Влияние озонированного физиологического раствора на микроэлементный состав тканей животных-опухоленосителей

Сазанов, Артем Иванович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние озонированного физиологического раствора на микроэлементный состав тканей животных-опухоленосителей
ВАК РФ 03.01.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние озонированного физиологического раствора на микроэлементный состав тканей животных-опухоленосителей"

На правахрукописи

САЗАНОВ Артем Иванович

ВЛИЯНИЕ ОЗОНИРОВАННОГО ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО РАСТВОРА НА МИКРОЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ ТКАНЕЙ ЖИВОТНЫХ-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ

Специальность 03.01.04 - биохимия

- 1 НОЯ 2012

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Нижний Новгород 2012

005054304

Работа выполнена на кафедре клинической лабораторной диагностики ФПКВ в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Нижегородская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Клавдия Николаевна Конторщикова Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Александр Сергеевич Корягин доктор медицинских наук, профессор Сергей Петрович Перетягин

Ведущая организация:

ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздравсоцразвития России, г. Ростов-на-Дону

Защита состоится 15 ноября 2012 г. в 15.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.166.15 при Нижегородском государственном университете им. Н.И. Лобачевского по адресу: 603950, Н. Новгород, пр. Гагарина, д. 23, корп. 1, биологический факультет.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ННГУ им. Н.И. Лобачевского

Автореферат разослан < > октября 2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доцент, к.б.н.

Актуальность проблемы

Онкологические заболевания прочно удерживаются среди лидеров по смертности наряду с сердечно-сосудистыми. Изучение механизмов развития злокачественных новообразований имеет большое значение. Опухолевый рост характеризуется нарушением многих видов обмена, среди которых можно выделить: нарушение микроэлементного статуса организма и нарушение баланса свободнорадикального окисления (Скальный A.B., 1997; Щербатюк, 1997; Aiba, 1999; Khuri, 2000; Алясова, Конторщикова, Шахов, 2006). Микроэлементы играт важную роль в процессах роста, дифференцировки, репарации, регенерации, апоптоза, некроза, выживаемости клеток. Дисбаланс микроэлементов сопутствует или, в некоторых случаях, служит отправной точкой развития различной аллергической, аутоиммунной и опухолевой патологии (Алясова, Конторщикова, Коркоташвилли, 2003;Кудрин, Громова, 2007). Расшифровка механизмов нарушений обмена микроэлементов при опухолевом росте и разработка способов коррекции выявленных нарушений представляет собой одну из актуальнейших фундаментальных проблем современной биологии и медицины.

Для лечения злокачественных опухолей наряду с хирургическим удалением применяют лучевую терапию и химиотерапию. Однако использование этих методов не позволяет получить полного уничтожения опухолевых клеток, часть их способна ускользать от действия противоопухолевых агентов, длительно сохраняться в организме в условиях анабиоза, а в последующем участвовать в формировании метастазов и являться причиной гибели опухоленосителя. Кроме того, злокачественные клетки могут обладать резистентностью к противоопухолевым препаратам, наличие которой затрудняет лечение и значительно ухудшает прогноз. Разработка методов потенцирования действия противоопухолевых агентов представляется весьма актуальной и находит отражение в научных исследованиях последних лет.

Положительный эффект использования озона при злокачественном росте доказан многочисленными исследованиями зарубежных и отечественных авторов (Варро, 1974; Sweet et al, 1980; Wolf, 1982; Aman, DeVries, 1983; Sthulz, Wagner, 1997; Щербатюк, 1997; Гончарова, 1998; Конторщикова, Щербатюк, 1999; Алясова, Конторщикова, Терентьев, 2000). Одним из методов озонотерапии является введение озонированного физиологического раствора (ОФР) (Перетягин, 1991; Конторщикова, 1992; Масленников, Конторщикова, 1999; ) Как известно ОФР корректирует про- и антиоксидантный баланс организма, снижает активность антиоксидантной защиты опухолевой ткани и приводит к активации свободнорадикальных реакций. Всё это в сумме обуславливает нарушение метаболизма опухолевых клеток и, в конечном итоге, их гибель.

С целью повышения эффективности химиотерапии разработаны различные медикаментозные и немедикаментозные методы. Однако сочетанное воздействие цитостатиков и низких физиологических концентраций озона на опухолевую ткань остается недостаточно изученным.

Цель и задачи исследования

Целью работы является исследование уровней микроэлементов при опухолевом росте и различных способах коррекции неопластического процесса.

Соответственно поставленной цели решались следующие задачи:

1. Исследовать в плазме крови, нормальных и опухолевых тканях животных-опухоленосителей содержание микроэлементов (2п, Си, Мп, Мо, Со, Бе, Сс1, N1, Сг, 81, А1, Ва, С<1).

2. Провести сравнительный анализ содержания микроэлементов на фоне озонотерапии, доксорубицина, и при сочетанном применении озонированного физиологического раствора и доксорубицина.

3. Оценить уровень перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты различных тканей при введении озонированного физиологического раствора, доксорубицина и сочетанного введения озонированного физиологического раствора и доксорубицина.

Научная новизна

Впервые у животных-опухоленосителей проведён анализ микроэлементного состава в тканях печени, почках, мозге, лёгком, сердце, опухоли и плазме крови.

Оценено влияние на микроэлементный состав различных способов воздействия (доксорубицин, озонированный физиологический раствор, сочетания озонированного физиологического раствора и доксорубицина).

Проведено исследование свободнорадикального окисления различных тканей (печень, почки, мозг, лёгкое, сердце, опухоль, плазме крови) у животных под влиянием доксорубицина, озонированного физиологического раствора и сочетанного введения озонированного физиологического раствора и доксорубицина.

Проведён морфологический анализ влияния на злокачественную опухоль доксорубицина, озонированного физиологического раствора и сочетания озонированный физиологический раствора и доксорубицина.

Оценена взаимосвязь микроэлементного состава, показателей перекисного окисления липидов, свободнорадикального окисления в гомогенате тканей животных-опухоленосителей.

Теоретическая и практическая значимость работы

Оценено регулирующее влияние низких концентраций озона на изменение концентраций микроэлементов в нормальных и патологически измененных опухолевым процессом тканях.

Выявленные изменения микроэлементного состава тканей здоровых животных и животных-опухоленосителей на фоне различных воздействий могут иметь большое значение для раскрытия общебиологических механизмов развития опухолевого процесса.

Отмечено потенцирующее действие озонированного физиологического раствора в отношении противоопухолевого эффекта цитостатиков, одним из механизмов которого является изменение обмена микроэлементов в организме опухоленосителя.Изученный характер распределения микроэлементов при опухолевом процессе позволит дополнить и усовершенствовать существующие способы лечения, что положительным образом скажется на показателях выздоровления и улучшит качество жизни больного.

Результаты исследования могут быть использованы в преподавании курсов по биохимии для студентов вузов биологического и медицинского профиля.

Положения, выносимые на защиту

1. Неопластический процесс сопровождается нарушением баланса микроэлементов в различных тканях по сравнению с интактными животными.

2. Изменение уровней микроэлементного состава в тканях животных-опухоленосителей связано с активностью свободно-радикальных процессов.

3. Введение озонированного физиологического раствора в сочетании с доксорубицином обеспечивает сохранение баланса микроэлементов в различных тканях и снятие металлодепресивного действия доксорубицина, что обеспечивает эффективность противоопухолевого воздействия.

Апробация работы

Результаты работы представлены на IX юбилейной научной сессии молодых учёных и студентов «Современное решение актуальных проблем в медицине» (Нижний Новгород,2010), Международный симпозиум федерации европейских обществ по изучению макро- и микроэлементов « Макро- и микроэлементы в медицине и биологии» (Санкт-Петербург, 2010), 15 Нижегородской сессии молодых учёных (Нижний Новгород,2010), III Всероссийском конгрессе с международным участием студентов и аспирантов-биологов «Симбиоз-Россия 2010» (НижнийНовгород,2010), V украинско-русской научно-практической конференции IV азиатско-европейской научно-практической конференции «Озон в биологии и медицине» (Одесса, 2010), Х-ой научной сессии молодых учёных и студентов (Нижний Новгород, 2011), IOAIUVAWorldCongress «OzoneandUV:Leading-edgescienceandtechnologies» (Paris, 2011) Публикации

По материалам диссертации опубликованы 12 работ, в том числе 5 в изданиях, рекомендуемых ВАК Министерства образования и науки РФ. Структура и объем диссертации

Диссертационная работа в объеме I т-г листов состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, ■ собственных результатов и их обсуждения, выводов и списка цитированной литературы. Диссертационная работа иллюстрирована 3S. рисунками и 2> таблицами. Библиографический указатель включает источников литературы(

отечественных и I ¿Риностранных).

Автор выражает искреннюю благодарность своему научному руководителю Клавдии Николаевне Конторщиковой за неоценимую помощь, мудрые советы, понимание и терпение. Автор благодарит за совместную работу к.х.н., в.н.с. Пименова В.Г., асп. Евдокимова И.И., д.б.н. Иванову И.П., к.б.н. Тихобразову О.П, Архипову Е.В., Кирилова A.A., д.м.н., проф. Кузнецова С.С., к.б.н., доц. Веселову Т.А. Автор высказывает особую благодарность коллективу кафедры клинической лабораторной диагностики ФПКВ за помощь и поддержку.

Материалы исследования Материалы исследования

Исследование выполнено на лабораторных животных — белых нелинейных крысах-самках (75 особей) массой 250±Ю г. Эксперименты проводились в соответствии с требованиями нормативных правовых актов, регламентирующих

выполнение исследований по безопасности и эффективности фармакологических веществ в РФ (Приказ МЗ РФ «Об утверждении правил лабораторной практики» №267 от 19.06.2003 г.) и международных правил правовых и этических норм.

Модель неоплазии создавали перевивкой штамма рака молочной железы РМК-1 подкожно в область правой подмышечной впадины. Штамм опухоли приобретен в Банке опухолевых штаммов РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН (г. Москва).

Животных вводили в эксперимент на 45-е сутки после перевивки опухоли, объем которой к этому времени достигал 6—8 см3. Животные были разделены на 5 групп по 15 особей в каждой:

Первая группа - контрольная - животные с перевитой злокачественной опухолью молочной железы РМК-1.

Вторая группа - животные - опухоленосители с внутрибрюшинным введением противоопухолевого препарата в дозе 0,04 мг на особь через день. Всего 5 процедур.

Третья группа - животные - опухоленосители с внутрибрюшинным введением озонированного физиологического раствора в объёме 0,02 мл с дозой озона 20 мкг. Всего 6 процедур через день.

Четвёртая группа - животные - опухоленосители с чередованием 6 инъекций озонированного физиологического раствора и 5 инъекций противоопухолевого препарата.

Пятая группа - интактные животные.

В качестве противоопухолевого препарата использовался противоопухолевый антибиотик антрациклинового ряда доксорубицин.

Озонированный физиологический раствор (ОФР) получали барботажем 0,9% ЫаС1озоно-кислородной смесью с использованием серийного отечественного генератора озона «Квазар» (Н.Новгород). Концентрацию озона в физиологическом растворе определяли с помощью анализатора концентраций ИКОЖ-5 (г. Киров).

На 11-е сутки после начала эксперимента под эфирным наркозом осуществляли декалитацию животных и забор тканей: кровь, печень, почки, мозг, сердце, лёгкое, опухоль.

Отбор проб, их подготовка и автоклавный метод минерализации для анализа микроэлементного состава тканей проводили согласно методическому указанию (МУК 4.1.985-00).

Спектр микроэлементов анализировался на базе Института химии высокочистых веществ РАН (ИХВВ РАН), с использованием атомно-эмиссионного спектрометра с индуктивно связанной плазмой АЭС и ИСП Модель i САР 6300INTERTECH Corporation (США).

Свободно-радикальное окисление оценивалось методом индуцированной хемилюминесценции (Кузьмина, 1983).Исследование активности перекисного окисления липидов включало измерение уровней диеновых коньюгатов (ДК), триеновых коньюгатов (ТК), оснований Шиффа (ОШ) методом И.А. Волчегорского и др. (1989).

Гистологическое исследование опухолевой ткани осуществлялось общепринятым способом. Препараты фиксировали раствором эозиннметиленового

синего по Май-Грюнвальду и окрашивали азур-эозиновым красителем по Романовскому в течение 3 минут.

Для статистической обработки полученных результатов применен ряд общеизвестных методов, принятых в биологической и медицинской статистике. При подсчете медиан (Me) с вычислением 25% и 75% квантилей, коэффициентов достоверности (р) по критериям Манна-Уитни, используя поправку Бонферрони рангового дисперсионного анализа Краскела-Уоллиса, коэффициентов корреляции по Спирмену, были использованы пакеты программ BioStat 2008 Professional и Microsoft Excel.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Содержание микроэлементов в тканях здоровых животных, крыс-опухоленосителей при различных экспериментальных условиях

В плазме крови животных интакгной группы был выявлен Сг (табл.1), который по современной классификации относят к эссециальным элементам (Кудрин, Громова, 2007). В норме организм содержит небольшие количества хрома, его физиологическая концентрация не обладает канцерогенным или токсическим действием. В интактной группе не были идентифицированы такие токсичные элементы как Al, Ва, Cd, но они обнаружены у животных-опухоленосителей (табл. 1). В литературе нет достоверных данных об эссенциальности кадмия, однако имеются сведения, подверждающие его генотоксичность и канцерогенность в экспериментальных моделях (OldigesH. etal., 1984,1989). Присутствие кадмия при одновременном снижении уровня цинка в контрольной группе подтверждает их антагонистическое взаимоотношение. Токсичность и мутагенность бария не установлена, в незначительных количествах он находится во всех органах и тканях организма (Кудрин, Громова, 2007). Данных об эссенциальной роли алюминия в организме человека и животных нет, и, учитывая отсутствие специальных диет, можно предположить, что присутствие алюминия в плазме носит скорее случайный характер.

Среди ряда определяемых микроэлементов наиболее выраженное повышение по сравнению с интактной группой отмечено у опухоленосителей для Си. Уровень меди статистически значимо возрос на 42% (табл.1). Уровень цинка, напротив, статистически значимо снизился на 58%. Избыток меди, возникающий в организме, приводит к дефициту цинка, что показано в нашем исследовании, и согласуется с данными литературы. Кроме того, отмечено статистически значимое увеличение содержания уровня Si у животных-опухоленосителей по сравнению'с интактными на 15%.

В плазме крови животных-опухоленосителей с введением ДР наблюдалась общая тенденция к повышению количества микроэлементов по сравнению со здоровыми животными и животными-опухоленосителями за исключением Fe и Zri (табл. 2). У животных-опухоленосителей с введением ДР статистически значимо по сравнению с интактной группой увеличивался уровень Си на 65% (табл.2 ).

Таблица 1

Содержание микроэлементов в плазме крови у интактных крыс и крыс-

опухоленосителей _(Ме, 25% -^75 %)_

Плазма

Элемент (г/500 мкл) Интакгные животные (Ме, 25%+75%) Контрольная группа (Ме, 25%+75%) Р

А1 4,72Е-06 (2,76Е-06-5,59Е-06)

Ва 1.05Е-08 (9,00Е-09-1,13Е-08)

са 5.25Е-09 (5,25Е-09+2,63Е-08)

Сг 2.93Е-08 (2,70Е-08-КЗ,04Е-08)

Си 7.13Е-07 (6,29Е-07-*-8,60Е-07) 1.01Е-06 (9,14Е-07+1,11Е-06) 0,00057

Ке 8.91Е-07 (7,19Е-07-!-1,21Е-06) 8.64Е-07 (5,29Е-07-Н,25Е-06)

Мп 9.60Е-09 (9,08Е-09*2,05Е-08) 1.50Е-08 (1,35Е-08-И,65Е-08)

ві 1.18Е-05 (8,84Е-06-1,27Е-05) 1.35Е-05 (1,04Е-05-1,52Е-05) 0,016

Ха 7,92Е-07 (6,95Е-07-8,70Е-07) 3.29Е-07 (2.95Е-07-3.59Е-07) 0,000027

Наряду с общим накоплением Си в плазме крови животных-опухоленосителей, наблюдалось снижение уровня Ъъ. Данная тенденция является неблагоприятной, так как соотношение Ъа!С\1, при увеличении уровня Си и снижении цинка, имеет большое значение для старта и развития онкологических заболеваний. У животных-опухоленосителей с введением ДР наблюдалось статистически значимое увеличение на 36% количества 7п по сравнению с опухоленосителями контрольной группы.

В плазме крови животных-опухоленосителей после введения ОФР обнаружено статистически значимое повышение уровня меди по сравнению с группой здоровых животных на 47% (табл. 2). Наряду с общей тенденцией увеличения уровня микроэлементов у животных-опухоленосителей по сравнению со здоровыми животными количество железа и цинка, наоборот, снижается. Наблюдается статистически значимое снижение уровня железа на 45% у опухоленосителей с введением ОФР по сравнению с ийтактной группой и статистически значимое снижение на 43% по сравнению с крысами-опухоленосителями. Уровень цинка статистически значимо на 45% снизился у животных-опухоленосителей с введением озона по сравнению с интактными животными (табл. 2).

Таблица 2

Содержание микроэлементов в плазме интакгных крыс, опухоленосителей и при

различных воздействиях

Эле мен т (г/50 0 мкл ) Интактны е животные (Ме, 25%+75%) Контроль ная группа (Ме, 25%+75%) Опухолевое отели с введением ДР(Ме, 25%+75%) Опухоленос ители с введением ОФР (Ме, 25%+75%) Опухолено сители с введением ОФРиДР (Ме, 25%+75%) Р

Си 7.13Е-07 (6,29Е-07+8,60Е-07) 1.01Е-06 (9,14Е-07+1,11Е-06) 1.18Е-06* (1,02Е- 06+1,28Е-06) 1.05Е-06 * (9,73Е- 07+1.20Е-06) 1.04Е-06 * (9,73Е-07+1,18Е-06) *ДР- 0,00001 ♦ОФР- 0,00004 ♦ОФРиДР - 0,00008

Ке 8.91Е-07 (7,19Е-07+1,21Е-06) 8.64Е-07 (5,29Е-07+1,25Е-06) 7.49Е-07 (5,16Е- 07+1.80Е-06) 4,89Е-07*Д (4,09Е- 07+6,45Е-07) 3,91Е-07*Д □ (3,44Е-07+4,94Е-07) ♦ОФР-0,005 ДОФР-0,016 *ОФР и ДР -0,0003 ДОФР и ДР -0,001 □ - 0,0065

Мп 9.60Е-09 (9.08Е-09+2,05Е-08) 1.50Е-08 (1.35Е-08+1,65Е-08) 1.80Е-08 (1.42Е- 08+2.14Е-08) 1.41Е-08 (1,35Е- 08+2.07Е-08) 9.75Е-09 □0 (8,63Е-09+1,01Е-08) □ -0,0011 0-0,0011

N1 1.69Е-07 (1Д8Е- 07+2,94Е-07)

в! 1.18Е-05 (8,84Е-06+1,27Е-05) 1.35Е-05 (1.04Е-05+1,52Е-05) 1.36Е-05 (1,10Е- 05+1.67Е-05) 9.52Е-06 (8,52Е- 06+1.53Е-05) 1.29Е-05 (8,76Е-06+1,43Е-05)

Ъа 7.92Е-07 (6.95Е-07+8,70Е-07) 3,29Е-07 (2,95Е-07+3,59Е-07) 4,47Е-07Д (3.25Е- 07+6.62Е-07) 4.04Е-07 * (3,27Е- 07+4.53Е-07) 3.66Е-07 * (3,29Е-07+4,08Е-07) ДДР - 0,021 ♦ОФР-0,00001 ♦ОФР и ДР -0,0000

*- статистически значимые различия по сравнению с интакгной групной(р<0,05) Д - статистически значимые различия по сравнению с опухоленосителями(р<0,05)

статистически значимые различия между опухоленосителями с введением ДР и опухоленосителями с введением ОФР(р<0,05)

□ - статистически значимые различия между опухоленосителями с введением ДР и опухоленосителями с введением ОФР и ДР(р<0,05)

О - статистически значимые различия между опухоленосителями с введением ОФР иопухоленосителями с введением ОФР и ДР(р<0,05)

При сочетанием использовании ОФР и ДР уровень железа и цинка у животных-опухоленосителей статистически значимо по сравнению со здоровыми животными снизился на 56% и 54%, соответственно (табл. 2). В плазме крови крыс с сочетанным введением озона и доксорубицина наблюдалось статистически значимое накопление меди, её уровень увеличился на 46% по сравнению со здоровыми животными (табл. 2)

Содержание железа в плазме крови у животных-опухоленосителей при сочетанном введении ОФР и ДР статистически значимо было ниже на 48% у животных с введением только ДР(табл. 2). Количество марганца в плазме крови у опухоленосителей после воздействия ОФР и ДР статистически значимо отличалось от опухоленосителей с введением ДР и от опухоленосителей с введением ОФР. По сравнению с опухоленосителями с введением ДР снижение количества марганца составило более 45%, а по сравнению с опухоленосителями с введением ОФР уровень марганца снизился на 31% (табл. 2). Необходимо отметить, что количество марганца после сочетанного введения ОФР и ДР практически не отличалось от такового у здоровых животных. Результат сочетанного действия ОФР и ДР положительно сказался на уровне марганца, который не отличался от такового у здоровых животных.

При анализе микроэлементного состава опухолевой ткани, только в группе с введением ОФР был выявлен алюминий (табл. 3). Данных об эссенциальной роли алюминия в организме человека и животных не обнаружено. Во всех исследуемых нами группах животных, кроме контрольной, был выявлен важный эссенциальный элемент хром (табл. 3). Имеются доказательства мутагенных и канцерогенных свойств хрома, связанных с подавлением стабильности синтеза ДНК и с активацией оксидативного повреждения ДНК (O'Brien, Kortenkamp, 1994; Stearnsetal., 1994; Sugiyama, 1994; Snow, 2003). О распределении хрома в организме сведений недостаточно, а информация о его распределении в опухоли отсутствует У животных-опухоленосителей контрольной группы, в группах с введением ОФР и введении ОФР и ДР в ткани опухоли был выявлен барий (табл. 3). Причём его уровень в группе с сочетанным введением ОФР и ДР статистически значимо уменьшился на 55%по сравнению с контрольной группой и статистически значимо уменьшился на 52% по сравнению с группой введения только ОФР. Данных о наличии у бария мутагенных или канцерогенных свойств в литературе не встречалось, тем не менее его накопление отмечается, когда в питании превалируют продукты, подвергнутые какой либо обработке (консервирование, сушка, лиофилизация). В группе с сочетанным введением ОФР и ДР обнаружено статистически значимое увеличение уровня кремния на 31% по сравнению с контрольной группой животных.

ТаблицаЗ

Содержание микроэлементов в опухоли при различных способах воздействия

Эле мен т (г/50 0мг тка ни) Контрольная группа (Me, 25%+75%) Опухоль с введением ДР (Ме, 25%+75%) Опухоль с введением ОФР (Ме, 25%+75%) Опухоль с введением ОФР и ДР (Ме,25%+75%) Р

Al 5.00Е-07 (4,54Е-07-5,81Е-07)

Ва 1.65Е-08 (1,43Е-08-*-2,18Е-08) 1.43Е-08 (1,31Е-08-Ч,54Е-08) 7.50Е-09 ДО (6,75Е-09+8,63Е-09) 0 - 0,02 Д- 0,033

Сг 5,40Е-08 (2,78Е-08+8,ОЗЕ-08) 6.75Е-08 (5,63Е-08^7,20Е-08) 4.65Е-08 (4,50Е-08-7,80Е-08)

Си 8.78Е-07 (7,70Е-07-Ч,02Е-06) 9.55Е-07 (8,75Е-07-ь1,09Е-06) 9,39Е-07 (8.17Е-07+1.00Е-06) 8.37Е-07 (7,68Е-07+9,97Е-07)

Fe 3.52Е-06 (2,58Е-0б+4,01Е-06) 3.60Е-06 (2,84Е-06^3,91Е-06) 2.82Е-06 (2,20Е-06^3,88Е-06) 2.86Е-06 (2^9Е-06+3,75Е-06)

Мп 2.40Е-08 (2,25Е-08-НЗ,60Е-08) 2.46Е-08 (2,10Е-08+2,91Е-08) 2.49Е-08 (1,94Е-08-ь2,70Е-08) 2.16Е-08 (1.64Е-08-2.69Е-08)

Ni 4.95Е-08 (4,95Е-08-Н>,53Е-08)

Si 1.42Е-05 (1,17Е-05+1,б2Е-05) 1.64Е-05 (1,43Е-05+1,97Е-05) 1,63Е-05 (1.47Е-05+1.72Е-05) 1.86Е-05 Д (1.71Е-05+1.99Е-05) д-0,012

Zn 1.24Е-06 (1,12Е-06+1,49Е-06) 1.24Е-06 (8.76Е-07-И.64Е-06) 1Д5Е-06 (1,09Е-06-=-1,50Е-06) 1,41Е-06 (1,15Е-06+1,5бЕ-06)

О - статистически значимые различия между группой с введением ОФР и группой с введением ОФР и ДР в опухолевой ткани(р<0,05)

Д - статистически значимые различия по сравнению с контрольной группой в опухолевой ткани(р<0,05)

В ткани печени у животных-опухоленосителей из контрольной группы содержание эссенциальных элементов Си, Бе, Мп было статистически значимо ниже, чем у интактных животных. Уровень меди статистически значимо (р=0,0022) снижался на 19%. Медь, как металл переменной валентности, способствует усилению ПОЛ, что проявляется развитием иммунодефицита и возрастанием частоты спонтанного опухолеобразования (MassieH.R_.etal., 1995). Уровень марганца у опухоленосителей контрольной группы снижался на 56% (р=0,00021) по сравнению с группой интактных животных. Марганец является одним из наиболее важных, жизненно необходимых микроэлементов. При снижении уровня

марганца снижается уровень важнейшего цитозольного антиоксидантного фермента - Мп-СОД, обеспечивающего инактивацию супероксид-аниона. Печень является одним из основным мест депонирования железа. В контрольной группе опухоленосителей уровень железа снижался на 67% (р=0,000018) по сравнению с интактными крысами. Железо - важнейший эссенциальный МЭ. Ионы Ре2+ являются индукторами ПОЛ (ВПтопёР., 1984). Имеются сообщения о роли железа в индукции разрывов ДНК, мутагенезе и канцерогенезе (Ме1аЫп Сагсто§епез1з, 1990).

Таблица 4

Содержание Сг, Си, 81, Ъп в сердце интактных крыс, опухоленосителей и

экспериментальных группах

Эл ем ент (Г/ 500 мк Г) Интактны е животные (Ме, 25%+75%) Контрольна я группа (Ме, 25%+75%) Опухолевое ители с введением ДР (Ме, 25%+75%) Опухоленос ители с введением ОФР (Ме, 25%+75%) Опухоленоси тели с введением ОФРиДР (Ме, 25%+75%) Р

Сг 5.40Е-08 {5,ЮВ-08+6,15Е-08) 6,83Е-08 (5,74Е-08+8,10Е-08) 9.00Е-08 *Д (7,73Е-08+1.09Е-07) 8.18Е-08 * (7,43Е-08+1,02Е-07) 7.50Е-08 * (6,71Е-08+8.21Е-08) *др- 0,001 ДЦР- 0,015 ♦ОФР- 0,015 *ОФР иДР- 0,015

Си 1.72Е-06 (1.55Е-06+2,09Е-06) 2.10Е-06 (1,58Е-06+2,69Е-06) 2,46Е-06 * (2,08Е-06+3.13Е-06) 2,43Е-06 * (1,85Е-0б+2,84Е-06) 2.50Е-06 * (1,98Е-06+2,91Е-06) *др- 0,0021 ♦ОФР- 0,015 *ОФР иДР- 0,0054

81 6.06Е-06 (4,83Е-06+1,21Е-05) . 1,43Е-05 (6,10Е-06+1.96Е-05) 2.01Е-05 * (1,29Е-05+3.15Е-05) 2,49Е-05* (1,32Е-05+3.52Е-05) 2,47Е-05 * (1,64Е-05+3.34Е-05) ♦ДР-0,016 ♦ОФР-0,024 *ОФР и ДР -0,0077

Ъа 5.98Е-06 (5,42Е-06+7,51Е-06) 7.28Е-06 (6,3 2Е-06+1,01Е-05) 8.52Е-06 * (7,09Е-06+1,06Е-05) 8.00Е-06 (6,13Е-06+9.94Е-06) 9.06Е-06 * (7,3 0Е-06+1.01Е-05) *ДР-0,002 *ОФР и ДР -0,0000 1

*- статистически значимые различия по сравнению с интактной группой(р<0,05) Д - статистически значимые различия по сравнению с опухоленосителями контрольной группы (р<0,05)

В гомогенате почечной ткани опухоленосителей контрольной группы имело место статистически значимое (р=0,00018) увеличение содержания меди по сравнению со здоровыми животными на 43%. Статистически значимое (р=0,022) повышение уровня цинка у животных-опухоленосителей контрольной группы на 10% по сравнению с интактной группой свидетельствует о разбалансировке гомеостаза цинка в организме на фоне развития злокачественного новообразования.

Исследование микроэлементного состава ткани сердца показало статистически значимые различия уровней хрома, меди, кремния, цинка (табл. 4). При развитие опухолевого процесса отмечалось увеличение количества хрома в сердце животных-опухоленосителей. Наибольшее количество хрома зарегистрировано у опухоленосителей с введением ДР, его содержание в сердце данной группы животных статистически значимо повышено на 67% по сравнению с интактной группой и на 32% по сравнению с опухоленосителями (табл. 4). В экспериментальных группах с различными способами воздействия на опухолевую ткань обнаружено статистически значимое повышение уровня меди по сравнению со здоровыми животными. При сочетанном введении ОФР и ДР повышение содержания меди составило 45% по сравнению с интактной группой, введение только лишь ОФР сопровождалось повышением содержания меди на 41%, а использование ДР как противоопухолевого агента увеличило содержание меди на 43% (табл.4).

Значительное повышение уровня кремния было отмечено во всех экспериментальных группах опухоленосителей (табл.4). В литературе имеются отдельные сообщения, свидетельствующие о нарушении обмена кремния при развитии злокачественных опухолей (Воронков и др., 1978). Содержание цинка, как и остальных микроэлементов увеличилось по сравнению с интактной группой. Статистически значимое повышение отмечено в группе с введением ДР - на 42% по сравнению с интактной группой, в группе с введением ОФР и ДР - на 52% по ставнению с интактной группой (табл. 4).

При анализе распределения микроэлементов в ткани лёгкого только у интактных животных был обнаружен никель, который относится к условно-эссенциальным элементам по жизненной необходимости и к иммунотоксическим по критерию иммуномодулирущего эффекта. Лёгкое — единственная ткань, которая накапливает никель с возрастом (Nielsen, 1987). В гомогенате лёгочной ткани животных-опухоленосителей контрольной группы наблюдалось статистически значимое увеличение по сравнению с интактной группой и Си на 36% (р=0,0014). Во всех исследуемых группах животных имело место статистически значимое накопление кремния. У животных-опухоленосителях с введением ОФР уровень железа статистически значимо (р=0,014) уменьшился на 34% по сравнению с интактной группой. Содержание железа в группе опухоленосителей с введением ОФР и ДР статистически значимо не отличалось от уровня интактных животных, однако обнаружено статистически значимое (р=0,0003) увеличение количество железа на 18% по сравнению с опухоленосителями с введением ОФР. Содержание железа в группе опухоленосителей с введением ОФР и ДР статистически значимо не отличалось от уровня интактных животных, однако обнаружено статистически

значимое (р=0,0003) увеличение количество железа на 18% по сравнению с опухоленосителями с введением ОФР .

В мозге крыс - опухоленосителей контрольной группы обнаружено статистически значимое накопление меди и цинка по сравнению с интактными животными, на 31% (р=0,0041) для меди и 23% (р=0,025) для цинка. Только в мозге интактных крыс был обнаружен никель. Имеются сведения, что в лёгких, поджелудочной железе, надпочечниках, мозге, зубах, костях, почках, сердце, аорте и коже наблюдается тенденция к обнаружению более высоких концентраций, в то время как в кишечнике, яичниках, крови и мышцах обнаружены небольшие количества (Sunderman, 1980). Как и в лёгочной ткани наблюдается накопление кремния. В группе животных-опухоленосителей с введением ОФР количество кремния статистически значимо (р=0,0017) увеличилось на 20%, а в группе опухоленосителей с сочетанным введением ОФР и ДР на 45% (р=0,009) по сравнению с интактной группой. Исследование содержания цинка показало статистически значимое накопление его у животных с введением только ОФР и группе с сочетанным введением ОФР и ДР по сравнению с интактной группой. Содержание меди в гомогенате мозга всех экспериментальных групп животных показало статистически значимое увеличение по сравнению с интактной группой. Наибольшее увеличение отмечено для опухоленосителей с введением ОФР и ДР, на 33% (р=0,0026) по сравнению со здоровыми животными

Исследование евободнорадикального окисления у интактных животных, крыс-опухоленосителей и экспериментальных группах

Одним из механизмов изменения уровней микроэлементов в тканях и в плазме крови может быть нарушение клеточных мембран под влиянием ПОЛ и выход из клеток микроэлементов. Кроме того, ряд микроэлементов могут участвовать в свободнорадикальном окислении как активаторы (металлы переменной валентности: Fe, Си, Zn) или участвовать в антиоксидантном ответе (церулоплазмин, СОД).

Рис. 1. Содержание диеновых коньюгатов и триеновых коньюгатов в плазме крови интактных животных и животных-опухоленосителей

* - статистически значимые различия по сравнению с контрольной группой животных (р<0,05)

0 - статистически значимые различия между опухоленосителями с введением ОФР иопухоленосителями с введением ОФР и ДР(р<0,05)

При исследовании продуктов ПОЛ в плазме крови интактных животных и плазме крови животных-опухоленосителей показано, что уровни первичных и конечных продуктов ПОЛ животных-опухоленосителей значимо не отличались от таковых у интактных животных (рис. 1). В экспериментальных группах по сравнению с контрольной отмечено статистически значимое повышение ДК (рис. 1). У животных-опухоленосителей с введением ОФР+ДР отмечено статистически значимое (р=0,0026) снижение количества ТК по сравнению с опухоленосителями с введением ОФР на 10% (рис. 1).

При расчёте корреляционных связей между показателями микроэлементов в плазме крови и показателями свободнорадикального окисления у животных опухоленосителей контрольной группы выявлена обратная корреляция между уровнем Ва и 1тах (Я= - 0,7819, р=0,0378), Ва и tg(-2a) (Я= -0,8546, р=0,0143). В литературе не встречается упоминаний о канцерогенных, мутагенных свойствах бария или его влияние на антиоксидантную систему организма. Обнаружена связь между уровнем Си и ОШ (11= - 0,6573, р=0,0202). Медь входит в состав церулоплазмина и СиДп-супероксиддисмутазы- белков, обеспечивающих защиту организма от свободно-радикальных продуктов ПОЛ. Дефицит меди вызывает усиление ПОЛ и повышение уровня ОШ. Отрицательная корреляционная зависимость выявлена между уровнем Мп и 1тах (П= -0,8729, р=0,0103), Мп и 2а) (11= - 0,9274, р=0,0026). Марганец входит в состав одной из изоформсупероксиддисмутазы-фермента, обеспечивающего инактивацию супероксид-аниона. Увеличение уровня марганца свидетельствует о снижении свободно-радикальных процессов в организме.

Печень является важнейшим органом детоксикации, обеспечивающим дезактивацию продуктов свободно-радикального окисления.

Ш Ингактные В Контроль ■ ДР В ОФР ЯОФР и ДР

а) б)

Рис. 2.Содержание диеновых коньюгатов и триеновых коньюгатов (а), оснований Шиффа (б) в печени интактных животных и животных-опухоленосителей

* - статистически значимые различия по сравнению с интактной группой животных (р<0,05)

При анализе первичных и конечных продуктов ПОЛ в гомогенате ткани печени у интактных животных и опухоленосителей была выявлена только

тенденция к накоплению конечных продуктов ПОЛ - оснований Шиффа, являющихся токсичными для организма.

Изменение уровней первичных продуктов ПОЛ, ДК и ТК в контрольной группе животных было статистически значимо по сравнению с интактными (рис. 2). В группе животных-опухоленосителей содержание ДК статистически значимо (р=0,0118) повышалось на 28%. Статистически значимо (р=0,033) увеличивался уровень ТК в печени животных контрольной группыс 0,078 ед. опт. плинтактных крыс, до 0,108 ед. опт. пл у животных-опухоленосителей. Содержание ТК у опухоленосителей с введением ОФР и ДР - 0,107 ед.опт.пл статистически значимо (р=0,02) увеличилось на 37% по сравнению с интактной группой. ДК и ТК, являясь первичными молекулярными продуктами, отражают раннюю стадию окисления и в последующем могут переходить в токсические продукты - ОШ.

Исследование индуцированной хемилюминесценции (рис. За) показало статистически значимое (р=0,028) снижение уровня параметра 1тах в гомогенате печени опухоленосителей по сравнению с интактной,с 1747 мВ до 1440 мВ (рис. За), что указывает на снижение активности ПОЛ. Помимо параметров Б и 1тах учитывался коэффициент 1тах/8, характеризующий степень антиоксидантной защиты (Конторщикова, 2000). Статистически значимое (р=0,0108)уменьшение на 12% индекса 1тах/8 в контрольной группе 0,184 (0,161-Ю,199) по сравнению с интактной группой 0,210 (0,199-Ю,217)(рис. 36) свидетельствовало о нарушении баланса про- и антиоксидантных систем в ткани печени.

Рис. 3. Показатели хемилюминограммы в гомогенате печени при различных воздействия. Показатель Б в масштабе 1:4. * - статистически значимые различия по сравнению с интактной группой животных (р<0,05) □ - статистически значимые различия между опухоленосителями с введением ДР и опухоленосителями с введением ОФР и ДР (р<0,05)

0 - статистически значимые различия между опухоленосителями с введением ОФР и опухоленосителями с введением ОФР и ДР (р<0,05)

Если в гомогенате ткани печени опухоленосителей при введении ОФР отмечено статистически значимое (р=0,02) увеличение параметра 8 на 14% по сравнению с контрольной группой, то при введении ОФР и ДР показатель Б снижался (р=0,0101) на 15% по сравнению с опухоленосителями после введения ОФР (рис. 3). У опухоленосителей с введением ДР статистически значимо (р=0,0014) на 10% по сравнению с интактной группой снизился показатель 1тах (рис. 3). У животных-опухоленосителей с введением ДР и ОФР статистически значимо по сравнению с интактной группой снизился коэффициент Ьпах/Б на 16% (р=0,001) и 15% (р=0,002), соответственно. На 13% (статистически значимо, р=0,013)увеличился коэффициент 1тах/5 в группе с введением ОФР и ДР по сравнению с опухоленосителями с введением ДР. Снижение Б и увеличение 1тах/8 в печени говорит о снижении процессов свободнорадикального окисления и увеличении антиоксидантной активности.

В гомогенате ткани почек животных-опухоленосителей имело место повышение уровня ДК на 14% по сравнению с интактной группой (рис. 4а). На 51% (р=0,025) увеличивалось содержание конечных, токсических продуктов ПОЛ-ОШ в контрольной группе по сравнению с интактной группой (рис.4б), что указывало на увеличение активности ПОЛ.

а) б)

Рис. 4.Содержание диеновых коньюгатов и триеновых коньюгатов (а), оснований Шиффа (б) в почках интактных животных и животных-опухоленосителей

* - статистически значимые различия по сравнению с интактной группой животных (р<0,05)

В группе животных-опухоленосителей с введением ОФР и ДР отмечено статистически значимое (р=0,01) накопление ДК по сравнению с интактной группой на 25% (рис. 4а). У крыс-опухоленосителй с введением ДР и ОФР отмечено статистически значимое повышение конечных продуктов липопероксидации - ОШ на 49% (р=0,02) и 73% (р=0,01), соответственно по сравнению с интактной группой (рис. 46). В группе с сочетанным введением ОФР и ДР отмечено увеличение уровня ОШ на 89% (р=0,023). Показано статистически значимое (р=0,02) увеличение коэффициента Ттах/Б - 0,195 у опухоленосителей с

сочеташшм введением ОФР и ДР на 15% по сравнению со здоровыми животными 0,188.

В ткани сердца животных-опухоленосителей отмечалось повышение уровня ДК на 17% по сравнению с интактной группой животных (р=0,021). У животных-опухоленосителей с введением ДР отмечено статистически значимое накопление ДК на 30% (р=0,004) и ТК на 37% (р=0,023) по сравнению с интактными животными. В группе с введением ОФР количество ДК статистически значимо (р=0,008) увеличились на18% по сравнению с интактными животными. В группе с введением ОФР и ДР количество ДК и ТК статистически значимо увеличилось на 17% (р=0,01) и 60% (р=0,0069) по сравнению с интактными животными. Противоположная картина наблюдалась с конечными продуктами ПОЛ-ОШ. В группах животных-опухоленосителей и опухоленосителей с введением ОФР количество ОШ статистически значимо снизилось на 38% (р=0,05) и 41% (р=0,01) по сравнению с группой здоровых животных. У животных-опухоленосителей с введением ОФР и ДР ОШ статистически значимо (р=0,0089) было больше, чем у опухоленосителей с введением ОФР на 136%. Исследование биохемилюминесценции не выявило статистически значимых различий в показателях между интактной группой и группой животных-опухоленосителей.

Содержание продуктов ПОЛ в мозге животных-опухоленосителей было выше, чем в интактной группе. Количество ДК статистически значимо (р=0,024) у животных-опухоленосителей превысило таковое значение у интактных животных на 13%. Измерение активности биохемилюминесценции не выявило отличий в отдельных группах.

При анализе ткани лёгкого достоверных изменений в параметрах про- и антиоксидантного баланса выявлено не было.

Анализ показателей хемилюминограмм гомогенатов ткани опухоли экспериментальных животных, (табл. 5), продемонстрировал статистически значимое повышение значений параметров 1тах (р=0,01) и Б (р=0,01), характеризующих интенсивность свободно-радикального окисления, и одновременно параметров tg(-2a) и коэффициента Ьпах/в, представляющих общую антиоксидантную активность. При этом показатели tg(-2a) и 1тах/8 гомогенатов ткани опухоли крыс с введением ОФР и ДР, занимали промежуточное положение между показателями у крыс с введением ДР и ОФР. Содержание ДК и ТК в гомогенате ткани опухоли (табл. 6) было статистически значимо более низкими у животных с введением ОФР (р=0,02) и ОФР и ДР (р=0,01) по сравнению с интактными животными. В то же время содержание конечных продуктов липопероксидации — ОШ, было статистически значимо выше только в опухолях животных с введением ОФР и ДР (р=0,0012). Статистически значимым (р=0,023) у животных этой группы по сравнению со всеми другими группами было увеличение коэффициента ОШ/ДК+ТК, который отражает направленность процесса липопероксидации в сторону преобладания в ткани опухоли жестких продуктов, которые разрушают клеточную мембрану и тем самым способствуют деструкции клеток опухоли.

Таблица 5

Показатели хемилюминограммы гомогената ткани опухоли экспериментальных животных (Х±т)

Группы животных Показатели хемилюминограммы Ішах/Б

Ішах, мВ 8, мВ 1ё(-2а)

Опухоленосители 1029,5±11,2 4951±31,5 403,6±12,4 0,207±0,012

Опухоленосители с введением ДР 1744±13,1* 5878±39,1* 838,3±10,9* 0,2967±0,019*

Опухоленосители с введением ОФР 1709±15,2* 7993±41,4* 696,7±9,8* 0,2314±0,021*

Опухоленосители с введением ОФР иДР 1589±13,2* 5864±36,6* 727,5±11,3* 0,2709±0,022*

* — различия статистически значимы по сравнению с контрольной группой животных (р<0,05)

Таблица 6

Содержание продуктов липопероксидации в гомогенате ткани опухоли экспериментальных животных (Х±т), отн. ед.

Группы животных Продукты липопероксидации ОШ/ДК+ТК

ДК ТК ОШ

Опухоленосители 0,098±0,005 0,081±0,001 1,34±0,12 7,44±0,81

Опухоленосители с введением ДР 0,100±0,006 0,098±0,003 1,52±0,2 0 7,67±0,63

Опухоленосители с введением ОФР 0,082±0,005* 0,067±0,002* 1,61±0,21 10,80±0,51*

Опухоленосители с введением ОФР и ДР 0,043±0,006* 0,074±0,003* 1,69±0,19* 14,40±0,72*

* — статистически значимые различия по сравнению с контрольной группой животных, (р<0,05)

Изучение морфологической структуры опухолевой ткани при различных способах воздействия на неё

Изучение микроэлементного состава и биохимических показателей важно было дополнить исследованием морфологической структуры опухолевой ткани, чтобы наглядно продемонстрировать изменения метаболизма опухоли при различных способах воздействия.

У животных-опухоленосителей контрольной группы опухоль имела солидную структуру. Проявления спонтанного патоморфоза были минимальны Изменения со стороны стромы и опухолевых клеток практически отсутствовали, носили спонтанный характер.

В опухолях животных с введением ДР патоморфоз характеризовался появлением мозаично расположенных, разного размера участков тотального некроза ткани новообразования. Частота встречаемости таких очагов была статистически достоверно выше, чем в опухолях животных, не подвергавшихся ни какому воздействию. При этом в сохраненных участках часть клеток находилась в состоянии необратимых форм дистрофий и ядерных повреждений. Количество подобных клеток было значимо выше, чем у опухоленосителей контрольной группы (табл.7). Строма была отечна.

В экспериментальной группе с введением ОФР, тотальный некроз был представлен в виде одного—двух фокусов, располагающихся на периферии опухоли. Площадь очагов некроза была статистически значимо меньше, чем в опухолях, подвергшихся воздействию ДР. В сохранившихся зонах количество клеток с необратимыми повреждениями также оказалось статистически значимо меньше, чем в предыдущей группе, и не отличалось от показателей в группе, не подвергавшейся противоопухолевому лечению.

Таблица 7

Морфологические изменения в опухолях лабораторных животных в зависимости _от вида воздействия_

Группы животных Морфологические изменения

Некрозы (%) Дистрофии (%) Митозы (%) Сохранные опухолевые клетки (%)

Опухоленосители 1,96±0,31 25,71±5,79 2,0±Ю,23 72,28±5,78

Опухоленосители с введением ДР 41,75±5,30" 44,80±2,87* 2,81±0,23* 34,43±5,58,'у

Опухоленосители с введением ОФР 8,46±3,68* 22,60±3,32* 2,47±0,27 69,0±4,24'

Опухоленосители с введением ОФР иДР 40,90±8,64*,у 49,0±8,18*'7 О^ЗАО,^'' 9,40±2,20*'у*

* - статистически значимые различия по сравнению с опухоленосителями с введением ДР(р<0,05)

• -статистически значимые различия по сравнению с интакгными животными (р<0,05)

V -статистически значимые различия по сравнению с опухоленосителями с введением ОФР(р<0,05)

Число клеток, находившихся в состоянии митоза, в данной группе не отличалось от их количества у опухоленосителей контрольной группы и опухоленосителей с введением ДР. Почти две трети опухолевых клеток не имели видимых повреждений (табл. 7).

У животных-опухоленосителей с введением ОФР и ДР было выявлено наличие мозаичных участков полной деструкции,общая площадь которых достоверно не отличалась от соответствующего показателя у животных с введением ДР и превосходила значения у опухоленосителей контрольной группы и опухоленосителей с введением ОФР. Имело место статистически значимое снижение числа митотически делящихся элементов и оставшихся жизнеспособными опухолевых клеток не только с опухоленосителями контрольной и опухоленосителями с введением ОФР, но и с опухоленосителями с введением ДР (табл. 7). Наблюдалась умеренно выраженная отечность стромы.Таким образом, сочетанное воздействие ОФР и ДР оказывало наиболее выраженное повреждающее воздействие на опухолевую ткань.

ВЫВОДЫ

1. Развитие неопластического процесса сопровождается изменением уровней микроэлементов в плазме крови и тканях (печень, почки, мозг, лёгкое, сердце) животных-опухоленосителей.

2. Цитостатик доксорубицин вызывает дальнейшее нарушение баланса микроэлементов в тканях, не повреждённых опухолью. Введение озонированного физиологического раствора сопровождалось незначительной коррекцией баланса микроэлементов. Сочетанное введение озонированного физиологического раствора и доксорубицина обеспечивает восстановление баланса микроэлементов в ткани печени, почек, и плазме крови.

3. У животных-опухоленосителей по сравнению со здоровыми животными имело место повышение уровня перекисного окисления липидов в плазме крови, печени, почках, мозге, лёгком, сердце. В плазме крови животных-опухоленосителей при сочетанном введении озонированного физиологического раствора и доксорубицина показано снижение показателей первичных и конечных продуктов перекисного окисления липидов по сравнению с опухоленосителями контрольной и опухоленосителями с введением доксорубицина.

4. Показано повышение общей антиоксидантной активности в гомогенате почек у опухоленосителей с введением озонированного физиологического раствора по сравнению с интактной группой. В печени опухоленосителей и опухоленосителей после введения доксорубицина имеет место снижение свободнорадикального окисления и антиоксидантной активности по сравнению с интактной группой животных. Сочетанное введение озонированного физиологического раствора и доксорубицина сопровождается увеличением антиоксидантной активности в печени по сравнению с раздельным воздействием озонированного физиологического раствора.

5. Согласно анализу морфологической структуры опухолевой ткани сочетанное введение озонированного физиологического раствора и доксорубицина оказывает наиболее выраженное повреждающее воздействие на опухолевую ткань.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Работы, опубликованные в ведущих рецензируемых научных журналах и в Изданиях, определенных ВАК

1. Алясова A.B. Влияние низких терапевтических концентраций озонированного фйзиологического раствора на терапевтический патоморфоз опухоли в эксперименте / Алясова A.B., Конторщикова К.Н., Терентьев И.Г., Иванова И.П., Кузнецов С.С., Сазанов А.И. // Современные технологии в медицине, 2010, №4, С. 27-32

2. Красникова О.В. Изменение параметров ИК спектров биологических тканей животных - опухоленосителей на фоне совместного введения доксорубицина и озона / Красникова О.В., Гордецов A.C., КонторщиковаКЛ., Крылов В.Н., Сазанов А.И. // Современные технологии в медицине, 2011, № 3, С. 83-87

3. Красникова О.В. Изменение параметров ИК спектров плазмы крови животных-опухоленосителей на фоне комплексного введения доксорубицина и озона / Красникова О.В., Гордецов A.C., Конторщикова КН., Крылов В.Н., Сазанов А.И. // Вестник Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского.-2011, № 5(1), С.105-109

Статьи, доклады, тезисы докладов региональных и международных конференций

1. Сазанов А.И. Оценка концентраций меди, цинка и железа в тканях животных-опухоленосителей на фоне введения озона и доксорубицина / Сазанов А.И., Конторщикова К.Н.. Пименов В.Г.// IX юбилейная научная сессия молодых учёных и студентов «Современное решение актуальных проблем в медицине», Нижний Новгород.-2010, С. 170-172

2. Сазанов А.И. Анализ концентраций меди, цинка и железа в тканях животных-опухоленосителей на фоне введения озона и доксорубицина / Конторщикова К.Н., Алясова A.B., Пименов В.Г., Евдокимов И.И. // Микроэлементы в медицине. Специальный выпуск. IV Международный симпозиум федерации европейских обществ по изучению макро- и микроэлементов « Макро- и микроэлементы в медицине и биологии» 9-12 июня 2010 г., Санкт-Петербург. Москва,- 2010,Том 11. Вып. 2., С. 54

3. Сазанов А.И. Исследование влияния озонированного физиологического раствора и доксорубицина на концентраии железа, меди и цинка в тканях животных-опухоленосителей / Конторщикова К.Н., Пименов В.Г. // 15-ая Нижегородская сессии молодых учёных. Нижний Новгород.- 2010, С. 23

4. Сазанов А.И. Влияние озонированного физиологического раствора и доксорубицина на концентрации железа, меди, цинка в тканях животных-опухоленосителей / Конторщикова К.Н., Пименов В.Г. // Ш Всероссийский конгресс с международным участием студентов и аспирантов-биологов «Симбиоз-Россия 2010», г. Нижний Новгород.-2010, С. 148-149

5. Конторщикова К.Н. Сравнительный анализ действия озона и доксорубицина на уровень микроэлементов в крови больных раком молочной железы и тканях животных-опухоленосителей / Конторщикова К.Н., Алясова А.В., Сазанов А.И., Пименов В .Г., Евдокимов И.И. // Материалы V украинско-русской научно-практической конференции ГУазиатско-европейской научно-практической конференции «Озон в биологии и медицине» 0десса.-2010, С. 17-18

6. Конторщикова К.Н. Изменение содержания некоторых микроэлементов у больных раком молочной железы и животных-опухоленосителей под влиянием химиотерапии и озонотерапии / Конторщикова К.Н., Алясова А.В., Сазанов А.И., Пименов В.Г. // Российский биотерапевтический журнал. 2010, № 2, том 9, С.63

7. Сазанов А.И. Анализ концентрации микроэлементов и продуктов перекисного окисления липидов в тканях животных-опухоленосителей на фоне введения озон и доксорубицина / Сазанов А.И., Конторщикова К.Н. // Медицинский альманах. Сборник материалов Х-ой научной сессии молодых учёных и студентов. Нижний Новгород,- 2011, С.135-136

8. Kontorshchikova C.N. Comparative analysis of the effect of small dozes of ozone and doxorubicin on the therapeutic pathomorphism of anexperimental tumor / C.N. Kontorshchikova, A.V. Alyasova, B.E. Shakhov, I.G. Terentiev, S.N. Tzybusov, S.N. Kuznetzov, A.I. Sazanov // 20th IOA World Congress - 6th IUVA World Congress: Ozone and UV Leading-edge science and technologies, Paris, 2011, P.V.I.6-1-9

9. Обухова Л.М. Морфологический анализ плазмы крови крыс при экспериментальном канцерогенезе и комбинированной терапии озоном и доксорубицином / Л.М. Обухова, А.В. Алясова, К.Н. Конторщикова, А.И. Сазанов, Т.Н. Горшкова, О.Н. Никифорова // Вестник физиотерапии и курортологии. Материалы VI Украинско-Русской научно-практической конференции V Азиатско-Европейской научно-практической конференции «Озон в биологии и медицине» Одесса, 2012, № 5, С.26-27

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ДК - диеновые конъюгаты ДР - доксорубицин МЭ - микроэлементы

ОФР - озонированный физиологический раствор

ОШ - основания Шиффа

ПОЛ - перекисное окисление липидов

СОД - супероксиддисмутаза

СРО - свободнорадикальное окисление

ТК - триеновые конъюгаты

Отпечатано о готового орипшала-макета в РИО НИУ РАНХиГС.

Лицензия ИД №04568 от 20 апреля 2001 г. Лицензия ПД №18-0140 от 8 октября 2001 г.

Подписано в печать 10.10.2012.

Формат 60x84/16. Печать офсетная. Бумага офсетная.

Уч.-изд. л. 1,0. Тираж 100 экз. Зак. 6569.

Нижегородский институт управления - филиал Российской академии народного хозяйства и государственной службы при Президенте Российской Федерации 603950, Нижний Новгород-292, пр. Гагарина, 46 тел./факс: (831)412-33-01

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Сазанов, Артем Иванович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1.Современные представления об микроэлементах.

1.1.1 Цинк.

1.1.2 Медь.

1.1.3 Железо.

1.1.4 Марганец.

1.1.5 Хром.

1.1.6 Кремний.

1.1.7 Молибден.

1.1.8 Кадмий.

1.1.9 Кобальт.

1.1.10 Никель.

1.1.11 Алюминий.

1.1.12 Барий.

1.1.13 Бор.

1.2 Роль некоторых микроэлементов при неопластическом процессе.

1.3. Окислительный стресс и перекисное окисление липидов при опухолевом процессе.

1.4. Биологические свойства озона и его влияние на биохимические процессы организма.

1.5. Использование озона в онкологии.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Материалы исследования.

2.2 Методы исследования.

2.2.1 Исследование микроэлементного состава тканей и органов.

2.2.2 Определение продуктов перекисного окисления липидов.

2.2.3 Исследование индуцированной хемилюминсценции.

2.2.4 Анализ морфологической структуры опухолевой ткани.

2.3 Методы статистического анализа результатов исследования.

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ.

3.1 Изменение показателей микроэлементов, продуктов перекисного окисления липидов, показателей биохемилюминисценции в тканях животных-опухоленосителей после перевивки опухоли по сравнению с интактными животными.

3.1.1. Уровень микроэлементов в плазме крови животных-опухоленосителей.

3.1.1.1 Содержание продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в плазме интактных животных и опухоленосителей.

3.1.2 Уровень микроэлементов в печени животных-опухоленосителей.

3.1.2.1 Содержание продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в печени интактных животных и опухоленосителей.

3.1.3 Уровень микроэлементов в почках животных-опухоленосителей.

3.1.3.1 Содержание продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в почках интактных животных и опухоленосителей.

3.1.4 Уровень микроэлементов в сердце животных-опухоленосителей.

3.1.4.1 Содержание продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в сердце интактных животных и опу холено сител ей.

3.1.5 Уровень микроэлементов в лёгком животных-опухоленосителей.

3.1.5.1 Содержание продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в лёгком интактных животных и опухоленосителей.

3.1.6 Уровень микроэлементов в мозге животных-опухоленосителей.

3.1.6.1 Содержание продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в мозге интактных животных и опухоленосителей.

3.2. Изменение показателей микроэлементов, продуктов перекисного окисления липидов, показателей биохемилюминисценции в плазме крови животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.2.1. Анализ показателей микроэлементов в плазме крови животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.2.2.Анализ продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в плазме крови животных-опухоленосителей и опытных групп.

3.3. Изменение показателей микроэлементов, продуктов перекисного окисления липидов, показателей биохемилюминесценции в печени животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.3.1. Анализ показателей микроэлементов в печени животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.3.2. Анализ продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в печени животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.4. Изменение показателей микроэлементов, продуктов перекисного окисления липидов, показателей биохемилюминесценции в гомогенате почек животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.4.1. Анализ показателей микроэлементов в гомогенате почек животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.4.2. Анализ продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в гомогенате почек животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.5. Изменение показателей микроэлементов, продуктов перекисного окисления липидов, показателей биохемилюминесценции в гомогенате сердца животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.5.1. Анализ показателей микроэлементов в гомогенате сердца животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.5.2. Анализ продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в гомогенате сердца животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.6. Изменение показателей микроэлементов, продуктов перекисного окисления липидов, показателей биохемилюминесценции в гомогенате лёгкого животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.6.1. Анализ показателей микроэлементов в гомогенате лёгкого животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.6.2. Анализ продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в гомогенате лёгкого животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.7. Изменение показателей \ микроэлементов, продуктов перекисного окисления липидов, показателей биохемилюминесценции в гомогенате мозга животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.7.1. Анализ показателей микроэлементов в гомогенате мозга животных-опухоленосителей и опытных группах.".

3.7.2. Анализ продуктов перекисного окисления липидов и показателей биохемилюминесценции в гомогенате мозга животных-опухоленосителей и опытных группах.

3.8. Изменение показателей микроэлементов, продуктов перекисного окисления липидов, показателей биохемилюминисценции а также изменения морфологической структуры в опухолевой ткани при различных способах воздействия.

3.8.1. Уровень микроэлементов в опухолевой ткани контрольной группы и различных способах воздействия.

3.8.2. Показатели биохемилюминесценции и перекисного окисления липидов при различных способах воздействия на опухолевую ткань.

3.8.3.Изменения морфологической структуры опухолевой ткани при различных способах воздействия на опухолевую ткань.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние озонированного физиологического раствора на микроэлементный состав тканей животных-опухоленосителей"

Положительный эффект использования озона при злокачественном росте доказан многочисленными исследованиями зарубежных и отечественных авторов (Sweet et al, 1980; Wolf, 1982; Arnan, DeVries, 1983; Sthulz, Wagner, 1997; Щербатюк, 1997; Гончарова, 1998; Конторщикова, Щербапок, 1999; Алясова, Конторщикова, Терентьев, 2000). Одним из методов озонотерапии является введение озонированного физиологического раствора (ОФР) (Перетягин, 1991; Конторщикова, 1992; Масленников и др., 2008). Как известно ОФР корректирует про- и антиоксидантный баланс организма, снижает активность антиоксидантной защиты опухолевой ткани и приводит к активации свободнорадикальных реакций. Всё это в сумме обуславливает нарушение метаболизма опухолевых клеток и в конечном итоге, их гибель.

Цель и задачи исследования Целью работы является исследование уровней микроэлементов при опухолевом росте и различных способах коррекции неопластического процесса.

Соответственно поставленной цели решались следующие задачи:

1. Исследовать в плазме крови, нормальных и опухолевых тканях животных-опухоленосителей содержание микроэлементов (Zn, Си, Мп, Mo, Со, Fe, Cd, Ni, Cr, Si, Al, Ba, B).

2. Провести сравнительный анализ содержания микроэлементов на фоне озонотерапии, доксорубицина, и при сочетанном применении озонированного физиологического раствора+доксорубицин.

Научная новизна

Впервые у животных-опухоленосителей проведён анализ микроэлементного состава в тканях в печени, почках, мозге, лёгком, сердце, опухоли и плазме крови.

• Оценена взаимосвязь микроэлементного состава, показателей перекисного окисления липидов, свободнорадикального окисления в гомогенате тканей животных-опухоленосителей.

Теоретическая и практическая значимость работы

Выявленные изменения микроэлементного состава нормальных и тканей животных-опухоленосителей на фоне различных воздействий могут иметь большое значение для раскрытия общебиологических механизмов развития опухолевого процесса.

Отмечено потенцирующее действие озонированного физиологического раствора в отношении противоопухолевого эффекта цитостатиков, одним из механизмов которого является изменение обмена микроэлементов в организме опухоленосителя. Изученный характер распределения 8 микроэлементов при опухолевом процессе позволит дополнить и усовершенствовать существующие способы лечения, что положительным образом скажется на показателях выздоровления и улучшит качество жизни больного.

Результаты исследования могут быть использованы специалистами в области онкологии и озонотерепии, а также в преподавании курсов по биохимии для студентов вузов биологического и медицинского профиля.

Положения, выносимые на защиту

3. Введение озонированного физиологического раствора при сочетании с доксорубицином обеспечивает сохранение баланса микроэлементов в различных тканях и снятие металлодепресивного действия доксорубицина, что обеспечивает эффективность противоопухолевого воздействия.

Апробация работы

Результаты работы представлены на IX юбилейной научной сессии молодых учёных и студентов «Современное решение актуальных проблем в медицине» (Нижний Новгород,2010), Международный симпозиум федерации европейских обществ по изучению макро- и микроэлементов « Макро- и микроэлементы в медицине и биологии» (Санкт-Петербург, 2010), 15 Нижегородской сессии молодых учёных (Нижний Новгород,2010), III Всероссийском конгрессе с международным участием студентов и аспирантов-биологов «Симбиоз-Россия 2010» (Нижний Новгород,2010), V украинско-русской научно-практической конференции IV азиатско-европейской научно-практической конференции «Озон в биологии 9 и медицине» (Одесса, 2010), Х-ой научной сессии молодых учёных и студентов (Нижний Новгород, 2011), IOAlUVAWorldCongress «OzoneandUV:Leading-edgescienceandtechnologies» (Paris, 2011).

Публикации

По материалам диссертации опубликованы 12 работ, в том числе 3 в изданиях, рекомендуемых ВАК Министерства образования и науки РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа в объеме 188 страниц состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов и их обсуждения, выводов и списка цитированной литературы. Диссертационная работа иллюстрирована 33 рисунками и 32 таблицами. Библиографический указатель включает 239 источников литературы (91 отечественных и 148 иностранных).

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Сазанов, Артем Иванович

выводы

Согласно анализу морфологической структуры опухолевой ткани сочетанное введение озонированного физиологического раствора и доксорубицина оказывает наиболее выраженное повреждающее воздействие на опухолевую ткань.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В ходе работы исследован широкий спектр микроэлементов и показателей свободнорадикального окисления и перекисного окисления липидов в плазме крови и 6 типах тканей при различных способах коррекции опухолевого процесса.

Выявлено нарушение баланса микроэлементов при развитии опухолевого процесса. Показано, что в разных органах уровень микроэлементов изменяется в различных направлениях. На фоне нарушения баланса микроэлементов при течении опухолевого процесса изменяются показатели перекисного окисления липидов и свободнорадикального окисления. Установлено увеличение уровня перекисного окисления липидов, свободнорадикального окисления и снижение антиоксидантной активности в организме опухоленосителя.

Введение противоопухолевого антибиотика - доксорубицина влечёт за собой дальнейшую разбалансировку микроэлементов, при том, что наблюдается тенденция к ещё большему увеличению уровня свободнорадикального окисления.

Использование озонированного физиологического раствора вносит незначительные коррективы в баланс микроэлементов. Уровень перекисного окисления липидов при введении озонированного физиологического раствора находится на высоком уровне и статистически значимо отличается от показателей здоровых животных.

Несомненно, важным и интересным представляется изучение совместного действия озонированного физиологического раствора и доксорубицина на организм опухоленосителя. Показано менее значительное изменение уровня микроэлементов по сравнению с воздействием только доксорубицина и озонированного физиологического раствора. По всей видимости, озон потенцирует противоопухолевую активность доксорубицина, при сохранении цитотоксического эффекта на опухолевые клетки.

Исследование морфологической структуры опухолевой ткани при различных способах воздействия показало, что сочетанное введение озонированного физиологического раствора и доксорубицина оказывает более губительное воздействие на опухолевые клетки по сравнению с моновоздействием доксорубицина и озонированного физиологического раствора.

Анализ перекисного окисления липидов в опухолевой ткани показал статистически значимое изменение коэффициента отражающего направленность процессов липопероксидации в сторону преобладания в ткани опухоли продуктов, которые разрушают клеточную мембрану и тем самым способствуют деструкции опухоли.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Сазанов, Артем Иванович, Нижний Новгород

1. Авцын А.П., Жаворонков A.A., Риш М.А., Строчкова Л.С. 1991. Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология. М.: Медицина. 496с

2. Агаджанян Н. А., Скальный А. В. Химические элементы в среде обитания и экологический портрет человека М.: изд-во КМК, 2001. - 83 с.

3. Алейников С.О., Чучалин А.Г. Респираторные эффекты озона // Пульмонология. 1997. - № 3. - С. 81-91.

4. Александров О.В., Стручков П.В., Зубкова A.B. и др. Озонотерапия в клинике внутренних болезней // Российский мед. ж. 2002. - № 3. - С. 47-50.

5. Александров A.B. Роль молекул адгезии и цитокинов в противоопухолевом иммунитете: Автореф. дис. к.м.н. -М., 1993. -24 с.

6. Алясова A.B., Конторщикова К.Н., Терентьев И.Г. и др. Озонотерапия в комплексном и комбинированном лечении злокачественных опухолей // Реаниматология и интенсивная терапия. Анестезиология. 2000. - № 4. -С.114-115.

7. Алясова A.B. К вопросу использования озонотерапии в комплексном лечении рака молочной железы // Мюцеве та парентеральне використання озонотерапп в медицин!: Зб1рник Наукових робгг. Харк1в,2001. - С.92 - 94.

8. Алясова A.B., Конторщикова К.Н. К вопросу озонотерапии рака молочной железы // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия. -2003. Приложение. - С. 190 - 191

9. Алясова A.B. Клинико-нейрофизиологическая и нейро-иммунологическая характеристика больных раком молочной железы: Автореф. Дис. докт. мед.наук. Иваново, 2004. - 43 с.

10. Алясова A.B., Конторщикова К.Н. Использование озонированного физиологического раствора в комплексном лечении больных раком молочной железы // Эфферентная терапия. 2004. - № 2. - С. 66-70.

11. Алясова A.B., Конторщикова К.Н., Шахов Б.Е.Озоновые технологии в лечении злокачественных опухолей. Н.Новгород: Издательство Нижегородской государственной медицинской академии. 2006.

12. Алясова A.B., Конторщикова К.Н., Цыбусов С.Н., Терентьев И.Г., Шахов Б.Е. Изменения содержания цинка, меди, железа у больных раком молочной железы под влиянием комплексного лечения и озонотерапии. //Микроэлементы в медицине. 2008. №1-2. - С.44-45,

13. Бабенко Г.А. Микроэлементозы человека: патогенез. Профилактика, лечение// Микроэлементы в медицине. 2001. - №2 (1). - С.2-5.

14. Беляев А.Н., Беляев С.А., Юдин A.A. и др. Влияние озона на функциональную активность печени и процессы свободнорадикального окисления при обтурационной желтухе// Revista Ozonoterapia. 2009. - №1.1. Vol. 3. P.76-81.

15. Бояринов Г.А., Горячев M.E., Бричкин Ю.Д. и др. Влияние озона на уровень эндотоксемии в постгипертермическом периоде у онкологических больных // Мюцеве та парентеральне використання озонотерапи в медицин!: Сб. научн. тр. Харьков, 2001. - С. 97-99

16. Бояринова JI.B. Коррекция метаболизма печени гутимином при озонированном искусственном кровообращении// Revista Ozonoterapia. -2009.-№1.-Vol. 3. P.12-14.

17. Бурмакова JI.M., Парсихенко В.Ю., Долгих В.В. Антиоксидантная и прооксидантная системы у больных с язвенной болезнью и опухолью желудка, леченных озоном // Московский мед. ж. 1998. - № 10. - С. 20.

18. Волчегорский И.А., Налимов А.Г., Яровинский Б.Г., Лифшиц Р.И. Сопоставление различных подходов к определению продуктов ПОЛ в гептан-изопропанольных экстрактах крови // Вопросы медицинской химии. 1989.- №1.- С. 127-131

19. Воронков М. Г., Зелчан Г. И., Лукевиц Э. Я. Кремний и жизнь. Биохимия, токсикология и фармакология соединений кремния. Изд. 2-е, перераб. и доп. Рига: Зинатне, 1978. 588 с.

20. Гельфонд Н.Е, Старкова Е.В., Шуваева О.В., Мичурин И.Е. Элементный состав опухолевой ткани сыворотки крови в условиях экспериментального канцерогенеза и его коррекции// Бюллетень СО РАМН. 2005.- №1.- С.28-32

21. Гончарова Т.А. Влияние озонированного физиологического раствора нафункциональное состояние печени крыс в норме и с Саркомой-45: Автореф. дисс. канд.биол.наук. Н.Новгород, 1998.-24 с.

22. Горячев М.Е., Бричкин Ю.Д., Скачков Н.В., Смирнова H.H. Корригирующее влияние озона на факторы клеточного иммунитета припроведении общей гипертермии у онкологических больных// Revista Ozonoterapia. 2009. - №1. - Vol. 3. - Р.94-95.

23. Гречканев Г.О., Палкина Е.Ю. Медицинский озон в лечении осложнений химиотерапии рака яичников // М1сцеве та парентеральне використання озонотерапи в медицин!: Сб. научн. тр. Харьков, 2001. - С. 94-97.

24. Гриневич Ю.А., Бендюг Г.Д. О механизме иммуномодулирующего действия капель Береша-плюс// Врач. дело. 1995. - № 5-6. - С.133-135.

25. Громова О. А. Школа по витаминам и микроэлементам. М., 2004. -59с.

26. Громова О. А. Нейрохимия макро- и микроэлементов. Новые подходы к фармакотерапии / О. А. Громова, А. В. Кудрин. М.: Алев-В., 2001. - 272 с.

27. Густов A.B., Котов С.А., Конторщикова К.Н., Потехина Ю.П. Озонотерапия в неврологии Н.Новгород: Литера, 1999. - 179 с.

28. Дубинина Е.Е. Продукты метаболизма кислорода в фундаментальной активности клеток. (Жизнь и смерть, созидание и разрушение). Физиологические и клинико-биохимические аспекты. СПб.: Изд-во Медицинская пресса. - 2006. - 400 с.

29. Жаворонков A.A., Кудрин A.B. Микроэлементы и естественная киллерная активность // Арх. патологии. 1996. - № 6. - С. 65-69.

30. Зайцев В .Я., Разумовский С. Д. Озониды олефинов как относительно новый и весьма перспективный класс биологически-активных соединений // Озон в биологии и медицине: Материалы I Укр.-русской научно-практ. конф. Одесса, 2003. - С. 9-11.

31. Захватов А.Н., Козлов С.А. Лещанов A.M. и др. Влияние внутрисуставного введения озона на процессы липопероксидации при травматическом повреждении коленного сустава в эксперименте// Revista

32. Ozonoterapia. 2009. - №. - Vol. 3. - P. 19-21.

33. Зенков H.K., Ланкин B.3., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты. М.: Наука. - 2001. - 343 с.

34. Зуев Б.М., Побединский Н.М., Джибладзе Т.А. Озонотерапия в гинекологии // Акушерство и гинекология. 1998. - № 3. - С.3-5.

35. Информационно-методическое письмо. О внесении изменений в МУК 4.1.985-00 "Определение содержания токсических элементов в пищевых продуктах и продовольственном сырье. Методика автоклавной пробоподготовки." Минздрав России, М., 2000.

36. Коноплёв В.П., Лагова Н.Д. Характеристика перевиваемого рака молочной железы крысы (РМК-1) // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины,-1960.-№7.-С.79-81.

37. Конторщикова К.Н., Алясова A.B., Ефременко Ю.Р., Окрут И.Е. Биологические механизмы эффективности озонотерапии. // Казанский медицинский журнал 2007 - №4. Приложение. - С.3-4.

38. Конторщикова К.Н. Перекисное окисление липидов в норме и патологии: Учебное пособие. Н. Новгород. - 2000. - 24 с.

39. Конторщикова К.Н. Озонотерапия: Биологические механизмы эффективности// Экспериментальная и клиническая дерматокосметология. -2004, №3,-С. 23-21.

40. Конторщикова К.Н. Перекисное окисление липидов при коррекции гипоксических нарушений физико-химическими факторами: Автореф. .докт. биол. наук. Н.Новгород. - 1992. -40 с.

41. Конторщнкова К.Н., Щербатюк Т.Г. Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте. Патент РФ № 213.7481 от 20.09.99.

42. Конторщнкова Е.Ю. Патогенетическое обоснование применения озонотерапии в послеоперационном периоде у онкологических больных: Автореф.: дисс. канд.мед.наук Н.Новгород. - 2005. - 24 с.

43. Конторщнкова К.Н., Перетягин С.П. Закономерности формирования адаптационных механизмов организмов млекопитающих при системном воздействии низкими дозами озона. Диплом открытия №309, № А-387 от 9 февраля 2006 г.

44. Корман Д.Б. «Основы противоопухолевой химиотерапии» //М., «Практическая медицина», 2006, С.503.

45. Котов С.А. Клинико-нейрофизиологическое обоснование озонотерапии заболеваний нервной системы: Автореф. . докт.мед.наук. -Н.Новгород, 2000. 43 с.

46. Кудрин A.B., Громова O.A. Микроэлементы в иммунологии и онкологии.-М: ГЭОТАР-Медиа, 2007.-544 с.

47. Кудрин A.B., Скальный A.B., Жаворонков A.A., Скальная М.Г., Громова O.A. 2000. Иммунофармакология микроэлементов. М.: изд-во КМК. 537 с.

48. Кудрин A.B. Микроэлементы и кальций в регуляции апоптоза // УСБ. -1998.-№5.-С. 17-21.

49. Кудрявцев В.А., Косых A.A., Козвонин В.А. Влияние озона на системные процессы патологически измененной печени// Revista Ozonoterapia. 2009. - №1. - Vol. 3. - Р.34-37.

50. Кузьмина Е.И., Нелюбин A.C., Щенникова М.К. Применение индуцированной XJI для оценок свободно-радикальных реакций вбиологических субстратах // Биохимия и биофизика микробиологов. 1983. -С. 41-48.

51. Лебедь С.Л., Бояринов Г.А., Грибков A.B., Лебедь В.Г. Аспекты применения озонированного физиологического раствора в нейрореаниматологии// Revista Ozonoterapia. 2009. - №1. - Vol. 3. - РЛ27— 130.

52. Ли В.А., Разиков Р.К., Ташмухамедов Р.И. и др. Иммунологические свойства металлокомплексов сополимеров винилпирролидона с аминокислотными остатками в боковой цепи // Иммунология. 1997. - № 1. -С. 35-37.

53. Маматкулов У.А. Иммунофармакологическая характеристика полимерных металлокомплексов железа, кобальта и меди: Автореф. дис. . к.м.н. Ташкент, 1988. - 16 с.

54. Масленников О.В., Конторщикова К.Н., Грибкова И.А. Руководство по озонотерапии. Н. Новгород: Изд-во «Вектор-ТиС». - 2008. - 326 с.

55. Махров В.И. Применение озона в лечении острого тромбоза вен нижних конечностей// Revista Ozonoterapia. 2009. - №1. - Vol. 3. - P.140-142.

56. Микашинович З.Н., Шепотиновский В.Н. Внутриклеточные механизмы лечебного действия озона при острой кровопотере // Озон в биологии и медицине Тезисы докладов II Всероссийской научно-практической конференции. Н. Новгород. 1992. - С. 5-6

57. Нейфах Е.А. К механизму окисления ненасыщенных жирных кислот раковыми и нормальными тканями // Тр. VII Международный противораковый конгресс.-1963.

58. Морщакова Е.Ф., Павлов А.Д. Регуляция гомеостаза железа // Гематология и трансфузиология 2003. - № 1. - С. 36-39.

59. Нурягдаев С.К. О содержании микроэлементов у больных раком// Здравоохранение Туркменистана. 1972. - №3. - С.22-27.

60. Оберлис Д., Харланд Б., Скальный А. Биологическая роль макро- и микроэлементов у человека и животных/ под ред. A.B. Скального. С.-Пб.: Наука, 2008. - 544 с.

61. Одинаева Н.Д., Яцык Г.В., Скальный A.B. 2002. Макро- и микроэлементы: анализ волос недоношенных новорождённых // Микроэлементы в медицине. 3(1):63-66.

62. Окрут И.Е. Влияние озонированного физиологического раствора на показатели системы гемостаза: Автореф. дис. к.б.н. Н.Новгород, 2000.

63. Перетягин С.П. Патофизиологическое обоснование озонотерапии постгеморрагического периода: Автореф. дис. . докт.мед.наук. -Казань, 1991.-45 с.

64. Пескин A.B. Взаимодействие активного кислорода с ДНК // Биохимия. 1997.-Т. 62.-Вып. 12-С. 1571 - 1578.

65. Плетюшкина О.Ю., Фетисова Е.К., Лямзаев К.Г. и др. Пероксидводорода, образуемый внутри митохондрий, участвует в передаче159апоптозного сигнала от клетки к клетке // Биохимия. 2006. - Т. 71. - Вып. 1. -С. 75 -84.

66. Потанин В.П. Современные технологии в программе регуляции геморрагических нарушений в оперативном лечении рака легкого и пищевода: Автореф. дис. . докт.мед.наук. М., 1998. - 19 с.

67. Разумовский С.Д., Зайков Г.Е. Озон и его реакции с органическими соединениями. М.: Наука. - 1974. - 322 с

68. Розанова Н.Б. Особенности обмена микроэлементов у больных с опухолями пищевода и желудка при проведении искусственного питания: Автореф. дисс. д.м.н. -М., 1991.-28 с.

69. Скальный A.B. Микроэлементозы человека (диагностика и лечение): Практическое руководство для врачей и студентов медицинских вузов. М., 1997.-71 с.

70. Скальный A.B. Цинк и здоровье человека. Оренбург: РИК ГОУ ОГУ, 2003.- 80 с.

71. Скальный A.B., Кудрин A.B. Радиация, микроэлементы, антиоксиданты и иммунитет (микроэлементы и антиоксиданты в восстановлении здоровья ликвидаторов аварии на ЧАЭС). М.: 2000. - С. 100-133.

72. Скальный A.B., Яцык Г.В., Одинаева Н.Д. 2002. Микроэлементозы у детей. М.

73. Скальный A.B., Рудаков И.А. Биоэлементы в медицине.- М: Издательский дом «ОНИКС 21 век»: Мир, 2004. 272 с.

74. Скальная М.Г., Нотова C.B. 2004. Макро- и микроэлементы в питании современного человека: эколого-физиологические и социальные аспекты. М.: РОСМЭМ.

75. Скулачев В.П. Старение организма особая биологическая функция, а не результат поломки сложной живой системы: биохимическое обоснование гипотезы Вейсмана // Биохимия. - 1997. - Т. 62. - Вып. 11. - С. 1394 - 1399.

76. Соловьева А.Г., Зимин Ю.В., Перетягин С.П. и др. Ферментативная активность печени крыс на фоне субхронического воздействия различных доз озона// Revista Ozonoterapia. 2009. - №1. - Vol. 3. - Р.62-64.

77. Сорока В.Р., Баранченко В.А., Крюков Н.В. Оценка изменения содержания марганца, железа и меди в очагах дисгормональных дисплазий и злокачественных опухолей молочной железы: Депонированная рукопись. -Донецк, 1989.

78. Тутельян В. А., Спиричев В.Б., Суханов Б.П., Кудашева В. А. микронутриенты в питании здорового и больного человека. М: Колос, 2002.

79. Фирсов О.В. Озонотерапия в лечении больных, оперированных по поводу рака мочевого пузыря: Автореф. дис. . к.м.н. Воронеж. - 1997. - 18 с.

80. Шаронов Б.П., Чурилова И.В Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах. // Докл. АН СССР. 1990. Т.314. С.1500.

81. Шахов Б.Е., Алясова A.B., Терентьев И.Г., и др. Онкология: руководство для врачей.Т.1.Общая онкология -Н.Новгород: Издательство Нижегородской государственной медицинской академии,2010.-480 с.

82. Шахов A.B., Терентьева А.Б. Применение озонотерапии у больных, перенесших операции по поводу рака гортани // Озон в медицине: II Всероссийская научно-практ. конференция с междунар. участием: Тез. докл. -Н.Новгород, 1995.-С.44.

83. Щербатюк Т.Г., Иванова И.П., Потехина Ю.П. и др. Комбинированное использование озона и гамма-излучения в условиях экспериментального онкогенеза // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: Материалы

84. Всероссийской научио-практ. конференции. Н.Новгород, 2000. - С. 1314.

85. Щербатюк Т.Г. Влияние озонированного физиологического раствора на про- и антиоксидантную систему опухолевых животных: Автореф. дис. к.б.н. Н.Новгород, 1997.

86. Эммануэль Н.М., Липчина Л.П. // Докл. АНСССР. 1958. - №1. - С. 141 - 144.

87. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М.: Медицина, 1999. - 608 с.

88. Aiba S. Incidence of sideropenia and effects of iron repletion treatment in women with subclinical hypothyroidism // Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. -1999. -vol. 107. -№ 6. P. 356-360.

89. Anderson R.A. 1987. Cromium// Mertz W. (ed) Trace Elements in Human and Animal Nitrition, Vol. P.225-244. New York: Academic Press.

90. Anderson R.A., Polansky M.M. 1981. Dietary chromium deficiency: Effect on sperm count and fertility in rats // Biol. Trace Element Res. 3(l):l-5.

91. Arnan M., DeVries L.E. Effect of ozone/oxygen gas mixture directly injected into the mammary carcinoma of the female C3H/HEJ mice// Medical applications of ozone. 1983. - P/101-107.

92. Baltin H. Ozonotherapy in Oncologi // Proceedings of the 12th World Congress of International Ozone Association. Lille, France. - 1995. - Vol. 3. - P. 71.

93. Basu-Modak S., Tyrrell R.M. Synglet oxygen: A primary effector in the ultraviolet A/near-visible light induction of the human heme oxygenase gene // Cancer Res. 1993.-Vol. 53.-P. 4505 -4510.

94. Baykan M., Celik U., Orem A. Iron status and its relationship with lipid peroxidation in patients with acute myocardial infarction // Acta Cardiol. 2001. -Vol. 56.-P. 277-281.

95. Beevi S.S., Rasheed M.H., Geetha A. Evidence of oxidative stress in patients with cervical squamous cell carcinoma // Clinica Chimica Acta. 2007. -Vol. 375.-P. 119-123.

96. Biasi F., Tessitore L., Zanetti D. et. al. Associated changes of lipid peroxidation and transforming growth factor beta 1 levels in human colon cancer during tumor progression // Gut. 2002. - Vol. 50. - P. 361 - 367.

97. Brown J. M., Pfau J. C., Holian A. Immunoglobulin and lymphocyte responses following silica exposure in New Zealand mixed mice// Inhal. Toxicol. -2004. Vol.16, №3. - P. 133 - 139.

98. Bocci V., Luzzu E., Corradeschi F., Paulesu I. Studies on the biological effects of ozone: evaluation of immunological parameters and tolerability in normal voluteers receiving ambulatory autohaemotherapy // Biotherapy. 1994. -Vol. 7. - P. 83-90.

99. Bocci V., Paulesu L. Studies on the biological effects of ozone: 1. Inductions of interferon gamma on human leucocytes // Haematologica. 1990. - Vol. 75. -P. 510-515.

100. Benes B., Sladka J., Spevackova V. Determination of normal concentration levels of Cd, Cr, Cu, Hg, Pb, Se and Zn in hair of the child population in the Czech Republic. // Centr. Eur. J. Public Health. 2003. - Vol. 11, №4. - P. 184 - 186.

101. Bucci I. Impact of trace elements and vitamin supplementation on immunityand infections in institutionalized elderly patients: a randomized controlled trial //

102. Arch. Intern. Med. 1999. - vol. 159. - № 7. - P. 748-754.163

103. Burgerstein L., Zimmermann M., Schurgast H, Burgerstein U.P. Burgersteins Hand-buch Naehrstoffe. 10 Auflage. Stuttgart: Karl F. Haug Verlag, 2002.

104. Campbell J. D. Lifestyle, minerals and health // Med. Hypotheses. 2001. -Vol. 57, №5.-P. 521 -531.

105. Carlisle E.M. 1972. Silicon: An essential element for the chick // Science 178(4061):619-621.

106. Carlisle E.M. 1974. Silicon as an essential element // Fed. Proc. 33(6):1758-1766.

107. Carlisle E.M. 1986. Silicon // Mertz W. (ed) Trace Elements in Human and Animal Nutrition, 5th Ed., Vol.2.P.373-390. New York: Academic Press.

108. Chappuis P., Aral B., Ceballos-Picot I.Copper related diseases//Metal Ions in Biology and Medicine/ Eds Ph. Collery et al. Paris: John Libbey Eurotex, 1998.-Vol.5.-P.729-736.

109. Christen Y. 2000. Oxidative stress and Alzheimer disease // Am. J. Clin. Nutr. 71:621S-629S.

110. Cotzias G.C. 1958. Manganese in healt and disease// Physiol. Rev. 38(3):503-532.

111. Dalle-Donne I., Scaloni A., Giustarini D. Et al. Proteins as biomarkers of oxidative stress in diseases: the contribution of redox proteomics // Mass. Spectrom. Rev. 2005. - Vol. 24. - P. 55 - 99.

112. Das U. A radical approach to cancer // Med. Sei. Monit. 2002. - Vol. 8. -P. RA79 - 92.

113. Davis C.M., Sumrall K.H., Vincent J.B. 1996. A biologically active form of chromium may activate a membrane phosphotyrosine phosphatase (PTP)// Biochem. 35:12963-12969.

114. Davis C.M., Vincent J.B. 1997. Chromium oligopeptide activates insulin receptor tyrosine kinase activity// Biochem. 36:4382-4385.

115. Dawid I.B., Toyama R., Taira M. LIM domain proteins // C-R. Acad. Sci. -1995.-vol. 318.-№3.-P. 295-306.

116. De Silva J.J.R.F., Williams J.J.P. The biological chemistry of the elements, 2nd Ed. Oxford: Oxford University Press, 2001.

117. Djavaheri-Mergny M., Mergny J.L., Bertrand F. et al. Ultraviolet-A induces activation of AP-1 in cultured human keratinocytes // FEBS lett. 1996. - Vol. 384.-P. 92-96.

118. Elmes M.E., Shkla V.K., Jerler B. et al. Metallothionein immunoreactivity as a prognostic marker in human malignant melanoma// Trace Elements in Man and Animals-TEMA-8/Eds M.Anke et al. Dresden, 1993. - P.759-762.

119. Emerick R.J., Kayongo-Male H. 1990. Interactive effects of dietary silicon, copper, and zinc in the rat // J.Nutr. Biochem. l(l):35-40.

120. Esterbauer H., Schaur R.J., Zollner H. Chemistry and biochemistry of 4-hydroxynonenal, malonaldehyde and related aldehydes // Free Rad. Biol. And Med. 1991.-Vol. 11.-P.81 - 128.

121. Failla M. Trace Elements and Host Defense: Recent Advances and Continuing Challenges // J. Nutr. 2003. - Vol. 133. - P. 1443S - 1447S.

122. Fahmy Z. The application of ozone therapyi: Rheumatology // Proc. of the 8-th Ozone World Congress. 1987. - P. 60.

123. Favier A. Is zinc a cellular mediator in the regulation of apoptosis? // Ibid. -1998. P.164-167.

124. Fraker P. J., King L. E. A distinct role for apoptosis in the changes in lymphopoiesis and myelopoiesis created by deficiencies of zinc// FASEB J. -2001.-Vol. 15.-P. 2572-2578.

125. Fuxiong L. Reactive Oxygen species in cancer, too much or too little // Med. Hypothesis. 2007. - Vol. 69. - P. 1293 - 1298.

126. Garot P.O. Metabolism and possible health effects of aluminum // Environ. Health Perspect.-1986.-Vol.65.-P.363-441.

127. Gehring L., Leonhardt P., Bigl H. et al. Serum trace elements in lung cancer // Metall Ions in Biology and Medicine / Eds Ph. Collery, P.Bratter et al. Paris: John Libbey Eurotext, 1998. - Vol. 5. - P. 583-587.

128. Ghesters J.K. Trace element-gene interactions// Nutr. Rev. 1992. -Vol. 50.-№ 8.-P. 217-223.

129. Gillisen A., Jaworska M., Wickenburg D. et al. Superoxide dismutase, glutathione and catalase lexels in bronchoepithelial cells after exposure to crocidolite, silica, basaltwool and rockwool in vitro // Eur. Respir. J.-1995.-Vol.25.-P.l-9.

130. Gomer C.J., Ferrario A., Rucker N. et al. Glucose regulated protein induction and cellular resistance to oxidative stress mediated by porphyrin photosensitization // Cancer Res. 1991. - Vol. 51. - P. 6574 - 6579.

131. Greenberg S.S., Xie J., Zatarain J.M. et al. Hydroxocobal-amin (vitamin Bi2) prevents and reverses endotoxin-induced hypotension and mortality in rodents: role of nitric oxide //J.Pharmacol. Exp. Ther.-1995.-Vol.273.-P.257-265.

132. Gunton J.E., Hams G., Hitchman R., McElduff A. 2001. Serum chromium does not predict glucose tolerance in late pregnancy // Am. J. Clin. Nutr. 73:99104.

133. Hall I.H., Chen S.Y., Rajendran K.G. et al. Hypolipidemic, anti-obesity,anti-inflammatory, anti-osteoporotic, and anti-neoplastic properties of amine carboxyboranes // Environ. Health Perspect.- 1994.- Vol.102, suppl.3.-P.21-30.

134. Hambidge K.M., Casey C.E., Krebs N.F. Zinc// Mertz W. (ed)/ Trace Elements in Man and Animals, 5th Ed. New York: Academic Press, 1986. - Vol. 2.-P. 1-137.

135. Hambidge K.M., Franklin M.L., Jacobs M.A. 1972. Changes in hair chromium with increasing distances from hair roots// Am.J.Clin. Nutr. 25(4):380-383.

136. Hamilton E.I., Minski M.J., Cleary J.J. 1972/1973. The concentration and distribution of some stable elements in healthy human tissues from the United Kingdom // Sci. Total Environ. 1:341-374.

137. Haraguchi H. Metallomics as integrated biometal science//Journal of Analytical Atomic Spectrometry. 2004. ~ Vol. 19. - P. 5-14.

138. Hansen S.H., Sandvig K., van Deurs B. 1993. Molecules internalized by clathrin-independent endocytosis are delivered to endosomes containing transferrin receptors //J. Cell Biol. Vol.123. № 1. P.89-97.

139. Hay R.W. 1985. Bio-inorganic Chemistry. Chichester: Ellis Horword Ltd.

140. Hazell T. 1985. Minerals in foods: Dietary sources, cheminical forms, interactions, bioavailability// Wld. Rev. Nutr. Diet. 46:42-45.

141. Herting B., Meixensberger J., Roggendorf W., Reichmann H. Metabolic patterns in meningiomas // J. Neurooncol. 2003. - Vol. 65 - P. 119 - 123.

142. Ho L.H. Involvement of intracellular labile zinc in suppression of DEVD-caspase activity in human neuroblastoma cells// Biochem. Biophys. Res. Commun.167-2000. Vol.268. -№1. - P. 148-154.

143. Horovitz C.T. 1990. Why are most trace elements cosidered as non-essential for life? // Trace Elements in Man and Animals.-TEMA-7. Abstr. Zagreb. P.37.

144. Horovitz C.T. Could scandium and yttrium be required for life // Trace Elements in Man and Animals TEMA-8 / End. M.Anke, D.Meissner, C.F.Mills. - Dresden, 1993. - P. 747-749.

145. Hosea H.J., Rector E. S., Taylor C.G. Zinc-deficient rats have fewer recent thymic emigrant (CD90+) T lymphocytes in spleen andblood// J. Nutr. 2003. -Vol. 133. - № 12. - P. 4239^242.

146. Hoshino T., Misaki M. In vitro cytotoxicities and in vivo distribution of transferrin platinum (II) complex // J.Pharm. Sei. - 1995. - Vol. 84. - № 2. - P. 216-221.

147. Huang S., Cidlowski J. Glucocorticoids inhibit serum depletion induced apoptosis in T-lymphocytes expressing Bcl-2// FASEB J. 1999. -Vol. 13. - P. 467-476.

148. Hull C.D. The biochemical effects of physiologic amounts of dietary boron in animal nutrition models // Environ. Health Perspect.-1994.-Vol. 102, suppl. 7.-P.35-43.

149. Johnson J.L., Hainline B.E., Rajagopalan K.V.1980. Characterization of the molybdenum cofactor of sulfite oxidase, xanthine oxidase, and nitrate reductase // J.Biol.Chem. 255(5):1783-1786.

150. Jugdaohsingh R., Anderon S.H.C., Tucker K.L., Elliott H., Kiel D.P., Thompson R.P.H., Powell J.J. 2002. Dietary silicon intake and absorption // Am.J. Clin. Nutr. 75(5):887-893.

151. Karlic H., Kucera H., Metka M. et al. Ozone and ionisi sierender Strahlung in vivo - modeleine pilostudie an vier gynäkologischen tumorenl // Strahlenther und Oncol. - 1987. - Vol. 163. - P. 37^2.

152. Keele B.B., McCord J.M., Fridovich I. 1970. Superoxide dismutase from Escherichia coli // J.Biol.Chem.245(22):6176-6181.

153. Kick G., Messer G., Goetz A. et al. Photodynamic therapy induces expression of interleukin-6 by activation of AP-1 but not NF-kB binding // Cancer Res. 1995. - Vol. 55. - P. 2373 - 2379.

154. Kidd M.T., Qureshi M.A., Dietali zinc-methionine enhances mononuclear-phagocytic function in young turkeys. Zinc-methionine, immunity, and Salmonella//Biol.Trace Elem. Res.-1994.-Vol.42.-P.217-229.

155. Kirchgessner M. Underwood memorial lecture. Homeostasis and homeorhesis in trace element metabolism // Trace Elements in Man and Animals -TEMA-8 / Eds M. Anke et al.-Dresden, 1993.-P.4-21

156. Khuri F.R. Lung cancer chemoprevention // Semin. Surg. Oncol. 2000. -Vol. 18. -№ 2. - P. 100-105.

157. Klaunig J.E., Kamendulis L.M. The role of oxidative stress in carcinogenesis // Rev. Pharmacol. Toxicol. 2004. - Vol. 44. - P. 239 - 267.

158. Klotz L.O., Briviba K., Sies H. Singlet oxygen mediates the activation of JNK by UVA radiation in human skin fibroblasts // FEBS Lett. 1997. - Vol. 408. -P. 289-291.

159. Kong X.R. 1982. Metabolism and physiological significance of molybdenum // Kong X.R., An Hui (eds) Nutrition, Physioligy, and Clinical Significance of Essential Trace Elements. China: Academic Press.

160. Kuramoto K. ZK7, a novel zinc finger gene, is induced by vascular endothelial growth factor and inhibits apoptotic death in hematopoetic cells // Cancer Res. 2000. - Vol. 60. - № 2. - P. 425^30.

161. Lang K.J., Nielsen B.D., Waite K.L.,Hill G.M., Orth M.W. 2001. Supplemental silicon increases plasma and milk silicon concentrations in horses // J.Anim. Sci. 79(10):2627-2633.

162. Lash A., Saleem A. Iron metabolism and its regulation // Ann. Clin. Lab. Sci. 1995. - Vol. 25. - № 1. - P. 20-30.

163. Lazo J.S., Pitt B.R. Metallothioneins and cell death by anticancer druys // Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1995. - Vol. 35. - P. 635-653.

164. Leimkuhler S., Rajagopalan K.V. 2001. In vitro incorporaton of nascent molybdenum cofactor into human sulfite oxidase // J. Biol. Chem. 276(3): 18371844.

165. March E.W., Leopold P.L., Jones N.L., Maxfield F.R. 1995. Oligomerized transferrin receptors are selectively retained by a lumenal sorting signal in a long-lived endocytic recycling compartments // J. Cell. Biol. Vol.129. No.6. P. 15091522.

166. Marcilese N.A., Ammerman C.B., Valsecchi R.M., Dunavant B.G., Davis G.K. 1969. Effect of dietary molybdenum and sulfate upon copper metabolism in sheep // J.Nutr. 99(1);177-183.

167. Maret W., Jacob C.,Vallee B.L., Fischer E.H. Inhibitory sites in enzymes: zinc removal and reactivation by thionein// proc. Natl. Acad. Soc. 1999. Vol. 96. - №3. - P. 1936-1940.

168. Massie H.R. Effect of dietary boron on the aging process // Environ. Health Perspect.-1994.-Vol. 102, suppl.7.-P.45-48.

169. Mates J .M., Perez-Gomez, Nunez de Castro. Antioxidant enzymes and human disease // Clin. Biochem. J. 1999. - Vol. 35. - P. 595 - 603.

170. McGregor S.J., Naves M.L., Oria R. 1990. Effect of aluminium on iron uptake and transferrin-receptor expression by human erythroleuk emia K562 cells //Biochem. J. Vol.272. No.2. P.377-382.

171. McCoy K.L., Gainey D., Inman J.K., Stutzman R. 1993. Antigen presentation by B lymphoma cells. Requirements for processing of exogenous antigen internalized through transferrin receptors // Immunol. Vol.151. № 9. P.4583-4594.

172. McLachlan D.R.C., Lukiw W.J., Mizzen C.A., Rruck T.P.A. Aluminum in Alzheimer disease: nuclear actions // Trace Elements in Man and Animals -TEMA-7: Abstr.-Zagreb, 1990.-P.42.

173. Mills C.F., Davis G.K. 1987. Molybdenum // Mertz W. (ed) Trace Elements in Human and Animal Nutrition, 5th Ed., Vol.1. P.429-463. New York: Academic Press.

174. Mocchegiani E., Santarelli L., Muzzioli M., Fabris N. Reversibility of the thymic involution and of age related peripheral immune disfunctions by zinc supplementation in old mice // J.Trace Elem. Exp. Med. - 1995. - Vol. 8. - № 2. -P. 96.

175. Moraleda M.A.G. Ozone therapy in the functional recovery from diseases involving damage to central nervous system cells // Proceedings of the XII World Congress. Lille, France. - 1995. - Vol. 3. - P. 111-123.

176. Nair U., Bartsch H., Nair J. Lipid peroxidation-induced DNA damage in cancer-prone inflammatory diseases: A review of published adduct types and levels in humans // Free Rad. Biol. And Med. 2007. - Vol. 43. - P. 1109 - 1120.

177. Nielsen F.H. 1971. Studies on the essentiality of nickel // Mertz W., Cornatzer W.E. (eds) Newer Trace Elements in Nutrition. P. 215-253. New York: Marcel Dekker Inc.

178. Nielsen F.H. 1986. Other elements: Boron (B) // Mertz W. (ed) Trace Elements in Human and Animal Nutrition, 5th Ed., Vol.2. P.420-427. New York:Academic Press.

179. Nielsen F.H. 1987. Nickel // Mertz W. (ed) Trace Elements in Human and Animal Nutrition, 5th Ed., Vol.l.P.245-273. New York: Alan R. Liss Inc.

180. O'Brien P., Kortenkamp A. Chemical models important in understanding the ways in which chromate can damage DNA // Environ. Health Perspect.- 1994. -Vol.102, suppl.3.-P.3-10.

181. Philcox J.C., Tilley M.H., Coyle P., Rote A.M. Metallothionein and zinc homeostasis during tumor progression // Biol. Trace Elem. Res.- 1994.-Vol.40.

182. Prasad A.S. Zinc an overview//Nutrition. 1995. - Vol. 11. -P.93-99.

183. Rajagopalan K.V. 1988. Molybdenum: An essential trace element in human nutrition // Ann. Rev. Nutr. 8:401-427.

184. Rasheed M.H., Beevi S.S., Geetha A. Enhanced lipid peroxidation and nitric oxide products with deranged antioxidant status in patients with head and neck squamous cell carcinoma // Oral Oncology. 2007. - Vol. 43. - P. 333 - 338.

185. Richelmi P., Franchini P., Ualdenassi L. Ossigeno-ozono Terapia. Pavia-Bergamo, 1995.

186. Riling S, Viebahn R. The Use of Ozone in Medicine // New York, Haug. -1987.

187. Rodriguez Y., Bello J.L., Menendez S. et al. Antitumor activity of ozone, Exsperimental researh // Ozone News. 1997. - Vol. 25. - № 3. - P. 50.

188. Rokitansky O. Clinical Considerations and biochemistry of ozone the ropy // Hospitalis. 1982. - № 52. - P. 643-647.

189. Rossi M.C., Zetter B.R. Selective stimulation of prostatic carcinoma cell proliferation by trancferrin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - Vol. 89. - P. 6197-6201.

190. Sandstead H.H. 1991. Zinc deficiency. A public health problem? // Am. J. Dis. Child. Vol.145. P.853-859.

191. Schwarz K., Milne D.B. 1972. Growth promoting effects of silicon in rats // Nature (London). 239(5371):333-334.

192. Selligman P.A., Kovar J., Gelfand E.W. Lymphocyte proliferation is controlled by both iron availability and regulation of iron uptake pathways// Pathobiology. 1992. - Vol.60. - P.19-26.

193. Skalny A. 1993. Interelementary relationships and oncological morbidity in the extremely As-polluted area // Trace Elements in Man and Animals-TEMA-8. M.Anke, D.Meissner, C.F.Mills (eds.). Dresden. P.794-797.173

194. Singh K.P., Zaidi S.I., Ratsuddin S., Saxena A.K., Murthy R.C., Ray P.K. 1992. Effect of zinc on immune functions and host resistance against infection and challenge //Immunopharmacol. Immunotoxicol. Vol.14. P.813-840.

195. Stadtman E.R., Levine R.L. Protein oxidation. // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2000. №899. P. 191-208.

196. Sthulz S., Wagner M. The influence of ozonized oxygen on lung tumor development (multiplicity after different forms of application on mice (NMRI) // Abstracts of 2nd International symposium on ozone applications. Havana, Cuba. -1997.-P.23.

197. Smialowicz R.J., Rogers R.R., Riddle M.M., Garner R.J., Rowe D.G., Luebke R.W. 1985. Immunologic effects of nickel. Suppression of natural liller activity // Env. Res. Vol.36. № 1. P.56-66.

198. Smith R.M. 1987. Cobalt // Mertz W.(ed) Trace Elements in Human and Animal Nutrition, Vol.1. P. 143-183. New York: Academic Press Inc.

199. Snow E.T. Effects of chromium on DNA replication in vitro // Environ. Health Perspect.-1994.- Vol.102, suppl.3.-P.41-44.

200. Spears J.W. 1985. Nickel as a "newer trace element" in the nutrition of domestic animals // J.Anim.Sci.59(3):823-835.

201. Sun Y. Free radicals, antioxidant enzymes and carcinogenesis // Free Radie Biol Med. 1990. - Vol.8. - P. 583 - 589

202. Sunderman F.W. Sunderman Jr. 1980. Analytical biochemistry of nickel // Pure Appl.Chem.52(2):527-544.

203. Sunderman F.W. Teratogenicity and embryotoxicity of metals in humans and experimental animals I I Metal Ions in Biology and Medicine / Eds Ph. Cpllery et al. Paris: John Libbey Eurotext, 1998.-Vol.5.-P.275-279.

204. Sutherland L.C. Zinc has no effect on IL-3-mediated apoptosis of BAR-3 cells but enhances CD95-mediated apoptosis of jurkat cells// J. Immunol. Methods. 2000. - Vol. 234. - №1-2. - P.43-50.

205. Sweet F. Ozone selectivity inhibits growth of cancer cells // Science. 1980. - vol. 209. - № 4459. - P. 931-933

206. Takahaski K. Staphylococcal enterotoxin H displays unique MHC class II-binding properties// J. Immunol. 1999. -Vol. 163.-№ 12.-P. 6686-6693.

207. Truong-Tran A.I.Q., Carter J., Ruffin R., Zalewski P.D. New insights in to the role of zinc in the respiratory epithelium // Immunol, and Cell Biol. 2001. -Vol. 79.-№2.-P. 170-177.

208. Tsukamoto H. Macrophage control of mycobacterial growth induced by picolinic acid is dependent on host cell apoptosis // J. Immunol. 2000. - vol. 164. -№ l.-P. 389-397.

209. Uchida K. 4-Hydroxy-2-nonenal: a product and mediator of oxidative stress // Prog. Lipid Res. 2003. - Vol. 42. - P. 318 - 343.

210. Underwood E.J. 1973. Trace elements// Strong F.M. (ed) Toxicants Occurring Naturally in Foods. P.56-58. Washington, D.C.: National Academy of Sciences.

211. Underwood E.J. 1977. Other Elements, I. Aluminum // Trace Elements in Human and Animal Nutrition, 4th Ed.P.430-433, New York: Academic Press.

212. Varro J. Die krebsbehandlung mit ozon. Erfahrung-sheilkunde; 1974; 23: 178—181.

213. Vernhet L. Differential sensitivities of MRPl-overexpressing lung tumor cells to cytotoxic metals // Toxicology. 2000. - vol.142. - № 2. - P. 127-134.

214. Viebahn-Hainsler R. The Use of Ozone in Medicine // 4th english edition. ODREI-Publishers. 2002. - P. 165

215. Vincent J.B. 2000. Elucidating a biological role for chromium at a molecular level//Acc. Chem. Res. 33:503-510.

216. Ward N.I. Boron levels in human issues and fluids // Trace Elements in Man and Animals TEMA-8 / Eds. M. Anke et al.-Dresden, 1993.-P.724-728.

217. Wiseman H., Halliwell B. Damage to DNA by reactive oxygen and nitrogen species: role in inflammatory disease and progression to cancer // Biochem. J. -1996.-Vol. 313. -P.17-29.

218. Wlaschek M., Brivida K., Stricklin G.P. et al. Singlet Oxygen may mediate the ultraviolet A-induced synthesis of interstitial collagenase // J. Invest. Dermatol. 1996. - Vol. 104. - P. 194 - 198.

219. Wlaschek M., Brenneisen P., Wenk J. et al. Cytokine dependant UV activation of interstinal collagenase in humane dermal fibroblasts is mediated by singlet oxygen // Photochem. Photobiol. 1997. - Vol. 65. - P. 72.

220. Wolf H.H. Das medizinische Ozon. 2 Auflage. - Heidelberg. - 1982. -250 p.

221. Wu C. Copper deficiency impairs immune cells // Sei News. 1995. - Vol. 148.-№7.-P. 102.

222. Xia M., Dempski R., Hille R. 1999. The reductive half-reaction of xanthine oxidase//J. Biol. Chem. 274(6):3323-3330.

223. Yun Chul Hong, Paik S.R., Lee H.J. et al. Magnesium inhibits nickel-induced genotoxicity and formation of reactive oxygen // Environ. Health Perspect.-1997.-Vol. 105.-P.744-748.

Информация о работе

Сазанов, Артем Иванович
кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2012
ВАК 03.01.04

Диссертация

Влияние озонированного физиологического раствора на микроэлементный состав тканей животных-опухоленосителей - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы