Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Структурный полиморфизм ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Ca2+ и их стехиометрия

ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Содержание диссертации, кандидата физико-математических наук, Хусаинова, Раиля Сагитовна

ВВЕДЕНИЕ.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

§ 1. Структурный полиморфизм фосфолипидов.

§ 2. Влияние ионов двухвалентных металлов на свойства фосфолипидных мембран.

§ 3. Структурный полиморфизм ДНК-липидных комплексов

П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

§ 1. Препараты.

1.1 Общая характеристика использованных препаратов

1.2 Приготовление буферных растворов.

1.3 Приготовление растворов ДНК.

1.3.1 Дополнительная очистка ДНК.

1.3.2 Диализ растворов ДНК.

1.3.3 Получение фрагментов ДНК.

1.3.4 Определение размера фрагментов ДНК методом электрофореза.

1.3.5 Определение чистоты и нативности ДНК с помощью спектрофотометра.

1.3.6 Определение концентрации растворов ДНК.

1.4 Определение концентрации раствора СаСЬ.

1.5 Получение фосфолипидных липосом.

1.6 Приготовление ДНК-фосфолипидных комплексов

§ 2. Акустические измерения (ультразвуковая велосиметрия)

§ 3. Микрокалориметрические измерения.

§ 4. Электронная микроскопия.

§ 5. Калибровка приборов.

Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

§ 1. Обнаружение основных типов структур ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов

Са2+.

§ 2. Изучение факторов, определяющих структурный полиморфизм ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Са2+.

§ 3. Исследование динамики структурного полиморфизма комплексов ДНК-Са2+-дипальмитоилфосфатидилхолин в зависимости от молярного соотношения

ДНК/фосфолипид.

§ 4. Определение стехиометрии связывания нуклеотидов ДНК с молекулами дипальмитоилфосфатидилхолина в присутствии ионов Са2+.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Структурный полиморфизм ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Ca2+ и их стехиометрия"

Актуальность темы

Структурные исследования ДНК-липидных, а именно, ДНК-фосфолипидных взаимодействий, занимают одно из центральных мест в изучении ДНК-мембранных контактов и исследовании молекулярных механизмов транслокации молекул ДНК через мембраны живой клетки, что является важной задачей физико-химической биологии, решение которой имеет большое практическое значение. Так, в последние годы, в связи с многочисленными экспериментальными данными о возможном участии фосфолипидов в процессах трансмембранного переноса полинуклеотидов и экспрессии генетической информации в клетке, большое внимание уделяется использованию ДНК-фосфолипидных комплексов в качестве невирусных систем доставки генетического материала в клетки-мишени. Широко используемые в настоящее время в качестве трансфекционных векторов катионные липиды обладают выраженным токсическим эффектом in vivo. Это обстоятельство заставляет обратиться к природным и синтетическим фосфолипидам, использование которых представляется особенно перспективным, так как именно фосфолипиды составляют большую часть бимолекулярного слоя липидов, являющегося основой всех мембранных структур клетки. Фосфолипидный бислой традиционно рассматривается как главный диффузионный барьер, отделяющий внутриклеточное пространство от внешней среды и разделяющий компартменты клетки. Представление о двойном слое молекул липидов, как о пассивной, сугубо инертной структуре, которая помимо упомянутого диффузионного барьера представляет лишь некий матрикс для размещения функционально важных мембранных компонентов, в настоящее время претерпевает существенные изменения. Цито плазматическая мембрана осуществляет не только функции переноса веществ, необходимых для метаболизма, но и выполняет информационно-регуляторную роль. Велика роль мембраны в межклеточных взаимодействиях и контактах. В соответствии с современными представлениями, все разнообразие биологических функций мембран, связанных с экзо- и эндоцитозом, избирательной проницаемостью ионов, транспортом макромолекул, в том числе и молекул ДНК, процессами межмембранного взаимодействия, является возможным благодаря способности фосфолипидов мембраны к полиморфным структурным перестройкам, сопровождающимся локальными нарушениями бислоя, а также образованием небислойных структур /Cullis R.P., De Kruijff В., 1979; Lindblom G., Rilfors L., 1989;

Landh Т., 1995/. Цитоплазматическая мембрана функционально и структурно связана с другими субклеточными компонентами: ядром, митохондриальными, микросомальными мембранами, мембранами эндоплазматического ретикулума, микротрубочками и микрофиламентами. Поэтому даже незначительные локальные структурные перестройки цитоплазматической мембраны под действием физических, химических или биологических факторов могут привести к генерализованным структурным перестройкам внутри клетки, и, как следствие, к значительным изменениям ее функционирования. Изменение фазового состояния липидного бислоя мембраны отражается не только на проницаемости мембран, но и на структурно-функциональных свойствах белков: в области фазового перехода липидов, отмечаются изменения их каталитических и транспортных свойств.

Инициатором изменений структуры и фазового состояния фосфолипидного бислоя мембраны клетки может выступать ДНК. Так, было показано, что трансмембранный перенос ДНК может сопровождаться изменением фазового состояния липидов, процессами слияния мембран и образования небислойных структур /Боровягин B.JL, 1987; Тараховский Ю.С., Хусаинов A.A., Иваницкий Г.Р., 1991, 1995/. Обнаружена структурная реорганизация мембраны вследствие образования ДНК-мембранных контактов, играющая существенную роль в процессах инициации и развития репликации ДНК /Gomez-Eichelmann, 1975, Hanania, 1973, Rakow, 1975/. Более того, с помощью биохимических методов, рентгеноструктурного анализа и микрокалориметрии доказано, что фосфолипиды являются важным компонентом хромосомной ДНК, структурно-функциональная роль которых до сих пор остается неясной /Стручков, Стражевская, 1993/.

Вот почему изучение ДНК-фосфолипидных взаимодействий в настоящее время является достаточно острой областью научных исследований.

Изучение ДНК-фосфолипидных взаимодействий, как область исследования, находится на стыке таких наук как молекулярная биология, биофизика, физическая химия. Это определяет использование широкого комплекса высокочувствительных биофизических методов, которые необходимы для изучения структурной организации ДНК-фосфолипидных комплексов. В настоящей работе были использованы такие методы исследования, как дифференциальная сканирующая калориметрия, акустическая велосиметрия, электронная микроскопия, с последующей компьютерной обработкой полученных данных.

Для изучения структурной организации ДНК-фосфолипидных комплексов в качестве модели была выбрана система: ДНК (фрагменты геномной ДНК тимуса теленка 100-300 пар оснований) - ионы металла (II) (Са2+, 20 мМ) -фосфатидилхолин (природный и его синтетический аналог). Выбор фосфатидилхолинов в качестве объекта исследования был обусловлен тем, что фосфолипиды этого класса, как правило, составляют достаточно большую часть фосфолипидов плазматических мембран различных клеток. Поэтому основная часть исследований методом электронной микроскопии по обнаружению типичных структур, образующихся при ДНК-фосфолипидных взаимодействиях, была проведена на комплексах ДНК с яичным лецитином (природными фосфатидилхолинами). Для проведения исследований методами дифференциальной сканирующей калориметрии и акустической велосиметрии было целесообразно использовать синтетический аналог природных фосфатидилхолинов дипальмитоилфосфатидилхолин (ДПФХ), вследствие насыщенности связей в ацильных остатках.

В ДНК-фосфолипидных комплексах ионы металла(И) выступают в качестве связующих мостиков между ДНК и молекулами фосфолипида. Следует отметить, что молекула ДНК не может непосредственно взаимодействобать с фосфолипидным бислоем вследствие отталкивания между одноименными отрицательными зарядами на фосфатах ДНК и фосфолипидов. Посредниками в таких взаимодействиях могут быть разнообразные катионы, среди которых следует назвать катионные белки, пептиды, полиамины, природные и синтетические катионные липиды, двухвалентные катионы металлов. В качестве такого посредника в нашей работе использованы ионы Са2+(20 мМ).

Цель и задачи работы

Диссертационная работа посвящена структурному аспекту ДНК-фосфолипидных взаимодействий, а именно: исследованию динамики структурного полиморфизма ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Са2+ и определению их стехиометрии. В связи с этим, основными задачами диссертационной работы являются:

1. Обнаружение основных типов структур, образующихся при взаимодействии ДНК с фосфолипидами в присутствии ионов Са2+.

2. Изучение факторов, определяющих структурный полиморфизм комплексов ДНК-Са2+-фосфолипид.

3. Исследование динамики структурного полиморфизма комплексов ДНК-Са2+-дипальмитоилфосфатидилхолин в зависимости от молярного соотношения нуклеотид/фосфолипид.

4. Определение стехиометрии связывания нуклеотидов ДНК с молекулами дипальмитоилфосфатидилхолина в присутствии ионов Са2+.

Научная новизна

1. Впервые обнаружены основные типы структур при взаимодействии ДНК в присутствии ионов Са2+ с фосфолипидами: природными фосфатидилхолинами и их синтетическим аналогом - дипальмитоилфосфатидилхолином.

2. Впервые для идентификации основных типов структур, образующихся при взаимодействии ДНК с дипальмитоилфосфатидилхолином в присутствии ионов Са2+ был применен метод дифференциальной сканирующей калориметрии.

3. Впервые были проведены прецизионные измерения скорости ультразвука в растворах комплексов ДНК с моно- и мультибислойными липосомами дипальмитоилфосфатидилхолина в присутствии ионов Са2+.

4. Впервые обнаружена закономерность образования основных типов структур при взаимодействии ДНК с дипальмитоилфосфатидилхолином в присутствии ионов Са2+.

5. Впервые определена стехиометрия связывания нуклеотидов ДНК с молекулами дипальмитоилфосфатидилхолина в присутствии ионов Са2+.

Теоретическая и практическая ценность

Решение поставленных в диссертационной работе задач позволило разработать новые методические подходы и представить ряд практических рекомендаций, полезных как при создании систем трансфекции клеток эукариот, так и для дальнейших структурных исследований ДНК-фосфолипидных комплексов и ДНК-мембранных контактов.

В работе было показано, что образование структур ДНК-фосфолипидных комплексов - процесс, зависящий от молярного соотношения нуклеотид/фосфолипид. Были определены соотношения нуклеотид/липид, при которых образуются основные типы структур ДНК-фосфолипидных комплексов. Полученный результат важен при создании геносом для генной терапии, поскольку, эффективность трансфекции определяется структурой ДНК-фосфолипидного комплекса.

Разработана методика получения стабильных структур ДНК-фосфолипидных комплексов.

Для идентификации структур комплексов ДНК-Са2+дипальмитоилфосфатидилхолин был применен метод дифференциальной сканирующей калориметрии. Данный метод становится необходимым для интегральной экспресс-оценки качества ДНК-фосфолипидных комплексов. 8

Апробация работы

Основные результаты диссертационной работы докладывались на рабочем совещании Дублинского университета (Ireland, 1995), на Втором съезде биофизиков России (г. Москва, 1999), на Международной конференции "New Trends in Calorimetry and its Applications" (Italy, 1999), на ежегодной научной конференции Института теоретической и экспериментальной биофизики РАН (г. Пущино, 1999), на межлабораторных научных семинарах Института теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Института биомедицинской химии РАМН и Института молекулярной биологии РАН.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ.

L ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Изучение структурного полиморфизма ДНК-фосфолипидных комплексов является достаточно сложной задачей ввиду многообразия факторов, влияющих на структуру каждого компонента комплекса. Поскольку в данной работе мы изучаем фазовое поведение фосфолипидной составляющей ДНК- фосфолипидного комплекса, то следует более подробно рассмотреть способность фосфолипидов к разнообразным структурным перестройкам.

Заключение Диссертация по теме "Биофизика", Хусаинова, Раиля Сагитовна

ВЫВОДЫ:

1. Методом электронной микроскопии впервые были обнаружены два основных типа структур комплексов ДНК с фосфолипидами в присутствии ионов Са2+ на примере комплексообразования ДНК с природными фосфатидилхолинами и их синтетическим аналогом - дипальмитоилфосфатидилхолином. Основными типами структур для ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Са2+ являются трубчатые и мультиламеллярные структуры.

2. Для идентификации основных типов структур ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Са2+ на примере комплексов ДНК-Са2+-дипальмитоилфосфатидилхолин помимо метода электронной микроскопии впервые был применен метод дифференциальной сканирующей калориметрии. С помощью этих методов было обнаружено: а) основным фактором структурного полиморфизма комплексов является изменение молярного соотношения нуклеотид/фосфолипид; б) индикатором образования мультиламеллярных структур служит появление третьего фазового перехода в области 44,1°С на графике температурной зависимости избыточной удельной теплоемкости плавления мультибислойных липосом дипальмитоилфосфатидилхолина в комплексах с ДНК в присутствии ионов Са2+; в) обнаружена закономерность структурообразования комплексов: при молярных соотношениях нуклеотид/фосфолипид ниже 1/12 образуются трубчатые структуры; при молярных соотношениях нуклеотид/липид выше 1/3 образуются мультиламеллярные структуры; при молярных соотношениях 1/12-1/3 происходит реструктуриз ация.

3. Проведены прецизионные измерения скорости ультразвука в растворах комплексов ДНК с моно- и мультибислойными липосомами дипальмитоилфосфатидилхолина в присутствии ионов Са2+ при молярных соотношениях нуклеотид/фосфолипид ниже 1/12. Результаты этого исследования позволили установить следующее: а) стехиометрия связвания нуклеотидов ДНК с молекулами фосфолипида не зависит от типа липосом (моно- или мультибислойные), участвующих в комплексообразовании; б) стехиометрия связывания составляет 4 - 5 молекул ДПФХ на один нуклеотид.

4. Методом дифференциальной сканирующей калориметрии определена стехиометрия связывания нуклеотидов ДНК с молекулами

69 дипальмитоилфосфатидилхолина для различных полиморфных типов структур комплексов. Стехиометрия связывания составляет: а) 0,5-2 молекулы фосфолипида на один нуклеотид для мультиламеллярных структур; б) 4 молекулы фосфолипида на один нуклеотид для трубчатых структур. Промежуточные значения стехиометрии, 24 молекулы ДПФХ на один нуклеотид, характерны для нестабильных структур комплексов в момент реструктуризации.

5. Разработана процедура приготовления ДНК-фосфолипидных комплексов со стабильной структурой.

70

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор выражает глубокую признательность своим научным руководителям Генриху Романовичу Иваницкому и Ренату Ибрагимовичу Жданову, а также всем сотрудникам лаборатории механизмов организации биоструктур — за помощь в процессе работы над диссертацией и теплую дружественную атмосферу, способствующую плодотворной работе. Автор благодарен всем соавторам своих статей: доктору физ.-мат. наук Попову Виктору Ивановичу, доктору физ.-мат. наук, профессору Харакозу Дмитрию Петровичу, кандидату физ.-мат. наук Дееву Александру Александровичу, Горелову Александру Владимировичу, кандидату биологических наук Тараховскому Юрию Семеновичу, Николаевой Тамаре Ивановне, кандидату физ.-мат. наук Рочеву Юрию Алексеевичу, профессору, декану химического факультета Дублинского Университета (Ирландия) Кеннету Даусону, а также доктору биологических наук Озолинь Ольге Николаевне, доктору биологических наук Архипову Владимиру Ивановичу, Масулис Ирине Станиславовне, доктору физ.-мат. наук Медвинскому Александру Берельевичу, кандидату физ.-мат. наук Цыганову Михаилу Аркадьевичу, ведущему инженеру лаборатории термодинамики белка Института белка РАН Сенину Александру Андреевичу. Трудно переоценить пользу, приобретенную мною от общения с этими людьми.

Работа была выполнена при финансовой подцержке ШТАБ (грант #93-2084), Российского фонда фундаментальных исследований (гранты #96-04-48192, #97-0448404).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последние годы все большее значение уделяется исследованию структурных перестроек плазматических мембран, инициированных молекулами ДНК. В связи с этим представляется необходимым изучение структур, образуемых в результате ДНК-фосфолипидных взаимодействий, факторов, влияющих на образование этих структур, а также параметров, характеризующих свойства мембран при их взаимодействии с ДНК.

Целью данной работы было исследование динамики структурного полиморфизма ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Са2+ и определению их стехиометрии. Проведенные нами исследования взаимодействия ДНК с фосфолипидными модельными мембранами в присутствии ионов Са2+ включали в себя решение следующих задач: 1) обнаружение основных типов структур ДНК-фосфолипидного комплексообразования в присутствии ионов Са2+; 2) изучение факторов, определяющих структурный полиморфизм ДНК-фосфолипидных комплексов; 3) исследование динамики структурного полиморфизма комплексов ДНК-Са2+-дипальмитоилфосфатидилхолин в зависимости от молярного соотношения нуклеотид/фосфолипид; 4) определение стехиометрии связывания нуклеотидов ДНК с молекулами дипальмитоилфосфатидилхолина в присутствии ионов Са2+.

Методом электронной микроскопии нами были обнаружены два основных типа структур ДНК-фосфолипидного взаимодействия в присутствии ионов Са2+ -трубчатые и мультиламеллярные структуры. Проведенные этим методом исследования позволили установить, что при снижении молярного соотношения нуклеотид/фосфолипид преимущественно образуются трубчатые структуры, а при увеличении - мультиламеллярные.

Анализ основных экспериментальных методов, использовавшихся для исследования структурного полиморфизма ДНК-фосфолипидных комплексов, позволил заключить, что в настоящее время для структурного исследования наряду с электронной микроскопией приемлемыми являются метод дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) и акустический метод, основанный на измерениях скорости и поглощения ультразвука в растворах.

Сопоставление термотропных свойств дисперсий ДПФХ в присутствии ионов Са2+ в комплексах с ДНК, свидетельствует о зависимости фазового состояния ДПФХ от молярного соотношения нуклеотид/фосфолипид.

Методами ДСК, акустической велосиметрии и электронной микроскопии было установлено соответствие между характером фазовых переходов при плавлении фосфолипидной составляющей ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Са2+ и основными типами структур, образующихся при ДНК-фосфолипидных взаимодействиях.

На основании полученных в работе данных нами был сделан вывод, что существует закономерность в структурообразовании ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Са2+, а именно: при молярных соотношениях нуклеотид/фосфолипид ниже 1/12 образуются трубчатые структуры, при соотношениях выше 1/3 - мультиламеллярные, при соотношениях 1/12-1/3 происходит реструктуризация комплексов. Обнаружение закономерности в структурообразовании комплексов является важным не только для дальнейших структурных исследований ДНК-фосфолипидных комплексов, но и при создании систем трансфекции эукариотических клеток, так как существенным фактором, определяющим трансфекционную эффективность геносом является структура образуемых комплексов.

Нами была определена стехиометрия связывания ДНК с дипальмитоилфосфатидилхолином (количество молекул ДПФХ, приходящихся на один нуклеотид) в присутствии ионов Са2+. Было установлено, что для мультиламеллярных структур стехиометрия связывания составляет 0.5-2 молекулы ДПФХ на один нуклеотид; для трубчатых структур - четыре. Промежуточные значения стехиометрии, 2-4 молекулы ДПФХ на один нуклеотид, характерны в момент реструктуризации системы. Анализ полученных результатов свидетельствует о высокой динамичности системы ДНК-фосфолипид, в которой незначительные количественные изменения составляющих этой системы приводят к значительным качественным изменениям всей системы. Эту динамику структурных переходов ДНК-фосфолипидных комплексов отражает предложенная нами модель структурного полиморфизма ДНК-фосфолипидных комплексов с указанием характерной стехиометрии для определенных типов структур (рис.21).

Результаты выполненной нами работы позволяют заключить, что состояние фосфолипидных мультибислойных мембран при взаимодействии с ДНК претерпевает существенные изменения. Эти изменения, главным образом, определяются молярным соотношением нуклеотид/фосфолипид. В присутствии ДНК обнаруживается латеральное разделение фаз в бислое, усиливающееся с увеличением концентрации ДНК. Разделение фаз и связанное с этим явлением возрастание числа отличающихся по своей организации кластеров бимолекулярного липидного слоя,

66 как правило, сопровождается в зоне перехода (на границе раздела фаз) нарушением упаковки жирнокислотных цепей фосфолипидов, возникновением структурных дефектов бислоя, в результате чего может значительно увеличиваться проницаемость мембран. Но увеличению проницаемости мембран может способствовать и их структурная реорганизация. Так, можно предположить, что при определенной концентрации ДНК на некоторых участках мембраны возникает складчатая, мультиламеллярная структура, приводящая к значительным повреждениям липидного бислоя мембраны. Полученное нами экспериментальное подтверждение участия ДНК-катионных комплексов в инициировании полиморфизма фосфолипидов может стать основой для объяснения механизмов транслокации молекул ДНК через мембраны живой клетки.

Э=4

Рис. 21. Модель структурного полиморфизма ДНК-фосфолипидных комплексов в присутствии ионов Са2+.

При стехиометрии меньше двух молекул ДПФХ на один нуклеотид образуются мультиламеллярные структуры. При увеличении количества фосфолипида, на некоторые нуклеотиды ДНК приходится четыре молекулы фосфолипида и здесь наблюдается частичное отслоение образующихся трубчатых структур от мультиламеллярных. При стехиометрии - четыре молекулы ДПФХ на один нуклеотид образуются-трубчатые структуры.

68

Библиография Диссертация по биологии, кандидата физико-математических наук, Хусаинова, Раиля Сагитовна, Пущино

1. Герасимов Я.И., Древин В.П., Еремин Е.Н. и др. Курс физической химии - М.: Госхимиздат, 1963, т. 1

2. Chapman D. Phase transitions and fluidity characteristics of lipids and cell membranes. Quart Rev. Biophys., 1975, v.8, N2, p. 185-235.

3. Hinz H.J., Sturtevant J.M. Calorimetric studies of dilute aqueous suspensions of bilayers formed from synthetic L-lecithins.- J.Biol.Chem., 1972, N19, v.247, p.6071-6075.

4. Shimshick E.Y., McConnell H.M. Lateral phase separation in phospholipid membranes.- Biochemistry, 1973, v. 12, p.2315-2360.

5. Phillips M.C., Williams R.M., Chapman D. On the nature of hydrocarbon chain motions in lipid liquid crystals.- Chem.Phys.Lipids, 1969, v.3, p.234-244.

6. Blume A., Ackerman T. A calorimetric study of the lipid phase transitions in aqueous dispersions phosphorilcholine-phosphorileethanolamine mixtures.- FEBS Lett., 1974, v.43, N1, p.71-74.

7. Barton P.G., Gunstone F.D. Hydrocarbon chain packing and molecular motion in phospholipid bilayers formed from unsaturated lecithins.- J.Biol.Chem., 1975.,v.250, p.4470-4476.

8. Харакоз Д.П. Исследование состояния и фазовых переходов белковых молекул и липидных мембран по измерениям объема и сжимаемости растворов. Докторская диссертация, 1995.

9. Engelman D.M. Lipid bilayer structure in the membrane of Mycoplasma laidlawii. -J.Mol.Biol., 1971, vol.58, p.153-165.

10. Engelman D.M. The use of X-ray scattering in the study of lipid bilayer planar organization. Biophys.J., 1975, vol.15, N9, p.940-944.

11. Gulik-Krzywicki T. Order-disorder conformational transition of the lipid hydrocarbon chains in biological membranes and their relation to the membrane transport. In: Biophysics of membrane transport: School proceedings. Wroclaw, 1976, pt.I, p.239-256.

12. Hui S.W., Parsons D.F. Phase transition of plasma membranes of rat hepatocyte and hepatoma cells by electron diffraction. Cancer Res., 1976, vol.36, N6, p. 1918-1922.

13. Levine Y.K. X-ray diffraction studies of membranes.- In: Progress in surface science (ed. Davison S.G.), Pergamon press, Oxford, N.Y., 1973, v.3, p.279-352.

14. Hitchcock P.B., Mason R., Thomas K.M., Shipley G.C. Structural chemistry of 1,2-dilauroyl-DL-phosphatidylethanolamine: molecular conformation and intermolecular packing of lipids.- Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1974, v.71, p.3036-3040.

15. Blaurock A.E. X-ray diffraction pattern from a bilayer with protein outside. -Biophys.J., 1973, vol.13, N3, p.281-289.

16. Wilkins M.H.F., Blaurocr A.E., Engelman D.M. Bilayer structure in membranes.-Nature.New Biol., 1971, vol.230, N11, p.72-76.

17. Janiak M.J., Small D.M., Shipley G.G. Nature of the thermal pretransition of synthetic phospholipids: Dimyristoyl- and dipalmitoyllecithin. Biochemistry, 1976, vol.15, p.4575-4580.

18. Seelig J., Gaily H. Investigation of phosphatidylethanolamine bilayers by deuterium and phosphorus-31 nuclear magnetic resonance. Biochemistry, 1976, vol.15, p.5199-5204.

19. Марголис JI.Б., Бергельсон Л.Д. Липосомы и их взаимодействие с клетками. Под ред. Чайлахяна Л.М.-Москва, "Наука", 1986.

20. Hui S.W. The tilting of the hydrocarbon chains in a single bilayer of phospholipid. -Chem. and Phys. Lipids, 1976, vol.16, p.9-18.

21. Rand R.P., Panghorn W.A., Pardon A.D., Tinker D.O. Lysolecithin and cholesterol interact stoichiometrically forming bimolecular lamellar structures in presence of excess water, or lysolecithin or cholesterol. Canad.J.Biochem., 1975, vol.53, p. 189-195.

22. Marsh D. Molecular motion in phospholipid bilayers in the gel phase: Long axis rotation. Biochemistry, 1980, vol.19, p. 1632-1637.

23. Hubbell W.L., McConnell H.M. Orientation and motion of amphiliphilic spin lables in membrane.- Proc.Nat.Acad.Sci. US, 1969, vol.64, p.20-27.

24. Hubbell W.L., McConnell H.M. Molecular motion in spinlabeled phospholipids and membranes.- J.Amer.Chem.Soc., 1971, vol.93, p.314-326.

25. Марголис Л.Б. Липосомы и клетки изучение взаимодействий мембран.- В кн.: Липосомы и их взаимодействие с клетками и тканями / Под ред. Антонова В.Ф. М.: Медицина, 1981, с.24-31.

26. Phillips М.С., Williams R.M., Chapman D. On the nature of hydrocarbon chain motion in lipid liquid crystals. Chem. and Phys. Lipids, 1969, vol.3, p.234-244.

27. Gaber B.P., Peticolas W.L. On the quantitative interpretation of biomembrane structure by Raman spectroscopy.- Biochim.et biophys.acta, 1977, vol.465, p.260-274.

28. Schindler H., Seelig I. Deuterium order parameters in relation to thermodynamic properties of a phospholipid bilayer: A statistical mechanical interpretation.-Biochemistry, 1975, vol.14, p.2283-2287.

29. Trauble H. Phase transitions in lipids.- In: Biomembranes (Kreuzer F., Siegers J.F.G., eds), Acad.Press, N.Y., 1972, v.3, p.197-226.

30. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Динамическая структура липидного бислоя.- М., «Наука», 1981, с.296.

31. Linden C.D., Biasie J.K., Fox C.F. A confirmation of the phase behavior of Escherichia coli cytoplasmic membrane lipids by X-ray diffraction.- Biochemistry, 1977, vol.16, N8, p.1621-1625.

32. Overath P., Brenner M., Gulik-Krzywicki T., Shechter E., Latellier L. Lipid phase transitions in cytoplasmic and outer membranes of E.coli.- BBA, 1975, vol.389, N2, p.358-369.

33. Blasenbrey S., Pechhold W. Theory der phasenumwand-lung in polymeren.-Ber.Bunsenges., 1970, v.74, p.784-796.

34. Marcelja S. Molecular model for phase transition in biological membranes.- Nature, 1973, v.241, p.451-453.

35. Nagle J.F. Lipid bilayers phase transition: density measurements and theory.-Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1973, v.70, p.3443-3444.

36. Nagle J.F. Theory of biomembrane phase transitions.- J.Chem.Phys., 1973, v.58, p.252-264.

37. Belle J., Bothorel P., Lemaire B. Melting entropy and structure of aliphatic chains in mono- and bilayers.- FEBS Lett., 1974, v.39, p. 115-117.

38. Marcelja S. Chain ordering in lipid crystala. II. Structure of belaer membranes.-Biochim. et Biophys. Acta, 1974, v.367, p. 165-176.

39. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран.-М., «Наука», 1982.

40. Bear R.S., Palmer K.J., Schmitt F.О. X-ray diffraction studies of nerve lipids.-J.Cell.Сотр.Physiol., 1941, v. 17, p.355-367.

41. Palmer K.J., Schmitt F.O. X-ray studies of lipid emulsions.- J. Cell Biol., 1941, v. 17, p.385-394.

42. Luzzati У. Ph.D., Husson F. The structure of the liquid-crystalline phases of lipid-warter systems.-J. Cell Biol., 1962, v.12, N2, p.207-219.

43. Gulik-Krzywicki T., Rivas E., Luzzati V. Structure et polymorphism des lipides: etude par duffraction des Rayons X, du susteme forme de lipides de mitochondries de coeur de boeuf et d'eau.- J.Mol.Biol., 1967, y.21, p.303-322.

44. Reiss-Husson F., Luzzati V. Ph.D. Phase transitions in lipids in relation to the structure of membranes.- In: Advances in Biological and Medical Physics, Acad. Press, N.Y., 1967, v.ll, p.87-105.

45. Reiss-Husson F. Structure des phases liqide-crystallines de différents phospholipids monoglycerides, sphingolipides, anhydres on en presence d'eau.- J.Mol.Biol., 1967, v.25, p.363-382.

46. Luzzati Y. Ph.D. X-ray diffraction studies of lipid-water systems.- In: Biological Membrane (ed. Chapman D.), Academic Press, N.Y., 1968, p.71-121.

47. Luzzati Y. Ph.D., Gulik-Krzywicki T., Rivas E., Reiss-Husson F., Rand R.P. X-ray study of model systems: structure of lipid-water phases in correlation with chemical composition of the lipid.- J.Gen.Phisiol., 1968, v.51, N5, p.37s-43s.

48. Luzzati V. Ph.D., Gulik-Krzywicki T., Tardiceu A. Polymorphism of lecithins.-Nature, 1968, v.218, p.1031-1034.

49. Tardieu A., Luzzati V.Ph.D., Reman F.C. Structure and polymorphism of hydrocarbon chains of lipids. A study of lecithin-water systems. J.Mol.Biol., 1973, v.75,p.711-733.

50. Chapman D., Williams R.M., Ladbrooke B.D. Physical studies of phospholipids. VI. Thermotropic and lyotropic mesomorphism of some 1,2-diacylphosphatidylcholines (lecithins).- Chem.Phys.Lipids, 1967, v.l, p.445-475.

51. Rand R.P., Luzzati V. Phase transition in lipids in relation to the structure of membranes.- In: Advances in Biological and Medical Physics, Acad. Press, N.Y., 1967, v.l 1, p.87-105.

52. Lee A.G. Lipid phase transitions and phase diagrams. I. Lipid phase transitions.-BBA, 1977, vol.472, N3,4, p.285-344.

53. Trâuble H. Phasenumwandlungen in lipiden mugliche schaltprozesse in biological membranen.-Naturwissenschaften, 1971, v.58, p.277-284.

54. Trâuble H. Phase transitions in lipids.- In: Biomembranes (Kreuzer F., Siegers J.F.G., eds), Acad.Press, N.Y., 1972, v.3, p. 197-226.

55. Trâuble H., Haynes D.H. The volume change in lipid bilayer lamellar at the crystalline liquid crystalline phase transition.- Chem.Phys.Lipids, 1971, v.7, p.324-335.

56. Sturtevant J.M., Ho Ch., Reimann A. Thermotropic behavior of some fluorodimyristoylphosphatidylcholines.- Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1979, v. 76, N5, p.2239-2243.

57. Nagle J.F. Lipid bilayers phase transition: density measurements and theory.-Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1973, v.70, p.3443-3444.

58. Nagle J.F. Theory of biomembrane phase transitions.- J.Chem.Phys., 1973, v.58, p.252-264.

59. Chapman D., Urbina K., Keough K.M. Biomembrane phase transitions: studies of lipid-water systems using differential scanning calorimetry.- J.Biol.Chem., 1974, v.249, N8, p.2512-2521.

60. Calhoun W.I., Shipley G.G. Fatty acid composition and thermal behaviour of natural sphingomyelines.- Biochim.et biophys. Acta, 1979, v.555, N3, p.436-441.

61. Albon N., Sturtevant J.M. Nature of gel to liquid crystal transition of synthetic phosphatidylcholines.- Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1978, v.75, N5, p.2258-2260.

62. Ubbelohde A.R. Melting and crystal structure.- Clarendon Press, Oxford, 1965, p. 141.

63. Forsyth P.A.Jr., Marcelja S., Mitchell D.J., Ninham B.W. Phase transitions in charged lipid membranes.- Biochim. et Biophys. Acta, 1977, vol. 469, N3, p.335-344.

64. Jacobs R.E., Hudson B.S., Andersen H.C. A theory of phase transitions and phase diagrams for one and two-component phospholipid bilayers.- Biochemistry, 1977, vol.16, N20, p.4349-4359.

65. Kanehisa M.I., Tsong T.Y. Cluster model of lipid phase transitions with application to passive permeation of molecules and structure relaxations in lipid bilayers.-J.Amer.Chem.Soc., 1978, vol.100, N2, p.424-432.

66. Конев С.В., Мажуль В.М. Межклеточные контакты.- Минск, «Наука и техника», 1977.

67. Fischer М.Е. The theory of equilibrium critical phenomena. Rep.Prog.Phys., 1967, vol.30, pt.2, p.615-730.

68. Mabrey S., Sturtevant J.M. Investigation of phase transitionof lipids and lipid mixtures by high sensitivity differential scanning calorimetry.- Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1976, vol.73, p.3862-3866.

69. Barton P.G., Gunstone F.D. Hydrocarbon chain packing and molecular motion in phospholipid bilayers formed from unsaturated lecithins.- J.Biol.Chem., 1975, vol.250, p.4470-4476.

70. Ladbrooke B.D., Chapman D. Thermal analysis of lipids, proteins and biological membranes.- Chem.Phys.Lipids, 1969, vol.3, p.304-367.

71. Phillips M.C. The physical state of phospholipids and cholesterol in monolayers, bilayers and membranes.- In: Progress in surface and membrane science. N.Y.: Acad.Press, 1972, vol.5, p. 139-221.

72. Petersen N.O.,Kroon P.A., Kainosho M., Chan S.I. Thermal phase transitions in deuterated lecithin bilayers.- Chem. and Phys.Lipids,1975, vol.14, N4, p.343-349.

73. Bach D., Bursuker I., Eibl H., Miller I.R. Differential scanning calorimetry of dipalmitoylphosphatidylcholine analogues and of their interaction products with basic polypeptides.- BBA, 1978, vol.514, N2, p.310-319.

74. Mabrey S., Sturtevant J.M. High sensitivity differential scanning calorimetry in the study of biomembranes and related model systems.- In: Methods in Membrane Biology (ed. Korn E.D.), Plenum press, N.Y., 1978, vol.9, p.237-274.

75. Sturtevant J.M. Some applications of calorimetry in biochemistry and biology.-Annu.Rev.Biophys.and Bioeng., 1974, vol.3, p.35-52.

76. Zimm B.H., Bragg J.K. Theory of the transition between helix and random coil in polypeptide chains.- J.Chem.Phys., 1959, vol.31, N2, p.526-535.

77. Kantor H.I., Mabrey S., Prestegard Y.H., Sturtevant J.M. A calorimetric examination of stable and fucing lipid bilayer vesicles.- Biochim.et Biophys.Acta, 1977, vol.446, p.402-410.

78. De Kruijff В., Cullis P.R., Radda G.K. Differential scanning calorimetry and 31P-NMR studies on sonicated and unsonicated phosphatidylcholine liposomes.-Biochim.et Biophys.Acta, 1975, vol.406, p.6-20.

79. Blume A. Application of calorimetry to lipid model membranes.- In: Physical Properties of Biological Membranes and Their Functional Implications (ed. Hidalgo C.). Plenum, NY, 1988, p.71-121.

80. Blume A. Apparent molar heat capacities of phospholipids in aqueous dispersion. Effects of chain length and head group structure.- Biochemistry, 1983, vol.22, p.5436-5442.

81. Blume A. Biological calorimetry: membranes.- Thermochimica Acta, 1991, vol.193, p.299-347.

82. Можаева Г.Н., Наумов А.П. Влияние поверхностного заряда на стационарную калиевую проводимость мембраны перехвата Ранвье. III. Действие двухвалентных катионов.- Биофизика, 1972, т. 17, стр.801-808.

83. Алфимова Е.Я., Кольтовер В.К., Райхман Л.М. Исследование методом люминесцентного зонда конформационных переходов в мембранах эндоплазматического ретикулума.- Биофизика, 1972, т. 17, стр. 1043-1046.

84. Weissmann G., Dingle J. Exp.Cell Res., 1961, vol.25, p.207.

85. Weissmann G. Fed.Proc., 1964, vol.23, p. 1038

86. Mandel M., Higa A. Calcium dependent bacteriophage DNA infection.- J.Mol.Biol., 1970, vol.53, p. 159-162.

87. Brass J.M., Boos W., Hengge R. Reconstitution of maltose transport in malB mutants of Escherichia coli through calcium-induced disruptions of the outer membrane.-J.Bacteriol., 1981, vol.146, p.10-17.

88. Brass J.M., Ehmann U., Buhau B. Reconstitution of maltose transport in Escherichia coli: Conditions affecting import of maltose-binding protein into the periplasm of calcium-treated cells.- J.Bacteriol., 1983, vol.155, p.97-106.

89. Blaustein M.P., Goldman D.E. J.Gen Physiol., 1968, vol.51, p.279

90. Heckmann K., Lindemann В.- Third Intern. Biophysics Congress, 1969, p.254.

91. Jakobson E.- Third Intern. Biophysics Congress, 1969, p. 103.

92. Papahadjopoulos D., Yail W.J., Newton C. et al. The rol of calcium-induced phase chages.- Biochim.et biophys.acta, 1977, vol.465, p.579-598.

93. Hauser H., Chapman D., Davson R.M.C. Physical studies of phospholipids. XI. Ca2+ binding to monolayers of phosphatidylserine and phosphatidylinositol.- Biochim.et biophys. acta, 1969, vol.183, p.320-333.

94. Jacobson K., Papahadjopoulos D. Phase transitions and phase separations in phospholipid membranes induced by changes in temperature, pH and concentration of bivalent ions.- Biochemistry, 1975, vol.14, N1, p. 152-161.

95. Newton C., Pangborn M.S., Papahadjopoulos D. Specifiety of Ca2+ and Mg2+ binding to phosphatidylserine vesicles and result at phase changes of bilayer membrane structure.- Biochim.et Biophys.Acta, 1978, vol.506, N2, p.281-287.

96. Papahadjopoulos D., Vail W.J., Pangborn W.A., Poste G. Studies of membrane fusion. II. Induction of fusion in pure phospholipid membranes by calcium ions and other divalent metals.- Biochim.et biophys.acta, 1976, vol.448, N2, p.265-283.

97. Lansman J., Haynes D.H. Kinetics of Ca2+-triggered membrane aggregation reaction in phospholipid vesicles.- Biophys.J., 1975, vol.15, N2, p.216-228.

98. Yervergaert P.HJ.Th., De Kruijff B., Verkleij A.J., Tocanne Y.F., Van Deenen L.L.M. Calorimetric and freezeetch study of the influence of Mg2+ on the thermotropic behaviour of phosphatidylglycerol.- Chem.Phys.Lipids, 1975, vol.14, N1, p.97-101.

99. Trâuble H., Eibl H. Electrostatic effects on lipid phase transitions: Membrane structure and ionic environment.- Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1974, vol.71, N1, p.214-219.

100. Rand R.P., Gupta S.S. Cardiolipin forms hexagonal structures with divalent cations.-BBA, 1972, vol.255, N2, p.484-493.

101. MacDonald K.C., Simon S.A., Baer E. Ionic influence on the phase transition of dipalmitoylphosphatidylserine.- Biochemistry, 1976, vol.15, p.885-891.

102. Kretsinger R.H., Nelson D.J. Calcium in biological systems.- Coord.Chem.Revs., 1976, vol.18, p.29-124.

103. Hauer H., Phillips M.C., Levine B.A., Williams J.P. Ion-binding to phospholipids. Interaction of calcium and lanthanide ions with phosphatidylcholine (lecithin).-Europ.J.Biochem., 1975, vol.58, N1, p. 133-144.

104. Chapman D., Peel W.E., Kingston B., Lilley T.H. Lipid phase transitions in model biomembranes. The effect of ions on phosphatidylcholine bilayers.- BBA, 1977, vol.464, p.260-275.

105. Simon S.A., Lis L.J., Kaufmann Y.W., MacDonald R.C. A calorimetric and monolayer investigation of the influence of ions on the thermodynamic properties of phosphatidylcholine.- BBA, 1975, vol.375, p.317-326.

106. Hauser H., Hinkley C.C., Krebs J., Levine B.A., Phillips M.C., Williams R.J.P. The interaction of ions with phosphatidylcholine bilayers.- BBA, 1977, vol.468, p.364-377.

107. Davenport J.B. Physical chemistry of lipids.- In: Biochemistry and methodology of lipids, (eds. Johnson A.R., Davenport J.B.) N.Y.,Wiley-Intersci., 1971, p.47-83.

108. Yabusaki K.K.,Wells M.A. Binding of calcium to phosphatidylcholines as determined by proton magnetic resonance and infrared spectroscopy.- Biochemistry, 1975, vol.14, N1, p.162-166.

109. McLaugchlin S., Grathwohl C., McLaugchlin A. The adsorption of divalent cations on phosphatidylcholine bilayer membranes. Biochim.et Biophys.Acta, 1978, vol.513, p.338-357.

110. Lis L.J., Kaufman J.W., Shriver D.F. Effect of ions on phospholipid layer structure as indicated by raman spectroscopy.- BBA, 1975, vol.406, p.453-464.

111. Verkleij A.J., De Kruijff В., Ververgaert P.H.J.Th., Tocanne Y.E., Van Deenen L.L.M. The influence of pH, Ca2+ and protein on the thermotropic behaviour of the negative charged phospholipid phosphatidylglycerol.-BBA, 1974, vol.339, p.432-437.

112. Manzoli F.A., Muchmore J.H., Bonora B. et al. Lipid- DNA interactions. II. Phospholipids, cholesterol, glycerophosphorylcholine, sphingosine and fatty acids.-BBA, 1974, vol.340, p. 1-9.

113. Mazoli F.A., Capitani S., Maraldi N.M. Chromatin lipids and their possible role in gene expression: a study in normal and neoplastic cells.- Advanc.Enzym.Regul., 1979, vol.17, p.175-194.

114. Moyer M.P. Association of DNA and RNA with membranes.- Int.Rev.Cytol., 1979, vol.61, p.1-61.

115. Кувичкин В.В., Сухомудренко А.Г. Взаимодействие природных и синтетических полинуклеотидов с липосомами в присутствии двухвалентных катионов.-Биофизика, 1987, т.32, №4, с.628-631.

116. Кувичкин В.В., Волкова JI.A., Нарышкина Е.П., Исангалин Ф.Ш. Изучение комплексов нуклеиновых кислот, липосом, и ионов металлов (II) методами ЭПР и 'Н-ЯМР.- Биофизика, 1989, т.34, №4, с.628-631.

117. Budker V., Godovikov A.A., Naumova L.P., Slepneva I.A. Interaction of polynucleotides with natural and model membranes.- Nucl.Acids Res., 1980, vol.8, p.2499-2515.

118. Сухоруков Б.И., Кувичкин В.В., Шабарчина Л.И. О структуре и функции контакта ДНК-мембрана в клетке,- Биофизика, 1980, т.24, с.270-275.

119. Стручков В.А., Стражевская Н.Б. ДНК-связанные липиды: состав и возможные функции.- Биохимия, 1993, т.58, с. 1154-1173.

120. Gomez-Eichelmann М.С., Bastarrachea F. Progress in the resolution of the cytoplasmic membrane DNA initiation complex of Escherichia coli.- ВВА, 1975, vol.407, p.273.

121. Hanania N., Harel J. Replication de I'ADN et membrane nucleaire dans les cellules animals.- Biochemie, 1973, vol.55, p.357.

122. Quinilan D.C., Maniloff J.J. Bacteriol., 1972, vol.112, p.1375.

123. Структурная лабильность мембран и ее роль в регуляции функциональной активности клеток.- Тезисы докладов, Минск, 1974.

124. Posch M., Rakusch U., Mollay C., Laggner P. Cooperative effects in the interaction between melittin and phosphatidylcholine model membranes.- J.Biol.Chemistry, 1983, vol.258, p.1761-1766.

125. Kent Juirgensen Calorimetric detection of sub-main transition in long-chain phosphatidylcholine lipid bilayers.- BBA, 1995, vol. 1240, p. 111 -114.

126. Fbldner H.H. Characterization of a third phase transition in multilamellar dipalmitoyllecithin liposomes.- Biochemistry, 1981, vol.20, p.5707-5710.

127. Shaw C. Chen, Sturtevant J.M., Gaffney B.J. Scanning calorimetric evidencefor third phase transition in phosphatidylcholine bilayers.-Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1980, vol.77, N9, p.5060-5063.

128. Delius H., Howe C.C., Kozinski A.W. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1972, vol.68, p.3049-3053.

129. Laggner P., Kriechbaum M.- Chem.Phys.Lipids, 1991, vol.57, p. 121.

130. Khusainov A.A., Deev A.A., Ivanitsky G.R. The structural and functional organization of the baseplate distal part of T4 bacteriophage.-BBA, 1992, vol.1117, p.237-242.

131. Khusainov A.A., Shilnikov G.V., Emelyanenko V.E., Ivanitsky G.R. Effect of thermoinduced changes in T4 bacteriophage structure on the process of molecular recognition of «hort» cells.- BBA, 1992, vol.1118, p.211-217.

132. Boroviagin V.L., Sabelnikov A.G. Lipid polymorphism of model and cellular membranes as revealed by electron microscopy.- Electron.Microsc.Rev., 1989, vol.2, p.75-115.

133. Lasic D. Liposomes in Gene Delivery.- Boca Raton, 1997.

134. Vojcikova L., Balgavy P. Interaction of DNA with dipalmitoylphosphatidylcholine model membranes: A microcalorimetric study.- Stud.Biophys., 1988, vol.125, p.5-10.

135. Vojcikova L., Svajdlenka E., Balgavy P. Spin Label and Microcalorimetric Studies of the interaction of DNA with Unilamellar Phosphatidylcholine Liposomes.-Gen.Physiol.Biophys.,1989, vol.8, p.399-406.

136. Mrevlishvili G.N., Kankia B.I., Mdzinarashvili T.J. et al. Liposome-DNA interaction: microcalorimetric study.- Chem.Phys.Lipids, 1998, vol.94, p. 139-143.

137. Budker V.G., Bichekov E.E., Voldman Ya.Yu., Vainer L.M. I3C-NMR study of polynucleotide-phosphatidylcholine complexes.- Biol.Membrany, 1986, vol.3, p.299-302.

138. Викторов А.В., Грепачевский А.А., Бергельсон Л.Д. ДНК-фосфолипидное взаимодействие. Исследование методом 31Р-ЯМР. Биоорг.химия, 1984, т. 10, с.935-939.

139. Budker Y.G., Kazachkov Yu.A., Naumova L.P. Polynucleotides adsorb on mitochondrial and model lipid membranes in the presence of bivalent cations.- FEBS Lett., 1978, vol.95, p. 143-146.

140. Grepachevsky A.A., Manevich E.M., Bergelson L.D. DNA-phospholipid interaction. A study with the aid of lipid-specific fluorescent and photoactivable probes.-Bioorg.Chim., 1986, vol.12, p.947-950.

141. Hoffman R.M., Margolis L.B., Bergelson L.D. Binding and entrapment of high molecular weight DNA by lecithin liposomes.- FEBS Lett., 1978, vol.93, p.365-368.

142. Тараховский Ю.С., Деев A.A., Масулис И.С., Иваницкий Г.Р. Структурная организация и фазовое поведение комплекса ДНК-кальций-дипальмитоилфосфатидилхолин.- Биохимия, 1998, т.63, с. 13-19.

143. Wilson Т., Papahadjopoulos D., Taber R. Biological properties of poliovirus encapsulated in lipid vesicles: Antibody resistance and infectivity in virus-resistant cells.- Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1977, v.74, p.3471-3475.

144. Dimitriadis G.T. Transition of rabbit globin mRNA introduced by liposomes into mouse lymphocytes.- Nature, 1978, v.274, p.923-924.

145. Dimitriadis G.T. Entrapment of plasmid DNA in liposomes.- Nucleic Acids Res., 1979, v.6, p.2697-2705.

146. Hoffman R.M., Margolis L.B., Bergelson L.D. Binding and entrapment of high molecular weight DNA by lecithin liposomes.- FEBS Lett., 1978, v.93, p.365-368.

147. Lurquin P.F. Entrapment of plasmid DNA by liposomes and their interactions with plant protoplasts.- Nucleic Acid Res., 1979, v.6, p.3773-3784.

148. Mannino R.J., Allenbach E.S., Strohl W.A. Encapsulation of high molecular weight DNA in large unilamellar phospholipid vesicles. Dependence on the size of the DNA.-FEBS Lett., 1979, v.101, p.229-232.

149. Fraley R., Subramani S., Berg P., Papahadjopoulos D. Introduction of liposome-encapsulated SV40 DNA into cells.- J. Biol. Chem., 1980, v.255, p. 10431-10435.

150. Wong Т., Nicolau C., Hofschneider P.H. Appearance of lactamase activity in animal cells upon liposome-mediated gene transfer.- Gene, 1980, v. 10, p.87-94.

151. Crystal R.G. Transfer of genes to humans: Early lessons and obstacles to success. Science, 1995, v.270, p.404-410.

152. Mulligan R.C. The basic science of gene therapy.- Science, 1993, v.260, p.926-932.

153. Feigner P.L., Gadek T.R., Holm M., Roman R., Chan H.W., Wenz M., Northrop J.P., Ringold G.M., Danielsen M. Lipofection: A highly efficient, lipid-mediated DNA-transfection procedure.- Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1987, v.84, p.7413-7417.

154. Feigner P.L., Ringold G.M. Cationic liposome mediated transfection.- Nature, 1989, v.331, p.461-462.

155. Feigner P.L. Particulate systems and polymers for in vitro and in vivo delivery of polynucleotides.- Adv. Drug Del. Rev., 1990, v.5, p. 163-187.

156. Feigner P.L., Rhodes G. Gene therapeutics.- Nature, 1991, v.349, p.351-352.

157. Gao X.A., Huang L. A novel cationic liposome reagent for efficient transfection of mammalian cells.- Biochem. Biophys. Res. Commun., 1991, v. 179, p.280-285.

158. Solodin I., Brown C.S., Bruno M.S., Chow C-Y, Jang E-H, Debs R.J., Heath T.D. High efficiency in vivo gene delivery with a novel series of amphilic imidazolinium compounds.- Biochemistry, 1995, v.34, p. 13537-13544.

159. Lasic D.D., Templeton N.S. Liposomes in gene therapy.- Advanced drug delivery reviews, 1996, v.20, p.221-266.

160. Plautz G.E., Yang Z.Y., Wu B., Gao X., Huang L., Nabel G.J. Immunotherapy of malignancy by in vivo gene transfer into tumors.- Proc Natl Acad Sci USA, 1991, v.90, p.4645-4649.

161. Liu Y., Liggitt D., Zhong W., Tu G., Gaensler K., Debs R.J. Cationic liposome-mediated intravenous gene delivery.- J Biol Chern, 1995,:v.270, p.24864-24870.

162. Stribling R., Brunette E.B., Liggitt D.L., Gaensler K., Debs R.J. Aerosol gene delivery in vivo.- Proc Natl Acad Sci USA, 1992, v.89, p. 11277-11281.

163. Gershon H., Ghirlando R., Guttman S.B., Minsky A. Mode of formation and structural features of DNA-cationic liposome complexes used for transfection.-Biochem, 1993, v.32, p.7143-7151.

164. Sternberg B., Sorgi F.L., Huang L. New structures in complex formation between DNA and cationic liposomes visualized by freeze-fracture electron microscopy.- FEBS Lett, 1994, v.356, p.361-366.

165. Gustafsson J., Arvidson G., Karlsson G., Almgreen M. Complexes between cationic liposomes and DNA visualized by cryo-TEM.- Biochm Biophys Acta, 1995, v. 1235, p.305-312.

166. Lasic D.D., Strey H„ Stuart M.C.A., Podgornik R., Frederik P.M. The structure of DNA-liposome complexes.- J Amer Chem Soc, 1997, v.l 19, p.832-833.

167. Radler J.O., Koltover I., Salditt T., Safinya C.R. Structure of DNA-cationic liposome complexes: DNA intercalation in multilamellar membranes in distinct interhelical packing regimes.- Science, 1997, v.275, p.810-814.

168. Szoka Jr FC, Xu Y, Zeiphati 0. How are nucleic acids released in cells from cationic lipid-nucleic acid complexes? J. Liposome Res, 1996, v.6, p.567-589.

169. Sternberg B. Freeze-fracture electron microscopy of liposomes. In: Oregoriadis G, ed. Liposome Technology, 2nd Ed, Boca Raton, FL: CRC Press, 1992, v.21, p.363-383.

170. Sternberg B. Morphology of cationic liposome/DNA complexes in relation to their chemical composition.- J. Liposome Res, 1996, v.6, p.515-533.

171. Sternberg B., Bottcher C., Stark H. Fine-structure of cationic liposome/DNA complexes and their interaction with cells.- J. Liposome Res, 1997, vol. 5, p.3-8.

172. Sorgi F.L., Sternberg B., Huang L. Interaction of DNA with Liposomes Containing Different Types of Cationic Amphiphiles. J. Liposome Res, 1996, vol.4.

173. Bangham A.D. Surrogate cells or trojan horses. The discovery of liposomes.-BioEssays, 1995, v.17, p.1081-1088.

174. Jaaskelainen I., Sternberg B., Monkkonen J., Urtti A. Physicochemical and morphological properties of complexes made of cationic liposomes and oligonucleotides. Intern J Pharmac., 1997, v.6, p. 135-140.

175. Sternberg B, Bottcher C. Electron microscopic examinations of monovalent and polyvalent cationic liposome-DNA complexes.- J.Liposome Res., 1997, v.3, p.20-25.

176. Behr J. Gene transfer with synthetic cationic amphiphiles; Prospect for gene therapy.-Bioconjugate Chem, 1994, v. 15, p.382.

177. Feigner J.H., Kumar R., Sridhar C.N., Wheeler C.J., Tsai Y.J., Border R., Ramsey P., Martin M., Feigner P.L. Enhanced gene delivery and mechanism studied with a novel series of cationic lipid formulations.- J Biol Chem, 1994; v.269, p.2550-2561.

178. Farhood H., Serbina N., Huang L. The role of dioleoyl phosphatidylethanolamine in cationic liposome mediated gene transfer.- Biochim Biophys Acta, 1995, v. 1235, p.289-295.

179. Boggs J.M. Intermolecular hydrogen bonding influence on structural organization and membrane function.- Biochim Biophys Acta, 1987, v.906, p.353-404.

180. Israelachvili N.J., Marcelja S., Horn R.G. Physical principle of membrane organization.- Quart Rev Biophys, 1980, v. 13, p. 121-200.

181. Pinnaduwage P., Schmitt L., Huang L. Use of a quaternary ammonium detergent in liposome mediated DNA transfer of mouse L-cells.- Biochim Biophys Acta, 1989, v.985, p.33-37.

182. Hui S.W., Langner M., Zhao Y-L, Ross P., Hurley E., Chan K. The role of helper lipids in cationic liposome-mediated gene transfer.- Biophys J, 1996, v.71, p.590-599.

183. Litzinger D.C., Huang L. Phosphatidylethanolamine liposomes: drug delivery, gene transfer and immunodiagnostic applications.- Biochim Biophys Acta, 1992, v. 1113, p.201-227.

184. Zhu N., Liggitt H.D., Liu Y., Debs R. Systemic gene expression after intravenous DNA delivery into adult mice.- Science, 1993, v.281, p.209-211.

185. Liu Y., Mounkes L.C., Liggitt H.D., Brown C.S., Solodin I., Heath T.D., Debs R.J. Factors influencing the efficiency of cationic liposome-mediated intravenous gene delivery.- Nature Biotechnology, 1997, v. 15, p. 167-173.

186. Hong K., Zheng W., Baker A., Papahadjopoulos D. Stabilization of cationic liposome-plasmid DNA complexes by polyamines and poly(ethylene glycol-phospholipid conjugates for efficient in vivo gene delivery.- FEBS Lett, 1997, v.400, p.233-237.

187. Cullis P.R., De Kruijff B. Lipid polymorphism and functional roles of lipids in biological membranes.- Biochim Biophys Acta, 1979, v.559, p.399-420.

188. Seddon J.M. Structure of the inverted hexagonal H(ii) phase, and non-lamellar phase transitions of lipids.- Biochim Biophys Acta, 1990, v.1031, p.1-69.

189. Feigner P.L. Structural and functional aspects of cytofectin mediated gene delivery.-Vancouver Liposome Research Days Conference, 1994, v. 19.

190. Sternberg B., Hong K., Zheng W., Papahadjopoulos D. Relation between morphology and transfec-tion activity of cationic liposome-DNA complexes.-J.Liposom Res., 1997, v.6, p.511-517.

191. Allen T.M., Hong K., Papahadjopoulos D. Membrane contact, fusion, and hexagonal (Hn) transitions in phosphatidylethanolamine liposomes.- Biochemistry, 1990, v.29, p.2976-2985.

192. Stein C.A. and Cheng Y-C. Antisense oligonucleotides as therapeutic agents—is the bullet really magical?- Science, 1993, v.261, p. 1004-1011.

193. Malone R.W., Feigner P.L., Verma I.M. Cationic liposome-mediated RNA transfection.- Proc Natl Acad Sci USA, 1989, v.86, p.6077-6081.

194. Meyer 0., Kirpotin D., Hong K., Sternberg B., Park J.W., Woodle M.C., Papahadjopoulos D. Cationic liposome coated with poly(ethylene glycol) as carriers for oligonucleotides. J.Liposome Res., 1997, v.4, p.305-317.

195. Gao X., Huang L. Cationic liposome-mediated gene transfer.- Gene Ther., 1995, v.2, p.710-722.

196. Thierry A.R., Lunardi-lskandar Y., Bryant J.L., Robinovich P., Gallo R.C., Mahan

197. C. Systemic gene therapy: biodistribution and long-term expression of a transgene in mice.- Proc Natl Acad Sci USA, 1995, v.92, p.9742-9746.

198. Stephan D.J., Yang Z-Y, Simari R.D., San H., Wheeler C.J., Feigner P.L., Gordon D., Nabel G.J., Nabel E.G. A novel cationic liposome DNA complex enhances the efficiency of arterial gene transfer in vivo. Human Gene Ther, 1996, v.7, p. 1803-1813.

199. Feigner P.L. Improvements in cationi? liposomes for in vivo gene transfer.- Human Gene Ther., 1996, v.7, p.1791-1793.

200. Canonico A.E., Plitman J.D., Conary J.Т., Meyrick B.O., Brigham K.L. No lung toxicity after repeated aerosol or intravenous delivery of plasmid-cationic liposome complexes.- J Appl Physiol, 1996, v.77, p.415-419.

201. Strauss W.M., Dawsman J., Beard C., Johnson C., Lawrence J.В., Jaenisch R. Germ line transmission of a yeast artificial chromosome spanning the murine alpha 1(1) collagen locus.- Science, 1993, v.259, p. 1904-1906.

202. Lasic D.D., Papahadjopoulos D. Liposomes revisited.- Science, 1995, v.267, p. 12751276.

203. Lasic D.D. Liposomes in gene therapy. In: Lasic DD, Barenholz Y, eds. Handbook of Nonmedical Applications of Liposomes. IV: From Gene Delivery and Diagnostics to Ecology. Boca Raton FL: CRC Press, 1996, v.20, p. 1-5.

204. Wrobel I., Collins D. Fusion of cationic liposomes with mammalian cells occurs after endocytosis.- Biochim Biophys Acta, 1995, v. 1235, p.296-304.

205. Friend D.S., Papahadjopoulos D., Debs R.J. Endocytosis and intracellular processing accompanying transfection mediated by cationic liposomes.- Biochim Biophys Acta, 1996, v. 1278, p.41-50.

206. Xu Y., Hui S.K., Szoka F.C. Effect of lipid composition and lipid-DNA charge ratios on physical properties and transfection activity of cationic lipid-DNA complexes.-Biophys J, 1995, v.68, p.A432.

207. Szoka F., Magnusson K-E, Wojcieszyn J., Hou Y., Derzko Z., Jacobson K. Use of lectins and polyethylene glycol for fusion of glycolipid-containing liposomes with eukarvotic cells.- Proc Natl Acad Sci USA, 1981, v.78, p. 1685-1689.

208. Boukamp P., Petrussevska R.T., Breitkreutz D., Hornung J., Markham A., Fusenig N.E. Normal keratinization in a spontaneously immortalized aneuploid human keratinocyte cell line.- J Cell Biol, 1988, v. 106, p.761-771.

209. Prufer K., Merz K., Barth A., Wollina U., Sternberg B. Interaction of liposomal incorporated vitamin D3-analogues and human keratinocytes.- J Drug Target, 1994, v.2, p.419-429.

210. Тараховский Ю.С., Иваницкий Г.Р. Липосомы в генной терапии. Структурный полиморфизм липидов и эффективность доставки генетической информации.-Биохимия, 1998, т.63, с.723-736.

211. Feigner P.L. J.Liposome Res., 1993, vol.3, p.3-16

212. Sternberg B. Ultrastructural morphology of cationic liposome-DNA complexes for gen Therapy.- In: Medical Applications of Liposomes (eds. Lasic, Papahadjopoulos), 1998.

213. Zhou X., Klibanov A.L., Huang L. J.Liposome Res., 1992, vol.2, p. 125-139.

214. Farhood H., SerbinaN., Huang L. BBA, 1995, vol.1235, p.285-295.

215. Langer R. Drug delivery and targeting.- Nature, 1998, vol.392, p.5-17.

216. Feigner P.L. DNA ordering on a lipid membrane.- Science, 1997, vol.275, p.810-814.

217. Биченков E.E., Будкер В.Г., Вайнер JI.M., Круппа А.И. Взаимодействие ДНК с фосфатидилхолиновыми липосомами.- Биол.мембраны, 1988, т.5, с.501-507.

218. Биченков Е.Е., Будкер В.Г., Коробейникова И.К. и др. Взаимодействие ДНК с фосфатидилхолиновыми липосомами. Плавление ДНК и фазовый переход липида в комплексе.- Биол.мембраны, 1988, т.5, с.843-847.

219. Будкер В.Г., Биченков Е.Е., Вальдман Я.Ю., Вайнер JI.M. Изучение комплексов полинуклеотидов с фосфатидилхолиновыми липосомами методом 13С-ЯМР.-Биол.мембраны, 1986, т.З, с.299-303.

220. Кувичкин В.В., Кузнецова С.М., Емельяненко В.И. и др. Микрокалориметрическое исследование системы полиА:полии ионы Mg -фосфатидилхолиновые липосомы.- Биофизика, 1999, т.44, №3.

221. Федоров Б.Б., Дьячков П.Н., Жданов Р.И. Структура и стабильность комплексов ДНК, ионов Me(II) и фосфатидилхолина по данным молекулярной механики и квантовой химии.- Изв.РАН. Сер.хим.,1999, №11.

222. Gruzdev A.D., Khramtsov V.V., Weiner L.M., Budker V.G. Fluorescence polarization study of the interaction of biopolymers with liposomes.- FEBS Lett., 1982, vol.137, p.227-330.

223. Koiv A., Palvimo J., Kinnunen P.K.J. Evidence for ternary complex formation by histone HI, DNA and liposoms.- Biochemistry, 1995, vol.34.

224. Venanci F., Zhdanov R., Petrelli C. et al. Entrapment of supercoiled DNA into preformed amphiphylic vesicles.- Liposomes in drug delivery. Abstracts, London, 1993, p. 122.

225. Маниатис Т. и др. Молекулярное клонирование (перевод с англ. под ред.Баева А.А., Скрябина К.Г.), М.: Мир, 1984.

226. Фрайфелдер Д. Абсорбционная спектроскопия.- В: Физическая биохимия, 1980, М.: Мир.

227. Handbook of Biochemistry and Molecular Biology. Ed. Fastman C.D., CRS Press, 1975, v.l.

228. Справочник химика Т.3, 1965, М.: "Химия".

229. Colotto A., Kharakoz D.P., Lohner K., Laggner P. Ultrasonic Study of Melittin Effects on Phospholipid Model Membranes.- Biophys.J., 1993, vol.65, p.2360-2367.

230. Kharakoz D.P. Single-frequency ultrasonic measurement of kinetic constants and volume and compressibility effects of the proton-transfer reaction in aqueous solutions.-J.Acoust.Soc.Am., 1992, vol.92, p.287-289.

231. Sarvazyan A.P. Development of methods of precise ultrasonic measurements in small volume of liquids.- Ultrasonics, 1982, v.20, p. 151-154.

232. Сарвазян А.П., Харакоз Д.П. Дифференциальный интерферометр малого объема для измерения скорости и поглощения ультразвука.- Приборы и техника эксперимента, 1981, т.З, с. 203-206.

233. Букин В.А. Акустическое исследование гидратации нуклеиновых кислот.-Кандидатская диссертация, 1983.

234. Харакоз Д.П. Исследование сжимаемости белков и аминокислот в растворе акустическим методом.- Кандидатская диссертация, 1983.

235. Fry E.J. Biological effect of ultrasound a review - Proc.IEEE, 1979, vol.67, p.604-619.

236. Боровягин В.Л., Василенко И.А., Сабельников А.Г., Тараховский Ю.С. -Биологические мембраны, 1987, т.4, №6, с.624-638.

237. Boroviagin V.L., Sabelnikov A.G., Tarahovsky Y.S., Vasilenko I.A.- J. Membrane Biol., 1987, v.100, p.229-242.

238. De Boland A.R., Jilka R.L., Martonosi A.N. Passive Ca2+ permeability of phospholipid vesicles and sarcoplasmic reticulum membranes.- J.Biol.Chem., 1975, vol.250, p.7501-7510.

239. Vanderkooi J.M., Martonosi A. Sarcoplasmic reticulum. XYI. The permeability of phosphatidylcholine vesicles for calcium.- Arch.Biochem. and Biophys., 1971, vol.147, p.632-646.

240. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

241. Tarahovsky, R.S. Khusainova, A.V. Gorelov, T.I. Nicolaeva, A.A. Deev, A.K. Dawson, G.R. Ivanitsky DNA initiates polymorphic structural transitions in lecithin II FEBS Letters, 1996, v.390, pp. 133-136.

242. Ю.С. Тараховский, P.C. Хусаинова, A.B. Горелов, К.А. Даусон, Г.Р. Иваницкий -Влияние ДНК на ультраструктурную организацию липосом из лецитина в присутствии катионов кальция // Доклады Академии Наук, 1996, том 350, № 3, с.411-413.

243. P.C. Хусаинова, Г.Р. Иваницкий, К.А. Даусон, Ю.А. Рочев Изменение структуры ДНК-липидных комплексов при изменении молярного соотношения нуклеотид/липид// II Съезд бифизиков России, 1999, тезисы докладов, т. 1, с. 177.

244. Д.П. Харакоз, P.C. Хусаинова, A.B. Горелов, К.А. Даусон Стехиометрия взаимодействия ДНК с дипальмитоилфосфатидилхолином в присутствии Са2+. Ультразвуковое исследование // II Съезд бифизиков России, 1999, тезисы докладов, т. 1, с. 177.

245. P.C. Хусаинова, Г.Р. Иваницкий, К.А. Даусон Стехиометрия взаимодействия ДНК с дипальмитоилфосфатидилхолином в присутствии Са2+. Микрокалориметрическое исследование // II Съезд бифизиков России, 1999, тезисы докладов, т. 1, с. 178.

246. P.C. Хусаинова, В.И. Попов, Г.Р. Иваницкий, К.А. Даусон, Ю.А. Рочев -Выявление агрегатных состояний ДНК-липидных комплексов с помощью микрокалориметрических исследований // II Съезд бифизиков России, 1999, тезисы докладов, т. 1, с. 179.

247. D.P. Kharakoz, R.S. Khusainova, A.V. Gorelov, К.А. Dawson Stoichiometry of dipalmitoylphosphatidylcholine-DNA interection in the presence of Ca2+: a temperature-scanning ultrasonic study II FEBS Letters, 1999, v.446, pp.27-29.

248. P.C. Хусаинова, A.A. Хусаинов, В.И. Попов, К.А. Даусон, Г.Р. Иваницкий -Выявление агрегатных состояний ДНК-Са2+-дипальмитоилфосфатидилхолин с помощью микрокалориметрических исследований // Доклады Академии Наук, 1999, том 367, № 3, с.416-419.

249. P.C. Хусаинова, К.А. Даусон, Ю.А. Рочев, A.B. Горелов, Г.Р. Иваницкий -Структурные изменения комплексов ДНК-Са2+-дипальмитоилфосфатидилхолин при изменении молярного соотношения нуклеотид/липид.88

250. Микрокалориметрическое исследование II Доклады Академии Наук, 1999, том 367, № 4, с.553-556.

251. Р.И. Жданов, P.С. Хусаинова, Г.P. Иваницкий, А.С. Борисенко Невирусные векторы в генной терапии. Новый подход в липофекции // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии, 2000, № 1, с. 10-17.