Углевод-белковые комплексы при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии

Булгакова, Валерия Сеогеевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Углевод-белковые комплексы при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Углевод-белковые комплексы при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии"

003453Э01

На правах рукописи

Булгакова Валерия Сергеевна

УГЛЕВОД - БЕЛКОВЫЕ КОМПЛЕКСЫ ПРИ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ НА ФОНЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГИПЕРГЛИКЕМИИ

03. 00. 04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

2 1 ГОС

Челябинск - 2008

003453901

Работа выполнена в государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Омская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Высокогорский Валерий Евгеньевич Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Цейликман Вадим Эдуардович доктор медицинских наук, профессор Бышевский Анатолий Шулимович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Уральская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации»

Защита состоится «_»_ 2008г. в_часов на заседании

диссертационного совета Д208.117.02 при ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации» (151092, г. Челябинск, ул. Воровского, 64)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации» (151092, г. Челябинск, ул. Воровского, 64) Автореферат разослан «_»_2008г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

Н. В. Тишевская

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

По данным клинических наблюдений 20,9% соматических больных многопрофильного стационара имеют признаки злоупотребления алкоголем (Огурцов П. П., 2003). У 8,3% больных сахарным диабетом эндокринологического отделения выявлены признаки хронического алкоголизма, сформировавшегося на фоне уже существующего заболевания (Сидоров П. И., 2002).

Употребление алкоголя на фоне сахарного диабета может провоцироваться информацией о возможности этанола оказывать гипогликемическое действие, реализующееся за счет его способности снижать активность ферментов глюконеогенеза, нарушать утилизацию глицерода и превращение его в глюкозу, а также, ингибировать превращение в глюкозу сорбитола и производство глюкозы из аланина (Бокарев И. Н., 1999; Балаболкин М. И., 2003).

Однако, по данным БЬа! I. й а] (2007) умеренное употребление алкоголя на фоне сахарного диабета снижает уровень глюкозы в плазме крови натощак, но не влияет на её концентрацию через 2 часа после нагрузки глюкозой. Алкоголизация сопровождается нарушением гликозилирования сывороточных гликопротеинов и приводит к появлению в кровотоке функционально неполноценных углевод - дефицитных белков и липидов,

таких как углевод - дефицитные трансферрин (Garige М.,2006; Methuen Т., 2007), аполипопротеин J (Ghosh P., 2001), аполипопротеин Е (Lakshman М. R., 1999), ганглиозиды (Garige М.,200б) и др.

Компенсация метаболических нарушений у больных сахарным диабетом, злоупотребляющих алкоголем, представляет значительные трудности ввиду множества сопутствующих нарушений, что делает необходимым целенаправленное изучение алкогольобусловленных висцеральных повреждений (Сидоров П. И., 1999). В литературе имеются лишь единичные сведения о метаболических нарушениях у больных сахарным диабетом при злоупотреблении алкоголем. По данным Притыкиной Т. В. (2005) у лиц, злоупотребляющих алкоголем на фоне сахарного диабета, наблюдается увеличение концентрации в сыворотке крови компонентов протеогликанов и гликопротеинов, однако, механизм этих изменений остается неясным и требует дальнейшего изучения. Цель исследования: выявить особенности уровня углевод-белковых комплексов печени и плазмы крови для установления механизма их нарушений при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии. Задачи исследования:

1. Исследовать концентрацию компонентов гликопротеинов в печени и плазме крови животных при алкоголизации на фоне экспериментальной гипергликемии.

2. Охарактеризовать уровень показателей обмена протеогликанов в печени и плазме крови животных при алкогольной интоксикации в сочетании экспериментальной гипергликемией.

3. Выявить особенности обмена коллагена в печени при алкоголизации и экспериментальной гипергликемии.

Научная новизна. В эксперименте показано существенное влияние алкоголизации на метаболизм углевод — белковых комплексов в печени и плазме крови животных с экспериментальной гипергликемией. Обнаружено

нарушение процессов синтеза гликопротеинов при алкоголизации в условиях гипергликемии. Установлена роль длительной алкоголизации в изменении метаболизма протеогликанов при экспериментальной гипергликемии, характеризующаяся накоплением гликозаминогликанов в печени. Выявлено существенное влияние хронической алкогольной интокскации на уровень белоксвязанного, свободного оксипролина и ТИМП-1, проявляющееся увеличением их количества в печени животных с гипергликемией. Теоретическое и практическое значение работы. Результаты проведенного исследования позволяют расширить представления о патохимических механизмах, лежащих в основе формирования метаболических сдвигов при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии. Полученные данные об изменении метаболизма компонентов гликопротеинов, протеогликанов и коллагена при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии могут служить обоснованием для разработки методов мониторинга течения сахарного диабета при злоупотреблении алкоголем. Экспериментально обоснована возможность выявления алкоголь индуцированных патологических процессов у больных сахарным диабетом, злоупотребляющих алкоголем, по показателям углевод-белковых комплексов плазмы крови. Положения, выносимые на защиту:

1. Алкогольная интоксикация и её сочетание с гипергликемией характеризуется значительными изменениями уровня компонентов гликопротеинов в плазме крови и печени, животных.

2. Алкогольная интоксикация при гипергликемии отличается характером и большей выраженностью нарушений обмена протеогликанов в сравнении с эффектами при изолированной алкоголизации и гипергликемии.

3. При гипергликемии алкогольная интоксикация сопровождается не только сдвигами со стороны концентрации углеводных, но и изменением уровня белковых компонентов гликопротеинов печени.

Апробация работы. Основные положения работы представлены: на межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы современной психиатрии и наркологии» (Омск, 2005); на 75 научной студенческой конференции, посвященной 85-летию ОмГМА; на V Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине (Тула, 2006); на Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной биохимии» (Киров, 2007); на научно - практическом симпозиуме «Ключевые проблемы совершенствования лабораторного обеспечения медицинской помощи» (Москва, 2007); на IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008); на научно - практическом симпозиуме «Лабораторная медицина: инновационные технологии в аналитике, диагностике, образовании, организации» (Москва,2008). Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 печатных работ, в том числе I работа в рецензируемом журнале по перечню ВАК Минобразования РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, глав результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения и выводов. Библиографический указатель включает 222 источника: 90 - отечественных и 132 - иностранных. Работа иллюстрирована 28 таблицами и 6 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперимент был проведен на 200 белых лабораторных крысах-самцах массой 180 - 220 грамм, находящихся в стандартных условиях вивария. Экспериментальную гипергликемию моделировали путем интраперитонеального введения 160 мг/кг аллоксана тетрашдрата (Пальчикова Н. А., 1987). Однократную алкоголизацию вызывали внутрибрюшинным введением 20% раствора этанола в дозе 2 г/кг, что

составило 'Л DL50 (Нужный В. П.,1995) на 14 сутки после введения аплоксана. Хроническую алкогольную интоксикацию моделировали путем использования 10% раствора этанола в качестве единственного источника жидкости в течение 42 и 63 суток. Эксперименты проведены в соответствии с этическими нормами и рекомендациями по гуманизации работы с лабораторными животными (Кополадзе Р. А., 1998), отраженных в «Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1985).

Животные были разделены на 4 группы: ] - контрольные животные (К), 2 - крысы с алкогольной интоксикацией (А), 3 - крысы с экспериментальной гипергликемией (Г), 4 - животные с сочетанием гипергликемии и алкоголизации (Г- А) (рис.7). Ыа 15, 43 и 64 сутки после введения аллоксана животных декашпировали.

В ткани печени и плазме крови животных исследовали уровень белкового и свободного гидроксипролина (Шараев П. Н., 2003), концентрацию нсколлагеновых белков по тирозину с использованием коммерческих наборов реактивов «Мукопротеины» («Hospitex diagnostics», Швейцария) и по содержанию в них гексоз (Камышников В. Ф., 2004), количество гликозамингликанов и глюкуроновой кислоты с помощью карбозольной реакции Дише (Шараев П. Н., 1990), уровень сиаловых кислот диагностическим набором реактивов «Сиалотест - 80» (НПП «Реахим», г. Ижевск), активность р - глюкуронидазы с использованием в качестве субстрата 4-ннтрофенил-Р,0-глюкуронида, а также уровня ТИМП-1 с помощью теста основанного на методе твердофазного иммуноферментного анализа («Invitrogen Corporation», Калифорния). Статистическая обработка результатов проводилась с помощью пакета программ STATISTICA-6 и возможностей Microsoft Excel с учетом рекомендаций по проведению биомедицинской статистики (Реброва О. Ю., 2002). Определяемые величины: медиана (Me), нижний квартиль (L),

Схема 1. Схема эксперимента.

I этап

1 группа животных

моделирование СД

через 24 - 72 часа -отбор животных с глюкозурией контроль

через 14 дней -контроль глюкозурии определение уровня гликемии

глюкозурия

гликемия натощак > 11,1 ммоль/л

2 группа животных

интраперитонеальное введение 1 mi 0,9% NaCl натощак

использование 10% р-ра этанола в качестве единственного источника жидкости

глюкозурия -<11,1 ммоль/л

аллоксановая гипергликемия

из исследования исключаются

'Г 1 г

введение 1 ш10,9% введение 20% р-ра №С1 натощак этанола в дозе 2 г/кг

шгграперитонеально

II этап

Формирование экспериментальных групп: К, Г, Г-А, А —> алкоголизация (в течение 1, 43, 64 суток) —> декапитация —> получение биологического материала —> лабораторное исследование —> статистическая обработка

верхний квартиль (Н). Статистическая значимость различий сравниваемых величин (р) для независимых выборок оценивалась с помощью непараметрического критерия Манна - Уитни. Критический уровень значимости статистических гипотез в данном исследовании принимался равным 0,05, так как при этом вероятность различия более 95%. Для определения степени связи между двумя неременными применяли непараметрический корреляционный анализ по Спирмену (Сергиенко В. И., 2001).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Уровень гликопротеинов в печени и плазме крови животных при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии

Однократная алкоголизация животных группы А характеризовалась повышением концентрации сиаловых кислот на ] 5%, (р - 0,002), 3-х кратным увеличением уровня гексоз гликопротеинов в плазме крови и существенным снижением уровня гексоз мукопротеинов (на 33%) (р = 0,0) 9) (рис. 1).

СК ГвМП Г в ГП МП

Примечание: Ряд! - груша К, ряд2 - группа А, ряд 3 - группа Г, ряд 4 - группа Г-А

11 - статиетическизначимые различия с группой К по критерию и Рис. 1. Концентрация компонентов гликопротеинов в плазме крови экспериментальных животных при однократной аткоголизации на 15 сутки после введения аллоксана (в %%)

При исследовании компонентов гликопротеинов в печени выявлено значительное увеличение уровня гексоз гликопротеинов и мукопротеинов под влиянием однократной алкоголизации (рис.2).

13 Ряд 1 ИРяд2 ПРйдЗ И Ряд4

ГвГП

ГвМП

Примечание: Ряд 1 - группа К, рял2 фугша А, ряд 3 - группа Г, ряд 4 - группа Г-А * - статиегичеекизначимые различия с группой К по критерию и ** - статистическизначимые различия с группами К и Г по критерию и Рис. 2. Концентрация компонентов гликопротеинов в печени экспериментальных животных при однократной алкоголизации на 15 сутки после введения аллоксана (в %%)

Однократная алкоголизация животных на 15 сутки после введения аллоксана, способствовала значительному увеличению в печени концентрации гексоз в мукопротеинах (в 2,4 раза в сравнении с группой К и на 219% относительно группы Г) и гексоз в гликопротеинах (в 1,5 раза относительно контроля и на 48,2% относительно группы Г), на фоне сохраняющегося в обеих группах повышенного количества мукопротеинов и гликопротеинов плазмы крови. Эти изменения сопровождались значимым снижением уровня глюкозы в плазме крови на 29,8% (р = 0,019) в сравнении с группой Г.

Кроме этого, в плазме крови наблюдалось существенное увеличение уровня свободных сиаловых кислот (на 16% (р = 0,032)) как в сравнении с группой К, так и с группой Г" (рис.1,2). Повышение количества свободных сиаловых кислот в плазме крови животных с гипергликемией на фоне однократной алкоголизации отрицательно коррелировало с уровнем гликопротеинов плазмы крови (-0,804; р = 0,039).

Таким образом, однократное введение алкоголя, как на фоне гипергликемии, так и без неё проявляется существенным увеличением в плазме крови концентрации свободных сиаловых кислот.

Характерной чертой острой алкогольной интоксикации, также, является снижение уровня гексоз мукопротеинов в плазме крови животных группы А и их повышение в группе Г-А на фоне повышенного в обеих группах уровня гексоз в мукопротеинах печени.

При хронической алкоголизации (в течение 64 суток) в плазме крови животных группы А наблюдалось повышение концентрации мукопротеинов по тирозину на 279,1 % (табл.1), на фоне отсутствия значимых изменений по содержанию в них гексоз, что, возможно, отражает нарушение процесса гликозилирования (Bortolotti F., 2006; Garige М.,2006; Methuen Т, 2007). Кроме этого, выявлено некоторое повышение уровня свободных сиаловых кислот (на 10,9% (р = 0,007)) и концентрации гексоз гликопротеинов (на 155%) (табл.1). Увеличение концентрации свободных сиаловых кислот в плазме крови, вероятно, отражает процессы дссиалирования, которые наблюдаются как при алкоголизации, так и при сахарном диабете (Lecomtsev I. V.,2002; Chrostec L., 2007; Garige М.,2006). В печени отмечалось снижение уровня гексоз гликопротеинов на 48,9% и повышение концентрации мукопротеинов по тирозину в 2 раза относительно контроля (табл. 1). Между данными показателями выявлена отрицательная корреляция (-0,857; р = 0,019). При сочетании хронической гипергликемии и алкоголизации в течение 64 суток в плазме крови животных группы Г-А выявлено повышение уровня свободных сиаловых кислот на 8,2% (р = 0,030), в сочетании с существенным увеличением концентрации гексоз в гликопротеинах и в мукопротеинах. При этом уровень тирозина в мукопротеинах был снижен на 77,3% (р = 0,004) (Табл.I).

Таблица 1. Уровень компонентов гликопротеинов в плазме крови и печени животных на 64 сутки эксперимента

Показатели Группы животных

К А Г Г-А

СК (плазма) (чмоль/л) (9) 1,4-1,8-1-9 (10) 2,0-2,1-2,2 рК-0,007 (10) 2,0-2,2-2,4 рК=0 008 (9) 1,9-2,0-2,2 рК=0,030

ГаГП (плазма) (г/л) (9) 1 00-1,11-1,78 (9) 2 74-2,84-2,85 рК=0,011 (9) 2 84-3,02-3,09 рК=0,003 (9) 3,19-3,21-3,43 рК'0,003

I в! И (печень) (мг/г белка) (9) 1,22-1,40-1,49 (9) 0,67-0,71-0.73 рК-0,007 (9) 0,51-0,70-0,92 рК=0,007 (9) 0,67-0,71-0 73 рК=0.007

МЛ (тир) (плазма) (мг/дг) (9) 39 8-87,0-110,8 (9) 229,3-242,9-329,9 рК-0,003 (9) 139,9-148,2-337,0 рК-0,023 (7) 26,6-33,6-132,5 рГ~0,004

МП (тир) (печень) (мг/дг белка) (9) 1,19-1,9-2,45 (9) 0,87-3,76-4,45 рК= 0,032 (9) 2 62-3,19-3.76 рК=0,032 (8) 0,41-1,00-1,48 рК=0,045, рГ-0 004

ГвМП (плазма) (мг/л) (9) 1,13-1,19-1,27 (9) 0,97-1,00-1,32 рК-0,302 (9) 1,74-1,36-1,86 рК=0,026 (9) 1,32-1,48-1,58 рК=0.027

Гв Ш1 (пече1£ь) (мкг/г белка) (9) 179,1-209,3-230,2 (9) 171,6-178,8-185 2 рК~0,247 (9) 121 0-167,6-207,6 рК'0,190 (9) 140 5-143,7-144,9 рК-0,0!9

Примечание к таб результаты в таблице приведены в формате верхний квартиль-медиана-нижний квартиль в скобках указано количество животных в группе р(К) - степень значимости различий с группой К по критерию V р(У) - степень значимости различий с группой Г по критерию II

В этот же срок интоксикации в печени экспериментальных животных установлено снижение концентрации гексоз в составе гликопротеинов на 48,9% и мукопротеинов на 31,9% в сочетании с существенным снижением уровня тирозина мукопротеинов на 48,2 % относительно группы К и на 68,6% в сравнении с группой Г". Выявлена положительная корреляция между концентрацией гексоз гликопротеинов и уровнем мукопротеинов в печени (0,786; р = 0,039).

Таким образом, особенностью хронической алкогольной интоксикации является повышение концентрации мукопротеинов в плазме крови и в печени у алкоголизированных животных. При этом повышение белкового компонента мукопротеинов в плазме крови животных с изолированной длительной алкоголизацией сопровождалось даже некоторым снижением уровня гексоз, что может быть отражением появлением в плазме крови углевод-дефицитных 6елков.(СЛозЬ Р., 2001; ОЫхика Т., 2005; ВогЫоАл Р., 2006). Противоположная картина наблюдалась при совместном действии алкоголизации и гипергликемии у животных группы Г-А, характеризующаяся значительным снижением в плазме крови мукопротеинов.

Уровень компонентов протеогликанов печени и плазмы крови у алкоголизированных животных с экспериментальной гипергликемией

При оценке показателей обмена протеогликанов в плазме крови и печени животных группы А при однократной алкоголизации существенных различий с группой К выявлено не было, что, вероятно, связано с устойчивостью изучаемых показателей.

На 15 сутки развития гипергликемии в группе Г наблюдалось повышение в плазме крови концентрации гликозаминогликанов на 28,3% (р - 0,011) и г.шокуроновой кислоты на 34,4% (р = 0,012) (Рис. 3).

гк ГАГ

Рис. 3. Уровень ГК и ГАГ в плазме крови животных при однократной ачкоголизащш (в %%) Примечание: см к рис. 3

Эти изменения сопровождалось увеличением уровня ГАГ на 52,1% (р = 0,021) и снижение активности р- глюкуронидазы на 52,7% (р 1 0,004) в печени (Рис.4).

Рис. 4, Уровень ГК, ГАГ и активность Р-глюкуронвдазы в печени животных при однократной алкоголизации (в %%). Примечание: ом к рис. 3

При этом была выявлена сильная отрицательная связь между уровнем глюкуроновой кислоты в печени и концентрацией гликозаминогликанов в печени (-964; р = 0,002). Повышение уровня исследуемых компонентов в плазме крови и печени животных группы Г свидетельствует об активации, как синтеза ГАГ в печени, так и их распада, что подтверждает данные Буголина Е. Г. (2005).

Однократное введение этанола на фоне хронической гипергликемии характеризовалось повышением уровня ГК в плазме крови на 57,3% (р = 0,012) относительно контрольных данных (рис.3). В печени животных концентрации ГК, также, была значительно повышена, при этом активность Р- глюкуронидазы снизилась на 30,4% (р = 0,004) относительно контроля, но превышала на 47,5% (р = 0,015) значения группы Г (Рис.4). Некоторое уменьшение уровня гликозаминогликанов по сравнению с 1руппой Г, видимо, связано с активацией процесса их распада при однократном введении этанола на фоне экспериментальной гипергликемии.

При хронической алкоголизации в группе А значимых изменений в плазме крови, выявлено не было (рис. 5).

160 140

120 100

60 1 40 | 20 !

гк

Рис. 5. Уровень ГК и ГАГ в плазме крови животных на 64 сутки интоксикации (в %%). Примечание: см к рис. 3

В печени алкоголизированных животных наблюдалось повышение уровня глюкуроновой кислоты на ! 13% (р = 0,003) относительно контроля в сочетании с умеренным снижением активности р-глюкуронидазы (на 16,1% (р = 0,037)) (рис.6).

400 '

Рис. 6. Уровень ГК, ГАГи активность ¡З-глюкурояидазы в печени животных на 64 сутки интоксикации (в %%). Примечание: см к рис. 3

Возможно, повышение ГК при длительной алкоголизации связано с нарушением её распада в глюкуронат-ксиллулозном цикле, вызванного

дефицитом НАД, возникающим из-за интенсивного окисления этанола. Кроме того, есть данные о повышении в крови лиц, злоупотребляющих алкоголем, концентрации этилглюкуронида - продукта неокислительного обезвреживания этанола (Бгоеппег, 2002, Рогеш1з, 1997).

У животных группы Г-А на 64 сутки алкоголизации на фоне гипергликемии наблюдалось выраженное снижение концентрации ГК в плазме крови экспериментальных животных (разница с группой К составила 62% (р = 0,03), а с группой Г - 74,3% (р = 0,009)) (рис. 5) и существенное повышение в печени уровня ГАГ (в 2 раза) и ГК (в 3,7 раза) (рис. 6). При этом активность |3-глюкуронидазы превысила на 65,7% (р = 0,003) данные группы К и на 171,5%) (р 0,004) - значения группы Г (табл.2).

Анализируя полученные результаты следует подчеркнуть, что длительная алкоголизация не приводит к существенным изменениям уровня гликозаминогликанов в плазме крови, ни в печени, и характеризуется умеренным повышением уровня глюкуроновой кислоты в печени на фоне снижения активности р-глюкуронидазы.

Таблица 2. Активность р-глткуронидазы п печени животных при экспериментальной гипергликемии в сочетании с алкоголизацией (мкмоль/ мин/ г белка)

Срок алкоголизации Группы животных

К А Г Г-А

1 сут (9) 163,0-172,5-182,7 (9) 173,5-185,3-188,2 рК=0,383 (9) 79 6-81,6-91,8 рК-0 004 (9) 117,1-120,0-131,4 рК-0,004, рГ-0 015

64 сут (9) 170,4-177,8-185,2 (9) 127,2-149,1-149,3 рК=0,037 (9) 103,4-108,5-116,9 рК-0,004 (9) 259,5-294,6-359,5 рК=0,003. рГ-0,004

Примечание см к таб 1

В отличие от изолированной алкоголизации при длительной алкогольной интоксикации на фоне гипергликемии наблюдается значительное повышение уровня ГАГ и ГК в печени и существенное

повышение активности [3-глюкуронидазы, т, е. совместное воздействие вызываег противоположный эффект на активность фермента, и проявляется в большей выраженности нарушений обмена протеогликанов в печени.

Показатели обмена коллагена в печени животных с алкоголизацией на фоне экспериментальной гипергликемии

При анализе изменений возникающих в метаболизме коллагена на фоне однократной алкоголизации животных группы Л выявлено значительное увеличение концентрации белоксвязанного оксипролина в печени (на 204% (р = 0003)), на фоне отсутствия значимых отличий по уровню свободного оксипролина и акгивности ТИМП-1 (рис.7).

В группе Г на 15 сутки развития гипергликемии наблюдалось уменьшение концентрации СОП на 76% (р = 0,006) и активности ТИМП-1 на 69,3% (р = 0,004), на фоне отсутствия выраженных изменений БСОП (рис.7).

250''

Рис. 7. Показатели обмена коллагена в печени при однократной алкоголизации (в %%) Примечание: см к рис. 3

В группе Г-А однократное введение этанола также, как и в группе А, способствовало существенному повышению уровня БСОП на 85,5% (р = 0,019). Активность ТИМП-1 при этом была снижена на 71,9% (р = 0,004), а уровень СОП значительных различий с контролем не имел (рис.7).

При хронической алкоголизации (в течение 64 суток) в группе А уровень исследуемых метаболитов находился в пределах данных контроля, но уровень ТИМЛ-1 был снижен (рис. 8).

con БСОП ТИМП-1

Ряс.8. Показатели обмена коллагена в печени на 64 сутки интоксикации (б %%) Примечание; см к рис. 3

В группе Г, также, как и в группе А на данном сроке эксперимента было выявлено только значительное снижение показателей ТИМП-1 (на 79,2% (р = 0,007) в сравнении с контрольными данными) (рис.8).

При алкоголизации на фоне гипергликемии в течение 64 суток в печени животных группы Г-А наблюдалось повышение на 154% концентрации БСОП в сочетании с высокими значениями уровня СОП, на 107% превышающего значения группы К и на 121% - данные группы Г. Несмотря на то, что относительно контроля уровень ТИМП-1 был снижен, данные группы Г были превышены на 321,3% (р - 0,023) (Рис.8).

Таким образом, можно сделать вывод, о том, что однократная и длительная алкоголизация на фоне гипергликемии, приводят к значительному повышению уровня белоксвязанного оксипролина в печени. Причем, при хронической алкоголизации повышение уровня БСОП происходит на фоне высоких значений СОП и ТИМП-1. Это говорит о преобладании процессов синтеза коллагена над его распадом и, наряду, с данными о повышения концентрации гликозаминогликанов в печени

животных группы Г-А, является проявлением фиброзных изменений в печени.

Заключая, следует отметить, что однотипность изменений некоторых углевод-белковых комплексов при острой алкогольной и аллоксановой интоксикации, может быть обусловлена развитием окислительного стресса в обоих случаях, так как для этих состояний характерна инициация свободнорадикапьных реакций (Бондарь Т.П.,2003; Жукова О.Ю.,2008).

Особенности нарушений углеводсодержащих белков при хронической интоксикации в отличие от гипергликемических состояний могут быть вызваны как мембранотропным действием этанола, так и влиянием его метаболита - ацетальдегида, который по данным С.Д.Подымовой (2001) способствует ускорению реакций синтеза гликопротеинов.

Совместное воздействие двух патологических состояний значительно отягощает нарушения обмена углевод-белковых комплексов.

Полученные данные подтверждают возможность использования показателей углевод-белковых комплексов в клинической практике для вьивления алкоголь-индуцированных метаболических нарушений. Однако при этом необходимо учитывать особенности изменений этих показателей при гипергликемиях.

Выводы:

1. Однократная массивная алкоголизация сопровождается повышением уровня сиаловых и глюкуроновой кислот, гексоз гликопротеинов и мукопротеинов в плазме крови и в печени животных с гипергликемией.

2. Установлены различия в изменении уровня мукопротеинов в плазме крови и в печени животных при длительной алкоголизации и животных алкоголизированных на фоне гипергликемии.

3. Существенное снижение уровня мукопротеинов плазмы крови и печени обусловлено влиянием алкогольной интоксикации на синтез мукопротеинов в печени животных с гипергликемией.

4. Длительная алкоголизация в сочетании с гипергликемией вызывает увеличение концентрации гликозаминогликанов в печени, что, несмотря на повышенный уровень глюкуроновой кислоты и активности Р-глюкуронидазы, свидетельствует о преобладании процессов образования протеогликанов.

5. Алкоголизация в течение 64 суток в сочетании с гипергликемией сопровождается увеличением уровня белоксвязанного оксипролина на фоне повышения концентрации свободного оксипролина и уменьшения уровня тканевого ингибитора металлопротеиназ - 1, что может указывать на преобладание процессов синтеза коллагена.

Список опубликованных работ:

1. Булгакова B.C. Особенности обмена глгокуроновой кислоты и гликозаминогликанов в печени при синдроме отмены этанола на фоне применения глутаксима / В. С. Булгакова, Е. С. Ефременко // Тезисы докладов 75-научной студенческой конференции, посвященной 85-летию ОмГМА. - Омск, 2006. - с. 309-310.

2. Булгакова В. С. Особенности обмена гликозаминогликанов и глюкуроновой кислоты межклеточного матрикса печени при алкогольной интоксикации / В. С. Булгакова, О. Ю. Жукова // Тезисы докладов 75-научной студенческой конференции, посвященной 85-летию ОмГМА. -Омск,2006.-с. 310-311.

3. Булгакова B.C. Особенности обмена гликозаминогликанов и глюкуроновой кислоты в печени при острой алкогольной интоксикации на фоне сахарного диабета / В. С. Булгакова, В. Е. Высокогорский // Материалы V Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине. - Тула, 2006. - с. 41-42.

4. Булгакова B.C. Углевод - белковые комшгексы в печени и плазме крови животных при острой алкогольной интоксикации на фоне аллоксанового диабета / В. С. Булгакова, В. Е. Высокогорский // Вятский медицинский вестник: Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной биохимии» посвященной 20 - летию Кировской государственной медицинской академию - 2007. - № 4. - с.38 -41.

5. Булгакова В. С. Особенности спектра углевод - белковых комплексов сыворотки крови при алкогольной интоксикации на фоне сахарного диабета // В. С. Булгакова, В. Е. Высокогорский, Т. В. Притыкина // Клиническая лабораторная диагностика. - 2007. - № 9. - с.62.

6. Булгакова В. С. Нарушение обмена углеводсодержащих соединений при алкогольной интоксикации / В. С. Булгакова, В. Е. Высокогорский, Т.В. Притыкина, С. С. Титов // Наркология. - 2008. - № 5. - с. 50-53.

7. Булгакова В. С. Нарушение обмена углеводсодержащих соединений при острой интоксикации этанолом на фоне сахарного диабета / B.C. Булгакова // Сборник трудов 4-го съезда Российского общества биохимиков и молекулярных биологов, 11-15 мая, 2008г. - Новосибирск, 2008.-с. 451.

8. Высокогорский В.Е. Нарушение метаболизма коллагена в печени животных при алкогольной интоксикации И В.Е. Высокогорский, B.C. Булгакова, Ю. А. Петрова. - Астраханский медицинский журнал. - Т.З, №3.-с. 74-76.

9. Т.В. Притыкина Сравнительная характеристика уровня показателей обмена углеводсодержащих соединений при алкогольной интоксикации на фоне сахарного диабета / Т.В. Притыкина, B.C. Булгакова, В.Е. Высокогорский // Клиническая лабораторная диагностика. - 2008. - № 9. - с.66-67.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ БСОП - белоксвязанный оксипролин ГАГ - гликозаминогликаны

ГвГП - концентрация гексоз в составе гликопротеинов

ГвМП - концентрация гексоз в составе мукопротеинов

ГК - глюкуроновая кислота

ГП - гликопротеины

МП - мукопротеины

СК - сиаловые кислоты

СОП - свободный оксипролин

ТИМП - тканевой ингибитор металлопротеиназ

ХАИ - хроническая алкогольная интоксикация

Булгакова Валерия Сергеевна

УГЛЕВОД - БЕЛКОВЫЕ КОМПЛЕКСЫ ПРИ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ НА ФОНЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГИПЕРГЛИКЕМИИ

03.00. 04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Челябинск - 2008

Подписано в печать 13.11.08. Формат 60x84 1/16. Бум. офсетная. Гарнитура «Тайме». Печать на ризографе. Печ. л. 1,5. Тираж 100 экз. Заказ 58.

Редакционно-полиграфический отдел издательства ФГОУ ВПО ОмГАУ при Институте экономики и финансов.

Отпечатано в редакционно-полиграфическом отделе издательства ФГОУ ВПО ОмГАУ при Институте экономики и финансов. Омск-8, ул. Физкультурная, 8е.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Булгакова, Валерия Сеогеевна

Список принятых сокращений.

Введение.

Глава 1. УГЛЕВОД - БЕЛКОВЫЕ КОМПЛЕКСЫ ПРИ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЯХ (обзор литературы).

1.1. Углевод - белковые комплексы печени. Их структура и метаболизм.

1.1.1. Коллаген.

1.1.2. Протеогликаны.

1.1.3. Гликопротеины.

1.2. Механизмы повреждения тканей в условиях гипергликемии.

1.3. Особенности метаболизма углевод - белковых комплексов печени при алкогольной интоксикации.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объекты и предметы исследования.

2.2. Особенности экспериментального моделирования.

2.3. Биохимические методы исследования.

2.3.1. Преаналитический этап.

2.3.2. Аналитический этап.

2.3.3. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

3.1. Гликопротеины в печени и плазме крови животных при алкогольной интоксикации в сочетании с экспериментальной гипергликемией.

3.2. Уровень компонентов протеогликанов в печени и плазме крови животных при алкоголизации на фоне экспериментальной гипергликемии.

3.3. Показатели обмена коллагена в печени животных при алкоголизации на фоне гипергликемии.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Углевод-белковые комплексы при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии"

Актуальность исследования. Ведущими причинами смерти мужчин трудоспособного возраста являются отравления, аварии и несчастные случаи, большая часть которых связана с состоянием алкогольного опьянения. Показатель смертности от цирроза печени в России составляет 26,1 на 100000 населения и более чем в 2 раза превышает среднемировой уровень. Установлено, что более чем в половине случаев (63,4%) цирроз печени, приводящий к смерти, обусловлен многолетним приемом токсических доз алкоголя. Доля алкогольного цирроза печени у умерших в возрасте 18-65 лет составляет 74% [31]. Хроническая алкогольная интоксикация выступает важным ко-фактором патогенеза ряда заболеваний, 20,9% соматических больных многопрофильного стационара имеют признаки злоупотребления алкоголем [54] У 8,3% больных сахарным диабетом эндокринологического отделения выявлены признаки хронического алкоголизма, сформировавшегося на фоне уже существующего заболевания [72].

По данным Shai I. и соавт. (2007) умеренное употребление алкоголя в течение трех месяцев на фоне сахарного диабета снижает уровень глюкозы в плазме крови натощак, по сравнению с больными сахарным диабетом, не употребляющими алкоголь, не влияет на её концентрацию через 2 часа после нагрузки глюкозой и сопровождается снижением концентрации гликозилированного гемоглобина в плазме крови. Известно, что этанол и продукты его окисления снижают активность ферментов глюконеогенеза, нарушают утилизацию глицерола и превращение его в глюкозу, ингибируют превращение в глюкозу сорбитола, а также производство глюкозы из аланина [2]. Кроме того, алкоголь обладает способностью значительно потенцировать инсулинстимулирующий эффект одновременно принятых легкоусвояемых углеводов. Эти изменения приводят к развитию гипогликемии спустя 6-36 часов после принятия алкоголя [3, 11]. Также, алкогольная интоксикация приводит к снижению активности ферментов участвующих в гликозилировании белков: галактозилтрансферазы, сиалилтрансферазы, N-ацетилглюкозаминтрансферазы [97, 127, 133, 177, 204] и к появлению в крови углевод - дефицитных гликопротеинов: углевод - дефицитные трансферрин [177, 204], аполипопротеин J [131, 132], аполипопротеин Е [160]. Есть данные, что употребление алкоголя в низких дозах приводит к увеличению в плазме концентрации адипонектина, не влияет на уровень ФНО-альфа и имеет положительную корреляцию с индексом чувствительности к инсулину [93, 198]. Адипонектин, вырабатывающийся в адипоцитах под влиянием инсулина, регулирует энергетический гомеостаз и оказывает антивоспалительный и антиатерогенный эффекты. Полагают, что адипонектин, частично оказывая антагонистический эффект на ФНО-альфа, выполняет защитную функцию против гипергликемии, инсулинорезистентности и атеросклероза. Установлено, что умеренное употребление алкоголя в эквивалентных дозах оказывает противовоспалительный эффект, снижает активацию моноцитов, ингибирует продукцию ФНО-альфа, ядерного фактора Каппа В, стимулирует выработку противовоспалительных цитокинов и интерлейкина - 10 [206].

С другой стороны, хроническое или массивное употребление этанола оказывает противоположный эффект и сопровождается окислительной модификацией углевод - белковых и углевод - липидных комплексов, стимулирующей окислительный стресс [129, 150, 171, 192] и аутоиммунное воспаление в тканях [129, 163, 171]. Это приводит к снижению реактивности тканей на инсулин и к развитию нарушения толерантности к глюкозе [135]. Компенсация метаболических нарушений у больных сахарным диабетом, злоупотребляющих алкоголем, представляет значительные трудности ввиду множества сопутствующих нарушений, что делает необходимым целенаправленное изучение алкогольобусловленных висцеральных повреждений [72]. В литературе имеются лишь единичные сведения о метаболических нарушениях у больных сахарным диабетом при злоупотреблении алкоголем. По данным Притыкиной Т. В. (2005) у лиц, злоупотребляющих алкоголем на фоне сахарного диабета, наблюдается увеличение концентрации в сыворотке крови компонентов протеогликанов и гликопротеинов, однако, механизм этих изменений остается не ясным и требует дальнейшего изучения.

Цель работы: выявить особенности изменений уровня углевод-белковых комплексов печени и плазмы крови для установления механизма этих нарушений при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии.

Задачи исследования:

2. Охарактеризовать уровень показателей обмена протеогликанов в печени и плазме крови животных при алкогольной интоксикации в сочетании с экспериментальной гипергликемией.

3. Выявить особенности обмена коллагена в печени при алкоголизации и экспериментальной гипергликемии.

Научная новизна. В эксперименте показано существенное влияние алкоголизации на метаболизм углевод - белковых комплексов в печени и плазме крови животных с экспериментальной гипергликемией. Выявлена способность алкоголизации влиять на процессы гликозилирования гликопротеинов. Установлена роль алкогольной интоксикации в изменении метаболизма протеогликанов при экспериментальной гипергликемии, что вероятно, отражает активацию фиброзных процессов. Выявлена способность алкоголизации значительно влиять на интенсивность обмена коллагена и стимулировать его накопление в печени.

Теоретическое и практическое значение работы.

Результаты проведенного исследования позволяют расширить представления о патохимических механизмах, лежащих в основе формирования метаболических сдвигов при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии. Полученные данные об изменении метаболизма компонентов гликопротеинов, протеогликанов и коллагена при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии могут служить обоснованием для разработки методов мониторинга течения сахарного диабета при злоупотреблении алкоголем. Экспериментально обоснована возможность выявления алкоголь индуцированных патологических процессов у больных сахарным диабетом, злоупотребляющих алкоголем, по показателям углевод-белковых комплексов плазмы крови.

Положения, выносимые на защиту:

1. Алкогольная интоксикация и её сочетание с гипергликемией характеризуется значительными изменениями уровня компонентов гликопротеинов в плазме крови и печени животных.

3. При гипергликемии алкогольная интоксикация сопровождается не только сдвигами со стороны концентрации углеводных, но и изменениями уровня белковых компонентов гликопротеинов печени.

Апробация работы. Основные положения работы представлены: на межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы современной психиатрии и наркологии» (Омск, 2005); на 75 научной студенческой конференции, посвященной 85-летию ОмГМА (Омск, 2006); на V Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине (Тула, 2006); на Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной биохимии» (Киров, 2007); на научно - практическом симпозиуме «Ключевые проблемы совершенствования лабораторного обеспечения медицинской помощи» (Москва, 2007); на IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008); на научно - практическом симпозиуме «Лабораторная медицина: инновационные технологии в аналитике, диагностике, образовании, организации» (Москва,2008).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 печатных работ, в том числе 1 работа в издании, рекомендованном ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, глав результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов. Библиграфический указатель включает 222 источника: 90 - отечественных и 132 - иностранных. Работа иллюстрирована 28 таблицами и 7 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Булгакова, Валерия Сеогеевна

Выводы:

1. Острая алкогольная интоксикация сопровождается повышением уровня сиаловых и глюкуроновой кислот, гексоз гликопротеинов и мукопротеинов в плазме крови и в печени животных с гипергликемией.

2. Установлены различия в изменениях уровня мукопротеинов в плазме крови и в печени животных при изолированной алкоголизации и у животных, алкоголизированных на фоне экспериментальной гипергликемии.

3. Существенное снижение уровня мукопротеинов в плазме крови и в ткани печени обусловлено влиянием алкогольной интоксикации на синтез мукопротеинов в печени животных с экспериментальной гипергликемией.

4. Длительная алкоголизация на фоне экспериментальной гипергликемии вызывает увеличение концентрации гликозаминогликанов в печени, что свидетельствует о преобладании процессов их синтеза.

5. Хроническая алкогольная интоксикация в условиях экспериментальной гипергликемии сопровождается увеличением уровня белоксвязанного оксипролина на фоне повышения концентрации свободного оксипролина и уменьшения уровня тканевого ингибитора металлопротеиназ - 1, что может указывать на интенсификацию процессов образования коллагена.

Заключение

Известно, что этанол и его метаболиты снижают активность ферментов глюконеогенеза, нарушают утилизацию глицерола и превращение его в глюкозу, а также, ингибируют превращение в глюкозу сорбитола и производство глюкозы из аланина [2]. Кроме того, алкоголь обладает способностью значительно потенцировать инсулинстимулирующий эффект одновременно принятых легкоусвояемых углеводов. Эти изменения приводят к развитию гипогликемии спустя 6-36 часов после принятия алкоголя [3, 11]. Также, выяснено, что алкогольная интоксикация приводит к снижению активности ферментов участвующих в гликозилировании белков: галактозил-и сиалилтрансфераз, N-цетилглюкозаминтрансферазы [97, 127, 133, 177, 204] и к появлению в крови углевод - дефицитных гликопротеинов: углевод -дефицитные трансферрин [97, 127, 133, 177, 204], аполипопротеин J [130, 131], аполипопротеин Е [160].

Компенсация метаболических нарушений у больных сахарным • диабетом, злоупотребляющих алкоголем, представляет значительные трудности ввиду множества сопутствующих нарушений [72]. По данным Притыкиной Т. В. и соавт. (2005) у лиц, злоупотребляющих алкоголем на фоне сахарного диабета, наблюдается увеличение концентрации в сыворотке крови компонентов протеогликанов и гликопротеинов, однако, для понимания механизма этих изменений требуются дальнейшие исследования.

Для уточнения патохимических механизмов нарушений обмена углевод-белковых комплексов при сахарном диабете в сочетании с алкоголизацией был исследован уровень их компонентов в плазме крови и печени экспериментальных животных с хронической гипергликемией на фоне алкоголизации.

При оценке уровня показателей обмена углевод-белковых комплексов в плазме крови и печени животных с гипергликемией в сочетании с алкоголизацией выявлен ряд изменений зависящих от длительности токсического воздействия.

Однократная алкоголизация животных группы А характеризовалась повышением количества сиаловых кислот в плазме крови и увеличением концентрации гексоз гликопротеинов в плазме крови и печени, что отражает усиление функциональной активности клеток соединительной ткани, видимо, в ответ на повреждение гепатоцитов [43].

При исследовании уровня мукопротеинов выявлено, что на фоне снижения концентрации гексоз мукопротеинов в плазме крови, наблюдается повышение их концентрации в печени. Привлекает внимание тот факт, что при исследовании уровня тирозина мукопротеинов статистически значимых отличий ни в плазме крови, ни в печени, выявлено не было. Возможно, введение алкоголя способствовало нарушению гликозилирования экспортных мукопротеинов и более активному включению углеводов во внутриклеточные белки. Это может косвенно подтверждаться способностью этанола стимулировать потребление глюкозы тканями, приводящее к развитию посталкогольной гипогликемии, описанной многими исследователями [2, 11].

В группе Г на 15 сутки развития экспериментальной гипергликемии при оценке метаболизма гликопротеинов выявлено существенное повышение в плазме крови уровня глюкозы, гликопротеинов и мукопротеинов, определяемых как по тирозину, так и по гексозам, на фоне отсутствия выраженных изменений со стороны показателей печени. Между уровнем гликопротеинов и концентрацией мукопротеинов обнаружена положительная корреляция. Возможно, повышение уровня гликопротеинов в плазме крови, на фоне отсутствии их увеличения в ткани печени, является следствием накопления конечных продуктов гликирования, активно образующихся в условиях хронической гипергликемии [4, 6, 188].

Однократное введение этанола животным с гипергликемией на 15 сутки эксперимента характеризовалось статистически достоверным снижением уровня глюкозы в плазме крови по отношению к группе Г, хотя относительно контрольной группы значения были существенно повышены.

Кроме этого в плазме крови наблюдалось значительное увеличение уровня свободных сиаловых кислот как в сравнении с группой К, так и с группой Г, отрицательно коррелировавшее с уровнем гликопротеинов плазмы крови.

Анализируя эти данные можно предположить, что однократное введение алкоголя прямо или через активацию сиалидазы способствовало нарушению структурной организации сиалогликопротеинов, что проявлялось существенным увеличением в плазме крови концентрации свободных сиаловых кислот. Известно, что, находясь в составе углеводной части гликопротеинов, СК маскируют остатки Сахаров, являющихся антигенными детерминантами и таким образом, играют важную роль в иммунных реакциях, снижая иммуногенные свойства нормальных и опухолевых клеток [88]. Отщепление сиаловых кислот приводит к тому, что концевым сахаром в молекулах гликопротеинов становится галактоза. Такие белки быстрее поглощаются клетками печени. Именно этим объясняется потеря гормонами биологической активности. Процесс старения эритроцитов также связан с уменьшением количества СК в их оболочке. Отсутствие статистически значимых отличий с контролем по данному показателю в группе Г, и значительный рост его в группе Г-А позволяет расценить данное изменение, как - алкогольобусловленное. Оно является отражением нарушения структурной организации сиалосодержащих гликопротеинов в условиях острой алкоголизации и, безусловно, оказывает неблагоприятное воздействие на их функционирование [88].

Однократная алкоголизация животных на фоне хронической гипергликемии также, способствовала значительному увеличению концентрации гексоз мукопротеинов и гликопротеинов в печени в сравнении с группой Г, на фоне сохраняющегося в обеих группах повышенного количества мукопротеинов и гликопротеинов плазмы крови. Высокие значения гексоз мукопротеинов в печени имели положительную корреляцию с их уровнем в плазме крови, что, вероятно, подтверждает именно активацию синтеза этих белков, а не только удлинение периода их циркуляции возможное из-за образования конечных продуктов гликирования на фоне хронической гипергликемии. Повышение концентрации мукопротеинов обычно наблюдается при разнообразных воспалительных процессах в организме, оно обусловлено выходом их в кровь из поврежденных тканей, а также активацией их синтеза в печени [20]. Известно, что мукопротеины способны связывать токсические молекулы тем самым, выполняя защитную роль и способствуя организации воспалительного очага [53].

Возможно, синтез белков в печени животных с экспериментальной гипергликемией ограничен низким уровнем инсулина. Введение этанола в этих условиях, за счет его способности стимулировать выработку инсулина может обуславливать его активацию. Кроме этого, на синтез мукопротеинов и гликопротеинов на фоне хронической гипергликемии также как и без неё, могут влиять различные метаболиты, образующиеся при окислении этанола.

На 15 сутки развития гипергликемии в группе Г наблюдалось повышение концентрации гликозаминогликанов и глюкуроновой кислоты в плазме крови экспериментальных животных, на фоне повышения уровня ГАГ и снижение активности /5 - глюкуронидазы в печени. При этом была выявлена сильная отрицательная связь между уровнем глюкуроновой кислоты и концентрацией гликозаминогликанов в печени. Эти данные говорят об одновременной активации как синтеза протеогликанов так и их распада в ткани печени, что, вероятно, связано с активацией фибробластов под влиянием гипергликемии, и запуском их естественных функций: пролиферации, выработки компонентов межклеточного матрикса и активации синтеза ферментов, его разрушающих [60].

Введение этанола на фоне хронической гипергликемии проявлялось повышением уровня ГК в печени достоверно превышающим её значения в группах К и Г, сопровождающееся повышенным уровнем ГК в плазме крови, отсутствием статистически значимых отличий с группой К по уровню ГАГ и существенным увеличением активности /3- глюкуронидазы, в сравнении с группой Г, хотя относительно группы К активность изучаемого фермента была значительно ниже. Уменьшение уровня гликозаминогликанов по сравнению с группой Г можно объяснить либо нарушением их синтеза, либо преобладанием процессов их распада. С учетом данных о повышении активности /3-гюкуронидазы в печени и повышении концентрации ГК в печени и в плазме крови, можно сделать вывод об усилении процесса распада ГАГ в печени животных при однократном введении этанола на фоне экспериментальной гипергликемии.

При анализе изменений возникающих в метаболизме коллагена на фоне однократной алкоголизации животных группы А выявлено значительное увеличение концентрации белоксвязанного оксипролина в печени, на фоне отсутствия значимых отличий по уровню свободного оксипролина и активности ТИМП-1.

В группе Г на 15 сутки развития гипергликемии наблюдалось уменьшение концентрации СОП и активности ТИМП-1, на фоне отсутствия выраженных изменений БСОП.

В группе Г-А, однократное введение этанола на 15 сутки развития экспериментальной гипергликемии, способствовало существенному повышению уровня БСОП, как относительно данных контрольной группы, так и в сравнении со значениями группы Г. Активность ТИМП-1 при этом была снижена, а уровень СОП достоверных различий с контролем не имел, хотя его значения тоже были ниже контрольных. Столь существенное повышение уровня БСОП при острой алкоголизации на фоне гипергликемии, говорит о преобладании процессов фибриллогенеза [38].

Таким образом, однократная алкоголизация на фоне экспериментальной гипергликемии сопровождалась активацией синтеза коллагеновых и неколлагеновых гликопротеинов в печени и распадом сиалогликопротеинов и протеогликанов.

Влияние длительной алкоголизации на метаболизм углевод - белковых комплексов печени и плазмы крови экспериментальных животных исследовали в течение 43 и 64 суток интоксикации.

В плазме крови животных группы А на 43 сутки алкоголизации выявлено существенное увеличение концентрации мукопротеинов по тирозину. При интоксикации в течении 64 суток уровень мукопротеинов по тирозину в плазме крови, также, остается повышенным и значительно возрастает его количество в печени. Кроме этого, хроническая алкоголизация способствовала значительному повышению уровня сиаловых кислот в плазме крови и характеризовалась повышением концентрации гексоз гликопротеинов в плазме крови на фоне снижения их количества в печени.

Известно, что при хроническом поступлении этанола гепатоциты начинают продуцировать провоспалительные цитокины и белки острой фазы воспаления [129]. Отмечено увеличение уровня альфа-1-антитрипсина, орозомукоида, альфа1серомукоидов, гаптоглобина [63, 201], SPARS и липокаина - 2 [101], что подтверждает наши данные об увеличении уровня мукопротеинов при длительной алкоголизации.

Однако повышение концентрации мукопротеинов по тирозину сопровождалось отсутствием выраженных изменений со стороны гексоз мукопротеинов. И повышение уровня гексоз гликопротеинов в плазме крови, наблюдается на фоне снижения их количества в печени.

По данным большого количества исследователей алкоголизация сопровождается нарушением гликозилирования сывороточных гликопротеинов, что приводит к появлению в кровотоке углевод — дефицитных белков и липидов, таких как углевод - дефицитный трансферрин [97, 127, 133, 169, 177, 204], аполипопротеин J [131, 132], аполипопротеин Е [160], ганглиозиды [127] и др. Chrostec L. et al. (2007) обнаружили корреляцию между концентрацией в крови лиц злоупотребляющих алкоголем, десиалированных альфа-1-гликопротеинов (альфа-1-антитрипсина, орозомукоида) и уровнем в крови общих и свободных сиаловых кислот. Выявлено повышение активности плазматической сиалидазы [127. 131].

Таким образом, хроническая алкоголизация способствует активации синтеза гликопротеинов в печени, что сопровождается нарушением процессов гликозилирования белков.

У животных с хронической гипергликемией на 43 сутки после введения аллоксана статистически значимых различий с контролем по изучаемым показателям не выявлено. На 64 сутки развития экспериментальной гипергликемии в плазме крови наблюдалось повышение уровня свободных сиаловых кислот, что совпадает с данными Лекомцева И. В. (2002), который экспериментально подтвердил преобладание процесса распада сиалогликопротеинов на фоне повышения активности плазматической сиалидазы при аллоксановом диабете у крыс. По данным Cylwic В. et al. (2006) повышение уровня свободных сиаловых кислот у больных, страдающих сахарным диабетом 2 типа, связано с уменьшением их концентрации в составе трансферрина и ассоциируется с развитием микроангиопатий. Таким образом, повышения количества сиаловых кислот может играть существенную роль в диагностике развития сосудистых осложнений сахарного диабета.

Кроме этого, у животных группы Г выявлено существенное повышение уровня гексоз гликопротеинов и мукопротеинов в плазме крови на фоне значимого снижения их уровня в печени. При этом уровень мукопротеинов по тирозину был высоким и в крови и в печени.

Эти данные говорят об активации синтеза мукопротеинов в печени экспериментальных животных при хронической гипергликемии, и, возможно, о нарушении гликозилирования внутриклеточных гликопротеинов, на фоне выраженного гликирования белков плазмы крови.

При сочетании хронической гипергликемии и алкоголизации в течении 43 суток, также как и в группе А в плазме крови наблюдалось повышение содержания мукопротеинов по тирозину. На 64 сутки в плазме крови животных группы Г-А выявлено повышение уровня сиаловых кислот, гексоз гликопротеинов и гексоз мукопротеинов, на фоне выраженного снижения содержания тирозина мукопротеинов. В печени экспериментальных животных установлено снижение концентрации гексоз в составе гликопротеинов и мукопротеинов в сочетании с существенным снижением уровня тирозина мукопротеинов. При этом снижение концентрации мукопротеинов определенных по тирозину было выражено не только относительно данных группы К, но и значений группы Г. Выявлена положительная корреляция между концентрацией гексоз гликопротеинов и уровнем мукопротеинов в печени.

Таким образом, значимым отличием между группами Г и Г-А является существенное снижение уровня мукопротеинов по тирозину в плазме крови и в печени экспериментальных животных, что, вероятно, говорит о нарушении синтеза мукопротеинов, об отсутствии адекватной реакции на токсическое воздействие и является неблагоприятным признаком.

При анализе изменений выявленных при исследовании показателей обмена протеогликанов на 64 сутки алкоголизации у животных группы А обнаружено повышение уровня глюкуроновой кислоты в печени на фоне снижения активности /З-глюкуронидазы.

Повышение уровня глюкуроновой кислоты при длительной алкоголизации может быть связано либо с распадом гликозаминогликанов, либо с изменением направления их метаболизма. Так как мы обнаружили снижение активности /З-глюкуронидазы в печени, есть основания предполагать, что уровень глюкуроновой кислоты повышен вследствие её накопления. В литературе имеются сведения о повышении в крови у лиц, злоупотребляющих алкоголем, концентрации этилглюкуронида — продукта неокислительного обезвреживания этанола [120]. Кроме того, дефицит НАД, возникающий вследствие окисления этанола, может препятствовать окислению ГК в глюкуронат-ксиллулозном цикле.

При оценке показателе обмена протеогликанов у животных группы Г на 43 сутки развития экспериментальной гипергликемии выявлено повышение концентрации ГАГ и ГК в плазме крови. На 64 сутки эксперимента концентрация гликозаминогликанов в плазме крови нарастала, в печени существенных различий с контролем выявлено не было, а уровень глюкуроновой кислоты достоверно превысил данные контроля не только в плазме крови, но и в печени. Это происходило на фоне снижения активности /З-глюкуронидазы.

У животных группы Г-А на 43 сутки алкоголизации на фоне гипергликемии в плазме крови наблюдалось существенное повышение уровня ГАГ, а в печени - глюкуроновой кислоты. А на 64 сутки алкоголизации на фоне гипергликемии наблюдалось выраженное снижение концентрации ГК в плазме крови экспериментальных животных, значительное увеличение уровня ГАГ и ГК в печени, а также повышение активности /З-глюкуронидазы.

Таким образом, у животных группы Г-А повышение уровня ГАГ в плазме крови предшествовало стадии накопления их в печени, что, вероятно, свидетельствует об изменении обмена протеогликанов под влиянием длительной алкоголизации. Увеличение концентрации ГАГ, на фоне высоких значений уровня ГК и активности /З-глюкуронидазы, является свидетельством развития фиброзных изменений в печени.

При исследовании компонентов коллагена в печени животных группы А на 43 сутки алкоголизации выявлено достоверное увеличение количества как БСОП, так и СОП, что отражает активное включение фибробластов в процесс ремоделирования межклеточного матрикса. Сигналом к активации клеток продуцирующих коллаген могут служить цитокины, свободные радикалы, продукты распада тканей, образующиеся при алкогольной интоксикации [30]. Уровень свободного оксипролина отражает интенсивность распада коллагена [38]. Одновременное повышение концентрации БСОП и СОП в тканях свидетельствует об активации как его синтеза, так и распада.

В печени животных группы Г на 43 сутки развития экспериментальной гипергликемии на фоне снижения активности ТИМП-1, наблюдалось повышение количества БСОП, что говорит о повышенном содержании коллагена в печени на фоне активации металлопротеиназ. Данные изменения имели транзиторный характер и на момент окончания эксперимента, видимо, были компенсированы.

При хронической алкоголизации на фоне гипергликемии в печени животных группы Г-А наблюдалось значительное повышение концентрации БСОП в сочетании с высокими значениями уровней СОП и ТИМП-1, что отражает интенсификацию, как процессов распада коллагена, так и его синтеза в условиях хронической алкоголизации, и свидетельствует о значительном преобладании последнего.

Особенности нарушений углеводсодержащих белков при хронической алкогольной интоксикации в отличие от гипергликемических состояний могут быть вызваны как мембранотропным действием этанола, так и влиянием его метаболита - ацетальдегида, который по данным С. Д.По дымовой (2001) способствует ускорению реакций синтеза гликопротеинов.

Полученные данные подтверждают возможность использования показателей углевод-белковых комплексов в клинической практике для выявления алкоголь-индуцированных метаболических нарушений. Однако при этом необходимо учитывать особенности изменений этих показателей при гипергликемиях.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Булгакова, Валерия Сеогеевна, Челябинск

1. Абрамова И. Э. Нарушение обмена гликозаминогликанов при неврологической патологии и его коррекция церуллоплазмином: автореф. дис. . канд. биол. наук / И. Э. Абрамова. Уфа, 1999. - 23с.

2. Абрикосова С. Ю. Гормональная функция островкового аппарата поджелудочной железы больных хроническим алкоголизмом / С. Ю. Абрикосова, М. И. Балаболкин, Е. Т. Лильин // клиническая медицина. — 1986. Т. 64, № 10. - С 123 - 126.

3. Балаболкин М. И. Головокружение как маргинальный симптом гипогликемии / М. И. Балаболкин, Е. М. Клебанова, В. М. Креминская // Consilium medicum Приложение. — 2001. - Oct. 05.

4. Балаболкин М. И. Диабетология / М. И. Балаболкин. М., 2000. - 672с.

5. Балаболкин М. И. Патогенез и механизмы развития ангиопатий при сахарном диабете / М. И. Балаболкин, Е. М. Клебанова, В. М. Креминская // Кардиология. 2000. - № 10. - с. 74 - 87.

6. Балаболкин М. И. Патогенез и профилактика сосудистых осложнений сахарного диабета / М. И. Балаболкин, В. М. Креминская // Тер. архив. -1999.-том 71, № 10.-с. 5-12.

7. Башкатов С. А. Гликозаминогликаны в биохимических механизмах адаптации к воздействию ксенобиотиков и термических ожогов: автореф. дис. . .д-ра мед. наук / С. А. Башкатов. — Уфа, 1997. 30с.

8. Башкатов С. А. Гликозаминогликаны в механизмах адаптации организма / С. А. Башкатов. Уфа, 1996. -142с.

9. Башкатов С. А. Плацентарные гликозамингликаны перспективные средства метаболической терапии и лечебно — профилактической косметики // Актуальные вопросы пластической хирургии и дерматокосметологии. - М.: Майер Джей, 2003. - С.93.

10. Бокарев И. Н. Об опасной для жизни алкогольной гипогликемии у лиц, не страдающих сахарным диабетом / И. Н. Бокарев, В. К. Беликов, О. И. Шубина // Клиническая медицина. 1999. - №3. - С. 29 - 31.

11. Бондарь И. А. Гликозаминогликаны и диабетическая нефропатия / И. А. Бондарь, В. В. Климентов // Проблемы эндокринологии. 2004. - Т. 50, № 2.-С. 29-33.

12. Бондарь И. А. Экскреция сульфатированных гликозаминогликанов с мочой у больных диабетической нефропатией / И. А. Бондарь, В. В. Климонтов, Г. А. Пауль, С. А. Амбросова, Т. А. Короленко // Проблемы эндокринологии. 2001. - Т. 47, № 4. - с. 35 -38.

13. Бондарь Т. П. Анемический синдром при поздних сосудистых осложнениях сахарного диабета типа 2 —критерии лабораторной диагностики: автореф. дис. . д-ра мед. наук / Т. П. Бондарь. М., 2002. -36с.

14. Бондарь Т. П. Лабораторно клиническая диагностика сахарного диабета и его осложнений /Т. П. Бондарь, Г. И. Козинец. - М.: Медицинское информационное агенство, 2003. - 84с.

15. Вавилова Т.П. Биохимия тканей и жидкостей полости рта / Т.П. Вавилова. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 208с.

16. Видершайн Г. Я. Биохимические основы гликазидозов / Г. Я. Видершайн. М.: Медицина, 1980. - 320 с.

17. Видершайн Г. Я. Углеводсодержащие биополимеры в процессах узнавания молекул и клеток / Усп. биол. химии. 1979. -Т. 20. - С.46 -71.

18. Видершайн Г. Я. Углеводсодержащие соединения, их биосинтез, роль в живой клетке / Г. Я. Видершайн // Мол. биол. 1976. - Т. 10, № 5. - С. 957 -980.

19. Голиков С. Н. Общие механизмы токсического действия / С. Н. Голиков, И. В. Саноцкий, JI. А. Таунов. JL: Медицина, 1986. -280с.

20. Готтшалк А. Гликопротеины: пер. с англ. / А. Готшалк. М.: Мир, 1969.-288с.

21. Дедов И. И. Диабетическая нефропатия / И. И. Дедов, М. В. Шестакова. Универсум Паблишинг, 2000. - 240с.

22. Дзугкоева Ф. С. Изменение состояния и реактивности мембран эритроцитов клеток почечной ткани при аллоксановом диабете / Ф. С. Дзугкоева, Турина А. Е. // Нефрология. 2001. - №3. - С. 99.

23. Добронравов В. А. Гликозаминогликаны и диабетическая нефропатия / В. А. Добронравов // Нефрология. 2002. - Т. 6, № 2. - С. 99 - 101.

24. Жижин К. Ф. Медицинская статистика: Учебное пособие/ К. С. Жижин. Ростов н/Д: Феникс, 2007. - 160с.

25. Жукова О. Ю. Патогенетическая значимость активации свободнорадикальных процессов в печени при алкоголизации на фоне сахарного диабета: дис. .канд. мед. наук / О. Ю. Жукова. Омск, 2008. -181 с.

26. Заболевания печени и хроническое злоупотребление алкоголем/ С. В. Плюснин // Медицинский вестник (архив газеты). 2007. - №18 (403). -Режим доступа: http://www.medvestnik.ru/archive/2007/l 8/740/forprint.html.

27. Зворыгин И. А. Показатели обмена гликопротеинов у больных хроническим миелоидным лейкозом: дис. . канд. мед. наук / И. А. Зворыгин. Ижевск, 2003. - 160 с.

28. Зимина Н. П., Рыкова В. И., Архипов И. А. // Успехи современной биологии. -1992.-Т. 112.-Вып. 4.-С. 571.

29. Зимницкий А. Н. Гликозаминогликаны в биохимических механизмах старения организма: дис. . д ра. биол. наук / А. Н. Зимницкий. - Уфа, 2005. - 334с.

30. Зимницкий А. Н. Плацентарная косметика, её свойства и перспективы применения // Актуальные вопросы пластической хирургии и дерматокосметологии. М.: Майер Джей, 2003. - С. 94.

31. Зимницкий А. Н., Башкатов С. А. Гликозаминогликаны в биохимических механизмах адаптации организма к некоторым физиологическим и патологическим состояниям. М.: Фармацевтический бюллетень, 2004. - 208 с.

32. Кадурина Т. И. Наследственные коллагенопатии (клиника, диагностика, лечение и диспансеризация). Спб.: Невский диалект. — 2000. -271с.

33. Казакова И. А.Клиническое значение оценки обмена биополимеров соединительной ткани у больных сахарным диабетом типа 1 с диабетической нефропатией / И. А. Казакова, В. В. Трусов, И. Б. Черемискина // Клин. лаб. диагн. 2003. - № 10. - С. 19 -22.

34. Каменских Т. Г. Иммунопатофизиологические особенности развития диабетической ретинопатии / Т. Г. Каменских, Н. Б. Захарова, О. А. Андрейченко, В. В. Никитина, О. В. Слюзова, В. JI. Дашкова // Вятский медицинский вестник. 2007. -№ 4. - С. 103 -104.

35. Камышников В. Ф. Справочник по химико-биологическим исследованиям и лабораторной диагностике / В. Ф. Камышников. — Москва: МЕДпресс информ. - 2004. - 920 с.

36. Корнев Б. М. Фиброзирующий альвеолит: руководство для врачей / Б. М. Корнев, Е. А. Коган, К. У. Резникова, В. В. Деньгин. Под ред. Н. А. Мухина. М., 2003. - 54 с.

37. Косарева О. В. Минеральная плотность костной ткани и показатели её метаболизма у больных сахарным диабетом: Автореф. дис. . канд. мед. наук / О. В. Косарева. Самара, 2000. - 23с.

38. Косых А. А. Биохимия соединительной ткани печени крыс в норме и при воспроизведении экспериментальной патологии / А.А.Косых // Вятский медицинский вестник. 2007. - № 4. -С. 113-115.

39. Лабори Г. Регуляция обменных процессов (теоретический, экспериментальный, фармакологический и терапевтический аспекты) / Г. Лабори. М.: Медицина, 1970. - 384 с.

40. Мазурина Н. К. Современные данные о пролиферативном процессе при диабетической ретинопатии / Н. К. Мазурина // Вестник офтальмологии. -1999.-№3.-37-39.

41. Макаров В. К. Алкоголь, HBV инфекция и состояние биологических мембран / В. К. Макаров // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2006. -№ 1. - С. 33 - 35.

42. Макаров В. К. Новый способ диагностики поражений печени / В. К. Макаров // Клиническая лабораторная диагностика. 2002. - № 12. - С. 8 -10.

43. Мецлер Д. Э. Биохимия, пер. с англ. / Д. Э. Мецлер. 1980. - 304с.

44. Меньшиков В. В. Лабораторные методы исследования в клинике / В. В. Меньшиков, И. С. Балаховский. М.: Медицина, 1987. - 368 с.

45. Мосолева И. М. выделение интактных митохондрий из печени крыс / И. М. Мосолева, И. А. Горская, К. Ф. Шольц и др. // Методы современной биохимии. М.: Наука, 1975. - С. 45 - 47.

46. Мурсалимова А. Ф. Клиническое значение исследования обмена гликозаминогликанов у больных с остеохондрозом позвоночника: автореф. дис. . канд. мед. наук / А. Ф. Мурсалимова . — Уфа, 1999. -22с.

47. Наймушин А. А. Изучение механизма мембраннотоксического действия хлорированных ароматических соединений: автореф. дис. . канд. мед. наук / А. А. Наймушин. Уфа, 1999. - 22с.

48. Огурцов П. П. Алкогольная патология в больнице общего профиля / П. П. Огурцов, Н. Ф. Плавунов, В. С. Моисеев // Клин, медицина. 2003. - № 11.-С. 66 69.

49. Огурцов П. П. Экспресс диагностика хронической алкогольной интоксикации у больных соматического профиля / П. П. Огурцов, В. П. нужный // Клин, фармакология и терапия. -2001. - №1. -С. 34 - 39.

50. Пальчикова Н. А. Количественная оценка чувствительности экспериментальных животных к диабетогенному действию аллоксана / Н. А.

51. Пальчикова, В. Г. Семятицкая, Ю. П. Шорин // Проблемы эндокринологии. — 1987. Т. 33, №4. - с. 65-68.

52. Переведенцева С. Е. Содержание суммарного коллагена в печени и миокарде при аллоксановом диабете / С. Е. Переведенцева, С. Р. Трофимова // Труды молодых ученых Ижевской государственной медицинской академии. Ижевск: «Экспертиза». - 1996. - С.43 - 44.

53. Петренко Е. Г. Оценка биологического возраста человека на основе анализа динамики содержания биополимеров в коже и сыворотке крови: автореф. дис. . канд. биол. наук / Е. Г. Петренко. Москва, 2007. - 25с.

54. Пирожков С. В. Использование антиоксидантов для лечения абстинентных и постабстинентных расстройств у больных алкоголизмом / С. В. Пирожков, JI. Ф. Панченко // Наркология. 2006. - № 4. — с. 54 -56.

55. Подгребельный А. Н. Роль фибробластов в развитии сахарного диабета и его осложнений / А. Н. Подгребельный, О. М. Смирнова, И. И: Дедов // Проблемы эндокринологии. 2005. - Т. 51, № 2. - С. 14 -22.

56. Поцелуева М. М. Выделение и характеристика мембраноактивных гликопротеинов ткани печени / М. М. Поцелуева, В. В. Евтодиенко, И. Н. Крылев // Биохимия. -1980. Т.45. -1399 -1404.

57. Притыкина Т. В. Углевод белковые комплексы сыворотки крови больных сахарным диабетом при злоупотреблении алкоголем: дис. . канд. мед. наук / Т. В. Притыкина. - Омск, 2005. - 150с.

58. Реброва О. Ю. Статистический анализ биомедицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О. Ю. Реброва. -М.: МедиаСфера, 2002. 312 с.

59. Рыжковская Э. Ю. Уровень алкогольной мотивации и гормональнометаболические процессы в условиях адаптации к стрессу: дис. . канд. мед. наук / Э. Ю. Рыжковская. Омск, 1996. - 199 с.

60. Сайфуллина Е. В. Особенности структурно функционального состояния мембран эритроцитов и обмен гликозаминогликанов у больных миотонической дистрофией: автореф. дис. . канд. мед. наук / Е. В. Сайфуллина. - Уфа, 1999. - 23 с.

61. Салтыков Б. Б. Иммуноморфологическое изучение диабетической микроангиопатии / Б. Б. Салтыков, В. К. Беликов // Арх. патологии. 2000. -№ 2. - С. 5 - 9.

62. Себякин Г. JI. Гликоконьюганты. Углеводные цепи гликопротеинов: структура, биосинтез и функции в тканях животных / Г. JI. Себякин, Р. П.

63. Евстигнеев // Успехи биологической химии. М.: Наука, 1988. -Т. 28, АН СССР. -213 -222.

64. Сидоров П. И. Форма потребления алкоголя и течение сахарного диабета / П. И. Сидоров, А. Г. Соловьева, И. А. Новикова // Наркология. -2002. -№5.-С. 28-33.

65. Слуцкий JI. И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани /Л. И. Слуцкий. Л.: Медицина. - 1969. -375 с.

66. Слуцкий Л. И. Матрикс соединительной ткани как механохимическая конструкция // Теоретич. вопрос. Травматологии и ортопедии: сб ст. ЦНИИ трав, и ортопед, им. Н. И. Приорова. М., 1990. - С .3 -9.

67. Соболева Г. М. Семейство матричных металлопротеиназ: общая характеристика и физиологическая роль / Г. М. Соболева, Г. Т. Сухих // Акушерство и гинекология. — 2007. №1. - С.5 -8.

68. Соколов Е. И. Нарушения реологических свойств крови и липидно -фосфолипидного спектра мембран эритроцитов у больных сахарным диабетом / Е. И. Соколов, В. И. Заботнов, С. В. Подачина, М. Б. Балуда // Кардиология. 1996. - № 9. - С.67 - 70.

69. Суворов А. В. Справочник по клинической токсикологии / А. В. Суворов. Издательство Нижегородской государственной медицинской академии, 1996. - 178с.

70. Стейси М., Баркер С. Углеводы живых тканей. М.: Мир, 1985. - 400с.

71. Удовиченко О. В. Патогенетическая роль диабетической микроангиопатии в развитии синдрома диабетической стопы / О. В. Удовиченко, М. Б. Анфицеров, А. Ю. Токмакова // Проблемы эндокринологии. 2001. - № 2. - С. 39 - 45.

72. Успенский А. Е. Токсикологическая характеристика этанола / А. Е. Успенский // Итоги науки и техники. Токсикология. — 1984. — Т.13. С.6-56.

73. Фидлер Д. М. Молекулярная биология клетки, пер.с англ. / Д. М. Фидлер, Д. Шилдс. М.: БИНОМ - Пресс, 2003. -272 с.

74. Чернобровкина Т. В. Гамма-глутамил трансфераза. Роль в патогенезе алкоголизма, наркоманий и токсикоманий / Т. В. Чернобровкина. Итоги науки и техники. ВИНИТИ. — 1989.- Т. 3. - 200с. — (Наркология).

75. Шараев П. Н. Биохимические методы анализа показателей обмена биополимеров соединительной ткани. Ижевск: Мет. Рекомендации МЗ РФ. - 1990.-15с.

76. Шараев П. Н. Биохимические методы анализа показателей обмена биополимеров соединительной ткани: методические рекомендации / П. И. Шараев, В. И. Рябов, Г. X. Гумярова и др. // Клин. лаб. диаг. 1993. - № 4. -С. 44-46.

77. Шараев П. Н. О диагностическом значении показателей обмена коллагена и гликопротеинов при эндогенных интоксикациях / П. Н. Шараев // Клин. лаб. диагн. 2001. № 9. - С. 9 - 10.

78. Шараев П. Н. Методы лабораторного исследования показателей обмена коллагена в биологических жидкостях: методические рекомендации / П. Н. Шараев и др.. Ижевск. - 2003. - 15с.

79. Шараев П. Н. Методы исследования показателей обмена сиаловых кислот в биологических жидкостях / П. Н. Шараев и др.. Ижевск. - 2001. -7с.

80. Шараев П. Н. О клиническом значении исследования показателей обмена коллагена / П. Н. Шараев, A. JI. Гаврилов, О. В. Игумнова, М. Н. Осипова, Н. Г. Чернышова // Омский научный весник. Приложение. — Омск, 2002. -№ 12.-С. 112-114.

81. Albano Е. Alcohol, oxidative stress and free radical damage / E. Albano // Proc Nutr Soc. 2006. - Vol.65, № 3. - P. 278-290.

82. Alterations in mRNA expression of myelin proteins in the sciatic nerves and brains of streptozotocin-induced diabetic rats / R. Kawashima et al. //Neurochem. Res. -2007.-Vol. 32, № 6. P. 1002-1010.

83. Avogaro A. Moderate alcohol consumption, glucose metabolism and lipolysis: the effect on adiponectin and tumor necrosis factor alpha / A. Avogaro, M. Sambataro, A. Marangoni, A. Pianta, R. Vettor, C. Pagano, M. C. Marescotti,

84. A. Tiengo, G. Beltramello // J Endocrinol Invest. 2003. - T. 26, №12. - P. 12131218.

85. Bancowski E. Collagen in liver fibrosis induced by ethanol / E. Bankowski // Rocz. Akad. Med. Bialymst. 1994. - Vol. 39. - P. 1 -6.

86. Beulens J.W. Alcohol consumption and type 2 diabetes: influence of genetic variation in alcohol dehydrogenase / J. W. Beulens, E. B. Rimm, H. F. Hendriks, F.

87. B. Hu, J. E. Manson, D. J. Hunter, K. J. Mukamal // Diabetes. 2007. - T. 56, №9. -P.2388-2394.

88. Bollineni J.S. Heparan sulfate proteoglycan synthesis and its expression are decreased in the retina of diabetic rats / J.S. Bollineni, I. Alluru, A.S. Reddi // Curr. Eye Res.-1997.-Vol. 16, №2.-P. 127-130.

89. Brecher A. S. Coagulation protein function: enhancement of the anticoagulant effect of acetaldehyde by sulfated glycosaminoglycans / A. S. Brecher, M. T. Adamu // Dig Dis Sci. 2001. - T. 46, №9. -P. 2033-2042.

90. Brecher A. S. The effect of glycosaminoglycans with acetaldehyde on the activation of prothrombin /А. S. Brecher, M. T. Adamu, J. Can // Physiol Pharmacol. 2005 . - T.83, №5. - P. 431- 438.

91. Brecher A. S. The influence of acetaldehyde and glycosaminoglycans upon factor Xa- and factor X-deficient plasma / A. S. Brecher, E. L. Hommema // Can J Physiol Pharmacol. 2002. - T. 80, №9. - P.879-886.

92. Bykov I. Effect of chronic ethanol consumption on the expression of complement components and acute-phase proteins in liver / I. Bykov, S. Junniklcala, M. Pekna, К. O. Lindros, S. Meri // Clin Immunol. 2007. - T. 124, №2.-P. 213-220.

93. Caimi G. Diabetes Mellitus: Oxidative Stress and Wine/ G. Caimi, C. Carollo, R. L. Presti// Curr Med Res Opin. 2003. -Vol.19, №7. - P.581 - 586.

94. Cherian L. Effect of acute injections of ethanol on lipid and protein bound sialic acid in mice of different ages / L. Cherian, W. R. Klemm // Drug Alcohol Depend. - 1990. - Vol.26, №1. -P. 29 -34.

95. Cho K.H. Altered activity of cytochrome P450 in alcoholic fatty liver exposed to ischemia/reperfusion / К. H. Cho, S. M. Lee // Arch Pharm Res. 2007. -T. 30, №1. -P.50-57.

96. Chrostec L. Relationship between serum sialic acid and sialylated glycoproteins in alcoholics / L. Chrostek et al. // Alcohol Alcohol. 2007. - Jun 15.

97. Corfield A. P. Mucin sialidase in the rat large intestine / A. P. Corfield, J. R. Clamp // Biochem. Soc. Trans. 1984. - Vol. 12, № 4. - P. 605 - 607.

98. Cottalasso D. Effect of chronic ethanol consumption on glycosylation processes in rat liver microsomes and Golgi apparatus / D. Cottalasso et al. // Alcohol Alcohol. 1996. - Vol. 31, № i. p. 51-59.

99. Coulon J. Increase in C-reactive protein plasma levels during diabetes in infants and young adults / J. Coulon, D. Willems , H. Dorchy // Presse Med. -2005. T.34, № 2 Pt 1. - P.89-93.

100. Curzio M. Chemotactic activity of the lipid peroxidation product 4-hydroxynonenal and homologous hydroxyalkenals / M. Curzio et al. // Biol. Chem. Hoppe Seyler. 1986. - Vol. 367. - P. 776 - 788.

101. Dewar M. J. S. J. Chem. Soc / V. J. S. Dewar, E. G. Zoebisch, E. F. Healy, J.J.P. Stewart, 1985.- 107p.

102. Diabetes increases formation of advanced glycation end products on Sarco(endo)plasmic reticulum Ca2+-ATPase / K.R. Bidasee et al. // Diabetes. -2004. Vol. 53, № 2. - P. 463-473.

103. Dietary glycotoxins promote diabetic atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice / R.Y. Lin et al. // Atherosclerosis. 2003. - Vol. 168, № 2. - P. 213-220.

104. Diminished loss of proteoglycans and lack of albuminuria in protein kinase C-alpha-deficient diabetic mice / J. Menne et al. // Diabetes. 2004. - Vol. 53, №8.-P. 2101-2109.

105. Droenner P. A kinetic model describing the pharmacokinetics of ethyl glucuronide in humans / P. Droenner et al. // J. Forensic. Sci Int. 2002. -Vol.126, №l.-p.24- 29.

106. Dungel P. Study of the effects of tissue reactions on the function of implanted glucose sensors / P. Dungel, N. Long, B. Yu, Y. Moussy, F. Moussy // J Biomed Mater Res A. 2007. - Sep 17.

107. Emanuele N. V. Consequence of alcohol use in diabetics / N. V. Emanuele, T. F. Swade, M. A. Emanuele // Alcohol Health & Research World. 1998. - Vol. 22, №3.-P. 211-219.

108. Expression of intracellular filament, collagen, and collagenase genes in diabetic and normal skin after injury / K.E. Rodgers et al. // Wound Repair Regen. 2006. - Vol. 14, № 3. - P. 298-305.

109. Fiorelli A. Characterization of a brain lysosomal sialidase active on ganglioside / A. Fiorelli, B. Venerando, C. Siniscalo, E. Monti // J. Neurochem. -1989.-V. 52.-P. 34.

110. Flora S. J. Role of free radicals and antioxidants in health and disease / S. J. Flora // Cell Mol Biol. (Noisy-le-grand).- 2007. T. 53, №1. - P. 1-2.

111. Garige M. Chronic ethanol consumption down-regulates CMP-NeuAc:GM3 alpha 2,8-sialyltransferase (ST8Sia-l) gene in the rat brain / M. Garige, M.A. Azuine, M.R. Lakshman // Neurochem. Int. 2006. - Vol. 49, № 3. - P. 312-318.

112. Gharagozlian S. Effect of hyperglycemic condition on proteoglycan secretion in cultured human endothelial cells / S. Gharagozlian et al. // Eur J Nutr. 2006 . -T.45, №7. - P.369-375.

113. Gheorghiu M. Ethanol induced dysfunction of hepatocytes and leukocytes in patients without liver failure / M. Gheorghiu et al. // Roum Arch Microbiol Immunol. - 2004. - Vol. 63, № 1-2. - P. 5 - 33.

114. Ghosh P. Chronic ethanol induce impairment of hepatic glucosylation machinery in rat is independent of dietary carbohydrate / P. Ghosh, M. R. Lakshman // Alcohol Clin. Exp. Res. 1997. - Vol. 21, № 1. - P. 76 -81."

115. Ghosh P. Long-term ethanol exposure alters the sialylation index of plasma apolipoprotein J (Apo J) in rats / P. Ghosh, E.A. Hale, R. Lakshman // Alcohol Clin. Exp. Res. 1999. - Vol. 23, № 4. - P. 720-725.

116. Ghosh P. Plasma sialic-acid index of apolipoprotein J (SIJ): a new alcohol intake marker / P. Ghosh, E.A. Hale, M.R. Lakshman // Alcohol. 2001. - Vol. 25, № 3. - P. 173-179.

117. Golka K. Carbohydrate-deficient transferrin (CDT)--a biomarker for long-term alcohol consumption / K. Golka, A. Wiese // J. Toxicol. Environ. Health В Crit. Rev. 2004. - Vol. 7, № 4. - P. 319-337.

118. Gong M. Liver Galbetal,4GlcNAc alpha2,6-sialyltransferase is down-regulated in human alcoholics: possible cause for the appearance of asialoconjugates / M. Gong et al. // Metabolism. 2007. - Vol. 56, № 9. - P. 1241-1247.

119. Gordon G. G. Alcohol, hormones and metabolism / G. G. Gordon, C. S. Lieber // Medical and Nutritional Complications of Alcoholism: Plenum Publishing Corp. New York, 1992. - P. 55 - 90.

120. Guasch R. Chronic ethanol consumption induces accumulation of proteins in the liver Golgi apparatus and decreases galactosyltransferase activity / Guasch R., Renau- Piqueras J., Guerri C. //Alcohol Clin. Exp. Res. 1992. - Vol. 16, № 5. -P. 942 -948.

121. Hadad S .J. Proteoglycans and glycosaminoglycans synthesized in vitro by mesangial cells from normal and diabetic rats / S J. Hadad, Y.M. Michelacci, N. Schor // Biochim. Biophys. Acta. 1996. - Vol. 1290, № 1. - P. 18-28.

122. Hanover J. A. Transmembrane assembly of membrane and secretory glycoproteins / J. A. Hanover, W. J. Lennarz // Arch. Biochem. And Bio-phys. -1981.-V211, № l.-P. 1 -19.

123. Han J. Y. Ethanol induced cell death by activating caspase-3 in the rat cerebral cortex / J. Y. Han et al. // Mol. Cells. -2005.- T. 20, № 2. P. 189-195.

124. Henningsen C. High glucose induces type 1 hexokinase gene expression in isolated glomeruli of diabetic rats and in mesangial cells / C. Henningsen, G. Zahner, F. Thaiss // Nephron Physiol. 2003. - Vol. 93, № 3. - P. 67-75.

125. High glucose-altered gene expression in mesangial cells. Actin-regulatory protein gene expression is triggered by oxidative stress and cytoskeletal disassembly / M.R. Clarkson et al. // J. Biol. Chem. 2002. - Vol. 277, № 12. -P. 9707-9712.

126. Hodge A. M. Alcohol intake, consumption pattern and beverage type, and the risk of Type 2 diabetes / A. M. Hodge, D. R. English, K. O'Dea, G. G. Giles // Diabet Med. 2006. - T. 23, №6. - P. 690-697.

127. Hoek J.B. Cellular signaling mechanisms in alcohol-induced liver damage / J.B. Hoek; J.G. Pastorino // Semin Liver Dis. 2004. - Vol.24, № 3. - P. 257-272.

128. Increased nonenzymatically glycosylated proteins in the vitreous humor of diabetic animals / A.K. Farr et al. // Lab. Anim. Sci. 1999. - Vol. 49, № 1. - P. 58-61.

129. Homann N. Alcohol dehydrogenase 1C*1 allele is a genetic marker for alcohol-associated cancer in heavy drinkers / N. Homann, F. Stickel, I. R. Konig, A. Jacobs, K. Junghanns, M. Benesova, D. Schuppan, S. Himsel, I. Zuber-Jerger,

130. С. Hellerbrand, D. Ludwig, W. H. Caselmann, H. K. Seitz // Int J Cancer. -2006. -T.l 18, №8. P.1998-2002.

131. Jarvelainen H.A. Activation of complement components and reduced regulator expression in alcohol-induced liver injury in the rat / H. A. Jarvelainen, A.Vakeva, К. O. Lindros, S. Meri // Clin Immunol. 2002. - T.l05, №1. - P.57-63.

132. Kim Y. D. Ethanol-induced oxidative DNA damage and CYP2E1 expression in liver tissue of Aldh2 knockout mice / Y. D. Kim et al. // J Occup Health. -2007. T. 49, № 5. - P. 363 - 369.

133. Klemm W.R. Membrane glycoconjugates as potential mediators of alcohol effects / W.R. Klemm // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 1987. -Vol. 11, №6.-P. 633-658.

134. Koda M. Free and small peptide-bound 14C.hydroxyproline synthesis in rat liver in vitro in CC14-induced hepatic fibrosis / M. Koda, Y. Murawaki, C. Hirayama // Biochem. Biophys Res. Commun. 1988. - Vol. 151, № 3. - P. 11281135.

135. Koolman J. Taschenatlas der Biochemie / J. Koolman, К. H. Rohm // New York, Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1998, 469 p.

136. Lakshman M.R. Alcohol and molecular regulation of protein glycosylation and function / M.R. Lakshman, M.N. Rao, P. Marmillot // Alcohol. 1999. - Vol. 19, №3.-P. 239-247.

137. Lekomtcev I. V. Metabolism of sialoglycoproteins of the stomach of rat with experimental diabetes /1. V. Lekomtsev, S. V. Longvinenko, E. G. Butolin // Patol. Fiziol. Eksp. Ter. 2002. - Vol. 4. - P. 16-17.

138. Lieber CS. Alcoholic fatty liver: its pathogenesis and mechanism of progression to inflammation and fibrosis /CS. Lieber // Alcohol. 2004. -Vol.34, №1.-P. 9-19.

139. Lieber CS. Pathogenesis and treatment of alcoholic liver disease: progress over the last 50 years / CS. Lieber // Rocz Akad Med Bialymst. 2005. - Vol. 50. -P. 7-20.

140. LuoY. Two Distinct Pathways for O-Fucosylation of Epidermal' Growth Factor-like or Thrombospondin Type 1 Repeats / Y. Luo, A. Nita-Lazar, and R. S. Haltiwanger // J. Biol. Chem.-2006.-Vol. 281, № 14.-P. 9385 9392. ,

141. Marinari U. M. Acetaldehyde-induced impairment of protein glycosylation in liver Golgi apparatus / U.M. Marinari et al. // Biochem. Mol. Biol. Int. 1993. -Vol. 29, №6.-P. 1131-1138.

142. McMullen M. R. Chronic ethanol exposure increases the binding of HuR to the TNFalpha З'-untranslated region in macrophages / M. R. McMullen, E. Cocuzzi, M. Hatzoglou, L. E. Nagy // J Biol Chem. 2003. - T.278, №40. - P. 38333-38341.

143. Methuen T. Disialotransferrin, determined by capillary electrophoresis, is an accurate biomarker for alcoholic cause of acute pancreatitis / T. Methuen, L.

144. Kylanpaa, О. Kekalainen, Т. Halonen, E. Tukiainen, S. Sarna, E. Kemppainen, R. Haapiainen, P. Puolakkainen, M. P. Salaspuro // Pancreas. 2007. - T. 34, №4. - P. 405-409.

145. Michalowska-Wender G. Impact of cytokines on the pathomechanism of diabetic and alcoholic neuropathies / G. Michalowska-Wender, G. Adamcewicz, M. Wender // Folia Neuropathol. 2007. - T.45, №2. P. 78-81.

146. Nagai T. Characterization of mouse liver sialidase and partial purification of the lysosomal sialidase / T. Nagai, H. Yamada // Chem. and Pharm.Bull. 1988. -V. 36, № 10.-P. 4008-4018.

147. Nagy L. E. Molecular aspects of alcohol metabolism: transcription factors involved in early ethanol — induced liver injury / L. E. Nagy // Annu Rev Nutr. -2004.-Vol. 24.-P. 55 -78.

148. Nowoslawski L. Molecular regulation of acute ethanol-induced neuron apoptosis // L. Nowoslawski, B. J. Klocke, K. A. Roth // J Neuropathol Exp Neurol. 2005. - T. 64, № 6. - P. 490-497.

149. Ohtsuka Т. Use of serum carbohydrate-deficient transferrin values to exclude alcoholic hepatitis from non-alcoholic steatohepatitis: a pilot study / T. Ohtsuka et al. // Alcohol Clin. Exp. Res. 2005. - Vol. 29, № 12. - P. 236-239.

150. Pawlicka E. Chronic intoxication with acetaldehyde stimulates collagen biosynthesis in rat liver / E. Pawlicka, E. Bankowski, K. Sobolewski / Arch. Toxicol. 1991. - Vol. 65, № 8. - P. 678-680.

151. Perides G. A mouse model of ethanol dependent pancreatic fibrosis / G. Perides, X.Tao, N. West, F. Sharma, M. L. Steer // Gut. 2005. -T. 54, №10. -P.1461- 1467.

152. Picardi A. Raised C-reactive protein levels in patients with recent onset type 1 diabetes / A. Picardi,et al.// Diabetes Metab Res Rev. 2007. - T.23, №3. -P.211-214.

153. Poplawska-Kita A. Glycosaminoglycans urinary excretion as a marker of the early stages of diabetic nephropathy and the disease progression / A. Poplawska-Kita et al. // Diabetes Metab Res Rev. 2008. - T.24, №4. - P.310-317.

154. Pritchard M. T. Ethanol-induced liver injury: potential roles for egr-1 / M. T. Pritchard, L. E. Nagy // Alcohol Clin Exp Res. 2005. - №11. - P. 146-150.

155. Protein tyrosine nitration in the mitochondria from diabetic mouse heart. Implications to dysfunctional mitochondria in diabetes / I.V. Turko et al. // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278, № 36. - P. 33972-33977.

156. Purohit V. Mechanisms of alcohol-induced hepatic fibrosis: a summary of the Ron Thurman Symposium / V. Purohit, D. A. Brener // Hepatology. 2006. -T.43, № 4. - P. 872-878.

157. Radek K.A. Matrix proteolytic activity during wound healing: modulation by acute ethanol exposure / K. A. Radek, E. J. Kovacs, L. A. DiPietro // Alcohol Clin Exp Res. 2007. -T. 31, №6. - P. 1045-1052.

158. Receptor for advanced glycation end products is involved in impaired angiogenic response in diabetes / T. Shoji et al. // Diabetes. 2006. - Vol. 55, № 8.-P. 2245-2255.

159. Reigle K. L. Non — enzymatic glycation of type I collagen diminishes collagen-proteoglycan binding and weakens cell adhesion / K. L. Reigle et. al. // J Cell Biochem. 2008. - T. 104, № 5. - P. 1684-1698.

160. Ricketts L. M. O-Fucosylation Is Required for ADAMTS13 Secretion / L. M. Ricketts, M. Dlugosz, К. B. Luther, R. S. Haitiwanger, and E. M. Majerus // J. Biol. Chem. -2007. Vol.282, № 23. - P.17014 - 17023.

161. Rider С. C. Sulphated glycoconjugates in the immune system / С. C. Rider. Biochem. Soc. Trans. - 1992. -Vol. 20, №2 . - P. 291 - 295.

162. Sandoval D. A. Forebrain and hindbrain effects of ethanol on counterregulatory responses to hypoglycemia in conscious rats / D. A. Sandoval, B. Gong, S. N. Davis //Metabolism. 2007. - Vol. 56, №12. - P. 1623-1628.

163. Sastre J. Mitochondrial function in liver disease / J. Sastre, G. Serviddio, J. Pereda, JB Minana, A. Arduini, G. Vendemiale, G. Poli, FV. Pallardo, J>. Vina // Front Biosci. 2007. -Vol.1, №12. - P. 1200-1209.

164. Savolainen V. Early perivenular fibrogenesis-precirrhotic lesions among moderate alcohol consumers and chronic alcoholics / V. Savolainen, M. Perola, K. Lalu, A. Penttila, I. Virtanen and P. J. Karhunen // J Hepatol. -1995. Vol. 23. - P. 524-531.

165. Schmitt G. Ethyl glucuronid concentration in serum of human volunteers, teetotalers, and suspected drinking drivers / G. Schmitt // J. Forensic. Sci Int. -1997. Vol.42, №6. - P.1099 - 1102.

166. Siegmund S. V. Molecular mechanism of alcohol induced hepatic fibrosis / S. V. Siegmund, S. Dooley, D. A. Brenner // Dig. Dis. - 2005. - Vol. 23, № 3-4. - P. 264 -274.

167. Solini A. High glucose and homocystein synergistically affect the metalloproteinase-tissue inhibitors of metalloproteinases pattern, but not TGFB expression, in human fibroblasts / A. Solini et al. // Diabetologia. 2006. - T. 49, № 10.- P. 2499-2506.

168. Spitcyn V. A. Genetic predisposition of toxic cirrhosis cause by alcohol / V. A. Spytsyn et al. // Genetika. 2001. - Vol. 37, № 5. - P. 698 - 707.

169. Stibler H. Glycoprotein glycosyltransferase activities in serum in alcohol-abusing patients and healthy controls / H. Stibler, S. Borg // Scand J Clin Lab Invest. -1991. Vol.51, №1. - P. 43-51.

170. Stricklin G. P. Biochemistry a physiology of mammalian collagenase / G. P. Stricklin, M. S. Hibbs // Collagen. Ed. M. E. Nimni. Florida: CRC Press, 1988. -Vol. l.-P. 188-205.

171. Suzuki M. Induction of transferrin receptor by ethanol in rat primary hepatocyte culture / M. Suzuki et al. // Alcohol Clin. Exp. Res. 2004. - Vol. 28, №8-P. 98-105.

172. Szabo G. Effect of ethanol on inflammatory responses. Implications for pancreatitis / G. Szabo, P. Mandrekar, S. Oak, J. Mayerle // Pancreatology. 2007. -T. 7, №2-3. — P.l 15-123.

173. Thakur V. Regulation of macrophage activation in alcoholic liver disease / V. Thakur, M. R. McMullen, M. T. Pritchard, L. E. Nagy // J Gastroenterol Hepatol. -2007.-№ 1. —P.53-56.

174. Thiele D. L. Tumor necrosis factor, the acute phase response and the patogenesis of alcohol liver disease / D. L. Thiele // Hepatology. 1989. - Vol. 9. - P. 497 - 499.

175. Trelstaad R. L. The fibroblast in morphogenesis and fibrosis: cell topography and surface related functions / R. L. Trelstaad, D. E. Birk. -London: Pitman, 1985.- 144 p.

176. Varga A. Normalization rate and cellular localization of phosphatidylethanol in whole blood from chronic alcoholics / A. Varga, P. Hansson, G. Johnson and C. Ailing // Clinica Chimica Act. 2000. - Vol. 299. - P. 141-150.

177. Wan Q. Ethanol feeding impairs insulin-stimulated glucose uptake in isolated rat skeletal muscle: role of Gs alpha and cAMP / Q. Wan, Y. Liu, Q. Guan, L. Gao,

178. К. О. Lee, J. Zhao // J. Alcohol Clin Exp Res. 2005. - T. 29, №8. - P. 14501456.

179. Wang J. H. Role of ethanol in the regulation of hepatic stellate cell function / J. H. Wang, R. G. Batley, J. George // World J Gastroenterol. 2006. - T. 12, № 43.-P. 6926-6932.

180. Yan S. Expression pattern of matrix metalloproteinases-13 in a rat model of alcoholic liver fibrosis / S.Yan, G. M. Chen, С. H. Yu, G. F. Zhu, Y. M. Li, S. S. Zheng // Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 2005. - T. 4, №4. - P. 569 - 572.

181. Yenice O. Erythrocyte membrane anionic content and urinary glycosaminoglycan excretion in type 1 diabetes: association with retinopathy // O. Yenice et al. // Curr Eye Res. 2006. - Т. 31, № 11. - P. 975-981.

182. Zima T. Oxidative stress and signal transduction pathways in alcoholic liver disease / T. Zima, M. Kalousova // Alcohol Clin Exp Res. 2005. - Vol.29, №11.-P. 110-115.

183. Zinchuk V. Ethanol consumption alters expression and colocalization of bile salt export pump and multidrug resistance protein 2 in the rat / V. Zinchuk, O. Zinchuk, K. Akimaru, F. Moriya, T. Okada // Histochem Cell Biol. 2007. - №5. -P. 503-512.

184. Zhou Z. A Critical Involvement of Oxidative Stress in Acute Alcohol -Induced Hepatic TNF-a Prodaction / Z. Zhou et. al. // American Journal of Pathology. 2003. - №163.- P. 1137-1146.

185. Zhu G.F. Gene expression of interstitial collagenase MMP-13 in progressive phase of rat liver fi brosis induced by ethanol /G. F. Zhu, C.H.Yu, Y. Zhang, Y. M. Li //Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2003. - T.l 1, №11. - P. 660-662.

186. Zhu Y.K. Dynamic evolution of MMP-13, TIMP-1, type I and III collagen and their interaction in experimental liver fibrosis / Y. K. Zhu, В. E. Wang, F. J.

187. Shen, A. M. Wang, J. D. Jia, H. HYPERLINK

188. Ъttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db^ubmed&Cmd=Search&Teгm=%22 Ma%20H%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.PubmedR esultsPanel.Pubmed RVAbstractPlus" DMaD // Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi.-2004.-T. 12, № 10.-P. 612-615.

Информация о работе

Булгакова, Валерия Сеогеевна
кандидата медицинских наук
Челябинск, 2008
ВАК 03.00.04

Диссертация

Углевод-белковые комплексы при алкогольной интоксикации на фоне экспериментальной гипергликемии - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы