Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Цитохром Р-450-зависимая монооксигеназная система печени животных при лучевом поражении и его коррекции

ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "Цитохром Р-450-зависимая монооксигеназная система печени животных при лучевом поражении и его коррекции"

МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА, ОРДЕНА ОКТЯБРЬСКОЙ РЕВОЛЮЦИИ И ОРДЕНА

ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ М. В ) ЛОМОНОСОВА

Биологический факультет

На правах рукописи

УДК 612 014.482

ХАКИМОВ АБДУЛХАКИМ >—

ЦИТОХРОМ Р—450—ЗАВИСИМАЯ МОНООКСИГЕНАЗНАЯ СИСТЕМА ПЕЧЕНИ ЖИВОТНЫХ ПРИ ЛУЧЕВОМ ПОРАЖЕНИИ И ЕГО КОРРЕКЦИИ

03-00.01 — Радиобиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва — 1991 г.

Работа выполнена в лаборатории радиационной биофизики биологического факультета (зав- лаб- — доктор биологических наук, профессор Ю- Б- Кудряшов) кафедры биофизики (зав- кафедрой — доктор биологических наук, профессор А. Б- Рубин) Московского государственного университета имени М- В- Ломоносова

Научный руководитель: доктор биологических наук

пофессор Ю- Б. КУДРЯШОВ

Научный консультант; старший научный сотрудник, кандидат биологических наук Л- И- ДЕЕВ

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Б. А- ЦУДЗЕВИЧ

Ведущая организация; Институт биофизики Минздрава СССР

час. на заседании специализированного совета Д-053 05-74 по адресу 119899, Москва, Ленинские горы. Биологический факультет МГУ-

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке, Биологического факультета МГУ-

Автореферат разослан » ]991 г- в

старший научный сотрудник, кандидат биологических наук С- В-КОТЕЛЕВЦЕВ

Защита состоится« 3/ »

1991 г- в —

Ученый секретарь специализированного совета^ доктор биологических наук

О Р КОЛЬО

ОБЩАЯ ХУЖТЕРИСТуЖА РАБОТЫ .'.лТГ.3 настоящее время пэ."чзняв проаоссав, Sc ixas'jr: . см;,/чешюм .эрганпзио и öiE дкмвных -рздста

.и от :eiii гвпя ионйир.'.'аде^ рад: щал.ямяется ак уальЕйз, ¡я i^a» "о-с зяза-лая циг^'хро.ч—1L/0- «гБасй'тя ^геяг-HFi

кз.егда, ло. i.ci3oraiiK£ в зкдо.'газ:'.ат* че-чсс * ps "шсулумэ гечеяп,

б.> oj :слятвль.зай кетао'олг.-зг. air, око ^о крута ьвдог ir ¿.vcs. :os) и, гкзог-зншгс (ковно^отиков) соаяннзнг.й, Bi->r<j~ iq стзягад», zsvprae полота, "гестпвдш, кгщех-'.фонн, рас лечь ::э л тсксяческя-э вецестш (Арчаков, -375). Нарушен*:-! .с зтоЗ спстеш монет пртвэотн х золавленаа дет..— ;шшр; г. эуышш печени и сшкенпв антатоксгчэской рээасте"т-•сгп гормонального статуса,a raise фармако-

aie^:.; чхфг-.^йджа.'.пжи лекарственна^ соединений. Ионизнруг'"-•л радх'4"-' сузезтвенное шдавлендэ imospoM.?-450-3i-

:onr.:o^ : _;.;.зкс:::гс.-1азно21 в ышфоио^ах самцов крпл

ЕаЬаг:- .. -„чет.- a al.- , 1976; Деез а Др., 1^34). 3 то та ■зги тли. .з-гонендя гтой ферментной систем-: а печени сам?:; ко,до векоторцх авторов (Knott , Hill-. , 1973; "ai-a-

wa 2t ai„1976), яноо отсутствует, лпсз гораздо кенеэ

pa^ei:.-:, .-.г/ s^-.эсг сводеикя о посградпадпошшх пзтжяяя'Х гак-соиая^-Лciotats окисления з печени других вдг.аз хазокгл: про-ворзч~Остается нэяскнм такав вопрос о спсгсхсхисз дзизтвъч нлоЕру;.'д.:: рзи»&дл па эту систему.

У читка ваглую роль цлтохром Р-450-заззе:::ол еткрозска-ного о/а.сленая печева ппвоткнх з метаболических процессах ор~ нпз!'.а :: су^эстзешше пострадаадконкые дзманеная характераотдк inioli сг.ст;?с1, прлзодящаэ к наруиэяия процессов превратил злоги~оо::'1 активах веществ з облученном организма, цаи-жахзэ

сходств, ст гобшафедуцре'-дать' й корректировать ля,

представляю* особый интерес. Не исключено, что вклкгаки по аб-кг"Л средств -з-холшекскае схемы лечения'лучевой болезнз. мое т сказать сугдсотзекшЗ пзлого- дельный. эффект.

Цвяъ я с?яо.в'п?е ."-ад'ачи заботы. • 3 связи с вшзеазяо^нкз: , дел ко наетойчо!: бо а явл&лооь взученае состояния цмоаров Р-45 зависимой мслоокс. г& азной системы 'печена животных црп луче:, ом » радении, ого кор?1-тп'П, п ткке шсеяенас вопроса с^оЦг^гл хе:;-стзия лонлзируэдэго облучен; я на даннуи систог.у.

Е сачзп етшл у задачи настоящей-работ входил:;:

1. Изучи 'ь »пли -аствэтпе и качественные изменена« цгтог яяа Р-450 в паче-н сзхцоз я сам.« различных видов зглеотж"; вцг1 р'зва-ТЦ лучевого 30] 115" л., .

2. Иосле,,.ова.ь ; иячне других экстремальных фанасро^ е-л гла,-т.осо?«аяьнсе ¿яг п< чвш' яавотных.

3. Вкяснгть вопрос об. частая эвдогеншх протег-: нагл системы ц^тохро^а Р-450 х.ри дейстаиа различных с-^ст:-?: ' /-п:

торов и о зз&'-.'м-освязи ак? звадш протеаз с перекиси*?: г--".:а з-

■ -Л2Ш!Д0а. . ' -

4. Изучат-» б. гянпа разлыьих радиопротекторов иг

оо повреедец ,е ^}тс;;о;шлруюцай сястрма пр^евн ггзогг*:* г ../.сте-/.;; гонгах ■ .rit.ro и 1п \г1*-о.

Нгту^зя, р тзур,» Провод :ка кошиекзнаа оценка шстр-.^'гзчоя-

нарушений данной заотвш у разтачных видов .улеотник хх;п-•;:о, что те; на: лв~ я являлся характерным проявлением .т/ле-о" 1- »"сгвя. Впер.ле ¡¿ро~;:лонстр:-розаво наличка ддаюелз*сл парусе-вЗ I :оксщярутад й с.-зт-'зц цато-.роаа Р-450 яра ультрайяолетозсп-1 •.•.¡действия, - вяз.- -ли- ;я ваяним гкологическшл {актором з уолоа:..-г г озадаемого яп щеь -я стра'"осферного озонового слоя.

3 f -

■ Выяснено, что одним из механизмов,приводяцнх к наблюдаемым ффс та;.? зри р= " ts ных воз;зпствиях, мсязт являться усилелие iipo-еол ;таческод} ¿.„гр-. ладил щ..еохрома Р-450 Лссле; эвана спо ¡обностъ г-.я эшк ра лс окт«- -оз тред "ГЕр'^а ь jocTpajашионше наруае-zz "зкотэрьг: xapairrep"-тк: сисгзкы щгрс ?.ои5ды.эго окисления.

Тэоре r!'4jck"e i. прс^.тич эсксе значе;;л; ра':зтк. Полученные дан-¿з представление о механизмах. де^ствгя иояизирующе; ;>

^лучения п других экстремальны", факторов на щ:эхром Р-450-зг г>л-вфг. систег.ту iгжрссомильно^о сшсленпя печени мвотннх.

Ьазное практическое значение имею? результата исследовали!' ¡диозапптной ь^релтивяости .радиопротекторов различных классов з ?яях коррекции пострадиационных нарушений данной системы. Эта гзулътаты ;.:огут бить использованы для целенаправленного поиска м.'лк'ояоглчэсклх грапаратов, способных модифицировать систему кросоглального окисления при различных г-ксгремальных воздейст-ях,

- Апроб./отч работы. Результаты диссертационной работы изложены обсуздэг.н з материалах ТУ Всесоюзной межуниверситетской конае-нг^и по биологии хлеткд {Тбилиси, 1985), I Всесоюзного радиоалогического стезда (Москва, 1989), Московского общества иопн-телей природы (1ЛСШ, 1983, 1938).

Диссертационная работа сярсбировапа в лаборатории рацкацпон-'л биофизика кафедры биофизики биологического факультета -ТУ' . '.!.В.Лс"окосоЕа.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 работ.

Структура диссертанта. Диссертация состоит пз введения, сб-за литературы, описания материалов и методов исследован^, из-:ензя и обсуждения рззультатов в пяти главах, шведов и списка гкруе:.:ой литературы. Диссертация ездергпт 20 рисунков z II raí-

лия.• .

■МАТЕРИАЛЫ И "ffilQDîi ИССЛЕДОВАНИЯ В экспе лшэатах аополь,овала половозрелых самцов и самгч крыс шнш "Вастар" (массо i 150-220 г) , мншей линия знк (2С-25г) морских сви'юк l-'ov.i proc 'lia ) (220-280 г); животных содержа ли в виваряч бис"ог/ческого факультета !.ТГУ в обычных условиях ухода и питания.

Общее однократное облучение жквотннх проводила на устаклвке РШ-II (180 хВ, 15 ?лА cu+i 0 m Д1 , мощность дози 0,5 Гр/мш); суспензию мгжросои .¿бдучшь. рентаеновскима лучаш прь. повности дозы облучеиш. .'.О.ГоДшн (/00 кВ, 15 ыА, без фильтров),

В качесгвэ источника У?-азлучения применяли лшинесцонтше эритемные лгмпк tl3-'->0, излучающие главным образом в диапазоне- ' длин воля 2L0S .0 icj и имеющие пик излучения при 312 ти Интенсивность УФ-азлучендя. измеряли с'помощь® 7Ф-раддомб1ра {¿лп игл ' Digital Radiometer; Ultra-Vlolet Products, Ine; s QIA/ С оен-о;ром. В эксчер центах использовали следующую дозу а антенсгз-К'.сть облучения: 120 кДж/м2 и XI Вт/м2. Облучению подверг с-hi: участок-коян ааготннх (плоцздьа примерно 20 gïj?)' с удаленна, за о;, тки до облтчегхч волосятл покровом.

Внделенкэ какросомальноЗ фракция печени: проводили методе* дифференциального центрифугирования (Каруйила, Арчаков, 1977). Концентрации* шкросошльного белка определяли по методу (Schachterle et al, ?oi:uck , 1973). Количественное определение мпкре-сомадьного îL'.Tor.joMj. Р-450 ü.Bg проводила на спектрометре "Spe-cord î<MQ'f (ГДР) по адтоду <Schoene et al. , 1972), Прл раочите количеств 1Щг'россчал^шх цитохромов использовали коэффициенты гкстаккцад àC 450-500 = глг1, для цнтохрош Р-450 и à £ 424~lQ9=r'-5çr,i~I ' с""1 ДЛЯ цитохрома в5 (л0шшга, .Sato, 10 -4).

Определение образовавшегося в процессе амак'пиршщеметилазной

>eai 'чи злрмап ;ег; да провецяла по метод; (i;ssh , 1953) ..ри

: 41. in,: га en- .:Tpi метре ес.ч-сi-гс " С: ЛР). Количество )бразо-

il 1Ш6Г0СЯ фоим- '-ьдтвдэ рас-лиг'залч с пс-ющью гтлллмолярчого

Т

:оэф.?адкс-1та зкотштосл. ''4,12' s' •

Спред.эябчлб кшущеЗоя спектральной козса^нтк дпссоциада Ч Яршнт-с /бс ^р.-'тного .комплекса проводили но "методу ( Schenkmar ct 1..ГЭ67) 'на спектрофотометре " Specord {Д-40" (ГДР)'.

Гидрех:зрэх1'-сз лкнолевой кислоты получали методом ( о1brier , Жд), а окисленную олошюв/v кислоту - катодом (Кудрязов, lot:-:адзе, 19-;2). Концентраздю гидроперекиси линолевой кислоты изне-

, - т

>яди с попользованием коэффициента экстдякщга =25,25ш .

c;,rl ( O'Brien , 1969). Интенсивность аскорсат я НАДФН-зави-жлого пэрокксного окисле¡шя ллпвдов в шшросомах контролировала ю-накоплению радонового диальдегида, определяемого по реакции с ¡-тиобарбхгурой кислотой { ЕоЬп. •, Mverseage , IS44). При опрэде-гении строки деструкции цитохрош Р-450 при протеолитической деградацпз иеьйран макросом печени трипсином суспензию шафосом <5олка/:лл) инкубировала в течение 15 мин-ара 37°С з ерэде, ¡одеркац'зЗ ОД i-.-jI К-фосфагного буфера рН = 7,4 и 0,1-10 Ш трпл-;ана (IOOCO эд. ВЛЕЕ/эт). Протеолиз останавливали добавление;.! :оответстзущего количества трипсин-ингибитора m расчета I 1дг щгпбптора на I ш1 трипсина. Содержание лабильнол а стабильно:» ю отноиенио к трипсину и гидроперекисям линолевой кислота форм щтегхркла Р-450 в мякросоках определяли при экстраполяции (до гересеченля с осью ординат) терминолого участка кривой в аазпеи-:оста стсеэеи разрусенля цпгочша Р-450 от кошентрздии грцпои--:а-л гидроперекиси ( jeffery, 1576, 1977).

В экстярпкзатах использовали следущие радиопротектора:s -Л-■ глиноэтилизотлурокин ддгцдробраяд (АЭГ), 2-аам о.бдягйдро

4-H, I,S-a.¡a3eh (сялтезяр-тайный в лаборатории профессора досеева на кафедре радиох'таи -химического факультета МГУ). 3-ai.ii коцроаш1а»л'ноз'гш1'гш,оосфо.;ная кислота, натриевая содь (raj. 4афос, эхиофос, 27-21),' . ^-Ш'Шдазолатялаьтн Сгисташн) ( рь-ч-э , Швейцария); "'5-к. то.'-ситршпашн (серотонин) ( Recml , Веяграя);

J -3-4 дг.окоп/8п_ 1Э2ила;шн (дофамин), меркаптоэтилаьш д.шидро хлорид "(МСА)\

Результата экспериментов обрабатывали статистически. Достоверность различий оценивала по критерию Стьэдента (Bete, -962}.

ТЕЗ/ГЪТШ И ОБСУЖДЕНИЕ Глава ;. Изучение рол;:' протеаз в усиления деградация ццто-хрома в сечени крыс при лучевой болезни и радио:""-

метичег ком а!»' -кт^ '

При ^аалдю»«: ц<яалогических состояниях, в ^жгй, острой форь'в лучевой болесни в мембранах •эндошсазг.:аглчос;-:ото tví— икулума rt чатцитов усил1.:вается деградация цатохрома F~i5<¡-oe-■ овного íop.JQíua шкросом&льной дотоксицирущей сас:еми пв'гею!. .становлена оь^-л эффекта с усиленном ПОЛ. Получены тан^о уззу.аЬ-аты, свидетельствующие о способности протеаз in-v.itro усиливать деструкцию -дасхрсма Г-45С прь индукции ÚQI б мжросомальшх кгм-браках (СерЗиюаа и др., 1383). Эти данные дают основания хля изучения рота лротеаз в кс.тичествендохйизменош1&х ццтохромг. Р-450 в паченн npi пагол.-гяях, р1звятие которых сопровождается но только усиление 1 IFi, :.о и, активацией автолитических процессов. К числу таких. патоло»«ческах состояний относится'луч«¿а болезнь (Кудряиов, ;.Э6б) и радаоми-та-гический э$$охг, вызываемой введем" •■ ем шшотнш количеств липадюх перокевдоз (Кудпццг--,

Домсадзе, I '■£. ; . - '

о -■■- ..

В связи с этим в касто-здей работе оценивали воз:,югаюсть уча-

<

c?r~ прстеаз з изшиеших цигохро:*л Р-150 в пе^зкя облученных н по,' ргн "Tin; ; лзш:-дых радуом^л.-г'ков тзотних. ля. этой

■i

пел . Спг-.' sftv- чю лзглеиенг. ¡ чу зхвг.тель: '.ста щ та шцфоо» мально-I . цлт ог о"а Г-45С к д- 1ст под "■пиш.пяи, г разлет ше сроки обяуче-кчя -^ивогиг.- рснггзпог kilv'l лу- аия в г ir1 7 ip л после введения ок. иекяс 1 ол -янсюй : чслсты !f"S) в дэзв СДзд/., (1.7:2 т. ■:/кг). -<кс 'л *.мс>гальяко ханше ли з<«з;;оиьостг степени дест! у::-юз :ди'го::роп Р—±50 от чонпэнтггдии трипе ша заявит гетероге} ,ас?ь аул i ге«лцро«да к яротес.тииггэской ,-вградацяг и показатл кглл-ч?я з мел "лабильной" к де;.отт.иа"TOabcœf. фраккяи (рис. I А),

Поел:-: облучения крыс в Дог'З 7 Гр (СДдо/Зо' еншеенив содотт-ння цито'-грека ?~450 в ышсросотльной фракция (до 88> от нор:ли па 3 сутки, до bZ% - ira 5 сутки) сопровсддатссь уьсличением yoTofinv.-восгя оехзгегося дула генопротсида к протеоллтзчесхой дограда-цяя. Зтс БЫрагллс^ь в умекьшежш (вплоть до латного исчезновения) доли "дз'ЗгшпоЛ" Франции дихохтома Р—150 и оикенял (в 1,5-2 газа) сил-^о количества генезрогеида, подвергавшегося деструкции при отеосл!ольео зисокйх концентрациях трипсина (рис. I П, Б) „ Лнглогптглз эффекта бшгз обнаружены й чорэз 24 часа поело введения .'¿тьзт.ллл CC'IÎ в дозе CJI^q/oq, вызывающей радйоггиузгячзегей эффект, с острой Нормой лучевого поразеиня {рис. I Г).

Получонпио дапшэ свидетельствует о ч" о при острой ¿ор-;.!-з лушез^э еог&к~и2Я (па -3-5 сучка) и радиогликеанч^ском &.">Тек-тз. <Ш (X сутки) енляениэ уровня аатохрома Р-1СЭ з лзчеш тпет-них хара/л-орйзуется дредцуяественаоЗ убыяьз части пула ггглолро-тезда.чзчетЕЛте.'гы.'оЯ (доступной) к лрогеэллгячеекоЯ деградации.

Эти результаты да:;т оснозакиз рассматривать активации пуотз-аз как един пз нозкопкых секторов, опродзляагда наряду с :д;те::~ сгфяхацнз* ПСП, усплежз догрэдацип цитохро'ла uo?r.> c-'iry-

10

" 0,05 ■ 0,10 0Д5

. КоадэЕТрация трипсина (ыг/ыл)

Рис. I. Ьтянне т.еп?генс8ского ■ облучения (7 Гр> и ОСЕ- (I,~2 ï^.vk ¡n зкаисгиоста с.'впенз деструкции цитохрсш Р-45С от концентрации трипсина. ■ . - ..

А - контрольные ïакроеош '

Б - 72-ча ;а тсдг облучения- ■ "

Б - 120-чнсса -idc^-i облучения Г - СОК, -4 - at хосле сведения

^ -

чечия и введения липидного радоошглетква.

ГлаЕЧ 2. -дя,'ие УФ-ос тстеняя.-ла.пи~:хром Г-450-зави-дадую

«

.удкг юома жг. „систему окилтени пе; зни.сауюв .крыс Излете ак'-авяоотя оистямы мик^ос ллальясто окислетия печени .¡ивот-шх при ркзли1 -¿к экст^ешлыг-х тег действиях, повышающих уровень токгггсзскгх ве:лес!з в организме ¿ре^ст&зляет оцриделгч-1-:хл интерес, Т. числу.таких агентов относят /й-сблучение. Важность изучения данного воздействия на слате;!у цчтохрома Р-450 . печени связана с гозмояным усилением роли УФ-излученпя, как геологического фактора.

В ми:росомалькой фракции печени УФ-облученных кдвотнпх обнаружено -длительное снижение содержания цитохром Р-450,до 60-70;? эт контрольного уровня на 3-14 сутки после облучения (рис. 2 А).

Изменение аглшопарин-н-деметилазной активности мшфосомаль-гой фракции печени УФ-облученных крыс происходило параллельно 1зкененп) уровня цитохрсма Р-450 (рис. 2Б). К 30 суткам поело ¡йлучен'/л. наблюдалась практически полная нормализация, всех изученных нггг параметров. Эти данные показывают, что-УФ-облучешге ;ачцов крыс в дозе .120 кДя/ы^ приводит, к существенногту (до 65$ гт норглы и длительному .- нечеткое 14 суток) уменьшению содерна-ш цитохрома Р-450 и снялешхю. деметплазной активности !.аг<росо-:альной фракции печени. Достоверных-изменений датохромаТэд з то-ение Х-7 суток после УФ-о.блуче!Ия не наблодали, тогда как з бо-ее поздние сроки (14 сутки) отмечено снижение его уровня на 27£ о сравнении с контролем (рис. 2 В).

Для .вчяснендя-механизмов обнаруженного. действия У5-облучегая а цитохром 'Р-450-завнсЕмую систем кикросошльного окисления аии была изучена возмоаная роль з атом еффокте активзгшл тило-зз-адренаяозой систем-! вследствие висвоЗоздеинл бпол.отпчесни

тр.

Время "осле 7С -облучения, сутки.

Рис. 2. Изменение ^одорквная «итохроыов Р-450 (Л), ¿.г-тотфйв-ден-зтизязкой .активности (Б) и в- (В), л мшсро'сошль.-кой фра:д!с: печени после УФ-облучешм (120 кДнДГ) :<рю..'

х. За 100^ принято содеолаиие нчтохромов Р-450 и Ас и н-амнкога-ркндеметилазвая ьхтг&ноехъ ь шкросшах печени контрольных крас, составляйте пкйгсетсадеиио 0,68+0,02, 0,4^+0,03 нмоль/мг белка, 7,25+0,28 нмгль уоркзльдоггда мИн/г-Т йслкгП

активных веществ.

■ '.ля этой и? "л 1шю изучено влияние адреналгна и гисташна яа с-::сте?..у глок: экс 1геназ ыасросом самцог крнс i> Адреналиг вводили зг'тршлнв'ечьс; ч дозах С200 шгДО, мог,з."ирующш. стрессоьой воздействие (Сслье, 1961) а "ист^шн догесохно и рнутрибрюшинно в 1сзс.х (ссотьетотвезно 100 л I2C мг/xr.V, близки:: к субтоксичеоким 1 оказыв?кщы вырэтешыи фармакологический ьффькт (Гончьреюо, :s-7i).

Через сутки после введзния адр-зналипа наблщали достоверное 1 существенное снижение содержания цитохрома Р-450, цитсхрот в5 1 ашнопириндеметилазной активности микросомальной фракции пзче-III садов крыс.

Подкожное введение гистамина приводило на 3-5 сутки к сниже-шй (до 68р от контроля) уровня цктохрома Р-450 в микросомальной фракции. Изк-знение аминопиривдеметилазяой активности происходило ишфазно и примерно.в такой: же степени, как и изменение содержания цитохрома Р-450. Достоверного изменения содержания цатохрогла 5 при этом-не происходило. , '

Аналогичное снижение уровня цитохрома Р-450 и аминопиривде-етилазной активности, но только в более ранние сроки (уле че-ез сутки) наблюдалось после внугрибрюкинного введения гистаиина.

Полученные данные свидетельствуют о возможности подавления ктивности микросомальной систеш окисления печени самцов крыс ведением им как адреналина, гак и гисташша.

В связи с тем, что ПОЛ и действие дротеолитических фермен-эз рассматривается как дан из основных процессов, ведущих к де-раданпи цитохрача Р-450 и подавлению активности цитохрэм Р-150-ависимой системы микросомального окисления, нами были такие отведены эксперименты по оценке тозмояного участил этих факто-

ров при действии УФ-облучемщ, и,'введении адреналина и гжжмина.

Установлено, что сншсегае содерзхакяя цитохрома Р-450 в лшкро-сог/альной фр.дкцш при всех грех воздействиях не сопровождалось изменением чувствительности пула гемояротеида к деструктива: эму действию гидроперлки''.и линсчевой кислоты.

Иную картину глбидали ори изучений возможной: роли протеаз в сшжешш уровня ци^охрош Р-450 после действия УФ-облучонпя.

Обнаружено, что пзслз У>-облучб1эя происходит ьреимущэсгвен-ное снижение содержания в пуле цитохрома фракции, чувствительной кпротеолитической дс?радащп. Так, на'7-е сутки после УЗ-облуче-ния соотношегие ¡та^ильнюс л лабильных к деструктивному действию трипсина форы цитохрома Р-4и0 увеличивалось в 1,5 раза (табл. I).

Подобных эффчктез' после введения адреналина а гисташна обнаружено не Сыяо,

Таблигд I

Введение /3-облученпя, адреналина и гисташна на соотношение ( и) стабчльлой ( 3 ) и лабильной ( ъ ) к трипсину форм, пито-хром Р-450 в :ликросоыальной фракции печени самцов крыс'

УФ-юб^учение Введение ' Введение

Вашант адреналина . гистамина

5с/г.г д^ мсг7й1г 400 мг/кт:

7-э сутки в/м , 2± час п/к, 5 сут.

Контроль 3,55 ± 0,22 3,67 ± 0,28 ' 3,67 ± О.ЗГ

Опыт 5,/55 ± 0/1 - 3,25 ± 0,26 . 3 ,60 ± 0,30 п < 0,("5

Таким образом, юлученииз данные свидетельствуют, -^о специфика радаациолнсй о псвреддехы системы цитохрома Р-450 заключается не в фак'^е плис-ировання. ее активности, что происходит л

при действии ?Ф~с-5лухэниа, зледенпи адреналина а'гдстамияа, а в и

особенностях развития шогойакторного процесса, включающего уси-

ление ЛОЯ и протеолятической деградации, изменения в составе пула 'мтохрома Р-4ЕГ0 я друг ю процессы.

Глаьа 3. Iпая те рентгеновского обручения'-на цитохт-ом Р-450-зав^сяг^ до /дон)окс"1анчзну ■ су.тв) ¡¡г, /.различных видев животных Дга вт1явлен"зя с-'зциЗике. рад: ац:: чого певреддения. системы м:лосокал1ного одислалия печени предо''. свг~лос-ь тахске необхда-илл наследовать вжяние рентгеновского облгчегия на цитохро,: Р-450-з£зисимуи юноокоигоназдую систегу п?ченл у различных видов животных, так как остается неясным вопрос, обусловлено .ли подавление активности системы микросомалъного окисления у облученных самцов крыс особенностями действия радиации на ее регуляцию у этих :зшотных пли же этот эффект тлеет более общи! характер н является независящим от вида и.дола животных проявлением острой формы лучевой болезни. Для ответа на этот вопрос было изучено влияние рентгеновского облучения в различных дозах на цито- -хром Р-450-завнскмую систему микросомального окисления в печени саздов п-санок трех видов животных: крыс, шоей и морских свинок.

Обнаружено, что при облучении животных в дозе 7 Гр, являющейся близкой к минимальной абсолютно, летальной дозе (ШШД) для саы-цоз и езглок ьипей, а'такне самцов' крыс,' выявлены однотипные изменения исследуемых показателей у всех видов животных. Наиболь-пий радиационный эффект отмечен на 5-7-е сутки , когда 'содержание цлтохрого Р-450 и агдоюпирин-деметллазная активность сшаалась в 1,5-2,5 раза по сравнению с необлучеиным контролем (рис. 3, 4).

7 самок пшоткых радиационный эффект также проявлялся на 57-е сутки посла облучения, однако, у самок крыс и морских, свинок ,члень2ет:о содержания цитохрома Р-450 я снааенле ашшопириндеме-гилазной активности били выралеш слабее (на 20-30,1), чем у об-гученных са'.щов (рис. 4).

I

1г

I 3. .5 7 I 3

> Сутки после облучения

Рис. 3. Влияние рентгеновского облучения в дозе 7 Гр на уровень цитохромов Р-450 ( о ) и ашнопирин деметилазаую активность ( Д ) в микросомах печени аавдов крыс (А),

и морских свинок ^Ь)

и В5 (И)" мышей .(Б)

НО 100

90

ао

§ ?о

•ВЧ

60

50 40

зо|-

3 '

.X.

7 0 1 3 .5

Сугкн. после облучения.

Рис, 4. Влияние рентгеновского облучения в дозе 7 Гр на уровень цигохромов Р-450 (о ) И в5 ( Ш )» ашшошгрщцеметалазвую активность { Д ) а минрооомах печени самок срккс (А), шшей (Б) к морских с санок (В)

В связи. с тем, что для самок крыс доза"7 Гр не являлась м якмально абсолютно летальной дозой,мыждвергли их облучению в зе 8,5 Гр, являющейся таковой для данных животных. Сопостав ь полученных данных, приведенных в табл. 2, с результатами, пре; ставленными. на рис. 3, позволяет сделать вывод с меньшей стегк радиационного поврезэдеюл пдтохром ?-450-завистюй системы мш сомального окисления у самок крыс по сравнению г самцами при < лучении яивотнпх в эквивалентных (по смертности) дозах.

Таблица 2

Влияние общего рентгеновского облучения самок крыс, в дозе 8,5 Гр на содержание цитозрома Р-450,и ашнопирин-п-деые-тилазную активность в микросомах печени

Ваоиант эксперимента

Содержание цитохроы Р-450 % от контроля

Ашнопирин- -деметила нал активность, % от кс роля

Контроль 100,0 ¿4,8 ■ 100,0 i 7,1

5-е сутки после облучения 60,9 ± 15,4 . 73,3 '± 11,8

P С 0,05 Р Z 0,05

7-е сутки после облучения 70,2 Р ±4,5 L 0,05 70,8 - P ¿5,1 / 0,05 .

Наблвдаемая более высокая по сравнению с самками радиопора-гаешсть данной ферментной' системы у самцов яшзотншс может быт: связана с пострадиационным уменьшением количества циркулируемоз тестостерона (¡:.с Unzart , wills ., 1977) - одного из эндогенных регуляторов активности и содержания нптохрома Р-450. Кроме того, имеется данные о более высокой 'устойчивости пула «икросо-сального пдтохрока Р-450 печеш: сакок (но сравнению с самцами) г. процессам лерекасиого окисления лецйдов (Jot £ ery , "oriand et .?■ j.., 1977), лгракаим, по-ввдпмо:.;у, ведуцую роль в усилении

трукции этого гечопротеида в печени облученных животных атонов . и др., IÍ/79; 2а Jas ' , • Bernard , 1982; Деев.Я др., 4). '

Таким образом, иписанные вше даншэ позволяют рассматривать яоние содержания цятохрот Р-450 и активности монооксигеназ-i-истеш микросомальной фракции печени в качестве общего для них. видов низотшгс проявления острой форш лучевой болезни, аг.терной как. для самцов, чак а для. самок, хотя степень проявил этого радиационного эффекта мокэт зависеть от пола и вида отных.

Глава 4. Влияние радиопротекторов на цитохром P-450-завпсянуто монооксигеназную систему микросомальной фракции печени крыс Данше о состоянии, системы цнтохрома Р-450 при химической филактпке лучевой болезни в литературе практически отсутству-в связи с чем остается, неясным вопрос, могут ли известные ра-лротехторц обеспечить эффективную-защиту" этой системы или для й цели необходимо изыскание других специальных средств. В сзя-с этим мы исследовали способность препаратов, относящихся к личным классам радиопротекторов (2-АДТ, АЗТ, МЭА, гаммафос, Tai.aiH, серотовин, дофамин) влиять на активность систеглы цито-на Р-450 и ее пострадиационное нарушение в экспериментах iп

vitro 3 123 vivo •

"На первом этапе работы била изучена способность радиопротеков предотвращать дучэзуто деструкцию, пдтохрома, Р-450 ir vitro . нку сяссобноста рс-дподролекторов влшггь на радиационное позроа-ие цитсхрот. Р-450 приводили, облучая з присутствия радисзалит-

rt п '

прелярятоз (10 - 10' Л) суспензия макросом з дозе'ЮСО Гр, шрэдой деструкци:-,1 данного гошлротецда па 30-60£. Било пока-о, что АЗТ, 2-АДТ а гаммафос лрактакзска не'влияют на стс-тл;.

разрушения цитохрома Р-450, тогда как НЭА оказывал слабое за! пое действие, а представители биогенных атшнов (гистаман, се: нил и дофамин) существенно подавляли деструктивное действги ( лучения. .

В отношении механизмов защитного действия препаратов на г хром Р-450 ш предположили., что наиболее иероятш дьа из них:

1) препараты оказывают защитное действие в результате инг бкрования шщуцировашшх излучением окислительных процессов в пвдах и предотвращения накопления продуктов ПОЛ, вызывающих д трукгщо цитохрома Р-450;

2) препараты связываются с цитохромом Р-450 и делают его : нее доступным для взаимодействия с продуктами ПШ.

- При проверке первого из этих предположений ш установили, что некоторые из исследованных препаратов способны ингибирова; накопление продуктов ПСй (1ЕК-активных продуктов) в суспензии облученных макросом, причем-степень ингибирования практически полностью соответствует их защитному действию на питоном Р-45С

При проверке второго предположения было обнаружено,, что ее ченше препараты (за исключением гачмафоса) при инкубации с ме росомамд, подобно классически субстратам цатохроиа Р-450, инду цирувт характерные спектральные изменения, так называете "спе ры связывания" (Арчаков, 1975).свидетельствующие об образовали комплексов исследованных радиопротекторов с цитохромом Р-450. Как показали проведенные расчеты, значения кажущихся констант диссоциации (К3 ) комплексов радиопротекторов с цитохромом Р— ,варьирует от 0,11 до 0,44 Ш, что 3403115361 на высокое сродстз! препаратов к цитохрому Р-450. Образование комплексов радиопрои торов с цатохромои Р-450 шяет в значитальной степени затрудни: гзаклодепсткю цдтозрома Р-450 с его субстратами и заингибиров?

1С0ЯДЗМ этих суб ; -ратог.. Об зто:.! сзлдетольствуэт и получен-гоми дадпыв об злач-. нда копстаясц Мяхаэдпса К., реакции де~ ¡ллролат-; алтогярка з присутстзди нокоторш: из ассяедзкш-рлд'лопр'отйк'-орсп Как л з случа.- с алазоппранотл, образование снксов радл-опрся .'К^ороз с цглохуоши Р-450 полэт з определак-степэнп зч'лудяи-'Ь взаимодействие дяввдшх перэкясэ* о цито-:ол Р-450 г. озиягг'Заровгть их глзтаболазм на цлтохромз Р-450, з;'льтатэ чего деструкюяг данного гемопротодда будет з знатный стелена предотвращала.

Получеззаэ данниз показала, что западное действие рздаоаро-ороз на ллтохром Р-450'VI-го связано с лх способностью бгрозать ппдгазрованное облучеядеи накопление продуктов ПС£, вг.здах деструкция цктахрогла. Обнаруженная способность радао-зктороз абрачозивать нсмггавксы с цатозрогдоа Р-450, по-влддыо-атрает несколько шньауэ роль, так как зацатаал. эффективность гдованных препаратов не зо всех случаях соответствовала лх эблостл связываться с цктохро-юм а ннгябировать метаболизм :ратов данного гедгацротевда^

'лава 5. Влияние, рздиогпоектороз на лдтохром Р-450-зпвлслмур юксагэназкуа систему эндоплаз;.чтпческого оотнкулума печена.

рп пзучо1сш злняндя радиопротекторов в эксдарлмэитаг на ха-рлстщси фэрмэитатчвной системы шпсхрома Р—450 у крнс,под-уи-гс рентгеновскому облуадндю з дозе 7 Гп, анзываыдза суженое карулекл^, з 1.г.кросс:латыгац сдстз::о окисления печен:! ж-х использовала.- препарата из слросодзрллздх радиопротекторов 2-ДД1, ЛОТ, гаг.глзфс) а баогегпдЗ 2?ш езпотонлн, ззодимлз когорах составляли 1/3 от СД 13/3. эяучстше р?сулг>?а-с:х по .жала, что пороз 120 плсод лс-::::?

облучения в дозе 7 Гр наблюдается. подавление активности спсте: ьнкросошльного окисления печени яивотных, проявляющееся в с:а кенка уровня цитохрама F-450 .(т 70,5 - 9,3%), увеличения Ц < 1,3—1,5 раза) и с нажегши- Умагс (СО,7-8,8,Í) рег-лдаа -н-дед« лирования ашшошриш (таг-л. 3).

При профилактическом введении радиопротекторов ACT, гахта-З са п серотошша была обнаружена лишь тенденция- к нормализации содержания цитохрома Р-450 облученных"ядвотных. Б случае введе LISA иаблвдался достоверный защитный эффект, а использование 2-полностьв нормализовало уровень автохрома Р-450 у облученных за; вотных.' •• •

Наблюдаемое' изменение константы Михаэлиса у облученных крц почти полностьв предотвращалось, введением серотошша и !.-'ЭА. Пр. введении AST наблюдалась тенденция к нормализации Kj„ а 2-АДТ ; гатаафос не оказали никакого защитного эффекта.

Значение v Jjiai,c деметилирования ашнопкрина (таб£,. 3) было почти полностьв нормализовано при профилактическом введении M3J а при введении 2-АДТ возрастало даже, вше .нормального, уровня. ■ Использование AST дало достоверный защитный, эффект, в то -время' Kaic введение гаммафоса и серотошша даншй показатель кэ .изменя При вияекенкд значимости наблцдаешх изменений харакгеристЕ цптохрот-да Р-450 печени зевотных для оценки интегрального состоя пня дэтоксицируицей ферментной систеш был вцбран известный в л тегатуре подход изучения фармакологического действия гексенала (по лрод^тгагелыюстп сна кивотшхх после введения препарата), 6;:отпа::спор:.адяя которого осуществляется данной г>зр:,:елтной сист {¿е--, L-a Зол-в, 1 Г£7).

Из результатов, продобавленных на рис. 5, -видно, что длигс-л; iucn- гексек^ловогд сна у-облучений: в дозе 7 Гр в ле-

Таблица 3.

Влияние редиопхотектэров ьа некоторые показатели цит.схром Р-450-завксиш:. системы иакросодаяьного окисления печени через-120 часов после облучения крыс в дозе 7 Гр (Введеште рэдзопротееторо" за 15 мин до облучения)

Зрриант згеримента

Содержание цито^м Р-45С

Демегилирование аминопирина

)

гтроль 100,0 £ 5,2 0,67 £ 0,17 10,00 + 0,31

0 чениб 74,5 £ 6,8 . 1,72 £ 0,21 5,88 £ 0,43

: (250 мг/кт) X 4 0,05 РХ С 0,002 рХ К. 0,01

■ 114,2 £ 5,8 3,00 £ 0,38 . 8,57 £ 0,51

Рх 0,001 'РХ 0,05

!+о<3 лучение 84,0 £ 7,0 Г, 56 £ 0,18 8,33 £ 0,58

рхх 0,02

:троль учение

ДТ С70 ют/кг) Д Г*" облучение

100,0 +6,9 ,65,6 £ 9,4' р* £ 0,05 85;Э ±9,4-

100,0 £ 6,3

р*3^ 0,05

1,83 + 0,11 2,71 £0,31 рх г. 0,05 З.ЗГ ± 0,33

5,56 ± 0,50

р*3^ 0,001

5,90 + 0,41 4,00 + 0,23 р <; 0,01 6,90 £ 0,48

10,00 +.0,70

р^^. 0,001

троль учение -

(200 иг/кг) юблуч'енпэ

100,0 ± 10.4 61,0 ± 6,.;

р* С 0,05 105,2 + 9,4

82,3 ± 4,2

р^о.ог

1,59 £ 0,17 3,27> 0,35 рх ¿0,05 2,27 + 0,16.

РХ 4 0,02 1,95 + 0,18 .

р^Х 0,002

и,30 + 0,72 5,10 +-0,63 ' о < 0,01 15", 40 + 0,77

12,50 +0,75 рж< 0,05

гроль • 100,0 + 8,5 1,25 ■«• 0,11 6,70 £.0,47

ргение 70,1 + 6,3 5,01 рх 0,35 5,00 + '0,35

Р* ¿0,05 с 0,01 рх ¿Г 0,05

лафос (190 5.е/кгЗ 87,2 £ 10,6 1,52 + 0,10 6,50 + 0,78

лафос+о<5 лучение 85 1 . » £ 12,а 4,51 £ 0,30 ^ 5,50 ± 0,44

?роль ' • 100,0 78 4 + 6,4 1,25 £0,15 10,00 + 0,71

тпние ' ? £ 7,2 6,64 +.0,38 ■ • 7,14 £0,43 р' < 0,05

1ТООТН .50 мг/кг) РХ 2 0,05 РХ 4 0,01

94,5 £ 6,6 1,01 + 0,17 9,69 +0,63

1Тонин+облученае. 03,3 > 5,й 1,51 Р:СС £ 0,11- 7,69- +0,53

¿. 0,01

к -

р'-Х.

по отнсаениа к необлученногду контроля, по отношению к обученному контроля, •

I стзэственнмх кз'ше'цлй детоксздзруздсй ферментативной сясте-хсченл приблизительно з 2 раза 'увеличена по сравнении с нсоб-л.яыгл контролем. Из псследуешх радпоцроекторов ляль МЭД п в юлько меньшой степени 2-АдТ проявили, способность нредотвра-. данный раддацяе.дшЗ эффект, з .о время хак остальные прегга-; не дан?, зацитнс^о действия.

Тзкеел образом, к? изученных радиопротекторов лишь .МЗА оказы-нормалпзуицее действие на зсэ доследованные параметры гшто-п-450-зазЕии?лой системы (урозэнь цитохрома Р-450, К,г

эдоягйггэяькссть гексанадового сна) широсомалыюго окисления, здее активном з этом огнотзния из радиопротекторов оказался у{юс, яри веодспиз которого набладалаоь лишь слабая т'енденцпя реализации параметроз ферментной системы, 'езудътаты проведенных исследований по влиянию радлозашт:длс фатов на детокспцлрувдуз систему печени облученных зизотшх ¡тольствуит'о ¿¿способности I ¿которых активных радиопротэх-существенно сшксать степень деструкции иитохрома Р-450 при тип лучевой болезни (например, гаммафос), что согласуется ЮЩ1ГЛИСЯ представлениями как о различных механизмах действия ■ защитных средств, так и о сложном многофакторном г~юцессе, гридем к сниг.енйв /ровт и активности данного гошпротевда.

ЗЖЖГСШЕ

нензиружцее излучение з летальных дозах вызцвает нзмеке:<де геристик детоксиь лру~з-дпй системы лбчени самцов и самок раз-I видо;< яяво'Яшх, что, па-вцпимоцу, является обгла пролвла-кл'рой формы лучеиого нора-хенас л мояет -способствовать дать-г иаруленпв яоргиыгаго' течения биохимических процессов з гном оргашгшо. .• •

и1радпяцио:миа агглзизкза хараатерг.ешк цдтохрем

BEcicioíi euerem гшкросоыального окисления печет исволшх не í ляются специфпчнкш для ионизирующего облучения и шеэд ту направленность п при других экстремальных воздействиях (У5-.с'л ченке, введение адреналина., гнетами:л), что, возмогло, указгзг на наличие общих механизме обнаружении.: эффекте.

Одним из механизмов снижения уровня и активности :.шкросома ного цатохрома Р—150, при действии иошзгрухаего и УО-облучена является усиление процессов протеолитической деградации в лоче

¡eubptiilix.

Пришлете в качестве модификаторов пострадиационна;-: наруы иаЗ састбш макросогального окисления пэчекц зкавотных представ: талей различных классов радиопротекторов показало отсутствие з, знсимости ш;зду радио эффективностью препаратов и г.х слоообност: предотвращать изменения характеристик данной система после обл; чокил. Дашой факт согласуется с тлеющимися цредставлешиюа кш о различных механизмах действия.радиозащигных средств,' ■ так и с слозном шогофакторном процессе, приводящем к сникешш уровня i активности шкросокачьного' цитохрока Р-450 печени яивотпых, чте необходимо зачитывать при .целенаправленном поиске радиопротекторов.

ВЫВОДЫ

1. Рентгеновское облучение з-дозе 7 Гр вызывает однотипные кз-'-апокия ам1:нол:гаян-до:.ютилаз1:ой активности я. содержания цпто-:г>ог.:а ?—^50 ).нг.росо?.;гльноЕ фракции иочони са'лцов к самок крыс, i^eivs морских свинок, с иакеш-гумои снидекп в 1,5-2,5 раза на

'7—3 сутки после облучения.

2. На С—14 сутаа. после облучения 70 саглцоа кр::о б доз о 120 кГ,?/;г: содетгазеие алтохро-к Р-450 и ваагющрзнтдемзтглазнпя ак-гньих-ть !с:прооо:.:с.-:ы:гГ:'^Т-ксзя печени сникается дз 60-7С> от

3. СншенЕЭ сод^р:гдн;!я цзтохрома Р-450 з микросомах печени ¿с после рентгене .ского облучения гшвотньгх в ьищс/альной абсо-ско летальноч дозе (7 Гр), введения окисленной олеиновой кисло-в полулегальной -.отю CÄgQ^I ,73 пт/кг, а такке 7<3-облученая ¡ровоздается ^лонгшеняем доли фоои цитохрома Р-450, чувствите-шх.к прс-золитической деградации. ;

.1. Профалси-лгачесхов введение LI3A в радаозздитной дозе (200 ¡.г г) почти, практически .полностью нормализует пострараднационнне .оненпя уровня цдтохроиа Р-450, К,, и V;12KC'реакции-к-деметплн-ааяа аияногс-рина в шкросомах печени крыс. 2-АДТ (70 1дг/:ц?) цотзращает скакениз уровня ц^тохрома, Р-450 и v"MaKC данной ро-аи; серотошш (50 иг/кг) нормализует лишь К,, реакции, а гаша-(190 от/кг) не оказывает какого-либо влияния на исследованные юатела радиационного повреждения цптохром P-450-заэдсшой силы шкросомальяого окисления.

5. Способность ЖА, 2-АДТ, гашафоса, АЭТ а серотоняла пред-;aaiaTb постр;-даационное увеличение гексеналового сна на 5-е :и после облучения яивотяых^в дозе 7 Гр в основном соответст-' способности данннх радиопротекторов нормализовать дострадла-зюе нарушение системы цитохрома Р-450 печени крыс. ■ СПИСОК РАБОТ, ОПУШКОВАННЖ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ еевЛ.И., Тспчкшзлля'Г.И., Хакямов А. Возможная, роль протео-в усилении деградации цитохрома Р-450 з почета крыс при лу-й болезни к радиоггаштическом »Лхясте. Труды 1У Зсос .:.;елуни-иетскоЗ коий. по биологии клетки. Тбилиси, 15-20 декабря г., С. 226-228. ' \

зев Л.К., Ахалая У.Я., Пяатопоз А.Г., Полушшна A.B.; Äai'-n-I. Влияние разлячжх экстремальных воздействий- на • цнтохре:.? Маэясвдув систему мпкросомольнсго оглслогпй яечонц геры^.

Доклады ;.Ю1Ш за 1986 г. Общая бдслогия . Наука. 1983. С. :

3. Хагллюв А., Деев .Т.П., Ахаллк М.Л., Платонов А.Г., Касимов Л.К., Куцрязов Ю.Б. Влияние ультрафиолетового облучения активность цптохром Р-^оО-зависгыо? сиитеглы. ыккросоиалького oi ления в нечени крыс. Доклады АН 7зС0Р. Тап-.скт. Нзд-ro "551Г. 1957." й 7. С. 53-55.

4. Десз Х.П., Ахадая 1,1 .Я., Хаходов А., Яркак О.д, Влияние рад; протекторов на пострадиационные изменения цптохро;.:а Р-150 и а; койирин-N-демзтилазной актизиостд в ттгюсопалто:: гракцш: л; чзни крыс. Б ю;.: I Всес.радкоблол.съезд. Тез.докл. М., 1989. С. 702-703.

5. Ахалач .Я., ДеепЛ.П., Заклплз А,, Дораева А . Влияние не которых биогенных а'.жнов на систему иикросогзльного* окисления яечэни крыс, доклады 1.КШ за 1958 г. Об-дая биология. !.'., Наука

ТСЗО п ТА

«L^w-^-1» v. .

6. Ахалая ¡Л.Я., Деев JLJÎ., Платонов А.Г., Хакшоз А. 'Влияние ' рентгеновского облучения на цитохроы Р-450-завве5шую шиоокса-

- геназнуи систем печени у различных видов глшотных. Бпо.логичес кие науки. 1990. S U.C. 47-52.