (%) .

Число- 7 Оплодотворяеыость ! Зародышей. 7 Нормальных овуляций { яйцеклеток { } вибрионов

4-6 66,7. »,5 40,7

7-И -71,7 49,4 56,6

П-14 74 Д 49,6 49,4

15-18 43,7 £.3 , 29,7

19-22 22,4 41,5 15,5

23-30 15,2 50,4 12,2

3.2. Результаты применения гипофизарного гормона ФСГ-п И; стандартного препарата ГСХК для вызывания суперовуляции у коров-доноров

* Для получения более высоких результатов суперовулйции я они- -жекия вариабельности в реакции яичников является перспективный применение фоддичглоомодулируюцего гормона (4СГ) (табл. 4).

•

Таблица 4

Количество и качество -аарэдыией в зависимости от типа гонадотропина

ПокаТатйь~ | Г о н а 7 о » Р о п и н ы " ~

1 стандарт вый Г ФСГ-п

I препарат {

_ ________________К ¿Н£е ¿гонан^.__________

Оперировано швотных 5 5

Чиоло-овуляцийнадонора Ю,6£1,41 12,6+1,82

Извлечено ©ародылай, всего II 44

Число вародывей на донора 2,2+0,90 8,8+2,41

В том числе: нормальных. 2,0+0;79 7,^2,22

Из 5 хоров, обработавшее ГСХН, амбржоян получены у 4 (80 .(9), а в гцупп» о ФОР - 7 во« хоров.

Среднее чиожо навлеченных эмбрионов на одного донора в ошп-воЯ группа было в 4 раза больше, чем в контроле (Р<0,01)• Процент извлечения зародышей от числа овуляций в группе о ГСЮС составил 23,9; о ФСГ-п86,3 0,01).

Результаты многоратного применения гормона ФСГ-а показывают , что он способствует Повышению оплодотвораемооти яйцеклеток, выхода нормальных вибрионов на донора, обеспечивает достаточный уровежь суперовуляцки. Однако уровень оуперовуляции*. получаемый после обработка стандартными препаратами ГСХК высокой очистки и ФСГ-п, не имеет точных пределов,

3.3, Влияние типа гонадотровина на уровень супероэулящга и качество эмбрионов

: Как было показано, на уровень суперовуляции, кроме индивидуальных особенностей обрабатываемых животных-доноров, существенное влияние оказывает тип н доза гонадотропина (табл. 5).

Установлено, что при применении стандартных препаратов по-лиовуляцаей реагировало 86,3% коров-доноров, при использовании нативного СХК леофильной сушки - только 7 доноров, обработанных катимым СХК, овуляций было 4,5; маротрошном - 6,7.; фОл-лягоном - 6,8 на донора, при коэффициент» изменчивости 109,9; . 8*9; 64,1$ соответственно. По числу навлеченных ембрионов на донора разницы между группами норов-доноров практически не было*

Процент животных,•реагирующих множественным роотом фолликулов на введение ГСХК, находитоя в зависимости от доен препарата. Оптимальной дозой нативного препарата СХК является 3,0-3,6 тыс.

Таблица 5

Реакция яичников коров-доноров на гонадотрошн

Показатель

Т Тип гонадотротова и доза {тыа. и.а.^ ГнахиЬниИ пре! бтавдартаые1препараты

И&^ГМ1!1.!4^0"

Обработано животных Реагировало полно в^гляцией

Среднее число овуляций на донора .

Число неовулировавпих

фоллюфлов

Положительных доноров по извлечении вибрионов (п-$) ■

Число зародышей на донора

Б том числе: нормальных

дегенерированвых

веоплодотворевных яйцеклеток

24

12-50,0

4,5»р,10

I »5*0 »15

6-90,0 4,3+0.13

2,3*0,72 0,7+0,42

36 31-3<?,1 6,7*0,70 2,4+0,33 23-74,2

4,5*6,42

2,30,40 1,4+0,©

82

71-86,5

6,8+0,54*

1,2+0,68

50-70,4 М+0,52 2,4+0,40 0,7+0,14

1,3+0,06 0,©>,18 1,2+0,39

и.е., обеспечивающая в среднем да 9 овуляций на положительного донора по суперовуляции (табл. ф.

Таблица 6

Реакция яичников у коров-доноров в зависимости от дозы ГОК

Доза Тчисло обра-Т Реакция яичников

гонадотрогог на -¡оотанных 'животных {овуляций (неовулировав- говуляош + !вих фалл грт о в 1^оллив2;яы

ЮОО 15 3.9 1.2 5.1

1600 10 3,3 1,1 «Л

2100 Ю 3,2 3,5

2530 25 5,2 3,5 8,7

3000 9 1,7 9,9

,20» 24 9,7 I.* Ю, I

4000 14 16,7 11,0 27,7

Результаты изадачения екДрионов у коров и teлов-доноров раз--иыми методами.

Хирургическое извлечение. У коров оперативный доступ к рогам матки и яйцеводам осуществляли.через разрез в области голодной ямки, у телок - по белой линии^живота. Извлечение■амбрионов методом вентральной лаяаротомии более аффективно,.чем через разрез в области голодной ямки (табл. 7).

Таблица 7

Результаты извлечения зародывей у животных-доноров хирургическим методом

{._Метод извлечения

Показатель {через основой- I ЬентраЛыМГ

' раврез_1 лапаротомии

j I "теШГ

Оперировано вивотных' 9 14

Число овуляций, всего © 132

Число овуляций на донора 7,7+0,41 9,4+0,65

Получено яйцеклеток и эмбрионов,.воего 22

Процент зародышей от*числа овуляций >3,2 . 52,5

Количество зародышей в среднем на донора < 2,4+0,69 4,9+0,86

От коров-доноров получено 33.2J6 зародывей» у телок - 52,51 от общего числа овуляций. В среднем от коров-доноров получено зародышей в 2 раза меньше, чем от телок (2,4 против 4,9). Операции по белой линии живота более аффективны, .так как в отдельных случаях позволяет получать до IOQJ» зародышей от числа овуляций.

При извлечении вибрионов через боковой разрез лучшие результаты получены промывавием рога ыаткина стороне разреза, чемиз. противоположного» Объясняется некоторыми затруднениями в подтяги-

вании.и.фиксировании егов просвете разреза* На телках такой метод шло пригоден* в связи о малыми рогами матки,

7.,некоторых телок-донэров хирургическое промывание рогов матки было осуществлено дважды..При этом, в.отдельных случаях наблюдалось снижение эластичности, широкой маточной овивки.врсщаление зндометрия рогов матади Др..

Нехирургическое извлечение,-Биотехнический метод бескровного получения:зародышей:должен быть надежным и простым, позволяющем получать их о высокой резулыативностью-в условиях ферм*

Освоение и усовершенотвованиевехирургаческого метода получения эмбрионов у животных-доноров в основном осуществляли о использованием трех.видов инструментов: безманжетного одноканального со съемвым наконечником, Фоллея в металлической трубке и двух видов резиновых двухванадышх катетеров (конструкции ВИ1а и модель "Нойотадт1?, ФГГ).

Устройства из резины о надувным баллоном легко проводятся через дерввкальный канал, не:вызывая травм.эндометрия матки, т.е. являются более удобными и падежными*

Ревухьтаты испытания устройств показали*; что при хорошем навыке оператора все катетеры могут успешно иопользоватьоя для извлечения эмбрионов (табл. 8)*.

Эффективность извлечения вибрионов от числа овуляций резиновыми катетерами.была в среднем на 23,выше, чем жесткими безман- -хетныш устройствами. Среднее число извлеченных эмбрионов на донора было соответственно 3,45 и 4,9.

Различия между группами, вероятно, больше обусловлены не -конструкцией катетеров, а вариациями в числе овуляций. Отсут-отше эмбрионов у 18,3$ доноров может быть объяснено неудачным промыванием, задержкой яйцеклеток в яйцеводеих.рассасыванием и др.

Эффективность извлечения вародышеК о использованием уотройств равной конструкции.

Катет е

Показатель

I—--г

(безмен,- '.Фоллея в 1жвтп.од-,металлина-!ноканадь.ской трубке 1со съем-} 1ным на- [ 1конячни-! ко« |

1 I

Резиновые

НИХ

1--

1"Нойжтад*т'

I I 1 I

Оперировано животных 31

Положительных доноров по извлечению.^аро^ыаей

Число овуляций на

донора б;9+0,б4

вибрионов на донора - 3,5К),69

Процент от числа овуляций Я), 7

29

36

46

23-74,2 24-82,8 31-в6Д 39-84,7

7,3*0,31 8,3+0,31 8,0+0,23

3,4+0,41 5,1+0,61 4,8+0,63 46,9 61,4 60,0

3.5. Влияние гормональной обработки и нехврургаческого извлечения.вибрионов на последующую плодовитость коров-доноров

При гормональном вызывании суперовуляции в крови у доноров накапливается большое количество эстрогенов и прогестинов, уровень которых резко отличается от их уровня у необработанных животных. ГГри этом масса яичников и их объем возрастают в несколько раз, в результате образуется разное количество желтых тел, а также остаетоя часть неовуяировавших фолликулов. Альтернативой такому ендокринноцу статусу будут физиологически» сдвиги в функции матки и яйцеводов.

