Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Сравнительный анализ реактивности Альфа-1-и Альфа-2-адренорецепторов артерий к фенилэфрину и клонидину в различные периоды холодовой адаптации

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Сравнительный анализ реактивности Альфа-1-и Альфа-2-адренорецепторов артерий к фенилэфрину и клонидину в различные периоды холодовой адаптации"

На правах рукописи

АМИНЕВ РАВИЛЬ ШАЙХУЛЛОВИЧ

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕАКТИВНОСТИ АЛЬФА-1- И АЛЬФА-2-АДРЕНОРЕЦЕПТОРОВ АРТЕРИЙ К ФЕНИЛЗФРИНУ II КЛОНИДЙНУ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ХОЛОДОВОЙ АДА.ИТАЛИИ

03 0013 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соисканне ученой степени кандидата медицинских наук

оозоь1иI^

Тюмень - 2007

003061079

Диссертация выполнена в ГОУ ВПО «Тюменская государственная медицинская академия»

Научный руководитель: доктор медицинских наук

Ананьева Ольга Васильевна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор

Щуров Владимир Алексеевич,

доктор медицинских наук, профессор Северин Александр Евгеньевич

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Российский

Государст венный медицинский университет»

Защита состоится «¿(¿Р_^'// 2007 г 6 0 часов на заседании

диссертационного совета Д 208 079 01 при ФГУ «Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» имени академика Г А Илизарова Федерально! о агенства по высокотехнологичной медицинской помощи» по адресу I Курган, ул М Ульяновой, 6

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ФГУ «РНЦ «ВТО» им акад Г А Илизарова Росмедтехнологий»

Автореферат разослан « я; ^ 2007 г

Ученый секретарь диссертационного совет; доктор медицинских наук, профессор

А Н Дьячков

Актуальность исследования.

Учение о рецепторах играет исключительную роль в понимании механизмов го-меостаза и патогенеза различных заболеваний (М Д Машковский, 1999, 2000, П В Сергеев и др, 1987, 1996, 1999) Использование данных о существовании альфа-адренорецепторов позволило создать и применить эффективно в клинической практике как селективные миметики так и селективные блокаторы альфа-1 и альфа-2-адренорецепторов Но до настоящего времени не разработано применение лекарственных средств для улучшения приспособляемости человека к различным режимам холодовой адаптации Это связано с тем, что недостаточно изучены фундаментальные механизмы адаптации к холоду на уровне рецепторных взаимоотношений

Важным является и то, что изменения в сердечно-сосудистой системе во многом определяют резервы организма при адаптации к холоду (Ю Ф Пастухов, В В Хас-кин, 1979, В И Турчинский, 1980, И П Казначеев, 1980, Н А Барбараш, Г Я Двуре-ченская, 1986, Н А Агаджанян, 1991,1993)

Изучение адаптации к низким температурам актуально, т к освоение Севера идет не только за счет миграции населения, но и используется вахтовый и экспедиционно-вахтовый метод труда, когда человек подвергается периодическому процессу адаптации и деадаптации к холоду (Н А Агаджанян с соавт 1984,1986,1994,1996,1997, В В Колпаков, 1983,1986,1991, Г Д Губин, 1990, В Л Хрущев, 1994) При этом может возникнуть состояние "незавершенной адаптации", одним из признаков которой является изменение реактивности периферических рецепторных систем (С Г Кривоще-хов и др 1998, 2000, 2001)

Изучение действия природных факторов, в том числе холода, на регуляцию рецепторов сердечно-сосудистой системы имеет фундаментальное значение, так как это, возможно, может позволить с профилактической целью с помощью холодового закаливания изменять в нужном направлении количество рецепторов Знание количества и чувствительности альфа-адренорецепторов сердечно-сосудистой системы в различные периоды холодовой адаптации позволит у больных более точно подбирать дозу лекарств, действующих на адренорецепторы при различных заболеваниях

Существование организма в изменяющихся условиях внешней среды обусловлено взаимосвязью между клетками, тканями, органами, функциональными системами, что осуществляется с помощью сигнальных молекул различной природы Воздействие медиаторов, гормонов, факторов роста эффекторная клетка воспринимает через специфические образования - рецепторы, которые количественно и качественно трансформируют полученную информацию в адекватную ответную реакцию Поэтому изучение функциональных свойств рецепторов - их количества и чувствительности к биологическим регуляторам - представляет несомненный интерес для фармакологов, физиологов, биохимиков и клиницистов (Т М Турпаев, 1962, 1967, Б Н Ма-нухин, 1968,2000, П В Авдонин, В А Ткачук, 1994, Ргаэег,1995)

Поэтому можно считать, что сравнительная количественная оценка функциональной активности селективного миметика альфа-1-адренорецепторов фенилэфрина и селективного миметика альфа-2-адренорецепторов клонидина на артериальные сосуды при различных сроках холодовой адаптации способствует раскрытию механизмов регуляции кровотока в различных сосудистых регионах на уровне рецепторов и представляет научный и практический интерес для фармакологов, физиологов, биохимиков и клиницистов

Цель работы

Целью настоящей работы явилось проведение сравнительного анализа реактивности альфа-1- и альфа-2-адренорецепторов артерий к фенилэфрину и клонидину в различные периоды холодовой адаптации

Основные задачи исследования

1 Провести сравнительный анализ изменения альфа-1-адренореактивности и альфа-2-адренореактивности к фенилэфрину и клонидину артериальных сосудов кожно-мышечной области задней конечности кроликов после однократного охлаждения

2 Изучить сравнительную характеристику изменения альфа-1-адренореактивности и альфа-2-адренореактивности к фенилэфрину и клонидину артериальных сосудов кожно-мышечной области задней конечности кроликов после 5-и дней холодовой адаптации

3 Исследовать сравнительную характеристику изменения альфа-1-адренореактивности и альфа-2-адренореактивности к фенилэфрину и клонидину артериальных сосудов кожно-мышечной области задней конечности кроликов после 10-и дней холодовой адаптации

4 Исследовать сравнительную характеристику изменения альфа-1-адренореактивности и альфа-2-адренореактивности к фенилэфрину и клонидину артериальных сосудов кожно-мышечной области задней конечности кроликов после 30-и дней холодовой адаптации

Основные положения диссертации, выносимые па защиту

При адаптации к холоду изменяется чувствительность а1-адренорецепторов к фенилэфрину и изменяется количество активных а1-адренорецепторов к фенилэфрину в периферических артериях

При адаптации к холоду изменяется чувствительность а2-адренорецепторов к клонидину и изменяется количество активных а2-адренорецепторов к клонидину в периферических артериях

В различные сроки холодовой адаптации реактивность артерий к фенилэфрину и клонидину изменяется сложным образом, в ряде случаев противоположно, поэтому при адаптации к холоду нужно изучать реактивность как а1-, так и а2-адренорецепторов комплексно с использованием селективных миметиков Тестирование только одного типа рецепторов может дать ложную картину изменения реактивности артерий при адаптации

Научная новизна работы

В работе впервые проведена количественная сравнительная оценка между селективным миметиком а1-адренорецепторов фенилэфрином и селективным миметиком а2-адренорецепторов клонидином Изучены их фармакокинетические свойства при введении одинаковых для них восьми возрастающих доз 2 мкг/кг, 5 мкг/кг, 10 мкг/кг, 15 мкг/кг, 20 мкг/кг, 25 мг/кг, 30 мкг/кг, 50 мкг/кг внутриартериально перед перфузи-онным насосом, при аутоперфузии изолированной задней конечности кролика при регистрации фармакодинамических свойств фенилэфрина и клонидина в виде изменения чувствительности а1- и а2-адренорецепторов, изменения количества активных а1- и а2-адренорецепторов

Впервые все эти изменения проанализированы у кроликов после однократного охлаждения, после 5-дней холодовой адаптации, после 10-дней и 30-дней холодовой адаптации

Получено, что после однократного охлаждения прессорное действие больше возрастает у фенилэфрина по сравнению с клонидином за счет уменьшения чувствительности а1-адренорецепторов к фенилэфрину и а2-адренорецепторов к клонидину одинаково в 3 раза и увеличения количества активных а1- и а2-адренорецепторов более чем в 2 раза

Показано, что на 5-день холодовой адаптации прессорное действие клонидина по сравнению с контролем, становится гораздо большим чем у фенилэфрина за счет резкого увеличения количества активных а2-адренорецепторов к клонидину

Продемонстрировано, что на 10-день холодовой адаптации клонидин сохранил и усилил свое прессорное действие на артерии а действие фенилэфрина почти не отличались от контроля Эти изменения бы пи за счет того, что количество же активных а2-адренорецепторов к клонидину повысилось на 42% (к контролю), а вот количество а1-адренорецепторов нормализовалось

Впервые получено что на 30-день холодовой адаптации прессорное действие клонидина было больше контроля а фенилэфрина меньше Эти изменения обеспечивало увеличение количество активных а2-адренорецепторов к клонидину на 37% (к контролю), снижение количества а1-адренорецепторов к фенилэфрину на 11% (к контролю)

Научно-практическая значимость Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Тюменской государственной медицинской академии Полученные в работе новые данные имеют теоретическое значение, поскольку раскрывают неизвестные ранее механизмы изменения как чувствительности, так и количества активных альфа-1- и альфа-2-адренорецепторов артериальных кожно-мышечной области в процессе холодовой адаптации Практическое значение полученных данных состоит в том, что они уточняют и расширяют механизмы фармакологического действия широко используемых в клинике препаратов, действующих на альфа-адренорецепторы и доказывают, что холодовое воздействие и холодовая адаптация могут изменить величины эффектов этих лекарственных препаратов

Полученные материалы исследований используются в научной работе и в преподавании на кафедре фармакологии ТГМА, на кафедре физиологии Тюменского государственного университета, на кафедре физиологии Университета дружбы народов г Москвы

Апробация работы Материалы и основные положения диссертации доложены и обсуждены на Российско-китайской конференции "Фундаментальная фармакология и фармация - клинической практике' (2006), на 4-Терапевтическом форуме (2005), на 12-Международном симпозиуме (2007)

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 работ, в том числе одна монография, получено свидетельство об официальной регистрации программы для ЭВМ, 4 работы входят в список работ, рекомендованных ВАК для кандидатских диссертаций

Структура и объем диссертации Диссертация изложена на 182 страницах машинописного текста, состоит из введения обзора литературы, описания методов ис-

следования, 4-х глав собственных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов и списка цитируемой литературы Работа иллюстрирована 32 рисунками и 15 таблицами, Указатель литературы содержит 184 отечественных и 149 иностранных источника

Материал н методы исследования Эксперименты проведены на кроликах самцах (массой 2,5-3,5 кг) под гексеналовым наркозом (внутривенно 30 мг/кг) с применением гепарина (1000 ед/кг) Исследуемые животные подразделялись на 5 групп Первую контрольную группу составили кролики, содержавшиеся при температуре окружающей среды (+)18-22'С в течение 30-и дней Вторая группа - кролики после однократного охлаждения, третья- животные после 5-дней, четвертая- кролики после 10-и дней холодовой адаптации, пятая - кролики после 30-и дней холодовой адаптации Холодовое воздействие проводилось ежедневно по 6 часов в охлаждающей камере при температуре (-)Ю'С, в остальное время кролики находились при температуре (+)18-22'С Регистрировали сосудистую ответную реакцию препарата кожно-мышечной области задней конечности при перфузии кровью этого же животного с помощью насоса постоянной производительности (В М Хаютин, 1964, Б И Ткаченко, 1984) Фенилэфрин и клонидин в разных дозах вводили перед входом насоса, изменения перфузионного давления регистрировали электроманометром и записывали на ленте самописца Н-338-4П

Фенилэфрин, селективный миметик а1-адренорецепторов и клонидин, селективный миметик а2-адренорецепторов вводили одномоментно в приводящую магистраль перфузионного насоса в объеме 0,125 мл в различных возрастающих концентрациях 2 мкг/кг, 5 мкг/кг, 10 мкг/кг, 15 мкг/кг, 20 мкг/кг, 25 мкг/кг, 30 мкг/кг, 50 мкг/кг веса животного

Изменения перфузионного давления от исходного уровня после внутриартери-ального введения фенилэфрина и клонидина оценивались как реакции, характеризующие активность адренорецепторов артериальных сосудов задней конечности

Введение восьми возрастающих доз позволило по кривым "доза-эффект" оценить в динамике влияние холодовой адаптации животного на реактивность артериальных сосудов на низкие, средние и высокие дозы фенилэфрина и клонидина.

Для количественной оценки параметров взаимодействия адренорецепторов с препаратами были применены методы оценки взаимодействия "медиатор-рецептор", разработанные БНМанухиным (1968), сущность которого заключалась в том, что данные представлялись в двойных обратных координатах Лайниувера-Берка и соединение экспериментальных точек представляло из себя прямую линию, экстраполяция которой на ось ординат и абсцисс позволяла определить чувствительность (1/К) реакции, максимально- возможную реакцию (Рм), дозу (К), вызывающую 50% от максимально возможного эффекта

Для примера, на рис 1 представлены средние величины повышения перфузионного давления на 8 доз фенилэфрина у животных контрольной группы (Ы) По этим данным, на рис 2 представлен график "доза-эффект" в двойных обратных координатах, где экспериментальные точки соединены прямой, математическим методом наименьших квадратов и экстраполированы до пересечения с осью ординат и абсцисс Пересечение с осью ординат давало отрезок, который соответствовал 1/Рм (1/мкг кг), а обратная величина была Рм (мм рт ст ), пересечение с осью абсцисс отсекало отрезок, который был равен величине 1/К, где /К/ доза вызывающая половину максимального эффекта Полученные для каждого животного величины (1/Рм, Рм, 1/К, К) реак-

тивности системного давления и артериальных сосудов при разных сроках холодовои адаптации обрабатывались статистически

400 350 300 250 200 150

ВКОНТРОЛЬ-ФЕНИЛЭФРИН-КОНЕЧНОСТЬ □1 ДЕНЬ

Рис 1 Средние величины повышения перфузионного давления артериального русла задней конечности на фенилэфрин в контрольной группе и после однократного охлаждения По оси абсцисс дозы препарата в мкг/кг (У) По оси ординат изменение перфузионного давления в мм рт ст, черные столбики - животные контрольной группы, более светлые столбики - животные после воздействия холода

ФЕНИЛЭФРИН АРТЕРИИ КОНЕЧНОСТИ КРОЛИКА

(50) (30) (25) (20) (15) (10) (5) (мкги)

Рис 2 Повышение перфузионного давления артериального русла задней конечности кролика на фенилэфрин в двойных обратных координатах в контрольной группе (Ы) и после однократного охлаждения (ОХС) По оси абсцисс от пересечения с осью ординат направо -доза препарата в обратной величине (1/мкг кг), ниже в круглых скобках - доза препарата в прямых величинах (мкг кг)

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ НИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕАКТИВНОСТИ АРТЕРИЙ К ФЕНИЛЭФРИНУ И КЛОНИДИНУ ПОСЛЕ ОДНОКРАТНОГО ОХЛАЖДЕНИЯ

На рис 3, таб 1 представлен сравнительный статистический анализ реактивности восьми возрастающих доз фенилэфрина с такими же дозами клонидина при внутриар-териальном введении перед перфузионным насосом после однократной холодовой экспозиции животных При введении всех восьми доз фенилэфрина и клонидина отмечались только прессорные реакции, на все дозы был больше прессорный эффект на фенилэфрин, чем на клонидин (Р<0 05)

Фенилэфрин является селективным миметиком альфа- 1-адренорецепторов, определяя кинетические параметры "доза-эффект" по фенилэфрину, мы судили об альфа-1-адренореактивности артериальных сосудов, а по клонидину об альфа-2-адренорецепторах артерий, что согласуется с данными ряда авторов, которые считают фенилэфрин и клонидин селективными миметиками а1- и а2-адренорецепторов сосудов (ЪесЫа е1 а,1975, Авакян О М, 1988, Машковский М Д, 1994, Лоуренс Д Р, Беннит П Н , 1993, Харкевич Д А , 1996, 1999)

Количество активных а1-адренорецепторов после однократного охлаждения увеличилось с Рм=192 ммртст в контроле до Рм=413 ммртст после охлаждения (рис 4), то есть увеличилось в 2 15 раза или возросло до 215% по сравнению с контрольной группой А вот чувствительность а1-адренорецепторов к фенилэфрину уменьшилась с 1/К=0 3 в контроле до 1/К=0 1 после охлаждения (Р<0 05), то есть снизилась в 3 раза

Количество активных а2-адренорецепторов (рис 4) после однократного охлаждения увеличилось с Рм=270 мм рт ст в контроле до Рм=675 мм рт ст после охлаждения, то есть количество активных рецепторов увеличилось в 2 5 раза. Чувствительность взаимодействия клонидина с а2-адренорецепторами уменьшилась с 1/К=0 03 в контроле до 1/К=0 01 после однократного охлаждения, т е снизилась в 3 раза

После однократного охлаждения (рис 4) чувствительность а1-адренорецепторов к фенилэфрину и а2-адренорецепторов к клонидину уменьшается одинаково в 3 раза, а количество активных а1- и а2-адренорецепторов возрастает почти одинаково, количество активных а1-адренорецепторов к фенилэфрину увеличено в 2 15 раза, а количество активных а2-адренорецепторов увеличено в 2,5 раза Поэтому, после однократного охлаждения прессорное действие больше возрастает у фенилэфрина по сравнению с клонидином

Сравнительный анализ фенилэфрина с клонидином показал, что чувствительность а2-адренорецепторов к клонидину была всего 1/К=0 01, что в 10 раз меньше чувствительности а1-адренорецепторов к фенилэфрину Но зато количество активных а2-адренорецепторов было в 1 63 раза больше к клонидину чем количество а1-адренорецепторов к фенилэфрину

На рис 5, таб 1 представлен график изменения прессорной реакции в процентах к соответствующему контролю различных 8 доз фенилэфрина по сравнению с клонидином Видно, что фенилэфрин и клонидин после однократного охлаждения на све дозы вызывают большую прессорную реакцию чем в контрольной группе Но прессорное действие фенилэфрина (по сравнению с контролем в %) намного больше клонидина А это значит, что кровоток и прогрев тканей больше будет уменьшать фенилэфрин чем клонидин (рис 5)

В результате большей чувствительности (1/К) а1-адренорецепторов к фенилэфри-ну, чем чувствительности а2-адренорецепторов к клонидину отмечается намного большая прессорная реакция фенилэфрина на более низкие дозы С увеличением дозы все большую роль играет такой параметр как количество активных адренорецепторов (Рм), поэтому разница в прессорной реакции на фенилэфрин и клонидин с увеличением дозы начинает уменьшаться Но, так как чувствительность а 1-адренорецепторов к фенилэфрину в 10 раз больше, а количество активных а1-адренорецепторов к фени-лэфрину только 1 63 раза меньше чем количество а2-адренорецепторов к клонидину, то преобладает прессорная реакция артерий на фенилэфрин

Таблица 1

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПОВЫШЕНИЯ ПЕРФУЗИОННОГО ДАВЛЕНИЯ

АРТЕРИЙ КОНЕЧНОСТИ КРОЛИКА В мм.рт-СТ. ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ

РАЗЛИЧНЫХ ДОЗ <МКГ/КГ> ФЕНИЛЭФРИНА. ГРИППА -1- ДЕНЬ

С КЛОИИДИНОМ. ГРИППА - 1—ДЕНЬ

ДОЗА 2 5 ю 15 20 25 ЗО 50

N У/к г У/кг У/кг У/ кг У/кг V/ кг У/кг У/кг

1 65 147 198.5 245 275 289 297 336.5

2 64 131 213 .5 231 275 303 313 344

3 73 129 2 Об 271 282.5 295 309 339

4 72 149 231 23 9 272.5 293 315 346.5

5 66 129 181 249 270 295 311 354

6 68 135 196 229 267.5 285 311 351.5

7 66 147 211 265 260 289 303 366.5

а 74 141 213.5 25 3 292.5 301 329 334

9 64 119 208.5 243 280 301 299 334

ю 68 143 201 245 275 299 ЗОЗ 334

11 64 139 211 247 262.5 287 315 334

12 63 131 2Ш1 247 272 .5 293 311 371.5

13 69 139 2 Об 255 277.5 295 301 324

14 73 137 188.5 237 275 295 309 346.5

15 71 139 223.5 249 287.5 305 309 344

16 61 133 218.5 243 267.5 295 301 344

IV 67 139 183 .5 243 267.5 301 321 344

18 72 141 216 253 285 ЗОЗ 311 344

19 70 123 201 247 285 287 301 329

20 7Ш 149 211 249 270 289 311 359

21 71 143 223 .5 23 7 282.5 295 315 366.5

22 66 137 203 .5 259 275 285 309 354

М= 68. 04 137. 27 2Ш6.68 247. 09 275.34 294. 54 309 . 27 345.47

п .79 1.7 2.69 2.12 1.75 1.3 1.6 2.68

С- 3.7 8 12.63 9.97 8.21 6.13 7.54 12.57

--- ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СОСЕДНИХ ДОЗ С р< О.05 > и вер . ош. /---

Вер 69 140 212 251 278 297 312 351

Низ 66 133 2131 242 271 291 305 339

Ьф = 36 .84 21 .77 11. 77 1(9 .25 8.78 7.1 11. 58

вер .от/» О О О □ О О О

ФЕНИЛЭФРИН 1-ДЕНЬ < ВЕРОЯТ.ОШИБКИ / и на*-/ И кЖЛОНИДИН ОХ С

СФ- 31 .11 43.53 38.46 53 .08 54.68 66.69 52.85 26.81

= О О а □ □ О О О

- 419 325 238 179 144 118 98 53

СРЕД. Рм НА ДОЗЫ и довер .ии.КЛОНИДИН - -ОХС---

М2- 13 .09 32.27 61 .11 88 .4 112.4 134. 86 156 225.15

Ёер 16 35 66 92 117 139 160 232

Низ 9 28 55 84 107 130 151 217

После однократного охлаждения

400 350 300 250 200 150 100 50 0

—♦-1-ДЕНЬ ФЕНИЛЭФРИН

1-ДЬМЬ июнид ли —-^^Зо

Р"

/ /

-Лг* 5

П-а

2У

5У

15У

20У

25У

ЗОУ 50У

Рис. 3 Средние величины повышения перфузионного давления артериального русла задней конечности на фенилэфрин и клонидин после однократного охлаждения (1-ДЕНЬ) По оси абсцисс дозы препарата в мкг/кг (У)

По оси ординат изменение перфузионного давления в мм рт ст, (ромб)— реакции на фенилэфрин, (квадрат)— реакции на клонидин, звездочки - недостоверные различия к контрольной группе (*Р>0 05), без звездочки - различия достоверны (Р<0 05)

1/ммртст 0.015Ц 1/Рм

ФЕНИЛЭФРИН I 0 0125 КЛОНИДИН АРТЕРИИ КОНЕЧНОСТИ

(50] (30) (25) (20) (15) 110) (5)

(мкг га)

Рис 4. Сравнительный анализ повышения перфузионного давления (мм рт ст ) артериального русла задней конечности кролика на фенилэфрин с клонидином в двойных обратных координатах после однократного охлаждения (1-ДЕНЬ)

По оси абсцисс от пересечения с осью ординат направо - доза препарата в обратной величине (1/мкг кг), ниже в кр}глых скобках - доза препарата в прямых величинах (мкг кг),

от пересечения с осью ординат налево - величина чувствительности взаимодействия (1/К) рецепторов с миметиком, а обратная ей величина отражает сродство (К мкг кг)

Рис 5 Изменение величины перфузионного давления артерий конечностн после восьми возрастающих доз ФЕНИЛЭФРИНА (ромб, +-% от контроля, ось ординат) по сравнению с КЛОНИДИНОМ (квадрат, +-% от контроля, ось ординат)

За нулевую линию взяты соответствующие величины реакций соответствующих контрольных групп

По оси абсцисс дозы ФЕНИЛЭФРИНА И КЛОНИДИНА в мкг/кг при в/а введении после однократного охлаждения

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕАКТИВНОСТИ АРТЕРИЙ К ФЕНИЛЭФРИНУ IIКЛОНИДИНУ ПОСЛЕ 5-ДНЕЙ ХОЛОДОВОЙ

АДАПТАЦИИ

После 5-и дней холодовой адаптации (рис 6, рис 8) прессорное действие фенилэфри-на на артериальные сосуды задней конечности кролика резко снизилось, по сравнению с животными после однократного охлаждения, а прессорное действие клонидина, наоборот, значительно увеличилось Таким образом , если после однократного охлаждения на все дозы преобладал прессорный эффект с а1-адренорецепторов на фенилэфрин по сравнению с эффектом на а2-адренорецепторы на клонидин, то на 5-й день холодовой адаптации начинает преобладает прессорный эффект клонидина (по сравнению с % исходным уровнем контрольной группы, рис 8)

Сравнительный анализ показывает (рис 6, таб 2), что с увеличением дозы фени-лэфрина и клонидина разница в их прессорном действии значительно уменьшается Так, при дозе 2 мкг/кг фенилэфрин в 3 78 раза более сильно сокращал артерии чем клонидин (по сравнению с контрольной группой), а уже при дозе 20 мкг/кг прессорное преимущество фенилэфрина составило 131 раза, а уже при дозе 50 мкг/кг клонидин начинает преобладать в своем прессорном действии над фенилэфрином Такие изменения реактивности не возможно объяснить простым способом "доза-эффект", для этого нужно проанализировать как изменения чувствительности рецепторов, так и проанализировать изменение количества а1- и а2-адренорецепторов

Таблица 2

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПОВЫШЕНИЯ ПЕРФУЗИОННОГО ДАВЛЕНИЯ

АРТЕРИЙ КОНЕЧНОСТИ КРОЛИКА В мм.рт-ст. ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ

РАЗЛИЧНЫХ ДОЗ <мкг/кг) ФЕНИЛЭФРИНА, ГРИППА - 5-ДНЕЙ

С КЛОНИДИНОМ ГРУППА - 5-ДНЕЙ

ДОЗА 2 5 10 15 20 25 30 50

N Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг

1 69 122.5 152 170 181 184 182 198

2 68 118.5 158 163 181 191 194 201

3 77 118 155 183 185.5 187 191 199

4 76 123 165 167 179.5 186 195.5 202

5 70 118 145 172 178 187 192.5 205

6 72 119.5 151 162 176.5 182 192.5 204

7 70 122.5 157 180 172 184 186.5 210

8 78 121 158 174 191.5 190 206 197

9 68 115.5 156 169 184 190 183.5 197

10 72 121.5 153 170 181 189 186.5 197

11 68 120.5 157 171 173.5 183 195.5 197

12 67 118.5 153 171 179.5 186 192.5 212

13 73 120.5 155 175 182.5 187 185 193

14 77 120 148 166 181 187 191 202

15 75 120.5 162 172 188.5 192 191 201

1Б 65 119 160 169 176.5 187 185 201

17 71 120.5 146 169 176.5 190 200 201

18 76 121 159 174 187 191 192.5 201

19 74 116.5 153 171 187 183 185 195

20 74 123 157 172 178 184 192.5 207

21 75 121.5 162 166 185.5 187 195.5 210

22 70 120 154 177 181 182 191 205

23 72 119.5 153 170 169 186 182 203

24 74 119.5 152 172 184 190 195.5 193

П= 72.12 120.02 155.04 171. 04 180.81 186.87 191 201.29

+-Л1 .72 .39 .99 .97 1.09 .61 1.18 1.04

3.56 1.91 4.89 4.77 5.36 3.01 5.8 5.12

--- ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СОСЕДНИХ ДОЗ < р< 0.05 > и вер.ош ---

Вер 73 120 157 173 183 188 193 203

Низ 70 119 152 169 178 185 188 199

tФ= 58 08 32 .67 11 .47 6. 67 4.82 3. 09 6.51

вер ош/ = 0 0 0 0 0 .196 0

ФЕНИЛЭФРИН 5-ДНЕЙ<ВЕР0ЯТ.ОШИБКИ и на*-/ М кЖЛОНИДИН 5-ДНЕЙ

«¡Ч>= 32.6 32.29 30.07 26.39 26.57 10.62 7.46 14.09

о и/ 0 0 0 0 0 -.001 -.001 0

*-/-- 280 1Ё0 86 50 31 16 7 -13

-- СРЕД.Рм НА ДОЗЫ и довер . ин.КЛОНИДИН —5-ДНЕЙ-

П2 = 18.93 46 83.29 113. 32 137.8 159.9 178.06 231.09

Вер 21 50 87 116 140 164 180 234

Низ 16 41 79 109 135 155 175 227

Поэтому, для выяснения механизмов данных различий проведен сравнительный анализ реактивности фенилэфрина и клонидина после 5-дней холодовой адаптации в двойных обратных координатах Лайниувера-Берка, что представлено на рис 7 Как видно из рис 7 прямая, отражающая реактивность перфузионного давления на фенилэфрин после 5-дней холодовой адаптации при экстраполяции пересекает ось ординат в точке 1/Р=0 00461 (обратные координаты), что соответствует Р=217 ммртст Значит, при возбуждении 100% альфа-1-адренорецепгоров максимально большая доза фенилэфрина (эта доза в этих координатах не может быть определена, так как стремится к пределу — бесконечности) теоретически вызовет прессорную реакцию перфузионного давления равную Р=217 мм рт ст и эта величина (согласно публикациям Б Н Манухина и др) соответствует пропорционально количеству активных альфа-1-адренорецегтгоров При дальнейшей экстраполяции прямой (прямая получена методом наименьших двойных квадратов), отражающей реактивность

перфузионного давления на фенилэфрин, на ось абсцисс при пересечении получаем величину (1/К) чувствительности а1-адренорецепторов к фенилэфрину, где 1/К=0 25 (1/К - это обратная величина дозы К=4 мкг/кг фенилэфрина, вызывающей 50% от максимально возможной прессорной реакции (Р=217 мм рт ст)

Сравнительный анализ после 5-дней холодовой адаптации фенилэфрина с клони-дином показал, что чувствительность а2-адренорецепторов к клонидину была всего 1/К=0 025, что в 10 раз меньше чувствительности а1-адренорецепторов к фенилэфрину Но зато количество активных а2-адренорецепторов к клонидину соответствовало Р=416 ммртст, что в 1 917 раза больше чем количество а1-адренорецепторов к фенилэфрину

Таким образом, можно сделать заключение, что после 5-дней холодовой адаптации чувствительность к фенилэфрину а1-адренорецепторов в 10 раз больше чувствительности а2-адренорецепторов к клонидину, но для обоих миметиков ниже чем в контрольной группе А вот количество же активных а2-адренорецепторов к клонидину в 1 917 раза больше чем количество а1-адренорецепторов к фенилэфрину Поэтому, на низкие дозы сильнее прессорное действие на артерии фенилэфрина, а на дозы с 50 мкг/кг и выше уже сильнее действие клонидина на артерии над фенилэфрином

После 5-дней холодовой адаптации

-♦-5-ДНЕЙ ФЕНИЛЭФРИН -Я-5-ДНЕЙ КЛОНИДИН

/J

г+Л ж\ м 0 8

У* 0 JTT 3 8

■С Ж'

I >

2Y 5Y 10Y 15Y 20Y 25Y 30Y 51

Рис. 6 Средние величины повышения перфузионного давления артериального русла задней конечности на фенилэфрин и клонидин после 5-и дней холодовой адаптации По оси абсцисс дозы препарата в мкг/кг (У) По оси ординат изменение перфузионного давления в мм рт ст, (ромб)- - реакции на фенилэфрин

ФЕНИЛЭФРИН

клонидин

АРТЕРИИ КОНЕЧНОСТИ

Кммртст 0 015 0 0125

01 / Г,

1/К=0 025 (50) (30) ^5) (20) (15) (10) (5) |мкгкг1

Рнс 7 Сравнительный анализ повышения перфузионного давления (ммртст) артериального русла задней конечности кролика на фенилэфрин с клонидином в двойных обратных координатах после 5-дней холодовой адаптации (5-ДНЕЙ) По оси абсцисс от пересечения с осью ординат направо - доза препарата в обратной величине (1/мкг кг), ниже в круглых скобках - доза препарата в прямых величинах (мкг кг), от пересечения с осью ординат величина чувствительности взаимодействия (1/К)

Рнс. 8 Изменение величины перфузионного давления артерий конечности после восьми возрастающих доз ФЕНИЛЭФРИНА (ромб, +-% от контроля, ось ординат) по сравнению с КЛОНИДИНОМ (квадрат, +-% от контроля, ось ординат) За нулевую линию взяты соответствующие величины реакций соответствующих контрольных групп По оси абсцисс дозы ФЕНИЛЭФРИНА И КЛОНИДИНА в мкг/кг при в/а

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕАКТИВНОСТИ АРТЕРИЙ К ФЕНИЛЭФРИНУ И КЛОНИДИНУ ПОСЛЕ 10-ДНЕЙ ХОЛОДОВОЙ АДАПТАЦИИ На 10-й день холодовой адаптации прессорное действие на артериальные сосуды фенилэфрина и клонидина в дозах от 2 мкг/кг до 50 мкг/кг на графике реактивности "доза-эффект' (рис 9, таб 3) имеет вид "ножниц' На дозы от 2 мкг/кг до 15мкг/кг была больше прессорная реакция артерий на фенилэфрин чем на клонидин (Р<0 05), а при возрастании доз от 20 мкг/кг до 50 мкг/кг, наоборот, было больше прессорное действие клонидина чем фенилэфрина

Таблица 3

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПОВЫШЕНИЯ ПЕРФУЗИОННОГО ДАВЛЕНИЯ

АРТЕРИЙ КОНЕЧНОСТИ КРОЛИКА В мм.рт.ст. ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ

РАЗЛИЧНЫХ ДОЗ (мкг/кгЭ ФЕНИЛЭФРИНА, ГРУППА - 10-ДНЕЙ

С КЛОНИДИНОМ , ГРУППА - 10-ДНЕЙ

доза 2 5 1Ш 15 20 25 30 50

N Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг Ч/кг

1 87 132 161 167 179.5 173 185.5 180

2 86 138 155 167 175 181 194.5 194

3 95 135 158 172 163 179 175 185

4 94 124 147.5 169 178 182 175 189

5 88 136 168.5 170 179.5 180 175 187

Б 90 134 165.5 164 170.5 180 175 186

7 88 130 144.5 175 181 176 197.S 183

8 96 134 164 168 175 189 169 187

9 86 133 155 170 173.5 174 182.5 189

10 90 134 161 168 175 176 181 190

11 86 131 168.5 169 167.5 182 181 183

12 85 134 156.5 169 170.5 180 181 184

13 91 135 155 172 179.5 175 181 186

14 95 126 153.5 168 179.5 179 172 191

15 93 139 156.5 167 178 179 190 191

16 83 136 156.5 166 169 175 194.5 184

17 89 133 146 163 173.5 185 187 188

18 94 132 176 176 175 180 184 187

19 92 132 152 171 175 175 169 185

2Q 92 132 159.5 169 182.5 180 170.5 191

21 93 130 144.5 164 175 182 173.5 186

22 88 136 171.5 168 179.5 179 187 191

23 90 133 162.5 170 181 173 181 188

24 92 143 155 169 169 182 184 185

25 87 123 156.5 174 170-5 179 179.5 185

26 95 129 158 166 175 176 188.5 186

М- 90.19 132.84 158 168. 88 175 178.88 181.28 186.96

.7 .85 1.55 .62 .94 .73 1.55 .62

S = 3.61 4.34 7.94 3.19 4.83 3.75 7.91 3.16

---- ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СОСЕДНИХ ДОЗ < р< 0.05 > м вер.oui ./---

Вер 91 134 161 170 176 180 184 188

Низ 88 131 154 167 173 177 178 185

t* = 38 52 14 .17 6. 48 5. 39 3.23 1. 39 3.4

вер ош/= О 0 0 0 .121 16 .212 .067

ФЕНИЛЭФРИН 10-ДНЕЙ<ВЕР0ЯТ. ОШИБКИ /- и на-*—/ 11 к) КЛОНИДИН 10- ДНЕЙ

35.87 25.4 12.51 2.41 6.21 lS. 75 18.77 56.51

ota/ = О 0 0 1.564 а 0 0 0

+-/ = 166 74 23 2 -9 -17 -22 -32

СРЕД-Рп НА ДОЗЫ и довер. ин .КЛОНИДИН —10-ДНЕЙ---

М2 = 33.85 76. D8 127.78 164. 82 192.21 213.35 229.82 273.85

Вер 36 80 131 167 197 217 234 276

Низ 31 71 124 161 186 209 225 271

250

200

н

о

о. 150

2

100 50 0

Рис. 9 Средние величины повышения перфузионного давления артериального русла задней конечности на фенилэфрин и клонидин после 10-и дней холодовой адаптации По оси абсцисс дозы препарата в мкг/кг (У) По оси ординат изменение перфузионного давления в мм рт ст, (ромб)- - реакции на фенилэфрин, (квадрат)— реакции на клонидин,, без звездочки - различия достоверны (Р<0 05)

После 10 дней холодовой адаптации прессорное действие восьми возрастающих доз фенилэфрина на артериальные сосуды задней конечности кролика было на 3%-24% (в зависимости от дозы) больше контроля (рис И, таб 3), а прессорное действи клонидина на артерии возрасло намного больше и превышало прессорную реакцию артерий на клонидин у контрольных животных на 69%-120% (в зависимости от дозы), что видно из рис 11 (Р<0 05)

После 10 дней холодовой адаптации (рис 10) чувствительность а1-адренорецепторов артерий к фенилэфрину увеличилась с 1/К=0 3 в контроле до 1/К=0 425 Количество активных а1-адренорецепторов стало Рм=196 ммртсг, что достоверно не отличалось от контроля (контроль Рм=192 мм рт ст)

После 10-дневной холодовой адаптации (рис 10) увеличилось как количество а2-адренорецепторов с Рм=270 мм рт ст в контроле до Рм=385 мм рт ст , так и возрасла чувствительность а2-адренорецепторов с 1/К=0 03 в контроле до 1/К=0 05 после адаптации к холоду

В результате большей чувствительности (1/К) а1-адренорецепторов к фенилэфрину, чем чувствительности а2-адренорецепторов к клонидину отмечается намного большая прессорная реакция фенилэфрина на более низкие дозы С увеличением дозы все большую роль играет такой параметр как количество активных адренорецепторов (Рм), поэтому разница в прессорной реакции на фенилэфрин и клонидин с увеличением дозы начинает уменьшаться Но, так как чувствительность а1-адренорецепторов к фенилэфрину в 8 5 раз больше, а количество активных а1-адренорецепторов к фенилэфрину только 1 96 раза меньше чем количество а2-адренорецепторов к клонидину, то преобладает прессорная реакция артерий на фенилэфрин только на низкие дозы от 2 мкг/кг до 15 мкг/кг , и только на дозы больше 15 мкг/кг начинает преобладать прессорная реакция артерий на клонидин по сравнению с фенилэфрином, это результат большего количества активных а2-адренорецепторов

I I I ^И 274

-♦-10 ДНЕЙ ФЕНИЛЭФРИН -«-10 ДНЕЙ клонидин

—-0 ш __+181

У

♦'90

2У 5У 10У 15У 20У 25У ЗОУ 50У

Эти изменения были обусловлены самой высокой чувствительностью как а1-адренорецепторов к фенилэфрину (на 41% больше контроля), так и а2-адренорецепторов к клонидину (на 66% больше контроля) из всех изученных периодов адаптации к холоду Количество же активных а2-адренорецепторов к клонидину повысилось на 42% (к контролю), а вот количество а1-адренорецепторов на 10-день адаптации к холоду нормализовалось

После 10-дней холодовой адаптации

(50) РО) НИИ (ОД {иги)

Рис. 10 Сравнительный анализ повышения перфузионного давления (мм рт ст) артериального русла задней конечности кролика на фенилэфрин с клонидином в двойных обратных координатах после 10-дней холодовой адаптации (10-ДНЕЙ) По оси абсцисс от пересечения с осью ординат направо - доза препарата в обратной величине (1/мкг кг), ниже в круглых скобках - доза препарата в прямых величинах (мкг кг), - величина чувствительности взаимодействия (1/К)

2У 5У 10У 15У 20У 25У ЗОУ 50

Рис 11 Изменение величины перфузионного давления артерий конечности после восьми возрастающих доз ФЕНИЛЭФРИНА (ромб, +-% от контроля, ось ординат) по сравнению с КЛОНИДИНОМ (квадрат, +-% от контроля, ось ординат) За нулевую линию взяты соответствующие величины реакций соответствующих контрольных групп По оси абсцисс дозы ФЕНИЛЭФРИНА И КЛОНИДИНА в мкг/кг

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕАКТИВНОСТИ АРТЕРИЙ К ФЕНИЛЭФРИНУ И КЛОНИДИНУ ПОСЛЕ 30-ДНЕЙ ХОЛОДОВОЙ АДАПТАЦИИ

После 30-дней холодовой адаптации прессорное действие восьми возрастающих доз фенилэфрина на артериальные сосуды задней конечности кролика было впервые на 10%-11% меньше контроля (рис 14, таб 4), а прессорное действи клонидина на артерии, наоборот, было больше на 51%-75% (в зависимости от дозы), чем у животных контрольной группы, что видно из рис 14 (Р<0 05)

Таблица 4

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПОВЫШЕНИЯ ПЕРФУЗИОННОГО ДАВЛЕНИЯ

АРТЕРИЙ КОНЕЧНОСТИ КРОЛИКА В им.рт .ст. ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ

РАЗЛИЧНЫХ ДОЗ <mki—кг> ФЕНИЛЭФРИНА , ГРУППА - ЗШ-ДНЕЙ

С КЛОНИДИНОМ. ГРИППА - ЗО -ДНЕЙ

ДОЗА 2 5 Ю 15 2(3 25 ЗО 5(3

N Ч/кг ЧУкг Y/кг V/кг V/кг У/кг- ЧУкг Ч/кг

1 62.5 Ю2 131 138 15(3 143 158 154

2 62 1(38 127 138 147 155 164 168

3 66 .5 Ю5 129 145.5 139 152 151 159

4 66 94 122 141 149 156.5 151 163

5 63 1(36 136 142-5 15е 153.5 151 161

6 64 Ю4 134 133 .5 144 153.5 151 160

7 63 ЮО 120 15(9 151 147.5 166 157

8 67 Ю4 133 139 .5 147 167 147 161

9 62 ЮЗ 127 142 .5 146 144.5 156 163

Ю 64 Ю4 131 139 .5 147 147.5 155 164

11 62 1(31 136 141 142 156 .5 155 157

12 61 .5 Ю4 128 141 144 153 .5 155 158

13 64.5 Ю5 127 145 .5 15(3 146 155 160

14 66.5 96 126 139.5 15(3 152 149 165

15 65 .5 1(39 128 138 149 152 161 165

16 6Q.5 1(36 128 136.5 143 146 164 158

17 63 .5 ЮЗ 121 132 146 161 159 162

18 66 1Ш2 141 151.5 147 153 .5 157 161

19 65 Ю2 125 144 147 146 147 159

20 65 Ю2 130 141 152 153.5 148 165

21 65 .5 ЮО 12(3 133.S 147 156.5 150 160

22 63 Ю6 138 139 .5 15(3 152 159 165

23 64 ЮЗ 132 142.5 151 143 155 162

24 65 113 127 141 143 156.5 157 159

2S 62.5 93 128 148.5 144 152 1S4 159

26 66.5 99 129 136.5 147 147.5 16D 160

27 62 .5 Ю5 129 136 .5 142 152 152 164

28 62 Ю6 133 147 146 149 157 157

М- 63.96 ЮЗ. 03 129.14 140.89 146 . 78 151.73 155. 14 16D.9

.34 .8 .97 .91 .61 1 .(32 .96 .6

S- 1.8 4.23 5.15 4.82 3.24 5.44 5.12 3.19

--- ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СОСЕДНИХ ДОЗ < р< 0.05 > и вер _ о а. Л---

Вер 64 Ю4 131 142 148 153 157 162

Низ 63 Ю1 127 139 14S 149 153 159

to>= 44 .97 20 .73 8. 81 5. 36 4.13 2. 41 5 .07

вер - ои/ - О О О (!) (3.004 1. 572 о

ФЕНИЛЭФРИН 30-ДНЕЙ<ВЕР0ЯТ. ОШИБКИ и и на* -У М кЖЛОНИДИН 3(3 -ДНЕЙ

t«t>= 25.51 17.11 7.42 1.64 9.8 19.78 17.91 4(3 .13

ou/.- О О О 9 .98 О-(3(31 (3 О а

W 136 68 22 2 -11 -18 -24 -35

--- СРЕД-Рм НА [ЮЗЫ и довер.ин. клонидин —за-дней---

М2- 27 61 Ж 138 164 185 2(32 246

Вер 29 65 111 141 167 187 2Ш6 25(3

Низ 24 56 98 134 1613 182 197 241

У клонидина отмечалось достоверное повышение прессорной реакции на артериальные сосуды после однократного охлаждения (рис 5) по сравнению с контролем, после 5-дней холодовой адаптации (рис 8) прессорное действие клонидина на артерии было больше чем у животных после однократного охлаждения, на 10-день (рис 11) холодовой адаптации была больше прессорная реакция клонидина на артерии чем после 5 дней холодовой адаптации, на 30 день холодовой (рис 14) адаптации прессорное действие клонидина меньше чем на 10 день адаптации к холоду и немного больше чем на 5 день адаптации

А вот у фенилэфрина отмечалось противоположное клонидину изменение прес-сорной реакции артерий при различных сроках холодовой адаптации На 30-день хо-лодовой адаптации прессорное действие фенилэфрина на артерии было меньше чем во всех исследуемых группах животных и в том числе меньше чем в контрольной группе (Р<0 05)

После 30-дней холодовой адаптации (рис 14) на все дозы фенилэфрина прессор-ная реакция была меньше чем в контрольной группе Количество активных а1-адренорецепторов к фенилэфрину (рис 13) уменьшилось с Рм=192 3 мм рт ст в контроле до Рм=172 4 мм рт ст после 30-дневной холодовой адаптации на 10 3%, а чувствительность а1-адренорецепторов к фенилэфрину стала равна чувствительности рецепторов артерий контрольной группы (Р<0 05) В результате величины перфузион-ного давления (рис 12) на введение возрастающих доз фенилэфрина с 2 мкг/кг до 50 мкг/кг достоверно Р<0 01 меньше после 30-дневного охлаждения исключительно за счет уменьшения количества активных альфа-1-адренорецепторов кожно-мышечной области к фенилэфрину по сравнению с контрольной группой

Количество активных а2-адренорецепторов (рис 13) после 30-дневной холодовой адаптации увеличилось с Рм=270 мм рт ст в контроле до Рм=370 мм рт ст (после 30 дней), то есть количество активных рецепторов увеличилось в 1 37 раза или возросло на 37% по сравнению с контрольной группой, а чувствительность а2-адренорецепторов к клонидину увеличилась с 1/К=0 03 в контроле до 1/К=0 04 после (30 дней), или возросла в 1 33 раза (+ 33 3%) (Р<0 05)

Сравнительный анализ после 30-дней холодовой адаптации фенилэфрина с кло-нидином показал, что чувствительность а2-адренорецепторов к клонидину была всего 1/К=0 04, что в 7 5 раза меньше чувствительности а1-адренорецепторов к фенилэфрину Но зато количество активных а2-адренорецепторов к клонидину соответствовало Р=370 мм рт ст, что в 2 15 раза больше чем количество а1-адренорецепторов к фенилэфрину

Поэтому, в результате большей чувствительности (1/К) а1 -адренорецепторов к фенилэфрину, чем чувствительности а2-адренорецепторов к клонидину отмечается большая прессорная реакция фенилэфрина на низкие дозы С увеличением дозы все большую роль играет такой параметр как количество активных адр енорецепторов (Рм), поэтому в дозе >15 мкг/кг уже сильнее сокращает артерии клонидин

Такие изменения привели к казалось бы пародоксальному результату, фенилэф-рин на 30-день холодовой адаптации на любые дозы вызывал меньшее сокращение артерий чем в контроле на 11%-12%, те увеличивал кровоток в кожно-мышечной области задней конечности и способствовал прогреву тканей Клонидин же, напротив, сохранил свое контролирующее прессорное действие на артерии

После 30-дней холодовой адаптации

250

о

X о С

ш _

« ао 1Ё1

5=100 ■е-

£ 50

1 1 1 -♦-30-ДНЕЙ ФЕНИЛЭФ -«-30-ДНЕЙ КЛОНИДИ

н

Ль ТП1

Ж*

Х?я

2( & ЮУ 15У2 (X 25/3 (У 5С

Рис. 12 Средние величины повышения перфузионного давления артериального русла задней конечности на фенилэфрин и клонидин после 30-и дней холодовой адаптации По оси абсцисс дозы препарата в мкг/кг (У) По оси ординат изменение перфузионного давления в мм.рт ст, (ромб)- - реакции на фенилэфрин, (квадрат)— реакции на клонидин, звездочки -недостоверные различия к контрольшй группе (*Р>0 05) , без звездочки - различия достоверны (Р<0 05)

Рис 13 Сравнительный анализ повышения перфузионного давления (мм рт ст) артериального русла задней конечности кролика на фенилэфрин с клонидином в двойных обратных координатах после 30-дней холодовой адаптации (30-ДНЕЙ) По оси абсцисс от пересечения с осью ординат направо - доза препарата в обратной величине (1/мкгкг), ниже в круглых скобках - доза препарата в прямых величинах (мкг кг),

10Y 15Y 20Y 25Y

Рис. 14 Изменение величины перфузионного давления артерий конечности после восьми возрастающих доз ФЕНИЛЭФРИНА (ромб, +-% от контроля, ось ординат) по сравнению с КЛОНИДИНОМ (квадрат, +-% от контроля, ось ординат) За нулевую линию взяты соответствующие величины реакций соответствующих контрольных групп По оси абсцисс дозы ФЕНИЛЭФРИНА И КЛОНИДИНА в мкг/кг при в/а

Таблица 5

КОЛИЧЕСТВО АКТИВНЫХ РЕЦЕПТОРОВ (Рм), ПРОПОРЦИОНАЛЬНОЕ МАКСИМАЛЬНОМУ ТОНУСУ АРТЕРИЙ, ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ РЕЦЕПТОРОВ (1/К), А ОБРАТНАЯ ВЕЛИЧ11НА (К) -РАВНА ДОЗЕ (К) мкг/кг, ВЫЗЫВАЮЩЕЙ 50% ЭФФЕКТА ОТ МАКСИМАЛЬНОЙ ПРЕССОРНОЙ РЕАКЦИИ ( Рм )

Вещество Сроки Адаптации Рм-мм рт ст Кол-во Рецеп Торов Рм% Отп 1 /к — чувствительность рецепторов 1/к % Отп К-доза мкг/кг 50% от рм Кроликов

ФЕНИЛ-ЭФРИН AI-AR НОРМА-Ы 192+2 1 * 0 3±0 004 * 3 33+ 0 04 * 26

1-ДЕНЬ 413+10 215% 0 1+0 006 33% (в 3 раза) 10+0 07 24

5-ДНЕИ 217±3 2 113% 0 25+0 006 83% 4+0 04 24

10-ДНЕИ 196±3 1* 102%* 0 425+0 008 142% 2 35+0 08 28

30-ДНЕИ 172±2 9 90% 0 3+0 005 100%* 3 33+0 06 * 28

КЛОНИ-ДИН A2-AR НОРМА-Ы 270+3 8 * 0 03+0 0003 * 33 3±0 4 * 26

1-ДЕНЬ 675+33 250% 0 01+0 0007 33% 100+2 2 22

5-ДНЕИ 416±6 154% 0 025±0 0006 83% 40+0 97 24

10-ДНЕИ 385+4 142% 0 05+0 0004 166% 20+0 17 28

30-ДНЕИ 370+3 5 137% 0 04+0 0004 133% 25±0 28 28

Сравнение всличи» и конгрольной группой, P<Û.tt5 достоверные отличия (иедостийрно [>^0.05, если * звездочка)

N 1-ДЕНЬ 5-ДНЕЙ 1 и. 30-

лнки ДНЕЙ

Рис, 15. Изменение количества активных (±% -Рм —мм.рт.ст. к контролю-Ы, за Нулевую линию взята группа контроля) а: и н2-адренорецепторов к фе:п:.|;фрк1]у (первый столбик, темный) и клониднцу (второй столбик) в коде холодовой адаптации (везде различия между фенилэфришм и клон ил н ном достоверны Р<0.05)

- ЁЭ ФЕНИЛЭФРИН- +-% (МО ш клони дин- +- (1/к) I

I_ в 6

- А 2 |1 У

I п -Щ !

а о J 3 1

щ 1:1 1

щ -1 7-1 7

И

_ 6 Г-Ç т

V 1-ДЕНЬ S-ДНЕ» III 30.

дней дней

Рис. 16. Изменение чувствительности рецепторов (±% 1 /К -1/мкг.кг по отношению к контрнлю-М, за нулевую линию взяты величины группы контроля) аЬ и а2-адреноренечторои к фенил эфрииу (первый столбик, темный) и клонидину (второй столбик) в ходе холодовой адаптации.

(различия между феннлэфрииом и клон ид ином недостоверны после 1-ДЕНЬ. 5-ДНКЙ адаптации к холоду Р>0.05; на. fO-й, 30-ДЕНЬ адаптации различия достоверны

Р<0.05)

ВЫВОДЫ

1 Сравнительный анализ прессорного действия фенилэфрина и клонидина в контрольной группе животных на артериальные сосуды региона задней конечности кролика показал, что количество активных а1-адренорецепторов в 1 4 раза больше количества активных а2-адренорецепторов Чувствительность а1-адренорецепторов в 10 раз больше чувствительности а2-адренорецепторов Поэтому, прессорное действие на артерии с а1-адренорецепторов на фенилэфрин в контрольной группе было на все дозы больше чем с а2-адренорецепторов на клонидин, особенно на низкие дозы за счет большей чувствительности аЬадренорецепторов

2 Нами доказано, что после однократного охлаждения чувствительность al-адренорецепторов к фенилэфрину и а2-адренорецепторов к клонидину уменьшается одинаково в 3 раза, а количество активных al- и а2-адренорецепторов возрастает почти одинаково, количество активных аЬадренорецепторов к фенилэфрину увеличено в 2 15 раза, а количество активных а2-адренорецепторов увеличено в 2,5 раза Поэтому, после однократного охлаждения прессорное действие больше возрастает у фенилэфрина по сравнению с клонидином

3 На 5-день холодовой адаптации прессорное действие клонидина, по сравнению с контролем, становится гораздо большим чем у фенилэфрина Чувствительность al-адренорецепторов к фенилэфрину и а2-адренорецепторов к клонидину одинаково меньше контроля и составляют 83% от нормы А вот количество активных а2-адренорецепторов к клонидину возрастает намного больше (на 54% больше контроля), чем количество активнх аЬадренорецепторов к фенилэфрину (на 13% больше контроля)

4 На 10-день холодовой адаптации клонидин сохранил и усилил свое лидирующее регуляторное действие на артерии, но впервые стал уменьшать прессорную реакцию (% к контролю) артерий с увеличением дозы Фенилэфрин, в основном, почти полностью нормализовал прессорное действие на артерии, за исключением малых доз, и его реактивность только на несколько процентов превышала показатели контрольной группы (Р<0 05) На 10-й день холодовой адаптации прессорное действие клонидина на а2-адренорецепторы увеличилось и было больше чем на 5-й день адаптации, намного превосходило прессорное действие фенилэфрина на аЬадре-норецепторы В отличии от клонидина прессорное действие фенилэфрина на al-адренорецепторы к 10-дню адаптации к холоду уменьшилось по сравнению как с 5-днями адаптации, так и по сравнению с однократным охлаждением Эти изменения были обусловлены самой высокой чувствительностью как аЬадренорецепторов к фенилэфрину (на 41% больше контроля), так и а2-адренорецепторов к клонидину ( на 66% больше контроля) из всех изученных периодов адаптации к холоду Количество же активных а2-адренорецепторов к клонидину повысилось на 42% (к контролю), а вот количество аЬадренорецепторов на 10-день адаптации к холоду нормализовалось

5 Адаптация животных к холоду в течение 30 дней привела к изменению как чувствительности аЬ и а2-адренорецепторов, так и изменению количества активных al- и а2-адренорецепторов Количество активных а2-адренорецепторов к клонидину на 30-день холодовой адаптации было на 37% больше контроля, а количество аЬ адренорецепторов к фенилэфрину, наоборот, стало на 11% меньше контроля По сравнению с 10-днями холодовой адаптации на 30-день адаптации к холоду уменьшилась чувствительность а2-адренорецепторов к клонидину, но все еще превышала

контроль на 33%, а вот чувствительность а1-адренорецепторов нормализовалась Такие изменения привели к казалось бы пародоксалыюму результату, фенилэфрин на 30-день холодовой адаптации на любые дозы вызывал меньшее сокращение артерий чем в контроле на 11%-12%, те увеличивал кровоток в кожно-мышечной области задней конечности и способствовал прогреву тканей Клонидии же напротив, сохранил свое контролирующее прессорное действие на артерии

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1 Результаты проведенных исследований могут служить основой для индивидуального подбора лекарственных средств, действующих на альфа-1- и альфа-2- адре-норецепторы при нарушении функции сердечно-сосудистой системы при снижении температуры окружающей среды у больных для разработки методов улучшения адаптации людей при вахтово-экспедиционной форме тр>да

2 Разработанный в работе метод котичественной оценки взаимодействия препаратов с рецепторами позволяет более глубоко выяснить не точько механизмы холодовой адаптации, но и может быть применен для анализа различных других воздействий на организм

3 Полученные в работе компьютерные программы определения чувствительности рецепторов и их количества по кривым "доза-эффект" к лекарственным препаратам целесообразно применять и для проверки активности и эффективности лекарственных препаратов различных серий и фирм, действующих на а1- и а2-адренорецепторы артерий

5 Полученные данные могут быть использованы для профилактики отморожений при проведении работ на открытом воздухе, при проведении спортивных мероприятий при низкой температуре окружающей среды у людей с различными периодами холодовой адаптации

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Ананьев В H, С H Суплотов, С С Беляева, И А Чешуина, M И Ворновская, Р Ш Аминев, Г В Ананьев Влияние холода на адрено- и холинореактивность артерий различных регионов кровообращения / -Тюмень Издательство "Вектор Бук", 2005 г - 96 с ,(монография)

2 Матаев С И , Ананьев В H , Куприянов В С , Куприянов С В , Беляева С С Действие холода на артерии/ (Глава 3 Количественная оценка альфа-1-адренореактивности артериальных сосудов кожно-мышечной области и тонкого кишечника на 1-й, 5-й, 10-й, 30-й день холодовой адаптации,-С 46-82 - совместно с Аминевым Р Ш) -Тюмень Издательство "Вектор Бук", 2005 г - 94 с (монография)

3 Ананьев В H , Матаев С И , Василькова Т H , Ананьева О В , Суплотов С H , Аминев Р Ш , Ананьев Г В , Ворновская M И , Фурин В H Изменение реактивности рецепторов сердечно-сосудистой системы в различные периоды адаптации к низким температурам//Материалы XII Международного симпозиума "Эколого-физиологические проблемы адаптации", Москва, РУДН, 2007 -С 32-34

4 Ananev V N, Suplotov S N, Ananeva О V, Furin V A, Aminev R Sh CHARACTERISTIC OF ACTIVITIES OF ADRENO- AND CHOLINORECEPTORS OF ARTERIAL VESSELS DURING DIFFERENT MATURITIES OF COLD DAPTATION II 2- Российско-китайская научная конференция по фармакологии «Фундаментальная фармакология и фармация - клинической практике», Perm, Russia 25-27 September, 2006 -С 12

5 Ананьева О В , Ананьев В H , Аминев Р Ш , Жмурова А И , Ворновская M И Реактивность рецепторов сердечно-сосудистой системы при адаптации к холоду //Материалы 4-терапевтического форума "Актуальные вопросы диагностики, лечения и профилактики наиболее распространенных заболеваний внутренних органов" Тюмень Издат центр "Академия",2005, 9-10 С

6 Ананьева О В , Ананьев В H , Аминев Р Ш , Ворновская M И Реактивность к адреналину и ацетилхолину системного и периферического кровообращения при адаптации к холоду //Материалы 4-терапевтического форума "Актуальные вопросы диагностики, лечения и профилактики наиболее распространенных заболеваний внутренних органов" Тюмень Издат центр "Академия",2005, С 9

7 Аминев Р Ш , Ананьев Г В , Курочкина И H Функциональная активность альфа-1 и альфа-2 адренорецепторов артерий к фенилэфрину и клонидину в различные периоды холодовой адаптации // VI Конференция молодых ученых и специалистов, аспирантов и студентов, посвещенная дню Космонавтики, Москва, 10 апреля 2007 г, С 6

8 Ананьев В H , Матаев С И , Суплотов С H , Ананьева О В , Фурин В А , Аминев Р Ш , Ананьев Г В Функциональная активность адрено- и холинорецепторов артериальных сосудов в различные сроки адаптации к холоду // Физиология висцеральных систем, XX Съезд Физиологического общества им И П Павлова, 5 июня 2007 г , С 124

Публикации в журналах, включенных в список ВАК

9 Ананьева О В , Суплотов С H , Ананьев В И , Аминев Р Ш , Ворновская M И Влияние холода на адренорецепторы сердца и артерий// Медицинская наука и образование Урала - 2006 -N3 -С 10-11

10 Ананьева О В , Суплотов С Н , Ананьев В Н , Аминев Р 111, Ворновская М И Влияние низких температур на холинореактивность сердечно-сосудистой системы // Медицинская наука и образование Урала - 2006 -N3 -С 9-10

11 Ананьева О В , Суплотов С Н , Ананьев В Н , Аминев Р Ш Реактивность рецепторов сердечно-сосудистой системы в различные периоды адаптации к низким температурам // Медицинская наука и образование Урала - 2006 -N3 -С 7071

12 Соловьев В С , Ананьева О В , Ананьев В Н , Ворновская М И , Жмурова А И , Аминев Р Ш Свидетельство об официальной регистрации программы для ЭВМ N2005610941 "Построение в двойных обратных координатах Лайниувера-Берка графика взаимодействия адреномиметиков с альфа-адренорецепторами артерий после однократного охлаждения животных и на 5-й, 10-й, 30-й день холодовой адаптации "//заявкаN2005610043, поступило 17 января 2005, зарегистрировано в Реестре программ для ЭВМ 19 апреля 2005 г

АМИНЕВ РАВИЛЬ ШАЙХУЛЛОВИЧ

СРАВНИТЕ ЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕАКТИВНОСТИ АЛЬФА-1- И АЛЬФА-2-АДРЕНОРЕЦЕПТОРОВ АРТЕРИЙ

К ФЕНИЛЭФРИНУ И КЛОНИДИНУ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ХОЛОДОВОЙ АДАПТАЦИИ

03 0013 - физиоюгия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 15 06 2007 г Тираж 120 экз Объем 1,0 уч-изд л Формат 60x84/16 Заказ 327 Издательский центр «Академия» 625023,1 Тюмень, ул Одесская, 54 Тел /факс (3452) 25-03-08