Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Технологические факторы при разбавлении, замораживании и оттаивании семени баранов

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Аванов, Николай Яковлевич

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Действие холода на гаметы самцов.

2.2. Значение защитной среды при замораживании семени животных

2.3. Замораживание семени баранов

2.4. Оттаивание замороженного семени баранов

2.5. Контаминация микроорганизмами и санация семени животных

3. ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

4.1. Материалы и методика исследований

5. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

5.1. Изучение биохимических и физиологических показателей в цроцессе его обработки и замораживания.

5.1.1. Макроэргические соединения в семени при разбавлении и замораживании в различных средах

5.1.2. Влияние обработки, состава сред и замораживания на "дегидрогеназную активность" живчиков.

5.1.3. Влияние состава сред на резистентность к осмотическому удару семени в цроцесее его технологической обработки

5.2. Действие различных камедей на выживаемость живчиков барана.

5.3. Усовершенствование метода оттаивания замороженного семени барана.

5.4. Влияние спермосана-3 на выживаемость живчиков в разбавленном семени и на устойчивость живчиков к замораживанию.

5. Результаты производственных опытов.

6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

7. ВЫВОДЫ.

8. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Технологические факторы при разбавлении, замораживании и оттаивании семени баранов"

Майский /1982 г./ Пленум ЦК КПСС принял Продовольственную программу, нацравленнуго на решение проблемы обеспечения населения молоком и мясом. Успех в решении затронутой проблемы заложен не только в увеличении маточного поголовья, но и в повышении его продуктивности. Осуществление поставленной задачи возможно лишь при квалифицированном применении метода генотипической селекции,основанного на использовании самцов-производителей, оцененных по качеству потомства как улучшатели.

Метод генотипической селекции имеет црямую связь с искусственным осеменением и получает возможность широкой практической реализации благодаря способу длительного хранения семени производителей цри температуре жидкого азота /-196°С/.

С целью изучения влияния низких температур на живые клетки и предотвращения опасных повреждений цри замораживании и хранении биоматериалов была создана новая смежная отрасль биологии - криобиология.

Дальнейшее развитие метода низкотемпературного хранения гамет требует изучения биофизических и биохимических характеристик, а также биологической полноценности живчиков после замораживания.

Большой вклад в разработку основ криобиологии семени внесли отечественные ученые. Первые исследования были цроведены И.И.Ивановым - основателем искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. Возможность сохранения биологической полноценности и генетической информации после замораживания цри низких температурах была открыта В.К.Миловановым, И.И.Соколовской и И.В.Смирновым от 1947 г. и записана в реестр открытий СССР за № 103. На основании этого открытия цроведена дальнейшая работа по совершенствованию технологии замораживания семени.

Но, если криогенная технология для крупного рогатого скота разработана, внедрена и дает положительные результаты при искусственном осеменении, то в овцеводстве первые опыты осеменения овец замороженным семенем давали лишь до 20% результативности осеменений,

В 1971-1976 гг. рядом НИИ животноводства были проведены поиски причин неудач и разработаны метода длительного хранения семени барана.

Опыты Милованова В.К., Варнавского А.Н. и др. /1975-1978/ показали, что от замороженного семени баранов получаются вполне нормальные ягнята, а по массе при рождении не уступают, а нередко и превосходят контрольных.

В отделе биологии воспроизведения ВИЖа под руководством академика В.К.Милованова выявлены основные причины непригодности технологии замораживания семени быка для замораживания семени барана. Согласно этим данным, особенность семени баранов состоит в отсутствии в нем естественных антиоксидантов и повышенной /по сравне-4 нию с семенем быков/ чувствительностью фосфолипидов мембраны живчиков к холодовым и иного рода взаимодействиям.

Определенные успехи были достигнуты Платовым Е.М. /1976/ путем использования свойства цриродных камедей, в частности - гум-миарбика предохранять живчики от криоповреждений ггри замораживании.

Возможность замораживания семени баранов в среде с гуммиарабиком была доказана цри комиссионной проверке в 1977-1978 гг.

Но наряду с достигнутыми успехами многие воцросы криобиологии и технологии замораживания и оттаивания семени баранов остаются нерешенными.

Наименее изучено действие санирующих веществ на живчиков баранов в замороженном состоянии. Применяемые в настоящее время цриемы санирования получены в основном в результате эмпирических поисков, а не выведены из теоретического анализа результатов эксперимента.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Аванов, Николай Яковлевич

ВЫВОДЫ

1. Методы биологической оценки: определение количества легко-гидролизуемого фосфора АТф+ДДФ, дегидрогеназной активности,физиологической /осмотической/ резистентности и резистентности живчиков к холодовому удару, разработанные для семени быка /ГОСТ 20909.4-75/, не позволяют объективно оценивать влияние сред на семя барана в процессе технологической обработки.

2. При разработке сред для разбавления семени животных их необходимо оценивать по рН, осмотическому давлению и электропроводности.

3. На качество оттаянного семени существенное влияние оказывает как количество оттаиваемых гранул, так и температура оттаивания. Установлено оптимальное количество одновременно оттаиваемых гранул замороженного семени барана - 15 цри температуре 70°С. На качество оттаянного семени значительное влияние оказывает материал, из которого изготовлен оттаиватель. Доказано преимущество стеклянного оттаивателя перед металлическим.

4. Сравнительная оценка защитных свойств криопротекторов,от-носящихся к группе полисахаридов /гуммиарабик, вишневый и абрикосовый клей и инулин/,в составе лактозо-желточно-трис-цитратно-глицериновой среды показала, что на предохранение биологической, полноценности живчиков барана после замораживания-оттаивания они обладают в разной степени защитным действием. Суягность овец,осемененных семенем, замороженным в средах с гуммиарабиком,вишневым и абрикосовым клеем составила соответственно 60,1+3,8; 32,2+6,1; 20,2+4,8%.

5. Санирующий црепарат - "спермосан-3" в составе лактозо-жел-точно-трис-цитратно-глицериновой среды по-разному влияет на выживаемость и оплодотворяющую способность живчиков барана после замораживания-оттаивания. Если в концентрации 25 тыс.НЩ/ЮО мл разбавленного семени црепарат повышает показатель абсолютной выживаемости живчиков и оплодотворяющую способность их от первого осеменения /62%/, то повышение концентрации антибиотика до 50 тыс. достоверно снизило оба показателя. Поэтому цри использовании препарата для санации семени барана необходимо строго контролировать дозирование.

6. При осеменении овец замороженным-оттаянным семенем большое влияние на результативность осеменения оказывает место введения семени. Введение семени по влагалище в сравнении с цервикальным осеменением снижает суягность в 2 раза.

7. Замораживание-оттаивание семени в лактозо-желточно-гуммиа-рабико-трис-цитратно-глицериновой среде не влияет на живую массу ягнят, которая составляет цри осеменении овец, замороженным в ЖГГЦГ среде семенем без спермосана-3, 5,6 кг для бефанчиков и 4,5 кг для ярочек, соответственно в среде в 25 тые.ВД/ЮО мл разбавленного семени спермосана-3 - 4,5 и 4,0 кг и в среде с 50 тыс. ВД спермосана-3 - 5,0 и 4,4 кг. В контрольной группе овец живая масса ягнят цри рождении составила соответственно 5,1 и 4,4 кг.

Максимальное количество двоен - 24,3 и 25,6% родилось от овец, осемененных семенем, замороженным в средах, содержащих спермосан-3 в концентрации 25 и 50 тыс.ВД/100 мл разбавленного семени.

Количество баранчиков в двойнях преволировало над ярочками /13 против 5/ только в группе маток, осемененных семенем с 25 тыс. спермосана-3, в остальных случаях в помете было приблизительно равное количество баранчиков и ярочек.

8. Замораживание-оттаивание семени баранов в лактозо-желточ-но-гумшарабико-трис-щтратно-глицериновэй среде не действует избирательно на живчиков, несущих различные половые гены /х и у/, так как соотношение числа баранчиков и ярочек в потомстве опытных и контрольной групп было одинаковым и составляло 46,5? 53,5 и 48,6:51,4.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Аванов, Николай Яковлевич, Дубровицы

1. Асатиани В.С. Новые методы биохимичечной фотометрии. М.: Наука, 1965, с.495.

2. Балашов Н.Г. Нужно ли применять антибиотики в средах для раз-.бавления.и хранения спермы животных? Молочное и мясное скотоводство; 1966, 9; с.65.

3. Балашов Н.Г. Контаминация спермы быков непатогенными микроба- . ми. Материалы межвузовской конференции по акушерству, гинекологии и искусственному осеменению с.-х. животных. - Ереван, 1971, с.19-21.

4. Балашов Н.Г. Ветеринарный контроль при искусственном осеменении ¡животных. М.: Колос, 1980.

5. Балашов Н.Г., Бутаков А.К., Родина В.Н. Устойчивость к санирукъ ¡цим средствам микроорганизмов, выделенных из замороженной спермы быков. Животноводство, 1978, .6 I, с.51-52.

6. Балашов Н.Г., Родина В.Н. Исследование спермы на бактериальную загрязненность. Материалы научно-производственной конференции ШКИ. М., 1964-1965, с. 181-182.

7. Баранов В.Н. Микотические аборты у коров. Труды Саратовской н.и. ветстанции, 1967, т.7, с.89-94.

8. Бахметьев П.И. Переохлаждение жидкостей. Журнал русского физико-химического общества, 1900.

9. Бахметьев П.И. Итог моих исследований об анабиозе насекомых и план его исследований .у теплокровных животных. Известия1. АН СССР, 1902, В 17, 4 с.

10. Бахметьев П.И. Как я нашел анабиоз у млекопитающих. Природа, 1912, 15 5.

11. Белькевич В.й., Клюгарёва З.С., Ромбе С.М., Филатова Н.В. .

12. О предохранении сперматозоидов от холодового удара. Труды BffilCa, 1959, т.23, с.211-230.

13. Берилло И.Г,1., Пухальский Л.Х. Вопросы длительного хранения спермы быка и барана. Проблемы животноводства, 1936, 10,с.24-40.

14. Бернштейн А.Д., Петропавловский В.В. Влияние неэлектролитов . на переживание сперматозоидов.,- Бюлл. экспериментальной биологии и медицины, 1937, т.З, с.41-43.

15. Бернштейн А.Д., Шергин Н.П. Физико-химические показатели спермы домашних животных. Успехи зоотехнической науки, 1936, т.2, с.5-16.

16. Большая медицинская энциклопедия, 1959, т.12, с.49-50.

17. Боярский В.М. Результаты осеменения овец замороженным семенем. - Овцеводство, 1978, }Ь 8, с.30-32.

18. Бронштейн И.Н., Семендяев К.А. Справочник.по математике для инженеров и учащихся втузов. Лейпциг; М.: Тойбнер; Наука, 1980, - 316 с.

19. Бугров А.Д. Температурный шок в диапазоне температур от 0° До -196° и качество спермы быков и баранов. Доклады советских . ученых к У1 Международному конгрессу по размножению и.искусственному осеменению животных. М.: Колос, 1968, с.77-79.

20. Бугров А.Д. Повреждение спермиев при оттаивании и пути устранения. Животноводство, 1977, J3 12, с.56-59.

21. Бугров А.Д. Разработка теории и практики криоконсервации спермы быков-производителей. Автореф. докт. дисс.ДарькоЕ,1983.

22. Варнавский А.Н. Микробное загрязнение семени сельскохозяйственных животных и меры его устранения. Животноводство, 1963, J5 10, с.66-69.

23. Варнавский А.Н. Ультраструктура живчиков-быка и барана после глубокого замораживания в нидком азоте. С.-х. биология, 1969, т.4, js 3, с.469-472.

24. Варнавский А.Н. Возможная причина снижения оплодотворяющей способности замороженного семени. Овцеводство, 1970, J* 2, с.28-29.

25. Варнавский А.Н. Изучение акросомы живчиков барана с псмощью фазово-контрастной микроскопии. Докл. ВА0ШШ, 1978, В 8, с.33-34.

26. Варнавский А.Н., Турбин.В.Ф. Некоторые итоги изучения замораживания семени барана. Животноводство, 1974, В 6, с.65-67.

27. Билли К., Детье В. Биология. IL: Мир, 1974, с.102-122.

28. Вишневский В.И. Электрометрия биофизических.процессов в сперме быков-производителей при замораживании. Авторе®, канд. дис., Харьков, 1970.

29. Волков A.C. К критике способа замораживания семени в гранулах . Жиео тн ов одс тво, 1974, $ 4, с.56-57.

30. Временные рекомендации по замораживанию и длительному хранению в жидком.азоте спермы бараяов-производителей. Лесные Поляны, 1978.

31. Гармашёва Н.Л. Экспериментальный инфекционный эндометрит. -Л., 1947.

32. Гладционова Е.<3. Влияние.резких понижений температуры на переживание сперматозоидов. Успехи зоотехнической науки, 1937, .!* 4, с.56-64.

33. Голубева Е.Д. Действие пешщиллина и.стрептомицина в разных дозах на качество спермы быков. Сб.науч.тр. Белорусской СХА, 1970, т.7, с.146-150.

34. Голубь B.C. Состав жирных кислот живчиков барана и быка. -Труды ВЖа, т.33, с.205-207.

35. Голубь B.C. Лшщцы семенника, придатка его и живчиков барана и быка. Канд.дис., Дубровины, БЖ, 1971.

36. ГОСТ 14746. Среда глюкозо-цитратно-желточная для хранения спермы быков при температуре 2-5°С.

37. ГОСТ 20909.1-75. Сперма быков неразбавленная. Метод отбора проб.

38. ГОСТ 20909.4-75. Сперма быков неразбавленная. Методы биологических исследований.

39. ГОСТ 20909.5-75. Сперма быков неразбавленная ний физических свойств.

40. ГОСТ 20909.6-75. Сперма быков неразбавленная ческих исследований.

41. Голубь B.C.,-Балашов Н.Г. Изменение некоторых биохимических и биологических показателей спермы баранов при замораживании в различных средах. Тр. ВГНКИ, 1980, В 109, с. 115.

42. Давиденко В.М., Чуксина Н. Оплодотворяемость коров.при осеменении их спермой, оттаянной при разных температурах. Молочное и мясное скотоводство, 1980, if? 2, с.32-33.

43. Дерягин Б.В.Талаев М.В., Федякин H.H. Аллотропия жидкостей при конденсации их паров в кварцевых капиллярах. Доклады АН СССР, IS65, 165, В 3. - 587 с.

44. Дерягин Б.В., Шедякин H.H.' Особые свойства и.вязкость жидкостей, сконцентрировавшихся в капиллярах. Доклады АН СССР, 1962, т.147, ß 2, - 403 с.

45. Дупенко O.A. Новая среда для разбавления спермы барана. -Животноводство, 1980, 7, с.25-26.

46. Евсюков М.Е. Сравнительное изучение и усовершенствование сред для хранения спермы быков. Автореф. канд.дис., Хар6ков,1978.

47. Желтобрюх H.A., Ивахненко В.К. Основные цричины снижения оплодотворяющей способности спермы барана. Тр. ВНИИОК, 1976, в.37, т.2, с.77-84.

48. Методы ислнта-. Методы биохими

49. Живков В., Калев Г., Съдъержание на кисолиннапастворзмата и липидната фоофорна в сдерматозоидите на бик, коч, нерез и . жребец. Ветеринарно-мед.науки, 1965, т.2, tè 4, о.333-337.

50. Жильцов Н.З. Концентрация кислорода в канале зпидидимиса кролика. Докл. ВАСХНЮ1, 1970, В 5, с.38-40.

51. Жильцов Н.З. Трансаминазы и фосфатазы в семени сельскохозяйственных животных., С.-х. биология, 1975, В 10, с.4.

52. Жильцов .-Н.З, , Голубь B.C. Жирнокислотный состав, лшщцов и свободные аминокислоты в секретах семенника и зпидидимиса быка и барана. Тр. ВШа, 1972, т.33, с.198-204.

53. Жильцов Н.З., Голубь B.C. О роли простагландинов в.ре продукции овцематок. С б. if Простагландины, Рига, 1974, с.95-104.

54. Захарова М.Н. Гигиена барана-производителя при искусственном осеменении. Автореф. канд.дис., Ставропольский ОХИ, 1950.

55. Захарова М.Н. Определение общего количества микробов в сперме домашних животных. Тр.Ставропольского СХИ, 1950, В 5,0.21-22.

56. Заянчковский И.Ф., Коленко.Е.И., Трискевич Б.И., Истин Г.К. Задержание последа у коров. Сельхозгиз, 1957.

57. Зверева Г.В. Роль грибов в эмбриональной Смертности у коров. -Докл. советских ученых к 71 Международному конгрессу по раз- . множеншо и искусственному осеменению животных. М., 1968, 53.

58. Зверева Г.В., Чухрай Б.Н., Клевец Л.А. Активность окислительных ферментов в сперме быков и оплодотворяющая способность спермиев. -Докл. ВАСХЕШ, 1981, J" 12, с.19-20.

59. Зверева Г.В., Яблонский В.А. Влияние стрептомицина, пенициллина, белого стрептоцида на дыхание.спермиев быков. Наука производству, Львовский зоовет.ин-т, 1961, т.II, с.109-111.

60. Иванов И.И., ШС/иэ&С- с^ Ш1><Жел1ьл ~

61. Иванов И.И. Искусственное оплодотворение у млекопитающих. -С.-П., 1907.

62. Инструкция по искусственному осеменению овец и коз. М.: Колос, 1970.

63. Инструкция по организации и технологии станции и предприятии., по.искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. -М.; Колос, 1981.

64. Калобухов Н.И. Материалы по изучению спячки и анабиоза у пчел. Зоологический журнал, 1933, $ 4.

65. Калобухов Н.И. Спячка животных. М.: Советская наука, 1946.

66. Калугин 1С.В. Изыскание новых .'защитных средств.,, предохраняющих сперму быков-производителей от повреждающего действия низких., температур при ее глубоком замораживании. Канд. дис., Харьков, 1969.

67. Касьшюв К.Т., Ашимов Ж.Б. Оплодотворяющая способность спермы при глубоком замораживании. Овцеводство, 1975, 8, с.9-11.

68. Касымов К.Т.Ашимов Ж.Б. В кн.: Пути повышения продуктивности животноводства в Казахстане. Алма-Ата, 1975, с.48-59.

69. Кершулис А. Действие различных антибиотиков на.качество семени и его микрофлору. Бюлл. ЛитНИКЖа, 1962, т.1.

70. Ким Е.Д. Фосфолипиды семени сельскохозяйственных животных. -Автореф. кад. дис., Киев, 1966.

71. Клен Р. Заготовка и консервирование тканей, Прага, Госмед-¿, издат, 1962.

72. Кононов Б.П., Голышев H.A., Хачапуридзе З.Л. Оборудование для глубокого охлаждения и оттаивания спермы. Свиноводство, 1975, В 6, о,23-25.

73. Кононов В.П. Тепловое расширение .в сперме при замораживании.-Доклады ВАСХНШ, 1982, В 5, с.32-34.

74. Коротков А.И',, шрченко М., Москалюк М. Хранение семени баранов при температуре минус 78°. Земледелие и животноводство, i960, 13 I,

75. Коротков А.И., Смирнова.В.Л., Москалюк .JvI.H. Динамика АТФ,ДНК .и РНК в семени быка и хряка. В сб.: Разведение и кормление сг-х.животных, Кишинев, Штница, 1973.

76. Котятина В.А., Платов Е.М., Ромбе М.С. Оплодотворяющая способность семени жеребца, сохраненного цри температуре минус 78°. Животноводство, 1963, & 3, с.83.

77. Кржижкоеский К.Н. и др. К биологии сперматозоидов насекомых.-Записки Ленинградского СХИ, 1924, J5 I, с.45.

78. Кругляк А.П, Актуальные вопросы искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. Сельское хозяйство за рубежом. 1983, й II, с.51-56.

79. Кузнецов М.П. Опыты глубокого'охлаздения и длительного хранения семени барана. Новое в племенном.дале и искусственном осеменении. - Материалы Международного семинара. М., 1963.

80. Кузнецов М.П., Куприянова Л.П. К вопросу сохранения семени барана при температуре минус 79°С. Труды ВЙЖа, 1959, т.23, с.171-190.

81. Кузнецова H.A. Первый опыт применения .искусственного осеменения в каракулеводстве. Проблемы животноводства, 1938, В 6,с.85-90.

82. Куклин А.Д. Изучение контаминации микроорганизмами.спермы.жеребцов при замораживании. Канд.дис. - Дивово, М., 1973.

83. Курбатова Р. Опыт ассептического получения, разбавления и технологической обработки спермы быков-производителей. -Молочное и мясное скотоводство, 1973, J3 3, с.39-40.

84. Лакин Г.Ф. Биология. М.: Высшая школа, 1980.

85. Лаптева Т.М. Изучение процессов кристаллизации в замороженном семени жеребца при различных.режимах охладцения. -Автореф. канд.дис., ВНИИОК, 1974.

86. Логвинов Д.Д. 0 чувствительности микрофлоры к.антибиотикам*-Молочное и мясное скотоводство, 1968, В II, с.26-27.87,. Логвинов Д.Д. Профилактика микробного и грибкового загрязнения спермы быков. Труды Харьковского зоовет.ин-та, 1970, т5.о. 87-89.

87. Логвинов Д.Д. Асептическое взятие спермы у быков. Ветери-• нария, 1972, JS 5, с.85-89.

88. Логвинова Н.В. Хранение семени барана при температуре -78°С.-т . Вопросы искусственного осеменения и кормления овец. Ставрополь, 1981, в.27.

89. Логинова Н.В. Причины низкой оплодотворяв мости овец, осемененных замороженным семенем. Овцеводство, 1962, J5 8,с.20-23.

90. Лозина-Лозинский Л.К. Холодоустойчивость и анабиоз у гусениц, кукурузного мотылька. Зоологический журнал, 1937, Jü 4,с. 16.

91. Лопырин А.И., Логинова Н.В. К методике.замораяивания семени барана. Овцеводство, 1958, fé 8, с.31-34.

92. Лянсберг Э.С. Синтетические среды для хранения семени барана.-Агтореф. дис. Дубровицы, 1970.

93. Лянсберг Э.С. Защитное действие гипертонических сред при замораживании семени барана. В сб.: Научные исследования в романовском овцеводстве. - Ярославль, 1975, в.2, с.76-82.

94. Медведев П.И., Фисанович Т.И. Роль криопротекторов как стабилизаторов воды в биологических средах, Успехи современном биологии, 1973, т.75, в.1, с.46-58.

95. Микитас А.К. Оценка качества спермы хряков-производителей на активность дегидрогеназ. В кн.: Вопросы животноводства на юге Украины. Херсон, 1970, с.160-163.

96. S8. Милованов В.К. Обеспечить пункты искусственного осеменения теплыми постройками. Овцеводство, 1932, ib 6, с.18-21.

97. Милованов В.К. Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. Сельхозгиз, 1940.

98. Милованов В.К. Ойислительно-восстановитальный режим при сохранении сперматогенеза сельскохозяйственных животных.вне организма. Труды ЛИО ВИЕ, I940-I94I, т.1, с.180-213.

99. Милованов В.К. Биология воспроизведения и искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1962.

100. Милованов В.К. Эксперимент к.бионике эшщщимиса. Доклады ВАСХНЙЛ, 1975, JS 10, с.26-28.

101. Милованов В.К., Варнавский А.Н., На.ук В.А. 0.природе криогенных повреждений живчиков барана» Вестник с.-х. науки,1970, В 10.

102. Шшованов В.К., Варнавский А.Н., ВарнавскаяВ.А. Разработка, метода глубокого замораживания семени баранов для.длительного хранения. Еивотноводство, 1976, ií 8, с.57-65.

103. Милованов В. К. , Варнавский АЛ., ВарнавскаяВ.А. и др. Длительное сохранение и дальние перевозки семени баранов. -Животноводство, 1978, В II, с.48-53.

104. Милованов B.K., Голубь B.C., Жильцов Н.З. Лизофосфатиды и их значение в технологии хранения семени быка и барана. Доклады ВАСХНИЛ, 1975, № I, с.24-25.

105. Милованов В.К., Ойвадис В.Н., Субботина А.Д., Варнавская В.А. Теоретическое обоснование метода глубокоцервикального осеменения овец. Доклады ВАСХНИЛ, 1980, № 10, с.29-30.

106. Милованов В.К., Селиванова O.A. Разбавители для спермы сельскохозяйственных животных. Проблемы животноводства, 1932.

107. Милованов В.К., Соколовская И.И. Теория холодового удара живчиков млекопитающих. Животноводство, I960, № I, с.3-9.

108. Милованов В.К., Соколовская И.И. Причины эмбриональной смертности и новые возможности улучшения воспроизводства стад. -Животноводство, 1964, № 6, с.75-83.

109. Милованов --В.К., Соколовская И.И. Длительное хранение семени барана и новые возможности крупномасштабной селекции в овцеводстве. Вестник с.-х. науки, 1980, № 12, с.122-132.

110. Милованов В.К., Жильцов Л.С. Комплексонаты металлов в средах для семени сельскохозяйственных животных. Вестник с.-х. науки, 1982, № 2, с.58-65.i

111. Михайлов Н.И. Профилактика бесплодия и малоплодия свиноматок. М.: Колос, 1967,

112. Морозов В.А. Длительное хранение спермы быка. Тр.СибНИИЖа, 1938, т.2

113. Морозов В.А. Влияние переохлаждения и замораживания на сперму быка. Сб. научн.-исслед.работ СибНИИЖа, 1940, № 3,с.58.

114. Морозов В.А. Сохранение семени барана в замороженном состоянии. Овцеводство, 1957, № 10, с.30-33.

115. Морозов В.А.О стеносмотизме живчиков сельскохозяйственных животных. Журнал общей биологии,1959,т.20, № 2, с.39-42.

116. Морозов В.А. Применение для хранения семени баранов гипертонических сред. Новое в племенном деле и искусственном осеменении с.-х. животных. - М., 1963.

117. Морозов В.А. Сохранение спермы барана в замороженном состоянии. Тр. Дагестанского НИИ с.-х. животных. - М., 1963.

118. Мюллерова Ж., Казда И., Палец В. Колинебактериум виридакс и его отношение к расстройствам плодовитости. Доклад на Международном семинаре стран СЭВ, 1961.

119. Наук В.А. Опыты замораживания семени барана цри температуре -79°С и -196°С. Сб.науч.тр. ВИЖа, 1974, в.1, ч.1,с.30-32.

120. Наук В.А., Лянсберг Э.С., Шейкин В.Н. Криогенные изменения в живчиках барана. Овцеводство, 1970, № 10, с.25-27.

121. Наук В.А., Лянсберг Э.С., Шейкин В.Н. Криогенные изменения аминокислотного состава спермиев. Свиноводство, £971, № II, с.21-22.

122. Ожин Ф.В. Технология искусственного осеменения овец. М.: Колос, 1978, с.71-83.

123. Ойвадис Р.Н. Морфологические изменения живчиков цри различных температурных режимах хранения семени. Биология воспроизведения и искусственное осеменение с.-х. животных. - Сб.науч. тр. ВИЖа, 1966, }р 3, с.45-54.

124. Осташко Ф.И. Длительное хранение семени производителей сельскохозяйственных животных в замороженном состоянии. М.: Сельхозиздат, 1962.

125. Осташко Ф.й. О природе холодового удара живчиков. Искусственное осеменение с.-х. животных. 1963, с.22-40.

126. Осташко Ф.И. Причина и механизм холодового удара клеток /половых/. Международный с.-х. журнал, 1964, № 3, с.106-109.

127. Осташко Ф.И. Глубокое замораживание и длительное хранение спермы производителей. Киев: Урожай, 1978.130.0сташко Ф.И., Бугров А.Д. Защитные свойства криоцротекторовпри размораживании спермы. Животноводство, 1980, № 7,с.20-22.

128. Осташко Ф.М., Гайворонский Г.С. Применение фотоэлектроколориметра для определения концентрации сперматозоидов. Мясноеи молочное скотоводство, 1960, № 2, с.43-45.

129. Осташко Ф.И., Лопатко М.И. Новое в племенном деле и искусственном осеменении. М., 1963.

130. Осташко Ф.И., Сердюк С.И., Величко И.М. Профилактика микробной загрязненности спермы быков цри ее длительном хранении. -Молочное и мясное скотоводство. 1971, вып.26, с.3-6.

131. Палий Г.К., Непарада В.П., Волянский Ю.Л., Корпан А.И. Чувствительность синегнойной палочки к антимикробным препаратам. -Ветеринария, 1975, № з, с.80-82.

132. Пантюхова О.И. Влияние обработки црецуция баранов на бактериальную загрязненность семени. Научные труды Киевской опытной станции, 1962, т.8, с.34-36.

133. Паршутин Г.В. Влияние микробов на сперму жеребцов. Труды ВНИИ коневодства, 1981, т.23, с.112-114.

134. Песковатсков А.П., Божко В.А., Южиков М.П. Искусственное осеменение коз замороженным семенем. Животноводство, 1975,1. II, с.75-76.- но

135. Петренкин Ф.И., Зудилин В.А. Санация спермы быков. Молочное и мясное скотоводство. 1978, № 12.

136. Платов Е.М. Осмотическое действие глицерина на сперматозоиды быка. Вестник с.-х. науки, I960, № II, с.59-63.

137. Платов Е.М. Замораживание семени быка в глицериновой компенсированной среде. Животноводство, 1963, № 8, 92-94.

138. Платов Е.М. О механизме действия глицерина цри разбавлении и замораживании семени быка. Доклады советских ученых к У Международному конгрессу по биологии восцроизведения и искусственного осеменения животных. М., 1964.

139. Платов Е.М. Замораживание семени барана в лактозо-желточно-этиленгликолевой среде. Овцеводство, 1965, № 9, с.П-12.

140. Платов Е.М. К цроблеме замораживания семени баранов. В сб.: Разведение и биология размножения животных. - Труды ВИЖа, 1966, т.29, с.355-360.

141. Платов Е.М. Теоретические и црактические основы замораживания семени производителей сельскохозяйственных животных. -Автореф. дис. на соиск.уч.степ.докт.биол.наук. М., Дуброви-цы, 1973.

142. Платов Е.М. Опыт по замораживанию семени. Овцеводство,1977, № 9, с.36-37.

143. Платов Е.М., Волков A.C. Технология замораживания спермы барана. Овцеводство, 1978, № 9, с.35-36.

144. Платов E.M., Николаев Д.И. Действие замораживания на синтез аденозинтрифосфата живчиками барана. Материалы 4-й Всесоюзной конференции по физиологическим и биохимическим основам повышения продуктивности с.-х. животных. 1966, кн.2.

145. Платов Е.М., Ойвадис Р.Н., Аби Сааб С.Ф. Оттаивание спермы, замороженной в соломинках. Молочное и мясное скотоводство, 1976, № И, с.33-34.

146. Плохинский H.A. Биометрия. Новосибирск, Сибирское отделение АН СССР, 1961.

147. Плугатьгрев В.П. Грибковая флора свежеполученной спермы в цре-пуциональной полости быков-цроизводителей. Труды Харьковского зооветинститута. 1970, т.5.

148. Поспелов А.И., Попов С.И., Миронов Применение стрептомицина и пенициллина цри искусственном осеменении коров. -Сб. работ, Ленинградского вет.ин-та, 1962, вып.24,с.99-102.

149. Раднабазарон В.Д. Изучение избирательной способности оплодотворения у мясных пород крупного рогатого скота. Канд.дис. М., 1954.

150. Репко А.Н. 0 грибковой загрязненности спермы быка. Доклады ВАСХНШ1, 1968, № 3, с.27-29.

151. Романькова Н.К., Науменков А.И. Санация спермы жеребцов. -Воспроизводство и улучшение конского поголовья. Б.М., 1979, с.63-68.

152. Рэ Л. Консервация жизни холодом. Медиздат, 1962.

153. Сахаров Н.Л. К изучению холодостойкости насекомых. Журнал опытной агрономии Юго-Востока, 1925.

154. Семенов С.Л. Микрофлора и методе, санации спермы сельскохозяйственных животных. Труды Кишиневского СХИ, 1955, т.5,с.124-129.

155. Силаева М.В. Сравнительная оценка и усовершенствование сред ^ цри искусственном осеменении: свиней.-Автореф.канд.дис.,1973.

156. СкатИИН:. П.Н. Температурный шок сперматозоидов жеребца. -Доклады ВАСХНШ1, • 1940, № 8, с.29-34.

157. Скаткин П.Н. Оптимальная температура хранения спермы жеребца.-Доклады ВАСХНШ1., 1940, № 12, с.23-29.

158. Смирнов И.В. Сохранение спермы животных посредством глубокого охлаждения. Канд. дис., 1949.

159. Смирнов И.В. Сохранение семени сельскохозяйственных животных посредством глубокого охлаждения. Советская зоотехния, 1949,4.

160. Смирнов И.В. Сохранение семени сельскохозяйственных животных цри температуре —78°С. Социалитическое животноводство, 1951, № I.

161. Смирнов И.В. Техника глубокого охлаждения семени сельскохозяйственных животных. Сб. Трудов Харьковского зооветинсти-тута, 1956, № 8.

162. Смирнов И.В. К вопросу о холодовом ударе спермиев. Научные труды Киевской опытной станции животноводства, 1961, № 7,с.61-70.

163. Смирнов И.В. Действие осмотических факторов на спермиев быкови хряков. В сб.: Резервы увеличения продукции животноводства. Киев: Урожай, 1964, с.89-93.

164. Смирнов И.В.'К теории глубокого охлаждения спермы. Животноводство, 1974, № II, с.65-70.

165. Смирнов И.В. Влияние температуры на осмотическую устойчивость спермиев. Животноводство, 1976, № I, с.61-64.

166. Смирнов И.В., Эль-Менуфи А.Х. Двухступенчатое оттаивание замороженной спермы быка. Животноводство, 1980, № 3, с.50-51.

167. Смит 0. Биологическое действие замораживания и переохлавде-ния.' М. :Й.Л., 1963.- из

168. Соколовская И.И. Может ли замороженная сперма оплодотворить и давать потомство? Доклады ВАСХНИД, 1947, № 6, с.21-23.

169. Соколовская И.И. Как избежать попадания микробов в семя. -Овцеводство, 1962, № 9*

170. Соколовская И.И. Новый способ оттаивания глубокоохлажденного семени животных. Животноводство, 1975, № 12, с.55-57.

171. Соколовская И.И. Новая модель оттаивания спермы животных. -. Молочное и мясное скотоводство, 1976, № 12, с.29-30.

172. Соколовская И.И., Дроздова Л.П., Голышева IVI.H. Значение антибиотиков, сульфоцрепаратов и витаминов для сохранения семени" вне организма. Известия ТСХА. М.: Сельхозгиз, 1956,вып.12.

173. Справочник по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. М.: Россельхозиздат, 1973.

174. Турбин В.Ф. Методы быстрого замораживания семени быков-производителей. Животноводство, 1966, № 10, с.70-75.

175. Турбин В.Ф. Современные методы замораживания семени быка. -Животноводство, 1968, № 3, с.87-89.

176. Францевич Л.М. Обработка результатов биологических экспериментов на микро ЭВМ "Электроника" БЗ-21". Киев. Наукова думка, 1979.

177. Хабибуллин Х.Х. Способы длительного хранения семени быка в замороженном состоянии. Молочное и мясное скотоводство, 1958, № 6, с.40-42.

178. Хабибуллин Х.Х., Калюжный С.М. Опыт искусственного осеменения коров семенем, сохраненным цри 0°. Сб.: Новое в биологии размножения. М., НЙЖ, 1951, с.212-217.

179. Шайдуллин И.Н. Икусственное осеменение овец глубокозаморо-женным семенем. Животноводство, 1977, № 8, с.53-61.

180. Шергин Н.П. Кислотность спермы. Проблемы животноводства, 1935, № 12, с.100.

181. Шергин Н.П. Дыхание спермы. Сб.: Искусственное осеменение животных. М., 1940-1941.

182. Шергин Н.П. Аминокислотный состав и изменения белка и других компонентов семени быка и барана в цроцесее хранения при низких температурах. Труды ВИЖа, 1959, т.23, с.191-210.

183. Шергин Н.П. Биохимия сперматозоидов сельскохозяйственных животных. М.; Колос, 1967.

184. Шергин Н.П., Несмеянова Т.Н., Кузнецов М.П. Реакция среды, анабиоз и сохранение жизнеспособности сперматозоидов. -Доклады ВАСХНИЛ, 1941, $ 2, с.34-37.

185. Яковлев Т.Е. К воцросу о санации спермы и половых путей животньк при искусственном осеменении. Материалы конференции молодых ученых, Краснодар, 1968.

186. Bahnik Ь.,Chrudim C. Bacterialni flora spermetu byku a jeji vztah к plodnosti veterinarstvi. Praga, 1969, No.2.

187. Blackshaw A.W. The effect of aquilibration and addition of vatious sugars on the revival of spermatozoa from -79°C.-Austral. Vet.J.,1955, vol.31, No.5, p.124-128.

188. Blackshaw A.W. Factor affecting the revival of bull and ram spermatozoa after freezing to -79°C. Austral.Vet.J., 1955, vol.31., No.9, p.238-241.

189. Blackshaw A.W., Emmens C.W. Survival of deepfrozen mammalian spermatozoa. Veter.Kec., 1953,vol.65, No.48, p.872.

190. Blackshaw A.W., Salisbury G-.W. Factors influencing metabolic activity of bull spermatozoa . Gold shock and its prevention. J.Dairy Sci., 1957, vol.40, No.9, p.I099-IIG6.

191. Cunsaluj J.C.,Campbell G.J.,Beck G,H.,Salisbury G.M. -2he bacteriology of bull semen. The effect of bacteria upon rapid. Tests for semen quality. J.Dairy Sci., 1944, No.27,p.357.

192. Dimov V.N.,Petkov Z.Z.,Georgiev G.S.,Marinov M.F. Investigations into the fertilization capacity of frozen ram semen treated with prostaglandines. ДОКЛ. Болг. Акад. наук, 1979, Т.32, Ш 3, с. 361- 363. "

193. Doebbler G.F.,Rinfret А.Р. Cryobiology, I965,vol.3,p.205.

194. Doyle A.W.,Brien H.V. Genital tract infection with candid albicons(monolea) in a thoroubred mare. Irisch.Veter.J.Vol. 1969, No.23, p.90-91.- 116

195. Dunn H.O., Larson G,S.,Willet E.L. The effect of freezing bovine spermatozoa in extenders containing antibacter: at agehts. J,Dairy Sci., 1953, vol.36, p.728- 732.

196. Emmens C.W.,Blackshaw A.W. The low temperature storage of ram,bull and rabbit spermatozoa. Austral. Vet.J., I960,v.26, No.9, p.226-228.

197. Engley F.B. Jef.Rep.Biol.Med.,1956, No.14, p.10.

198. Feredean F.,Bragaru F. Contributii la studine conservarii spermei de berbec prin congelare la 79°C. Lucrari Stiintifice Inst.Cercetari Zootehn.,1962, No.21,p.357.

199. First N.J.,Sevinge A.,Henneman H.A. Fertility of frozen and infrozen ram semen. J.Anim.Sci., I96I,vol.20, No.I,p.79-84.

200. Foote R.H., Bratton A. The fertility of bovine semen in extenders containing sulfanilamide,Penicilline, Streptomycin and Polimyxin.

201. Gomsalus L.C.,Salisbury C.W., Willet E.L. The bacteriology of bull semen. J.Dairy Sci., 1941, vol.24, p.911.

202. Gustafsson B., Edqust S., Einarsson S.,Longe F. The fertility of dee'p-frozen ram semen supplemented with PGKE^. Acta Vet.Scand., 1975, vol.16, No.3, p.468-470.

203. Hancock G.L. The morphology of bull spermatozoa, J.Exp, biol., 1952, No.29, p.445.

204. Hartree E.F.,Mann T.; Plasmalogen in ram semen and its role in sperm metabolism. The Biochem.J.,1959, vol.71, No.3, P.423-434.

205. Hartree E.F.,Srivastava P.N. Chemical composition of the acrosomes of ram spermatozoa. J.Repr.Fert.,1965,No.9,p.47.- 117

206. Healy P. Effect of freezing on the ultra-structure of tlie spermatozoa of some domestic animals. J.Reprod.Fert., 1969,v.I8, No.I, p.21-27.

207. Hese R., Schaf er W. ,Baum W. 'i'iefkiihlkonservierung von bchaf-locksperma unter Verwendung von flüssigen Stickstoff "bei -I96°C.-Fortpflanz.Besamung und Aufzucht der Haustiere., I967,No.3-4,p.I67-176.

208. Haagland H.,Pincus G. Revival of mammalian sperm after im-mersoon in liquid nitrogen. J,Gen.Physiol.,1942, Ho.25,p.337-344.

209. Honmode G. Observations on some factors influencing vitality of ram semen during its freezing and thewing. Indian Vet.J., 1979, vol.56, No.8, p.663-666.

210. Howard T.H., Vasquez L.A.,Amann R.P. Antibiotic control of Campylobacter fetus by three extenders of bovine semen. J.Dairy Sci., 1982, 65, 1596-1600.

211. Gones R.C.,Martin J.C. Deep-freezing ram spermatozoa the effect of milk yolk-citrate and syntetic diluents containing sugar. J.Reprod.and Fertility, 1965, vol.10, No.3, p.413-423.

212. Gones R.C-. The use of dimethyl sulfoxide glucerol and reconstituted skim milk for the preservation of ram spermatozoa. Austral-, J.Biolog. Sci. , 1965, vol.18, No.4,p.887-900.

213. Karrow A.M.,Webb W.R. Cryobiology, 1965,vol.2, No.3,p.99.

214. Lingleton E.E.,Schimons G.C. Bacteriological study of semen from intensivaly housed bulls. Queensland a.Agric.,Anim. Sci. ,1969, No. 6.

215. Lovelock J.E. The physical instability of human red blood cells. Biochem.J., 1955, No.60,p.692-696.

216. Lype R.T.,Abraham K.A.,Bhargava P.M. Further evidence for a positive role acrosome in the uptake of labelled amino acids by bovine and avian spermatozoa. J.Reprod.Fert.,1963, No.5,p.151.- 118

217. Mann T.,Lutwak-Mann C. Biochemical changes under-lying the phenomenon of cold-chock in spermatozoa.- Arch.Sci.Biol., 1955, vol.39, p.578-588.

218. Martin J.C.,Watson P.F. Artificial insemination of sheep: effects on fertility of number of spermatozoa inseminated and of storage of diluted semen for up to 18 hors at 5°C. Therio-genology, 1976, No.5, p.129-135.

219. Olaffson P. Intrauterin inseminasjon av soyer med dypfro-sset saed. Nord.veterinarmed., 1979,vol.31, No.7-8,p.297-301.

220. Parez M.,Guillo B. Action des antibiotiqus sur les sper-matozoides de Tauren vibrata factus et Tricomones factus. Re-cucil med.veterin., 1958, vol.134, p.I57-I6I.

221. Phillips P.H.j Preservation of bull semen.- J.Biol.Chem., 1939, vol.4, No.5, p.130.p

222. Phiilips P.H., Lardy E.A. A yolk buffer pabulum for the preservation of bull semen. J,Dairy Sci., 1940, No.23,p.399.

223. Pockett B.W.,Koncharek R.J. Evidence for loss of lipia from bovine spermatozoa due to freezing. J.Dairy Sci.,1964, vol.47, No.4, p.905-908.

224. Polge C.,Rowson L.E.A. Fertilizing capacity of bull spermatozoa after freezing at 79°C. - Nature, 1952, vol.169,p.4302.

225. Quinn P.J.,Salamon S.,White J.G. The effect of cold shock and deep-freezing on ram spermatozoa collected by elec-tical ejaculation and by on artificial vagina. Austral.J. Agrie.Ees., 1968, vol.19, Ho.I.

226. Quinn P.J,,White J.G. The effect of cold shock and deepfreezing on the concentration of major cations in spermatozoa.-J.Reprod.Fértil., 1966, vol.12, No.2, p.20.

227. Quinn P.J., White J.G.,Clecland K.W. Chemical and ultrastructural changes in ram spermatozoa after washing cold chock and freezing. J.Reprod,Fértil., 1969, vol.18,No.2,p. 209-220.

228. Rajamannan A.H.; Freezing and ferztility studies with stallich semen. VI Congr.Intern.Reprod.Anim.Insem.Artif.-Paris, 1968, No.2, p.I60I-I604.

229. Rowe O.W. Cryobiology, 1966, vol.3,No.I, p.12.

230. Ruiz Garate G.I.,Martin Zancaja. Control microbiologic© de las pajuelas utilizadas en inseminación artificial gonade-ra» An Inst.invest.vet., 1976-1977, No.24, p.211-213.

231. Sachs J. Untersuchungen über das Erfriezen der Pflanzen. Landwirt.Versuchsstationen, I860, No.2,p.167-204.

232. Salaraon S. Observations on fertility of ram semen frozen by different methods. Austral.J.Expt.Agrie.and Animal Husbundjfcy, 1967, vol.29, No.7,p.559-561.

233. Salamon S, Deep freezing of ram semen: vecovery of spermatozoa after pelleting and comparison with other methods freezing. Austral.J.Biol.Sei., 1968,vol.21,No.2,p.351-360.

234. Salamon S.,Lightfoot R.G. Fertilization and ambyonic 1 loss in sheep after insamination with deep frozen semen. -Nature, 1967, vol.216,p.194-195.- 120

235. Salisbury G.W.,Fuller H.K.,Willet E.L. Preservation of bovine spermatozoa in yolk-citrate diluent and field results fromits use. J.Dairy Sei., 1941, No.24,p.903.

236. Salisbury G.W.,Knodt C.B. The effect of sulfanilamide in the diluent upon the fertility of bull semen. J.Dairy Sei., 1947, vol.30, p.361-369.

237. Salisbury G.W.,Van-Bemark N.S. Physiology of reprodicti-on and artificial insemination of cattle. -W.H.Freeman and company San-Francisco and London. 1961.

238. Schettles l.B. The resporation of human spermatozoa and their response to various gases and low temperatures,. Amer. J.Phisical., 1938, No.2, p.128.

239. Sharma S,C,Singh S., Desai R.N. The utility of the various antibiotics and sulpfa dungs in bovine semen. Indian ve-terin., 1962, vol.39, No.12, p.648-656.

240. Smith A.U.,Polge C. Microscopic observation of living freezing and theewing. J.Biol.Micro.Soc.,1951,vol.71,No.2, p.186-195.

241. Stoyc H.,Magier R.,Dieckmann W. Versuche zur Verlegung des Auftan verganges von Tiefgefricsperma ins weibliche Genitalle beim Rind. Zuchthygiene, 1966, No.3.

242. Szy-Hsiao W.,Alliker O.R. The effect of Bacteria cole on the semen of bulls,rames and rabits. Sta techn.Bull.Ore. Agric.Expsta., 1933, No.27 , p.33.

243. Visser D. The effect of freezing method on the survival of ram spermatozoa. Soc.Agric.J.Anim.Sci.,I974,vol.4,No.2, P.157-163.