Восстановительный период у коров-доноров определяется как промежуток времена от извлечения вибрионов до последующей охоты.

Средний показатель восстановительного периода в опытной группе составил 18,4 дня, в контрольной 26,1 (табл.-9).

Таблица 9

Влияние простагяандина,на восстановление воспроизводительной функции у коров-доноров

Показатель Группы

контрольная (п^25) опытная (в*24)

М+м Сигыа Сигма

вариаоель-ность (?) Ьариаоель-нос» (%)

Число дней; от.извле-чения вибрионов до повторного прихода коров в охоту 26,1^3,82

-от извлечения Эмбрионов до плодотвор- ' ного осеменения 32,0+5,00

- от предыдущего оте- • ла до гормональной обработки 90,5+14,1

. Сервис-период от отела до плодотворного' осеменения 140,0+13,25

Расход семени на

шодотворяоеооеме-

нвние 1,5-Ю,41

По сравнению с коровами без суперовуляцгалатеолктичесвая активность задерживалась, вероятно,из-за повышенного уровня прогестерона в сыворотке крови. 7 животных,, которым вводили проста-гландян, длительность суперовуляторного киота составила - 25,4 ^яя, у коров без простагпандина - 35,1 дня. Вариаци* между отдельными животными были большими (4151 в контроле и 65& - в опыте).

Количество.дней от извлечения амбрионов до плодотворного

10.7 12.0

41,0 13,4+3,3 65,5

13.2 15.5

41,2 25,1+7,50

39.7 57.7

44,0 П7,0+16,7

35.0 49.8

25А 132,0+14,4 ^

Х.Г 1.Х.

45,6 1.7+Р.30 ^

осеменения в отавой группе было на 6,9 дня меньше, чем в контрольной, при коэффициенте изменчивости 59,3 и 41,2% соответствеа-80.

Средняя опходотвзряемооть коров после первого осеменения для обеих групп составила 5*1-,8$.

Таким образом, хотя простаглавдиновые инъекции и укорачивают суперовуляторвый цикл, однако, прост агландин оказывает побочное действие (нерегулярвость астральных циклов) на последующую цикличность и иежотедьяый период.

3.6. Результаты нехярургическоЙ пересадки эмбрионов

При пересадке амбриовов реципиентам исходили из того, что оптимальное место нахождения вибриона должно быть обусловлено, местом,.на которой бы он имплантировался при естественной зачатии». Также,было важным соблюдение асептики щш пересадке,.что обеспе-чавалооь применением специальной вацнхной оболочки,. .

Пересаженные ембрионы по результатам морфологической,оценки качества классифицировались как очень хорошие, хорошие.-

При.пересадке чулътивнрэванвых вибрионов процент стельности реципиентов был выше,.чем свежих я эаморожавво-оттаяваых (табл.10).

На результаты пересадки оказывают влияние скрытые факторы, как и при искусственном осеменении животных.

Данные по пересадке вибрионов показывают,.что от одного или двух Доноров вибрионы.имрют различную прижавдявность, что влияет . на результаты пересадки.,

В эксперименте по сравкеяяю искусственного осеменения а кои-бинацинкскуссхвенное осеменение и нехнрургическая пересадка (подсадка) в противоположный рог матки по отношению к желтоцу телу в яячвяке, разница в результатах прнживлявмооти бына весуцеот-

Таблица 10

Уровень приживляемооти.вибрионов при нехирургическов перевалке телкаы-доворвы

Э м б р и о н ы

Показахель

] рич^дцци-

I свежие ,заморожей-}|^лмнви- гитптч»

1 ¡но-оттаяв-рованные {

| ¡ныв { 24 ч *

Пересажено зародышей 80 21 16 П7

Число реципиентов. 80 21 16 117

Отельных реципиентов 46 12 10 £8

Процент от числа реципиентов 57,5 57.1 «.5 тл

Получено телят 43 9 9 а

венной (табл. II),

Таблица!!

Результаты контрлатеральной перевалки вибрионов осемененным коровам

- -Т " Г~р~7~гГд~ы

Показатель (¿оеменение-|осеменение +■

(контроль) ) подсадка

Количество гавотшх 32. 27

Число стельных коров 16 14-

Процент стельнооти 50,0 51,9

Количество двоен - 5

Процент от числа стельных - 35,7

Подсадка:зародыией предварительно- осемененным животным обеспечивала 35,7% двойневости от чиоха стельных реципиентов и 18,51 от числа пересаженных ембрионов. Больное влияние на реаультатив-ность эмбрио пере садок оказывает степеньсикхрэвности астральных

циклов»

Причины гибели зародышей пооде их пересадки реципиентам под- ■ ноотьо еще не выяснены. Основной причиной, вероятно, является.отклонение в шрфойункциовально Й адекватности вндометрая катки к восприятию'зародыша. Немаловажный явлкютоя некоторые технические моменты, требующие определенного'опыта и точности, связанные с получением, оценкой и пересадкой вибрионов.

4, В ы в о д ы

I* Комплексное применение нахиввого препарата СЕК в сочетании о простагдандиняни и биологически активными веществами, обеспечивает вызывание множественного роста фолликулов у 8 6,55 коров и телок-доноров, получение в среднем 7,7 овуляций на обработанно-■ го и 5,8 зародышей на оперированного донора.

2. Процент положительных доноров по суперовуляции выше при применении стандартных препаратов - маротропина- (86,156) .и фоллиго-на (80,^), по сравнению с наивным препаратом СХК,

9*.Оперативный доступ через разрез.по белой линии живота обеспечивает извлечение: 52,ЗЙ зародышей от общего числа овулящй при среднем числе зародышей 4,9 на оперативного донора.

4. Техника нехирургического получения зародышей у коров-доноров в навей модификации обеспечивает успешное промывание рогов матки в.среднем у животных и получение 51,35 вибрионов от общего числа овуляций. Эффективность вехирургического извлечения ' зародыней зависит от конструкция катетеров,.полноты удалении промывной среды и-квалификации оператора.

5. Вехирургичеекая пересадка свежих, заморожевно-оттаянвых-

ивудмивированных вибрионов хорошего качества-с использованием уотройств ШЖа-позволяет получать в среднем 58,1$ стельноотей. Подсадка эмбрионов в противоположный желтому телу рог матки предварительно осемененным реципиентам не влияет на приживляемосп собственного зародыша.

6. Гормональное вызывание суперовуляции и нехирургическо» извлечение вибрионов не оказывает существенного влияния на воспроизводительную способность воров-доноров.

7. Применение.простагландина в день извлечения вибрионов во-: кращает суперовуляторный воостановителышЯ период с 26*1 до 18,4 дня.и промецгток времени от извлечения зародышей до плодотворного

оосеыенения с 32,0 до 2<%Х-Дня,

5. Практические предложения.

1. Для повышения эффективности гормонального вызывания су-перовуляциа у коров-доноров, повышения оплодотворнемости.яйцеклеток и выхода нормальных эмбрионов рекомендуется способ получения зародышей путем включения в общую схему гормональной обработки биологически активных веществ - витаминов А и Б, йодистого калия.

2. В целях увеличения выхода телят целесообразно использовать метод двойневих пересадок по одному вибриону в кавшй рог матки или подсади вибрионов в противоположный рог матки по отношению к желтому телу в яичнике предварительно осемененному реципиенту.

По теме диссертации опубликовано 9 работ, основное.содержание изложено в следующих статьях:

I. Об осеменении коров с множественной овуляцией. Молочное— 19 —

и мясное скотоводство, 1979, & 12, 38-39 (в соавторстве;.

2. - Трансплантация эмбрионов у крупного рогатого окота. Бюллетень научных работ БИЖа, 1980, 61, Х08-П0.

3. Оуперовуляция коров и телок-доноров эмбрионов. Ветеринария, 1982, Й 7, 47-49 (в соавторстве).

4. Уровень полиовуляции у коров-доноров в зависимости от размера яичников и состояния желтого тела. Сборник научных трудов ВИХа, 1983, 44. 74-79.

5. Способ получения эмбрионов у крупного рогатого скота

ь *

для трансплантации. Авт. ов-во № 1009366. Бюллетень "откршия, изобретения", № 13, 7.04.83 (в соавторстве).

л

Л-101031 Подписано влетать X0.07.8Sr. ■

Формат 60x84/16. Тирах 100 экз. Объем 1,25 печ.л.

Зак. 1952 Ротапринт

Типография ШШЭЫР г.Шербинка