Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние мутаций PTS, повреждающих цитоплазматические компоненты системы транспорта D -углеводов, на регуляцию транскрипции катаболитных оперонов у Escherichia coli K-12

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Глезина, Марина Львовна

ВВЕДЕНИЕ.'.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ КАТАБОЛИТНЫХ ОПЕРОНОВ У

БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA СОЫ . Э

1.1. Позитивная и негативная регуляция экспрессии катаболитных оперонов

1.2. Факторы, участвующие в позитивной регуляции катаболитных оперонов

1.3. Механизм позитивной регуляции катаболитных оперонов

1.4. Является ли комплекс цАМФ-САР единственным фактором, необходимым для осуществления позитивной регуляции катаболитных оперонов?.

Глава 2. ФОСФОЕНОЛПИРУВАТ: УГЛЕВОД ФОСФОТРАНСФЕРАЗНАЯ

СИСТЕМА (ФТС) У Е.СОШ И S.TYPHIMURIUM.

2.1. Биохимическая характеристика цитоплазматических компонентов ФТС.

2.2. Генетические детерминанты цитоплазматических компонентов ФТС.

Глава 3. УЧАСТИЕ ФТС В РЕГУЛЯЦИИ МЕТАБОЛИЗМА У ЭНТЕРО

БАКТЕРИЙ

3.1. ФТС и "глюкозный эффект"

3.2. Нарушение экспрессии катаболитных оперонов в результате мутационного повреждения компонентов ФТС

Глава 4. РЕГУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ КАТАБОЛИТНЫХ ОПЕРОНОВ,

- НЕЗАВИСИМАЯ ОТ цАШ-САР.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава I. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Глава 2. ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЙ УРОВЕНЬ цАЬ@ И ИНДУЦИБЕЛЬНЫЙ

СИНТЕЗ ФЕРМЕНТОВ У МУТАНТОВ PTSI и PTSH

2.1. Штаммы Е.соIi K-I2, использованные в экспериментах главы

2.2. Экспрессия лактозного оперона и внутриклеточная концентрация цкШ у мутантов ptsi и

2.3. Влияние экзогенного цАШ на скорость синтеза

-галактозидазы у мутантов а cyapts 1.

2.4. Экспрессия триптофаназного оперона у мутанта pts I в присутствии мультикопийной плазмиды, несущей ген аденилатциклазы

Глава 3. ЭКСПРЕССИЯ ЛАКТОЗНОГО ОПЕРОНА У МУТАНТОВ PTSI ' И PTSH В ПРИСУТСТВИИ ТЕМПЕРАТУРОЧУВСТВИТЕЛЬНОЙ МУТАЦИИ, ЗАТРАГИВАЮЩЕЙ ^'-СУЕЬЩИНИЦУ РНК-ПОЛИМЕРАЗЫ.

3.1. Штаммы E.ooli K-I2, использованные в экспериментах в главе

3.2. Скорость синтеза ß -галактозидазы у мутантов pts I и ptsH в присутствии мутации rpocl.

3.3. Влияние цАШ на синтез -галактозидазы у мутантов ptsi и ptsH в присутствии мутации rpocl

Глава 4. МУТАЦИОННОЕ ПОВРЕВДЕНИЕ САР И ЭКСПРЕССИЯ КАТАБО

ЛЙТНЫХ 0ПЕР0Н0В У МУТАНТА ptsH.

4.1. Штаммы е.coli K-I2, использованные в экспериментах в главе 4.

4.2. Скорость синтеза -галактозидазы и ь -трип-тофаназы у мутанта ptsH в присутствии мутации сгр ,.

Глава 5. ЭКСПРЕССИЯ ЛАКТОЗНОГО ОПЕРОНА В СОПРЯЖЕННОЙ

ТРАНСКРИПЦИОННО-ТРАНСЛЯЦИОННОЙ СИСТЕМЕ В ЭКСТРАКТАХ МУТАНТОВ PTS

5.1. Штаммы E.coü K-I2, использованные в экспериментах в главе

5.2. Синтез РНК и белка в э 30 экстрактах бактерий pts и I н .:.

5.3. Синтез £ -галактозидазы в з 30 экстрактах бактерий ргэ и pts I н .;.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ .'.

ПРИМЕЧАНИЕ

ВЫВОДЫ. Пб

ПРИМЕЧАНИЯ

I. Все использованные в работе углеводы, за исключением ъ -арабинозы, являются б -изомерами, а все аминокислоты имеют ь -конфигурацию.

П. В работе приняты следующие сокращения и обозначения: ц/1Ш? - циклический аденозин-3',5ншнофосфат САР - белок-рецептор цАМФ АШ, АДФ, АТФ - аденозин-5^-моно-,ди-, трифосфаты соответственно з' АШ - аденозин-3' -монофосфат цГШ?, гфШР, цУЖ, цЦШ> - циклические гуанозин, инозин, уридин, цитозин-31,-5 '-монофосфаты соответственно АЦ - аденилатциклаза

2',3' цАШ - циклический аденозин-2',3-монофосфат ффГфф - гуанозин-5^-дифосфат-3-дифосфат

ФТС - фосфоенолпируват: углевод фосфотрансферазная система

МГ - метил- с< - в -глюкопиранозид

ФЕП - фосфоенолпируват ф1 - фермент I ФТС

Нрг - термостабильный белок, компонент ФТС фП, ПА, ПВ - различные ферменты П ФТС

Шглюк - фактор Ш ФТС

Ррг - Нрг подобный белок ФТС ф~ф1 - фосфорилированная форма фермента I ФТС ф^нрг - фосфорилированная форма Нрг ФТС ф Шглюк - фосфорилированная форма фактора Ш ФТС

Км - константа Михаэлиса

К0 - константа связывания

М.м. - молекулярная масса

ИПТГ - изопропил-^) - в -тиогалактопиранозид

ЭДТА - этилендиаминтетраацетат

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние мутаций PTS, повреждающих цитоплазматические компоненты системы транспорта D -углеводов, на регуляцию транскрипции катаболитных оперонов у Escherichia coli K-12"

Адаптация бактериальной клетки к условиям внешней среды происходит чрезвычайно быстро. При этом количество отдельных белков У бактерий Escherichia coli СИЛЬНО Колеблется И Зависит от состава среды роста. Такой эффект связан с существованием механизмов, обеспечивающих в данный конкретный момент избирательный синтез тех белков, в которых клетка испытывает большую потребность

В основе этого явления лежит индуцибельный синтез белков, связанный с резким увеличением скорости синтеза определенного белка при появлении в среде роста специфического субстрата (индуктора). Регуляция индуцибельного синтеза белков согласно V современным представлениям может быть негативной или позитивной. При негативной регуляции специальные белки-репрессоры взаимодействуют с регуляторной областью ДНК, вызывая подавление синтеза белков. При позитивной регуляции циклический аденозин-З',5^ монофосфат (цАШ) в комплексе с белком-рецептором - САР ц/или специфические белки-активаторы вызывают стимуляцию синтеза индуци-бельных белков.

Однако, как показано в последнее время, механизм регуляции индуцибельного синтеза белков существенно сложнее, чем предполагалось ранее и может включать факторы, неизвестные до сих пор. В связи с указанными обстоятельствами особое значение приобретают исследования, посвященные регуляции синтеза индуцибельных белков при участии компонентов системы транспорта D -углеводов (фосфоенолпируват: углевод фосфотрансферазная система, ФТС). ФТС многокомпонентна>и содержит как цитоплазматические (растворимые), так и мембранные белки.

К ;числу углеводов, транспортируемых при помощи ФТС, относится глюкоза. Известно, что добавление глюкозы или других углеводов в среду роста вызывает резкое подавление индуцибельного синтеза белков. Этот эффект связан с тем, что в присутствии глюкозы потребность в углероде и энергии полностью удовлетворяется этим углеводом, что делает ненужным расщепление для этих целей других соединений.

Тем более удивительным является тот факт, что даже в отсутствий глюкозы в среде роста у мутантов, имеющих повреждения цитоплазматических компонентов ФТС (мутации pts ) наблюдается по 1 давление синтеза индуцибельных белков. К числу таких белков относятся j?> -галактозидаза, ь -триптофаназа, амиломальтаза и многие другие. Механизм, обеспечивающий снижение синтеза индуцибельных белков у бактерий с повреждением цитоплазматических компонентов ФТС не ясен. По мнению одних авторов, это явление обусловлено снижением концентрации цАШ и/или индуктора в клетке; по мнению других, этот феномен связан с непосредственным влиянием цитоплазматических компонентов ФТС на транскрипцию генов, кодирующих индуцибельные белки.

Целью настоящего исследования явилось изучение механизма действия мутаций pts , повреждающих цитоплазматические компоненты ФТС, на регуляцию синтеза индуцибельных белков.

Перед нами стояли следующие конкретные задачи:

1. Изучить взаимосвязь между снижением синтеза индуцибельных белков и изменением внутриклеточного уровня цкШ (активное-ти аденилатциклазы ) у мутантов с повреждениями цитоплазматических компонентов, ФТС.

2. Создать удобную модель для исследования эффекта мутаций, затрагивающих цитоплазматические компоненты ФТС, на инду-цибельный синтез белков in vivo ; используя такую модель, провести сравнительное исследование эффективности синтеза индуцибельных белков у мутантов, имеющих повреждения различных цитоплазматических компонентов ФТС.

3. Выявить компонент, участвующий в регуляции индуцибель-ного синтеза белков и подверженный действию мутаций pts.

4. Исследовать влияние транспортных белков ФТС на индуци-бельный синтез in vitro в условиях бесклеточной системы сопряженной транскрипции - трансляции.

В результате исследований впервые получены доказательства, что подавление синтеза индуцибельных белков у мутантов p^s , имеющих повреждения цитоплазматических компонентов ФТС, не связано с изменением активности аденилатциклазы и внутриклеточной концентрации цАМФ. Впервые созданы модельные условия in vivo , позволяющие увеличивать или уменьшать действие мутаций pts при варьировании условий инициации транскрипции генов, кодирующих синтез индуцибельных белков (катаболитные гены). Эти данные поч казывают, что действие мутаций pts связано с нарушением процесса инициации транскрипции катаболитных генов. Обнаружено, что наиболее вероятной точкой приложения действия мутаций pts является фактор позитивной регуляции катаболитных генов -белок-рецептор цАМФ (САР).

Результаты, полученные в настоящем исследовании, имеют не только теоретическое, но и практическое значение. Они могут явиться предпосылкой для направленного вмешательства в работу регуляторных механизмов бактериальной клетки, с целью изменения её биосинтетических функций.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Глезина, Марина Львовна

- 116 -выводы

Г«: Подавление экспрессии лактозного оперона у мутантов имеющих повреждения цитоплазматических компонентов системы транспорта d -углеводов, резко усиливается (в 3-6 раз) в присутствии температурочувствительной мутации rpoci , приводящей к изменению jb' -субъединицы РНК полимеразы.

2. Добавление экзогенного цкШ восстанавливает на 75$ синтеза jj> -галактозидазы у двойных мутантов ptsrpoci при непер-миссивной температуре. Это означает, что у бактерий, имеющих повреждения цитоплазматических компонентов системы транспорта углеводов, снижается эффективность инициации транскрипции катаболитных оперонов.

3. Подавление индуцибельного синтеза белков у мутантов pts не связано с изменением активности аденилатциклазы и внутриклеточной концентрации цАШ>.

4. Мутационное повреждение белка-рецептора цАМФ (САР) устраняет дефект в скорости синтеза jb -галактозидазы и ъ -триптофана зы у бактерий pts;1 Это означает, что подавление экспрессии катаболитных оперонов у бактерий pts связано с измерением способности САР активировать инициацию транскрипции.

5. Стандартная система ДНК-зависимого синтеза белков (бес* клеточная система сопряженной транскрипции трансляции) не пригодна для выявления роли цитоплазматических компонентов система транспорта к -углеводов в регуляции экспрессии катаболитных оперонов.

6. Совокупность полученных данных показывает, что эффективность инициации транскрипции катаболитных оперонов, а именно функционирование САР, зависит от интактного состояния цитоплазматических компонентов системы транспорта D -углеводов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Глезина, Марина Львовна, Москва

1. Bolshakova Т.Н., Bobrynina O.J,, Gershanovitcn V.U. Isolation and investigation of the Escherichia coli mutant with the deletion in the pts H gene.- Febs Letters, 1979, v. 107, n.I, pp. I69-I7I.

2. Glucose effect in tgl mutant of Escherichia coli K-I2 defective in methyl-Ii-D-Glucoside transport ./Erlagaeva R.S., Bolshakova Т.Н., Sulgina H.V., Bourd G.J. et al. Eur.J.Biochem.,1977, v.72, pp. 127-235.

3. Волошин А.Г., Белкина H.A., Бурд Г.И. Механизм катаболитной репрессии у бактерий Escherichia coli : взаимодействие между транспортными белками и аденилатциклазой.- Биохимия,1983, т. 48, с. 1624-1633.

4. Гершанович В.Н., Юровицкая Н.В., Бурд Г.И. Плейотропные нарушения синтеза ферментов у мутантов Escherichia coli с повреждениями фосфотрансферазной системы Роземана.-Мол.биология, 1970, т. 4, с. 534-540.

5. Гольцмайер Т.А. Клонирование гена аденилатциклазы у Escherichia coli K-I2. Тезисы конференции молодых ученых "Плаз-мида", Таллин, 1982, с. 28

6. Катаболитная репрессия у мутантов coii к-12с дефектами в различных системах транспорта глгокозы./Гершанович В.Н., Юровицкая Н.В., Комиссарова Л.В., Большакова Т.Н. и др.-Мол.биология, 1976, т. 10, с. 216-223.

7. Khesin R.B., Kikiforov V.G., Zograff J.3J. A study of E. coli RHA polymerase In; Biology reviev/s (Soviet Scientific reviews) ed. by Skulacher V.P.,1980, v.I, sec.D.,pp.267-318.

8. Мецлер Д. Биохимия; -Пер. с англ./Под ред. и с предисловием А.Е.Браунпгтейна, Л.Н.Гинодмана, Е.С.Северина. -М.: Мир, 1976, т. I.

9. Миллер Д. Эксперименты в молекулярной генетике. Пер. с англ./ Под ред. и с предисловием С.И.Алиханяна. - М.: Мир, 1976.- с. 436.

10. Мутант Escherichia с. К-12 с нарушенными системами утилизации глюкозы./ Гершанович В.Н., Бурд Г.И., Юровицкая Н.В., Скавронская А.Г. и др. Мол.биология, 1978, т. I, с. I04-II3.

11. Никифоров В.Г., Зограф Ю.Н. Регуляция активности генов у бактерий.- В кн.: Итоги науки и техники. Серия Молекулярная биология/ред. Р.Б.Хесина. -М.,1977, т.13, с. 262.

12. Shulgina M.Y., Kalachev J.J., Bourd G.J. The o^ -methyl-glucoside effect on adenylatcyclase activity and membrane energization in Escherichia coli K-I2.- Febs betters,1979, v.103, pp.238-240.

13. Bachman B.J., Low K.B., Edition G» Linkage map of Escherichia coli K-I2.- Microbiol.Rev., 1980; v.44, pp. 1-56.

14. Bacterial phosphotransferase system solubilization and purification of the glucose-specific enzyme II from membranes of Salmonella typhimurium./Erni B., Trachsel H., Postma P.W., Rosenbuch J.P.- J.Biol.Chem., 1982, v.257, n.22, pp.I3726-I3730;

15. Bankaitiz V., Bassford P. Regulation of adenylate cyclase synthesis in E.coli. Studies with cya-lac operon. -J.Bacteriol., 1982, v. 151, n.3, pp. 1346-1357.

16. Blazy B., Takahashi M., Baudras a. Binding of CRP^ to DM-dependent BNA polymerase from E.coli.- Molec.Biol.Reports, 1980, v.6, n.I, pp. 39-45.

17. Casadahan M., Regulation of the regulatory gene for the arabinose pathway.- J.Molec.Biol., 1976, v. 104, pp. 557-566.

18. Chapon C. Role of the catabolite activator protein in the expression of the maltose regulon of Escherichia coli.- Ann; Microbiol., 1982, v. 133 A, pp. 77-80.

19. Cook D.J., Revzin A. Intracellular location of catabolote activator protein of E.coli.- J.Bacteriol., 1980 , v.I4I; n.3,pp. 1279-1283»

20. Cordaro C. Genetics of the bacterial phosphoenolpyruvate: glucose phosphotransferase system.- Ann.Rev.Genet., 1976, v.XO, pp. 341-359.

21. Curtis S.J., Epstein W. Phosphorylation of D-glucose in Escherichia coli mutants defective in glucosephosphotransferase, mannosephosphotransferase and glucokinase.- J.Bacteriol., 1975» v. 122, pp. II89-H99.

22. Dessein A., Schwartz M., Ullmann A. Catabolite repression in E.coli mutants lacking cyclic AMP.- Molec.Gen.Genet., 1978,v. 162, pp. 83-87.

23. Dooijewaard G., Roosien P.P., Robillard G.T. Escherichia coli phosphoenolpyruvate dependent phosphotransferase system. Copurification of Hpr and ck -1,6 glucon.- Biochemistry, 1979, v.I8, pp. 2990-2996.

24. Effects of guanosine tetraphosphate on cell—free synthesis of Escherichia coli ribosomal RNA and other gene product. Reiness G., Jang H.H., Zubay G., Gashel M.- Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1975, v. 73, PP. 707-711.

25. Epstein W., Jewett S., Fox C.F. Isolation and mapping of phosphotransferase mutants in Escherichia coli.- J.Bacteriol., 1970, v. 104; pp. 793-797.

26. Epstein W., Rothman-Denes H.B., Hesse J. Adenosine 3?,5'-monophosphate as mediator of catabolite repression in Escherichia coli.- Proc.Natl.Acad.Sci. , 1975, v; 72, pp. 2300-2304.

27. Fraser A.D.E., Yamazaki H. Effect of carton sources on the rates of cyclic AMP synthesis, excretion and degradation and the ability to produce p-galactosidase in E.coli.- Can.J.Biochem., 1979, v. 57, n. 8, pp. 1073-1080.

28. Gilman A.C., A protein binding assay for adenosine 3,5 -cyclic monophosphate.- Proc.Natl. Acad.Sci., 1970, v.67, PP.305312.

29. Grice S.F.J., Matzura H. Binding of ERA polymerase and the catabolite gene activator protein within the cat promoter in Escherichia coli.- J.Molec.Biol., 1981, v. 150, pp. 185-196.

30. Guidi-Rontani C., Danchin A., Ullmann A. Catabolite repression in Escherichia coli mutants lacking cyclic AMP receptor protein.- Pcoc.lTatl.Acad.Sci., USA, 1980, v. 77, n.IO,1. PP. 5799-5802.

31. Guidi-Rontani C., Danchin A., Ullmann A. Pleotropic expression of the catabolic operons in the absence of the c AMP-CAP complex: the case of the maltose regulon.- Ann. de Microbiol., 1982, v. AI33» n. I, pp. 81-87.

32. Guiso N., Blazy B. Regulatory aspects of the cyclic AMP receptor protein in Escherichia coli K-I2.- Biochem.Biophys.Res. Commun., 1980, v. 94, n. I, pp. 278-283.- 123

33. Hall B., Gallant J. Defective translation in EG cells.-Nature (London) New.Biol., 1972, v. 237» PP« 131-135«

34. Harwood J.P., Peterkofsky A. Glucose-sensitive adenylate cyclase in toluene-treated cells of Escherichia coli.- J.Biol. Chem., 1975» v. 250, n. 12, pp. 4656-4662.

35. Hoving H., Zoning J.H., Robillard G.T. Escherichia coli phosphoenolpyruvate-dependent phosphotransferase system: role of divalent metals in the dimerization and phosphorylation of Enzyme I.- Biochemistry, 1982, v. 21, pp. 3128-3136.

36. Hpr-proteins of different microorganisms studied by H* -High resolution nuclear magnetic resonance: similarities of structures and mechanisms.- Kalbitzer H.R., Hengstenberg W., Roch P., Mub P. et al.- Biochemistry, 1982, v. 21, pp. 2879-2885.

37. Joseph E., Danchin A., Ullmann A* Regulation of galactose operon expression: glucose effect and role of cyclic adenosine 3',5*-monophosphate.- J.Bacteriol., 1981, v. 146, n. X,pp. 149-154.

38. Kunding W. Molecular interaction in the bacterial phos-phoenolpyruvate-phosphotransf erase system (PTS).- J.Supramol. Struct. Suppl., 1974, v.2, pp. 695-7H.

39. Kunding W. The bacterial phosphoenolpyruvate phosphotransferase system.- In: The enzymes of biological membranes./ Ed. by Mortonose.- Hew York, 1976, n.3, pp. 32-55.

40. Mackman R.S., Sutherland E.W. Adenosine 3»5 -monophosphate in E.coli.- J.Biol.Chem.: 1965, v. 240, pp. I309-I3I4.64 • Magasanik B. Catabolite. -repression.- Cold Spr. Harb. Symp.- Quant Biol., 1961, v. 26, pp. 249-256.

41. Magasanik B. Glucose effects: inducer exclusion and repression.» In: Lactose operon./Ed J.R.Beckwith, D.Zipser.- Madison, 1970, pp. 189-219.

42. Majors J., Initiation of in vitro mRHA synthesis from the wild-type lac promoter.- Proc.Hatl.Acad.Sci. USA, 1975» v. 72,n. II, pp. 4394-4398.

43. Mallick U., Herrlich P. Regulation and synthesis of a major outer membrane protein: Cyclic AMP repress Escherichia coli protein III synthesis.- Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1979, v.76, n. II, pp. 5520-5523.

44. Mandecki W., Wild J. Expression of the lac operon in RNA polymerase mutants of Escherichia coli K-I2.- Molec.Gen. Genet., 1979, v. 173, pp. 339-343.

45. V/ 69. Mattoo R.X., Waygood E.B. Determination of the levels of Hpr and enzyme I of the phosphoenolpyruvate sugar phosphotransferase system in Escherichia coli and Salmonella typhimurium.

46. Canad.J.Biochem., 1982, v.60, n. 5» PP. 55~6D

47. Meadow N., Saffen D.W., Roseman S. Molecular cloning of the err gene and evidence that it is the structural gene for

48. Moses y., Prevost c. Catabolite repression of j^-galacti-sidase synthesis in E.coli.- J.Biochem., 1966, v. 100, pp.336-353«

49. Mowa R.N., Green P., Inouye M. Interaction of cAMP receptor protein with o.mpA gene, a gene for a major outer membrane protein of Escherichia coli.- Febs Letters, 1981, v.128, n. 2, pp. 186-190.

50. Nelson S.O., Sholfce B.J., Postma P.W. Phosphoenolpyruvate: sugar phosphotransferase system mediated regulation of carbohydrate metabolism in Salmonella typhimurium.- J.Bacteriol.,1982, v. 150, n.2, pp. 604-615.

51. O'Neill M.C., Amass K., de Grombrygghe B. Molecular model of the DI& interaction site for the cyclic AMP receptor protein.« Proc. Natl .Acad.Sci. USA, 1981, v. 78, n.4, pp.2213-2217.

52. Pastan J., Adhya S. Cyclic adenosine 3,5 -monophosphate in Escherichia coli.- Bacteriol.Rev.,1976, v.40, n.3, pp. 527551.

53. Perlman E.H., Pastan J. Eegulation of -galactosidase synthesis in E.coli by cyclic adenosine 3,5 -monophosphate.- J. Biol.Chem., 1968, v.243, PP- 5420-5427.

54. Peterkofsky A., Gazdar G. The Escherichia coli adenylate cyclase complex: activation by phosphoenolpyruvate.- J.Supramol. Struct. Suppl•, 1978, v.9, PP. 219-230.

55. Postma E.W., Eoseman S. The bacterial phosphoenolpyruvate: sugar phosphotrancferase system.- Biochem.Biophys.Acta, 1976,v. 451, pp. 213-257.

56. Postma P.W. Regulation of sugar in Salmonella typhimurium. Ann. Microbiol.(Inst.Pasteur), 1982, v. I33A, n.I, pp. 261-267.

57. Primakoff P., Artz S.W. Positive control of lac operon expression in vitro by guanosine 5 -diphosphate 3 -diphosphate.-Proc.Natl.Acad.Sci., 1979, v. 76, pp. 1726-1730.

58. Primakoff P. In vivo role of the relA+gene in regulation of the lac operon.- J.Bacterial., 1981, v. 145, n.I, pp.410-416.

59. Eegulation of lac operon expression: Eeappraisal of the theory of catabolite repression./Wanner B.L. Kodaira E., Heidhardt.- J.Bacteriol., 1978, v. 136, n.3, pp. 947-954.

60. Regulation of the synthesis of adenylate cyclase in Escherichia coli "by the cAMP cAMP receptor protein compex./Majer J.H., Miller D., Spitz E., Rickenberg H.V. -Mol.Gen.Genet., 1981, v. 181, pp. 470-475.

61. Reiness G., Zubay G., Cashel H. Effects of guanosine tetraphosphate on cell-free synthesis of escherichia coli ribosomal RNA and other gene product.- Proc.Uatl.Acad.Sci. USA, 1975»v. 72, n.8, pp. 2881-2885.

62. Robillard G.T., Dooijewaard G., L.olkeme J. Escherichia coli phosphoenolpyruvate dependent phosphotransferase system. Complete purification of enzyme I by hydrophobic interaction chromatography.- Biochemistiy, 1979» v. 18, pp. 2982-2984.

63. Role of the crr-gene in glucose uptake by Escherichia coli./Joness-Mortimer H.C., Koraborg H.H., Maltby R., Watts P.D. -Febs Letters, 1977» v. 74, n.I, pp. 17-19.

64. Roosien P.P., Dooijewaard G., Robillard G.T. The Escherichia coli phosphoenolpyruvate dependent phosphotransferase system: Observation of heterogeneity in the amino acid composition of Hpr.- Biochemistry, 1979, v.I8, n.26, pp. 5793^5797.

65. SabcurLn D., Beckwith J. Deletion of the Escherichia coli crp gene.- J.Bacteriol., 1975» v. 122, pp. 338-340.

66. Saier M.H.Ir., Simoni R.D., Roseman S. The physiological behavior of enzyme I and heat-stable protein mutants of bacterial phosphotransferase system.- J.Biol.Chem., 1970, v. 245,pp. 5870-5873.

67. Saier M.H.Ir., Feucht B.V. Coordinate regulation of adenylate cyclase and carbohydrate permeases by the phosphoenol- 129 pyruvate: sugar phosphotransferase system in Salmonella typhymu-rium.- J.Biol.Chem., 1975, v. 250, pp. 7078-7080.

68. Saier M.H.Ir., Roseman S. Sugar transport. The err mutation: its effect on repression of enzyme synthesis.- J.Biol. Chem., 1976, v. 251, pp. 6598-6605.

69. Saier M.H.Ir., Staley J.T. Phosphoenolpyruvate: sugar phosphotransferase system in Ancalomicrobium ademun.- J.Bacteriol., 1977, v. 131, n.2, pp. 716-718.

70. Saier M.H.Ir. Bacterial phosphoenolpyruvate: sugar phosphotransferase systems: structural, functional and evolutionary interrelationships.- Bacterial reviews, 1977, v. 41, n.4,pp. 856-871.

71. Saier M.H.Ir., Moczydlowski E.G. The regulation of carbohydrate transport in E-coli and Salmonella typhimurium. In: Bacterial transport /Ed. by B.P.Rosen.- New York Basel, 1978, pp. 103-127.

72. Sansey B. Modulation of gene expression by drugs affecting deoxyribonucleic acid gyrase. J.Bacteriol., 1979, v.138, n.I, pp. 40-47.

73. Schmitz A. Ciclic AMP receptor protein interacts with lactose operator DHA.- Nucleic Aci Research, 1981, v.9, n.2, pp. 277-293.

74. Sholte B.J., Postma P.W. Mutation in the crp gene of Salmonella typhimurium with interferes with inducer exlusion.

75. J.Bacteriol., 1980, v. 141, n.2, pp. 751-757.

76. HO. Sholte B.J. The phosphoenolpyruvate: sugar phosphotransferase system in Salmonella typhimurium.- In: Sugar transport and regulation of metabolism, Amsterdam, 1977, PP. I-I26.

77. Sholte B.J., Sehuitema A.R., Postma P.W. Isolation of III®"'"0 of the phosphoenolpyruvate-dependent glucose phosphotransferase system in Salmonella typhimurium.- J.Bacteriol., 1981, v.148, n. I, pp. 257-264.

78. Sholte B.J., Sehuitema R.J., Postma P.W. Characterization of factor IIIslc in catabolite repression resistant (err) mutants of Salmonella typhimurium.- J.Bacteriol., 1982, v. 149, n.2, pp. 576-586.

79. Smith G.R. DN6. supercoiling: Another level for regulating gene expression.- Cell, 1981, v. 24, n.3, pp. 599-600.

80. Stender W. Cyclic adenosine 3,5-monophosphate receptor protein: interaction with E.coli RNA polymerase.- Biochem.Biophys. Res;Commun., 1980, v.96, n;I, pp. 520-526.

81. H9. Sugar transport by the bacterial phosphotransferase system. Isolation and characterization of a phosphocarrier protein Hpr from wild type and mutants of Salmonella typhimurium.- J,Biol. Chem., 1982, v. 257, n.23, pp. I4492-I4498.

82. Takebe Y., Shuibuya M., Kazizo J. A new extragenic suppressor of cya mutation.- J.Biochem., 1978, v. 8$, n.6, pp. 16151623.

83. Taniguchi T., O'Neill M., de Grambrugghe B. Interaction site of Escherichia coli cyclic AMP receptor protein on DNA galactose operon promoters.- Proc.Natl.Acad.Sci. T3SA, 1979» v. 76» n.IO, pp. 5090-5094.

84. Ullmann A., Tillier P., Monod J. Catabolite modulator factor: a possible mediator of catabolite repression in bacteria.-Proc.Natl.Acad/Sci/ USA, 1976, v. 73» n.IO, pp. 3476-3479.

85. Ullmann A., Joseph E.» Danchin A. Cyclic AMP as a modulator of polarity in polycistronic transcriptional units.- Proc. Natl.Acad.Sci. USA, 1979» v. 76» n.7» pp. 3194-3197.

86. Ullmann A., Danchin A. Role of cyclic AMP in regulatory mechanisms in bacteria.- Trends Biochem.Sci., 1980, v.5,1. PP. 95-96.

87. Wallace R.G., L.ee N., Fowler A.V. The araC. gene of Escherichia coli transcriptional and translational start-points and complete nucleotide sequence.- Gene, 1980, v.I2, n.3,pp. 179-190.

88. Waygood E.B. Resolution of the phosphoenolpyruvate: fructose phosphotransferase system of E scherichia coli into two components: enzyme iifr',lc^ose and. fructose-induced Hpr-like protein (i£r).- Can.J.Biochem., 1980, v.58, n.IO, pp. II44-II46.

89. Waygood E.B., Meadow N.D., Roseman S. Modified assay procedures for the phosphotransferase system in enteric "bacteria. -Anal.Biochem., 1979, v.95» PP. 293-304.

90. Wayne P.K., Rosen O.M. Cyclic 3»5 -adenosine monophosphate in Escherichia coli during transient and catabolite repression.» Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1974, v. 71, pp. 1436-1440.

91. Weigel N., Powers D.A., Roseman S. Sugar transport by the bacterial phosphotransferase system. Primary structure and active site of a general phosphocarrier protein (Hpr) from Salmonella typhimurium.- J.Biol.Chem., 1982, v.257, n. 23,pp. 14499-14509.