Структурно-функциональная характеристика нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы и респераторных отделов лёгкого крыс в условиях интратрахеального инфицирования

Лабутин, Илья Викторович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Структурно-функциональная характеристика нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы и респераторных отделов лёгкого крыс в условиях интратрахеального инфицирования
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме "Структурно-функциональная характеристика нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы и респераторных отделов лёгкого крыс в условиях интратрахеального инфицирования"

004Ы22о?

ЛАБУТИН Илья Викторович

СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НОНАПЕПТИДЕРГИЧЕСКОЙ ГИПОТАЛАМО-ГИПОФИЗАРНОЙ НЕЙРОЭНДОКРИННОЙ СИСТЕМЫ И РЕСПИРАТОРНЫХ ОТДЕЛОВ ЛЕГКОГО КРЫС В УСЛОВИЯХ ИНТРАТРАХЕАЛЬНОГО ИНФИЦИРОВАНИЯ

03.03.04 Клеточная биология, цитология, гистология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Оренбург-2010

1 1 НОЯ 2010

004612239

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ Сгадников Александр Абрамович

Официальные оппоненгм:

доктор медицинских наук, профессор Зайцев Валерий Борисович

доктор медицинских наук, профессор Полякова Валентина Сергеевна

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский

университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Защита состоится 'v плат г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 208. 066. 04 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 460000, Оренбург, ул. Советская, 6, зал заседаний Учёного совета

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия Росздрава»

Автореферат разослан « 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, профессор

Шевлюк Н. Н.

ОБШАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Вопросы изучения закономерностей гистогенезов, тканевой реорганизации макроорганизмов в условиях их интервенции современными бактериальными патогенами являются наиболее важными и малоизученными. Решение их существенно для понимания механизмов клеточных и тканевых реорганизаций в условиях многогранных взаимодействий с прокариотами (Бухарин О.В. с соавт, 2004), что чрезвычайно важно относительно клинических аспектов клеточной биологии и инфектологии.

Благодаря внутригеномным преобразованиям микроорганизмы приобрели способность к значительной изменчивости своих свойств, обеспечивающих противостояние защитным силам млекопитающих, к числу которых относятся и генетически детерминированные свойства и биологические особенности структурных (клеточных, тканевых) элементов эукариот, в том числе и механизмы репаративных гистогенезов (Стадников A.A., 2001, 2005; Стадников A.A., Сеньчукова М.А., 2009). Известно, что наличие антилизоцимной, акгииктерфероновой, антилактоферриновой активностей у микробных патогенов существенно затрудняет реализацию репаративных процессов в различных тканях млекопитающих (Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., 1996; Бухарин О.В., Литвин В.Ю., 1997; Ковбык Л.В., 2000; Козлова А.Н., 2009, 2010). Однако до сих пор малоизученными остаются вопросы взаимодействия микроорганизмов, обладающих соответствующим персистентным потенциалом, и тканевых элементов ацинусов лёгких.

Согласно имеющимся данным, респираторный отдел лёгкого (ацинус) состоит из альвеолоцитов, стромальных элементов и сосудов. Однако закономерности межклеточных отношений, принципы дифферонной организации этих элементов остаются до конца невыясненными. До сих пор нет единой точки зрения относительно судьбы дифференцированных клеток в условиях репаративного восстановления тканей легких (Токин И.Б., 1972; Саркисов Д.С.,

1973, 1977; Лиознер Л.Д., 1982; Ерохин В.В., Романова Л.К., 2000; Полякова B.C., 2004; Мещеряков К.Н., 2008).

Изучение особенностей регенераторных возможностей альвеолоцитов и структурных компонентов подлежащей соединительной ткани, характер их взаимодействия в очаге повреждения друг с другом, с клетками воспаления и бактериальными патогенами в процессе физиологической и репаративной регенерации до сих пор остаются чрезвычайно актуальным.

Среди важнейших регулирующих систем организма весьма существенна роль гипоталамической нонапептидергической нейроэндокринной системы (ГТНС) в поддержании тканевого и клеточного гомеостаза, обеспечении процессов адаптации и компенсации нарушенных функций различных органов висцеральных систем (Поленов А.Л., 1993; Акмаев И.Г., 1979; Шевлюк H.H., Руди В.Н., 2000; Стадников A.A. с соавт., 2000; Валов С.Д., 2001; Кузнецов СЛ. с соавт., 2009). Известно, что в критических ситуациях, сопровождающихся значительной активизацией гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы (ГГНС), а также при повреждениях и репарациях различных тканей нонапептиды крупноклеточных ядер гипоталамуса (окситоцин, вазопрессин) осуществляют адаптогенное влияние и имеют важное значение в развитии долговременной (структурной) адаптации клеток и тканей. Кроме того, указанные гуморальные факторы выступают как стимуляторы репаративных гистогенезов (Стадников A.A., 2005,2010; Канюков В.Н., Стадников A.A., 2009). В отношении влияния ГГНС на диапазон пластичности и реактивности гистологических структур респираторных отделов лёгких данных в настоящее время крайне мало, и они характеризуются противоречивостью.

Таким образом, очевидна необходимость дальнейшего исследования роли и значимости ГГНС в процессах взаимодействия бактериальных патогенов со структурными компонентами респираторных отделов лёгких, её влияния на репаративные возможности ацинусов.

Цель настоящего исследования - установить роль и значимость

гипоталамической нейроэндокринной регуляции в процессах структурно-функциональной реорганизации тканевых элементов ацинусов легких в условиях взаимодействия про - и эукариот.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи исследования:

1. Провести морфофункциональную оценку альвеолярных структур лёгких и нонапептидэргической ГГНС у крыс в условиях интратрахеального введения штаммов Klebsiella pneumoniae, обладающих антилизоцимной активностью (AJ1A+) и без таковой (AJIA-).

2. Оценить реактивность и пластичность тканевых элементов лёгочных ацинусов крыс при электролитическом выключении супраоптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса на экспериментальных моделях у интактных животных, а также при введении указанных патогенов.

3. Определить регуляторное влияние гипоталамических нонапептидов на репаративные возможности альвеолярных структур легких в условиях их сокультивирования с крупноклеточными ядрами гипоталамуса (в асептических условиях и после инфицирования животных-доноров) по методу Ф.М. Лазаренко (1959).

Научная новизна: Впервые получены данные о характере адаптивных и дезадаптивных изменений структурных элементов ацинусов легких млекопитающих (крыс) в условиях инфицирования, культивирования и органотипического сокультивирования с нонапептидергическими ядрами гипоталамуса in vivo по Ф.МЛазаренко.

Впервые установлено прямое позитивное влияние нонапептидов гипоталамуса на диапазон органо - и гистобластических потенций клеток легочных ацинусов в условиях интратрахеального инфицирования. Обоснованы критерии оценки персистентных свойств бактерий на основе ультраструктурных данных и показателей апоптозной доминанты нейросекреторных клеток

супраоптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса крыс при их инфицировании штаммами Klebsiella pneumoniae, обладающими антилизоцимной активностью.

На современном методическом уровне (электронная микроскопия) использован оригинальный метод Ф.М. Лазаренко (1959) культивирования тканей in vivo, в том числе при сокультивировании респираторных отделов легкого крыс с крупноклеточными ядрами гипоталамуса, что позволило получить приоритетные данные и раскрыть новые возможности данного метода экспериментальной гистологии. Сформулировано положение о регулирующей роли нонапептидергической ГГНС в процессах взаимодействия бактериальных патогенов со структурными компонентами респираторных отделов лёгких в аспекте оптимизации репаративных гистогенезов.

Теоретическая и практическая значимость: Полученные результаты позволяют дополнить существующие представления о закономерностях репаративных процессов в легочных ацинусах млекопитающих и их нейроэндокринной регуляции. Обоснована позитивная роль гуморальных факторов нонапептидергических нейросекреторных ядер гипоталамуса в регуляции тканевого и клеточного гомеостаза альвеолоцитов, сосудистых и стромальных компонентов респираторных отделов легких млекопитающих животных в условиях микробной интервенции. В своей совокупности это позволяет сформулировать новое направление в области клеточной биологии, которое обозначается как нейроэндокринная регуляция взаимодействий про- и эукариот. Полученные результаты могут быть использованы при разработке проблем патологии органов дыхания, позволят существенно расширить и углубить имеющиеся представления о закономерностях репаративных процессов в ацинусах млекопитающих, о роли гипоталамических нонапептидов в репаративном гистогенезе структурных элементов респираторных отделов лёгких. Это создаст предпосылки для дальнейшего развития учения о биологии тканей, а также совершенствования научной базы для клинической пульмонологии.

Положения, выносимые на защиту:

1 Выраженность воспалительно - деструктивных изменений в ацинусах легких при интратрахеальном инфицировании имеет прямую зависимость от обладания микроорганизмом персистентных свойств (в частности антилизоцимной активности).

2. Характер и выраженность фаз нейросекреции нонапептидергических ядер гипоталамуса отражают персистентный потенциал Klebsiella pneumoniae, антшшзоцимная активность которых усугубляет процессы рассинхронизации секреторного цикла, вплоть до блокирования высвобождения нейросекреторных продуктов на уровне аксовазальных комплексов в нейрогипофизе.

3. Электролитическое выключение супраоптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса лимитирует реализацию альвеолярными структурами респираторных отделов легких экспериментальных животных своих органотипических и гистобластических потенций, включая процессы репарации.

4. Гипоталамические нейропептиды оказывают позитивное влияние на адаптивную реорганизацию структурных элементов легочных ацинусов в условиях интратрахеального инфицирования, что обосновано методом культивирования по Ф.М. Лазаренко (1959).

5. Адаптивный характер воздействия нонапептидергической ГТНС на клеточный и тканевой гомеостаз альвеолоцитов респираторных отделов легких проявляется дистантно и паракринно через активизацию репаративных процессов фибробластов, макрофагов, эндотелиоцитов и адвентициальных клеток.

Внедрение результатов исследования

Основные результаты диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии; фтизиатрии Оренбургской государственной медицинской академии при изложении материала

на лекциях и проведении практических занятий со студентами.

Апробация работы: Результаты проведенных исследований докладывались и обсуждались на региональной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов (Оренбург, 2008), Всероссийской конференции «Медицинская наука и образование Урала» (Челябинск, 2008), Всероссийской научной конференции «Вопросы морфологии XXI века» (Санкт - Петербург, 2010), X Конгрессе международной ассоциации морфологов (Ярославль, 2010).

Публикации: По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, из них 6 в центральных рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации: Диссертация изложена на 179 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, обзора литературы, главы «Материал и методы исследования», главы результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов и выводов. Диссертация иллюстрирована 57 рисунками, 3 таблицами. Библиография включает 157 отечественных и 88 зарубежных источников. Диссертация написана на русском языке.

Собственные исследования Материал и методы исследования

Эксперименты проведены на 146 белых беспородных лабораторных крысах-самцах массой 210-250 г. В соответствии с поставленными задачами настоящей работы объектами исследования служили легкие, нейрогипофиз, а также фрагменты гипоталамуса, содержащие супраоптические (СО) и паравентрикулярные (ПВ) ядра. Сведения по количественному распределению материала по сериям экспериментов представлены в таб. 1

Таблица 1

Количественное распределение материала по сериям и срокам

экспериментов

Серия эксперимента Сроки эксперимента Количество животных

Интратрахеальное инфицирование штаммами Kl. Pneumoniae АЛА+ 1 4

3 4

7 4

21 4

Интратрахеальное инфицирование штаммами Kl. Pneumoniae АЛА- 1 4

3 4

7 4

21 4

Контрольные животные I 3

3 3

7 3

21 3

Интратрахеальное инфицирование штаммами Kl. Pneumoniae АЛА+ животных с разрушенными крупноклеточными ядрами гипоталамуса 1 4

3 4

7 4

Интратрахеальное инфицирование штаммами Kl. Pneumoniae АЛА-животных с разрушенными крупноклеточными ядрами гипоталамуса 1 4

3 4

7 4

Контрольные животные 1 4

3 4

7 4

Совместное культивирование альвеолярных структур легких крыс, инфицированных штаммами Kl. Pneumoniae АЛА+ и крупноклеточных ядер гипоталамуса 1 9

3 9

7 9

Совместное культивирование альвеолярных структур легких крыс, инфицированных штаммами Kl. Pneumoniae АЛА- и крупноклеточных ядер гипоталамуса 1 9

3 9

7 9

Контрольные животные 1 4

3 4

7 4

Всего животных 146

Было проведено 3 серии опытов. В первой серии (16 животным) проводилось интратрахеальное введение К.1. pneumoniae, обладающих антилизоцимной активностью (AJ1A+). Под эфирным рауш-наркозом с помощью инсулинового шприца интратрахеально вводили 200 млн микробных тел штаммов KI. Pneumoniae, содержащихся в 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия. Вывод их из эксперимента проводился на 1,3,7,21 сутки (по 4 особи). 16 животным было проведено интратрахеальное введение штаммов KI. pneumoniae, не обладающих AJ1A (по 4 особи на 1,3,7,21 сутки). Для контроля использованы 12 интактных животных (по 3 на каждой стадии серии).

Во второй серии было проведено электролитическое разрушение супраоптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса по методике А.А. Стадникова и А.Н. Варламова (1983) с последующим (через сутки) интратрахеальным введением KI. pneumoniae с AJ1A+ (12 животным с выводом из эксперимента по 4 особи на 1,3,7 сутки) и АЛА- (12 животным с выводом из эксперимента по 4 особи на 1,3,7 сутки), на базе известной конструкции для трансаурикулярной гипофизэктомии у крыс (Федотов Б.А. с соавт.,1971). Для контроля были использованы 12 ложнооперированных животных (трепанация черепа без разрушения ядер гипоталамуса)-по 4 особи на каждой стадии серии.

В третьей серии было проведено совместное культивирование альвеолярных структур лёгких (от крыс, инфицированных KI. pneumoniae с АЛА+ и АЛА- через 3 суток после введения патогена и интактных животных) с крупноклеточными ядрами гипоталамуса по методу Ф.М. Лазаренко (1959). При этом структуры лёгкого для имплантации были взяты от 24 инфицированных (штаммами К.1. pneumoniae с АЛА+ и АЛА-) крыс и 12 интактных животных. Крысами-донорами для получения ядер гипоталамуса служили 24 интактных животных. Крысами-реципиентами были 36 животных.

Крыс-доноров декапитировапи под эфирным рауш-наркозом, производили вскрытие грудной полости и легкие осторожно и быстро выделяли

из окружающих тканей и помещали в стерильные чашки Петри с охлажденной (+4°С) средой 199. Взятые кусочки размером 1-1,5мм3 тщательно промывали в нескольких порциях среды 199 с добавлением стрептомицина в разведении 50000 ед. на 1 мл. Указанные дозы антибиотиков не влияют на результаты эксперимента (Хлыстова З.С., 1958), но предотвращают имплантаты от инфицирования. Затем полученный материал измельчали глазными ножницами до консистенции кашицы. Образовавшуюся массу смешивали с целлоидиновым "песочком" в соотношении 1:2 согласно рекомендациям автора метода (Лазаренко Ф.М., 1959). Затем к полученному материалу добавлялись соответствующие фрагменты гипоталамуса. У животных-реципиентов накануне имплантации производили электролитическое разрушение супраоптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса. После эвтаназии крыс-доноров быстро вскрывалась полость черепа, извлекался головной мозг и помещался в стерильную чашку Петри с охлажденной до +4°С средой 199.

Выделение крупноклеточных нейросекреторных ядер гипоталамуса производились при помощи микроскопа МБС-9, используя стереотаксические карты (Буреш Я. с соавт., 1962). Для оценки правильности выделения гипоталамических ядер проводился выборочный анализ взятого для трансплантации материала и оставшихся после выделения ядер частей гипоталамуса.

Прооперированных животных содержали в стандартных условиях вивария. В каждой серии опытов взятие материала осуществляли через 1,3,7 суток от начала имплантации.

Исследовано 72 имплантата через 1,3,7 суток культивирования (по 12 имплантатов на каждой стадии). Вывод животных из эксперимента осуществлялся путем декапитации под эфирным рауш-наркозом. в утренние часы (10.00-11.00). Имплантаты выделяли при помощи ножниц и пинцета, не нарушая целостность наружной соединительнотканной капсулы.

При выполнении исследования соблюдались правила биоэтики,

утвержденные приказом МЗ СССР № 755 от 12.08.1977 г., а также принципы гуманности, изложенные в директивах Европейского сообщества (86/609/ЕЕС) и Хельсинской декларации по защите позвоночных животных, используемых для лабораторных или иных целей.

Светооптическне гистологические методы. Для светооптического исследования полученный материал фиксировали в 10% охлажденном (t +4°С) ВОДНОМ растворе нейтрального формалина, спирт-формоле, жидкости Буэна. Парафиновые срезы толщиной 4-6 мкм окрашивались гематоксилином Майера и эозином, гликоген и нейтральные гликопротеиды обнаруживали перийодат-ШИФФ реакцией по Мак-Манусу (Пирс Э., 1962). Нуклеиновые кислоты выявляли метиленовым зеленым и пиронином по методу Браше (Пирс Э., 1962). Суммарный белок в срезах определяли по методу Даниэлли (Пирс Э., 1962). Нейросекреторный материал идентифицировали паральдегид-фуксином по Гомори-Габу в модификации A.A. Поленова (1963). Все гистохимические методики сопровождались соответствующими энзиматическими контролями (Пирс Э., 1962).

При проведении иммуноцитохимических исследований на

парафиновых гистосрезах осуществляли двухэтапные реакции по идентификации белка-маркера апоптоза - р-53 и антиапоптотического белка bcl-2. ца первом этапе депарафинированные срезы подвергали высокотемпературной обработке и инкубации с первыми (специфическими) моноклональными антителами (фирма «Дако», Дания) в рабочем разведении 1:50. Для визуализации позитивного (р53) иммунного окрашивания клеток применяли стрептавидин-биотиновый пероксидазный метод с последующим докрашиванием ядер гематоксилином Майера. Параллельно для определения внутриядерной фрагментации ДНК использовали набор реактивов «Apoptag Plus Peroxidaze in Situ Apoptosis Detection Kit» (фирма «Integrin», Канада) с докрашиванием ядер клеток 0,5% раствором метиленового зеленого на 0,1 М ацетатном буфере. На втором этапе осуществляли инкубацию гистосрезов с

моноклональными антителами bcl-2 и авидин-биотин-пероксидазным комплексом с последующим выявлением пероксидазы диамин-бензидином. Подготовленные таким образом гистологические срезы докрашивали квасцовым гематоксилином и заключали в канадский бальзам. Подсчет р53 и bcl-2 позитивных клеток производили методом их визуализации в каждом гистологическом срезе (при стандартном увеличении х 900, не менее 200 клеток) в соответствии с рекомендациями А.А. Жданкиной (2006).

Для электронномикроскопического исследования материал фиксировался в 2,5-3% охлажденном (t +4°С) растворе глутарового альдегида на S-коллединовом буфере. Постфиксация проведена в четырехокиси осмия по Millonig (1961). Материал обезвоживался в ацетоне либо спирте с возрастающей концентрацией и заключался в ЭПОН-812 или аралдит. Ультратонкие срезы были приготовлены на ультратоме LKB-5 (Sweden-Bromma).

Для прицельного выявления гистологических структур использованы полутонкие срезы, окрашенные капельным способом метиленовым синим и основным фуксином по рекомендациям Т. Sato et М.А. Shamoto (1973).

Ультратонкие срезы подвергались двойному контрастированию в 2% водном растворе уран ил-ацетата при температуре +37°С в течение 2 часов и в цитрате свинца (Reynolds E.S., 1963). Исследование ультратонких срезов производилось на электронном микроскопе ЭМВ 100АК с фотографированием ультраструктур при увеличениях от хбООО до х40000. Электронномикроскопическая гистоавторадиография выполнялась по методике Larra F. et Drozz В. (1970) с введением экспериментальным животным НЗ-тимидина.

Морфомертрнческий метод. Необходимая количественная информация о размерах ядер, ядрышек, цитоплазмы альвеодоцитов, ядерно-цитоплазматических (ЯЦО) и ядрышко-ядерных (ЯдрЯО) отношениях была

получена в ходе морфометрических исследований при использовании винтового окуляр-микрометра МОВ-1-15ху42 и окулярных вставок (Автандилов Г.Г., 1984).

Вычисление площади поверхности ультраструктур производилось одномоментным наложением на электронограмму квадратной сетки (размер квадрата 10x10 мм), содержащей внутри каждого квадрата 25 точек (расстояние между точками 1,5 мм). Снятие морфометрических параметров осуществлялось путем подсчета точек, проецирующихся на срез ультраструктуры (A.C. Якубов, В.А. Кац, 1984).

Статистический метод. Статистическая обработка количественных данных, построение таблиц произведена на ПЭВМ Pentium III с использованием пакета программ "Statistica 5,5 for Windows" и программного пакета "MS Excel 2000". Производили подсчет среднеарифметических значений абсолютных и относительных величин (М), ошибок средних величин (ш) и стандартных отклонений (s). Полученные в работе количественные данные подвергнуты статистической обработке в соответствии с рекомендациями П.Ф. Рокитского (1973) и Г.Г. Автандилова (1990). Достоверность различий сравниваемых показателей определяли по t-критерию Стьюдента. Различия средних величин считали достоверными при уровне значимости р<0,05 (95%).

Результаты собственных исследований

При исследовании альвеолярных структур легких инфицированных крыс на светооптическом уровне у животных на ранних стадиях эксперимента (1-Зсут) наблюдались явления прогрессирующей инфильтрации легочных ацинусов нейтрофилами, лимфоцитами, эозинофилами, плазматическими клетками, на фоне выраженного интерстициального отека. Кроме того, выявлены признаки разрушения и фрагментации межальвеолярных перегородок. Повышение сосудистой проницаемости приводило к выраженной экссудации и набуханию межуточного (основного) вещества стенок альвеол. Следует отметить, что зкстравазация плазмы и форменных элементов крови в

просвет альвеол до 3-х суток эксперимента (инфицирование АЛА-) удерживается альвеолоцитами I типа, сохраняющими свои межклеточные контакты. При инфицировании же персистентным штаммом бактерий (АЛА+) данный эффект не наблюдался. При этом отмечались явления выраженной дистрофии и некробиоза альвеодоцитов, что и усугубляло развитие экссудативной пневмонии (рис. 1).

Рис. 1. Легочная альвеола крысы в условиях инфицирования Kl. pneumoniae АЛА+ Стадия: 3 сут

Полутонкий срез. Окраска: по Sato et Shamoto Стрелками показаны деструктивно измененные альвеолоциты Ув. об.40, ок. 10

В данных условиях просветы альвеол резко суживаются (вследствие отечного утолщения их стенки). Одновременно регистрируется спазм бронхиол, в просвете которых идентифицируются бактериальные агенты.

В респираторных альвеолах (при инфицировании персистентным

штаммом бактерий АЛА+) определяются скопление эозинофилов, фибрина, макрофагов и слоистых компонентов дезорганизованного сурфактанта. Можно полагать, что в данных условиях опыта имеет место быть существенное повреждение сурфактантной системы, что и приводит у экспериментальных животных к развитию ателектазов.

В очагах воспаления отмечается незавершенный фагоцитоз со скоплением полиморфноядерных лейкоцитов (ПЯЛ) и выпотом фибрина. В центральных зонах подобных очагов выявляются некротически измененные альвеолоциты, окруженные фибринозным или серозным экссудатом. О незавершенности фагоцитоза бактерий, обладающих АЛА+, свидетельствует также обнаружение внутриклеточно локализованных патогенов. Ультраструктурный анализ показал, что такого рода микроорганизмы сохраняли электронноплотный нуклеоид. Вместе с тем клеточная оболочка приобретала узурированные контуры, что могло быть связано с литическим разрушением структур клеточной оболочки. Следует особо подчеркнуть, что подобного «укрытия» микробов в цитоплазме макрофагов не было нами зарегистрировано в случае контаминации бактериями без АЛА.

При инфицировании экспериментальных животных штаммом микроорганизмов с АЛА, последние определялись и в просвете гемокапилляров аэрогематического барьера. В этих случаях они имели разрыхленный нуклеоид, резко разрушенную клеточную оболочку, что вероятно связано с антибактериальными воздействиями плазменных факторов крови (которые однако не приводили к полному лизированию бактерий). С другой стороны данные наблюдения со всей очевидностью свидетельствуют о феномене транслокации бактерий с АЛА через эпителиальные барьеры воздухоносных и респираторных отделов легких в условиях интратрахеального инфицирования.

При введении бактериального патогена с высокими персистентными

свойствами через 7 суток эксперимента развивались морфологические признаки, характерные для интерстициальной пневмонии. Они сопровождались разрушением сурфактантной системы и развитием выраженного отека альвеолоцитов, стромы ацинусов. Их стенки инфильтрированы лимфоцитами, макрофагами, плазматическими клетками.

Некроз альвеолоцитов 1 типа наиболее выражен в сочетании с фибринозным выпотом в полость альвеол. В этих же зонах легкого отмечены явления васкулита с тромбозом сосудов микроциркуляторного русла, развитием геморрагических инфарктов. В более поздние сроки отмечается разрастание соединительной ткани в области аэрогематического барьера, что приводит к очаговому склерозу в участках воспаления либо ателектазов.

Установлено, что при прямом контакте с Klebsiella pneumonia АЛА+ клеточные элементы легочных ацинусов имели признаки ультраструктурных и иммуноцитохимических изменений (в цитоплазме возрастало число лизосом и аутофагосом, эндоплазматический ретикулум резко расширялся, увеличивался объем ядер с деконденсированным хроматином, возрастали размеры перинуклеарных пространств и поровых комплексов, достоверно повышалось количество клеток с признаками апоптоза по показателям экспрессии синтеза протеина р-53. Число клеток, вступающих на путь программированной гибели, было значительно большим в случае инфицирования бактериями с АЛА+, нежели при интратрахеальном введении микробов, не обладающих таковой активностью.

Данная закономерность прослеживалась нами и по показателям деградации ДНК, установленной TONEL-методом (табл 2).

Таблица №2

Уровень деградации ДНК (Apoplag позитивные стромальные элементы аг/инусов легких крыс: иитактные (А), инфицированные Kl. Pneumoniae AJ1A-(Б) и Kl Pneumoniae AJIA+ (В) через 7 сут эксперимента (%)

А п=3 Б п=5 В п=5

Стромальные клетки ацинусов 0,4+0.01 3.7+0.02 5,5+0.01*

*р< 0.05

Примечание: идентификацию клеток осуществляли при визуализации гистологических препаратов в условных полях микроскопа МБИ-15, окуляр-вставка 0,25мм2, об. 90, ок. 10

Важнейшим компонентом развивающегося воспалительного процесса у экспериментальных крыс является альтерация. В стенке альвеол это касается локальных некробиотических повреждений альвеолоцитов и эндотелиоцитов. Данные изменения, включая усиление процессов апоптоза, протекают на фоне интенсивной полиморфноклеточной инфильтрации (нейтрофилы, эозинофилы, лимфоциты, моноциты, тучные клетки) вследствие резкой вазодилятации гемокапилляров и усиления экстравазации плазмы и форменных элементов крови. Данные изменения, приводящие к локальным некрозам, особенно характерны при клебсиеллезных пневмониях (Ерохин В.В., Романова Л.К., 2000).

При введении бактерий АЛА+ особенно выражены процессы отека паренхимы и стромы легкого. В этом случае преобладал диапедез эритроцитов. При АЛА- превалировала миграция лейкоцитов. По данным патологов (Цинзерлинг В.Д., 1963, Струков А.И с соавт, 1984) течение пневмонии с «красным опеченением» является более тяжелым, с фатальными последствиями, по сравнению с вариантом «серой гепатизации».

Светооптическая и ультраструктурная оценка состояния супраоптических

и паравентрикулярных ядер гипоталамуса при инфицировании животных штаммом Klebsiella pneumoniae АЛА- показала, что в ГГНС наблюдались выраженная активизация секреторного процесса в нейросекреторных центрах подбугорья и усиление высвобождения нейропептидов в общую гемоциркуляцию на уровне нейрогипофиза. Количество НСК с признаками депонирования нейросекрета невелико (6-10%).

В условиях интратрахеального введения Klebsiella pneumoniae АЛА+ в гипоталамусе и нейрогипофизе на фоне гиперсекреции нейропептидов происходили деструктив ные изменения нейросекреторных клеток и существенная задержка выведения нейрогормонов на уровне аксовазальных контактов. Прежде всего, менялось соотношение «светлых» и пикноморфных НСК в пользу последних. При этом НСК, находящиеся в состоянии длительной гиперсекреции, имели сильно гипертрофированный перикарион, округлые пузыревидные ядра, бедные хроматином. Канальцы гранулярного эндоплазматического ретикулума, теряя рибосомы, превращались в вакуолеподобные структуры диаметром 800-1100 нм. В данных клетках нарушалась ультраструктура аппарата Гольджи и митохондрий. Весьма характерным для данных НСК является большое количество лизосом, аутофагических вакуолей и мультиламеллярных телец. Часть таких клеток дегенерирует (подобные клеточные элементы имеют угловатую, различной степени сжатости форму тела и пикнотические ядра).

Интенсификация функционирования приводит к более активному износу и дегенерации НСК, в силу чего количество их удваивалось. В последних были обнаружены явления апоптоза. Увеличение дегенерирующих клеток более чем в 2 раза позволило выявить развитие начальных признаков истощения среди клеток СОЯ.

В условиях электролитического разрушения супраоптических либо паравентрикулярных ядер мы получили однотипный ответ структурных изменений респираторных отделов легких экспериментальных животных. В

своей совокупности их можно было охарактеризовать как деструктивно-реактивные.

Во время фазы деструктивно-реактивных изменений (1-3 сут) наблюдается усиление кровенаполнения сосудов, развитие неравномерно выраженного интерстициального и внутриальвеолярного отека. Отмечается также мозаичное утолщение межальвеолярных перегородок.

Изменения в ультраструктурной организация сурфактантного альвеолярного комплекса выражаются в неравномерности толщины гликокаликса альвеолоцитов, локальном его истончении, сглаживании микроворсинок. В просветах отдельных альвеол появляются десквамированные эпителиоциты, хлопьевидный материал в сочетании с фрагментами сурфактанта. В этих участках легких регистрируются микроателектазы.

На ультраструктурном уровне выявляются признаки внутриклеточного отека альвеолоцитов 1-го типа и эндотелия кровеносных капилляров (формирование везикул крупных размеров, локализация микропиноцитозных пузырьков у плазмолеммы, расширение цистерн агранулярной эндоплазматической сети). Одновременно происходит увеличение размеров митохондрий с просветлением их матрикса и редукцией крист. Имеет место микроклазматоз, сопровождающийся отрывом фрагментов цитоплазмы отечно измененных клеток.

На фоне развития внутриклеточного отека появляются микродефекты в плазмолемме респираторных альвеолоцитов. У них наблюдается отек ядра. Как показали исследования В.В. Ерохина, Л.К. Романовой (2000), стойкий и выраженный локальный внутриклеточный отек компонентов аэрогематического барьера как правило приводит к снижению его диффузионной способности.

Альвеолоциты 2-го типа явились более устойчивыми. Их ультраструктура изменяется незначительно во время описываемой фазы.

Указанные изменения нарастали в более поздние сроки наблюдений (7

j сут).

При инфицировании K.I. pneumoniae АЛА+ у данных животных

воспалителная реакция альвеолярных структур носит дисрегенераторный характер. На экспериментальном материале показаны серьезные нарушения гемоциркуляции на фоне микроателектазов. Прежде всего это проявилось в спазмировании микрососудов и микротромбозами в гемокапиллярах (рис. 2).

Рис. 2. Микротромбоз в гемокапилляре легочной альвеолы крысы в условиях электролитического разрушения

паравентрикулярных ядер гипоталамуса и дополнительного инфицирования K.I. pneumoniae АЛА+ (стадия 7 сут) Ув. х24500

При инфицировании бактериями с АЛА+ повреждения эндотелия носят необратимый характер, заканчивающийся деструкцией клеток с некрозом перикапиллярной зоны.

Таким образом, наблюдаемые процессы могут быть связаны с прямым

повреждением эндотелиоцитов, последующим присоединением секвестрации лейкоцитов и тромбоза микрососудов. Такая последовательность событий характерна для токсемии бактериальной этиологии (Pratt P.C. et al, 1979; Katzenstein A.L., 1982). В своей совокупности морфологические изменения у экспериментальных предварительно инфицированных животных с разрушенными гипоталамическими ядрами укладывались в картину отдельных признаков «шокового легкого» (острого респираторного дистресс-синдрома).

Исследования реактивных изменений альвеолярных структур легкого крыс в условиях их сокультивирования in vivo с крупноклеточными ядрами гипоталамуса in vivo по методу Ф.М. Лазаренко (1959) показали, что через 1 сут сокультивирования кусочки имплантата дискомплексированы и представлены фрагментированными структурами альвеол. Обнаруживаются лейкоциты и мононуклеарные фагоциты. Отмечались тесные контакты между альвеолоцитами и лейкоцитами. При этом в области их взаимодействия, происходит разрыхление компонентов базальной мембраны, нарушение целостности цитолеммы альвеолоцитов и выход органелл в межклеточное и перикапиллярное пространство. В этот период наблюдается существенная активизация клеток фибробластического ряда (как клеток донорского материала, так и реципиентов). Соединительная ткань разрастается, обрастает каждый имплантированный кусочек. Одновременно происходит врастание в имплантат гемокапилляров.

В каждом имплантированном кусочке можно выделить две зоны: центральную и периферическую. Клеточные элементы центральных участков имплантата дегенеративно изменены. Однако в небольших фрагментах имплантатов клетки центральной зоны сохранялись лучше, и участок некроза был незначительным. В периферических участках кусочка переживание тканевых структур выражено в большей степени, и на фоне умеренных депрессивных изменений в данной области наблюдается заметный клеточный гетероморфизм. Было установлено, что массивная гибель альвеолоцитов

наблюдалась в имплантатах крыс, инфицированных штаммами К1. pneumoniae с АЛА+.

Идентифицированы 3 основных типа альвеолоцитов, которые отличались друг от друга структурными изменениями, а также выявлены переходные формы между ними.

Во-первых, определялись сохранные альвеолоциты. Такие клетки не имели выраженных дегенеративных изменений цитоплазмы и содержали светлые ядра овальной формы. При ультраструктурном исследовании в таких переживающих альвеолоцитах отсутствовала дискомплексация внутриклеточных структур и не наблюдались разрывы цитолеммы. Митохондрии в клетках были незначительно увеличены в размерах и содержали частично разрушенные кристы. Ядра переживающих альвеолоцитов содержали больше эухроматиновых компонентов. Данные клетки сохраняли способность к своей репродукции. Сохранялась целостность наружной и внутренней мембран кариолеммы. Этот тип чаще наблюдался в имплантатах от крыс, инфицированных штаммами Kl. pneumoniae с АЛА-.

Во-вторых, присутствовали дегенерирующие альвеолоциты. Они имели ядра с выраженными явлениями пикноза, рексиса и последующего лизиса. При ультраструктурном исследовании в дегенерирующих альвеолоцитах всегда наблюдалась дискомплексация внутриклеточных структур. Обнаруживался выраженный полиморфизм митохондрий. Часто отмечались разрывы наружной мембраны органелл, при этом митохондриальный матрикс был «вымыт». Другие митохондрии, уплотненные, имели гребенчатые кристы с электронноплотным матриксом, в проекции которых определялись аморфные осмиофильные включения. Отмечались разрывы цитолеммы и выход органелл в межклеточное пространство. Нередко можно было видеть деструкцию периферической части клеток с образованием фрагментов цитоплазмы, содержащих аутофагические вакуоли, остатки

митохондрий. Ядра подобных альвеолоцитов были набухшие (в других случаях были сморщенные). Отмечались выраженная маргинация хроматина и образование крупных гетерохроматиновых участков, отек и просветление кариоплазмы. Перинуклеарное пространство в отдельных участках расширено, с повреждением кариолеммы.

Третий тип альвеолоцитов составили перестраивающиеся клетки. Главным признаком подобных альвеолоцитов на светооптическом уровне является присутствие сохранного ядра в проекции дегенеративно измененной периферической цитоплазмы. Ультраструктурный анализ позволил нам получить дополнительную информацию об особенностях строения таких клеточных форм. Установлено, что особенностью перестраивающихся альвеолоцитов является наличие в проекции их клеточной территории структурно сохранного ядра, заполненного эухроматином с незначительными участками его прикариоллемной конденсации.

В обнаруженных ядерно-цитоплазматических участках содержались многочисленные небольшие митохондрии с единичными сохранными кристами. При этом одни митохондрии подвергались процессу аутолиза, другие же, утратив кристы и сохраняя целостность наружной и внутренней мембран, приобретали вид двумембранных вакуолей, заполненных хлопьевидным материалом. В мелкозернистой цитоплазме отмечались короткие канальцы гранулярного эндоплазматического ретикулума. Кроме того можно было наблюдать крупные и мелкие вакуоли, заполненные хлопьевидным детритом.

На стадии 1-3 сут культивирования среди других клеток легких отмечался выраженный гетероморфизм реактивных изменений. В общей популяции таких клеток присутствовали дегенеративно измененные, жизнеспособные и активизированные клеточные формы.

Имплантированные структуры через 3 суток сокультивирования оказывались окруженными несколькими слоями фибробластов и рыхло

расположенных коллагеновых волокон В этот же период между имплантированными кусочками и на их периферии появляются мигрирующие фибробластические элементы. На светооптическом уровне имплантаты выглядели значительно уменьшенными в размерах по сравнению с предшествующей стадией имплантации. При этом основную часть легочной ткани представляли дегенеративно измененные альвеолоциты, особенно в имплантатах от крыс, инфицированных штаммами К.1. pneumoniae с AJ1A+.

Через 7 сут от начала сокультивирования фрагментов легких с участками гипоталамуса в проекции разрушающихся альвеолоцитов наблюдались многочисленные макрофагоподобные клетки. В данных условиях опыта присутствовали более крупные макрофагоподобные клетки, по сравнению с условиями культивирования легких без ядер гипоталамуса. Такие клетки имели четкие контуры, крупные овальные или округлые ядра с большими ядрышками и вакуолизированную цитоплазму. Морфометрическое исследование подтвердило также, что в таких происходит одновременное увеличением как объема их ядер, так и цитоплазмы. Кроме того в ядрах этих клеток отмечался рост объема ядрышек (табл 3).

Таблица 3

Морфометрические показатели: фибробластоподобные клетки (Ф) и макрофагоподобные клетки (М) через 7 сут совместного культивирования фрагментов легких с крупноклеточными ядрами гипоталамуса (М±т)

Измеряемый параметр Контроль Опыт

Объем ядер Уям(мкм3) 105,7±23,4 214,2±58,7*

Объем цитоплазмы Х/цм (мкм3) 4487,7±1204,3 7858,3±984,5

Объем ядер Уяф(мкм:1) 345,1±56,8 340,9±54,7

* Различия по сравнению с контролем значимы при Р<0,05.

Морфометрический анализ показал, что перенос фрагментов гипоталамуса в область формируемых имплантатов по методу Ф.М. Лазаренко хотя и приводит к гибели определенной части нейросекреторных клеток, тем не менее около 60+2,8% клеток сохраняют свою жизнеспособность вплоть до 7-х сут эксперимента.

Прежде всего, была показана лучшая сохранность альвеолоцитов (респираторных, секреторных), эндотелиоцитов гемокапилляров не только в ранние сроки культивирования (1 сут), но и в более поздние (3-7 сут). Жизнеспособными оказывались как клетки периферических зон имплантатов, так и центральных их участков. Это отмечено во всех сериях культивирования, включая «посев» кусочков легкого животных, которым предварительно вводили штамм клебсиелл с АЛА+ .

Центральным звеном структурной перестройки паренхимы имплантированных кусочков легких в данных условиях следует признать стойкую гипертрофию альвеол, сопровождающуюся новообразованием кровеносных и лимфатических капилляров, пролиферацией альвеолоцитов, клеток фибробластического ряда, укреплении эластического и коллагенового каркаса альвеолярных стенок.

В случае имплантации фрагментов легких от крыс-доноров, подвергнутых инфицированию бактериальным патогеном с АЛА+, всегда наблюдались выраженные сосудистые изменения имплантатов (развитие неравномерного интерстициального внутриальвеолярного отека, появление мелкоочаговых ателектазов, мозаичные утолщения межальвеолярных перегородок).

При культивировании фрагментов легких от крыс-доноров, инфицированных штаммом клебсиелл с АЛА+, переживающие до 7-х сут альвеолярные структуры в своих просветах имели хлопьевидный осмиофильный материал в сочетании с дезорганизованным сурфактантом, что безусловно указывало на нарушение целостности этого альвеолярного

комплекса.

При сокультивировании объектов с ядрами гипоталамуса общий план ультраструктурной организации упорядоченных мембранных образований резервного сурфактанта во многих сохранных (переживающих) альвеолах сохранялся. Одновременно уменьшалось число микроателектазов.

Гуморальные факторы крупноклеточных ядер гипоталамуса позитивно влияли на процессы внутриклеточного отека имплантированных структур легкого: уменьшалось везикулообразование и число микропиноцитозных пузырьков у плазмолеммы апьвеолоцитов 1-го типа и эндотелиоцитов гемокапилляров.

Сокультивирование фрагментов легких экспериментальных животных с крупноклеточными ядрами гипоталамуса показало, что в основе компенсаторно-приспособительных потенций тканевых структур легких лежит активация синтезов белка, ДНК и РНК.

При этом пролиферативная активность касается не только альвеолоцитов, но и клеток межальвеолярных перегородок. К сожалению, нам не удалось точно идентифицировать тип делящихся клеток. Однако мы полагаем, что при развитии компенсаторных реакций в легком почти все клеточные популяции респираторных альвеол способны к клеточной репродукции.

ВЫВОДЫ

1. При интратрахеальном инфицировании крыс бактериальными патогенами, обладающими различными персистентными свойствами по показателям АЛА, возникают ответные дифференцированные гисто- и органотипические реакции реакции как в респираторных отделах легких, так и в гипоталамо - гипофизарной нейроэндокринной системе.

2. При инфицировании экспериментальных животных штаммами К), pneumoniae АЛА- в ацинусах легких возникают обратимые изменения с

морфологической картиной пневмонии по типу «серого опеченения», тогда как при интервенции штамма Kl. pneumoniae АЛА+ в ацинусах легких возникают морфологические признаки пневмонии по типу «красного опеченения».

3. При инфицировании экспериментальных животных штаммами К1. pneumoniae АЛА- происходит усиление синтеза и высвобождения нейросекрета в общую гемоциркуляцию, что оказывает стимулирующее действие на комплекс компенсаторно - приспособительных реакций со стороны структурных элементов респираторных отделов легких.

4. При инфицировании экспериментальных животных штаммами К1. pneumoniae АЛА+ наблюдается блокирование высвобождения нейросекрета на уровне аксовазальных комплексов нейрогипофиза, что приводит к дефициту нейрогормонов в общей гемоциркуляции, а это в свою очередь усугубляет течение воспалительных процессов в легких.

5. Адаптивное воздействие нонапептидергической ГГНС на клеточный и тканевой гомеостаз ацинусов легких проявляется не только дистантно, но и паракринно через стимуляцию васкулогенеза и активности фибробластов, макрофагов, эндотелиоцитов и периваскулярных клеток.

6. Реактивность, пластичность и апоптоз альвеолоцитов и стромальных элементов респираторных отделов легких эксперименталных животных играют существенную роль в патогенезе пневмоний, заключающуюся в аутоселекции дегенеративно измененных клеток, а также в стимуляции регенераторного потенциала эпителиоцитов, плазмоцитов, макрофагов, реализуемой через адекватные механизмы нонапептидергической гипоталамической нейросекреции.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лабутин И.В. Морфофункциональное состояние крупноклеточных ядер гипоталамуса экспериментальных животных в условиях интратрахеального введения стафилококка / И.В. Лабутин, А.Н. Козлова И Морфология. -2006.-Том 130.-Х» 5.-С. 57.

2. Лабутин И.В. «Морфофункциональное состояние нонапептидергических ядер гипоталамуса и респираторных отделов легких крыс пр,и интратрахеальном введении патогена». Материалы конференции молодых ученых и специалистов Оренбургской области / И.В. Лабутин // Вестник Оренбургского государственного университета. -2008. -№ 82. -С. 145147.

3. Лабутин И.В. Морфофункциональная характеристика трахеи и респираторных отделов легких длительно стрессированных животных при интратрахеальном введении бактерий, обладающих персистентными свойствами. / И.В. Лабутин, Э.М. Вахитов // Морфология. 2008.-Том 133. -№ 3. -С. 63.

4. Лабутин И.В. Морфофункциональная характеристика нейроэндокринной системы и иммунной системы легких крыс в условиях воздействия бактерий различновирулентности / А.Н. Козлова, И.В. Лабутин // Морфология. -2008. -Том 133. -№ 3. -С. 51.

5. Лабутин И.В. Реактивность и пластичность эпителиев воздухоносных путей и легочных ацинусов крыс в экспериментальных условиях. / К.Н. Мещеряков, И.В. Лабутин // Медицинская наука и образование Урала. -2008. -Том 54. -№ 4. -С. 92-94.

6. Лабутин И.В. О динамике структурно-функциональной реорганизации нонапептидергическнх нейросекреторных центров гипоталамуса в постстрессорном периоде и условиях инфицирования крыс

/ A.A. Стадников, B.B. Солодовников, Э.М. Вахитов, И.В. Лабутин // Морфологические ведомости. -2009. -№ 3. -С. 291-292.

7. Лабутин И.В. К проблеме нейрогормональной регуляции репаративных гистогенезов, реализуемых в условиях взаимодействия про- и эукариот. / A.A. Стадников, А.Н. Козлова, H.H. Кочкина, В.Н. Безносик, И.В. Лабутин, Э.М. Вахитов // Сборник научных трудов «Вопросы морфологии XXI века» к 80-летию со дня рождения профессора A.A. Клишова. -Санкт-Петербург. -2010.-С. 48-49.

8. Лабутии И.В. Адаптивная роль гипоталамической нонапептидергической нейросекреторной системы в аспекте реализации клеточного и тканевого гомеостазиса про - и эукариот. I A.A. Стадников, H.H. Шевлюк, АЛ1. Козлова, И.В. Лабутин, В.В. Солодовников // Морфология. -2010 - Том 137. 4. -С. 180.

Отпечатано в типографии Оренбургского государственного педагогического университета Лицензия 021346 от 2.08.97 г. Подписано в печать 12.10.2010 г. Заказ № 789. Усл.печл. 10,47. Тираж 150 экз. 460844, г. Оренбург, ул. Советская, 19.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Лабутин, Илья Викторович

Введение.

Глава 1. Структурно-функциональные основы компенсаторно-приспособительных реакций и репаративных возможностей ацинусов легких млекопитающих и человека в аспекте нейроэндокринной регуляции тканевого и клеточного гомеостаза (обзор литературы).

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Материалы исследования.

2.2.Методики исследования.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

ЗЛ.Морфофункциональная оценка альвеолярных структур легких и нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной нейросекреторной системы (ГГНС) крыс в условиях инфицирования.

3.2. Структурно-функциональная характеристика лёгочных ацинусов крыс при электролитическом выключении крупноклеточных ядер гипоталамуса.

3.3. Реактивность и пластичность альвеолярных структур лёгкого крыс в условиях их сокультивирования in vivo с крупноклеточными ядрами гипоталамуса.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Структурно-функциональная характеристика нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы и респераторных отделов лёгкого крыс в условиях интратрахеального инфицирования"

Вопросы физиологического и репаративного гистогенезов, тканевой реорганизации макроорганизмов в условиях их интервенции современными бактериальными патогенами являются наиболее важными и малоизученными. Решение их необходимо для понимания механизмов клеточных и тканевых реорганизаций макроорганизмов в условиях многогранных взаимодействий с прокариотами (Стадников A.A., 2001, 2005, 2010; Бухарин О.В. с соавт, 2004), что чрезвычайно важно в клинических аспектах клеточной биологии, инфектологии и находится в центре внимания исследователей.

Благодаря внутригеномным преобразованиям микроорганизмы приобрели способность к значительной изменчивости своих свойств, обеспечивающих противостояние защитным силам организмов млекопитающих, к числу которых относятся и генетически детерминированные свойства и биологические особенности структурных (клеточных, тканевых) элементов эукариот, в том числе и механизмы репаративных гистогенезов (Стадников A.A., 2001, 2005; Стадников A.A., Сеньчукова М.А., 2009). Известно, что наличие антилизоцимной, антиинтерфероновой, антилактоферриновой активностей у микробных патогенов существенно затрудняет реализацию репаративных процессов в различных тканях (Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., 1996; Бухарин О.В., Литвин В.Ю., 1997; Бухарин О.В., 1999; Ковбык JI.B., 2000; Козлова А.Н., 2009, 2010). Однако до сих пор малоизученными остаются вопросы взаимодействия микроорганизмов, обладающих соответствующим персистентным потенциалом, и тканевых элементов ацинусов лёгких, влияния прокариот на репаративные процессы в респираторных отделах лёгких.

Безусловно, изучение особенностей регенераторных возможностей альвеолоцитов и структурных компонентов подлежащей соединительной ткани, характер их взаимодействия в очаге повреждения друг с другом, с клетками воспаления и бактериальными патогенами в процессе физиологической и репаративной регенерации до сих пор остаются чрезвычайно актуальным.

Существенным моментом в поддержании тканевого гомео стаза органов дыхания является обеспечение в организме сохранения общей массы клеток, необходимой для правильного функционирования органа, т.е. соотношение между делящимися, дифференцированными и гибнущими клетками. Достижение этого обеспечивается как генетическими механизмами, так и воздействием комплекса регуляторных факторов, внутрисистемных (тканеспецифические ингибиторы и стимуляторы клеточной регенерации) и межсистемных (нейрогуморальные факторы).

Среди важнейших регулирующих систем организма весьма существенна роль гипоталамической нейроэндокринной системы в поддержании тканевого и клеточного гомеостаза, обеспечении процессов адаптации и компенсации нарушенных функций различных органов висцеральных систем (Поленов A.JL, 1993; Акмаев И.Г., 1979; Шевлюк H.H., Руди В.Н., 2000; Стадников A.A. с соавт., 2000; Валов С.Д., 2001; Кузнецов C.JI. с соавт., 2009). Известно, что в критических ситуациях, сопровождающихся значительной активизацией гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы (ГГНС), а также при повреждениях и репарациях различных тканей нонапептиды крупноклеточных ядер гипоталамуса (окситоцин, вазопрессин) осуществляют адаптогенное влияние и имеют важное значение в развитии долговременной (структурной) адаптации клеток и тканей. Кроме того, указанные гуморальные факторы выступают как стимуляторы репаративных гистогенезов (Поленов A.JI. с соавт., 1994; Стадников A.A., 2005, 2010; Канюков В.Н., Стадников A.A., 2009). В отношении влияния ГГНС на диапазон пластичности и реактивности гистологических структур респираторных отделов лёгких данных в настоящее время крайне мало, и они характеризуются противоречивостью.

Цель настоящего исследования - установить роль и значимость нейроэндокринной регуляции в процессах структурно-функциональной реорганизации тканевых элементов ацинусов легких в условиях взаимодействия про - и эукариот.

Для реализации этой цели поставлены следующие задачи:

АЛА-).

Научная новизна результатов

Получены данные о характере адаптивных и дезадаптивных изменений структурных элементов ацинусов легких млекопитающих (крыс) в условиях инфицирования, культивирования и органотипического сокультивирования с нонапептидерическими ядрами гипоталамуса in vivo по Ф.М.Лазаренко. Впервые установлено прямое позитивное влияние нонапептидов гипоталамуса на диапазон органо - и гистобластических потенций клеток легочных ацинусов в условиях интратрахеального инфицирования. Обоснованы критерии оценки персистентных свойств бактерий на основе на основе ультраструктурных данных и показателей апоптозной доминанты нейросекреторных клеток супраоптических и паравентрикулярных ядер гипоталамуса крыс при их инфицировании штаммами Klebsiella pneumoniae, обладающими антилизоцимной активностью, либо без таковой. На современном методическом уровне (электронная микроскопия) использован оригинальный метод Ф.М. Лазаренко (1959) культивирования тканей in vivo, в том числе при сокультивировании респираторных отделов легкого крыс с крупноклеточными ядрами гипоталамуса, что позволило раскрыть новые возможности данного метода экспериментальной гистологии. Сформулировано положение о регулирующей роли нонапептидергической ГГНС в процессах взаимодействия бактериальных патогенов со структурными компонентами респираторных отделов лёгких.

Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные результаты позволяют дополнить существующие представления о закономерностях репаративных процессов в легочных ацинусах млекопитающих и их нейроэндокринной регуляции. Обоснована позитивная роль гуморальных факторов нонапептидергических нейросекреторных ядер гипоталамуса в регуляции тканевого и клеточного гомеостаза альвеолоцитов, сосудистых и стромальных компонентов респираторных отделов легких млекопитающих животных в условиях микробной интервенции. В своей совокупности это позволяет сформулировать новое направление в области клеточной биологии, которое обозначается как нейроэндокринная регуляция взаимодействий про- и эукариот. Полученные результаты могут быть использованы при разработке проблем патологии органов дыхания, позволят существенно расширить и углубить имеющиеся представления о закономерностях репаративных процессов в ацинусах млекопитающих, о роли гипоталамических нонапептидов в репаративном гистогенезе структурных элементов респираторных отделов лёгких. Это создаст предпосылки для дальнейшего развития учения о биологии тканей, а также совершенствования научной базы для клинической пульмонологии.

Внедрение

Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии; фтизиатрии Оренбургской государственной медицинской академии при изложении материала на лекциях и проведении практических занятий со студентами.

Основные положения, выносимые на защиту

1 Выраженность воспалительно - деструктивных изменений в ацинусах легких при интратрахеальном инфицировании напрямую имеет прямую зависимость от обладания микроорганизмом персистентных свойств (в частности антилизоцимной активности).

2. Характер и выраженность фаз нейросекреции нонапептидергических ядер гипоталамуса отражают персистентный потенциал Klebsiella pneumoniae, антилизоцимная активность которых усугубляет процессы рассинхронизации секреторного цикла, вплоть до блокирования высвобождения нейросекреторных продуктов на уровне аксовазальных комплексов в нейрогипофизе.

5. Адаптивный характер воздействия нонапептидергической ГГНС на клеточный и тканевой гомеостаз альвеолоцитов респираторных отделов легких проявляется дистантно и паракринно через активизацию репаративных процессов фибробластов, макрофагов, эндотелиоцитов и адвентициальных клеток.

Апробация работы

Результаты проведенных исследований докладывались и обсуждались на региональной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов (Оренбург, 2008), Всероссийской конференции «Медицинская наука и образование Урала» (Челябинск, 2008), всероссийской научной конференции «Вопросы морфологии XXI века» (Санкт - Петербург, 2010), X конгрессе международной ассоциации морфологов (Ярославль, 2010).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, из них 6 в центральных рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 179 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, обзора литературы, главы «Материал и методы исследования», главы результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов и выводов. Диссертация иллюстрирована 57 рисунками, 3 таблицами. Библиография включает 157 отечественных и 88 зарубежных источников. Диссертация написана на русском языке.

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Лабутин, Илья Викторович

Выводы

1. При . иитратрахеальиом инфицировании крыс бактериальными патогенами, обладающими различными персистентными свойствами по показателям АЛА, возникают ответные дифференцированные гисто- и органотипические реакции как в респираторных отделах легких, так, и в гипоталамо - гипофизарной нейроэндокринной системе. 2. При инфицировании: экспериментальных животных штаммами Kl. pneumoniae АЛА- в ацинусах легких возникают обратимые изменения с морфологической картиной пневмонии по типу «серого опеченения», тогда как при интервенции штамма Kl. pneumoniae АЛА+ в ацинусах легких возникают морфологические признаки пневмонии по типу «красного опеченения».

3. При, инфицировании экспериментальных животных штаммами Kl. pneumoniae АЛА- происходит усиление синтеза и высвобождения нейрбсекрета в общую гемоциркуляцию, что оказывает стимулирующее действие на комплекс компенсаторно -приспособительных реакций со стороны структурных элементов респираторных отделов легких.

4. При инфицировании экспериментальных животных штаммами Kl. pneumoniae АЛА+ наблюдается блокирование высвобождения нейросекрета на уровне аксовазальных комплексов нейрогипофиза, что, приводит к дефициту нейрогормонов в общей гемоциркуляции, а это в свою очередь усугубляет течение воспалительных процессов в легких.

6. Реактивность, пластичность и апоптоз клеточных элементов респираторных отделов легких эксперименталных животных играют существенную роль в патогенезе пневмоний, заключающуюся в ауто селекции дегенеративно измененных клеток, а также в стимуляции регенераторного потенциала эпителиоцитов, плазмоцитов, макрофагов, реализуемой через адекватные механизмы нонапептидергической гипоталамической нейросекреции.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Лабутин, Илья Викторович, Оренбург

1. Абельсон Ю.О. Регуляция секреции антидиуретического гормона// Усп. физиол. наук.-1977.- т.8.- с.109-133.

2. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М., Медицина, 1990.- 384с.

3. Ажипа Я. И. Нервы желез внутренней секреции и медиаторы в регуляции эндокринных функций,- М.: Медицина, 1981.- 503 с.

4. Акмаев И. Г. Пути и способы гипоталамической регуляции эндокринных функций // Актуальные вопросы современной эндокринологии. М., 1971. С. 58—81

5. Акмаев И.Г. Структурные основы механизмов гипоталамической регуляции эндокринных функций.- М.: Наука, 1979.227 с.

6. Акмаев И. Г., Горбатюк О. С. Половой диморфизм в реакции крупноклеточных нейронов паравентрикулярных ядер гипоталамуса крыс на водно-солевую нагрузку и обезвоживание // Арх. патол. 1991. № 1. С. 13—15.

7. Акмаев И.Г. Современные представления о взаимодействиях гипоталамической нейросекреторной и вегетативной нервных систем в регуляции эндокринной и гомеостатической функции. //Морфология.-1992 .-Т.102.-№3.-С.5-39.

8. Акмаев И. Г. Взаимодействия основных регулятивных систем (нервной, эндокринной и иммунной) и клиническая манифестация их нарушений II Клиническая медицина. 1997. № И. С. 8—13.

9. Акмаев И.Г., Гриневич В.В. От нейроэндокринологии к нейроиммуноэндокринологии. //. Бюл. эксперим. биол.- 2001.- Т. 131.-№1.- С. 22-32.

10. Ариэль Б.М., Кауфман О.Я. Хронические неспецифические заболевания легких и хронические пневмонии.- В кн.: Клеточная биология легких в норме и при патологии (рук-во для врачей)./ Под. ред. Ерохина В .В. и Романовой Л.К.- М. Медгиз, 2000 - С.378-374.

11. Асфандияров Р.И., Бугин В.Н., Лазько А.Е., Резаев A.A. Острые отравления сероводородсодержащими газами. Астрахань.-1995.-156 с.

12. Багров Я.Ю., Красновская И.А. Химическая характеристика гипоталамических нейрогормонов, их биосинтез и механизм действия //В кн. Нейроэндокринология // под ред. член-корр. РАИ А. Л. Поленова. СПб., 1993.- часть 1.- с.89-95.

13. Беленький М. А. Срединное возвышение гипоталамуса гипофизэктомированных крыс: структура и ультраструктура // Цитология. 1977. № 12. С. 1346— 1352.

14. Беленький М.А., Поленов А.Л. АКТГ-подобная иммунореактивность в гипоталамусе и гипофизе стерляди. // Журн. эвол. биохим. и физиол. 1990. - Т. 26. - № 2. - С. 98-104.

15. Белоусова Т.А., Милованов А.П. Особенности тонкого строения межальвеолярной перегородки как проявление экологической адаптации легких к условиям Северо-Востока СССР // Физиол. человека, Т.З. 1977. - № 1. -С. 97—105.

16. Боев. В.М., Сетко Н.П. Сернистые соединения природного газа и их действие на организм. М: Медицина, 2001.-216 с.

17. Бонашевская Т. И., Кумпан Н. Б. Защитноприспособительные реакции воздухоносных и респираторных отделов легких при воздействии загрязнителей атмосферного воздуха.// Арх. анат.-1986.-№4- С.41-48.

18. Борисов С.Д. Антилизоцимная активность менингококков и ее применение в диагностике менингококковой инфекции: Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1988.

19. Брудастов Ю.А. Антикомплементарная активность бактерий: Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1992.

20. Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г. Биологическое значение антикомплементарной активности бактерий // Журн. микробиол. 1994. Приложение. С 28—32.

21. Брудастов Ю.А., Валышев A.B., Брудастов А.Н. Антикомплементарная активность производственного штамма Вас. cereus IP 5832 и энтеробактерий при их совместном культивировании // Журн. микробиол. 1996. № 3. С. 91—93.

22. Бубнова Н.И. Хронические неспецифические заболевания легких у детей В кн.: Клеточная биология легких в норме и при патологии (рук-во для врачей)./ Под. ред. Ерохина В.В. и Романовой Л.К.- М. - Медгиз, 2000 - С.351-357.

23. Буреш Я., Петрань М., Захар И. Электрофизиологические методы исследования. М.: ИЛ., 1962.- с.420.

24. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Способ бактериологической диагностики гонорреи: А. с. СССР № 914622. Бюл. № 11 от 25. 03. 82.

25. Бухарин O.B. Механизмы бактериальной персистенции/ТПерсистенция бактерий / Под ред. О. В. Бухарина. Куйбышев, 1990. С. 5—14

26. Бухарин О. В., Усвяцов Б. Я. Бактерионосительство. Екатеринбург: УрО РАН, 1996. 208 с.

27. Бухарин О.В., Литвин В.Ю. Патогенные бактерии в природных экосистемах. Екатеринбург: Изд-во УрО РАН, 1997. 276 с.

28. Бухарин О. В. Персистенция патогенных бактерий. М.: Медицина, 1999. 367 с.

29. Бухарин О.В., Карташова О.Л., Киргизова С.Б., Валышева И.В. Антилактоферриновая активность микроорганизмов. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-2005.-№6.-С. 7-10.

30. Валов С.Д. Влияние нейроэндокринных факторов на репаративный гистогенез околоушной железы при культивировании в диффузионных камерах // Морфология.- 1999.- т.116, N 5.- с.34-37.

31. Валов С.Д., Семченко Ю.П. К вопросу о влиянии нейромедиаторов и нейропептидов на гистогенез железистых покровных эпителиев при культивировании в организме // Сб. науч. трудов, Томск.-2002.-вып.2.-с.98-99.

32. Валов С.Д., Стадников A.A. Влияние нейроэндокринных факторов на репаративный гистогенез поджелудочной железы при культивировании в организме // Морфология.- 2001.- т.119, N 2,- с.52-55.

33. Валов С. Д. Нейробиологические аспекты регуляции пролиферации, роста и цитодифференцировки железистых эпителиевразличного генеза: Автореф. дис.док. мед. наук. Оренбург 2003.- 40 с.

34. Владимиров С. В. Морфогенез ядер гипоталамуса у человека' и их изменения при моделировании некоторых патологических процессов: Автореф. дис. д-ра биол. наук. М., 1984.

35. Войткевич A.A., Дедов И.И. Ультраструктурные основы гипоталамической нейросекреции.-М.Медицина, 1972.-270 с.

36. Володина Е.П. Гистологическое и гистоавторадиографическое изучение эпителия передней доли гипофиза в онтогенезе и эксперименте: Автореф.дис.д-ра мед. наук. М., 1970,- 40 с.

