Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Структурная организация и каталитические свойства микросомальной гидроксилирующей системы

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Курченко, Владимир Петрович

ВВЕДЕНИЕ.б

ГЛАВА I. ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРОСОМАЛЬНОЙ ГИДРОКСИЛИРУЮ-ЩЕЙ СИСТЕМЫ (Обзор литературы)

§ I. Распространенность системы и ее функции

§ 2. Состав гидроксилирующей системы микросом печени и множественность форм цитохрома Р

§ 3. Механизм действия гидроксилирующей системы микросом печени

Постановка задачи.

ГЛАВА II. МЕТОДЫ ЭКСПЕРИМЕНТА

§ I, Исходные вещества

§ 2. Методы вьщеления микросом, цитохромов Р-450 ЛМг>, Р-450 ЛМ^, В^ и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы

1. Вьщеление микросом.

2. Вьщеление и очистка цитохрома Р-450 ЛМ^ из микросом печени кроликов получавших фенобарбитал натрия

3. Выделение и очистка цитохрома Р-450 ЛМ^ из микросом печени кроликов, получавших метилхолантрен

4. Вьщеление и очистка НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы

5. Вьщеление цитохрома В^.

§ 3. Иммунохимические методы

§ 4, Вьщеление фосфолипидов и получение липосом и протеолипосом

§ 5. Электрофоретические методы

§ 6. Кинетические методы.

§ 7. Ингибиторный анализ.

§ 8. Методы анализа

I. Химические методы.

-32. Спектральные методы.

§ 9. Методы характеристики реакций.

ГЛАВА III. СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ГИДРОКСИЛИРУЮЩЕЙ СИСТЕМЫ МИКРОСОМ ПЕЧЕНИ.

§ I. Характер взаимодействия НАДФН-цитохром Р-450 редук-тазы и цитохрома Р-450 JIMg.

1. Встраивание цитохрома Р-450 JIMg в микросомальные мембраны

2. Иммунохимическое изучение каталитической активности цитохрома Р-450 JIMg.

3. Реконструкция микросомальной гидроксилирующей системы, содержащей цитохром Р-450 ЛМ^.

§ 2. Каталитические свойства системы, включающей цитохром Р-450 ЛМ

1. Встраивание цитохрома Р-450 ЛМ^ в микросомальные мембраны.

2. Иммунохимическое изучение каталитической активности цитохрома Р-450 ЛМ4.

3. Сравнение каталитической активности цитохромов Р-450 ЛМ£ и Р-450 ЛМ^ в реконструированных системах.

ГЛАВА 1У. РОЛЬ ЦИТОХРОМА В5 В ОКИСЛЕНИИ АНИЛИНА И ДИМЕТИЛАНИЛИНА МИКРОСОМАМИ И РЕКОНСТРУИРОВАННШМ МИКРОСОМАЛЬ-НШИ СИСТЕМАМИ.

ГЛАВА У. РОЛЬ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА В ОКИСЛЕНИИ ДИ-МЕТИЛАНШШНА И АНИЛИНА.

§ I. Суперокисный анион как возможный активный агент при окислении диметиланилина цитохромом Р-450.

I. Ингибирующее действие соединений меди на окислительное деметилирование диметиланилина микросомами печени

-42. Ингибирующее действие соединений меди при окислении диметиланилина гидроперекисью кумила с участием цитохрома Р

§ 2. Вклад радикальных реакций в окисление диметиланилина и анилина с участием цитохрома Р

Введение Диссертация по биологии, на тему "Структурная организация и каталитические свойства микросомальной гидроксилирующей системы"

В организмы человека и животных постоянно поступают чужерод

ТА тае вещества окружающей среды. К их числу относятся лекарственные зредетва, пестициды, канцерогены, пищевые и косметические добавки i т.д. Метаболизм всех этих соединений является важнейшим звеном химической защиты организма. Превращения ксенобиотиков направлены т увеличение полярности молекул, уменьшение их растворимости в ли гадах и скорейшее выведение из организма. Ключевую роль в метабо-шзме инародных соединений и эндогенных субстратов играет микросо сальная мультиферментная гидроксилирутощая система печени, содержа \ая в качестве терминальной оксидазы цитохром Р-450. Для успешной юрьбы с отравлениями этими веществами необходимо знание молекуляр [их механизмов окисления ксенобиотиков в организме. Перед современ [ой фармакологией и эндокринологией стоит проблема регуляции мета юлизма стероидных гормонов, в котором также принимает участие ци 'охром Р-450. Кроме того, исследование цитохром Р-450-зависимых !истем необходимо для разработки общей теории монооксигеназного :атализа.

Широкое распространение гидроксилирующей ферментной системы [ большой круг реакций, катализируемых ею, обусловили повышенный [нтерес к ней ученых разных специальностей. Цитохром Р-450, как (читают специалисты, является в настоящее время одним из наиболее •.зучаемых ферментов. Его исследования интенсивно ведутся в ряде ла |ораторий СМ, Швеции, Японии, ФРГ, ГДР и других странах. В СССР -силия научных учреждений, изучающих механизм действия гидроксили >ующих систем, объеденены Всесоюзной исследовательской программой Цитохром Р-450" и "Гидроксилаза".

Прошло более 20 лет со времени открытия цитохрома Р-450, но :есмотря на большие достижения в изучении свойств компонентов и механизма действия микросомальной гидроксилирующей системы, остается нерешенным ряд важных вопросов. Во-первых, не выяснена структурная организация мультиферментной гидроксилирующей системы макросом Литературные данные свидетельствуют о двух возможностях ее организации: с одной стороны, предполагается существование жестко-органи зованных "кластеров", состоящих из НАДШ цитохром P-45G редуктазы, цитохрома Р-450 и фосфолипидов; с другой стороны, возможна латераль *ая подвижность компонентов мультиферментной системы мжросомально ?о гидроксилирования в мембране. Экспериментальные данные, получен ше нами, доказывают, что цитохромы Р-450 Mg и Bg обладают высо-сой латеральной подвижностью в микросомах печени. Во-вторых, цито-сром Р-450 существует в виде разных форм с различной субстратной шецифичностыо. Нами впервые показана инертность цитохрома Р-450 при окислении диметиланилина и анилина в отличие от цитохрома 3-450 JIMg, окисляющего оба субстрата с высокими скоростями. С при-юнением биоспецифического ингибиторного анализа антителами к цито :рому Р-450 JIMg нами показано, что эта форма гемопротеида на Ю% >пределяет окисление диметиланилина и анилина микросомами печени :ролика. В-третьих, остается открытым вопрос об участии цитохрома ig в восстановлении цитохрома Р-450 вторым электроном. Наши данные называют на сложный характер влияния цитохрома Bg в процессах жисления. Роль цитохрома Bg определяется несколькими факторами: :риродой цитохрома Bg и окисляемого субстрата, а также природой ци 'охрома Р-450. B-четвертьк, не установлена природа гидроксилируто-рах агентов. Нами доказана неспособность суперокисного аниона окис сить диметиланилин. Показано, что деметилирование диметиланилина дет радикальным путем при его окислении микросомами, реконструиро ;анными сиотемами и очищенным цитохромом Р-450 JMg и гидроперекисью умила.

Полученные результаты игле ют практическое значение. Работа выполнена в рамках Всесоюзных исследовательских программ "Цитохром Р-450" и 'Тидроксилаза" и плановой темы, утвержденной Государствен зым комитетом СССР по науке и технике (J£ Госрегистрадии 81003788). 3 ней даны рекомендации по тестированию реакционной способности лекарственных соединений, содержащих третичный азот простыми сис-гемаш, содержащими цитохром Р-450 или другой гемопротеид в сочета ши с гидроперекисями. Материалы диссертации использованы в монографиях Д.И. Метелицы "Активация кислорода ферментными системами", L: Наука, 1982, 256 с. и "Моделирование окислителъно-восстановитель 1ых ферментов", Минск: Наука и техника, 1984, 293 с.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Организация мультиферментной гидроксилирующей системы мик-росом печени.

2. Субстратная специфичность форм цитохрома Р-450 ffi/lg и Р-450 микросом печени кроликов.

3. Выяснение роли цитохрома Bg в окислении анилина и диметил-шилина в разных системах, содержащих цитохром Р-450.

4. Изучение возможного участия суперокисного аниона и кислород юдержащих радикалов в окислении диметиланилина и анилина в разных !истемах, включающих цитохром Р-450 и другие компоненты монооксиге сазного комплекса.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Курченко, Владимир Петрович

выводы

1. Доказана высокая латеральная подвижность цитохромов Р-450 Ж2, Р-450 ЛМ4 и Bg в микросомах печени с использованием встраивания белков в мембраны, кинетики окисления анилина и ди-метиланилина и иммунохимического анализа.

2. Высокоочищенные цитохромы Р-450 М2 и Р-450 ЛМ4 имеют различные спектральные, электрофоретические, иммунохимические и каталитические свойства.

3. С помощью высокоспецифичных антител к цитохрому Р-450 ЛМ2 показано, что эта форма цитохрома на 80% определяет окисление диметиланилина и анилина микросомами печени кроликов, получавших индукторы и не получавших их.

4. Участие цитохрома В5 в окислении диметиланилина и анилина определяется: а) природой цитохрома В^ и субстрата, б) свойствами цитохрома Р-450.

5. На основании характера ингибирующего действия солей и комплексов двухвалентной меди на процесс окисления диметиланяли на микросомами и очищенным цитохромом Р-450 ЛМ2 доказано, что суперокисный анион не является окисляющим агентом по отношению к диметиланилину.

6. С применением ингибиторов радикальных процессов показано, что радикалы участвуют в превращении диметиланилина и анили на при их окислении микросомами, реконструированной системой и очищенным цитохромом Р-450 ЛМ2 в сочетании с природными кофакто рами и гидроперекисью кумила.

-1587. Упрощенная система, содержащая гемопротеид и гидроперекиси, может быть применена для тестирования окисляемости третич ных аминов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Решение сложных вопросов структурной организации микросомальной гидроксилирующей системы, субстратной специфичности цитохромов Р-450 ЛМг, и Р-450 ЛМ^, транспорта электронов на цитохром Р-450, а также установление механизма активации молекулярного кислорода требует применения разнообразных методов исследования. Полученные нами количественные кинетические данные по каталитической активности встроенных очищенных микросомальных белков в мембраны и реконструкции гидроксилирующей системы, а также инги-биторный анализ с применением моноспецифичных антител, солей и комплексов меди и антиоксидантов свидетельствуют о большой информативности этих методов при решении поставленных в настоящей работе задач.

Полученные нами результаты по обогащению микросом очищенными цитохромами Р-450 Mg, Р-450 ЛМ^ и В^ подтверждают гипотезу о высокой латеральной подвижности всех компонентов гидроксилирующей системы в мембране микросом. Встроенный в микросомальные мембраны цитохром Р-450 ЛМ^ оказался кинетически неотличимым от содержащегося в микросомах гемопротеида, т.е. включенный и нативный цитохром Р-450 восстанавливается НАДФН-цитохром Р-450 редуктазой с одинаковой скоростью, зависящей от подвижности компонентов гидроксилирующей системы в мембране. Включение в микросомальные мембраны цитохрома Р-450 ЛМ^ приводит к уменьшению скорости окисления ДМА и анилина, что связано с неспособностью высокоспиновой формы Р-450 ЛМ^ принимать участие в реакциях окисления использованных субстратов. Включение в мембраны цитохрома Bg приводит к уменьшению скорости окисления ДМА и анилина, что свидетельствует о способности встроенного цитохрома В^ получать электроны от НАДФН-Р-450 редуктазы и отсутствии их транспорта на тройной комплекс "АН - Р-450 - 02". Включенный в микросомальные мембраны цитохром В5 обладает высокой подвижностью, позволяющей ему взаимодействовать с НАДФН-Р-450 редуктазой и восстанавливаться, что приводит к непродуктивному для процесса гидроксилирования расходованию восстановительных эквивалентов редуктазы.

Возможность свободной диффузии в мембране компонентов гид-роксилирующей системы микросом печени подтверждена также нашими и литературными данными по каталитической активности реконструированных систем с участием цитохрома Р-450 ЛМ2 и имцунохимичес-кими исследованиями.

Нами проведено сравнительное исследование спектральных, электрофоретических, иммунохимических и каталитических свойств цитохромов Р-450 ЛМ2 и ЛМ^. Доказано различие в спектральных свойствах форм Р-450 ЛМ2 и Р-450 ЛМ^. Выделенный нами цитохром Р-450 ЛМ^ находится в высокоспиновой, а Р-450 ЛМ2 — преимущественно в низкоспиновой форме. Электрофоретические свойства Р-450 ЛМ2 и Р-450 ЛМ^ в присутствии додецилсульфата натрия также сильно отличаются. Использование моноспецифичных антител к обеим формам цитохрома Р-450 показало их иммунохимические различия. Доказаны различия в субстратной специфичности форм Р-450 ЛМ2 и ЛМ^.

Нами получены и очищены моноспецифичные антитела к цитохро-мам Р-450 ЛМ2 и Р-450 ЛМ^. Отсутствие перекрестной иммунопреци-питации между этими антителами и другими компонентами гидроксили-рующей системы микросом печени позволило использовать антитела как биоспецифические ингибиторы в реакциях окисления ДМА и анилина контрольными, ФБ- и МХ-микросомами в полной и гидроперекисной системах. Ингибиторный анализ с применением моноспецифичных антител позволил оценить индивидуальный вклад цитохромов Р-450 ЛМ2 и Р-450 ЛМ^ в окисление использованных субстратов микросомами печени. Показано, что в отличие от Р-450 JIM^, цитохром Р-450 ЛМ4 каталитически инертен в окислении ДМА и анилина микросомами, реконструированными системами и в растворе с участием полной и гид-роперекисной систем.

Для изучения роли цитохрома В^ в транспорте электронов на цитохром Р-450 было проведено систематическое кинетическое исследо' вание влияния цитохрома В^ на окисление микросомами печени и реконструированными системами двух субстратов - ДМА и анилина. Показан синергистический эффект в действии двух пиридиннуклеотидов — НАДФН и НАДН - только для субстрата I типа — ДМА. Встроенный в микросомальные мембраны цитохром В^ не влияет на эффективность си-нергистического действия НАДФН и НАДН, в то время как эндогенный цитохром В^ участвует в окислении ДМА. Встроенный цитохром В^ ин-гибирует окисление ДМА и анилина, получая электроны от НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы и непродуктивно расходуя их. Введение цитохрома Bg в реконструированные системы вызывает уменьшение скорости окисления ДМА. Таким образом, влияние цитохрома В^ на процессы окисления ДМА и анилина определяется несколькими факторами: природой окисляемого субстрата и цитохрома Bg, свойствами цитохрома Р-450, зависящими от индуктора, способа реконструкции и типа используемых липидов.

Для изучения природы гидроксилирующих агентов в микросомальной системе нами использованы ингибиторы, селективно удаляющие из реакционной среды определенные формы активированного кислорода.

Для выяснения возможности непосредственного участия суперг окисного аниона 0^ в окислении ДМА использовали соли и соединения двухвалентной меди, обладающие супероксид-дисмутазной активностью. Нами доказано, что ингибирующее действие комплексов меди в полной системе объясняется увеличением диссоциации тройного комплекса

2+ *

АН - Ге - Og" в сторону 0£ , что ведет к снижению концентрации восстановленного тройного комплекса и к уменьшению скорости деметилирования ДМА. Соли и комплексы меди разрушают цитохром Р-450. й

Сам суперокисный анион 0£ не способен окислить ДМА. Ингибирующее действие соединений двухвалентной меди в гидроперекисных системах связано с разрушением цитохрома Р-450 под влиянием хлорида меди и свободных радикалов, образующихся при взаимодействии гидроперекиси с комплексами меди.

Вклад радикальных реакций в микросомальное окисление ДМА и анилина мы оценили с помощью антиоксидантов — маннитола и 1-наф-тола. Полученные нами данные позволяют утверждать, что окисление ДМА происходит, в основном, по радикальному (одноэлектронному) механизм/. Природа радикалов в полной и гидроперекисной системах различна, но в обеих системах I-нафтол взаимодействует с ними, что объясняет сходный сложный тип ингибирования.

Легкость одноэлектронного окисления третичных аминов, к числу которых относится множество лекарственных соединений, позволяет использовать для оценки их реакционной способности в упрощенную систему, состоящую из цитохрома Р-450 и гидроперекисей. Труднодоступный цитохром Р-450 в этой системе можно заменить на другие гемопротеиды — цитохром С, пероксидазу — или просто гемин, которые генерируют радикалы из органических гидроперекисей. Таким образом, тестирующие системы для оценки реакционной способности третичных аминов могут вместо дорогого кофактора — НАДФН — содержать доступные гидроперекиси, а вместо дорогого катализатора — цитохрома Р-450 — его доступные аналоги — цитохром С, пероксидазу или гемин. Мы предлагаем схему упрощенного устройства тестирующего третичные амины:

Такая тестирующая система, включающая иммобилизованный гемо-протеид или его простой аналог и спектрофотометрический анализатор альдегидов, позволит быстро и с высокой точностью характеризовать in vitro реакционную способность множества третичных аминов, потенциальных биологически активных веществ с целью характеристики их способности деалкилироваться под влиянием цитохрома Р-450.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Курченко, Владимир Петрович, Минск

1. Леви А., Сикевиц Ф. Структура и функция клетки. М.: Мир, 1971, 583 е.

2. Bielka Н. Endoplasmatisches Retikulum und Ergastoplasma. In: Molekulare Biologic der Zelle. /Ed. H. Bielka. Stuttgart: Fiscker, 1969, p. 399-432.

3. Арчаков А.И. Микросомальное окисление. M.: Наука, 1975, 327 с.

4. Ляхович В.В., Цырлов И.Б. Структурные аспекты биохимии монооксигеназ. Новосибирск: Наука, 1978, 238 с.

5. Метелица Д.И. Активация кислорода ферментными системами. М.: Наука, 1982, 254 с.

6. Головенко Н.Я. Механизмы реакций метаболизма ксенобиотиков в биологических мембранах: Киев: Наукова думка, 1981, 219 с.

7. Действие физиологически активных соединений на биологические мембраны. /Ред. Л.А. Пирузян, И.Б. Паверная. М.: Наука, 1974, 102 с.

8. Номенклатура ферментов. /Ред. А.Е. Браунштейн. М.: ВИНИТИ, 1979, 320 с.

9. Mannering L.I. Hepatic cytochrome P-450 linked drug-metabolizing systems. In: Concepts in Drug Metabolism, Part B. /Ed. S.P. Ienner and B. Testa. N.Y.:Marcel Dekker, 1981, p. 54-147.

10. Serabjit-Singh G.I., Wolf G.R.M., Philpot R. The rabbit pulmonary monooxygenase system. Immunochemical and biochemical characterization of enzyme components. J. Biol. Chem., 1979, v. 254, 19, p. 9901-9907.

11. Jones D.P., Grafstrom R., Orreniuss S. Quantition of hemoproteins in rat small interestinal mucosa with identification of mitochondrial cytochrome P-450. J. Biol. Chem., 1980, v. 255, № 6, p. 2383-2390.

12. Sasame H.A., Ames M.M., nelson S.D. Cytochrome P-450 and NADPH cytochrome С reductase in rat brain: formation of catechols and reactive catechol metabolites» Biochem. Biophys. Res. Commun., 1977, v. 78, 3, p* 919-926.

13. Ahokas J,T, Cytochrome P-450 and mixed function oxidase of trout, Salmo truttu lacustris, With spesial reference to aromatic hydrocarbon hydroxylase. Acta univ, ouluen., 1977, D, № 20, p. 53-Ю5.

14. Brattsten L,B,, Price S.L., Gunderson C.A. Microsomal oxidases in midgut and fatbody tissues of a broadly herbivorous insect larva, Spodoptera eridania Cramer (Hoctuidae). Сотр. Biochem. and Physiol., 1980, С 66, 2, p. 231-237.

15. Yoshida Y., Aoyama Y., Kumaoka H., Kubota S. A.highly purified preparation of cytochrome P-450 from microsomes of ana erobically grown yeast. Biochem. Biophys. Res, Communs, 1977, v. 78, 3, p. 1005-1010.

16. Chem., 1973, v. 248, № 7, p. 2630-2633.

17. Reichhart D., Salaun J.P., Benveniste I., Durst P. Induction by manganese, ethanol, phenobarbital, and herbicides of microsomal cytochrome P-450 in higher plant tissues. Arch. Biochem. Biophys., 1979, v. 196, № 1, p. 301-309.

18. Salaun J.P., Benveniste I., Reichhart D., Durst P. A microsomal (cytochrome P-450)-linked lauric-acid-monooxygenase from aged Jerusalem-artichoke-tuber tissues. Eur. J. Biochem., 1978, v. 90, № 1, p. 155-159.

19. Иноземцева И.A., Me лик-Саркисян С.С., Кретович В.JI. Гете рогенность цитохрома Р-450 бактероидов Rhizobium lupini. Докл. АН СССР, 1978, т. 240, № 6, с. I468-I47I.

20. Кретович В.Л., Чернядьева И.Ф., Мелик-Саркисьян С.С. -В^-коэнзим и легоглобин в клубеньках люпина в процессе вегетации и в связи с эффективностью сембиоза. 1 Биохимия, 1972, т. 37, № 3, с. 548-555.

21. Raw I., Rockwell P. Effect of a single dose of inducers and inhibitors on the rate of synthesis of cytochromes and reductases in liver organelles. Moll. Cell. Biochem., 1979, v. 28, № 1, p. 7-16.

22. Jarasch E.-D., Bruder G. The significance of cytochromes in cell surface membranes. Eur. J. Cell. Biol., 1980, v.-16322, № 1, p. 270-275.

23. Ахрем A.A., Василевский В.И., Марцев С.П., Шкуматов В.М., Чащин В.Л. Различия в структурной организации цитохромов Р-450из митохондрий коры надпочечников быка и их ориентация в мембране митохондрий. Докл. АН СССР, 1980, т. 252, № 3, с. 751-754.

24. Churchill P.P., Kimura Т. Topological studies of cytochrome £-450scc and. P-4501 ^ in bovine adrenocortical inner mitochondrial membranes. Effect of controlled tryptic digestion.- J. Biol, Chem., 1979, v. 254, № 20, p. 10443-10448.

25. Frommer U., Ullrich V., Orrenius S. Influence of inducers and inhibitors of the hydroxylation pattern of U-hexane in rat liver microsomes. FEBS Lett., 1974, v. 41, p. 14-16.

26. Frommer U., Ullrich V., Staudinger H. Hydroxylation of aliphatic compounds by liver microsomes. Naunys-Schmiedeberger1s Arch. Pharmacol., 1970, v. 266, № 2, p. 328-329.

27. Hamberg M., Bjorkhem J. -oxidation of fetty asids. -J. Biol. Ghem., 1971, v. 246, № 24, p. 7411-7418.45» Bjorkhem J., Hamberg M. On the rete-limiting step in -hydroxylation of lauric acid. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1972, v. 47, № 2, p. 333-340.

28. Dorfman R.I., Ungar P. Metabolism of steroids hormones. New York: Academic Press, 1965, p. 386.

29. Danielsson H. Mechanism of Bile Acids Biosynthesis. -In: The Bile Acids. New York: Plenum Press, 1973, № 2, p. 12.

30. Brodie B.B., Gillette I.R., Ladu B.N. Enzymatic metabolism of drugs and other foreing compouds. Ann. Rev. Biochem., 1958, v. 27, № 3, p. 427-432.

31. Ziegler D.M., Pettit F.H. Microsomal 'oxidases. 1. The isolation and dialkylanylamine oxygenase activity of pork liver microsomes. Biochemistry, 1966, v. 6, № 2, p. 2932-2938.

32. Hlavica P., Hulmann S. Studies on the mechanism of hepatic microsomal N-oxide formation. Biochem. J., 1979» v. 182, № 1, p. 109-116.

33. Sugiyama T. , Miki N. , Yamano Т. 1ШШ- and NADPH-depen-dent reconstituted p-nitroanisole O-demethylation system containing cytochrome P-450 with high affinity for cytochrome b^.

34. J. Biochem., 1980, v. 87, № 5, p. 1457-1467.

35. French J.S., Coon M.J. Properties of NADPH-cytochrome P-450 reductae purified from rabbit liver microsomes. Arch.

36. Biochem. Biophys., 1979, v. 195, № 2, p. 565-577.

37. Black S.D., French J.S., Williams C.H., Coon M.J. Role of a hydrophobic polypeptide in the N-terminal region of NADPH-cytochrome P-450 reductase in complex formation with P-450 Ш. -Biochem. Biophys. Res. Commun., 1979, v. 91, № 4, p. 1528-1535.

38. Lumper L., Basch P., Dzelic S., Henning J., Lazar T.

39. Iyanagi T., Makino R., Anan F.K. Studies on the microsomal mixed-function oxidase system: mechanism of action of hepatic NADPH-cytochrome P-450 reductase. Biochemistry, 1981, v. 20, № 7, p. 1722-1730.

40. Vermilion J.L., Ballou D.P., Massey V., Coon M.J. Separate roles for FMN and PAD in catalysis by liver microsomal NADPH-cytochrome P-450 reductase. J. Biol. Chem., 1981, v. 256, № 1, p. 266-277.

41. Арчаков А.И., Бачманова Г.И., Изотов М.В., Кузнецова Г.П, Восстановление микросомальных гемопротеидов суперокисным радикалом, образующимся на NADPH-специфичном флавопротеиде. -Биохимия, 1979, т. 44, № II, с. 2026-2032.

42. Gibson G., Cinti D., Sligar S.G., Schenkman J.B. The effect of microsomal fatty asids and other lipids on the spinstate of partially purified cytochrome P-450. J. Biol. Chem.,-1681980, v. 255, № 5, p. 1867-1873.

43. Misselwitz R., Rein H., Ristau 0», Janig G.-R., Zir-wer D., Ruckpaul K. Analysis of the spin equilibrium of cytochrome P-450 in the presence of warious substrates. Stud, bio-phys., 1980, v. 79, № 1, p. 165-166.

44. Tamburini P.P., Gibson G., Gordon J. Mammalion cytochrome P-450: spin state modulation of the electrophoretically homogeneous hemoprotein by substrate and membrane components. -Biochem. Soc. Trans., 1981, v. 9, № 12, p. 250.

45. Yochida Y., Kumaoka H. Studies on the substrate-induced spectral change of cytochrome P-450 in liver microsomes. J. Biochem., 1975, v. 78, № 3, p. 455-468.

46. Coon M.J., Chiang Y.L., French J.S. Chemical characterization of the enzymes involved in drug metabolism. In: The induction of drug metabolism (Estabrook R.W., Lindenlaub E., eds). Stuttgart - N.Y., Schattauer, 1979, p. 201-211.

47. Guengerich F.P. Comparison of highly purified microsomal cytochromes P-450 and NADPH-cytochrome P-450 reductases by peptide mapping. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1978, v. 82, № 3, p. 820-827.

48. Dean W.L., Coon M.J. Immunochemical studies on two electrophoretically homogeneus forms of rabbit liver microsomal cytochrome P-450: P-450 LM2 and P-450 LM^. J. Biol. Chem., 1977, v. 252, № 10, p. 3255-3261.

49. Levin W., Thomas P.E., Reik L., Bresnick E. , Ryan D.E. Characterization and regulation of rat liver microsomal cytochrome P-450. Biochem. Soc. Trans., 1981, v. 9, № 2, p. 95*

50. Lu A.Y.H., West S.B. Multiplicity of mammalian microsomal cytochrome P-450. Pharmacol. Rev., 1979, v. 31, № 4, p. 277-295.

51. Rukpaul K., Rein H., Blanck J., Ristau 0., Coon M.J. Molecular mechanisms of interactions between phospholipids andliver microsomal cytochrome P-450 LMg. Stud, biophys., 1980, v. 78, № 1, p. 150-160.

52. Noshino M., Omura T. Immunochemical study of electron transport from NADH to cytochrome P-450 of liver microsomes. -J. Biochem., 1978, v. 83, № 1, p. 61-77.

53. Blank J., Rohde K., Ruckpaul K. Kinetic of elementary steps in the cytochrome P-450 reaction seqence. Pharmazie, 1978, B. 33, H. 6, S. 321-332.

54. Ristau 0., Rein H., Janig G.-R., Ruckpaul K. Quantitative analysis of the spin equlibrium of cytochrome P-450 LM-2 liver microsomes. Biochem. Biophys. Acta, 1978, v. 536, № 1, p. 226-234,

55. Sligar S.G., Cinti D.L., Gibson G.G., Schenkman J.B. Spin state control of the hepatic cytochrome P-450 redox potential. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1979, v. 90, № 3, P# 925-932.

56. Oprian D.D., Yatsis K.P., Coon M.J. Kinetics of reduction of cytochrome P-450 Ш-4 in a reconstituted liver microsomal enzyme system. J. Biol. Chem., 1979, v. 254, № 18, p. 8895-8920.

57. Bakes W.L., Sligar S.G., Schenkman J.B. Cytochrome P-450 reduction exhibits burst kinetics. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1980, v. 97, № 3, p. 860-867.

58. Bonfils C., Debey P., Maurel P. Highly purified microsomal P-450: the oxyferro intermediate stabilized at low temperature. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1979» v. 88, № 4, p. 1301-1307.

59. Bonfils C., Andersson K.K., Maurel P., Debey P. Cytochrome P-450 oxygen intermediators and reactivity at subzero temperatures. J. Mol. Catal., 1980, v. 7, № 2, p. 209-308.

60. Guengerich P.P., Ballou D.P., Coon M.J. Spectral intermediates in the reactions of oxygen with purified liver microsomal cytochrome P-450. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1976, v. 70, № 3, p. 951-956.

61. Estabrook R.W., Kawano S., Werringloer J., Kuthan H., Tsuji H., Graf H., Ullrich V. Oxycytochrome P-450: its breakdown to superoxide for the formation of hydrogen peroxide. -Acta biol. et med. germ., 1979, H. 2-3, p. 423-432.

62. Bonfils C.M.P. Comparative studies on the oxyferrous intermediate of highly purified cytochrome P-450 Ш2 and ЬМ^. Biochem. Soc. Trans., 1981, v. 9, № 2, p. 285.

63. Ingelman-Sundberg M., Edvardsson A.-L., Holmqwist A., Malmberg K. Factors affecting electron transport to cytochrome P-450 and b^ in reconstituted liposomes. Biochem. Soc. Trans., 1981, v. 9, № 2, p. 117.

64. Jonnson I., Schenkman J.B. Influences of substrates of different microsomal electron transfer pathways on the oxidation-reduction kinetics of microsomal cytochrome b^. Arch. Biochem. Biophys., 1978, v. 185, № 1, p. 251-261.

65. Sligar S.G., Kennedy K.A., Pearson D.C. Chemical mechanisms for cytochrome P-450 hydroxylation: evidence for acyla-tion of heme-bound dioxygen. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. Phys. Sci., 1980, v. 77, № 3, p. 1240-1244.

66. Adams P.A., Berman M.C. The participation of both 0.^ and HOg species in the haemin-catalysed para-hydroxylation of aniline. J,Chem. Soc. Chem. Commun., 1979, № 19, p. 856-858.

67. Карузина И.И., Бачманова Г.И., Изотов М.В., Осипов А.Н., Вереница А.И. Исследование механизма ингибирующего действия медьтирозинового комплекса на гидроксилазные реакции. Биохимия, 1981, т. 46, № ю, с. 1754-1760.

68. Румянцева Г.В., Вайнер JI.M. Взаимодействие комплекса С и( ЗУ s) ^ с nadpff-зависимой микросомальной цепью переноса электронов и микросомальной мембраной. Биохимия, 1982, т. 47, № б, с. 921-930.

69. Ахрем А.А., Еремин A.H., Усанов С.А., Метелица Д.И. Многофазный характер кинетики деструкции цитохрома Р-450 в микросомальной, ЛМ-2- и JIM-4-формах в реакции с гидроперекисью кумила. Биофизика, 1980, т. 25, № I, с. 75-81.

70. Estabrook R.W. Cytochrome Р-450 its function in the oxidative metabolism of drugs. - In: Handbook of Experimental Pharmacology. /Broge B.B., Gillette J.R., eds. N.Y. - Heidelberg, Springer-Verlag, 1971, p. 264.

71. Ito A. Evidence obtained by cathepsin digestion of microsomes for the assemby of cytochrome b^ and its reductase in the membrane. J. Biochem., 1974, v. 75, № 4, p. 787-793.

72. Tajima S., Mihara K., Sato R. Two-domain structure of microsomal reduced nicotinamide adenine dinucleotide- cytochrome b^ reductase. Arch. Biochem. Biophys., 1979, v. 198, № 1, p. 137-144.

73. Inoko Y. Mode of binding of cytochrome b^ to phospholipid bilayers in lamellar structure. Biochem. Biophys. Acta, 1980, v. 599, № 2, p. 359-369.

74. Omura T. Cytochrome P-450 linked mixed function oxidase turnover of microsomal components and effect of inducers on the turnover phospholipids, proteins and specific enzymes. -Pharm. and Ther., 1980, v. 8, № 3, p. 489-499.

75. Rogers M.J., Strittmatter P. The binding of reduced nicotinamide adenin dinycleotide-cytochrome b^ reductase to hepatic microsomes. J. Biol. Chem., 1974, v. 249, № 17, p. 5565-5569.

76. Okada Y., Omura T. Synthesis and turnover of microsomal and mitochondrial NADH-cytochrome b reductase in rat liver.-175

77. J. Biochem., 1978, v. 83, № 4, p. 1039-Ю48.

78. Ullrich S.H., Bernhard P., Pop H. Immunohistological studies on the distribution of cytochrome b^ reductase in rat liver. Hoppe-Seylers Z. Physiol. Chem., 1978, v. 359, № 4, p. 489-497.

79. Kuriyama Y., Omura T#, Siekevitz P., Palade G.P. Effect of phenobarbital on synthesis and degradation of the protein components of rat liver microsomal membranes. J. Biol. Chem., 1969, v. 244, № 8, p. 2017-2026.

80. Omura T. Biosynthesis and drug-induced increase of microsomal enzymes. In: The Induction of Drug Metabolism. /Es-tabrook R.W., Lindenlaud E., eds. Stuttgart - N.Y., Schattauer, 1979, p. 161-175.

81. Miwa G., Cho A.K. Stimulation of microsomal N-demethy-lation by solubilized UADPH-cytochrome С reductase. Life Sci., 1976, № 18, p. 983-988.

82. Snura М., Fujk-Kuriyama Y., Tashiro Y. Immunoelectron microscope localization of cytochrome P-450 on microsomes and other membrane structures of rat hepatocytes. J. Cell. Biol., 1978, v. 78, 11° 2, p. 503-519.

83. Современные методы в биохимии. /Ред. В.Н. Орехович. М.: Медицина, 1979, с. 391.

84. Ахрем А.А., Усанов С.А., Еремин А.Н., Метелица Д.И. Выделение и очистка разных форм цитохрома Р-450 из микросом печени кроликов, индуцированных фенобарбиталом. Докл. АН БССР, 1978,т. 22, № 9, с. 839-842.

85. Mazin A.L., Salimova G.E., Vanyushin В.P. Granulated hydroxyapatite: preparation and chromatographic properties. -Analitical Biochemystry, 1974, v. 61, № 1, p. 62-69.

86. Ouchterlony 0. Antigen-Antibody Reaction in Cels. -Acta Path. Microbiol. Scand., 1953, v. 32, № 2, p. 231-240.

87. Van der Hoeven T.A., Haugen D.A., Coon M.J. Cytochrome P-450 purified to apparent homogenity from rabbit liver microsomes: catalytic activity and other properties. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1974, v. 60, № 2, p. 569-575.

88. Hashimoto-Yutsudo C., Imai Y., Sato R,, Multiple forms of cytochrome P-450 purified from liver microsomes of PB- and 3-MeCh-preteated rabbits. II. Spectral properties. J. Biochem., 1980, v. 88, № 2, p. 505-516.

89. Еремин A.H., Усанов С.А., Метелица Д.И., Ахрем А.А. Спектральные параметры взаимодействия высокоочищенных форм цитохрома Р-450 ЛМ-2 и Р-450 JIM-4 с различными лигандами. Био-органич. химия, 1980, т. 6, № 5, с. 757-764.

90. Yaung-Ling Chiang, Coon M.J. Comparative study of twohighly purified forms of liver microsomal cytochrome P-450: circular dichroism and other properties. Arch. Biochem. Biophys., 1979, v. 195, № 1, p. 178-187.

91. Еремин A.H. Иммобилизация цитохрома P-450 из микросом печени. Диссертация на соискание учен. степ. канд. биол. наук. Шнек: 1979, 217 с.

92. Усанов С.А., Курченко В.П., Метелица Д.И. Сравнение реконструированных систем микросом печени кролика, содержащих цитохромы Р-450-ЛМ£ и Р-450-М^. Биоорган, химия, 1982, т. 8, № 5, с. 630-642.

93. Yasukochi Y., Masters B.S.S. Some properties of a de-tergent-solubilized NADPH-cytochrome С (cytochrome P-450) reductase purified by biospecific affinity chromatography. J. Biol. Chem., 1976, v. 251, № 17, p. 5337-5344.

94. French J.S., Coon M.J. Properties of NADPH-cytochrome P-450 reductase purified from rabbit liver microsomes. Arch. Biochem. Biophys., 1979, v. 195, № 2, p. 565-577.

95. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L. Rendall P.J.

96. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1964, v. 239, № 7, p. 2370-2378.

97. Кейтс M. Техника липидологии. M.: Мир, 1975, с. 72305.

98. Рэкер Э. Биоэнергетические механизмы: новые взгляды. М.: Мир, 1979, с. 132-137.

99. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Высшая школа, 1971, с. 311.

100. Bradford М.М. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding. - Anal. Biochem., 1976, v. 72, № 2, p. 248-254.

101. Остерман JI.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование. М.: Наука, 1981, с. 286.

102. Omura Т., Sato R. The carbon monoxidebinding of liver microsomes. J. Biol. Chem., 1964, v. 249, № 8, p. 2370-2378.

103. Omura Т., Sato R. The carbon monooxide binding pigment of liver microsomes. II. Solubilization, purification and properties. J. Biol. Chem., 1964, v. 249, № 8, p. 2379-2385.

104. Miwa L.T., West S.B., Lu A.Y.H. Studies on rate-limiting componentin the microsomal monooxygenase system. J. Biol.

105. Chem., 1978, v. 253, № 6, p. 1921-1929.-179162. Yang C.S., Strickhart F.S., Kicha L.P. Interaction between HADPH-cytochrome P-450 reductase and hepatic microsomes. Biochem. Biophys. acta, 1978, v. 509, № 2, p. 326-337.

106. French J.S., Guengerich P.P., Goon M.J. Interactions of cytochrome P-450, NADPH-cytochrome P-450 reductase, phospholipid and substrate in the reconstituted liver microsomal enzyme system. J. Biol. Chem., 1980, v. 255, № 9, p. 4112-4119.

107. Ingelman-Sundberg M., Johansson J. Cytochrome b^ as electron donor to rabbit liver cytochrome P-450 LMg in reconstituted phospholipid vesicles. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1980, v. 97, № 2, p. 582-589.

108. Blanck J., Rohde K., Ruckpaui K. Kinetics of elementary steps in the cytochrome P-450 reaction sequence. IV. Mechanism of the NADPH reduction reaction of cytochrome P-450 LM. -Acta biol. et med. germ., 1979, v. 38, № 1, p. 23-32.

109. Janig G.-R., Pfeil D., Ruckpaui K. Enzymatic activities of matrix-bound components of the liver microsomal cytochrome P-450 system. Acta biol. et med. germ., 1979, v. 38, № 2-3, P. 409-422.

110. Кисель M.A., Усанов С.А., Метелица Д.И., Ахрем А.А. Влияние модифицированных фосфатидилэтаноламинов на каталитическую активность цитохрома Р-450 из микросом печени кролика. -Виоорган. химия, 1979, т. 5, № 10, с. 1558-1563.

111. Еремин А.Н., Кисель М.А., Усанов С.А., Метелица Д.И.,

112. Ахрем А.А. Роль фосфолипидов при иммобилизации высокоочшцен-ного цитохрома Р-450. Докл. АН БССР, 1980, т. 24, №5, с. 465-467.

113. Peterson J.A., Ebel R.E. , O'Keeffe D.H. NADPH-cyto-chrome (Р-450) reductase. Interaction on the microsomal membrane. Hoppe-Seyler's Z. Phisiol. Chem., 1976, v. 357, № 6, p. 1049.

114. Peterson J.A., Ebel R.E., O'Keeffe D.H., Matsubara T. Estabrook R.W. Temperature dependence of cytochrome P-450 reduction. A model for UADPH-cytochrome P-450 reductase: cytochrome P-450 interaction. J. Biol. Chem., 1976, v. 251, № 13, p. 4010-4016.

115. Stier A., Sackmann E. Epin labels as enzyme substrates. Heterogeneous lipid distribution in liver microsomal membranes. Biochim. Biophys. Acta., 1973, v. 311, № 3, p. 400408.

116. Thomas P.E., Lu A.Y.H., West S.B., Ryan D., Miwa G. T., Levin W. Accessibility of cytochrome P-450 in microsomal membrane: inhibition of metabolism by antebodies to cytochrome P-450. Mol. Pharmacol., 1977, № 13, p. 819-831.

117. Hildebrandt A., Estabrook R.W. Evidence for the participation of cytochrome b^ in hepatic microsomal mixed-function oxidation reactions. Arch. Biochem. Biophys., 1971, v. 143,1, p. 66-79.

118. Ахрем А.А., Усанов С.А., Метелица Д.И. Синергизм действия НАДФН и НАДН при микросомальном гидроксилировании нафталина. Докл. АН БССР, 1978, т. 22, № 3,с. 275-278.

119. Sasame Н.А., Gillette J.R., Boyd M.R. Effect of anti-NADPH-cytochrome P-450 reductase and anti-cytochrome b^ on microsomal metabolism of 4-ipomeanol in lung and liver. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1978, v. 84, № 2, p. 389-395.

120. Noshiro M., Harada N., Omura T. Immunochemical study of the participation of cytochrome b^ in drug oxidation reactions of mouse liver microsomes. Biochem. Biophys. Res. Commun. , 1979, v. 91, № 2, p. 207-213.

121. Imai Y., Sato R. The role of cytochrome b^ in a reconstituted N-demethylase system containing cytochrome P-450. -Biochem. Biophys. Res. Commun., 1977, v. 75, № 2, p. 420-426.

122. Lu A.Y.H., West S.B. Reconstituted mammalian mexed-function oxidases requirements, specifites and other properties. Pharmas. Ther. A., 1978, v. 2, p. 337-358.

123. Jansson I., Schenkman J.B. Inhibition of NADPH-suppor-ted aminopyrine demethylation by incorporated cytochrome b^. -Mol. Pharmacol., 1973, v. 9, p. 840-845.

124. Strobel H.W., Coon M.J. Effect of superoxide generation and dismutation on hydroxylation reactions catalyzed by liver microsomal cytochrome P-450. J. Biol. Chem., 1971, v. 246, № 24, p. 7826-7830.

125. Ахрем А.А., Бокуть С.Б., Метелица Д.И. Характер ингибирующего действия соединений двухвалентной меди в микросо-мальном гидроксилировании анилина. Докл. АН БССР, 1977, т. 21, № 7, с. 637-640.

126. Metelitza D.I., Akhrem А.А., Erjomin А.К., Kieel М.А., Usanov S.A. The mechanism of hydroperoxide-dependent reactions with participation of cytochrome P-450. Acta biol. et med. germ., 1979, v. 38, p. 511-518.

127. Метелица Д.И. Активация кислорода цитохромом Р-450 и другими гемопротеидами. Успехи химии, 1982, т. 51, № 7,с.

128. Capdevila J., Estabrook R.W., Prough R.A. Differences in the mechanism of HADPH- and cumene hydroperoxide-supported reactions of cytochrome P-450. Arch. Biochem. Biophys., 1980, v. 200, № 1, p. 186-195.

129. Griffin B.W., Marth C., Yasukochi Y., Masters B.S.S. Radical mechanism of aminopyrine oxidation by cumen hydroperoxide catalyzed by purified cytochrome P-450. Arch. Biochem. Biophys. , 1980, v. 204, № 2, p. 397-403.

130. Cederbaum A.I., Dicker E., Cohen G. Role of hidroxyl radicals in the iron-EDTA mediated stimulation of microsomal oxidation of ethanol. Biochemistry, 1980, v. 19, № 11, p. 3698-3704.

131. Метелица Д.И., Попова Е.М. Сравнительное изучение окисления I-нафтола с участием цитохрома Р-450 и оксигемоглоби-на. Биохимия, 1980, т. 45, № 8, с. 1379-1384.

132. Денисов Е.Т. Константы скорости жидкофазных гемолитических реакций. М.: Наука, 1971, с. 191-366.

133. Уотерс У. Механизм окисления органических соединений. М.: Мир, 1966, с. 160-173.

134. Метелица Д.И. Механизмы гидроксилирования ароматических соединений. Успехи химии, 1971, т. 40, с. II75-I2I0.

135. СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ, 0ТРАЖАКЩИХ ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ:

136. Усанов С.А., Курченко В.П. Ингибирующее действие соединений двухвалентной меди в микросомальном окислении. Тезисы докладов Всесоюзного симпозиума "Окисление физиологически активных соединений в биологических мембранах". Одесса, 1979, с. 39.

137. Курченко В.П., Усанов С.А., Метелица Д.И. Ингибирующее действие соединений меди на окислительное деметилирование диметиланилина гидроперекисью кумила при участии цитохрома Р-450. -Биохимия, 1980, т. 45, №7, с, I3I2-I3I8.

138. Metelitza D.I., Erjomin A.N., Kurchenko V.P., Usanov S.A. The mechanism of action and practical use of hydroperoxide dependent systems, involving cytochrome P-450. In.: Biochemistry, Biophysics and Regulation of Cytochrome P-450. /Eds.

139. J.-A. Gustafsson et al. North-Holland Biomedical Press / Elsevier, 1980, p. 291-298.

140. Курченко В.П., Усанов C.A., Метелица Д.И. Иммунохими-ческое изучение каталитической активности цитохрома Р-450-ДМ^ из микросом печени кролика. Биохимия, 1980, т. 45, № 12, с. 2202-2207.

141. Курченко В.П., Усанов С.А., Метелица Д.И. Реакционная способность ЛМ^-формы цитохрома Р-450 из микросом печени кроликов. -Биохимия, 1981, т. 46, №6, с. I035-I04I.

142. Курченко В.П., Усанов С.А., Метелица Д.И. Ингибирующее действие I-нафтола в окислении диметиланилина и анилина при участии цитохрома Р-450 микросом печени. Изв. АН БССР, сер. хим. наук, 1981, Ш 6, с. 78-86.

143. Курченко В.П., У санов С. А., Метелица Д.И. Роль цитохро ма Bg в окислении анилина и диметиланилина микросомами и реконструированными микросомальными системами. Изв. АН БССР, сер. хим. наук, 1982, В 2, с. 71-78.

144. Усанов С.А., Курченко В.П., Метелица Д.И. Сравнение реконструированных ферментных систем микросом-. печени кролика, содержащих цитохромы Р-450 ЛМ2 и Р-450 ЛМ4. Биоорган, химия,1982, т. 8, В 5, с. 630-642.

145. Курченко В.П., Метелица ДЛ. Роль радикальных стадий в окислении анилина и диметиланилина при участии цитохрома Р-450 микросом печени. Тезисы докладов Всесоюзного симпозиума "Цитохром Р-450 Структура и функция": Минск, 1982, с. 28.

146. Курченко В.П. Роль цитохрома Bg в окислении анилина и да метиланилина микросомами и реконструированными микросомальными системами. Тезисы докладов Всесоюзного симпозиума "Цитохром Р-450 Структура и функция": Минск, 1982, с. 58.

147. Курченко В.П., Усанов С.А., Метелица Д.И. Иммунохими-ческое изучение каталитической активности цитохрома Р-450 ЛМ2 микросом печени кролика. Биохимия, 1982, т. 47, № 9, с. I43I-I436.