Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Создание комплексной системы профилактики бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Создание комплексной системы профилактики бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа"

На правах рукописи

РОЖДЕСТВЕНСКАЯ ТАТЬЯНА НИКОЛАЕВНА

СОЗДАНИЕ КОМПЛЕКСНОЙ СИСТЕМЫ ПРОФИЛАКТИКИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ПТИЦ В ХОЗЯЙСТВАХ ПРОМЫШЛЕННОГО ТИПА

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология.

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

1 О МАР 2011

Санкт-Петербург - 2011

4840136

Работа выполнена в Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства» (ГНУ «ВНИВИП»),

Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор,

Борисенкова Адель Наумовна, Заслуженный деятель науки РФ

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук

Тугаринов Олег Алексеевич

доктор ветеринарных наук, профессор Субботин Владимир Викторович

доктор ветеринарных наук, профессор Тимченко Людмила Дмитриевна

Ведущая организация: Московская государственная академия

ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина (МГАВМиБ)

Защита диссертации состоится « 31 » марта 2011 г. в 13— часов на заседании диссертационного совета Д220.011.01 в Федеральном Государственном учреждении «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ)» по адресу: Россия, 123022, г. Москва, Звенигородское шоссе, д. 5

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «ВГНКИ» Автореферат разослан « ^/¡гфевраля 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, у

кандидат ветеринарных наук, доцент ^¿'•уТ^У? /

Заслуженный ветеринарный врач РФ 'у Козырев Ю.А.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы

Характерной особенностью современных птицеводческих хозяйств промышленного типа является узкая специализация производства, использование высокопродуктивных линейных и гибридных кроссов птицы, высокая концентрация поголовья на ограниченных территориях. В таких условиях даже при незначительных нарушениях оптимальных зоотехнических и ветеринарно-санитарных условий содержания и кормления птицы происходит интенсивное накопление патогенной и условно патогенной микрофлоры в воздухе и на объектах птичника, что приводит к снижению уровня нормофлоры и отрицательно влияет на естественную резистентность организма птиц. В следствие чего происходит быстрое распространение инфекционных болезней, в первую очередь бактериальной природы, уровень которых по данным Росптицесоюза превышает 60% (Венгеренко Л. А.,2009, Бобылева Г.А., 2010).

В этой связи актуальным является организация и проведение мониторинговых исследований бактериальной микрофлоры, циркулирующей в птицеводческих хозяйствах различного технологического направления, что позволяет контролировать и прогнозировать эпизоотическую ситуацию на весь период выращивания птицы (Борисенкова А.Н., 2000; Гусев В.В. и др., 2003; Андреева Н.Л. и др., 2004; Сидорова А.,2008; Лыско С., Макарова О., 2009).

Одной из особенностей эпизоотологии бактериальных болезней птиц в промышленных птицеводческих хозяйствах является их ассоциированное течение с проявлением респираторного синдрома. При бактериологических исследованиях, как правило, выделяют культуры эшерихий, стафилококков, синегнойной палочки, микоплазм, пастерелл ослабленной вирулентности, орнитобактерий, зачастую в ассоциациях с пневмовирусом, что значительно затрудняет своевременную и объективную постановку диагноза и разработку мер борьбы (Борисенкова А. Н., 2007; Лазуткина Е.А., Бессарабов Б. Ф., 2007; Сауаг^Ь Б.,1999).

В последние годы в птицехозяйствах возросла циркуляция условно патогенной микрофлоры, являющейся причиной проявления токсикоинфекций человека, что ставит проблему на уровень не только ветеринарный, но и медико-экологический. Достаточно упомянуть о выделении в ряде хозяйств культур кишечной палочки (0:157 Н:7), которые вызывают у людей геморрагический колит (Бондаренко В.М., Шаманова М.А.,2004; Степаншин Ю.Г. и др., 2005; Thamm В., 2000), S. enteritidis - одного из основных патогенов при сальмонел-лёзной инфекции (Кафтырева Л.А. и др.,2008 ) и С. jejuni - возбудителя кампи-лобактериоза, являющегося причиной кишечных заболеваний у детей ( Черкасский Б.Л., Минаев В.И.,1993).

Традиционно для профилактики бактериальных болезней птиц широко применяют антимикробные препараты. Наиболее эффективными являются макролиды, тетрациклины, фторхинолоны и созданные на их основе комплексные препараты - тилозина и левомицетина, тилозина и апрамицина (Татарчук 0.п.,2007), доксициклина и линкомицина ( Лагунин С. В. и др., 2005), спек-тиномицина и клиндамицина (Ионов С.Н. и др., 2007). Однако, избавиться этими средствами от ряда вирулентных микроорганизмов удается далеко не всегда. При этом, использование антимикробных препаратов с профилактической целью влечет за собой целый ряд негативных последствий - иммуносу-прессию, дисбактериоз, аллергические реакции, появление у патогенных и условно патогенных бактерий резистентности к антибиотикам, ограничение на использование в пищу людям продуктов убоя птицы, обработанной такими препаратами. Кроме того, в комплексе противобактериальных профилактических мероприятий используют целый ряд эффективных антисептиков (Видении В. Н. 1994), пробиотиков (Тараканов Б.В. и др.,2007; Панин А.Н.,2008).

До последнего времени в стране, за исключением пастереллёза (Борисенкова А.Н., 1992), не были разработаны эффективные вакцины против колибактерио-за, сальмонеллёза и микоплазмоза птиц. Широко апробированные в 70-90-х гг. прошлого века моно - и бивалентные инактивированные вакцины против коли-бактериоза, изготовленные на основе целой бактериальной клетки (Рахманина

И.А., Грошева Г.А., 1980; Артемьева С.А. и др., 1987; Радчук H.A., 1990), оказывали защитное действие только при заражении гомологичными полевыми штаммами E.coli. В комплексе мероприятий по предупреждению и ликвидации бактериальных болезней птиц в РФ отсутствовали также наиболее востребованные практикой ассоциированные бактериальные вакцины.

Установлено, что наиболее эффективные противобактериапьные вакцины могут быть созданы на основе штаммов, подобранных с учетом факторов пато-генности - вирулентных, адгезивных, токсигенных свойств (Григорьева Г.И., Игнатов П.И., 1987; Литвин В.Ю., 1994; Бондаренко В.М., 1999) и с использованием масляно-эмульсионных адъювантов нового поколения, обеспечивающих более продолжительный и напряжённый иммунитет (Glisson J.R. ei ah, 1984; Feberwee A. et al., 2006; Kleven S., 2008).

Исходя из вышеизложенного, работа по совершенствованию системы профилактики бактериальных болезней птиц и созданию эффективных средств их специфической защиты является актуальной.

1.2. Цель работы и задачи исследований

Создать комплексную систему профилактики бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа с учетом биологических свойств возбудителей.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

- провести микробиологический и серологический мониторинг, изучить спектр возбудителей бактериальных болезней, циркулирующих в хозяйствах разного технологического направления;

- изучить биологические свойства возбудителей наиболее значимых бактериальных болезней птиц;

- провести исследования некоторых антимикробных средств, пробиотиков и антисептиков с целью профилактики бактериальных болезней птиц;

- изучить факторы патогенности возбудителей бактериальных болезней птиц и предложить критерии подбора вакцинных штаммов для создания средств специфической профилактики;

- получить лабораторные образцы инактивированных вакцин против бактериальных болезней птиц;

- испытать и предложить адъюванты для промышленного производства бактериальных вакцин;

- разработать технологию производства инактивированных вакцин против колибактериоза, сальмонеллёза и микоплазмоза птиц;

- разработать систему профилактики бактериальных болезней для оценки и прогноза эпизоотической ситуации на период выращивания птицы;

- внедрить в практику промышленного птицеводства средства и методы профилактики болезней бактериальной этиологии.

1.3. Научная новизна и теоретическая значимость работы

Определен спектр и количественный состав микрофлоры возбудителей бактериальных болезней птиц, циркулирующих в хозяйствах различного технологического направления.

Изучены биологические свойства культур, выделенных из различных птицеводческих объектов (здоровая и павшая птица, смывы с тушек, вода из ванн охлаждения, групповые пробы помета, воздух инкубатория). Установлено, что видовой состав микрофлоры зависит от вида, возраста птицы, эпизоотической ситуации и, в меньшей степени, от технологического направления птицехо-зяйств.

Показано, что штаммы Е. coli, не типируемые с помощью набора коммерческих О-коли сывороток, эпизоотически опасные и высоковирулентные для РКЭ и цыплят первого возраста.

Изучены биологические свойства Е. coli и установлено, что термостабильный и термолабильный энтеротоксины вызывают у птиц диареегенные и геморрагические поражения на слизистых оболочках, соответственно, а цито-токсин - пневмонию и гибель цыплят.

Установлена корреляции между токсигенными, адгезивными и вирулентными свойствами эшерихий, выделенных от птиц. Показано, что наибольшей сте-

пенью вирулентности обладают культуры, способные вырабатывать термостабильный энтеротоксин, цитотоксин и специфические адгезивные антигены.

Впервые изучено течение респираторного синдрома у птиц, предложена модель определения этиологического фактора заболевания у птиц при заражении цыплят смесью культур Pasteurella multocida, Escherichia coli и Staphylococcus aureus.

Установлено, что экзотоксин A Ps.aeruginosa свободно проникает через ге-матоэнцефалический барьер и вызывает патологические изменения в паренхиматозных органах.

Изучена степень чувствительности культур патогенных и условно патогенных микроорганизмов, выделенных от птиц, к антибиотикам - «Тиланик», «Тилокол» и «Польодоксин», изучены антагонистические свойства пробиоти-ков - «Ц-люкс» и «Лактикол» и даны рекомендации для внедрения их в практику птицеводства.

Предложены критерии подбора вакцинных штаммов E.coli и S.enteritidis с учетом вирулентных, адгезивных и токсигенных свойств.

Разработаны инактивированные сорбированные вакцины против колибакте-риоза, сальмонелла-энтеритидис инфекции птиц и ассоциированная вакцина против колибактериоза и пастереллеза птиц.

Подобран эффективный масляный адьювант для промышленного производства бактериальных инактивированных вакцин.

Разработаны и внедрена промышленная технология производства инактивированных моно- и ассоциированных сорбированных и масляных вакцин против сальмонеллеза, колибактериоза, пастереллеза и респираторного мико-плазмоза птиц.

Разработана комплексная система профилактики бактериальных болезней птиц с использованием специфических и неспецифических средств защиты и учетом биологических свойств возбудителей.

1.4. Практическая значимость

Разработаны и утверждены нормативные документы на следующие биопрепараты:

- «Вакцина против сальмонеллёза, колибактериоза и пастереллёза птиц инактивированная АВИВАК-Сальмо-Коли-Пастовак», СТО 46262188-00022007;

- «Инструкция по применению вакцины против сальмонеллёза, колибактериоза и пастереллёза птиц инактивированной «АВИВАК - Сальмо- Коли - Пас-товак», утверждена 06.12.07 г.;

- «Вакцина инактивированная эмульсионная против респираторного мико-плазмоза птиц АВИВАК-РМ», ТУ 9384-002-46262188-04.

- «Инструкция по применению вакцины инактивированной эмульсионной против респираторного микоплазмоза птиц «АВИВАК-РМ», утверждена 20.12.2005 г.;

Разработаны: «Рекомендации по диагностике и профилактике псевдомоноза птиц» (одобр. ВПНО «Союзптицепром» 10.11.1989 г.); «Рекомендации по проведению микробиологического мониторинга вывода и выращивания цыплят» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 28.11.1994 г. и утв. директором института); « Рекомендации по диагностике и профилактике пастереллеза птиц» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 1995г.); «Рекомендации по профилактике пневмонии индеек» (утв. ВПНО «Союзптицепром» 28.12.1990 г.); «Рекомендации по контролю сальмонелла-энтеритидис-инфекции птиц» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 31.10.2005 г. и утв. директором института).

1.5. Апробация

Основные положения диссертации опубликованы, доложены и одобрены на: заседаниях Учёного совета Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института птицеводства (ВНИВИП) за 1986-2006 гг.; Всесоюзной научно-производственной конференции (Санкт-Петербург, 1986); Конференциях по птицеводству Национального отделения ВНАП России (Санкт-Петербург, 1993; Сергиев Посад, 1995; Зеленоград, 2003); III Украинской кон-

ференции по птицеводству с международным участием «Птицеводство» (Харьков, 2001); Международной юбилейной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ГНУ ВНИВИП «Новое в эпизоотологии, диагностике и профилактике инфекционных и незаразных болезней птиц в промышленном птицеводстве» (Санкт-Петербург - Ломоносов, 2004); Конференции НПП «АВИВАК» «Современные научные разработки и перспективные технологии для промышленного птицеводства» (Санкт-Петербург, 2005), «20 лет на благо промышленного птицеводства» (Санкт-Петербур, 2010); [-VI Международных конгрессах по птицеводству (Москва, 2005-2010); Научно-практической конференции «Новые мировые тенденции в производстве продуктов из мяса птицы и яиц» (Ржавки, Московская обл., 2006), Научно-практической конференции, посвященной памяти академика РАСХН Р.Н. Коровина «Болезни птиц в промышленном птицеводстве. Современное состояние и стратегия борьбы» (Санкт-Петербург, 2007).

1.6. Публикации результатов исследований

По материалам диссертации опубликовано 37 научных работ, в том числе 12- в изданиях, рекомендованных перечнем ВАК РФ

1.7. Структура и объём работы

Диссертация изложена на 310 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложений.

Работа иллюстрирована 41 таблицей, 25 рисунками и 3 схемами. Список использованной литературы включает 339 источников, в т.ч. 141 иностранных авторов.

1. 8. Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- спектр микрофлоры, выделяемой от птиц при промышленном выращивании;

- биологические свойства возбудителей основных бактериальных болезней птиц (пастереллёз, колибактериоз, псевдомоноз, сальмонеллёз) в птицехозяйст-вах разного технологического направления;

- результаты исследований эффективности антибактериальных препаратов;

критерии подбора вакцинных штаммов для получения высоко иммуно-генных препаратов;

- разработка инактивированных сорбированных и эмульсионных вакцин на основе поверхностных антигенов возбудителей бактериальных болезней, условия их инактивации, режимов сорбции, оптимального состава антигенов в лабораторных и опытно-промышленных партиях вакцин;

- результаты испытаний инактивированных сорбированных и эмульсионных моно- и ассоциированных вакцин против сальмонеллёза, колибактериоза и пас-тереллёза («АВИВАК-Сальмо-Коли-Пастовак») и респираторного микоплазмо-за («АВИВАК-РМ») с целью обеспечения эпизоотического благополучия при промышленном выращивании птицы;

- теоретическое обоснование и разработка средств борьбы и профилактики с бактериальными болезнями птиц с учётом биологических свойств возбудителей и факторов патогенности;

- комплексная система контроля и профилактики бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа.

2.Собственные исследования

2.1. Материалы и методы

Диссертационная работа выполнена в 1986-2007 гг. в соответствии с Российской (общесоюзной) и отраслевой научно-техническими программами НИР в отделе микробиологии ГНУ ВНИВИП Россельхозакадемии. Работа по получению биопрепаратов проведена совместно с НПП «АВИВАК», НИИЭМ им. Пастера (Санкт-Петербург), НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи (Москва), НИИВС (Санкт-Петербург), НИИ микробиологии МО РФ (Киров) и ФГУП «Ставропольская Государственная биофабрика».

2.1.1. Материалы

В работе использовано 2350 коммерческих развивающихся куриных эмбрионов (РКЭ) и 1363 СПФ РКЭ 7-8 сут. возраста производства ФГУП «Щелковский биокомбинат»; 1500 цыплят и кур разного возраста, 30 петухов; 120 белых мышат-сосунков и взрослых белых мышей линии «C57BL/6» живой массой 6-7 и 14-18 г соответственно, и 37 кроликов породы «Шиншилла». В опытах использовали культуры E.coli, Ps.aeruginosa, P.multocida, S.enteritidis, S.gallinarum-pullorum и M. gallisepticum и полевые культуры.

2.1.2. Эпизоотологический, микробиологический и серологический мониторинг

Исследования проведены на 52 птицефабриках яичного и мясного направления кур, индейководческих и утководческих хозяйствах 32 регионов РФ, в которых под наблюдением находилось свыше 30 млн. птиц.

В каждом хозяйстве анализировали эпизоотическую ситуацию, оценивали условия содержания и кормления, при необходимости устанавливали и причины повышенного отхода птицы. С этой целью проводили мониторинговые микробиологические исследования по выделению в хозяйствах культур микроорганизмов от клинически здоровой (мазки из трахеи, помет), павшей птицы (внутренние органы) и объектов птицеводства (воздух инкубатория, смывы с тушек, вода из ванн охлаждения).

Микробиологический мониторинг воздуха выводных шкафов инкубатория проводили в птицехозяйствах разного технологического направления. Для этого чашки со средами - кровяной агар (КА), среда Эндо и желточно-солевой агар (ЖСА) устанавливали на 3-х уровнях выводного шкафа при достижение вывода 15, 40, 60 и 80%, время экспозиции 1мин. Затем чашки выдерживали в термостате и через 24 часа проводили подсчет колоний.

Культурально-морфологические и биохимические свойства микроорганизмов и их идентификацию проводили в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеро-бактериями» (1984 г.) и «Методическими указаниями по бактериологической

диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных» (2000г.). Для идентификации выделенных культур энтеробактерий использовали пластины биохимические дифференцирующие для энтеробактерий, серотипирование - с помощью типоспецифических О-агглютинирующих коли-сывороток согласно «Наставлению по применению агглютинирующих О-колисывороток», утверждённому ГУВ Госагропрома СССР 16 июня 1990 года № 115-6а. Серотипирование сальмонелл проводили согласно схеме Кауфмана-Уайта, с использованием О-комплексных, О-монорецепторных и Н- сывороток, а синегнойной палочки -агглютинирующими поливалентными сыворотками. Каждую из культур Е. coli, Ps.aeruginosa и S. enteritidis, агглютинирующих с любой поливалентной сывороткой на стекле, исследовали с моновалентными сыворотками, входящими в состав наборов. Все реакции, оцененные более чем на два креста, переставляли в пробирочном варианте.

2.1.3. Изучение биологических свойств возбудителей

Вирулентные свойства E.coli, Ps.aeruginosa, P.multocida, S.enteritidis, S.gallinarum-pullorum и других культур микроорганизмов, выделенных от птиц при различной эпизоотической ситуации и из объектов птицеводства, изучали на модели РКЭ 7-8 сут. возраста, 1-3 сут. цыплятах и курах различного возраста. Эмбрионы заражали в аллантоисную полость оттитрованными дозами суточных бульонных культур тестируемых микроорганизмов в объеме 0,2 см3, цыплятам аналогичные культуры вводили интраокулярно в объеме 0,1 см3. Летальную дозу (LD50) рассчитывали по методу Рида и Минча. Кур разного возраста заражали внутримышечно или внутривенно. При гибели биологических моделей в течение 3 сут. в количестве 80% и выше культуры характеризовали как высоковирулентные и вирулентные.

Макроскопические поражения внутренних органов цыплят оценивали по предложенной нами 4-х балльной системе: 0 - изменений нет, 1 балл - слабое поражение одного из органов, 2 - поражение органов дыхания, умеренный перикардит, перигепатит, 3- пневмония, перикардит, перигепатит, энтерит, и 4 балла- пневмония, сильный фибринозный перикардит, перигепатит и энтерит.

Адгезивные свойства кишечной палочки определяли в реакции иммуноадге-зивной гемагглютинации (РИАГА) диагностическими наборами производства ВНИИ прикладной микробиологии (г. Оболенск), в соответствии с «Временным наставлением по применению агглютинирующих сывороток к адгезивным антигенам эшерихий К 88, К 99, 987Р, F41, А20, (1989 г.).

Способность культур E.coli продуцировать термолабильный энтеротоксин (LT) изучали с помощью теста отёка лапки (Вартанян Ю.П. и др. 1978), термостабильный энтеротоксин (ST) - по развитию диареи у мышей-сосунков или 1-3-суточных цыплят (Смирнова Н.А. и др. 1978). Способность культур E.coli вырабатывать цитотоксин (СТ) выявляли при интратрахеальном заражении цыплят, используя «лёгочную» модель (Полоцкий Ю.К., 1968).

Для оценки культур, вызывающих клиническую картину воспаления подглазничных синусов, сережек, межчелюстного пространства, как этиологического фактора ассоциированного респираторного синдрома у птиц, изучали биологические свойства культур, выделенных из мест поражения и параллельно проводили исследования сывороток крови птиц на выявление антител к P.multocida методом ИФА с обязательным подтверждением выделения и идентификации возбудителя бактериологическими методами.

Клиническую картину ассоциированного респираторного синдрома воспроизводили в лабораторных условиях при заражении цыплят 55-сут. возраста смесью культур P.multocida, E.coli и St. aureus в соотношении 1:1:1 по 1 млрд./см3 каждой.

Способность культур Ps. aeruginosa продуцировать экзотоксин А определяли в реакции диффузионной преципитации (РДП) в агаровом геле по методу Эликса с моновалентной антитоксической сывороткой кролика. Биологические свойства экзотоксина А исследовали на моделях РКЭ и цыплятах разного возраста, которым вводили токсиносодержащий супернатант или взвесь бактериальных клеток. Для гистологических исследований кусочки внутренних органов (сердце, печень, почки, селезенка, тимус и бурса) эмбрионов и цыплят фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина и обрабатывали по обще-

принятой методике. Гистосрезы окрашивали гемотоксилином и эозином. Исследования выполнены совместно с доктором ветеринарных наук Бакули-ным В.А.

2.1.4. Определение антибактериальных свойств препаратов

Эффективность антибиотиков в отношении различных культур микроорганизмов определяли по величине минимальной ингибирующей концентрации (МИК) общепринятым диско-диффузионным методом по Керби-Бауэр и методом двойных серийных разведений в жидкой питательной среде.

Антимикробную активность «Катапола» в отношении E.coli, St. aureus, Ps. aeruginosa определяли методом серийных разведений в МПБ при микробной нагрузке 106 мик. тел/мл, токсические свойства препарата на модели РКЭ. Безвредность и эффективность аэрозолей «Катапола» изучали на цыплятах разного возраста, для чего распыление препарата проводили с помощью аппарата САГ-1, время экспозиции - 30 мин.

Антагонистические свойства пробиотиков «Ц-лгокс» и «Лактикол» исследовали методом перпендикулярного подсева тест-микроба к микробу антагонисту (Биргер М.О.,1989) и в опытах на цыплятах в лабораторных и производственных условиях.

2.1.5. Методы получения и контроля опытных и опытно-промышленных серий вакцин

Наработку экспериментальных микросерий вакцин проводили в условиях ГНУ ВНИВИП, опытные серии вакцины готовили на двух биопредприятиях -Научно-исследовательском институте вакцин и сывороток (НИИВС, Санкт-Петербург) и ФГУП «Ставропольская биофабрика». Вакцины получали на основе поверхностных антигенов высоковирулентных штаммов «№ 115» P. mul-tocida, «12 СМ» и «4П» E.coli, «С-5-АТ» S. enteritidis , для получения антигенов использовали метод тепловой дезинтеграции (Борисенкова А.Н., 1975) и штамма «S6» М. gallisepticum, полученным из ФГУ «ВГНКИ».

Контроль накопления адгезивных антигенов в процессе культивирования вакцинных штаммов проводили в реакции агглютинации с коли-адгезин тестом.

В качестве адьювантов использовали 3%-ный раствор ГОА в разных соотношениях (1:1, 1:2 и 2:1), масляную эмульсию на основе Магсо1-52, Моп1а-шёе 1БА-70 УО(1:2).

Стабильность эмульсионных форм вакцин определяли центрифугированием при 4000 об/мин в течение 30 мин, вязкость - с помощью вискозиметра ВПЖ-2 (по ГФ, вып. XI, 1990, с.87).

Стерильность и полноту инактивации полученных препаратов исследовали по ГОСТ 28085-90 «Препараты биологические. Методы бактериологического контроля стерильности», безвредность - по ОСТ 9380-076-00008064-96 «Препараты ветеринарные. Методы определения безвредности. Основные положения».

Антигенную активность вакцин оценивали по уровню антител в сыворотке крови иммунизированных птиц в РА, РИГА с латекс диагностикумом, и/или ИФА на 5, 10, 15 и 20 день. Для изготовления диагностикума использовали гамма-глобулиновые фракции гипериммунных антиадгезивных сывороток цыплят. Полученную фракцию разводили глициновым буфером до концентрации 1,2-1,4 мг%. Частицы монодисперсных полистироловых латексов диаметром 0,31 мкм (производство ВНИИ синтетического каучука им. Лебедева) разводили в соотношении 1:3 глициновым буфером ( рН 8,2 ). Раствор латекса смешивали с гамма-глобулиновой фракцией гипериммунной сыворотки крови кур. Учет реакции проводили визуально в течение 1 часа по 4-х бальной системе.

Напряженность иммунитета изучали на цыплятах разного возраста по результатам контрольного заражения патогенными штаммами возбудителей. При этом учитывали количество клинических случаев заболевания, павших птиц, характер патологоанатомических изменений, процент выделения культур заражающего штамма из органов убитых в конце опыта птиц, сохранность пого-

ловья, прирост живой массы. Коэффициент иммунологической эффективности

(КИЭ), полученных вакцин рассчитывали по формуле:

КИЭ = Ai х 100, где А

КИЭ - коэффициент иммунологической эффективности, % А - количество заболевшей птицы в контрольной группе; % В - количество заболевшей птицы в опытной группе, %

Полученные данные обработаны статистически с применением компьютерной программы Microsoft Excel, проведен расчет средних данных и проверка достоверности различия по критерию Стьюдента, использованы методы математического моделирования и компьютерной графики. 2.2. Результаты собственных исследований

2.2.1. Эпизоотологический, микробиологический и серологический мониторинг бактериальных болезней птиц

Анализ эпизоотической ситуации в РФ за последние 10-15 лет показал, что структура инфекционных болезней птиц претерпела существенные изменения. Падеж от болезней бактериальной этиологии достиг 60% и более от общего числа павших: в том числе от колибактериоза погибло 48,5%, от респираторного микоплазмоза - 11,6%, пуллороза - 1,2%, сальмонеллезов -0,2% и пастереллеза - 0,03%. При этом наибольший процент занимают болезни, возбудители которых относятся к группе условно патогенных микроорганизмов.

Важным звеном в комплексной системе профилактики и борьбы с бактериальными болезнями птиц является микробиологический мониторинг периода вывода и выращивания цыплят. В результате проведенных исследований проб, взятых от клинически здоровых и павших птиц, смывов с тушек, воды из ванн охлаждения тушек, воздуха выводных шкафов инкубатория, замерших эмбрионов в 26 хозяйствах разного технологического направления, было выявлено 18 видов микроорганизмов. При этом доминировали представители условно патогенной микрофлоры - E.coli (39,6 %), S. aureus (13,9%), Pr. vulgaris (14,2%) и Ps. aeruginosa (6,9%). Зооантропогенные бактерии S. enteritidis и С.

jejuni были выделены в 1,8 и 3,5% проб соответственно. При этом оба патогена не были изолированы от индеек и гусей. Процент выделения остальных микроорганизмов составлял 28,7%.

При бактериологическом исследовании птицы в хозяйствах разного технологического направления было установлено, что от птицы мясного направления культуры S. enteritidis и С. jejuni выделяли в количестве 1,7% и 0,9%, яичного -2,6% и 8,2%, соответственно.

Исследования проб воздуха выводных шкафов инкубатория в птицехозяй-ствах показали, что в процессе вывода идет интенсивное накопление микрофлоры . Как видно из данных таблицы 1, общее количество колоний микроорганизмов на кровяном агаре (КА) при выводе 40% было в 2 раза, а при 60 и 80% - в 7-10 раз больше, чем при исследовании, проведенном при 15% уровне вывода цыплят. Аналогичные изменения отмечены и при определении видового состава микроорганизмов. Так, количество колоний колипаратифозных бактерий на среде Эндо к концу вывода увеличивается в 6-9 раз, а стафилококков на желточно-солевом агаре (ЖСА) - в 2,5-4 раза. Полученные результаты статистически достоверны (Р<0,02-0,001).

Таблица 1.

Динамика накопления микрофлоры в воздухе выводных инкубаторов

(п=15)

№ п/п Вывод, % Количество колоний на средах

КА Р Эндо Р ЖСА Р

1. 15 23±4,1 - 5±0,7 - 34±5,0 -

2. 40 45±7,9 <0,02 10±1,5 <0,01 32±4,2 >0,05

3. 60 170±27 <0,001 29±4,0 <0,001 83±10 <0,001

4. 80 228±35 <0,001 45±6,2 <0,001 130±20 <0,001

Спектр микрофлоры, выделяемой из проб воздуха выводного шкафа инкубатора, составил 18 нозологических видов микроорганизмов, в т.ч. потенциально опасных для птицы - St.aureus, St.albus, E.coli, S.enteritidis, Ps. aeruginosa и др. В процессе работы в 8 птицеводческих хозяйствах с различной эпизоотической ситуацией из трупов павших и вынужденно убитых цыплят, кур, индеек, уток, а

также со скорлупы яиц, из воздуха птицеводческих помещений и выводных шкафов инкубатория было выделено 142 культуры Ps. aeruginosa, которые обладали типичными для данного вида культурально-морфологическими и биохимическими свойствами.

При анализе результатов микробиологического мониторинга вывода и выращивания с целью выяснении причин высокого уровня падежа цыплят в первые дни жизни было установлено, что спектр микрофлоры, выделенной из трупов цыплят, в первую очередь из легких, совпадал с данными бактериологического анализа воздуха выводных шкафов и показателями микрофлоры, выделенной из трупов эмбрионов -задохликов. Так, в хозяйстве, неблагополучном по стафилококкозу, возбудитель выделяли не только из воздуха выводного шкафа и выводного зала, но также из легких и сердца цыплят, павших в первую декаду выращивания.

В хозяйствах, благополучных по бактериальным болезням, патогенную микрофлору из проб воздуха выделяли в единичных случаях.

Для оценки и прогноза эпизоотической ситуации по болезням бактериальной этиологии в условиях промышленного выращивания птицы были разработаны "Рекомендации по проведению микробиологического мониторинга вывода и выращивания цыплят», которые одобрены Ученым советом (протокол №19 от 21. 11.1994 г.).

С целью изучения ассоциированного респираторного синдрома у птиц было обследовано 7 хозяйств разного технологического направления, включая одну фабрику по разведению индеек. При клиническом осмотре выявляли до 5% птиц с признаками воспаления инфраорбитальных синусов, сережек, межчелюстного пространства и отмечали повышенный отход и вынужденную выбраковку (8-10%). При проведении серологических исследований птицы родительских стад только на трех бройлерных птицефабриках методом ИФА были обнаружены антитела к Р. multocida в 25,4; 40,2 и 33,1% случаев от количества исследованных, соответственно, а от индеек - 16,7% .

При бактериологических исследованиях патологического материала от птиц с признаками воспаления тканей в области головы в 4-х птицехозяйствах выделены культуры P.multocida в различных ассоциациях с E.coli, St. aureus, Pr. vulgaris и Ps. aeruginosa, а в трех птицехозяйствах - те же ассоциации культур, но без выделения P. multocida. При этих исследованиях культуры P. multocida выделены не были в индейководческом хозяйстве, а серологически регистрировали наличие антител к этому возбудителю. Полученные данные свидетельствуют о полиэтиологичности ассоциированного респираторного синдрома и сложности выделения культур P. multocida при смешанном течении инфекций.

С целью контроля распространения сальмонеллезной инфекции, был проведен сравнительный анализ выделения S. enteritidis и других видов микрофлоры из трупов павшей птицы и групповых проб помета в птицехозяйствах по производству мяса бройлеров и производству яиц (№ 1,3). Микрофлора, выделенная от павшей птицы, представлена 6 и 7-ю видами. В основном это культуры Е. coli - 53,2 и 43,4%, и S. enteritidis - 14,9 и 42,2% , соответственно. При исследовании проб помета кур в хозяйствах №1 и №3, было выделено 10 видов микроорганизмов, при этом E.coli обнаружили в 39,1 и 45,0%, a S. enteritidis - в 26,1 и 5,3% случаев.

Для оценки эпизоотической ситуации по респираторному микоплазмозу (РМ) в разных регионах РФ в 2004-2005 гг. были исследованы соответственно 1032 и 2421 пробы сывороток крови птиц разного возраста на наличие антител к М. gallisepticum. В эти же сроки в 3-х птицехозяйствах определяли уровень антител к возбудителю инфекционного синовита (ИС). Специфические антитела к М. gallisepticum были установлены в 57%, к М. sinoviae -в 33% проб сыворотки. Антитела к обоим видам микоплазм одновременно обнаружены в 73% проб сывороток, что свидетельствовало о высокой инфицированности промышленных стад птиц возбудителями микоплазмозов. Наглядным примером инфицированности М. gallisepticum цыплят и кур разного возраста в пти-цехозяйстве №4 яичного направления, неблагополучным по микоплазмозу, могут служить следующие данные: у цыплят раннего возраста материнские анти-

тела обнаруживали в 5 и 15-сут. возрасте в количестве 10 и 20%, соответственно, а при исследовании в 45-сут. возрасте они отсутствовали. Максимальный уровень инфицированности - 100% положительных реакций был установлен у птиц в возрасте 149-226 дней. Средний титр антител составил 1:2927±410 и 1:9483±1300 (Р<0,01), с минимальными и максимальными колебаниями 1:41 -1:8052 и 1:2739 и 1:18408, соответственно. У кур-несушек в возрасте свыше 450 дней положительных серологических реакций было выявлено уже значительно меньше-18%.

Антитела к М. Бшомае в диагностических значениях в хозяйстве № 5 мясного направления появились к 90- сут. возрасту (1:3000±470) и значительно увеличились (1:7300±900) к 120-сут. возрасту (Р<0,05). В птицехозяйстве яичного направления № 4 антитела начали регистрироваться в 120-сут. возрасте (1:1050±170), а в другом (№6) они отсутствовали. Тем не менее, уже к 140-сут. возрасту птица из всех трех хозяйств различного технологического направления имела высокий уровень антител (1:7300-1:8000 и более). Следует отметить, что в хозяйстве мясного направления (№ 5) у кур родительского стада к 90-100-сут. возрасту при клиническом осмотре отмечали опухание суставов, болезненность при пальпации. При патологоанатомическом вскрытии регистрировали аэросакуллиты. У птицы из хозяйств яичного направления №4 и 6 эти признаки появлялись к 120-140 сут., но в значительно меньшем количестве.

Результаты серологического мониторинга эпизоотической ситуации по М. gaПisepticum и М. в^гктае показали, что респираторный микоплазмоз имеет значительно большее распространение, так как наличие антител к возбудителю М. gaШsepticum обнаружено практически во всех исследуемых хозяйствах.

Таким образом, результаты микробиологического и серологического мониторинга распространения патогенной и условно патогенной микрофлоры позволяет дать оценку эпизоотической ситуации и прогнозировать ее на период выращивания птицы, что позволит своевременно проводить меры неспецифи-

ческой и специфической профилактики болезней птиц в птицехозяйствах неблагополучных по данной инфекции.

2.2.2. Исследование биологических свойств возбудителей бактериальных инфекций птиц

Биологические свойства изучали более чем у 400-х культур E.coli, выделенных от эмбрионов-задохликов, клинически здоровых и павших птиц разных видов и при различной эпизоотической ситуации. При серотипировании выделенных культур E.coli, почти половину (47%) не удалось типировать по О-антигену со стандартными О-коли-сыворотками. Не типируемые культуры выделяли, как правило, в хозяйствах неблагополучных по колибактериозу. Из типируемых 45% отнесли к серовару 0:78, 41% к серовару 0:2 и 14% к серо-варам 0:1, 0:4, 0:8, 0:9, 0:11, 0:15, 0:55, 0:115, 0:126,0:127 и др.

Все выделенные культуры E.coli обладали характерными для данного вида культурально-морфологическими и биохимическими свойствами, но проявляли разную вирулентность в отношении РКЭ и суточных цыплят. По вирулентным свойствам выделенные культуры Е. coli разделили на 4 группы: высоковирулентные, вирулентные, слабовирулентные и авирулентные. Высокую вирулентность проявили 19 из 24 тестированных культур, выделенных от индеек; 9 из 13 - от бройлеров и 5 из 22 - от кур-несушек. Культуры вводили в дозе 0,2 мл3 в аллантоисную полость РКЭ и интраорбитально суточным цыплятам, гибель моделей наблюдали в 90-100% случаев уже в течение 24-48 ч. При этом у павших цыплят при патологоанатомическом вскрытии обнаруживали признаки катаральной пневмонии. Остальные культуры были слабовирулентными или авирулентными как для РКЭ, так и для суточных цыплят.

При исследовании 118 культур Е. coli адгезивные свойства выявили у 63, из которых 20% обладали сильной, 40% - умеренной и 24,5% - слабой адгезивно-стью. Наибольшее количество штаммов имело адгезивные антигены К99, К88 или F41. Три культуры имели по 2 адгезивных антигена (К99 и F41) и по одной культуре - двойные антигены (К88 и F41, А20 и F41, К88 и 987Р).

Эшерихии, у которых были обнаружены адгезины, относились к патогенным сероварам 0:1, 0:2, 0:78, 0:9, 0:11. Большинство их (69%) принадлежали к се-ровару 0:2. У сероваров 0:2 и 0:78 выявлено по два адгезивных антигена. Установлена прямая корреляция между степенью адгезивной активности и вирулентностью культур кишечной палочки. Так, 87,55% культур, обладающих высокой и средней степенью адгезивности, были высоковирулентны для эмбрионов и цыплят разного возраста, а авирулентные культуры не обладали высокоадгезивными свойствами.

Токсигенные свойства Е.соП изучали у 93 культур. Большинство из них образовывало токсины: 24% - термолабильный (ЬТ), 24% - термостабильный (БТ), 9% - оба упомянутых токсина и 24% продуцировали еще и цитотоксин (СТ).

В опытах на мышатах-сосунках и 1-3- сут. цыплятах установили, что 8Т-токсин обладает диареегенными свойствами. У мышей процесс развивался в течение 4 часов и по истечении этого времени у вынужденно-убитых животных на вскрытии отмечали серозно-геморрагический энтерит. У цыплят были аналогичные изменения, и они погибали в течение 2-3-х сут.

ЬТ-токсин, напротив, вызывал геморрагические поражения. При введении его в аллантоисную полость РКЭ и 10- сут. цыплятам интраназально наблюдали их 100% гибель в течение 24-48 ч. На вскрытии у эмбрионов отмечали точечные кровоизлияния на оболочках, у цыплят - отек легких, острую катаральную пневмонию, скопление серозно-геморрагического экссудата.

С помощью «легочной» модели установили, что высоковирулентные культуры кишечной палочки (серовар 0:78 или нетипируемые) способны вырабатывать цитотоксин. При интраназальном заражении эти культуры интенсивно размножались в легочной ткани, вызывая острую катаральную пневмонию и скопление серозно- геморрагического экссудата в грудной полости. Количество микробных тел, высеваемых от зараженных цыплят в динамике, резко возрастало и на 2-3 сутки птица погибала. Установить связь между токсигенными и антигенными свойствами не удалось, так как к одному и тому же серовару

(например, 0:78) были отнесены культуры, образующие токсины, и не обладающие функцией токсинообразования.

При серологическом типировании культур Ps. aeruginosa с помощью набора поливалентных агглютинирующих О-сывороток была установлена их принадлежность к 0:1, 0:2, 0:3, 0:4, 0:6, 0:9 и 0:10 серогруппам, при этом у кур и индеек преобладал серотип 0:6, а у уток - серотип 0:3.

Вирулентные свойства культур Ps.aeruginosa изучали на7-8-сут. РКЭ и цыплятах суточного возраста. Показано, что все культуры вызывали гибель спустя 24-48 ч в 90-100% случаев. У павших цыплят при патологоанатомиче-ском вскрытии отмечали кровоизлияния на сердечной сорочке, пневмонию, инфильтраты в месте инъекции. При бактериологическом исследовании культуры заражающих штаммов выделяли из всех внутренних органов, что свидетельствует о развитии генерализованного септического процесса.

В опытах на цыплятах старшего возраста и курах было показано, что культуры Ps. aeruginosa были вирулентные для РКЭ и цыплят до 30-дневного возраста и слабовирулентные для цыплят старше 40-суточного возраста при вн/венном введении. Птица погибала на 2-3-и сут. в 40-60% случаев. При вскрытии павших цыплят основными патологоанатомическими признаками были кровоизлияния на сердечной сорочке, серозный перикардит, пневмония, некроз тканей в месте введения культуры, а также зеленый цвет печени. Внутримышечное и внутрисинусальное заражение 30-60-сут. цыплят культурами Ps. aeuruginosa приводило лишь к единичным случаям гибели.

При изучении способности синегнойной палочки продуцировать экзотоксин А, было отобрано 6 высоковирулентных культур, обладающих типичными для Ps. aeruginosa культурально-морфологическими свойствами. Иммунохимиче-ским методом в агаризованной среде Мартена было установлено, что все 6 культур, выделенные из трупов птицы, образовывали линии преципитации с моновалентной антитоксической сывороткой кролика, т.е. обладали функцией токсинообразования.

Исследованиями биологических свойств выделенного экзотоксина А на модели РКЭ было показано, что он вызывал их гибель в 66-73% случаев в течение 24 ч, а при введении бактериальной взвеси Ps. aeruginosa за этот период погибало лишь 27-30% эмбрионов. Аналогичные результаты были получены в опытах на цыплятах 10-сут. возраста. При внутримышечном введении токсино-содержащей жидкости гибель наступала в течение 48 ч у 68-72% птиц, а при инъекции бактериальной взвеси за этот же период пало лишь 23-29% птицы. При патологоанатомическом вскрытии трупов вынужденно убитых цыплят на месте введения наблюдали некроз тканей.

Культуры Ps. aeruginosa были высоковирулентны для эмбрионов и цыплят первых дней жизни, при этом возбудитель свободно проникает через гематоэн-цефалический барьер и вызывает специфические изменения характерные для действия токсина, блокируя деятельность основных иммунокомпетентных органов. Проведенными гистологическими исследованиями выявлены деструктивные изменения не только в месте введения культур Ps. aeruginosa, но и во внутренних органах, что указывает на развитие генерализованного патологического процесса.

2.2.3. Ассоциированный респираторный синдром бактериальной этиологии у птиц

Для определения роли патогенных и условно патогенных микроорганизмов в развитии респираторного синдрома у птиц был проведен анализ спектра микрофлоры, выделяемой из мест поражения, и показано, что доминируют культуры кишечной палочки (36,5%) и кокковой микрофлоры (35,85%). Выделение М. gallisepticum, P. multocida и S. enteritidis регистрировали в 4,6; 2,9 и 2,9% случаях, соответственно. При проведении бактериологических исследований патологического материала, взятого от птиц с признаками воспаления тканей в области головы, были выделены культуры P. multocida с типичными культурально-морфологическими и биохимическими свойствами, но не обладающие гемолитическими свойствами. У 4-х культур в сравнении с высоковирулентным штаммом «N»115» P.multocida были изучены вирулентные свой-

ства на 1-3- и 90-сут. цыплятах при внутримышечном, внутрисинусальном и внутривенном заражении.

При внутримышечном способе заражения цыплят оттитрованной дозой суточной бульонной культуры Р.тикоас1а в объеме 0,5 см 3 заболело и пало лишь 40-50% птицы в течение 6-7 сут. При этом высоковирулентный штамм Р.тикоаёа в объеме 0,5 см3 суточной бульонной культуры, разведенной до 10"8, вызывал гибель цыплят в течение 36-48 часов. У павших цыплят обнаруживали серозный перикардит и некротические узелки в печени и разлитой некроз на месте инъекции культуры.

Внутрисинусальное введение цыплятам испытуемых культур Р.тикос1с1а в 70% случаев приводило к развитию респираторного синдрома, характерного для хронического течения пастереллеза. Полученные данные доказывают, что культуры пастерелл, выделенные при респираторном синдроме, обладают слабовирулентными свойствами. Пастереллез птиц в современных условиях протекает в основном ассоциированно в подостро-хронической форме и клинически характеризуется развитием респираторного синдрома.

Для создания у цыплят мясных пород 55-сут. возраста модели ассоциированного респираторного синдрома в экспериментальных условиях были отобраны культуры пастерелл, кишечной палочки и стафилококка, вирулентные для РКЭ 8-сут. возраста. Цыплят заражали как монокультурами, так и их смесью (1:1:1) внутрисинусальным способом в объеме 0,21 см3.

Наиболее выраженная клиническая картина с двусторонним воспалением тканей подглазничных синусов, сережек и межчелюстного пространства была при введении смеси культур, в то время как при заражении монокультурами Р.ти1кга<1а и Е.соН отмечали лишь незначительное воспаление на месте введения. Заражение культурой 51.аигеиз клинически никак не проявлялось.

2.2.4. Исследование антибактериальных препаратов

Традиционное решение проблемы бактериальных болезней птиц с помощью антибиотиков явилось предпосылкой для сравнительной оценки эффек-

тивности препаратов «Тилозина», «Тилокола» и «Польодоксина», действующим веществом которого является доксициклин.

В производственных условиях испытали препараты «Тилокол» и «Тила-ник». Первая группа цыплят (4480 гол.) получала «Тилокол» в дозе 200 мг/кг на 1-3 и 26-28 сут., 2-я (5200 гол.) - «Тиланик» в дозе 0,5 г/л по аналогичной схеме и 3-я группа (4480 гол.) - препараты не получала (контрольная). Продолжительность опыта составила 42 дня. Применение «Тилокола» и «Тилани-ка» улучшило показатели сохранности бройлеров на 3,5 и 1,4% , среднесуточного прироста живой массы на 2,2 и 0,7 г и средней живой массы перед убоем на 94 и 30 г по сравнению с контрольной группой.

Эффективность «Польодоксина» проверяли в опытах in vitro на 44 культурах 10 видов бактерий. Показано, что 72,7% культур были чувствительны и высокочувствительны.

«Польодоксин», назначенный цыплятам 75-сут. возраста перорально в дозе 0,2 см3 четыре дня подряд, был эффективен при внутримышечном заражении на 2-й день оттитрованной дозой высоковирулентного штамма «№115» P. multoci-da. Из 10 подопытных цыплят за 14 дней пал только один, в то время как в контрольной группе погибли все цыплята. В третьем аналогичном опыте, цыплят заражали внутрисинусально смесью суточных культур - ослабленной вирулентности P. multocida, E.coli и St. aureus, взятых в соотношении 1:1:1. Из 7 подопытных цыплят только у одного отмечено воспаление вокруг подглазничного синуса, в то время как в контрольной группе заболели все цыплята.

Таким образом, применение «Тиланика», «Тилокола» и «Польдоксина» может стать эффективной составляющей системы профилактики бактериальных болезней птиц.

Для снижения микробного давления воздуха выводных шкафов инкубатора в период вывода цыплят изучена эффективность применения антисептика из группы поверхностно-активных веществ - «Катапол» в отношении условно патогенной микрофлоры.

Применение «Катапола» для обработки цыплят на выводе в хозяйствах, неблагополучных по болезням респираторного комплекса, дало положительный эффект. Количество птиц, павших от патологии органов дыхания, в т.ч. и с признаками аэросаккулитов, за первые 20 дней выращивания было в 2,3 и 2,7 раза меньше по сравнению с контрольной группой. Сохранность в опытной группе была на 0,5 % выше, чем в контроле.

В дальнейшем эти цыплята были обработаны «Катаполом» в птичнике из расчета 1,0 см3/м3 на 6,7, 13,14 и 15 -й дни выращивания. В опытной группе цыплят, павших с патологией органов дыхания, было на 14,5% меньше, в т.ч. и с аэросаккулитами (0,45%), а сохранность была на 1,17% выше по сравнению с группой контрольной птицы.

В дополнение к комплексу мероприятий по профилактике заболеваний, вызываемых условно патогенной микрофлорой были проведены исследования по изучению эффективности применения пробиотиков при выращивании птиц. Комплексный препарат «Ц-люке», в который входят три вида нормальной микрофлоры и фермент норизин, оказывал антагонистическое действие по отношению к 7 из 10 исследованных культур бактерий и в первую очередь на патогенную культуру кишечной палочки. В производственных условиях препарат был назначен с целью профилактики колибактериоза цыплятам-бройлерам перо-рально из расчета 25 мг/кг живой массы в течение 5 дней, что позволило за период выращивания повысить показатели сохранности на 0,8-1,6% и увеличить средний прирост живой массы на 165 г ( р < 0,05), по сравнению с группой цыплят, не получавшей пробиотик.

«Лактикол», препарат полученный на основе антагонистически активных штаммов лактобактерий, обладал выраженным действием в отношении Е. coli и Ps. aeruginosa. Зона задержки роста составила от 15 до 20 мм, St. aureus - до 15 мм. В эксперименте была показана безвредность «Лактикола» для цыплят 5-кратной дозы пробиотика при пероральном введении в течение 10 дней. В производственных условиях опыт провели на 35 тыс. цыплят-бройлеров, которым «Лактикол» назначали с питьевой водой в течение 7 дней. Сохранность цыплят-

бройлеров в опытной группе составила 95,6%, в контрольной - 91,9%. Количество вынуждено убитой птицы в опытной группе было значительно ниже -10,3% по сравнению с контрольной группой - 15,2% .

В целях повышения естественной резистентности и снижения инфициро-ванности условно патогенной микрофлорой, на птицефабрике яичного направления, в период искусственно вызванной линьки кур, пробиотик «Лактикол» применяли в возрасте 500 дней в дозе 5 млн. микробных клеток с питьевой водой курсом 5 дней. Эффективность препарата оценивали по выделению микрофлоры из помёта кур до и после его применения.

Анализ полученных данных показал, что если до применения «Лактикола» из помета кур выделяли культуры С. jejuni, Streptococcus spp., Pr.vulgaris и E.coli в 56,6; 73,3; 20,0 и 100% проб соответственно, то после его применения количество обнаружений, С jejuni практически не регистрировалось, других условно патогенных микроорганизмов уменьшалось на 30-50 %.

Таким образом, применение «Лактикола» с лечебно-профилактической целью позволяет птицехозяйствам повысить сохранность поголовья, улучшить качество тушек и контролировать эпизоотическую ситуацию по бактериальным инфекциям без включения в схему ветеринарных обработок антибиотиков.

2.2.5. Разработка средств специфической профилактики

Одним из этапов комплексной системы профилактики бактериальных болезней птиц является усовершенствование и разработка средств специфической профилактики. На модели вакцины против колибактериоза птиц были определены критерии подбора вакцинных штаммов эшерихий с учетом факторов патогенности по следующим показателям: принадлежность к одному из наиболее широко распространенных серовариантов или к нетипируемым, высокая степень вирулентности, адгезивности и токсигенности.

На основании предварительных исследований и с учетом перечисленных требований были отобраны 2 штамма кишечной палочки ( «4П» и «12СМ») и разработана методика получения поверхностных антигенов, обладающих про-

тективной активностью в отношении наиболее эпизоотически опасных серова-риантов. Проведены исследования по подбору адъювантов.

Технологическая схема производства вакцины против колибактериоза птиц состоит из трех основных этапов:

1. Подготовка вакцинных штаммов: пассажирование на РКЭ, определение культурально-морфологических, вирулентных, адгезивных и токсигенных свойств, изготовление производственных расплодок штаммов Master seed (MS), Working seed (WS) и Production seed (PS).

2. Получение коливакцины: приготовление питательной среды, подготовка посевного материала (PS), засев реактора матровой расплодкой, глубинное культивирование, снятие поверхностных антигенов, инактивация бактериальной массы формалином, сорбция антигенов на геле гидроокиси алюминия или эмульгирование с масляным адъювантом.

3. Биологический контроль полученной вакцины: определение стерильности, полноты инактивации, безвредности для птиц, антигенных, протективных и др. свойств.

Для наработки опытной серии инактивированной сорбированной вакцины против колибактериоза птиц в соответствии с первым этапом штаммы E.coli «12СМ» и «4П» трижды пассажировали на РКЭ, заражая их каждый раз суточной бульонной культурой в объеме 0,2 см3. Гибель эмбрионов наступала, как правило, на 1-2 сутки. Все штаммы обладали высокой степенью вирулентности. Штамм «12 СМ» (серовар 0:78 ) продуцировал энтеротоксины и имел специфические адгезивные антигены К88, К99 и А20. Штамм E.coli «4П» не типиро-вался по О-антигену, обладал способностью вырабатывать термолабильный и термостабильный энтеротоксины, цитотоксин, и адгезивные антигены К88, К99 и А20.

Полученные вакцинные штаммы по культурально-морфологическим, биохимическим и биологическим свойствам соответствовали исходным и служили основой для изготовления MS, WS и PS .

В связи с тем, что среда Минка, рекомендуемая для накопления адгезинов, достаточно дорогостоящая и состоит из большого количества дефицитных компонентов, было проведено сравнительное культивирование штаммов эше-рихий на других питательных средах аналогичного назначения. Было показано, что максимальное накопление бактериальной массы происходит при выращивании E.coli в бульоне на основе панкреатического гидролизата кильки. При этом штаммы сохраняли исходные культурально-морфологические, биохимические, адгезивные и токсигенные свойства.

С целью повышения иммуногенности вакцины проводили сорбцию антигенных комплексов из смеси подобранных штаммов в равных пропорциях на 3%-ном геле гидроокиси алюминия (ГОА) при pH 5,8-6,3 с таким расчетом, чтобы в 1 см3 готовой вакцины содержалось 1,5-2,0 мг сорбента в пересчете на А1203.

Полученные опытные серии вакцины инактивированной сорбированной против колибактериоза «АВИВАК-Коливак», были проверены на соответствие требованиям стандарта отрасли. При внутримышечном введении вакцины по 2,0 см3 в каждое крыло цыплятам они оставались клинически здоровыми в течение 10 суток наблюдения. Местная реакция после введения вакцины отсутствовала, что свидетельствовало о ее безвредности.

Для определения антигенных и протективных свойств вакцины «АВИВАК-Коливак» было сформировано 3 группы цыплят, по 10 голов в каждой. Цыплятам первых двух групп вакцину вводили вн/мышечно в крыло в дозе 0,5 см3 однократно и двукратно с интервалом 8 дней, цыплят третьей группы не вакцинировали. При исследовании сыворотки крови цыплят первой и второй групп через 7 и 14 дней была установлена положительная РА на стекле. В развернутой РИГА средний титр антител к E.coli 0:78 составил 5,7±0,4 и 6,3±0,5 log2 (Р>0,05), соответственно. На 14 день после второй вакцинации цыплят заражали вн/венно суточной бульонной культурой вирулентного штамма Е. coli в дозе - 1 млрд. микробных клеток в объеме 1,0 см3. При этом в группе цыплят, вакцинированных однократно, заболело 4, из которых пало 3 головы. При дву-

кратной вакцинации - заболел и пал 1 цыпленок. В группе контроля все 10 зараженных цыплят заболели с признаками диареи и из них пало - 6 голов. Коэффициент иммунологической эффективности (КИЭ) после однократной и двукратной вакцинации составил 60 и 90 % соответственно. Через две недели все оставшиеся в живых цыплята были убиты и проведено полное бактериологическое исследование. Культура заражающего штамма была выделена только от цыплят группы контрольного заражения.

Производственные испытания вакцины инактивированной сорбированной против колибактериоза провели в птицехозяйстве яичного направления, в котором бактериологически подтверждали циркуляцию вирулентных штаммов Е. coli. Было вакцинировано 28 тыс. цыплят 120-сут. возраста. В аналогичной контрольной группе цыплят профилактику колибактериоза проводили с помощью химиотерапевтических средств.

В результате у вакцинированной птицы, в сравнении с контрольной, сохранность за 10 месяцев наблюдения была выше на 0,7%, а яйценоскость - на 6,0%, затраты на 10 снесенных яиц уменьшились на 0,11 кормовых единиц, расходы на медикаменты были в 1,5 раз ниже. При бактериологическом исследовании эпизоотически опасные культуры Е. coli выделяли только в группе не вакцинированной птицы.

Таким образом, вакцина «АВИВАК-Коливак» обладала выраженными про-тективными свойствами в отношении эпизоотически опасных изолятов Е. coli, независимо от региона выделения и серологической принадлежности штаммов. Применение вакцины способствовало увеличению производственных показателей и значительно сокращало расходы на применение препаратов неспецифической профилактики.

С целью оптимизации схемы специфической профилактики, была разработана и испытана с положительным эффектом ассоциированная вакцина против колибактериоза и пастереллеза птиц. В работе использовали антигенные комплексы вакцинных штаммов «4П» и «12СМ» Е. coli и « 115» Р. multocida, взя-

тые в равных количествах. Сорбцию полученного ассоциированного антигенного комплекса проводили на 3%-ном геле гидроокиси алюминия (ГОА).

Вакцину испытали в условиях вивария на цыплятах яичных пород 15-сут. возраста. Было сформировано 6 групп: 1-я группа - 20 голов (две подгруппы) и по 10 голов в остальных. Цыплятам 1-й группы вводили ассоциированную вакцину против пастереллеза и колибактериоза вн/мышечно в дозе 0,5 см3, 2-й - только против колибактериоза, 3-й - против пастереллеза, 4- и 5-я - были группами контрольного заражения, 6-я служила интактным контролем. Для изучения динамики накопления титров антител сыворотки крови опытных и контрольных цыплят исследовали с антигенами Е.соН и Р. тикоаёа на 5, 10, 15 и 20-й день после вакцинации.

Было установлено, что у цыплят, иммунизированных ассоциированной вакциной, титр антител в РА нарастал постепенно и достигал максимума к 15-20-у дню (4,0 и 3,8 1о£2), а при применении моновакцин он был несколько ниже (3,4 и 3,5 1о&).

На 28 день после вакцинации провели контрольное заражение цыплят 1-подгруппы, 2- и 4-й группы патогенным штаммом Е.соН в дозе 0,5 см3 вн/мышечно и 2-й подгруппы, 3- и 5-й группы оттитрованной дозой бульонной культуры Р. тиКоЫск. В группе цыплят, иммунизированных ассоциированной вакциной, на 3-й сут. пал один , во 2 и 3-й - по 2 и в 4 и 5-й группах заболели все и из них пало по 9 цыплят. В группе интактного контроля птица была клинически здорова.

По результатам испытания моновакцина (КИЭ -70%) уступала в эффективности ассоциированной вакцине, у которой КИЭ составил 90%. Можно предположить, что это связано с активностью препарата, обусловленной содержанием двух антигенных комплексов.

Для подтверждения результатов испытания вакцины ассоциированной инактивированной против колибактериоза и пастереллеза птиц был проведен повторный опыт. В опыте находилось четыре группы цыплят яичных пород, по 10 голов в каждой. Птицу 1- и 2-й групп вакцинировали однократно ассо-

циированной вакциной, где соотношение поверхностных антигенов было 1:1, в дозе 0,5 см3 вн/мышечно. На 20-й день опыта их заразили соответственно патогенными штаммами E.coli и Р. multocida вн/мышечно. В эти же сроки аналогично провели контрольное заражение цыплят 3- и 4-й групп.

После заражения иммунизированных цыплят 1-й группы Е. coli пал 1 цыпленок и 9 выжили. При бактериологическом исследовании еще от одного цыпленка была выделена исходная культура Е. coli и при вскрытии отмечали патологоанатомические изменения, характерные для колибактериоза. Во второй группе иммунизированных цыплят, зараженных P.multocida, пало 2 головы. В группах контрольного заражения при заражении Е. coli, пало 2 и заболело 3 головы, а в группе цыплят, зараженных Р. multocida, пали все цыплята. При бактериологическом исследовании исходные культуры заражающих штаммов были выделены от всех невакцинированных цыплят. КИЭ для цыплят, иммунизированных ассоциированной вакциной и зараженных Е. coli, составил 80%, а Р. multocida - 80%, что отвечает требованиям СТО.

Учитывая полученные данные по выделению сальмонелл в хозяйствах различного технологического направления из разных объектов, и то, что Salmonella enteritidis относится к эпидемически опасным возбудителям, нами разработана вакцина против сальмонелла-энтеритидис инфекции птиц.

Для создания инактивированной вакцины против сальмонелла - энтерити-дис инфекции птиц был подобран штамм «С-5-АТ», который обладал типичными для сальмонелл культурально-морфологическими, биохимическими свойствами и антигенной структурой (0:9, Н : mg), был высоковирулентным для РКЭ 8-сут. возраста и цыплят при вн/венном введении. В лабораторных условиях была изготовлена опытная серия вакцины с сорбентом ГОА в соотношении 1:1.

Безвредность сорбированной вакцины определяли на 10 цыплятах яичных пород 100-сут. возраста. Ее образцы вводили в каждое крыло вн/мышечно в объеме 2,0 см3. Все цыплята в течение 10 дней наблюдения были клинически здоровы.

Для определения антигенной активности сорбированную вакцину вводили цыплятам 100-сут. возраста вн/мышечно в крыло в объеме 1,0 см3. Динамику формирования поствакцинальных антител оценивали в ККРНГА на стекле и развернутой РА с эритроцитарным пуллорным антигеном производства ФГУП «Курская биофабрика - «БИОК». Исследования проводили с интервалом 7 дней, начиная с 7 по 91 день.

У птиц, иммунизированных сорбированной вакциной, первые положительно реагирующие пробы крови в ККРНГА были выявлены на 14 день (47%), а на 21-й день опыта 100% проб крови от вакцинированной птицы давали реакцию на 4 креста. В развернутой РА максимальный титр специфических антител установлен на 28 день (1: 433±44). Прирост уровня антител за последующие 4недели в среднем составил 25%. С 35 по 91-й день после вакцинации он постепенно снизился с 1:320±35 до 1:60±6,3. В среднем снижение составило 9,6% (рис. 1).

7 10 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91 дни после вакцинации

Рис. 1. Динамика изменения титра сывороточных антител к Б. еШегШс^ у птиц, иммунизированных сорбированным вариантом вакцины

В период с 40 по 79-й день после вакцинации проводили сбор яиц. При исследовании экстрактов яичных желтков в РА было показано, что титр специфиче-

ских антител был ниже, чем в сыворотках крови, и максимального уровня (1:103±14 и 1:96±9,7) достигал позже - на 46-50 день (рис. 2).

40 46 50 56 64 72 79

дни после вакцинации

Рис.2.Динамика изменения титра антител к Б. етегшсКБ в желтке яиц птиц, иммунизированных сорбированным вариантом вакцины

. Обнаружение в желтках яиц специфических антител в диагностических титрах свидетельствует о возможности защиты цыплят от Б. ег^епйсНз за счет формирования материнского иммунитета с первых дней жизни.

Антиинвазивные свойства инактивированной сорбированной вакцины против сальмонелла-энтеритидис инфекции изучали на 38-сут. цыплятах. Одну группу цыплят вакцинировали внутримышечно в дозе 0,5 см3, вторая - была контрольной. На 22 день после вакцинации обе группы цыплят заразили перо-рально суточной бульонной культурой 8. еШегШсНз. Групповые пробы помета собирали за сутки до заражения и далее с 2-дневным интервалом до конца срока наблюдения (10 дн.). При бактериологических исследованиях исходную культуру заражающего штамма Б. еп1егШсН8 изолировали только из проб помета цыплят группы контрольного заражения. Через 10 дней после заражения проводили вынужденный убой птицы обеих групп и бактериологическое исследование внутренних органов. Были получены результаты, аналогичные ис-

следованиям групповых проб помета, т.е. исходные культуры выделяли только от невакцинированной зараженной птицы.

Для производственных испытаний была наработана опытно-промышленная серия инактивированной сорбированной вакцины «АВИВАК-Сальмовак». Вакцину испытали в хозяйствах мясного направления корпорации «Саратов-птица», неблагополучных по сальмонелла-энтеритидис инфекции, где, при исследовании крови эритроцитарным пуллорным антигеном в 10% случаев выявляли положительно реагирующую птицу, а при проведении бактериологических исследований из патологического материала выделяли культуры З.еЩепй&в.

В опытной группе было 42757 голов, вакцинацию которых проводили двукратно: первый раз в 35-сут. возрасте, ревакцинацию в 90-сут. возрасте. Аналогичное количество птицы было в контрольной (невакцинированной) группе. Эффективность вакцинации определяли через 1,5 мес. по количеству выделения возбудителя из трупов, эмбрионов-задохликов, мазков из клоаки, а также сохранности цыплят. При бактериологическом исследовании 149 проб, взятых от вакцинированной птицы, в т.ч. 40 мазков из клоаки, 70 смывов с поверхности яиц и 39 положительно реагирующих в ККРНГА птиц, культуры Б.егиегШШз не были выделены, тогда как от птицы невакцинированной группы из 176 проб, в т.ч.125 эмбрионов - задохликов, 6 трупов и 45 положительно реагирующих в ККРНГА птиц было выделено 17 положительных проб (10%).

Во втором хозяйстве мясного направления первая вакцинация ремонтного молодняка 30 сут. возраста (25037 голов) проведена в двух птичниках, и ревакцинация через 2 месяца только в одном. Падеж цыплят в первые 30 дней выращивания составил 2,8%, а после вакцинации в течение последующих 30 дней он снизился до 0,6%. Проведенное бактериологическое исследование 5 голов убитых вакцинированных цыплят дало отрицательный результат, в то время как из трупов цыплят 4-11-суточного возраста, полученных от невакциниро-ванных кур, была выделена культура З.егиегШс^. Установлено также, что

вакцинация вызывала выраженную сероконверсию. Наибольшее количество реагирующих в ККРНГА проб выявлялось на 14-21 день после вакцинации (90%), а через 4,5 и 8,5 месяцев уровень антител снижался до 25 и 10 %, соответственно.

При исследовании в Саратовской региональной ветеринарной лаборатории по болезням птиц из 20 вакцинированных цыплят, реагирующих в ККРНГА, от 5 были произведены бактериологические высевы из крови сердца, печени, селезенки и желчного пузыря. Культура Б. е^егШ&в не была выделена.

Оставшиеся 15 цыплят разделили на 3 группы, по 5 голов в каждой. Первую группу заражали культурой Б.егЛегШсНв с кормом из расчета 1 млрд. микробных тел на 1 г корма; 2-ю - подкожно в область шеи аналогичной культурой в объеме 1,0 см3 и 3-я была контрольной (вакцинированная, но не зараженная). Через 7 дней цыплят исследовали в ККРНГА. Все вакцинированные цыплята дали положительную реакцию, контрольные - только в 60% случаев. На 12-й день после заражения цыплята всех трех групп были убиты. У 100% цыплят, зараженных подкожно, обнаруживали разлитые некрозы в месте введения культуры, однако из внутренних органов культура заражающего штамма не была выделена. У вакцинированных, но незараженных цыплят, изменений, характерных для сальмонеллеза, не установлено. Применение инактивированной сорбированной вакцины позволило обеспечить в хозяйствах стабильное благополучие по сальмонелла-энтеритидис инфекции.

За последние годы показано, что при производстве инактивированных вакцин важное значение имеет подбор адъюванта, так как это позволяет достичь у привитых птиц необходимый защитный уровень гуморальных антител на каждый из входящих в композицию антигенов и обеспечивать их циркуляцию в крови в течение более длительного времени.

Нами были изготовлены образцы моновакцин против сальмонелла-энтеритидис инфекции на основе минерального масла Магсо1-52 и масляного адъюванта Могйашёе К1А-70 УС. Антиген и адъюванты смешивали в соотношении 1:2 при режиме 3000 об/мин в течение 10 мин, а затем эмульгировали на

диспергаторе «ULTRA TIJRRAX». Изготовленные вакцины представляли собой однородную эмульсию белого цвета, стерильную, с вязкостью 56 и 35 мм2/с , соответственно, и стабильностью 3,0 мм.

С целью определения реактогенности эмульсионные вакцины вводили подкожно в область верхней дорсальной поверхности груди в объеме 2,0 см3. После 15 дней наблюдения на месте инъекции вакцины, изготовленной на основе масла Marcol-52, образовывались уплотнения, безболезненные при пальпации. При инъекции вакцины на основе адъюванта Montanide ISA-70 VG аналогичные изменения отсутствовали, что и послужило основанием в дальнейшем проводить испытание антигенной активности вакцины, изготовленной только на масляном адъюванте Montanide ISA-70 VG.

-1 30 60 90

дни после вакцинации

Рис. 3. Динамика изменения титра сывороточных антител к Б. еШегШШв у птиц, привитых эмульсионным вариантом вакцины

Для исследования антигенной активности вакцину вводили подкожно в область верхней дорсальной поверхности груди в объеме 0,5 см3. Определение титра антител в сыворотке крови в ИФА проводили за сутки до вакцинации и через 30,60 и 90 дней после. До введения вакцины титр специфических антител у птицы был ниже диагностического уровня (1:20). Динамика роста уровня сывороточных антител у птицы представлена на рисунке 3.

Также было проведено сравнительное изучение антигенной активности сорбированной и эмульсионной вакцин против сальмонелла-энтеритидис инфекции, изготовленных на идентичном инактивированном антигене S. enteritidis с одинаковой его концентрацией в обоих образцах.

Вакцинами, полученными на основе гидроокиси алюминия и адъюванта Montanide ISA-70 VG, иммунизировали цыплят 60-сут. возраста в мышцу крыла между лучевой и локтевой костями и подкожно в область нижней трети шеи в дозе 0,5 см3, соответственно. Ревакцинацию проводили в 90-сут. возрасте сорбированной вакциной в объеме 1,0 см3, а эмульсионной 0,5 см3 вышеописанными методами. Установлено, что титр антител в развернутой РА с пуллорным эритроцитарным антигеном у цыплят, иммунизированных инактивированной эмульсионной вакциной, на 14 и 28 день составил 1:1470±130 и 1:1225±117, а сорбированной вакциной только 1:595±65 и 1:350±45. У птицы чистого контроля титры антител отсутствовали.

-^"эмульсионный вариант вакцины " сорбированный вариант вакцины

до дни после I вакцинации дни после II вакцинации

вакцинации 14 28 22 119

Рис. 4. Антигенная активность сорбированного и эмульсионного вариантов вакцин, изготовленных на основе инактиврованного антигена З.еШегтсШ

После ревакцинации эмульсионной вакциной титр антител на 22 день незначительно повысился (1:1592±180), а в группе иммунизированной сорбированной вакциной существенно возрос (1:945±87). По окончании опыта (119 день после второй вакцинации) титр антител у птиц, привитых эмульсионной вакциной, был в 3,5 раза выше - 1:477±60 по сравнению с привитыми сорбированной вакциной - 1:133±15(Р<0,001).

При сравнении результатов антигенной активности сорбированной и эмульсионной вакцин было показано, что после применения эмульсионной вакцины наблюдали более выраженный и напряженный иммунитет, чем при иммунизации сорбированной вакциной (рис. 4).

Проблема сальмонелла-энтеритидис инфекции птиц актуальна не только для птицеводства, но и для охраны здоровья людей. Предлагаемая система профилактики и оздоровления, включающая применение не только антибактериальных препаратов, но и вакцин против сальмонелла-энтеритидис инфекции птиц, научно обоснована и позволяет стабилизировать эпизоотическую ситуацию в хозяйствах и предотвратить заражение людей.

Респираторный микоплазмоз (РМ) - одно из наиболее экономически значимых для промышленного птицеводства заболеваний. Важным методом контроля РМ является вакцинопрофилактика. С этой целью нами разработаны и изготовлены образцы инактивированной вакцины «АВИВАК-РМ» на основе масляного адъюванта высокой степени очистки, что позволило исключить ре-актогенные свойства и повысить иммуногенность препарата.

Опытный образец инактивированной эмульсионной вакцины против РМ птиц был изготовлен на основе адьюванта МоШашс1е 18А-70 Ув и инактиви-рованного антигена, полученного в результате культивирования вакцинного штамма «86» М^аШвер^сит на среде Эдварда, с последующей инактивацией возбудителя химическим препаратом «Теотропином». Образец вакцины эмульгировали с помощью диспергатора «ШЛИАЛЖРАХ».

Для накопления бактерийной массы использовали триптический гидролизат кильки, который равноценен по биологической ценности триптическому гид-

ролизату из сердца КРС (Стегний Б.Т. и др., 2007), с добавлением сыворотки крови лошади и дрожжевого экстракта.

Инактивированная эмульсионная вакцина против респираторного микоплаз-моза птиц представляла собой однородную эмульсию белого цвета, со следующими характеристиками: стабильность эмульсии по высоте верхней прозрачной фракции 2,5 мм, вязкость 41 мм2/с. Исследование безвредности и антигенной активности вакцины проводили^ на цыплятах^ кросса л<Хайсекс:браун)> 25-суточного возраста.

Для определения безвредности и антигенной активности вакцины было сформировано 3 группы птиц по 10 голов в каждой. Для определения безвредности птице первой группы вакцину вводили п/к в нижнюю треть шеи в объеме 2,0 см3. На 13 день, при вскрытии вынужденно убитых цыплят, на месте введения вакцины отмечали остатки не рассосавшейся вакцины в виде крупинок размером 0,5-1,5 мм. Признаков воспалительного процесса обнаружено не было.

Для определения антигенной активности цыплят второй группы иммунизировали опытным образцом вакцины, которую вводили п/к в область нижней трети шеи в объёме 0,5 см3/голову. Третья группа была контрольной и вакцинации не подвергалась. Результаты определения антигенной активности эмульсионной вакцины против респираторного микоплазмоза птиц в ИФА приведены в табл. 2. Таблица 2

Антигенная активность инактивированной эмульсионной вакцины против респираторного микоплазмоза птиц

Результат Опытная группа №2 | Контрольная группа №3

Титр антител к M.gallisepticum

До вакцинации После вакцинации через: До начала опыта Через:

1 мес. 3 мес. 1 мес. 3 мес.

Среднее значение: 50±7,4 6801±580 7050±540 41±5,6 75±14 183±56

Мах результат в группе 135 10684 11000 81 146 352

Min результат в группе 18 3555 3549 20 38 108

Как видно из данных табл. 2, в группах цыплят № 2 и 3 до начала опыта средний титр антител в ИФА был отрицательным (1:50 и 1:41). Спустя 1 мес. после иммунизации в группе № 2 средний титр составил 1:6801±580 (1:3555 -1:10684), а через 3 мес. он был 1:7050±540 (1:3549 - 1:11000), что указывает на высокую антигенную активность испытуемого препарата. Достоверной разницы между показателями титров антител через 1 и 3 месяца после вакцинации не установлено. У цыплят контрольной, невакцинированной группы титры в диагностически положительных значениях не выявлены.

Для изучения антигенных свойств вакцины инактивированной эмульсионной против РМ, в условиях птицехозяйства яичного направления было сформировано две группы цыплят, по 21700 и 20500 голов в каждой. Первой группе цыплят вакцину вводили вн/кожно в область нижней трети шеи с дорсальной стороны в объёме 0,5 см3 в возрасте 5 недель, с последующей ревакцинацией за 4 недели до начала яйцекладки. Вторая группа цыплят была интактным контролем.

■опытная группа

контрольная группа

I

К

7Л7Ч Л

19516 /

• \iUUUU

/ 4.14040 / 11163 / -*чЮ911

5579 /

гшь^У 33&-Л20 133 42 ад 4°

до после I в. ч/з

1м. 2 м. 1 1,5 2,5 3,5 4,5 5,5 6,5 7,5 8,5 Рис.5. Антигенная активность инактивированной эмульсионной вакцины «АВИВАК - РМ»

после II вакцинации через (мес.) 2,5 3,5 4,5 5,5 6,5 7,5

Результаты исследований титров антител в сыворотке крови цыплят методом ИФА за сутки до, через 30 и 60 дней после первой вакцинации, второй -через I; 1,5; 2,5; 3,5; 4,5; 5,5; 6,5; 7,5 и 8,5 мес. представлены на рисунке 5. До начала опыта у птиц обеих групп антитела не были обнаружены.Через 1 и 2 мес. после 1-й иммунизации титр антител составил 1:2026±230 и 1:5579±670 (Р<0,05), что в 2 и 5,4 раза превышает минимально положительный показатель (1:1029) для диагностических наборов производства НПП «АВИВАК» и свидетельствуют об антигенной активности вакцины уже после первого введения.

После второй иммунизации максимальный титр антител устанавливали на 30 и 45 день - 1:19516±1500 и 1:24254±2000, хотя разница в титрах была не существенной (Р>0,05). Затем он удерживался с 75 по 135 день на уровне 1:140401:10911 и на 195-255 день стабилизировался на значениях 1:5626-1:5867. В контрольной группе титр антител во все указанные сроки составлял 1:38-1:398.

Применение инактивированной эмульсионной вакцины «АВИВАК-РМ» в хозяйстве, неблагополучном по респираторному микоплазмозу, улучшило продуктивность птицы: яйценоскость и выводимость цыплят увеличилась на 14-17% и 8,7-9,1%, соответственно. В подопытных группах количество птиц, павших с патологоанатомическими признаками поражения органов дыхания, уменьшилось на 15-18% по сравнению с контролем.

С помощью инактивированной вакцины в сочетании с химиопрофилакти-кой удалось снизить уровень циркуляции возбудителя в стаде, предотвратить вертикальную передачу инфекции, получить потомство свободное от мико-плазменной инфекции и стабилизировать эпизоотическую ситуацию по РМ, что позволило увеличить продуктивность несушек и бройлеров, обеспечить сохранность поголовья и улучшить финансово-экономические показатели хозяйств.

Наиболее значимым разделом является разработка системы контроля бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа, которая включает основные этапы производственных процессов начиная с закладки яйца на

инкубирование, получения здорового, молодняка, и заканчивая этапом контроля получения экологически чистой птицеводческой продукции.

Основные этапы системы профилактики бактериальных болезней птиц:

1. Эпизоотологический мониторинг технологического цикла производства

2. Микробиологический мониторинг вывода и выращивания цыплят

3. Диагностический мониторинг

- серологические исследования

- микробиологические исследования

4. Антибиотикопрофилактика

5. Пробиотикопрофилактика

6. Вакцинопрофилактика

7. Дезинфекция

8. Дератизация

В заключение следует отметить, что для создания стабильно благополучной эпизоотической ситуации по бактериальным болезням в комплексе ветеринар-но-санитарных мероприятий необходимо проводить мониторинговые микробиологические и серологические исследования как в период вывода и выращивания птицы, так и при выпуске готовой продукции. Применение антибиотиков и других химиопрепаратов оправдано только после оценки чувствительности к ним выделенных культур. Целесообразно также шире использовать методы специфической профилактики бактериальных болезней птиц инактивирован-ными моно- и ассоциированными вакцинами. Работники птицехозяйств обязаны регулярно проходить медицинские осмотры с целью выявления скрытого бактерионосительства.

Только комплексный подход к решению проблемы бактериальных болезней птиц позволит улучшить экономические показатели работы птицехозяйств и обеспечить эпизоотическое и эпидемиологическое благополучие.

3. Выводы

1. Разработана комплексная система профилактики бактериальных болезней птиц, включающая эпизоотологический, серологический и микробиологи-

ческий мониторинг вывода и выращивания птицы, контроль качества подготовки технологического оборудования, инкубационного яйца, использования эффективных антибактериальных препаратов и средств специфической профилактики.

2. Спектр и количественный состав микрофлоры, циркулирующей в птице-хозяйствах, зависит от вида, возраста птицы и эпизоотической ситуации. Зоо-патогенные виды Salmonella enteritidis и Campylobacter jejuni чаще выделяют из помета и смывов с тушек, обсеменение которых происходит в процессе потрошения,

3. Результаты микробиологического мониторинга вывода и выращивания цыплят позволяют прогнозировать развитие эпизоотической ситуации в птицехозяйствах и своевременно разработать эффективные меры предупреждения возникновения инфекционных болезней.

4. Причиной возникновения эпизоотически опасного колибактериоза птиц являются штаммы Е. coli, обладающие высокой вирулентностью, способностью вырабатывать термолабильный и термостабильный энтеротоксины, цито-токсин, а также два или три энеротоксина одновременно. Культуры, продуцирующие термолабильный энтеротоксин, вызывают геморрагические поражения, а цитотоксин - пневмонию у цыплят. Колибактериоз птиц протекает по типу токсико-септико инфекции.

5. Этиологическим фактором развития респираторного синдрома у птиц является ассоциированное действия пастерелл ослабленной вирулентности и условно патогенной микрофлоры.

6. Культуры синегнойной палочки, выделенные от птиц, способны продуцировать экзотоксин А, который свободно проникает через гематоэнцефаличе-ский барьер, вызывает патологические изменения в паренхиматозных органах.

7. Установлено, что применение водорастворимого тилозина тартрата и комплексного препарата тилозина тартрата с левомицетином в соответствии с наставлением для профилактики бактериальных и микоплазменных болезней птиц увеличивает сохранность цыплят-бройлеров на 1,4 и 3,5 %, среднесу-

точный прирост живой массы на 0,7 и 2,2 г и средней живой массы перед убоем на 30 и 94 г, соответственно.

8. Антисептик «Катапол» эффективен in vitro в отношении большинства штаммов стафилококков, кишечной и синегнойной палочки. Его применение в форме аэрозоля 1% раствора из расчета 5мг/м в выводных шкафах при достижении вывода цыплят более 60% снижает контаминацию воздуха инкубатория различными бактериями в 2-15 раз, уменьшает количество птиц, павших от патологии органов дыхания, в т.ч. с признаками аэросаккулитов, которые за первые 20 дней выращивания регистрировали в 2,3 и 2,7 раза меньше и увеличивает сохранность в опытной группе на 0,5 % , по сравнению с контрольной группой.

9. Применение препаратов «Ц-люкс» и «Лактикол» для восстановления микробиоценоза кишечника птиц в период выращивания и, особенно, в период технологического стресса, а также после применения антибиотиков, позволяет повысить сохранность бройлеров на 0,8-1,6% и снизить инфицированность кур-несушек и контаминацию тушек при убое и разделке птиц С. jejuni и другими условно патогенными микроорганизмами.

10. Предложены критерии подбора вакцинных штаммов с учетом факторов патогенности (вирулентных, адгезивных, токсигенных и др.). Селекционированы штаммы эшерихий и сальмонелл для производства инактивированных вакцин нового поколения.

11. Инактивированная вакцина «АВИВАК-Сальмо-Коли-Пастовак», созданная на основе селекционированных штаммов «С-5-АТ» Salmonella enteritidis, адгезивных антигенов токсигенных штаммов Escherichia coli и «№115» Pasteu-rella multocida с адьювантами гидроокиси алюминия или эмульсионным Montanide ISA-70 VG в моно- или двухвалентных вариантах, обладает выраженными иммуногенными свойствами. Применение вакцин в птицехозяйствах позволяет стабилизировать эпизоотическую ситуацию, повысить планово-экономические показатели и снизить затраты на ветобслуживание в 1,5 раза.

12. Разработана и внедрена инактивированная эмульсионная вакцина «АВИ-ВАК-РМ» против респираторного микоплазмоза птиц. Ее применение в сочетании с правильно подобранными схемами химиопрофилактики позволяет стабилизировать эпизоотическую ситуацию в неблагополучных по данному заболеванию птицехозяйствах, повысить яйценоскость на 14 -17% и увеличить выводимость цыплят от вакцинированной птицы на 8,7-9,1% 4. Предложения для практики Разработаны и внедрены в ветеринарную практику вакцины против сальмо-неллеза, колибактериоза и пастереллеза птиц инактивированные сорбированные и эмульсионные «АВИВАК-Сальмо-Коли-Пастовак», выпускаемые в моно-или двухвалентном вариантах, и вакцина инактивированная эмульсионная против респираторного микоплазмоза птиц «АВИВАК-РМ». Вакцины производятся серийно на биологическом предприятии НПП «АВИВАК» и широко применяются в птицеводческих хозяйствах страны.

Для практического применения в комплексе ветеринарных мероприятий рекомендованы водорастворимый препарат тилозина тартрата и его комплекс с левомицетином, антисептик «Катапол», пробиотики «Ц-люкс» и «Лактикол».

Разработаны: «Рекомендации по диагностике и профилактике псевдомоноза птиц» (одобр. ВПНО «Союзптицепром» 10.11.1989 г.); «Рекомендации по проведению микробиологического мониторинга вывода и выращивания цыплят» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 28.11.1994 г. и утв. директором института); « Рекомендации по диагностике и профилактике пастереллеза птиц» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 1995г.); «Рекомендации по профилактике пневмонии индеек» (утв. ВПНО «Союзптицепром» 28.12.1990 г.); «Рекомендации по контролю сальмонелла-энтеритидис-инфекции птиц» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 31.10.2005 г. и утв. директором института).

5. Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Рождественская Т.Н. Токсигенные свойства кишечной палочки и их роль в патологии птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н. // Ветеринария,-1994.-№3.- С.27-29.

2. Рождественская Т.Н. Определение эффективности «Энрофлона» при бактериальных болезнях птиц/ Борисенкова А.Н, Рождественская Т.Н., Новикова О.Б., Елисеева E.H. // Ветеринария.-2002.-№6.-С.15-17.

3.Рождественская Т.Н. Результаты испытания тилозина отечественного производства в отношении микроорганизмов, выделенных от птиц / Борисенкова А.Н, Рождественская Т.Н., Новикова О.Б., Головещенко К. А., Елисеева Е. Н. // Ветеринария,- 2003,- N 8. - С. 12-14.

■ 4. Рождественская Т.Н. Биологические свойства возбудителя псевдомоноза птиц/ Т.Н. Рождественская// Ветеринария.-2005.-№3.-С.29-30.

5.Рождественская Т.Н. Зоопатогенные и эпидемиологически опасные микроорганизмы, выделяемые от птицы в хозяйствах промышленного типа/ Рождественская Т.Н., Борисенкова А.Н., Новикова О.Б., Чавгун В.А. // Российский ветеринарный журнал. С.-х. животные.-2005.-№4.-С. 37-38.

6.Рождественская Т.Н. Микоплазмозы птицы: особенности эпизоотологии, диагностики и профилактики/ Рождественская Т.Н., Борисенкова А.Н., Панкратов C.B. //Российский ветеринарный журнал. С.-х. животные.- 2006.-№3.-С.38-40.

7. Рождественская Т.Н. Биологические свойства пастерелл, выделенных при респираторном синдроме птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Лебедева А.И., Новикова О.Б. // Российский ветеринарный журнал. С.-х. животные. т-2007.-№3 .- С.39-40.

8. Рождественская Т.Н. Респираторный микоплазмоз птиц / Борисенкова, А.Н. Рождественская Т.Н.//Птицеводство.-2008.-№1.-С.11-13.

9. Рождественская Т.Н. Польодоксин против возбудителей бактериальных болезней птицы/ Борисенкова А.Н., Новикова О.Б., Рождественская Т.Н., Лебедева А.И., Волкова M.// Птицеводство.-2008.-№4.-С.51-52.

Ю.Рождественская Т.Н. О проблеме кампилобактериоза в птицеводстве/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Новикова О.Б. //Российский ветеринарный журнал. С.-х. животные..-2008,- №4.- С.30-31.

11. Рождественская Т.Н. Колибактериоз птиц: факторы патогенности возбудителя и профилактика болезни/ Т.Н.Рождественская // Российский ветеринарный журнал.С.-х. животные.-2008.- №1.- С.40-42.

12. Рождественская Т.Н. Специфическая профилактика инфекции Salmonella enteritidis у птицы// Российский ветеринарный журнал. С.-х. животные.-2009,-№1.- С.46-48.

13. Рождественская Т.Н. Лабораторная диагностика псевдомоноза птиц / Бо-рисенкова А.Н., Бовкун Г.Ф., Рождественская Т.Н. //Основы профилактики болезней сельскохозяйственных животных: сб. науч. тр. /ВНИВИП.-Л., 1989.-С.27-32.

14. Рождественская Т.Н. Сравнительная характеристика антигенных, токси-генных, адгезивных и вирулентных свойств эшерихий, выделенных от птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Смирнова Л.И. //Национальное отделение России ВНАП: тез. докл. конф. по птицеводству.- С-Пб., Ломоносов, 1993.-С.203-204.

15. Рождественская Т.Н. Испытание комплексного препарата на основе про-биотика и фермента для профилактики бактериальных болезней у птиц/ Борисенкова А.Н, Рождественская Т.Н. //Сб. науч. тр. Литовского вет. инст.-1993.-С. 99-100.

16. Рождественская Т.Н. Рекомендации по диагностике и профилактике псевдомоноза птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Бовкун Г.Ф. и др. -С-Пб, 1995.-17с.

17. Рождественская Т.Н. Эффективность применения катапола в присутствии птицы/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Слизнёва И.В. //Ветеринарная профилактика в промышленном птицеводстве: сб. науч. тр. ВНИВИП. -С-Пб, 1996.-С.62-65.

18. Рождественская Т.Н. Ассоциированная вакцина для профилактики коли-бактериоза и пастереллёза/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Лебедева А.И., Заерко В.И. // Птицеводство.: межв. науч. сб. матер. III Укр. конф. по птиц, с 3 межа, участием.- Борки, 2001.-вып.31.-С.514-515.

19. Рождественская Т.Н. Инактивнрованная сорбированная вакцина против пастереллёза птиц - эффективное средство специфической профилатики/ Бори-сенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Заерко В.И. //Практик.-2002-№5-6.- С.62-64.

20. Рождественская Т.Н. Рекомендации по проведению микробиологического мониторинга вывода и выращивания цыплят/ Рождественская Т.Н., Борисенко-ва А.Н., Новикова О.Б., Чавгун В.А. и др.//Современные научные разработки и передовые технологии для промышленного птицеводства: мат. Юбил. конф. 15 лет. НПП «АВИВАК».-С-Пб, 2005.-С.101-108.

21. Рождественская Т.Н. Спектр микрофлоры, выделяемой от птиц в хозяйствах различного технологического направления/ Борисенкова А.Н, Коровин Р.Н., Рождественская Т.Н., Новикова О.Б., Чавгун В.А., Головещенко К.А. //РацВетИнформ.-2003 .-№ 10.-С. 3-6.

22. Рождественская Т.Н. Препараты Тиланик® и Тилокол® в отношении возбудителей бактериальных болезней птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Новикова О.Б.,. Головещенко К.А и др.//Новое в эпизоотологии, диагностике и профилактике инфекционных и незаразных болезней птиц в промышленном птицеводстве.: мат. Межд. юбил. научн.-практ. конф., поев. 40-лет. ВНИВИП 14-16 сент. 2004 г.- С-Пб, Ломоносов, 2004.-С. 248-251.

23. Рождественская Т.Н. Диагностика бактериальных болезней птиц при смешанном течении (пастереллёз, гемофиллёз, колибактериоз)/ Борисенкова А.Н., Новикова О.Б., Рождественская Т.Н. //Новое в эпизоотологии, диагностике и профилактике инфекционных и незаразных болезней птиц в промышленном птицеводстве.: мат. Межд. юбил. научн-практ. конф., поев. 40-лет. ВНИВИП 14-16 сент. 2004 г.- С-Пб, Ломоносов, 2004.-С. 135-137.

24. Рождественская Т.Н. Метод контроля бактериальной инфицированности птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Новикова О.Б., Чавгун В.А. //РацВетИнформ.-2004.-№Ю.-С.6-7.

25. Рождественская Т.Н. О выделении Salmonella enteritidis от птиц/ Рождественская Т.Н.,. Борисенкова А.Н, Новикова О.Б., Чавгун В.А. //1-й Международный конгресс по птицеводству. 18-22 апреля 2005 М., 2005 -С.170-174.

26. Рождественская Т.Н. Программа обеспечения эпизоотического благополучия птицехозяйств в отношении бактериальных болезней птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н. //Современные научные разработки и передовые технологии для промышленного птицеводства: мат. Юбил. конф. 15 лет. НПП «АВИВАК». -С-Пб, 2005.-С.60-73.

27. Рождественская Т.Н. Методические рекомендации по выделению кампи-лобактерий и другой кишечной микрофлоры из групповых проб помёта птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Новикова О.Б., //Современные научные разработки и передовые технологии для промышленного птицеводства: мат. Юбил. конф. 15 лет. НПП «АВИВАК». -С-Пб, 2005.-С.94-101.

28. Рождественская Т.Н. Испытание инактивированной сорбированной вакцины против сальмонелла-энтеригидис инфекции птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Байбиков Ю.И. и др. //Современные научные разработки и передовые технологии для промышленного птицеводства: мат. Юбил. конф. 15 лет. НПП «АВИВАК».-С-Пб, 2005.-С.73-80.

29. Рождественская Т.Н. Программа профилактики и оздоровления хозяйств от сальмонелла-энтеритидис инфекции птиц/ Рождественская Т.Н., Борисенкова А.Н, Новикова О.Б. и др.//Био.-2006.-№10.-С.25-29.

30. Рождественская Т.Н. Контроль и возможности снижения контаминации тушек кур зоопатогенной и эпидемиологически опасной микрофлорой/ Рождественская Т.Н., Борисенкова А.Н, Новикова О.Б. //Новые мировые тенденции в производстве продуктов из мяса птицы и яиц: мат. науч.-практ. конф.- Ржавки,

2006.-С.202-205.

31. Рождественская Т.Н. Инактивированные вакцины для профилактики бактериальных болезней птиц/ Рождественская Т.Н., Панкратов С.В, Гаврилов С.Н. // III Международный конгресс по птицеводству 10-13 апреля 2007 г, М,

2007.-С.187-190.

32. Рождественская Т.Н. Респираторный синдром бактериальной этиологии у птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н. //III Международный конгресс по птицеводству 10-13 апреля 2007 г., М., 2007-С.176-181.

33. Рождественская Т.Н. Особенности эпизоотологии пастереллёза птиц в современных условиях/ Борисенкова А.Н., Лебедева А.И., Рождественская Т.Н., Новикова О.Б. //Болезни птиц в промышленном птицеводстве. Современное состояние и стратегия борьбы: мат. научно-практ. конф., поев, памяти акад. РАСХН Р.Н. Коровина, 5-6 июня 2007 г, С-П6.-С.202-207.

34. Рождественская Т.Н. Чувствительность к антимикробным препаратам сальмонелл, выделенных от животных и птиц и из продуктов животного происхождения в Северо-Западном регионе РФ/ Забровская A.B., Кафтырева Л.А., Селиванова Л.В., Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н. и др. //Болезни птиц в промышленном птицеводстве. Современное состояние и стратегия борьбы: мат. науч.-практ. конф., поев, памяти акад. РАСХН Р.Н. Коровина, 5-6 июня 2007 г., С-П6.-С.207-209.

35. Рождественская Т.Н. Профилактика и лечение сальмонеллеза/ Рождественская Т.Н., Борисенкова А.Н., Панкратов С. В., Новикова О.Б.// Агрорынок., 2007.-№4,-С.16-18. .....

36. Рождественская Т.Н. Методы специфической и неспецифической защиты от сальмонеллеза птиц/ Борисенкова А.Н., Рождественская Т.Н., Новикова О.Б. и др.//V Международный ветеринарный конгресс по птицеводству 21-24 апреля 2008 г., М.,2008.-С.140-145.

37. Рождественская Т.Н. Изучение эффективности «Лактикола» в профилактике сальмонелла-энтеритидис инфекции у кур/ Рождественская Т.Н., Борисенкова А.Н., Новикова О.Б. //VI-й Международной ветеринарный конгресс по птицеводству 26-29 апреля 2010 г., М„ 2010.-С. 106-109.

Подписано в печать: 03.11.10 Тираж: 100 экз. Заказ № 3787 Отпечатано в типографии «Реглет» 119526, г. Москва, ул. Фридриха Энгельса, д. 3/5, стр. 2 (495) 661-60-89; www.reglet.ru

Содержание диссертации, доктора ветеринарных наук, Рождественская, Татьяна Николаевна

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Мировое и отечественное промышленное птицеводство: основные тенденции развития

2.2. Особенности бактериальных болезней птиц на современном этапе

2.3. Биомолекулярные основы и критерии патогенности микроорганизмов

2.4. Неспецифическая профилактика бактериальных болезней птиц - основа эпизоотического благополучия птицехозяйств

2.4.1.Антибиотикопрофилактика

2.4.2. Пробиотикопрофилактика

2.5. Колибактериоз - одна из важнейших проблем промышленного птицеводства

2.6. Особенности пастереллёза птиц на современном этапе

2.7. Псевдомоноз птиц: биологические свойства возбудителя, диагностика и профилактика

2.8. Сальмонеллёз птиц

2.9. Респираторный микоплазмоз птиц

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Материалы и методы

3.2. Эпизоотологический и микробиологический мониторинг в птицехозяйствах разного технологического направления

3.3. Серологический мониторинг микоплазмозов в птицехозяйствах

3.4. Эффективность применения антибактериальных препаратов в промышленном птицеводстве - Ю

3.4.1. Антибиотики Ю

3.4.2. Изучение эффективности применения антисептика «Катапол» на выводе и при выращивании цыплят

3.4.3. Исследование лечебно-профилактических свойств пробиотиков «Ц-люкс» и «Лактикол»

3.5: Изучение биологических свойств возбудителей бактериальных болезней птиц

3.5.1. Изучение биологических свойств выделенных культур Е.coli

3.5.2. Изучение штаммов пастерелл с ослабленной вирулентностью и создание модели хронического пастереллёза

3.5.3. Ассоциированный респираторный синдром бактериальной этиологии у птиц

3.5.4. Изучение биологических свойств культур синегнойной палочки

3.5.5. Изучение биологических свойств выделенных культур S.enteritidis

3.5.6. Определение чувствительности сальмонелл к антимикробным препаратам

3.6. Принципы конструирования вакцин нового поколения с учетом основ патогенности E.coli и технологическая схема их производства

3.6.1. Иммуногенные свойства растворимых антигенных комплексов E.coli

3.6.2. Проведение комиссионных испытаний инактивированной сорбированной вакцины против колибактериоза птиц в экспериментальных условиях

3.6.3. Испытание инактивированной сорбированной вакцины против колибактериоза птиц в производственных условиях

3.6.4. Усовершенствование и разработка инаквированной вакцины против пастереллёза птиц 1^

3.6.5. Разработка ассоциированной инактивированной вакцины для профилактики колибактериоза и пастереллеза птиц

3.7. Разработка специфической профилактики и рекомендаций по контролю сальмонелла-энтеритидис инфекции

3.7.1. Разработка инактивированной сорбированной вакцины против сальмонелла-энтеритидис инфекции птиц

3.7.2. Разработка вакцины ассоциированной инактивированной эмульсионной «АВИВАК-Сальмовак»

3.8. Разработка инактивированной эмульсионной вакцины против респираторного микоплазмоза птиц «АВИВАК-РМ»

3.9. Разработка рекомендаций по профилактике псеводомоноза птиц

3.10. Система контроля и профилактики бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Создание комплексной системы профилактики бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа"

1.1. Актуальность темы. Характерной особенностью современных птицеводческих хозяйств промышленного типа является узкая специализация производства, высокая концентрация поголовья на ограниченных территориях, использование высокопродуктивных линейных и гибридных кроссов птицы. Однако несоблюдение оптимальных зоотехнических и ветеринарно-санитарных условий содержания птицы часто приводит к накоплению патогенной и условно патогенной микрофлоры в воздухе и на объектах птичника, снижению уровня нормальной микрофлоры и естественной резистентности организма, и, вследствие этого, к быстрому распространению инфекционных болезней, в первую очередь бактериальной природы, уровень которых по данным Росптицесоюза превышает 60% (Венгеренко Л. А.,2009).

В этой связи проведение мониторинговых исследований бактериальной микрофлоры, выделяемой от птицы и из ее продукции в хозяйствах разного технологического направления, является актуальным и позволяет контролировать и прогонозировать эпизоотическую ситуацию на период выращивания и содержания птицы (Борисенкова А.Н., 2000; Гусев В. и др., 2003; Андреева Н.Л. и др., 2004; Сидорова А., 2008; Лыско С., Макарова О., 2009).

Одной из особенностей эпизоотологии бактериальных болезней птиц на современном этапе является ассоциированное течение инфекций с характерным проявлением признаков респираторного комплекса. При проведении бактериологических исследований, как правило, выделяют культуры эшерихий, стафилококков, синегнойной палочки, микоплазм, пастерелл с ослабленной вирулентностью, орнитобактерий (Борисенкова А. Н., 2007), а таюке пневмовирусы, что значительно затрудняет своевременную и объективную постановку диагноза и разработку мер борьбы и профилактики (Лазуткина Е.А., Бессарабов Б. Ф., 2007; Cavanagh D.,1999).

В последние годы в птицехозяйствах возросла циркуляция условно патогенной микрофлоры, являющейся причиной проявления токсикоинфекций человека. Достаточно упомянуть о выделении в ряде хозяйств Е. coli с антигеном 0:157 Н:7, которые вызывает у людей геморрагический колит (Бондаренко В.М., Шаманова М.А.,2004; Степаншин Ю.Г. и др., 2005; Thamm В., 2000), S. enteritidis - одного из основных патогенов при сальмонеллёзной инфекции (Кафтырева Л.А. и др., 2008 ) и С. jejuni - возбудителя кампилобактериоза, являющегося причиной кишечных болезней у детей (Черкасский Б.Л., Минаев В.И.,1993). Все это ставит проблему бактериальных болезней птиц на уровень не только ветеринарный, но и медико-экологический.

Общепринятым методом профилактики бактериальных болезней птиц всегда было применение антимикробных препаратов. Наиболее эффективными являются макролиды, тетрациклины, фторхинолоны и созданные на их основе комплексные препараты - тилозина и левомицетина, тилозина и апрамицина (Татарчук О. П.,2007), доксициклина и линкомицина (Лагунин С. В. и др., 2005), спектиномицина и клиндамицина (Ионов С.Н. и др., 2007), тиамулина и хлортетрациклина (Islam K.M. et al., 2008). Однако избавиться с помощью средств неспецифической профилактики от вирулентных штаммов, циркулирующих в птицехозяйствах, удается далеко не всегда. Кроме того, следует помнить, что использование антимикробных препаратов с профилактической целью влечет за собой целый ряд негативных последствий -иммуносупрессию, дисбактериоз, аллергические реакции, проявление у патогенных и условно патогенных бактерий резистентности к антибиотикам, ограничение на использование в пищу людям продуктов убоя птицы, обработанной такими препаратами. Довольно часто альтернативой применению антибиотиков являются применение антисептиков (Видении

В.Н.,1994), пробиотиков (Тараканов Б.В. и др.,2007; Панин А.Н.,2008) и вакцинопрофилактика (Радчук H.A., Ледовских Н.П., Михайлова В.Е., 1987).

До последнего времени в стране, за исключением пастереллёза (Борисенкова А.Н., 1992), не были разработаны эффективные вакцины против колибактериоза, сальмонеллёза и микоплазмоза птиц. Широко апробированные в 70-90-х гг. прошлого века инактивированные вакцины против колибактериоза, изготовленные из полной бактерии или бивалентные (Рахманина И.А., Грошева Г.А., 1980; Артемьева С.А. и др., 1987; Радчук H.A.,1990), оказывали защитное действие только при заражении гомологичными полевыми штаммами. При этом следует отметить, что в комплексе мероприятий по предупреждению и ликвидации бактериальных болезней птиц в практике российского промышленного птицеводства отсутствуют наиболее востребованные ассоциированные формы бактериальных вакцин.

Установлено, что наиболее эффективные бактериальные вакцины могут быть созданы на основе штаммов, подобранных с учетом факторов патогенности ( вирулентности, адгезии, токсигенных и других свойств) (Григорьева Г.И., Игнатов П.И., 1987; Литвин В.Ю., 1994; Бондаренко В.М., 1999) и на основе масляно-эмульсионных адъювантов нового поколения, обеспечивающих более продолжительный и напряжённый иммунитет (Glisson J.R. et al., 1984; Feberwee A. et al., 2006; Kleven S., 2008).

Поэтому работа по совершенствованию системы контроля бактериальных болезней птиц и созданию эффективных средств неспецифической и специфической профилактики является актуальной.

1.2. Цель работы и задачи исследований

Создать комплексную систему профилактики бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа с учетом биологических свойств возбудителей.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

- провести микробиологический и серологический мониторинг, изучить спектр; возбудителей: бактериальных болезней, циркулирующих в хозяйствах разного технологического направления;

- изучить биологические свойства возбудителей наиболее значимых бактериальных болезней птиц;

- провести исследования некоторых антимикробных средств, пробиотиков и антисептиков с целью профилактики бактериальных болезней птиц;

- изучить факторы патогенности возбудителей бактериальных болезней птиц и предложить критерии подбора вакцинных штаммов для создания средств специфической профилактики;

- получить лабораторные образцы инактивированных вакцин против бактериальных болезней птиц;

- испытать и предложить адъюванты для промышленного производства бактериальных вакцин;

- разработать технологию производства инактивированных вакцин против колибактериоза, сальмонеллёза и микоплазмоза птиц;

- разработать систему профилактики бактериальных;болезней, для оценки и прогноза эпизоотической ситуации на период: выращивания птицы;

- внедрить в практику промышленного птицеводства средства и методы профилактики болезней бактериальной этиологии.

1.3. Научная новизна и теоретическая значимость работы

Определен спектр и количественный состав микрофлоры возбудителей бактериальных болезней птиц, циркулирующих в хозяйствах различного технологического направления.

Изучены биологические свойства культур, выделенных из различных птицеводческих объектов (здоровая и павшая птица, смывы с тушек, вода из ванн охлаждения, групповые пробы помета, воздух инкубатория). Установлено, что видовой состав микрофлоры зависит от вида, возраста птицы, эпизоотической ситуации и, в меньшей степени, от технологического направления птицехозяйств.

Показано, что штаммы Е. coli, не типируемые с помощью набора коммерческих О-коли сывороток, эпизоотически опасные и высоковирулентные для РКЭ и цыплят первого возраста.

Изучены биологические свойства Е. coli и установлено, что термостабильный и термолабильный энтеротоксины вызывают у птиц диареегенные и геморрагические поражения на слизистых оболочках, соответственно, а цитотоксин - пневмонию и гибель цыплят.

Установлена корреляции между токсигенными, адгезивными и вирулентными свойствами эшерихий, выделенных от птиц. Показано, что наибольшей степенью вирулентности обладают культуры, способные вырабатывать термостабильный энтеротоксин, цитотоксин и специфические адгезивные антигены.

Впервые изучено течение респираторного синдрома у птиц, предложена модель определения этиологического фактора заболевания у птиц при заражении цыплят смесью культур Pasteurella multocida, Escherichia coli и Staphylococcus aureus .

Установлено, что экзотоксин A Ps.aeruginosa свободно проникает через гематоэнцефалический барьер и вызывает патологические изменения в паренхиматозных органах.

Изучена степень чувствительности культур патогенных и условно патогенных микроорганизмов, выделенных от птиц, к антибиотикам -«Тиланик», «Тилокол» и «Польодоксин», изучены антагонистические свойства пробиотиков - «Ц-люкс» и «Лактикол» и даны рекомендации для внедрения их в практику птицеводства.

Предложены критерии подбора вакцинных штаммов E.coli и S.enteritidis с учетом вирулентных, адгезивных и токсигенных свойств.

Разработаны инактивированные сорбированные вакцины против колибактериоза, сальмонелла-энтеритидис инфекции птиц и ассоциированная вакцина против колибактериоза и пастереллеза птиц.

Подобран эффективный масляный адьювант для промышленного производства бактериальных инактивированных вакцин.

Разработаны и внедрена промышленная технология производства инактивированных моно- и ассоциированных сорбированных и масляных вакцин против сальмонеллеза, колибактериоза, пастереллеза и респираторного микоплазмоза птиц.

Разработана комплексная система профилактики бактериальных болезней птиц с использованием специфических и неспецифических средств защиты и учетом биологических свойств возбудителей.

1.4. Практическая значимость

Разработаны и утверждены нормативные документы на следующие биопрепараты:

- «Вакцина против сальмонеллеза, колибактериоза и пастереллёза птиц инактивированная АВИВАК-Сальмо-Коли-Пастовак», СТО 46262188-00022007;

Инструкция по применению вакцины против сальмонеллеза, колибактериоза и пастереллёза птиц инактивированной «АВИВАК - Сальмо-Коли - Пастовак», утверждена 06.12.07 г.;

- «Вакцина инактивированная эмульсионная против респираторного микоплазмоза птиц АВИВАК-РМ», ТУ 9384-002-46262188-04.

- «Инструкция по применению вакцины инактивированной эмульсионной против респираторного микоплазмоза птиц «АВИВАК-РМ», утверждена 20.12.2005 г.;

Разработаны: «Рекомендации по диагностике и профилактике псевдомоноза птиц» (одобр. ВПНО «Союзптицепром» 10.11.1989 г.); «Рекомендации по проведению микробиологического мониторинга вывода и выращивания цыплят» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 28.11.1994 г. и утв. директором института); Рекомендации по диагностике и профилактике пастереллеза птиц» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 1995г.); «Рекомендации по профилактике пневмонии индеек» (утв. ВПНО «Союзптицепром» 28.12.1990 г.); «Рекомендации по контролю сальмонелла-энтеритидис-инфекции птиц» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 31.10.2005 г. и утв. директором института). 1.5. Апробация

Основные положения диссертации опубликованы, доложены и одобрены на: заседаниях Учёного совета Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института птицеводства (ВНИВИП) за 1986-2006 гг.; Всесоюзной научно-производственной конференции (Санкт-Петербург, 1986); Конференциях по птицеводству Национального отделения ВНАП России (Санкт-Петербург, 1993; Сергиев Посад, 1995; Зеленоград, 2003); III Украинской конференции по птицеводству с международным участием «Птицеводство» (Харьков, 2001); Международной юбилейной научно-практической конференции, посвященной 40-летию ГНУ ВНИВИП «Новое в эпизоотологии, диагностике и профилактике инфекционных и незаразных болезней птиц в промышленном птицеводстве» (Санкт-Петербург - Ломоносов, 2004); Конференции НПП «АВИВАК» «Современные научные разработки и перспективные технологии для промышленного птицеводства» (Санкт-Петербург, 2005), «20 лет на благо промышленного птицеводства» (Санкт-Петербур, 2010); I-VI Международных конгрессах по птицеводству (Москва, 2005-2010); Научно-практической конференции «Новые мировые тенденции в производстве продуктов из мяса птицы и яиц» (Ржавки, Московская обл., 2006), Научно-практической конференции, посвященной памяти академика РАСХН Р.Н. Коровина «Болезни птиц в промышленном птицеводстве. Современное состояние и стратегия борьбы» (Санкт-Петербург, 2007).

1.6. Публикации результатов исследований

По материалам диссертации опубликовано 37 научных работ, в том числе 12- в изданиях, рекомендованных перечнем ВАК РФ

1.7. Структура и объём работы

Диссертация изложена на 310 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложений.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Рождественская, Татьяна Николаевна

5. ВЫВОДЫ

1. Разработана комплексная система профилактики бактериальных болезней птиц, включающая эпизоотологический, серологический и микробиологический мониторинг вывода и выращивания птицы, контроль качества подготовки технологического оборудования, инкубационного яйца, использования эффективных антибактериальных препаратов и средств специфической профилактики.

2. Спектр и количественный состав микрофлоры, циркулирующей в птицехозяйствах, зависит от вида, возраста птицы и эпизоотической ситуации. Зоопатогенные виды Salmonella enteritidis и Campylobacter jejuni чаще выделяют из помета и смывов с тушек, обсеменение которых происходит в процессе потрошения.

3. Результаты микробиологического мониторинга вывода и выращивания цыплят позволяют прогнозировать развитие эпизоотической ситуации в птицехозяйствах и своевременно разработать эффективные меры предупреждения возникновения инфекционных болезней.

4. Причиной возникновения эпизоотически опасного колибактериоза птиц являются штаммы Е. coli, обладающие высокой вирулентностью, способностью вырабатывать термолабильный и термостабильный энтеротоксины, цитотоксин, а также два или три энеротоксина одновременно. Культуры, продуцирующие термолабильный энтеротоксин, вызывают геморрагические поражения, а цитотоксин - пневмонию у цыплят. Колибактериоз птиц протекает по типу токсико-септико инфекции.

5. Этиологическим фактором развития респираторного синдрома у птиц является ассоциированное действия пастерелл ослабленной вирулентности и условно патогенной микрофлоры.

6. Культуры синегнойной палочки, выделенные от птиц, способны продуцировать экзотоксин А, который свободно проникает через гематоэнцефалический барьер, вызывает патологические изменения в паренхиматозных органах.

7. Установлено, что применение водорастворимого тилозина тартрата и комплексного препарата тилозина тартрата с левомицетином в соответствии с наставлением для профилактики бактериальных и, микоплазменных болезней птиц увеличивает сохранность цыплят- бройлеров на 1,4 и 3,5 %, среднесуточный прирост живой массы на 0,7 и 2,2 г и средней живой массы перед убоем на 30 и 94 г, соответственно.

8. Антисептик «Катапол» эффективен in vitro в отношении большинства штаммов стафилококков, кишечной и синегнойной палочки. Его применение в форме аэрозоля 1% раствора из расчета 5мг/м в выводных шкафах при достижении вывода цыплят более 60% снижает контаминацию воздуха инкубатория различными бактериями в 2-15 раз, уменьшает количество птиц, павших от патологии органов дыхания, в т.ч. с признаками аэросаккулитов, которые за первые 20 дней выращивания регистрировали в 2,3 и 2,7 раза меньше и увеличивает сохранность в опытной группе на 0,5 % , по сравнению с контрольной группой.

9. Применение препаратов «Ц-люкс» и «Лактикол» для восстановление микробиоценоза кишечника птиц в период выращивания и, особенно, в период технологического стресса, а также после применения антибиотиков., позволяет повысить сохранность бройлеров на 0,8-1,6% и снизить инфицированность кур-несушек и контаминацию тушек при убое и разделке птиц С. jejuni и другими условно патогенными микроорганизмами.

10. Предложены критерии подбора вакцинных штаммов с учетом факторов патогенности (вирулентных, адгезивных, токсигенных и Др.). Селекционированы штаммы эшерихий и сальмонелл для производства инактивированных вакцин нового поколения.

11. Инактивированная вакцина «АВИВАК-Сальмо-Коли-Пастовак», созданная на основе селекционированных штаммов «С-5-АТ» Salmonella enteritidis, адгезивных антигенов токсигенных штаммов Escherichia coli и. «№115» Pasteurella multocida с адьювантами гидроокиси алюминия или эмульсионным Montanide ISA-70 VG в моно- или двухвалентных вариантах, обладает выраженными иммуногенными свойствами. Применение вакцин в птицехозяйствах позволяет стабилизировать эпизоотическую ситуацию, повысить планово-экономические показатели и снизить затраты на ветобслуживание в 1,5 раза.

12. Разработана и внедрена инактивированная эмульсионная вакцина «АВИВАК-РМ» против респираторного микоплазмоза птиц. Ее применение в сочетании с правильно подобранными схемами химиопрофилактики позволяет стабилизировать эпизоотическую ситуацию в неблагополучных по данному заболеванию птицехозяйствах, повысить яйценоскость на 14 -17% и увеличить выводимость цыплят от вакцинированной птицы на 8,7 — 9,1%

6. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

В ветеринарную практику внедрены: «Вакцины против сальмонеллеза, колибактериоза и пастереллеза птиц, инактивированные сорбированные и эмульсионные «АВИВАК-Сальмо-Коли-Пастовак», выпускаемые в моно- или двухвалентном вариантах, и вакцина инактивированная эмульсионная против респираторного микоплазмоза птиц «АВИВАК-РМ». Вакцины производятся серийно на биологическом предприятии «Hiill «АВИВАК» и широко применяются в птицеводческих хозяйствах страны.

Для практического применения в птицехозяйствах рекомендованы антибиотики: «Тиланик», «Тилокол» и «Польодоксин», антисептик «Катапол», пробиотики «Ц-люкс» и «Лактикол».

Разработаны: «Рекомендации по диагностике и профилактике псевдомоноза птиц» (одобр. ВПНО «Союзптицепром» 10.11.1989 г.); «Рекомендации по профилактике пневмоний индеек» (утв. ВПНО «Союзптицепром» 28.12.1990 г.); «Рекомендации по проведению микробиологического мониторинга вывода и выращивания цыплят» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 28.11.1994 г. и утв. директором института); «Рекомендации по контролю сальмонелла-энтеритидис-инфекции птиц» (одобр. Ученым советом ВНИВИП 31.10.2005 г. и утв. директором института)

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, доктора ветеринарных наук, Рождественская, Татьяна Николаевна, Санкт-Петербург

1. Аккузина С.Г. Эпизоотология колибактериоза и свойства эшерихий, выделенных от кур, в неблагополучном хозяйстве: автореф. канд. вет. наук/ Аккузина С.Г.-Л., 1981.-17с.

2. Аккузина С.Г. Адгезивные антигены эшерихий, выделенные от птиц/ С.Г. Аккузина, С.А. Артемьева// Эффективные средства и методы диагностики и профилактики болезней птиц в промышленном птицеводстве: сб. науч. тр. ВНИВИП.-Л., 1991.- С.71-78.

3. Алиев А. Д. Серологическая диагностика колибактериоза птиц/ А.Д.Алиев, С.Ш.Кабардиев// Современное состояние проблемы и стратегия борьбы: мат. научн.- прак. конф., поев, памяти акад. РАСХН Р.Н.Коровина.- СПб, 2007. С. 230-235.

4. Андреева Н.Л. Изучение бактериальных инфекций на птицефабриках/ Н.Л.Андреева, М.Е.Дмитриева, А.А. Климов, Л.С. Фогель // Ветеринария.-2004.-N5.-С. 14-16.

5. Антипов В.А. Использование пробиотиков в животноводстве/ В.А.Антипов//Ветеринария.-1991.-№4.- С.55-58.

6. Аронов В.М. Роль различных видов сальмонелл в патологии птиц: автореф. дис. канд. вет. наук/Аронов В.М.//.- СПб, 1999.- 21с.

7. Ю.Артемьева С.А. Колибактериоз птиц / Артемьева С.А.-Л.: «Колос», Ленинградск. отд.,1977.- 96с.

8. П.Артемьева С. А. Серологические варианты синегнойной палочки (Pseudomonas aeruginosa)/ С.А. Артемьева, В.И. Артемьев// Современныепроблемы профилактики и терапии заразных болезней сельскохозяйственных животных и птиц: сб. науч. тр. ЛВИ.-Л.,1984.-С.З-8.

9. Артемьева С. Способы применения формолвакцины/ С. Артемьева, В.Соколов, Г.Дорофеев//Птицеводство.-1987.-№8.- С.37-38.

10. Афонюшкин В. Современные методы контроля сальмонеллёза/

11. B.Афонюшкин, Е. Дудаева, Л. Малахеева, О.Фролова, О.Шкред, М.Филиппенко // Птицеводство. -2008. -№9 .-С .43-44.

12. Африкантов С.Г. Псевдомоноз птиц/ С.Г. Африкантов, С.В. Ладыгин, А.К. Силин, Г.И. Пиленко // Ветеринария.-1985.-№10.-С.40-41.

13. Африкантов С.Г. Роль синегнойной палочки в патологии птиц/

14. C.Г.Африкантов, А.К.Силин, Г.И. Пиленко// Современные средства борьбы с заразными болезнями сельскохозяйственных птиц: сб. научн. тр. ВНИТИП, ВНИВИП, ч.2.-Л., 1988.- С.86-91.

15. Байдевлятов А.Б. Система ветеринарно-санитарных мероприятий в прмышленном птицеводстве/ Байдевлятов А.Б. и др.//- 2-е изд., доп. и перераб.-Киев.:,Урожай, 1987.-152 с.

16. Белкин В.А. Проблемы диагностики и профилактики респираторного микоплазмоза в промышленном птицеводстве/ В.А.Белкин // V Межд. ветерин. конгр. по птицев., 21-24 апреля 2009 г.-М.,2009.-С.145-148.

17. Бессарабов Б.Ф. Микоплазмоз птиц и применение байтрила для борьбы/ Б.Ф.Бессарабов // IV Межд. ветер, конгр. по птицев., (8-11 апреля 2009 г.,М.).-М., 2009.- С.127-130.

18. Бессарабов Б.Ф. Респираторный микоплазмоз кур/ Бессарабов Б.Ф., Мельникова И.И.- М., 1998.- 19 с.

19. Бессарабов Б. Аэрозольная обработка надежная защита птицы от болезней/ Б. Бессарабов, В. Полянинов// Птицеводство.-2006.-№3.-С.34-36.

20. Биргер М.О. Справочник по ветеринарной микробиологии/ Биргер М.О.-Агропромиздат, 1989.- 215 с.

21. Бобылева Г.Птицеводство России/ Г.Бобылева// Птиицеводство.-2005.-~Зч,£Ъ^ С.4-11.

22. Бобылева Г.А. Состояние и перспективы развития отрасли птицевод Г.А.Бобылева// VI Межд.ветер, конгр. по птицев.(26-29 апреля 2010 r.^Js^i ^ М.,2010.-С.7-14.

23. Бовкун Г.Ф. Микробиоценоз кишечника в норме и патологии уптиц, крупного рогатого скота и целесообразность пробиотическо^ и пребиотической коррекции: учебное пособие /Бовкун Г.Ф. и др.//-Брянская ГСХА, 2005.-80с.

24. Бондаренко В.М. Факторы патогенности бактерий и их роль в Развитии инфекционного процесса/ В.М. Бондаренко//ЖМЭИ.- 1999.-№5.-С.34-39.

25. Бондаренко В.М. Инфекции, вызываемые энтерогеморрагическимиэшерихиями/ В.М.Бондаренко, М.А.Шаманова// Ветеринарная патолог^ 2004.-№4 (11).-С.60-69.

26. Бондаренко В.М. Гемагглютинирующая и адгезивная способность штаммов клебсиелл и энтеробактерий/ В.М.Бондаренко, М.М. Баркус5 g ^ Брилис, A.A. Ленцнер // ЖМЭИ.-1987.-№7.-С.З-6.

27. Бонзак X. Опыт вакцинопрофилактики сальмонеллёзной ийфекции (Salmonella gallinarum) у кур-несушек/ X. Бонзак// III Межд. ветер, конгресс по птицев.( 10-13 апреля 2007 г., Москва) .-М., 2007.-С.157-158.

28. Борисенкова А.Н. Значение соматического и капсульного антигенов Р. шикос1с1а в иммунологической специфичности вакцин/ А.Н. Борисенкова// Ветеринария.-1978.-№5.-С.40-42.

29. Борисенкова А.Н. Профилактика пастереллёза птиц/ Борисенкова А.Н.-М.: Россельхозиздат, 1979.-87 с.

30. Борисенкова А.Н. Профилактика пастереллеза/ А.Н.Борисенкова// Птицеводство.-1983.-№12.-С.26-27.

31. Борисенкова А.Н. Изучение ферментов патогенности Р.тикоЫёа и их роль в патологии пастереллёза птиц/ А.Н. Борисенкова, Г.В. Горовенко, М.А. Журнакова// Материалы XV Всемирного конгресса по птицеводству.- США, 1974,-Новый Орлеан .- С.584-585.

32. Борисенкова А.Н. Биохимический состав и серологическая активность растворимых антигенных комплексов, выделенных из Р.тикошёа/ А.Н.Борисенкова, А.П. Юдаев, М.А.Журнакова, А.Д. Комисаренко//

33. Технологические и ветеринарные аспекты промышленного птицеводства.: сб. тр. ВНИТИП, т.41.-Загорск, 1976.-С.157-162.

34. Борисенкова А.Н. Бактериальная инфицированность цыплят на выводе в разные сроки их выборки/ А.Н. Борисенкова, Т.Г.Федорчук, А.П. Пилипенко// Национальное отделение СССР Всемирной научной ассоциации по птицеводству: тез. докл.- Одесса, 1979.-С.67.

35. Борисенкова А.Н. Испытание комплексного препарата на основе пробиотиков и фермента для профилактики бактериальных болезней у птиц./ А.Н. Борисенкова, Т.Н. Рождественская// Сб. науч. тр. Литовского вет. института.- 1993.-С.99-100.

36. Борисенкова А.Н. Токсигенные свойства кишечной палочки и их роль в патологии птиц/ А.Н. Борисенкова, Т.Н. Рождественская //Ветеринария,-1994.-№3.-С.27-29.

37. Борисенкова А.Н. О кампилобактериозе кур/А.Н. Борисенкова, Т.Н. Рождественская, О.Б. Новикова//Конференция по птицеводству: матер. Национ. комитета по сотр. птицев. России с Всемирной научной ассоциацией по птицеводству.- Зеленоград, 2003.-С.202-203.

38. Борисов А. Специфическая профилактика вирусных болезней птицы /А. Борисов // Птицеводство.-2008.-№1.-С.15.

39. Борисов В. Пятивалентная инактивированная вакцина для профилактики вирусных болезней/ В. Борисов, Д. Долгов, С. Фролов, А. Борисов// Птицеводство.-2009.-№3 .-С.39-41.

40. Бортюк Я.А. Опыт применения живой вакцины из штамма Salmonella enteritidis для профилактики инфекций, вызываемых Salmonella gallinarium и

41. Salmonella pullorum/ Я.А. Бортюк //IV Межд. ветерин. конгр. по птицев., 8-11 апреля 2008 г.-М.-С. 131-133.

42. Бортюк Я. Применение живой вакцины из штамма Salmonella enteritidis/ Я. Бортюк //Птицеводство.- 2008.-№10.-С.19.

43. Борьба с сальмонеллёзом: роль ветеринарии и пищевой гигиены//Д0клад комитета экспертов ВОЗ №774.-Женева, ВОЗ, 1991.-83 с.

44. Брилис В.И. Адгезивные свойства лактобацилл: автореф. дис.канд. мед. наук/ Бриллис В.И.- М.:,1983.- 18с.

45. Бриллис В.И. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов/ В.И. Бриллис, Т.А. Бриленс, Х.П. Ленцнер и др. //Лаб. дело.-1986.-№4.-С.2Ю-212.

46. Бунаков А.П. Характеристика микрофлоры, выделенной от погибших в период инкубации эмбрионов кур/А.П. Бунаков//Современные проблемы профилактики и терапии заразных болезней сельскохозяйственных животных и птиц: сб. науч. тр. ЛВИ.- Л., 1984.-С.65-68.

47. Бурханова Х.К. Свойства E.coli, выделенных от больных птиц/Х.К. Бурханова //Ветеринария.-1980.-№ 10.-С.66-68

48. Бухарин О.В. Инфекция модельная система ассоциативного симбиоза/ О.В.Бухарин// 2009.-№1.- С.83-86.

49. Бухарин О.В. Ассоциативный симбиоз/ Бухарин О.В., Лобакова Е.С., Немцева Н.В., Черкасов C.B.- Екатеринбург, Изд. УрО РАН, 2007,- 250 с.

50. Вартанян Ю. П. Отёк лап белых мышей тест для оценки активности энтеро- токсинов / Ю. П. Вартанян, М. К. Северцева, О. И. Введенская, Е.С. Станиславский. //Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1978. -№2.-С. 150-152.

51. Венгеренко Л.А. Эпизоотическое благополучие залог эффективной работы хозяйств / Л.А. Венгеренко // Птицеводство.-2008.- №1.- С. 11-12.

52. Венгеренко Л.А. Ветеринарно-санитарное обеспечение эпизоотического благополучия в птицехозяйствах Российской Федерации/Л.А. Венгеренко //Ветеринария, 2009.-№8.-С.З-6.

53. Вертиев Ю. В. Бактериальные токсины: биологическая сущность и происхождение / Ю. В. Вертиев //Журн. микробиол.-1996.-№3.-С.43-46.

54. Видении В.Н. Катапол при после операционных гнойно-восполительных осложнениях у животных/ В.Н. Веденин //Ветеринария,-1994.- №4.- С. 44-45.

55. Виноходов В.О. Биотехнология профилактики колибактериоза птиц/ ВиноходовО.В.- Прилож. к т.2(49) «Архива ветеринарных наук».-С-Пб, Ломоносов, 2000 г.-597с.

56. Волков М. С. Определение степени патогенности полевых изолятов микоплазм (Mycoplasma gallisepticum и Mycoplasma synoviae) на куриных эмбрионах / М.С.Волков, А.Н.Колотилов// Вет. патология.- 2006.- N 4. С. 139143.

57. Волков М. Современные антибактериальные средства для борьбы с микоплазмозом/ М. Волков, В. Ирза, Т. Черняева// Птицеводство.-2008.-№2.-С.21-23.

58. Волкова И.А. Разработка иммуноферментных тест-систем для диагностики микоплазмозов птиц: автореф. дис.канд. биол. наук.- Владимир,2004.-21с.

59. Габасония Т. Резистентность кишечной микрофлоры к аминоглюкозидам/ Т. Габасония, К. Детулидзе, Н. Мелашвили, К. Кочламазвили, Т. Элиава, Т.

60. Калануиришвили, М. Надирадзе, Н. Чахунашвили// Птицеводство.-2008.-№8.~ С.45.

61. Головко А.Н. Средства диагностики и специфической профилактики колибактериоза нового покаления/А.Н. Головко, В.А. Ушкалов// Ветеринарные и зооинженерные проблемы животноводства.: мат. межд. науч.-произ. конф,-Витебск, 1996.-С.96.

62. Григорьева Г. И. Факторы патогенности, как протективные антигены при конструировании вакцин/ Г.И. Григорьева, П.И. Игнатов //С.-х. биологии.-1987.-№12.- С.100-104.

63. ГрошеваГ.А. Колисептицемия/Болезни птиц, М., 1971.- 190 с.

64. Гусев В. Мониторинг возбудителей бактериальных инфекций/ В. Гусев, Э. Светоч, Н. Глазков, М. Теймуразов, С.Приходько, С.Павлов // Птицеводство.-2003.- №2.-С.8-9.

65. Данилевская Н.В. Фармакологические аспекты применения пробиотиков/ Н.В. Данилевская// Ветеринария.-2005.-№11 .-С.6-10.

66. Данилевская Н.В. Фармакостимуляция продуктивности животных пробиотическими препаратами: автореф. .д-ра вет. наук/ Данилевская Н.В.-М.,2007.-48с.

67. Дорофеева С. Г. Респираторный микоплазмоз птицы и методы его предупреждения. / С. Г. Дорофеева // Ветеринария.- 2005.-Ы8.- С. 15-18.

68. Джавадов Э.Д. Инактивированные вакцины серии «Авикрон» -эффективная профилактика болезней птиц в промышленном птицеводстве/ Э.Д. Джавадов, М.Е. Дмитриева, И.Н. Вихрева, А.С.Дубовой, Г.Н.Самусева// Ветеринария.-2009.-№6.-С. 13-14.

69. Езепчук Ю.В. Функциональные критерии патогенности/ Ю.В.Езепчук// ЖМЭИ.- 1988.-№5.- С.33-37.

70. Езепчук Ю.В. Патогенность, как функция биомолекул/ Езепчук Ю.В.- М., Медицина, 1985. 238 с.

71. Ещенко И.Д. Микроорганизмы-индикаторы санитарного состояния птицеводческих помещений/ И.Д.Ещенко// Современные средства и методы борьбы с заразными болезнями сельскохозяйственных птиц: сб.науч.тр. ВИТИП, ВНИВИП, Ч.2.-Л., 1988.-С.133-139.

72. Заерко В.И. Совершенствование специфической профилактики пастереллёза/ В.И. Заерко, В.И. Ситьков, И.К. Тутов //Ветеринария.-2000.-№ 6.-С.20-22.

73. Закомырдин A.A. Ветеринарно-санитарные мероприятия в промышленном птицеводстве/ Закомырдин A.A.// 2-е издание перераб. и доп. М. Колос, 1981.-271с.

74. Зароза В.Г. Антигены адгезии Е. coli: морфологические и биохимические свойства/Г.В.Зароза// Сельскохоз. биология.-1988.-№4.-С. 36-41.

75. Зуев O.E. Макролиды препараты выбора для борьбы с микоплазменной инфекцией/ O.E. Зуев// VI Межд. веет. Конгр.по птицев.26-29 апреля 2010 г.-М.,2010.- С.132-135.

76. Ибрагимов A.A. Этиология и патоморфогенез колибактериоза птиц/ А.А.Ибрагимов// III Междун. ветер, конгр. по птицев.10-13 апреля 2007г.- М., 2007.-С.158-161.

77. Изоляция, идентификация и лекарственная устойчивость Salmonella. Протокол лабораторных исследований. Программа ВОЗ по надзору за сальмонеллёзами.З, 2002.

78. Ионов С.Н. Клиндаспектин при бактериальных инфекциях птиц/ С.Н.Ионов, А.Д. Игнатова, Е.Н. Елисеева // Ветеринария.-2007.-№1.-С.13-16

79. Калина Г.П. Род Pseudomonas aeruginosa новые аспекты старой проблемы/ Г.П. Калина//ЖМЭИ.-1985.-№5.-С.91 - 98.

80. Капустин А.В. Этиологическая структураэширихиоза кур: автореф. дисс. канд. вет. наук/ Капустин А.В. М., 2001.- 32 с.

81. Капустин А.В. Серогрупповая принадлежность Escherichia coli, выделенных от кур/ А.В. Капустин, Ю.А. Малахов // Тез. докл. Всерос. научн.-произв. конф.- Ставрополь, 2000.-С.16-18.

82. Каргилл П.В. Современный взгяд на инфекционное воспаление носа и трахеи птицы// Био.-2002.-№5.-С. 13-14.

83. Карпухин Г.И. Выделение антигенных комплексов действием детергентов.-В кн. «Химические вакцины для профилактики кишечных инфекций»/ Карпухин Г.И.- М.: Медицина, 1979.- С.20-21; 73-74.

84. Каспарьянц С.А. Ринотрахеит птицы/ С.А. Каспарьянц, А.Г. Столляр // Ветеринария.-2009.-№9.-С. 18-21.

85. Кафтырёва JI.A. Сальмонеллёзы у людей, связанные с продуктами промышленного птицеводства/ JI.A. Кафтырёва, А.В. Забровская //1-й Международный ветеринарный конгресс по птицеводству 18-22 апреля 2005 г.-М., 2005.-С.188-190.

86. Кафтырева JI.А. Сальмонеллезы на территории Северо-Западного Федерального Округа РФ. Аналитический обзор/Л.А. Кафтырева, З.Н.Матвеева, A.B. Забровская, С.А. Егорова, М.А. Макарова.- С-Пб, 2008.- 41с.

87. Киржаев Ф.С. Динамика • титра агглютининов у цыплят при пуллорозе-тифе/Ф.С. Киржаев//Ветеринария.-1975.-№ 1.-С.41-42.

88. Киржаев Ф.С. Диагностическая ценность реакции непрямой гемагглютинации при пуллорозе-тифе/ Ф.С. Киржаев, М.П. Рожанская //Ветеринария.-1979.-№5.-С.70-72.

89. Киржаев Ф.С. Иммунопрофилактика при сальмонеллёзе гусей/ Ф.С. Киржаев, H.A. Соловьян, A.C. Персов //Сб. научн. тр. ВНИВИП. ч.2.-Л., 1988.-С.67-73.

90. Кислюк С. Ферментативный пробиотик целобактерин ответ на многие вопросы/ С. Кислюк, Н. Новикова, Г. Лаптев //Современные технологии в животноводстве.-2008, №1 .-С.26-27.

91. Климов A.A. Повышение эффективности фторхинолов в индустриальном животноводстве/ A.A. Климов // Ветеринария.-2003.-№5.-С.9-11.

92. Кожевников Е.М. Батерионосительство, его значение в экологии Pasterella multocida и борьбе с пастереллезом птиц: автореф. дис . докт. вет. наук/ Кожевников Е.М.-Воронеж, 1975.- 33с.

93. Кожемяка Н. Ешерихиоз бройлеров/ Н. Кожемяка //Животноводство России.-2008.-№11.-С.15-16.

94. Козак С.С. Снижение контаминации тушек бройлеров путём использования в корме пробиотиков/ С.С. Козак, С.А. Барышников //Птица и птицеПродукты.-2009.-№3.-С.32-34. 105. Колибактериоз птиц/ //Рос. вет. журн. С.-х. животные.- 2008.-№1.-С.42-43.

95. Красиков А.П. Ассоциативный респираторный микоплазмоз птиц. / А.П. Красиков, С. Б. Лыско // Вет. патология.- 2005.- N 1. С. 59-65

96. Крохин H.JI. Сальмонеллёз птиц основы профилактики/ H.JI. Крохин, C.B. Панкратов //IV Межд. вет. конгр. по птицев., 8-11 апреля 2008 г.-М., 2008.-С.122-125.

97. Кузьмин В. А. Микробная контаминация инкубатория в период инкубации и вывода цыплят/ В.А.Кузьмин//Сб. научн. тр. ВНИВНП.-1981.-Т.52.-С. 100-105.

98. Кузьмин В.А. Комплексная система профилактики сальмонеллёза в птицеводстве/В.А. Кузьмин, И.Д. Ещенко//1-й Международный ветеринарный конгресс по птицеводству 18-22 апреля 2005 г.-М., 2005.-С. 167-170.

99. Куликовский A.B. Эмерджентные пищевые зоонозы/ A.B. Куликовский //М., Крафт+, 2004. 174 с.

100. Лагунин C.B. Изучение фармакокинетики препарата на основе доксициклина и линкомицина в организме птиц/ C.B.Лагунин, Б.В.Виолин, Е.М.Сазонова// Ветеринарная практика.-2005.-№3.-С.9~13.

101. Лазуткина Е. Ветеринарно-санитарные мероприятия при синдроме опухшей головы/ Е. Лазуткина, Б.Бессарабов, И.Мельникова// Птицеводство.-2007.-№10.- С.35-36.

102. Ленев C.B. Сальмонеллёз птиц и его специфическая профилактика/С.В. Ленев, О.Н.Виткова, М.В.Калмыков// 1-й Межд. ветер, конгр. по птицев.( 18-22 апреля 2005г., Москва).- М.,2005.-С.38- 42.

103. Ленев C.B. Вакцинопрофилактика сальмонеллёза кур/ C.B. Ленев, Н.А.Дрогалина, С.А.Бугаев// III Межд. Ветер, конгр. по птицев.10-13 апреля 2007 г., Москва.- M., 2007.-С.153-156.

104. Литвин В.Ю. Факторы патогенности бактерий: функции в окружающей среде/ В.Ю. Литвин, В.И.Пушкарева// ЖМЭИ.-1994.-№1.-С.83-87.

105. Лыско С.Б. Чувствительность микоплазм и эшерихий к антибактериальным препаратам/ С.Б.Лыско, Н.Ф.Хотько, О.А.Сунцова// Ветеринария.-2006.-№3 .-С.31-32.

106. Лыско С.Б. Профилактика и лечение респираторного микоплазма птиц/ С.Б.Лыско, А.П.Красиков// III Межд. ветер, конгр. по птицев. 10-13 апреля 2007 г., Москва.- M., 2007.-С.161-164.

107. Лыско С.Б. Микробиологический мониторинг в инкубаториях/С.Б. Лыско, О. Макарова// Птицеводство.-2009.-№8.-С.43-44.

108. Макаров В.В. Международная классификация заразных болезней животных/ В.В.Макаров//Вет. консультант.- 2003.-№19.-С5-7.

109. Макаров В.В. Роль продуктов птицеводства в токсикоинфекции сальмонеллезной этиологии/В.В.Макаров, И.Г.Серегин// Ветеринария.-1992.

110. Махмутова Л.Р. Орнитобактериоз птиц/Л.Р. Махмутова, В.В.Макаров// Ветеринария.-2007.-№12.-С.53-56.

111. Мишурнова Н.В. Профилактическая эффективность препарата СТФ-1/56 при сальмонеллёзе птиц/ Н.В. Мишурнова// Современные средства борьбы с заразными болезнями сельскохозяйственных животных и птиц: сб. науч. тр. ВНИТИП, ВНИВИП ч.2.- 1988.- С. 73-80.

112. Мишурнова Н.В. Препарат СТФ 1/56 при выращивании бройлеров/ Н.В. Мишурнова, Ф.С. Киржаев//Птицеводство.-1987.-№2.-С.40-41.

113. Мяченкова М.В. Патоморфологический метод диагностики респираторного микоплазмоза птиц/М.В. Мяченкова// Рос. вет. журн. С.-х. животн.- 2006.-№3.- С.37-38.

114. Наставление по применению вакцины сорбированной против., респираторного миоплазмоза птиц. Утв. МСХ и П РФ 16.03.1998 г. №13-42/1187.

115. Новикова А.Ф. Вакцина против респираторного микоплазмоза/ А.Ф.Новикова, И.В. Городиская, Н.Д. Придыбайло// Птицеводство .-2009.-№8.-С. 41-42.

116. Новикова О.Б. Методика выделения кампилобактерий из помёта кур/О.Б.Новикова// Материалы 54-й науч.-практ. конф. проф.-преподават. состава, научн. сотр. и аспирантов СПб ГАВМ.-СПб, 2002.-С.66-68.

117. Новикова О.Б. Усовершенствование методов контроля эпидемиологически опасных и условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от птиц: автореф. дис. канд. вет. наук/ Новикова О.Б.^ СПб,2004.-18с.

118. Орехов Д.А. Инактивированная липосомальная вакцина и гидроокись алюминиевая формолвакцина против колибактериоза птиц/ Д.А. Орехов, Ю.В. Конопатов, А.А. Сухинин // Вестн. Рос. акад. с.-х. наук, 2007.-№4.-С.77-79.

119. Орехов Д.А. Использование аминоэтиленимина при конструировании липосомальной вакцины против колибактериоза птиц/ Д.А. Орехов, Ю.В. Конопатов, А.А. Сухинин, О.В. Рыбальченко //Вет. патол., 2007.-№2.-С.66-69.

120. Паникар И.И. Промышленное птицеводство и охрана окружающей среды/ Паникар И.И., Гаркавая В.В., Севрюков Ю.И.-М.: Росагропромиздат, 1988.-80 с.

121. Панин А.Н. Пробиотики как неотъемлемый компонент рационального кормления животных и птицы/ А.Н.Панин// Птица и птицеПродукты.-2008.-ЖЗ.-С.13-16.

122. Панин А.Н. Новый препарат для лечения и профилактики сальмонеллезов птицы (применение сальмофага) / А.Н. Панин, С.В. Ленёв, Ю.А. Малахов, Э.А Светоч // Докл. РАСХН,- 2006.-№3.- С.53-56.

123. Панин А.Н. Пробиотики неотъемлемый компонент рационального кормления животных / А.Н. Панин, Н.И. Малик // Ветеринария.-2006.-№7.-С.3-6.

124. Патент РФ № 2162690. Препарат для лечения бактериальных инфекций животных и птиц, осложненных микоплазмозом.- БИПМ.-№4 от 10.02.2001г.

125. Патент РФ № 2265451. Способ получения средства для профилактики респираторного микоплазмоза птиц и способ профилактии/ Р.Н Коровин, А.Ф. Новикова, Н.Д.Придыбайло, И.В.Городиская.-БИПМ.-№ 2.

126. Петровская В.Г. Генетические основы вирулентности патогенных и условно-патогенных бактерий/ В.Г. Петровская // ЖМЭИ.-1987.-№7.- С.77-85.

127. Петровская В.Г. Энтеротоксины энтеротоксигенных Е. coli, характеристика, механизм действия и генетический контроль/ В.Г. Петровская,

128. B.М.Бондаренко // ЖМЭИ.-1990.-Ж7.- С.92-98.

129. Полоцкий Ю. Е. Сравнительный анализ эксперементальных инфекционных процессов, вызванных различными энтеропатогенными и неэнтеропатогенными кишечными палочками / Ю. Е. Полоцкий // Автореф. дис.канд. мед. наук. — Л., 1968. 22с.

130. Полоцкий Ю.Е. Патогенные свойства энтеробактерий и патогенез кишечных инфекций/ Ю.Е. Полоцкий, В.М. Бондаренко //Острые кишечные инфекции.-Л, 1986.-№Ю.-С.74-85.

131. Полоцкий Ю.Е. Защита от вирулентных сальмонелл групп В и Д после пероральной иммунизации цыплят гибридом S. typhimurium и S. dublin/ Ю.Е.Полоцкий, В.Е., Ефетов, В.М. Бондаренко и др./ ЖМЭИ.- 1992.-№ 9-10.1. C.50-57.

132. Приходько Л.Ф. Оптимальные условия культивирования Mycoplasma gallisepticum и Mycoplasma synoviae/ Л.Ф. Приходько, В.П. Левина, В.И. Диев, Т.А.Забродина, М.И.Сорокина // Тр. Федер. центра охраны здоровья животных. Владимир, 2007.- Т. 5. - С. 393-398.

133. Программа ВОЗ по надзору за сальмонеллезами/ Изоляция, идентификация и лекарственная устойчивость Salmonella. Протокол лабораторных исследований.- 3, 2002.

134. Радчук H.A. Колибактериоз птиц/ Радчук H.A.-JI., ВО Агропромиздат, 1990.-71 с.

135. Рахманина И.А. К разработке способа специфической профилактики колибактериоза птиц/ И.А.Рахманина, Г.А.Грошева// Тр. ВИЭВ, 1980.-Т.5.-С.57-69.

136. Рекомендации по кормлению сельскохозяйственной птицы.-Сергиев Посад, 1989.

137. Рекомендации по нормированию кормления сельскохозяйственной птицы/ Под общей редакцией Фисинина В. И.-Сергиев Посад, 1992.

138. Рождественская Т.Н. Гиалуронидаза P. multocida и ее игибирование: автореф. дис. .канд. вет. наук/ Рождественская Т.Н.-Тарту, 1989.- 24 с.

139. Рождественская Т.Н. Биологические свойства возбудителя псевдомоноза птиц/ Т.Н.Рождественская// Ветеринария.-2005.-№3.-С.29-30.

140. Рождественская Т.Н. Колибактериоз птиц: факторы патогенности возбудителя и профилактика болезни/ Т.Н.Рождественская// Российский вет. журн. С.-х. животные.-2008.-№1 .-С.40-42.

141. Рождественская Т.Н. Специфическая профилактика инфекции Salmonella enteritidis у птицы/ Т.Н.Рождественская // Российский вет. журн. С.-х. животные.-2009.-№1.-С.46-48.

142. Рождественская Т.Н. Микоплазмозы птиц: особенности эпизоотологии, диагностики и профилактики/ Т.Н.Рождественская, А.Н.Борисенкова, С.В.Панкратов// Российский вет. журн. С.-х. животные.-2006.-№3.-С.38-40.

143. Селивёрстов В.В. Пастереллёз животных/ В.В. Селивёрстов// Ветеринария.-2007.-№ 10.- С.3-5.

144. Сидоров М. А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов/ Сидоров М.А., Скордумов Д. И., Федотов В. Б.-М.: Колос, 1995.-319с.

145. Сидорова А. Микробная загрязненность воздуха в птичнике / А. Сидорова // Птицеводство.- 2008.- №6.- С. 8.

146. Смирнова JI. А. Способ определения энтеротоксигенности у кишечных палочек на мышах сосунках / Л. А. Смирнова, Т. Л. Авдеева , В. В. Ефремов // «Дезинтерия. Эшерихиозы. Сальмонеллёзы» Тр. Института им. Пастера. Л., 1978.- Т. 50.-С. 65-69.

147. Соколов В.Д. Резистентность патогенных микроорганизмов к химиопрепаратам и пути ее преодоления/ Новые фармакологические средства в ветеринарии// Мат. XVII Межд.межвуз. научн.-практ. конф.- СПб, 2005.-С.3-4.

148. СП 3.1.086-96; ВП 13.4. 1318 -96/ Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных: сб. сан. и вет. правил.- М.,1996.-С.50-70.

149. Степаншин Ю.Г. Бактерионосительство энтерогеморрагических эшерихий серовара 0157:Н7 у животных/ Ю.Г. Степаншин, Э.А. Светоч, Б.В. Брусланов, В.Н, Борзенков, С.Л.Каврук //Ветеринария, 2005.-№7.-С. 17-22.

150. Субботин В.В. Опыт применения пробиотического препарата лактобифидол в птицеводстве / В.В. Субботин, Н.В. Данилевская// 11 Межд. вет. конгр. по птицев., 21-23 марта 2006 г., Москва.- М.,2006.-С. 110-112.

151. Супотницкий M.B. Микроорганизмы, токсины и эпидемии. М., 2005.376 с.

152. Сухинин A.A. Ринотрахеит птиц, вызванный орнитобактериями/ A.A. Сухинин, И.В. Белкина //Новое в диагностике и профилактике болезней птиц.: мат. науч.-практ. конф. 3-4 июня 2008г. СПб-Ломоносов, 2008.-С.114-126.

153. Тараканов Б. В. Влияние микроцикола на микрофлору кишечника и продуктивность цыплят-бройлеров. / Б. В. Тараканов, Т. А.Николичева, В.Н. Никулин, Т. Е. Палагина // Ветеринария.- 2007.-№9.- С.46-50.

154. Тараканов Б. Влияние пробиотиков на выводимость гусиных яиц, сохранность и продуктивность молодняка / Б. Тараканов, В. Никулин, В. Герасименко, А. Лукьянов // Птицеводство.-2008.-№2.-С.17-18.

155. Татарчук О.П. Тилозин тартрат: рациональная антибиотикотерапия/ О.П.Татарчук// Ветеринария.-2004.-№4.-С.11-13.

156. Татарчук О. П. Использование микрогранулята тилозина в комбикормах. / О. П. Татарчук // Ветеринария.- 2005.- N 8. С. 11-12.

157. Татарчук О.П. Эффективность комбинирования тилозина и апрамицина при антибактериальной терапии/ О. П. Татарчук //Ветеринария.-2007.-№10.-С.17-18.

158. Тугаринов O.A. Средства и методы специфической профилактики,лечения и диагностики эшерихиоза животных: дис. док. вет. наук. 1. МД998,- С.416.

159. Тутов И.К. Основы биотехнологии ветеринарных препаратов: уч пособ. по спец. «Ветеринария» / Тутов И.К., Ситьков В.И.- Ставрополь, 1997. -253с.

160. Урбан В. П. Профилактика заражения цыплят в инкубатории на выводе/ В. П. Урбан, А. Н. Борисенкова, Н. Г. Пономарчук //Вестн. с.-х. наук.- 1985.-№5.-С.135-138.

161. Фисинин В.И. Промышленное птицеводство России: состояние, инновационные направления развития, вклад в продовольственнуюбезопасность/В.И. Фисинин// V Межд. ветерин. конгресс по птицев., 21-24 апреля 2009 г., Москва .-М.,2009.-С.5-26.

162. Фисинин В.И. Стратегия инновационного развития мирового и отечественного птицеводства/ В.И. Фисинин// Достижения в современном птицеводстве: исследования и инновации: мат. XVI конф. нац. отд. В НАЛ. -Сергиев Посад, 2009.-С.6-14.

163. Фисинин В.И. Птицеводство России стратегия инновационного развития/ Фисинин В.И.-М.,2009.-147с.

164. Цыганова С.В. Выделение бактериофагов против возбудителей бактериальных болезней птиц и изучение их биологических свойств: авт. дисс. . .канд. вет наук.- СПб, 2009.- 23 с.

165. Цыганова С.В. Патент РФ №2342429. Штамм бактериофага bacteriophagum salmonella IBP-1, обладающий литической активностью по отношению к S.enteritidis /С.В. Цыганова С.В., А.Е. Гончаров, О.Б. Новикова, А.Н. Борисенкова // БИПМ.-2008.-№36.

166. Черкасский Б.Л. Кампилобактериоз: руководство по эпидемиологии/ Черкасский Б.Л., Минаев В.И.- М.:Медицина, 1993, С.51-60.

167. Черняева Т. Профилактика микоплазмозов птицы/ Т. Черняева, В. Ирза, М. Волков, А. Колотилов // Птицеводство.- 2007.- N 8. С. 35.

168. Шмельков Е.В. Антигенная активность вакцины против инфекционных болезней свиней при включении в ее состав адъювантов/ Е.В. Шмельков, Ю.Н. Федоров, О.А.Верховский// С-х. биология.-2002.-№4.- С.101-108.

169. Шуляк Б.Ф. Руководство по бактериальным инфекциям собак.—М: Олита, 2003.

170. Эль Ганан М.Л. Токсигенность и патогенность эшерихий/ М.Л. Ганан, М.А. Сидоров //Ветеринария.-1986.-№2.-С.66-67.

171. Яковлев С.В. Антибиотикорезистенгтность в стационаре: контроли:р-уем ли мы ситуацию?/ С.В. Яковлев, Д.Н.Проценко, Т.В.Шахова и др.// Ангиби0т и химиотерап. -2010. -Т. 5 5 ,№ 1 -2. -С.50-58.

172. Яковлев С.С. Эпизоотическая ситуация в птицеводстве России/ q Яковлев //Современные научные разработки и передовые технологии .для промышленного птицеводства: мат. юбил. конф. 15 лет. НПП «Авивак».- Crjg 2005.-С.9-12.

173. Ярцев М.Я. Пастереллёзы животных и птиц: специфическая профилактика, лечение и методы борьбы/ Ярцев М.Я. и др.. -М., 1989.-57 с

174. Abd El-Hakim A.S. Use of organic acids herbs and their combination improve the utilization of commercial low protein broiler diets/ A. S. Abd El-Hakim G. Cherian, M.N. Ali// Intern. J. Poultry Sci.-2009.-Vol.8, N.1.-P.14-20.

175. Abdul Rahman A1 - Ankari. Avian pneumovirus infection in broiler chicks inoculated with Escherichia coli in different time intervals/ Al-Ankari Abdul-Rahman, J.M. Bradbury, C. J. Naylor et al.// Avian Pathol.-2001 .- Vol. 30, Js|b 2 P. 257-267.

176. Alvarado I. R. Flock vaccination reduces rick of Salmonella enteritidis infection/1. R. Alvardo//Egg. Industry.-2009.-Vol.l 14, №l.-P.6-9.

177. Anderson G., Pseudomonas in hstching eggs/ G. Anderson, N. Epps // Canad. Poult. Rev. -1974 .- Vol.98, N8.- P. 18-29.

178. Anon. Joint Expert Advisory Comm. On Antibiotic Resistance. The use of antibiotics in food producing animals and humans. Commonwealth Dep. Health and Aged Care and Commonwealth Dep. Agricult, Fisheries and Forestry, London, UK, 1999.

179. Fucouturier J., Ganne V., 2002/ Адъюванты для ветеринарных вакцин/ www/sepic.com., P/2089/GB/01 Barnes H.J. Colibacillosis./ Barnes H.J., Gross W.B.- In: Diseases of Poultry, 10th'Ed. B.W. Calnek.-1997.

180. Baurhoo B. Purified cell wall of Saccharomyces cerevisiae increases protection against intestinal pathogenic in broiler chickens/ B. Baurhoo, F. Goldflus, X. Zhao// Intern. J. Poultry Sci.-2009.-Vol.55, N.2.-P.133-137.

181. Beaumont C. Selection for increased resistance to Salmonella carrier-state/C. Beaumont, H. Chapuis, N. Sellier, F. Calenge, P. Zongo, P. Velge, J. Protais// Worlds Poultry Sci. J.-2010.-Vol. 66, N 2.- Р.251-259/.

182. Berkowitz Frank E. Bacterial exotoxins: How they work /Berkowitz Frank E. //Pediat. Infect. Disease. J.-1989.-Vol.8, N1.-P.42-47.

183. Bettelheim K.A. Escherichia coli in domestic animals and humans/ Bettelheim K.A. In: Gyles C.L. (ed). CAB International.- UK, 1994.- P.3-30.

184. Bhakdi S. Staphylococcal alpha-toxin, streptolysin-O and Escherichia coli hemolisin: prototypes of pore-forming bacterial cytolisins/S. Bhakdi, H. Bayley, A. Valeva et al. //Arch. Microbiol.- 1996.- Vol. 165, №1.- P.73-79.

185. Blanco J.E. Serotypes of Escherichia coli isolated from septicaemic chickens in Galicia (northwest Spain)/ J.E. Blanco , M. Blanco, A. Mora et al //Vet. Microbiol. 1998.-Vol.61, №.-P.229-235.

186. Bradbury J.M. Avian mycoplasmas/ Bradbury J.M. In: Jordan F. et al (Eds.). Poultry Diseases, 5th ED., W.B. Saunders.- London, UK, 2001.- P. 178-193.

187. Brogden K.A. Comparison of Pasteurella multocida serotyping systems/ K.A. Brogden, R.A. Packer//Am. J. Vet. Res.- 1979.-Vol. 40, N.- P.1332-1335.

188. Brogden K.A. A new serotype of Pasteurella multocida associated with fowl cholera/ Brogden K.A., K.R Rhoades, K.L. Heddleston // 1978.

189. Bumstead N. Resistance to Salmonella gallinarum, S. pulloram ancj g enteritidis in inbred lines of chickens| N.Bumstad, P. Barrow|| Avian E>is.-X993 -Vol.37, N 1.-P.189-193.

190. Carpenter T.E. Vaccination with F-strain Mycoplasma gallisepticum. to reduce production losses in layer chickens/ T.E. Carpenter, E.T. Mallinson, K.F. Ivliller

191. Avian Dis.- 1981.-Vol. 25, №.-P.404-409.

192. Cason J.A. Location of Salmonella typhimurium during incubation and hatching of inoculated eggs/ J.A. Cason, J.S.Bajley, N.A. Cox// Poultry Sci.-l.993 -Vol 72, N11 .-P. 2064-2068.

193. Cassels F.J. Colonization factors of diarrheagenic E.coli and their intestinal receptors /F.J. Cassels, M.K. Wolf// J. Ind. Microbiol.-1995.-Vol.l5,N 3.-P.214-226.

194. Cavanagh D. Avian Pneumovirus and Rhino tracheitis /D. Cavanagh// Poultry Intern.-1999.-Vol. 38, №4.- P. 32-36.

195. Cerda R.O. In vitro antibiotic susceptibility of field isolates of Mycoplasma synoviae in Argentina /R. O. Cerda, G.I. Giacoboni, J.A. Xavier, P.L. Sansalone M.F. Landoni // Avian Dis.- 2002,- Vol.46, N 1. P. 215-218.

196. Chappell L. The immunobiology of avian systemic salmonellosis/ L. Chappell, P. Kaiser, P. Barrow, C. Johnston, P. Wigley// Veter. Immunol.& Immunopathol.-2009.-Vol. 128, N1-3, P.53-59.

197. Contreras M. Serological responses in birds vaccinated with ts-11/ M. Contreras, R. Ochoa, F. Rojo, R. Fernandez // Poultry Intern.- 2003.-Vol.42 N5.-P.33-36

198. Cook J.K.A. In vitro and in vivo studies in chicken and turkeys on strains of turkey rhino tracheitis virus isolated from the two species/ J. K.A. Cook, S. Kinloch, M.M. Elias // Avian Pathol.-1993.- Vol. 22, № .- P.157-170.

199. Costerton J.W. Bacterial biofilms: a common cause of persistent infections/

200. J.W.Costerton, P.S. Stewart, E.P. Greenberg// Science.-1999.-Vol. 284, N.1. P.1318-1332.

201. De Brito B.G. Virulence factors and clonal relationships among E.coli strains isolated from broiler chickens with cellulitis/ B.G. De Brito, L.C. J. Gaziri, M.C. Vidotto // Inf. & Immun.- 2003.- Vol.71,№7,- P. 4175-4177.

202. Delden C.V. Cell-to-cell signaling and Pseudomonas aeruginosa infections/ C.V. Delden, B.H. Iglewski//Emerging Inf. Dis.-1998.-Vol., №4.- P.551.

203. Dho-Moulin M. Avian pathogenic E. coli (APEC)/ M. Dho-Moulin, J.M. Fairbrother// Vet. Res .- 1999.- Vol. 30,№. P.299-316.

204. EC (2003b) Regulation (EC) No 2160/2003 of the European Parliament and the Council of 17. November 2003 on the control of salmonella and other specified food borne pathogens// Official Journal of the European Commision L.- N 325.-P. 1-15.

205. Eyigor A. Rapid detection of Salmonella from poultry by real-time polymerase chain reaction with fluorescent hybridization probes/ A. Eyigor, K.T. Carli //Avian Dis.-2003.-Vol.47, N2.-P.380-386.

206. Farber J.M. An introduction tu the howsand whys of molecular typing/ J.M. Farber //J.of Food Protec.-1996.-Vol.59.-P. 1091 -1101.

207. Feberwee A., a. The effect of vaccination with a bacterin on the horizontal transmission of Mycoplasma gallisepticum/ A. Feberwee, T. Banniseht-Wysmuller, J.C.M. Vernooij, F.LJ. Gielkens, J.A. Stegeman//Avian Pathol.- 2006.-Vol.35, N1.-P.35-37.

208. Feberwee A. Seroprevalence of Mycoplasma synoviae in Dutch commercial poultry farms / A. Feberwee, T.S. de Vries, W.J. Landman // Avian Pathol.-2008.-Vol.37, N6.-P.629-633.

209. Feberwee A. A novel eggshell pathology induced by Mycoplasma synoviae/ A. Feberwee, W. Landman// World Poultry.-2008.-Vol. 24, №7.- P.22-23.

210. Feberwee A. Induction of eggshell apex abnormalities by Mycoplasma synoviae: field and experimental studies /A. Feberwee, J.J. de Wit, W.J. Landman // Avian Pathol.-2009.-Vol.38, N2.-P.187.

211. Ganapathy Kannan. Avian metapneumovirus: diagnosis& prevention (2)// World Poultry.- 2001.- Vol 23,№5.-P.35-37.

212. Gast R.K. Effect of prior passage through layning hens on invasion of reproductive organs by Salmonella enteritidis / R.K.Gast, J. Guard-Bouldin, R. Guraya, P.S. Holt//Intern. J. ofPoultry Sci.-2009 .-Vol.8, N2.-P.116-121.

213. Gharaibeh S. Field evaluation of maternal antibody transfer to a group of pathogens in meat-type chickens / S. Gharaibeh, K. Mahmoud, M. Al-Natour // Poultry Sci.-2008.-Vol.87, N8.-P.1550-1555.

214. Gingrich E. Health of U.S. egg flocks./ E. Gingrich //Egg Industry.- 2009.-Vol.114, N2.-P.4.

215. Ginns C.A. Development and application of aerosol challenge method for reproduction of avian colibacillosis/ C,A.Gins, G.F.Brovning, M.L.Benham, K.G. Whithear//Avian Pathol.- 1998.- Vol. 27, .P. 511-523.

216. Giron J.A. An inducible bundle-forming pilus of enteropathogenic Escherichia coli/ J.A. Giron, A.S. Ho, G.K. Schoolink // Science. -1991.- Vol.254, №5032.-P.710-713.

217. Glisson J.R. The effect of oil-emulsion vaccines of the occurrence of nonspecific plate agglutination reactions for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae/ J. R. Glisson, J. F. Dawe, S.H. Kleven//Avian Dis.-1984.-Vol.28, N2.-P.397-405.

218. Gomez-Lus R. Evolution of bacterial resistance to antibiotics during the last decades/R. Gomez-Lus//Int. Microbiol.-1998.-Vol., № 1.-P.279-284.

219. Goren E. Reduction of salmonella infection of broilers by spray application of intestinal microflora: a longitudinal study/ E. Goren, W.A. Jong, P. De Doornenbal et al.// Vtter. Q.-1988.-Vol.l0, N4.-P.249-255.

220. Gyimah I.E. Immunogenicity of an E. coli multivalentpilis Vaccine in chickens/ I.E. Gyimah, B. Panigrahy, Y.D. Williams// Avian Dis.-1986.- Vol. 30, N4.- P.687-689.

221. Gyimah Q.E. Immunogenecity of an oilemilsified E. colibacterin against heterolog/ Q. E. Gyimah, B. Panigrahy, C.F. Hall, Y.D. Williams // Avian Dis.-1985.-Vol. 29, N2.-P.540-545.

222. Harming I. Campylobacter jejune as a primary colonizing biofilm former/ I. Hanning, M. Slavik // Intern. J. Poultry Sci.-2008.-Vol.8.-Nl.-P.l-6.

223. Heddleston, K.L. Properties of tree endotoxin from Pasteurella multocida/ K.L. Heddleston, P.A. Rebers. //Am. J. Vet. Res 1975.- Vol. 36, N.-P.573-574.

224. Hess M. Interlaboratory comparison of ability to detect nucleic acid of Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae by polymerase chain reaction/ M.Hess, C.Neubauer, R.Hacki// Avian Pathol.-2007.- Vol.36, №2.-P.127-133.

225. Jordan F.T. Mycoplasma induced arthritis in poultry/ F.T. Jordan// Isr. J. Med. Sci.-1981/-Vol. 17, №7.-P. 625 - 635.

226. Kang M. S. Virulence of recent isolates of Mycoplasma synoviae in turkeys / M. S. Kang, P. Gazdzinski, S. H. Kleven // Avian Dis.- 2002.- Vol.46, N 1. P. 102-110.

227. Karaca K. Efficacy of commercial Mycoplasma gallisepticum bactrirx Qvjq. Bac) in preventing airsac lessionsin chickens/ K. Karaca, K.M. Lam// Avian 1987.- Vol.31, N2.- P.202-203.

228. Karakulska J. Resistance to tetracyclines of pathogenic Escherichia col' strains/Karakulska J//Advances in agr. Sci.Agr. Univ. of Szczecin.- Szc2;ec-n 2006.-N10.-P.51-58.

229. Kaukas A. The effect of growth-promoting antibiotics on the feacal enterococci of healthy young chickens/ A. Rauras, M. Hinton, A.H. Linton// J app| Bacterid.-1988.-Vol. 64, №l.-P.57-64.

230. Keller L. S. enteritidis colonization of the reproductive tract fresh laid. eggs chickens/ L. Keller, C. Benson //Infect. & Immun. -1995.-Vol.63,2249.

231. Kempf I. Evaluation of two commercial ensyme-linked immunosorbent assay kits for the detection of Mycoplasma gallisepticum antibodies/ I. Kempf, F-Gesbert M.Guittet, G. Bennejean, L.Stipkovits// Avian Pathol.- 1994/- Vol. 23, №>2.- j>338.

232. Kempf I. DNA amplification methods for diagnosis and epidemiologic investigations of avian mycoplasmosis/ I. Kempf// Avian Pathol.- 1998.-Vol 27 N1.- P.7-14.

233. Khan M.I. Observations on comvercial layers vaccinated with Mycoplasma gallisepticum (MG) bacterin on a multiple-age site endemically infect with MG/ M.I. Kahn, D. A. McMartin, Y. Yamamoto, H. B. Ortmayer// Avian Dis.-19§g -Vol 30, N2.-P.309-312.

234. Kleven S. H. Mycoplasma synoviae Infection/ Kleven S.H.- Diseases of Poultry.-10th ed. Ames ,Iowa, 1997.-220-228.

235. Kleven S.H. Mycoplasma in the aetiology of multifactorial respiratory disease/ S.H. Kleven// Poultry Sci.-1998.-Vol.77, N6.-P.1146-1149.

236. Kleven S.H. Control of avian mycoplasma infections in commercial poultry/ S.H. Kleven // Avian Dis.-2008.-Vol.52.-N3.-P.367-374.

237. Köhn S. Prevalence of Mycoplasmas in commercial layer flocks during laying period/ S. Köhn, J. Spergser, C. Ahlers, M.Voss, T. Bartels, R. Rosengarten M.E. Krautwald -Junghanns// Berl. -Munch. Tierarztl. Wochenschr.- 2009.-Jg. 122, N5-6.-Z.186-192.

238. Kolasa A. Influence of the therapy of laying hens with selected antibiotics on the presence of Salmonella enteritidis in the contents of the eggs/ A.Kolasa, J. Rzedzicki, M. Skowron // Med. Weter.-2007.-Vol.63, N10.-P.1168-1171.

239. Lam K.M. Mycoplasma gallisepticum induced alterations in chicken red blood cells/K.M. Lam // Avian Dis.- 2003.- Vol.47, N2.-P.485-488.

240. Lauerman L.H. Development and application of polymerase chain reactionassay for Mycoplasma synoviae/ L.H.Lauerman, R.J. Hoerr, A.R.Sharpton A.R.

241. Avian Dis.-1993.-Vol.37, N.-P.829-834.

242. Ley D.H. Transmissibility of live Mycoplasma gallisepticum vaccine strains ts-11 and 6/85 from vaccinated layer pullets to sentinel poultry/ D. H. Ley, J. McLaren, A. M. Milles// Avian Dis.-1997.-Vol. 41, №2.-P.187-194.

243. Ley D.H. Mycoplasma gallisepticum infection/ Ley D.H., Yoder H.W. Jr.- 10th ed. Ames, Iowa, 1997.P. 194-207.

244. Ley D.H. Mycoplasma gallisepticum Infection/ Ley D.H.- In: Salt Y. et al. (Eds.). Disease of Poultry, 1 th Ed., Iowa State Univ. Press, USA, 2001.-P. 722-744.

245. Mallinson E.T. In vivo bioassay and supplemental serological technigues for the detection of mycoplasma in suspect breeding chickens/ E.T. Mallinson , R.J. Eckroade, S.H. Kleven//Avian Dis.- 1981.- Vol. 25, №.-P. 1077-1082

246. Manfreda G. Campylobacter and Salmonella in poultry and poultry products: hows and whys of molecular typing/ G. Manfreda, A.De Cesare // World Poultry Sci. J .- 2005.-Vol.61, June, P.185-197.

247. Maniloff J. Mycoplasmas: molecular biology and pathogenesis/ Maniloff J., McElhaney R., Finch L. Washington: Am. Society for Microbiology, 1992.-609 p.

248. Marois C. Detection on Mycoplasma synoviae in poultry environment samples by culture and polymerase chain reaction/ C.Marois, F.Oufour-Gesbert, I.Kempf// Veter. Microbiol.- 2000.- Vol.73, N 4. P. 311-318.

249. Mazzeretti R. La pseudomonosi del polio. Osservazioni e congiderazioni pratiche/ R. Mazzeretti// Zooprofilassi.-1972.- Vol.27, N 5-6.- P. 191-198.

250. Mellata M. Role of virulence factors in resistance of avian pathogenic E.coli to serum and in pathogenicity/ M.Mellata, M.Dho-Moulin, C.M.Dozois et al. //Inf & Immun.- 2003.-Vol.71,N 1.- P.536-54.

251. Messens W. Eggshell penetration by Salmonella: a review/ W. Messens, K.Grijspeerdt, L. Herman // World Poult. Sci. J.-2005.-Vol.61, N1.-P.71-85.

252. Methner U. Intestinal colonization-inhibition and virulence of Salmonella phoP, rpoS and ompC deletion mutants in chickens/ U. Methner, P.A.Barrow, D. Gregorova, I. Rychlik//Veter. Microbiol.-2004.-Vol.98, N1.- P. 37-43.

253. Nafie E.K. 1.Studies on E. coli in poultry. 2. Preparations and ewaluation of different types of vaccines / E.K.Nafie, M. Rehawy, A.A.Ybrehin// Assiut veter. med.-1989.-Vol.21 (41), N 1.-P.56-60.

254. Nielsen J.R. Production of toxin in strains previously classified as Pasteurella multocida/J. R. Nielsen, M. Bisgard, K. B. Pedersen// Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. Sect. B.- 1986 .- Vol. 94,№ 2.-P. 203-204.

255. Nighot P.K. Physiopathology of avian respiratory diseass /P. K.Nighot, G.N. Kolte, G.R. Ghalsasi // Poultry intern. 2002.-Vol 41, N8.-P.24,26,28.

256. Question EFSA-Q-2004-079. Opinion of the Scientific Panel on Biological Hazards on the reguest from the Commission related to the use of antimicrobials for the control of Salmonella in poultry.

257. Qureshi A. A. Microbiological monitoring hatching eggs and chicken / A. A. Qureshi // Poultry intern. 1993. -Vol. 32, № 1. - P. 52-56.

258. Ozbey G. Salmonella spp. isolation from chicken samples and identification by polymerase chain reaction. /G.Ozbey, H.B.Ertas// Bulg.J.Veter.Med.-2006.-Vol.9, N1.-P.67-73.

259. Popoff M.Y. Supplement 2001 (no.45) to the Kauffinann-White scheme/ M.J. Popoff, J.Bockemuhl, L.L.Gheesling // Res. Microbiol.- 2003.- Vol.154, №2.-P.173-174.

260. Pourbakhsh S.A. Virulence mechanisms of avian fimbriated Escherichia coli in experimentally inoculated chickens/ S.A.Pourbakhsh, M.Boulianne, B. Martineau-Doize, J.M: Fairbrother // Vet. Microbiol.- 1997 .-Vol.58, №2.-P.195-213.

261. Pourbakhsh S.A. Localization of the in vivo expression of P and F1 fimbriae in chickens experimentally inoculated with pathogenic Escherichia coli /

262. S.A.Pourbakhsh, M. Dho-Moulin, A. Bree et al. // Microb. Pathog.- 1997.- Vol 22, N.-P.331-341.

263. Pratt L.A. Genetic analysis of Escherichia coli biofilm formation: roles of flagella, motility, chemotaxis and type I pili/ L.A. Pratt , R.Kolter // Mol. Microbiol., 1998.-Vol. 30, №2.-P. 285-293.

264. Protais J. Changes in Salmonella enteritidis contamination in two layer lines vaccinated during the rearing period/ J. Protais, B. Nagard, E. Boscher, S. Queguiner, C. Beaumont, G. Salvat// British Poultry Sci.-2003.-Vol.44, N.P.827-828.

265. Provence D.L. Isolation and characterization of a gene in volved in hemagglutination by an avian pathogenic E.coli strain / D.L.Provence, III R. Curtiss // Inf. Immun .- 1994.- Vol. 62.- №.p. 1369-1380.

266. Qureshi A.A. Mikrobiological monitoring hatching eggs and chicka / A.A. Quercshi // Poultry Intern.-1993.-Vol.32, N 1.-P.52-56.

267. Rantala M. Prevention of the grows of Salmonella infantis in chicks by the flora of the alimentary tract of chicken/ M. Rantala, E. Nurmi, / British Poultry Sci.-1973.-Vol. 14, N.-P. 627-630.

268. Rasheed J.K. Two precursors of the heat-stable enterotoxin of Escherichia coli: evidence of extracellular processing / J.K. Rasheed, L. M.Guzman-Verduzco, Y.M. Kupersztoch //Med. Microbiol.-1990.- Vol.4, N2.-P.265-273.

269. Raviv Z. The development of diagnostic real-time TaqMan PCRs for the four pathogenic avian mycoplasmas / Z.Raviv, S.H. Kleven// Avian Dis.-2009.-Vol. 53.-N1.-P.103-107.

270. Rehman H. Influence of fermentable carbohydrates on the intestinal bacteria and entheropathogenes in broilers / H.Rehman, W. Vahjen, A. Kohl-Parisini, A. Iyaz J. Zentek//World Poultry Sci. J.-2009-Vol.65.-Nl.-P.79-94.

271. Rhoades, K.R.,a Capsular groups of Pasteurella multocida isolated from avian hosts /K. R. Rhoades, R.B. Rimler//Avian Dis.-1987.- Vol. 31.- P.895-898.

272. Rhoades, K.R.,b Effects of Pasteurella multocida endotoxins on turkey poults /Rhoades, K.R., R.B. Rimler // Avian Dis.-1987.-Vol. 31.- P.523-526.

273. Rhoades, K.R. Toxicity and virulence of capcular serogroup D Pasteurella multocida strains isolate /K.R. Rhoades, R.B. Rimler //1988.

274. Russell S. Campylobacter, the next challenge/ S. Russell // Poultry TJSA.-2008.-Vol.9.-N13.-P.24, 26, 28.

275. Sadasivan P.S. Aeruginocine typing and antibiotic sensesetiv of Pseudomonas aeruginosa of poultry origin/ P.S.Sadasivan, V.A. Srinivasan// Avian Dis.-1977. Vol.21, N1.-P.136-138.

276. Saleha A.A. Campylobacter jejuni in poultry production and processing in relation to public health /A.A. Salega, G.C. Mead, A.L. Ibrahim //Worlds Poultry Sei.-1998.-Vol.54,N1.- P.49-58.

277. Salvage. B. Moving forward on food safety/ B. Salvage// Meat & Poultry.-2008.-Vol.54.-N9.-P. 10.

278. Schmitt C.K. Bacterial Toxins: Friends or Fues? / C.K.Schmitt, K.C. Meysick A. O'Brien //Emerging infect. Dis.-1999.-Vol.5, N2.-P.224-234.

279. Shane S. Egg production: what does Salmonella infection cost? / S. Shane// Poultry Intern.-2008.-Vol. 47, N11.- P.32-35.

280. Shane S. Impact of E.coli on profitable egg production/ S. Shane // Egg industry.- 2009,-Vol.l 14, N2.-P.8-12.

281. Sixma T. Redefined structure of Escherichia coli heat-labile enterotoxin, a close relative of cholera toxin/ T.Sixma, K. Kalic, B. van Zanten et al. // J. Mol. Biol.-1993.-Vol.230, N7.-P.890-918.

282. Smith K. Influence of tigecycline on expression of virulence factors in biofilm associated cells of methicillin resistant Staphilococcus/ K. Smith, K.A.Gould, G.

283. Ramage et al.// Antimicrobial agents and chemotherapy.-2010.-Vol.54,Nl.-P.380-387.

284. Snoeyebos G.H. Salmonellosis/ Snoeyebos G. H., Williams J.E.// In:Diseases of Poultry, 9. Edition, Iowa State University Press.- 1995.- P.72-144.

285. Stone H.D. Newcastle disease oil-emulsion vaccines prepared with animal, vegetable and synthetic oils/ H.D. Stone//Avian Dis.- 1997.- Vol.41.- P.591-597.

286. Van den Bogaard A.E. Antibiotic usage in animals impact on bacterial resistance and public health/ A.E.Van den Bogaard, E.E. Stobberingh// Drugs.-1999.-Vol.58.-P. 589-607.

287. Van Hemert S. Gene expression responses to a Salmonella infection in the chicken intestine differ between lines/ S. Van Hemert, A.J.W. Hoekman, M.A. Smits, J.M.J. Rebel // Vet.Immunol. & Immunopathol.-2006.-Vol. 114, N 3/4.-P.247-258.

288. UK. Salmonella National Control Programme approarch/ Poultry Intern.-2008.-Vol. 47, N8.- P.10, 12.

289. Van Veen L. Do we know real impact of Ornithobacterium rinotracheale infections ? / L. van Veen// Poultry Intern.-2003.-Vol 42, №5.- P.20-23.

290. Vasserman Y. Genetic detoxification and adjuvant-activity retention of Escherichia coli enterotoxin LT / Y. Vasserman, J.Pitcovski J. // Avian Pathol.-2006.-Vol.35, N2.- P.134-140.

291. Yamanaka M. Local pathological reactions and immune response of chicken to ISA 70 and other adjuvants containing Newcastle disease virus antigen / M. Yamanaka, T. Okabe, M. Nakai, N. Esoto// Avian Dis.- 1993.- Vol.37.- P.459-466.

292. YoderH.W. Evaluationof inactivated Mycoplasma gallisepticum oil-emulsion bacterins for protection against airsacculitis in broilers/ H.W.Yoder, Jr. S.R. Hopkins, B.W. Mitchell// Avian Dis.-1984.-Vol.28, N2.-P.224-234/

293. Zhang-Barber L. Vaccination for control of Salmonella in Poultry// L. Zhang-Barber, A. K. Turne, P. A Barrow// Vaccine.-2010.-Vol. 17, N.-P.2358-2545