Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние острой гипертермии на организм цыплят в раннем онтогенезе

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Влияние острой гипертермии на организм цыплят в раннем онтогенезе"

На правах рукописи

ЧЕРНЯВСКАЯ Татьяна Сергеевна

ВЛИЯНИЕ ОСТРОЙ ГИПЕРТЕРМИИ НА ОРГАНИЗМ ЦЫПЛЯТ В РАННЕМ ОНТОГЕНЕЗЕ

(ПО ПОКАЗАТЕЛЯМ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ И ПЕЧЕНИ)

03.00.16. - экология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Омск - 2005

Работа выполнена на кафедре общей биологии и методики преподавания биологии ГОУ ВПО «Омский государственный педагогический университет»

Нс^чный руководитель: д.б д., профессор Мкртчан Офелия Завеновн а

Официальные оппоненты: д.б.н., профессор Лотиюва Татьяна Михайловна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Омский государственный ахрарный университет»

Защита состоится » декабря 2005 года в « {о » часов на заседании диссфтационного совета К 212.17702 в ГОУ ВПО «Омский государственный педагогический университет» по адресу: 644099, г. Омск, наб.Тухэтевсюго, 14.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Омский государственный педагогический университет»

А втореферат разослан «М » «_ _» 2005 года

д£ .н., профессор Лихачёв Сергей Федорович

Ученьй секретарь диссертационного совета к.б.н ,доцент

ы/

Соловьев С.А.

JLpoe~r 224 Мб!

ITUe з

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В связи с усилением техногенного и антропогенного воздействия в последние годы выявляется опасная тенденция глобальных изменений в окружающей среде, оказывающих негативное влияние на организм животных и растений (Vellinga, van Verseveld, 2000). Особое место среди факторов экологической дестабилизации занимают нарушения температурного оптимума, а именно гипо- и гипертермия. Общее перегревание организма происходит в естественных жарких климато-географических зонах, производственных, клинических и экспериментальных условиях (Александров, 1974; Султанов, 1978; Александров и др. 1980; Мкртчан, 1986; Гурин, 1985; Худайбердиев, 1990; Истомина, 1992; Дунаев, 1996; Антонова, 1999; Лукьянова, 2004; Pechan, 1991).

Повышение частоты экстремальных погодных явлений приводит к росту экономического ущерба, вызванного ими, в том числе и в промышленном птицеводстве (Остроумов, 2005).

Организм птиц в его развитии является весьма чувствительным к температурным перепадам окружающей среды, которые происходят стихийно или по мере смены климатических условий при широтных и поясных миграциях, а так же перелетах (Вартапетов, 2005). В связи с этим, актуальным является изучение влияния гипертермии на его органы и системы. Важную информационную значимость для оценки повреждающего действия этого абиотического фактора имеют исследования периферической крови как интегрального показателя состояния организма, и печени как органа, являющегося частью исполнительной системы организма, обеспечивающей его детоксикацию и выживаемость в нормальных и экстремальных условиях (Гичев, 1990, Арцимович, 1992; Истомина, 1992,1998,2004; Козлов, 1993).

Работы, посвященные изучению влияния гипертермии на организм, касаются преимущественно млекопитающих. Системных сведений о влиянии этого фактора на организм и отдельные системы органов у птиц в раннем онтогенезе недостаточно. Между тем, изучение влияния острого перегревания на организм птиц имеет немаловажное теоретическое значение для фундаментальной экологии и прикладное значение для промышленного птицеводства.

Работа выполнена в соответствии с планом НИР ГОУ ВПО «Омского государственного педагогического университета» «Влияние повреждающих факторов на организм и его развитие» (№ гос. j ^бли о^ е ka Ó14 ).

СП 1 99

ет

*-----ш

Цель исследования. Изучить закономерности действия острого однократного перегревания на организм кур-бройлеров в ражем онтогенезе Задачи исследования. 1. Выявить влияние острого перегревания на морфофункциональные показатели периферической кропи и печени цыплят в эмбриональном и раннем постэмбриональном периоде развития

2 Изучить влияние острого перегревания на рост клеточных культур гепатоцитов in vitro

3. Установить критические периоды повреждающего действия острого перегревания на организм птиц в условиях промышленного разведения

Научная новизна работы. Впервые установлено, что острое перегревание приводит к изменению морфофункциональных признаков крови как интегрального системного показателя состояния организма (снижение фагоцитарной активности, повышение активности ферментов маркеров цитолиза и окислительных процессов, сдвиг лейкоцитов «влево», возрастание ЛИИ). Обнаружено нарушение гемодинамики, уменьшение диаметра ядер гепатоцитов, изменение способов репродукции, активности процессов трансаминирования и окисления в печени кур как в исполнительном органе детоксикации и выживания Выявлено прямое повреждающее действие острого перегревания на рост клеточных культур гепатоцитов и установлена корреляционная связь между изученными показателями

Теоретическая и практическая значимость. В ходе комплексных исследований показано изменение функционально - морфологических показателей крови (активность АлАТ, АсАТ, ЛДГ, количество лейкоцитов и их фагоцитарная активное ib, ЛИИ, ИСЛК) и печени (диаметр просвета сосудов портального тракта, ценгральной вены и синусоидпых капилляров, диаметра ядер, уровень митотической активности и число двуядерных i ештоцитов) при действии острого перегревания, как повреждающего фатора, в раннем онтогенезе птиц

Определены критические периоды в раннем онтогенезе птиц, с наиболее выраженным проявлением повреждающего действия острого перегревания в условиях промышленного разведения Полученные результаты могут быть использованы дот экологического мониторинга в промышленном птицеводстве Внедрение результатов исследования. Материалы диссертации используются в курсах «Общая экология», «Зоология позвоночных», «Цитология», «Гистология с основами эмбриологии», при выполнении студентами выпускных квалификационных работ на химико-биологическом

факультете ГОУ ВПО «Омского государственного педагогического университета», на кафедре патологической анатомии Института ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет», на кафедре гистологии, цитологии, эмбриологии и медицинской биологии ОГМА, на ЗАО П/Ф «Сибирская» в технологическом процессе.

Апробация результатов научных исследований. Основные положения диссертационной работы доложены на III конференции молодых ученых России «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004), на Всероссийской научной конференции «Адаптация биологических систем к естественным и экстремальным факторам среды» (Челябинск, 2004), на Международном эмбриологическом симпозиуме «Закономерности эмбриофетальных морфогенезов у человека и позвоночных животных» (Ханты-Мансийск, 2004), на Всероссийской научно-практической конференции «Клинико-морфологические аспекты общепатологических процессов при социально-значимых заболеваниях» (Новосибирск, 2004), на Всероссийской конференции «Актуальные проблемы экологической физиологии, биохимии и генетики животных» (Саранск, 2005), на семинаре химико-биологического факультета ОмГПУ (Омск 2003, 2004).

Публикации результатов исследования. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ.

Объем и структура диссертации. Общий объем диссертации составляет 122 страницы. Включает следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, собственные данные, обсуждение собственных данных, выводы, список литературы. Работа иллюстрирована 21 фотографией, 12 рисунками и 34 таблицами. Список цитированной литературы включает 254 работы, в том числе зарубежных — 62.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Острое перегревание оказывает повреждающее действие на развивающийся организм кур-бройлеров. Периферическая кровь как интегральный показатель состояния организма проявляет после острого перегревания ряд изменений: «сдвиг влево» нейтрофильных лейкоцитов, увеличение агранулоцитов, снижение фагоцитарной активности, изменение ЛИИ. В печени как исполнительном органе детоксикации и выживания структурные изменения опосредованы нарушением гемодинамики (гиперемия артериол, венул, синусоидных капилляров) и выражаются в уменьшении кариометрических показателей гепатоцитов, изменении формы клеточной репродукции, повышении активности аминотрансфераз и ЛДГ.

2 Прямое повреждающее действие острого перегревания на клеточные культуры гепатоцитов in vitro выражается в умет,тении диаметра ядер и увеличении числа noi ибших гепатоцитов.

3. Наиболее выраженное повреждающее действие острого перегревания на органюм кур-бройлеров проявляется на 16-е сутки инкубации и на 15-е сутки после вылупления.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена на 67 эмбрионах кур и 67 цыплятах кросса «Смена-2», разводимых на птицефабрике «Сибирская» г Омска

В ходе эксперимента было выполнено 2 серии опытов-

I серия - моделирование острого однократного перегревания организма птиц в эмбриональном периоде онтогенеза (16-е, 18-е, 20-е сутки),

II серия - моделирование острого однократного перегревания организма птиц в раннем постнатальном онтогенезе (1-е, 15-е, 30-е сутки) (табл. 1)

Инкубация яиц осуществлялась на птицефабрике «Сибирская» с соблюдением стандартных условий В период проведения исследования не было зарегистрировано инфекционных и паразитарных заболеваний Цыплята всех возрастных групп находились в одинаковых условиях содержания и кормления Эксперименты проведены в период с 2003 по 2005 год на голодных птицах с 9 до 12 часов дня.

Острое перегревание достигали путем выдерживания эмбрионов и цыплят в течение 20-30 минут в воздуховентилируемой камере «Chirana» при 141-42° С, что приводило к развитию теплового удара средней тяжести (Козлов, 1993) Выведение цъптлят из эксперимента производили по стандартной методике через 20 минут после воздействия До и после перегревания у цыплят определяли ректальную температуру электротермометром ТОП-16

Таблица 1

Количество животных r эксперименте по моделированию острого

перегревания

Период развития ВСЕГО

Группа птиц Эмбриональный Постэмбриональный

16-е сутки 18-е сутки 20-е сутки 1-е сутки 15-е сутки 30-е сутки

контроль 8 8 8 8 8 8 48

гипертермия 13 13 13 13 13 13 78

ИТОГО 21 21 21 21 21 21 126

Для определения интегральных показателей состояния организма во всех группах фиксировали летальность, измеряли массу тела и массу печени до и после перегревания. Изучали морфологическую картину крови. Производился подсчет лейкоцитарной формулы на 100 лейкоцитов с последующим определением лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ) и индекса сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК) (Кальф-Калиф, 1939), фагоцитарной активности лейкоцитов путем поглощения латексных частиц нейтрофильными ' лейкоцитами периферической крови. Для определения степени цитолиза клеток

и выявления изменений процессов окисления определяли активность аминотрансфераз (АлАТ и АсАТ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в сыворотке периферической крови (Прохорова, 1982).

Для гистологических исследований печени образцы органа фиксировали в 10% нейтральном растворе формалина, кусочки фиксированной печени после проводки заливали в парафин по общепринятой методике (Меркулов, 1961; Валовая, 1993). Для обзорной микроскопии срезы окрашивали гематоксилином Майера и эозином, для окраски соединительнотканных компонентов печени применяли окраску Ван-Гизон.

Изучение гистологических препаратов и морфометрическое исследование проводилось при помощи светового микроскопа «REICHERT», окуляр -микрометра МОВ-1-15х, (объектив х 40, х 90) (Автандилов, 1973, 1980, 1990; Ташке, 1980).

На всех стадиях эксперимента проведено исследование количественных показателей печеночного ацинуса: диаметр сосудов портального тракта, центральной вены и синусоидных капилляров; толщина стенок сосудов портального тракта и центральной вены; диаметр ядер гепатоцитов дифференцированно в 3-х зонах ацинуса; митотическая активность гепатоцитов (общая и дифференцированная в 3-х зонах ацинуса) на 1000 клеток; количество двуядерных гепатоцитов на 1000 клеток; количество живых гепатоцитов (определяли в гомогенатах печени при помощи окраски 0,1% трипановым синим в соотношении 1:1, в камере Горяева). Всего изучено 390 > гистологических препаратов.

