Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние экологических условий морской среды и организма человека на возбудителей галофильных вибрионозов, их патогенность и способность к индуцированию иммунодефицитов

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Долгова, Татьяна Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА I. ГАЛОФИЛЬНЫЕ ВИБРИОНЫ И ИХ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ЗДОРОВЬЯ ЧЕЛОВЕКА.

1.1. Оценка экологической ситуации в Заливе Петра Великого.

1.2. Галофильные вибрионы, их таксономия, биологическая характеристика.

1.3. Эпидемиология и клиника пищевых галофилезов.

1.4. Принципы лечения и профилактики галофилезов.

ГЛАВА II. НАПРАВЛЕНИЯ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Контингент и материал исследований.

2.2. Направления исследований.

2.3. Методы исследования.

2.3.1. Выделение чистой культуры.

2.3.2. Идентификация галофильных вибрионов.

2.4. Способ ускоренной компьютерной диагностики галофилезов.

2.5. Изучение факторов патогенности галофильных вибрионов.

2.5.1. Инвазионно-колонизационные факторы и механизмы.

2.5.2. Защитные факторы патогенности бактерий.

2.5.3. Определение факторов собственно патогенности (болезнетворные факторы).

2.6. Изучение факторов персистенции.

2.7. Изучение чувствительности галофильных вибрионов к антимикробным средствам.

2.7.1. Определение чувствительности галофильных вибрионов к антибиотикам.

2.7.2. Изучение чувствительности галофильных вибрионов к антисептикам и дезосредствам.

2.7.3. Изучение чувствительности галофильных вибрионов кэубиотикам.

2.8. Статистическая обработка цифровых данных.

2.9. Изучение экологических условий.

ГЛАВА III. НЕКОТОРЫЕ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ, ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ И ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ГАЛОФИ-ЛЕЗОВ В ПРИМОРЬЕ.

3.1. Клинико-эпидемиологические данные о галофилезах в Приморском крае.

3.2. Микробиологическая характеристика галофильных вибрионов.

3.2.1. Микробиологические исследования и анализ проб.

3.2.2. Биологическая характеристика изолятов галофильных вибрионов.

3.3. Экологические особенности окружающей среды и их влияние на изоляты галофильных вибрионов.

ГЛАВА IV. ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ ГАЛОФИЛЬНЫХ ВИБРИОНОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ БОЛЬНЫХ ПИЩЕВОЙ ТОКСИКОИНФЕКЦИЕЙ И ОБЪЕКТОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ МОРСКОЙ СРЕДЫ В г. ВЛАДИВОСТОКЕ

4.1. Инвазионные факторы галофильных вибрионов основных видов.

4.2. Защитные факторы галофильных вибрионов основных видов.

4.3. Собственно патогенные факторы галофильных вибрионов основных видов.

ГЛАВА V. ОТНОШЕНИЕ ОСНОВНЫХ ВИДОВ ГАЛОФИЛЬНЫХ ВИБРИОНОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ В г. ВЛАДИВОСТОКЕ, К ФАКТОРАМ КЛЕ-ТОЧНО-ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА.

5.1. Отношение галофильных вибрионов, выделенных из разных источников в г. Владивостоке, к клеточным факторам иммунитета.

5.1.1. Адгезия галофильных вибрионов разных видов на эритроцитах и фагоцитоз штаммов - изолятов от больных.

5.1.2. Отношение основных видов галофильных вибрионов, выделенных в разные годы из объектов окружающей среды к клеточным факторам иммунитета

5.1.3. Сравнительные показатели отношения основных видов галофильных вибрионов, выделенных из разных источников.

5.2. Отношение галофильных вибрионов основных видов, выделенных в г. Владивостоке, к факторам неспецифического гуморального им^у^тета.

ГЛАВА VI. ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К АНТИМИКРОБНЫМ ФАКТОРАМ ГАЛОФИЛЬНЫХ ВИБРИОНОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ РАЗЛИЧНЫХ БИООБЪЕКТОВ.

6.1. Чувствительность галофильных вибрионов к антибиотикам.

6.2. Чувствительность галофильных вибрионов к антисептическим средствам.

6.3. Чувствительность галофильных вибрионов к эубиотикам

Энтеролу», «Ациполу», «Колибактерину», «Бифидумбактерину» и «Линек

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние экологических условий морской среды и организма человека на возбудителей галофильных вибрионозов, их патогенность и способность к индуцированию иммунодефицитов"

Впервые участие галофильных вибрионов в патологии человека было обнаружено в середине прошлого столетия в Японии во время вспышки тяжелой пищевой токсикоинфекции, вызванной галофильными парагемолитическими вибрионами (Fuyino P., Okuno Y., Nakada D. et. al, 1951). Зарегистрирована подобная патология и в условиях Приморья (Воронок В. М., Тарасенко Т. Т., Качан А. Э., Говор О. В., Лискина Н. И., Казакова М. В., 1997; Григорьев Ю.И., Пивоваров Ю. П., 1975). В последующие годы спектр заболеваний данной этиологии оказался более широким. В частности, была доказана причастность галофильных вибрионов к этиологии раневых инфекций, отитов, септицемий и других нозологических форм (Бойко А. В., 1994).

Галофильные условно-патогенные бактерии рода Vil. отличающиеся солелюбивостью и неспособные размножаться в отсутствие хлористого натрия, являются, как правило, обитателями прибрежных вод. Это, по-видимому, связано с высоким уровнем содержания аллохтонного органического вещества в последних, поступающего сюда с суши (Огородникова А. А., 2001). Так, в морской воде районов с высокой плотностью населения, насыщенной сбросами сточных бытовых вод, отходами животных и человека частота выделения галофильных вибрионов выше, чем в олиготрофных водах. Поэтому не случайно галофильные бактерии очень часто и в большом количестве выделяются, главным образом, вдоль побережья таких стран, как Индия, Китай, Япония, Индонезия, в которых проживает около половины населения Земли. Галофильные микроорганизмы рода Vibrio широко распространены таюк. , прибрежных водах других территорий Южной и Юго-Восточной Азии, у берегов Новой Зеландии, Австралии, в водах Атлантического океана возле ряда европейских стран, около США, Мексики, в водах Тихоокеанского побережья Северной Америки. Они обнаруживаются и в морских водах Северного, Средиземного морей. При микробиологическом исследовании промысловых видов рыб и беспозвоночных их довольно часто находят среди многообразных видов морских гидробионтов (Григорьев Ю.И., Пивоваров Ю. П., 1975).

Галофильные вибрионы в последние годы все чаще заполняют экологическую нишу, образовавшуюся с течением времени в организме человека благодаря комплексу лечебно - профилактических мероприятий и приобретению им иммунитета ко многим другим патогенным микроорганизмам. Последние в связи с этим не находят больше благоприятных условий для своего существования и либо исчезают, либо заменяются иными видами.

Наиболее изученными на сегодняшний день и часто вызывающими инфекционную патологию у человека преимущественно типа пищевых отравлений галофилезной природы, являются V.parahaemolyticus и V.alginolyticus. Исключением, в данном вопросе, не является и Приморский край, в частности, город Владивосток, в котором только в последние (1997, 2001г.г.) зарегистрированы две довольно крупные вспышки данной инфекции (Смоликова Л. М., Ломов Ю. М., Хоменко Т. В., Мурначев Г. П., Кудрякова Т. А., Фецайлова О. П., Сана-мянц Е. М., Македонова Л. Д., Качкина Г. В., Голенищева Е. Н., 2001). Однако, несмотря на это многие стороны характеристики этих возбудителей галофильных вибрионозов остались либо не изученными, либо нуждающимися в дальнейшем углубленном исследовании. Это и определило выбор настоящей темы.

Цель исследования. Биологическая паспортизация и медицинская оценка эпидемической опасности штаммов галофильных вибрионов (V.parahaemolyticus и V.alginolyticus), изолированных от больных и из различных объектов окружающей морской среды залива Петра Великого. Задачами для достижения поставленной цели явились:

1. Изучение видового разнообразия и частоты распространения галофильных вибрионов в различных объектах окружающей среды (морская вода, гид-робионты);

2. Идентификация выделенных культур, определение их таксономической принадлежности и общей биологической характеристики;

3. Выяснение роли галофильных вибрионов в патологии человека;

4. Исследование различных факторов патогенности галофильных вибрионов: ферментов, токсинов и токсиноподобных веществ;

5. Изучение персистентных свойств галофильных вибрионов и их потенциальной роли в развитии патологии у человека (антилизоцимная, антиинтерфе-роновая, антикомплементарная активности, чувствительность к фагоцитозу (индекс Гамбургера, индекс Райта), адгезивные свойства (СПА, К-адгезии)).

6. Определение чувствительности (резистентности) галофилов к антибиотикам, эубиотикам, антисептическим средствам, применяемым в медицине и пищевой промышленности.

7. Разработка способов оценки энтеротоксигенности и ускоренной компьютерной диагностики, лецитиназной активности.

Для выполнения перечисленных задач были использованы разнообразные микробиологические, иммунологические, биохимические, статистические методы исследования. С их помощью на протяжении последних лет (1999 -2002г.г.) было выделено, идентифицировано и исследовано 266 штаммов галофильных вибрионов 102 из них - изоляты от больных, 167 - из окружающей среды.

Научная и теоретическая значимость проведенных исследований заключается в определении медико-биологической значимости галофильных вибрионов в развитии различной патологии у человека, формировании имму-нодефицитов изучение эффективности потенциальных средств профилактики и лечения этих патологических состояний.

Впервые получены данные об эколого-эпидемиологической характеристике галофильных вибрионов, их зависимости от температурных условий, рН, бактериологических загрязнений морской воды.

Важное значение имеют новые данные о чувствительности к эубиотикам, антисептикам, нетрадиционным антибиотикам.

Практическая ценность проведенного анализа определяется: расширением паспортной характеристики галофильных вибрионов данными о факторах патогенности, персистентности, чувствительность к антимикробным факторам.

Разработано рационализаторское предложение «Способ компьютерной бактериологической диагностики галофильных вибрионозов» (Удостоверение № 2453 от 23 мая 2002г. патентного отдела ВГМУ).

Разработано рационализаторское предложение «Способ определения эн-теротоксигенности галофильных вибрионов» (Удостоверение № 2488 от 25 октября 2002г. патентного отдела ВГМУ).

Разработано рационализаторское предложение «Способ определения и оценки лецитиназной активности у галофильных вибрионов» (Удостоверение № 2446 от 18 марта 2002г. патентного отдела ВГМУ).

Все рац. предложения внедрены в бак. лабораториях и в учебный процесс на кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии Владивостокского государственного медицинского университета и Амурской государственной медицинской академии.

- Разработана лекция «Клиническая микробиология и иммунология галофилезов». Внедрена в учебный процесс профильных кафедр ВГМУ (г. Владивосток), АМА (г. Благовещенск), ДВМУ (г. Хабаровск).

Апробация диссертации и её материалов проведена на:

VIII Всероссийском съезде эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. 26 - 28 марта 2002 (г. Москва).

Республиканской научной конференции студентов и молодых ученых Башкирского государственного медицинского университета «Вопросы теоретической и практической медицины», 2001 (г. Уфа).

Научно-практической конференции, посвященной 60-летию НИИ эпидемиологии и микробиологии Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, 24-26 сентября 2001г. (Владивосток).

Симпозиуме с международным участием «Микробиологические исследования на Дальнем Востоке» 10-11 октября 2002г. (г. Владивосток).

Тихоокеанской научно-практической конференции молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы экпериментальной, профилактической и клинической медицины» 1999 - 2001 г.г. (г. Владивосток).

III научно-практической конференции «Компьютер на службе здоровья», 2000 (г. Владивосток).

Структура диссертации. Диссертация написана на русском языке по традиционному плану и состоит из обзора литературы (1 главоЛ собственных исследований (5 глав), заключения, общих выводов, рекомендаций для внедрения результатов исследования в науку и практику, указателя литературы. Последний включает 258 источников, в том числе - 122 иностранных автора. Текст диссертации размещен на 197 страницах, иллюстрирован 46 таблицами, 46 рисунками, 2 схемами.

Положения, выносимые на защиту:

1. Галофилезы - одна из распространенных форм пищевых токсикоинфек-ций в прибрежной части Приморья. Главными его возбудителями являются V.parahaemolyticus, реже - V.alginolyticus.

2. Возникновение галофилезов связано с употреблением морепродуктов, отличается строгой сезонностью (май - сентябрь), зависит от температуры, рН морской воды, санитарно-бактериологических показателей и загрязнений антропогенно - производственного характера.

3. Галофильные вибрионы обладают комплексом ферментов патогенности (лецитиназа, РНК-аза, ДНК-аза), экзотоксинов (энтеротоксигенность, гемоток-син, лейкотоксин), в большой степени представленных у изолятов от больных, меньше - из объектов окружающей среды.

4. Галофильные вибрионы, обладают комплексом факторов персистенции (антилизоцимной активностью, антикомплементарной активностью, антиин-терфероновой активностью, адгезивными свойствами, устойчивостью к фагоцитозу), в связи с чем, могут служить источником развития иммунодефицитов.

5. Галофильные вибрионы чувствительны к антибиотикам (12 традиционно применяемым для лечения данной патологии и 6 - нетрадиционным), эубиотикам (3 - «Энтерол - 250», «Аципол», «Колибактерин»), антисептикам, что может быть использовано для лечебно-профилактических целей.

6. Способы компьютерной бактериальной диагностики галофилезов, определения у них лецитиназы и энтеротоксигенности.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Долгова, Татьяна Геннадьевна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Высеваемость галофильных вибрионов из морской среды отличается сезонностью (май - сентябрь), синхронизируется с нарастанием температуры морской воды, увеличивается в годы эпидемического неблагополучия и в предшествующий период. Видовой состав галофильпыл вибрионов в прибрежной зоне беден и представлен двумя видами V.alginolyticus и V.parahaemolyticus с преобладанием первого из них.

2. Высеваемость галофильных вибрионов из морской среды зависит от ее экологической характеристики. Она выше при инициальном слабокислом и нейтральном рН, ниже - при щелочном. Наибольшая высеваемость отмечена при относительно низком индексе ЛКП, высоком и среднем уровне БПК-5, среднем содержании азота аммония и низком - фенола.

3. Среда обитания галофильных вибрионов характеризуется в прибрежной зоне г. Владивостока высоким содержанием нефтепродуктов, СПАВ, пестицидов, загрязнением свободными (Pb, Ni, Cd, Ag, Zn и др.) тяжелыми металлами, присутствие которых в несколько раз превышает содержание в отдаленных от берега морских зонах.

4. Наибольшая высеваемость галофильных вибрионов от больных пищевыми токсикоинфекциями и гидробионтов (креветки), послуживших источником их инфицирования, совпадает по сезонности с эпидемическим периодом (май - сентябрь), но преобладает в августе. От больных выделяется главным образом V.parahaemolyticus, намного реже - V.alginolyticus.

5. У галофильных вибрионов обнаружены многие факторы патогенности: ферменты - лецитиназа, мурамидаза (лизоцим), оба вида нуклеаз (ДНК-, РНК-аза); токсины - гемо-, лейко- и энтеротоксин. У них отсутствуют фибринокиназа, плазмокоагулаза, гиалуронидаза.

Более богаты факторами пгтогенности галофил . не вибрионы -изоляты от больных пациентов. Некоторые факторы патогенности (лецитиназа), чаще встречается у штаммов из окружающей среды.

Гемо- энтеро- токсины обнаружены только у V.parahaemolyticus, лейкотоксин - у обоих видов, но чаще у изолятов от больных.

6. Персистентные свойства V.parahaemolyticus и V.alginolyticus по частоте проявления и активности зависят от вида, времени и источника их выделения. Наиболее активными являются гостальные штаммы, особенно среди V.parahaemolyticus. Максимальное проявление персистентности галофильных вибрионов отмечено в годы эпидемического неблагополучия -1997, 2001 г.г.

7. Противоклеточные адгезирующие факторы персистенции у V.parahaemolyticus отличаются большей выраженностью в межэпидемический период (выше уровень К-адгезии, СПА), у V.alginolyticus, наоборот, - в период эпидемического неблагополучия. Индекс Райта как показатель отношения галофильных вибрионов к фагоцитозу был максимален у обоих видов - изолятов от больных в годы эпидемических вспышек, индекс Гамбургера - свидетель готовности лейкоцитов к фагоцитозу - постепенно нарастал к периоду эпидемического взрыва.

8. Влияние галофильных вибрионов на факторы гуморального иммунитета выше у штаммов - изолятов от больных в период эпидемической вспышки, у штаммов из окружающей среды отмечено постепенное нарастание к ее началу. AJIA нарастала у обоих видов вибрионов к периоду эпидемического неблагополучия, АКА - была зарегистрирована максимально часто в межэпидемический период у V.parahaemolyticus, АИА - у V.alginolyticus к моменту эпидемической вспышки.

9. Галофильные вибрионы V.parahaemolyticus и V.alginolyticus оказались совершенно нечувствительны к канамицину, первый из них - дополнительно к доксициклину и стрептомицину, второй - к тетрациклину.

Высокая чувствительность обоих видов отмечена к офлоксацину, рифампицину, левомицетину, поимиксину, ципрофлоксацину, цифотаксиму, цефалотину.

V.parahaemolyticus выделенные от больных, были более чувствительны по сравнению с внеорганизменными штаммами к офлоксацину, рифампицину, левомицетину, полимиксину, ципрофлоксацину, цефатоксиму, цефалотину. Самым контрастным было отношение к карбенициллину (100% против 0,0%)Ниже по уровню, но с преимуществом у гостальных культур оказалась чувствительность к гентамицину, цефалотину, цефалексину.

V.alginolyticus обнаружил близость показателей у гостальных и внеорганизменных штаммов к рифампицину, выше у первых - к офлоксацину, левомицетину, полимиксину, больше у вторых - к гентамицину, ципрофлоксацину, карбенициллину, неомицину.

10. Чувствительность галофильных вибрионов основных видов к антисептикам была высокой, а у V.alginolyticus по отношению к йоду, бриллиантовой зелени, фукорцину и у V.parahaemolyticus - к бриллиантовой зелени - абсолютной (100%).

Чувствительность к мараславину, салициловому спирту, КМпС>4 была выше у V.alginolyticus.

11. Эубиотики «Колибактерин», «Энтерол», в меньшей степени «Аципол» оказывали на галофильные вибрионы из разных источников бактериостатический и бактерицидный эффект, резко сокращая количество микробных клеток, изменяя морфологию - у выживших. «Колибактерин» усиливал in vitro гемотоксин у вибрионов V.parahaemolyticus - изолятов от больных и из креветок, не влияя на этот критерий у водно-морских штаммов того же вида.

Эубиотики «Линекс», «Бифидумбактерин», в условиях эксперимента свое антагонистическое влияние на вибрионы не проявляли.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ И ПРАКТИКУ.

Для внедрения предлагается и частично внедрено следующее:

1. «Способ ускоренной компьютерной диагностики галофильных вибрионозов» - рационализаторское предложение (Удостоверение патентного отдела ВГМУ № 2453 от 23 мая 2002г.).

2. «Способ определения эетеротоксигенности галофильных вибрионов» (Удостоверение патентного отдела ВГМУ № 2488 от 25 октября 2002г.).

3. «Способ определения лецитиназы у галофильных вибрионов» (Удостоверение патентного отдела ВГМУ № 2446 от 18 марта 2002г.).

4. «Способ определения чувствительности галофильных вибрионов к антибиотикам методом дисков».

5. Лекция «Клиническая микробиология гагофильных вибрионозов». Внедрена в учебный процесс профильных кафедр ВГМУ, АГМА, ДВГМУ, систему ИПК ВГМУ г. Владивостока.

6. Рекомендуются перед лечебно-профилактическим назначением антимикробных средств предварительные испытания чувствительности к ним первых генераций штаммов галофильных вибрионов - изолятов начинающегося эпидемического сезона и учет наблюдений предшествующего мониторинга.

7. Необходима комплексная клиническая оценка опасности для больных факторов патогенности и персистенции у галофильных вибрионов как прогностических указаний на развитие возможных осложнений и иммунодефицитов неспецифического барьера защиты макроорганизма от инфекции.

8. При оценке эпидемической значимости возбудителей галофильных вибрионозов необходимо четко дифференцировать их на гостальные и внеорганизменные штаммы как различные по своей патогенности и персистентности.

9. При санации прибрежной зоны заливов Петра Великого целесообразно обратить внимание на экологические (биологические, химические) загрязнители, способствующие повышенной выживаемости и высеваемости галофильных вибрионов: слабокислой рН в начале эпидемического сезона с последующим расщелачиванием среды, присутствие СПАВ, нефтепродуктов, солей тяжелых металлов, азота аммония, фенола из микробиологических показателей - индексы ЛКП и БПК - 5.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

За полувековую историю учения о галофильных вибрионах и галофилезах, начавшего свое развитие с момента возникновения эпидемической вспышки неизвестной пищевой токсикоинфекции в Японии и описанной Fudgino Т., 1950, многое стало известно об ее возбудителях.

Установлены географический ареал этого заболевания, его привязанность к прибрежным территориям морей и океанов, многообразие видов галофильных вибрионов, показана их способность вызывать не только пищевые отравления, но и септические процессы с образованием разнообразных гнойных очагов, изучены многие биологические характеристики этого рода.

Однако, наиболее важные из них остались до сих пор либо вовсе не исследованными, либо изучены недостаточно. Неясны патогенетические особенности развития галофилезов, не выявлены ассортимент факторов патогенности возбудителей, их влияние на клеточно-гуморальные механизмы защиты макроорганизма. Недостаточно исследованы особенности экологии среды обитания галофильных вибрионов, в том числе и тех двух широко распространенных видов - V.parahaemolyticus и V.alginolyticus, которые побывали в руках исследователей.

Эти основные направления и легли в основу цели по разработке комплексной биологической паспортизации галофильных вибрионов, встречающихся в конкретной среде г. Владивостока и его прибрежной части. Задачей прикладного характера служили разработка ускоренной компьютерной диагностики галофилезов, дифференциации их возбудителей и оптимизация микробиологического тестирования их по параметрам факторов патогенности, чувствительности к некоторым антимикробным факторам - антибиотикам, пробиотикам, антисептикам.

Материалом для исследования явились 266 культур галофильных вибрионов. Из них 125 культуры принадлежали к V.parahaemolyticus, 141 - к V.alginolyticus. Причем, среди первых из них 75 штаммов имели гостальное происхождение, 50 - внеорганизменный источник; среди вторых общее число культур разделилось по тем же признакам на 27 и 114 штаммов соответственно.

Высеваемость культур галофильных вибрионов наблюдалась в течение 1997 - 2001 г.г. весь эпидемический период, продолжающийся с мая по сентябрь включительно с преобладанием пика в августе во всех 14 исследованных точках. Выделенные штаммы тестировались по всем известным для них биологическим признакам, но особое внимание было уделено дифференциации их по углеводолитическим группам Хейберга. При этом из морской среды выделяется главным образом V.alginolyticus I группы Хейберга, от больных - V.parahaemolyticus VII группы Хейберга.

При анализе экологических условий пребывания галофилов во внешней среде более высокая высеваемость вибрионов отмечена при слабокислой и нейтральной инициальной рН в диапазоне 6.6 - 7.0 и одновременном росте температуры морской воды. Так, при указанном диапазоне рН частота их выделения была высокой и колебалась в пределах 89,6 - 100 %. При расщелачивании морской воды, при рН 7,2 и выше высеваемость галофильных вибрионов неизменно была ниже. Имели значение и другие факторы среды. В частности, выявлена наибольшая высеваемость галофильных вибрионов при относительно низком индексе ЛКП, высоком и среднем уровнях БПК-5, среднем содержании азота аммония и относительно низком фенола.

Наибольшая высеваемость галофильных вибрионов отмечена при высоком содержании нефтепродуктов, СПАВ и пестицидов, изученных А. А. Огородниковой (2001). Морская вода в прибрежной зоне Амурского и Уссурийского заливов - местах отбора проб, по ее данным, загрязнена как свободными, так и связанными элементами тяжелых металлов. По первым из них особенно высока загрязненность Pb, Со, Ni и некоторыми другими элементами, по вторым - особенно Cd, Ag, Zn, теми же Ni, Pb.

Надо отметить, что исследования проводились в период нарастания и максимума солнечной активности, что, очевидно, нашло отражение в колебаниях уровня бактериологических находок в разных источниках.

При изучении высеваемости и особенно дифференциации выделенных культур имели место определенные трудности, связанные с многочисленностью обрабатываемых проб и штаммов, многообразием выделенных видов галофильных вибрионов и недостаточностью справочного идентификационного материала.

Сложность видовой дифференциации многочисленных культур заставила нас разработать ускоренную компьютерную диагностику галофильных вибрионозов, в основе которой лежала предложенная нами система кодирования признаков.

Способ защищен нами как рационализаторское предложение и внедрен в лабораторную практику противочумной службы г. Уссурийска и г. Владивостока.

Одновременно с этим были адаптированы к потребностям изучаемых возбудителей галофилезов методы определения некоторых факторов патогенности (лецитиназа, энтеротоксин), выявления чувствительности к антимикробным факторам и др. Они также заявлены и защищены авторскими удостоверениями как рационализаторские предложения.

В процессе расширенной микробиологической паспортизации галофильных вибрионов наше внимание привлекли, прежде всего, факторы патогенности галофильных вибрионов, выделенных от больных пищевой токсик* инфекцией и окружающей морской среды.

Исследования показали, что у штаммов галофильных вибрионов видов V.parahaemolyticus и V.alginolyticus, выделенных от больных, частота обнаружения факторов патогенности была выше, чем у изолятов из морской среды. Причем, наибольшая частота их выявления отмечена в годы эпидемического неблагополучия. Ими явились 1997 и 2001 г.г.

У изученных галофильных вибрионов присутствуют, как оказалось, многие факторы патогенности: ферменты лецитиназа и мурамидаза (лизоцимогенность), гемотоксин, лейкотоксин, отмечена энтеротоксигенность, выявлены оба вида нуклеаз - ДНК-аза, РНК-аза, но отсутствуют фибринокиназа, гиалуронидаза, плазмокоагулаза широко распространенные у других бактерий.

Так, оба вида галофильных вибрионов, - V.parahaemolyticus и V.alginolyticus, исследованных в работе, обладали высокой лецитиназной активностью с преобладанием ее частоты у первого из них. Отмечена также наибольшая частота данного признака у штаммов - изолятов из объектов окружающей среды в эпидемический сезон 2000 - 2001 г.г., особенно у V.alginolyticus.

Лизоцимогенность галофильных вибрионов основных видов в эпидемический сезон была выше у гостальных штаммов, но в разные годы: в 1997г. - у V.alginolyticus, в 2001г. - у V.parahaemolyticus. Среди внеорганизменных культур в 2000,2001 г.г. лизоцимогенность, напротив, преобладала у первого вида, а в 1999г. - у второго. Однако, следует отметить, что средняя частота лизоцимогенности среди всех изученных штаммов было сравнительно небольшей - всего 15,26±2,28%.

Гемо- и энтеротоксигенность выявлена только у V.parahaemolyticus, причем, с 2,0 - 2,5 кратным превышением их частоты у штаммов от больных пищевыми токсикоинфекциями над изолятами из морской среды.

Лейкотоксин обнаружен у обоих видов галофильных вибрионов вне зависимости от источника их выделения, но с преобладанием частоты лизированных лейкоцитов в опытах с V.parahaemolyticus и больше у изолятов от больных.

Гемо- энтеро- и лейкотоксигенность у V.parahaemolyticus чаще регистрировались у гостальных и внеоранизменных штаммов в эпидемический сезон 2001г.

Нуклеазы (ДНК-аза, РНК-аза) выявлены у обоих видов галофильных вибрионов, но у гостальных штаммов их частота оказалась выше, особенно в эпидемически неблагополучном 2001г. Однако, внеорганизменные культуры обнаруживали ДНК-азную активность почти в 1,5 раза реже, а РНК-азную -намного чаще.

У V.parahaemolyticus гостальные и внеорганизменные к у льтуры проявляли одинаковую, причем очень высокую РНК-азную активность (100%). Среди V.alginolyticus такой показатель отмечен только в эпидемический сезон 1997г. и лишь у изолятов от больных.

Следует отметить, что в ходе исследования факторов патогенности, в частности, лецитиназы и энтеротоксина, нам удалось получить весьма показательные результаты только благодаря разработанным нами способам, адаптированным к биологическим особенностям галофильных вибрионов.

Оценивая факторы болезнетворного действия галофильных вибрионов, несмотря на некоторые колебания их выраженности у разных видов, следует подчеркнуть, что их опасность для здоровья человека связана, прежде всего, с разносторонностью их патогенетического влияния hu организм. Это необходимо учитывать, хотя пищевая токсикоинфекция галофилезной природы чаще не имеет высокой тяжести.

Не меньшее значение имеют и наблюдения по отношению галофильных вибрионов к факторам клеточно-гуморальной защиты организма от возбудителей галофилезов. Они, как установлено, обладают способностью к индуцированию неспецифических иммунодефицитов. Это удалось проследить in vitro на примере изучения персистирующей активности штаммов.

Персистентные свойства основных видов галофильных вибрионов -V.parahaemolyticus и V.alginolyticus - по частоте проявления и активности зависят от вида возбудителя, времени и объекта выделения штаммов.

Наиболее персистентно активным видом являются У.с ahaemolyticus и штаммы гостального происхождения обоих видов.

Среди культур, выделенных от больных во время двух последних вспышек пищевых токсикоинфекций в 1997 и 2001г.г., как установлено, наблюдаются некоторые различия по персистирующим свойствам.

Адгезивнее свойства галофильных вибрионов в отношении эритроцитов человека О (I) группы и индекс Райта как показатель интенсивности фагоцитоза были несколько выше у культур, выделенных в 1997 году, а индекс Гамбургера как индикатор готовности лейкоцитов к фагоцитозу - в 2001г., то есть единой направленности в выраженности этих процессов не было даже в эпидемически неблагополучные периоды.

Отмечены также различия и у штаммов, выделенных из объектов окружающей среды. Коэффициент адгезии имел наименьшее значение у V.parahaemolyticus в 2001г., а наивысшее - в 1999г.; у V.alginolyticus, наоборот,

- в 1999г. и 2001г. соответственно.

Наивысшие значения среднего показателя адгезии (СПА) были отмечены у V.parahaemolyticus в 2000г., а у V.alginolyticus - в 2001г.

Показатели фагоцитоза в отношении штаммов обоих видов имели тенденцию к незначительному повышению значений с течением времени. Для V.parahaemolyticus, выделенных из объектов окружающей среды, индекс Гамбургера вырос с 1999 по 2001 г.г. на 7,59%, а для V.alginolyticus - изолятов из того же объекта - только на 0,08%; для культур, выделенных от больных -на 6,5% и 1,95% соответственно.

Тенденции в изменении показателей индекса Райта не были столь однонаправленными. Для культур V.parahaemolyticus, выделенных от больных, значения данного индекса были выше в 1997г. на 0,23кл./ф., а для V.alginolyticus, из того же источника - в 2001г. на 0,43кл./ф.

Для изолятов обоих видов из объектов окружающей среды, была характерна тенденция к незначительному росту индекса ао времени но различающаяся по годам: в 1999г. - на 0,05кл./ф. в 2001г. на 0,47кл./ф. (разница в 9 раз).

Влияние галофильных вибрионов основных видов на неспецифические факторы гуморального иммунитета в целом было выражено сильнее у штаммов

- изолятов от больных, особенно в 2001 году. Среди культур, выделенных из объектов окружающей среды, полученные данные не были столь однозначными.

По антилизоцимной активности (АЛА) у штаммов обоих видов имела место тенденция к нарастанию; по антикомплементарной активности (АКА) наивысшее значение показателя было у V.parahaemolyticus в 2000г., у V.alginolyticus отмечено постепенное нарастание частоты данного признака. Антиинтерыероновая активность (АИА) у V.parahaemolyticus проявила тенденцию к уменьшению значений с течением времени, а у V.alginolyticus -наивысшее значение этого признака отмечено в 2000г.

Исходя из сказанного, следует заключить, что галофильные вибрионы видов V.parahaemolyticus и V.alginolyticus представляют несомненную патогенетическую опасность для здоровья человека не только в связи с остротой вызываемой ими пищевой токсикоинфекции, но и как инициаторы возможного формирования иммунодефицита в естественном неспецифическом иммунитете разной сложности.

Выраженная оснащенность галофильных вибрионов анализируемых видов факторами патогенности и персистенции указывает на необходимость тщательной разработки современных средств антибактериальной терапии и профилактики, а также систематического мониторинга за их эффективностью.

С этой целью были проверены чувствительность исследованных галофильных вибрионов к 12 - ти традиционным и 6 - ти нетрадиционным для них антибиотикам, 5 пробиотикам (колибактерин, энтерол, аципол, бифидумбактерин, линекс) и 6-ти антисептикам (фукорцин, мараславин, Kmn04, бриллиантовая зелень, салициловый спирт, йод).

Исследования чувствительности к перечисленным антимикробным факторам галофильных вибрионов, выделенных из различных биообъектов, показали неодинаковые результаты.

Прежде всего, галофильные вибрионы V.parahaemolyticus и V.alginolyticus обнаружили неодинаковую чувствительность к большинству антибиотиков. Совершенно нечувствительными в условиях in vitro они оказались к канамицину, V.parahaemolyticus - дополнительно к доксициклину и стрептомицину; V.alginolyticus - к тетрациклину.

Высокая и близкая чувствительность у обоих видов выявлена к офлоксацину, рифампицину, левомицетину, полимиксину М, цефатоксиму; средняя - к карбеннцнллину и гентамицину. К остальным антибиотикам чувствительность была либо низкой, либо вовсе отсутствовала.

Чувствительность галофильных вибрионов к антибиотикам зависела от источника выделения культур. V.parahaemolyticus, изолированные от больных, были более чувствительны по сравнению с внеорганизменными штаммами к офлоксацину, рифампицину, левомицетину, полимиксину М, ципрофлоксацину, цефатоксиму, цефалотину. Самым контрастным было отношение штаммов из различных популяций к карбенициллину (100% против 0,0%)Ниже по уровню, но с преимуществом у гостальных культур оказалась чувствительность к гентамицину, цефалотину, цефалексину.

Чувствительность V.alginolyticus была ровной у гостальных и внеорганизменных штаммов к рифампицину, выше у первых из них - к офлоксацину, левомицетину, полимиксину М; больше у вторых - к гентамицину, ципрофлоксацину, карбенициллину, неомипину. К остальным антибиотикам чувствительность исследуемых культур была низкой без особых различий по источникам их выделения.

Чувствительность галофильных вибрионов основных видов к антисептикам была высокой, а у V.alginolyticus по отношению к йоду, бриллиантовой зелени, фукорцину и у V.parahaemolyticus - к бриллиантовой зелени - абсолютной (100%).

Чувствительность к мараславину, салициловому спирту, КМп04 оказалась выше у V.alginolyticus.

Пробиотики или эубиотики «Колибактерин», «Энтерол», в меньшей степени - «Аципол» оказывали на галофильные вибрионы, изолированные из разных источников, бактериостатический и бактерицидный эффект. Они резко сокращли количество микробных клеток, изменяли морфологию у выживших штаммов. «Колибактерин» усиливал in vitro гемотоксическое действие вибрионов - изолятов от больных и из креветок, не влияя на этот критерий у водно-морских штаммов.

Эубиотики «Линекс» и «Бифидумбактерин», в условиях эксперимента свое антагонистическое влияние на галофильные вибрионы не проявляли.

Таким образом, проведенные нами исследования пополнили знания по возбудителям галофилезов основных видов, что, с одной стороны, расширило представления о проблеме, а с другой, - позволяет рекомен^^чть медицинской науке и практике ряд предложений для внедрения.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Долгова, Татьяна Геннадьевна, Владивосток

1. Авчинников А. В. Микробное загрязнение водной среды и его влияние на заболеваемость населения.// Медицинская консультация. 2000. - № 2. - С. 43-47.

2. Адамов А. К. Метаболические и иммунологические аспекты патогенности микроорганизмов: Автореф. дис. канд. мед.наук. - Саратов, 1994. -27с.

3. Алленов А. В. Микробиологическая и эколого-эпидемиологическая характеристика вибрионозов в Приморском крае: Автореф. дис. канд. мед.наук. Владивосток, 1999. - 28 с.

4. Алленов А. В., Кнзилова М. Д., Ткачев А. В., Мурначев Г. П. Организация эпиднадзора за холерой в г. Владивостоке// Актуалт проблемы профилактики особо опасных и природноочаговых инфекционных болезней. Иркутск, 1994.-С. 10.

5. Альдова Е. Серовары Vibrio parahaemolyticus. II Журн. гигиены, эпидемиологии, микробиологии и иммунологии. 1989. - Т. 33. - № 2. - С. 223 - 233.

6. Анисимова Л.А., Бородин A.M. Генетические детерминанты резистентности к антибиотикам грамотрицательных бактерий //Молекулярная генетика микробов и вирусов. 1988. - № 11. - С. 3.

7. Ашмарин И. П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Наука, 1962. - 178 с.

8. Баснакян И. А., Мельникова В А. Стрессовые белки у бактерий// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - № 6. - С. 99.

9. Беляков В.Д., Голубев Д.Б., Каминский Г.Д., Тец В.В. Саморегуляция паразитарных систем: Молекулярно-генетические мехрт,,*змы. — М.: Медицина, 1987. 238с.

10. Биргер М.О. (ред.) Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, М.: Медицина, 1982. 200 с.

11. Бойко А. В. Факторы патогенности некоторых вибрионов и аэромонад// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000. - № 6. - С. 104107.

12. Бойко А. В. Факторы персистенции микроорганизмов// Эпидемиология, клиника, диагностика, лечение и профилактика важнейших инфекционных болезней. Мат.конф.- Тамбов-Астрахань, 1994. С. 33.

13. Бойко А. в., Бойко О. В. Рибонуклеазная активность бактерий как фактор персистенции некоторых возбудителей сапронозных инфекций// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1997. - № 4. - С. 71-73.

14. Бойко А. В., Ющенко Г. В. Питательные среды для выделения парагемолитических вибрионов (Обзор литературы)//Клинич. Лаб. диагностика. -1993.-№2.-С. 57-59.

15. Бойко А.В., Погорелова Н.П., Жигарева Т.М. Эколого-эпидемиологические аспекты распространенности Vibrio parahaemolyticus в пресноводном регионе// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1994.-№3.-С. 49-51.

16. Бойко А.В., Погорелова Н.П., Черникова Ю. Ю., Жигарева Т.М. Опервых случаях острых кишечных инфекций, вызванных парагемолитическими вибрионами в пресноводном регионе// Казан, мед. журн. 1989. - Т. 70. - № 3. -С. 170-172.

17. Бондаренко В. М. Общий анализ представлений о патогенных и условно-патогенных бактериях// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1997. - № 4. - С. 20-26.

18. Брилис В. R, Брилене Т. А, Ленцнер X. IL, Ленцнер А. А. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов//Лаб. дело. 1986. - № 4. - С. 210.

19. Брудастов Ю. Л., Сборец Т. С., Дерябин Д. Г. Активность каталазы и супероксиддисмутазы Staphylococcus aureus при их персистировании в макроорганизме // Журк. микробиологии эпидемиологии и иммунологии. 2001. - № 2. - С. 13-16.

20. Бухарин О.В., Гриценко В.А. Экологическая детерминированность внутривидового разнообразия патогенных бактерий // Журтт микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000. - № 1. - С. 103-106.

21. Бухарин О. В. Персистенция патогенных бактерий. М.: Медицина, Екатеринбург: УрО РАН, 1999 - 370 с.

22. Бухарин О. В. Персистенция патогенных бактерий: теория и практика.// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000. - № 4. - С. 5-7.

23. Бухарин О. В., Васильев Н. В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине. Томск: изд-во ун-та, 1974. - 207с.

24. Бухарин О. В., Литвин В. Ю. Патогенные бактерии в природных экосистемах. -Екатеринбург: УрО РАН 1997. 247 с.

25. Бухарин О. В., Усвяцов Б. Я., Малышкин Л. П., Немцева Н. В. Метод определения антилизоцимной активности микроорганич^ч //Журн. микробиологии эпидемиологии и иммунологии 1984. - № 2. - С. 27 - 29.

26. Бухарин О.В. Персистенция бактериальных патогенов как результат отношений в системе паразит-хозяин// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1997. - № 4. - С. 3.

27. Бухарин О.В., Бойко А. В., Журавлева Л. А. Факторы персистенции и (или) патогенности вибрионов и аэромонад различной экотопической принадлежности.// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1998. - № 5. - С. 30-33.

28. Бухарин О.В., Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г. Изучение антикомплементарной активности стафилококков// Клинич. лаб. диа! ностика. 1992. -№ 11-12.-С.68.

29. Бухарин О.В., Каган ЮЛ., Бурмистрова А.Л. Сальмонеллы и сальмо-неллезы. — Екатеринбург: УрО РАН. 2000. - 260с.

30. Бухарин О.В., Чернова О.Л., Матюшина С.Б. Способность стафилококков к инактивации карнозина // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -1999.-№5.-С. 545-546.

31. Ведыиина Е. А., Хайтович А. Б. Микробиология галофильных вибрионов// Антибиотики и химеотерапия. 1993. - Т. 38. - № 10-11. - С. 60-69.

32. Вейант Р., Мосс У., Уивер Р., Холлис Д. Джордан Дж., Кук Э., Дейншвар М. Определитель нетривиальных патогенных грамотрицательных бактерий (аэробных и факультативно анаэробных): Пер.с англ.-М.: Мир, 1999. -791 е., ил.

33. Виноградова Л. А., Пархомчук Т. К. Комплексные санитарно-биологические критерии оценки качества водных объектов в условиях возрастающей антропогенной нагрузки// Гигиена и санитария.- 1991.-№ 1.-С.24- 26.

34. Витухновская Л. А., Исмаилов А. Д. Кинетика свечения бактерий Vibrio harveyi при различных градиентах ионов Na+ на плазматической мембране // Горизонты физ.-хим.биол.: Шк.-конф., Пущино, 28 мая 2 ^оня, 2000. - Т. 1. - Пущино, 2000. - С. 193.

35. Голковский Г. М., Хайтович А. Б., Львовская А. Б. Полужидкая элективно-дифференциальная среда для выделения чистых культур вибрионов.// Лаб. дело. 1984. - № 4. - С. 244-247.

36. Григорьев Ю.И. Распространение галофильных вибрионов в морской воде: Автореф. дис. канд. мед. наук, Москва, 1974. - 26с.

37. Григорьев Ю.И., Пивоваров Ю. П. Распространение Vibrio рага-haemolyticus в различных объектах внешней среды // Гигиена и санитария. -1975.-№ 5.-С. 63-66.

38. Далин М.В., Фиш Н.Г. Белковые токсины микробов. М.: Медицина, 1980.-114 с.

39. Долговременная программа охраны природы и рационального использования природных ресурсов Приморского края до 2005 г. (Экологическая программа), ч. 2. Владивосток: Дальнаука, 1992. - 276 с.

40. Домарадский И. В. Вирулентность бактерий как функция адаптации// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. -1997. № 4. - С. 16-20.

41. Домарадский И.В. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий к окружающей среде // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1997. - №4. - С. 31.

42. Дрынов И. Д., Сергиев В. П., Малышев Н. А. Классификация болезней человека и профилактика заболеваемости населения// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000. - № 4. - С. 106-109.

43. Егоров Н. С. Микробы антагонисты и биологические методы определения антибиотической активности. -М.: Высш. школа, 1965. С. 75 - 78.

44. Езепчук Ю. В. Функциональные критерии патогенности // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1988. - № 5. - С. 113-116.

45. Зуенко Ю. И. Приливное перемешивание как фактор биологической продуктивности субарктических вод в летний сезон // Океанологические основы биопродуктивности северо-западной части Тихого океана. Владивосток: ТИНРО, 1992.-С. 56-79.

46. Зуенко Ю. И. Типы термической стратификации вод на шельфе Приморья //Комплексные исследования морских гидробионтов и условий их обитания. Владивосток: ТИНРО, 1994. - С. 20 - 39.

47. Зуенко Ю. И. Элементы структуры вод северо-западной части Японского моря // Изв. ТИНРО. 1998. - Т. 123. - С. 262 - 290.

48. Зуенко Ю. И., Юрасов Г. И. Водные массы северо-западной части Японского моря //Метеорология и гидрология. 1995. - № 8. - С. 50 - 57.

49. Ибрагимов Ф. X., Погорелова Н. П., Бойко А. В., Буркин В. С., Ге-рок Г. И. Способ выделения парагемолитических вибрионов из различных субстратов// Лаб. дело. 1990. - № 5. - С. 71-72.

50. Иванова Е. П., Романенко Л. А., Горшкова Н. М., Чайкина Е. Л.

51. Микробиологический мониторинг возбудителей сапронозов в воде Богатинско-го водохранилища// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. -2000.-№ 5.-С. 22-25.

52. Карбышев Г. Л. Эпидемиологические особенности пищевых токсико-инфекций, вызываемых морскими галофильными парагемолитическими вибрионами: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Саратов, 1988. - 26 с.

53. Клясова Г. А. Рациональная антибактериальная терапия при критической нейтропении//Инфекция и антимикроб. Терапия. 2000. - №1. - С. 25-37.

54. Королева Н. С., Феклисова JI. В., Рыбалова А. Г., Бавина Н. А., Гребенник М. М. Метод определения антагонистической активности ацидофильных бактерий по отношению к холерным вибрионам//Эпидемиология и инфекционные болезни. 1997. - № 3. - С. 40 - 41.

55. Корчак Г. И., Григорьева JI. В., Гордиенко Н. И., Ващенко В. И., Голковский Г. М. Риск заболеваемости галофилезом в связи с евтрификацией прибрежной зоны моря // Гигиена и санитария. 1992. - № 11-12. - С. 33-34.

56. Корчак Г. И., Шикалов Г. М. Экспериментальное изучение действия некоторых физических и химических факторов на выживание и размножение Vibrioparahaemolyticus II Гигиена и санитария. 1991. - № 5. - С. 74-78.

57. Красильников А. П. Справочник по антисептике. Минск: Вышайш. Школа., 1995.-367 с.

58. Либиизон А. Е. О методике выделения и идентификации галофильных вибрионов// Лаб. дело. 1974. - № 8. - С. 493-495.

59. Либинзон А. Е., Демина А. И., Кулов Г. И., Шестиалтынова И. С., Манукьян Г. В. Галофильные вибрионы, выделенные из Азовского моря// Журн. микробиологии, эпидемиологии, иммунологии. 1977. - № 6. - С. 77-80.

60. Лнбннзон А. Е., Ус 3. И., Гальцева Г. В., Дегтярев Б. М., Голковский

61. Г. М. Фаги галофильных вибрионов// Журнал микробиологии, эпидемиологии, иммунологии. 1995. -№ 1. - С. 15-18.

62. Либннзон А.Е. Методические рекомендации по выделению и идентификации галофильных вибрионов.- Ростов-на-Дону, 1974. 24 с.

63. Либинзон А.Е., Гольдберг А. М. Химиотерапия бактериальных инфекций.- М.: Медицина, 1979.- С. 60-61.

64. Либинзон А.Е., Домарадский И. В.Парагемолитические вибрионы и родственные им галофильные микроорганизмы// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1974. - № 5. - С.80-84.

65. Либннзон А.Е., Лунева Э. И., Каширова А. К., Величко С. А., Сахно Е. И., Шарапова О. К., Преображенская В. Н., Сердюк Н. К., Дитрих Е. Б.

66. Изучение галофильных вибрионов в выделениях человека и морской во-де//Гигиена и санитария. 1980. - № 12. - С. 73-74.

67. Либинзон А.Е., Ус З.И., Лунева Э. И., Голковский Г. М, Шикулов В. А., Демина А. И., Сухнова Г. М., Сухно Е. И. Этиологическая роль галофильных вибрионов при острых кишечных инфекциях//Всерос. съезд микробиологов и иммунологов. М., 1985. - С. 260-262.

68. Лучшева Л. Н. Содержание ртути в компонентах экосистемы бухты Алексеева (залив Петра Великого Японского моря) // Биология моря. 1995. -Т.21.-№6.-С.412-415.

69. Лях С.П. Микробный меланиногенез и его функции. -М: Наука,1981.- 274с.

70. Ляшенко Н.Э. Факторы персистенции E.coli.: Авт^рф. дис. канд. мед. наук. — Оренбург, 1995. 26 с.

71. Мазрухо А.Б., Михась Н.К., Монахова Е.В., Рожков К.К. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000. - № 1. - С. 21-24.

72. Марамович А. С., Ганин В. С., Урбанович Л. Я., Погорелов В. И.

73. Актуальные вопросы эпидемиологического надзора за холерой//Эпидемиология и инфекционные болезни. 1999. - №5. - С. 54-57.

74. Марамович А.С., Наркевич М.М., Пинигин А.Ф. Эндемичные очаги холеры в Азии// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1992. -№5-6.-С. 61 -67.

75. Маслов Д. В. Вспышка галофилеза среди населения г. Владивостока Приморского края// Здоровье населения и среда обитания: Информ. бюл. -1997. -№ 12 (57).-С. 17-18.

76. Мельников М.И., Мельников В.Н., Гимранов В.Г. Ферменты патогенности и токсины бактерий. М.: Медицина, 1969. - 227с.

77. Микробиологические аспекты гигиены пищевых продуктов. (Доклад Комитета экспертов ВОЗ с участием ФАО). Женева: ВОЗ,1978. - С. 22-25.

78. Мнрзоева JI. М. Качество и безопасность продуктов аквакультуры// Инф. пакет. Сер. Аквакультура. Рыбы как переносчики болезней человека и животных. Всерос.н.-и. и проект.-конструкт. ин-т экон., янф. и АСУ рыб. х-ва. -1999.-№ 1.-С. 10-14.

79. Мнрзоева JI. М. Качество и безопасность продуктов аквакультуры// Инф. пакет. Сер. Аквакультура. Рыбы как переносчики болезней человека и животных/ Всерос.н.-и. и проект.-конструкт. ин-т экон., инф. i, АСУ рыб. х-ва. -1999.-№ 1.-С. 1-4.

80. Мисетов И. А., Немцева Н. В. Персистентные свойства микрофлоры открытых водоемов и питьевой воды//Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000. - № 4. - С. 95 - 99.

81. Мисетов ИЛ. Факторы персистенции бактериофлоры воды и их использование в санитарно -гигиенической практике: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Оренбург, 1999. 26 с.

82. Михайлова Е. А., Луда А. П., Бигеев М. И. Антииммуноглобулиновая активность бактерий и ее диагностическая ценность// Персистенция бактерий: Сб. науч. тр./Под ред. О. В. Бухарина. Куйбышев, 1990. - С. 107.

83. Мишустина И. Е., Щеглова И. К., Мицкевич И. II. Морская микробиология: Учебное пособие. Владивосток. Изд-тво Дальневост. Ун-та, 1985.- 184 с.

84. Мотавкина Н. С. Диго Р. Н., Туркутюков В. Б. Методические разработки лабораторных, практических занятий по общему курсу микробиологии, вирусологии и иммунологии. Владивосток, 1990. - Т 2. - 152 с.

85. Немцева Н.В. Микробиологическая характеристика биоценотических взаимоотношений гидробионтов и ее значение в санитарной оценке водоемов: — Автореф. дис. . д-ра мед. наук. — Челябинск, 1998. 26 с.

86. Огородникова А. А. Эколого-экономическая оценка воздействия береговых источников загрязнения на природную среду и биоресурсы залива Петра Великого. Владивосток: ТИНРО-це.пр, 2001. - 193 с.

87. Одум Ю. Экология: В 2-х томах. М.: «Мир», 1986. - Т. 2. - 102 с.

88. Окружающая среда и здоровье населения Владивостока. Владивосток: Дальнаука, 1998.-212с.

89. Определитель бактерий Берджи: В 2-х т. Т. 1: Пер. с англ. /Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уилльямса. - М.: Мир, 1997. -с. 199-200.

90. Пастернак Н. А., Андрусенко И. Г., Ведьм и на Е.А., Габриелян С. А., Шендерович В. А., Соболев В. Р., Шепелев А. П. Метод определения энтеро-токсигенности некоторых видов грамотрицательных бактерий// Лаб. дело. -1985.-№ 10.-С. 556-557.

91. Пастернак Н.А., Ведьмина Е.А., Андрусенко И.Г. Титрование энтеро-токсина холерных вибрионов на модели УФ-2 мутанта Staph.aureus 209Р // Лаб. дело. 1983. - № 9. - С.52-53.

92. Петровская В. Г. Общие закономерности взаимодействия в системе паразит — хозяин и проблема смешанных инфекций// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1982. - № 8. - С. 24.

93. Петровская В. Г., Бондаренко В. М. Роль хромосомы и её взаимодействия с внехромосомными детерминантами в процессе генетического контроля патогенности бактерий// Молекулярная генетика.- 1994.- №5. С. 3-8.

94. Петровская В. Г., Бондаренко В. М., Гостева В. В. Роль антилизоцим-ного признака для выживания бактерий в макрофагах периферической крови человека// Эпидемиология и микробиология раневых инфекций. -М, 1986.-С.34.

95. Петровская В.Г. Роль множественной устойчивости в биологии патогенных и условно-патогенных бактерий// Антибиотики. 19у4. - № 2. - С. 104.

96. Пивоваров Ю.П., Григорьев Ю.И., Зиневич Л.С. Обнаружение V.parahaemolyticus в гидробионтах прибрежных заливов Японского моря.-М., 1976.-24 с.

97. Подорванова Н. Ф., Ивашинникова Т. С., Петренко В. С., Хомичук

98. Л. С. Основные черты гидрохимии залива Петра Великого (Японское море). -Владивосток: ДВО АН СССР, 1989. 201 с.

99. Поздеев В. В., Тхалин А. В., Фельдман А. М., Шаповалов Е. Н. Мониторинг нефтяного загрязнения северной части Тихого океана и прибрежной зоны Японского моря // Тр. ДВНИИ. 1986. - Вып. 37. - С. 3 - 7.

100. Поликарпов Н. А. Солнечная активность и продукция потенциально-патогенными микроорганизмами факторов агрессии// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1994. - № 6. - С. 19.

101. Поляк М. С. Определение чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам «методом дисков». СПб, 1997. - 20 с.

102. Поляк М. С. Принципы рационального применения антимикробных лекарственных средств. СПб, 1996.- 19с.

103. Правила охраны от загрязнения прибрежных вод морей. М.:

104. ЦБНТИ Минводхоза СССР, 1984. 109 с.

105. Рожавин М. Л. Причины несовпадения лабораторных и клинических данных о чувствительности грамотрицательных бактерий к антибиотикам// Антибиотики и химотерапия. -1988. № 6. - С.460.

106. Романова Ю. М., Бошнаков P. X., Баскакова Т. В., Гинцбург A. JI. Механизмы активации патогенных бактерий в организме хозяина// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000. - № 4. - Z.1 - 11.

107. Ряпис Л., А., Беляков В. Д. Современные достижения в молекулярной эпидемиологии холеры// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1996. - № 6. - С. 95-99.

108. Сергевнин В. И. Экологическая классификация острых кишечных инфекций и их возбудителей// Вторая международная конференция «Идеи Пасте-ра в борьбе с инфекциями», 2-4 сентября 1998г.: Тез.докл., СПб., 1998.-С. 145.

109. Сидоренко В.К. Перспективы контроля распростри ^пия антибиоти-корезистентности// Антибиотики и химотерапия. -1998. -№7.-С.З-6.

110. Сидоренко С. В. Резистентность микроорганизмов и антибактериальная терапия// Рус. мед. жур.: РМЖ. 1998. - Т. 6. - № 11. - С. 717-725.

111. Соколов В. Ю. Антиинтерфероновой активность л.лкроорганизмов// Персистенция бактерий: Сб. научн. тр./ Под ред. О. В. Бухарина. Куйбышев, 1993.-С. 83.

112. Соколов В. Ю., Тарасов А. В. Ускоренный метод определения антиинтерфероновой активности// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1992. - № 3. - С.11 - 14.

113. Солодовников Ю. П. Теория этиологической избирательности главных (первичных) путей передачи и их неравнозначности при различных нозологических фсрмах кишечных инфекций// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1999. - № 5. - С. 67-72.

114. Сомов Г. П. Итоги и перспективы изучения экологии внеорганиз-менных популяций патогенных бактерий//Вестн. Рос. АМТТ, 1995.-№8.-С44.

115. Спивак Н. Я., Зуева В. С., Белоцкий С. М. Интерферон и бактериальные инфекции// Антибиотики. 1987. - № 12. - С. 920.

116. Страчунский JI. С. Состояние антибиотикорезистентности в России// Клинич. фармакология и терапия. 2000. - Т. 9. - № 2. - С. 6-9.

117. Тарасенко Т.Т., Грушина Г.А., Воронок В.М., Хоменко Г.В. Пищевые токсикоинфекции, вызываемые галофильными вибрионами, в г. Владивостоке: эпидемиологическая характеристика// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1999. - № 2. - С. 36 - 39.

118. Токаревич К.Н. Условно-патогенные микробы и их роль в инфекционной патологии// Закономерности эпидемического процесса. JL, 1983. -С. 50- 52.

119. Ужевский H.JI. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.: Медицина, 1965. - 423 с.

120. Феофилова Е.П. Пигменты микроорганизмов. - М: Медицина, 1974. - 220с.

121. Хайтович А. Б., Кудрякова Т. А., Македонова JI. Д., Пидченко Н. Н., Качкина Г. В. Фаговары галофильных вибрионов// Жур" микробиологии, эпидемиологии, иммунологи. 1997. - № 2. - С.11-14.

122. Хайтович А.Б., Шикулов В.А. Определение длительности хранения Vibrio parahaemolyticus в продуктах моря// Журн. микробиологии, эпидемиологии, иммунологии. 1996. - № 5. - С. 87-88.

123. Хайтович А.Б., Шикулов В.А.,, Богатырева JI. М. Усовершенствование лабораторной диагностики галофильных вибрионов// Лаб. дело. 1980. - № 12.-С. 749-751.

124. Хесин Л. Непостоянство генома. М.: Медицина, 1994. - 47с.

125. Шавдия Н. Т. Изучение распросранения галофильных вибрионов на территории Грузинской ССР: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Тбилиси, 1981.-26 с.

126. Шеенков Н. В. Роль антилизоцимной активности бактерий в развитии инфекционного процесса и пути ее регуляции: Автореф. канд. дис. Челябинск, 1993. -25с.

127. Шендеров Б. А. Биологические свойства и антибиотикочувствитель-ность неферментирующих и грамотрицательных бактерий// Антибиотики и химиотерапия. 1988. - № 2. - С. 141- 146.

128. Шикалов Г. М. Биологическая характеристика штаммов галофильных вибрионов, возможных возбудителей пищевых токсикоинфекций.: Дис. канд. мед. наук.- М., 1978. 130 с.

129. Шикулов А.В., Либинзон А. Е., Мицевич Г. Ф., Ковальчук И. А.

130. Клинико-эпидемиологическая характеристика заболеваний, вызванных гало-фильными вибрионами на побережье Азовского моря// Журн. микробиологии, эпидемиологии, иммунологи. 1987. - № 7. - С.23-25.

131. Шикулов В. А., Хайтович А. Б., Богатырева Л. М. Выделение галофильных вибрионов от людей и из объектов внешней среды// Журн. микробиологии, эпидемиологии, иммунологи. 1980. - № 6. - С.38-39.

132. Шикулов В.А. Новые виды патогенных вибрионов, выделенные от людей, а также из воды Черного и Балтийского морей// Журн. микробиологии, эпидемиологии, иммунологи. 1994. - № 6. - С. 15-16.

133. Шульгина Л. В., Загородняя Г. И., Шульгин Ю. ГГ., Бывальцева Т.

134. М. Микрофлора дальневосточных морей и ее влияние на продукцию из промысловых гидробионтов // Гигиена и санитария. 1995. - № 1. - С. 14-15.

135. Ющенко Г.В., Шапошников А.А. Гапофилез (заболевание, вызываемое Vibrio parahaemolyticus)//Медицина катастроф. -1998. № 3-4. - С. 23-26.

136. Яковлев С. В., Яковлев В. П. Краткий справочник по антимикробной химиотерапии. М.: Москва, 1998. - 97с.

137. Aiiso К. & Fujiwara К. Feeding tests of pathogenic halophilic bacteria// Annual Report of the Institute of Food Microbiology. Japan: Chiba University, 1963.-Vol. 15.-P. 34.

138. Altschul S. F., Madden T. L., Schaffer A. A., Zhang J., Zhang Z., Miller W., Lipman D. J. Gapped BLAST and PSI BLAST: a new ^"^ration of protein database search programs// Nucleic Acids Res. - 1997. - Vol. 25. - P. 3389 - 3402.

139. Atsumi Т., Mc Carter L. L., Imae Y. Polar and lateral flagellar motors of marine Vibrio are driven by different ion membrane forces// Nature (London). 1992. -Vol. 355.-P. 182- 184.

140. Baba К., Shirai H., Terai A., Kumagai K., Takeda Y., Nishibuchi M.

141. Similsrity of the tdh gene-bearing plasmids of Vibrio cholerae non-01 and Vibrio parahaemolyticusll Microb. Pathog. 1991. - Vol. 10. - P. 61 - 70.

142. Barrow G. I. Marine microorganisms and foodpoisonirig// Hoobs В. C.& Christian, J. H. В., ed. The microbiological safety of food. London: Academic Press, 1973.-P.181.

143. Barrow G. I., Miller D. C. Growth studies on Vibrio parahaemolyticus in relation to pathogenicity// International symposium on Vibrio parahaemolyticus / Fu-jino T. Tokyo: Saikon Publishing Co., 1974. - P. 205.

144. Bassler B. L., Green berg E. P., Stevens A. M. Cross-species induction of luminescence in the quorum-sensing bacterium Vibrio harveyiII J. Bacteriol. 1997. -Vol. 179.-P. 4043-4045.

145. Belas R., Simon M., Silverman M. Regulation of lateral flagella gene transcription in Vibrio parahaemolyticusll J. Bacteriol. -1986.-Vol. 167.-P. 210-218.

146. Ben-Jacob E., Cohen I., Gutnick D. L. Cooperative organization of bacterial colonies: from genotype to morphotype// Annu. Rev. Microbiol. 1998. - Vol. 52. -P. 779-806.

147. Beuchat L. R. Environmental factors affecting survival and growth of Vibrio parahaemolyticus: a review// J. of milk and food technology. -1975.-Vol. 38.-P.-476.

148. Birnboim H., Doly J. A rapid alkaline extraction procedure for screening re-combinent plasmid DNA//Nucleic Acids Res. 1979. - Vol. 7. - P. 1513 - 1523.

149. Blake P. A., Weaver R. E., Hollis D. G. Diseases of humans (other than cholera) caused by Vibrios// Annu. Rev. Microbiol. 1980. - Vol. 34. - P. 341-367.

150. Boles B. R., Mc Carter L. L. Insertional Inactivation of Genes Encoding Components of the Sodium Type Flagellar Motor and Switch of Vibrio para-haemolyticusll J. Bacterid. - 2000. - Vol. 182, N 4. - P. 1035 - 1045.

151. Boom R., Sol C. J. A., Salimans M. M. M., Jansen C. L., Wertheim-van Dillen P. M. E., van Der Noordaa J. Rapid and simple method for purification of nucleic acids// J. Clinical. Microbiol. 1990. - Vol. 28. - P. 495-503.

152. Bsat N., Wiedmann M., Czajka J., Barany F., Piani M., Batt C. A. Food safety applications of nucleic acid-based assays// J. Food Tachnol. 1994. - Vol. 6. -P. 142-145.

153. Caccamese S. M., Rastegar D. A. Chronic diarrhea associated with Vibrio al-ginolyticus in an immunocompromised patient// Clin. Infect. Diseases. 1999. - Vol. 29, N 4. - P. 946 - 947.

154. Cars O. Resistance to antibiotics a threat to human health:Pap. Of the Symposium on Antibiotic Resistence with Emphasis on Animal - Human Transfer, Fal-cenberg, 13-14 Sept., 2000 // Acta vet. Scan. Suppl. - 2000. - N 93. - P. 143 - 148.

155. Chang В., Taniguchi H., Miyamoto H., Yoshida S.-I. Filamentous Bacteriophages of in Vibrio parahaemolyticus as a Possible Clue to Genetic Transmission// J. Bacteriol. 1998. -Vol. 180, N 19.-P. 5094-5101.

156. Choi S. H. Unpublished observation. Dept. of Food Science & Technology.-Korea.: Chonnam National Univ., Kwang-Ju, 1997. 54 p.

157. Comstok L. E., Maneval D., Panigrahi P. //Infect. Immun.-1995.-Vol.63 -P.317-323.

158. Daniel L., Herson Diane S., Hike Doris Т., Hoover Dallas G. Response of pathogenic Vibrio species to high hydrostatic pressure// Appl. and Environ. Microbiol. -1999. Vol.65, № 6. - P. 2776-2780.

159. De Roier D. J. The turn of the screw: the bacterial flagellar motor// Cell.-1998. Vol. 93. - P. 17-20.

160. Dictionary of Japanese Fish Names and Their Foreign Equivalents.1.htyological Society of Japan, Japan.: Tokio, Sanseido Co., LTD, 1981. - P. 884.

161. Dodd С. E. R., Stewart G. А. В., Waites W. M. Biotechnology-based methods for the detection, enumeretion and epidemiology of food poisoning and spoilage organisms// Biotechnol. Gent. Eng. Rev. 1990. - Vol. 8. - P. 1-52.

162. Dorsch M., Lane D., Stackerbrandt E. Towards a phylogeny of the genus Vibrio based on 16S rRNA sequens// Int. J. Syst. Bacteriol. -1992.-Vol.42.-P.58 63.

163. Ebesawa Isao, Shigeru M. Traveler's diarrhea: Current status and its coun-termeasures// Asian. Med. J. 1999. - Vol. 42, N 4. - P. 159 - 166.

164. Enomoto H., Unemoto Т., Nishibuchi M., Padan E. and Nakamura T. Topological study of Vibrio alginolyticus NhaB Na+/H+ antiporter using gene fusions in Escherichia coli cells//Biochim. Biophys. Acta. 1998. - Vol. 1370. - P. 77 - 86.

165. Enos-Berlage J. L., Mc Carter L. L. Relation of Capsular Polysaccharide Production and Colonial Cell Organization to Colony Morphology in Vibrio parahaemolyticusll J. Bacteriol. 2000. - Vol. 182, N 19. - P. 5513 - 5520.

166. Fujino Т., Oku mo Y., Nakada D. On the bacteriological examination of shi-rasu food poisoning// J. Japan. Ass. of Infect. Diseases. 1951. - Vol. 35. - P. 11-17.

167. Furuno M., Nishioka N., Kawagishi I., Homma M. Supression by the DNA fragment of the mot X promoter region on long flagellar mutants of Vibrio alginolyticus// Microbiol. Immunol. 1999. - Vol. 43. - P. 39 - 43.

168. Graf J., Ruby E. G. Host-derived amino acids support the proliferation of symbiotic bacteria// Proc. Natt. Acad. Sci. (USA). 1998. - Vol. 95. - P. 1818 - 1822.

169. Gugnani H. C. Some emerging food and water borne pathogens// J. Commun. Diseases. 1999. - Vol. 1, N 2. - P. 65-72.

170. Henderson В., Wilson M., Mc Nab R., Lax A. J. Cellular microbiology: bacteria host interactions in health and disease. - Nj, 1999. - P. 632 - 633.

171. Henderson I. R., Owen P., Nataro J. P. Molecular switches the ON and OFF of bacterial phase variation// Mol. Microbiol. - 1999. - Vol. 33. - P. 919 - 932.

172. Honda Т., Shimizu M., Takeda Y., Miwatani T. Isolation of factor causing morphological changes of Chinese hamster ovary cells from the culture filtrate of V.parahaemolyticus II Infect. Immunol., 1976. Vol. 14. - P 1028 - 1033.

173. Hooper D. C. New usus for new and old quinolones and the challenge of resistance// Clin. Infect. Diseases. 2000. - Vol. 30, N 2. - P. 243 - 255.

174. Hiromi Obata, Kai Akemi, Morozumi Satoshi. Анализ вспышек пищевого происхождения, вызванных V.parahaemolyticus в Токио: 1989 2000. // Kansen-shogaku zasshi = J. Jap. Assoc. Infec. Diseases. - 2001. - 75, N 6. - P. 485 - 489.

175. Huq M. I., Alam А. К. M. J., Brenner D. J., Morris G. K. Isolation of Vibrio-like group EF-6 from patients with diarrhea// J. Clin. Microbiol. 1980. - Vol. 11.-P. 621-624.

176. Jacobsen C. S., Rasmussen O. F. Development and application of a new method of extract bacterial DNA from soil based on separation of bacteria from soil with cation-exchange resin// Appl. Environ. Microbiol. -1992.-Vol.58.-P.2458 2462.

177. Janda J. M., Powers C., Bryant R. G., Abbott S. L. Current perspectives on the epidemiology and pathogenesis of clinically significant Vibrio spp.// Clin. Microbiol. Rev. 1988. - Vol. 1. - P. 245 - 267.

178. Jaques S., Kim Y.-K., Mc Carter L. L. Mutations conferring resistence to phenamil and amiloride, inhibitors of sodium-driven motility of Vibrio parahaemo-lyticus/l Proc. Natl. Acad. Sci. (USA). 1999. - Vol. 96. - P. 5740 - 5745.

179. Kim Y. -K., Mc. Carter I. L. Analysis of the Polar Flagellar Gene System of Vibrioparahaemolyticusll J. Bacterid. 2000. - Vol. 182, N 13. - P. 3693 - 3704.

180. Koebnik R. К., Locher К. P., Van Gelder P. Structure and function of bacterial outer membrane proteins: barrels in a nutshell// Mol. Microbiol. 2000. - Vol. 37.-P. 239-253.

181. Kogure K. lkemoto E., Morisaki H. Attacment of Vibrio alginolyticus to Glass Surfaces Is Dependent on Swimming Speed// J. Bacteriol. 1998. - Vol. 180, N. 4.-P. 932-937.

182. Kojima S., Shoji Т., Asai Y., Kawagishi I., Horn ma M. A Slow Motility Phenotype Caused by Substitutions at Residue Asp 31 in the Pom A Channel Component of a Sodium - Driven Flagellar Motor// J. Bacteriol. - 2000. - Vol. 182, N 11. -P. 3314-3318.

183. Kothary M. H., Claverie E. F., Miliotis M. D., Madden J. M., Richardson

184. S. H. Purification and characterization of Chinese hamster ovary cell elongation factors of Vibrio hollisea// Infect. Immun. 1995. - Vol. 63. - P. 2418 - 2423.

185. Laboratory diagnosis of common diarrhoeal disease agents// Glimpse News-lett. 2000. - Vol. 22, № 1. - P. 9.

186. Lee J. Y., Bang Y. В., Rhee J. H., Choi S. H. Two-stage Nested PCR Effectiveness for Direct Detection of Vibrio vulnificus in Natural Samples// J. Food Sciens. 1999. - Vol. 64, № 1. - P. 158-162.

187. Lee J. Y., Eun J. В., Choi S. H. Unpublished data. Dept. of Food Science & Tachnology. Korea: Chonnam National University, Kwang-Ju. -1995. - 86 p.

188. Lee J. Y., Jong В. E., Sang H. C. Improving Detection of Vibrio vulnificus in Octopus variabilis by PCR// J. Food Sciens. 1997. - Vol. 62, № 1. - P. 179-182.

189. Lee К. H., Ruby E. G. Symbiotic role of the viable but nonculturable state of Vibrio fischeri in Hawaiian coastal seawater// Appl. Environ. Microbiol. 1995. -Vol. 61.-P. 278-283.

190. Lerstloompleephunt N., Tantawichien Т., Sitprija V. Renal failure in Vibrio vulnificus infection// Renal Failure. 2000. - Vol. 22, N 3. - P. 337 - 343.

191. Mc Carter L. L., Silverman M. Phosphate regulation of gene expression in Vibrio parahaemolyticusll J. Bacterid. 1987. - Vol. 169. - P. 3441 - 3449.

192. Mc Carter L. L., Silverman M. Surface-induced swarmer cell differentiation of Vibrio parahaemolyticusll Mol. Microbiol. 1990. - Vol. 4. - P. 1057 - 1062.

193. Mc Carter L. L. Opa R, a Homolog of Vibrio harveyi LuxR, Controls Opacity of Vibrio parahaemolyticusll J. Bacterid. -1998. Vol 180,N12. -P. 3166-3173.

194. Mc Carter L. L. The multiple identities of Vibrio parahaemolyticusll J. Mol. Microbiol. 1999. - Vol. 1. - P. 51 - 57.

195. Mc Fall-Ngai M. J., Ruby E. G. Developmental biolopv in marine invertebrate symbioses// Curr. Opin. Microbiol. 2000. - Vol. 3. - P. 603 - 607.

196. Mc Fall-Ngai M. J. Consequences of evolving with bacterial symbionts: insights from the squid vibrio associations// Annu. Rev. Ecol. Syst. - 1999. - Vol. 30. -P. 235-256.

197. Mc Lean R. J. C., Whitely M., Stickler D. J., Fuqua W. C. Evidence of autoinducer activity in naturally occurring biofilms// FEMS Microbiol. Lett. 1997. -Vol. 154.-P. 259-263.

198. Miyamoto Y., Kato Т., Obara Y. In vitro haemolytic characteristic of Vibrio parahaemolyticus; its close correlation with human pathogenicity// J. Bacterid. -1969. Vol. 100, N 2. - P. 1147 - 1149.

199. Miyoshi Shin-ichi, Kawata Koji, Tomochika Ken-ichi. Shinoda Sumio.

200. The hemoagglutinating action of Vibrio vulnificus metalloprotease// Microbiol, and Immunol. 1999. - Vol. 43, N 1. - P. 79 - 82.

201. Morita Y., Kataoka A., Shiota S., Mizushima Т., Tsuchiya T. NorM of Vibrio parahaemolyticus. Is an Na+-Driven Multidrug Efflux Pump// J. Bacterid. -2000. Vol. 182, N 23. - P. 6694 - 6697.

202. Moss, C. W., M. I. Daneshvar. Identification of some uncommmon monoun-saturated fatty acid of bacteria//J. Clin. Microbiol. 1992. - Vol. 30. - P. 2511-2512.

203. Nakanishi H., Iida Y., Maeshima K., Teramoto Т., Hosaka Y., Ozaki M.1.olation and properties of bacteriophages of Vibrio parahaemolyticusll Biken J. -1966.-Vol. 9.-P. 149-157.

204. Nakasone Noboru, Ikema Masahide, Higa Naomi, Yamashiro Tetsu, Iwanaga Masaaki. A filamentous phage of Vibrio parahaemolyticus 03:K6 isolated in Laos// Microbiol, and Immunol. 1999. - Vol. 43, N 4 - P. 385 - 388.

205. Nishibuhi M., Kaper J. B. Duplication and variation of the termostable direct hemolysin (tdh) gene in Vibrio parahaemolyticusll Mol. Microbiol. 1990. - Vol. 4. -P. 87-99.

206. Nishibuhi M., Kaper J. B. Termostable direct hemolysin gene of Vibrio parahaemolyticus: a virulense gene acquired by a marine bacterium// Infect. Immun. 1995. Vol. 63. - P. 2093 - 2099.

207. Nyholm S. V., Stabb E. V., Ruby E. G., Mc Fall-Ngai M. J. Establishment of an animal bacterial association: recruiting symbiotic vibrios from the environment// Proc. Natl. Acad. Sci. (USA). - 2000. - Vol. 97. - P. 10231 - 10235.

208. Oliver J. D., Kaper J. B. Vibrio species, in Food Microbiology Fundamentals and Frontiers. M. P. Doyle, L. R. Beuchat and T. J. Montville (Ed.). Washington, DC: ASM Press. 1997. P. 228 - 264.

209. Oliver J. D., Warner R. A., Cleland D. R. Distribution of Vibrio vulnificus and other lactose-fermenting vibrios in the marine environment// Appl. Environ. Microbiol. 1983. Vol. 91. - P. 985 - 998.

210. Raimondi F., Kao J., P., Y., Kaper J., В., Guandalini S., Fasano A. Calcium dependent intestinal chloride secretion by Vibrio parahaemolyticus thermostable direct hemolysin in vitro// Gastroenterology. 1995. - Vol 109. - P. 381 - 386.

211. Raloff J. Waterways carry antibiotic resistance// J. Sci. News. 1999. - Vol. 155,N23.-P. 356.

212. Ramamurthy Т., Albert M. J., Huq A., Colwell R. R., Takeda Y., Takeda Т., Shimada Т., Mandal В. K., Nair G. B. Vibrio mimicus with multiple toxin types isolated from human and enviromental sources// J. Med. Microfc: 1994. Vol. 40. -P. 194- 196.

213. Roberts Jennifer A. Economic aspects of food-borne outbreaks and their control/Brit. Med. Bull. 2000. - Vol. 56, № 1. - P. 133-141.

214. Rosamund W. The impact of antimicrobical resistance: Pap. Of the Symposium on Antibiotic Resistence with Emphasis on Animal Human Transfer, Falcen-berg, 13 - 14 Sept., 2000// Acta vet. Scan. Suppl. - 2000. - N 93. - P. 17-21.

215. Rossen L., Norskov P., Holmstrom K. and Rasmussc F. Inhibition of PCR by components of food samples, microbial diagnostic assaya and DNA-extraction solutions// Int. J. Food. Microbial. 1992. - Vol. 17. - P. 37 - 45.

216. Saito H. and Miura K. Preparation of transformin deoxyribonucleic acid by phenol tretment// Biochim. Biophys. Acta. 1963. - Vol. 72. - P. 619 - 629.

217. Sakazaki R. Present status of studies on Vibrio parahaemolyticus in Japan. In: Symposium presented by the Division of Microbiologi, US Food and Drug Administration. Washington: DC. 1971. - P. 1-15.

218. Sakazaki R. Proposal of Vibrio alginolyticus for the biotype 2 of Vibrio parahaemolyticusll Jap. J. Med. Sci. Biol. 1968. - Vol. 21, N 5.- P. 353 - 362.

219. Sakazaki R., Iwanami S., Tamura K. Studies on the enteropathogenic, facultatively halophilic bacteria, Vibrio parahaemolyticus. II. Serological characteristics. // Ibid. 1965. - Vol. 21, N 5. - P. 313 - 324.

220. Sears C. L., Kaper J. B. Enteric Bacterial Toxins: Mechanisms of Action and Linkage to Intestinal Secretion// Microbiol. Rev.-1996.-Vol. 60.-P. 167-215.

221. Soto G. E., Hultgren S. J. Bacterial adhesins: common themes and variations in architecture and assembly// J. Bacteriol. 1999. - Vol. 181. - P. 1059 - 1071.

222. Soulas C., Baussant Т., Aubry J. P., Delneste Y., Ba»-;iiat N., Caron G., Renno Т., Bonnefoy J. Y., Jeannin P. Outer membrane protein A (Omp A) binds to and activates human macrophages// J. Immunol. 2000. - Vol. 165. - P. 2335 - 2340.

223. Takeda Y. Thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus!I Pharmacol. Ther. 1983. - Vol. 19. - P. 123 - 146.

224. Taniguchi H., Sato K., Ogawa M., Udou Т., Mizuguchi Y. Isolation and characterization of a filamentous phage, Vf33, specific for Vibrio parahaemolyticus!I Microbiol. Immunol. 1984. - Vol. 28. - P. 327 - 337.

225. Terai A., Baba K., Shirai H., Yoshida O., Takeda Y., Nishibuchi M. Evidence for insertion sequence-mediated spread of the thermostable direct hemolysin gene among Vibrio species// J. Bacteriol. 1991. - Vol. 173. - P. 5036 - 5046.

226. Trafic de genes chez les bacteries. Lett. Innst. Pasteur. 1998. - N 23. - P 3.

227. Tkalin A. V., Belan T. A., Shapovalov E. N. The state of the marine environment near Vladivostoc, Russia// Mar. Pbllut Bull. -1993. Vol. 26, N 8. -P. 418 -422.

228. Urdaci M. С., M. Marchand, P. A. Grimont. Characterization of 22 Vibrio species by gas chromatography analysis of their cellular fatty acids// Res. Microbiol.- 1989.-Vol.141.-P. 437-452.

229. Vibrio parahaemolyticus, Japan, 1996 1998// Wkly Epidem. Rec. - 1999. -Vol. 74,N43.-P. 361 -363.

230. Vaidya S. Y., Vala A. K., Dube H. C. Production of cellulases by marine bacteria. // Indian J. Mar. Sci. 2000. - 29, N 4. - P. 336 - 338.

231. Wang Shih-Min, Liu Ching-Chuan, Chiou Yuan-Yow, Yang Hsiao-Bai. Hen Chun-Ta. Vibrio vulnificus infection complicated by acute respiratory distress syndrome in a child with nephrotic syndrom// Pediat. Pulmonol. 2000. - Vol. 29, № 5.-P. 400-403.

232. Wright L., Simpson L. M., Oliver J. D., Morris J. G. Jr. Relation of capsular materials and colony opacity to virulence of Vibrio vulnificus!I Infect. Immunol.- 1990.-Vol. 47.-P. 446-451.

233. Yoh M., Honda Т., Miwatani T. Production by non 01 Vibrio cholerae of hemolysin related to thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticusll FEMS Microbiol. Lett. - 1985. - Vol. 29. - P. 197 - 200.

234. Yoh M., Honda Т., Miwatani T. Purification and characterization of a non-Ol Vibrio cholerae hemolysin that cross-reacts with thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticusll Infect. Immunol. 1986. - Vol. 52. - P 319 - 322.

235. Yoh M., Honda Т., Miwatani Т. Purification and characterization of a Vibrio holisae hemolysin that relates to thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticusll Can. J. Microbiol. 1986. - Vol. 32. - P. 632 - 636.

236. Zanetti S., Deriu A., Volterra L., Falchi M. P., Molicotti P., Fadda G., Sechi L. Virulence factors in Vibrio alginolyticus strains isolateo irom aquatic environments// Med.prev. comunita. 2000. - Vol.12, № 6. - P. 487-491.

237. Zrajevskij J. UNEP's future regional seas programme with special reference the Blac Sea and the North-West Pasific// Pap. Advisory Comm. Prot. Sea Conf.-L., 1994.-P. 131-140.