Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ И ПЕРЕСАДКИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ И ПЕРЕСАДКИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА"



всесоюзный научно-исследовательский институт

животноводства

(виж)

На правах рукописи ХИЛЬК^ВИЧ Сергей Николаевич

УДК ei2.MS.02

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ И ПЕРЕСАДКИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

03.00.13 — Физиология человека и животных

Автореферат диссертации на соискание ученой степени , кандидата биологических наук

' Дубровнцы, Московской области — 1987 г.

Работа выполнена в центре по трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных ВНИИ животноводства н в Московской ветеринарной академии.

Научные руководители — лауреат Государственной премии СССР, доктор ветеринарных наук, профессор И. И. Родин; доктор биологических наук, профессор Н. И. Сергеев.

. Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор А. Д. Бугров; кандидат биологических наук В, Е. Да-ровских.

Ведущее учреждение —Украинский НИИ физиологии и биохимии жнвотных. ^___Г7 / /1

Защита состоится «/£».. Х^с-йг ф/гэ^1987 г. в «мЗ часов на заседании Специализированного совета Д.020.16.02 при Всесоюзном научно-исследовательском институте животноводства.

Адрес института: 142012, Дубровицы, Подольского района, Московской области.

С диссертацией можно ознакомиться в брбржотеке ВИЖ.

Автореферат разослан «

Ученый секретарь Специализированного совета — кандидат биологических наук

И. И, Шмыгни.

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Атал&нао.7Ь.-1ШЦ заключается в том. что она направлена па решение задач, поставленных ХХУП съездом КПСС.

В двенадцатой пятилетке предсто.гт повести производство мяса то 21 миллиона тонн, молока до IOG-IIO миллионов тонн. Большое значение для выполнения этих планов имеет использование достижений научно-технического прогресса, особенно в селекции.

Перевод животноводства на промывдонную технологию обусловливает неотложную необходимость создания высокопродуктивных порок, линий, отвечащих современным требованиям промышленной технологии, говншеиия уровня селекционной работы по совершенствова-нига племенных и продуктивных качеств животных и сохранности поголовья.

Объективно селекционную работу и увеличение поголовья крупного рогатого скота тормозит то. что от самок в условиях промышленной технология получают за юс жизнь 4-5 телят.

Однако, крупный рогатый скот.обладает большим генеративным потенциалом. Так, по Л.ВЛ1емилову (1934) в яичниках трехмесячной телочки имеется до 75000 яйцеклеток,- у 3-летней коровы -21000, у 10-летней коровы - 2500. По данным Л.Хенриета (1955), чиоло зародышевых клеток у животных 200-400 тысяч. Использовать более эффективно столь большой генеративный потенциал позволяет биотехнический метод трансплантации эмбрионов.

На современном этапе реализация метода трансплантации встречает затруднения как в условиях производства, так к во многих научно-исследовательских учреждениях. Не достаточно надежны методы вызывания множествешюй овуляции, высока вариабельность результатов гормональных воздействий, непредсказуема реакция яичников на гормональные препараты. Все ет^е остается не то вершенной t техника извлечения я пересадки эмбрионов.

Цель ,и задачи; йРРДЗДов^чиЦ,., Целью исследований являлось оо-воешге и усовершенствование методов гормональных воздействий для направленного индуцирования половьа циклов я получения суперовуляции, а также ваявление роли ряда факторов технологии трансцервикального получения и пересадки эмбрионов*

Исходя из этого были поставлены следуадие задачи:

I. Освоить и усоведенотвовать метод гормонального индуцирования половых шшюв коров-доноров а телок-реципиентов путем 'применена.! стандартного препарата ГСП* (^оллигон) в сочеттсяи

о проста гланд ином.

2. Изучить в сравнительном аспекте эффективность методов гормонального вызывания супе^ювуляцид гонакотропинами ФСГ-л и ГОЖ у коров-доноров в спонтанный и индуцированный половые пакли.

3. Определить наличие возможной связи гормонального фона коров-доноров перед обработкой с уровнем индущфо ванной суперовуляция.

4. Исследовать влияние исходного гормонального фон а кров« телок-реципиентов на результативность пересадок.

5. Усовершенствовать технологию трапецервякаль но го извлечения н пересадим эмбрионов с использованием различных инструментов и методов нремедикацая.

6. На основе полученных данных выявить степень влияния исходного гормонального профиля на результаты оуперовуляции и при-живляемость эмбрионов, определить значение этих показателей при выборе доноров и реципиентов; оценить методы преыедикации реципиентов и эффективность использования различных инструментов при траненервякальном извлечения и пересадке эмбрионов.

Нахамаа-Домаш-Дй^йха заключается в том , что впервые изучены физиологические факторы, оказывающие влияние на качество индуцированных половых циклов коров-доноров и телок-решшион- . тов. определена степень зависимости оуперовуляции от типа гона-цотрошша и исходного гормонального фона, выявлены-оптимальные концентрации прогестерона в крови телок перед пересадками свеже-получеяных и заиорожеино-оттаянных эмбрионов. Изучены факторы» влияющие на результаты транонервикального извлечения а пересадки эмбрионов.

Драит и^еско^ в^че^то рд^оук. Полученные наш на иные позволяет целенаправленно отбирать .коров-доноров и телок-реципиентов; получать качественные и стабильные результаты гормональных воздействий с целью синхронизации охоты и получения су перо нуля— ции; более эффективно проводить извлечение и пересадку эмбрионов.

йив1гоояи&. Научные разработки внедрены в ОПХ "Дубровины" Подольский район Нооковокал обл., а также используются в учебном процессе при изложении курса акушерства и искусственного осеменения в Горском с.-х. институте.

АЛГОЗаМиА рзбоуц. Материалы диссертации доложены на расши-

Рэнном заседания кафедры акушерства и искусственного осеменения Московское ордена Трудового Красного Знамени ветеринаркой академии им. К. It.Скрябина и на Всесоюзной конференции тлодых ученых (Москва, 1905).

Щубгчицапия результатов иг^плогежггй. По теме диссертации опубликовано 3 работы.

Объец рабртцд Диссертация изложена на 137 страницах машинописного текста, иллюстрирована 27 таблицами, 7 рисунками. Список литературы включает 193 источника, б том числе 144 иностранных.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводили в 1984-1985 гг. в Центре по трансплантация эмбрионов ЕЛИ и опытно-производственном хозяйстве ВЖ -"Щапово". Опыты по синхронизации охоты у доноров и реципиентов проведены на 64 коровах и СЗ телках. Изучение эффективности гормонального вызывания суперовуляции проведено на 125 коровах*. Влияние исходного гормонального профиля на уровень суперовуляции я эффективности пересадок на 75 донорах я 94 реципиентах. Технология трансцервпкального извлечения и пересадки, фактора влияющие на ее эффективность изучены на 72 донорах и 260 реципиентах.

В качестве доноров использовали торов черно-пестрой породи 4-6-летнего возраста, живой массой 500-650 кг, удоем 4-7 тыс,кг молока за лактацию.

В качестве реципиентов использовали телок черно-пестрой породы в возрасте 16-18 месяцев с живой массой 350-380 кг.

КорАлениа животных осуществляли по норнам БИЯ.

При выборе животных для экспериментов учитывали общее состояние здоровья, упитанность, состояние репродуктивных органов. , Использовали только здоровых животных с правильным чередованием полевых циклов. ОхОту определяли ю четко выраженному рефлексу неподвижности во время прогулки в стойловый период один раз в сутки, в летний - два раза утром и вечером.

В своих исследованиях мы'применяли фоллигон - стандартный препарат ГСКК высокой степени очистки, ССГ-ir - препарат, представляющий собой фолликулостямулируший гормон высокой степени очистки, получаемый из гипофиза свиней я эстроген - синтетический аналог простагландкна •

С целью синхронизация охоты коро сам инъецировали фоллигон

в дозе 500 И.Е. и через 40 чалов - зстрсиїан в дозе 500 мкг; тэл-кам-фоллигон в доза 250 II.£. к зстрофан в дозе 500 мкг одновременно в две различило точки. Препараты вводил« внутримышечно независимо от дня полового цикла. Качество индуцированного цикла у доноров определяли по результатам индуцированной подиовуляшщ. у реципиентов - по результатам аппликаций 7-8-дневных эмбрионов.

Для получения суперовуляции у доноров ФСГ-п вводили внутримышечно с В по 12 день спонтанного полового цикла ежедневно утром к вечером по 5 кг с интерьалом 12 часов (общая доза 60 мг) и на II-tt донь - эстро-^ан в дозе 500 мкг, Фоллшхш инъецировали на 11-й день индуцированного полового цикла в дозе 2500-3000 И.Е, Через 48 часов после шгьекнод фоллигоїш вводили эстрофан в дозе 500 мкг*

Через 48 часов после инъекции эстрофана ко роь-допоров осеменяли на протяжении охоты с интервалом 12 часов двойной дозой замороженно-оттаянноЙ спецій от одного быка. На каждое осеменение расходовалось 50 млн.спермиев. Лень первого осеменения принимался за 0. Извлечение эародишеЙ осуществляли на 7-й день.

При подведении итогов ректальной пальпацией перед извлечением учитывали: число жолтих тэл и неовулировавшх фолликулов; после не хирургического извлечения - общее количество зародышей, число нормальных, дегенерировашшх эмбрионов и неошюцотшрен- . лых яйцеклеток.

Нехирургическое извлечение зародышей осуществляли катетерами модели Ш£ и "Нойштадт". Оценку моделей проводили по трано-«ервикальной проходимости« объему введенной и выведенной среды, числу извлеченных зародышей. .

Взятие крови для изучения эндокринных влияний на су л еро ву-ляцшо и приживляемость осуществляли путем пункции яремной вены за 1-2 часа перед обработкой и пересадкой. .Пробы центрифугировали и сыворотку консервировали в жидком азоте. Определение концентраций прогестерона и эстрадиола проводили рсцношлоувологи-ческим методом.

Трансцервикальную пересадку проводиш катетерами НЕЇ и "НоИштадт". Снятие напряжения с шейки и рогов матки осуществляли проведением сакральной анестезии ила паточним релаксантом. Для сакральной анестезии ітрнменяля двухпроцентные раствори новокаина либо лигновета в дозо 5 мл. Наточішй релаксант вводили внутримышечно в дозе 20 ?ал за 20 минут до пересадки.

Трансплантировали свежеполученные, культивированные и эамо-роженно-оттаянные эмбрионы телкам, синхронным по половым циклам донорам день в день либо ±1 день. Эмбрионы апплицирогали в верхушку рога . ипсилатерального яичнику о желтым телом.

Результаты определяли по 3-месячной стельности и по отелам, Цифровой материал обработан биометрически* методом.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3*1. Синхронизация соловой охоты у коров-доноров я телок-рещпт енто в Синхронизацию половой охоты шров-доноров и телок-реципиентов проводили с целью выяснения влияния физиологического состояния яичняков на результаты обработок.

Анализ полученных данных показывает, что лучшие результаты были голучшш на коровах при наличии в день обработка в одном из яичников типичного желтого тела (I группа)* В этой группе бил наибольший процент коров, пришедших 'в охоту (94,7 %), Несколько нижебшш результаты при наличия в яичниках в день обработка типичного желтого тела и фолликула (2 группа) - признаки охоты . проявили 90,4 % коров. Хуже оказались результаты при наличии в яячниках обрабатываемый животных фолликула либо старого желтого тела и фолликула.(3 группа) - признаки охоты проявили 66,7 % коров.

Аналогичная зависимость'результатов от исходного состояния яичников била получена на телках-реципиентах. Соответственно по труппам пришло в охоту 97,7; 83,3 и 65,4 % животных*

Подавляющее большинство коров и телок пришло в охоту через 48 часов и меньшинство - через 72 часа (табл. I).

7 хоров-доноров* пришедших в охоту на XI день индуцированного цикла, провели гормональное вызывание сулеровуляцжи* Бее коровы I и 2 хрупп прореагировали суперовуляцпей, однако уровень ее был различен* Так, с девять» и более овуляхдатая в I группе было 44,4 и во 2 - 26,3 %г о 5-3 овуляциями соответственно 38.9 и 42,1 %1 о 1-4 овуляциями 16,7 и 31,6 $. В 3 группе овуляторная реакция в целом бидо шюхоК (табл. 2).

■ Результаты суперовуляционной обработки во 2 и 3 группах предполагают, что синхронизация животпкх.при наличии в яичниках фолликула не гриводит к оптимальной степени синхронности индуцированных половых циклов. У отдельных НУГООГШХ ПЛОХО ВЫрЯЖЭНЫ

Результаты синхроиизааш охоты у коров-доноров к телок~ре:ишаентов

Груд- 'ОбраЗо-па ¡таио

.живот-:ных

Црцащо в охоту., %

всего

: Не - припиго . в охоту, %

48 ч

72 ч.

Коровы-доноры

I 19 ' 94,7 89,4 5.3 6,3

2 21 90.4 71,4 19,0 9,5

3 24 66,7 50.0 16.7 33,3

Толки-реципиенты

I 43 . 57.7 93,0 4,7 " 2,3

2 24 83.3 70,8 12,5 16,7

3 26 65.4 57,7 7,9 34,6

Таблица 2

Уровень оутровуляцйи, вызванной-в ин ауцировапни 11 цикл в зависимости от состояния шчпиков в цепь синхронизационной обработка

Показатель

..Гвуцаа,

"¡Г-

Обработано животных

Прореагировало суперовуляцией

В том числе о желтим» телами:

9 и больше

5-8

1-4

Прореагировало иеоБудировавшими фолликулами

1а 18

В 7 3

100,0 19 100.0 . 16 100,0 100,0 19 100.0 II 63.7

44,4. 33.9 16.7

5

а

6

26,3 42,1 31,6

2. 3 6

12.5 18.7 .; 37.4

31,3

признаки окоти, а у некоторых - четко шражшшые признаки охоты не отражают истинного физиологического состояния яичников. Это приводит к ошибкам при определении дня для начала сунеровуляди-онной обработки, что являегся причиной нвуношютьорительноИ 110-лиовуляциониой реакции либо по,¡иго го отсутствия суперовуляции.

Та же зависимость имеет мао^о при синхронизации охоти на телках. Не все релипионты, проявившие признаки охот» окаэддквь иригоадимл цля нероспцок. Наибольшею адпло ренитиытоа, пришнц-'

С>

і I :. г : з

43 26

97.7 83,3 65,4

90,7 66,6 46.2

7,0 , 16,7 19,2

тих в охоту н на 7-8 день показавших типичное желтое таю (пригодных для пересадок) было в I группе <90,7 ¡О. Во 2 я 3 группах эти показателя ¿или меньше соответственно на 24,1 и 44,5 %. Непригодных для пересалок реципиентов было по группам соответственно 7,0; 16,7; 19,2 % (табл. 3).

Таблица 3

Состояние явттиков талок-решшиентов на 7-8-Й день индуцированного цикла

..............................I ■■ И ■■■■■■ II I..........I I ■ ■ 1 I 1 ■ ■ 1 ----------------

Показатель :_;рруппа_

Обработано животных, голов

Пршш> s охоту, %

В том числе: о желтим телом

с желтым талом и фолликулом

Для точной оценки функшюнальнрго состояния желтых тел в индуцированный цикя телкам-рецяляентам были пересажены заморожвн-но-оттаянныа эмбрионы: в I группе -22, во2-6ивЗ-8. В I к 3 хтуппах стельными стали соответственно 72,7 я 12,5 % реципиентов, so 2 груше стельных не было.

3.2. Эффективность применения препарата ФСГ-Л и фолли-гона (стандартного препарата ГСЕК) при вызывании суперовудяции у коров-доноров

В исследованиях по Получению судеровуляции была установлена большая изменчивость в реакция яичников на действие экзогенных гона до трошшо в, обусловленная, по-видимому, в первую очередь индивидуальными особенностями какдого обработанного животного, Колебании;по числу овуляций составили от 1-3 да Ю и ваше i (табл. 4). ' ;

Ошюдотэоряемость яйцеклеток у суперовудлровавшях коров-доноров в определенной степени зависит от продолжительности охоты. Процент оплодотьоряемостя повышается о увеличением продолжительности охоты от 12 до 24часов, а следовательно с увеличением четности осеменадай то 3. Пря трехкратном осеменении ошгадот- * воряетостъ составляла 93,6-93,9 3£. Увеличение продолжительности охоты до 36 чесов сопровождалось снявшем ошгодотворяеыоотя . яйцеклеток (табл. 5).

Таблица 4

Реакция яичников и ее ишенчивость у коров-доноров пря применения АСГ-п и ГСШ (фоллнгон)

Показатель

I группа (ФСГ-п):2 группа (фол-

I |гнт>пи1

; ■ % I П Г К

Обработано коров-доноров 24 100,0 61 100,0

Прореагировало суперовуля-циеи 24 100,0 48 64,1

Общее число овуляций 186 100,0 310 100,0

Колебания числа овуляций: 1-3 I 4.2 II 22,9

4-6 10 41.7 13 27.1 .

7-9 6 25.0 16 33.3

10 и выше 7 29,1 8 ■ 16.7 .

Таблица 5

Продолжительность охоты, кратность осеменения и оплодотшряемость яйцеклеток

Показатель ;Лродод-• житель— ¡НОСГЬ охоты, ,! , Л , 'Чисто -Среднее число:Число .коров-:овуляций на ,осе-'доно- .донора ;мене- :ров * 'ний * • » ¡Оплодот-•воряе-.мооть яй-•цек^еток,

I группа 12 4 7,5*2.0 2 " 85.0

(!СГ-п) 24 10 8,0^,6 3 93.9

36 6 6.7л:1,0 4 . 72.7

2 группа 12 8 5.9^) ,8 2 85.7

{фоллнгон) 24 16 7.3лр.7 3 93.6

■ 36 7 ■ 8.4*1,0 4 84.6

В наших иосхецова1шях число воложительних по извлечению зародышей доноров бьшо больше при наличии у животных в яичниках . желтого тела. У таких доноров меньший выход неоплодохворетоас яйцеклеток и несколько вше уровень реагирования на введение ГСЖК. Средние числа зародшей. в том числе нормалыцас и дегена-рироващшх на донора получешосс от животных имевших в яичниках только желтое тело и от животных имевших желтое тело и фолликул были близки и не тлели достоверных различий (табл. 6),

Сравнительный анализ данных не шяпляет существенной разницы результатов применения ФСГ-п и $оллигона. Показатели числа

е

.Влицнив состояния яичников у коров—доноров на уровень ггалуовуляций и качество эмбрионов

Показатель : ■ iCf-ir ГСДК ((Ьоллигон)

:в яични- їв яични- 'в ЯИЧНИ- ! в яични-

-.ках жел- :ках хел- •ках жел- . ках жел-

,тое тело :тое тело ;тов тело ; тое тело

■: .И фОДЛК- ; • И фОЛЛИ-

І iKVJT J_ - „І-КЗИ-

Обработано доноров

12

Реагировало полиовуляци-

ай Сп - 12-100,0

7,8^,5

12 12-100.О 7.7JP.3

26 26-100,0

25 22-08,0 6.8J0.4

ІІ-9Ї,6 9-75,0 17-65,4 15-60,0

3.6jp,5 3,7±1,0 з.і^р.з

2.IJD.2 О.бдР.5 2,2jP,5 І.ОдР.З 2,2jO,3 0,44р,І 2,3*0.2 0,4.20,3

О.ЗіРД 0,9jp,2 0,ІіР,І 0,5jf»,3

Число овуляций на ооло-дшгельного донора

Число положительных ш азвлечении зародышей доноров (Л - >)

Излучено эмбрионов на I положительного донора

3 том числе: нормальній

дегенерирова иных

нео пло дотворе ИНЫХ яйцеклеток

овуляций и зародешей на X положительного донора в наших опытах были чуть вше при применении £СГ, в то время как показатели выхода нормальных змбрионов, дегенвриро ванта эмбрионов и неоп-додотвореиных яйцеклеток были несколько лучше цри применении фоллигона.

. 3.3. Нехирургическое извлечение зародышей Методы извлечения зародышей должны быть надежными и простыми, лозволявдими применять юс в производственных условиях о высокой эффективностью.

Извлечение зародышей осуществляли двумя видами инструментов: катетерами модели ВШ и "Нойштадт", предогавляшдаи собой устройство из резины с надувным баллоном. Испытания показали, что при достаточном навыке они легко проводятся через цервикаль-ний канал, не вызывая травм эндометрия матки, удобны, надежны. Оба катетера о равной колей успеха можно использовать для извлечения эмбрионов бескровным методом. Однако, эффективность извлечения зародышей находится в большой зависимости от потерь среды при вымывании: с уменьшением потерь среды увеличиваются показатели извлекаемости зародышей (табл. 7).

Таблица 7

Зависимость числа извлеченные зародышей от потерь среды для шмываиая

Катетер :йотеря _ :средн. % + * Опврзро-: вано ш- Число пологитель- 1п±х яоеопов Извлечено зародышей :Чясло .Часло за-.загюдкпей 'тюшлпей

: вотных . * ф 2 ''% от часяа ¡животных и '•% ог чжслв ¡овуляций 'на опара- :ров. .донора •:на положительного •донора

Модель ИИ Больше .20,0 8 4 50,0 7 13,5 0,9чр,4

10,0-20,0 7 4 - 57,1 ' 9 . 18,8 1,3*>,6 2,3^0.6

Меньше 10,0 12 П 91,7 57 59,4 4,8+1,2 5,2+^,2

Модель. "Нойштая Больше " 20.0 Ю 7 53,8 10 10,4 0,8+ 0,3 1.4^,4

10,0-20,0 15 10 66,7 29 У29,9 1,94р,5 2,94р.5

Меньше 10,0 17 15 88,2 55 53,9 2,2$,6 3,?£0.6

3.4. Влияние исходного гормонального фона в спонтанный я индуцированный полоша циклы на результаты вызывания полновуляши у коров-доноров № нашим данным наиболее высокие результаты суперовуліщии можно олидать при обработках доноров 4СГ-П о 6 дня спонтанного полового (щкла с исходным уровнем концентрации прогестерона от 2,3 до 2,6 нг/мл.

В индущфованный половой цикл, при обработках РСЖ на 11-й день лучшие результаты соответствовали средним исходным концентрациям прогестерона - 3,9-9,9 нг/мл (табл. 8),

Таблица 8

Зависимость результатов сунеровуляцяонных обработок от исходных значений концентраций прогестерона

Показатель

Обработка ФСГ-п і Обработка фоллиго-в спонтанный цикл : ном в нндуцирован--:_ШІЙЛШД-

прогедтеца^(ц р/мл)

Число овуляций 9 и больше 9 и больше Чиоло нео вулирова вших

фолликулов Отсутствие Отсутстше

Число зародышей б и больше 5 и больше

Чиоло эмбрионов, пригодных для пересадок 5 и больше 5 и больше

При этом возможны отклонения, связанные, по-видимому, о индивидуальными особенностями обрабатываемых животных и о.тем, что чиоло получаемых зародышей не взаимосвязано о исходной концентрацией прогестерона цри минимальных ее значениях.

, Взаимосвязи исходных концентраций эстрадиола и выходом зародышей выявлено не было.

- Э.Б. Нехирургическая пересадка зародышей Испитаїша при пересадках двух моделей катетеров: ЯШ и "Нойштадт" показало некоторое преимущество последнего.

Изучая влияние премедикации установили, что при использования са(фальной аностезии было получено стельностай больше, чим при применении маточного релаксанта. Уровень стельности при применении новокаина был па £,? % одшо, чем при применении лигноиата (табл. 9).

Эффективность способов прлмедикации

Показатель

£анальлая..аизахаада.

всего *2 5?-пый раст-:2

.вор ново ка- ; раствор :т,пнт. ;гош .лпгновета.^1

:Каточ-

ІННЙ

•ралак-

Число пересадок 62 29 23 30

Число стельностей 29 14 15 12

Процент стельностей 46,8 48,2 45,5 40,4

При этом необходимо учитывать, что на приживляемость влияют индивидуальные особенности реципиентов, разнокачественноогь желтых тел, различия долевых циклов и стадий развития эмбрионов* Эти обстоятельств объясняют различия в показателях стельности. Однако, бесспорна необходимость снятия напряжения с тела и рогов матки при транецервакалышх пересадках.

3.6. Приживляемость эмбрионов в зависимости от гормонального фона в крови телок-реципиеято» при нехирургической пересадке

Виявлена достоЕорная корреляция между содержанием прогестерона в крови телок-реципиентов в спонтанный (X и 2 группы) и индуцированный (3 группа) половые циклы и приживляемость» после нехирургической пересадки свежеполученных (I группа) и заморо-женно-оттаянных (2 и 3 группы) эмбрионов (табл. Ю).

Таблица 10

Цраживляемость эмбрионов в зависимости от уровня , концентрации прогестерона в крови реципиентов

Группа^ уровни концент-* рация прогестерона, иг/мл

'Переса- ¡Стельных'Пестель-¡Процент :*ено эм-.рецишенгных ре- стельных к .брионов 'тов .цяпиен- ¡числу пере— _* -уов_агааак-

Меньше 2,0 2,0-5,0 Больше 5,0

19 12 8

5

6 4

14 6 4

26,3 50,0 50,0

Продалжение таблицы 10

1_:_8_

Меньше 2,0 2 2,0-5,0 Больше 5,0

З і 4 І 5 ; , б

5 9

а

І 4 20,0

6 3 66,7

5 3 62,5

Меньше 2,0 З 2.0-5.0 Больше 5,0

17 ІЗ З

7 7 І

10

Є

2

41.2

53.3 33,3

Ш нашему мнению установленная оптимальная концентрация прогестерона <2,0-5,0 нг/мл) в день пересадка не дает полной гарантии приживвяемости пересаживаемого эмбриона, так как важную роль в успех» пересадки играют: способ и путь аппликации эмбриона, его качеотво я ряд других известных и на выявленных еще факторов. Тем не менее определение концентрации прогестерона являатоя дополнительным теотом при выборе реципиентов.

В наших исследованиях зависимости прижиьляемости эмбрионов от походного значения концентрации эстрадиола не выявлено.

X. Комплексное применение фоллигоаа и простагландина (эстрофан) для синхронизации охоты у коров-доноров и телок-ре-ципнзнтов о хорошо шраженными желтыми телами в яичниках обеспечивает приход в охоту 94.7-97,7 % животных. Наличие в яичниках желтого тела и фолликула либо только фолликула сопровождается снижением числа животных о признаками охоты.

2. Для получения оуперовуляции у коров-доноров о равной долей успеха можно применять 4СГ-Л в спонтанный и стандартный препарат ГОКК в индуцированный' половой цикл.

3. С равной результативностью нехирургическов извлечение эмбрионов можно осуществлять катетерами модели-НОС и Повила дт". Минимальный потери промывной среды при работе обеими моделями обусловливают наиболее полное извлечение эародашей.

4. .Оптимальной неходкой концентрацией прогестерона в крови коров-доноров перед обработкой ОСГ-п при спонтанном половом цикле оледуит считать от 2.Э до 2,6 нг/мл, при обработке стан-

выводы

дартным препаратом ГС2К на ІІ-Й день индуцированного цикла - от 3,9 до 9,9 нг/мл.

5. При трапсцервякальных пересадках необходимо снятие напряжения о шейки и poros матки. Для этой цели можно применять как сакральную анестезию, так и маточний релаксант,

6. Оптимальной концентрацией прогестерона перед пересадкой в крови телок-реципиентов в спонтанный и индуцированный половой цикл является 2,0-5,0 нг/мл при которой можно получить свыше 50,0 % стельностей при пересадке свежелолученних и эамороасеино-оттаяншх эмбрионов,

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРВДЮШШ

1. Для с к ¡tic пия трудоемкости и затрат на проведение программы трансплантации эмбрионов у крупного рогатого скота рекомендуется синхронизировать половые циклы у коров-доноров н те-лок-роципнентов. При использовании для этой цели ГСЖК в сочетании с просганглан.'ияюм следует применять их при наличии в яичниках обрабатываемых животных хорошо выраженного желтого тела 10-12 день половою цикла.

2. В до полі; єни о к общепринятым признакам выбор коро в-доноров и телок роцлплентов рекомендуется обусловливать определением концентрация прогестерона в крови животных серед супер-овуляциониоЯ обработкой и пересадкой. Отбирать коров следует преимущественно с концентрацией прогестерона в крови - 2,32,6 нг/г.іл на 8-і! день спонтанного полового цикла для обработки ОСГ-п я -3,9-9,9 нг/мл на II-й день индуцированного цикла для обработки ГСЕК; телок в качестве рецзшиентов предпочтительно использовать с концентрацией прогестерона э ігрова перед пересадкой - 2,0-5,0 нг/мл.

Список .работ. одублииотатт.ых по теме

ддсг.зрхаццв

I. Хилькевяч С., Овчинников А, Суперовуляция у,коров-доноров в завися:.*)ста от гормонального про,£пля перед обработкой /ДЪлочное я мясное скотоводство/ 1986. А 2. С. 4749.

2. Хилькевяч С,Н. Приживляемость эмбрионов при нехирургической пересадке //Еиютновоцство. 1986. Л 10. С. 46-47.

3. Хилькевнч С. Применение проотангландшш для синхронизации охоты у коров-доноров и телок-реципиентов //Молочное и мясное скотоводство. 1996. Л 6. С. 40-41.

Л-85842. 28.08.87 г. Объем 1 п. л. Зак. 2582. Тир. 100

Типография Московской с.-х. академии им. К. А. Тимирязева 127550, Москва И-550, Тимирязевская ул., 44