Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Структурная организация кожи в условиях нормы, аппликационном и пероральном использовании цеолитов на модели ожоговой травмы

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Структурная организация кожи в условиях нормы, аппликационном и пероральном использовании цеолитов на модели ожоговой травмы"

На правах рукописи

Павленко Оксана Юрьевна

Структурная организация кожи в условиях нормы, аппликационном и пероральиом использовании цеолитов на модели ожоговой травмы (экспериментальное исследование)

03 00 25 - гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Новосибирск-2007

кШмоо

003055935

Работа выполнена в лаборатории ультраструктурных исследований ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, г Новосибирск

Научный руководитель

доктор биологических наук, профессор Бгатова Наталия Петровна

Официальные оппоненты

доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

Машак Светлана Владимировна Голубева Ирина Александровна

Ведущая организация ГОУ ВПО Кемеровская государственная медицинская академия Росздрава

Защита состоится УК £ХЛЛ^007 г на заседании диссертационного

совета Д 208 062 05 при ГЦУДГЮ Новосибирском государственном медицинском университете Росздрава (630091, г Новосибирск, Красный проспект, 52)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирского государственного медицинского университета (630091, г Новосибирск, Красный проспект, 52)

Автореферат разослан « Д^А » 2006 г

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук

профессор

А В Волков

Общая характеристика работы Актуальное ib исследовании

Нсс.мофя на большие усиеки, досшшухыс в лечении ожогов jicia.'ibHooib среди обожженных больных, остается высокой даже в специали шроващшх стационарах (Парамонов ЪЛ с соаш , 2000, McCampbell В et al, 2002, Zhang XT et al , 2002, Лавров В Л , 2003) Одной из главных причин высокой летальности среди пострадавших, является полиорганная недостаточность, развивающаяся вследствие системного воспалительного ответа который в свою очередь может резко усугубляться при снижении дстоксикационной функции лимфатической системы

В условиях глубокого ожога лимфатические сосуды не в состоянии дренировать и отводить из тканей региона жидкость, белки и клеточные элементы, появляющиеся при воспалении за счет увеличения проницаемости кровеносных капилляров и повреждения ikjhch (Ravage ZB et al, 1998, Cetmkdlc О cl al , 1999, Scncr С ct al , 2003, 7hu CH et al, 2004) Это объясняется закупоркой просвета сосудов, тромбозом, спазмом, блокадой синусов лимфатических узлов и его тсруппых лимфатических коллекторов

Одним m юможиых способов коррекции лимфатическою дренажа ожогобой раны при термическом ожоге кожи и, следовательно, снижение юксемии, яи1яе1ся использование сорбциошшх lexuo.ionw Показано, что нанесенный на поверхность ожоговой раны сорбент, принимая на себя часть жидкости и токсинов, способствует созданию оптимальной дренажной функции в регионе, своевременному «разблокированию» регионарного лимфатического узла и морфо-фу национальной компенсации лимфатического русла (Любарский М С и др , 1993, Нимасв В В , 1995)

В хирургии для лечения гнойных ран применяются сорбционные кошеинеры из iканною капрона с дробленым цсолиювым туфом -шивыртлином (Богомолов ПИ, 2005) Особенностью цеолитов, как сорбешов, янляшся не юлько споообнос]ь сорбировав юксические всщссхва, но и рс!улирова1ь минеральный х-омеоотаз - способность отдавать ортнизму недостающие микро- и макроэлемент и выводить, находящиеся в избытке (Лаптев А М, 2006) Однако основные проблемы применения цеолитов в медицине связаны с недостаточной изученностью механизма их действия Актуальным и перспективным подходом к лечению термических ожогов кожи является изучение эффективности использования раневых покрытии на основе природного цеолита, которые способствовали бы ускорению отторжения гнойно-некротического отделяемого и обеспечивали условия для выполнения лимфатической системой своих основных функций (лимфодреналеной, лимфодетоксикационной, иммунологической) Однако основные проблемы применения цеолитов в медицине связаны с недоем точной и чешюстыо механизма действия природных минералов

з

Цель нсследовапия

Выявить особенной» структурной организации кожи п условиях нормы, аппликационном и пероралыюм использовании цеолитов в послеожоговом периоде

Задачи исследовании-

1 Определить морфометрическис критерии структуры эндотслиоцитов лимфатических капилляров и фибробластов кожи в условиях нормы

2 Изучить Сфукгпру ^ндо!Слиоцтов лимфагических капилляров, инюрсхиция и фибробласюв кожи в динамике развшия раневого процесса при спошаппом заживлении ожоювой раны

3 Исследовав сгруюуру эндоюлиоцтов лимфашческих капилляров, интерстиция и фибробластов кожи в динамике развития раневого процесса при местном лечении мазью «Левомеколь»

4 Изучить структуру эндотелиоцитов лимфатических кашшляров. интерстиция и фибробластов кожи в динамике развитш раневого процесса при использовании аппликаций контейнеров с природным цеолитом

5 Исследовать структуру эндотслиоцитов лимфатических кашшляров, интерстиция и фибробластов кожи в динамике развития раневого процесса при эшералыюм использовании цеолиюв

6 И ¡учить струю} ру щдогслиощпов лимфагических капилляров, интерстиция и фибробластов кожи в динамике развития раневого процесса ггри сочшагшом эптеральном и аппликационном использовании цеолитов в постеожоговом периоде

Научная повпзпа исследования.

1 Методами световой, электронной микроскопии и морфометрии показано, что п послеожоговом перггоде при спонташтом заживлении ожоювой раны кожи развиваются десгрукшвные ишенепия шдо1елиоциюп лимфатических кашштяров снижаются численные плотности прикрепленных и свободных и полисомальных рибосом, концентрация хрнст митохондрии, объемные пло!нос1и микрониноциюшых везикул, нозрасме! электронная плотность просветов лимфатических кашшляров и перикапиллярных пространств, свидетельствующие о нарушении лимфашческою дренажа органа

2 Показано, чю в условиях коррекции лимфашчеокого дренажа ожоговой раны использованием аппликаций контейнеров с цеолитом, в меньшей степени выражены изменения ультраструктурной организации эндотелиоцитов лимфатических капилляров, структуры интерстиция и фибробластов

3 Выявлено, что в условиях совместного перорального и аппликационного использования природных цеолитов в послеожоговом периоде, происходит наиболее эффективное восстановление структуры кожи

Теоретическое п практическое значение работы

1 [отученные количественные и качественные харата ерис 1 ики структурной организации кожи в условиях нормы и посте термического ожога, могут быть т ^пользованы в качестве т-ршериев для оценки характера и степени поражения органа

Выявленное протектикное дейстис аппликационного и нерорального использования природных минеральных сорбсшов на структуру эндотелиоцитов лимфатических капилляров и эффективность развития процесса регенерации при термической гравме кожи, с тедует учитывать при разработке рекомендаций но лечению термических ожот ов

Положении, выносимые на защшу

1 В условиях термического ожога ЗА степени в прилежащих к ожогу участках кожи развиваются деструкппзчыс изменения эндотелиоцитов лимфатических капилляров и интерстиция, свидетельствующие о нарушении лимфатического дренажа, обусловливающие структурные изменения фибробластов и макрофагов тканевого микрорайона кожи и снижение эффективности восстановления органа

2. Использование аппликаций контейнеров с цеолитом на ожоговую рану оказывает протективное действие на стр\ктур\ эндотелиоцитов лимфашчееких капилляров и ншерстция, прилежащего к обласш ожо1а ношеного микрорайона кожи, способствуя меньшему повреждению фибробластов и макрофагов и большей эффективности восстановления органа

3. Совместное пероралыюе и апплнкащюпное использование природного цеолита обеспечивает наиболее )ффек~1иштую ретеперацию поврежденного участки кожи в послеожоговом периоде

Внедрение результатов исследовании.

Реллыаты /чееерчациоштой работы исполыуклея в лекционных курсах и семинарских занятиях на кафедре анатомии, физиологии и валеологии Новосибирского государственного педагогического университета Полученные данные о структурных перестройках кожи при термических ожогах внедрены в научно-исстсдоватстьскую работу- отдела профилактической и экологической лимфологии ГУ Н11И клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН

Апробапнп результатов исследования Основные положения диссертации доложены па I Съезде Лимфологов Сибири (Новосибирск, 2006), между народном симпозиуме «Физиология и патология лимфатической системы» (Алма-Ата, 2006), научно-практической конференции «Проблемы эндоэкологии и лимфатического дренажа» (Кишинев, 2006), конференции, посвященной 75-летию кафедры гисто тогпи Белгородской медицинской академии (Белгород, 2006), научной конференции «Клинические проблемы

микроцирку ляции» (Москва, 2006), VIII Конгрессе международной ассоциации морфологов (Орел, 2006)

Публикации. По гсме диссертации опубликовано 8 печатных работ из них одна статья в научном ж-у риале, рекомендованном ВАК России

Объем п структура диссертации Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста Содержит 18 таблиц, иллюстрирована 35 рисунками Диссертационная работа состоит из введешг?, обзора литераторы, 1ланы о материалах и меюдах исследования, pesyjiwdion собственных исследований обсуждения потучепных результатов, выво^'в и практических рекомендаций Указатель литературы включает в себя 226 работ из них 107-отечестветлгх и 119 - зарубежшлх авторов

Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором

Содержание работы Материал и методы исследования

Работа выпо таена на крысах самцах линии Вистар, характеризующихся высокой устойчивостью к инфекциям (Лейп-Петтер У , 1964, Западшок И П. 1974) и низкой индивидуальной вариабельностью структурно-функциональных параметров организма В работе использовано 95 животных, массой 180-200г

Под эфирным наркозом крысам выбривали участок кожи в грудопоясничной области и наносили ожог диаметром 2 см с помощью специально ра фабоыпнош усфойива, nyieM подачи водяного пара в течение 5 сск В результате у экспериментальных животных развивалась ожоювая раш кожи ЗА степени, занимающая 8% иовсркиосш 1сла, чю документировалось морфологическими исследованиями раневой поверхности кожи

Животные были разделены на 6 групп Первая ipyiriid - ингактнме животные, не подвергавшиеся термическому ожогу Вторая группа -животные, не получавшие лечения после ожога 1ретья гругша - животные, которым в течение 7-ми дней после ожога накладывали на раневую поверхность контейнеры с цсолитовым минеральным комплексом Смену контейнеров производили ежедневно

Нами бьп применен контейнер из полупроницаемой целлофаьовои оболочки (с диаметром пор не менее 10 нм), который заполнялся тонко измельченной цеолигсодержащей горной породой (фракция помола 0,01м\() В качестве сырья использовался цеолшизированный вулканический iyф Милотрадовстсот месторождения (Приморский край) В ею минеральном составе преобладали кчиноптилолит (около 60%) и смектит (около 35%), как примеси присутствовали полевые шпаты, кварц и вулканическое стекло

б

Перед использованием порошок туфа прокаливали в течение 2 ч при температуре 120° С

Четвертая группа - животные, которым на ожоговую поверхность наносили мазь «Левомеколь» Этим животным также делали ежедневные перевязки «Левомекоть» использоваяи в качестве принятого местного лечения ожоговых ран (Спиридонова К Л, 2002) В состав мази «Левомекоть» входит левомицетин - 0,75г, метилу рацил - 4,0 г, полиэтиленоьсид 1500 - 19,5 г, полиэтилепотссид 400 - 76,2 г (Маттнсовский МД , 1987)

Пятая труппа - жимошме, которые в течение 15 и 30 дней с пищей получали природный минерал - цеолит из расчета 0,1 г/кг массы тела

Шестая группа - животные, которые в течение всего эксперимента получали с пищей цеолиты и которым па раневую поверхность накладывали контейнеры с цеолитовым минеральным комплексом Все крысы были рассажены в индивидуальные просторные клетки

Животных декапитировали под эфирным наркозом через 3, 7, 15 и 30 су ток после нанесения ожога В качестве объекта исследования использовали образцы кожи из раневой и прилежащеи к ране поверхности На каждый срок исследования брали по 5 живо 1 пых

Для светоошическото исследования образцы кожи фиксировали в 10% растворе нейтральною формалина, обезвоживали в серии сиирюв возрастающей концентрации и заключали и парафин (Волкова О В , Елецкий ЮК, 1982) Срезы толщиной 5-6 микрон окрашивали шмаюксилином Маиера эозином и заключали в канадский бальзам

Дта изучения образцов кожи в просвечивающем режиме элекфопного микроскопа их фиксировали в 1% растворе ОчОд па фосфатном буфере (рН=7,4) (МШопищ О, 1961), дегидрагпроватп в этиловом спирте возрастающей концентрации и заключали в шоп (Уикли Б, 1975) Из полученных б токов готовили полу тонкие срезы толщиной 1 мкм, окрашивали голуидиновым голубым, изучат иод световым микроскопом и выбирали необходимые участки тканей для исследования в электронном микроскопе Из отобранного материала получали ультратонкие срезы толщиной 35-45 им на ультратомс ЬКВ-8800, кошрастировали насыщенным водным раствором уранилацетата (Уикли Ь, 1975), цитрашм свинца (ИсупоМьЕ 8 , 1963) и из}чали в электронном микроскопе ШМ 1010

Подготовку образцов органов, планирование и проведение морфометрических исследований, выполняли в соответствии с общепринятыми иршщипами и методами (Лвтаидилов Г Г, 1984, Непомнящих ЛМ. Лушникова ЕЛ, Непомнящих ГИ, 1986, Шкурупий В Л , Самойлов К С) , Верещагина 1 Н , 2001, \Veibel 1- К й а! , 1969, \Veibel Е К , 1979)

Сфуктуру компонентов кожи изучали и фотографировали в световом и электронном микроскопах При увеличении 4000 в электронном микроскопе фотографировали макрофати, фибробласлы, тучные клетки, эндотелиоциты

лимфатических и кровеносных микрососудов Фотографии с негативов печатали при увеличении 8000-10000

Морфометрию фибробластов кожи (по 30 клеток на каждую группу) проводили при конечном увеличении в 32000 раз с помощью закрытой тестовой системы с 144 точками Эндотелиоциты лимфатических капилляров (по 20 клеток на каждую труппу) морфомегрировали при конечном увеличении в 32000 раз с помощью многоцелевой открытой тестовой системы

Статистическую обработку резульыюв проводили с использованием программ Exccl и Statistioa Различия между сравниваемыми средними считали достоверными при р<0,05 (t-критерий Стыодсггга)

Результаты исследования и их обсуждение

1. Структурная организация кожи крыс интактпон группы.

В структуре кожи животных контрольной группы выявляли эпидермис, представленный слоем базалышх клеток, слоем шиповатых клеток и 2-3-мя слоями зернистых клеток, покрытых роговыми чешуйками Сосочковый слой кожи отличался наличием большого количества кровеносных и лимфатических капилляров Из клеток рыхлой неоформленной соединительной ткани здесь присутствовали фибробласты, одиночные макрофага, лимфоцшы, тучные клетки Межклеючное вещество было представлено пучками рагреженно расположенных коллатеповых и эластических волокон В сетчатом слое дермы наблюдали большое количество юлсшч ко-тлапенопых волокон, между которыми располатадиоь липоциты, фибробласты, тучные клетки, микрососуды, нервные волокна

Лимфатические капилляры имели узкие просветы, эндотелиоциты содержали небольшое количество органоидов и мелких микрониноциюлшх везикул, которые определялись как базалыгые, люмипальпые и цитоплазматические Выявляли контакты эндотелиоцитов типа интердигитаций, наложений и конец в конец

Гиподерма отличалась меньшей плотностью интерстиция, большим количеством клеточных элементов, чем коллагеновых и эластических волокон, развитой капиллярной сетью

Подлежащие мышечные волокна были представлены поперечнополосатой скелетной мышечной тканью Мышечные волокна располагались ITJTOTHO относительно друт друга При анализе структуры мышечного волокла в электронном микроскопе хорошо выявлялась поперечная исчерченнооть ткани

2. Структурная организация кожи крыс после термического ожога при спонтанном развитии ожоговой рапы

При морфологическом исследовании ожоговой рапы кожи при спонганном развитии раневого процесса выявляли образовавшийся коагуляционный некроз эпидермиса и дермы Коллагеновые волокна были склеены в грубые плотные тяжи Структура волосяных фолликулов была нарушена Через 3-е суток после ожога образовывался плотный ожоговый

8

струп, отмечали отек гиподермы, изменение ориентации котлагеповых волокон, наличие воспалительной ипфилмрапни, си; эритроцит он в кровеносных капиллярах Морфологические изменения наблюдали не только в глубоких слоях кожи, но и в мышечных волокнах, не подвергавшихся гипертермии при моделировании ожога Эли изменения выражались в нарушении с груш у ры волокон, возрастании ра'лтеров пространств между волокнами поперечно-полосатой скелетной мышечной ткани При этом нарушалась ультраструктурная организация миофибрилл

В структуре эндотелиоцшов кровеносных капилляров наблюдали набухание митохондрии и снижение содержания крист митохондрии Происходило расширение цистерн траиулярното )ндонла.машческого речикулума и комплекса I ольджи Уменьшалось количество ми1сропипоцитозт>1х везикул Все перечислеттые стру ктурные изменения свидетельствовали о набухании эндотелиоцитов кровеносных капилляров Перикапиллярное пространство также было в состоянии отека По-видимому, происходило возрастание проницаемости сосудистой стенки и накопление межтканевой жидкости

При термическом ожоге кожи лимфатические капилляры образовывали петли, их просвет*' были значительно расширены В цитоплазме клеток отмечали структу рные изменения, свидетельствующие о снижении .энергетической, синтетической и транспортной функции эндогелиоциюв Происходило набухание органоидов Нрг морфометрнческом авали ¡с эттдотетиоцитов лимфатических капилляров в прилежащих к области ожога участках кожи черс) 3-е су ток после термическом травмы бы то выяв тетю, что объемная плотность митохондрий возросла на 29%, а концентрация крист миIохопдрий уменьшилась на 45% Численные плошосш прикрепленных рибосом и свободных полисомальных рибосом сня «тлись на 50 и 45%, соответственно Объемная плотпоетт мембран гранулярного эпдоплазматического ретикулума возросло на 50% Меньшими стали обьемные плотности люминальных микрошпюциюзимч вешкул на 43%, базальных - 38% и цитоплазматических - 44% (рис 1) Перечисленные структурные признаки, являющиеся отражением набухания клеток, сохранялись на протяжении веет эксперимента Появились межэндотслиальныс контакты открытого типа Электронная плотность интсрстиция была меньшей, чем плотность просветов лимфатических капилляров, что, являюсь свидетельством отека тканей, нарушения оттока лимфы и лимфатическою дренажа 1каневото микрорайона

Состояние интсрстиция является определяющим для создания микроокружения, оптимального для функционирования клеток тканевого региона Нами были выявлены различия в утьтраструктурнои организации клеток эффекторов воспалешш - макрофагов и клеток, являющихся основными клеточными элементами, участвующими в восстановлении ожоговой травмы - фнбробластов В стру ктуре макрофагов отмечали значительное накопление лизосомальпых структур, что, вероятно, было связано с незавершенностью фагоцитоза, отмечаемой при ожоговой травме

9

Структура фиброб кц-тов через 7 суток после ожога отличалась значительно расширенными цистернами гранулярного эндоплазматического ретикулума, при этом его объемная плотность возрастала на 34%, снижением содержания прикрепленных и, особенно, свободных полисомальных рибосом, на 63 и 62%, соответственно, набуханием митохондрий и снижением содержания в них крист Всс наблюдаемые структурные изменения макрофагов и фибробластов косвенно свидетельствовали о снижении их фу пкциопалытои активности

Снижение интенсивности воспалительного процесса и развитие трануляциошюй гкани у животных со сиошаниым шкиплеиием ожоговой раны развивалось на 15-20-е сутки после ожога Полная эпителизация раненой поверхности иасту пала к 42 суткам эксперимента

Следовательно, после термического ожога кожи под ожоговым струпом происходили структурные изменения, свидетельствующие о возрастании проницаемости стенки кровеносных капилляров, нарушении лимфашческою дренажа снижения функциональной акхивноеш макрофаюв и фибробластов прилежащего к области ожога тканевого микрорайона кожи

3 Структ}рпая организация кожи крыс после термического ожога в условиях коррекции лимфашческою дренажа ожоюиой раны природным цеолиюч

В условиях коррекции лимфатическою дренажа ожоговой раны в виде аппликаций на ожоюную поверхность цеолилоиых кошейнеров, мере! 3-е суюк после ожота, при наличии некроза эпидермиса и дермы, в типодерме наблюдали юные и зрелые формы фибробластов с признаками активации цитоплазмы, а в ишерстиции возросло содержание коллатенош.гх волокон При этом ие отмечали дистрофических изменений в подлежащих мышечных волокнах В ультраструктурной организации эндотелиоцитов кровеносных капилляров отмечали признаки набухания клеток и снижения содержания цитоплазматических органоидов Перикапиллярное пространство было расширенным

Структура эндотелиоцитов лимфатических капилляров, прилежащих к ожоговой ране участков кожи претерпевала меньшие дистрофические изменения, чем при спонтанном течении раневого процесса Объемная шю 1 носпь -номинальных микроииноциюзных везикул снизилась на 33%, цшотша^матических - на 20%, а базальных - на 17% Концентрация крист митохондрий была снижена на 33% Это снижение было меньшим, чем значетпте соответствующего параметра у животных со спонтанным заживлением ожоговой раны Уменьшение численной плотности приьреплеш1ых рибосом составило 33%), а свободных полисомальных рибосом - 23% Использование аппликаций цеолитовых контейнеров оказывало некоторое протективное действие на структуру эндотелиоцитов лимфатических капилляров, способствуя их меньшему повреждению и поддержанию структурной целостности (рис 1)

Морфоме1рические исследования ультра структурно и организации фибробласлов выявили чю обьемная плотность митохондрий была

10

-увеличена на 50%, а концентрация крист снижена - на 28% Объемная плотность гранулярного эндоплазматического ретикулума была недостоверно выше контрольного уровня Па 55% снижалась численная плотность прикрепленных рибосом в клетке и на 33% - численная плотность свободных потисомальных рибосом Не изменялись объемная и численная плотности лизосом

В у словиях коррекции лимфатического дренажа ожоговой раны в виде аппликаций па ожоговую поверхность цеолитовых контейнеров, уже на 7-е сутки эксперимента под струпом отмечали активное развитие грануляционной исапи, в которой преобладали фибробласлы и макрофаги и практически отсутствовали нейтрофилы В подлежащей мышечной ткани пе наблюдали нарушения структуры мышечных волокон Наблюдали возрастание количества новообразованных кровеносных капилляров, отличающихся мелкими размерами и большим содержанием свободных рибосом в цито плазме Полная эпителизация раиевой поверхности происходила к 30-м су ткам эксперимент

Следовательно, использование аппликаций цеолитовых контейнеров на ожоговую рану кожи оказывало про юкхинное дейся вис на структуру лимфатических капилляров прилежащих к обласли ожота участков кожи, чго обу слон тикало коррекцию лимфатическою дренажа тканевою микрорайона, создавая благоприятные условия микроокружения для эффективного ра шишя ретепераюрпот о процесса

4. Структурная организация кожи крыс после термического ожога ко/кп в условиях лечения ожоговой рапы использованием мази «JIeiioMtKo.ii>»

В условиях примепештя аппликаций па ожоговую поверхность мази «Левомеколь», через 3-е суток после ожога также наблюдали некроз эпидермиса и дермы В гиподерме выявляли отек ткани и расширенные интерстициальные пространства В подлежащей мышечной ткани происходило нарушение структуры мышечных волокон При зтом возрастало содержание макрофагов и нейтрофилов В связи со значительным набуханием мышечных волокон, нарушалась их -ультраструктурная организация В структуре эндотслиоцитов кровеносных капилляров также обмечали признаки набухания клеток и снижение содержания ци тонлачма т ичееких орт аноидов

В структуре эндотелиоцитов лимфатических капилляров ожоговой рапы кожи животных, которым делали аппликации с использованием мази «Левомеколь», происходило набухание к ююк и снижение содержания цитоплазматических органоидов и микропииоцитозпых везикул Объемная плотность люминальпых микропииоцитозпых везикул снизилась па 43%, цшопла¡матичееких - на 33%, а баильных - на 21% Обьсмная плошость митохондрий была увеличена на 25% Концетрация крист митохондрий -снижена на 39% Это снижение было меньшим чем значение соответствующего параметра у животные со спонтанным заживлением ожоговой раны и более значительным, чем у животы*, получавших

11

Ц итопл азматические микропиноцитозные везикулы

зоИ 20 10 О

7г. НЛ 7с Ц Тс П 7с Ц+Ц

Прикрепленные рибосомы

7С НЛ 7д Ц 7сЛ 7с Ц+Ц

Концентрация крист митохондрий

3YSH\SVHap

<1 -3 2 1

3

?С НЛ 7с Ц 7е Л 7с Ц*Ц

Рис. I. CipyKiypa эндотелиоцитов лимфатическихштил.1йров кожи через 7 суток после термического ожога.

а- Объемная плотность цитоплазматичсских микропиноцитозных везикул (Vv - объемная плотность структур (% от объема цитоплазмы).

Б - Численная плотность прикрепленных рибосом (Ыа - численная плотность структур (число структур п тестовой площади I

ii Концентрация крист ми^нюндрий (Sv BEf/Sv нар соотношение между ионсрхностной плот ностью внутренней и наружной мембранами митохондрий).

К - контроль: 7cWl - 7 суток поело ожога без лечения; 7сЦ - 7 суток посла ожога -аппликации цсолитовьк контейнеров: 7cJI - 7 суток после ожога-аппликации мази «Левомекопь»; 7сЦ4 Ц 7 суток после ожога i аппликации цеолитов н пероральное использование цеолитов.

аппликации контейнеров с цеолитами Уменьшение численной плотности прикрепленных рибосом составило 44%, а свободных полиоомальиых рибосом - 33% Использование аппликации мази «Левомеколь» оказывало менее выраженное протективное действие на структурл эндотетиоцитов лимфатических капилляров, чем использование цеолитов

Морфомстрическис исследования у чырастру ктурнои организации фибробтаетов показали возрастание объемной плотность митохондрий на 50%, и снижение концентрация крисл па 56% Объемная плотность трану.тярнош эндо I хазмашческого решкулума бы та выше кошротыюто уровня на 52% На 58% снижалась численная плошоеть прикрепленных рибосом в кле1ке и яа 51% - численная плонгаоп. свободных полисочальных рибосом Не измени тись обьемная и численная плотности тизосом

Полная эпителизация раневой поверхности и при использовании аппликаций мази «Левомеколь» происходила г 30-м су пам эксперимента

Следовательно, при использовании аппликаций мази «Левомеколь» на ожоговую рану, не снижалась степень отека прилежащих тканей кожи, происходило нарушение сфуктуры мышечных волокон развивались дистрофические изменения эндотелиоцитов лимфатических и кровеносных капилляров, а также фибробластов Всс псрсчнс-лшшс изменения были менее выражены чем при спонтанном за ,л ив тении ожоговой раны, но большей степени, чем при нрименешш апшшкаций ц^о шюв

5. СI рук горная ор| ацизацпя кожи крыс после 1ермическо1 о ожо| а в условиях совместного пероралыюго н апптпкационпого использования цеолитов

В условиях энтеральпого использогания цеолита и коррекции лимфаIичеысого дренажа ожоговой раны природным цео тиюм, чере1 3-е су юк после ож«1а происходило, как и в ранее описанных труппах животных, формирование ожогового сфупа При этом при отеке па уровне гиподермы, пе отмечали дистрофических изменений в подлежащих мышечных волокнах В улырасфуктурной организации шдогелиоциюи кровеносных капилляров отмечали признаки набухания клеток и снижения содержания цитоплазматических органоидов

Нами было выявлено, что в структуре эндотелиоцитов лимфатических капилляров ожоговой раны животных, которым делали аппликации с исполъзованиех! щолитовых контейнеров и давали цеолиты в корм, происходило набухание клеток, но сохранялась их структурная целостность Не отмечали достоверных изменении в улыраетрук1урнои орт-анизация клеток по сравнению с только аппликационным использованием цеолитов Объемная плотность люминалъных микропипопитозпых везикул снижалась па 29%, цитоплазматических - па 22%, а базтлышх - па 21% Концентрация крист митохондрий была снижена на 30% Это снижение было меньшим, чем значение соответствующего параметра у животных со спонтанным заживлением ожоговой раны Уменьшение численной плотности прикрепленных рибосом составило 31%), а свободных полисомальпых рибосом - 22% (рис 1) Использование аппликаций цеолиговых контейнеров

13

в комплексе с пероральным использованием цеолитов оказывало протективное действие на структуру эндотелиоцитов лимфатических капилляров, способствуя их меньшему повреждению и поддержанию структурной целостности

Морфометрические исследования ультрастру ктурной организации фибробластов выявили недостоверное ■увеличение объемной птотности митохондрий Концентрация крист была снижена - на 28% Объемная плотность гранулярного эпдоплазматического ретикулума была недостоверно выше контрольного уровня На 38% снижалась численная плотность 1фикрепленных рибосом п клетке и на 26% - численная плотное и> свободных полисомальных рибосом Па 69% возрастала объемная плотность лизосом Полная эпителизация раневой поверхности происходила к 30-м суткам эксперимента

Таким образом, при совместном использовании аппликаций цеолитовых контейнеров на ожоговую рапу и цеолитов в составе корма, происходили менее выраженные дистрофические изменения эндотелиоцитов лимфатических, кровеносных капилляров и фибробластов тканевого микрорайона кожи, прилежащего к облай и ожота, но сравнению со спонтанным ранил нем раненого процесса и использованием аппликации мази «Лсвомсколь» В го же время не наблюдали достоверных изменений по сравнению с использованием только аншшкаций цеолитовых контейнеров

ВЫВОДЫ

1 Определены морфомстричсскис критерии структуры эндотелиоцитов лимфатических капилляров и фибробластов кожи в условиях нормы

2 После термической травмы в тканевом микрорайоне -кожи, прилежащем к об гасти ожога, развиваются структурные изменения, свидетельствующие о нарушении лимфатического дренажа и снижении функциональной активности макрофагов и фибробластов

а) происходит набухание эндотелиоцитов лимфатических капилляров снижение объемной плотности микропиноцитозных везикул численной плотности свободных и прикрепленных полисомальных рибосом, повышение электронной плотности шгтерстиция и просветов лимфатических капилляров

б) снижается концентрация цшоилазматических органелл в цитоплазме фибробластов

в) происходит избыточное накопление лизосом в макрофагах

3 Использование аппликаций цеолитовых контейнеров на ожоговую поверхность оказывает протективное действие на опдотелиоциты лимфатических капилляров прилежащих к ожоговой ране участков кожи, обусловливая их большую структурную целостность и эффективность дренажа тканевого микрорайона

4. Выявлена взаимосвязь между структурой эндотелиоцитов лимфатических капилляров и улырасгруктурной организацией

фибробластов и макрофагов тканевого микрорайона кожи, прилежащего к ожоговой ране

5 Ультрастру кгурная оргашхзация фибробластов является маркером эффективности развития раневого процесса после термического ожога кожи

6. Наиболее эффективным способом коррекции лимфатического дренажа в области ожоговой раны кожи и восстановления органа является совместное пероральпое и аппликационное применение природного мипералыгого сорбента - цеолита

Практические рекомендации

1 В целях повышения эффективности лечения термических ожогов кожи и профилактики послеожоговых осложнений, при разработке подходов к лечению данной патологии необходимо учитывать состояние лимфатического дренажа ожоговой раны

2 Целесообразно совместное аппликационное и пероральное использование сорбционных материалов в послсожо1 овом периоде

Список научных patío i, опубликованный по 1еме диссертации

1 Бородин Ю И , Бтаюва HII, Павленко С) Ю , Паничев Л M , Силкип С В , Гульков A H , Кокшарова В 11 Садыкока В С Викюрова Ю M Подходы к рсгу 1ЯЦИИ лимфатического дренажа в условиях паголоши // Metode de limfologie clínica ы reabililare endoecologica in pneumologie, fiziologie si terapie generala Chisinau, 2006 - Vol 2 - P 32-34

2 Бгатова H П , Пааленко О Ю , Макарова О П , Кокшарова В П , Паничев АМ, Силкин СВ, Скури дина ЕГ Структурно-функциональная характеристика клеток эффекторов воспаления при различных подходах к лечению ожоговой раны кожи // Морфолотия 2006 -Т 129 -№4-С 21

3 Павленко ОЮ, Бгатова IIП Паничев АМ, Гульков АII Особенности ультраструктурной организации фибробластов трану.тяционнои ткани при nono тьзовании раневого хюкрьпия «Литопласл» после термического ожота кожи// Современные проблемы па\ки и образования -2006 -№3 -С 29

4 Бородин К) И , Ьгатова HI1, Павленко ОЮ Кокшарова ВП Коррекция микроциркуптяторпьгх нарушении при ожоговой травме// Материалы II всероссийской научной конференции « Микропиркуляция в клинической практике^ Москва, 2006 - С 32-34

5 Бородин Ю И , Ьт-агова H 11, 1 [авлсш о О К) Кокшарова В 1 [, Шсдина В В Состояние микроциркуляторного русла различных органов при коррекции лимфатического дренажа ожоговой раны кожи // Тезисы международного симпозиума « Физиоготия и патология лимфатической системы» Алма-Аха, 2006 -С 10-12

и

6 Бородин Ю И , Ьгатова НII, Павленко О Ю , Папичев Л М, Силкин СБ, Гулькой АН, Кокшарова НИ Ультраструктура фибробластоа грануляционной ткани кожи - маркер эффективности лечения термического ожога Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии Белгород, 2006 -С 28

7 Павленко ОЮ, Бтаюна НП Влияние микроокружения на ультраструктурную организацию фибробластов грану ляционной ткани // Материалы Сибирског о съезда лимфологов с международным участием Новосибирск, 2006 - С 238-239 8

8 Павленко ОЮ, Бгатова НП, Макарова ОП, Рачковская ЛН, Садыкова ВС, Викторова Ю М Особенности улырасгруктурной организации фибробтасгов при различных поводах к лечению ожоговой раны кожи // Вестник Новосибирского 1 осударственного Университета Серия Биология, клиническая медицина 2006 -1 4 -№3 -С 53-58

Подписано к печати 22 12 Об формат - 60x84 - 1 печатный чист

Ь>мага офсетная Печать Duplo DP-43S Тираж 100 экз Номер заказа № 528 Типография ООО "ЮГУС ПРИНТ" i Новосибирск, у i Залссикого, 4