37. Горизонтов П. Д. Гомеостаз.- М.: Медицина, 1981.- с.538569.

38. Данилова O.A. Становление гипоталамо-гипофизарного комплекса в онтогенезе.-В кн.:Нейроэндокринология.- СПб.- 1993.- С JI 87-201.

39. Дедков Э. И. Морфофункциональная характеристика дефинитивного миокарда при культивировании в организме животных: Автореф. дис. канд. мед. наук. Оренбург, 1996.

40. Дерябин Д. Г. Способность к инактивации факторов естественной резистентности в биологии и экологии стафилококков: Автореф. дис. докт. мед. наук. Челябинск, 1997.

41. Долгушин И. И., Бухарин О. В. Нейтрофилы и гомеостаз. Екатеринбург: УрО РАН, 2001. 280 с.

42. Ерохин В. В. Малые альвеолярные клетки / тип I пневмоцита легкого // Арх. анат. — 1974.— Т. 64, № 3. С. 23-26.

43. Ерохин В.В. Изучение легочной ткани в растровом электронном микроскопе // Арх. анат. — 1974. — №1.-С. 95-97.

44. Ерохин В.В. Функциональная морфология легких. — М.: Медицина, 1987. — 270 с.

45. Жинкин JI.H. Применение радиоактивных изотопов в гистологии.- В кн.: Радиоактивные индикаторы в гистологии. / Под ред. Жинкина Л.Н.-Л.- 1959.- С.6-30.

46. Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А. Лабораторные животные Киев, 1974. - 303 с.

47. Зарецкая Ю. М. Клиническая иммуногенетика М.: Медицина, 1983.-207 с.

48. Зыкова Л.С. Факторы персистенции уропатогенов в диагностике, прогнозировании и лечении пиелонефрита у детей: Автореф. дис. докт. мед. наук. Оренбург, 1998.

49. Канюков В.Н., Стадников A.A., Трубина О.М., Подопригора Р.Н., Казеннов А.Н. Влияние вакуума на биологические и механические свойства роговицы в условиях консервации. // Бюллетень со РАМН.-2009.-Т. 138.-№4.

50. Керашева С.И., Илинская Б.В. Персистенция протеев и их антилизоцимная активность // Персистенция микроорганизмов: Сб. науч. трудов / Под ред. О. В. Бухарина. Куйбышев, 1987.- С. 130—134.

51. Клишов A.A. Гистогенез и регенерация тканей.- Л.: Медицина.- 1984. -232с.

52. Ковбык Л.В. Морфофункциональная характеристика эпителиев мягкого неба крысы в онтогенезе и в экспериментальных условиях: Автореф. дис. канд. биол. наук. Оренбург, 1998. 24 с.

53. Ковбык Л.В Структурно-функциональная реорганизация эпителия мягкого неба и бронхов в условиях их культивирования в организме по методу Ф. М. Лазаренко роль нейроэндокринных факторов / Л В Ковбык, А H Козлова // Морфология -2003 № 5 - С 16-19

54. Козлова А.Н. Морфофункциональная характеристика эпителиев бронхов в онтогенезе человека и в экспериментальных условиях: Автореф. дис. канд. мед. наук. Оренбург, 1997.

55. Козлова А.Н. Изменения эпителия воздухоносных путей у крыс, инфицированных на фоне длительного эмоционально-болевого стресса, и влияние на них окситоцина. // Морфология.-2008.-Т. 134.- № 5.-С. 33-36.

56. Константинова М.С., Наточин Ю.В. Гормоны нейрогипофиза вазопрессин и окситоцин. Физиология эндокринной системы // Под ред. В.Г. Баранова. Л: Наука, 1979.- с.90-119.

57. Королюк A.M., Рищук C.B. Экологические аспекты антилизоцимной активности иерсиний // Персистенция бактерий: Сб. науч. трудов / Под ред. О. В. Бухарина. Куйбышев, 1990. С. 35—41.

58. Краеновская И.А. Изменение нейросекреторной системы крыс в условиях длительной гипоксии // Пробл. эндокринол.- 1974.-т.20.- с.53-57.

59. Курлаев П.П., Чернова О.Л., Киргизова С.Б. Воздействие окситоцина, лазерного и электромагнитного излучения на персистентные свойства Staphylococcus aureus // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2000. №4. С. 62—65

60. Лазаренко Ф.М. Закономерности роста и превращения тканей и органов в условиях культивирования их в организме.- М.: Медгиз.- 1959.- 400 с.

61. Лиознер Л .Д. Регенерация и развитие.- Л.: Наука. -1982.167с.

62. Луценко М.Т. Дыхательная система. В кн.: Руководство по гистологии, т. II, Частная гистология органов и систем.-СПб.: Изд. Спец. лит.-2001,- С. 194-228.

63. Магомедов М.З. Бронхопневмония телят, её патогенез, функциональная морфология и фармакотерапия композиционными пролонгированными препаратами.: Автореф. дисс. док. вет. наук — Воронеж.-2007.-38 с.

64. Махова А.Н. Особенности восстановительных и компенсаторных процессов в патологически измененных органах в эксперименте // Морфология.- 2003.- т. 124, N 5.- с.61-64.

65. Машанский Ф.В., Рабинович И.М. Ранние реакции клеточных органоидов.- Л.: Наука, 1987. 127 с.

66. Маянский Д.Н. Хроническое воспаление. М.: Медицина, 1991.-312 с.

67. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика.-М.:Наука, 1981.-С.278.

68. Меерсон Ф.З. Основные закономерности индивидуальной адаптации.- В кн.: Физиология адаптационных процессов.-М.Наука, 1986.- С. 10-76.

69. Меерсон Ф.З., Пешникова М.Г. Адаптация к стрессовым ситуациям и физическим нагрузкам. М.: Медицина, 1988.-253 с.

70. Меерсон Ф. 3. Защитные эффекты адаптации и некоторые перспективы развития адаптационной медицины // Усп. физиол. наук.-1991.-Т. 22.- №2.-С. 52-89.

71. Мещеряков К.Н. Структурно-функциональная реорганизация эпителия внутрилегочных бронхов в условиях воздействия дестабилизирующих факторов.: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Оренбург, 2008,- 24 с.

72. Михайлов В.П., Катинас Г. С. Тканевой гомеостаз и его механизмы // Арх. анат., гистол., эмбриол. 1984. № 9. С. 5—13.

73. Михайлов С.П. Патогенетическое значение антилизоцимной активности возбудителя при сальмонеллезной инфекции.: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Челябинск, 1986.-46 с.

74. Немцева Н.В. Антилизоцимная активность шигелл. // Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1984.

75. Никитенко В. И. Взаимоотношения макроорганизма и бактерий в ране и тканях человека и животных // Хирургия. 1990. № 9. С. 94—98.

76. Никитенко В. И., Стадников А. А., Есипов В. К. Изучение транслокации кишечной микрофлоры у животных с экспериментальным перитонитом//Матер. Рос. научн. конф. Оренбург, 1997. С. 10—11.

77. Николаева О.Я. Прямое воздействие окситоцина, дофамина, норадреналина на структурно-функциональную реорганизацию тимуса // Сб. материалов. Оренбург, 2002. с. 14-16.

78. Новожилова А.П., Плужников H.H., Новиков B.C. Механизмы клеточной смерти: проблемы и перспективы.-В кн.: Программированная клеточная гибель / Ред. Новиков В. С. СПб.: Наука, 1996.-С. 9-30.

79. Первушина J1.A. Антилизоцимный признак микроорганизмов в бактериологической диагностике и лечении воспалительных заболеваний внутренних женских половых органов: Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1990.

80. Петровская В.Г., Бондаренко В.М., Гостева В.В. Роль антилизоцимного признака для выживания бактерий в макрофагах периферической крови человека // Эпидемиология и микробиология раневых инфекций. М., 1986. С. 34—35.

81. Петровская В.Г., Маракуша Б.И. Ранние этапы инфекционного процесса (достижения и проблемы) // Журн. микробиол. 1987. № 10. С. 107—116.

82. Пирс Э. Гистохимия Изд. Ин. лит.: Москва.- 1962.- 962 с.

83. Плешко Р.И., Суходоло И.В., Огородова JI.M. Морфофункциональные аспекты сопряженности бронхиальной астмы и гастроэзофагельного рефлюкса // Бюллетень Сибирской медицины : научно-практический журнал. , 2005. - Том 4.-N 4 . - С. 54-58.

84. Поленов А.Л.Гипоталамическая нейросекреция. Л.:Наука, 1968.-159с.

85. Поленов А.Л. О жизненном пути и секреторном цикле нейросекреторных клеток гипоталамуса // Арх. анат., гистол., эмбриол. 1974. № 7. С. 5—20.

86. Поленов А.Л. Взаимодействие пептидных и моноаминовых нейрогормонов — основной принцип двойной нейроэндокринной регуляции //Усп. физиол. наук. 1979. Т. 10, № 1. С. 28—53.

87. Поленов А. Л. Общий принцип гипоталамическойнейроэндокринной регуляции защитно-приспособительных реакций организма. -В кн.: Эндокринные системы организма и токсические факторы внешней среды.- JL- 1980.- С.272-285.

88. Поленов A.JI. Эволюция гипоталамо-гипофизарного нейроэндокринного комплекса.- Эволюционная физиология.- Д.: Наука, 1983.- часть 2.- с.53-109.

89. Поленов A.JL, Константинова М.С., Гарлов П.Е. Гипоталамо-гипофизарный нейроэндокринный комплекс // Нейроэндокринология. СПБ., 1994. т.2.- с.139-286.

90. Полунин И. Н., Асфандияров Р.И., Тризно H.H. Токсический отек легкого при остром отравлении сероводородсодержащим газом. // Астрахань, 1999.-219с

91. Полякова B.C. Структурно-функциональная реорганизация эпителия лёгких и печени при воздействии сероводородсодержащих газовых смесей: Автореф. дисс. док. мед. наук Москва, 2004. -49 с.

92. Полякова Н.Д. Морфо-функциональная характеристика гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы крыс при острой кровопотере и гипербарической оксигенации.: Автореф. дис.канд. мед. наук, Ленинград, 1987. -21с.

93. Прусс В.Ф. Антилизоцимная активность шигелл и ее значение в формировании реконвалесцентного бактерионосительства при дизентерии: Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1989.

94. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск: Выш. школа, 1973.- 318 с.

95. Романова Л.К. Органы дыхания. — В кн.: Клеточное обновление / Ред. Л.Д. Лиознер. — М.: Медицина, 1966.-С. 137-153.

96. Романова Л. К. Регенерация легких в эксперименте и клинике.- М.: Медицина.- 1971.- 199 с.

97. Романова Л. К., Покровская М.С. Реакция сурфактантнойсистемы и воздушно-кровяного барьера легких на общую острую гипотермию // Бюлл. экспер. биол. — 1982. — № 9. С. 97—102.

98. Романова JI.K. Органы дыхания. В кн.: Атлас сканирующей электронной микроскопии клеток, тканей и органов. / Под ред. Волковой О.В., Шахламова В.А., Миронова A.A.- М.: Медицина.-1987.-С.288-293.

99. Романова JI.K., Серебряков И. С., Лебедев Д.Б., Ярыгин В.Н. Особенности секреторной активности клеток респираторного отдела легких мышей после частичной "химической симпатэктомии" // Бюлл. экспер. биол. — 1988. — № 2. — С. 231— 234.

100. Романова Л.К. Структурные основы системы дыхания.-В кн: Физиология дыхания./Ред. Бреслав И.С., Исаев Г.Г.- СПб.: Наука, 1994.-С.7-29.

101. Романова Л.К. Респираторный отдел легких. -В кн.: Клеточная биология легких в норме и при патологии. / Под. ред. Ерохина В .В. и Романовой Л.К.- М. Медгиз, 2000 - С.113-151.

102. Романова Л.К. Клеточная пролиферация и обновление эпителия воздухоносных путей и респираторного отдела легких.-В кн.: Клеточная биология легких в норме и при патологии. / Под. ред. Ерохина В .В. и Романовой Л.К.- М. Медгиз, 2000 - С. 153-166.

103. Романова Л.К. Сурфактантная система легких.-В кн.: Клеточная биология легких в норме и при патологии. / Под. ред. Ерохина В .В. и Романовой Л.К.- М. Медгиз, 2000 - С. 167-180.

104. Руди В.Н., Шевлюк H.H. Байбак и его адаптации к антропогенным ландшафтам на Южном Урале с. 103-117.- // Биология сурков Палеарктики. Сборник научных трудов. М.: МАКС Пресс, 2000.-С. 103-117.

105. Саликова С.П., Стадников A.A. Ультраструктурная характеристика реактивно измененного миокарда при культивировании in vitro // Морфология. 2003.- т. 124, N 5.- с. 16-19.

106. Саркисов Д.С. Очерки по структурным основам гомеостаза.- М.:Медицина, 1977.-3 51с.

107. Саркисов Д. С, Аруин Л.И., Туманов В.П. Приспособительные и компенсаторные процессы. В кн: Общая патология человека. / Под ред. Струкова А.И., Серова В.В., Саркисова Д.С.-М.: Медицина, 1982.-С.443-546.

108. Сеньчукова М.А., Стадников A.A. О роли бактерий в этиологии и патогенезе злокачественных новообразований // Сибирский онкологический журнал.—2009.-№ 2.- С. 79-85.

109. Серденко М.М., Розова Е.В., Великанов Э.Б., Тризно H.H., Морфофункциональная характеристика аэрогематического барьера легких у крыс при дыхании газовыми смесями с высоким содержанием сероводорода.//Морфология, 1992.-Т. 102.-№5.-С. 120-129.

110. Серебряков И.С. Клеточный состав и секреторная активность легочного эпителия в норме и при изменении функционального состояния вегетативной нервной системы: Автореф. дис. .канд. биол. наук.-М., 1984.- 22с.

111. Серов В.В. Пауков B.C. Воспаление.- М.: Медицина, 1995.640 с.

112. Сетко Н.П., Стадников A.A., Фатеева Т.А. «Особенности биологического действия сернистых соединений на женский организм».//М.: Медицина.- 2004.- 192 С.

113. Соколов В.Ю. Механизм антилизоцимной активности бактерий: Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1990.

114. Стадников A.A. Изменения клеток аденогипофиза при совместной имплантации с различными ядрами гипоталамуса. // Арх. анат.- 1989.-t.97, вып. 10.- с.63-70.

115. Стадников A.A. Нейробиологические аспекты регуляции репаративных гистогенезов // Морфология.- 1995.- т.108, N 2.- с.16-19.

116. Стадников A.A., Шевлюк H.H. Морфофункциональная характеристика гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы крыс самцов в условиях эмоционально-болевого стресса // Морфология.-1996.-т.5.- с.38-42.

117. Стадников A.A. Гипоталамические факторы регуляции процессов роста, пролиферации и цитодифференцировки эпителия аденогипофиза.- Екатеринбург, Уро РАН.- 1999.- 137 с.

118. Стадников А. А., Чернова О. JL, Ковбык JI. В., Шевлюк Я. Я. Влияние карнозина на морфофункциональное состояние клеток слизистой оболочки мягкого неба крыс при стафилококковой инфекции // Журн. микробиол., эпидемиол., иммунобиол. 2000. № 4. С. 59—62.

119. Стадников A.A., Чернова О. Л., Ковбык Л. В. Роль гипоталамических нонапептидов во взаимодействии про- и эукариотических клеток // Вестн РАМН. 20006. № 2. С. 49—52.

120. Стадников A.A. Роль гипоталамических нонапептидов во взаимодействиях про- и эукариот (структурно-функциональные аспекты). Екатеринбург, Уро РАН.- 2001.- 243 с.

121. Стадников Б. А. Клинико-морфологическое обоснование ццелесообразности применения окситоцина в комплексной терапии острого панкреатита // Тезисы докладов 5-й Всерос. конференции "Нейроэндокринология-2000". СПб., 2000. С. 121.

122. Струков А.И., Пауков В.С, Орехов О.О. Морфология, патогенез, классификация интерстициальных заболеваний легких. // Архив патологии.- 1984.- Т.2.- вып.7.-С. 3-15.

123. Струков А. И., Серов В.В., Саркисов Д.С. Общая патология человека. М.: Медицина, 1990. Т. 2.

124. Струков А.И., Серов В.В. Патологическая анатомия. М.: Медицина, 1995.- 688 с.

125. Сурикова Е. В. Факторы персистенции клебсиелл: Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1992. 22 с.

126. Сутулов А.Ю., Лихванцева В.Г., Степанова Е.В., Астахова С.Е., Верещагина М.В. Молекулярные механизмы действия Ронколейкина® при системном введении препарата у пациентов с увеальной меланомой.// Медицинская иммунология.- 2003.- Т. 5.- № 3-4.-С.461-462.

127. Токин И.Б. Электронно-микроскопический анализ процессов дифференцировки и дедифференцировки клеток // Арх. анат.- 1972.- № 6.- С. 46—62.

128. Топурия З.М., Милованов А.П., Алексеевских Ю.Г. Морфология аэрогематического барьера. — Тбилиси: Тбилисский гос. мед. ин-т, 1991. — 142 с.

129. Третьяков А. А. Клинико-экспериментальное обоснование комплексного лечения холангита при механической желтухе: Автореф. дис. докт. мед. наук. Оренбург, 1998.

130. Уманцева Н. Д., Шишкин Г. С., Устюжанинова Н. В. Строение легочного ацинуса белой крысы. // Бюлл. СО РАМН.- 1995.- №3.- С. 6063.

131. Усвяцов Б. Я. Лизоцимная и антилизоцимная активность патогенных кокков: Автореф. дис. докт. мед. наук. 1Ь, 1986.

132. Фарех Ф.М.Ш. Нейроэндокринная регуляция структурнофункциональной реорганизации миокарда (экспериментальногистологическое исследование): Автореф. дис.канд. мед. наук. 1. Оренбург, 2004.- 28 с.

133. Фещенко Ю. И., Гаврисюк В. К., Моногарова Н. Е. Без альтернативы. Лечение идиопатического фиброзирующего альвеолита. // Лжи Украши. 2005. - № 7-8.- С. 71-73.

134. Фиалкина С.В. Генетические детерминанты патогенности клинических штаммов Klebsiella pneumoniae.: Автореф. дисс. . канд. биол. наук -Москва, 2004 -24 с.

135. Филаретов А. А. Принципы и механизмы регуляции гипофизарноадренокортикальной системы. Л.:Наука,1987.-166с.

136. Фролов Б.А., Смагин Г.Н., Филиппов В.К. Роль нарушений центральных механизмов нейргуморальной регуляции в исходе вирусной инфекции // Докл. АН СССР, 1990.- т.314, N 3.- с.764-767.

137. Фролов Б.А., Стадников А. А. Экспериментальная гриппозная инфекция как стрессор; активация гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы (ГТАКС) // Тезисы докладов 4-го Всесоюзного симпозиума. Кишинев, 1991.

138. Хакешева Т.А., Хараева З.Ф., Емкужева З.К. Факторы персистенции staphylococcus aureus и klebsiella pneumoniae, выделенных при различных нозологических формах заболевания // Усп. совр. естеств.-2008.-№ 5.-С. 151.

139. Хлопин Н. Г. Общебиологические и экспериментальные основы гистологии. М.: Изд-во АН СССР, 1946.- 491с.

140. Хлыстова З.С. Сравнительное исследование превращений дермального и энтеродермального эпителиев в культурах в организме // Арх. анат., I960.- т.38, вып.1.- с.43-47.

141. Цинзерлинг В.А. Пневмонии и другие острые респираторные инфекции у взрослых.- В кн.: Клеточная биология легких в норме и припатологии (рук-во для врачей). / Под. ред. Ерохина В.В. и Романовой Л.К.- М. Медгиз, 2000 - С.329-350.

142. Чекулаева Л. И. Исследование возрастных особенностей строения и физиологической регенерации эпителия и волос методом авторадиографии.-В кн.: Радиоактивные индикаторы в гистологии. / Под ред. Жинкина Л.Н. Ленинград, 1959.-С. 34-67.

143. Челпаченко O.E. Экспериментальное обоснование рациональной терапии пиелонефрита у детей под контролем маркеров персистенции возбудителя: Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1993.

144. Шахламов В.А. Закономерности восстановления клеточных мембран в норме и эксперименте. В кн.: Гистологическая наука России в начале XXI века: итоги, задачи, перспективы. Материалы Всероссийской научной конференции,- Москва.- 2003. С.6-9.

145. Шевлюк Н. Н. Морфофункциональная характеристика интерстициальных эндокриноцитов семенников суслика рыжеватого в условиях сезонного изменения репродуктивной активности //

146. Морфология. 1998. Т. 114, №4. С. 88—93.

147. Яблочков А.Л. Выделение и характеристика антилизоцимного фактора Klebsiella pheumoniae // Журн. микробиол. 1989. № 3. С. 11 — 14.

148. Adriaensen D., Scheuermann D.W. Neuroendocrine cell and nerves of the lung.// Anat. Rec- 1993.- Vol.236.- P. 70-85.

149. Adriaensen D., Brouns I., Van Genechten J., Timmermass J. Functional Morphology of Pulmonary Bodies: Extremely Complex Airway Receptors. //Anat. Rec-2003.- Vol.270.- P.25-40.

150. Alario A., Beato M.J., Trancho G. Body weight gain, food intake adrenal development in chronic noise stressed rats // Physiol Behav.- 1987.-v.40.- c.29-32.

151. Armario A., Marti O., Gavalda A., Giralt M. Effects of. immobilization stress on GH and TSH secretion in the rat: response to hypothalamic regulatory factors // Psychoneuroendocrinol. 1993. Vol. 18, N 5—6. P. 405—413.

152. Berthiaume Y. Tumor necrosis factor and lung edema clearance: the tip of the iceberg? // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2003. V. 168. P.1022-1023.

153. Bignon J., Jaurand M., Pinchon M. et al. Immunoelectron micposcopic and immunochemical demonstrations of serum proteins in the alveolar lining material of the rat lung // Amer. Rev. Resp. Dis. — 1976. — Vol. 113.-P. 109-120.

154. Blenkinsopp W.K. Proliferation of respiratory tract epitheliumin the rat. // Exp. Cell. Res.-1967.- Vol. 46.- P. 144-155.

155. Bolduc P., Reid L. Mitotic index of the bronchial and alveolar lining of the normal rat lung. // Amer. Rev. resp. Dis.- 1976.- Vol. 114,- № 6.-P. 1121- 1128.

156. Braude A.I. Some reasons for clinical concern—Discussion // Microbial Perturbation of Host Defences ed O' Grady, H. Smith. L., 1981. P. 13.

157. Brody A.R. The brush cell. // Amer. J. of Resp. and Critic. Care Med.-2005.- Vol 172.-P. 1349.

158. Broers J.L., Jensen S.M., Travis W.D. et al. Expression of surfactant associated protein A and Clara cell 10 Kilodalton m RNA in neoplastic and non -neoplastic human lung as detected by situ hybridization. // Lab. Invest-1992. Vol.66.-P.337-346.

159. Cerkez V., Tos M., Mygind N. Goblet cell density in the human lung-whole-mount study of the normal left lower lobe. // Anat. Anz.-1986.- Vol. 162.- №3.- P. 205-213.

160. Chess P.R., Benson R.P., Maniscalco W.M., Wright T.W., O'Reilly M.A., Johnston C.J Murine mechanical ventilation stimulates alveolar epithelial cell proliferation./ Exp Lung Res.- 2010 -Vol.36(6).-P.331-341.

161. Collet A.J. Preservation of alveolar type II pneumocyte lamellar bodies for electron microscopic studies. // J Histochem Cytochem.-. 1979.-Vol. 27.-№5.-P. 989-996.

162. Crapo J.D., Barry B.E., Gehr P. et al. Cell number and cell characteristics of the normal human lung // Amer. Rev. Respir. Dis. 1982. — Vol. 125. - P. 332- 337.

163. Czuprynski C.J. Bacterial Evasion of Cellular Defense Mechanisms // Virulence Mechanisms of Bacterial Pathogenes / Ed. J. A. Roth. Washington, 1988. P. 141—160.

164. Delmotte P., Sanderson M.J. Ciliary beat frequency is maintained at a maximal rate in the small airways of mouse lung slices. // Am J Respir Cell Mol Biol.-2006.-Vol. 35.-№ l.-P. 110-117.

165. Devendra G, Spragg RG. Lung surfactant in subacute pulmonary disease. // Respir Res.- 2002.- Vol.3.- P. 19.

166. Dobbs L.G., Wright J.R., Hawgood S. et al. Pulmonary surfactant and its components inhibit secretion of phosphatidylcholine from cultured rat alveolar type II cells // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1987. - Vol. 84.-P. 10101014.

167. Erokhin V.V., Lepekha L.N. Morpho-fimctional changes of surfactant system in pulmonary tuberculosis. // Vestn Ross Akad Med Nauk.-2000.- Vol 12.-P. 31-36.

168. Evans M.J., Shami S.G. Lung cell kinetics. — In: Lung cell biology. Lung biology in health and disease. — New York: Marcel Dekker, 1989.—Vol. 41.-P. 1-36.

169. Franks TJ., Colby T.V., Travis W.D., Rubin M. Tuder R.M. Current Knowledge and Goals for Research on Cell Phenotyping and Function. // The Proceedings of the American Thoracic Society -2008.- Vol. 5.-P. 763-766.

170. Fulton B.K.; Davis M.M. Surfactant protein B deficiency. // Fetal and Pediatric Pathology.-2002.-Vol. 21 .-P. 507-511.

171. Gregoiy W. A., Hall D., Benett M. V. et al. Neuronal and glial gap junctions in the goldfish preoptic area, a thin section and freeze-structure study // Dev. Brain Res. 1988. Vol. 44, N 1. P. 9—19.

172. Glick S.M. The regulation of growth hormone secretion // Frontiers in neuroendocrinology / Eds W.F. Canong L. Martini L. 1963. - P. 141-142.

173. Gregoiy W.A., Hall D.H., Benett M.V. Neuronal and glial gap junction in the goldfish preoptic area, a thin section and freeze-structure study // Dev. Brain. Ress.-1988.-v.44, N l.-p.9-19.

174. Harmon R.R., Marinelli N.A., Henke C.A., Bitterman P.B. Regulation of cell replication. In: The Lung: Scientific Foundations. / Eds:Crystal R.G., West J.B. et al.-New York: Raven Press, Ltd, 1991.-Vol.l.-P. 105-129.

175. Hirasawa A., Hashimoto K., TsuJimoto G. Distribution and developmental change of vasopressin VIA and V2 receptor mRNA in rats // Eur. J. Pharmacol.- 1994.- v.267, N 1.- p.71-75.

176. Huang Y.T., Hsueh P.R. Antimicrobial drug resistance in Taiwan.//1.t J Antimicrob Agents.- 2008. -Vol. 32.- P. 174-178.

177. Ichimura H., Parthasarathi K., Quadri S., Issekutz A.C., Bhattacharya J. Mechano-oxidative coupling by mitochondria induces proinflammatory responses in lung venular capillaries. // J Clin Invest.- 2003.-Vol. 111.- №5.- P. 691-699.

178. Imai T., Hirata Y., Emorl T., Yanaglsawa M., Masaki T., Marumo F. Induction of endothelin-1 gene by angiotensin and vasopressin in endothelial cells // Hypertension.- 1992.- v. 19, N 6, Pt.2.- p.753-757.

179. Jacobs H., Jobe A., Ikegami M., Conaway D. The significance of reutilisation of surfactant phosphatidylcholine // J. Biol. Chem. 1983. -Vol. 258.-R 4159-4165.

180. Johnson K. I. Hystology and cell biology. Baltimore: Williams and Wilkins.-1991.- P.345.

181. Kauffman S. Cell proliferation in the mammalian lung. // Intern. Rev. Exp.Pathol.-1980.- Vol.22.-P. 131-191.

182. Khassawneh M., Khader Y., Abuqtaish N. Clinical features of neonatal sepsis caused by resistant Gram-negative bacteria. / Pediatr Int.-2009.- Vol. 51(3).-P. 332-336.

183. Khundadze Kh.M., Tsagareli Z.G., Gogiashvili L.E. Changes in ultrastructure of lung aerohematic barrier and blood gas indices in long term exercise. // Georgian Med News.- 2005.- Jul- Vol. 124-125.-P. 57-60.

184. Kikkawa Y, Yoneda K., Smith F. et al. The type II epithelial cells of the lung. II. Chemical composition and phospholipid synthesis // Lab. Invest. — 1975. — Vol. 32. — P. 295-302.

185. Kimura A., Gomi T.G., Kikuchi Y., Kishi K.K. Morphological studies on ontogeny of the rat lung. // Zool. Sci.-1991.-Vol.8.-№6,-P. 1155.

186. Kinnula V.L., Crapo J.D. Superoxide dismutases in the lung and human lung diseases. // Am. J. Respir. Crit. Care Med.- 2003,- V. 167.-P. 1600-1619.

187. Kudo S. Differentiation of Clara cells and pneumocytes of the rat by means of enzyme and immunohistochemistry. // Anat. Rec.-1994.-Vol.238.-№l- P.49-56.

188. Larra F., Droz B. Techniques radioautographiques et eur application a l'etude du renouvellement des constituants cellulaires. // J. Microsc.-1970.-№ 9.- P. 845—880.

189. Livingston A. Morphology of the perivascular regions of the rat neural lobe in relation in hormone release // Cell and Tissue Res. 1975. Vol. 159, N2. P. 551—561.

190. Loeffler D.A., Schat K.A., Norcross N.L. Use of Cr release to measure the cytotoxic effects of staphylococcal leukocidin and toxin neutralization on bovine leukocytes // J. Clin. Microbiol. 1986. V. 23. P. 416-420.

191. Louie J.K., Hacker J.K., Gonzales R. Characterization of viral agents causing acute respiratory infection in a San Francisco University Medical Center Clinic during the influenza season. // Clin Infect Dis.- 2005.-Vol.41.-P. 822-828.

192. Low F.N. Electron microscopy of the rat lung. // Anat Rec.-1952. Vol. 113.- № 4.- P. 437-449.

193. Luscher T.E., Wenzel R.R. Endothelin and endothelin antagonists: pharmacology and clinical implications.- Agents and Actions.: Suppl.-1995.-v.45.- p.237-53.

194. Masse R., Fritsch P., Chretien J. Renewal of bronchial and pulmonary cells: a comprehensive review of recent information. // Rev. Fr. Mai. Respir.-1981.- Vol. 9, № 2.- P.85-112.

195. Matsumoto S. Relationship between presence of past pulmonary illness and flow-volume curves of adults with normal appearance. // Rinsho. Byori- 1975.-Vol.23.- № 6.- P.471-474!

196. McNutt A.V., Fawcett W.S. Quantative of cytoplasmic inelectron micrographs // Lab. Inv.- 1974.- v.16, N 8.- p.996-108.

197. Meyrick B., Reid L. The alveolar wall. // Brit. J. Dis. Chest.-1970.-Vol. 64.-№3.-P. 121-140.

198. Meyrick B., Reid L . In vitro incorporation of (H3 ) thre-onine and (H3) glucose by the mucous and serous cells of the human bronchial sutanucosal gland, A quantitative electron microscope study. // J. Cell. Biol. -1975.- Vol. 67. №2,- P.320-344.

199. Millonig G. Advantages of a phosphate buffer 0s04 solutions in fixation // J. Appl. Physics.- 1961.- N 32.- p.1637-1642.

200. Nowell J.A., Tyler W.S. Scanning electron microscopy of the surface morphology of mammalian lungs. // Am Rev Respir Dis.- 1971 Vol. 103.-№3.-P. 313-328.

201. Ohata M.,. Irako M. Regeneration of the respiratory epithelium. // Hum. Cell.-1991.- Vol. 4.- № 3.-P.204-215.

202. Palkovits M. Stereotaxic map, cytoarchitectonic and neurochemical summary of the hypothalamic nuclei rat 11 Endocrine System / Eds T. C. Jones, U. Mohr, R. D. Hunt. Berlin etc., 1983. P. 319—331.

203. Papadopoulos G.C., Kargmanlidis A.N., Michaloudi H.,

204. Dinopoulos A. The coexistence of oxytocin and corticotropin-releasing factor in the hypoyhalamus: immunocy- tochemical study in the rat, sheep and hedehog // Neurosci. Leff. 1985. Vol. 62, N 2. P. 213—218.

205. Phelps D.S., Floros J. Localization of pulmonary surfactant proteins using immunohistochemistry and tissue in situ hybridization. // Exp. Lung Res.-1991.- 17.-№6 P.985-995.

206. Polenov A.L. Hypothalamic neurohormonal mechanisms of physiological Sci., Budapest, 1980, Acad. Kiado, Budapest, Pergamon Press.-1981.-p. 122.

207. Reichlin S. Regulation of somatotrophic hormone secretion. // Endocrinol.- 1974.-Vol. 42.-№4.- P. 208-212.

208. Reid L., Meyrick B., Veena B. Antony V.B., Chang L., James D., Crapo J., Reynolds H. The mysterious pulmonary brush cell. A cell in Search of a function. // Amer. J. of Resp. and Critic. Care Med.-2005.- Vol 172.- P. 136-139.

209. Reynolds E.S. The use of lead citrate at high pH as an electronopaque stain in electron microscopy // J. Cell. Biol.- 1963.- v. 17.-p.208-212.

210. Sahly H., Keisari Y., Ofek I. Manno(rhamno)biose-containing capsular polysaccharides of Klebsiella pneumoniae enhance opsono-stimulation of human polymorphonuclear leukocytes. // J Innate Immun.-2009.-Vol. l.-№ 2.-P. 136-144.

211. Sato T., Shamoto M. A simple rapid polychrome stain for epoxy embedded tissue // Stain. Technol.- 1973.- v.48.- p.223.

212. Scavo L.M., Ertsey R., Chapin C.J., Allen L., Kitterman J.A. Apoptosis in development of rat and human foetal lungs.// Am. J. Respair cell Mol. Biol.-1998.- Vol.18.- P 21-31

213. Selye H. The story of the adaptation syndrome (told in the form of informal, illustrated lectures). Montreal: Med. Publish.- 1960. - P.

214. Selye H. Stress without distress.- New York: Hodder and Stoughton. 1974.- p. 125-130.

215. Somwar R., Shum D., Djaballah H., Varmus H. Identification and preliminary characterization of novel small molecules that inhibit growth of human lung adenocarcinoma cells. / J Biomol Screen.- 2009.- Vol. 14(10).- R 1176-84

216. Stratton C.J. The ultrastructure of multilamellar bodies and surfactant in the human lung. // Cell Tissue Res.- 1978.- Vol. 193.- № 2.- R 219-229.

217. Sud B.N. Electron microscopic study of the human type II pneumonocyte and surfactant synthesis. // Anat. Rec.-1977.- Vol. 187.- R 724725.

218. Sugahara K., Rubin J.S., Mason R.J., Aronsen E.L., Shannon J.M. Keratinocyte growth factor increases mRNAs for SP-A and SP-B in adult rat alveolar type II cells in culture. //Am J Physiol.- 1995,- Vol. 269.- P. 344-350.

219. Tascilar N., Irkorucu O., Tascilar O., Comert E, Eroglu O., Bahadir B., Cakmak G.K., Ankarali H., Sayan H. Bacterial translocation in experimental stroke: what happens to the gut barrier?/ Bratisl Lek Listy.-2010.-Vol. 111(4).-P. 194-199.

220. Taylor P.W. Bacterial Resistance to Complement // Virulence Mechanisms of Bacterial Pathogenes // Ed. J. A. Roth. Wachington, 1988. P. 107—120.

221. Terentyeva S., Stadnikov A., Volyanik M. The results of hypothalamic-hypophyseal stimulation in the treatment of rheumatola arthritis in children // Europ. J. Allergy and Clin. Immunol. 1998. Vol. 54, N 37. P. 232.

222. Tesfaigzi J, Wood M.B., Johnson N.F., Nicula K.J. Apoptosis is a pathway responsible for the resolution of endotoxin-induced alveolar type

223. Tomas J.M., Benedi V.J., Ciurana B., Joffre. Role of capsule and 0 antigen in resistance of Klebsiella pneumoniae to serum bactericidal activity//Infect. Immun. 1986. V. 54. P. 85—89.

224. Tsagareli Z.G., Gogiashvili L.E., Topuria Z.M., Dzhandieri K.N. Morphofunctional estimation of blood-air barrier and lung surfactant in rats of different age. // Georgian Med News.- 2008 -Vol. 159.-P. 47-52.

225. Uribe R.M., Redondo J.L., Charli J.L., Joseph-Bravo P. Suckling and cold stress rapidly and transiently increase TSH mRNA in the paraventricular nucleus // Neuroendocrinol. 1993. Vol. 58, N 1. P. 140—145

226. Voorhout W.R, Weaver T.E., Haagsman H.P., Geuze H.J., Van Golde L.M. Biosynthetic routing of pulmonary surfactant proteins in alveolar type II cells. // Microsc Res Tech.- 1993.- Vol. 26,- № 5.- P. 366-373.

227. Weibel E. R., Gil J. Electron microscopic demonstration of an extracellular duplex lining layer of alveoli. // Resp. Physiol. -1968. №4. - P. 42-57.

228. Williams P., Lambert P.A., Brown M. R.W., Jones R.J. The role of the O and K antigens in determining the resistance of Klebsiella aerogenes to serum killing and Phagocytosis //J. Gen. Microbiol. 1983. V. 129.- P. 2181— 2191.

229. Wright J.R., Yoomans D.C. Degradation of surfactant lipids and surfactant protein A by alveolar macropfages in vitro // Amer. J. Physiol.-1995.-Vol. 286.-№4.-P. 772-780.

230. Zachary I., Woll P.J., Rozengurt E. A role for neuropeptides in the control of cell proliferation // Dev. Biol.- 1987.- v. 124, N 2.- p.295-308.

231. Zeltner T.B., Burri P.H. The postnatal development and growth of the human lung. II. Morphology // Resp. Physiol. 1987b. - Vol. 67. - P. 269282.

Информация о работе

Лабутин, Илья Викторович
кандидата медицинских наук
Оренбург, 2010
ВАК 03.03.04

Диссертация

Структурно-функциональная характеристика нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной нейроэндокринной системы и респераторных отделов лёгкого крыс в условиях интратрахеального инфицирования - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы