Диссертации » Биологические науки » Биотехнология

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Совершенствование технологии приготовления эритроцитарных иммунодиагностикумов для РПГА на основе клеточных фракций бифидобактерий с использованием синтетических полимеров
ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Автореферат диссертации по теме "Совершенствование технологии приготовления эритроцитарных иммунодиагностикумов для РПГА на основе клеточных фракций бифидобактерий с использованием синтетических полимеров"

На правах рукописи

ЮРИНОВА ГАЛИНА ВАЛЕРЬЕВНА

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНЫХ ИММУНОДИАГНОСТИКУМОВ ДЛЯ РИГА НА

ОСНОВЕ КЛЕТОЧНЫХ ФРАКЦИЙ БИФИДОБАКТЕРИЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПОЛИМЕРОВ

03.00.23- биотехнология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Улан-Удэ - 2005

Работа выполнена в Иркутском Государственном Университете, институте эпидемиологии и микробиологии Государственного учреждения Научный центр медицинской экологии Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения РАМН

Научный руководитель: академик РАМН, д-р мед. наук, проф.

В. И. Злобин

Официальные оппоненты: д-р биол. наук, проф. В. К. Войников;

канд. биол. наук А. В. Битуева

Ведущая организация: Иркутский государственный медицинский университет

Защита диссертации состоится " ^луы 2005 г. в ¿О ч на заседании регионального диссертационного совета ДМ 212.039.02 при Восточно-Сибирском государственном технологическом университете по адресу: 670013, Республика Бурятия, г. Улан- Удэ, ул. Ключевская, 40а.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВосточноСибирского государственного технологического университета

Автореферат разослан •'<¿7" 2005 г.

юнального

гта, „ илй/»^'

Ученый секретарь Регионального диссертационного совета, д-р техн. наук, проф. Л? Н. И. Хамнаева

тьъ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Последние десятилетия характеризуются возрастающим вниманием исследователей к микроорганизмам, обитающим в организме человека и животных, и их роли в поддержании здоровья и возникновении болезней. Важное значение симбиотической микрофлоры для организма человека к настоящему времени является общепризнанным и базируется на результатах многочисленных исследований (Гончарова Г.И., 1986; Дубинин A.B., Бабин В.Н., Раевский П.М., 1991; Шендеров Б.А., 1998; Перетц Л.Г.,1955). Вместе с тем, молекулярные механизмы кооперативного взаимодействия макроорганизма и населяющих его микроорганизмов, обеспечивающие стабильность кишечной экосистемы, приживление аутохтонной и элиминацию аллохтонной микрофлоры, до настоящего времени окончательно не выяснены.

Постоянство "микрофлоры, микробиологический фенотип, присущий каждому человеку, является показателем иммунологической реактивности организма и одним из факторов естественного иммунитета (Пи-негин Б.В. с соавт., 1984; Гребнева А.Л., Мягкова А.Н., 1994; Лыкова Е.А. с соавт., 1996; Захарченко М.П., 2003). Показатели специфической реактивности к условно-патогенным и непатогенным бактериям служат важным критерием риска развития устойчивого дисбактериоза. Для определения иммунологической реактивности организма необходимо иметь диагностические тест системы, при выборе которых существенное значение имеет их чувствительность и специфичность, а также и экономический фактор. Поэтому разработка технологических подходов к выделению функционально активных антигенов, создание на их основе искусственных антигенов и применение новых коньюгирующих компонентов на основе синтетических полимеров является актуальной при создании и стандартизации недорогих тест систем, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью.

Цель исследования. Изучить физико-химические и иммунологические свойства клеточных фракций бифидобактерий; на основе полученных клеточных фракций сконструировать иммунодиагностикумы для определения антимикробных антител в РПГА с использованием синтетических полимеров.

Задачи исследования:

- изучить влияние антибактериальных (естественных) антител и отваров лекарственных трав на цитоадгезию бифидобактерий in vitro;

- выявить оптимальные условия получения и использования комплексов сополимера АК- ВИ с биомолекулами клеточных фракций бифи-добактерий;

- сконструировать иммунодиагностикумы на основе антигенов полученных клеточных фракций бифидобактерий для определения антимикробных антител в РПГА с использованием синтетических полимеров в качестве коньюгирующих компонентов.

Научная новизна. Установлено, что естественные антитела против антигенов бифидобактерий могут иметь патогенетическое значение для кишечного микробиоценоза.

Впервые продемонстрирована эффективность использования сополимера акриловой кислоты и винилимидазола (АК- ВИ) в комплексообра-зовании с биомолекулами клеточных фракций бифидобактерий.

Впервые показано, что полученный в экспериментальных условиях искусственный антиген при вакцинации способен давать примирующий эффект в существенно более низких дозах, чем при введении тех же компонентов в виде смеси, что создает перспективы его использования в медицинских технологиях для получения высокотитражных сывороток.

Усовершенствована технология получения эритроцитарных имму-нодиагностикумов на основе выделенных функционально активных антигенов бифидобактерий с использованием синтеических полимеров в качестве коньюгирующих компонентов для определения уровня иммунореак-тивности организма. Показано, что сконструированные эритроцитарные иммунодиагностикумы обладают высокой специфичностью, чувствительностью и стабильностью при хранении.

Практическая значимость работы. Разработанные технологические подходы по выделению функционально активных антигенов клеточных фракций бифидобактерий и созданию искусственного антигена позволяют использовать их в биомедицинских технологиях при конструировании эритроцитарных иммунодиагностикумов и получении высокотитражных сывороток. Сравнительные результаты испытаний подтвердили диагностическую эффективность созданных иммунодиагностикумов с использованием синтетических полимеров в качестве коньюгирующих компонентов.

Результаты работы включены в материалы учебных занятий по микробиологии, иммунонологии и биотехнологии на биолого- почвенном факультете Иркутского государственного университета. Усовершенствованная технология приготовления эритроцитарных иммунодиагностику-мов используется в практической деятельности института эпидемиологии и микробиологии Государственного учреждения Научный центр медицинской экологии Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения РАМН (акты внедрения приложены к диссертации)

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на научной конференции студентов и молодых ученых «Экология Южной Сибири» (Абакан, 2001); научной конференции «Техногенное загрязнение и инфекционная патология» (Иркутск, 2001); VIII Съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2002); Международной научно-практической конференции «Пробиотиче-ские микроорганизмы, современное состояние вопроса и перспективы использования» (Москва. 2002); Всероссийской научно- практической конференции «Развитие физико- химической биологии и биотехнологии на современном этапе» (Иркутск, 2003); Межрегиональной научно- практической конференции «Биология микроорганизмов и их научно- практическое использование» (Иркутск, 2004); Международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания» (Москва, 2004).

Публикации. По материалам исследования опубликовано 14 печатных работ.

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 140 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов, списка литературы. Работа иллюстрирована 9 рисунками и 15 таблицами. Список литературы включает 250 источников, в том числе 100 зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Приведен анализ отечественной и иностранной научной литературы по взаимоотношениям в системе «макроорганизм-микробиота». Проанализировано влияние различных факторов на адгезию микроорганизмов. Описано действие синтетических полимерных адъювантов на имуноге-нез. Показана иммуномодулирующая активность комплексов антигенов с синтетическими полимерами. Описаны способы получения диагностических систем на основе эритроцитов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объекты исследований. - Клеточные фракции бифидобактерий (штамм Bifidobacterium bifidum 1, полученный из коммерческого препарата Bifidobacterium siccum, производства «Ланафарм», г. Москва), полученные методом ультразвуковой дезинтеграции с последующим дифференциальным центрифугированием;

- штамм Bifidobacterium bifidum I., полученный из сухого коммерческого препарата "Bifidobacterium siccum" , сер. 0518, выпуска 1998 г., производства ФГУП "Аллерген", г. Ставрополь;

- синтетические полимеры: сополимер акриловой кислоты и вини-лимидазола (АК- ВИ), поливинилимидазол (ПВИ), сополимер 1-винил-4,5,6,7-тетрагидроиндола, метакриловой кислоты и метилметакрилата (МАК- ВТГИ), полиметакриловая кислота (ПМАК).

Адгезивный процесс бифидобактерий изучали по методике Брилис В.И. и соавт.(1986).

Количественное определение белка в клеточных фракциях бифидобактерий определяли по методу Лоури (1951).

Белки клеточных фракций анализировали с помощью субъединичного электрофореза в щелочной буферной системе по Лэммли (1970).

Аминокислотный анализ белков клеточных фракций бифидобактерий проводился в Na+ -цикле на аминокислотном анализаторе ААА-881 (Чехословакия).

Спектральный анализ продуктов взаимодействия биомолекул клеточных фракций с сополимером АК- ВИ проводили на спектрометре Bruker IFS25, ИК- спектры снимали в таблетках с КВг.

Иммунологические исследования были проведены на 12 кроликах породы "Шиншилла" и 42 беспородных мышах самцах.

Определение содержания антител к общим антигенам бифидобак-терий и антигенам клеточных фракций проводили в реакции пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА).

Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета программ «Excel» и "Statgrafics". Выводы сделаны при вероятности безошибочного прогноза Р>0,95.

Схема экспериментальных исследований представлена на рисунке 1.

Рис. 1. Схема экспериментальных исследований

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Изучение влияния экзогенных и эндогенных факторов на адгезию бифидобактерий in vitro

Изучение влияния естественных антител на цитоадгезию бифидобактерий показало, что как детские, так и взрослые сыворотки с антителами против бифидобактерий проявили антиадгезивный эффект (табл. 1).

Таблица 1

Показатели адгезии бифидобактерий после их преинкубации с сыворотками разных групп населения

Режим экспозиции, мин. Средний показатель адгезии (СПА)

Бифидобактерии +сыворотка детей с отсутствием антител Бифидобактерии +сыворотка детей с наличием антител Бифидобактерии + сыворотка взрослых с отсутствием антител Бифидо-бактерии + сыво-ротка взрослых с наличием антител Контроль (бифидобактерии + физ.р-р)

60 2,0 ± 0,14 1,155 ± 0,12 (pi 0,01) 1,225 ± 0,047 0,670 ±0,07 (Р^ 0,01) 1,390 ±0,02

Средние показатели адгезии бифидобактерий в контроле (1,39 ± 0,02) сопоставимы с таковыми в экспериментах с применением сывороток детей (2,0± 0,14) и взрослых (1,225± 0,047), где антитела против бифидобактерий не обнаруживались. В первом случае СПА бифидобактерий после обработки их сыворотками детей, содержащими антитела против этих микроорганизмов, значимо снизился с 2,0 ±0,14 до 1,155 ±0,12 (снижение адгезии на 42,3%). Во втором варианте СПА бифидобактерий после обработки их сыворотками взрослых также достоверно понизился с 1,225 ± 0,047 до 0,670 ± 0,07 (снижение адгезии на 45,3%).

Использование отвара кашкары оказывало выраженную ингибицию адгезии бифидобактерий (от 12% до 23% по отношению к контролю), это позволяет заключить, что данный растительный препарат блокирует рецепторы эритроцитов и адгезины бактерий. Таким образом, блокировка бактериальной адгезии при длительном употреблении лекарственных

бактериальной адгезии при длительном употреблении лекарственных растений, которые часто рекомендуются практическими врачами при кишечных энтероколитах (Минаева В.Г., 1991) является одним из механизмов, способствующих снижению колонизационной резистентности организма.

Получение функционально активных (иммуногенных) клеточных фракций и изучение их белкового и аминокислотного состава При выборе способа выделения клеточных фракций исходили из того, что антигены бифидобактерий должны быть в нативном состоянии. В связи с этим, были отработаны режимы получения функционально активных клеточных фракций бифидобактерий (рис.2).

Суспензия клеток бифидобактерий, 109 клеток/мл УЗ - дезинтеграция (+4°С) 2-кратная, 2 мин Центрифугирование (+4°С, 2 мин, 2000 об/мин)

Осадок неразрушенных клеток

Центрифугирование (10 мин, 8000 об/мин)

Цитоплазматическая фракция

Фракция клеточных стенок

Рис. 2. Схема получения клеточных фракций бифидобактерий

Определение серологической активности клеточных фракций би-фидобактерий с помощью РПГА показало, что они обладают функциональной активностью (иммуиогенностью) (табл. 2). Более высокий титр антител в РПГА цитоплазматической фракции можно связать с более высокой дозой антигена, рассчитанной на белок (0,535 мг/мл).

Таблица 2

Иммуногенность клеточных фракций бифидобактерий

Исследуемый объект, доза (мг) на 1 животное Титр антител"

1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1: 64

ФКС, 0,38 ++++ ин- -н-н- ++++ 1-3 ¡г

ЦПФ, 1,24 1П1 ым 1111 ++++ ++++ Ег

* Представлены средние данные трех параллелей, полученные в одном опыте; «1111» - полная агглютинация, «-» - отсутствие агглютинации

Электрофоретическое разделение белков клеточных фракций бифидобактерий показало, что фракция клеточных стенок содержит до 30 отдельных белковых субъединиц с молекулярными массами от 44,2 кДа до 125 кДа, цитоплазматическая фракции- до 17 субъединиц с молекулярной массой от 44,2 кДа до 85 кДа (рис. 3).

Г

125 кОа

85 кПа

59 5 кОа 57кЭа

53 кОа 31 кОа 50 7 кПа ■

:: i

47 7 Ша

45 2 _ _

44 8 Ша — _ 44 2 кВа/—""

1 2

Рис. 3. электрофорез клеточных фракций бифидобактерий по Лэммли.

1. ЦПФ, 2. ФКС

Аминокислотный анализ белков клеточных фракций показал, что четыре аминокислоты (аланин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глицин) составляют более 50% от общего аминокислотного состава белков клеточной стенки бифидобактерий; пять аминокислот (аланин, про-лин, аспарагиновая, глутаминовая кислота, лизин) составляют составляют более 60% от общего аминокислотного состава белков цитоплазматиче-ской фракции бифидобактерий (табл.3).

Таблица 3

Аминокислотный состав белков клеточных фракций бифидобактерий

Аминокислота Молярные проценты

Фракция клеточных стенок Цитоплазматическая фракция

Аланин 17,7 9,6

Валин 6,86 8,3

Лейцин 7,33 6,0

Изолейцин 4,99 4,0

Фенил аланин 1,5 2,1

Метионин 1,1 0,8

Пролин 4,55 9,2

Тирозин 0,17 1,4

Серин 6,46 5,3

Треонин 5,29 4,0

Глицин 10,27 5,1

Аспарагиновая кислота 12,99 8,0

Глутаминовая кислота 16,2 21,2

Аргинин 1,01 1,9

Лизин 2,9 12,2

Гистидин 0,68 0,9

2 100 100

Получение комплексов биомолекул клеточных фракций бифидобактерий с сополимером АК-ВИ и изучение их иммуногснности

В результате изучения взаимодействия сополимера акриловой кислоты и винилимидазола с биомолекулами клеточных фракций бифидобактерий было показано, что при подкислении среды наблюдалось образование осадков (табл. 4).

Таблица 4

Условия образования осадков биологических молекул клеточных фракций бифидобактерий с сополимером АК-ВИ_

Фракция бифидобактерий, рН Количество 0,1 М НС1 для образования осадка, мл рН выпадения осадка Масса осадка, мг

ФКС, 7,7 15,35 5,43 10,85

ФКС, 7,7 15,40 4,43 8,18

ЦПФ, 7,6 14,60 5, 34 18,7

ЦПФ, 7,6 15,95 3,67 8,95

Данные спектроскопии показали, что осадок, образованный при рН 5,43 содержит как синтетический полимер, так и биомолекулы ФКС (спектр 5, рис. 4).

Рис. 4. ИК- спектры полиакриловой кислоты (1), поли-1-винилимидазола (2), сополимера АК-ВИ (3), лиофилизированной ФКС (4), оеадке при рН 5,43 (5), .. осадка при рН 4,43 (6).

В спектре сохраняются основные полосы поглощения звеньев ВИ (1110,1080, 827 и 744 см"1) и полосы поглощения биомолекул ФКС (1630, 1465, 1040-1150). Осадок, образующийся при рН 4,43 (спектр 6) представлен сополимером (рис. 4). Результаты, полученные для ЦПФ указывают на отсутствие содержания сополимера в осадке, образованного при рН 5,34 (спектр 5, рис. 5). В спектре присутствуют только полосы погло-

щения биомолекул ЦПФ (1645,1545,1050,935, 510). Осадок, полученный при рН 3,67 (спектр 6, рис.5) содержит как сополимер, так и биомолекулы ЦПФ. В спектре сохраняются полосы поглощения сополимера (1107, 1985, 1230, 1400, 1700, 660, 622) и полоса поглощения биомолекул ЦПФ (1638).

Анализ условий усиливающего действия сополимера АК-ВИ на процесс вторичного иммунного ответа показал тенденцию к повышению иммуногенности антигенов ФКС и при совместном их введении с сополимером АК- ВИ и в составе комплекса (табл. 5). Это можно объяснить образованием множества водородных и ионных связей между биомолекулами ФКС и молекулами сополимера, придающих прочность комплексам, образованным и в экспериментальных условиях и в физиологических условиях организма. Причем титр 1:32 в случае комплексообразования in vitro можно получить используя дозу искусственного антигена (ФКС-сополимер) в 8 раз меньшую, чем при введении смеси антигенов ФКС с сополимером в одном шприце. Это может, свидетельствовать о фокусировке антигеном действия адъюванта (сополимер АК- ВИ) на предшественниках антигенспецифических клеток памяти.

Рис. 5. ИК- спектры полиакриловой кислоты (1), поли-1-винилимидазола (2), сополимера АК-ВИ (3), лиофилизированной ЦПФ (4), осадка при рН 5,34 (5), осадка при рН 3,67 (6).

ЗООО 1ЯОО 1000 1400

40С

Таблица 5

Оценка иммуногенности комплексов антигенов клеточных фракций бифидобактерий с сополимером АК- ВИ (соотношение звеньев 54:46)

Исследуемый объект Доза, мг Способ введения Титр антител

ФКС-(АК-ВИ) осадок при рН 5,43 0,54 Внугрибрюшинно и в подушечки лап в виде комплекса 1:32

ФКС + (АК-ВИ) 4,38 Внутрибрюшинно и в подушечки лап смесь в одном шприце 1:32

ФКС 0,38 Внутрибрюшинно и в подушечки лап 1:16

* Представлены средние данные трех параллелей, полученные в одном опыте; «++++»- полная агглютинация; «-»- отсутствие агглютинации; ФКС-(АК-ВИ)-комплекс антигенов фракции клеточных стенок с сополимером АК-ВИ; ФКС+(АК-ВИ)- смесь антигенов фракции клеточных стенок с сополимером АК-ВИ.

Показана низкая иммуногенность комплекса антигенов ЦПФ с сополимером АК- ВИ, полученного m vitro при рН 3,67. Это связано с его неустойчивостью в физиологической среде, в результате чего часть связанного белкового антигена может теряться, поэтому использование искусственного антигена (ЦПФ- АК-ВИ) не перспективно.

Таким образом, устойчивость и иммуногенность комплекса антигенов ФКС с сополимером АК- ВИ, полученного in vitro при рН 5,43 позволяет использовать его при конструировании эритроцитарных иммуноди-агностикумов и получении высокотитражных сывороток.

Конструирование и оценка активности эритроцитарных имму-нодиагностикумов для РПГА на основе клеточных фракций бифидобактерий с применением синтетических полимеров

Изучение эффективности антигенной сенсибилизации эритроцитов барана с помощью синтетических полимеров: поливинилимидазола (ПВИ), сополимера 1-винил-4,5,6,7-тетрагидроиндола, метакриловой кислоты и метилметакрилата (МАК- ВТГИ), полиметакриловой кислоты (ПМАК) и гидрохинона показало, что синтетические полимеры более активно сенсибилизируют эритроциты антигенами, чем гидрохинон и соответственно, эритроцитарные иммунодиагностикумы на их основе определяют специфические антитела в РПГА в более высоких титрах (1:64-1:128) (табл. 6).

Сополимер МАК-ВТГИ показал высокую активность при снижении концентрации полимера в 20 раз (0,8мг/мл и 0,04мг/мл), что можно связать с его химической структурой. Введение некоторого количества гидрофобных групп в цепь полимера существенно повышает стабильность образующихся на его основе интерполимерных комплексов. В случае применения ПВИ в качестве связующего агента при концентрациях 0,04-0,08мг/мл наблюдалась спонтанная агглютинация эритроцитов при замене иммунной сыворотки физиологическим раствором. Понижение концентрации ПВИ до 0,005-0,01мг/мл позволило устранить этот эффект при сохранении высокой активности полимера в качестве связующего агента.

Таблица 6

Чувствительность эритроцитарных антигенных диагностикумов в зависимости от вида коньюгирующего компонента_

Связывающий компонент, концентрация Титры антибактериальных антител в РПГА

1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256

Сополимер МАК-ВТГИ (1000 кДа), 0,8мг/мл 1111 -н-н- ++++ 1 1 и ■М-++ ++++ ++++ +/-

Сополимер МАК-ВТГИ (1000 кДа), 0,04мг/мл ++++ ++++ ++++ ++++ ++-Н- -Н-++

ПВИ (70 кДа), 0,005мг/мл -н-н- ++++ ++++ - - - ■

ПВИ (70 кДа), 0,01мг/мл ++++ ПН ++++ пп ++++ ++++ +/- +/-

Гидрохинон, 0,43% раствор ПН ++++ +/- - - * *

«-»- отсутствие агглютинации; «+/-»- реакция слабо положительная

Диагностикум, приготовленный с конъюгирующим компонентом ПВИ при концентрации 0,01мг/мл, сохранял высокую активность, и титр антибактериальных антител к антигенам бифидобакетерий в РПГА составил 1:32- 1:64. Проведенная сравнительная характеристика сконструиро-

ванных диагностических препаратов, приготовленных на основе антигенов двух клеточных фракций бифидобактерий с использованием в качестве коньюгирующего компонента сополимера АК- ВИ показала, что эритроцитарный иммунодиагностикум на основе антигенов фракции клеточных стенок определил высокие титры антител (1:32) в большем количестве сывороток (46%) по сравнению с эритроцитарным иммунодиагно-стикумом на основе антигенов цитоплазматической фракции, который определил те же титры в 14% сывороток. Титры антител 1:8- 1:16 первый диагностикум выявил в 54% сывороток, второй- в 74% сывороток (рис. 6).

Рис. 6. Сравнительная характеристика диагностикумов на основе антигенов клеточных фракций бифидобактерий с применением сополимера акриловой кислоты и винилимидазола (АК- ВИ) (0,8 мг/мл)

ЭД на основе цитоплазматической фракции в трех случаях показал отрицательные результаты (отсутствие специфических антител), хотя ЭД на основе антигенов ФКС зафиксировал наличие антител, что характеризует его как более чувствительный. Сравнительная характеристика сконструированных иммунодиагностикумов на основе трех типов антигенов бифидобактерий показала, что эритроцитарный иммунодиагностикум на основе антигенов клеточной стенки бифидобактерий определил высокие титры антител (1:16- 1:64) в 97% сывороток, эритроцитарный иммунодиагностикум на основе антигенов цитоплазматической фракции- в 15 % сывороток (1:16), третий ЭД на основе общих антигенов бифидобактерий определяет эти же титры антител в 56% сывороток (рис.7).

13 5 7 9 11 13 15 Номера сывороток

Рис. 7. Сравнительная характеристика диагностикумов на основе антигенов клеточных фракций и общих антигенов бифидобактерий с применением сополимера АК- ВИ

Таким образом, при конструировании эритроцитарных диагностикумов по определению специфических антител к бифидобактериям целесообразно сенсибилизировать эритроциты антигенами клеточных стенок или целыми клетками бифидобактерий. Однако использование в РПГА диагностикума на основе антигенов фракции клеточных стенок бифидобактерий позволяет повысить чувствительность к исследуемым антителам в среднем в 6 раз по сравнению с диагностикумом, приготовленным с использованием целых клеток бифидобактерий.

Испытание сконструированного эритроцитарного иммунодиагно-стикума на основе антигенов фракции клеточных стенок с применением сополимера АК- ВИ в качестве коньюгирующего компонента для определения иммунореактивности разных групп населения показало, что содержание антибактериальных антител в сыворотке крови различных групп населения (от рождения до 14 лет и от 25 до 35 лет) регистрируется в низких концентрациях (log2 титра 1-3) (рис. 8), что согласуется с данными лиитературы об иммунологической толерантности к представителям ин-дигенной микрофлоры.

1 2 3 4 5 Возрастные группы населения

Рис. 8. Показатели титра антибактериальных антител (в ^2) к антигенам бифидобактерий. 1. Новорожденные, 2. Дети (1- 5 лет), 3. Дети (6-8 лет), 4. Дети (9-14 лет), 5. Взрослые (25- 35 лет)

Возможность широкого применения РПГА с сенсибилизированными эритроцитами в значительной мере определяется стабильностью эритроцитарного диагностикума, которая обеспечивается прочностью связи между носителем и сенситином, отсутствием спонтанной агглютинации носителя. Измерение чувствительности РПГА с диагностикумами разных сроков хранения показало, что жидкие эритроцитарные иммуно-диагностикумы, приготовленные с использованием синтетических полимеров, сохраняют свою активность в течение 2-х лет (срок наблюдения) при 1=3-6 градусов (таб.7). Эритроцитарные диагностикумы, приготовленные с использованием использованием гидрохинона сохраняют свою активность в течение 3-5 месяцев при 1=3-6 градусов. При более длительном хранении наблюдаются явления спонтанной агглютинации сенсибилизированных эритроцитов.

Таблица 7

Активность эритроцитарных диагностикумов разных сроков хранения

Сроки хранения, мес. 1 3 6 12 18 24

2 титра антител 5 5 5 5 5 5

выводы

1. Антибактериальные (естественные) антитела в сыворотках людей, ингибируя цитоадгезию (на 19-45%) могут иметь патогенетическое значение для кишечного микробиоценоза. Отвар кашкары снижает адгезивную активность бифидобактерий (на 12- 23%), что способствующих снижению колонизационной резистентности организма

2. Клеточные фракции бифидобактерий, полученные с помощью разработанного метода, обладают функциональной активностью (имму-ногенностью).

3. Иммуногенность фракции клеточных стенок обеспечивают белки с молекулярными массами от 44,2 кДа до 125 кДа, цитоплазматической фракции- белки с молекулярными массами от 44,2 кДа до 85 кДа

4. Четыре аминокислоты (аланин, аспарагиновая кислота, глутами-новая кислота, глицин) представляют более 50 % от общего аминокислотного состава белков клеточной стенки бифидобактерий; пять аминокислот (аланин, пролин, аспарагиновая, глутаминовая кислота, лизин) составляют более 60 % от общего аминокислотного состава белков цитоплазматической фракции бифидобактерий.

5. Комплекс антигенов клеточной стенки бифидобактерий с сополимером АК- ВИ, полученный при рН 5,43 позволяет при иммунизации использовать дозу антигена в 8 раз меньшую, чем при введении смеси антигенов ФКС с сополимером в одном шприце, что доказывает перспективность его использования при получении высокотитражных сывороток. Устойчивость полученного комплекса позволяет использовать антигены фракции клеточных стенок и сополимер АК- ВИ для получения стабильных эритроцитарных иммунодиагностикумов.

6. Полученный при рН 3,67 комплекс антигенов цитоплазматической фракции с сополимером АК-ВИ показал низкую иммуногенность (титр 1:8), что является доказательством неперспективности использования антигенов этой фракции в комплексообразовании с сополимером АК-ВИ в плане получения искусственных антигенов и высокотитражных сывороток.

7 Сконструированные эритроцитарные иммуиоди агностику мы на основе антигенов бифидобактерий с использованием синтетических полимеров в качестве коньюгирующих компонентов обладают высокой активностью. Специфичность подтверждается взаимодействием эритроци-тарного иммунодиагностикума с гомологичными сыворотками, чувствительность и стабильность выражается в высоких титрах (1:16- I 64).

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Юринова Г.В. Адгезивность бифидобакгерий- как фактор, определяющий эубиоз кишечника/ Юринова Г.В., Попкова С.М., Злобин В.И. // Экология Южной Сибири: мат-лы Южно-сибирской междунар. науч. конф. студентов и мол. уч.-Абакан, ноябрь, 2001 г. -Т.2. -С. 170-171.

2. Юринова Г.В. Роль адгезии бактерий в колонизации слизистых поверхностей организма / Юринова Г.В., Попкова С.М, Злобин В.И. // Бюлл. СО РАМН. - 2001. - № 3-4. - С.21-26.

3. Антиадгезивный эффект антител против бифидобактерий в системе in vitro/ Попкова С.М, Кичигина E.JI, Лещук С.И., Юринова Г.В. // Аллергология, астма и иммунология. - 2001.- № 9 - С. 15-17.

4. Попкова С.М. Особенности формирования кишечного микробиоценоза у детей в современных условиях/ Попкова С.М., Кичигина E.JL, Юринова Г.В. и др. // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН - Иркутск, 2001. -№4(18).-С. 72-74.

5. Попкова С.М. Влияние некоторых экзогенных и эндогенных факторов на адгезию бифидобактерий/ Попкова С.М., Кичигина E.J1., Юринова Г.В // Журнал микробиол. - 2002. - №6. - С. 15-21.

6. Попкова С.М. О некоторых факторах, влияющих на адгезию бифидобактерий/ Попкова С.М., Кичигина E.JL, Юринова Г.В.и др. // Материалы VIII Съезда Всерос. общ-ва эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - М., 2002. - С.228-229.

7. К вопросу о роли естественных антител в формировании кишечного дисбакгериоза/ Попкова С.М., Лещук С.И., Кичигина Е.Л., Юринова Г.В., Сердюк Л.В.// Пробиотические микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования: мат-лы международн. науч.-практ. конф., май 2002 г. - М., 2002. - С.ЗЗ.

8. Выделение клеточных стенок бифидобактерий/ Юринова Г.В., Попкова С.М., Анненков В.В. и др. // Бюлл. ВСНЦ.- 2003,- №7 - С.37-39.

9. Изучение иммуногенности некоторых клеточных фракций бифидобактерий/ Юринова Г.В., Лещук С.И., Попкова С.М и др.// Бюлл. ВСНЦ. - 2003. - №7. - С.39-41.

10. Новые полимерные системы для иммунологии: адьюванты, гидрогели, функционализированные покрытия/ Анненков В.В., Лещук С.И., Юринова Г.В.и др. // Фундаментальные науки- медицине: Материалы конф., 10- 11 декабря, 2003 г.- М., 2003.- С.85-86.

биол-2004,- № 2 .-С.70-74.

12. Юринова Г.В. Выделение клеточных фракций бифидобактерий и изучение их иммуногенносш/ Юринова Г.В., Попкова С.М, Анненков

B.В. и др. // Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания: Материалы Межд. конф., июнь, 2004 г.- М.,2004-

C.38-39.

13. Юринова Г.В. Использование неприродных полиэлектролитов в иммунотехнологии/ Юринова Г.В., Анненков В.В , Даниоловцева E.H. и др. // Биология микроорганизмов и их научно- практическое использование: Материалы Межрегиональной научно-практ. конф., Иркутск, октябрь, 2004 г. -С.99-101.

14. Анненков В.В. Современные подходы к конструированию препаратов в иммунотехнологии/ Анненков В.В., Даниловцева E.H., Юринова Г.В. и др. // Бюллетень ВСНЦ РАМН. - 2004. - №9. - С.50-54.

Список основных сокращений

ФКС - фракция клеточных стенок

ЦПФ - цитоплазматическая фракция

СПА - средний показатель адгезии

ЭД - эритроцитарный иммунодиагностикум

РПГА - реакция пассивной(непрямой) гемагглютинации

АК- ВИ - сополимер акриловой кислоты и винилимидазола, ММ=

1750 кДа

ПВИ - поливинилимидазол, ММ= 70 кДа

МАК- ВТГИ - сополимер 1-винил-4,5,6,7-тетрагидроиндола, метак-

риловой кислоты и метилметакрилата, ММ=1000 кДа

ПМАК - полиметакриловая кислота, ММ=1000 кДа [) /

Подписано в печать 20.10.05. Формат 60x84 1/16. Печать трафаретная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ 81.

РЕДАКЦИОННО-ИЗДАТЕЛЬСКИЙ ОТДЕЛ Иркутского государственного университета 664003, Иркутск, бульвар Гагарина, 36; тел. (3952) 24-14-36

-г

*

$ Г9 5 75

РНБ Русский фонд

2006-4 20733

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Юринова, Галина Валерьевна

ГЛАВА I. ВВЕДЕНИЕ 6

ГЛАВА II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 12

2.1 .Современные представления о взаимоотношениях 12-24 макроорганизм - микробиота

2.2. Создание искусственных иммуногенов 24

2.3. Диагностические системы в иммунологии 39-

ГЛАВА III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 47

3.1 Объекты исследований 47

3.2. Методы исследований 48

ГЛАВА IV. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 57

4.1. Изучение влияния эндогенных -и экзогенных факторов на 57-64 адгезию бифидобактерий in vitro

4.2.Получение функционально активных (иммуногенных) 65-74 клеточных фракций бифидобактерий и изучение их белкового и аминокислотного состава

4.3. Получение комплексов биомолекул клеточных фракций 74-84 бифидобактерий с сополимером АК - ВИ и изучение их иммуногенности

4.4. Конструирование и оценка активности эритроцитарных 84-100 иммунодиагностикумов для РПГА на основе клеточных фракций бифидобактерий с применением синтетических полимеров

Введение Диссертация по биологии, на тему "Совершенствование технологии приготовления эритроцитарных иммунодиагностикумов для РПГА на основе клеточных фракций бифидобактерий с использованием синтетических полимеров"

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

Последние десятилетия характеризуются возрастающим вниманием исследователей к микроорганизмам, обитающим в организме человека и животных, и их роли в поддержании здоровья и возникновении болезней. Важное значение симбиотической микрофлоры для организма человека к настоящему времени является общепризнанным и базируется на результатах многочисленных исследований [Перетц Л.Г., 1955; Гончарова Г.И., 1986; Дубинин А.В., Бабин В.Н., Раевский П.М., 1991; Шендеров Б.А., 1998].

Вместе с тем, молекулярные механизмы кооперативного взаимодействия макроорганизма и населяющих его микроорганизмов, обеспечивающие стабильность кишечной экосистемы, приживление аутохтонной и элиминацию аллохтонной микрофлоры, до настоящего времени окончательно не выяснены.

Постоянство микрофлоры, микробиологический фенотип, присущий каждому человеку, является показателем иммунологической реактивности организма и одним из факторов естественного иммунитета [Пинегин Б.В. с соавт., 1984; Гребнева А.Л., Мягкова А.Н., 1994; Лыкова Е.А. с соавт., 1996; Захарченко М.П., 2003]

Иммунореактивность к представителям нормальной микрофлоры формируется под влиянием изобилия антигенов, микробных метаболитов, митогенов, супрессоров, адъювантно-активных и прочих веществ и составляет важный компонент иммунологического гомеостаза. Нарушения иммунологических взаимоотношений в системе «макроорганизм-микрофлора» нередко приводят к развитию патологических состояний, характеризующихся изменением реактивности к представителям нормальной микрофлоры хозяина, как условно- патогенной, так и непатогенной.

Показатели специфической реактивности к условно-патогенным и непатогенным бактериям служат важным критерием оценки состояния биоценоза кишечника.

Для определения иммунологической реактивности организма к индигенным микроорганизмам необходимо иметь диагностические тест-системы, при выборе которых существенное значение имеет их чувствительность и специфичность, а также и экономический фактор. В ряде случаев применение простых и недорогих методов может быть более эффективным, чем использование дорогостоящей тест- системы с высоким уровнем чувствительности и специфичности. Поэтому разработка технологических подходов к выделению функционально активных антигенов, создание на их основе искусственных антигенов и применение новых конъюгирующих компонентов на основе синтетических полимеров является актуальной при создании и стандартизации недорогих тест- систем, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью.

Цель исследования:

Изучить физико-химические и иммунологические свойства клеточных фракций бифидобактерий; на основе полученных клеточных фракций сконструировать иммунодиагностикумы для определения антимикробных антител в РПГА с использованием синтетических полимеров.

Задачи исследования:

- изучить влияние антибактериальных (естественных) антител и отваров лекарственных трав на цитоадгезию бифидобактерий in vitro;

- получить функционально активные (иммуногенные) клеточные фракции бифидобактерий и изучить их белковый и аминокислотный состав;

- выявить оптимальные условия получения и использования комплексов сополимера АК- ВИ с биомолекулами клеточных фракций бифидобактерий;

- сконструировать иммунодиагностикумы на основе антигенов полученных клеточных фракций бифидобактерий для определения антимикробных антител в РПГА с использованием синтетических полимеров в качестве конъюгирующих компонентов.

Научная новизна:

Установлено, что естественные антитела против антигенов бифидобактерий могут иметь патогенетическое значение для кишечного микробиоценоза.

Впервые продемонстрирована эффективность использования сополимера акриловой кислоты и винилимидазола (АК - ВИ) в комплексообразовании с биомолекулами клеточных фракций бифидобактерий.

Впервые показано, что полученный в экспериментальных условиях искусственный антиген при вакцинации способен давать примирующий эффект в существенно более низких дозах, чем при введении тех же компонентов в виде смеси, что создает перспективы его использования в медицинских технологиях для получения высокотитражных сывороток.

Усовершенствована технология получения эритроцитарных иммунодиагностикумов на основе выделенных функционально активных антигенов бифидобактерий с использованием синтетических полимеров в качестве коньюгирующих компонентов для определения уровня иммунореактивности организма. Показано, что сконструированные эритроцитарные иммунодиагностикумы обладают высокой специфичностью, чувствительностью и стабильностью при хранении.

Теоретическая и практическая значимость работы:

Установленное негативное влияние естественных антител на адгезию бифидобактерий показало, что изменение уровня иммунореагирования на индигенные микроорганизмы отрицательно влияет на колонизационную резистентность организма, что, в конечном счете, может привести к проявлению устойчивого дисбактериоза.

Разработанные технологические подходы по выделению функционально активных антигенов клеточных фракций бифидобактерий и созданию искусственного антигена позволяют использовать их в биомедицинских технологиях при конструировании эритроцитарных иммунодиагностикумов и получении высокотитражных сывороток. Сравнительные результаты испытаний подтвердили диагностическую эффективность созданных иммунодиагностикумов с использованием синтетических полимеров в качестве конъюгирующих компонентов.

Результаты работы включены в материалы учебных занятий по микробиологии, иммунологии и биотехнологии на биолого - почвенном факультете Иркутского государственного университета. Усовершенствованная технология приготовления эритроцитарных иммунодиагностикумов используется в практической деятельности института эпидемиологии и микробиологии Государственного учреждения Научный центр медицинской экологии Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения РАМН.

Положения, выносимые на защиту:

- Естественные антитела к антигенам бифидобактерий ингибируют адгезивную активность этих микроорганизмов, что может иметь важное значение для понимания молекулярных механизмов патогенеза кишечного микробиоценоза;

- Полученные клеточные фракции бифидобактерий являются функционально- активными (иммуногенными).Иммуногенность фракции клеточных стенок бифидобактерий обеспечивают белки с молекулярными массами от от 44,2 кДа до 125 кДа, цитоплазматической фракции- белки с молекулярными массами от 44,2 кДа до 85 кДа;

- Неприродный полиэлектролит акриловой кислоты и винилимидазола (АК- ВИ) вступает во взаимодействие с биомолекулами клеточных стенок бифидобактерий и образует устойчивый иммуногенный комплекс, что делает перспективным его применение в решении проблем по созданию искусственных антигенов и получении высокотитражных сывороток, необходимых для стандартизации эритроцитаных иммунодиагностикумов.

- Иммунодиагностикумы, сконструированные для определения антимикробных антител в РПГА на основе антигенов бифидобактерий с использованием неприродных полиэлектролитов в качестве конъюгирующих компонентов показывают высокую специфичность, чувствительность и стабильность при хранении.

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на научной конференции студентов и молодых ученых «Экология Южной Сибири» (Абакан, 2001); научной конференции «Техногенное загрязнение и инфекционная патология» (Иркутск, 2001); VIII Съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2002); Международной научно-практической конференции «Пробиотические микроорганизмы, современное состояние вопроса и перспективы использования» (Москва. 2002); Всероссийской научно- практической конференции «Развитие физико - химической биологии и биотехнологии на современном этапе» (Иркутск, 2003); Межрегиональной научно- практической конференции «Биология микроорганизмов и их научно- практическое использование» (Иркутск, 2004); Международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания» (Москва, 2004).

Публикации. По материалам исследования опубликовано 14 печатных работ.

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 142 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов, списка литературы. Работа иллюстрирована 9 рисунками и 15 таблицами. Список литературы включает 250 источников, в том числе 92 зарубежных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Юринова, Галина Валерьевна

ГЛАВА VI. ВЫВОДЫ

1. Антибактериальные (естественные) антитела в сыворотках людей, ингибируя цитоадгезию (на 45%) могут иметь патогенетическое значение для кишечного микробиоценоза. Отвар кашкары снижает адгезивную активность бифидобактерий (на 12- 23%), что способствует снижению колонизационной резистентности организма.

2. Клеточные фракции бифидобактерий, полученные с помощью разработанного метода, обладают функциональной активностью (иммуногенностью).

3. Иммуногенность фракции клеточных стенок обеспечивают белки с молекулярными массами от 44,2 кДа до 125 кДа, цитоплазматической фракции- белки с молекулярными массами от 44,2 кДа до 85 кДа.

4. Четыре аминокислоты (аланин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, глицин) составляют более 50 % от общего аминокислотного состава белков клеточной стенки бифидобактерий; пять аминокислот (аланин, пролин, аспарагиновая, глутаминовая кислота, лизин) составляют более 60 % от общего аминокислотного состава белков цитоплазматической фракции бифидобактерий.

5. Комплекс антигенов клеточной стенки бифидобактерий с сополимером АК - ВИ, полученный при рН 5,43 позволяет при иммунизации использовать дозу антигена в 8 раз меньшую, чем при введении смеси антигенов ФКС с сополимером в одном шприце, что доказывает перспективность его использования при получении высокотитражных сывороток. Устойчивость полученного комплекса позволяет использовать антигены фракции клеточных стенок и сополимер АК - ВИ для получения стабильных эритроцитарных иммунодиагностикумов.

6. Полученный при рН 3,67 комплекс антигенов цитоплазматической фракции с сополимером АК-ВИ показал низкую иммуногенность (титр

1:8), что является доказательством неперспективности использования антигенов этой фракции в комплексообразовании с сополимером АК - ВИ в плане получения искусственных антигенов и высокотитражных сывороток.

7. Сконструированные эритроцитарные иммунодиагностикумы на основе антигенов бифидобактерий с использованием синтетических полимеров в качестве коньюгирующих компонентов обладают высокой активностью. Специфичность подтверждается взаимодействием эритроцитарного иммунодиагностикума с гомологичными сыворотками, чувствительность и стабильность выражается в высоких титрах (1:6- 1:64)

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Юринова, Галина Валерьевна, Улан-Удэ

1. Абишева Ф.Ж. Использование эритроцитов различных видов животных при конструировании антигенных диагностических препаратов / Ф.Ж. Абишева // Тр./ Ин-т микробиологии и вирусологии. 1989. - Т. 36. - С. 108-111.

2. Адгезивные свойства бифидобактерий / Н.И. Бевз, A.M. Лянная, Э.П. Козлов, И.А. Барбашевская и др. // Всес. семинар «Колонизационная резистентность и химиотерапевтические антибактериальные пр-ты», 28-29 июня 1988 г. М., 1988. - Часть II. - С. 161-162.

3. Аковбян В.А. Эволюция лабораторной диагностики сифилиса: Комментарии к Приказу Минздрава РФ № 87 от 26.03.01 г. «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» / В.А.Аковбян, Г.А. Дмитриев // Здравоохранение.-2001.- №6.-С.103- 106.

4. Алексеева Н.Ю. Конструирование вакцин нового поколения против сальмонеллезов и чумы// Иммунология.-1997.- №5.-С14-18.400.44.

5. Алмагамбетов К.Х. Транслокация кишечной микрофлоры и ее механизмы / К.Х. Алмагамбетов, Е.М. Горская, В.М. Бондаренко // Журн. микробиол. -1991.-№ 10.-С. 74-78.

6. Антипов А.Н. Экологические проблемы урбанизированных территорий/ А.Н. Антипов, Е.В. Полюшкин. Иркутск, 1998.-198 с. ; Аронов Г.Г. Иммунологическая реактивность при различных режимах физических нагрузок/ Г.Г. Аронов, Н.И. Иванов.- Киев, 1987. - 115 с.

7. Бакулин И.Н. Метод получения эритроцитарного диагностикума для обнаружения энтеротоксина CL. Perfringens типа А / И.Н. Бакулин, Г.Б. Кашкина, Т.И. Сергеева// Журн. микробиол. 1982. -№1.-С. 79-81.

8. Басова Н.Н./ Системы серологических реакций, основанных на феномене гемагглютинации// Мат. Докл. Всероссийской н- п.конференции.- Пермь, 1993,- С.26- 27.

9. Белобородова Н.В. Метаболиты анаэробных бактерий (летучие жирные кислоты) и реактивность макроорганизма / Н.В.Белобородова, С.М. Белобородов // Антибиотики и химиотерапия.- 2000.-Т.45.- №2.-С.28-36.

10. Белобородова Н.В. О микрофлоре хозяина и ее участии в ответе на инфекцию // Антибиотики и химиотерапия.-1998.-Т.43.-№9.-С.44- 48.

11. Бондаренко В.М. «Острова» патогенности бактерий / В.М. Бондаренко // Журн. микробиол. 2001. - № 4. - С. 67-73.

12. Бондаренко В.М. Адгезивная активность клинических штаммов клебсиелл / В.М.Бондаренко, Wu Gang, М.М. Barcus // Журн. микробиол. -1996. -№2. С. 104-109.

13. Бондаренко В.М. Ранние этапы развития инфекционного процесса и двойственная роль нормальной микрофлоры/ В.М. Бондаренко, В.Г. Петровская // Вестн. РАМН.-1997. №3. - С.7 - 10.

14. Брилис В.И. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов/

15. B.И Брилис, Т.А., Брилене, Х.П., Ленцнер, А.А. Ленцнер // Лаб. дело,-1986.-№4.- С. 210-212.

16. Вершинина В.И. Характеристика общих антигенов некоторых представителей микрофлоры кишечника человека (бифидобактерии, энтерококки, энтеробактерии): Автореф. дисс. канд.мед.наук / Москва, 1982.- 20 с.

17. Взаимодействие бычьего сывороточного альбумина с поли-N— винилимидазолами /В.В.Анненков, Н.Л.Мазяр, В.А.Круглова, И.А.Ичева и др.// Высокомолекулярные соединения.-Серия А.-2000.-Т.42.-№11.-С.1-6.

18. Влияние сополимеров N- винилпирролидона и акриловой кислоты на отдельные этапы иммуногенеза/ А.М.Нажмитдинов, Р.М.Хаитов, А.Ш.Норимов и др.// Журн микробиол.-1979.-№9.-С.14-18.

19. Влияние тривалентной конъюгированной полимер-субъединичной вакцины Гриппол на иммунный статус привитых добровольцев/Р.В.Петров, Р.М.Хаитов, А.В.Некрасов, Б.В.Пинегин// Иммунология.-2003 .-№3 .-С. 8-15.

20. Влияние пробиотиков и биотерапевтических препаратов на иммунную систему организма- хозяина / В.М.коршунов, Н.Н.Володин,

21. C.А.Агафонова, О.В.Коршунова / Вопр. Гинекологии, акушерства и перинатологии.-2004.-№3.-С.80- 86.

22. Воробьев А.А. Популяционно генетические аспекты микробиологического фенотипа кишечника здорового человека /

23. А.А.Воробьев, Ю.В.Несвижский, Е.В.Буданова, Л.О.Инозеемцева // Журн. Микробиол.- 1995.- №4.-С.30-35.

24. Воскун С.Е. Особенности начальной стадии колонизации поверхностей клетками ESCHERICHIA COLI в зависимости от их подвижности и хемотаксиса/ С.Е.Воскун, Л.Ф.Новикова // Микробиология.- 1992.- Т.61.-вып.4.-С. 666- 671.

25. Вторичный иммунный ответ на конъюгаты флагеллина с полиакриловой кислотой / Р.В.Петров, Р.М.Хаитов, Б.Ф.Семенова, А.В.Некрасов и др. // Журн. микробиол.- 1985.- №10.-С.54-57.

26. Выделение и характеристика поверхностных белков стрептококка группы А / Е.П.Савельев, Е.И Блинникова, С.А Битко, О.П. Дегтерева // Биохимия.-1987.-Т.52. -Вып. 11.- С. 1875-1880.

27. Вылегжанина Е.С. Строение и свойства липотейхоевой кислоты стрептококка группы А типа М29 / Е.С. Вылегжанина, Н.Ф. Дмитриева, И.Б. Наумова, Ю.И. Чеканова, Ю.Н. Епишин, Т.М. Оксман // Антибиотики и химиотерапия. 1989. - Т. 34, № 8. - С. 572-579.

28. Габриэлян Н.И. Функции микрофлоры желудочно кишечного тракта и последствия ее нарушений после хирургических вмешательств / Н.И.Габриелян, Е.М.Горская, Н.Д. Снегова // Антибиотики и химиотерапия.-2000.-Т.45.-№9.-С. 24-29.

29. Гончарова Г.И. // Собрание трудов МНИИЭМ "Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве". 1986. - С. 10-17.

30. Гончарова Г.И. Бифидофлора человека, ее нормализующие и защитные функции / Г.И.Гончарова, Л.П.Семенова, А.М.Лянная и др.//Антибиотики и мед. Биотехн. 1987.- №3.- С. 179 -183).

31. Горская Е.М. Механизмы развития микроэкологических нарушений в кишечнике и новые подходы к их коррекции: Дисс. .докт. мед. наук/ Москва, 1994.-312 с.

32. Гребнева А.Л. Болезни кишечника / А.Л.Гребнева, А.Н.Мягкова.- Москва, 1994; Сочетанная антибактериальная терапия хеликобактерассоциированных заболеваний у детей/ Е.А.Лыкова, В.М. Бондаренко, С.В. Сидоренко и др. // Журн. микробиол.-1996.-№ 2.-С. 7681.

33. Гриппол эффективный препарата для иммунизации лиц пожилового возораста проотив гриппа/ Е.И.Бурцева, А.Н.Слепушкин, А.Л.Беляева и др. //. Иммунология.- 2000.-№2.-С. 39-42.

34. Гриценко В.А.Экологические и медицинские аспекты симбиоза ESCHERICHIA COLI и человека / В.А.Гриценко, О.В.Бухарин // Журн. микробиол.-2000.- №3.-С.92- 99.

35. Гришина И.А. Влияние антибиотиков на адгезию микроорганизмов/ И.А. Гришина, A.M., Далина, В.П. Яковлев // Антибиотики и химиотерапия.-1990.- Т. 35.- №3.-С. 50-52.

36. Гущин И.С. Аллергенные свойства коньюгата авльбумина с сополимером акриловой кислоты и N-винилпирролидона / И.С. Гущин, Н.Л. Богуш, В.А. Алешкин, Н.Г. Пучкова // Иммунология. 1986. - № 1. - С. 61-63.

37. Действие синтетических полианионов и поликатионов сополимеров N-винилпирролидона на тучные клетки / И.С.Гущин, В.Г.Войтенко, Б.Д.Свиридов, А.И.Зебрев и др. // Иммунология.-1988.-№5.-С.49- 52.

38. Дектева Г.К. Получение эритроцитарного диагностикума на основе стафилококковой протеиназы / Г.К. Дектева, П.Н. Дерябин, Е.В. Беляева, З.В. Шубина // Лаб. дело. 1991. - № 11. - С. 69-72.

39. Денисова Т.Г. Эритроцитарные реагенты в иммунодиагнстике сальмонеллезов: Автореф. дисс. .канд. мед. наук/ Алматы, 1993. 24 с.

40. Дерябин П.Н. Биологические свойства и использование тейхоевых кислот микроорганизмов / П.Н. Дерябин, Б.В. Каральник // Журн. микробиол. -1983.-№4.-С. 15-20.

41. Дерябин П.Н. Совершенствование иммунодиагностики гнойно-воспалительных и септических заболеваний при помощи новых эритроцитарных реагентов: Автореф. дисс. . .докт. мед. наук // Алма-Ата, 1992.-42 с.

42. Дерябин П.Н. Эритроцитарные диагностикумы для выявления видоспецифических антигенов стафилококка и его этиологической роли при различных заболеваниях. Дисс. . канд. мед. наук. Алма-Ата, 1985. 22 с.

43. Диапазон антигенной специфичности пептидогликана бифидобактерий / Н.И.Сибирякова, Д.Г.Астафьев, И.В.Маянская, Г.И.Гончарова и др.// Журн. микробиол.-1991.-№6.-С.2-3.

44. Дисбактериозы- актуальная проблема медицины/ А.А.Воробьев, Н.А. Абрамов, В.М.Бондаренко, Б.А. Шендеров // Вестник РАМН. — 1997. № 3. -С. 4 - 7.

45. Дубинин А.В. Трофические регуляторные связи кишечной микрофлоры и макроорганизма (к патогенезусиндрома раздраженной толстой кишки / А.В. Дубинин, В.Н. Бабин, П.М.Раевский // Клинич. Медицина.-1991.-№7.-С.24-28.

46. Езепчук Ю.В. Патогенность как функция биомолекул/ Езепчук Ю.В.- М., 1985.-240 с.

47. Зависимость иммуногенности искусственных антигенов от количества связанных полиэлектролитом белковых молекул / Р.М.Хаитов, М.И.Мустафаев, А.Ш.Норимов, Т.В.Абраменко и др. // Бюллетень эксперименал. биологии и медицины.- 1983.- №11.-597-599.

48. Закирова С.Ф. Использование реакции непрямой гемагглютинации для диагностики заболеваний, вызываемых вирусами коксаки В / С.Ф. Закирова, А.Т. Кравченко, Т.Н. Омельченко, Н.Я. Бенедиктова и др. // Журн. микробиол. 1986. - № 10. - С. 113-114.

49. Захарченко М.П. Проблемы диагностики дисбиоза под влиянием факторов окружающей среды / М.П.Захарченко, В.Б.Гриневич, В.М.Добрынин //Гиг. и сан.-2003.-№5.-с.74-76.

50. Зезин А.Б. Полиэлектролитные комплексы/ А.Б.Зезин, З.Б.Рогачева// Успехи химии и физики полимеров. Москва: Химия, 1973.-C.3-30.

51. Зуев А.С. Разработка и характеристика эритроцитарных препаратов дли диагностики сальмонеллезов / А.С. Зуев, М.В. Дулатова, С.Н. Головачева, М.П. Привалов и др. // Тр./ Ин-т им. Пастера. 1981. - Т. 56. - С. 50-55.

52. Изачик Ю.А. Дисбактериоз кишечника/ Ю.А. Изачик, А.А. Корсунский, И .Я. Миху // Мед. помощь. — 1993. №2. — С.58 — 60.

53. Изучение иммуномодулирующего действия нормальной микрофлоры кишечника / М.М. Шкарупета, Н.Н. Мальцева, В.М.Коршунов, Б.В.Пинегин //. Иммунология.- 1989.-№ 2.-С.26-30.

54. Изучение клеточных и молекулярных механизмов взаимодействия иммуномодулятора полиоксидония с клетками иммунной системы человека/ В.А.Дьяконова, В.В.Бураков, Г.В.Шаронов, Б.В.Пинегин // Иммунология.-2004.-№3.-С. 145- 152.

55. Изучение механизмов действия гепарина и поли-4- винипиридина на иммуногенез / Р.В.Петров, А.Н.Гвоздецкий, А.А.Горохов, В.П.Евдаков и др. // Журн. Микробиол.-1974.-№ 1 .-С.37- 40.

56. Иммуноадъювантные свойства ионофоров / М.Н.Китаева, Д.М.Абдуллаев, Р.И.Атауллаханов, Г.Н.Торсунова// Иммунология.-1986.-№1.-С. 69-72.

57. Иммунобиологические диагностические средства- http:/ www.umi.ru/profy/view/399/71 (18 июня 2005).

58. Иммуномодулирующие свойства некоторых микробов представителей нормальной микрофлоры кишечника / Н.Н.Мальцева, М.М.Шкарупета, Б.В.Пинегин, В.М.Коршунов // Антибиотики и химиотерапия.- 1992.-Т.12.-№37.-С. 41-42.

59. Иммуномодулирующий эффект белковых фракций, выделенных из бифидобактерий / Т.Н.Николаева, В.М.Бондаренко, А.И.Николаева, В.В.Зорина и др.// Журн. микробиол.-2004.-№2, С.60-64.

60. Исследование иммуномодулирующей активности имидазолсодержащих полиэлектролитов /В.М.манько, Т.Б.Руднева, Р.И.Гаджиев, Е.А.Соколова и др. // Иммунология.-1990.-№5.-С.63-66.

61. Кабанов В.А. Новый принцип создания искусственных иммуногенов/ В.А.Кабанов, Р.М.Хаитов // Журн. Всесоюзного хим. общества им. Д.И.Менделеева.-1996.-№4.-С.57-68.

62. Калмыкова А.И. Пробиотики: Терапия и профилактика заболеваний. Укрепление здоровья/ Калмыкова А.И. Новосибирск,2001.-208 с.

63. Каральник Б.В. Диагностические реакции с применением сенсибилизированных эритроцитов / Б.В. Каральник // Журн. микробиол. -1982.-№ 11.-С. 8-15.

64. Каральник Б.В. Единый стабилизатор для эритроцитарных диагностикумов / Б.В. Каральник, М.Ф. Шмутер, Н.М. Нуркина, П.Н. Дерябин и др. // Лаб. дело. 1985. - № 3. - С. 163-166.

65. Каральник Б.В. Научные основы изготовления эритроцитарных диагностикумов / Б.В. Каральник // Журн. микробиол. 1977. - № 4. - С. 29-33.

66. Каральник Б.В. Получение эритроцитарных Fab-, %- и А,-диагностикумов / Б.В. Каральник, В.А. Шамардин, K.JI. Шаханина, P.JI. Панурина // Журн. микробиол. 1980. - № 12. - С. 65-69.

67. Каральник Б.В. Эритроцитарные реагенты в клинической иммунологии / Б.В. Каральник // Иммунология. 1995. - № 6. - С. 4-6.

68. Карпунина Т.И. Повышение терапевтического действия пробиотиков/ Т.И., Карпунина, Э.С. Горовиц, А.Н. Чиненкова, А .Я. Перевалов // Журн. микробиол,- 1998.- №2.-С. 104- 107.

69. Карсонова М.И. Иммунопрофилактика и иммунотерапия хирургических инфекций/ М.И.Карсонова, Б.В.Пинегин, Р.М.Хаитов // Практикующий врач.-1998.-№12.-С.9-12.

70. Ким К.В. Эритроцитарные иммунореагенты для диагностики эутоиммунных повреждений поджелудочной железы / К.В. Ким, П.Н. Дерябин, Б.В. Каральник // Лаб. дело. 1991. - № 11. - С. 44-47.

71. Колобов А.В. Пептидные иммуностимуляторы и искусственные иммуногены/ А.В.Колобов, Г.М.Бочко // Иммунология.-1987.-№6.-С.85-87.

72. Коникова Р.Е. Разработка эритроцитарных препаратов для выявления антигенов и антител в РИГА / Р.Е. Коникова, Ф.С. Носков, Г.А. Бояр // Тр. / Ин-т им. Пастера. 1981. - Т. 56. - С. 13-30.

73. Кооперативное связывание сывороточного альбумина кватернизованными поли- 4- винилпиридинами и структура образующихся комплексов / В.А.Кабанов, В.П.Евдаков, М.И.Мустафаев, А.Д.Антипина // Молекулярная биология.- 1997.-Т.11.-Вып.З.-С.582-597.

74. Корректирующее действие антител при эксперименальном кишечном дисбактериозе / И.Г Чхаидзе, В.Г.Лиходед, Е.А.Лобова, М.Ю. Яковлев // -Журн. микробиол.- 1998.-№4.-С. 12-14.

75. Коршунов В.М. Влияние иробиотиков и биотерапевтических препаратов на иммунную систему организма- хозяина / В.М.Коршунов, Н.Н.Володин, С.А.Агафонова, О.В.Коршунова // Вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии.-2004.-ТЗ.-№3.-С.80-86.

76. Коршунов В.М. Проблема регуляции микрофлоры кишечника // Журн. микробиол.-1995.-№3.-С.48-55.

77. Кравцов Э.Г. Роль адгезина в полимерном строении Vi-антигена / Э.Г. Кравцов, Н.Г. Фиш, Л.И. Кулинич, А.П. Аллилуев и др. // Журн. микробиол. 1989. - № 2. - С. 29-31.

78. Латышева Т.В. Эффективность полиоксидония при некоторых формах первичных иммунодефицитов (ОВИН) и вторичных иммунодефицитных состояниях/Т.В.Латышева, Н.Х. Сетдикова // Аллергия, астма и клиническая иммунология.-2000.-№1 .-С.41-43.

79. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований/ А.С.Лабинская. М., 1972.-378 с.

80. Лечение гнойно септических осложнений у больных диабетом/ Т.Ю. Гришина, А.И.Станулис, А.В.Жданов, А.В.Хаев // Аллергия, астма и клиническая иммунология.-2000.-№1 .-С.47-48.

81. Лещинская Л.Ц. Стабильный реагент для определения Е-розеткообразующих клеток у морских свинок / Л.Ц.Лещинская, Б.В.Каральник // Иммунология.-1983.-№6.-С.73-74.

82. Лещук С.И. Новые подходы к совершенствованию методов иммунохимического анализа с помощью синтетических полимеров дляряда возбудитеолей инфекционной патологии: Автореферат. Дис.докт биол. наук: 03.00.23.- Улан-Удэ, 2002.-35 с.

83. Лизько Н.Н. Дисбактериозы экстремальных состояний/ Н.Н. Лизько // Антибиотики и медицинская биотехнология.-1987.- Т. 32. № З.-С.184-186.

84. Лихо дед В.Г. Развитие кишечного дисбактериоза у новорожденных при дефиците антител к RE- гликолипиду/ В.Г. Лиходед, И.Г. Чхаидзе, М.А. Галдавадзе и др. // Журн. микробиол.- 1998.-№ 4.-С.67- 68.

85. Лиходед В.Г., Чхаидзе И.Г., Галдавадзе М.А. и др. Развитие кишечного дисбактериоза у новорожденных при дефиците антител к RE- гликолипиду. Журн. микробиол. 1998.- №4.- С. 67- 68.

86. Лусс Л.В. Полиоксидоний в общеклинической практике// Аллергия, астма и клиническая иммунология.-2000.-№1.-С.21-41.

87. Лызлова Л.В. Растворимый фибронектин: биологические функции и роль системе паразит-хозяин / Л.В. Лызлова, К.Б. Гробовская, А.А. Тотолян // Журн. микробиол. 1990. - № 9. - С. 112-120.

88. Лыкова Е.А. Бактериальная эндотоксинемия у детей с дисбиозом кишечника/ Е.А.Лыкова, В.М. Бондаренко, А.А. Воробьев и др. // Журн. микробиол.- 1999.-№3.-С.67- 70. 144

89. Метаболиты кишечной микрофлоры в диагностике дисбиоза кишечника / А.О.Тамм, М.П.Вия, М.Э. Микельсаар, У.Х.Сийгур // Атибиотики и мед. биотехнология.-1987.-№3.- С.191-195.

90. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири/ В.Г. Минаева-Новосибирск: Наука, 1991.- 356 с.

91. Митрохин С.Д. Биохимическая активность микробных популяций пищеварительного тракта и влияние на нее антибактериальных препаратов. Антибиот и химиотер. 1991.-№ 8.-С. 46- 50.

92. Модификация иммунного ответа при помощи антигена, связанного с неприродными полиэлектролитами / Р.В.Петров, В.А.Кабанов, Р.М.Хаитов, М.И.Мустафаев и др.// Журн. Микробиол.-1981.-№2.-С.58- 63.

93. Москаленко Е.П. О фракциях растворимого антигена возбудителя коклюша// Журн. микробиол.-1968.-№6.-С.63-67.

94. Мошиашвили И.Я. Модификация ультразвукового генератора ULA-100 ВТ для микробиологических исследований / И.Я. Мошиашвили, И.М.Файкин // Журн. микробиол.-1968.-№6.-С. 120-122.

95. Назарова Е. К. Микробиоценоз влагалища и его нарушения. Этиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика / Е. К. Назарова, Е. И. Гиммельфарб, JI. Г. Созаева//Антибиотики и химиотерапия,- 2002.-Т.47.-№. 4.-С.36- 43.

96. Николаев В.П. Препараты для иммунодиагностики клещевого энцефалита / В.П. Николаев // Тр./ Ин-т им. Пастера. 1989. - Т. 65. - С. 159-163.

97. Новые подходы к разработке лекарственных средств/ Бабин В.Н., Домарадский И.В., А.В. Дубинин, О.А. Кондракова // Ж. Рос. хим. Общества. 1996. - Т. 40,№ 2. - С. 125-130.

98. Новые эритроцитарные иммунодиагностикумы для метода РПГА / С.И. Лещук, Л.В. Сердюк В.В. Анненков, Е.Н. Даниловцева, А.И. Михалева.-http:/ www.catalvsis.ru/chem/medicina/4/45.html (5 мая 2005 г)

99. Норимов А.Ш. Влияние молекулярной массы сополимеров акриловой кислоты и N-винилпирролидона на их иммуноадьювантную активность /

100. A.Ш. Норимов, А.В. Некрасов, Н.Е. Сивук, С.Г. Завгородний и др. // Иммунология. 1983. - № 6. - С. 24-27.

101. О сниженных анафилактогенных свойствах аллергоида, коньюгированного с синтетическим полимером / Р.М Хаитов, В.Н. Федосеева, А.В. Некрасов,

102. B.И. Шустова и др. // Иммунология. 1996. - № 6. - С. 40-45.

103. Об итогах специфической профилактики острых респираторных заболеваний и гриппа В в г. Когалым в эпидемическом сезоне 1998-1999 г.г./ Н.Н.Иващенко, В.М.Якупов, Л.А.Надточей и др. // Иммунология.-2000.-№3.-С.25-26.

104. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека / Л.Г.Перетц.- Москва, 1955.-431 с.

105. Петров Р.В. Вакцины нового поколения на основе синтетических полиионов: история создания, феноменология и механизмы действия, внедрение в практику / Р.В.Петров, Р.М.Хаитов// Иммунология.-1998.-№5.-С. 4-11.

106. Петров Р.В. Иммуногенетика и искусственные антигены / Р.В.Петров, Р.М.Хаитов, Р.И.Атауллаханов,- Москва: Медицина, 1983.-256 с.

107. Петров Р.В. Искусственные антигены и вакцины /Р.В.Петров, В.А.Кабанов, Р.М.Хаитов // Иммунология.-1996.- №1.-С.5-23.

108. Ш.Петров Р.В. Коньюгированные полимер- субъединичные иммуногены и вакцины/ Р.В.Петров, Р.М.Хаитов// Вестник РАМН.-2003. 1. -С 10-14.

109. Петров Р.В. Поликлональная активация антителопродуцентов и клеток-супрессоров сополимерами акриловой кислоты и N-винилпирролидона / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, А.Ш. Норимов, A.M. Нажмитдинов и др. // Иммунология. 1981. - № 2. - С. 39-43.

110. Петров Р.В. Полностью синтетические пептид-полиионные комплексы обладают протективным эффектом при гриппозной инфекции / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, А.Л. Лиознер, Л.А. Фонина и др. // Иммунология. -1986.- № 1.-С. 29-31.

111. Петров Р.В.Искусственные антигены нового типа / Р.В.петров, Р.М.Хаитов // Журн. микробиол.-1982.-№12.-С.22-28.

112. Петровская В.Г. Адгезины энтеротоксигенных кишечных палочек: роль в патогенезе диарей и генетический контроль/ В.Г. Петровская, В.М. Бондаренко//Журн. микробиол.-1990.- №5.-С. 110- 116.

113. Петровская В.Г. Ранние этапы инфекционного процесса / В.Г. Петровская // Журн. микробиол. 1977. - № 4. - С. 11-19.

114. Пинегин Б.В. Дисбактериозы кишечника/ Б.В.Пинегин, В.Н. Мальцев, В.М.Коршунов.—М., 1984. — 144с.

115. Пинегин Б.В. Современные представления о стимуляции антиинфекционного иммунитета с помощью иммуномодулирующих препаратов//Антибиотики и химиотерапия.-2000.-№12.-С.З-8.

116. Повышение иммуногенности М- белка стрептококков группы а при конъюгации с синтетическим полиэлектролитом / Е.Н.Семенова, В.Ю.Санина, А.В.Некрсов, Н.Г.Пучкова и др. // Журн. микробиол.-1991.-№11.-С.56-59.

117. Повышение терапевтического действия пробиотиков / Карпунина Т.И., Горовиц Э.С., Чиненкова А.Н., Перевалов А.Я. // Журн. микробиол.- 1998.-№ 2.-С.104- 107. 500.2.,

118. Подволоцкая А.Б. Функциональная характеристика аутомикрофлоры кожи детей младшего школьного возраста в условиях техногенного загрязнения среды: Автореф. Дисс. . канд. биол. Наук/ Владивосток, 2000. 31 с.

119. Полиоксидоний- иммуномодулятор последнего поколения: итоги трехлетнего клинического применения / Р.В.Петров, Р.М.Хаитов, А.В.Некрасов и др. // Аллергия, астма и клиническая иммунология.-1999.-№3.-C.3-6.

120. Полиоксидоний- препарат нового поколения иммуномодуляторов с известной структурой и механизмом действия/ Р.В.Петров, Р.М.Хаитов, А.В.Некрасов, Р.И.Аттауллаханов и др.// Иммунология.-2000.-№5.-С.24-28.

121. Получение и иммунохимическое изучение антител к скрытым антигенным детерминантам гомологичного Ig G, появляющимся при расщеплении этого белка пепсином / Е.В.Фишевская, Л.М.Бартова, Т.В.Гневская, А.Я.Кульберг // Иммунология.-1981 .-№2.-С.50-53.

122. Производное поли-1,4- этиленпиперазина, обладающее иммуномодулирующей, противовирусной и антибактериальной активностью: Пат. 2073031 РФ/А.В.Некрасов, Н.Г.Пучкова, А.С.Иванова, Р.И.Атауллаханов и др., август1990.

123. Растения западного побережья озера Байкал. Приложение к полевому справочнику- фотоопределителю: Справочное пособие / С.Е.Калинович, В.Я. Кузеванов, Н.А.Пузанова и др.- Иркутск: Облмашинформ, 2002.-Ч.1.-32 с

124. Результаты полевого контролируемого испытания диагностикума эритроцитарного иммуноглобулинового сухого для выявления антигена вируса гепатита А / М.А.Горбунов, Н.М. Никитюк, Ю.Ф.Соловьев, Л.Г.Карпович и др.// Журн. микробиол.-1991.-№11.-С.43-45.

125. Савицкая К.И Современные представления о роли и составе кишечной микрофлоры у здоровых взрослых людей / К.И.Савицкая К.И, А.А.Воробьев, Е.Ф.Швецова // Вестник РАМН,- №2.-2002.-С. 50-52).

126. Сарап П.В. Значение микроэкологических нарушений флоры кишечника при перитоните / П.В. Сарап // Ежеквартальный медицинский журнал. -2002. № 6. - С. 34-38.

127. Свиридов Б.Д. Синтетические высокомолекулярные иммуномодуляторы на основе модифицированных сополимеров винилпирролидона / Б.Д. Свиридов, В.Ю. Скворцов, Р.И. Аттауллаханов, А.В. Некрасов и др. // Иммунология. 1976. - № 2. - С. 25-27.

128. Сибирякова Н.И. Биологическая активность пептидогликана бифидобактерий: Автореф. дис. .канд. биол. наук. М., 1992. - 22 с.

129. Система лимфоидной ткани пищеварительного тракта животных и перорально индуцированная иммунная толерантность / Б.Б. Першин, А.Б.Гелиев, Д.В.Толстов, Л.В.Ковальчук // Иммунология.-2000.-№6.-с.10-19.

130. Скворцов Н.Ю. Изучение иммуномодулирующих и токсических характеристик сополимеров винилпирролидона с кротоновой кислотой и виниламином / Н.Ю. Скворцов, Т.Б. Мастернак, Б.Д. Свиридов, Е.В. Панарин и др. // Иммунология. 1989. - № 3. - С. 63-65.

131. Современные представления о механизмах действия полиоксидония / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2005. - № 4. - С. 197-199.

132. Сокуренко Е.В. Исследование фибронектинсвязывания сальмонелл методом пассивной гемагглютинации / Е.В. Сокуренко, И.Б. Богин, Н.Н. Филатов, М.В. Шнар и др. // Журн. микробиол. 1991. - № 11. - С. 7-10.

133. Сополимеры 1- винилимидазола и акриловой кислоты для биосепарации / Даниловцева Е.Н., Анненков В.В., Михалева А.И., Трофимов Б.А.// Высокомолекулярные соединения.- Серия А.- 2004.-Т.46.- №2.-С.1-6.

134. Сохин А.А. Использование реакции пассивной гемагглютинации для определения иммунитета к вирусу кори / А.А. Сохин, В.Ф. Попов, Л.И. Слюсарь, Т.Н. Юнасова //Лаб. дело. 1986. - № 3. - С. 172-175.

135. Способность конъюгатов бактериального полисахарида с синтетическими полиэлектролитами давать иммунизирующий эффект / Р.В.Петров,

136. B.А.кабанов, Р.М.Хаитов, А.В.Некрасов и др.// Иммунология.-1983.- №5.1. C.40-43.

137. Тартаковский И.С. Современные подходы к диагностике атипичных пневмоний / И.С. Тартаковский // Клиническая Микробиология и антимикробная Химиотерапия. 2000. - № 2. - С. 33-41.

138. Телятьев В.В. Полезные растения Центральной Сибири/ Телятьев В.В. -Иркутск, 1985.-520 с.

139. Тринчина Е.В. Структурно-функциональный анализ участка рецепторного связывания адгезии Fimh уропатогенных штаммов Escherichia coli / Е.В. Тринчина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. -Т. 136, №10.-С. 430-434.

140. Туйгунов М.М. Молекулярные организмы взаимоотношений организма и патогенных энтеробактерий / М.М. Туйгунов, Э.Г. Габидуллин, А.В. Зурочка, О.В. Бухарин // Журн. микробиол. 2003. - № 4. - С. 23-27.

141. Уровень сывороточных антител к условнопатогенной микрофлоре как маркер процесса формирования вторичного иммунодефицита у детей / М.А.Стенина, Д.А.Воеводин, А.Ю.Скрипник, Г.Н.Розанова и др. // Журн. микробиол.-2001.-№5.-С.50-54.

142. Февралева И.С. Значение взаимодействия полиэлектролитов с липидным бислоем для повышения проницаемости клеточных мембран / И.С.Февралева, Ю.А.Ермаков, Р.И.Атауллаханов // Иммунология.-1996.-Ш.-С.66-69.

143. Физиология иммунной системы и экология/В.А.Черешнев, Н.Н.Кеворков, Б.А.Бахметьев, С.В. Ширшев и др. // Иммунология.-2001.-№3.-С.12-16.

144. Формирование микробиоценоза кишечника у новорожденных в норме и при антибиотикотерапии / Е.В.Трапезо, Ж.К.Урдабаева, В.М.Бондаренко, А.В.Родионов и др. // Журн. микробиол.-1990.-№10.-С.48-53.

145. Хаитов P.M. Аллерговакцина из пыльцы березы. Снижение анафилактогенных свойств / P.M. Хаитов, В.Н. Федосеева, А.В. Некрасов, Н.Г Пучкова и др. // Иммунология. 1997. - № 3. - С. 33-35.

146. Хаитов P.M. О сниженных анафилактогенных свойствах аллергоида, коньюгированного с синтетическим полимером / Р.М Хаитов, В.Н. Федосеева, А.В. Некрасов, В.И. Шустова и др. // Иммунология. 1996. - № 6. - С. 40-45.

147. Хаитов P.M. Отечественные иммунотропные лекарственные средствапоследнего поколения и стратегия их применения/ Р.М.Хаитов, Б.В.пинегин, Т.М.Андронова// Лечащий врач.-1998.-№4.-с.46-51.

148. Хаитов P.M. Современные представления о механизмах действия полиоксидония / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2005. - № 4. -С. 197-199.

149. Чахава О.В. Гнотобиология/ О.В. Чахава.— М.: Медицина, 1972. 199 с.

150. Чахава О.В. Микробиологические и иммунологические основы гнотобиологии/ О.В.Чахава, Е.М. Горская, С.З. Рубан.-М.: Медицина, 1992.-С. 160.

151. Чекотило A.M. Реакция непрямой гемагглютинации в диагностике склеромы / A.M. Чекотило // Лаб. дело. 1969. - № 9. - С. 555-557.

152. Чхаидзе И.Г. Корректирующее действие антител при экспериментальном кишечном дисбактериозе / В.Г. Лиходед, Е.А.Лобова, М.Ю.Яковлев // Журн. микробиол.- 1998.-№ 4.-С.12- 14.

153. Шварцман Я.С. Местный иммунитет/ Я.С.Шварцман, Л.Б.Хазенсон.- Л.: Медицина, 1978. 223 с.

154. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание/ Б.А. Шендеров. М.: Издательство ГРАНТЪ, 1998. - Т. 1-3.

155. Эволюция лабораторной диагностики сифилиса: Комментарий к Приказу Минздрава РФ «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» от 26 марта 2001 г. № 87 // Медицина. 2001. - 12 апреля. - С. 4.

156. Янькова В.И. Разработка и характеристика эритроцитарных антигенных диагностикумов для выявления кишечного иерсиниоза / В.И. Янькова, С.Н. Бениова, Л.А. Андреева, М.Ф. Дзадзиева // Журн. микробиол. 1991. - № 4. - С. 83-84.

157. Adhesion of bacteria to the human small-intestinal mucose- a scanning electron-microscopic study / P. Horstedt, A.Danielsson, H.Nyhlin. et al.// M Scand. J. Gastroenterol. 1989. - Vol.24.- №7. - P.877-885.

158. Adhesion of Bifidobacterium Spp. to Human Intestinal Mucus / Fang He, Arthur C. Ouwehand, Hideo Hashimoto, Erika Isolauri et ol.// Microbiol. Immunol.-2001.- Vol.45 (3).-P. 259-262.

159. Adjuvant activity of the cell wall of Bifidobacterium infantis for in vivo immune responses in mice/ K. Sekine, E.Watanabe-Sekine, T.Toida, T.Kasashima end oil //Immunopharmacol Immunotoxicol.- 1994.- Vol. 16(4).-P.589-609.

160. Analysis of antitumor properties of effector cells stimulated with a cell wall preparation (WPG) of Bifidobacterium infantis / K. Sekine, J.Ohta, M. Onishi, T.Tatsuki // Biol. Pharm. Bull.-1995.- Vol .18(1).- P.148-153.

161. Anraka J. Transport and utilization of amino acids by bacteria // Microorganisms and Nitrogen Sourses /Ed. J.W. Payne. N.Y.: Jolin Wiley a. Sons. - 1980. - Part I. - P.l-8.

162. Antitumor effect of cytosine deaminase/5-fluorocytosine suicide gene therapy system mediated by Bifidobacterium infantis on melanoma / Cheng Y.I., Ying HUANG,

163. Zhi-ying GUO, Shu-ren WANG / Acta Pharmacologica Sinica.- 2005.- Vol. 26 (5).-P. 629-634.

164. Antimicrobial peptides are among the antagonistic metabolites produced by Bifidobacterium against Helicobacter pylori / Collado M.C., Gonzalez A., Gonzalez R., Hernandez M. and oil //Int. J. Antimicrob. Agents.- 2005.-P.25(5).-Vol.-385-591.)

165. Beers R. F., Bassett E. G. CeU membrane receptors for viruses, antigens and antibodies polypeptide hormones, and small molecules. — New York: Raven Press, 1976. —540 p.

166. Berg R.D. Bacterial translocation from the gastrointestinal tract // Trends Microbiol. 1995. - Vol.3, №4. - P.149-154.

167. Berg R.D. Immune responses of specific pathogen-free and gnotobiotic mice to antigens of indigenous microorganisms / R.D.Berg, D.C. Savage // Infect. Immunity. -1975. Vol.11. - P.321-329.

168. Bianchi A.T.J. Parenteral vaccination of mice and piglets with F4+ E.coli supresses the enteric anti-F4 response upon oral infection // Vaccine.-1996.-№ 14.-P. 199-206.

169. Binenstook J. Mucosal barriers functions // Nutr. Rev. 1984. -Vol.42, №3. -P.105-108.

170. Bohnhoff M., Miller СР., Martin W.R. Resistance of the mouse's intestinal tract to experimental salmonella infection. II. Factors responsible for its loss following streptomycin treatment // J. Exp. Med. 1964. -Vol.120, №5. - P.817-828.

171. Boman H.G. Innate immunity and normal microflora/ H.G. Boman // Immunological Reviews. — 2000. — Vol. 173. — P. 5-16.

172. Collado M.C. Production of bacteriocin-like inhibitory compounds by human fecal Bifidobacterium strains /M.C.Collado, M.Hernandez, Y Sanz // J. Food Prot.- 2005.-P.68(5).-Vol. 1034-1040.

173. Costerton J.W. Phenomena of bacterial adhesion/ J.W. Costerton, T.J. Marrie, K.J. Cheng. Bacterial adhesion (eds. Savage D.C., Fletcer M.). Plenum Publ. Corporation, 1985.

174. Cummings J.H., Englyst H.N. Fermentation in the human large intestine and the available substrates // Am. J. Clin. Nutr. 1987. -Vol.45. - P.1243-1255.

175. De Simone С. Effect of Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus acidophilus on gut mucosa and peripheral blood B-lymphocytes / C. De Simone // Immunopharmacol., Immunotoxicol.-1992.-Vol. 14, № 1-2.-P. 331-340.

176. Deriabin P.N. The specificity of erythrocyte staphylococcal diagnostic agents in relation to the presence of protein A in sensitin preparations // P.N. Deriabin, B.V, Karal'nik // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. -1988.-Vol.ll.-P.85-89.

177. Evaldson G. The normal human anaerobic microflora / G. Evaldson, A. Heimdahi, L.Kager, C.E. Nord // Scand. J. Infect. Dis. 1982. - Vol.35, Suppl. -P.89-115.

178. Falcao R.P. Human blood lymphocyte subpopulations from birth to eitht gears / R.P. Falcao // J.Clin Exp.Immunol. 1980. - V.39. - P. 203-207.

179. