Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Структура ценопопуляций и внутривидовая дифференциация редкого вида Hedysarum zundukii Peschkova

ВАК РФ 03.00.05, Ботаника

Автореферат диссертации по теме "Структура ценопопуляций и внутривидовая дифференциация редкого вида Hedysarum zundukii Peschkova"

На правах рукописи

ЧЕРКАСОВА Елена Сергеевна

СТРУКТУРА ЦЕНОПОПУЛЯЦИЙ И ВНУТРИВИДОВАЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ РЕДКОГО ВИДА НЕБ У&4 Я им иКИ РЕвСНКОУА

03.00.05 - «Ботаника»

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

0 5 ДЕК 2008

Новосибирск - 2008

003454268

Работа выполнена в Центральном сибирском ботаническом саду СО РАН, г. Новосибирск.

Научный руководитель — доктор биологических наук, с.н.с.

Дорогина Ольга Викторовна.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, с.н.с.

Зверева Галина Кимовна; доктор биологических наук, с.н.с. Байкова Елена Валентиновна.

Ведущая организация — Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ.

Защита состоится 23 декабря 2008 г. в 1230 ч на заседании совета Д 003.058.01 по защите докторских и кандидатских диссертаций при Центральном сибирском ботаническом саде СО РАН по адресу: 630090, Новосибирск-90, ул. Золотодолинская, 101.

Факс:(383)3301-986.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Центрального сибирского ботанического сада СО РАН.

Автореферат разослан 14 ноября 2008 г.

Ученый секретарь совета доктор биологических наук

Ершова Э.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время всё более актуальной становится проблема сохранения биологического разнообразия. Исчезновение любой популяции, а тем более вида, является невосполнимой утратой.

К числу редких и исчезающих видов относится копеечник зундукский - Hedy-sarum zunduku Peschkova узколокальный эндемик западного побережья оз. Байкал (Красная книга СССР, 1978; Красная книга РСФСР, 1988; Красная книга Иркутской области, 2001). Он является реликтом древней доледниковой пустынно-степной флоры. Основная часть его ареала представляет собой территорию длиной около 8 км и шириной 0,5 км (Бардунов и др., 2006). Необходимым предварительным условием разработки стратегии сохранения редких видов является изучение их генофонда и выяснение биологических особенностей, включающих систему размножения и состояние ценопопуляций.

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы - изучение биологических особенностей и популяционно-генетической структуры редкого вида Н zunduku в сравнении с полиморфными видами Н gmelmu Ledeb. и Н. setigerum Turcz. ex Fisch, et С. А. Mey.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

- исследовать ценопопуляционные характеристики редкого вида Н zunduku-. плотность, онтогенетический состав;

- для оценки уровня самоподдержания ценопопуляций Н. zundukii изучить семенную продуктивность и возможные причины низкого самовозобновления популяций;

- изучить изменчивость морфологических признаков вегетативных и репродуктивных органов Н zundukii;

- провести кариологический анализ Н zundukii, Н gmehnii, Н setigerum и Н. grandiflorum Pall.;

- на основе изучения электрофоретических спектров запасных белков семян определить внутри- и межпопуляционную изменчивость изучаемых видов;

- дать комплексную оценку состояния ценопопуляций Н. zundukii.

Защищаемые положения:

1. Низкий адаптационный потенциал эндемичного вида Н zunduki, характеризующийся узколокальным распространением на западном побережье оз. Байкал, обусловлен особенностями онтогенеза, демографической структурой ценопопуляций и невысоким репродуктивным потенциалом.

2. Небольшая изменчивость электрофоретических спектров запасных белков у эндемичного вида Н. zunduku отличает его от широко распространенных совместно произрастающих с ним видов Нgmelinii чН setigerum.

Научная новизна работы. Впервые проведено комплексное исследование редкого вида Н. zunduku, включающее выявление плотности и структуры ЦП, а также семенной продуктивности

Впервые изучена изменчивость по полипептидным спектрам запасных белков семени, с помощью которой охарактеризован уровень генетического полиморфизма и дифференциации популяций Н. zundukii и двух видов, произрастающих совместно с ним.

Апробация работы. Основные положения и результаты работы были представлены на Международной конференции молодых ботаников (Санкт-Петербург,

2006); Всероссийской конференции, посвященной 60-летию Центрального сибирского ботанического сада (Новосибирск, 2006); Пятой международной научно-практической конференции (Барнаул, 2006); Всероссийской молодежной научно-практической конференции ботаников (Новосибирск, 2007).

Публикации. Автором опубликовано 6 работ, 3 статьи, в том числе 1 в рецензируемом издании.

Практическая значимость. Полученные данные вносят вклад в изучение биологических и генетических особенностей природных популяциях редких видов и могут послужить основой для разработки стратегии их сохранения.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 5 глав, выводов, списка литературы и приложения. Содержание диссертации изложено на 135 страницах, включает 5 страниц приложения, 18 рисунков и 20 таблиц. Список литературы содержит 177 источников, в том числе 92 - на иностранных языках.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

В главе проведен анализ существующих подходов и методов изучения редких видов растений. Приведена оценка возможных подходов к сохранению редких и исчезающих видов, выявлены проблемы, с которыми сталкиваются специалисты по вопросам охраны. Рассмотрены генетические и экологические исследования в изучении популяций редких видов; возможности использования технологий молекулярного маркирования в целях сохранения биоразнообразия; применение запасных белков семян в качестве генетических маркеров. Особое внимание уделено методам, которые используются при изучении видов рода Hedysarum L

Род Hedysarum (копеечник) относится к трибе Hedysareae, включает 200 видов и подразделяется на 2 группы, различающиеся по системам скрещивания, особенностям кариотипа и географическому происхождению. Первая - виды с 2п=14. Среди видов 2-й группы диплоидные (например, Я. coronarium L., Я flexuosum L., Я. carnosum Desf.) имеют 2n=16 (Baatout et al., 1991).

Степные виды рода Hedysarum принадлежат к двум секциям Multicaulia (Boiss.) В. Fedtsch. и Subacaulia (Boiss.) В. Fedtsch. (Федченко, 1948). Наибольший интерес для нас представляет секция Subacaulia, которую почти полностью составляют ксерофитные виды.

Довольно труден в таксономическом отношении сборный вид Н. setigerum, по мнению Г. А. Пешковой (2001), его стоит рассматривать в качестве самостоятельного вида. Из числа видов из родства Н. setigerum, обитающих в отдельных районах Южной Сибири, известны: Н. roseum Sims, Н. pumilum (Ledeb.) В. Fedtsch., Н. sajanicum N. Ulziykh., H. baicalense В. Fedtsch.

Совсем иные родственные связи имеет эндемик Приольхонья - Н. zundukii. По данным Г. А. Пешковой (2001) он родственен группе видов: Я grandiflorum, распространенному в европейской части России; Я. argyrophyllum Ledeb., редкому виду, обитающему на юге Урала, но очень близкому к Я. grandiflorum и Я elegans Boiss. et Huet. Значительный отрыв ареала Я zundukii от упомянутых выше видов доказывает его древний, возможно, плиоценовый возраст. На западном побережье Байкала (Приольхонском) сохранился небольшой рефугиум реликтов третичной ксерофитной флоры (Stipa glareosa, Oxytropis triphylla, Я zundukii и др.).

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ, РАЙОНЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Объекты исследования

Для сопоставления уровней изменчивости и биологических особенностей редкого вида Н. гипйики нами были изучены более широко распространенные виды Н gmehnll, Н зе1щегит, а также Н. grandlflorum, являющийся, по данным Г. А. Пешковой (1972), близким к виду Я гипйики.

В работе анализировались растения и семена, собранные в 2005 и 2007 гг., а также семена из коллекции лаборатории интродукции редких и исчезающих видов растений ЦСБС СО РАН. Было изучено 7 ценопопуляций (ЦП) Н. гип^ки (табл. 1), 12 ЦП Н. gmellmi и 4 ЦП Н. яе^егит.

Таблица 1

Характеристика ценопопуляций Hedysarum zundukii

Местонахождение Название ЦП Фитоценоз

1. Мыс Зундук 2 Мыс Зундук 3 Мыс Зундук 4 МысХужир 5. Мыс Ото-Хушун 6 Мыс Хохе-Нахойтуй 7 Мыс Зундук Зундук 1 Зундук 2 Зундук 3 Хужир Ото-Хушун Хохе-Нахойтуй Зундук 4 Голубоостролодочниково-фестуко-копеечниковая степь Дриадово-разнотравная степь Приземистоосоково-хамеродосово-разнотравная степь Житняково-нителистниково-разнотравная степь Типчаково-разнотравная степь Дриадово-разнотравная степь Хамеродосово-разнотравная степь

2.2. Природные условия

Западное побережье оз. Байкал очень своеобразно в ботаническом отношении и давно привлекает внимание исследователей. Изучение растительного мира этой территории представляет большой интерес, так как в ботаническом отношении Приольхонье занимает совершенно особое место во всей Восточной Сибири, благодаря обилию здесь эндемиков, в том числе узколокальных, высокой концентрации редких видов различного генезиса и наличию только здесь ценозов, сформированных некоторыми редкими растениями. В степной флоре этого района сосредоточено 33 вида эндемичных растений (Бардунов и др., 2006), ярким представителем которых является Н. zundukii. Известно, что Н. zundukii нередко сопутствуют другие редкие и эндемичные виды Приольхонья (Бардунов и др., 2006): Agro-pyron distichum (Georgi) Peschkova, Dracocephalum pinnatum L., Dryas sumneviczii Serg., Iris potaninii Maxim., Primula pinnata M. Popov et Fed., Rhinactmidia eremo-phila (Bunge) Novopokr. subsp. tuvinica Koroljuk. Из бобовых, кроме Hedysarum zundukii, встречаются Oxytropis peschkovae M. Popov, O. popoviana Peschkova, O tragacanthoides Fischer, O íriphylla (Pallas) Pers., O. íurczamnovii Jurtzev и Vicia olchonensis (Peschkova) Nikiforova (Карнаухова и др., 2006). Особые экологические условия (повышенная радиация, инсоляция и др.) обуславливают уникальность местообитаний H zundukii, что требует подробных исследований особенностей биологии вида.

2.3. Методы исследования

Изучение ценопопуляций Н zundukii проводили по методикам, рекомендованным для редких видов (Заугольнова, 1982; Программа..., 1986). Онтогенетический спектр описывали на основе учета 25-100 площадок размером 0,25 м2, на трансек-тах, заложенных регулярным, редко - случайным способом. При этом особи лишь освобождались от рыхлого грунта по всей окружности каудекса без выкапывания.

При изучении морфологических особенностей в каждой ценопопуляции исследовали 15-20 среднегенеративных особей по количественным показателям вегетативной сферы.

Определение семенной продуктивности проводили по методике И. В. Вайна-гия (1973, 1974).

Полученные биометрические показатели обрабатывались статистически: определялись среднеарифметическое, его ошибка, минимальные и максимальные значения признака, коэффициент вариации (Плохинский, 1970).

Уровни изменчивости оценивали по величине коэффициента вариации в соответствии со шкалой С. А. Мамаева (1973).

Подсчет хромосом проводился в корешках проростков (Красников, 2004). Просмотр и фотографирование препаратов осуществляли с помощью комплекса анализа и обработки изображений: микроскоп Axiolab А, видеокамера Sony 920, программное обеспечение Ахю Vision 3.1.

Запасные белки анализировались индивидуально для каждого семени. Электрофорез проводили по методу U. К. Laemmli (1970) с модификациями (Агафонов, Агафонова, 1992). Были опробованы разные концентрации разделяющего геля: 12, 14, 16 и 18 %, концентрирующий гель был 5 %. Гели полимеризовали в присутствии 0,5 % TEMED и 2 % персульфата аммония. Размер гелевых пластин 13 * 20 см и толщина 1 мм. Для оценки молекулярной массы полипептидных фракций использовали белковые маркеры с известными молекулярными массами («Ferments», Литва).

На основе полученных с помощью SDS-электрофореза данных строили матрицы. Для оценки уровня изменчивости белковых спектров использовался коэффициент сходства, рассчитанный по формуле (Ladizinsky, Hymovits, 1979) и по величине дистанции М. Nei (1972).

ГЛАВА 3. ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ЦЕНОПОПУЛЯЦИЙ HEDYSARUM ZUNDUKII

3.1. Изменчивость морфологических признаков в ценопопуляциях

Согласно классификации жизненных форм Т. И. Серебряковой (1980), Н. zundukii - стержнекорневой (каудексовый) травянистый многолетник с розеточными моноподиально нарастающими поликарпическими побегами. Большой жизненный цикл Н. zundukii подразделяется на 4 периода (латентный, прегенеративный, генеративный и постгенеративный) и 9 возрастных состояний (рис. 1).

Рис 1 Онтогенетические состояния Не^агит гипс/ики.

р - проросток, ] - ювенильное, т - имматурное, V - виргинильное, д( - молодое генеративное, д2 - средневозрастное генеративное; дз - старое генеративное, бб - субсенипьное, б - сенильное

Прегенеративный период может продолжаться до 21 года. Проростки в природных условиях появляются после схода снега, увлажнения и прогревания карбонатных склонов. Благоприятные периоды для прорастания семян непродолжительные, а в сухой год (2005) проростки практически не встречались. В благоприятные годы появляются немногочисленные всходы. Когда семядоли отмирают, растение переходит в ювенильное возрастное состояние. Как правило, в природных условиях это маленькие растения, до 3,5-4,0 см высотой, на розеточном побеге которых развертывается от 2 до 4 простых листьев. У растений первого и последующих лет жизни сохраняются остатки прошлогодних черешков. Подсчет листовых остатков показал, что ювенильные растения, несущие только простые листья, могут существовать до 5 лет. На 4-5-й год жизни наряду с простыми листочками, начинают расти тройчатые. Продолжительность ювенильного возрастного состояния у Н 2ипс1икп в природе составляет 8-10 лет.

Переходом в имматурное возрастное состояние является начало кущения. Высота растения около 7 см. К этому времени пазушные почки на базальной части главной оси, втянутые в почву, трогаются в рост и образуют моноподиально нарастающие розеточные побеги (скелетные оси) второго и следующих порядков. Основание побега окружено остатками листьев прежних лет. На каудексе видны листовые рубцы, подсчет которых показал, что возраст этих растений 8-15 лет.

Молодые виргинильные особи имеют 3-4 побега с 4-6 листьями взрослого типа на побег. У молодых виргинильных растений хорошо развита многолетняя стеблевая часть - каудекс, диаметр которого около 1,5 х 0,5 см Растение приобретает вид взрослой особи, имеющей несколько розеточных побегов. Абсолютный возраст виргинильных особей 14-21 год.

Генеративный период начинается с появлением генеративных почек. В возрасте около 20 лет растение зацветает. Массовое цветение наступает в июне. Значительно увеличивается общее число побегов на особь, нарастает диаметр каудекса.

Молодые генеративные растения копеечника зундукского имеют 2-9 вегетативных и 2-20 генеративных побегов, на каждом из которых имеется 4-9 листьев взрослого типа и 1-2 цветоноса с соцветием. В среднем у молодой генеративной особи почти в 2 раза больше генеративных побегов, чем вегетативных.

Средневозрастные особи (старше 30-35 лет) характеризуются наибольшей мощностью. Из-за большого числа побегов (до 52), приземистости (средняя высота 7,9 см) и разрастания многоглавого каудекса, растения этого возрастного состояния приобретают вид «подушки» серовато-седой от опушения. Доля генеративных побегов меньше, чем у молодых генеративных особей - примерно половина от общего числа побегов на особь.

У старых генеративных растений Н. zunduku многоглавый каудекс с обособленными главами и отмершими участками. На каудексе появляются полости, мертвые участки от отмерших генеративных побегов, наблюдается частичная пар-тикуляция. Особь приобретает вид низкорослого подушковидного растения с «проплешиной». У таких растений генеративных побегов в 3-4 раза меньше, чем вегетативных. Можно предположить, что генеративное состояние у Н zundukii сохраняется до 50-70 лет.

Постгенеративный период. Особи Н. zundukii, утратившие способность цвести и плодоносить, переходят в субсенильное возрастное состояние. Субсениль-ные особи имеют от 6 до 18 вегетативных розеточных побегов с листьями более простой структуры (от 1 до 5 пар листочков). Каудекс с мертвыми участками, с полостями от отмерших побегов, часто с многочисленными отмершими партику-лами. У сенильных растений уменьшаются все показатели надземной сферы: высота растения до 1,5-6,5 см, иногда остается одиночный розеточный вегетативный побег с 3-4 измельчавшими листьями. Общая продолжительность онтогенеза копеечника зундукского, видимо, около 80 лет (Карнаухова и др., 2008).

Нами была исследована изменчивость и внутривидовая дифференциация эндемичного вида Н. zundukii на основе комплекса морфологических признаков вегетативных и генеративных органов.

В табл. 2 приведены результаты по изменчивости морфологических признаков в выборках особей среднего генеративного состояния из изученных ценопопуля-ций Н. zunduku. Анализ средних значений признаков показал, что природные ЦП Н. zundukii неоднородны. Наиболее изменчивыми во всех ценопопуляциях оказались признаки: диаметр каудекса и количество вегетативных побегов - для них обнаружен очень высокий уровень изменчивости.

Изучение изменчивости морфологических признаков цветка показало, что наименее вариабельны длина крыльев и длина лодочки венчика.

Таблица 2

Значения морфологических признаков в ценопопуляциях Hedysarum zundukii

ЦП Высота растения, см Диаметр каудекса, см Длина листа, см Длина листочка, см Ширина листочка, см Кол-во листьев Кол-во вегетативных побегов

Зундук1 7,4±0,6 10,0±1,6 6,0±0,3 1,1 ±0.05 0,3±0,02 6,0±0,2 11,9±1,5

Зундук 3 8,4±0,6 8,7±1,3 6,3+0,2 1,1 ±0,04 0,4±0,02 5,9+0,3 11,7±1,7

Хужир 7,9±0,5 11,7+1,3 6,3+0,2 1,2±0,04 0,4±0,02 5,1±0,2 17,7±4,1

Ото-Хушун 8,4±0,4 10,0±0,8 6,9±0,3 1,2+0,05 0,4±0,02 4,8±0,2 25,5±3,5

Хохе-Нахойтуй 10,4±0,6 21,4±1,2 7,2+0,2 1,1±0,03 0,4±0,01 5,4+0,2 51,8±9,3

Зундук 4 11,5±0,8 15,4±1,0 9,3+0,3 1,3±0,03 0,5±0,02 5,6±0,2 37,6±4,3

Учитывая изученные нами показатели морфологических признаков, можно заключить, что ценопопуляции Хохе-Нахойтуй (ЦП 6) и Зундук 4 (ЦП 7) произрастают в наиболее благоприятных условиях. Они характеризуются в среднем самой большой высотой растения (10,4 и 11,5 см), наибольшим диаметром каудекса (21,4 и 15,4 см) и длиной листа (7,2 и 9,3 см).

Минимальные значения признаков встречались в основном в ЦП Хужир (ЦП 4) и Ото-Хушун (ЦП 5), вероятно, вследствие антропогенного изменения условий среды обитания. В данных пунктах отмечена активная антропогенная нагрузка, связанная с интенсивным движением автотранспорта и прохождением туристических маршрутов.

Для определения оптимума организма проводили оценку каждого из параметров по 6-балльной шкале. По сумме баллов популяции можно разделить на две группы: первая - ЦП Хохе-Нахойтуй (ЦП 6) и Зундук 4 (7), сумма балов у них составила 33 и 37, соответственно; вторая группа - ЦП Зундук 1 (ЦП 1), Зундук 3 (ЦП 3), Хужир (ЦП 4) и Ото-Хушун (ЦП 5), у которых сумма баллов равнялась 16-18. Наименьшим количеством баллов (16) характеризовались ценопопуляции Хужир (ЦП 4) и Ото-Хушун (ЦП 5).

3.2. Анализ семенной продуктивности в ценопопуляциях

Размножение у копеечника зундукского исключительно семенное. Плод - боб с перетяжками, разделяющими его на 2-4 односемянных членика. Семена округло-почковидные, светло-коричневые, длиной 2,0-3,5 мм (2,65 мм в среднем), шириной 1,5-2,1 мм (1,92 мм в среднем). Бобы с семенами созревают внутри засохшего венчика и осыпаются вместе с ним в непосредственной близости от материнского растения во второй половине июля - августе. Семенное размножение осуществляется, по-видимому, не каждый год, всходы появляются только в благоприятные по увлажнению вегетационные периоды.

В лабораторных условиях после 6 месяцев хранения было проведено проращивание семян при температуре 18-20° С в двух вариантах: 1) скарифицированные наждачной бумагой и 2) без скарификации. Скарифицированные семена начинали прорастать на третьи сутки (10 %), и в течение 17 дней всхожесть достигла 80 %. Всхожесть нескарифицированных семян очень растянута (за 20 дней - 20 % и да-

лее в течение 3 месяцев еще 10 %) из-за твердосемянности, характерной для бобовых (Попцов, 1974).

В ЦП Н гипсМса обнаружена значительная изменчивость показателей семенной продуктивности. Во всех популяциях установлен низкий уровень семенной продуктивности, процент семинификации колеблется от 5,1 до 14,4 % Максимальные показатели семенной продуктивности отмечены в ценопопуляциях Хохе-Нахойтуй (ЦП 6) и Зундук 3 (ЦП 3), где реальная семенная продуктивность составила 167,4 и 152,7 семян на особь в среднем, а самые низкие (30,3 шт) в ЦП Зундук 4.

Самая высокая изменчивость обнаружена по количеству генеративных побегов на растение (Су = 33,6-102,6 %).

3.3. Онтогенетический состав ценопопуляций

Изучение онтогенетического состава 6 ЦП Н тпйики (рис. 2) показало, что максимум численности приходится на взрослую часть ценопопуляции.

При этом все ЦП, кроме Зундук 3 (ЦП 3) и Зундук 4 (ЦП 7), включали в себя весь набор возрастных состояний, являясь по определению полночленными. Во всех изученных ценопопуляциях преобладала группа генеративных особей, их число колебалось от 44,8 до 83,4 %. Только в ЦП Ото-Хушун (ЦП 5) преобладали постгенеративные особи (48,6 %), а на долю генеративных приходится только 29,7 %. Основной максимум во всех популяциях обнаружен на старых генеративных особях (10,8-41,7%). Высокий процент старых генеративных и постгенеративных особей свидетельствует о несбалансированности популяций.

Снижение численности прегенеративных особей, а также отсутствие проростков в неустойчивых и нарушенных антропогенными воздействиями местообитаниях довольно интенсивны, и именно эти стадии жизненного цикла являются наиболее уязвимыми. Полученные данные свидетельствуют о достаточно неустойчивом положении вида в изученных местообитаниях и неблагоприятных условиях для его возобновления.

3.4. Демографические показатели ценопопуляций

Растения в пределах исследованных участков ЦП распределены неравномерно. Максимальные значения плотности 6,1 шт./м2 отмечены в ЦП Хужир. Средняя плотность составила 5,3-5,5 шт./м2 (ЦП Ото-Хушун и Зундук 1). Минимальная плотность особей - 0,7 шт./м2 - в ЦП Зундук 3.

По классификации «дельта-омега» (Животовский, 2001) ценопопуляции Н. гипйикп распределились следующим образом: три ценопопуляции (ЦП Хохе-Нахойтуй, Зундук 4 и Ото-Хушун) являются переходными (А = 0,45-0,52 и ш = 0,57-0,68); две (ЦП Зундук 1 и Зундук 3) относятся к стареющим (Д = 0,62-0,63, со = 0,57-0,68); одна - Хужир (ЦП 4) - является старой (Д = 0,61; со = 0,49).

Важными популяционными параметрами являются индекс возобновления (Жукова, 1987) и индекс старения (1с) (Глотов, 1998). Индекс возобновления в исследованных ценопопуляциях составил 0,17-0,43 и был наиболее высоким в ЦП Зундук 4 (0,43), а самым низким в ЦП Хужир (ЦП 4) (0,17). Индекс старения составил 0,16-0,48, самый высокий - в ЦП Ото-Хушун (ЦП 5) - 0,48.

ЦП1

j im V gl g2 g3 ss s

j im V g1 g2 g3 ss s

j im V g1 g2 g3 ss s

Рис. 2. Онтогенетические спектры ЦП H. zundukii

Так как ценопопуляции произрастают в очень сходных местообитаниях на небольшом расстоянии друг от друга, это позволяет предположить, что основное влияние на межпопуляционные различия по показателям семенной продуктивности и мощности развития растений оказывает антропогенное воздействие. Четыре из изученных нами ЦП произрастали вдоль дороги. Только ЦП Хохе-Нахойтуй (ЦП 6) и Зундук 4 (ЦП 7) располагались вдали от дороги, на крутом склоне (3040°). Ухудшение условий существования и разрушение мест обитания приводит ЦП в дигрессивное состояние: в возрастном спектре отмечается снижение доли молодых и увеличение старых групп особей, уменьшение мощности растений.

ГЛАВА 4. ИЗМЕНЧИВОСТЬ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИХ СПЕКТРОВ И ЧИСЛА ХРОМОСОМ У ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ СЕКЦИЙ МииПСАША И $иВАСМЛ1А

4.1. Изучение запасных белков семян Нейуъагит гипАики методом 8Б8-электрофореза

При проведении БОЗ-электрофореза были опробованы различные концентрации разделяющего геля: 10, 14, 16 и 18 %. Установлено, что лучшей концентрацией для разделения полипептидов запасных белков семени Н. гипс1икп является 18 %-ный разделяющий гель.

Анализ семян Н. гипс1икИ в 18 %-ном геле показал, что основная часть полипептидов распределена преимущественно в диапазоне от 14 до 116 кДа (рис. 3).

Полипептидные спектры состоят, как правило, из 32-38 компонентов. Белковый спектр Н. гипс1иИ для удобства можно условно разделить на 3 зоны. В зоне 1 (45-116 кДа) обычно присутствует группа из 3-4 интенсивно окрашенных компонентов. Наибольшей изменчивостью обладают легко подвижные компоненты в области от 25 до 45 кДа в зоне II, в этой зоне у разных образцов присутствует от 4 до 12 компонентов. В зоне III (14-25 кДа) выявляются 2-3 ярко выраженных компонента и от 5 до 8 слабоокрашенных.

а б

Рис. 3. Электрофоретический спектр запасных белков семян Н. гипс!и1<И (а) и схема спектра (б). 1-20 - особи популяции Зундук 1, - стандарт соя (сорт Приморская-301), М - молекулярные маркеры.

Результаты исследования белкового спектра Н гипйики показали, что различия в спектре не носили принципиального характера, так как растения из всех популяций сохраняли одинаковую структуру спектров со сходным составом компонентов во всех зонах. Тем не менее, обнаруженная изменчивость в полипептидных спектрах индивидуальных семян, позволяет идентифицировать отдельные генотипы и изучать изменчивость на внутри- и межпопуляционном уровне.

Для оценки внутрипопуляционной и внутривидовой изменчивости по полипептидным спектрам были изучены выборки из 7 природных ЦП, из каждой взято от 34 до 50 семян. В общей сложности проанализировано 262 белковых спектра, полученных из индивидуальных семян Н. гипс1ик11 Изменчивость в пределах одного растения невысокая Ксх=77,5-97,9 %. Изменчивость в изученных ЦП Н. гипйиЫ невысокая и среднее значение коэффициента сходства составило 67,8-88,1% (табл. 3).

Таблица 3

Уровень изменчивости запасных белков семян внутри ЦП Нейувагит гипвики

цп Ксх, % Дистанция N61

Зундук 1 67,8±1,9 0,84±0,01

Зундук 2 82,7±1,2 0,91 ±0,02

Зундук3 77,9±1,5 0,90±0,01

Хужир 74,2±1,5 0,83±0,01

Ото-Хушун 72,9+2,0 0,88±0,01

Хохе-Нахойтуй 73,4+2,1 0,84±0,18

Зундук 4 88,1 ±0,8 0,94±0,01

Полученные нами данные свидетельствуют о присутствии невысокой гетеро-зиготности в популяциях. Для оценки межпопуляционной изменчивости белковых спектров использовалась формула М. №1 (1972) по коэффициенту сходства. Попарно сравнивались выборки из 7 ЦП. Изменчивость между популяциями невысокая Ксх=71-92% На отсутствие существенных отличий между популяциями по белковым спектрам указывают и значения показателей генетической дистанции по Мег (0,80-0,96). Внутрипопуляционное разнообразие белковых спектров было немного выше, чем межпопуляционное.

4.2. Изменчивость электрофоретических спектров запасных белков семян Н. gmelimi и Н. setigerum

Белковые компоненты Н %те1ти и Н. зещегит на электрофореграмме расположены в области 14-84 кДа (рис. 4).

Число белковых компонентов в различных популяциях колеблется от 14 до 33. На электрофореграммах можно условно выделить 3 зоны. Первая зона включает компоненты с молекулярной массой более 45 кДа. В этой зоне присутствует 2-3 ярко окрашенных компонента и 2-5 слабоокрашенных.

Вторая группа (25-45 кДа) включает 7-11 более слабо окрашенных компонентов. Третью группу (14-25 кДа) составляют 5-7 яркоокрашенных компонентов и 2-5 менее ярко окрашенных, эта группа обычно более стабильна. Изменчивость внутри изученных выборок Н ектг высокая, что подтверждается значением КсХ= 42-74 % и величиной дистанции Ке1 = 0,57-0,85. Самое высокое разнообразие белковых спектров (КсХ = 42,8 и 51,4 %) обнаружено в популяциях из Горного Алтая (ЦП Шавла и Чуя).

Рис. 4. Электрофоретические спектры запасных белков семян Н. дтеПпии Н. ьеИдегит. а) белковые спектры; б) схема белковых спектров: 1 - Н. дтеНпИ, 2 -Н. веНдегит, - стандарт (соя), М - молекулярные маркеры.

В ЦП Я. яе^егит обнаружено более высокое сходство полипетидных спектров (Ксх = 62,6-73,6 %), чем в популяциях Я. gmelinii.

Наиболее высокие различия у Я. gmelinii наблюдались по полипептидным спектрам между популяциями, произрастающими в разных частях ареала, Ксх= 1868 %, дистанция N61 от 0,25 до 0,77.

Было обнаружено, что полипептидные спектры сходны в популяциях, которые произрастают совместно или недалеко друг от друга. Среднее значение коэффициента сходства для вида Я. gmelimi составило 34,5 %.

Для Я. setigerum дистанция между популяциями составила 0,72-0,87 (Ксх = 5378 %). Среднее сходство популяций Я. яе^егит в среднем 72,7 %.

В целом, при сопоставлении белковых спектров семян было выявлено, что набольшей изменчивостью на видовом уровне обладает широко распространенный полиморфный вид Н. gmelinii (Ксх=34,5 %). Редкий вид Н. гип(1ики характеризуется низким полиморфизмом полипептидных спектров, в среднем для вида Ксх=80,5 %. Среднее значение коэффициента сходства обнаружено у Н. setigerum (Ксх=72,7 %).

4.3. Цитологический анализ

По литературным данным, для исследованных видов характерны следующие числа хромосом: Я гипс1икИ 2п=14; у Я. gmelinii 2п=28, 56; у Я. setigerum 2п=14, 28, 32, 48 (Числа хромосом ..., 1990; Малахова, Курбатский, 1992; Флора Сибири, 1994).

Нами были получены следующие результаты: в 5 изученных ЦП Я. гипс!икИ (Зундук 1, Зундук 2, Зундук 3, Хужир и Ото-Хушун) число хромосом составило 2п=16, что отличается от литературных данных по этому виду (2п=14) и подтвер-

ждает его обособленность от часто совместно встречающихся Н. gmellnll и Н 5е1щегит.

По мнению Г. А. Пешковой, Н grandiflorum является близким к Н. хипйики У Н. grandlflorum (в ЦП Серноводск и Кинельская) нами также было выявлено число хромосом 2п=16. Это является еще одним аргументом в пользу данных о родстве этих видов.

В ЦП Н gmelinii обнаружено 2п=14 в Хакасии (Боград и Усть-Бюрь). В одной из ЦП Горного Алтая, произрастающей на р. Шавла обнаружено 2п=14 и 28. В ЦП из Иркутской (Ото-Хушун) и Самарской (Гусиха) областей, а также в двух ЦП из Горного Алтая (Чеке-Таман и Сальджар) выявлено 2п=28. У двух ЦП из Горного Алтая (Чуя и Яконур) число хромосом 2п=32.

В ЦП Н. 5е^егит из Иркутской области (Ольхон, Ольхон 2 и Ото-Хушун) и Горного Алтая (Тархаты) нами выявлено 2п=28.

ГЛАВА 5. ИНТРОДУКЦИЯ И РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ОХРАНЕ Н. ZUNDUKII 5.1. Интродукция

В течение 3 лет изучалась возможность интродукции Н ги^икИ в условиях ЦСБС. Семена перед посадкой проращивали в чашках Петри на фильтровальной бумаге. Для опыта были заложены варианты со скарифицированными и не скарифицированными семенами. Посев семян проводили с февраля по апрель. Проростки высаживали в стаканчики, в качестве субстрата использовали песок с дренажом из мелких камешков. Растения высаживали в открытый грунт с 29 мая по 10-14 июня. В условиях культуры данный вид проходил 5 возрастных состояния: покоящиеся семена, проростки, ювенильные растения, имматурные растения, виргинильные растения.

Растения были высажены в открытый грунт на песчаную горку 29 мая в имма-турном и виргинильном возрастных состояниях. Растения плохо пережили пересадку. В 2006 г. было высажено 14 растений, из них выжили только 4. В 2008 г. из 96 высаженных растений прижилось только 8. Приживаемость рассады в 2006 г. составила 28,5 %, в 2008 г. - 8,3 %.

Через 2,5 месяца после высадки в грунт растения находились в виргинильном возрастном состоянии. Растения 11-20 см высотой имели 3-4 побега с 7-9 сложными листьями: длина листа с черешком 11-19 см, длина листовой пластинки 1,7-3,8 см, ширина - 1,9-1,8 см. Растения перед зимним покоем были мощно развиты. Однако весной они не отрастали: возможно, из-за высокого снежного покрова они выпревали. Можно заключить, что условия ботанического сада не соответствуют экологическим требованиям узкоспециализированного ксерофитного вида Н. zundukli.

5.2. Охрана

На основании проведенных нами исследований можно заключить, что основным лимитирующим фактором для сохранения Н. ги^икп в естественных местообитаниях является возрастающая антропогенная нагрузка. Естественным фактором, влияющим на репродуктивные возможности вида, являются суровые экологические условия местообитаний Н zundukll.

Биологическими особенностями, обуславливающими очень ограниченное распространение данного вида, являются низкая семенная продуктивность, затрудненное прорастание семян, плохая приживаемость проростков и узкая специализация, приспособленность к строго определенным условиям существования и, как следствие, очень узкий ареал и прерывистое распространение даже в его пределах.

В районе произрастания популяций Я 2ипс1икИ проходит автотранспортная дорога, наличие которой, а также увеличивающееся с каждым годом количество туристов могут крайне негативно сказаться на состоянии ценопопуляций Н. гипбикп. Активно ведется строительство туристических баз на границе и даже на территории заповедника. Возрастающая антропогенная нагрузка выражается в снижении семенной продуктивности, мощности развития растений, плотности растений в ЦП.

Полученные нами данные свидетельствуют о достаточно неустойчивом положении вида в изученных местообитаниях и неблагоприятных условиях для его возобновления. Для ценопопуляций Н. гипс!иЫ, наряду с общей низкой плотностью особей, характерен низкий процент особей среднего генеративного состояния. Низкая численность ювенильных и имматурных особей, а также отсутствие проростков, свидетельствуют о том, что элиминация ювенильных и имматурных особей в неустойчивых и нарушаемых антропогенными воздействиями местообитаниях довольно интенсивна, и именно эти стадии жизненного цикла являются наиболее уязвимыми.

Очевидно, возобновление и самоподдержание ЦП зависит не только от числа генеративных особей и их семенной продуктивности, но и от благоприятных условий для выживания проростков.

Из семи изученных ЦП четыре произрастало вдоль дороги, а возле местообитания ЦП 5 идет строительство туристической базы. Нарушение среды обитания привело к сокращению прегенератиных особей (например в ЦП 4 и 5) или к полному их исчезновению (ЦП 3). Дальнейшее увеличение антропогенной нагрузки может привести не только к нестабильности популяций, но и к их полному исчезновению, что ставит под угрозу существование этого узкоэндемичного вида.

Так как данный вид произрастает на территории протяженностью всего около 8 км, сохранение каждой ЦП имеет очень большое значение для дальнейшего выживания вида в целом. Все известные местонахождения данного вида необходимо учесть и обеспечить мониторинг и контроль за состоянием всех ЦП.

При попытке интродуцировать Н гипйики в условиях ЦСБС был получен отрицательный результат. Это придает еще большую значимость охране этого узкоспециализированного вида в естественных местообитаниях.

ВЫВОДЫ

1. На основании изучения состояния природных ЦП Я. гипс1ики установлено, что большинство онтогенетических спектров ЦП являются правостороними, полночленными и неполночленными. Максимум численности приходится на старые генеративные и субсенильные особи. Для всех популяций характерна низкая плотность (в среднем 3,4 особи на 1 м2). По классификации «дельта-омега» ЦП относятся к типу стареющих и старых.

2. Изучение особенностей семенной продуктивности Н. zunduku показало, что реализация потенциальной семенной продуктивности у этого вида крайне низкая. Процент семенификации в среднем равен 10,4.

3. Ценопопуляции Н zunduku характеризовались низким полиморфизмом полипептидных спектров, в среднем для вида Ксх= 80,5 %. Внутривидовая изменчивость полипептидных спектров наиболее высокая у растений полиморфного вида Н gmelimi Среднее значение коэффициента сходства выявлено у Н setigerum (Ксх=72,7 %).

4. Анализ средних значений морфологических признаков показал, что ЦП Н zunduku неоднородны. Наибольшая изменчивость выявлена для диаметра кау-декса и числа генеративных и вегетативных побегов. Изучение изменчивости параметров цветка показало, что наименьшая изменчивость характерна для таких признаков, как длина крыльев и длина лодочки.

5. В пяти изученных нами ЦП Н. zundukii число хромосом составило 2п=16. Полученное число хромосом отличается от литературных данных (2п=14), и подтверждает обособленность данного вида от совместно произрастающих с ним Н. gmelimi и Н setigerum

6. Узкая специализация вида Н zunduku, низкая плотность особей в пределах очень ограниченного ареала, низкая семенная продуктивность, затрудненность прорастания семян, большая элиминация проростков служат причинами того, что этот вид крайне редок и требует проведения охранных мероприятий в природных местах обитания.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Черкасова Е С. Структура ценопопуляций редкого вида Hedysarum zunduku Peshkova (Fabaceae) // Материалы I (IX) Международной конференции молодых ботаников. СПб, 2006 С. 120-121

2 Черкасова Е С Полиморфизм запасных белков семян Hedysarum zunduku, Н gmehnu, Н gmelimi ssp. setigerum // Материалы Всероссийской молодежной научно-практической конференции ботаников. Новосибирск, 2007. С 363-365.

3. Черкасова Е С, Селютина ИЮ, Карнаухова НА Метод SDS-электрофореза при изучении внутривидовой изменчивости редкого вида Hedysarum zunduku Peshkova (Fabaceae) II Материалы Всероссийской конференции, посвященной 60-летию ЦСБС. Новосибирск, 2006 С 317-319.

4 Карнаухова Н А , Селютина И Ю, Черкасова Е С Особенности развития Hedysarum theinum Krasnob при интродукции в лесостепную зону Западной Сибири // Материалы Всероссийской конференции, посвященной 60-летию ЦСБС. Новосибирск, 2006 С. 129-131

5. Карнаухова НА , Селютина НЮ, Черкасова Е С Оценка устойчивости ценопопуляций эндемиков Прибайкалья - Hedysarum zunduku Peschkova, Oxytropis triphylla (Pallas) Pers, O popoviana Peschkova // Материалы Всероссийской научной конференции с международным участием «Биоразнообразие экосистем Внутренней Азии». Улан-Удэ, 2006 Т. 1 С 131-132.

6. Карнаухова НА , Селютина ИЮ, Дорогина О В, Черкасова Е С Изучение популя-ционной изменчивости редкого вида Hedysarum zunduku Peshkova (Fabaceae) // Материалы Пятой международной научно-практической конференции Барнаул, 2006 С 99-103

7 Карнаухова Н А , Селютина И Ю, Казановский С Г, Черкасова Е С Онтогенез и структура популяций Hedysarum zunduku (Fabaceae) - эндемика западного побережья озера Байкал // Бот. журн 2008 Т 93. № 5. С 744-755 (Реценз )

8. Селютина И Ю, Черкасова Е С, Дорогина О В, Подгорная А А , Аильчиееа А О Онтогенез и возрастной состав популяций редкого вида Gueldenstaedtia monophylla Fisch (Fa-baceae) в Центральном Алтае // Сибирский ботанический вестник 2006 Т. 1 Вып 1 С 121126 www journal csbg ru

9 Селютина И Ю., Черкасова Е С, Дорогина О В Видоспецифичность запасных белков редких видов рода Iris L. Дальнего Востока, выявляемая методом SDS-электрофореза // Сибирский ботанический вестник 2006 Т. 1. Вып. 1. С. 93-98. www.journal csbg ru

Подписано в печать 07.11 08 Формат 60x84'/¡6 Объем 1,0 п л Тираж 100 экз Заказ № 17

Центральный сибирский ботанический сад СО РАН 630090 Новосибирск, ул Золотодолинская, 101

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Черкасова, Елена Сергеевна

СодержаниеВведение.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Общая характеристика рода Hedysarum L.

1.2. Методы изучения и охраны редких видов растений.

Оценка различных подходов к сохранению редких и исчезающих видов растений.

Генетические подходы в изучении популяций.

Использование молекулярных технологий в целях сохранения биоразнообразия.

Применение запасных белков семян в качестве генетических маркеров.

Глава 21Объекты, районы и методы исследования.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Природные условия.

2.3. Методы исследования.

Методики изучения ценопопуляций.

Цитологический анализ.

Электрофорез запасных белков семян.

Математическая обработка данных.

Глава 3. Оценка состояния ценопопуляций Hedysarum zundukii.

3.1. Изменчивость морфологических признаков в ценопопуляциях

3.2. Анализ семенной продуктивности в ценопопуляциях.

3.3. Онтогенетическни состав ценопопуляций.

3.4. Демографические показатели ценопопуляций.

Глава 4. Изменчивость электрофоретических спектров запасных белков семян и числа хромосом у представителей секций Multicaulia и Subacaulia.

4.1. Изучение запасных белков семян Hedysarum zundukii методом

SDS-электрофореза.Ошибка! Закладка не определена.

Характеристика электрофоретических спектров.

Внутрипопуляционная и внутривидовая изменчивость по электрофоретическим спектрам запасных белков семян.

4.2. Изменчивость электрофоретических спектров запасных белков семян Н. gmelinii и Н. setigerum.

4.3. Цитологический анализ.

Глава 5. Интродукция и рекомендации по охране Н. zundukii.

5.1. Интродукция.

5.2. Охрана.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Структура ценопопуляций и внутривидовая дифференциация редкого вида Hedysarum zundukii Peschkova"

Актуальность работы.

В н астоящее время все более актуальной становится проблема сохранения биологического разнообразия. Интенсивность воздействия человека на природу носит глобальный характер и приводит к исчезновению множества видов. Исчезновение любой популяции, а тем более вида, является невосполнимой утратой для биологического разнообразия планеты. Особенно актуально это в отношении реликтовых видов, которые являются свидетелями уникальных процессов, связанных с глобальными изменениями климата. Эти сохранившиеся, преимущественно теплолюбивые, виды в современных климатических условиях, как правило, имеют небольшую численность. Состояние популяций таких видов может ухудшаться под влиянием антропогенных воздействий. Как следствие, наблюдается снижение генетического разнообразия и усиление негативных последствий генетического дрейфа и инбридинга, что, в свою очередь, может привести к полному исчезновению вида.

К числу редких и находящихся под угрозой исчезновения видов относится Hedysarum znndukii Peschkova - узколокальный эндемик западного побережья оз. Байкал (Красная книга СССР, 1978; Красная книга РСФСР, 1988). Основная часть его ареала представляет собой территорию длиной около 8 км и шириной 0,5 км (Бардунов и др., 2006). Многие авторы (Малышев, Пешкова, 1984; Намзалов, 1999 и др.) признают, что Hedysarum zundukii древний реликтовый вид пустынно-степной флоры.

Необходимым предварительным условием разработки стратегии сохранения редких видов является изучение состояния их генофонда и выяснение их биологических особенностей, включающих систему размножения и состояние ценопопуляций.

Цель и задачи исследования.

Цель настоящей работы - изучение биологических особенностей и популяционно-генетической структуры редкого вида Н. zundukii в сравнении с полиморфным видом Н. gmelinii Ledeb. и Н. setigerum Turcz. ex Fisch. et С. A. Mey.

Для решения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать ценопопуляционные характеристики редкого вида Н. zundukii: численность, плотность, возрастной состав.

2. Для оценки уровня самоподдержания ценопопуляций Н. zundukii изучить семенную продуктивность, возможные причины низкого самовозобновления популяций.

3. Изучить изменчивость морфологических признаков вегетативных и репродуктивных органов Н. zundukii.

4. Провести цитологический анализ Н. zundukii, Н. gmelinii, Н. setigerum и Н. grandijlorum Pall.

5. На основе изучения электрофоретических спектров запасных белков семян определить внутри- и межпопуляционную изменчивость изучаемых видов.

6. Дать комплексную оценку состояния ценопопуляций Н. zundukii.

Защищаемые положения.

К zundukii - эндемичный вид, характеризующийся низким адаптационным и репродуктивным потенциалом и невысоким уровнем генетической изменчивости.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование редкого вида Н. zundukii, включающее выявление плотности и структуры ЦП, семенной продуктивности.

Впервые изучена изменчивость по полипептидным спектрам запасных белков семени, характеризующая уровень генетического полиморфизма и дифференциации популяций Н. zundukii и двух видов произрастающих совместно с ним.

Апробация работы. Основные положения и результаты работы были представлены на Международной конференции молодых ботаников (Санкт-Петербург, 2006); Всероссийской конференции, посвященной 60-летию Центрального сибирского ботанического сада (Новосибирск, 2006); Пятой международной научно-практической конференции (Барнаул, 2006); Всероссийской молодежной научно-практической конференции ботаников (Новосибирск, 2007).

Публикации. Автором опубликовано 6 работ, 3 статьи, в том числе 1 в рецензируемом издании.

Практическая значимость. Полученные данные вносят вклад в изучение биологических и генетических особенностей в природных популяциях редких видов и могут послужить основой для разработки стратегии их сохранения.

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, 5 глав, выводов, списка литературы и приложения. Содержание диссертации изложено на 135 страницах, включая 5 страниц приложения, 18 рисунков и 20 таблиц. Список литературы содержит 179 источников, в том числе 92 - на иностранных языках.

Заключение Диссертация по теме "Ботаника", Черкасова, Елена Сергеевна

Выводы

1. На основании изучения состояния природных ЦП Н. zundukii установлено, что большинство онтогенетических спектров ЦП являются правостороними, полночленными и неполночленными. Максимум численности приходится на старые генеративные и субсенильные особи. Для всех популяций характерна низкая плотность (в среднем 3,4 особи на 1 м ). По классификации «дельта-омега» ЦП относятся к типу стареющих и старых.

2. Изучение особенностей семенной продуктивности Н. zundukii показало, что реализация потенциальной семенной продуктивности у этого вида крайне низкая. Процент семенификации равен в среднем 10,4%.

3. Ценопопуляции Н. zundukii характерилизовались низким полиморфизмом полипептидных спектров, в среднем для вида Ксх=80,5%. Внутривидовая изменчивость полипептидных спектров наиболее высокая у растений полиморфного вида Н. gmelinii. Среднее значение коэффициента сходства выявлено у Н. setigerum (Ксх=72,7%).

4. Анализ средних значений морфологических признаков показал, что природные ЦП Н. zundukii неоднородны. Наибольшая изменчивость выявлена для признаков: диаметр каудекса, число генеративных и вегетативных побегов. При исследовании морфологических параметров цветка было обнаружено, что менее изменчивы длина крыльев и длина лодочки.

5. В пяти изученных нами ЦП Н. zundukii число хромосом составило 2п=16. Это отличается от представленной ранее информации по числу хромосом этого вида (2п=14), что подтверждает обособленность данного вида от видов совместно произрастающих с ним Н. gmelinii и Н. setigerum.

6. Узкая специализация изученного вида, низкая плотность особей в пределах очень ограниченного ареала, низкая семенная продуктивность, затрудненность прорастания семян, большая элиминация проростков служат причинами того, что Hedysarum zundukii крайне редок и требует проведения охранных мероприятий в природных местах обитания.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Черкасова, Елена Сергеевна, Новосибирск

1. Агафонов А. В., Агафонова О. В. SDS-электрофорез белков эндосперма видов Elymus с различной геномной структурой // Сиб. биол. журн. 1992. Вып. 3. С. 7-12.

2. Алтухов Ю. П. Аллозимная гетерозиготность, возраст первой репродукции и продолжительность жизни у древесных // Докл. РАН. 1996. Т. 351. №6. С. 837-840.

3. Алтухов Ю. П. Природоохранная генетика // Экология в России на рубеже XXI века. М.: Нучн. Мир, 1999. С. 9-26.

4. Алтухов Ю. П. Генетические процессы в популяциях. М.: ИКЦ «Академкнига», 2003. 431 с.

5. Бардунов JI. В., Макрый Т. В., Киселева А. А., Казановский С. Г. Особенности флоры Приольхонья (западное побережье Байкала) // Бот. журн. 2006. Т. 91. №1. С. 23-33.

6. Вайнагий И. В. Методика статистической обработки материала по семенной продуктивности на примере Potentilla aurea L. // Раст. ресурсы. 1973. Т. 9. №2. С. 287-296.

7. Вайнагий И. В. О методике изучения семенной продуктивности растений // Бот. журн. 1974. Т. 59. №6. С. 826 -831.

8. Вайнагий И. В. Продуктивность цветков и семян Arinica Montana L. в украинских Карпатах // Раст. ресурсы. 1985. Т. 21. Вып. 3. С. 266-277.

9. Васильев А. Е., Воронин Н. С., Еленевский А. Г., Серебрякова Т. И. Ботаника. Анатомия и морфология растений. М., 1978. 478 с.

10. Вахромеева М. Г., Денисова Л. В. Оценка критического состояния популяций редких и исчезающих видов растений // Охрана генофонда природной флоры. Новосибирск: Наука, 1983. С. 24-28.

11. Глотов Н. В. Об оценке параметров возрастной структуры популяций растений // Жизнь популяций в гетерогенной среде. (Часть I). — Йошкар-Ола: Периодика Марий Эл. 1998. С. 146-149.

12. Горчаковский П. Л., Зуева В. Н. Внутрипопуляционная и межпопуляционная изменчивость уральских эндемичных астрагалов // Экология. 1982. № 4. С. 20-27.

13. Горчаковский П. Л., Зуева В. Н. Возрастная структура и динамика малых изолированных популяций уральских эндемичных астрогалов // Экология. 1984. № 3. С. 3-11.

14. Животовский Л. А. Онтогенетические состояния, эффективная плотность и классификация популяций растений // Экология. 2001. № 1. С 3-7.

15. Жукова Л. А. Изменение возрастного состава популяций луговика дернистого под влиянием выпаса // Биологические науки. 1967. №8. С. 1826.

16. Журавлев Ю. Н., Корень О. Г., Музарок Т. И. Молекулярные маркеры для сохранения редких видов растений Дальнего Востока // Физиол. раст. 1999. Т. 46. Вып. 6. С. 953-964.

17. Журавлев Ю. П. Угрозы биоразнообразию российского Дальнего Востока и текущие задачи охраняемых природных территорий // Вестник ДВО РАН. 2004. №4. С. 158- 161.

18. Завадский К. М. Вид и видообразование. Л., 1968. 405 с.

19. Заугольнова Л. Б. Анализ ценопопуляций как метод изучения антропогенных воздействий на фитоценоз // Бот. журн. 1977. Т. 62. №12. С. 1767-1779.

20. Заугольнова JI. Б. Понятие оптимумов у растений // Журн. общ. биол. 1985. Т. XLXI. №4. С. 444 452.

21. Заугольнова JI. Б., Денисова JI. В., Никитина С. В. Подходы к оценке состояния ценопопуляций растений // Бюлл. МОИП. 1993. Т. 39. Вып. 5.

22. Заугольнова JI. Б. Структура популяций семенных растений и проблемы их мониторинга: Автореф. дисс. . д-ра биол. наук. СПб., 1994. 70 с.

23. Злобин Ю. А. Принципы и методы изучения ценотических популяций растений. Казань, 1989. 148 с.

24. Иметхенов А.Б., Долхонова Э.З., Елбаскин П.Н. Ольхон край родной. Улан-Удэ: Из-во Бурятского госуниверситета, 1997. - С.5-21.

25. Итоги науки и техники. Ботаника. М., 1987. Т. 6. Вып. 1. 207 с.

26. Карнаухова Н. А., Селютина И. Ю., Дорогина О. В., Черкасова Е. С. Изучение популяционной изменчивости редкого вида Hedysarum zundukii Peshkova (Fabaceae) // Материалы Пятой международной научно-практической конференции. Барнаул. 2006. С. 99-103.

27. Карнаухова Н. А., Селютина И. Ю., Казановский С. Г, Черкасова Е. С. Онтогенез и структура популяций Hedysarum zundukii (Fabaceae) — эндемика западного побережья озера Байкал // Бот. журн. 2008. Т. 93. №5. С. 744-755.

28. Кимура М. Молекулярная эволюция: теория нейтральности. М.: Мир, 1985. 398 с.

29. Конарев В. Г. Белки растений как генетические маркеры. М.: «Колос», 1983. 319 с.

30. Конарев А. В., Конарев В. Г., Губарева Н. К., Пенева Т. И. Белки семян как маркеры в решении проблем генетических ресурсов, селекции и семеноводства//Цитология и генетика. 2000. Т. 34. №2. С. 91-104.

31. Красная книга Иркутской области: Сосудистые растения. Иркутск: Изд-во «Облмашинформ», 2001. 200 с.

32. Красная книга Республики Тыва. Новосибирск. Изд-во СО РАН, «Гео», 2002. 150с.

33. Красная книга РСФСР (растения). М.: Росагропромиздат, 1988.590 с.

34. Красная книга СССР. Редкие и находящиеся под угрозой уничтожения виды животных и растений. М., 1978. 460 с.

35. Красников А. А. Методика приготовления временных давленых препаратов для подсчета хромосом // Проблемы кариологии, кариосистематики и молекулярной систематики растений. Новосибирск: Центральный сибирский ботанический сад СО РАН. 2004. Вып. III. 10 с.

36. Курбатский В. И., Млахова Л. А. Числа хромосом для некоторых видов Hedysarum L. на юге Красноярского края (Минусинская степь) // Сист. заметки по материалам Гербария им. П. Н. Крылова. Томск, 2003. № 93. С. 12—13.

37. Левина Р. Е. Репрдуктивная биология семенных растений. (Обзор проблемы). М.: Наука, 1983. 96 с.

38. Майр Э. Популяции, виды и эволюции. М.: Мир, 1974. 460 с.

39. Малахова Л. А., Курбатский В. И. Числа хромосом для некоторых видов Hedysarum L. с территории Сибири // Сист. зам. Герб. Томск, ун-та. 1992. №89. С. 3-5.

40. Малышев С. В., Картель Н. А. Молекулярные маркеры в генетическом картировании растений // Молекуляр. Биология. 1997. Т. 31. С. 197-208.

41. Малышев JI. И., Пешкова Г. А. Нуждаются в охране редкие и исчезающие растения Центральной Сибири. Новосибирск, 1979. 172 с.

42. Малышев Л. И., Пешкова Г. А. Особенности и генезис флоры Сибири (Предбайкалье и Забайкалье). Новосибирск, 1984. 265 с.

43. Мамаев С. А. Формы внутривидовой изменчивости древесных растений. М.: Наука, 1973. 283 с.

44. Мухина В. Ф. Плодоношение Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng. в Центральной Якутии // Раст. ресурсы. 1995. Т. 31. Вып. 3. С. 81-89.

45. Некрасов В. И. Актуальные вопросы развития теории акклиматизации растений. М.: Наука, 1980. 101 с.

46. Намзалов Б. Б. Эндемизм и реликтовые явления во флоре и растительности степных экосистем Байкальской Сибири // Биоразнообразие Байкальской Сибири / Под ред. В.М. Корсунова. Новосибирск, 1999. С. 184-192.

47. Охрана генофонда природной флоры. Нвосибирск: «Наука», 1983. 192 с.

48. Пешкова Г. А. Степная флора Байкальской Сибири. М.: Наука, 1972. 207 с.

49. Пешкова Г. А. Семейство Fabaceae или Leguminosae Бобовые // Флора Центральной Сибири. Новосибирск, 1979. Т. 2. С. 585-639.

50. Пешкова Г, А. Флорогенетический анализ степной флоры гор Южной Сибири. Новосибирск : Наука, 2001. 192 с.

51. Плохинский Н. А. Биометрия: учебное пособие для студентов биол. специальностей. М., 1970. 368 с.

52. Политов Д. В., Крутовский К. В., Алтухов Ю. П. Характеристика генофондов популяций кедровых сосен по/совокупности изоферментных локусов//Генетика. 1992. Т. 28. №1. С. 93-114.

53. Попцов А. В., Некрасов В. И., Иванова И. А. Очерки по семеноведенью. М.: Наука, 1981.

54. Пробатова Н. С., Рудыка Э. Г., Павлова Н. С., Верхолат В. П.,. Нечаев В. А. Числа хромосом видов растений из Приморского края, Приамурья и Магаданской области // Бот. журн. 2006. Т. 91. №. 3. С. 491509.

55. Программа и методика наблюдений за ценопопуляциями видов растений Красной книги СССР. М., 1986. 34 с.

56. Работнов Т. А. Жизненный цикл многолетних травянистых растений в луговых ценозах // Тр. Бот. ин-та АН СССР. 1950. Сер. 3. Вып. 6. С. 7-204.

57. Работнов Т. А. Некоторые вопросы изучения ценотических популяций // Бюлл. МОИП. Отд-ние. биол. 1969. Т. 74, вып. 1. С. 141 149.

58. Работнов Т. А. Луговедение. М.: Изд-во МГУ, 1974. 384 с.

59. Редкие и исчезающие растения Сибири. Новосибирск, 1980. 223с.

60. Растительные белки и их биосинтез. М.: Наука, 1975. 342 с.

61. Серебрякова Т. И. Еще раз о понятии "жизненная форма" у растений. // Бюлл. МОИП, отд. биол. 1980. Т. 85, вып 6. С. 75-86.

62. Семенова Г. П. Редкие и исчезающие виды флоры Сибири: биология, охрана. Нвовсибирск: Академическое изд-во «Гео». 2007. 408 с.

63. Стегний В. Н. Архитектоника генома, системные мутации и эволюция. Новосибирск: Изд-во Новосиб. ун.-та, 1993. 110 с.

64. Стегний В. Н. Системная реорганизация генома при видообразовании. Мат. конф. Томск: Томский государственный университет, 2001. Т.1. С. 128-137.

65. Тахтаджян А. Л. Макроэволюционные процессы в истории эволюции растительного мира // Бот. журн. 1983. Т. 68. №12. С. 1593-1603.

66. Тимофеев-Ресовский Н. В., Яблоков А. В., Глотов Н. В. Очерки учения о популяции. М.: Наука, 1973. 271 с.

67. Тюрина Е. В. Интродукция зонтичных в Сибири. Новосибирск: Наука, 1978. 240 с.

68. Улизийхутаг Н. Бобовые Монгольской Народной Республики: Автореф. Дис.д-ра биол. Наук. Л., 1989. 42 с.

69. Уранов А. А., Смирнова О. В. Классификация и основные черты развития многолетних растений // Бюлл. МОИП. Отд. биол.: Изд-во Моск-го унив-та, 1969. Т. LXXIL (1). С. 119-134.

70. Уранов А. А. Возрастной спектр фитоценопопуляции как функция времени и энергетических волновых процессов // Биол. науки. 1975. № 2. С. 7-33.

71. Уранов А. А. Вопросы изучения структуры фитоценозов и видовых ценопопуляций // Ценопопуляции растений. Развитие и взаимоотношения. М.: Наука, 1977. С. 8-20.

72. Федоренко О. М., Олимпиенко Г. С. Генетическое разнообразие природных популяций Festuca pratensis Hubs, в Карелии // Генетика. 1998. Т. 34. № 3. С. 379-384.

73. ФирсоваМ. К. Семенной контроль. М.: Колос, 1969. 295 с.

74. Флора СССР. Л.: Изд-во Академии наук СССР. Т. XIII. 1948. 588 с.

75. Флора Сибири. Новосибирск: Наука, 1994. Т. 9. 280 с.

76. Холина А. Б. Состояние популяций Oxytropis chankaensis Jurtz. (Fabaceae) на территории заповедника «Ханкайский» // Мониторинг растительного покрова охраняемых территорий российского Дальнего Востока. Владивосток: БСИ ДВО РАН, 2003. С. 212-221.

77. Холина А. Б. Изменчивость и структура популяций остролодочника ханкайского Oxytropis chankaensis Jurtz.: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Владивосток, 2005. 19 с.

78. Холина А. Б., Холин С. К. Внутривидовая изменчивость дальневосточного эндемика Oxytropis chankaensis // Экология. 2008. №1. С. 16-22.

79. Ценопопуляции растений (основные понятия и структура). М.: Наука, 1976. 217 с.

80. Ценопопуляции растений (очерки популяционной биологии). М.: Наука, 1988. 184 с.

81. Черемушкина В. А. Биология луков Евразии. Новосибирск: Наука, 2004. 280 с.

82. Черепанов С. К. Сосудистые растения России и сопредельных государств. С.-П.: Мир и семья-95, 1995. 991 с.

83. Числа хромосом цветковых растений флоры СССР: Семейства Aceraceae-Menyanthaceae. Л.:Наука, 1990. Т.1. 568 с.

84. Шеппард Ф. М. Естественный отбор и наследственность. М.: Просвещение, 1970. 216 с.

85. Яковлев Г. П. Бобовые земного шара. М.: 1991. 230 с.

86. Andersson S., Waldmann P. Inbreeding depression in a rare plant, Scabiosa canescens (Dipsaceae) // Hereditas. 2002. №136. P. 207-211.

87. Ayres D. R., Frederick J. R. Genetic diversity and structure of the narrow endemic Wyethia reticulata and its congener W. bolanderi (Asteraceae) using RAPD and allozyme techniques // Amer. J. Botany. 1999. №86 (3). P. 334353.

88. Avise J. C. A role for molecular genetics in the recognition and conservation of endangered species // Conservation Biol. 1989. No. 4. P. 279281.

89. Avise J. C. Molecular markers, natural history and evolution. 1994. New York, 356 p.

90. Avise J. C., Hamriek J. C. Conservation genetics: case histories from nature. New York, 1996. 281 p.

91. Baatout H., Marrakchi M., Combes D. Genetic divergence and allozyme variation within and among populations of Hedysarum spinosissimum subsp. capitatum and subsp. spinosissimum (Papilionaceae) // Taxon. 1991. V. 40. P. 239-252.

92. Babaoglu S., Acik L., Adiguzel N. Molecular analysis Turkish Alyssum L. (Brassicaceae) species by RAPD-PCR and SDS-PAGE method // G. U. J. of Science. 2004. 17(3). P. 25-33.

93. Babbel G. R., Selander R. K. Genetic variability in edaphically restricted and widespread plant species // Evolution. 1974. Vol. 28. P. 619-630.

94. Badr A. Electrophoretic studies of seed proteins in relation to chromosomal criteria a the relationships of some taxa of Trifolium II Taxon. 1995. Vol. 44. №2. P. 183-191.

95. Barrett S. С. H., Kohn J. R. Genetic and evolutionary consequences of small population size in plants: implications for conservation // Genetics and conservation of rare plants. New York: Oxford University Press, 1991 P. 3-30.

96. Barrett S. H., Kohn J. R. Implications for conservation. Oxford university press, 1991. 130 p.

97. Bau S. M. Т., Mazzafera P., Santoro L. Seed storage proteins in coffee // R. Bras. Fisiol. Veg. 2001. Vol. 13. № 1. P. 33-40.

98. Booy G.3 Hendriks R. J. J., Smulders M. J. M., Van Groenendael J. M., Vosman B. Genetic diversity and the survival of populations // Plant boil. 2000. Vol. 2. P. 379-395.

99. Brussard P. F., Gilpin M. E. Demographic and genetic problems of small populations // Conservation biology and the black-footed ferret. New Haven: Yale University Press, 2004. P. 37-48.

100. Caliskan M., Yavuz A., Aktoklu E. Isoenzyme variation in two allopatric populations of Hedysarum pogonocarpum Boiss. (Fabaceae), a Turkish endemic // Biochemical Systematics and Ecology. 2006. Vol. 34. № 2. P. 119-126.

101. Caughley G. Directions in conservation biology // J. Anim. Ecol. 1994. №63. P. 215-244.

102. Charles worth D., Charlesworth B. Inbreeding depression and its evolutionary consequences // Annual Review of Ecology and Systematics. 1987. Vol. 18. P. 237-268.

103. Crawford D. J., Stuessy T. F., Siva M. O. Allozym variation in Chenopodium sancta-clerae, an endemic species of the Juan Fernandez islands, Chile // Biochemical Systematics and Ecology. 1988. Vol. 16. № 3. P. 279-284.

104. Cruzan M. B. Genetic markers in plant evolutionary ecology // Ecology. 1998. Vol. 79. №2. P. 400-412.

105. DeMauro M. M. Relationship of breeding system to rarity in the lakeside daisy (Hymenoxys acaulis var. glaubra) // Conserv. Biol. 1993. No. 7. P. 542-550.

106. Falk D. A., Holsinger К. E. Population biology and genetics of rare species. New York: Oxford University Press, 1991. P. 5-30.

107. Falk D. A., Millar С. I., Olwell M. Restoring Diversity: Strategies for Reintroduction of Endangered Plants. Washington. Island Press, 1996. 303 p.

108. Ford E. B. Ecological genetics. L.: Methuen, 1964. 410 p,

109. Frankham R. Do islands population have less genetic variation than mainland populations? // Heredity. 1997. Vol. 78. P. 311-327.

110. Frankham R. Quantitative genetics in conservation biology // Genet. Res. Camb. 1999. Vol. 74. P. 237-244.

111. Falistocco E., Maurelli L. Chromosome study in Hedysarum coronarium L. II Annali di Botanica. 1990. Vol. XVIII. P. 80-86.

112. Felsesten J. Phylogenies and the comparative method // American Naturalis. 1985. № 125. P.l-15.

113. Gitzendanner M. A., Soltis P. S. Patterns of genetic variation in rare and widespread plant congeners // Amer. J. Bot. 2000. Vol. 87. P.783-792.

114. Godt M. J., Hamrick J. L. Allozyme diversity in the endangered shrub Lindera melissifolia (Lauraceae) and its widespread congener Lindera denzoin I I Canadian Journal of Forest Research. 1996. № 26. P. 2080-2087.

115. Gilpin M. E., Soulu M. E. Minimum viable populations: processes of species extinction II Conservation biology: the science of scarcity and diversity. Sunderland, MA: Sinauer Associates, 1986. P. 19-34.

116. Haig S. M. Molecular contribution to conservation // Ecology. 1998. Vol. 79. No.2. P. 413-425.

117. Hanelt P., Mettin D. Biosystematics of the genus Vicia L. (Leguminosae) //Annu. Rev. Ecol. Syst. 1989. Vol. 20. P. 199-223.

118. Hamrick J. L. The distribution of genetic variation within and among natural plant population // Genetics and Conservation. Benjamin: Cummings, 1983. P. 335-348.

119. Hamrick J. L., Godt M. J. W. Conservation genetics of endemic plant species // Conservation genetics: case histories from nature. London: Chapman & Hall, 1996. P. 281-304.

120. Hamrick J. L., Godt M. J. W. Effects of life history traits on genetic diversity in plant species. Philos. Trans. R. Soc. Lond. 1996. Vol. 351. P. 12911298.

121. Hederik P. W., Miller P. S. C. Conservation genetics: techniques and fundamentals //Ecol. Applic. 1992. No.2. P. 30-46.

122. Holsinger К. E., Gottlieb L. D. Conservation of rare and endangered plants: principles and prospects // Genetic and conservation rare plants. New York, 1991. P. 149-170.

123. Heywood J. S. The effect of the plant size variation on genetic drift in population of annuals // American Naturalist. 1986. No. 127. P. 851-861.

124. Husband В. C., Schemske D. W. Evolution of the magnitude and timing of inbreeding depression in plants // Evolution. 1996. Vol. 50. P. 54-70.

125. Karron J. D. A comparison of levels of genetic polymorphism and self-compatibility in geographically restricted and widespread plant congeners // Evolution Ecology. 1987. № 1. P. 47-58.

126. Karron J. D., Linhart Y. В., Chaulk C. A., Robertson C. A. Genetic structure of populations of geographically restricted and widespread species of Astragalus (Fabaceae) // Amer. J. Bot. 1988. Vol. 75. №8. P. 1114-1119.

127. Karron J. D. Breeding systems and levels of inbretding depression in geographically restricted and widespread species of Astragalus (Fabaceae) // Amer. J. Bot. 1988. Vol. 76. P. 331-340.

128. Karron J. D. Genetic consequences of different patterns of distribution and abundance // The biology of rarity: causes and consequences of rare-common differences. London: Chapman & Hall, 1997. P. 174-189,

129. Karudapuram S., Larson S. Identification of Hedysarum varieties using amplified fragment length polymorphism on a capillary electrophoresis system // Journal of Biomolecular Tehniques. 2005. Vol. 16. P. 318-326.

130. Koehn R. K., Hilbish T. J. The adaptive importance of genetic variation//Amer. Sci. 1987. Vol. 75. P. 134-141.

131. Kruckeberg A. R., Rabinowitz D. Biological aspects of endemism in higher plants 11 Annual Review of Ecology and Systematics. 1989. № 16. P. 447479.

132. Ellstrand N. C., Elam D. R. Population genetic consequences of small population size: implications for plant conservation // Annu Rev. Ecol. Syst. 1993. Vol. 24. P. 217-242.

133. MaClenaghan L. R., Beauchamp A. Low genetic differentiation among isolated populations of the California fan palm {Washingtonia filifera) II Evolution. 1986. Vol. 40. № 2. P. 315-322.

134. McGuire A. D. Interactiona for pollination between two synchronously blooming Hedysarum species {Fabaceae) in Alaska // Amer. J. Bot. 1993. Vol. 80. №2. P. 147-152.

135. Mitchel-Olds J. Quantitative genetic changes in small populations // The unity of evolutionary biology. 1994. Vol. II. P. 634-638.

136. Moran G. F., Muona O., Bell J. Acacia mangium: a tropical forest tree of the coastal lowlands with low genetic diversity // Evolution. 1989. Vol. 43.l.P. 231-235.

137. Narain P. Genetic diversity conservation and assessment // Current Science. 2000. Vol. 79. № 2. P. 170-175.

138. Naveed M., Motomitsu К., Ghulam M. A. Genetic differentiation of cotton cultivars by poly aery lamide gel electrophoresis // Journal of Central European Agriculture. 2005. Vol. 6. № 1. P. 69-76.

139. Nei M. Genetic distance between populations // Amer. Natur. 1972. Vol. 106. P. 283-292.

140. Nei M. Molecular population genetics and evolution. Amsterdam: Holland Press, 1975. 278 p.

141. Nei M. Molecular evolutionary genetic. New York: Columbia Univ. Press, 1987. 363 p.

142. Neel M. C., Cumings M. P. Effectiveness of conservation targets in capturing genetic diversity // Conservation Biology. 2003. Vol. 17. № 1. P. 219229.

143. Neila T-F., Mohamed M. Hedysarum phylogeny mediatied by RFLP analysis of nuclear ribosomal DNA and Hedysarum phylogeny // Genetic Resources and Crop Evolution. 2001. Vol. 48. No. 4. P. 339-345.

144. Nunney L., Campbell K. A. Assessing minimum viable population size: demography meets population genetics // Trends. Ecol. Evolut. Vol. 8.1. P. 234-249.

145. O'Brien S. J. A role for molecular genetics in biological conservation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. Vol. 91. P. 5748-5755.

146. Pavlova K. D., Manova I. V. Pollen morphology of the genera Onobrychis and Hedysarum (.Hedysareacea, Fabaceae) in Bulgaria// Ann. Bot. Fennici. 2000. Vol. 37. P. 207-217.

147. Pearson S. M., Turner M. G., Gardner R. H., O'nell R. V. An organism-based perspective of habitat fragmentation // Biodiversity in Menaged Landscapes. Oxford University Press, 1991. P. 231-242.

148. Polans N. O., Allard R. W. An experimental evaluation of the recovery potential of ryegrass populations from genetic stress resulting from restriction of population size//Evolution. 1989. No. 43(6). P. 1320-1324.

149. Primack R. Essentials of Conservation Biology. Sinauer Associates. Sunderland, 1993. 564 p.

150. Powell A. H., Powell G. N. Population dynamics of euglossine bees in Amazonian forest//Biotropica. 2001. No. 19. P. 176-179.

151. Quinn J. F., Hastings A. Extinction in subdivided habitats // Conservation Biol. 1987. No. 1. P. 198-208.

152. Robinson G., Quinn J. Extinction, turnover and species-diversity in an experimentally fragmented California annual grassland // Oecologia. 1988. No. 76. P. 71-82.

153. Leberg P. L. Strategies for population reintroduction: effects of genetic variability on population growth and size // Conservation Biology 1993. No. 7. P. 194-199.

154. Lande R. Genetic and demography in biological conservation // Science. 1988. No. 241. P. 1455-1460.

155. Lande R. Extinction risks from anthropogenic, ecological, and genetic factors // Genetics and the extinction of species: DNA and the conservation of biodiversity Princeton: Princeton University Press, 1999. P. 1-22.

156. Lerner I. M. Genetic homeostasis. N.Y.: Wiley, 1954. 134 p.

157. Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. Vol. 227. № 5259. P. 680-685.

158. Levin D. A., Ritter K., Ellstrand N. C. Protein polymorphism in the narrow endemic Oenothera organensis // Evolution. 1979. Vol. 33. № 2. P. 534542.

159. Lewontin R. C. Twenty-five years ago in genetics: Electrophoresis in the development of evolutionary genetics: Milestone or millstone? // Genetics. 1991. Vol. 128. P. 657-662.

160. Ladizinsky G., Hymowitz T. Seed protein electrophoresis in taxonomic and evolutionary studies // Theor. Appl. Genet. 1979. Vol. 54. P. 145151.

161. Louati M., Louati-Namouchi I., Chriki A. Genetic diversity, population structure and mating system in endemic Hedysarum carnosum Desf. (Fabaceae) // Plant Genetic Resources Newsletter. 2007. No. 135. P. 33-39.

162. Louati-Namouchi I., Louati M., Chriki A. Mating system and multiple paternity in Hedysarum coronarum L. (Fabaceae) // Agronomie. 2000. Vol. 20. P. 655-663.

163. El-Shanshoury A. R., Haieder A. S. Evidence from SDS-PAGE of seed protein, isozyme patterns and chromosome number for the phylogeny of some Astragalus species from Egypt // J. Union Arab. Biol. 2003. Vol. 4(B). P. 145-164.

164. Sammor R. H. Using electrophoretic techniques in varietal identification, biosystematic analysis, phylogenetic relations and genetic resources management // Journals of Islamic Academy of Sciences. 1991. Vol.4. №3. P. 221-226.

165. Sammor R., Mustafa A. E.-Z., Bard S., Tahr W. Genetic variations in accessions of Lathyrus sativus L // Acta Bot. Croat. 2007. Vol. 66. №1. P. 1-13.

166. Schemske D. W., Husband В. C., Ruckelshaus M. H., Goodwille C., Parker I. M., Bishop J. G. Evaluating approaches to the conservation of rare and endangered plants // Ecology. 1994. Vol. 75. №3. P. 584-606.

167. Schaal B. A., Leverich W. Molecular variation in isolated plant populations // Plant Species Biol. 1996. Vol. 11. P. 33-40.

168. Schaal B. A., Smith W. A., Schmid K. DNA variation in the rare endemic, Salvia penstemenoides II Wildflower. 1992. No. 5. P. 28-32.

169. Shaffer M. L. Minimum population sizes for species conservation // Bioscience. 1981. Vol. 31. № 2. P. 131-134.

170. Spielman D., Brook B. W., Frankham R. Most species are not driven to extinction before genetic factors // PNAS. 2004. Vol. 101. № 42. P. 1526115264.

171. Solbrig О. T. Breeding system and genetic variation in Leavenworthia //Evolution. 1972. Vol. 26. P. 155-160.

172. Thanh V., Phuong V. P., Hien P. P. Application of protein electrophoresis SDS-PAGE to evaluate genetic purity and diversity of several varieties //Рак. J. Agri. Sei. 2003. Vol. 36. P.l 10-115.

173. Torkpo S. K., Danquah E. Y., Offei S. K., Blay E. T. Esterase, total protein and seed storage protein diversity in okra {Abelmoschum esculentus L. Moench) // West Africa J. Applied Ecology. 2006. Vol. 9. P. 7-18.

174. Yaguiu A., Machado-Neto N. В., Cardoso V. J. M. Grouping of Braszilian assesses of lima beans (Phaseolus lunatus L.) according to SDS-PAGA patterns and morphological characters //Maringa. 2003. Vol. 25. № 1.1. P. 7-12.

175. Young A. G., Brown A. H. D. Comparative analysis of the mating system of the rare woodland shrub Daviesia suaveolens and its common congener D, mimosoides H Heredity. 1998. Vol. 80. P. 374-381.

176. Young T. P. Restoration ecology and conservation biology // Biological conservation. 2000. Vol. 92. P. 73-83.

177. Young A. S., Chang S.-M., Sharit R. R. Reproductive ecology of legume, Baptisia arachnifera, and its more widespread congener, B. lanceolata II Journal of Botanty. 2007. № 94 (2). P. 228-236.