СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ МИОМЕТРИЯ МЫШЕЙ ПРИ ЕГО ИНВОЛЮЦИИ ПОСЛЕ МНОГОКРАТНЫХ РОДОВ И ПРЕРВАННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ

Обединская, Кристина Сергеевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ МИОМЕТРИЯ МЫШЕЙ ПРИ ЕГО ИНВОЛЮЦИИ ПОСЛЕ МНОГОКРАТНЫХ РОДОВ И ПРЕРВАННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ МИОМЕТРИЯ МЫШЕЙ ПРИ ЕГО ИНВОЛЮЦИИ ПОСЛЕ МНОГОКРАТНЫХ РОДОВ И ПРЕРВАННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ"

004603915

На правах рукописи

ОБЕДИНСКАЯ КРИСТИНА СЕРГЕЕВНА

СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ МИОМЕТРИЯ МЫШЕЙ ПРИ ЕГО ИНВОЛЮЦИИ ПОСЛЕ МНОГОКРАТНЫХ РОДОВ И ПРЕРВАННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ

03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология 14.03.02. - патологическая анатомия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

~ 2 СЕН 2010

Новосибирск - 2010

004608915

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научный центр клинической и экспериментальной медицины Сибирского отделения РАМН и Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава

Научные руководители:

Заслуженный деятель науки РФ, академик РАМН,

доктор медицинских наук, профессор Шкурупий Вячеслав Алексеевич

Доктор медицинских наук,

профессор Иадеев Александр Петрович

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор Доктор медицинских наук, профессор

Обухова Лидия Александровна Ларионов Петр Михайлович

Ведущая организация: НИИ региональной патологии и патоморфологии СО РАМН

Зашита состоится » 2010 года в часов на заседании

диссертационного совета Д001.048.01 в Научном центре клинической и экспериментальной медицины Сибирского отделения Российской академии медицинских наук по адресу: 630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2. Тел. / факс 8(383) 333 64 56

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НЦ КЭМ СО РАМН. Автореферат разослан

2010 года

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор биологических наук Пальчикова Н.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Послеродовый период - заключительная стадия гестационного процесса, характеризующаяся «обратным развитием» изменений, связанных с беременностью и родами, становлением лактационной функции молочных желез и восстановлением деятельности гипоталамо-гипофизарно-янчниковой системы (Чернуха Е.А., 2006, Милованов А.П. и др., 2007). Особенностью матки в перинатальный период является то, что во время беременности ее масса значительно возрастает, а после родов очень быстро возвращается к исходному (до беременности) уровню, что обусловлено инволютивными процессами, происходящими преимущественно в миометрии.

Механизмы, реализующие программу послеродовых структурных изменений миометрия, не достаточно изучены. В научной литературе рассматривают четыре механизма, обеспечивающих постгесгационную трансформацию структур матки: апоптоз (Chatzaki Е., et al., 2003; Carón P.-L. et al., 2009), клазмацитоз (Шкурупий B.A., и др., 2008; Inoue S. et al., 1983), аутофагоцитоз и некроз (Henell F. et al., 1983; Jeffrey J.J., 1991). Однако какой из приведенных механизмов элиминации структур является наиболее эффективным и «физиологичным» не ясно. Так, аутофагоцитоз, в связи с малым его масштабом, не может быть таковым. Физиологически наиболее «предпочтительным» представляется клазмацитоз, т.к. с ним не сопряжены уменьшение численности миоцитов и последующее воспаление, поскольку происходит лишь уменьшение размеров миоцитов, которые могут быть восстановлены в процессе регенерационной гипертрофии при повторной беременности и, видимо, без ущерба для силы мышечных сокращений. Однако наиболее широко распространено представление о том, что ведущим механизмом послеродовой инволюции структур маки является апоптоз (Shimonnvitz S. et al., 1994; Leppert P C.,1998; Pampfer S. et al., 2003; Chatzaki E. et al., 2003; Dery M.C. et al., 2003; Yin Y. et al., 2008; Caron P.-L. et al., 2009).

Известно, что увеличение количества беременностей, а также многократные беременности, наряду с эпизодами их искусственного прерывания, являются факторами риска развития ряда осложнений при родах, среди которых угрожающие плоду и матери -атония матки и слабость родовых сил. Одним из ведущих признаков клинического неблагополучия в течете послеродового периода является субинволюция матки, которая достаточно часто встречается после родов у женщин с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом. В связи с этим не ясно, какая существует зависимость между инволютивными процессами, происходящими в миометрии после родов и слабостью родовых сил при многочисленных беременностях, а также при наличии эпизодов прерывания беременности в анамнезе.

Таким образом, для решения вопросов профилактики и разработки наиболее эффективных способов коррекции послеродовых осложнений в условиях многократных родов, и родов, осложненных прерыванием предшествующей беременности, необходимо белее углубленное изучение механизмов инволюции миометрия в экспериментах, моделирующих процессы, потенциально сопряженные с возможностью развития осложнений в родах и послеродовом периоде при многократных беременностях и их искусственном прерывании, в частности.

Цель исследования. Изучить особенности структурных преобразований в миометрии мышей линии C57/B16g во время беременности, в ранний и поздний послеродовые периоды при однократной, многократных берменносгях и многократных беременносях с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности.

Задачи исследования:

1. Изучить структурную организацию миометрия у небеременных мышей линии C57BL/6g и при физиологической беременности.

2. Изучить особенности структурных преобразований паренхимы и стромы миометрия мышей линии C57BL/6g в процессе третьей физиологической беременности и его инволюции после нее.

3. Изучить структурные преобразования в миометрии мышей в процессе третьей физиологической беременности и после нее у мышей линии С57ВЬ^ с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности.

4. Изучить структурные проявления механизмов, обеспечивающих послеродовую инволюцию матки у мышей линии С57ВЬ/6§ после однократных, многократных и многократных с прерыванием второй беременности родов.

5. Изучить влияние многократных физиологических беременностей и родов, а так же родов с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности на вероятное изменение количества плодов в помете у мышей.

Научная новизна результатов исследования. Впервые рассмотрены механизмы структурных преобразований миометрия мышей линии С57ВЬ/6§ при беременности и в процессе послеродовой инволюции. Показано, что послеродовая инволюция миометрия у мышей линии С57ВЬ^ завершается к 10-м суткам после родов, проявляясь «возвратом» структурной организации миометрия к структурным параметрам матки у небеременных животных. Показано, что процесс инволюции после третьих физиологических беременностей и родов, и физиологических родов, которым предшествовало искусственное прерывание беременности, не завершался к 10-м суткам послеродового периода. Удлинение процесса инволюции сопряжено с неэффективностью механизмов элиминации (клазмацитоз, апоптоз, некроз) структур миометрия. Впервые показано, что инициация процессов инволюции миометрия имеет обратную корреляционную связь с ухудшением васкуляризации миометрия, особенно после многократных родов с эпизодом прерывания предшествующей беременности, а ухудшение трофики миометрия инициирует процессы клазмацитоза, апоптоза и некроза миоцитов в нем.

Впервые установлено, что к 10-м суткам послеродового периода в интерстиции миометрия у мышей, перенесших три беременности, каждая из которых закончилась физиологическими родами, а также у мышей с наличием эпизода прерывания беременности в «анамнезе», происходило многократное уменьшение количества коллагена. Впервые показано, что за «пределами родов» в тех же экспериментальных условиях в миометрии продолжались процессы пролиферации миоцитов, а уровень структурных механизмов инволюции у самок в связи с многократными родами и эпизодом прерывания беременности - недостаточен для завершения процесса инволюции миометрия к 10-м суткам послеродового периода.

Научно-практическая значимость работы. Показано, что основными механизмами послеродовой инволюции являются: клазмацитоз, апоптоз, некроз при адекватном количестве макрофагов в миометрии, «обеспечивающих» элиминацию погибших миоцитов и цитоплазматических конгломератов (продуктов клазмацитоза) из интерстиция. Показано, что многократная беременность и многократная беременность с эпизодом ее прерывания сопряжены с избыточной элиминацией коллагена, удлинением периода послеродовой инволюции миометрия в связи с задержкой процесса элиминации структур миометрия и уменьшением количества плодов в помете у мышей.

Положения, выносимые на защиту.

1. Ведущими механизмами, обеспечивающими послеродовую инволюцию миометрия у мышей, являются: клазмацитоз, апоптоз, некроз миоцитов с последующим фагоцитозом их «продуктов» макрофагами. Эффективность механизмов послеродовой инволюции миометрия снижена после многократных физиологических родов и многократных физиологических родов с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности.

2. Многократные физиологические беременности и роды, и многократные беременности и роды с эпизодом искусственного прерывания предыдущей (второй) беременности, сопряжены с: продолжением пролиферативных процессов в миометрии после родов, удлинением периода инволюции миометрия за пределы 10-х суток в связи с метшей эффективностью механизмов ее обеспечивающих по сравнению с таковыми у мышей после

однократных физиологических беременностей и родов; существенным уменьшением количества коллагена в миометрии и количества плодов в помете.

3. Установлены сильные обратные корреляционные связи структурных проявлений механизмов, обеспечивающих инволюцию миометрия и коэффициента его васкулярнзации, а также прямые сильные корреляции изменений численной плотности макрофагов в миометрии с концентрацией его структур, подлежащих элиминации в послеродовом периоде. Это свидетельствует о том, что ухудшение васкулярнзации миометрия в конце беременности и в послеродовом периоде является фактором, инициирующим процесс инволюции миометрия механизмами клазмацитоза, апоптоза и некроза, и, как следствие, приводит к адекватному увеличению численности макрофагов без проявлений процесса воспаления в миометрии.

Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на III съезде Российского общества патологоанатомов (Самара, 2009 г.), четвертой Всероссийской научно-практической конференции «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов» с международным участием (Новосибирск, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, из которых 2 в журналах, включенных в список периодических научных изданий, рекомендованных ВАК РФ для опубликования материалов кандидатских диссертаций.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 142 страницах машинописного текста, содержит обзор литературы, описание материала и методов исследования, результаты исследования и их обсуждение, заключение, выводы и список цитируемой литературы, который включает 98 русскоязычных и 116 иностранных источников. Работа иллюстрирована 13 микрофотографиями, 22 графиками, 16 таблицами.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена на 95 мышах-самках двухмесячного возраста массой 20-22 гр. линии С57В1^. Животные получены из питомника НИИ цитологии и генетики СО РАН (г. Новосибирск).

Животных содержали в стандартных условиях, на стандартной лабораторной диете, они имели свободный доступ к пище и воде. Продолжительность периода адаптации мышей к условиям содержания перед проведением эксперимента составила две недели. Для получения материала по методике, описанной М. Мопк (1987), группу самок (по 5 животных) помещали в клетку с самцом. Срок беременности у самок определяли со дня обнаружения во влагалище копулятивной пробки. Животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом методом дислокации шейных позвонков. Регистрировали количество плодов в каждой группе мышей. Все воздействия на животных в ходе эксперимента, взятие

/ /,00 1 АООЧ

экспериментального материала осуществляли в утренние часы (с 9 до 10 ).

Животные были разделены на четыре группы по пять мышей на каждом этапе исследования:

Первая группа - шгтактная (небеременные) мыши-самки линии С57В1^.

Вторая группа - однократно рожавшие мыши-самки линии С57В1/6, перенесшие одну беременность.

Третья группа - многократно рожавшие мыши-самки линии C57Bl/6g, перенесшие две беременности. Образцы матки получали в течение третьей физиологической беременности и после третьих физиологических родов.

Четвертая группа - многократно рожавшие с эпизодом прерывания беременности. Преждевременные роды были индуцированы препаратом «Энзапрост-Ф» (Хиноин, Венгрия) с концентрацией действующего вещества 5 мг/мл, на 15-е сутки второй беременности. Введение препарата осуществляли интралеритонеально в дозе 0,3 мл. на мышь. Образцы материала получали в течение третьей физиологической беременности и после третьих физиологических родов.

Объектом исследования служил миометрий мышей линии C57Bl/6g, образцы которого забирали на 10-е и 20-е сутки беременности и на 1-е, 3-е, 5-е, 10-е сутки после родов.

Для гистологического исследования образцы миометрия получали из межплацентарных зон матки, фиксировали в 10%-ном водном растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и заключали в парафин. Срезы толщиной 5-6 мкм. изготавливали на микротоме ротационного типа НМ 355S (Mikrom) (Carl Zeiss), окрашивали гематоксилином Майера и эозином и по ван Гизон (Пирс Э., 1962; Лили Р., 1969). Для идентификации апоптотических изменений в миоцитах проводили иммунногистохимическое окрашивание срезов с использованием моноклональных антител caspasae 3 (Novocastra Ltd, Великобритания) (Саркисов Д.С., Перов Ю.Л., 1996). Гистологические срезы исследовали в световом микроскопе AxioStar plus (Carl Zaiss).

Морфометрию структур миометрия осуществляли с помощью закрытой тестовой системы, состоящей из 25 регулярно расположенных квадратов с тестовой площадью 1600 мкм2 при конечном увеличении в 400 раз. Подсчитывали объемную (Vv) и численную (Nai) плотности миоцитов миометрия и их структур (ядро, цитоплазма); сосудов миометрия. Для оценки эффективности кровоснабжения миометрия вычисляли коэффициент васкуляризации (отношение объемной плотности сосудов в миометрии к суммарной объемной плотности миоцитов). Величину данного показателя выражали в долях единицы. Определяли средний объем ядра миоцита (отношение объемной плотности (Vv) ядер миоцитов к численной плотности (Nai) ядер миоцгов) и средний объем самого миоцита (отношение общей объемной плотности (Vv) миоцитов к численной плотности (Nai) цитоплазмы миоцитов). Оценивали объемные плотности (Vv) коллагеновых волокон стромы миометрия, алоптотически измененных миоцитов, идентифицированных по визуальным цитологическим признакам (кариопикноз, кариорексис, апоптотическое тельце) и с использованием иммуногистохимической метки для выявления экспрессии caspasae 3, цитоплазматических конгломератов в интерстиции (продукты клазмацитоза цитоплазмы миоцитов) и некротически измененных миоцитов. На основании полученных данных, в каждом из периодов наблюдений путем сложения определяли суммарную объемную плотность миоцитов, погибших механизмами апоптоза, клазмацитоза (цитоплазматические конгломераты в интерстиции) и некроза. Кроме того, определяли объемную (Vv) и численную (Nai) плотности миоцитов в состоянии вакуольной и баллонной дистрофий. Исследовали численную плотность (Nai) макрофагов в интерстиции миометрия. Проводили корреляционный анализ величин (результатов морфометрии) - устанавливали характер взаимосвязи объемных долей сосудов миометрия с объемными долями некротически и алоптотически измененных миоцитов; концентрацией макрофагов (Nai) с объемными плотностями алоптотически, некротически измененных миоцитов и продуктами их клазмацитоза.

Статистическую обработку полученных данных выполняли в соответствии с принципами вариационной статистики (Автандилов Г. Г., 1996; Гланц С.В., 1999) и с использованием пакета прикладных программ «Statistica 7,0» (StatSoft Inc., USA). Результаты представлены как среднее арифметическое и ошибка среднего (М±т). Оценку межгрупповых различий проводили с учетом нормального распределения величин исследованных параметров и использованием t-критерия Стьюдента. Проводили корреляционный анализ с расчетом коэффициента ранговой корреляции Пирсона. Выявленные различия считали статистически значимыми при величине р<0,05.

Полученные результаты представлены в виде графиков, диаграмм и таблиц, созданных с помощью программ Microsoft Word и Microsoft Excel 2007.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Структурная организация небеременных мышей-самок линии С57В1^

Морфологическое исследование миоцитов миометрия мышей интактной группы показало, что данная популяция клеток разнородна. В соответствии с морфофункциональной классификацией групп миоцитов миометрия, предложенной В.А. Шкурупием, ЕВ. Дубининым (2005), было выявлено, что большая часть миоцигов относится к клеткам 1-го (активно функционирующие) и 2-го (покоящиеся) типов. Содержание 3-го, 4-го, 5-го типов миоцитов (миоциты в состоянии вакуольной, баллонной дистрофий и апоптотически измененных миоцитов, соответственно) было незначительным (табл. 1). Кроме того, на долю миоцитов приходилось более двух третей и менее трети - на долю коллагеновых волокон стромы миометрия (табл. 2).

Таблица 1

Результаты морфометрического исследования структур миометрия мышей линии C57Bl/6g при однократной беременности и в процессе его послеродовой инволюции (М±гп)

Усло- Мио- Мио- Цито- Апопто- Некроти- Общий Макро-

вия циты в циты в плазма- тически чески объем фаги

экспе- состо- состо- тические изме- изменен- мио-

римен- янии янии конгло- ненные ные цитов,

та, вакуоль- баллон- мераты в мио- миоциты подле-

объект ной ной интерстиц циты жщих

дистро- дистро- ии элими-

фии фии нации

(Vv) (Vv) (Vv) (Vv) (Vv) (Vv) (Nai)

Метает

-ные 1,36±0,29 1,28±0,35 0,80±0,27 1,68±0,34 0,48±0,14 2,90±0,2 0,73±0,11

мыши-

самки

10 6,88±0,85 2,64±0,35 3,12±0,57 1,84±0,38 0,44±0,13 5,40±0,36 0,91±0,14

а а а а

20 Н,92±0,7 3,28±0,54 5,04±1,02 2,80±0,40 2,48±0,51 10,32±0,64 1,25±0,13

8 а а а а а а а

1 9,44±0,70 6,56±0,80 16,08±1,01 3,44±0,49 2,92±0,47 22,44±0,65 1,84±0,25

ab ab b а а ab а

3 7,28±0,8 I 5,04±0,56 8,00±1,0 7 5,04±0,51 1,44±0,25 14,49±0,75 1,17±0,12

ab ab b ab ab ab а

5 5,28±0,71 7,76±0,77 3,76±0,88 2,32±0,41 0,96±0,76 7,04±0,68 0,87±0,12

ab ab b а b ab b

10 3,28±0,39 2,88±0,49 0,00 2,16±0,32 0,44±0,12 2,62±0,33 0,77±0,10

ab а ab b b b

Примечание: отличия статистически значимы - а - от величин параметров миометрия интактных самок, Ь - от параметров миометрия на 20-е сутки беременности.

10,20 - продолжительность беременности (сутки).

1,3, 5,10 - продолжительность послеродового инволютивного периода (сутки).

2. Структурные изменения миометрия впервые беременных мышей-самок линии С57В1^ и в процессе его послеродовой инволюции

Во время первой беременности наблюдали увеличение объема матки. При морфометрическом исследовании миометрия на 10-е и 20-е сутки беременности было определено, что гипертрофия матки обусловлена процессами пролиферации миоцитов, т.к.

средние объемы миоцитов и их ядер уменьшились в 2 раза, а численная плотность ядер увеличилась в 3 раза (см. табл. 2). Наряду с анаболическими процессами, происходящими в паренхиме миометрия, наблюдали процессы деструкции миоцитов - увеличение доли дистрофически измененных миоцитов к концу беременности (см. табл. 1). В период беременности доля коллагеновых волокон стромы уменьшалась (см. табл. 2).

Таблица 2

Результаты морфометрического исследования паренхимы, коллагена и структур миоцитов миометрия мышей линии С57В1^ при однократной беременности и в процессе послеродовой инволюции (М±т)

Условия Общий Объем Цитоплаз- Объем Ядра Коллагеновые

экспери- объем миоцита мы ядра миоцитов волокна

мента, миоцитов миоцитов стромы

объект миометрия миометрия

(I УУ) (V) (N31) (V) (N31) (Уу)

Интакт-

ные 62,74±1,25 1,88±0,02 33,46±1,08 0,73±0,02 28,05±1,05 27,30±1,19

мыши-

самки

10 68,65±0,96 1,53±0,02 44,89±1,79 0,63±0,01 38,12±1,74 25,56±1,06

а а а а а

20 75,54±1,12 0,89±0,01 84,00±1,01 0,32±0,02 78,79±1,0б 15,38±1,19

а а а а а а

1 71,28±0,99 1,67±0,01 42,б2±1,61 0,65±0,02 32,48±1,54 18,01±1,0б

аЪ аЪ аЬ аЬ аЬ аЬ

3 68,20±1,21 1,70±0,02 40,08±1,34 0,65±0,01 31,88±0,63 21,25±1,18

аЬ аЬ аЬ аЬ Ь аЬ

5 65,45±0,98 1,83±0,01 35,86±1,21 0,64±0,02 30,05±1,36 22,8б±1,0б

Ь аЬ Ь аЬ Ь аЬ

10 63,08±1,12 1,80±0,01 34,95±1,32 0,68±0,01 28,04±0,80 27,98±0,9б

Ь аЬ Ь аЬ Ь Ь

10,20 - продолжительность беременности (сутки).

1,3, 5, 10 - продолжительность послеродового инволютивного периода (сутки).

Объемная и численная плотности сосудов к середине беременности не изменялись и соответствовали аналогичным величинам в небеременной матке. В конце беременности величина объемной плотности сосудов увеличивалась на 48%, а величина численной -изменялась незначительно (табл. 3). При гистологическом исследовании нередко наблюдали полнокровие сосудов. Все это указывает на застойные явления в миометрии в данный период беременности, что может быть причиной нарушения гемодинамики в михроциркуляторном русле и развития тканевой гипоксии. Недостаточная трофика миоцитов с последующим развитием окислительного стресса в миоцитах может объяснить масштабную трансформацию миоцитов в состояние вакуольной дистрофии, а также явления апоптоза и, возможно, клазмацитоза.

Так, общий объем элиминированных миоцитов к исходу беременности в 3,5 раза превышал величину аналогичного показателя у животных интактной группы (см. табл. 1). Преимущественным механизмом элиминации миоцитов в рассматриваемом периоде был клазмацитоз, продукты которого на светооптическом уровне были представлены

скоплениями многочисленных вакуолей в ингерсгации - цигоплазматические конгломераты из участков цитолеммы миоцитов (Шкурупий В.А., Дубинин Е В. и др., 2008). Объемная плотность данных структур в середине беременности была выше, чем у небеременных животных и продолжала увеличиваться к моменту родов. Элиминацию структур миометрия механизмами некроза и апоптоза наблюдали в конце беременности, и их объемы были примерно равными (см. табл. 1).

Элиминация миоцитов, находящихся на завершающих стадиях гибели (апоптотически и некротически измененные миоциты), и фрагментов их цитолеммы (продукты клазмацитоза) является «прерогативой» макрофагов (Hunt J.S.1990; De М., Wood G.W., 1990; Grossman C.J. et al., 1994; Druckmann R., 2001). Для адекватной реализации данной функции возникает «необходимость» увеличения численного состава макрофагального звена. Согласно данным, представленным в таблице 1, на 20-е сутки бсрсмешюсти численная плотность макрофагов увеличилась почти в 2 раза по сравнению с величиной данного показателя у мышей шпаклюй группы. Была выявлена прямая положительная корреляционная зависимость между изменениями объемных плотностей каждой из структур, подлежащих элиминации, и численной плотностью макрофагов (табл. 4). Необходимо отметить, что, несмотря на наличие деструктивных изменений в миоцитах, выраженных морфологических признаков развития типичной воспалительной реакции (нейтрофилы, лимфоидно-гистиоцитарная инфильтрация миометрия) не было обнаружено.

Таблица 3

Результаты морфометрического исследования сосудов миометрия мышей линии C57Bl/6g при однократной беременности и в процессе послеродовой инволюции (М±т)

Условия Исследованные параметры

эксперимента, объект Сосуды миометрия (Vv) Сосуды миометрия (Nai) Коэффициент васкуляризации*

Интактные мыши-самки 9,5 8± 1,24 1,47±0,16 0,15±0,02

10 9,88±1,01 1,42±0,17 0,15±0,01

20 14,67±1,45 а 1,59±0,16 0,19±0,01 а

1 12,40±1,44 b 1,42±0,13 0,17±0,02Ъ

3 10,89±1,07Ъ 1,49±0,16 0,16±0,01 b

5 10,60±1,03 b 1,57±0,13 0,16±0,01 b

10 9,98±0,95 b 1,51±0,36 0,15±0,01 b

Примечание; отличия статистически значимы - а - от величин параметров миометрия интактных самок, Ь - от параметров миометрия на 20-е сутки беременности.

10,20 - продолжительность беременности (сутки).

1,3,5,10 - продолжительность послеродового инволютивного периода (сутки).

* - коэффициент васкуляризации — УУу сосудов

Уу миоцитов.

В период ранней (1-е, 3-й сутки) послеродовой инволюции при исследовании гистологических срезов миометрия наблюдали гипертрофированные, неупорядоченно ориентированные друг относительно друга миоциты, которые отличались значительным полиморфизмом. На 5-е сутки после родов наблюдали значительное уменьшение размеров миоцитов и их более компактное расположение, а к концу послеродового периода (10-е сутки) гистологическое строение миометрия было сходным с таковым у небеременных мышей.

С помощью морфометрического исследования было обнаружено, что сразу после родов определялась тенденция к уменьшению объемной плотности миоцитов относительно

величины аналогичного показателя данной группы перед родами (20-е сутки), а на 10-е сутки наблюдали ее соответствие величине того же показателя у интактных животных. Аналогичную закономерность наблюдали при изучении концентрации ядер миоиитов в миометрии (см. табл. 2). Вместе с тем происходило уменьшение доли коллагеновых волокон в интерстиции мышечного слоя матки (см. табл. 2). К 10-м суткам послеродового периода доля коллагеновых волокон соответствовала величине аналогичного показателя у небеременных самок. Динамика величин объемной плотности данных параметров (за исключением коллагена) приведена на рис. 1.

% 18 -16 -14 -12 -10 -8 -6

4 -2 -

Интактные 10 Б 20 Б 1 ПП 3 ПП 5 ПП 10 ГШ

животные

-■-Цитоплазматические конгломераты в интерстиции

...»— Апоптотически измененные миоииты —— Некротически измененные миоциты

Рис. 1. Объемные плотности (Уу) элиминируемых структур (цитоплазматические конгломераты в интерстиции, апоптотически измененные миоциты, некротически измененные миоциты) во время первой беременности (Б) и в послеродовый период (ПП).

10,20 - продолжительность беременности (сутки).

1, 3, 5,10 - продолжительность послеродового периода (сутки).

Условия васкуляризации миометрия в раннем послеродовом периоде несколько ухудшались, т.к., судя по коэффициенту васкуляризации, на единицу объема кровоснабжаемого миометрия приходилось большее количество мышечной ткани. Уменьшение объема сосудистого русла может быть обусловлено спазмом сосудов во время родов и мощной ретракцией миометрия после родов. Однако к 10-м суткам инволютивного периода коэффициент васкуляризации соответствовал таковому у небеременных животных (см. табл. 3).

Вероятнее всего общим механизмом, индуцирующим процессы инволюции структур, являются развившиеся условия недостаточной трофики. Об этом свидетельствуют результаты, проведенного нами, корреляционного анализа. Именно снижение объемной плотности сосудов в миометрии обусловливало увеличение доли апоптотически измененных миоцитов (табл. 4). Во все исследованные сроки периода послеродовой инвотоции, основная доля структур, подлежащих элиминации, приходилась на продукты клазмацитоза (цитоплазматические конгломераты в интерстиции), и примерно равные доли - на апоптотически (с некоторым преобладанием) и некротически измененные миоциты (см. рис. 1).

Таблица 4

Результаты корреляционного анализа структур миометрия мышей линии С57В1/6" при однократной беременности и в процессе послеродовой инволюции

Условия Сосуды Сосуды Макрофаги и Макрофаги Макрофаги (ЫаО

экспе- миометрия и миометрия и апоптотическ (Ш) и и некротически

римента, некроти- апоптоти- и измененные цито плазма- измененные

объект чески чески миоциты (№1) тические миоциты

изменен-ные изменен-ные конгломераты в (уу)

миоциты (уу) миоциты ОМ шггерегиции (Уу)

Интакт-

ные мыши- -0,33 -0,38 +0,55 +0,59 +0,54

самки

10 -0,25 -0,45 +0,65 +0,60 +0,57

20 -0,42 +0,05 +0,49 +0,76 +0,64

1 -0,14 -0,60 +0,50 +0,67 +0,58

3 -0,22 -0,59 +0,19 +0,83 +0,57

5 -0,31 -0,48 +0,37 +0,62 +0,76

10 -0,06 -0,79 +0,31 +0,00 +0,57

В отношении апоптотически измененных миоцитов необходимо отметить, что результаты определения их концентрации (объемной и численной плотностей) в миометрия при использовании визуальных цитологических критериев достоверно не отличались от данных, полученных при применении метода иммуноцитологической визуализации экспрессии саврахае 3 (рис. 2).

О Н-1-■-'-■-"-'----ч-■-■

Ишиктные 10 Б 20 Б 1 ПП 3 ПП 5 ПП 10 ПП

животные -—--,---

--• — Апоптотически измененные миииигы.ицетифииировагавде по

цитологическим критериям -•-Миоштгы, меченые сазрайае 3

Рис. 2. Объемная плотность (Уу) апоптотически изменешшх миоцитов в миометрии мышей линии C57Bl/бg при однократной беременности (Б) и в послеродовом периоде (ПП). 10,20 - продолжительность беременности (сутки). 1,3,5, 10 - продолжительность послеродового периода (сутки).

В дальнейшем концентрация клеток, подлежащих элиминации, снижалась, очевидно, в связи с их некробиозом и элиминацией макрофагами, и на 10 сутки исследованного

периода была близка к величине аналогичного показателя у интактных животных (см. табл. 1).

Во все периоды после родов концентрация макрофагов в миометрии изменялась пропорционально содержанию всех структур, подлежащих элиминации. При анализе общей численной плотности макрофагов и долей каждой из структур, подлежащих элиминации, была установлена определенная взаимосвязь (см. табл. 1). На 10-е сутки после родов продукты клазмацитоза с помощью метода светооптическон визуализации уже не определялись, а доли остальных структур, подлежащих элиминации, не имели статистически значимых отличий от величин аналогичных показателей в миометрии интактных животных.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют об успешном завершении процесса инволюции миометрия в матке мышей линии C57BL/6g после однократных физиологических родов.

3. Результаты морфологического исследования миометрия мышей-самок линии C57BI/6g в процессе многократной физиологической беременности и послеродовой

инволюции

В процессе третьей беременности наблюдали увеличение доли миоцитов миометрия. Гестационные изменения (гипертрофия, гиперплазия) миоцитов были несколько менее выражены, чем в миометрии мышей 1-ой группы (табл. 5). При этом динамика относительных величин объемных плотностей стромально-паренхиматозного компонентов в условиях однократной и многократной беременностей имела общую тенденцию. Однако соотношения паренхимы и коллагена в интерстиции значительно отличались: 3:1 - в конце третьей беременности и 5:1 - в конце первой.

Таблица 5

Результаты морфометрического исследования паренхимы, коллагена и структур миоцитов миометрия мышей линии C57Bl/6g при многократной беременности и в процессе послеродовой инволюции (М±т)

Условия эксперимента, объект Общий объем миоцитов миометрия (7.VV) Объем миоцита (V) Цитоплазма миоцитов (Nai) Объем ядра (V) Ядра миоцитов (Nai) Коллагеновые волокна стромы миометрия (Vv)

Интактные мыши-самки 62,74±1,25 1,87±0,02 33,46±1,08 0,73±0,01 28,05±1,05 27,30±1,19

10 64,81±0,80 0,85±0,01 а 75,99±1,05 а 0,43±0,01 а 46,06±1,27 а 32,83±1,01 а

20 70,05±1,35 а 1,26±0,02 а 55,30±1,07 а 0,36±0,02 69,53±1,53 а 28,5б±1,15

1 72,45±0,78 а 0,85±0,02 ab 85,17±0,99 ab 0,45±0,01 а 66,49±1,07 ab 24,06±0,86 ab

3 80,36±1,15 ab 0,78±0,02 ab 102,26±1,83 ab 0,37±0,01 а 94,51±1,08 ab 16,32±1,22 ab

5 86,36±1,23 ab 0,67±0,02 ab 131,48±1,57 ab 0,37±0,02 а 119,03±l,55ab 10,32±1,16 ab

10 88,21±0,93 ab 0,63±0,02 ab 139,15±1,40 ab 0,37±0,01 а 127,18±1,40 ab 4,56±1,28 ab

Примечание: отличия статистически значимы - а - от величин параметров миометрия интактных самок, Ь - от параметров миометрия на 20-е сутки беременности. 10,20 - продолжительность беременности (сутки).

1,3,5, 10 - продолжительность послеродового инволютивного периода (сутки).

В середине 3-й беременности (10-е сутки) условия кровоснабжения миометрия были значительно хуже, чем в тот же период при однократной беременности (табл. 6). Перед родами (20-е сутки) ситуация несколько улучшалась - определилась тенденция к увеличению коэффициента васкуляризации (см. табл. 6), однако кровоснабжение миометрия все равно оставалось недостаточным. Следовательно, миометрий находился в состоянии ишемии и гипоксии, что, вероятно, являлось пусковым фактором развития некробиотических, апоптотических и, возможно, клазматозных изменений миоцитов.

Таблица 6

Результаты морфометрического исследования сосудов миометрия мышей линии C57BI/6g при многократной беременности и в процессе послеродовой инволюции (М±т)

Условия эксперимента, объект Исследованные параметры

Сосуды миометрия (Vv) Сосуды миометрия (Nai) Коэффициент васкуляризации*

Интактные мыши-самки 9,58±1,24 1,47±0,16 0,15±0,02

10 2,06±0,34 а 0,77±0,12 а 0,03±0,01 а

20 3,27±0,59 а 0,84±0,15а 0,05±0,01 а

1 3,92±0,63 а 1,15±0,13 b 0,05±0,01 а

3 4,96±0,82 а l,21±0,16b 0,06±0,01а

5 5,16±0,78 ab l,25±0,15b 0,05±0,01 а

10 8,16±0,86 b I,59±0,20 0,09±0,01 ab

10, 20 - продолжительность беременности (сутки).

1,3,5, 10 - продолжительность послеродового инволютивного периода (сутки).

* - коэффициент васкуляризации - £Уу сосудов

Уу миоцитов.

По мере развития третьей беременности суммарный объем (Уу) структур, элиминированных всеми исследованными механизмами, за сутки перед родами увеличивалась в 4,6 раза по сравнению с величиной того же параметра у интактных самок, и в 1,3 раза - по сравнению с величиной аналогичного показателя у впервые беременных самок (табл. 7).

Гистологическими особенностями строения миометрия после третьих физиологических родов в раннем периоде инволюции (1-е и 3-е сутки) были: клеточный полиморфизм (максимально выраженный на 3-й сутки), большое количество вакуолизированых миоцитов, гипертрофированные миоциты, узкие прослойки соединительной ткани и немногочисленными сосуды. Морфологически миометрий на 5-е, 10-е сутки после родов отличался от такового на 1-е, 3-й сутки инволютивного периода большей однородностью клеточного состава, отсутствием пузыревидных образований в интерстиции, более компактным расположением миоцитов.

Результаты морфометрического анализа миометрия мышей после многократных родов свидетельствуют об интенсивных процессах пролиферации, происходящих в паренхиме миометрия. Так, объемная плотность миоцитов миометрия и численная плотность ядер миоцитов в течение всего исследованного послеродового периода увеличивались, вместе с тем, объем самих клеток значительно уменьшался (см. табл. 5). Нарастание суммарной объемной доли миоцитов может быть связано с многократным увеличением миоцитов в состоянии вакуольной и баллонной дистрофий, что сопряжено с увеличением объема клеток (см. табл. 7).

Таблица 7

Результаты морфометричеекого исследования структурных проявлений механизмов послеродовой инволюции миометрия мышей линии C57Bl/6g после многократной беременности (М±т)

Условия эксперимента, объект Миоциты в состоянии вакуольной дистрофии (Vv) Миоциты в состоянии баллонной дистрофии (Vv) Цитоплазма тические конгломера ты в интерстиции (Vv) Апопто-тически измененные миоциты (Vv) Некротичес ки измененные миоциты (Vv) Общий объем миоцитов, подлежщих элиминации (Vv) Макрофаги (Nai)

Интакгные мыши-самки 1,3б±0,29 1,28±0,35 0,80±0,27 1,68±0,34 0,48±0,14 2,90±0,2 0,73±0,11

10 4,04±0,61 а 3,13±0,52 а 2,24±0,96 а 2,00±0,36 0,80±0,18 5,04±0,50 а 2,01±0,24 а

20 10,27±0,86 а 4,71±0,62 а 8,08±1,32 а 2,72±0,46 2,72±0,39 13,52±0,72 а 3,04±0,28 а

1 16,8±0,91 ab б,00±0,80 ab 15,84±1,31 ab 4,64±0,44 ab 5,24±0,59 ab 25,72±0,78 ab 4,63±0,13 а

3 28,32±1,21 ab 9,92±0,84 ab 11,6±1,06 ab 7,04±0,57 ab 4,80±0,7 ab 23,44±1,33 ab 4,71±0,39 а

5 25,76±1,10 ab 4,00±0,49 а 2,08±0,43 ab 3,04±0,42 а 3,80±0,53 а 8,92±0,46 ab 4,21±0,2б а

10 20,96±1,19 ab 6,53±0,47 ab 0,00 ab 2,56±0,43 2,72±0,37 а 5,28±0,40 ab 2,85±0,28 а

Примечание: отличия статистически значимы - а - от величин параметров миометрия

интактных самок, Ь - от параметров миометрия на 20-е сутки беременности.

10,20- продолжительность беременности (сутки).

1,3,5,10- продолжительность послеродового инволютивного периода (сутки).

Наряду с увеличением доли миоцитов регистрировали и значительное (в 6 раз) уменьшение доли коллагена в интерстиции миометрия. Таким образом, паренхиматозно-стромальное отношение на 10-е сутки после родов определялось как 19:1, тогда как в миометрии интактных животных и после однократной беременности-2:1.

Формирующаяся после родов тенденция улучшения васкуляризации миометрия сохранялась и в более отдаленные сроки инволютивного периода. К 10-м суткам регистрировали увеличение коэффициента васкуляризации в 2 раза в сравнении с величиной аналогичного показателя на 20-е сутки беременности (см. табл. 6). Однако, несмотря на увеличение объемной и численной плотностей сосудов, кровоснабжение миометрия оставалось все еще недостаточным. Величины коэффициентов васкуляризации были существенно снижены по сравнению с таковыми у интактных мышей и самок после первых родов в аналогичные периоды (см. табл. 3, 6).

Возможно, с вышеописанными особенностями кровоснабжения миометрия после родов связано резкое увеличение доли подлежащих элиминации структур (см. табл. 7). Как в ситуации до родов, так и после них, в условиях однократной и многократной беременностей преобладал физиологически наиболее «выгодный» (ввиду отсутствия гибели клетки) механизм инволюции миометрия - клазмацитоз, продукты которого были полностью элиминированы на 10-е сутки после родов. Доля некротически измененных миоцитов на 1-е сутки после родов у многократно беременных мышей возросла почти в 2 раза, и во столько же относительно величины аналогичного показателя того же периода наблюдения после первых родов (см. табл. 1, 7).

Несколько менее выражены были масштабы апоптотических изменений в миовдггах. Величины объемной и численной плотностей апоптотически измененных миовдгтов, определенные иммунногисгохимичсским методом («каспазная» метка) и с использованием метода цитологической визуализации апопготически измененных миоцитов достоверно мало отличались по величинам, и не отличались по динамике (рис. 3).

% 8 -7 -6 -5 " 4 -3 -2 " 1 " О -

Интактные 10 Б 20 Б 1 ПП 3 ПП 5 ПП 10 ПП

животные

— •— Апоптотически измененные миоингы, идентифицированные по

цитологическим критериям -•-Миоциты, меченые савраэае 3

Рис. 3. Объемная (Уу) плотность апоптотически измененных миоцитов в миометрии мышей линии С57В1/6§ при многократной беременности (Б) и в послеродовом периоде (ПП).

10, 20 - продолжительность беременности (сутки).

1,3, 5, 10 - продолжительность периода послеродовой инволюции (сутки).

На 3-й сутки после родов доля апоптотически измененных миоцитов увеличилась в 1,5 раза, а некротически измененных - уменьшилась в 1,1 раз (см. табл. 7). Видимо, мощными хемоаттрактапшыми свойствами для макрофагов обладали некротически измененные миоциты (табл. 8), что продиктовано «необходимостью» скорейшей элиминации потенциальных индукторов воспаления.

Таблица 8

Результаты корреляционного анализа структур миометрия мышей линии С57ВЬ^ при многократной беременности и в процессе послеродовой инволюции

Условия Сосуды Сосуды Макрофаги и Макрофаги (№0 Макрофаги (№1)

эксперимента, миометрия и миометрия и апоптотически и цитоплазмати- и некротически

объект некротически апоптотически измененные ческие конгломе- измененные

измененные измененные миоциты раты в миоциты

миоциты (Уу) миоциты (Уу) (Ыш) интерстиции (Уу) (Уу)

Интактные

мыши-самки -0,33 -0,38 +0,55 +0,59 +0,54

10 -0,53 -0,68 +0,31 +0,68 +0,56

20 -0,74 -0,65 +0,69 +0,79 +0,61

1 -0,52 -0,39 -0,13 +0,71 +0,53

3 -0,48 -0,31 +0,36 +0,76 +0,57

5 -0,53 -0,45 -0,08 +0,65 +0,47

10 -0,59 -0,71 +0,46 0,00 +0,70

В целом, в конце периода послеродовой инволюции суммарная объемная плотность подлежащих элиминации структур была в 2 раза большей, чем у однократно беременных мышей и у животных интактной группы (см. табл. 1,7). Однако, рассмотренные механизмы, видимо, были недостаточными для полноценной инволюции миометрия к 10-м суткам после родов, т.к. миоциты, погибшие механизмами некроза и апоптоза не были элиминированы из миометрия на 10-е сутки послеродового периода.

Динамика элиминации структур рассмотренными механизмами послеродовой инволюции миометрия отражена на рис. 4.

животные

-•-Все элиминированные структуры

--«.-- Цигоплазматические конгломераты в икгерстиции .. .» — Апогтготическиизмененные миоциты

Некротически измененные миоциты_

Рис. 4. Объемная плотность (Уу) элиминированных различными механизмами структур (цитоплазматические конгломераты в интерстиции, апоптотически измененные миоциты, некротически измененные миоциты) и общего объема элиминированных гладкомышечных клеток в миометрии мышей линии С57В1/^ при многократных родах.

1,3, 5, 10 - продолжительность послеродового периода (сутки).

После третьих родов концентрация макрофагов в миометрии изменялась пропорционально изменению содержания всех подлежащих элиминации структур (см. табл. 7). Но к 10-м суткам инволютивного периода общий объем подлежащих элиминации структур был в 2 раза большим, чем у интактных самок, тогда как количество макрофагов - в 4 раза (см. табл. 7). Причины данного феномена не ясны. Возможно, это связано с сохранением достаточно высокой доли апоптотически измененных миоцитов в составе подлежащих элиминации структур, перевариваемых более медленно, чем иные структуры, что стимулировало процессы компенсации функциональной недостаточности макрофагов увеличением их численности.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о сохранении пролиферативной активности миоцитов и незавершенности процессов инволюции миометрия на 10-е сутки после родов у многорожавших мышей по сравнению с мышами, рожавшими один раз.

4. Результаты морфологического исследования миометрия матки самок-мышей линии C57Bl/6g в процессе послеродовой инволюции после многократных родов и предшествующей (второй) прерванной беременности

В процессе следующей - после прерывания предшествующей (второй) - беременности наблюдали увеличение суммарной объемной доли миоцитов, которое связано с гиперплазией миоцитов (увеличите численной плотности ядер клеток и уменьшение их объема) (табл. 9). Аналогичные закономерности проявлений рассмотренных механизмов наблюдали в эксперименте во время однократной и многократной беременностей (см. табл. 2, 5).

Таблица 9

Результаты морфометрического исследования паренхимы, коллагена и структур миоцитов миометрия мышей линии C57Bl/6g во время третьей беременности, следующей после искусственного прерывания предыдущей (второй) беременности, и в процессе послеродовой инволюции (М±т)

Условия эксперимента, объект Общий объем миоцитов миометрия (XVv) Объем миодита (V) Цитоплазма миоцитов (Nai) Объем ядра (V) Ядра миоцитов (Nai) Коллагеновые волокна стромы миометрия (Vv)

Иэтактные мыши-самки 62,74±1,25 1,87±0,02 33,46±1,08 0,73±0,01 28,05±1,05 27,30±1,19

10 65,96±1,29 0,79±0,02 а 83,43±1,49 а 0,35±0,01 а 81,58±1,52 а 16,64 ±0,83 а

20 69,43±0,80 а 1,05±0,01 а 65,84±0,92 а 0,29±0,01 а 88,13±0,80 а 20,46±1,01 а

1 71,06±1,24 а 1,51±0,01 ab 46,76±1,41 ab 0,53±0,02 ab 40,72±1,49 ab 17,52±0,96 ab

3 80,04±1,10 ab 0,86±0,01 b 92,37±1,58 ab 0,37±0,01 ab 90,77±1,58 ab 16,16±0,70 b

5 79,64±0,82 ab 0,63±0,01 ab 126,53±1,44 ab 0,33±0,02 ab 123,19±1,54 ab 13,16±0,56 ab

10 81,80±0,97 ab 0,62±0,01 ab 131,42±0,57 ab 0,34±0,01 ab 130,64±1,65 ab 11,56±0,58 ab

10,20 - продолжительность беремешюети (сутки).

1,3,5,10- продолжительность послеродового инволютивного периода (сутки).

Доля коллагеновых волокон в интерстиции миометрия к концу беременности изменялась обратно пропорционально относительно общей объемной плотности миоцитов (см. табл. 9). При этом величина данного показателя (объемная плотность коллагеновых волокон стромы) у многократно беременных мышей была большей почти на 40%, а у однократно беременных - на 33% меньшей, чем в миометрии многократно беременных мышей с прерванной беременностью в «анамнезе» (см. табл. 2, 5, 9).

В течение всего периода беременности, наступившей после прерывания предыдущей, васкуляризация миометрия была существенно хуже, чем во время первой беременности. Необходимо отметить, что объемная доля сосудов при многократной беремешюети без эпизода ее прерывания, была в 2 раза меньшей, чем с наличием последнего в «анамнезе», а численная плотность сосудов в процессе беременности не изменялась. В целом, судя по коэффициенту васкудяризации, перед родами у мышей 2-й и 3-й групп кровоснабжение миометрия было существенно хуже, чем у интактных и первородящих мышей (см. табл. 3, 6, Ю).

Таблица 10

Результаты морфометрического исследования сосудов миометрия мышей линии C57Bl/6g во время третьей беременности, следующей после искусственного прерывания предыдущей (второй) беременности, и в процессе послеродовой инволюции (М±т)

Условия Исследованные параметры

эксперимента, Сосуды миометрия Сосуды миометрия Коэффициент

объект (Vv) (Nai) васкуляризации*

Ингактные мыши- 9,58±1,24 1,47±0,16 0,15±0,02

самки

10 6,20±0,82 а 1,25±0,13 0,09±0,01 а

20 7,04±0,61 а 1,11±0,42 0,10±0,02 а

1 4,84±0,61 ab 0,93±0,13 а 0,06±0,02 ab

3 4,72±0,54 а 1,19±0,12 0,05±0,01 ab

5 4,13±0,43 а 1,08±0,11 0,05±0,02 ab

10 3,48±0,52 а 0,90±0,13 а 0,04±0,02 ab

10, 20 - продолжительность беременности (сутки).

1,3,5, 10 - продолжительность послеродового инволютивного периода (сутки).

* - коэффициент васкуляризации - УУ\ сосудов

Уу миоцитов.

Рассмотренные выше условия кровоснабжения миометрия после многократных родов с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности позволили предположить, что миоциты находились в состоянии циркуляторной, а затем, в родах, и тканевой гипоксии. Можно полагать, что при ишемии и гипоксии в миоцитах миометрия развиваются метаболические нарушения, результатом которых является повышенная продукция активированных метаболитов кислорода. Последние, особенно перекись водорода, способны оказывать повреждающее воздействие (Зенков Н. К. и др., 2001, Курашвили Л. В. и др., 2003; Бштска М. е[ а1., 2003) на миоциты, индуцируя развитие вакуольной дистрофии и некроза. О взаимосвязи изменений объемной плотности сосудов и деструктивных изменений в клетках паренхимы миометрия свидетельствует наличие между величинами данных показателей сильной обратной корреляционной зависимости (табл. 11).

Таблица 11

Результаты корреляционного анализа структур миометрия мышей линии С57В^ при многократной беременности и прерывания предыдущей (второй) беременности и в процессе послеродовой инволюции

Условия Сосуды Сосуды Макрофаги и Макрофаги (Nai) Макрофага (Nai) i

эксперимента, миометрия и миометрия и апоптотически и цитоплазмати- некротически

объект некротически апоптотичес- измененные ческие измененные

измененные ки изменен- миоциты конгломераты в миоциты

миоциты ные миоциты интерстиции

(Vv) (Vv) (Nai) (Vv) (Vv)

Интактные

мыши-самки -0,33 -0,38 +0,55 +0,59 +0,54

10 -0,52 -0,64 +0,61 +0,49 +0,32

20 -0,53 -0,49 +0,12 +0,52 +0,24

1 -0,19 -0,49 +0,57 +0.48 +0,29

3 -0,42 -0,52 +0,15 +0,58 +0,25

5 -0,43 -0,37 +0,36 +0,50 +0,42

10 -0,66 -0,74 +0,77 +0,60 +0,16

После физиологического родоразрешения в паренхиме миомегрия многократно беременных животных с эпизодом искусственного прерывания беременности в «анамнезе», наблюдали увеличение общей объемной плотности миоцитов вплоть до 10-х суток включительно (см. табл. 9). Аналогичную закономерность изменений выявляли у многократно беременных животных. Однако в 3-й группе увеличение составило 40,71 %, а в 4-й - 30,53% относительно величины этого параметра у интактных мышей (см. табл. 5, 9), что, видимо, было обусловлено и сохраняющейся гипертрофией, и усиливающейся гиперплазией миоцитов миомегрия. Так, наряду с постепенным увеличением (с 1-х по 10-е сутки после родов) общей объемной плотности миоцитов, наблюдали увеличение и численной плотности миоцитов, сопровождавшееся уменьшением объема клеток (см. табл. 9). Причиной данных изменений, возможно, является недостаточность механизмов послеродовой инволюции.

Элиминация коллагена в период послеродовой инволюции была, очевидно, избыточной. Однако наиболее существенно (более чем в 6 раз) концентрация коллагена в миометрии уменьшалась у мышей 3-й труппы после третьих физиологических родов, и к завершению периода послеродовой инволюции была почти в 3 раза меньшей, чем у мышей 4-й группы после третьих физиологических родов, которым предшествовало прерывание второй беременности (см. табл. 2, 5, 9)

Вопрос о механизмах избыточности резорбции коллагена после родов остается открытым, но представляет большой интерес в связи с проблемой фибротических осложнений при целом ряде острых и хронических патологических состояниях и рассмотрения возможностей их профилактики и лечения.

Соотношение паренхимы и коллагеновых волокон стромы миометрия на 10-е сутки после родов у многократно беременных мышей с эпизодом прерывания предыдущей беременности составляло 7:1. Сравнительный анализ величин рассмотренных параметров между экспериментальными группами приведен на рис. 5.

шйшь

Интактные мыши

Однократно рожавшие мыши

Многократно рожавшие мыши

Многократно рожавшие мыши с прерыванием беременности в

□ Паренхима миометрия

Ш Коллагеновые волокна стромы миометрия

Рис. 5. Объемные плотности (Уу) миоцитов и коллагеновых волокон стромы миометрия мышей линии С57В1^ на 10-е сутки после однократных, многократных родов и многократных родов с прерыванием второй беременности в «анамнезе».

Васкуляризацня миометрия после родов у мышей 4-й группы была существенно хуже, чем у интактных мышей, и не нормализовалась к 10-м суткам (см. табл. 6, 10). При этом величина коэффициента васкуляризации была примерно в 2 раза меньшей, чем у многократно беременных мышей. Сравнительная динамика коэффициентов васкуляризации перед родами и на завершающем этапе периода послеродовой инволюции в экспериментальных группах представлена на рис. 6.

рожавшие мыши рожавшие мыши рожавшие мыши с

прерыванием беременности в "анамнезе"

О 20сутки беременности И Юсугки после родов

Рис. 6. Коэффициент васкуляризации миометрия мышей линии С57В1/^ перед родами (20-е сутки беременности) и в периоде поздней послеродовой инволюции (10-е сутки после родов) после однократных, многократных родов и многократных родах с прерыванием второй беременности в «анамнезе».

Недостаточная васкуляризацня миометрия, вероятно, является пусковым фактором в развитии механизмов элиминации целой клетки (апогггоз, некроз) или ее частей (клазмацитоз), что подтверждается результатами корреляционного анализа (см. табл. 4, 8, 11).

При морфометрическом исследовании продуктов клазмацитоза цитоплазмы миоцитов у многократно беременных мышей с эпизодом прерывания предыдущей беременности наблюдали, что данный процесс несколько активизировался сразу после родов и сохранялся на одном уровне в течение первых трех суток, а на 10-е сутки цитоплазматические конгломераты в интерстиции были единичными. Необходимо отметить, что наиболее активным данный процесс был у многократно рожавших мышей. При этом в миометрии мышей после однократных и многократных родов на 10-е сутки наблюдали волную элиминацию продуктов клазмацитоза (рис. 7).

10 9 -

7 " 6

5 " 4 " 3 2 " 1

_г Iе тгигм

Интактные мыши

Однократно рожавшие мыши

Многократно рожавшие мыши

□ 20сутки беременности

СЮ 1 Осутки п

__гпйипл-

Многократно рожавшие мыши с прерыванием беременности в "анамнезе"

Рис. 7. Объемные плотности (Уу) цитоплазматических конгломератов в интерстиции миометрия мышей линии С57В1/^ перед родами (20-е сутки беременности) и в периоде поздней послеродовой инволюции (10-е сутки после родов) после однократных, многократных родов и многократных родов с прерыванием второй беременности в «анамнезе».

Объемная доля апоптотически измененных миоцитов у мышей 4-й группы на всех исследованных сроках послеродового периода была примерно на одном уровне и статистически значимо не отличалась от величины аналогичного показателя на 20-е сутки беременности. Однако относительно величин данного показателя в миометрии мышей после однократных и многократных родов активность данного процесса была значительно снижена и к 10-м суткам полностью не завершалась.

Изменения доли апоптотически измененных миоцитов перед родами и в конце периода послеродовой инволюции в различных экспериментальных ситуациях показаны на рис. 8.

1.5

I -0,5 -

Интактные мыши

Однократно рожавшие мыши

Многократно рожавшие мыши

Многократно рожавшие мыши с прерыванием беременности в "анамнезе"

О 20сутки беременности

Ш 1 Осутки шслс родов

]

Рис. 8. Объемные плотности (Уу) апоптотически измененных миоцитов в миометрии мышей линии С57 В1/бд перед родами (20-е сутки беременности) и в периоде поздней послеродовой инволюции (10-е сутки после родов) после однократных, многократных родов и многократных родов с прерыванием второй беременности в «анамнезе».

В миометрии мышей 4-й группы объемная плотность некротических изменений была максимально выражена на 3-й сутки после родов, которая в дальнейшем постепенно уменьшалась, и к 10-м суткам достигала величины аналогичного показателя у интактных и однократно беременных мышей. Динамика изменений величин показателей некротически измененных миоцитов перед родами и в конце периода послеродовой инволюции отражена на рис. 9.

% 3,5

з -

2.5 2 -1.5 -

Интактные

Однократно рожавшие Многократнорожавшие Многократно

мыши мьгош рожавшие шиш с

прерыванием беремет

анамнезе

О 20сутки беременности

Рис. 9. Объемные плотности (Уу) некротически измененных миоцитов в миометрии мышей линии С57В1^ перед родами (20-е сутки беременности) и в периоде поздней послеродовой инволюции (10-е сутки после родов) после однократных, многократных родов и многократных родов с прерыванием второй беременности в «анамнезе».

В целом, суммарный объем структур, подлежащих элиминации, механизмами упомянутыми выше, свидетельствует о несостоятельности последних у мышей данной группы, т.к. на 10-е сутки после родов процессы инволюции в миометрии не были завершены (рис. 10).

16 14 -

■

Г-Ь

Интактные мыши

Однократно беременные мыши

Многократно беременные мыши

Многократно беременные мыши с прерыванием беременности в "анамнезе"

О 20супси беременности

И 1 Осутки после родов

Рис. 10. Суммарные объемные плотности (Уу) структур, подлежащих элиминации в миометрии мышей линии С51Ш!ь% перед родами (20-е сутки беременности) и в периоде поздней послеродовой инволюции (10-е сутки после родов) после однократных, многократных родов и многократных родов с прерыванием второй беременности в «анамнезе».

Изменения величин численных плотностей макрофагов и объемных плотностей цитоплазматических конгломератов в интерсгиции миометрия у мышей 4-й группы характеризовались сильной прямой корреляционной связью (см. табл. 11). Однако более высокие величины коэффициентов корреляции были получены в миометрии у однократно и многократно беременных мышей (см. табл. 4, 8, 11).

Эпизод искусственного прерывания 2-й беременности в «анамнезе» у мышей 4-й группы сопряжен с уменьшением количества плодов в помете на 44 % после третьей беременности по сравнению с самками 3-й группы и на 56 % по сравнению с количеством плодов у мышей той же линии после однократной физиологической беременности (рис. 11).

Однократно Многократно Многократно

рожавшие мыши рожавшие мыши рожавшие мыши с

прерыванием беременности в "анамнезе"

Рис. 11. Количество плодов в помете мышей линии C57B'l/6g после однократных, многократных родов и многократных родов с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности.

Таким образом, после третьих родов, которым предшествовало прерывание беременности, наблюдали задержку инволюции паренхимы миометрия в связи с продолжающимся процессом его гипертрофии, что указывает на недостаточность механизмов ее обеспечивающих и, вероятно, на нарушения регуляции пролиферации миошгтов.

ВЫВОДЫ

1. В процессе физиологической беременности в миометрии наблюдали морфологические проявления клазмацитоза, апоптоза, некроза гладкомышечных клеток вне зависимости от количества беременностей и эпизодов прерывания одной из них.

2. В процессе послеродовой инволюции в миометрии мышей наблюдали процессы клазмацитоза, апоптоза, некроза максимально выраженные в ранний послеродовый период, что позволило рассматривать их в качестве основных механизмов послеродовой инволюции миометрия.

3. После однократной физиологической беременности процессы инволюции миометрия у мышей линии СЫЬУЬ^ завершались на 10-е сутки после первых родов

4. Инвогаотивные послеродовые преобразования миометрия после третьих физиологических беременностей родов у мышей линии С57В1/6§ к 10-м суткам не завершались в связи с недостаточностью механизмов инволюции:

а. У многократно рожавших мышей - апоптоза и некроза.

б. У многократно рожавших мышей с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности - клазмацитоза, апоптоза, некроза.

5. Васкуляризация миометрия у многократно беременевших и рожавших мышей была недостаточной в конце беременности и ухудшалась после родов вплоть до 10 суток.

6. Выявленные обратные сильные корреляционные связи структурных проявлений механизмов, обеспечивающих послеродовую инволюцию миометрия, и коэффициента его васкуляризации дают основание полагать, что ухудшающиеся условия трофики, гипоксия миометрия являются факторами, инициирующими механизмы инволюции: клазмацитоз, апогтгоз, некроз.

7. Процессы пролиферации гладкомышечных клеток в миометрии мышей после третьих физиологических беременностей и родов, которым предшествовало прерывание беременности, были интенсивнее процессов элиминации миоцитов и продолжались в послеродовом периоде, а элиминация коллагена, напротив, была резко усилена.

8. Увеличение количества физиологических беременностей и родов, медикаментозное прерывание беременности в сочетании с многократными физиологическими беременностями и родами сопряжено с прогрессирующим уменьшением количества плодов в помете.

1. Обединская К.С. Морфологическая структура миометрия мышей в послеродовом периоде при многократной беременности / К.С. Обединская, А.П. Надеев, В.А. Шкурупий // Современные проблемы общей и частной патологической анатомии: Мат. всеросс. научной конф., посвященной 150-летию кафедры патологической анатомии Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова24 апреля 2009 года. - СПб.: Б.и., 2009. - С. 89-91.

2. Структурная организация миометрия при патологии беременности / К.С. Обединская, В.А. Жукова, А.П. Надеев, В.А. Шкурупий // Актуальные вопросы патологической анатомии Мат. III съезда Росс, общества патологоанатомов 26-30 мая 2009 года. - Самара, 2009. - Т. 2. - С. 376-378.

3. Обединская К.С. Структурные изменения миометрия мьппей в послеродовом периоде при преждевременно прерванной беременности / К.С. Обединская, А.П. Надеев, В.А. Шкурупий // Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов: Четвертая Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием 2729 октября 2009 года. - Новосибирск, 2009. - С. 168-169.

4. Структурная организация плацентарной площадки матки при патологии беременности / К.С. Обединская, В.А. Жукова, А.П. Надеев, В.А. Шкурупий // 100-летие Российского общества патологоанатомов - научные чтения памяти О.К.Хмельницкого. -СПб, 2009.-С. 239-240.

5. Шкурупий В.А. Исследование структурных изменений в миометрии при многократных беременностях и в процессе инволюции матки у мышей / В.А. Шкурупий, К.С. Обединская, А.П. Надеев // Бюлл. эксперим. биол. мед. - 2010. - Т. 149, №5. - С. 487491. - в списке журналов, рекомендованных ВАК.

6. Шкурупий В.А. Исследование структурных проявлений механизмов инволюции миометрия после многократных беременностей у мышей / В.А. Шкурупий, К.С. Обединская, А.П. Надеев // Бюлл. эксперим. биол. мед. - 2010. - Т. 149, №6. - С. 622-626. -в списке журналов, рекомендованных ВАК.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Соискатель

Обединская К.С.

Подписано к печати 24.08.2010 формат - 60x84 1/16, Усл. печ. л. 1

Бумага: офсетная Печать: трафаретная Тираж: 100 экз. Номер заказа № 431 Типография ООО "ЮГУС-ПРИНТ", ИНН 5402467637, г. Новосибирск, ул. Залесского, 4

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Обединская, Кристина Сергеевна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Строение матки в норме.

1.2 Строение миометрия во время нормально протекающей беременности и после физиологических родов.

1.2.1. Изменение миометрия во время беременности.

1.2.2 Изменение миометрия в послеродовом периоде.

1.3. Значение коллагена в матке во время беременности и после родов.

1.4. Вероятные механизмы инволюции матки: апоптоз, клазмацитоз, аутофагоцитоз.

1.4.1. Биологическое значение апоптоза, клазмаг[итоза и аутофагоцитоза.

1.4.2. Регуляция апоптоза, клазмаг^итоза, аутофагоцитоза.

1.4.3. Стадии, морфологические, биохимические проявления апоптоза, клазмацитоза, аутофагоцитоза.

1.4.4 Механизмы апоптоза, клазмацитоза, аутофагоцитоза.

1.4.5 Апоптоз в матке и его гормональная регуляция; клазмацитоз и аутофагоцитоз в миометрии после родов.

1.5. Особенности строения матки после преждевременно прерванной и многократной беременностей.

И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 3.1. Результаты морфологического исследования миометрия интактных мышей, в процессе первой физиологической беременности и в периоде инволюции после родов.

3.1.1. Структурная организация миометрия небеременных мышей-самок.

3.1.2. Структурные изменения миометрия впервые беременных самок и в процессе его послеродовой инволюции.

3.2. Результаты морфологического исследования миометрия мышей в процессе многократной физиологической беременности и послеродовой инволюции.

3.3. Результаты морфологического исследования миометрия матки самок-мышей в процессе послеродовой инволюции после многократной беременности и предшествующей прерванной беременности.

Введение Диссертация по биологии, на тему "СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ МИОМЕТРИЯ МЫШЕЙ ПРИ ЕГО ИНВОЛЮЦИИ ПОСЛЕ МНОГОКРАТНЫХ РОДОВ И ПРЕРВАННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ"

Послеродовый период - это ранний (1-2 сутки и до 8-12 суток) и поздний отрезок времени после родов (3-8 нед.), когда матка, подвергается перестройке, называемой «обратным развитием» или структурной инволюцией (Чернуха Е.А., 2006, Милованов А.П. и др., 2007). При нормальном течении послеродового периода происходит изменение анатомо-физиологических параметров матки к исходным (до беременности), что обусловлено инволютивными процессами, происходящими преимущественно в миометрии.

В научной литературе достаточно хорошо описана суть процессов, обеспечивающих увеличение массы матки во время беременности (Бесков В.Н., 1973; Шубникова Е.А и др., 2001; Камерницкий А.В и др., 2002; Дубинин Е.В., 2005; Csapo A. et al., 1965; Leung D.Y. et al., 1976; Shynlova O. et al., 2004, 2009; Jaffer S. et al., 2009). Однако, особенности процессов гипертрофии миометрия при многократных беременностях и беременностях, с искусственным прерыванием одной из предыдущих беременностей, недостаточно изучены.

Известно также, что процесс послеродовой инволюции матки затрагивает все ее структуры: эндометрий, миометрий с вовлечением компонентов интерстиция последнего - коллагена и сосудов. Большое количество морфологических исследований, касающихся послеродовых изменений в матке, посвящено структурным преобразованиям эндометрия (Радзинский В.Е., Милованов А.П., 2004; Радзинский В.Е., 2005; Милованов А.П., 2008; Кирсанов Я.Н., 2009) и, в меньшей степени, механизмам элиминации коллагена (Рывняк В.В. и др., 2003; Goto Т., 1999; Melendez J.A. et al., 2001; Shum Jenny K.S. et al., 2002; Manase K., 2002; Manase K. et al., 2006; Leah C. A., 2009). Инволюционные процессы в собственно миометрии после родов изучены в значительно меньшей степени. Имеющиеся в литературе отдельные морфологические и биохимические исследования изменений, происходящих в миометрии после родов, не формируют целостного представления о процессах его физиологической послеродовой инволюции.

Одним из ведущих признаков клинического неблагополучия в течение послеродового периода является субинволюция матки, которая достаточно часто встречается у женщин с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом. Несмотря на большое количество исследований, нет единого мнения в понимании механизмов развития данного осложнения: является ли субинволюция матки предстадией послеродового метроэндометрита или его следствием; возможно, это самостоятельная нозологическая форма патологического развития послеродового периода, или патология не сопряженная с инфицированием органа. Однако субинволюция матки в послеродовом периоде может явиться причиной формирования локальных гнойно-септических осложнений (эндометрита, метрита, метроэндометрита) и генерализованного септического процесса (Кочиева С.К. и др., 2002).

Механизмы, реализующие программу послеродового «обратного развития» миометрия, не достаточно изучены. Ранее было показано, что у крыс в инволютивном периоде после однократной беременности в течение пяти суток развивались процессы клазмацитоза цитоплазмы миоцигов, апоптоза, аутофагоцитоза и некроза миоцитов, каждый из которых с полным основанием может быть рассмотрен в качестве механизма физической и функциональной элиминации «избыточных» в этот период структур миометрия (Шкурупий В.А. и др., 2008). Аутофагоцитоз, в связи с малым его масштабом, не может быть эффективным механизмом элиминации структур миометрия. Физиологически, как механизм элиминации, наиболее «предпочтителен» - клазмацитоз, т. к. с ним не сопряжены уменьшение численности миоцитов и последующее воспаление, поскольку происходит лишь уменьшение размеров миоцитов. Они могут быть восстановлены в процессе регенерационной гипертрофии при повторной беременности и, видимо, без ущерба для силы мышечных сокращений. В связи с этим, для решения вопросов профилактики и разработки наиболее эффективных способов коррекции послеродовых осложнений в условиях многократных родов, и родов, осложненных прерыванием предшествующей беременности, необходимо белее углубленное изучение механизмов инволюции миометрия в экспериментах, моделирующих процессы, потенциально сопряженные с возможностью развития осложнений в родах и послеродовом периоде при многократных беременностях и их искусственном прерывании, в частности.

Цель исследования: Изучить особенности структурных преобразований в миометрии мышей линии C57/B16g во время беременности, в ранний и поздний послеродовые периоды при однократной, многократных берменностях и многократных беременносях с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности. Задачи исследования:

3. Изучить структурные преобразования в миометрии мышей в процессе третьей физиологической беременности и после нее у мышей линии C57BL/6g с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беременности.

4. Изучить структурные проявления механизмов, обеспечивающих послеродовую инволюцию матки у мышей литии C57BL/6g после однократных, многократных и многократных с прерыванием второй беременности родов.

Впервые рассмотрены механизмы структурных преобразований миометрия мышей линии C57BL/6g при беременности и в процессе послеродовой инволюции. Показано, что послеродовая инволюция миометрия у мышей линии C57BL/6g завершается к 10-м суткам после родов, проявляясь «возвратом» структурной организации миометрия к структурным параметрам матки у небеременных животных. Показано, что процесс инволюции после третьих физиологических беременностей и родов, и физиологических родов, которым предшествовало искусственное прерывание беременности, не завершался к 10-м суткам послеродового периода. Удлинение процесса инволюции сопряжено с неэффективностью механизмов элиминации (клазмацитоз, апоптоз, некроз) структур миометрия. Впервые показано, что инициация процессов инволюции миометрия имеет обратную корреляционную связь с ухудшением васкуляризации миометрия, особенно после многократных родов с эпизодом прерывания предшествующей беременности, а ухудшение трофики миометрия инициирует процессы кдазмацитоза, апоптоза и некроза миоцитов в нем.

Показано, что основными механизмами послеродовой инволюции являются: клазмацитоз, апоптоз, некроз. Показано, что многократная беременность и многократная беременность с эпизодом ее прерывания сопряжены с избыточной элиминацией коллагена, удлинением периода послеродовой инволюции в связи с задержкой процесса элиминации структур миометрия и уменьшением репродуктивного потенциала у мышей.

Эти данные могут быть использованы в преподавании курса гистологии в медицинских университетах в разделе «Изменения органов женской половой системы в процессе физиологической беременности и послеродовой инволюции», а также при преподавании патологической анатомии в разделе «Патология беременности и послеродового периода». Разработанные в диссертации критерии оценки состояния миометрия могут найти применение в практике научных исследований. Описанный комплекс морфологических изменений миометрия может быть использован для прогноза характера послеродовых осложнений в акушерской и ветеринарной клинике, поскольку рассмотренные механизмы являются общими для разных видов млекопитающих.

Положения, выносимые на защиту:

2. Многократные физиологические беременности и роды, и многократные беременности и роды с эпизодом искусственного прерывания предыдущей (второй) беременности, сопряжены с: продолжением пролиферативных процессов в миометрии после родов, удлинением периода инволюции миометрия за пределы 10-х суток в связи с меньшей эффективностью механизмов ее обеспечивающих по сравнению с таковыми у мышей после однократных физиологических беременностей и родов; существенным уменьшением количества коллагена в миометрии и количества плодов в помете.

3. Установлены сильные обратные корреляционные связи структурных проявлений механизмов, обеспечивающих инволюцию миометрия и коэффициента его васкуляризации, а также прямые сильные корреляции изменений численной плотности макрофагов в миометрии с концентрацией его структур, подлежащих элимииации в послеродовом периоде. Это свидетельствует о том, что ухудшение васкуляризации миометрия в конце беременности и в послеродовом периоде является фактором, инициирующим процесс инволюции миометрия механизмами клазмацитоза, апоптоза и некроза, и, как следствие, приводит к адекватному увеличению численности макрофагов без проявлений процесса воспаления в миометрии.

Апробация работы.

Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на III съезде Российского общества патологоанатомов (Самара, 2009 г.), четвертой Всероссийской научно-практической конференции «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов» с международным участием (Новосибирск, 2009).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, из которых 2 в журналах, включенных в список периодических научных изданий, рекомендованных ВАК РФ для опубликования материалов кандидатских диссертаций.

Объем работы.

Работа изложена на 143 страницах машинописного текста, содержит обзор литературы, описание материала и методов исследования, результаты исследования и их обсуждение, заключение, выводы и список цитируемой литературы, который включает 98 русскоязычных и 116 иностранных источников. Работа иллюстрирована 13 микрофотографиями, 22 графиками, 16 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Обединская, Кристина Сергеевна

выводы

В процессе физиологической беременности в миометрии наблюдали морфологические проявления клазмацитоза. апоптоза, некроза, гладкомышечных клеток вне зависимости от количества беременностей и эпизодов прерывания одной из них.

3. После однократной физиологической беременности процессы инволюции миометрия у мышей линии C57Bi/6g завершались на 10-е сутки после первых родов

4. Икволютивные послеродовые преобразования миометрия после третьих физиологических беременностей родов у мышей линии C57Bl/6g к 10-м суткам не завершались в связи с недостаточностью механизмов инволюции: а. У многократно рожавших мышей - апоптоза и некроза. б. У многократно рожагшшх мышей с эпизодом прерывания предыдущей (второй) беремешюсти - клазмацитоза, апоптоза, некроза.

5. Васкуляризацня миометрия у многократно беременевших и рожавших мышей была недостаточной в конце беременности и ухудшалась после родов вплоть до 10 суток.

6. Выявленные обратные сильные корреляционные связи структурных проявлений механизмов, обеспечивающих послеродовую инволюцию миометрия^ и коэффициента его васкуляризации дают основание полагать, что ухудшающиеся условия трофики, гипоксия миометрия являются факторами, инициирующими механизмы инволюции: клазмацнтоз, апоптоз, некроз.

7. Процессы пролиферации гладкомытпечных клеток в миометрии мышей после третьих физиологических беременностей и родов, которым предшествовало прерывание беременности, были интенсивнее процессов элиминации миоцитов и продолжались в послеродовом периоде, а элиминация коллагена, напротив, была резко усилена.

3.4. Заключение

Таким образом, согласно проведенным исследованиям, инволюция миометрия сопряжена с комплексом структурных изменений в его паренхиме и строме.

Гипертрофия миометрия мышей-самок лилии C57BJ/6g во всех экспериментальных ситуациях в период беременности осуществлялась механизмами гиперплазии миоцитов. Гистологической особенностью ицтерстиция миометрия на 20-е сутки беременности являлось наличие в нем пузыревидных цитоплазаматических конгломератов, которые в большей или меньшей степени выявляли в миометрии мышей всех исследованных групп. Кроме того, в паренхиме миометрия наблюдали значительное увеличение доли дистрофически измененных миоцитов. Функциональное значение феномена трансформации ГМК в нефункциональное состояние (дистрофия, .некроз, утрата частей цитоплазмы клазматозом) перед родами, когда миометрий должен быть максимально готов к реализации сократительной функции, не достаточно ясно.

Васкуляризация миометрия перед родами и после них в группе однократно беременных мышей была достаточной и на 10-е сутки инволютивного периода соответствовала таковой до беременности. к'^ППЛРТто^т'-АТТ??^ * жтт» «fvpt^tm » 'ТТ^ГАТ^ПО/ПТТГ\ ^'tftrrpri г» iVpUliUvituv/inviliiV iViiiUivivlрлл wCjpUvivuiiUlA ivimxuwl i* cvpw/^tiitvrf беременности было наихудшим, после родов ситуация постепенно улучшалась, к 10-м суткам оно восстанавливалось до уровня у интактных животных. Особенностью васкуляризации миометрия у многократно беременных мышей с эпизодом прерывания предыдущей беременности было ухудшение трофики миометрия перед родами и после них вплоть до 10-х суток инволютивного периода.

В период ранней послеродовой инволюции (1-е, 3-й сутки) наиболее интенсивно происходили процессы элиминации «избыточных» миоцитов и их структур, которые осуществлялись следующими механизмами; клазмацитозом (элиминация частей цитоплазмы миоцитов), апоптозом и некрозом (элиминация целых клеток). Во всех группах ведущим механизмом инволюции миоцитов, о котором судили по объему продуктов клазмацитоза в интеретиции, в данный период был клазмацитоз. Однако согласно литературным данным, инволюция миометрия осуществляется преимущественно механизмом апоптоза миоцитов (Dery М.С. et al., 2003; Yin У. et al., 2008). Клиринг структур, лоддежащих элиминации, осуществлялся макрофагами. Эффективность процессов инволюции у мышей во всех экспериментальных группах была оценена на 10-е сутки после родов. Так, количество миоцитов у самок, рожавших один раз, к 10-м суткам послеродового периода достигало величин у интактных животных. У многократно беременных мышей и мышей, у которых беременность наступила после прерывания предыдущей, процесс инволюции был, очевидно, пролонгирован, т.к. к 10-м суткам после родов морфологических признаков нормализации строения миометрия не наблюдали. Однако у мышей с поерыванием бепеменности в «анамнезе» активность механизмов t г i элиминации ГМК (клазмацитоз, апоптоз, некроз) была значительно снижена. Вместе с тем в данных группах наблюдали количественные свидетельства активных процессов пролиферации миоцитов, прошедших, видимо, до развития в них дистрофии и некробиоза. Возможно, пролиферативные процессы в миометрии носят резервирующий характер, инициация которых, как и процессов деструкции (дистрофия, некроз и апоптоз), сопряжена с состоянием гипоксии и развитием состояния окислительного стресса с образованием большого количества активированных метаболитов кислорода. Также можно предположить, что задержка инволюции паренхимы миометрия в сочетании с продолжающимся процессом его гипертрофии связана с недостаточностью механизмов элиминации ГМК. Вместе с тем, возможно, что в данной экспериментальной ситуации имеют место быть нарушения регуляции пролиферации ГМК.

В интеретиции миометрия многократно беременных мышей, как с эпизодом прерывания беременности, так и без него, происходило многократное уменьшение содержания коллагена, которое к 10-м суткам после родов не восстанавливались. Вопросы биологического значения, причин и вероятных последствий избыточной элиминации коллагена остаются открытыми.

Репродуктивная способность многократно беременных самок (особенно родивших после прерывания предыдущей беременности) ухудшалась, что выражалось в значительном уменьшении количества плодов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Обединская, Кристина Сергеевна, Новосибирск

1. Абрамченко В.В. Медикаментозный аборт / В.В. Абрамченко, Е.Н. Гусева. СПб.: ЭЛБИ-СПБ, 2005. - 139 с.

2. Автандилов Г.Г. Введение в количественную патологическую морфологию / Г.Г. Автандилов. -М.: Медицина, 1980. 216 с.

3. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов. — М.: Медицина, 1990.-384 с.

4. Автандилов Г.Г. Основы патологоанатомической практики / Г.Г. Автандилов. М.: Медицина, 1994. - 510 с.

5. Автандилов Г.Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностической гистоцитопатологии / Г.Г. Автандилов. М.: РМАПО, 1996.-256 с.

6. Авцын А.П. Морфометрический и стереологический анализ миокарда. Тканевая и ультраструктурная организация / А.П. Авцын. Новосибирск. 1984. 160с.

7. Авцын А.П. Ультраструктурные основы патологии клетки / А.П. Авцын, В.А. Шахламов М.: Медицина, 1979. - 316 с.

8. Адамян JI.B. и др. Практическая гинекология: Клинические лекции / Под ред. В.И. Кулакова, В.Н. Прилепской. М: МЕДпресс-информ, 2001.-С. 89-115.

9. Ю.Айламазян Э.К. Акушерство / Э.К. Айламазян. Спб.: СпецЛит, 2002. -529 с.

10. Айламазян Э.К. Акушерство: учебник для медицинских ВУЗов / Э.К. Айламазян. Спб.: СпецЛит, 4 изд., 2003. - 528 с.

11. Амирханова М.И. Нарушение лактационной функции у многорожавших женщин с гестозом Автореф. канд. дис. - Ростов-на-Дону, 2001.-94 с.

12. Анализ причин материнской смертности. Руководство для врачей / Под редакцией А.П. Милованова М.: МДВ. - 2008. - 228 с.

13. Байбеков И.М. Клазматоз эпителиощггов желудка и тонкой кишки при лазерном облучении / И.М. Байбеков, Б.З. Касымов, П.Ю. Юнусходжаев // Бюлл. Эксп. Биол. Мед. 1998. - № 3. - Т. 125. - С. 339343.

14. Басков AJB. Иммунногистохимическое изучение апоптоза клеток спинного мозга при его экспериментальном повреждении / А.В. Басков, А.Г. Коршунов, И.А. Борщенко, Ф.С. Сатанова // Арх. Патол. 2002. -№2. - С. 23-27.

15. Бегова С.В. Перинатальные исходы у многорожавших женщин с гестозом, применявших хофитол / С.В. Бегова // Российский вестник акушера-гинеколога 2008. - №4. - Т. 8. - С. 48-51.

16. Белушкина Н.Н. Молекулярные основы апоптоза / Н.Н. Белушкина, Х.Х. Али, С.Е. Северин // Вопросы биол., мед. и фарм. химии. 1998. -№4.-С. 215-235.

17. Белушкина Н.Н. Молекулярные основы патологии апоптоза / Н.Н Белушкина, С.Е. Северин // Арх. Патол. 2001. - №1. - С. 51-60.

18. Бесков В.Н. Морфологические и гистохимические изменения миометрия в процессе беременности Автореф. канд. дисс. -Караганда, 1973. -35 с.

19. Варга 0.10. Апоптоз: понятие, механизмы реализации, значение / O.IO. Варга, В.А. Рябков // Экология человека. 2006. - № 7. - С. 28-32.

20. Волкова О.В. Основы гистологии с гистологической техникой / О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий. -М: Медицина, 1982. -304 с.

21. Гланц С.В. Медико-биологическая статистика / С.В. Гланц. — М.: Практика, 1999. 459 с.

22. Горбунова В.Н. Коллагены и коллагеновые гены / В.Н. Горбунова, Т.И. Кадурина // Медицинская генетика. 2006. - Т. 5. - № 6. - С. 3-10.

23. Григорьев М.Ю. Алоптоз в норме и патологии / М.Ю. Григорьев, Е.Н. Имянитов, К. П. Хансон // Медицинский академический журнал. 2003.- Т.З. № 3. - С. 3-11.

24. Гридчик A.JI. Социальные и медицинские проблемы аборта / A.JI. Гридчик, Г.В. Тамазян // Материалы пленума Российской ассоциации акушеров и гинекологов. 2000. - С. 66-68.

25. Далгатова С.В. Фактическое питание женщин Дагестана, влияние его на гестациго и плод Автореф. канд. дисс. - Махачкала. - 1999. - 22 с.

26. Кадурина Т.И. Наследственные коллагенопатии (клиника, диагностика, лечение и диспансеризация) / Т.И. Кадурина. СПб.: Невский диалект, 2000.-270 с.

27. Камерницкий А.В. Морфологические изменения тканей матки крысы под влиянием прогестинов и антипрогестинов ряда прегаа-О-пентрана

28. А.В. Камерницкий, И.С. Левина, Л.С. Куликова и др. II Биоорганическая химия. 2002. - Т.28. - №3. - С. 261-268.

29. Качалина Т. С. Клинико-иммунологические аспекты различных методик медицинского аборта / Т.С. Качалина, К.В. Морозов // Медицинский альманах. 2008. - № 4. - С. 118-121.

30. Кириченко А.К. Динамика морфологических изменений в маточно-плацентарной области в течение первого триместра беременности / А.К. Кириченко // Фундаментальные исследования. — 2004. № 1. - С. 107.

31. Кирсанов Я.Н. Структурная инволюция матки и патоморфология плацентарных полипов после медицинских абортов и родов — Автореф. канд. дисс. Красноярск, 2009. - 25 с.

32. Колпакова Е.В. Прогнозирование темпа послеродовой инволюции матки -Автореф. канд.дисс. Томск, 2007. - 24 с.

33. Кох Л.И. Связь структуры миометрия с характером сократительной деятельности матки / Л.И. Кох, Т.В. Биссе // Морфология. 1993. - Т. 105. - Вып. 9 - С. 99.

34. Кох Л.И. Анатомо-гистологические особенности строения миометрия женщин / Л.И. Кох, Ф.Ф. Сакс // Акушерство и гинекология. 1983. -№2.-С. 49-52.

35. Кочиева С.К. Актуальные вопросы послеродового периода / С.К. Кочиева, Е.А. Чернуха, Н.А. Короткова и др. // Акуш. и гин. 2002. - № 1. - С. 6-8.

36. Краснопольский В.И. Безопасный аборт / В.И. Краснопольский, Т.Н. Мельник, О.Ф. Серова. -М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. 48с.

37. Крыжановский Г.Н. Процесс дистрофии (некоторые аспекты проблемы) / Г.Н. Крыжановский // Арх. патол. 1974. - Т. 36, вып. 5. -С. 3-12.

38. Кулавский В.А. Физиология и патология эндометрии / В.А. Кулавский. -Уфа: Информреклама, 2003. 196 с.

39. Кулаков В.И. Проблема аборта / В.И. Кулаков, В.Н. Серов, Ю.И. Барашнев, О.Г. Фролова // Руководство по безопасному материнству -М.: ТриадаХ, 2000 . С. 449-468.

40. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Наука, 1980. - 293 с.

41. Ледина А.В. Искусственный аборт и его последствия / А.В. Ледина, А.А. Куземин//Рус. Мед. Журн. 2001. - Т. 6. - № 15. - С. 968-970.

42. Лейсли А. Световая микроскопия в биологии. Методы. / А. Лейсли. -М.: Мир, 1992.-462 с.

43. Лили Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лили. М.: Мир, 1969. - 645 с.

44. Лушников Е.Ф. Гибель клетки (апоптоз) / Е.Ф. Лушников, А.Ю. Абросимов М.: Медицина, 2001. - 192 с.

45. Матвеева Н.Ю. Апоптоз: морфологические особенности и молекулярные механизмы / Н.Ю. Матвеева // Тихоокеанский мед. журн. 2003. - № 4. - С. 12-16.

46. Мелышк Т.Н., Реабилитация после медицинского аборта — путь к сохранению репродуктивного здоровья женщин / Т.Н. Мельник, О.Ф. Серова // Русский медицинский журнал. 2007. - Т. 15. - № 177. - С. 1266-1271.

47. Микроскопическая техника / Под. ред. Д.С. Саркисова, Ю.Л. Перова -М., 1996.-548 с.

48. Милованов А.П. Децидуализация эндометрия как фактор, регулирующий цитотрофобластическую инвазию в течение! триместра беременности / А.П. Милованов, Т.В. Фокина. Н.А. Старосветская, С.В. Назимова//Арх. Патол. 2007. - Т. 69. -№5.-С. 31-34.

49. Морозов К.В. Клинико-морфологические аспекты различных методик медицинского аборта / ICB. Морозов // Казанский медицинский журнал. 2008. - Т. 89. - № 3. - С. 274-276.

50. Муцаева З.Д. Медико-социальная характеристика современного контингента беременных и рожениц в Чеченской республике / З.Д.

51. Муцаева // Проблемы репродукции: ежеквартальный журнал. 2006. -№4.-Т. -С. 92-97.

52. Нагорнев В.А. Апоптоз и его роль в атерогенезе / В.А. Нагорнев, А.Н. Восканьянц // Медицинский академический журнал. 2003. - Т. 3. - № 4. - С. 3-18.

53. Новиков B.C. Программированная клеточная гибель / B.C. Новиков -СПб.: Наука, 1996. 275 с.

54. Общая патология человека. Руководство для врачей. / Под ред. А.И. Струкова, В.В. Серова, Д.С. Саркисова 2-е изд. - Т.1. - М: «Медицина», 1990.-448 с.

55. Омаров С.-М.А. Активное ведение многократных родов / С.-М.А. Омаров, Ш.Ш. Раджабова, С.И. Нурмагомедов, А.Ш. Дабузов // Актуальные вопросы акущ. и гин. 2002 - № 1. - Т. 1. - Вып. I. - С. 71.

56. Павлович С.В. Сосудисто-эндотелиальный фактор роста в патогенезе синдрома гиперстимуляции яичников / С.В. Павлович, В.А. Бурлев // Акуш. и гин. 2004. - №2. - С. 11-13.

57. Пальцев М.А. Молекулярная медицина и прогресс фундаментальных наук / М.А. Пальцев // Вестник РАМН.- 2002. Т. 72. - № 1 - С. 13-21.

58. Пальцев М.А. Патологическая анатомия: Учебник. В 2-х т. / М.А. Пальцев, Н.М. Аничков. М.: Медицина, 2000. - Т. 1. - 528 с.

59. Пимкипа Ю.С. Роль опухолевого супрессора ARF в канцерогенезе и молекулярных механизмах активации аутофагиии Автореф. канд. дисе. - СПб., 2009. - 22 с.

60. Пирс Э. Гистохимия. Теоретическая pi прршладная / Э. Пирс. М.: Иностранная литература, 1962. - 963 с.

61. Поливанова Т.В. Морфо-функционалные параметры коллагена в норме и при патологии / Т.'В. "Поливанова, "ВТ. Манчук // "Успехи современного естествознания. 2007. - №2. - С. 25-30.

62. Поливода С.Н. Структурно-функциональная перестройка крупных артерий при гипертонической болезни; роль нарушений метаболизмасоединительной ткани / С.Н. Доливода, А.А. Черепок, Р.А. Сычев // Клин. Медицина. 2004. - №8. - С.30-33.

63. Поликар А. Молекулярная цитология мембран животной клетки и ее микроокружение / А. Поликар. — Новосибирск: Наука, 1975. 175 с.

64. Поликлиническая гинекология / Под ред. В.Н.Прилепекой. М.: МЕДпресс, 2004. - 624 с.

65. Проскуряков С.Я. Некроз — активная, управляемая форма программируемой клеточной гибели / С.Я. Проскуряков, B.JI. Габай, А .Г. Коношмнников // Биохимия. 2002. - Т.67. - № 4. - С. 467—49 L

66. Пшеничникова Т.Я. Бесплодие в браке / Т.Я. Пшеничникова. М.: Медицина, 1991. - 78 с.

67. Ранние сроки берехменности / Под редакцией В.Е. Радзинского, А.А. Оразмурадова. М.: Медицинское информационное агентство, 2005. -448 с.

68. Роганова, Т.В. Прогнозирование течения искусственных: абортов — Автореф. канд.дисс. Томск, 1998. - 26 с.

69. Рыбакова МА. Активность тиоловых протеин аз в процессе послеродовой инволюции матки / М.А. Рыбакова. М.: Медицина, 1996.-80 с.

70. Рывняк В.В. Механизмы резорбции коллагена при послеродовой тшволюдии матки / В.В. Рывняк //Арх. патол. — 2001. №1. - С. 32-35.

71. Рывняк В.В. Электронно-гистохимическая локализация катепсина D и эластазы в матке / В.В. Рывняк, B.C. Гудумак, О.Ф. Дулгиеру // Бюлл. Эксп. Биол. Мед. 2003. - № 8. - Т. 136. - С. 228

72. Рывняк В.В. Участие эластазы во внеклеточной и внутриклеточной деградации коллагена при послеродовой инволюции матки / В.В. Рывняк, О.Ф. Дулгиеру // Бюлл. Эксп. Биол. Мед. 2003. - № 8. - Т. 136. - С. 235-237.

73. Савицкий Г.А., Биомеханизм родовой схватки / Г.А. Савицкий, М.Г. Моряк Кишинев: ШТИИНЦА, 1983. - 118с.

74. Самсусв Р.П. Атлас по цитологии, гистологии л эмбриологии / P.O. Самсуев, Г.И. Пупышева, А.В. Смирнов. М.: «Мир и Образование», 2004. - 400 с.

75. Серов В.В. Соединительная ткань / В.В. Серов, А.Б. Шехтер. М: Медицина, 1981.-317 с.

76. Сидельникова В.М. Гемолитическая болезнь штода и новорожденного / В.М. Сиделышкова, А.Г. Антонов. М.: Триада X, 2004. - 191с.

77. Сметник В.П. Половые гормоны и молочная железа / В.П. Сметник // Гинекология. -2000. -Т. 2. № 5. - С. 133-136.

78. Современное представление о ,перекисном окислении лшшдов и антиоксидантной системе при патологических состояниях / Л.В. Курашвили, Г.А. Косой, И.Р. Захарова. Пенза, 2003. - 93 с.

79. Сухих Г/Г. Пролиферативная активность и апоптоз в гиперплазированном эндометрии / Г.Т. Сухих, Г.Е. Чернуха, В.П. Сметник и др. // Акуш. и гин. 2005. - №5. - С. 25 - 29.

80. Тагиева Т.Т. Факторы риска развития заболеваний молочных желез / Т.Т. Тагиева // Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохипа РАМН. 2007. - Т. 18. - № 3. - С. 68-73.

81. Тихоновская О.А. Эффсктивноть восстановления эндометрия после больничного аборта при экстракорпоральной антибиотикопрофилактике / О.А. Тихоновская, О.М. Фохт, С.В. Логвинов //Бюлл. Сибирской медицины. 2008. - № 3. - С. 23-27.

82. Торшин Й.Ю. Дисплазия соединительной ткани, магний и нуклеогидные полиморфизмы / И.Ю. Торшин, О.А. Громова // Кардиология. 2008. - № 10. - С. 14-21.

83. Хмелышцкий O.K. Натоморфологическая диагностика гинекологических заболеваний /' O.K. Хмельницкий. СПб.: СОТИС, 1994. - 165 с.

84. Хэм А. Гистология / А. Хэм, Д. Кормак. -М.: Мир, 1983. Т. 5. -296 с, 89.Чернуха Е.А. Нормальный и патологический послеродовый период:руководство / Е.А. Чернуха. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 272 с.

85. Шкурупий В.А. Динамика миоцитов разных типов в миометрии крыс в периоды беременности и ранней послеродовой инволюции / В.А. Шкурупий, Е.В. Дубинин, Н.Н. Дубинина // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2008. - Приложение Лг° 1. - С. 101-104.

86. Шкурупий В.А. Лизосомотропизм проблемы клеточной физиологии и медицины /' В.А. Шкурупий, Ю.Н. Курунов, Н.Н. Яковченко. -Новосибирск, 1999.-288 с.

87. Шубникова Е.А. Мышечные ткани / Е.А. Шубникова, Н.А. Юрина, Н.Б. Гусев, и др. М.: Медицина, 2001. - 236 с.

88. Экстраэмбриональные и околоплодные структуры при нормальной и осложненной беременности / Под ред. В.Е. Радзинского, А.П. Милованова. М.: МИА, 2004. - 393 с.

89. Ярилин А.А. Апоптоз. Природа феномена в целостности организма / А.А. Ярилин // Патол. физиол. эклер, тер. 1998. - №2. - с. 38-48.

90. Adams J.M. Ways of during: multiple pathways to apoptosis / J.M. Adams // Genes and Development. 2003. 17. - P. 2481-2495.

91. Afting E.G. DNA in the rat uterus myometrium during pregnancy and postpartum involution. Measurement of DNA in small pieces of mammalian tissue / E.G. Afting, J.S. Elce // Analyt. Biochem. 1978. - Vol. 86. - № 1. -P. 90-99.

92. Alberts B. DNA Replication Mechanisms: DNA Topoisomerases Prevent DNA Tangling During Replication / B. Alberts, A. Johnson, J. Lewis et al. // Molecular Biology of the Cell, 4th edition, Garland Science. -2002.-P. 238-240.

93. Arends M.J., Apoptosis. Mechanism and role in patology / M.J. Arends, A.H. Wyllie // Intern. .Rev. Exp. Pathol. J 99,1. - Vol.32. -P. 223254.

94. Belzacq-Casagrande A.S. Pharmacological screening and enzymatic assays for apoptosis /A.S. Belzacq-Casagrande, C. Martel, C. Pertuiset et al. // Front. Biosci. 2009. - № 14. - P. 3550-3562.

95. В en-Jonathan N. What Can We Learn from Rodents about Prolactin in Humans? /"N. Ben-Jonathan, С JR. LaPensee, E.W. LaPensee // Endocrinol. Rev. 2008. - Vol. 29. - № J. -P. 1-41.

96. Blair H.C., Teitelbaum S.L., Ehlich L.S. Collagenase production by smooth muscle: correlation of immunoreactive with functional enzyme in the myometrium / H.C. Blair, S.L. Teitelbaum, L.S. Ehlich // J. Cell. Physiol. 1986. - V. 129. - P. 111-123.

97. Borel I.P. Uterine collagens. General review / LP. Borel // Rev. Fr. Gynecol. Obstet. 1991. -Vol 86. - № 12. -P. 715-722.

98. Bregmann A. Mechanisms and control of programmed cell death in invertebrates / A. Bregmann // Oncogene. 1998. - Vol. 17. - P. 3215-3223.

99. Carmen MJVL, Angela Т., Fanta Z. Shed membrane microparticlcs from circulating and vascular cells in regulating vascular function / M.M. Carmen, T. Angela, Z. Fanta // J. Heart and Circulatory Physiology. 2005. -Vol. 1004-P. 288.

100. Csapo A. Stretch-induced uterine growth, protein synthesis and function / A. Csapo, T. Erdos, C.R. De Mattos // Mature. 1965. - Vol. 207. -P. 1378-1379.

101. Chatzaki E. Transforming growth factor betal exerts an autocrine regulatory effect on human endometrial stromal cell apoptosis, involving the

102. X? or 1 nt*»r| X) Л1 9 VWO-flnil rotrfl / hot"7nl/"l Ти V 14+YlfTArtl Л11 Лj. UDIJ cuiti apOptUtiv pctLiivv ауЪ t ju. Xvwuulilzuwgiwu, IN.

103. Margioris et al. // Mol. Hum. Reprod. 2003. - Vol. 9. - P. 91-95.

104. Cory S. The Bcl2 family; regulation of the cellular life-or-death swatch / S. Cory, XTVI. Adams //"Nat. "Rev. Cancer. 2002. -У6\. 2. -P. 656-674.

105. Dahmoun M. Apoptosis, proliferation, and sex hormone receptors in superficial parts of human endometrium at the end of the secretory phase /

106. M. Dahmoun, X. Boman, S. Cajander // Clin. Endocrinol. Metab. 1999. -Vol. 84.-P. 1737-1743.

107. De M., Wood G.W. Influence of oestrogen and progesterone on macrophage distribution in the mouse uterus / M. De, G.W. Wood // J. Endocrinol. 1990. - Vol. 126. - P. 417-424.

108. Dery M.C. Regulation of Akt expression and phosphorylation by 17(3-estradiol in the rat uterus during estrous cycle / M.C. Dery, V. Leblanc, C. Shooner // Reprod. Biol. Endocrinol. 2003. - Vol. !. - P. 47.

109. Ding F. Effect of abnormal apoptosis in human decidual tissure during early gestation pregnancy / F. Ding //.Di,YLTun.YiDa.Xue.Bao. 2002. -Vol.2. - № 2. - P. 145-147.

110. Druckmann R. Review: female sex hormones, autoimmune diseases and immune response / R. Druckmann // Gynecol. Endocrinol. 2001 - Vol. 15. -№6.-P. 69-76.

111. Eckert L.O. Endometritis: the clinical-pathologic syndrome / L.O. Eckert, S.E. Hawes //Am J. Obstet. Gynecol. 2002. - Vol. 186. - JS1» 4. - P. 690-695.

112. Elmore S. Apoptosis: A Review of programmed cell death / S. Elmore // Toxicol Pathol. 2007. - Vol. 35. - № 4. - P. 495-516.

113. Fang Y.P. Signaling between the placenta and the uterus involving the mitogen-regulated protem/proliferin / Y.P. Fang, J. Lepont, C. Fasset // Endocrinology. 1999. - Vol. 140. - P. 5239-5274.

114. Galluzzi ~L. Methods to dissect mitochondrial membrane permeabilization in the course of apoptosis / L. Galluzzi, I.Vitale, O.Kepp et al. // Methods Enzymol. 2008. - № 442. - P. 355-374.

115. Geyer H. Biochemical studies on hypotrophy and hypoplasia in the post partumuterus of the rat / H. Geyer, E.G. Afting, U. Muller // Arch, uynecoi. — iy/ /. — vol. — r. iji-^jo.

116. Goldspink D.F. Changes in uterine growth and proteine turnover in rat during and after pregnancy / D.F. Goldspink, A.J. Morton // J. Physiol. -1985.-Vol. 361.-P. 41.

117. Gravett M.G. Global report on preterm birth and .stillbirth (2 of 7): discovery science / M.G. Gravett, C.E. Rubens, T.M. Nunes et al. // BMC Pregnancy and Childbirth. 2010. - Vol. 10. - jYi> 1. - P. 2.

118. Graves W.E. Tissue changes in the involuting uterus of the postpartum sow /' W.E. Graves, J.W. Lauderdale, R.L. Kircpatrick et al. // Res. Bull. -1967.-Vol. 26.-P. 365-371.

119. Gross A., McDonnell J. TV1, Korsmeyer S. J. BCL-2 family members and the mitochondria in apoptosis / A. Gross, J.M. McDonnell, S.J. Korsmeyer//Genes Dev. 1999.-Vol. 13.-P. 1899-1911.

120. Grossman C.J. The role of sex steroids in immune system regulation. In bilateral communication between the endocrine and immune systems / C.J. Grossman, J.W.Whitehead, A.W. Oxford, et al. // Br. J. Pharmacol. -1994-P. 1-11.

121. Hacker G. The morphology of apoptosis / G. Hacker // Cell Tissue Res. 2000. - Vol. 301. - P. 5-17.

122. Harris J. Socs2 and elf5 mediate prolactin-induced mammary gland development У J. Harris, P.M. Stanford, K. Sutherland // Mol. Endocrinol. -2006. Vol. 20. -P. 1177-1187.

123. Helguera G. Changes in global gene expression in rat myometrium in transition from late pregnancy to parturition / G. Heiguera, M. Eghbali, D. Sforza et al. /7 Physiol Genomics. 2009. - Vol. 36. - № 2. - P. 89-97.

124. Henell F. An electron microscopic study of the post-partum involutionrvF fbp rot ntAnic \X7itVi о г\тл qnnQrpnt ргтлпЬогух? ftf ллИоа^П / ^vx Uiv iui uivi Uj. iui u iiviv v.ni u^ypuivuL vi uivpxiu^j ui vv/iiu^vii / i. . liwiiviij

125. J.L. Ericsson, H. Glaumann // Virchows Arch. B. Cell Pathol, incl. Mol. Pathol. 1983. - Vol. 42. - № 3. - P. 271-87.

126. Highton G. Cell death of apoptosis is the future of rheumatoid nodul / G. Highton, P.A. Hessian, A. Kean ct ai. // Annals of the Rheumatic Diseases. 2003. - № 62. - P. 77-80.

127. JIunt .I.S. Hormonal .regulation of uterine macrophages / J.S.Hunt, 1. Miller, J.S. Piatt // Developmental immunology. -1998. Vol. 6. - № 1. -P. 105-110.

128. Igney F.H. Death and anti-death: tumour resistence to apoptosis / F.H.

129. ТЛ TT ТЛ / / ЛЛ i ТЧ /-1 ЛАЛЛ T Л ТЧ Л^П ЛООigney, гл. isjmnmer // i\ai. Jtiev. cancer. zuu2. — voi. 2. — P. 277-Z65.

130. Inoue S. Phagocytosis of Cytoplasmic blebs derived from smooth muscle cells by llbrobiast-like cells and macrophages in the post-partum rat uterus / S. Inoue, K. lyama, C. Arald et ai. /7 Virchows Arch. B. Cell Pathol. 1983. - Vol. 42. - P. 235-242.

131. Ttoh K. Central role of mitohondria and p53 in Fas-mediated apoptosis of rheumatoid synovial fibroblasts / K. Itoh, FI. Hase, H. Kojima // «JieuinaLuiugy. — 2иич j™ tj. - F. z / 1-J.oj.

132. Jaatteia M. Multiple ceil death pathways as regulators of tumor initiation and progression / M. Jaatteia // Oncogene. 2004. - № 23. - P. 2746-2756.

133. Jackson S. The effect of oestradiol on vaginal collagen metabolism in postmenopausal women / S. Jackson, M. James, P. Abrams // Br. J. Obstex. Gyn. 2002. - Vol 109. - P. 339-344.

134. Jaffer S. Mammalian Target of rapamycin is activated in association with myometrial proliferation during pregnancy / S. Jaffer, O. Shynlova, S. Lye // Endocrinology. 2009 - Vol. 150. - № 10. - P. 4672-4680.

135. Jeffrey J.J. Collagen and collagenase: pregnancy and parturition / J.J.jviilCV / / uviumutij in IJvi iiiulviufcr . 1 77 J . т uj. i^. ju i . 11 i — I /.. .—-—

136. Jos wig A. Apoptosis in uterine epithelium and decidua in response to implantation; evidence for two different pathways / A. Jos wig, H,D. Gabriel, M. Kibschuii /7 Reproa. Bioi. Endocrinol. 2003. - Vol. 1. - P. 44.

137. Jurukova Z. Involvement of smooth muscle cells in collagen degradation in the postpartum uterus / Z. Jumkova, C. Milenkov // Virchows Arch. B. Ceil. Pathol Jnci. Mo$. Pathoi. 1981. - Vol. 37. - P. 237-244.

138. Kabakov Y.iN. Clasmatosis: Ultrastmctare of cytoplasmic fragments from the soleen. Ivmnh nodes, and tfrvmus of the rat / Y.N. Kabakov. A.I.1. JL ' tf Л. ' •»

139. Grachova И Protoplasma. 1970. - Vol. 70. - № 2. - P. 167-177.

140. Kabakov Y.N. Clasmatosis: Certain qualitative and quantitative peculiarities of this phenomenon ir. the lymphoid organs of the rat / Y.~N. Kabakov, K.A. Fofanova, N.N. Perestoronina 11 Protopiasma. 1969. - Vol. 67. -№ 1. - p. 21-31.

141. Kaidi R. Uterine collagen during involution in cattle /' R. Kaidi, P.J. Brown, J.S. David et al. //Matrix. 1991. - Vol. 11. - Jfe 2. - Р.ЮЫ07.

142. Kando Y. The role of autophagy in cancer development and response to therapy / Y. Kando, T. Kanzawa, R. Sawaya et al. // Nat. Rev. Cancer. -2005. № 5. -P. 726—734.

143. Kemp M.W. Analysis 01 skeletal muscle function in the C57BL6/SV129 syncoilin knockout mouse / Kemp M.W., Edwards В.,

144. Burgess M. et al. // Journal of structural biology. —2009. Vol. 165. - № 3. -P. 196-203.

145. Kerr Y.F.R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics / Y.F.R. Kerr, A.II. Wyllie, A.R. Currie // Br. J. Cancer. 1972. - Vol. 26. - Ш 2. -P. 239-257.

146. Kirschke, AJ. Barrett, N.D. Rawlings /7 Prolein Profile. 1995. - P. 15871620.

147. Lai a P.K. Mechanisms of irophoblasL invasiveness and their control: the role of protease inhibitors / P.K. Laia, C.H. Graham // Cancer Metastasis Rev. 1991. - Vol. 9. - P. 369-379.

148. Leah C.A. rnagocyrosis and remodeling of collagen matrices / C.A. Lean, J F. Dice, K. Lee U Exp. Cell. Res. 2009. - Vol. 313. - P. 10451055.

149. Lee H. Critical Role for the Membrane-type 1 Matrix Metalloproteinase in Collagen Phagocytosis / II. Lee, CM. Overall, СЛ. McCulloch et al. // Mol. Biol. Cell. 2006. - Vol. 17. - № 11. - P. 48124826.

150. Leppert P.C. Proliferation and apoptosis of fibroblasts and smooth muscle cells in rat uterine cervix throughout gestation and the effect of theantiprogesterone onanristone / P.C. Leppert // Am. J. Obstet. Gynecol. — 1998. Vol. 178. -P. 713-725.

151. Leung D.Y. Cyclic stretching stimulates synthesis of matrix components by arterial smooth muscle cells in vitro / D.Y. Leung, S. Glagov, M.B. Mathews // Science. 1976. - № 191. -P. 475-477.

152. Levinc- B. Autophagy in cell death: an innocent convict? / B. Levine, J. Yuan // J. Clin, hivestig. 2005. - № 115. - P. 2679—2688.

153. Lewis-Wambi J.S. Jordan V.C. Estrogen regulation of apoptosis: how can one hormone stimulate and inhibit? / j.S. Lewis-Wainbi, V.C. Jordan // Breast Cancer Res. 2009. - Vol. 1L - № 3, - P. 206,

154. Li Y. Intact, injured, necrotic and apoptolic cells after foca! cerebrai ischemia in the rat / Y. Li, M. Chop, C. Powers // Molecular brain reseach. -2000. Vol. 762. - P. 301-312.

155. Lin У. Androgen and its receptor promote Bax-mcdiated apoptosis / Y. Lin, J. Kokontis, F. Tang // Mol. Cell. Biol. 2006. - Vol. 26. - № 5. - P. 1908-1916.

156. Manase К. The significance of membrane type 1 metalloprotcinase in structural involution of human corpora iutea / K. Manase, T. Endo, H. Henmi //Mol. Hum. Reprod. 2002. - Vol. 8. - P. 742-749.

157. Matrisian L.M. The matrix-degrading metalloproteinases / L.M. Matrisian //Bioessays. 1992. - Vol 14. - P. 455^163.

158. Melendez J.A. The cell biology of autophagy in metazoans: a developing story development / J.A. Melendez, T.P. Neufeld // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2009. - Vol. 135. - № 14. - P. 2347-2360.

159. Melendez J.A. Localization and regulation of IL-laipha in rat myometrium during late pregnancy and the postpartum period / J.A.• r t • ~f" Т» 1Г «• T • » г т Г ЛЛ ( / * • • 1 л * ► «

160. Miityk W. Hie potential mechanism for glutamine-induceu collagen biosinthesis in culture human skin / W. Miityk, E. Kama, S. Wolczynski et al. //Mol. Cell. Biochem.- 1998. Vol. 189. - № 1. -P. 177-183.

161. Mizushima N. Autophagy: process and function / N. Mizushima //GenesDev.-2007.-Vol. 21.-P. 2861-2873.

162. Mizushima N. The plciotropic role of autophagy: from protein metabolism to bactericide / N. Mizushima // Cell Death Differ. 2005. -Vol. 12. №2.-P. 1535-1541.

163. Monk M. Mammalian development. A practical approach / M. Monk.rw fWl- ГГ? f "I QW7 ТУ1 1лv^r (Viuiu. i*v l/j i s \j ! , / | j ч

164. Pampfer S. Apoptosis at the time of embryo implantation in mouse тЛ rot / $ pprp»-.rbi- т nA.WQV // r"«u r^^th t^vtt^r г qqq a p

165. Ш1VI iul / О. i Cll 1ПДС1. X. i^VMilluj it V 11 , t^-^dlll. IViXlVl. JL У У У . v W i. vy. X .533.545.

166. Parakkal P.F. Involvement of macrophages in collagen resorption / P.F. Parakkal // J. CelL BioL 1969. - Vol 4h — P. 345-354.

167. Perotti C. Heat shock protein-90-alpha, a prolactin-STAT5 target gene identified in breast cancer cells, is involved in apoptosis regulation. / C. Perotti,R. Liu, C.T. Pamsei //breast. Cancer Res. 2008. - P. JO.

168. Raddy V. Y. Pericellular ТП Ov/1^vl O" of the tissue destructive cysteine proteinases, catiiepsin-B, catliepsin-L, and cathepsin-S, by human monocyte-derived macrophages / V. Y. Raddy. O.Y. Zhang, SJ. Weiss //

169. Г Л Л. т i • Л A t P rt Г ,1 ТТГ1А 1 пл r1. rhp 1\1Я!ППП'*» /Л /«iinpmv ОТ ЧПРПРЙС ГЛГ ТПР I IN U --.—л * l/vvvv+ilii-iJ V/a ti.iv xNulivilui j. avu-UviII V Ui uvivuvvu ч/i. uiv i. л у у1. Vol. 92. P. 3849-3853.

170. О 7 C^ *Dr>10 о1лг| fl^n isartiiloti Л1Л л-Р ла|1 rjonfU / Ti ow. ivwwwx uLi"^ ctiili LIIvv i w^Liici-Liwil wi pi си iiiiiwu. w^ii UwcLLii / J . V^

171. Reed // J. Ceil. Bioi. -1994. Vol. 124. - P. 1-6.

172. Reef S. A short mitochondrial form of pl9AJRF induces autophagy and caspasc-independent cell death / S. Reef, E. Zalckvar, O. Shifman el al. i'i Moi. Ceil. 2006. - Nk 22. - P. 463- 475.

173. Reinshagen K. Autophagoeytosis of the apical membrane in microvillus inclusion disease / lv. Reinshagen, H.Y. Nairn, K-P. Zimmer // Gut. 2002. - Vol. 51. - № 4. p. 514-521.

174. Слп1га1 aF ImnhrtKlaot m\?ocion / Q Qlitmonn^nf'? A l-Tiinifit^ M Ппс.лпг1г Atv/uviv/i vi uuwiiv/Jiuji- Iii * uoiuit / u . uiiiijiuiiiiv / i, i tut Vv it/J; Ivi. iуuoiiiim. wlal. // Am. J. Obstet. Gynecol. 1994. - Vol. 171. - P. 832-838.

175. Shimizu K. Clearance of materials from breakdown of uterine collagen in mice during postpartum involution i K. Shimizu, T. Furuya, Y. Takeo et al. // Acta. Anat. (Basel.). 1983. - Vol. 116. - P. 10-13.

176. LJiiingicton W.D. 40iiagenase; а кеу enzyme in couagen turnover / W.D. Shingleton, D J.Hodges, P. Brick et al /'/' Biochcm. Cell. Bioi. 1996. Vol. 74. - №6.- P. 759-775.

177. Siiiraisuchi. hidependence of plasma membrane blebbing from other biochemical and biological characteristics of apoptotic cells / Shiratsuchi,

178. Л 1 'I Ik Г 1 Iff 1 Г T^V" » * , ^ЛЛЛ 7 * "» Л Гк

179. Akiko, iviori et ai. // journal oi rnocuemistry. zuuz. - vol ij2. - j. - r. 381.

180. Shooner C. TGF-beta expression during rat pregnancy and activity on decidual cell survival / C. Shooner, P.L. Caron, G. Frechette-Frigon et al. // Reprod. Biol. Endocrinol. 2005. - Vol. 3. - P. 20.

181. Shynlova O. Mechanical stretch regulates hypertrophic phenotype of the myometrium during pregnancy / O. Shynlova, R. Kwong, S. Lye // Reproduction. 2009. - № 70. - P. 986-992.

182. Shynlova О. Progesterone and gravidity differentially regulate expression of ECIvl components in pregnant rat myometrium / O. Shynlova, J.A. Mitchell, A. Tsampalieros et al. // Biol. Reprod. 2004. - № 70. - P. 986-992.

183. Slot A.J. Identification of PLOD2 as telopeptide lysyl hydroxylase, an important enzyme in fibrosis / A J. Slot, A.M. Zuurrnond, A.F. Bardocl et al. // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278. - № 42. - P. 40967-40972.

184. Srnrcka M. The onset of aoootosis of neurons induced by ischemia1. A Jreperfusion injury is delayed by transient period of hypertension in rats / M. Smrcka, M. Horkv, F. Otevrel et al. // Physiol. Res. 2003. - Vol. 52. - №tf. t L i~ tz2.

185. Stewart I J. Macrophages and other endocytic cells in the mouse uterus during the second half of pregnancy and into the postpartum period / I J. Stewart,B.S. Mitchell //J. AnaL .1992. -Vol. 181. - P. 119-26.

186. Strasser A. Apoptosis signaling / A. Strasser, L. O'Connor, V. Dixit // Ann. Rev. Biochem. 2000. - Vol. 69. - P. 217-245.

187. Thomson A.J. Leukocytes infiltrate the mvimetrium during human parturition: further evidence that labour is an inflammatory process / A.J. Thomson, J.F. Telfer, A. Young et al. //Hum. Reprod. 1999. - Vol. 14. —t> too "vja 1 . /-.

188. Trump B.F. The pathways of cell death: oncos, apoptosis, and necrosis / B.F. Tramp, I.K. Berezesky, S.H. Chang et al. !! Toxicol. Pathol. 1997. -Vol. 25. -P. 82-88.

189. Wilcox B.D. Regulation of collagenase gene expression by serotonin and progesterone in rat uterine smooth muscle cells / B.D. Wilcox, L.

190. Rydelek-Fitzgerald, JJ. Jeffrey // The Journal of biological chemistry. -1992. Vol. 267. - № 29. - P. 20752-20757.

191. Wang Y. Loss of macroautophagy promotes or prevents fibroblast apoptosis depending on the death stimulus / Y. Wang, R. Singh, A.C. Massey et al. // J. Biol. Chem. 2009. -Vol. 283. - № 8. - P. 4766-4777.

192. Weibel E.R. Stereological methods. Practical method for biological morphometry / E.R. Weibel. L.: Acad. Press., 1979. - Vol. 1.-425 p.

193. Woessener J.F. Acid hydrolases of the rat uterus in relation to pregnancy, post-partum involution and collagen breakdown / J.F. Woessener // Biochem. J. -1965. Vol. 97. - P. 855-866.

194. Woessener J.F. Collagenase in Normal and Pathological Connective Tissues / J.F. Woessener // New York. 1980. - P. 223-239.

195. Yin Y. Estrogen suppresses uterine epithelial apoptosis by inducing Bel expression / Y. Yin, W.-W. Huang, C. Lin et al. // Mol. Endocrinol. -2008.-Vol. 22.-№ l.-P. 113-125.

196. Zorn T.M. Collagen remodeling during decidualization in the mouse / T.M. Zorn, E.M. Bevilacqua, P.A. Abrahamsohn // Cell and tissue research. 1986. - Vol. 244. - № 2. - P. 443-448.

Информация о работе

Обединская, Кристина Сергеевна
кандидата медицинских наук
Новосибирск, 2010
ВАК 03.00.25

Диссертация

СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ МИОМЕТРИЯ МЫШЕЙ ПРИ ЕГО ИНВОЛЮЦИИ ПОСЛЕ МНОГОКРАТНЫХ РОДОВ И ПРЕРВАННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы