Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Цитологический скрининг рака шейки матки

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Цитологический скрининг рака шейки матки"

На правах рукописи

003057Т80

Родионова Ольга Михайловна ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ СКРИНИНГ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

003057780

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию и Тихоокеанском институте биоорганической химии

ДВО РАН

Научный руководитель

Научный консультант

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Апанасевич Владимир Иосифович

кандидат химических наук, Булгаков Александр Александрович

доктор биологических наук, Вараксин Анатолий Алексеевич; кандидат медицинских наук, Фисенко Александр Иванович

Ведущая организация

Российская медицинская академия последипломного образования

Защита состоится " ¿5" 2007г. в -/¿^часов на заседании

диссертационного совета Д 208. 007. 01 при ГОУ ВПО Владивостокском государственном медицинском университете Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию по адресу: 690990, г. Владивосток, пр-т Острякова, 2.

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке Владивостокского государственного медицинского университета (г. Владивосток, пр-т Острякова, 2).

Автореферат разослан "

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

Рева Г. В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Рак шейки матки (РШМ) относится к наиболее распространенным и социально значимым онкологическим заболеваниям. Ежегодно в мире диагностируется от 450 до 500 тысяч новых случаев РШМ, и ежегодно умирают от него около 231 ООО женщин (Parkin D.M. et al., 2001, 2005). В России в структуре заболеваемости среди злокачественных новообразований у женщин РШМ занимает четвертое место, а в структуре смертности находится на 6-м месте (Петрова Г.В., 2003; Давыдов М.И., Аксель Е.М., 2004; Хасанов Р.Ш., 2006).

К большому сожалению, доля больных РШМ, выявленных на ранних стадиях, остается относительно небольшой. Внедрение скрининговых программ в США позволяет выявить в преинвазивной стадии более 2/3 новообразований шейки матки и 70% - 80% больных в I - II стадиях заболевания (Петрова Г.В., 2003; Чиссов В.И. и др., 2005). В России в среднем только у 10% больных, взятых на учет по поводу рака шейки матки, выявляются ранние (0 - I а) стадии, у 58,7% пациенток - в I - II стадиях заболевания. Инвазивные и распространенные стадии РШМ выявляются у больных в широком диапазоне значений от 24,7% до 90,2% (Кравец Б.Б. и др., 2001; Черенков В.Г. и др., 2001; Невожай В.И., Юдин C.B., 2002; Петрова Г.В., 2003; Чиссов В.И. и др., 2005; Хасанов Р.Ш., 2006).

Лабораторные методы исследования позволяют выявить только морфологические изменения эпителия шейки матки и цервикального канала (Шиллер-Волкова H.H. и др., 1964; Абрамов М.Г., 1974; Петрова A.C., Птохов М.П., 1976; Cardozo P.L., 1976; Базарнова М.Л., 1988; Andereon MJ8., 1997; Хмельницкий O.K., 2000; Шабанова И.П., 2001; Шабанова И.П., Касоян К.Т., 2006). Стандартом раннего (доклинического) выявления РШМ является цитологический метод. Цитологический скрининг привел к снижению уровня заболеваемости и смертности от РШМ в каждой стране, где была внедрена соответствующая программа. Однако чувствительность цитологического метода остается недостаточно высокой и составляет от 5% до 83,3% (Koss

L.G., 1989; Davidson J., Marty J., 1994; Подистов Ю.И., 2005; Doh A.S. et al., 2005;Vuysta H. De. et al., 2005). В последние годы в некоторых странах отмечается повышение уровня заболеваемости и смертности (Аксель Е.М., Давыдов М.И., 2002; Чиссов В.Й. и др., 2005). С внедрением новых цитологических и биохимических методов исследования (определение плойдности ядер, вирусные и тканевые биомаркеры; белки: bel, Е - 6, Е — 7 и др.) появились новые диагностические возможности выявления РШМ на доклиническом этапе (Wisman G. Bea A. et al., 2001; Wolf J. К. et al., 2003; Автандилов Г.Г. и др., 2004; Goel М.М. et al., 2005; Карселадзе А.И., 2006; Манухин И.Б., Минкина Г.Н., 2006; Подистов Ю.И. и др., 2006).

Развитие доклинической диагностики РШМ во второй половине 20 века пошло по пути определения в сыворотке крови опухолевых маркеров (ОМ). Для диагностики РШМ наиболее значимыми были признаны антиген плоскоклеточной карциномы (SCC), специфический тканевой полипептид (TPS) и раково-эмбриональный антиген (РЭА). Однако большинство из предложенных маркеров обладают недостаточно высокой чувствительностью и специфичностью. При этом только SCC применяется для мониторинга течения плоскоклеточного РШМ, прогноза и эффективности проводимого лечения (Pras Е. et al., 2002; Сергеева Н.С. и др., 2004).

На этом фоне весьма перспективным является разработка новых подходов, позволяющих определять ранние биохимические нарушения, коррелирующие с неопластической трансформацией. Перспективным в этом направлении является исследование уровня РЭА/РЭА подобных антигенов в вагинальном секрете (Булгаков А.А. и др., 2005). Поиск новых систем диагностики с использованием компонентов, специфически связывающихся с РЭА/РЭА-подобными структурами, является актуальным и необходимым.

Ранее из целомическэй жидкости голотурии Apostichopus japanicm (дальневосточного трепанга) учеными Тихоокеанского института биоорганической химии был выделен и охарактеризован лектин, получивший название маннан-связывающего лекпша трепанга (МСЛ-Т). В современном

представлении лектины - это обширная группа белков, обладающих общим свойством обратимо и избирательно связывать углеводные детерминанты гликоконьюгатов. Эта принципиальная особенность лектинов нашла практическое применение при диагностике ряда злокачественных новообразований, сопровождающимися изменениями углеводного состава гликоконьюгатов (йаЫш Н., 2002; Капра-Маккег Р. е1 а1., 2002). Было показано, что МСЛ-Т специфически взаимодействует с углеводными цепями РЭА. Это свойство МСЛ-Т, а также содержание РЭА/РЭА-подобных антигенов в вагинальных секретах (ВС), послужило предпосылкой для проведения сравнительного изучения вагинальных секретов у здоровых женщин, у женщин с доброкачественными процессами и РШМ.

Цель исследования: Усовершенствовать методы диагностики рака шейки матки.

Задачи исследования:

1. Оценить информативность цитологического материала, полученного при скрининге рака шейки матки с применением традиционного набора инструментов и комбинации цервикальной щетки СуШЬгшЪ и деревянного шпателя Эйра.

2. Оптимизировать метод получения качественного материала для цитологического исследования при атрофической слизистой шейки матки.

3. Оценить риск развития РШМ в группе женщин при наличии положительного цитологического заключения о злокачественном поражении шейки матки при отрицательном результате гистологического исследования.

4. Разработать новый лектин-иммуноферментный метод определения РЭА, РЭА-подобных антигенов в вагинальных секретах у здоровых женщин, с доброкачественными процессами и у женщин с раком шейки матки. Оценить перспективы применения метода в диагностике РШМ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Использование комбинации цервикальной щетки СуЬ>ЬтзЬ и деревянного шпателя Эйра улучшает качество цитологических исследований при скрининге рака шейки матки.

2. При наличии ложной цитологической гипердиагностики РШМ и гистологической гиподиагностики пациенты нуждаются в динамическом наблюдении для своевременного выявления раннего рака шейки матки.

3. Возможна дополнительная диагностика рака шейки матки при использовании лектин-иммуноферментного метода определения РЗА/РЭА-подобных антигенов в вагинальных секретах.

Научная новизна исследования. Показана возможность повышения эффективности доклинической диагностики рака шейки матки при цитологическом скрининге.

Снижение уровня концентрации лектин-связанных РЭА/РЭА-подобных антигенов (ЛСД), выявляемое разработанным нами лектин-иммуноферментным методом в вагинальном секрете, показало значительную корреляцию со злокачественными заболеваниями шейки матки.

Практическая значимость работы. Выявлена достоверная закономерная зависимость ложноотрицательных цитологических результатов от качества цитологических препаратов.

Разработан лектин-иммуноферментный метод диагностики РШМ по вагинальному секрету. Установлена диагностическая ценность метода с определением чувствительности и специфичности.

Внедрение результатов в практику. Полученные данные используются в работе цитологических лабораторий, женских консультаций и смотровых кабинетов г. Владивостока, Приморского края. Они внедрены в учебный процесс института повышения квалификации врачей ВГМУ (для врачей клинической лабораторной диагностики, клинических интернов), студентов 4-6 курсов лечебного, педиатрического и медико-профилактического факультетов.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены и обсуждены на краевой научно-практической конференции врачей гинекологов-эндокринологов (Владивосток, 2004; 2005); 6-ой Тихоокеанской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины» (Владивосток, 2005); краевом научно-практическом семинаре «Междисциплинарный подход к диагностике и лечению пролиферативных процессов репродуктивной системы» (Владивосток, 2006) и на краевой научно-практической конференции врачей онкологов (Владивосток, 2006).

Публикации. Основные положения диссертационной работы нашли свое отражение в 17 печатных работах.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, глав: «Характеристика материалов и методов исследования», «Эффективность цитологического скрининга рака шейки матки», «Организационные аспекта скрининга рака шейки матки», «Перспективы использования маннан-связывающего лектина дальневосточной голотурии {АровНсИорш ]аропгсш) в диагностике рака шейки матки», обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка цитируемой литературы, который состоит из 84 отечественных и 149 зарубежных источников. Диссертация изложена на 139 страницах, содержит 11 таблиц и 21 рисунок.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. В настоящей работе были проанализированы 698866 цитологических заключений материала, полученного при скрининге рака шейки матки у женщин г. Владивостока с 1 января 1992 г. по 31 декабря 2003 г.

Был разработан и применен метод лектин-иммуноферментной диагностики РШМ у 90 пациенток.

Цитологические методы

Материал для цитологического исследования получали в соответствии с Приказом №270 МЗ РФ от 12 .09.97 «О мерах по улучшению организации онкологической помощи населению Российской Федерации». Мазки брали как по общепринятой методике, так и но предложенному нами методу. Материал получали со всей поверхности влагалищной части шейки матки с захватом зоны трансформации путем соскоба обратной стороной деревянного шпателя Эйра. Такое применение шпателя продиктовано тем, что не существует шпателя, который по форме идеально подходил для любой шейки матки. После этого получали материал из цервикального канала при помощи щетки Cytobrush (Medscand Plus, Швеция) (производили четыре вращения вокруг оси на 360 0 — два раза по часовой стрелке, два раза против часовой стрелки и два поступательных движения по оси цервикального канала). Обработку цитологических микропрепаратов проводили по общепринятым методикам (Петрова A.C.,1985; Шабалова И.П., 2001). Цитологический диагноз устанавливался в соответствии с классификацией, принятой в России (сходная с ней классификация TBS, 2001) (Шабалова И.П., 2001; Solomon D. et al., 2004).

Лектин-иммуноферментный метод

Принцип: Маннан-связывающий лекган трепанга специфически связывается с углеводными структурами раково-эмбрионального антигена, адсорбированного на лунках полистирольного микропланшета Maxisorb (Costar, USA). Это гетерогенный, твердофазный метод анализа, основанный на выявлении двух типов антигенных детерминант белковой и углеводной природы.

Приборы и реактивы: Сканирующий спектрофотометр Multiscan II (Финляндия), гоейкер Heidolph duomax 1030, миксер, микроцентрифуга. Посадочный буфер 0,1M NaHC03 pH9.5; буферТВБ-Т; 0,25% BSA в TBS-T; раствор лектина трепанга; буфер TBS-T - Са2+; маннан-связывающий лекган

трепанга, меченный пероксидазой хрена; субстрат ОФДА; стоп реагент (5% H2S04).

Материал для исследования: объектом исследования был вагинальный секрет здоровых женщин, а также пациенток с доброкачественными и злокачественными поражениями в возрасте от 40 до 60 лет1. Диагноз рака шейки матки был установлен клинически и верифицирован гистологическим методом. Образцы были собраны в различные стадии ежемесячного цикла, кроме менструации. Вагинальный секрет получали с помощью пастеровской полиэтиленовой стерильной градуированной пипетки <1-1.4мм и V=1.5 мл. Брали свободно лежащий секрет ближе к поверхности шейки матки. Полученный секрет помещали в пробирки Eppendorf V=l.5 мл. Пробирки заранее взвешивались на аналитических весах. Исследуемые образцы ВС были стандартизованы по весовой концентрации и хранились при температуре - 42°С.

Ход определения: Лектин-иммуноферментный метод включает следующие основные стадии:

1. Адсорбцию поликлональных антител против РЭА в лунках полистирольного микропланшета (Ат-РЭА).

2. Стадию блокировки свободных центров связывания BSA.

3. Инкубацию адсорбированных антител Ат-РЭА с антигенами (Аг):

3.1. С раствором РЭА, используемого в качестве положительного контроля и для построения калибровочной кривой.

3.2. С экстрактами вагинальных секретов.

4. Инкубацию МСЛ-Т с ранее полученными комплексами Ат-РЭА-Аг.

5. Иммунодетекцию комплексов АтРЭА-Аг-МС Л-Т антителами против МСЛ-Т меченных пероксидазой хрена.

6. Цветную визуализацию конечного комплекса субстратом.

Уровень лектин-связанных РЭА/РЭА-подобных антигенов в экстрактах ВС выражался в условных единицах (U/ml) по калибровочной кривой, рассчитанной для растворов РЭА с известными концентрациями. Количество

определяемого маннан-связывающего лектина вторичными антителами пропорционально количеству углеводных изоформ раково-эмбрионального антигена.

Взаимодействие лектина трепанга с комплексом РЭА/РЭА-подобных антигенов с первичными антителами было специфично, так как было показано, что лектин не взаимодействует с нормальными иммуноглобулинами, с бычьим сывороточным альбумином и пероксидазой хрена.

Статистическая обработка полученных цифровых данных проводилась методом вариационной статистики. Различия между исследуемыми группами, рассчитанные по t-критерию Стьюдента-Фишера, признавались достоверными при р<0,01, р<0,05 или р<0,001. Полученные результаты обрабатывались с помощью программ STATJSTICA 6.0 и Mathcad 2001.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ

В ЦДЛ г. Владивостока проводились сравнительные исследования по оценке информативности материала, полученного различными инструментами в двух группах женщин. Было обследовано 1000 женщин в возрасте от 18 до 70 лет. В первой группе средний возраст составил 39,7±2,8 года, во второй группе 39,5±3,2 года. Все женщины ежегодно подвергались цитологическому скринингу с использованием традиционных инструментов. В первой группе (п=500) материал на цитологическое исследование получали с помощью комбинированного применения щетки Cytobrush (Medscand Plus, Швеция) и деревянного шпателя Эйра по нашей методике. Во второй группе (п=500) применялись традиционные инструменты (ложка Фолькмана, желобоватый зонд, металлический или пластмассовый шпатель Эйра и др.).

Полученные препараты оценивались с позиции информативности материала (табл. 1), а также учитывались изменения эпителия (табл. 2). Контролем качества цитологических исследований являлись гистологические заключения.

Характеристика информативности материала, полученного различными

инструментами

Метод получения материала

Су№ЬгшЬ и деревянный шпатель Эйра Традиционные инструменты

Количество пациентов 500 500

Материал адекватный 499 (99,8±0,2%) 162 (33,5±2Л%)

недостаточно адекватный 1 (0,2%) 321 (63%)

неадектный 0 17(3,5%)

Из таблицы 1 следует, что материал, полученный в результате комбинированного применения щетки СуйэЬпюЬ и деревянного шпателя Эйра, был расценен как информативный в 99,8±0,2% случаев. Напротив, материал, полученный с помощью традиционных инструментов, не отвечал установленным требованиям, и его информативность составила 33,5±2,1%. Между группами определены статистически достоверные различия (р<0,001).

В соответствии с таблицей 2, при анализе цитологических заключений в I группе женщин была установлена более высокая частота выявления атипических изменений эпителия шейки матки (40,8%), в том числе плоскоклеточного рака (0,2%). Совпадение с гистологическим заключением в этой группе составило 100%. Соответственно, во И группе отмечалась низкая частота обнаружения клеточных изменений (7,4%). Комбинированное применение щетки Суи>ЬгшЬ и деревянного шпателя Эйра обеспечивает комплексное получение материала из исследуемых зон и может способствовать более частому выявлению атипических изменений эпителия шейки матки.

Характеристика цитограмм в зависимости от характера применения различных инструментов

Группы женщин

I II

Методы получения материала Су1оЬгазЬ и деревянный шпатель Эйра Традиционные инструменты

Количество пациентов 500 500

Цитограмма без особенностей 295 125

Воспаление 84 18

Фоновые процессы (эрозия,

псевдоэрозия, лейкоплакия с 78 12

атипией)

£ о Легкая 24 3

Умеренная 13 . 3 .

а Тяжелая 4 1

Рак 1 0

Одной из причин ложноотрицательного цитологического результата у женщин периода менопаузы и постменопаузы при атрофической слизистой является скудный клеточный состав или отсутствие клеток в препарате. С целью определения диагностической ценности цитологических микропрепаратов у женщин этого периода при атрофической слизистой, провели исследование по оценке информативности материала, полученного различными инструментами. Было обследовано 954 женщины в возрасте от 45 до 70 лет, которые были распределены по двум группам. В первой группе (п=474) материал получали из шейки матки и цервикального канала с помощью деревянного шпателя Эйра. Средний возраст женщин в этой группе

составил 64,0±5,7лет. Во второй группе (п=480) материал получали со всей поверхности влагалищной части шейки и из церв икал ьного канала по оригинальной методике. Перед получением материала деревянный шпатель Эйра предварительно увлажняли в физиологическом растворе, чтобы препятствовать клеткам фиксироваться на сухом шпателе. Средний возраст женщин в этой группе составил 65±4,2 лет (рисЛ).

5

80,00% 70,00% 60,00% 50,00% 40,00% 30,00% 20,00% ■ 10.00% 0,00%

Шпатель Эйра

Шпатель Эйра, увлажненный физ. раствором

Рис. 1. Сравнительная характеристика информативности материала в зависимости от характера используемых инструментов при атрофической слизистой шейки матки.

Согласно данным рисунка 1 в первой группе информативность материала составила в 36,5±2,2%, во второй группе — 74,5±1,9%. Предварительное увлажнение шпателя Эйра в физиологическом растворе способствовало лучшему получению и переносу клеток на предметное стекло, что значительно повышает информативность цитологических микропрепаратов, достоверность (р0,001).

Таким образом, применение комбинации цервикальной щетки СугоЬпкЬ и деревянного шпателя Эйра по нашей методике оказалось действительно эффективным, что подтверждено выявлением рака шейки матки. Современные коммерческие одноразовые наборы для проведения

профилактических осмотров не предусматривают включение щетки «Cytobrush». Поэтому, учитывая вполне приемлемую стоимость щетки «Cytobrush», были даны рекомендации ДЗАПК аптечной сети включить щетки «Cytobrush» в состав одноразовых наборов. На основании рекомендаций был издан приказ ДЗАПК № 43 - 876 от 28.07.03.Согласно этому приказу необходимо: обеспечить 100% скрининг рака шейки матки в смотровых кабинетах, обеспечить доступ приобретения по желанию женщин одноразовых инструментов «Cytobrush», активизировать санитарно -просветительную работу среди женщин. Предварительное увлажнение деревянного шпателя Эйра в физиологическом растворе перед получением материала при атрофической слизистой шейки матки повышает информативность цитологических препаратов до 74,5±1,9%.

За 12 летний период деятельности лаборатории выделена группа из 20 женщин (0,003% от числа обследованных цитологическим методом) с ложноположительным цитологическим диагнозом рака шейки матки. В разные периоды (от 1,5 до 7,5 лет) у этих женщин установлен диагноз РШМ, преимущественно запущенных форм. Большинство из этих женщин клинически были здоровы. Средний возраст женщин составил 63,5±4,1 года. Проведенный анализ работы ЦЦЛ выявил 7,9% ошибочно-отрицательных цитологических результатов и 15,8% ошибочно положительных результатов, которые перешли в ошибочно-отрицательные гистологические результаты.

Существующие до сих пор цитологические критерии не позволяют с оптимальной точностью диагностировать на цитологическом уровне CIS. с одной стороны от CIN Ш, с другой - от инвазивного рака. Для уточнения диагноза по существующим протоколам рекомендуется проведение кольпоскопии, прицельной биопсии и выскабливания цервикального канала. Если результаты этих исследований остаются отрицательными, но имеется цитологическое заключение о наличии РШМ, следует изменить тактику ведения пациенток в индивидуальном порядке. Необходима контрольная визуализация как цитологических, так и гистологических препаратов 2-3

исследователями одновременно. По результатам совместного исследования выдавать экспертное заключение, которое будет иметь решающее значение в постановке окончательного диагноза. Пациентки должны находиться под особым наблюдением. Цитологические исследования проводить через 4-8 недель, 3, 6 и 12 месяцев. Преимущества и ограничения каждого из методов диагностики позволяет обеспечить индивидуальный подход к выбору оптимального решения в зависимости от патологического процесса и анатомо-функционального состояния пациентки. Наиболее удачным решением классификации TBS является объединение CIN II ,СШ III и CIS в одну группу « Поражение клеток плоского многослойного эпителия тяжелой степени». Такая трактовка цитологического заключения должна стать руководством для клинициста, которому будет необходимо получить полноценный материал для гистологического исследования.

В последнее время успешно развиваются методы, основанные на использовании лектинов, которые получили название ELLA (enzyme-linked lectin assay). Лекшн-иммуноферментный метод анализа позволяет проводить исследования углеводного профиля гликопротеинов, как плазмы крови, так и других биологических жидкостей человека В связи с этим, весьма перспективным является разработка новых подходов, позволяющих определять ранние биохимические изменения состава вагинальных секретов, коррелирующих с неопластической трансформацией. К их числу относится разработка методов диагностики патологии шейки матки на основе изучения углеводного состава вагинального секрета.

Известно, что вагинальный секрет является продуктом биосинтеза эпителиальных клеток, имеющего строго определенные параметры pH, микроэлементного, белкового, углеводного, липидного и других составов. Немногочисленные работы и наши собственные данные свидетельствуют о том, что влагалищное содержимое состоит из жидкостного и клеточного компонентов, слизи, продуцируемой цервикальными железами, транссудата, десквамированного эпителия влагалища и матки, лейкоцитов и

микроорганизмов. Процесс образования влагалищного содержимого относительно постоянен и количественно составляет в сутки от 0,76±0,004 до 4,50±0,12 мл. В его составе нами были обнаружены раково-эмбриональный антиген и РЭА/РЭА-подобные антигены. В связи с этим определенный интерес представляло проведение исследования по изучению качественных и количественных изменений, происходящих при секреции этих антигенов нормальными и трансформированными клетками.

Ранее из целомической жидкости голотурии Apostichopus japonicits (дальневосточного трепанга) учеными Тихоокеанского института биоорганической химии был выделен и охарактеризован лектин, получивший название маннан-связывающего лектина трепанга. Было показано, что MCJI-Т специфически взаимодействует с углеводными цепями РЭА. Это свойство MCJI-T, а также содержание РЭА/РЭА-подобных антигенов в вагинальных секретах, послужило предпосылкой для проведения сравнительного изучения ВС у трех групп пациентов: здоровых, с доброкачественными изменениями и раком шейки матки.

Нами были исследованы вагинальные секреты, полученные у 90 женщин, средний возраст которых составил 46,4±0,6 года. Главной целью исследования был поиск существенной разницы между уровнем JTCA при раке шейки матки, доброкачественных процессах шейки матки и у здоровых женщин.

В экспериментах, проведенных нами с вагинальными секретами 3 групп женщин — здоровых (30), с доброкачественными поражениями шейки матки (30) и с раком шейки матки (30), были показаны существенные различия в связывании МСЛ-Т с углеводными компонентами секретов в этих группах. При этом концентрации ЛСА в вагинальных секретах здоровых женщин и с доброкачественными изменениями были близки по своим значениям, и в среднем составляли 20,3=Ы,3 U/ml и 19,7±1,6 U/ml, соответственно. Среднее значение концентраций ЛСА в секретах женщин с диагностированным раком шейки матки составили 5,2±0,8 U/ml (табл.3).

Уровень лектин-связанных РЭА/РЭА-подобных антигенов (JICA) в вагинальных секретах в исследуемых группах

Количество женщин (п=30) Группы пациенток Уровень ЛСА (U/ml) M±m

30 Здоровые 20,3*1,3

30 С доброкачественными изменениями 19,7±1,6

30 Рак шейки матки 5,2±0,8

Согласно результатам таблицы 3 уровень ЛСА при наличии рака шейки матки был значительно ниже, чем при доброкачественных процессах шейки матки и у здоровых женщин. Нами установлены статистически достоверные различия значений ЛСА между здоровыми женщинами и пациентками с диагнозом рака шейки матки (р<0,001), а также между пациентками с доброкачественными и злокачественными заболеваниями (р<0,001).

Мы считаем, что снижение уровня лектин-связанных антигенов у женщин со злокачественными поражениями шейки матки вызвано появлением сиаловой кислоты на терминальных остатках углеводных цепей РЭА/РЭА подобных антигенов, что приводит к блокировке связывания лектина с углеводными цепями.

Важной характеристикой диагностической значимости метода является его чувствительность, специфичность. Дифференциация между двумя группами определяется при выбранном контрольном уровне cut-off level. По существующим требованиям к диагностическим наборам для выявления опухолевых маркеров специфичность метода должна составлять не менее 95%. При диагностической специфичности (установленной нами) 95% по отношению к соответствующим исследуемым группам значение

контрольного уровня (cut-off level z^,) составило 12,74 U/ml Чувствительность метода при специфичности 95% составила 86,2% (рис.2).

Значения лектансвязанных атнгенов в вагинальных секретах z,U/ml —рак шейки матки

-—— доброкачественные поражения шейки матки

----здоровые женщины

Рис.2. Зависимость ЛС А от установленного уровня cut-off level гш.

Таким образом, снижение концентрации JICA, выявляемой разработанным нами лектин-иммуноферментным методом в вагинальном секрете ниже определенного уровня, показало значительную корреляцию со злокачественными заболеваниями шейки матки (р<0,001). По нашему мнению, определение концентрации лектин-связанных форм в вагинальном секрете является перспективным и требует дальнейших исследований. Возможно, это позволит использовать данный метод для верификации диагноза и прогноза характера патологического процесса.

19

ВЫВОДЫ

1. При соблюдении методики получения материала с поверхности шейки матки и цервикального канала с помощью комбинированного применения цервикальной щетки СуТоЬгшЬ и деревянного шпателя Эйра количество информативных мазков составляет 99,8±0,2 % против 33,5±2,1% случаев. При использовании комбинации СугоЬпвЬ и деревянного шпателя Эйра по нашей методике в 99% случаев из 100 не требуется проведения повторного исследования.

2. Предварительное увлажнение деревянного шпателя Эйра физиологическим раствором перед получением материала при наличии атрофической слизистой шейки матки значительно увеличивает диагностические возможности цитологического скрининга. Количество информативных микропрепаратов возрастает с 36,5±2,2% до 74,5±1,9%.

3. При положительном цитологическом диагнозе РШМ и отрицательных гистологических результатах высока вероятность выявления в будущем РШМ (17,б±3,5%). Необходим регулярный мониторинг за этой категорией женщин с комплексным обследованием.

4. Эксперементально показано, что разработанный лектин-иммуноферментный метод диагностики РШМ, основанный на определении РЭА, РЭА-подобных антигенов в вагинальных секретах является % перспективным и представляет интерес для практической онкологии. Использование лектин-иммуноферментного метода дает дополнительную возможность выявления РШМ и дифференцировки с доброкачественными заболеваниями, а также проведения мониторинга и выявления рецидивов заболевания. Чувствительность метода при специфичности 95% составляет , 86,2%. По чувствительности и специфичности метод не уступает известным на данный момент методам диагностики РШМ.

ПРАКТИЧЕОСИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для снижения ошибочно-отрицательных результатов цитологического исследования при получении материала с поверхности

шейки матки и цервикального канала рекомендуем использовать комбинацию цервикальной щетки Cytobrush и деревянного шпателя Эйра по предлагаемой методике. ДЗАПК рекомендовано аптечной сети включить щетки «Cytobrush» в состав одноразовых наборов.

2. Для предупреждения развития инвазивного рака шейки матки у женщин с положительным цитологическим диагнозом злокачественного поражения и при отрицательном результате гистологического исследования, необходим регулярный мониторинг за этой категорией женщин с комплексным обследованием.

3. При наличии атрофической слизистой шейки матки перед получением материала для цитологического исследования рекомендовано предварительное увлажнение деревянного шпателя Эйра физиологическим раствором.

4. Разработаны и опубликованы 2 методические рекомендации: «Стандартизация цитологических методов исследования в диагностике заболеваний шейки матки»(2002), «Скрининг рака шейки матки, организация и методолошя»(2006).

5. Данные диссертационной работы могут быть использованы при чтении лекций и проведении семинарских занятий в медицинских вузах и на циклах повышения квалификации врачей.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Ermolina, Larisa N. The transmitters of inflammation in gravidas with recurrent genital herpis / Larisa N. Ermolina, Olga M. Rodionova, Elena V. Prosekova. Course of clinical laboratory diagnostics, Vladivostok State Medical University, Vladivostok, Russia // The eleventh International Symposium of the Japan - Russia Medical Exchange: program - Abstract (H) Supplement- Niigata, 2004.-P.422.

2. Ермолина, Л.Н. Динамика интерлейкина 4 (ИЛ-4) в вагинальном секрете и сыворотке крови беременных с рецидивирующим генитальным герпесом / Л.Н. Ермолина, Е.В. Просекова, О.М. Родионова // Аллергология и

иммунология: тез. П Всемирного конгресса по иммунопатологии и аллергии. - Москва, 2004. - Т. 5, № 2. - С. 136 - 137.

3. Ермолина, JX.H. Локальный и системный уровень фактора некроза опухоли a (TNFa) и его динамика у беременных с рецидивирующим генитальным герпесом / Л.Н. Ермолина, Е.В. Просекова, О.М. Родионова // Цигокины и воспаление. - 2006. - Т. 5, № 4 - С.17 - 21.

4. Особенности герпес вирусной инфекции в цервикальной патологии / Л.Н. Чиркова, Е.В. Просекова, О.М. Родионова, Г.Ф. Погорелова, Л.В. Седая // Вопросы диагностики и лечения злокачественных опухолей:

_ тез. докл.У - Дальневост. онколог.конф. - Владивосток, 2003. - С. 147 - 150.

5. Перспективы использования маннан-связывающего лектина дальневосточной голотурии Apostichopus japonicus при диагностике рака шейки матки / A.A. Булгаков, О.М. Родионова, И.Ю. Петрова, М.Г. Елисейкиыа, В.И. Апанасевич // Вопросы диагностики и лечения злокачественных опухолей: материалы VII Дальневост. онколог, конф. -Владивосток, 2005. - С. 156 - 158.

6. Применение лектин-иммуноферментного метода в диагностике рака шейки матки / A.A. Булгаков, О.М. Родионова, И.Ю. Петрова, М.Г. Елисейкина, Л.Н. Ермолина, В.И. Апанасевич // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2006. - Т. 5, № 4. - С. 792 - 796.

7. Родионова, О.М. Роль централизованной цитологической лаборатории при раннем выявлении злокачественных новообразований / О.М. Родионова // Оказание терапевтической помощи в условиях поликлиники (к 10-летию - кафедры поликлинической терапии ВГМУ) -Владивосток, 1997. - С. 51.

8. Родионова, О.М. Опыт работы централизованной цитологической лаборатории г. Владивостока за период с 1986 по 2000 годы / О.М. Родионова // Вопросы диагностики и лечения злокачественных опухолей: тез. Ш -Дальневост. онколог, конф. - Владивосток, 2001. - С. 42 ~ 46.

9. Родионова, О.М. Стандартизация цитологических методов исследования в диагностике заболеваний шейки матки: методические рекомендации / О.М. Родионова, Т.И. Слепнева, А.Г. Мухотина, C.B. Юдин.

- Владивосток: Изд-во ОАО Дальприбор. - 2002. - 37 с.

10. Родионова, О.М. Состояние цитологической службы в Приморском крае и перспективы развития / О.М. Родионова, И.В. Назарова, C.B. Юдин // Вопросы диагностики и лечения злокачественных опухолей: тез. V - Дальневост. онколог, конф. - Владивосток, 2003. - С. 22 - 26.

11. Родионова, О.М. Роль папилломавирусной инфекции в возникновении рака шейки матки / О.М. Родионова // Вопросы диагностики и лечения злокачественных опухолей: тез. докл.VI Дальневост. онколог, конф.

- Владивосток, 2004. - С.31 - 34.

12. Родионова, О.М. Выявление папилломавирусной инфекции при скрининге рака шейки матки / О.М. Родионова, ИВ. Остапчук, В.И. Апанасевич // Вопросы диагностики и лечения злокачественных опухолей: тез. докл. VI Дальневост. онколог, конф. - Владивосток, 2004. - С. 87 - 88.

13. Родионова, О.М. Гинекологический скрининг и характеристика информативности материала, полученного разными методами в цервикальной цитологии / О.М. Родионова, В.И. Апанасевич, А,С. Юдина, И.Ю. Невмержицкая // Новости клинической цитологии России. - 2004. - Т. 8,№1-2.-С. 38-41.

14. Родионова, О.М. Применение аналитической модели для оценки качества цитологического скрининга рака шейки матки / О.М. Родионова, В.И. Апанасевич // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2005. - № 4. - С. 60-61.

15. Родионова, О.М. Перспективы и место цитологического скрининга рака шейки матки / О.М. Родионова // Журнал теоретической и практической медицины. - 2005. - Т. 3, № 3. - С. 365 - 369.

16. Родионова, О.М. Проблема целого и части, структуры и функции в медицине. Содержание и соотношение понятия молекулярная патология,

органопатология Г О. М. Родионова // Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины: тез.докл. VI - Тихоокеанской научн.-практич. конф. студентов и молодых ученых с междунар. участием, Владивосток, 27 апреля 2005. - Владивосток, 2005 - С. 175.

17. Юдин, C.B. Скрининг рака шейки матки (организация и методология): метод, рекомендации / C.B. Юдин, Л.А. Несвяченная, О.М. Родионова, A.A. Мелякова, В.Г. Морева — Владивосток: йзд-во ОАО Дальприбор - 2006. - 31 с. СПИСОК СОКРАЩЕНИИ Аг-антигены

Ат-РЭА — антитела против раково-эмбрионального антигена ВГМУ - Владивостокский государственный медицинский университет ВС - вагинальный секрет

ДЗАПК - Департамент здравоохранения администрации Приморского края

ЛСА - лектин-связанные антигены

МСЛ-Т - маннан-связывающий лектин трепанга

ОМ - опухолевые маркеры

ОФДА - ортофенилендиамин

РШМ - рак шейки матки

РЭА - раково-эмбриональный антиген

ЦДЛ - централизованная цитологическая лаборатория

BSA - бычьий сывороточный альбумин

CIN П — дисплазия умеренной степени

CIN Ш - дисплазии тяжелой степени

CIS - внутриэпителиальная карцинома

SCC - антиген плоскоклеточной карциномы

TBS - Т - буфер с тритоном

TBS - классификация The Bethesda System (2001 г.) TPS - специфический тканевой полипептид

РОДИОНОВА Ольга Михайловна

ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ СКРИНИНГ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ

АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Подписано в печать 26.02.07. Формат 60x84/16 Усл. печ. л. 1,4. Уч.-изд. л. 1,0 Тираж 100 экз. Заказ 027

Типография издательства ДВГТУ. 690950, Владивосток, Пушкинская, 10

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Родионова, Ольга Михайловна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОСОБЕННОСТИ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО СКРИНИНГА РАКА ШЕЙКИ МАТКИ (Обзор литературы).

1.1. Рак шейки матки: эпидемиология, этиология, факторы риска.

1.1.1. Эпидемиология рака шейки матки.

1.1.2. Этиология рака шейки матки.

1.1.3. Факторы риска в развитии рака шейки матки.

1.2. Диагностика рака шейки матки.

1.2.1. Характеристика клинических проявлений рака шейки матки.

1.2.2. Кольпоскопические методы исследования.

1.2.3. Морфологические методы исследования.

1.3. Молекулярно-биологические методы исследования.

1.3.1. Опухолевые маркеры в диагностике рака шейки матки.

1.3.2. Лектины и их значение в биологии и медицине.

1.3.3. Перспективы диагностики рака шейки матки.

Глава 2. ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛА И МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Цитологические исследования.

2.2. Лектин-иммуноферментный метод.

Глава 3. ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО СКРИНИНГА РАКА ШЕЙКИ МАТКИ (на примере города Владивостока).

3.1. Анализ показателей централизованной цитологической лаборатории г. Владивостока.

3.2. Стандартизация цитологических исследований.

3.3. Характеристика адекватности цитологического материала, полученного разными методами.

Глава 4. ОРГАНИЗАЦИОННЫЕ АСПЕКТЫ СКРИНИНГА РАКА ШЕЙКИ МАТКИ.

Глава 5. ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ МАННАН-СВЯЗАННОГО ЛЕКТИНА ДАЛЬНЕВОСТОЧНОЙ ГОЛОТУРИИ (APOSTICHOPUS

JAPONICUS) В ДИАГНОСТИКЕ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Цитологический скрининг рака шейки матки"

Рак шейки матки (РШМ) относится к наиболее распространенным и социально значимым онкологическим заболеваниям. Ежегодно в мире диагностируется от 450 до 500 тысяч новых случаев РШМ, и ежегодно умирают от него около 231 ООО женщин [110, 178, 179]. В России в структуре заболеваемости среди злокачественных новообразований у женщин РШМ занимает четвертое место, а в структуре смертности находится на 6-м месте [22, 52, 65].

К большому сожалению, доля больных РШМ, выявленных на ранних стадиях, остается относительно небольшой. Внедрение скрининговых программ в США позволяет выявить в преинвазивной стадии более 2/3 новообразований шейки матки и 70% - 80% больных в I - II стадиях заболевания [52, 61, 71]. В России в среднем только у 10% больных, взятых на учет по поводу рака шейки матки, выявляются ранние (0 -1 а) стадии, у 58,7% пациенток -I - II стадии заболевания. Инвазивные и распространенные стадии РШМ диагностируются у больных в широком диапазоне значений от 24,7% до 90,2% [16, 40, 44, 52, 61, 65, 71]. Лабораторные методы исследования позволяют выявить только морфологические изменения эпителия шейки матки и цервикального канала [1, 5, 50, 51,67,70, 74,75, 88,103].

Стандартом раннего (доклинического) выявления РШМ является цитологический метод. Цитологический скрининг привел к снижению уровня заболеваемости и смертности от РШМ в каждой стране, где была внедрена соответствующая программа. Однако чувствительность цитологического метода остается недостаточно высокой и составляет от 5% до 83,3% [53, 119, 126, 155, 230]. В последние годы в некоторых странах отмечается повышение уровня заболеваемости и смертности [21, 61]. С внедрением новых цитологических и биохимических методов исследования (определение плоидности ядер, вирусные и тканевые биомаркеры; белки: bcl, Е - 6, Е - 7 и др.) появились новые диагностические возможности выявления РШМ на доклиническом этапе [2, 26, 28, 36, 54,

104, 151, 217]. Развитие доклинической диагностики РШМ во второй половине 20 века пошло по пути определения в сыворотке крови опухолевых маркеров (ОМ). Для диагностики РШМ наиболее значимыми были признаны антиген плоскоклеточной карциномы (SCC), специфический тканевой полипептид (TPS) и раково-эмбриональный антиген (РЭА). Однако большинство из предложенных маркеров обладают недостаточно высокой чувствительностью и специфичностью. При этом только SCC применяется для мониторинга течения плоскоклеточного РШМ, прогноза и эффективности проводимого лечения [4, 211].

На этом фоне весьма перспективным является разработка новых подходов, позволяющих определять ранние биохимические нарушения, коррелирующие с неопластической трансформацией. При этом целесообразно определение этих показателей в участке наиболее близком к месту их синтеза [38, 56]. Перспективным в этом направлении является исследование уровня РЭА/РЭА подобных антигенов в вагинальном секрете [48]. Поиск новых систем диагностики с использованием компонентов, специфически связывающихся с РЭА/РЭА-подобными структурами, является актуальным и необходимым.

Из целомической жидкости голотурии Apostichopus japonicus (дальневосточного трепанга) учеными Тихоокеанского института биоорганической химии был выделен и охарактеризован лектин, получивший название маннан-связывающего лектина трепанга (MCJI-T). Было показано, что MCJI-T специфически взаимодействует с углеводными цепями РЭА. Это свойство MCJI-T, а также содержание РЭА/РЭА-подобных антигенов в вагинальных секретах (ВС), послужило предпосылкой для проведения сравнительного изучения вагинальных секретов у здоровых женщин, у женщин с доброкачественными процессами и РШМ.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Усовершенствовать методы диагностики рака шейки матки.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1. Оценить информативность цитологического материала, полученного при скрининге рака шейки матки с применением традиционного набора инструментов и комбинации цервикальной щетки Cytobrush и деревянного шпателя Эйра.

2. Оптимизировать метод получения качественного материала для цитологического исследования при атрофической слизистой оболочке шейки матки.

3. Оценить риск развития РШМ в группе женщин при наличии положительного цитологического заключения о злокачественном поражении шейки матки и отрицательном результате гистологического исследования.

4. Разработать новый лектин-иммуноферментный метод определения РЭА, РЭА-подобных антигенов в вагинальном секрете у здоровых женщин, пациенток с доброкачественными процессами и при раке шейки матки. Оценить перспективы применения метода в диагностике РШМ.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

Показана возможность повышения эффективности доклинической диагностики рака шейки матки при цитологическом скрининге.

Снижение уровня концентрации лектин-связанных РЭА / РЭА-подобных антигенов (JICA), выявляемое разработанным нами лектин-иммуноферментным методом в вагинальном секрете, показало значительную корреляцию со злокачественными заболеваниями шейки матки. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.

В результате проведенных нами исследований выявлена достоверная закономерная зависимость ложноотрицательных цитологических результатов от качества цитологических препаратов.

Разработан лектин-иммуноферментный метод диагностики РШМ по вагинальному секрету. Установлена диагностическая ценность метода с определением чувствительности и специфичности.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

Основные положения диссертации представлены и обсуждены на: краевой научно-практической конференции врачей гинекологов-эндокринологов (Владивосток, 2004; 2005); 6-ой Тихоокеанской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины» (Владивосток, 2005); краевом научно-практическом семинаре «Междисциплинарный подход к диагностике и лечению пролиферативных процессов репродуктивной системы» (Владивосток, 2006); краевой научно-практической конференции врачей онкологов (Владивосток, 2006). ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ.

Полученные данные используются в работе цитологических лабораторий, женских консультаций и смотровых кабинетов г. Владивостока, Приморского края. Они внедрены в учебный процесс института повышения квалификации врачей ВГМУ (для врачей клинической лабораторной диагностики, клинических интернов), студентов 4-6 курсов лечебного, педиатрического и медико-профилактического факультетов.

По материалам диссертации опубликовано 17 печатных работ в местной, центральной и зарубежной печати. Разработано информационное письмо «Профилактика рака шейки матки» (2004). Разработаны методические рекомендации «Стандартизация цитологических методов исследования в диагностике заболеваний шейки матки» (2002), «Скрининг рака шейки матки, организация и методология» (2006). ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Использование комбинации цервикальной щетки Cytobrush и деревянного шпателя Эйра улучшает качество цитологических исследований при скрининге рака шейки матки.

2. При наличии ложной цитологической гипердиагностики РШМ и гистологической гиподиагностики пациенты нуждаются в динамическом наблюдении для своевременного выявления раннего рака шейки матки. 3. Возможна дополнительная диагностика рака шейки матки при использовании лектин-иммуноферментного метода определения РЭА/РЭА-подобных антигенов в вагинальном секрете. СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ.

Работа состоит из введения, обзора литературы, главы «характеристика материалов и методов исследования», 3 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, списка цитируемой литературы, который состоит из 84 отечественных и 149 зарубежных источников. Диссертация изложена на 139 страницах, содержит 11 таблиц и 21 рисунок.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Родионова, Ольга Михайловна

выводы

1. При соблюдении методики получения материала с поверхности шейки матки и цервикального канала с помощью комбинированного применения церви-кальной щетки Cytobrush и деревянного шпателя Эйра количество информативных мазков составляет 99,8±0,2% против 33,5±2,1% случаев.

2. Предварительное увлажнение деревянного шпателя Эйра физиологическим раствором перед получением материала при наличии атрофической слизистой оболочки шейки матки значительно увеличивает диагностические возможности цитологического скрининга. Количество информативных микропрепаратов возрастает с 36,5±2,2% до 74,5±1,9%.

3. При положительном цитологическом диагнозе РШМ и отрицательных гистологических результатах высока вероятность выявления в будущем РШМ (17,6±3,5%). Необходим регулярный мониторинг за этой категорией женщин с комплексным обследованием.

4. Разработанный лектин-иммуноферментный метод диагностики РШМ, основанный на определении РЭА / РЭА-подобных антигенов в вагинальном секрете является перспективным и представляет интерес для практической онкологии. Использование лектин-иммуноферментного метода дает дополнительную возможность выявления РШМ. Чувствительность метода при специфичности 95% составляет 86,2%. По чувствительности и специфичности метод не уступает известным на данный момент методам диагностики РШМ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для снижения ошибочно-отрицательных результатов цитологического исследования при получении материала с поверхности шейки матки и цервикального канала рекомендуем использовать комбинацию цервикальной щетки Cytobrush и деревянного шпателя Эйра по предлагаемой методике. ДЗАПК рекомендовано аптечной сети включить щетки «Cytobrush» в состав одноразовых наборов.

2. Для предупреждения развития инвазивного рака шейки матки у женщин с положительным цитологическим диагнозом злокачественного поражения и при отрицательном результате гистологического исследования, необходим регулярный мониторинг за этой категорией женщин с комплексным обследованием.

3. При наличии атрофической слизистой оболочки шейки матки перед получением материала для цитологического исследования рекомендовано предварительное увлажнение деревянного шпателя Эйра физиологическим раствором.

4. Разработаны и опубликованы 2 методические рекомендации: «Стандартизация цитологических методов исследования в диагностике заболеваний шейки матки» (2002), «Скрининг рака шейки матки, организация и методология» (2006).

5. Данные диссертационной работы могут быть использованы при чтении лекций и проведении семинарских занятий в медицинских вузах и на циклах повышения квалификации врачей.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Родионова, Ольга Михайловна, Владивосток

1. Абрамов, М.Г. Клиническая цитология / М.Г. Абрамов. М.: Медицина, 1974.-335 с.

2. Автандилов, Г.Г. Плоидометрическая диагностика предраковых процессов и рака шейки матки по цитологическим препаратам / Г.Г. Автандилов, Ю.К. Глухова, И.П. Шабалова // Клиническая лаб. диагностика. 2004. -№11.-С. 45-47.

3. Анисимов, В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения / В.Н. Анисимов. СПб: Наука, 2003. - 466 с.

4. Базарнова, М.Л. Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике / М.Л. Базарнова. Киев: Выща школа, 1988. -317 с.

5. Бауэр, Г. Цветной атлас по кольпоскопии / пер. с нем. О.А. Зубановой; под ред. С.И. Роговской / Г. Бауэр. М.: ГЕОТАР, 2006. - 400 с.

6. Блохин, Н.Н. Клиническая онкология / Н.Н. Блохин, Б.Е. Петерсон. М.: Медицина, 1971.-Т. 2.-С. 388-405.

7. Бохман, Я.В. Руководство по онкогинекологии / Я.В. Бохман. СПб.: Фолиант, 2002. - 539 с.

8. Виды-Вирски, Ф. Рак шейки матки и задачи массовой профилактики / Феликс Виды-Вирски, Юзеф Шамборски, Кристина Шиманьска. Варшава: Польское гос. мед. изд., 1962. -157 с.

9. Винокуров, В.Л. Рак шейки, тела матки и яичников: итоги и перспективы исследований в ЦНИРРИ Минздрава РФ / В.Л. Винокуров // Вопросы онкологии- 2003. Т. 49, № 5. - С. 656 - 663.

10. Выделение и свойства маннансвязывающего лектина из цел омической жидкости голотурии (Cucumaria japonica) / А.А. Булгаков, E.JI. Назаренко, И.Ю. Петрова, М.Г. Елисейкина, Н.М. Вахрушева, В.А. Зубков // Биохимия.- 2000. Т. 65, № 8. - С. 1099 - 1106.

11. Ганцев, Ш.Х. Онкология / Ш.Х. Ганцев. М.: Мед. информ. агенство,2004.-481 с.

12. Герасименко, Н.Ф. Государственный доклад о состоянии здоровья населения Российской Федерации в 2001 году / Н.Ф. Герасименко // Здравоохранение Рос. Федерации. 2003. - № 2. - С. 7 - 12.

13. Головин, Д.И. Ошибки и трудности гистологической диагностики опухолей / Д.И. Головин. JL: Медицина, 1982. - С. 229 - 239.

14. Готовы ли мы к угрозе онкогенной папилломавирусной инфекции и эффективному цитологическому скринингу? / В.Г. Черенков, М.А. Локтионова, О.Г. Иванченко, О.Ю. Субботина // Новости клинич. цитологии России. 2001. - Т. 5, № 1 - 2. - С. 38 - 40.

15. Диагностика заболеваний молочной железы: цитологический атлас / И.П. Шабалова, Т.В. Джангирова, Н.Н. Волченко, К.К. Пугачев. М.: Триада,2005.-С. 101-106.

16. Дильман, В.Н. Четыре модели медицины / В.Н. Дильман. Л.: Медицина, 1989.-288 с.

17. Заболеваемость злокачественными новообразованиями населения в Томской области / P.M. Тахауров, Е.Л. Чойнзонов, Л.Ф. Писарева, А.Б. Карпов, И.Н. Одинцова // Здравоохранение Рос. Федерации. 2003. - № 2.1. С. 30-32.

18. Заридзе, Д.М. Приоритетные направления противораковой борьбы в России / Д.М. Заридзе, Т.Х. Мень // Рос. онколог. журн.-2001.-№ 5.-С. 5 14.

19. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2000 г. / Е.М. Аксель, М.И. Давыдов. М.: РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, 2002. -281с.

20. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2002 г. / под ред. М.И. Давыдова, Е.М. Аксель. М.: Мед. информ. агентство, 2004. -279 с.

21. Иевлева, Н.Ф. Цитометрическая характеристика ядерно-ядрышкового аппарата при дисплазии и экзоцервикальном раке шейки матки / Н.Ф.Иевлева, Г.В. Чижова, В.И. Цыганков // Клинич. лабораторная диагностика. 2006. - № 5. - С. 55 - 56.

22. К вопросу о цитологической верификации предраковых процессов шейки матки / И.И. Лазарев, М.Ф. Софрони, Э.Р. Ботнарь и др. // Новости клинич. цитологии России. 2001. - Т. 5, № 3 - 4. - С.139 - 141.

23. Карпищенко, А.И. Медицинская лабораторная диагностика: справочник (программы и алгоритмы) / А.И. Карпищенко. СПб.: Интемедика, 1997. -С. 228-241.

24. Карселадзе, А.И. Современные тенденции и перспективы развития гинекологической онкоморфологии / А.И. Карселадзе // Акушерство и гинекология 2006. - (приложение). - С. 47 - 51.

25. Кира, Е.Ф. Биохимические и биологические свойства влагалищной жидкости. Инфекции и репродуктивное здоровье (часть II) Электронный ресурс. / Е.Ф. Кира. Электрон, дан. - Рос. Военно-мед. академии. - Режим доступа: http:// www.jowd.sp.ru, 2002.

26. Киселев, В.И. Вирусы папилломы человека в развитии рака шейки матки / В.И. Киселев. -М.: Изд-во Димитрейд График Групп, 2004. 184 с.

27. Козаченко, В.П. Рак шейки матки / В.П. Козаченко // Современная онкология. 2001. - Т. 2, № 2. - С. 2 - 4.

28. Козаченко А.В. Новые направления в диагностике и лечении микрокарциномы шейки матки / А.В. Козаченко // Акушерство и гинекология. -2006 (приложение). С. 56 - 59.

29. Кольпоскопия / В.Н. Прилепская, С.И. Роговская, Е.А. Межевитинова // Практическое руководство. -М.: Мед. информ. агентство, 2001. 100 с.

30. Коханевич, Е.В. Кольпоцервикоскопия: атлас / Е.В. Коханевич, К.П. Танина, В.В. Суменко. Киев: Выща школа, 1997. - 49 с.

31. Луцик, А.Д. Лектины / А.Д. Луцик, Е.Н. Панасюк, М.Д. Луцик. Львов: Выща школа, 1981. - 156 с.

32. Луцик, А.Д. Лектины в гистохимии / А.Д. Луцик, Е.С Детюк, М.Д. Луцик. Львов: Выща школа, 1989. - 139 с.

33. Манухин, И.Б. Проблемы и перспективы цервикального скрининга / И.Б. Манухин, Г.Н. Минкина // Акушерство и гинекология. 2006 (приложение).-С. 51-56.

34. Методические указания по осуществлению контроля качества цитологических исследований // Новости клинической цитологии России. Воронеж, 2000. - Т. 4, № 3 - 4. - С. 109 -111.

35. A.И. Рудниченко // Вестн. новых мед. технологий. 2002. - Т. 9, № 3. - С. 53-55.

36. Невожай, В.И. Обследование больных с визуальными формами злокачественных новообразований. Методические рекомендации / В.И. Невожай, С.В. Юдин. Владивосток, 2002. - 31 с.

37. Новик, В.И. Эпидемиология рака шейки матки, факторы риска, скрининг /

38. B.И. Новик // Практическая онкология. 2002. - Т. 3, № 3. - С.156-165.

39. Новик, В.И. Факторы эффективности цитологического скрининга рака шейки матки / В.И. Новик // Рос. онколог, журн. 2006.- № 1 - С. 47 - 49.

40. Новикова, Е.Г. Диагностика предраковых заболеваний и начальных форм рака шейки матки / Е.Г. Новикова // Заболевания шейки матки, влагалища и вульвы (Клинические лекции) / под ред. В.Н. Прилепской. 2-е изд. -М.: МЕДпресс, 2000. - С. 153 - 159.

41. О роли цитологического исследования в профилактике и ранней диагностике рака шейки матки / Б.Б. Кравец, Е.П. Маркова, О.М. Гантюк, Н.И. Климова // Новости клинич. цитологии России. 2001. - Т. 5, № 3 - 4. - С. 135- 136.

42. Онкомаркеры и их диагностическое значение / А.И. Карпищенко, В.Г. Антонов, А.Б. Бутенко, А.С. Белохвостов, Е.П. Шелепина. СПб.: В.М.А., 1999.-48 с.

43. Организационные аспекты раннего выявления злокачественных новообразований / В.И. Чиссов, В.В. Старинский, Б.Н Ковалев, А.А. Попова, Н.Н. Харламова // Рос. онколог, журн. 2002. - № 2. - С. 43 - 45.

44. Оценка информативности цервикальных мазков при получении материала разными методами / В.И. Новик, А.С. Вишневский, Н.Р. Сафронникова, О.Г. Иванченко // Новости клинич. цитологии России. 2000. - Т. 3, № 3 -4.-С. 86-87.

45. Петрова, А.С. Практическая клиническая цитология / Петрова А.С, И.Ю. Полонская. М.: Медицина, 1997. - 61 с.

46. Петрова, А.С. Руководство по цитологической диагностике опухолей человека / А.С. Петрова, М.П. Птохов. М.: Медицина, 1976. - 304 с.

47. Петрова, А.С. Цитологическая диагностика опухолей и предопухолевых процессов / А.С. Петрова. М.: Медицина, 1985. - 300 с.

48. Петрова, Г.В. Показатели онкологической помощи больным раком шейки матки в России / Г.В. Петрова // Рос. онколог, журн. 2003. - № 5. - С. 36 -38.

49. Подистов, Ю.И. Сопоставление результатов цитологического исследования и данных молекулярно-биологического метода HYBRID CAPTURE II у больных предраком шейки матки / Ю.И.Подистов // Клиническая лабораторная диагностика 2005. - № 8. - С. 43 - 45.

50. Подистов, Ю.И. Эпителиальные дисплазии шейки матки (диагностика и лечение) / Ю.И. Подистов, К.П. Лактионов, Н.Н. Петровичев, В.В. Брюз-гин. М.: ГОЭТЕР-Медиа, 2006. - 132 с.

51. Прилепская, В.Н. Лейкоплакия шейки матки / В.Н. Прилепская. Заболевания шейки матки, влагалища и вульвы. (Клинические лекции) // под ред. В.Н. Прилепской. 2-е изд. - М.: МЕДпресс, 2000. - С. 84 - 93.

52. Птух, Е.Я. Ранняя диагностика хирургических заболеваний молочной железы, сопровождающихся синдромом галактореи: автореф. дис. кандидата мед. наук. / Птух Евгения Яковлевна. Владивосток, 2004. - 23 с.

53. Ранняя диагностика и лечение предраковых состояний шейки матки / С.А. Сельков, С.В. Рищук, Д.Ф. Костючек., Г.Н. Веденеева // Акушерство и гинекология. 2005. - № 3. - С. 17 - 20

54. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / под ред. С.В. Петрова, Н.Г. Райхмана. Казань, 2000. -287 с.

55. Садикова, Н.В. Стандартизация забора материала и его адекватность в обеспечении качества цитологического скрининга / Н.В. Садикова // Новости клинической цитологии России. 1998. -Т. 2, № 3 - 4. - С. 131.

56. Серебров, А.И. Рак матки / А.И. Серебров. М.: Медицина, 1968. - 323 с.

57. Состояние онкологической помощи населению России в 2004 году / под ред. В.И. Чиссова, В.В. Старинского, Г.В. Петровой. М.: МНИОИ им. П. А. Герцена, 2005.-184 с.

58. Сочетанная (локальная и системная) модификация лучевой терапии больных раком шейки матки / Н.Ю. Некласова, Г.М. Жаринов, B.JI. Винокуров, Г.М. Скрындица//Вопросы онкологии.-2006-Т. 52, № 5.-С. 560-564.

59. Фролова, И.И. Цервикальные интраэпителиальные неопазии и дискерато-зы шейки матки / И.И. Фролова, И.И. Бабиченко, Г.М. Местергази. М.: Изд. Дом Династия, 2004. - 78 с.

60. Хасанов, Р.Ш. Рак шейки матки и цитологический скрининг в республике Татарстан / Р.Ш. Хасанов // Рос. онколог, журн 2002. - № 1. - С. 41 - 42.

61. Хасанов, Р.Ш. Роль диспансеризации женского населения в ранней диагностике рака шейки матки (опыт Сармановской ЦРБ республики Татарстан) / Р.Ш Хасанов, С.Е Габитова, Р.Ф. Латыпова // Акушерство и гинекология. 2006. - № 2. - С. 49 - 51.

62. Хирш, X. Оперативная гинекология / X. Хирш, О. Кезер, Ф. Икле: атлас /пер. с англ.: под ред. В.И. Кулакова, И.В. Федорова. М.: ГЭОТАР. - Медицина, 1999. - 656 е.: 1200 ил.

63. Хмельницкий, O.K. Цитологическая и гистологическая диагностика заболеваний шейки и тела матки / O.K. Хмельницкий.-СПб.: Sotis, 2000.-332с.

64. Хэм, А. Гистология / А. Хэм, Д. Кормак / пер. с англ.: под ред. Ю.И. Афанасьева, Ю.С. Ченцова. М.: Мир, 1983. - Т. 5. - С. 126 - 182.

65. Хэтч, К. Злокачественные опухоли шейки матки и влагалища. Гинекология по Эмилю Новаку / К. Хэтч, Я. Фу / под ред. Дж. Берека, И. Адаши и П. Хиллард, пер. с англ. М.: Практика, 2002. - С. 702 - 723.

66. Цитологическая диагностика злокачественных новообразований: атлас / Н.Н. Шиллер-Волкова, Н.И. Никитина, К.А. Агамова, M.JI. Брин. М.: Медицина, 1964.-263 с.

67. Черенков, В.Г. Клиническая онкология / В.Г. Черенков. М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999.-С. 174-184.

68. Чиссов, В.И. Злокачественные новообразования в России в 2004г. (заболеваемость и смертность) / В.И. Чиссов, В.В. Старинский, Г.В. Петрова. -М.: Медицина, 2006. 246 с.

69. Чиссов, В.И. Ранняя диагностика онкологических заболеваний / В.И. Чиссов, В.В. Старинский, Е.Н. Сотникова. -М.: Медицина, 1994. 193 с.

70. Шабалова, И.П. Критерии диагностики заболеваний шейки матки: цитологический атлас /И.П. Шабалова. Тверь: Губернская медицина, 2001 -116 с.

71. Шабалова, И.П. Цитологическая диагностика заболеваний шейки матки: цитологический атлас / И.П. Шабалова, К.Т. Касоян Тверь: ООО Изд. Триада, 2006. - 162 е.: 551 ил.

72. Шапиро, Н.А. Оценка экспертами разных стран обеспечения качества и контроля качества цитологического скрининга / Н.А. Шапиро // Новости клинической цитологии России. 1997. - Т. 1. - С. 27 - 29.

73. Шуваева, Н.И., Коротких, И.Н. Клиника, диагностика рака цервикального канала: методические рекомендации / Н.И. Шуваева, И.Н. Коротких. М., 1984.-10 с.

74. Эпидемиологические особенности рака шейки матки на территориях с различными уровнями техногенного загрязнения / Т.В. Кайданек, Г.Е. Ефимов, Л.И. Шляхтенко, К.Ф. Кондратьева и др. // Вопросы онкологии. -2004. Т. 50, № 6. - С. 720 - 722.

75. Юдин, С.В. Организационные аспекты системы совершенствования онкологической помощи / С.В. Юдин. Владивосток, 2004. - 257 с.

76. Юрасова, И.В. Цитологическое исследование при профилактических гинекологических осмотрах / И.В. Юрасова, Н.Ю. Полонская // Новости клинической цитологии России, 2000. Т. 4, № 3 - 4. - С. 115 - 119.

77. Юрасова, И.В. Эффективность использования стандартных цитологических заключений при профилактических гинекологических осмотрах / И.В. Юрасова, Н.Ю Полонская, Т.Ю. Сокольская // Новости клинической цитологии России, 2003. Т. 7. - № 3 - 4. - С. 15 - 19.

78. Яковлева, И.А. Морфологическая диагностика предопухолевых процессов и опухолей матки по биопсиям и соскобам / И.А Яковлева, Б.Г. Кукутэ. -Кишинев: Штиинца, 1979. С. 5 - 77.

79. A new liquid-based cytology technique / Weynand Birgit, Berlire Martine, Esther Haumont, Framoise Massart, Anne Pourvoyeur, Pierre Bernard, Jacques Donnez, Christine Galant. // Acta Cytol. 2003. - Vol. 47. - P. 149 - 153.

80. Anderson, M.B. Fales positive cervicovaginal cytology: a follow-up study / M.B Anderson, B.A. Jones // Acta Cytology.-1997.-Vol. 41. P. 1697 - 1700.

81. Anderson, P.S. Runowicz beyond the pap test: New techniques for cervical cancer screening. Minimizing false-negative results / S. Patrick Anderson, D. Carolyn. // Women's Health in Primary Care.-2001.-Vol. 4, N 12.-P. 753-758.

82. Application of tumor markers CEA, TP A, and SCC-Ag in patients with low-risk FIGO stage IB and IIA squamous cell carcinoma of the uterine cervix / Chi-Mou Juang, Peng-Hui Wang, Ming-Shien Yen et al. // Gynecol. Oncology. -2000.-Vol. 76-P. 103-106.

83. Arason, G.J. Lectins as defence molecules in vertebrates and invertebrates / G.J. Arason // Fish Shellfish Immunology. 1996. - N 6. - P. 277 - 289.

84. AutoCyte Prep system vs. conventional cervical cytology. Comparison based on 2,156 cases / L. Minge, M. Fleming, T. VanGeem, J.W. Bishop // J. Reprod. Med. 2000. - Vol. 45. - P. 179.

85. Aylesbury and cervitula spatulas: A comparative study to assess the adequacy of cervical smears / Jacobus M. Plessis, Albrecht E. Schaetzing, Peter A.B. Wrantz and Mercia Louw // Acta Cytol. 2001. - Vol. 45. - P. 675 - 678.

86. Baaron, Т. Increased carcinoembryonic antigen expression in cervical intraepithelial neoplasia grade 3 and in cervical squamous cell carcinoma / Tendler Baaron, L. Howard Kaufman, Anna S. Kadish. // Hum. Pathol. 2000. - Vol. 31,N11.-P. 1357- 1362.

87. Baker, J.J. Conventional and liquid-based cervicovaginal cytology: A comparison study with clinical and histologic follow-up / John J. Baker // Diagnostic Cytopathol. 2002. - Vol. 27, N 3. - P.l 85 - 188.

88. Barton-Smith, P. Cervical cancer screening in England and Wales: an update / Peter Barton-Smith, Val Thomas, Thomas Ind // Rev. Gynaecol. Practice. -2003.-Vol. 3, N 1.-P. 5 10.

89. Benedet, J.L. An analysis of 84,244 patients from the British Columbia cytol-ogy-colposcopy program / J.L. Benedet, J.P. Matisic, M.A. Bertrand // Gynecol. Oncology. 2004. - Vol. 92, N 1. - P. 127 - 134.

90. Berenblum, I. Established principles and problems in carcinogenesis /1. Beren-blum // J. Nat. Cancer Inst. 1978. - Vol. 60. - P. 2400 -2409.

91. Cangiarella, J.F. Atypical glandular cells an update / Joan F. Cangiarella, David Chhieng // Diagnostic Cytopathol. - 2003.- Vol. 29, N 5. - P. 271 - 279.

92. Carbohydrate-binding proteins in cancer, and their ligands as therapeutic agents / Pratima Nangia-Makker, Jeffrey Conklin, Victor Hogan, Avraham Raz // Trends Molec. Med. 2002. - Vol. 8, N 4 - P. 187 - 192.

93. Carcinoembryonic antigen as a predictive factor for postoperative tumor relapse in early-stage lung adenocarcinoma / Yukinori Sakao, Shinji Tomimitsu,

94. Yuji Takeda, Masafumi Natsuaki, Tsuyoshi Itoh // Eur. J. Cardio-Thoracic Surgery. 2004. - Vol. 25, N 4. - P. 520 - 522.

95. Cardozo, P.L. Atlas of Clinical Cytology / P.L. Cardozo. Department of Haematoinorphology and Clinical Cytology Medical Clinic. Netherlands: Leiden University, 1976. - 732 p.

96. СБА, CA 50 and CA 242 in patients surviving colorectal cancer without recurrent disease / B. Engaras, J. Kewenter, O. Nilsson, H. Wedel, L. Hafstrom // Eur. J. Surgi. Oncology. 2001. - Vol. 27, N 1. - P. 43 - 48.

97. Cellular senescence, cancer and aging: the telomere connection / J. Campisi, S. Kim, C.S. Lim, M. Rubio // Exp. Gerontol. 2001. - Vol. 36. - P. 1619 -1637.

98. Cervical cancer control, priorities and new directions / Joseph Monsonego, F. Xavier Bosch, Pierre Coursaget, John Thomas Cox, Eduardo Franco et al. // Int. J. Cancer. 2003 Vol. 108, N 3. - P. 329 - 333.

99. Cervical cancer screening by simple visual inspection after acetic acid / J.L. Belinson, R.G. Pretorius, W.H. Zhang, L.Y. Wu et al. // Obstet. Gynecol. -2001. Vol. 98, N 3. - P. 441 - 444.

100. Cervical cancer screening in developing countries. Why it is ineffective? The case of Mexico / Eduardo Cesar Lazcano-Ponce, Sue Moss, Patricia Alonso de Ruiz et al. // Arch. Med. Research. 1999. - Vol. 30, N 3. - P.240 - 250.

101. Cervical cancer screening in developing countries. Report of a WHO. 2002. http://www.who.int/reproductivehealth / cancers - Режим доступа: вход свободный.

102. Cervical cancer screening in France / P. Schaffer, H. Sancho-Garnier, M.

103. Fender, P. Dellenbach, J.P. Carbillet, E. Monnet, G.P. Gauthierand A. Gamier // Eur. J. Cancer. 2000. - Vol. 36, N 17. - P. 2215 - 2220.

104. Cheung, K.L. Tumour marker measurements in the diagnosis and monitoring of breast cancer / K.L. Cheung, C.R.L. Graves, J.F.R. Robertson // Cancer Treatment Reviews. 2000. - Vol. 26, N 2. - P. 91 - 102.

105. Christiane, L. 100% Rapid (partial) rescreening for quality assurance / Christian Lemay, Alexander Meisels // Acta Cytol. 1999. - N 43. - P. 86 - 88.

106. Circulating anti-CEA antibodies in the sera of patients with breast cancer / D. Haidopoulos, M.M. Konstadoulakis, P.T. Antonakis et al. // Eur. J. Surgi. Oncology. 2000. - Vol. 26, N 8. - P. 742 - 746.

107. Clark, S.B. Invasive squamous-cell carcinoma in ThinPrep® specimens: Diagnostic clues in the cellular pattern / Sarah B. Clark, Andrea E. Dawson // Diagn. Cytopathol. 2002. - Vol. 26, N 1. - P. 1 - 4.

108. Colposcopy and cervical pre-malignancy / Saloney Nazeer, Mahmood I. Shafi, Richard Todd // Cur. Obstet. Gynaecol. 2004. - Vol. 14, N 2. - P. 104 - 114.

109. Comparative study: conventional cervical and ThinPrep Pap tests in routine clinical setting / A. Grace, P. McBrearty, S. Troost, M. Thornhill, E. Kay, M. Leader // Cytopatology. 2002. - Vol. 13, N 4 - P. 200 - 205.

110. Cuschieri, K.S. The role of human papillomavirus testing in cervical screening / Kate S. Cuschieri, Heather A. Cubie // J. Clin. Virology. 2005. - Vol. 32, Suppl. 1 - P. 34-42

111. Cuzick, J. HPV testing in cervical screening / Jack Cuzick // Pharmacoepidemiology Drug Safety. 2001. - Vol. 10, N 1. - P. 33 - 36.

112. Cytomorphology of small-cell (neuroendocrine) carcinoma on ThinPrep® cytology as compared to conventional smears / Marlyn C. Ciesla, Barbara J. Gui-dos, Suzanne M. Selvaggi //Diagn. Cytopathol.-2000.-Vol. 24, N l.-P. 46-52.

113. CytoRich liquid-based cervical cytologic test screening results in a routine cy-topathology service / Pierre Vassilakos, Sayuri Griffin, Eric Megevand, Aldo Campana // Acta Cytol. 1998. - Vol. 42. - P. 198 - 202.

114. Davidson, J. Detecting premalignant cervical lesions: contribution of screening colposcopy to cytology / J. Davidson, J. Marty // J. Repr. Med. 1994. - Vol. 5 -P. 408-410.

115. Dawn, H. Impact of automated technology on the cervical cytologic smear. A comparison of cost / H. Dawn, M. S. Grohs // Acta Cytol. 1998. - Vol. 42. -P. 165-170.

116. Detection of HPV 16 and HPV 18 DNA in the blood of patients with cervical cancer / Patti Kay, Bruce Allan, Lynette Denny, Margaret Hoffman, Anna-Lise Williamson // J. Med. Virology. 2005. - Vol. 75, N 3. - P.435 - 439.

117. Detection of human papillomavirus in urine and cervical swabs from patients with invasive cervical cancer / Grazyna A. Stanczuk, Patti Kay, Bruce Allan,

118. Mike Chirara, Sam A. Tswana, Staffan Bergstrom, Elopy N. Sibanda, Anna-Use Williamson // J. Med. Virology. 2003. - Vol. 71, N 1. - P. 110 - 114.

119. Diane Solomon, Ritu Nayar. The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology. Second edition. -N Y: Springer-Verlag Telos, 2004. 191 p.

120. Dighe, S. Collection devices for cervicovaginal cytology: a comparison / Swati Dighe, Dulhan Ajit // Acta Cytol 2005. - N 49. - P. 416 - 420.

121. Drug-induced increase of carcinoembryonic antigen expression in cancer cells / Aquino Angelo, Formica Vincenzo, Prete Pasquale Salvatore, Correale Pier Paolo, Massara Maria Chiara et al. // Pharmacol Res. 2004. - Vol. 49, N 5. -P. 383-396.

122. Duggan, M.A. Papnet-assisted, primary screening of cervico-vaginal smears / M.A.Duggan // Eur. J. Gynaecol. Oncol. 2000. - Vol. 21. - P. 35.

123. Exact touch: A new single sampler for the uterine cervix / Maria Cenci, Cecilia Midulla, Piera De Iorio, Aldo Vecchione // Acta Cytologica. 1999. - Vol. 43, N6.-P. 1192-1193.

124. False negative rate of cervical cytologic smear screening as determined by rapid rescreening / A. Renshaw Andrew, Bronya Bellerose et al. // Acta Cytology. 1999. - Vol. 43, N 3. - P. 344 - 350.

125. Gabius, H.J. The sugar code: functional lectinomics / H.J. Gabius, S. Andre, H. Kaltner, H.C. Siebert//Biochim. Biophys. Acta. 2002.-№ 1572.-P. 165-177.

126. Gloria, B. Tumor antigens CA 19.9, CA 125, and CEA in carcinoma of the uterine cervix / Gloria Borras, Rafael Molina, Jordi Xercavins et al // Gynecol. Oncology. 1995. - Vol. 57, N 2. - P. 205 - 211.

127. Hacker, N.F. Cervical cancer // Practical gynecologic oncology / Eds J.S Berek, N.F. Hacker. Third Edition. Philadelphia (USA): Lippincott Williams and Wilkins, 2000. - P. 345 - 405.

128. Hilgarth, M. The colposcopic screening / M. Hilgarth, M. Menton // Eur. J. Ob-stet. Gynecol. Repraduct. Biology. 1996. - Vol. 65, N 1. - P. 65 - 69.

129. Hulka, B. S. Risk factors for cervical cancer / Barbara S. Hulka // Arch. Med. Research. 1999. - Vol. 30, N 3. - P.240 - 250.

130. Human papilloma virus type 16 infection and the early onset of cervical cancer

131. Akihiro Karube, Masahiro Sasaki, Hidenori Tanaka et al. // Biochem. Bio-phys. Res. Commun. 2004. - Vol. 323, N 2. - P. 621 - 624.

132. Imaging in cervical cancer / Michele Follen, Charles F. Levenback, Revathy B. Iyer, Perry W. Grigsby, Erik A. Boss, Ebrahim S. Delpassand, Bruno D. For-nage, Iliot K. Fishman // Cancer. 2003. - Vol. 98, N 9. - P. 2028 - 2038.

133. Israels, L. Apoptosis. / L. Israels, E. Israels // Oncologist. 1999. - Vol. 4, N 4. -P. 332-339.

134. Jerry, T. Thornthwaite. Anti-malignin antibody in serum and other tumor marker determinations in breast cancer / T. Jerry Thornthwaite // Cancer Letters. 2000. - Vol. 148, N 1. - P. 39 - 48.

135. Jones, B.A. Cervical biopsy-cytology correlation. A college of american pathologists Q-probes study of 22439 correlations in 348 laboratories / B. A. Jones, D. A. Novis // Arch. Pathol. Lab. Med.-1996.- Vol. 120. P. 523 - 531.

136. Koss, L.G. The Papanicolaou test for cervical cancer detection: a triumph and a tragedy / L.G Koss // JAMA. 1989. - Vol. 261. - P. 737 - 743.

137. Leslie, R. PREPmate automated processor: Comparison of automated andmanual methods of liquid-based gynecologic sample preparation / Rowe Leslie, C. Jay Marshall, Joel S. Bentz // Diagn. Cytopathol. 2002. - Vol. 27, N 5. -P. 312-315.

138. Linder, J. The ThinPrep Pap test: A Review of clinical studies / James Linder, David Zahniser // Acta Cytol. 1997. - Vol. 41. - P. 30 - 38.

139. Maramatsu, T. Carbohydrate signals in metastasis and prognosis of human carcinomas / T. Maramatsu // Glycobiology.-1993. Vol. 3, N 4.-P. 291- 296.

140. Marluce, Bibbo. Performance of the AutoPap primary screening system at Jefferson University Hospital / Marluce Bibbo, Clementine Hawthorne // Acta Cytol. 1999. - Vol. 43. - P. 27 - 29.

141. Meike, Schoolland. Adenocarcinoma of the cervix. Sensitivity of diagnosis by cervical smear and cytologic patterns and pitfalls in 24 cases / Meike School-land, Stephen Allpress, Gregory F. Sterrett // Cancer Cytopathol. 2002. - Vol. 96, N1.-P. 5-13.

142. Metastatic lobular carcinoma in a ThinPrep Pap test: Cytomorphology and differential diagnosis / Green M. Kimberly, Turyan V. Hach, Jones B. Jennifer, Hoda S. Rana // Diagnostic Cytopathology. 2005. - Vol. 33, N 1- P. 58 - 59.

143. Misra IB-1 and PCNA immunostaining as a diagnostic adjunct to cervical Pap smear / M.M. Goel, Anju Mehrotra, Uma Singh, J.S. Gupta // Diagn. Cytopa

144. Cytopathol. 2005. - Vol. 33, N 1. - P. 15 - 19

145. Monitoring different stages of breast cancer using tumour markers CA 15-3, CEA and TPA / G. Soletormos, D. Nielsen, V. Schioler, H. Mouridsen, P. Dombernowsky // Europ. J. Cancer. 2004. - Vol. 40, N 4. - P. 481 - 486.

146. Monsonego, J. Liquid-based cytology for primary cervical cancer'screening: a multi-centre study / J. Monsonego, A. Autillo-Touati, C. Bergeron et al. // Br. J. Cancer. 2001. - Vol. 84. - P. 360 - 366.

147. Montesano, R. Environmental causes of human cancers / R. Montesano, J. Hall // Eur. J. Cancer. 2001. - Suppl. 8. - P. 67 - 87.

148. Natural history of cervical squamous intraepithelial lesions: a meta-analysis / J. Melnikow, J. Nuovo, A.R. Willan, B.K. Chan, L.P. Howell // Obstet. Gynecol. 1998. - Vol. 92. - P. 727 - 735.

149. Ni, Y. Lectin-carbohydrate interaction in the immune system / Y. Ni // J. Vet-erin. Immunology Immunopathol. 1996, Vol. 55. - P. 205 - 223.

150. Nisreen Fidda. Impact of the new Bethesda System 2001 on specimen adequacy of conventional cervicovaginal smears / Nisreen Fidda, Joel Miron, William H. Rodgers, Anne Rader // Diagn. Cytopathol. 2004. - Vol. 30, N 4. - P. 235-239.

151. Ohta, M. Complement-dependent cytotoic activity of serum mannan-binding protein towards mammalian cells with surface-exposed high-mannose type gly-cans / M. Ohta, T. Kawasaki // Glycoconjugate J.- 1994.-Vol. 1 l.-P. 304-308.

152. Ostur A.G. Natural history of cervical intraepithelial neoplasia: a critical review / A.G. Ostur//Int. J. Genie.Pathol.- 1993.-Vol. 12.-P. 186-192.

153. Pap smear quality parameters of 3 sampling devices used by auxiliary nurse midwives on symptomatic rural Indian Women / Lakshmi Rao, Veena Kamath, Mathilde E. Boon, Manna Valiathan, Anuradha С. K. Rao // Acta Cytol. -2005.-Vol. 49.-P. 249-256.

154. Parkin, D.M. Cancer burden in the year 2000. The global picture / D.M. Parkin, F. I. Bray, S. S. Devesa // Eur. J. Cancer. 2001. - Vol. 37. P. 64 - 66.

155. Parkin, D.M. Global cancer statistics, 2002 / D.M. Parkin, F.I. Bray, J. Ferlay, P. Pisani // CA Cancer J. Clin. 2005. - Vol. 55. - P. 74 - 108.

156. Patterns of CEA-related antigenex pression in invasive squamous carcinoma of the cervix / S.A. Sanders, S.R. Ferryman, F.J. Bryant, T.P. Rollason // J. Pathol. 2005. - Vol. 171, N 1. - P. 21 - 26.

157. Peto, J. Cancer epidemiology in the last century and the next decade / J. Peto // Nature. 2001. - Vol. 411. - P. 390 - 395.

158. Peto, R. The causes of cancer / R. Peto // Eur. J. Cancer. 1999. - Vol. 35, Suppl. 4.-P. 125.

159. Petra, D.K. Comparative evaluation of seven cell collection devices for cervicalsmears / Kohlenger D. Petra, Josefme Stani et al. // Acta Cytologica. 1999. -Vol. 43.-N6.-P. 1023-1026.

160. Phosphorilated high mannose-type oligosaccaride chain of human thyroglobu-lin isolated from malignant thyroid tissue / K. Yamamoto, T. Tsuji, O. Tarutani, T. Osava//Biochim. Biophys. Acta. 1985.-Vol. 838.-P. 84-91.

161. Polymorphisms for chemical metabolizing genes and risk for cervical neoplasia / Sierra-Torres H. Carlos, W. Au William, Arrastia D. Concepcion et al. // Environ. Molec. Mutagen. 2003. - Vol. 41, N 1. - P. 69 - 76.

162. Positive correlation between the frequency of micronucleated cells and dysplasia in Papanicolaou smears / Patricia Guzman, Rita C. Sotelo-Regil, Alejandro Mohar, Maria E. Gonsebatt // Environ. Molec. Mutagenesis. 2003. - Vol. 41, N5.-P. 339-343.

163. Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer: a worldwide perspective / F.X. Bosch, M.M. Manos, N. Munoz et al. // J. Natl. Cancer Inst. 1995. -Vol. 87, N11.-P. 796-802.

164. Prognostic significance of Bax, Bcl-2, and p53 expressions in cervical squamous cell carcinoma treated by radiotherapy / Virach Wootipooma, Nol Lekhyanandaa, Temsak Phungrassamib et al. // Gynecol. Oncol. 2004. - Vol. 94.-P. 636-642.

165. Prognostic value of bcl 2, p53, and Ki67 in invasive squamous carcinoma of the uterine / P. Padovan, R. Salmaso, M. Marchetti, Padovan R. // Eur. J. Gynecol. Oncol. 2000. - Vol. 21, N 3 - P. 267 - 72.

166. Raab, S.S. Can glandular lesions be diagnosed in Pap smear cytology? / Stephen S. Raab // Diagn. Cytopathol. 2000. - Vol. - 23, N 2. - P. 127 - 133.

167. Raab, S.S. Cervical cancer screening by simple visual inspection after acetic Acid / S.S Raab // Obstet. Gynecol. 2002 - Vol. 99. - P. 517 - 518.

168. Reverse lectin histochemistry: Design and application of glycoligands for detection of cell and tissue lectins / H.J. Gabius, S. Gabius, T.V. Zemlyanukhina, N.V. Bovin, U. Brinck et al. // Histol. Histopathol.-1993.-Vol. 8.-P. 369- 383.

169. Richart, R.M. A follow-up study of patients with cervical dysplasya / R.M. Richart, B.A. Barren//Amer. J. Obstet. Gynecol.-1969.-Vol. 105.-P.386-393.

170. Sawaya, G.F. New technologies in cervical cytology screening: a word of caution / G.F. Sawaya, D.A. Grimes // Obstet Gynecol.-1999.-Vol.94.-P.307-310.

171. SCC antigen in the serum as an independent prognostic factor in operable squamous cell carcinoma of the cervix / H.G. Strauss, C. Laban, C. Lau-tenschlager, J. Buchmann, I. Schneider, H. Koelbl // Eur. J. Cancer. 2002. -Vol. 38,N15.-P. 1987-1991.

172. Schiffman, M.N. The epidemiology of cervical carcinogenesis / M.N. Schiff-man, L.A. Brinton// Cancer. 1995. -N 76. - P. 1888 - 1901.

173. Segnan, N. Cervical cancer screening in Italy / N. Segnan, G. Ronco, S. Ciatto // Eur. J. Cancer. 2000. - Vol. 36, N 17. - P. 2235 - 2239.

174. Selvaggi, S.M. Endocervical component: Is it adeterminant of specimen adequacy? / S.M. Selvaggi, B.J. Guides // Diagn. Cytopathol. 2002. - Vol. 26. -P. 53-55.

175. Selvaggi, S.M. Is it time to revisit the classification system forcervicovaginal cytology? / S.M. Selvaggi // Arch. Pathol. Lab. Med. 1999. - Vol. 123. - P. 993-994.

176. Senescent fibroblasts promote epithelial cell growth and tumorigenesis: a link between cancer and aging / A. Krtolica, S Parinello, S. Locckett et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. - Vol. 98. - P. 12072 - 12077.

177. Seregni, E. Biochemical characteristics and clinical applications of alfa-fetoprotein isoforms / Ettore Seregni, Carlo Botti, Emilio Bombardieri. // Anticancer Research. 1995. - Vol. 15. - P. 53 - 55.

178. Serum squamous cell carcinoma antigen and CYFRA 21-1 in cervical cancer treatment / Elisabeth Pras, Pax H. Willemse, Alof A. Canrinus, Henk W.A. de Bruijn et al // Int. J. Radiation Oncology Biology Physics. 2002. - Vol. 52, N l.-P. 23-32.

179. Serum tumor markers in the management of ovarian, endometrial and cervical cancer / Angiolo Gadducci, Stefania Cosio, Angelo Carpi, Andrea Nicolini, Andrea Riccardo Genazzani // Biomed. Pharmacotherapy. 2004. - Vol. 58, N l.-P. 24-38.

180. Shoell, W.M.J. Epidemiology and biology of cervical cancer / W.M.J. Shoell, M.F. Janicek, R. Mirhashemi // Seminars Surg. Oncology. 1999. - Vol. 16. -P. 203-211.

181. Sugar chein multiformity of human carcinoembrionic antigen: difference between normal and tumor-associated subtractions / M. Miura, Y. Fukuyama, T. Hirano, M. Hirano, H. Matsuzaki, H. Oka // Clin. Chem. 1990. - Vol. 35, N 3.-P. 583-584.

182. Surrogate endpoint biomarkers for cervical cancer chemoprevention trials / T.

183. Mack, Ogaily S. Mohammed, Johnston M. Carolyn, Gregoire Lucie, Lancaster D. Wayne, Brenner E. Dean // J. Cell. Biochem. 2004. - Vol. 59, N 23. - P. 113-124.

184. Telomerase in relation to clinicopathologic prognostic factors and survival in cervical cancer / G. Bea A. Wisman, Ageeth J. Knol, Marco N. Helder, Mindert Krans, Elisabeth G.E. de Vries et al. // Int. J. Cancer. 2001. - Vol. 91. - N 5. -P. 658-664.

185. Tench W. Preliminary assessment of the AutoCyte Prep. Direct-to-vial performance / W. Tench // J. Reprod Med. 2000. - Vol. 45. - P. 912.

186. The AutoCyte preparation system for gynecologic cytology / Lydia P. Howell, Robin L. Davis, Timothy I. Belk, Rolando Agdigos, Jesse Lowe // Acta Cytol. -1998.-Vol. 42.-P. 171-177.

187. The Auto-Pap system for primary screening in cervical cytology / D.C. Wilbur, M.U. Prey, W.M. Miller et al. // Acta Cytology. 1998. - Vol. 42, N 1. - P. 214-220.

188. The expression of mammaglobin mRNA in peripheral blood of metastatic breast cancer patients as an adjunct to serum tumor markers / Yung-Chang Lin, Yah-Huei Wu Chou, I-Ching Liao and Ann-Joy Cheng // Cancer Letters. -2003. Vol. 191, N 1. - P. 93 - 99.

189. The importance of the cell sample in cervical cytology: a controlled trial of a new sampling device / C.R. Laverty, A. Farnsworth, J.K Thurloe, R.C. Bowditch // Med. J. Australia. 1989. - Vol. 150. - P. 432 - 436.

190. The role of pretreatment squamous cell carcinoma antigen in predicting nodal metastasis in early stage cervical cancer / H. Lin, C.C. Chang-Chien, E.Y. Huang, C.W. Tseng, H.L. Eng, C.C Huang // Acta Obstet. Gynecol. Scand. -2000.-Vol. 79.-P. 140-144.

191. Tibbs, R.F. Enhancing recovery of endocervical component on gynecologic cytology specimens processed by thin-layer technology / Rita F. Tibbs, Jick Y. Wong // Acta Cytol. -2003. № 47. - P.172 - 176.

192. Trimble, E.L. Untreated cervical cancer in the United States / Edward L. Trimble, Linda C. Harlan, Limin X. Clegg // Gynecol. Oncology. 2005. - Vol. 96, N2.-P. 271-277.

193. Tumour CEA as predictor of better outcome in squamous cell carcinoma of the lung / Giulia Veronesi, Giuseppe Pelosi, Angelica Sonzogni, Maria Elena Leon, Massimiliano D'Aiuto et al. // Lung Cancer.-2005.-Vol. 48, N 2.-P. 233 240.

194. Vandermulen, D.L. The identification of glioblastoma-associated, fucose-containing glycoproteins induced by retinoic acid / D.L. Vandermulen, V.V.T.S Prasad, J.R. Moskal // Molec. Chemical. Neuropathol. 1994. - Vol. 21, N 2 -3.-P. 311 -327.

195. Visual inspection with acetic acid and cytology as screening methods for cervical lesions in Cameroon / A.S. Doh, N.N. Nkele, P. Achu, F. Essimbi, O. Es-same, B. Nkegoum // Int. J. Gynecol. Obstet.-2005.-Vol. 89, N 2.-P. 167173.

196. Visualization techniques colposcopy / Thomas C. Wright, Michael Menton, James F. Myrtle, Carl Chow, Albert Singer Direct // Acta Cytol. 2002. - Vol. 46.-P. 793-800.

197. Weintraub, J. Efficacy of a liquid-based thin layer method for cervical cancer screening in a population with a low incidence of cervical cancer / J. Weintraub, A. Morabia // Diagn. Cytopathol. 2000. - Vol. 22. - P. 52.

198. Wilkinson, E.J. Pap smears and screening for cervical neoplasia / E.J. Wilkinson // Clin. Obstet. Gynecol. 1990. - Vol. 33. - P. 817 - 825.