Для выявления активности процессов переаминирования в цитозоле гепатоцитов исследована активность АлАТ и АсАТ. Эти показатели определяли в цитозольной фракции гомогенатов печени, выделяемых методом дифференциального центрифугирования в соответствии с методическими указаниями Мосоловой и др. (1971) и Ещенко (1982). Для изучения активации процессов окисления выявляли активность ЛДГ (Прохорова, 1982).

g

Прямое влияние гипертермии проведено у эмбрионов 16-ти суток инкубации и цыплят 15-ти суток после вылупления ("табл. 2). Использовали метод клеточных культур in vitro. Культивирование гепатоцитов in vitro проводилось с соблюдением стандартных условий по методике, изложенной Бродским и др. (1994). Под эфирным наркозом брюшная полость птиц вскрывалась, и осуществлялась двухкратная ее перфузия через воротную вену печени. Первая перфузия проводилась раствором Хэнкса, а вторая - раствором Хэнкса с добавлением 0,5%-ой коллагеназы. Далее печень освобождали от капсулы, измельчали, помещали в колбу со средой Игла и перемешивали полученную суспензию на магнитной мешалке в течение 5мин. Взвесь клеток отфильтровывали и центрифугировали 5 мин. при скорости 2000 об./мин. Надосадочную жидкость сливали, осадок ресуспензировали в инкубационной среде (среда 199, сыворотка КРС, антибиотик). Далее производили посев в чашки Петри на покровные стекла. Через 24 часа осуществляли замену среды культивирования. Затем материал для культивирования подвергали перегреванию на паровой бане при температуре 42°С в течение 20 мин. Полученные монослойные культуры окрашивали гематоксилином Майера и эозином. Определяли диаметр ядер и количество живых и погибших гепатоцитов в монослое.

Таблица 2

Культивирование гепатоцитов птиц в контроле и после острого перегревания in vitro____

Период развития Повторность Количество монослойных культур ВСЕГО

контроль гипертермия

16-е сутки эмбрионального развития 2 8 8 16

15-е сутки постэмбрионального развития 2 8 8 16

ИТОГО: 16 16 32

Для выявления уровня сопряженности исследуемых показателей применяли корреляционный анализ Пирсона (г). При значении г<0,3 -слабая связь, при 0,3<г<0,7 - средняя связь, при 0,7<г<1 - сильная связь. Заданный интервал значимости р<0,05 (Лакин, 1990).

Обработку результатов экспериментальных исследований проводили методами математической статистики с применением стандартного пакета программ «Statistica - 6» в операционной среде Microsoft Exel for Windows

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Действие острого перегревания на показатепи крови и печени птиц в эмбриогенезе

На 16-е сутки развития масса эмбрионов кур в норме составляет 27,3±1,1 г, а масса печени - 334,5±29,81 мг, что составляет 1,2% от общей массы теча Острое перегревание не приводит к значимым изменениям массы тела и печени эмбрионов На этой стадии эксперимента зарегистрирован максимальный уровень летальных исходов (9%), вызванный гипертермией, что свидетельствует о наибольшей чувствительности эмбрионов этого периода развития к гипертермии

В периферической крови эмбрионов на данном этапе развития п норме преобладающими клетками являются зернистые лейкоциты Острое перегревание вызывает увеличение в 1,5 раз количества палочкоядерпьгх лейкоцитов, в 1,2 раза лимфоцитов и 3,2 раза моноцитов на фоне уменьшения сегментоядерпых лейкоцитов в 1,2 раза (р0,05), эти данные согласуются с данными Болотникова (1980) и показывают нарастапие токсических метаболитов, вызванных острым перегреванием

Общее количество лейкоцитов в эксперименте снижено на 10% (р<0,05) Происходит снижение неспецифического иммунитета, за счет значимого уменьшения фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов в 1,5 раз в сравнении с контролем После острого перегревания в сыворотке крови на 37% увеличивается активность АлАТ и на 86% ЛДГ - маркеров цитолитического синдрома

Гипертермия вызывает цикл сосудисто-тканевых изменений в печени Выявляется стойкое увеличение просветов сосудов венозного звена печеночного ацинуса. в частности просветов центральной вены и венулы портального тракта в 1,3 раза (р<0,05) Синусоидные капилляры значимо расширены во всех зонах печеночного ацинуса

Нарушение проницаемости сосудистой стенки и нарушение кровоснабжения в целом приводит к структурным и метаболическим изменениям гепатоцитов Так, в 1,3 раза отмечается снижение количества живых гепатоцитов на фоне возрастания в 3 раза погибших клеток (р<0,05)

Таблица 3

Размеры ядер и показатели клеточной репродукции гепатоцитов печени эмбрионов кур после острого перегревания на 16 сутки инкубации ____________(М±т)_________________

Наименование показателей Контроль (п=8) Гипертермия (п=13)

Диаметр ядер, мкм: -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона 3,44±0,19 3,04±0,17 3,15±0,20 2,49±0,16* 2,75±0,19* 2,7*0,14*

Общая митотическая активность, %о -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона -в трех зонах 1,10±0,12 0,60±0,05 0,40±0,07 0,70±0,08 0,90±0,09* 0,50±0,10 0,70±0,02* 0,70±0,07

Количество двуядерных клеток (на 1000 клеток) -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона -в грех зонах 18,13±0,63 21,88±1,88 24,75±1,25 21,59*1,25 13,84±1,40* 14,16±1,40* 16,25±1,25* 14,75±1,35*

* - достоверность различий по сравнению с контролем, р<0,05

Уменьшается диаметр ядер гепатоцитов во всех исследуемых зонах ацинуса, но особенно выражено изменение в перипортальной зоне (табл. 3), где гепаюциты подвержены наибольшему действию реактивных метаболитов.

Нарушение структуры печеночного ацинуса влечет за собой изменение клеточной репродукции. Количество двуядерных гепатоцигов уменьшается достоверно во всех зонах ацинуса и в целом (табл. 3). На фоне этого снижается митотическая активность в перипортальной зоне и возрастает в перивенулярной зоне в сравнении с контрольными показателями. В целом, изменение уровня митотической активности по 3-м зонам в этот период эмбрионального развития не происходит.

Корреляционный анализ выявил в контрольной группе положительную взаимосвязь активности АлАТ сыворотки с диаметром артериолы (г=0,86) (р<0,05), АлАТ цитозоля с диаметром центральной вены (г~0,85) (р<0,05) и уровнем активности ЛДГ сыворотки (г=0,83) (р<0,05), который в свою очередь также сопряжен с диаметром центральной вены (г=0,72) (р<0,05). Уровень активности ЛДГ сыворотки отрицательно сопряжен с числом двуядерных гепатоцитов (г=-0,74) (рис. 1а).

Рис.1. Характер корреляционных связей интегральных и внутриорганных показателей на 16-е сутки пренаталыюго развития: а) контроль; б) гипертермия.

Острое перегревание вызывает резкое падение числа сопряженностей. Выявляются две положительные взаимосвязи активности АлАТ сыворотки с активностью ЛДГ сыворотки (г~0,76) и общего количества митозов с диаметром центральной вены (г=0,71) (рис. 16).

В клеточных культурах гепатоцитов in vitro на 16-е сутки эмбрионального развития происходит снижение количества живых гепатоцитов в 1,6 раз (р<0,05), Диаметр ядер уменьшается на 48% р<0,05.

На 18-е сутки развития масса тела эмбрионов кур достигает 30,8±1,7г, что на 12% больше чем на 16-сутки развития. Масса печени составляет 568,5±22,7мг, что составляет 1,8% массы тела. В этот период развития уровень летальности уменьшается в 2 раза и составляет 4%.

Клеточный состав крови эмбрионов кур в контроле на 18 сутки развития значительно не изменяется в сравнении с предыдущим периодом развития, кроме увеличения количества моноцитов в 2,5 раза. Исследование показателей крови эмбрионов, как интегрального показателя организма, после воздействия гипертермии выявило снижение общего количества лейкоцитов в 1,2 раза и ' иадение их фагоцитарной активности в 1,7 раз, это свидетельствует о снижении

неспецифического иммунитета. В 1,8 раз возрастает число палочкоядерных на k фоне снижения сегментоядерных лейкоцитов в 1,2 раза (р<0,05). ИСЛК равен

1,08±0,05 в контроле и 0,85±0,06 в эксперименте, что является «сдвигом» влево за счет палочкоядерных форм лейкоцитов. Под влиянием острого перегревания выявлено увеличение активности ЛДГ в сыворотке крови на 35% (р<0,05), это отражает повреждение клеточных мембран.

Гипертермия вызывает изменения сосудистого звена печени. Как и в предыдущий период, это выражено в увеличении внутреннего диаметра

центральной вены, венулы портального тракта в 1,3 раза (р<0,05) Статистически значимо выражено увеличение просвета синусоидных капилляров во всех зонах печеночного аципуса На фопе этого наблюдается набухание стенки артериолы и увеличение ее толщины.

Таблица 4

Размеры ядер и показатели клепочной репродукции гепатоцитов печени эмбрионов кур после острого перегревания _______на 18 сутки инкубации (М±т)_

Наименование показателей Контроль <п=8) Гипертермия (п=13)

Диаметр ядер, мкм: -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона 4,07±0,24 3,33±0,18 3,71 ±0,26 3,31±0,34 2,05±0,17* 2,71±0,22*

Общая митотическая активность, %о -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона -в трех зонах 0,б7±0,06 0,30±0,03 0,17±0,01 0,38±0,03 0,58±0,08 0,35±0.01 0,42±0,04* 0,45±0,04

Количество двуядерных клеток (на 1 ООО клеток) -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона -в трех зонах 19,80±1,03 22,61 ±1,20 26,29±1,06 22,90±1,09 16Д0±0,86* 20,78±1,60 22,90±1,32* 19,96±1,26

* - достоверность различий по сравнению с контролем, р<0,05

Нарушение гемодинамики органа приводит к изменениям в паренхиме печени Снижается количество живых гепатоцитов в 1,3 раза (р<0,05) по сравнению с контролем.

Изменение среднего диаметра ядер гепатоцитов выявлено в интермедиарной и перипенулярной зонах (табл. 4) Показатели мшогической активности и число двуядерных гепатоцитов значимо не изменяются

Корреляционный анализ выявил в контроле две отрицательные сопряженные связи и большое число положительных Центром положительных сопряженностей является уровень ЛДГ сыворотки, который сопрягается с активностью аминогрансфераз сыворотки и уровнем показателей ренаративной регенерации Отрицательно сопрягается уровень активности АлАТ сыворотки с диаметром венулы (г=-0,71) (р<0,05) и показатели активности аминотрансфераз в цитозоле (г=-0,78) (р<0,05).

Гипертермия вызывает значительное уменьшение числа корреляций между исследуемыми признаками Огмечается положительная сопряженность

между АлАТ сыворотки и АсАТ цитозоля (г=0,79) (р<0,05), активностью ЛДГ с числом митозов (г=0,72) (р<0,05) Отрицательно сопрягаются число двуядерных гепатощггов и диаметр венулы (г=-0,73) (р<0,05)

На 20-е сутки развития масса эмбрионов кур составляет 31,3±1,2 г В это г период развития печень увеличивается в размерах, ее вес равен 722,6±22,8 мг, что составляет 2,2% от массы тела Это превышает показатели прироста печени в предыдущие периоды развития Острое перегревание вызывает снижение массы тела эмбрионов на 6% Летальные исходы не зарегистрированы

У эмбрионов кур на 20-е сутки инкубации в контроле определяется снижение доли сегментоядерных лейкоцитов и увеличение агранулоцитов Острое перегревание приводит к увеличению палочкоядерных лейкоцитов на фоне снижения количества сегментоядерных лейкоцитов Статистически значимо возрастает число лимфоцитов При этом в 1,6 раз снижается общее количество лейкоцитов, равно как и их фагоцитарная активность на 30% Снижение количества лейкоцитов в единице объема может отражать процессы выхода этих клеточных элементов системы моионуклеарных фагоцитов та циркуляции в периваскулярную соединительную ткань портальных трактов, с образованием инфильтратов Гипертермия приводит к статистически значимому снижению показателей ИСЛК - это свидетельствует о сдвиге «влево» В сыворотке крови эмбрионов на 20-е сутки развития происходит увеличение активное™ ЛДГ на 20% (р<0,05).

Таблица 5

Размеры ядер и показатели клеточной репродукции гепатоцитов печени

эмбрионов кур после острого перегревания __на 20 сутки инкубации (М±т)_

Наименование показателей Контроль (п=8) Гипертермия (п-13)

Диаметр ядер, мкм: -перипортальная зона -цетролобулярная зона -перивепулярная зона 4,03±0,21 4,09±0Д6 4,09±0,21 3,59±0,18* 3,72±0,19 3,84±0,23

Общая митотическая активность, %о -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенуляряая зона -в грех зонах 0,50±0,05 0,25±0,01 0,25±0,01 0,33±0,02 0,60±0,04 0,20±0,03 0,22±0,02 0,34±0,03__ 17,25±2,25 17,75±1,75 16,75±1,42* 17,27±1.80

Количество двуядерных клеток (на 1000 клеток) -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивепулярная зона -в трех зонах 19,27±1,15 20,30±2,07 22.30±1,32 20.62±1,51

* - достоверность различий по сравнению с контролем, р<0,05

Выявлены изменения со стороны микроциркуляторного русла печени. Статистически значимо увеличен просвет центральной вены, синусоидных капилляров во всех 3-х зонах печеночного ацинуса. Впервые выявлено расширение просвета лимфатических сосудов, желчного протока. Увеличивается толщина стенок артериолы и венулы портального тракта.

Острое перегревание вызывает увеличение количества погибших гепатоцитов в 5,1 раз (р<0,05), уменьшение диаметра ядер в перипортальной зоне, кариолизис и кариорексис гепатоцитов. Общий уровень митотической активности не изменяется. Однако в перивенулярной зоне выявлено значимое снижение числа двуядерных гепатоцитов (табл. 5).

Корреляционный анализ выявил незначительное число сопряженных связей в контроле. Основные сопряженности формируются вокруг активности аминотрансфераз сыворотки и цитозоля и активностью ЛДГ сыворотки. Число двуядерных гепатоцитов сопряжено с активностью АсАТ сыворотки (г=0,75) (р<0,05). Выявляется отрицательная корреляция между показателями активности АлАТ цитозоля с диаметром центральной вены (г=-0,73) (р<0,05).

Гипертермия вызывает перераспределение сопряженностей. Выявляются два центра: первый - с отрицательной сопряженностью между показателями активности аминотрансфераз сыворотки с числом двуядерных гепатоцитов. Второй центр - это связь активности ЛДГ сыворотки с аминотрансферазами цитозоля.

Действие острого перегревания на показатели крови и печени птиц в постнатальном онтогенезе На 1-е сутки инкубации происходит увеличение массы тела кур, она составляет 47,3±1,07 г, при этом масса печени равна 1036±28мг (2,19% от массы тела). Под влиянием острого перегревания происходит снижение массы тела цыпляг на 7%, чю является следствием дегидратации, а возрастание массы печени на 5% отражает перераспределение крови в целом, с увеличением ее депонирующей функции (Козлов, 1990; Розен и др., 1991).

Преобладающими клетками в периферической крови суточных цыплят в норме по прежнему являются зернистые лейкоциты. Количество лимфоцитов снижается до 47,8±3,8. Острое перегревание вызывает изменения в крови цыплят, в 1,8 раз снижается число моноцитов. Изменение общего числа лейкоцитов не выражено, однако в 1,7 раз уменьшается их фагоцитарная активность. ЛИИ в эксперименте возрастает в 1,9 раз (р<0,05).

Гипертермия вызывает изменения со стороны сосудистого русла печени. Увеличен просвет центральных вен на 20% и синусоидных капилляров во всех исследуемых зонах печеночного ацинуса, увеличен просвет желчных протоков и лимфатических сосудов. Возрастает толщина стенок артериолы и венулы портального тракта.

Статистически значимо растет число погибших гепатоцитов, увеличивается активность аминотрансфераз и ЛДГ цитозоля гепатоцитов.

Диаметр ядер гепатоцитов уменьшается в перипортальной зоне (табл. 6). Митотическая активность не изменяется, количество двуядерных гепатоцитов, в целом, возрастает (табл. 6).

Корреляционный анализ выявил большое число положительных сопряженностей, а именно между показателями репаративной регенерации, активностью ферментов сыворотки и цитозоля и показателями сосудов печеночного ацинуса.

Таблица 6

Размеры ядер и показатели клеточной репродукции гепатоцитов печени кур после острого перегревания на 1 сутки постнатального онтогенеза _______(М±ш)_______

Наименование показателей Контроль (п=8) Гипертермия (п=13)

Диаметр ядер, мкм: -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона 4,17+0,17 4,21+0,20 4,25±0,22 3,64+0,12* 3,83+0,10 3,79+0,18

Общая митотическая активность, 96о -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона -в трех зонах 0,33+0,09 0,25+0,02 0,25+0,04 0,28+0,05 0,40+0,01 0,20+0,04 0,13±0,03 0,24+0,03

Количество двуядерных клеток (на 1000 клеток) -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона -в трех зонах 25,06±1,86 31,65+2,05 29,01+1,05 28,57+1,65 34,90+1,94* 32,38+2,60 34,84+1,45* 34,04+1,99*

* - достоверность различий по сравнению с контролем, р<0,05

После острого перегревания снижается число корреляционных связей, все положительные связи нарушаются, и формируются отрицательные сопряженности между активностью АсАТ сыворотки с диаметром венулы

(г=-0,72). активностью АлАТ иитозоля и активностью ЛДГ цитозоля (г=-0,77) (р<0,05), от которой зависит и число двуядерпых гепатоцитов (г=-0.76) (р<0.05) и активностью ЛДГ сыворотки и диаметром центральной вены (г=-0,77) (р<0,05).

На 15-е с\тки посгнатального онтогенеза масса тела цыплят составляет 518,33±11,07г В этот период развития масса печени составляет 6255±86,25мг -это 1,2% от массы тела Острое перегревание вызывает снижение массы тела цыплят на 4% Масса печени при этом значимо возрастает на 19% (р<0,05) Увеличение массы печени может бьггь связано с усилением депонирующей функции печени, тем более, что просвет синусоидных капилляров стойко увеличен во всех зонах печеночного ацинуса, как и просвет центральной вены, желчных протоков и лимфатических сосудов Случаев с четальным исходом не зарегистрировано

В периферической крови цьшлят в норме происходит резкое снижение числа гранулярных лейкоцитов и возрастание количества лимфоцитов Острое перегревание приводит к снижению в 1,9 раз количества эозинофилов и увеличению базофильных форм в 1,5 раз Общее количество лейкоцитов снижается в 1,7 раз в сравнении с контролем, а фагоцитарная активность лейкоцитов - в 1,6 раз ЛИИ возрастает в 2.4 раза (р<0,05) и является максимальным показателем среди исследуемых групп цыплят . В сыворотке крови выявлено значимое увеличение активности А.1АТ и ЛДГ

Под влиянием острого перегревания происходит изменение сосудистого русла печени Статистически значимо увеличивается просвет центральной вены, синусоидных капилляров во всех 3-х зонах печеночного ацинуса, увеличение просвета лимфатических сосудов и желчных протоков Возрастает юлщипа стенок веттул портального тракта

Острое перегревание вызывает в печени на 20% снижение количества живых гепатоцитов. на фоне резко] о возрастания числа погибших клеток г» 3,5 раза (р<0.05) Отмечается статистически значимое увеличение активности АлАТ, АсАТ и ЛДГ

Гипертермия оказывает влияние на ядерный аппарат гепатоцитов. Происходит стойкое уменьшение этого показателя во всех зонах печеночного ацинуса (табт 7) При исследовании клеточной репродукции гепатоцитов печени птиц было выявлено статистически значимое снижение митотической активности, и увеличение числа двуядерных гепатоцитов в перивенулярной зоне печеночного ацинуса (табл 7).

Таблица 7

Размеры ядер и показатели клеточной репродукции гепатоцитов печени кур после острого перегревания на 15 сутки постнатального онтогенеза ______________(М±т) ____________

Наименование показателей Контроль (п=8) Гипертермия (п-13)

Диаметр ядер, мкм:

-перипортальная зона 4,30+0,19 3,28±0,22*

-центролобулярная зона 4,44±0,15 3,16±0,21*

-перивенулярная зона 4,38±0,19 3,63±0,23*

Общая митотическая активность, %о

-перипортальная зона 0,30±0,07 0,35±0,01

-центролобулярная зона 0,30±0,10 0,30±0,06

-перивенулярная зона 0,23±0,03 0,14±0,03*

-в трех зонах 0,28±0,07 0,28±0,03

Количество двуядерных клеток (на 1000 клеток)

-перипортальная зона 17,25±2,77 20,00±2,03

-центролобулярная зона 19,05±1,82 21,75±1,50

-перивенулярная зона 26,41±1,04 34,15±1,85*

-в трех зонах 20,90±1,88 25,30±1,79*

* - достоверность различий по сравнению с контролем, р<0,05

В контроле корреляционный анализ выявил меньшее число сопряженных связей, чем в предыдущем периоде. Выявляется цепь последовательных сопряженностей между аминотрансферазами сыворотки и цитозоля, в то же время активность ЛДГ в сыворотке связана с диаметром венозного (г=0,95) (р<0,05) и артериального звена (г=0,76) (р<0,05)печеночного ацинуса. Общее число митозов сопряжено с активностью АлАТ цитозоля (г=0,75) (р<0,05) (рис. 2а).

1 АлАтс

2 АсАтс

3 АлАТа

4 АсАтд 5ЛДГс 6ЛД1 а

7 Диаметр яртсриоям

8 Дшиктр вену лы

9 Диаметр пеятрвльяой вены

10 Обшее количество штдоя УдЧ Н Количество звчядеряих ^^ геивтоцкгов

СрйЛНМ ЭПИОШОСГЬ

<и<г<07

авт ш сипмшг пгркателмша ивиопюетъ 1<г<-0 7 вшм склънм паюжитолнв зависимость, 8 7<г< 1

е/

а) б)

Рис. 2. Характер корреляционных связей интегральных и внутриорганных показателей на 15-е сутки постнатального развития: а) контроль, б) гипертермия.

После действия острого перегревания отмечается появление трех центров сопряженностей и отрицательных связей. В первом центре выявляются как положительные, так и отрицательные связи между показателями сосудов печеночного ацинуса с активностью ЛДГ сыворотки и цитозоля. Второй центр - сопряженность между показателями клеточной репродукции и активностью АлАТ сыворотки. Третий центр - взаимодействие показателей репаративной регенерации с активностью АсАТ цитозоля (рис. 26).

На 15 сутки развития в клеточных культурах гепатоцитов в условиях гипертермии происходит статистически значимое уменьшение числа погибших гепатоцитов. Диаметр ядер при этом уменьшается на 14% (р<0,05).

На 30-е сутки постнатального онтогенеза масса цыплят в контроле составляет 1353,33±50,87г, масса печени продолжает увеличиваться и составляет 18540±64мг, это составляет 1,4% массы тела. Гипертермия приводит к снижению массы тела цыплят на 10% (р<*0,05), в то время как масса печени возрастает на 4% (р<0,05). Случаев летальности не зарегистрировано.

К 30-м суткам развития цыплят в норме преобладающими клетками в периферической крови становятся лимфоциты, количество нейтрофильных гранулоцитов резко падает. Гипертермия вызывает снижение числа эозинофилов и лимфоцитов на фоне увеличения количества сегментоядерных псевдоэозинофилов и моноцитов. Общее количество лейкоцитов значительно не меняется. О снижении неспецифического иммунитета свидетельствует падение фагоцитарной активности на 30% (р<0,05). Активность АлАТ увеличена на 26%, АсАТ - на 22% и активность ЛДГ сыворотки крови - на 26% (р<0,05).

В печени гипертермия вызывает нарушение гемодинамики. Увеличивается просвет центральной вены, артериолы, желчного протока, синусоидных капилляров во всех зонах ацинуса. Наряду с этим выявлено увеличение толщины стснок сосудов портального тракта и центральной вены.

Вслед за изменениями кровообращения органа наблюдается реакция со стороны паренхимы печени. На 20% снижается количество живых гепатоцитов, при этом количество погибших гепатоцитов увеличено в 5 раз по сравнению с контролем (р<0,05). Отмечена повышенная активность АлАТ и ЛДГ цитозоля. Средний диаметр ядер статистически значимо снижается во всех зонах печеночного ацинуса. Впервые в этой возрастной группе обнаружено значимое снижение митотической активности и возрастание количества двуядерных гепатоцитов (табл. 8).

Корреляционный анализ выявил в контроле положительную сопряженность АлАТ сыворотки и цитозоля с общим числом митозов и связь АсАТ цитозоля с диаметром артериолы (г~0,90) (р<0,05).

Таблица 8

Размеры ядер и показатели клеточной репродукции гепатоцитов печени кур после острого перегревания на 30 сутки постнатального онтогенеза _________(М±т)_________________

Наименование показателей Контроль (п=8) Гипертермия (п=13)

Диаметр яд(ф, мкм: -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона 4,39±0,19 4,59±0,21 4,66±0,27 3,23±0,18* 3,96±0,20* 3,99±0,24*

Общая митотическая активность, %о -перипортальная зона -цегггропобулярная зона -перивенулярная зона -в трех зонах 0,47±0,05 0,33±0,03 0,23±0,04 0,34±0,04 0,45±0,03 0,20±0,02* 0,13 ±0,05* 0,23±0,05*

Количество двуядерных клеток (на 1 ООО клеток) -перипортальная зона -центролобулярная зона -перивенулярная зона -в трех зонах 17,30±0,72 16,00±1,10 22,67±1,40 18,66±1,07 21,00±1,02* 22,00±1,42* 26,70±0,90* 23,20±1,11*

* - достоверность различий по сравнению с контролем, р<0,05

После острого перегревания характер и число сопряженностей изменяется Четко проявляется центр сопряженностей между показателями сосудистого звена, активностью ЛДГ и числом митозов, сильная отрицательная связь между показателями двуядерных 1-епатоцитов и активностью АсАТ сыворотки (г=-0,82) (р<0,05).

Таким образом, анализ полученного фактического материала позволяет сделать заключение, что избранный период раннего онтогенеза кур-бройлеров характеризуется динамичным увеличением массы тела, массы печени, изменением показателей лейкоцитарной формулы, становлением сосудисто-тканевой организацией в печени и ее перестройкой по типу ацинусов, возрастанием размеров ядер гепатоцитов и постепенным снижением их митотической активности.

Острое перегревание оказывает повреждающее действие на всех изученных стадиях раннего онтогенеза. Полученные данные позволяют выделить- 1 ~ признаки, проявляющиеся во всех возрастных группах и 2 -признаки, свойственные определенной возрастной категории. Из общих признаков следует выделить усиление активности АлАТ, АсАТ, ЛДГ сыворотки крови, «сдвиг влево» лейкоцитарной формулы, увеличение доли лимфоцитов и моноцитов, снижение фагоцитарной активности и другие В печени к таким общим признакам следует отнести стойкое расширение венозного русла и капилляров, усиление сосудистой проницаемости

уменьшение диаметра ядер гепатоцитов, появление инфильтратов из клеток макрофагальной системы, увеличение числа погибших гепатоцитов

Из 2-ой группы признаков можно выделить летальность (только в эмбриогенезе), а так же особенности динамики показателей массы тела и массы печени. Так, в эмбриогенезе эти показатели после острого перегревания существенно не меняются, и это можно связать с протективным действием внезародышевых органов и, прежде всего, амниотической оболочки и аллантоиса. В то же время после вылупления установлено значимое снижение массы тела цыплят и увеличение массы печени, что опосредовано развивающейся дегидратацией организма и усилением депонирующей функции печени. Последнее иодгверждается стойким расширением кровеносных сосудов и лимфатических сосудов портального тракта. Такие индексы состояния организма, как ЛИИ и ИСЛК в эмбриогенезе проявляют отрицательную динамику, а у цыплят установлено значимое возрастание ЛИИ. Отдельный интерес представляет динамика клеточной репродукции гепатоцитов после общего перегревания: если в эмбриогенезе митотическая активность не меняется, но значимо снижается число двуядерных гепатоцитов возникающих, как известно, вследствие ацитокинетических митозов Бродский (1981), то у цыплят постепенно, от 1 до 30 суток развития определяется снижение митотической активности при повышении числа двуядерных гепатоцитов во всех зонах печеночного ацинуса. Эти данные можно рассматривать как развитие компенсаторно - приспособительных механизмов организма, происходящих в онтогенезе в норме и при действии стрессовых факторов Аналогичные данные о смене способов репродукции гепатоцитов в условиях действия альтерирующих агентов описаны Ястребовым, (1980) и Солопаевым, (1980), Мкртчан и Антоновой, (1997). Наши данные подтверждают эту закономерность.

Повышение активности АлАТ, АсАТ и ЛДГ сыворотки крови характеризуют активацию процессов цитолиза в органах, что подтверждено на примере печени во всех возрастных группах. Активация АлАТ и АсАТ в надосадочной жидкости гомогенатов печени отражает усиление метаболизма аминокислот, способствует перераспределению фонда аминокислот для синтеза структурных белков, необходимых для активации клеточной репродукции, что в целом направлено на усиление детоксикационной функции органа и выживаемость организма.

В клеточных культурах гепатоцитов in vitro показано прямое повреждающее действие острого перегревания (нарушение межклеточных контактов, увеличение числа погибших гепатоцитов, уменьшение диаметра их ядер).

Данные корреляционного анализа интегральных и внутриорганных показателей состояния сосудистого русла, клеточной репродукции и ферментативной активности подтверждают стрессовый характер общего перегревания, его повреждающее действие на организм и его системы.

ВЫВОДЫ:

1 Острое перегревание оказывает повреждающее влияние на организм цыплят-бройлеров. В эмбриональном развитии отмечена легальность у 16 суточных эмбрионов - 9%, у 18-ти суточных эмбрионов - 4%. Нарушаются интегральные и внутриорганные показатели гемодинамики и активности ферментов В постнатальном онтогенезе острое периревание приводит к значимому снижению массы тела цыплят-бройлеров на 30-е сутки, возрастанию массы печени на 15-е и 30-е сутки развития, увеличению активности аминотрансфераз и ЛДГ сыворотки, снижению фагоцитарной активности лейкоцитов и возрастанию ЛИИ

2 В печени в условиях гипертермии выявляется нарушение гемодинамики, которое приводит к дистрофическим изменениям гепатоцитов Динамика клеточной репродукции определяется возрастом особи: в эмбриональном развитии уменьшается число двуядерных гепатоцитов, в постнатальном развитии на стадии 30 суток снижается митотическая активность при значимом возрастании числа двуядерных гепатоцитов.

3 Прямое действие острого перегревания на культуры гепатоцитов ш vitro на 16-е сутки инкубации вызывает уменьшение диаметра ядер па 32% и количества живых гепатоцитов на 36% На 15-е сутки после вылупления диаметр ядер уменьшается на 13% и число живых гепатоцитов на 42%

4 Наиболее выраженное повреждающее действие острого перегревания выявлено на стадии 16 суток в эмбриональном периоде развития (9% уровень летальности, высокий процент погибших гепатоцитов, увеличена активность аминотрансфераз. снижена на 60% фагоцитарная активность лейкоцитов) и на 15-е сутки в постнатальном онтогенезе (на 60% снижение фагоцитарной активности лейкоцитов, высокий процент погибших гепатоцитов)

5 Изменения показателей периферической крови и печени отражают состояние организма при остром перегревании и подтверждают альтерирующее действие теплового стресса

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Антонова Е И Некоторые морфометрические показатели печени у животных с различной системой терморегуляции в условиях действия термального стресса /НИ Антонова, Т С Чернявская // Морфология. - 2003 №5.-С 42.

2. Антонова Е.И. Сосудис го-тканевая реакция печеночного ацинуса у гомо- и пойкилотермных животных в условиях гипертермии. / Е.И. Антонова,

B.Е. Высокогорский, 0.3. Мкртчан, Т.С. Чернявская, С.Ю. Медведева, А.В Шуплецова // Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины: III конференция молодых ученых России с международным участием, сборник тезисов. - Москва, 2004. - С. 91.

3. Мкртчан 0.3. Некоторые морфометрические показатели сосудов печеночного ацинуса птиц в онтогенезе после однократного термального стресса. / О.З. Мкртчан, Е.И. Антонова, Т.С. Чернявская // Адаптация биологических систем к естественным и экстремальным факторам среды: Материалы Всероссийской научной конференции. - Челябинск, 2004. - С. 302305.

4. Мкртчан О.З. Некоторые показатели функциональной морфологии печени эмбрионов птиц после общего однократного перегревания. / О.З Мкртчан, Т.С. Чернявская // Сб. науч. тр., посвященный 80-лстию проф. Степанова П.Ф. - Смоленск, 2004. - С. 123-128.

5. Мкртчан О.З., Антонова Е.И., Чернявская Т.С. Репаративная регенерация гепатоцитов и морфометрические показатели микроциркуляторного русла печени птиц после однократного теплового шока. // Клинико-морфологические аспекты общепатологических процессов при социально-значимых заболеваниях- Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной памяти проф. М.Я. Субботина и Ю.Г. Целлариуса. - Новосибирск, 2004.

6. Мкртчан О.З. Показатели функциональной морфологии печени кур после действия общего однократного перегревания. / О.З. Мкртчан, Т.С. Чернявская // ЮГРА-ЭМБРИО. Закономерности эмбрио-фетальных морфогенезов у человека и позвоночных животных: Материалы Международного эмбриологического симпозиума. - Ханты-Мансийск, 2004. -

C. 248-251.

7. Мкртчан О.З. Морфометрические изменения в печени птиц после действия острого однократного перегревания. / О.З. Мкртчан, Е.И. Антонова, Т.С. Чернявская // Актуальные проблемы экологической физиологии, биохимии и генетики животных: Материалы Всероссийской конференции. - Саранск, 2005 - С. 163-165.

8. Мкртчан О.З. Микроциркуляторное русло и репродукция эпителия печени птиц на разных стадиях онтогенеза после однократного перегревания. / О.З. Мкртчан, Е.И. Антонова, Т.С. Чернявская, Л.Ю. Тысло // Морфология. 2005. №4. -С. 109-110.

Отпечатано вИздательсш-полиграфическомцентреОмГМА 644099, г. Омск,ул. Ленина, 12 Тираж 100 экз.

<Í33M

РНБ Русский фонд

2006-4 25886

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Чернявская, Татьяна Сергеевна

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общие закономерности влияния острого перегревания на организм.

1.2. Функциональная морфология печени птиц в онтогенезе, в норме, в сравнительном ряду позвоночных и при действии повреждающих факторов.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 3. СОБСТВЕННЫЕ ДАННЫЕ.

3.1. Динамика показателей крови и печени эмбрионов кур при остром перегревании.

3.1.1. Действие острого перегревания на показатели крови и печени на 16-е сутки инкубации.

3.1.2. Действие острого перегревания на показатели крови и печени на 18-е сутки инкубации.

3.1.3. Действие острого перегревания на показатели крови и печени на 20-е сутки инкубации.

3.2. Динамика показателей крови и печени кур при остром

• перегревании.

3.2.1. Действие острого перегревания на показатели крови и ф печени кур на 1 сутки постнатального онтогенеза.

3.2.2. Действие острого перегревания на показатели крови и печени кур на 15-е сутки постнатального онтогенеза.

3.2.3. Действие острого перегревания на показатели крови и печени кур на 30-е сутки постнатального онтогенеза.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние острой гипертермии на организм цыплят в раннем онтогенезе"

В связи с усилением техногенного и антропогенного воздействия в последние годы выявляется опасная тенденция глобальных изменений в окружающей среде, оказывающих негативное влияние на организм животных и растений (Veiling, van Verseveld, 2000). Особое место среди факторов экологической дестабилизации занимают нарушения температурного оптимума, а именно гипо- и гипертермия. Общее перегревание организма происходит в естественных жарких климато-географических зонах, производственных, клинических и экспериментальных условиях (Александров В.Я., 1974; Султанов Ф.Ф., 1978; Александров Н.Н. и соавт. 1980; Турин В.Н., 1985; Мкртчан О.З., 1997; Худайбердиев М.Д., 1990; Истомина О.Ф., 1992; Дунаев П.В., 1996; Антонова Е И., 1999; Лукьянова Л.Е., 2004; Pechan P.M., 1991).

Повышение частоты экстремальных погодных явлений приводит к росту экономического ущерба, вызванного ими. Каждое десятилетие наблюдается рост экономических потерь от погодных явлений, в том числе и в промышленном птицеводстве (Остроумов С.А., 2005).

Организм птиц в его развитии является весьма чувствительным к температурным перепадам окружающей среды, которые происходят стихийно или по мере смены климатических условий при широтных и поясных миграциях, а так же перелетах (Вартапетов Л.Г., 2005). В связи с этим, актуальным является изучение влияния гипертермии на его органы и системы. Важную информационную значимость для оценки повреждающего действия этого абиотического фактора имеют исследования периферической крови как интегрального показателя состояния организма, и печени как органа, являющегося частью исполнительной системы организма, обеспечивающей его детоксикацию и выживаемость в нормальных и экстремальных условиях (Гичев Ю.П., 1990; Арцимович Н.Г., 1992; Истомина О.Ф., 1992, 1998, 2004; Козлов В.И., 1993).

Работы, посвященные изучению влияния гипертермии на организм, касаются преимущественно млекопитающих. Системных сведений о влиянии этого фактора на организм и отдельные системы органов у птиц в раннем онтогенезе недостаточно. Между тем, изучение влияния острого перегревания на организм птиц имерт немаловажное теоретическое значение для фундаментальной экологии и прикладное значение для промышленного птицеводства.

Работа выполнена в соответствии с планом НИР ГОУ ВПО «Омского государственного педагогического университета» «Влияние повреждающих факторов-на организм и его развитие» (№ гос. регистрации 01 9 10011014).

Цель исследования. Изучить закономерности действия острого однократного перегревания на организм кур-бройлеров в раннем онтогенезе.

Задачи исследования.

1. Выявить влияние острого перегревания на морфофункциональные показатели периферической крови' и печени цыплят в эмбриональном и раннем постэмбриональном периоде развития.

2. Изучить влияние острого перегревания на рост клеточных культур гепатоцитов in vitro.

3. Установить критические периоды повреждающего действия острого перегревания на организм птиц в условиях промышленного разведения.

Научная новизна работы.

Впервые установлено, что острое перегревание приводит к изменению морфофункциональных признаков крови как интегрального системного показателя состояния организма (снижение фагоцитарной активности, повышение активности ферментов маркеров цитолиза и окислительных процессов, сдвиг лейкоцитов «влево», возрастание ЛИИ). Обнаружено нарушение гемодинамики, уменьшение диаметра ядер гепатоцитов, изменение способов репродукции, активности процессов трансаминирования и окисления в печени кур как в исполнительном органе детоксикации и выживания. Выявлено прямое повреждающее действие острого перегревания на рост клеточных культур гепатоцитов и установлена корреляционная связь между изученными показателями.

Теоретическая и практическая значимость.

В ходе комплексных исследований показано изменение функционально - морфологических показателей крови (активность АлАТ, АсАТ, ЛДГ, количество лейкоцитов и их фагоцитарная активность, ЛИИ, ИСЛК) и печени (диаметр просвета сосудов портального тракта, центральной вены и синусоидных капилляров, диаметра ядер, уровень митотической активности и число двуядерных гепатоцитов) при действии острого перегревания, как повреждающего фактора, в раннем онтогенезе птиц.

Определены критические периоды в раннем онтогенезе птиц, с наиболее выраженным проявлением повреждающего действия острого перегревания в условиях промышленного разведения. Полученные результаты могут быть использованы для экологического мониторинга в промышленном птицеводстве.

Внедрение результатов исследования.

Материалы диссертации используются в курсах «Общая экология», «Зоология позвоночных», «Цитология», «Гистология с основами эмбриологии», при выполнении студентами ВКР на химико-биологическом факультете ГОУ ВПО «Омского государственного педагогического университета», на кафедре патологической анатомии Института ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет», на кафедре гистологии, цитологии, эмбриологии и медицинской биологии ОГМА, . на ЗАО «П/Ф «Сибирская» в технологическом процессе.

Апробация результатов научных исследований.

Основные положения диссертационной работы доложены на III конференции молодых ученых России «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004), на Всероссийской научной конференции «Адаптация биологических систем к естественным и экстремальным факторам среды» (Челябинск, 2004), на Международном эмбриологическом симпозиуме «Закономерности эмбриофетальных морфогенезов у человека и позвоночных животных» (Ханты-Мансийск, 2004), на Всероссийской научно-практической конференции «Клинико-морфологические аспекты общепатологических процессов при социально-значимых заболеваниях» (Новосибирск, 2004), на Всероссийской конференции «Актуальные проблемы экологической физиологии, биохимии и генетики животных» (Саранск, 2005), на семинаре химико-биологического факультета ОмГПУ (Омск 2003, 2004).

Публикации результатов исследования. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ.

Объем и структура диссертации.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Чернявская, Татьяна Сергеевна

ВЫВОДЫ

1. Острое перегревание оказывает повреждающее влияние на организм цыплят-бройлеров. В эмбриональном развитии отмечена летальность у 16 суточных эмбрионов - 9%, у 18-ти суточных эмбрионов -4%. Нарушаются интегральные и внутриорганные показатели гемодинамики и активности ферментов. В постнатальном онтогенезе острое перегревание приводит к значимому снижению массы тела цыплят-бройлеров на 30-е сутки, возрастанию массы печени на 15-е и 30-е сутки развития, увеличению активности аминотрансфераз и ЛДГ сыворотки, снижению фагоцитарной активности лейкоцитов и возрастанию ЛИИ.

2. В печени в условиях гипертермии выявляется нарушение гемодинамики, которое приводит к дистрофическим изменениям гепатоцитов. Динамика клеточной репродукции определяется возрастом особи: в эмбриональном развитии уменьшается число дву ядерных гепатоцитов, в постнатальном развитии на стадии 30 суток снижается митотическая активность при значимом возрастании числа двуядерных гепатоцитов.

3. Прямое действие острого перегревания на культуры гепатоцитов in vitro на 16-е сутки инкубации вызывает уменьшение диаметра ядер на 32% и количества живых гепатоцитов на 36%. На 15-е сутки после вылупления диаметр ядер уменьшается на 13% и число живых гепатоцитов на 42%.

4. Наиболее выраженное повреждающее действие острого перегревания выявлено на стадии 16 суток в эмбриональном периоде развития (9% уровень летальности, высокий процент погибших гепатоцитов, увеличена активность аминотрансфераз, снижена на 60% фагоцитарная активность лейкоцитов) и на 15-е сутки в постнатальном онтогенезе (на 60% снижение фагоцитарной активности лейкоцитов, высокий процент погибших гепатоцитов).

5. Изменения показателей периферической крови и печени отражают состояние организма при остром перегревании и подтверждают альтерирующее действие теплового стресса.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Чернявская, Татьяна Сергеевна, Омск

1. Автандилов Г.Г. Морфометрия в патологии / Г.Г. Автандилов. - М: Медицина, 1973.-248 с.

2. Автандилов Г.Г. Введение в количественную патологическую морфометрию / Г.Г. Автандилов. М.: Медицина, 1980. - 216 с.

3. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов. М: Наука, 1990.-340 с.

4. Адоева Е.Я. Изучение синтеза трансферрина и ферретина в стимулированных гепатоцитах / Е.Я. Адоева, А.В. Полевщиков, Т.П. Степанова // Цитология. 1994. - Т. 36. - № 6. - С. 509-511.

5. Адыширин-Заде Э.А. Факторы регуляции местного кровотока и их роль в патогенезе и лечении заболеваний / Э.А. Адыширин-Заде, П.А. Гелашвили, Е.С. Бабалянц, О.А. Гелашвили // Морфология. 1996. -№ 2. - С. 28.

6. Ажаев А.Н. Функциональные изменения в организме человека при различеых условиях гипертермии / А.Н. Ажаев // III Всес. конф. по авиац. и косм, медицине: Сб. научн. тр. -М., 1969. Т. 1. - С. 5-10.

7. Азаубаева Г. Гематологические показатели и естественная резистентность у гусят разных пород / Г. Азаубаева, С. Суханова, А. Твердохлебов // Птицеводство. 2004. - № 9. - С. 31.

8. Акилов А.Т. Печень как кроветворный орган в филогенезе позвоночных животных / А.Т. Акилов, Л.М. Заремская, М.А. Нишанбаева // Физиол. и патол. печени: Сб. науч. тр. Ташкент, 1975.-С. 136-138.

9. Александров В.Я. Клетки, макромолекулы и температура / В.Я. Александров. Л.: Наука, 1974. - 149 с.

10. Ю.Александров Н.Н. Применение гипертермии и гипергликемии при лечении злокачественных опухолей / Н.Н. Александров, Н.Е. Савченко, С.З Фрадкин, Э.А. Жаврид. М.: Медицина, 1980. - 256 с.

11. П.Алешина Т.В. Исследование активности протеолитических ферментов в тканях мозга, печени, сердечной и скелетной мышц у перегретых животных / Т.В. Алешина // XXY научн. конф.: Мастер конф. Смоленск, мед. ин-та. Смоленск, 1967. - С. 221.

12. Алимова Е.К. Динамика некоторых показателей обмена липидов при острой гипертермии / Е.К. Алимова, А.А. Бирюкова, А.П. Шепелев // Физиол. журнал. -1971. Т.7, №8. - С. 1188-1191.

13. Алишев Н.В. Об отдаленных последствиях острого глубокого охлаждения / Н.В. Алишев, Г.А. Акимов, В.В. Колосов // Труды ВМОВА им. С.М. Кирова. Л., 1964. - Т. 161. - С. 62-71.

14. Алматов К.Т. О фосфолипидном составе мембран митохондрий печени при тепловых стрессах / К.Т. Алматов, Х.Н. Мусоев, З.Х. Кадирова // Вопр. мед. химии. 1994. - № 2. - С. 48-52.

15. Амвросьев А.П. Адренергическая и холинергическая иннервация органов пищеварительной системы / А.П. Амвросьев Минск: Наука и техника, 1977. - 173 с.

16. Анисимова-Александрова В.В. Гистология легких в условиях острого нагревания организма /В.В. Анисимова-Александрова, И.Е Синявская, Ж.А. Яковлева, Г.М. Стадников // Сб. научн. тр. Смоленского, мед. ин-та. Смоленск, 1970. - Т. 32. - С. 45-48.

17. Анохин П.К. // В кн.: Эволюция темпов индивидуального развития животных. -М., 1977. С. 9-18.

18. Антонова Е.И. Гисто-энзиматические корреляции печени при действии на организм крыс повреждающих факторов: автореф. . кан. биол. наук / Е.И. Антонова. Омск, 1999. - 23 с.

19. Арцимович Н.Г. Печень как орган иммунобиологической системы гомеостаза / Н.Г.Арцимович, Н.Н. Настоящая, Д.Б. Казанский, М.С. Ломакин // Успехи совр. биологии. 1992. - Т.112, Вып. 1. - С. 116-124.

20. Барбараш Н.А. Периодическое действие холода и устойчивость организма / Н.А. Барбараш // Успехи физиологических наук. 1996. -т. 27. -№ 4.-С.116-132.

21. Бахадиров Ф.Н. Адаптация кровеносных сосудов печени к различным экспериментальным воздействиям / Ф.Н. Бахадиров, Ф.Х. Алимходжаев, В.А. Швердин, А.Д. Жаксимуратова // Арх. анат. гист. и эмбр. Т. 105. Вып. 9-10. - 1993. - С. 46.

22. Бахадиров Ф.Н. Микрососуды печеночных комплексов после резекции печени на фоне токсического поражения / Ф.Н. Бахадиров, З.М. Сатаева, В.А. Швердин // Морфология. 1996. - № 2. - С. 34.

23. Белинская A.M. МорфО-гистохимическая характеристика печени при выключении ее из кровообращения в условиях нормо- и гипотермии и при изолированной перфузии: автреф. . канд. мед. наук / A.M. Белинская. Новосибирск, 1970. - 18 с.

24. Белобородов Г.С. О специфичности закаливания к охлаждениям в условиях Крайнего Северо-Востока России / Г.С. Белобородов // Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии: Сб научн. Тр. Томск, 2004. Т. 3. - № 1.-С. 134-135.

25. Бердник О.В. Чувствительность организма к факторам окружающей среды. Индивидуальная чувствительность / О.В. Бердник // Environ and Yealth. 2000. - № 1. - С. 38-41.

26. Бессарабов Б.Ф. Практикум по инкубации яиц и эмбриологии сельскохозяйственной птицы / Б.Ф. Бессарабов. М.: Агропромиздат. -1985.- 175 с.

27. Бессчетнов И.И. Динамика информационных характеристик химического состава развивающихся органов куриных эмбрионов /

28. И.И. Бессчетнов, О.Г. Чораян // Архив анат. гист. и эмбр. 1981. -T.LXXXI. - № 11. - С. 89-92.

29. Бетлинг Е.С. ФЛС-микс лечебный премикс для профилактики и лечения синдрома жировой дистрофии печени у кур-несушек и родительского стада / Е.С. Бетлинг // Био. - 2005. - № 4. - С. 28.

30. Биология клетки в культуре. / А.С.Трошин. Л.: Наука, 1984. - 280 с.

31. Блюгер А.Ф. Ультраструктурная патология печени / А.Ф. Блюгер, В.К. Зальцмане, О .Я. Карташова. Рига: Знание, 1989. - 319 с.

32. Блюгер А.Ф. Новое в гепатологии. Методы, факты / А.Ф. Блюгер. -Рига: Рим, 1988.- 180 с.

33. Болотников И.А., Михкиева B.C., Олейник Е.К. Стресс и иммунитет у птиц / И.А. Болотников. Л.: Наука, 1983. - 118 с.

34. Бочаров Ю.С. Эволюционная эмбриология позвоночных / Ю.С. Бочаров. — М.: Изд-во Московского ун-та., 1988. 232 с.

35. Бродский В.Я. Дистантное взаимодействие клеток в культуре гепатоцитов / В.Я. Бродский, Н.В. Нечаева, Т.Е. Новиков, В.И. Фатеева // РАН биол. Серия. 1994.-№ 6. - С. 946.

36. Бродский В.Я. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка / В.Я. Бродский. М.: Наука, 1981. - 260 с.

37. Быков В.Л. Морфологические изменения щитовидной железы крыс при остром перегревании / В.Л.' Быков, М.В. Константинов // Патол. физиол. и эксп. терапия. 1976. - № 4. - С. 57-61.

38. Валовая М.А., Кавтарадзе Д.Н. Микротехника правила приема, искусство эксперимента / М.А. Валовая. М.: Московский Университет, 1993. - 240 с.

39. Вартапетов Л.Г. Широтная зональность и высотная поясность зимнего населения птиц Западной и Южной Сибири / Л.Г. Вартапетов, С.Г. Ливанов, С.М. Цыбулин // Экология, 2005. № 1. - С. 69-72.

40. Верин В.К. Дифференцировка гепатоцитов и холангиоцитов в эмбриональном и постэмбриональном периодах онтогенеза крыс / В.К.

41. Верин // Арх. анат. гистол. эмбриол. 1982, Т.82. - № 2. - С. 106-114.

42. Верин В.К. Дивергентная дифференцировка гепатоцитов и холангиоцитов при эмбриональном и репаративном гистогенезе печени / В.К Верин., И. Козак // Морфология. 1996. - Т 109. - № 2. - С. 41.

43. Вишневская Е.К. Клетки синусоидных сосудов печени / Е.К. Вишневская //Морфология. 1993. - Т 104. С. 135-147.

44. Вракин В.Ф. Анатомия и гистология домашней птицы / В.Ф. Вракин, М.В. Сидорова-М.: Колос. 1984.-288 с.

45. Гасенова З.Я. Аскорбиновая кислота и глютатион в условиях гипер- и гипотермии: автореф. . канд.- биол. наук / З.Я. Гасенова. Баку, 1973. -22с.

46. Гематология птиц / И.А. Болотников. JL: Наука, 1980. - 116 с.

47. Гепатоцит: Функционально-метаболические свойства / Л.Д. Лукьянова. -Москва.: Наука, 1985.-271 с.

48. Гичев Ю.П. Роль печени в стрессовых реакциях организма / Ю.П. Гичев // Усп. физиол. наук. 1990. - Т. 21. - № 1. - С. 23.

49. Гичев Ю.П. Печень адаптация и экология / Ю.П. Гичев. -Новосибирск: Наука, 1993. - 152 с.

50. Гичев Ю.П. Здоролвье человека как индикатор экологического риска индустриальных регионов / Ю.П. Гичев. // Вестник РАМН. 1995. - № 8.-С. 52-55.

51. Горизонтов П. Д. Стресс и система крови / П. Д. Горизонтов, О.И. Белоусова, М. И. Федотова. М.: Медицина, 1983. - 240 с.

52. Григорьев Н.И. Строение и регенерация печени после ее местного повреждения / Н.И. Григорьев. Ленинград: Медицина, 1975. - 179 с.

53. Гужова И.В. Влияние теплового шока на процессы дифференцировки и апоптоза в клетках U-937 / И.В. Гужова, Е.Б. Ласунская, К. Нильсон, З.А. Дариева Б.А. Маргулис // Цотология. 2000. - Т 42. - № 7. - С. 653.

54. Турин В.Н. Актуальные проблемы экспериментального изучения температурной реакции и сопряженных сдвигов метаболических процессов / В.Н. Турин // Физиол. и фармокол. терморегуляции. -Минск: МГМИ, 1985. С. 6-15.

55. Гусельников А. Влияние некоторых экологических факторов на ранний онтогенез птиц / А. Гусельников // Экология: проблемы и пути решения: Тезисы докладов 10 Всероссийской научно-практической конференции. Пермь, 2002. С. 34-36.

56. Данилов А.П. Морфология печени кур в норме, при рентгеновском облучении и добавках в кормовой рацион микроэлементов: автореф. . кан. вет. наук / А.П. Данилов. Омск, 1978. - 20 с.

57. Данилов-Данильян В.И. Экологическая безопасность / В.И. Данилов-Данильян, М.И. Залиханов, К.С. Лосев. М.: МНЭПУ, 2001. - 332 с.

58. Дегонский А.И. Гипоталамо-аденогипофизарно-надпочечниковая нейросекреторная система в условиях гипертермии / А.И. Дегонский // Бюлл. Эксп. биол. Мед. 1973. - Т. 75. - № 3. - С. 32-34.

59. Довганский А.П. Печень при экстремальных состояниях / А.П. Довганский, Б.М. Курцев, Т.А. Зорькина. Кишинев: Штиинца. - 1989. -136 с.

60. Долгова З.Я. К характеристике функционального состояния щитовидной железы при гипертермии / З.Я. Долгова, Ф.Д. Разяпова // Бюлл. эксп. биол. мед. 1972. - Т. 73. - № 3. - С. 29-32.

61. Долгова З.Я. Структурно-метаболические и функциональные сдвиги в организме при общем перегревании и переохлаждении: автореф. . док. биол. наук. / З.Я. Долгова. Ашхабат, 1972. - 22 с.

62. Дорофеев А.А. Морфология кровеносного и лимфатического русел печени при ожоговой болезни в эксперименте / А.А. Дорофеев // Арх. анат. гист. и эмбр. 1981. - № 3- - С. 82-88.

63. Дунаев П.В. Реакция ткани печени на воздействие экстремальных факторов в онтогенезе / П.В. Дунаев, Г.С. Соловьев, Л.П. Туровинина, О.Ф. Истомина // Морфология. 1996,- № 2. - С. 50.

64. Дядичкина Л. Оптимальные температура и влажность в инкубаторе / Л. Дядичкина, О. Главатских, Н. Позднякова // Птицеводство, 2003. № 2. -С. 4-5.

65. Зуфаров К.А. Электронная микроскопия органов пищеварительной системы (Атлас) / К.А. Зуфаров, П.И. Ташкоджаев. Ташкент: Медицина, 1969. - 123 с.

66. Иванов Д.Е. Нарушение функций печени при травматическом стрессе / Д.Е. Иванов, Д.М. Пучиньян // Усп. физиол. наук. 1998. - Т.29. - № 1. -С. 58-71.

67. Исламов Т.М. Радиационные изменения синтеза белков печени цыплят в различные сроки постнатального развития / Т.М. Исламов, Г. Хожиахмедов // Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. - Т. 34. -Вып. 3.-С. 375-377.

68. Истомина О.Ф. Структурные и гистохимические изменения печени при остром перегревании организма в постнатальном онтогенезе: автореф. . кан. биол. наук / О.Ф. Истомина. Тюмень, 1992. - 18 с.

69. Калашникова М.М. Особенности ультраструктуры клеток печени в сравнительно-морфологическом ряду животных и их значение / М.М. Калашникова//Бюллетень экспериментальной биологии 1996. Т. 121. - № 6. - С. 604-609.

70. Калашникова М.М. Ультраструктура клеток печени некоторых растительноядных животных. / М.М. Калашникова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1994. - № 3. - С. 309-312.

71. Кальф Калиф Я.Я. // Хирургия.- 1939,- № 7. с. 40-44.

72. Каппас А. Превращение чужеродных веществ в печени / А. Каппас, А Альварес // Молекулы и клетка. 1977. - Вып. 6. - С. 287-303.

73. Карташова О.Я. Микроциркуляторное русло / О.Я. Карташова, В.К. Зальцман, JI.A. Зариня, И.С. Голубцов // Закономерности морфогенеза в норме, патологии и индивидуальном развитии: Сб. науч. тр. / РМИ -Рига, 1977.-С. 130-135.

74. Карташова О.Я. Функциональная морфология печени / О.Я. Карташова, JI.A. Максимова. Рига: Знание, 1979. - 118 с.

75. Карупу В.Я. Нервы печени и их реактивные свойства / В.Я. Карупу -Киев: Наукова Думка, 1967. 200 с.

76. Катаева С.И. Непрямая электоростимуляция лимфообразующей и эритропоэтической функции печени / С.И. Катаева, JI.H. Катаева // Морфология. 1996. - № 2.-С. 58.

77. Кириллов О.И. Процессы клеточного обновления и роста в условиях стресса / О.И. Кириллов. М.: Наука, 1977. - 118 с.

78. Кирпатовский И.Д. Типичная форма и основные варианты анатомического строения внутрипеченочного отдела воротной вены / И.Д. Кирпатовский, Н.И. Мосйн // Архив АГЭ, 1970. Т. 96.

79. Козлов В.И. Патобиохимия и патология перегревания: Сб. науч. тр. Смоленского мед. ин-та. 1993. С. 87-88.

80. Козлов В.И. Структурно-функциональные единицы в системе микроциркуляции крови / В.И. Козлов // Морфология. 1996.- № 2. - С. 59.

81. Козлов Н.Б. Аммиак, его обмен и роль при патологии / Н.Б. Козлов. -М.: Медицина, 1971. 127 с.

82. Козлов Н.Б. Гипертермия: биохимические основы патогенеза, профилактики, лечения / Н.Б. Козлов. Воронеж: Изд-во ВГУ, 1990. -104с.

83. Коваленко И.Я. Морфофункциональная организация и регуляция микроциркуляторной системы печени / И .Я. Коваленко // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1978. -№8.-С. 86-91.

84. Константинов М.В. Сердечная мышца в динамике острого перегревания организма / М.В. Константинов, Л.П. Толстова // Патол. физиол. и экспер. терапия. 1975. - № 4. - С. 36-40.

85. Копаладзе Р. А. Методы эвтаназии экспериментальных животных -этика, эстетика, безопасность персонала / Р.А. Копаладзе // Успехи физиол. наук. 2000. - Т. 31. - № 3. - С. 79-90.

86. Культивирование клеток животных и человека / Пудков С.Я. -Пущино, 1992.- 127 с.

87. Куниский Д.Г. Влияние метионина, витаминов Bi2 и Bi5 на содержание и распределение в дольке печени цыплят белка, гликогена и липидов / Д.Г. Куниский // Арх. анат. гист. и эмбр. 1980. - № 10. - С. 97-101.

88. Куприянов В.В. Микроциркуляторное русло / В.В. Куприянов, Я.Л. Караганов, В.И. Козлов. М.: Медицина, 1975. - 214 с.

89. Кутырева Т.С. Изучение физиологических деструкций и митозов в эмбриональном гистогенезе печени кур: автореф. . кан. биол. наук / Т.С. Кутырева. М, 1975. - 20 с.

90. Куцый М.П. Влияние ионизирующей радиации на активность протеиназ ядерного матрикса гепатоцитов крыс / М.П. Куцый, А.Ю. Мартынов // Тезисы I Всесоюз. радиобиол. съезда. Пущино, 1989. -Т.1.-С. 151.

91. Лакин Г. Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1990. - 352 с.

92. Логинов А.С. Клиническая морфология печени / А.С. Логинов, Л.И. Аруин. М.: Медицина, 1985. - 240 с.

93. Лукьянова Е.С. Патоморфологические изменения в печени при синдроме длительного сдавливания и его лечении лизосомотропным препаратом: автореф. . канд. мед. наук. / Е.С. Лукьянова -Новосибирск, 1995. 21с.

94. Лукьянова Л.Е. Экологически дестабилизированная среда: влияние на население мелких млекопитающих / Л.Е. Лукьянова, О.А. Лукьянов // Экология. 2004. - № 3. - С. 210-217.

95. Лупандин Ю.В. Энергетический обмен, терморегуляция и температурная адаптация / Ю.В. Лупандин, Г.И. Кузьмина. -Петрозаводск. 1990. - 56 с.

96. Макаров П.В. Наблюдения над аппаратом Гольджи и отложением трипановой синьки в печеночных клетках различных позвоночных / П.В. Макаров. Русск. архив анат. и гист. - 1926. - № 5. -С. 157-171.

97. Маленков А.Г. Межклеточные контакты и реакции ткани / А.Г. Маленков, Г.А. Чуич. М.: Медицина, 1979. - 135 с.

98. Мартынова Н.А. Механизмы нарушения резистентности организма в условиях экологической нестабильности / Н.А. Мартынова // Экология человека. 1997. - № 1.-С. 10-16.

99. Манухина Е.Б. Увеличение продукции оксида азота в органах крыс при тепловом шоке / Е.Б. Манухина, И.Ю. Малышев, В.Д. Микоян, Л.Н. Кубрина, А.Ф. Ванин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996. - № 5. - С 520-524.

100. Манухина Е.П. Защитный эффект окиси азота при тепловом шоке / Е.П. Манухина, Д.А. Покшдышев, Е.Б. Маленюк, И.Ю. Малышев, А.Ф. Ванин // РАН. 1997. - № 7. - С. 54-58.

101. Мельман Е.П. Функциональная морфология инервации органов пищеварительной системы / Е.П. Мельман. М.: Медицина, 1970. -270 с.

102. Меркулов Г.А. Курс гистологической техники / Г.А. Меркулов. -JI.: Медгиз, 1961.-350 с.

103. Методы биохимических исследований / М.И. Прохорова. Л.: Универ-т, 1982.-380 с.

104. Мкртчан О.З. Микроциркуляторное русло и репродукция эпителия печени птиц на разных стадиях онтогенеза после однократного перегревания / О.З. Мкртчан, Е.И. Антонова, Т.С. Чернявская, Л.Ю. Тысло // Морфология. 2005. - № 4. - с. 109-110.

105. Мкртчан О.З. Рост и дифференцировка эпителия почки и печени после острого перегревания / О.З. Мкртчан, Е.И.Антонова, А.В. Индутный, В.Е. Высокогорский // Морфология. -1996. -№ 2. С. 73.

106. Мусаева Д.Б. Влияние антиоксидантов на морфологические показатели печени при интоксикации / Д.Б. Мусаева, Ф.К. Клычева, Д.Х. Юлдашева // Морфология. 2004. - Т 126. - С. 84.

107. Огородникова Л.Г. Глюкозо-6-фосфатаза и ее физиологическая роль / Л.Г. Огородникова. Л.: Наука, 1986. - 122 с.

108. Отрыганьев Г.К. Болезни эмбрионов птиц / Г.К. Отрыганьев, Ю.В. Исаев, Б.Ф. Бессарабов. М.: Россельхозиздат. 1981. - 136 с.

109. Отрыганьев Г.К. Технология инкубации / Г.К. Отрыганьев, А.Ф. Отрыганьева. М.: Росагропромиздат. 1989. - 189 с.

110. Паевский В.А. Адаптивная сущность сезонных миграций: опасны ли для птиц их сезонные перелеты? / В.А. Паевский //Зоол. журн. -1999. Т. 78. - Вып. 3. - С. 303-310.

111. Панин Л.Е. Биохимические механизмы стресса / Л.Е. Панин. -Новосибирск, 1983. 164 с.

112. Пенионжкевич Э.Э. Разведение и племенное дело в птицеводстве / Э.Э. Пенионжкевич. М.: 1982. 145 с.

113. Печень: адаптация, экология / Гичев Ю.П. Новосибирск: ВО Наука, Сибирская издательская фирма, 1993. - 152 с.

114. Пехович A.M. О морфологических изменениях некоторых внутренних органов при гипертермии и гибернации / A.M. Пехович // Науч. тр. Т. 13. - Черновцы, I960. - С. 348-353. ф 127. Подымова С.Д. Болезни печени / С.Д. Подымова. - М.:1. Медицина, 1993.-352 с.

115. Покровский А.А. Печень, лизосомы и питание / А.А. Покровский, Л.П. Крыстев. София (Болгария), 1977. - 208 с.

116. Положий Е.А. Влияние облучения и глюкокортикоидов на активность 5'- нуклеотидазы плазматических мемебран печени крыс / Е.А. Положий // Тезисы 1 Всесоюз. радиобиол. съезда. Пущино, 1989. -Т.1.-С. 78.

117. Половая дифференцировка функций печени / В.Б. Розен, Г.Д. ® Матарадзе, А.Н. Смирнов. М.: Медицина, 1991. - 336 с.

118. Профилактика и лечение заболеваний животных и птиц: Сб. науч. тр./ Одесск. сельхозинститут. Одесса. - 1990. - 96 с.

119. Проблемы космической биологии / А.Н. Ажаев. М.: Наука. -* 1979.-264 с.

120. Рагозина М.Н. Развитие зародыша домашней курицы / М.Н. Рагозина. М.: Изд-во Академии наук СССР - 1961. - 168 с.

121. Розен В.Б. Половая дифференцировка функций печени / В.Б. Розен, Г.Д. Матарадзе, О.В. Смирнова, А.Н. Смирнов. М.: Медицина, 1991.-200 с.

122. Рольник В.В. Биология эмбрионального развития птиц / В.В. Ф Рольник. Наука, Ленингр. отд., Л. - 1968. - 425 с.

123. Романов В.И. Площадь функционирующих капилляров в поджелудочной железе перегретых животных один из показателей глубины острой гипертермии / В.И. Романов // Тез. докл. - Смоленск, 1973.-С. 61-63.

124. Сеферова Р.И. Биоэнергетические процессы в печени при остром перегревании / Р.И. Сеферова, И.Д. Маненкова, А.Х. Бабаева // Изв. АНТССР. биол серия. 1976. - № 2. - С. 7-12.

125. Слоним А. Д. Температура среды обитания и эволюция температурного гомеостаза. / А.Д. Слоним // Физиология терморегуляции. Л., 1984. - С. 378-440.

126. Смолов С.А. Состояние органов иммунной системы у эмбрионов и цыплят в зависимости от температурных условий инкубации яиц / С.А. Смолов: автореф. . канд. с.-х. наук, 2002. 19 с.

127. Соколов JI.B. Популяционная динамика воробьиных птиц / JI.B. Соколов // Зоол. журн. 1999. - Т. 78. - Вып. 3. - С. 311-324.

128. Сондоре В.Ю. Разделение билирубина и его коньюгатов в тонком слое / В.Ю. Сондоре, Г.К. Громова // Материалы IV Всерос. конф. по клинической биохимии и клинической морфологии инфекционных болезней. Рига, 1973. - С. 365-366.

129. Стапль Э. // В кн.: Биогенез природных соединений. М., 1965. -С. 141-161.

130. Султанов Ф.Ф. Гипертермия: компенсация и недостаточность / Ф.Ф. Султанов. Ашхабад: Ылым, 1978. - 224 с.

131. Султанов Ф.Ф. Кровообращение при гипертермии / Ф.Ф. Султанов, Б.И. Ткаченко, Г.Ф. Султанов. Ашхабад: Ылым, 1988. - 344 с.

132. Султанова У.К. Изменение жирнокислотного состава и перикисного окисления липидов при экспериментальном поражениипечени / У.К. Султанова, С.О. Олимова // Проблемы гастроэнтерологии. 1994. - № 3-4. - С. 34.

133. Таидзе М.С. О некоторых особенностях русла внутрипеченочных желчных протоков / М.С. Таидзе. // Тез. Докл. VIII Всесоюз. Съезда анатомов, гистологов и эмбриологов. -М., 1974.

134. Таскаев И.И. Гистохимические и цитологические изменения в печени при экспериментальной интоксикации и последующей беременности / И.И. Таскаев //Арх. анат. гист. и эмбр, 1979. - №2. - С. 49-54.

135. Ташке К. Введение в количественную цитологию и морфологию / К. Ташке. -М.: Медицина, 1980. 180 с.

136. Тейлор Б.С. Индуцибельная синтаза окиси азота в печени: регуляция и функции / Б.С. Тейлор, JI.X. Аларсон, Т.Р. Биллиар // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 7. - С. 905-923.

137. Техвер Ю.Т. Гистология пищеварительных органов домашних животных в 2-х т. / Ю.Т. Техвер. М.: Наука - 1974. - 406 с.

138. Тиллис А.Ю. Гипотермия / А.Ю. Тиллис // Патологическая физиология экстремальных состояний. М., 1973. - С. 202-222.

139. Третьяков Н.П. Инкубация с основами эмбриологии / Н.П. Третьяков. -М.: Колос, 1978. 304 с.

140. Труфская В.А. Иммунологические показатели формирования экологически обусловленной патологии / В.А. Труфская, Х.А. Тружова // Вестник РАМН. 1994. - № 7. - С. 15-18.

141. Туровинина Л.П. Структурная и гистофизиологическая характеристика в онтогенезе и эксперименте / Л.П. Туровинина // Структурные изменения в органах и тканях при различных воздействиях: Сб.науч.тр. / ТАШМИ. Ташкент, 1982. - С. 14-15.

142. Тюков И.А. Патоморфология поджелудочной железы при общей острой гипертермии / И.А. Тюков // Бюлл. эксп. биол. мед. 1970. - Т. 70.-№ 12.-С. 98-101.

143. Урываева И.В. Развитие ядерных аномалий в переживших генетические поврежденных клетках печени / И.В. Урываева, Г.В. Делоне, Т.Д. Маршак // Цитология. 1997. - Т.39, №1. - С. 112-113.

144. Ушаков В.Ф. Исследование реакции контактной поверхности гепатоцита при воздействии химических веществ с целью гигиенического регламентирования: автореф. дис. . д-ра биол. наук. / В.Ф. Ушаков. М. - 1992. - 35 с.

145. Федоров Б.М. Стресс и система кровообращения / Б.М. Федоров. М.: 1991.-245с.

146. Федоров Н.А. Патогенное действие термического фактора / Н.А. Федоров // Патологическая физиология экстремальных состояний. -М., 1973.-С. 180-200.

147. Федоров Н.А. Патологическая физиология экстремальных состояний / Н.А. Федоров. М., 1973. - 220 с.

148. Филимонова Г.Ф. Реактивные изменения тканей печени различных позвоночных в условиях аутотрансплантации: автореф. . кан. биол. наук / Г.Ф. Филимонова. Л., 1967. - 20 с.

149. Фисинин В.И. Эмбриональное развитие птицы / В.И. Фисинин, И.В. Журавлев, Т.Г. Айдинян. / Всесоюз. акад. с. х. наук им. В.И. Ленина. М.: Агропромиздат, 1990. - 240 с. ф 175. Фишер А. Физиология и экспериментальная патология печени /

150. А. Фишер. Будапешт. Изд-во АН Венгрии, 1961. - 264 с.

151. Халилов Ф.Х. Материалы к гистологии и гистохимии поджелудочной железы и печени костистых рыб / Ф.Х. Халилов // Вопр. ихтиол., 1968. № 2, С. 312-317.

152. Халилов Ф.Х. Материалы по морфологии и гистохимии пищеварительной системы костистых рыб / Ф.Х. Халилов. Алма-Ата, 1969.

153. Халилов Ф.Х. К сравнительной морфологии кишечника и ® гепатопанкреас некоторых карповых рыб В кн.: Рыбные ресурсыводоемов Казахстана и их использование / Ф.Х. Халилов, И.А. Бармина. Алма-Ата, 1966. - Т. 5. - С. 339-345.

154. Хонин Г. А. Морфологические методы исследования в ветеринарной медицине / Г.А. Хонин, С.А. Барашкова, В.В. Семченко. Омск: Омская областная типография, 2004. - 198 с.

155. Худайбердиев М.Д. Терморегуляция организма в жарком климате / М.Д. Худайбердиев. Ашхабад: Ылым, 1990. - 184 с.

156. Челидзе П.В. Трехмерная организация ядрышка и ядрышкообразующих районов дифференцируемых клеток / П.В.

157. Челидзе, Т.В. Мдивани, Д.В. Дзидзигури, Е.О. Черкезия, Т.Г.

158. Туманишвили, Г.Д. Туманишвили // Цитология. 1992. - Т.34. - № 9. -С. 17-25.

159. Ченцов Ю.С. Биоэнергетические, цитохимические тонкториальные свойства гепатоцитов в норме, при функциональных нагрузках, адаптациях к изменениям среды и при неспецифических повреждениях / Ю.С. Ченцов, М.И. Косых // Цитология. 1995. - № 2.

160. Чернух A.M. Феномен перераспределения крови в системе микроциркуляции печени / A.M. Чернух // Вест. АН. СССР. 1976. -№.6. - С. 74-84.

161. Чернышенко JI.B. Развитие иммунных структур печени / JI.B. Чернышенко, Л.И. Остаток // Морфология. 1993. - Т.105. - вып. 9-10.-С. 171.

162. Шкурупий В.А. Ультраструктура клеток печени при стрессе / В.А. Шкурупий. Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1989. - 114 с.

163. Шмальгаузен И.И. Рост и дифференцировка. Избр. Тр. В 2-х томах / И.И. Шмальгаузен. Киев: Наук. Думка. - 1928.- Т. 1. - 176 с.

164. Шмальгаузен И.И. Основы сравнительной анатомии позвоночных животных / И.И. Шмальгаузен. М.: Госуд-е изд-во Советская наука. - 1947. - 502 с.

165. Щеголев А.И. Структурно-метаболическая характеристика синусоидальных клеток печени / А.И. Щеголев, О.О. Мишнев // Успехи соврем, биол. 1991. - Т. 111. -№ 1. - С. 73-82.

166. Юй Р.Н. Изменение печени при комбинированном действии стресс-факторов / Р.Н. Юй, Л.И. Наумова // Морфология. 1996. - № 2.-с. 108.

167. Юнкеров В.И. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований / В.И. Юнкеров, С.Г. Григорьев. СПб.: ВМеда, 2002. - 266 с.

168. Яковлева Ж. А. Патологические и компенсаторно-приспособительные процессы в легких при остром перегревании организма и их обратное развитие: автореф. . канд. мед. наук / Ж.А. Яковлева Смоленск, 1978. - 22 с.

169. Ямскова В.П. Роль межклеточной адгезии гепатоцитов в процессах спонтанного гепатобластомогенеза / В.П. Ямскова, Н.Б. Туманова. // Успехи соврем, биол. 1996.- Т. 116, вып. 2. - С. 194-205.

170. Ademeyiva О., Adesanya О., Ajuwon R. Vitamin С in CCL4hepatokxidy. Apreliminary report // Hum. and Exp. Toxticol-1994.- vol. 13.-№ 2- P. 107-109.

171. Aqius L. Regulation of glikogen sinthesis by insulin hepotocites isolated from the periportal and perivenous zones of ratliver / L. Aqius, M. Peak // Diabet. Med. 1989. - № 6. - P. 5.

172. Anatskaya О. V. Hepatocyte poliploidy and metabolism. Lifehistory traits: hepotheses testing / О. V. Anatskaya, A.E. Vinogradov, B.N. Kudryavtsev // Theor. Biol. 1994. - vol.168. - P. 191-199.

173. Bholck F. Spezielle pathologische. Anatomie, leber and Gallenuvge / F. Bholck, G. Machnik. Berlin. - 1978. - vol. 10 - P. 1029.

174. Bosch F. Epidermal grouth factor mimics insulin effects in rat hepatocytes / F. Bosch, B. Bouscarel, J. Jlaton, P. Blackmore // Biochem -1986. vol. 239. - № 3. - P. 523-530.

175. Cassuto V.R. The thermogenic role of the liver in the heat accumulated hamster / V.R. Cassuto, R. Caffes Canad. I. Biochem. Physid, 1963, vol.41.-P. 1840.

176. Darlington G. J. Molecular mechanisms of liver development and differentiation / G. J. Darlington. Curr.Opinion Cell Biol. - 1999. - V. 11.-N 6. - P. 678-682.

177. David H. Neue Aspekte normalen und pathologischen Feinstructur der leber/Н. David. Stuttgart: Hippokrates Zeit, 1968. - Bd. 39. - P. 605-613.

178. David H. // Acta Biol. Med. Germ. 1979. - Vol. 38. -N 7. - P. 935952.

179. David H., Uerlings I. // Zentralbl. Allg. Pathol. 1979. - Vol. 123. -N 1-2,-S. 85-103.

180. Dvorak M. Mazanek K. // Z. Zellforsch. 1967. - Vol. 80. - S. 370384.204. > Haiji L. Yingyang xuebao. Acta nuts. Sin. 1995. 17. - № 1. - P. 3236.

181. Hanson D. F. Fever, temperature, and the immune respons. Ann. N. Y.1. Acad. Sci. 813 : 453-464.

182. Hakomori S.I. Structure and function of sphingoglycolipids in transmembrane signalling and cell-cell interactions / S.I. Hakomori // Biochem. Soc. Trans. 1993. - vol. 21. - P. 583.

183. Haussaini E. // C. R. Soc. Biol. (Paris). 1971. - Vol. 165. - N 2. - P. 401-404.

184. Hill F.W., Scott M.L, Norris L.C, Heuser G.F. // Poultry Sc. 1961. -Vol. 40. P. 1245-1254.

185. Huang Y. H. Effect of in vitro hyperthermia on proliferative responses and lymphocyte activity / Y. H. Huang, A. Haegerstrand, J. Frostegard. -Clin. Exp. Immunol., 1996. Vol. 103 (1). - P. 61-66.

186. David H. Neue Aspekte normalen und pathologischen Feinstructur der leber / H. David Stuttgart: Hippokrates Zeit, 1968.- BD.39.- P. 605613.

187. Deutsch G. A bipotential precursor population for pancreas and liver within the embryonic endoderm / G. Deutsch, J. Jung, M. Zheng, S. Zaret. -Develompment, 2001. Vol. 128. - P. 81-871.

188. Duncan S.A. Transcriptional regulation of liver development / S.A.

189. Duncan. Devel. Dyn., 2000. - Vol. 219. N. 2. - P. 131-142.

190. Elias H. Liver znjyry 11. Cjnf. 1952.- Sur. gery 36, 950 ( 1954 ).

191. Engin K. Biological rational and clinical experience with hyperthermia. Control Clin. Trial. 1996. Vol. 17. - N 4. - P. 316-342.

192. Essner E. Observations of hepatic and renal peroxomes in the developing chick / E. Essner // Histochem. Cytolchem. 1970. -.Vol. 18. - N 2/-P. 91-99.

193. Gabriele P. Experiencia de nuestro grupo en la hipertermia radiologica / P. Gabriele, F. Munoz, G. Ogno, L. Bolla // Oncologia. 1989. - Vol. 12. N 4.-P. 117-180. .

194. Gail Deutsch, Joonil Jung, Mighua Zheng, Jose Lora and Kenneth S. Zaret Development, 2001. Vol. 128. - P. 871-81.

195. Hochachca P.W. Strategies of biochemical adaptacion / P.W. Hochachca, G.N. Somero. Philadelphia, 1973. - 320 p.

196. Jungermann K. Functional specialization of different hepatocyte populations / K. Jungermann, N. Katz // Physiol. Rev., 1989. Vol. 69. - P. 708-764.

197. Jundermann K. Metabolic heterogenety of liver parenchyma / K. Jundermann, N. Kats // In: Metabolic compartmentation. Ed. H. Sies. L.:-Acad. press, 1982. P. 411- 435.

198. ICase B.F. // Scand. J. Clin. Lab.Invest. 1986. Vol. 49. - P. 1-10.

199. Kenneth S. Zaret Regulatory Phases of earli liver dewelompment: paradigms of organogenesis / S. Kenneth // Nature Reviews Genetics 3, 2002. -N 7. -P. 499-512.

200. Kingsbury J.W. The development, of the liver in the chick / J.W. Kingsbury, M. Alexanderson, E.S. Kornstein // Anat. Rec 1958, Vol. 124. -N2.-P. 165.

201. Kingsbury J. The development of the liver in the chick / J. Kingsbury, M. Alexanderson, E.S. Kornstein: 1958. - Vol.124, p. 22-23.

202. Klinger W. Functional and structural zonal hepatocyte heterogeneity -dynamics and ontogenic development / W. Klinger, T. Devereux, J. Fouts // Exp. Pathol. 1988. - Vol 35. - P. 69-91.

203. Kudrjavtseva M.V. The metabolic zonalion of glucogen in the rat liver cells in the course of ihs resynt-thesis / M.V. Kudrjavtseva, G.M. Sakuta, G.I. Stein, B.N. Kudrjavtsev // Tissue and cell. 1992. - Vol. 24. - P. 31-35.

204. Lengermann K. Functional specialisation of different hepatocyte populations / K. Lengermann, N. Katz // Phisiol. Rev. 1989.- Vol. 69.- P. 718-745.

205. Luzzatto C. // Cell Tissue Res. 1981. - Vol. 215. - N 1. - P. 133142.

206. Macsween R.N. Pathology of. the liver / R.N. Macsween, P.P. Anthoni, J.J. Schener. Edin-bourgh, 1979. - 458 p.

207. Marimoto R.I. The heat shock response: Sensing and responding to changls in the environment / R.I. Marimoto, J. Gotto, M. Kline // Cell. Biochem. 1995.-Vol. 19. - P. 189.

208. Marzi Z. Bedeutung der Leber fur den verlauf des sirs nach Schock, Trauma. Not falallmed. Schmerzther. 1994. - Vol. 29. - N. 1. - P. 41-46.

209. Miltner J., Wagner H., Haars R. // Immunobiol. 1988. - Vol. 178. - N 1-2.-P. 110.

210. Ohata M., Tanuma Y, Uchida K. // Ibid. 1982. - Vol. 45. - P. 285301.

211. Parentela A. Unfluence of hypotermia on Renal function / A. Parentela, F. Corania, C. Marchegiani, S. Messinetti // Ann. Ital. chir. -1961.-Vol. 38.-P. 511-531.

212. Pechan P.M. Heat chock proteins and cell proliferation / P.M. Pechan // FEBS Lett. 1991. Vol. 28.-N 1. - P. 1-4.

213. Peetermans W.E. Heat shoslc preteins in medicine / W.E. Peetermans // Acta clin. belg. - 1995. - Vol. 50. - N 3. - P. 131-136.

214. Prigojine I. Thermodinamics of evolution /1. Prigojine, G. Nirolis, A. Babloyantz. Phys. Today, 1972. Vol. 25. - N 11. - P. 23-32.

215. Rappaport A.M. The microcirculatory hepatic unit / A.M. Rappaport // Microvax. Res. 1973. - Vol. 6. - N2. - P. 212-228.

216. Rappaport A.M. Phisioanatomical basis to toxic liver injury / in: Toxic injury of the liver, E. Farber, M.Fisher (eds). Marcel Dekker. 1979. -N. Y. -P. 1-57.

217. Rinaudo M. Т., Ponzetto C., Curto M. // Biochem. 1976. - Vol. 7. -P. 239-243.

218. Robert J. Bases physiques de hyperthermia / J. Robert, J. Escanye, C. Marsal, P. Thouvenot, C. Itty, F. Brunotte // Biophys et biomec. 1985. -Vol. 9.-P. 27-30.

219. Romadori G. The stellate cell of the liver. Neww insigints into pathophysiology of intriguing cell. Arch. B: Cell Pathol. 1991. Vol. 61. -P. 147-158.

220. Ruth R. Vertebrate Embriology. The Dynamic Develompment. N.Y., 1964.

221. Selye H. The story of the adaptation syndrome / H. Selye. Canada. 1952.

222. Shinichl K. Activation of the plas-mamembrane choloride channel by protein kinase С in isolated guinea-pig hepatocy-tes / K. Shinichl, S. Ryoichi, A. Takume. // Phisiol. 1995. - Vol. 487. - № 2. - P. 379-394.

223. Sive S.A. Die Leber. In: Handb. der vergleichenden Anat. der Wirbeltiere / S.A. Sive. - Bd. 3. Berlin. 1937.

224. Sosa-Pineda B. Hepatocyte migration during liver development requires Prox 1. / B. Sosa-Pineda, J.N. Wigle, G. Oliver // Nature Geneyic, v. 25, №3, p. 252-254.

225. Stephens R.I., Bils R.F. // Ultrastruct. Res. 1967. - Vol. 18. - N 3-4. -P. 456-474.

226. Swan H. Thermoregulation and bioenergetics / H. Swan. Elsevier, Amsterdam, 1974. - 96 p.

227. Tsutsumi M. Charakterrization of desmin-positive rat liver sinusoidal cells / M. Tsutsumi, F. Takada, S. Takase // Hepatologi. 1987. Vol. 7. - P. 277-284.

228. Vellinga P., van Verseveld W.J. Climate change and extreme weather events / P. Vellinga, van W.J. Verseveld. Gland, 2000. - 46 p.

229. Wike-Hole J.L. Liver damage and extraction of indocyanine green under whole body hyperthermia / J.L. Wike-Hole, N.S. Faithfull, J. Zee // Appl. Physiol. And Occup. Physiol, 1983. Vol. 51. - N 2. - P. 269 - 279.

230. Wisse E. On the endothelial cells of rat liver sinusoids / E. Wisse // Recent. Hdv. Clin. Microcirc. Res. Basl. - 1977. - Vol. 2. - P. 373-376.

231. Zaret. A bipotential precursor population for pancreas and liver within the embryonic endoderm. 1996; - 66 p.