Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Структурно-функциональная организация тканевых фосфолипидов при кардиоваскулярной патологии и воздействии некоторых физических факторов

ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Автореферат диссертации по теме "Структурно-функциональная организация тканевых фосфолипидов при кардиоваскулярной патологии и воздействии некоторых физических факторов"

ереванский ордена трудового красного знамени государственный университет

На правах рукописи

АСРЯН Нуне Вааговна■

СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ТКАНЕВЫХ ФОСФОЖЩОВ ПРИ КАРдаОВАСКУЛЯРЮЙ ПАТОЛОШИ и ВОЗДЕЙСТВИИ НЕКОТОРЫХ ФИЗИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ.

03.00.02- Биофизика

Автореферат

Диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ереван - 1991

Работа выполнена ва кафедре медицинской и биологической £язака в Ереванской ордена Трудового Красного Знамени Государственно« медицинском институте им. М.Гераци

Научвые ружсьодитеси:

¿актор медицинских наук, профессор З.С.Секоян кандидат фиа.-мат. наук, доцент Х<.А,Ращш

Официальные опоовента; Член корр. АН РА,профессор

С. С'. Оганесян

доктор биологических наук, старший научный сотрудник С. А. Ба/шпшн

Ведущая организация: . Институт молекулярной биологии

АН Республики Армения

20

Защита диссертации «20 1991г. вХ__

часов ва заседании специализированного Совета К.005.01.08 по присуждению ученой степени кандидата биологических наук при биологической факультете Ереванского государственного Университета по адресу: 375049,г.Ереван, Мравяна I,

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ЕГУ. Автореферат разослан"

Ученый секретарь слециали зирована ого Совета, кандидат биологических наук Г Л.Г.Ававяв

ОЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность тема. Все возрастающий интерес к изучению структурно- функциональной организации лвпвдного компонента природных мембран определяется многообразной ролью жидкокристаллических свойств бислоя, рассматриваемого не только в качестве своеобразного "матрикса",во и существенного элемента обеспечения динамических перестроек мембранных структур в норме и при патологии /Bretchef, Raff, 1975; Е.М.Крепе,1981; В.Г.Ивков, Г.Н.Берес-товский,1981; В.Ф.Антонов, 1982; Cu.lüs et aL, 1985; Беrezta-t-, 1988; Bishop, BeLLl, 1988; Hütts, 1988; Thomas, 1989).

Согласно современный представлениям, особенности строения и функциональных свойств липидного бислоя биологических мембран, характер его пространственной организации, молекулярной ассинет-рии и микродинамики, во многом обусловлены важнейшими структурными компонентами амфипатической природы- полярными фосфолипида-ми/

OrLancto, 1987; Peti-ov, 1988; Poznansxy, I989J ZactiovsKi, 1989; Ю.М.Львов и соавт., 1990; Karsianje, 1990/.

Характеризующийся значительной гетерогенностью фосфолипид-ный набор природных мембран, детерминирует комформационное состояние, степень структурированности, аморфно- кристаллические свойства фосфолипидов, их полиморфизм, характер фазовых переходов, определяет участие фосфолипидов в интегративвых механизмах функционирования мембранных образований/ kl,eij , 1984;Lev/Л, I988J Vi его, 1988; Gershfeld , 1989; И.А.Василенко и соавт., 1990/.

Фосфолипидам и продуктам их превращений принадлежит существенная роль в патогенезе структурно- функциональных нарушений биологических мембран при заболеваниях сердечно-сосудистой сис-теш. Выявлено, что при вшемических поражениях миокарда и головного мозга, повышенный уровень свободнорадикального окисления/ s а к а ;< i) 1988; Ф.З.Меерсен и соавт., Z988; Thompson, 1989/ индуцирует образование продуктов метаболизма фосфолипидов, способствующих дестабилизации и даже деструкции мембранных структур/ So6eL, 1978; Snyder, 1981; Н.С.Баширов и соавт., 1985; Тогок, 1986; Цоерег, 1987; cuemens, 1989;

Е.Б.Бурлакова и еоавт., 1990/.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение особенностей структурной организации суммарных тканевых фосфолипидов при кардио-васкулярной патологии и воздействии некоторых физических факторов.

Основные задачи исследования состояли в следующем:

1.Методом дифракции рентгеновских лучей изучить аморфно-кристаллические свойства суммарных фосфолипидов/СФЛ/,выделенных из эритроцитов и плазмы крови больных ишемической болезнью сердца/ИБС/ и острыми нарушениями мозгового кровообращения /ОНМК/,

* с исследованием, некоторых показателей, характеризующих функциональное состояние, эритроцитарннх мембран.

2.В условиях моделирования экспериментальной артериальной гиперяевзии /АГ/,исследовать степень структурированности СФЛ крови/эритроциты, плазма/,миокарда и. мозговой ткани, с одновременным определением содержания индивидуальных фосфолипидов

в миокарде и мембранах эритроцитов.

3.Исследовать особенности изменений структурной организации СФЛ мембран эритроцитов крови больных ИБС, а также эритроцитов,миокарда и мозга экспериментальных животных в условиях воздействия ультразвука /УЗ/ различной мощности.

4.Изучить эффекты тотального и локального воздействия на организм подопытных тавотных однородного постоянного магнитного поля/ШЩ/ различной индукции, продолжительности действия и точка приложения ва аморфно-кристалдические свойства СФЛ эритроцитов крови и различных тканей, с параллельным определением в них уровня линииной пероксидации.

б.Охарактеризовать состояние ионной проводимости в отношении. Ма+, К*и модельных бис дойных мембран, сформированных из СФЛ крови, «иокарда я мозговой ткани экспериментальных животных, подвергнутых, воздействию 73 и однородного ШП.

Н? эаиитг выносятся следующие основные положения:

1.Црв кардио-васкулярной патологии .включая различные фор--мы ИБС, ОНМК и экспериментальную АГ, ва фоне функционально-метаболических сдвигов со стороны мембран эритроцитов,обнаружена однонаправленная перестройка аморфно-кристаллических

свойств СОЛ эритроцитов и плазмы крови, характеризующаяся увеличением степени их структурированности,укрупнением кристаллитов и формированием кристаллитов новой сивгонии.

2.Характер и степень выраженности индуцированной УЗ- колебаниями модификации структурно- функциональной организации СФЛ крови и различных тканей, находится в зависимости от интенсив-, ности УЗ воздействия,при этом терапевтические мощности способствуют коррекции расстройств аморфно-кристаллических свойств СФЛ эритроцитов крови больных ИБС, а более высокие- возрастанию степени кристалличности СФЛ крови и миокарда экспериментальных животных.

3.Воздействие на целостный организм подопытных животных ПМП индукцией 500 мТл сопровождается качественным преобразованием структурной организации СФЛ миокарда,с увеличением степени их кристалличности и интенсификацией процессов липидной перокси-дации.

■Научная новизна. Выявлены и охарактеризованы особенности изменений структурной организации СФЛ эритроцитов и плазмы крови при различных формах ИБС и ОНМК по типу ишемического -инсульта.

Обнаружена корреляция между изменениями аморфно-кристаллических свойств СФЛ эритроцитов крови и некоторыми функционально-метаболическими сдвигами со стороны эритроцитарннх мембран, характеризующими клеточное звено система регуляции агрегатного состояния крови /РАСК/ при ИБС.

Впервые установлено, что в условиях моделирования АГ, на фоне перераспределения фосфолипидного набора эритроцитарннх мембран, рентгенодифракционным методом обнаруживается повышение • степени структурированности СФЛ эритроцитов и плазш крови, без существенных изменений со стороны аморфно- кристаллических свойств СФЛ мозга, миокарда и печени. .

Изучено влияние УЗ терапевтической мощности на структурную организацию СФЛ мембран эритроцитов и уровень липидной перокси-дации в них у больных ИБС. Установлена способность относительно высоких интенсивностей УЗ модифицировать аморфно-кристаллические свойства СФЛ' крови и миокарда экспериментальных животных.

Выявлена, индуцированная однородным ГШ, качественная перестройка структурной организации СФЛ миокарда,сопровождающаяся

усилением процессов липидной пероксидации в мозга.печени и плазме крова.

Получены доказательства относительно характера и степени изменений ионной проводимости модельных бис дойных мембран, сформированных и8 СФ1 различных органов и крови экспериментальных животных , подвергнутых воздействию различных мощностей УЗ и ПМП различной индукции.

Научно- практическая ценность работы. Получгнныеданные об однородном характере изменений со стороны структурной организации СФЛ эритроцитов и плазмы крови больных различными формами ИБС и ОНМК, а также крови и ряда органов экспериментальных животных с воспроизведенной моделью АГ, являются одним из свидетельств системного характера структурно-функциональных нарушений фосфолипидного бислоя клеточных мембран при кардио-васкулярной патологии.

Использованный комплекс подходов дает основание считать,что метод дифракции рентгеновских лучей обладает достаточной разрешающей способностью, информативностью и корректностью для изучения аморфно-кристаллических свойств СВД.и, в совокупности с другими методическими подходами, может явиться методом выбора при исследовании структурнонфункциональной организации фосфоли-пидного компонента природных мембран в норме и при патологии.

Характер и направленность действия УЗ колебаний т г.-тт>уктур-ную организацию СФЛ находятся в определенной зависимости от интенсивности влияния УЗ, при этом его относительно высокие,супертерапевтические мощности способствуют повышению степени кристалличности СФЛ, что следует учитывать при использовании УЗ с лечебной л диагарстической целью.

Учитывая, что при воздействии ПМП достаточно высокой индукции отмечается модификация анорфно-кристаллических свойств СФЛ миокарда, представляется перспективным проведение дальнейших исследований в плане выяснения роли кардиального компонента в гемодинамических эффектах магнитных полей и выявления физико-химических механизмов их поливалентного действия на биологические мембраны.

Атэобашя работа. Материалы диссертации доложены и обсуЩь-т на пленумах Проблемной комиссии МЗ СССР " Магнитоласлогам и -магитотерапня в медицине" /Ереван, 1988 и Сочи, 19Ь9/, на годич-

юй научной конференции Ереванского медицинского института 'Ереван,1989/, на заседании кафедры медицинской и биологичес-сой физики ЕрМИ /1991/, на заседании нафедры биофизики биолога-1еского факультета Севанского государственного университета '1991/.

Структура и объем работа. Диссертация изложена на 159стр. гадшнописного текста. Иллюстрированный материал представлен в ) таблицах и 32 рисунках.

Диссертационная работа состоит из введения,обзора ли-:ературы, описания материала и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения,заключения, выводов I литературного указателя, содержащего 94 отечественных и ¡63 иностранных источников.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ .

Исследованию подверглись эритроциты и плаз т крови 65 5ольных ИВС, из них 25 больных ОИМ и в динамике заболевания, Ю больных стабильной стенокардией напряжения /ССН/ 1-11 ФК, ."6 больных ОНМК по типу ишемического инсульта. В качестве сонтроля служили эритроциты и плазма крови 35 практически здо-эовых лиц / доноров/.

Экспериментальные исследования проведены яа 260 беспород-шх белых крыс массой 120-150г. Подопытные животные, в соответствии с поставленными задачами, были распределены по различным грумам. Изучению подверглись кровь, миокард,мозговая .печеночная 5 почечная ткани.

Используемый комплекс методических подходов включил в-

:ебя:

I.Изучение аморфно-кристаллических свойств СФЛ методом дифракции рентгеновских лучей.

Рентгенодифракционному изучению подверглись СФЛ, экстрагированные по методу Росс Ь/1957/ из эритроцитов и плазмы крови практически здоровых лиц, больных ИБС, ОНМК, а также крови из различных органов экспериментальных животных.Исследования проведены на установке УРС-70 с камерой РКСО,дающей возможность подучить рефяексы в интервале углов 2.0от 2,5° до 45,0°.Использовалась рентгеновская трубка с медным антикатодом.Напряжение на аноде 40 кВ,анодный ток 18 мА,время экспозиции 2 ч.. Дифраги-

рованные под большими углами лучи регистрировали на плоской рентгеновской пленке/ А.Гинье, 1961/.Фотометрирование рентгено-гармм проводили с помощью микрофотометра ИФО-451.

2.Количественное определение содержания дипидных перекисей.

Для суждения о состоянии процессов липидной пероксидации, в эритроцитах и плаэме крови, а также в гомок-натах мозга и печени экспериментальных животных определяли содержание маркера окисления липидов- малонового диальдегида. Использовали метод,основанный на реакции взаимодействия последнего с тиобарбитуровой кисло той, с образованием хромогена, зкстинция которого измерялась при 532 нм. Содержание липидных перекисей рассчитывали во коэффи циенту молярной экстинции малонового диальдегида /Б.А.Владимиров А.И.Арчаков,1972/,количество которого выражали в ыкмоль ва I г ткани. •

З.Определение содержания кислых и нейтральных ФосФодапидов.

Фракционирование индивидуальных ФЛ эритроцитов,плазмы крови и различных тканей осуществляли методом ТСХ ва затепленном адсорбенте ЛС /П.И.Казарян.Д.Б. Элоян,1982/, с последующим опре делением в пятнах содержания липидного фосфора/В.И.Светашев, 1973/.

4.Изучение функционального состояния эритроцитов крови.

Исследование индуцированной агрегации эритроцитов крови проводили фотометрическим методом Вот , /1962/, с графической регистрацией по 0 'Вгчеп,/1966/, в модификации М.А. Котовщико-вой и соавт./1980/. В качестве индуктора агрегации использовали голубой алциав. Изучение способности эритроцитов к деформации проводили путемисследования Их проходимости через фильтр с размером пор 6 микрон/ вгееп-ма1А , 1978/.

5.Определение активности р -глюкуронидазы в мозге и печени.

В гомогеватах мозга и печени экспериментальных животных определяли активность одного из маркеров лизосом^-глюкуронидази Исследование активности указанного фермента осуществлялось спеки рофотометрическим методом, основанном на определении отщепленного р-нитрофевола. Активность фермента выражали в нмоль высвобс лившегося р-нитрофевола на I мг белка за I ч инкубации.

6.Явучение ионной проводимости модельных мембран из СФЛ.

Модельные бислойные мембраны формировали по Моп±а1, МеиЦег, /1972/ ив СФЛ,выделенных их крови, миокарда и мозговой ткани

- .?-

еспородннх белых крыс, подвергнутых воздействию УЗ колебаний и днородного ПМП. Исследовали проводимость бислойвнх мембран для Мз+ , К+ и Са2+, с помощью хлорсеребрянных электродов и эталонных опротивлений. /С.А.Бацжинян,1973/.

7.Воспроизведение экспериментальной модели АГ.

Модель стойкой АГ вызвалась путем длитеяьвого внутрибрюшин-ого введения беспородным беяш 1фысам суммарной фракции церебро-идов /О.П.Соцкий,1986/,выделенных из головного мозга крупного югатого скота по мето,цу Г.М. Злауэрса/ 1975/ л по нершутого |Ч0сткеЛаис.е, Siveeltey, 1967/. Цереброзиды вводились животным в ;озе 5 мг/кг, при этом к концу 3 месяца у крыс отмечалось стойкое говышение систолического артериального давления, измеряемого' бес-сровным методом в хвостовой артерии.

8.Исследование воздействия УЗ колебаний и МП в. экспериментальных условиях.

Озвучивание животных осуществлялось с помощью ультразвукового шпарата УЗТ-IOI с площадью излучателя I см2. Интенсивность УЗ зоздействия составляла 0,2-1,0 Вт/см2. Время излучения для каждой зз перечисленных интенсивностей 10-30 мин. УЗ воздействию подверглись области верхнего шейного симпатического гангдия и надпочечников.

Подопытные животные подверглись воздействию ПМП с индукцией 500 и 40 мТл. В первом случае крысы целиком помещались в магнитное поле, во втором воздействие ограничивалось областью головы. Вре^я экспозиции 1-4 ч. Для локального воздействия ПМП /40 мТл/ использовали дисковиднне магниты толщиной Змм и диаметром 10мм, с индукцией 40 мТл.- Контрольной группе животных вместо магнитов подкожно имплантировали металлические диски того же размера.

Полученный материал подвергнут статистической обработке'с оценкой достоверности по критерию Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

I,Особенности етрлдурвофудкциовальвой организации тканевых СФЛ при кзрди ова скуляря ой патологии.

Т. Т.АмогхЬно-кристаллические свойства СФЛ эритроцитов и плазмы крови больных ИБС.'

Хотя одним из первых метсЯдифракции рентгеновских лучей для изучения фосфолипид^белковых взаимоотношений в биомембранах исполь-

аовал Fmean /1973,1978/, рентгенодифракцаонный анализ в настоящее время достаточно широко применяется при и (¡следовании фосфолипидвых бислоев, везикул жидкокристаллических свойств и фазовых переходов различных фосфолипидов/ Arnold e-i лЬ 1985; Оimtov, Lvov. 1986;! Laggner, 1987; WacMeL, 1987;

DOrsei, 1987; HenischeL, 1988/.

Полученные данные свидетельствуют, что для рентгенограмм СФЛ эритроцитов крови практически здоровых лиц характерным является наличие вокруг первичиото пучка широкого аморфного гало,несущего информвцию об аморфной фазе СФЛ и сравнительно узких, очерченных дифракционных колец, отражающих кристаллическую фазу. Межплоскостные расстояния составляют для гало 4,5 5, а для дифракционных линий соответственно 3,3;.3,1; 2,8: и 2,2 Я. Одновременно, мозаичное распределение по кристаллическим осям кристаллитов и аморфных участков свидетельствует о поликристаллической структуре ОМ эритроцитов. Сходная картина выявлена при исследовании СФЛ плазмы крови практически здоровых лиц, где межплоскостные расстояния варьируюгв более широких пределах,составляя 4,6; 3,1; 2,8; 2,2; и 2,0 Я .

У больных ОИМ на рентгенограммах СФЛ эритроцитов наблюдается расщепление гало-на- 3 близко"расположенных дифракционных кольца, что свидетельствует" опроцессе кристаллизации СФЛ, с формирований! кристаллитов тго-видимоыу с новой сингонией. Более выраженные изменения со стороны аморфно-кристаллических свойств СФЛ эритроцитов выявлены -на- 8-16-ай дни ИМ, при этом обнаружены отсутствующие в норме, дополнительные дифракционные линии с межплос-костннми расстояниями 13,8; 6,4; 5,6; 4,7; 4,4; 3,5; 3,8; 2,2; 2,0 и 1,7 Я . Со стороны СФЛ плазмы крови указанных больных выявле полное отсутствие аыорфвипгтшго, с наличием на его месте дифракционных линий с ывжтгосхостнншграсстояниями 17,7; 12,9; 8,3; 6,2; 2,5; 3,4; 4,9 и 4,5$, что свидетельствует о трансформации анорфно-кристаллической структуры ОФЛ плазш в кристаллическую, с укрупнением размеров- "кристаллитов. Последнее утверждение основано на тон, что' на рентгенограммах СФЛ эритроцитов крови больных Ш, на дифракционных линиях выявляются множественные мел-иге- дифракционные пятна / в виде точек/ отсутствующие в норме.

Ори иссиедованинх формах ИБС в СФЛ, выделенных их эритроцитов лсрови.существенно изменяется степень з-фисталличности., Так,

если степень кристалличности в СФЛ эритроцитов практически здоровых лиц составляет 0,71, то у больных ОИМ оно достигает 1,31 /рис.I/

Рис.1 Сравнительная характеристика аморфно- кристаллических свойств. СФЛ эритроцитов крови практически здоровых лиц и больных различными формами ИБС. По оси абсцисс: I- донора, 2-ССН; 3-ОИМ / 1-3-й дни/; 4-ИМ /8-10-й дни/.По оси ординат- количество кристаллитов в Внутри столбцов - степень кристалличности СФЛ.

. Резшируя данные рентгенодйффракцианного изучения струк- . турной организации СФЛ"эритроцитов и плазмы крови больных различными форнами ИБС, можно заключить,что при исследуемой патологии отмечаются существенные изменения аморфно-кристаллических свойств СФЛ, что 'находит свое выражение в увеличении стеде-ни их кристалличности, укрупнении кристаллитов и, возможно, образование кристаллитов новой сингонии.

1.2. Функциональное состояние мембран эритроцитов а уровень липидной пероксидапии в них у больных различными с&ориами ИБС,

Согласно современным представлениям, в обеспечении упруго-эластических свойств мембран эритроцитов существенная роль принадлежит их липидному компоненту. Выявлено, что обогащение эритроцитов холестерин«! коррелирует с увеличением жесткости их мембран/. Изи е+ } 1980/, а воздействие фосфолиааин Аз уменьшает степень деформируемости эритроцитов / Г.Я.Левин ■

сооавт., 1980/; Ясд'и, 1981/. Показано,что 1а дефю-

мируемость эритроцитов влияют некоторые фосфолипиды, в частности фосфатидилинозит/Магсне^г, 1980/.

Установлено, что при ОШ отмечается возрастание величины максимальной алциан- индуцированной агрегации эритроцитов, с одновременным значительны!.' понижением степени деформируемости эритроцитов. Так величива максимальной агрегации эритроцитов крови доноров составляя 28,7± 1,2%, достигает у больных ОШ 59,1,9$ /Р^О.га/, а ССН- 43,0+-0,265? / Р^ 0,01). Деформируемость эритроцитов,равняясь в контроле 51,6^,6$, снижается у больных 0ИМ цо 32,3+-1,3$ / Р-0,01/, а ССН до 35,6± 1,0% /Р^О.О!/. Указанные факты свидетельствуют, что определяется достаточно выраженный параллелизм между степенью увеличения кристалличности СФЛ крови больных различными формами ИБС и изменениями со стороны функционального состояния эритроцитов /рис.2/

Рис.2. Сравнительная характеристика структурной организации СФЛ эритроцитов и их пехоторнх функциональных свойств у практически здоровых лиц /А/ и больных ОШ /Б/.По оси асцисс: I- количество кристаллитов в СФЛ; 2 -алциав-индуцированная агре^ гация эритроцитов; 3-цеформируемость эритроцитов. По оси ординат- соответствующие величины в %.

Полученные даввне приобретают определенную значимость в свете представлений о возможном участии фосфсгаипидного бислоя мембран эритроцитов, и особенно- фосфатидилэтаволамина в связывании природных'и синтетических лигандов- индукторов агрегация /Г.Я. Левин и соавт., 1980/.0дновременно показано, что дифосфаи дилиноаятолу и фосфатидилсерияу принадлежит существенная роль в обеспечении деформируемости эритроцитов/ MariaaiU, Grain, 1978; FereII, 1984/.

Среди различных механизмов расстройств структурно- функциональной организации мембранных ФЛ, значительная роль принадлежит процессам их перекисного окисления. Существенно, что различные представители ФЛ, обладают в зависимости от химической структуры,неодинаковой степенью окисляемости/ 90 а1, 1973;Е.Б. £)урлакова,1974; В.Е.Каган и соавт./1974/•

Как показали полученные данные, количество малонового диаль-дегида в эритроцитах крови больных ССН значительно выше/339,4± 11,2 мкмоль/ мл суспензии эритроцитов/, чем у практически здоровых лиц / 102,1,2 мкмоль /мл, Р^ 0,001/. Возможно указанное обстоятельство является одной из причин изменений структурной организации СМ эритроцитов крови при ИБС. Не исключается, что вследствии легкокисляемости фосфатидилэтаноламина и фосфатидил-серина изменяется соотношение СФЛ,тем аашм, ряд их физико-химических свойств. В указанном плане представляют определенный интерес данные сопоставления изменений аморфно-кристаллических свойств СФЛ эритроцитов крови больных ССН, с показателями.характеризующими нэкоторые стороны их функционально-метаболических пз^но-пЛ / рис.3/. икМ/ип

Рис.З Сравкптельная характеристика структурной организации СФЛ эритроцитов и их некоторых функционально- метаболических показателей у практически здоровых лиц /А/ и больных ССН /Б/. По оси абсцисс: I- количество кристаллитов в СФЛ; 2- индуцированная агрегация эритроцитов; 3 -степень деформируемости; 4- содержание малонового диальдегида. По оси ординат- величины в соответствующих единицах.

Анализрруя результаты изучения процентного содержания индивидуальных фосфолипидов,следует подчеркнуть значительное возрастание в эритроцитах крови больных ССН содержания лизофосфатидилхоли на /8,5±0,9$ против 3,3± 0,7% в норме/, Р^ 0,001, при'одновре-менном снижении фосфатидилхолина с 27,0* 2,0$ до 16,3± 0,5% /Р-^ 0,001/. В эритроцитах крови больных ССН отмечается также снижение процентного содержания фосфатидилэтаноламина / с II,0,8% до 5,6+ 0,4$; /Р^0,001/ и увеличение фосфатидилсерина / с 6,2± 0,4%% до 10,3* 0,6/; Р-^0,05/. Таким образом, совокупность полученных данных свидетельствует, что у больных ИБС, наряду с изменениями со стороны структурной организации СФЛ эритроцитов крови, наблюдаются определенные расстройства функционального состояния мембран эритроцитов, возрастает уровень липидной пероксидации, выявляются разнонаправленные изменения со стороны процентного содержания индивидуальных ФЛ.

1.3.РентгенодиЗгоакционный анализ СФЛ -эритроцитов и плазмы $гоови брдьных ОНМК.

Полученные даниые свидетельствуют, что рентгенодифракцион-ная картина СФЛ эритроцитов крови больных ОНМК по типу ишемичес-кого инсульта характеризуется наличием на дифракционных кольцах множества мелких пятен /точек/. Последнее обстоятельство указывает на наличие определенного процесса трансформации структурной организации СФЛ эритроцитов, в виде увеличения степени их кристалличности, размера "кристаллитов и появления кристаллоподоб-ных образований" с возможно новой сингонией. Изучение аморфно-кристаллических 'свойств 0ФЛ плазма крови указанных больных выявило наличие на рентгенограммах меиглоскостных расстояний, равных 13,3; 8,4; 7,8; 5,1; 4,6; 3,1; 2,8; 2,2; и 2,0 2 . Аморфное гало в этих случаях"почти полностью отсутствует и на его месте выявляются резко выраженные дифракционные кольца. Проведенный анализ показал, что- изменении структурной организации СФЛ, выделенных из эритроцитов и платан крови больных ОНМК по типу ишеми-ческого инсульта характеризуются повышением степени кристалличности исследуемых ФЛ.

Таким образом, ревотируя полученные данные можно заключить, что метод дифракции рентгеновских лучей является довольно информативным при изучении изменений структурной организации тканевых

- Ьз-

М эритроцитов и плазмы крови больных с различными видаш ардиоваскулярной патологии и в комплексе с другими методически-и подходами, может служить методом выбора. С другой стороны, роведеннке исследования дала возможность установить, что при азлвчных формах ИБС и ОШК по типу ишемического инсульта выявятся качественно однотипные изменения со стороны аморфно-крис-аллических свойств СФЛ эритроцитов и плазны крови, что сви-етельствует об отсутствии элемента системного характера расст-ойств.

1.4. Степень структурированности -гкаревы^с СФЛ и фоссБолипид-вй спектр при экспериментальной модели АГ.

Установлено, что при стойкой артериальной гипертеязии, выз-анной длительным введением беспородным белым крысам цереброза-ов, наиболее выраженные сдвиги отмечаются со стороны структурой организации СФЛ эритроцитов и плазш крови. Так, если в конт-оле количество кристаллитов в СФЛ эритроцитов составляет 40,6$, о у животных с АГ оно достигает 61,3$. В отношении плазш ати еличанн составляют соответственно 41,3% и 72,Одновременно тмечается резкое возрастание степени' кристалличности СФЛ эритро-лтов и плазмы крови. Существенно, что на рентгенограммах СФЛ рови животных с экспериментальной АГ отмечаются изяененпя, во многом сходные с картиной, выявленной"при исследовании СФЛ кро-з больных ИБС и ОНЖ. Это образование в области аморфного гало ополнительных дифракционных колец, свидетельствующее о повы-:ении степени структурированности СФЛ, появлейие прерывистых ^фракционных линий, с наличием точек /пятен/,изменение меяялос-:остных расстояний.

Обращает на себя внимание то обстоятельство, что в отличии 1Т эритроцитов и плазны крови .структурная организация СФЛ сследуемых органов подопытных животных не подвергается доста-■очно значительным изменениям. В частности не выявляются изме-1ения со стороны аморфно-кристаллических свойств СФЛ миокарда фыс с АГ. Более того степень 1фисталличности СФЛ мозговой, пе-[еночной и почечной ткани указанных животных несколько умень-вется /рис. 4/.

Полученные данные выдвинули задачу изучения количествен-ых сдвигов в содержании кислых и нейтральных ФЛ в различных

органах подопытных животных с моделью АГ.

X "VI

¿я

¿я

¿7]

/Я

/Л

3(1

15/

Рис.4. Сравнительная характеристика аморфно- кристаллических свойств СФЛ крови и различных тканей беспородных белых крыс. А- контроль; Б- артериальная гипертензия. По оси абсцисс: I- эритроциты; 2- плазма; 3- мо»г; 4- миокард; 5- печень; 6-почка. По оси ординат: количество кристаллитов в %.

Установлено /табл.I/,что при длительном введении церебро-задов существенных сдвигов со стороны суммарного содержания кислых и нейтральных ФЛ эритроцитов' не отмечается. В то же врем выявлена значительное уменьшение в эритроцитах процентного содержания фосфатидилхотпгна,повышение уровня лизофосфатидилхолинг фосфатиди л этан о латг&а, фосфатиднлсерина, фосфатидилинозита и сфингомиелина. В результате указанных сдвигов в мембранах эрит! цитов уменьшается "количество' НФЛ и увеличивается содержание их кислых форм. В ощутимых количествах обнаруживается отсутствующий в контроле кардиолипив. Менее выраженные сдвиги со стороны ФЛ обнаружены состороны миокарда животных с АГ. Так, отмечается некоторое повышение содержания лизофосфатидилхолина, сфингомиелина и кардиошпшна, при отсутствии существенных сдвигов в уровне фосфатидилхолииаг, фосфатидилинозита-и некотором умень-шении'процентного содержания фосфатидилсерина. В итоге не выявлено изменений в стоотношении Шй/КЭД.

Следовательно,удалось установить ,что в условиях повышения степени структурированности СФЛ эритроцитов,выявленного при экспериментальной АГ,значительным изменениям одновременно

подвергается ФЛ спектр эритроцитарных мембран с увеличением кислых форм ФЛ.

Таблица I

Сравнительное содержание кислых и нейтральных фосфо-липидов в эритроцитах крови и миокарде беспородных белых крыс в условиях воспроизведежжя »одели артериальной гипертензии /в % /.

Исследуемые объекта ' Эритроцит» Миокард

Исследуемые показат . контроль ОПЫТ контроль опыт

Лизофосфатидилхолив 3,6*1,24 1,5+0,58 7,7+ 0,44 9,6+0,24*

Фосфатидялинозит 13,3^3,64 31,7*7,42я 7,7±0,44 8,1*0,24

Сфингомиелин 9,8+2,75 19,3+5,0 Ю,7±0,5 14,2+0,21*

Фосфатидилхолин 72,2+0,47 29,2*6,03* 38,8+2,07 36,7*0,07

Фосфатидилэтаноламин 1,1+0,69 9,8*1,2* I7.4t0.44 12,5+0,03*

Фосфатидилсерин 0,006^0,002 3,7*0,93* 6,3*0,44 4,5+025*

Кардиолипив - 5,4+3,7* 11,4*0,5 14,5*0,2*

®Л 86,7+3,68 59,8*4,47* 74,6+1,57 73,3*0,55*

КФЛ 13,3+3,67 40,2*4,45* 25,4*1,38 26,7±0,01*

ШД/КФЛ 6,55*3,4 1,45*0,08* 2,9±0,9 2,7*0,02

х - Р<0,05; без обозначений - Р>0,05

В то же время, в миокарде,где у животных с АГ не выявлено существенных изменений со стороны аморфно-кристаллических свойств СФЛ, количественные сдвиги со стороны индивидуальных ФЛ проявляются намного в меньшей степени, чем со стороны ФЛ эритроцитов.

2,Влияние ультразвука на структурную организацию СФЛ крови и различных органов.

В настоящее время довольно интенсивно изучаются биофизические, физико-химические и метаболические основы действия УЗ. Установлено свойство УЗ индуцировать хемалюминесценцию биожидкостей, диспергировать белковые агрегаты, уменьшить степень структурированности примембранного сдоя воды, вызывать конформационную перестройку природных и модельных мембран. При действии терапевтических ' интенсивностей ультразвука обратимо изменяется суб-

микроскопическая архитектоника внешней и внутренней поверхностей клеточных мембран ( И.'Е.Элышнер,1973; Журавлев А.И.,Ако--шш В.Б., 1977;Улащак B.C., Чнркин А.А.,1983). В эффектах ультразвука значительное место отводится резонансным явлениям в биообъектах, его термическому влиянию ( Улащик B.C. и соавт. 1983, Букин В.А., 1988,)

В соответствии с поставленными задачами.исследовали влияние терапевтических интевсиввостей УЗ на структурную организацию СФЛ эритроцитов крови больных ССН. Озвучивание проводилось паравертебрально в импульсном режиме (0,1-0,2 Вт/см2). Длительность воздействия по 2 мин. с каждой стороны, всего 8-10 сеансов.

Установлено, что после проведения курса УЗ терапии отмечается уменьшение мелких точек(пятен) на дифракционных кольцах СФЛ'эритроцитов'крови больных ССН, свидетельствующие об уменьшении размеров' щисталли^ов. Количество кристаллитов, достигающие в СФЛ эритроцитов kpobSW61,4$, после УЗ терапии снижается до 46,9$,т.е. частично нормализуется,существенно, что УЗ терапия способствует снижению уровня малонового диальдетида в

эритроцитах крови больных ССН с 339,4+11,2 мкмоль/мл до 275,2+16,8 мкмоль/ыл (Р ^ .0,001).

Экспериментальными исследованиями выявлено,что при 5-15мин. озвучивании верхнего шейного симпатического ганглия беспородных белых крыс (интенсивность УЗ равно 0,7 Вт/см2) через 24час. со стороны СФЛ крова, мозта и миокарда отмечаются лишь признаки повышения степени их структурированкости. Ори повышении мощности УЗ до I Вт/см2 со стсрошг структурной организации СФЛ крови выявлены сдвиги.указывающие о повышении степени их кристалличности и укрупнении кристаллитов. Существенно, что у указанных животных структурная организация СФЛ мозговой ткани и миокарда не подвергаются существенной модификации.

Реитгенодифракционное изучение структурной организации СФЛ крови и различных <?рганов беспородных белых крыс при воздействии УЗ в области надпочечников выявляет интересные результата: интенсивность УЗ 0,2-1,0 Вт/см2, время излучения Ю-25мин. Выделение и исследование СФЛ проводилось спустя 24 часа после озвучивания.

Дифракционные рентгенограммы СФЛ, выделенные из крови сонтрольной группы животных и крыс, подвергнутых воздействию /3 интенсивностью 1,0 Вт/см** (время озвучивания 25 мин.),сви-штельствуют об укрупнении имеющихся в норке щшсталлитов и юявлении возможно новых мелких кристаллитов. Следует отмесить, что выявленная закономерность наблюдается также при цри-аенении УЗ интенсивности 1,0 Вт/см2 с продолжительностью экспозиции равной 10,15 и 20мин. Последнее свидетельствует,что бо-iee существенным в данном случае является уровень интенсивности зоздействующего ультразвука,чем продолжительность проведенного озвучивания.Одновременно при более низких мощностях УЗ (0,2-],7 Вт/см2), на рентгенограммах СФЛ корова отмеченные изменения зе наблюдаются. Существенно,что при надпочечниковой локализации воздействия,трансформации подвергаются, наряду с фосфолипидами ¡срови, и структурная организация СФЛ миокарда. Это находит :вое выражение в появлении новых дифракционных линий, раорпле-нии аморфного гало на дифракционные кольца, указывающее на повышение степени кристалличности. Заслуживает внимания, что при воздействии УЗ интенсивностью I Вт/см2 изменения со стороны структурной организации СФЛ мозга обнаружить не удалось.

3.Воздействие постоянного магнитного поля иа структурную организацию СФЛ.

3.1. Эффекта тотального и локального действия ПМЦ _на аморфно- кристаллические свойства тканевых СФЛ.

По существу,как указывают О.Никагура и Х.Хаяси (1986), до 1972 исследование влияния магнитного поля на химические реакции "считалось бебсмысленвой затеей". Однако,как показали последние теоретические разработки и экспериментальные исследования, магнитное поле оказывает выраженное влияние на химические реакции с участием радикалов, при этой одним из ведущих механизмов является магнитное воздействие на'синглет-триплетнне переходы в радикальных парах.'

Среди исследований, посвященных изучению физико- химических основ биологического действия магнитных полей, заслуживают внимания работы о влиянии магнитного поля на течение ряда свободно- радикальных реакций в биологических системах (Кваяина Е.Б.

и соавт.,1972; Деген И.Л.,1974; Аристаров В.М..Пирузян Л.А., 1978,Юркевич Б.Д.,1988),что согласуется с теорией синглет-трип-летных переходов в радикальных парах (Сагдеев Р.З. и соавт., 1977).

Рентгенодифракционные исследования СФЛ проводились у животных, подвергнутых тотальному воздействию однородного ПМП с индукцией 500 мГл, с экспозицией 1-4час. Выделили СФЛ из крови, миокарда, мозга и печени экспериментальных животных через 24час.,а также 7,14,20 и 35 суток.

Установлено,что при воздействии однородного ПМП индукцией 500мТл на целостный организм экспериментальных животных продолжительностью 1-4час., на дифракционных рентгенограммах СФЛ миокарда отмечается увеличение, по сравнению с контролем.степени кристалличности .укрупнение кристаллитов и образование кристаллито: новой, отличной от существующей в норме сингонии. По-вядимому, под влиянием магнитного облучения происходят достаточно глубокие изменения структурной организации, которая обусловлена глубокими метаболическими изменениями. Об этом свидетельствует наличие достаточно длительного срока (примерно месяц), необходимого для восстановления исходной аморфно-кристаллической структуры СФЛ.

При рентгенодифракцаонном исслечовании СФЛ цельной крови, изменения,вызванные воздействием на целостный организм животных ПМП индукцией 500 мТл характеризуются двумя особенностями. Во-первых,в отличие от фосфолипидов миокарда, в данном случае пропс ходит лишь укрупнение кристаллитов, без изменения их сингонии. Во-вторых, сдвиги со стороны аморфно- кристаллических свойств фосфолипидов более нестойки, вбо исходная структурная организация фосфолипидов восстанавливается весьма быстро.

Следует отметить, что в рамках разрешающей способности метода дифракции рентгеновских лучей,выявить структурные изменения в организации СФЛ мозга не удается.

Локальное воздействие однородного ПМП,индукцией 40мТл, осуществлялось так: подкожно в области верхнего шейного симпатического ганглия была фиксированы магниты. Время воздействия составляло 6 и 12 суток. В качестве контроля служили животные, которым аналогичным образом подкожно вживлялись металлические диски, с размерами, соответствующими используемым магнитам.

'езультаты проведенных исследований показали, что при локальном ¡оздействии ПШ индукцией 40 мТл существенных изменений со сто-)овч аморфно-кристаллических свойств СФЛ, выделенных из крови, »«л;карда .мозга и печени экспериментальных животных не отмечается.

3.2.Вяияние постоянного магнитного поля на чпоцессы липид-зой пероксидаиии и активность ? -глюктоонидазы.

В настоящее время накапливается все больше фактов,свидетельствующих о том,что рассмотрение вопросов структурно- функциональной организации фосфолипидов должно быть осуществлено в рамках проблемы изучения роли и механизмов свободаорадикального окисления липидов. Установлено,что состав фосфолипидов и скорость их окислительных превращений взаимосвязаны. Так, по данным Е.Б.Бурлаковой и соавт.(1982), при повышении антиокислительной активности наблюдается увеличение относительного количества легко окисляемых фракций фосфолипидов - фосфатидидэтаноламина и фосфатидилсерина, а при понижении антиокислительной активности - рост содержания фосфатадилхолина и сфингомиеллна. Эти и ряд других рабрт,представленных в обзоре литературы,выдвинули вопрос о возможном участии механизмов липидной пероксидации в индуцированных ПМП перестройках структурной организации СФЛ.

Состояние липядшой пероксидации оцевивали по количеству малонового даальдегада.Животные подверглись воздействию однородного ПМП индукцией 500мТл, с экспозицией 1,2 и Зчас. Количественное определение содержания маяонового диальдегида проводилось через I и 24 час., 7 и 14 дней после воздействия ПМП на целостный организм,а при 3-х часовой экспозиции и спустя месяц после разового облучения. Изучению подверглись мозговая ткань, печень и плазма крови беспородных белых крыс.

Установлено,что при воздействии ПМП в плазме крови отмечается значительное возрастание уровня липидвнх перекисей. В то же время ПМП, не оказывая существенного влияния на структурную организацию СФЛ моста,способствует значительной интенсификации перекисного окисления липидов в мозговой ткани экспериментальных животных.Таким образом, налицо факт определенного "расщепления" аффектов воздействия ПМП на аморфно-щшсталлические свойства СФЛ и процессы липидной пероксидации. Если в случае

- 2 <ъ -

цельной крова повышение липидвой пероксидации соцровождается увеличением степени структурированности СФЛ, то при исследовании мозга повышение уровня липидной пероксидации определяется в условиях практически отсутствия изменений со стороны аморфно-кристаллических свойств фосфолипидов. Указанное обстоятельство дает основание полагать,что хотя процессы липядяой пероксидации принимают определённое участие в механизмах индуцированной ДШ трансформации аморфно- кристаллических свойств фосфолипидов немаловажное значение приобретают особенности структурной организации фосфолипидов различных органов и тканей.

С целью получения информации о влиянии постоянного магнит ного поля на состояние мембранных структур, в отдельной серии экспериментов в гомогенатах мозга и печени определяла активвост $ -глюкуронидазы. Выбор указанного фермента в качестве объекта изучения определялся тем, что р -глюкуроньдаза будучи одним из маркеров лизосом.представлена также и в ряде других клеточных образований,таких как эндоплазматическяй ретикулум и,частично микросомы. Активность фермента была исследована при различной продолжительности воздействия постоянного магнитного поля (500 ыТл 1,2 и Зч.). Забивка экспериментальных животных производилась через I, 24ч. 7 и 14 дней после магнитного воздействия .

Проведенные исследования выявили повышение активности £ -глю куронидазы во все сроки воздействия постоянного магнитного поля, особенно выраженное чере? 7 суток после магнитного облучения. Наиболее значительные сдвиги наблюдаются при 3-х часовом воздействии.По-видимому это связно с повреждением структуры субклеточных мембран.

4,Итм твтчть тчЧш чз gyprawre

ФосФолипидов крови, мозга и сердца животных, подвергнутых g9?fleg<?Tfflre ШЦЧЧИИ Физачесвд фа^ррд.

4.1. Эффекта ультразвука на ионную проводимость модельных фосфолипидишс ■ мембран.

Почти 30 лет тому нааад Мае iter et a ¿, (1962) впервые сформировали устойчивую плоскую липидную мембрану из фосфоли-пндов мозга и положили начало новому направлению исследований электрических свойств подобных пленок. Позднее rtoata^Muefter"

(1972) разработали разновидность метода формирования бислойных липидных мембран, не содержащих растворителя,который и по настоящее время по существу является наиболее распространенной моделью, широко используемой для исследований самого различного профиля.

Располагая данными относительно способности ультразвука сравнительно высоких терапевтических мощностей индуцировать изменения структурной организации суммарных тканевых фосфолипи-дов, исследованию подвергли проводимость бислойных фосфолипид-ных мембран, сформированных из суммарных фосфолипидов мозга, миокарда и крови животных, подвергшихся воздействию ультразвука, в отношении одно- и двухвалентных катионов.

Полученные данные свидетельствуют,что ионная проводимость бислойных мембран,сформированных из суммарных фосфолипидов мозговой ткани животных контрольной группы довольно низкая, порядка Ю-9 Ом-1 X см--*-. В исследованиях, проведенных на модельных мембранах из суммарных фосфолипидов мозга животных, подвергнутых ультразвуковому воздействию в области верхнего шейного симпатического ганглия установлено,что озвучивание приводит к повышению ионной проводимости мембран к одно- и двухвалентным катионам. Существенно, что определяющим фактором'в изменении ионной проводимости является мощность ультразвукового воздействия,между тем как продолжительность воздействия, существенно не отражается на эффектах озвучивания. Указанные факты, а также данные, полученные при исследовании ионной проводимости модельных бислойных мембран,сформированных из суммарных фосфолипидов миокарду и цельной крови свидетельствуют, что, во-первых, озвучивание не в равной степени и' в неоднозначной последовательности отражается на состоянии проводимости искусственных мембран по отношению к К* и Са2+. Во-вторых, продолжительность воздействия ультразвуковых колебаний (10,20,ЗОмин) не отражается на величине сдвигов со стороны ионной проводимости модельных мембран, сформированных из суммарных фосфолипидов мозга, миокарда и крови при применении ультразвука мощностью 0,2; 0,7 и 1,0 Вт/см2.

Для объяснения механизмов ионной проводимости в настоящее время используют т.н. кластерную модель бислойных липидных

ыеыбран. Полагают,что последняя, наряду с наличием структурированных участков бислоя (кластеров).включает пограничные области между ними, отличающиеся более неупорядоченной структурой (Ивков В.Г. .Берестовский Г.Н. ,1982). С позиций указанной модели, при воздействии ультразвука более вероятным является образование дополнительного количества пор в переходных зонах между кластерами или увеличение проводимости равее существующих пор, вследствии их деформации. Причиной этого могут быть индуцированные ультразвуком колебания бислоя,появление на его поверхности воля, способствующих перераспределению упругой энергии бислоя (Миронов М.А.,1983).

4.2.Влия^яе постоянного магнитного поля на ионную проводимость модельных ФосФолипидвых бислоев.

Приступая к разработке поставленных задач по изучению влияния магнитного поля на ионную проводимость модельных мембран, сформированных из суммарных тканевых фосфолипидов, исходили из двух отправных точек выявленных наш эффектов воздействия постоянного магнитного поля на структурную организацию суммарных фосфолипидов различных органов и обнаруженных сдвигов со стороны процессов липидной перокспдации.

Полученные данвые свидетельствуют,что при 3-х часовом тотальном воздействии на животны^^стоянного магнитного поля индукцией 500 мТл.через 7 дней . облучения отмечаются существенные изменения ионной проводимости модельных бислойных мембран, сформированных из фосфолипидов мозговой ткани. Так, отмечается одновременное повышение ионной проводимости,в среднем на 2,5 порядка по отношению к К^а Са2+(табл.2). Обращает на себя внимание то обстоятельство, что примерно одинаковые изменения выявлены при изучении ионной проводимости модельных бислойных мембран, сформированных из фосфолипидов миокарда и цельной крови экспериментальных животных, подвергнутых воздействию ПМП указанной индукции.

Полученные в указанной серии экспериментов результаты позволили выявить.что в отличие от ультразвукового воздействия, под влиянием ПМП определенный селективности в изменении ионной проводимости модельных мембран,сформированных из СФЛ мозга,, миокарда и крови по отношению к исследуемым ионам не отмечается

Таблица 2

Влияние постоянного магнитного поля различной индукции на ионную проводимость модельных бислойннх мембран, сформированных из тканевых СОЛ.

Источник фосфолипидов Индукций Дли-поля тель-1ность Удельная птаволимость( 0М_1х СМ""1)

0,1моль А/а а 0,1 моль КС1 0,1моль С 9 С С •

Мозг Контроль Опыт 500мТл Опыт 40 мТл

1,2x10' Зч. 4,5x10' 12дн. 1,8x10'

г?

1,2x10' 5,4x10' 2,4x10'

г7

1,1x10"

6,6x10'

2,7x10"

,-7

Миокард

Контроль Опыт Опыт

,-9

1,1x10' 50СМТл Зч. 1,ЗхЮ~7 40мТл 12дн. 2,7x10""®

1,2x10" 1,2x10' 2,7x10"

,-7

1,1x10"

2,5x10

3,3x10

,-8 1-8

Кровь

Контроль Опыт Опыт

500мТл 40 Ш"л

1,1x10" Зч. 1,7x10' 12дн. 2,1x10'

Г7

,-8

1,1x10' 2,6x10' 2,4x10'

Г9

Г7

,-8

1,2x10' 1,8хЮ: 1,5x10'

Г9

Г7

,-8

9

Таким образом,резюмируя полученные данвые можно заключать, что в результате предпринятого исследования в определенной степени расширены и углублены существующие представления о структурно- функциональной организации тканевых фосфолипидоа и их изменениях при различных формах кардиоваскулярной патологии .дополнены сведения о физико- химических механизмах влияния на биоструктуры ультразвуковых колебаний и постоянного магнитного поля.

ВЫВОДЫ

I.Методом дифракции рентгеновских лучей под большими углами выявлены качественно однородные изменения со стороны структурной организации суммарных фосфолипидов эритроцитов и

плазмы крови больных различными формами ИБС и острыми наруше--ниями мозгового кровообращения, в виде увеличения степени структурированности фосфолипидов,укрупнения кристаллитов и возникновения кристаллитов новой сивговии.

2.Модификация аморфно- кристаллических свойств суммарных фосфолипидов эритроцитов крови при ИБС, сопровождается функционально-метаболическими сдвигами со стороны их мембран, что находит свое выражение в увеличении индуцированной агрегации и снижении степени деформируемости эритроцитов, перераспределении фосфолипидного набора эритроцитарных мембран и интенсификации процессов липидной пероксидации.

3.На модели экспериментальной артериальной гипертен-зии установлено повышение степени структурированности суммарных фосфолипидов эритроцитов и плазмы крови, без существенных сдвигов со стороны аморфно- кристаллических свойств фосфолипидов мозга миокарда и печени. Изменения структурной организации фосфолипидов эритроцитов обнаруживается на фоне трансформации фосфолипидного спектра их мембран, характеризующейся увеличением содержания кисрнх форм фосфолипидов.

4.Ультразвуковая терапия больных ИБС способствует уменьшению степени структурирована ости суммарных фосфолипидов эритроцитов, с одновременным снижением в них интенсивности процессов липидной пероксидации. Относительно высокие мощности ультразвуковых колебаний индуцируют аморфно- кристаллических свойств суммарных фосфолипидов крови и миокарда животных, выражающиеся в увеличении количества кристаллитов и их укрупнении.

б.Воздействие на целостный организм экспериментальных животных постоянного магнитного поля индукцией 500мТл сопровождается выраженными сдвигами со стороны аморфно- кристаллических свойств суммарных фосфолипидов миокарда, свидетельствующими о качественном преобразовании структурной организации фосфолипидов, интенсификации процессов их кристаллизации.

6.Постоянное магнитное поле различной индукции и продолжительности воздействия опособстыует усилению процессов липидной пероксидации в мозге, печени и плазме {срови подопытных животных, с одновременным повышением активности В-глюкурони-дазы а гомогенатах мозга и печени.

?.Внявленное по отношению X1" и Са~+, увеличение яон-

шй проводимости модельных- бислойных мембран, сформированных из ¡уммарных фосфолипидов мозга, вгаокэрда и крови ивотннх, подверг-гутых предварительному воздействию исследуемых физических факторов, 1аходится в зависимости от интенсивности ультразвуковых колебаний i величины индукции постоянного магнитного поля.

Список опубликованные работ до теме диссертации.

1.Асрян Н.В., Рапян Ю.А., Секоян Э.С.- Рентгеволотаческое :труктурных изменений некоторых фосфолипидов, выделенных от белых 1>ыс,подвергнутых воздействию УЗ колебаний. Зурнад эксперты, и клин ¡едацины АН РА т.ХХУИ, Л 6, 1988, с. 608-611.

2.Агаджанов М.И., Экелекян В.Л., Чалингарян Л.А.«Асрян Н.В.-лияние постоянного магнитного поля на лишишую пероксиданию у елых крыс. Маториадн докладов Всесоюзного Пленума Проблемной ко-иссии Ш СССР "Магнитобвологая и магямтотерапяя а медицина" ,Ере-лн,ияд.Айпотан,19í¡8, о. ?в-79.

3.Экелекян B.JÍ..Агаджаяов Н.И. .Чилингарян Л.А.,Асрян Н.З.-шенения в активности ß -глюкуронидазн в мозгу в печеия бе-^х -рс вод влияние* ШП. Материалы докладов Всесоюзного Пленума роблемной Кояжссит ИЗ СССР, "Мвгвитобиология и магивтотсрапия • !дицинея, Ереван, изд.Айастан, 1988, с.79-82.

4.Асрян Н.В., Рапян Ю.А.,- Рентгенографическое зсслодсвг.яло груктуриых изменений в некоторых фосфолипядных образовать: / >лых вдис .подвергнутых воздействию ПМП. Материалы докладов ¡¿союзного Пленума Проблемной Комиссии МЗ СССР," Магннтобиологая и 'Нитотерапия в медицине", Ереван,изд.Айаотан, 1988,с.64-67.

5. Асрян Н.З. .Рапян Ю.А. .Погосян Н.Р. .Секоян Э.С.- Исследа;п-10 фосфолипидов мэибран эритроцитов крови больных ИБС методом фракции рентгеновских лучэй. Журнал экспериы.'и клин.медицина [РА.т.ИП, J» 2, 1289,0.156-159.

6.Асряв Н.В., Рапяв Ю.А. .Секоян Э.С.-Влияние ультразвука на руиууыуц орггшизаца» суммарных тканевых фосфолипидов. Дуряал вперим. и кляв.июдвцянн АН РАт.ХП,* 1,1990,с.98. -

7.Асрян Н.В..Епископосян Н.Г. .Рапян Ю.А.,Секоян Э.С.-Исслеживав структурной организация фосфолипидов мембран эритроцитоь j аз:ш крови больных инфарктом цнокарда методом дифракции рс-нтге-всках лучей, Щурнал экспврим. и клин.медицины АН РА т.»Л. Л Ой, с.126-129.

в.Рацян Ю.А.,Асрян Н.В.- Исследование структурной организации тканевых фосфолихгадов белых крыс«подвергнутых воздействию постоянного магнитного поля, методом дифракции рентгеновских лучей. Журнал эксперим. и клин.медицины .АН РА т.ХХХ,№ 5,1990, с.474-477.

М'СиЛ

, ^ I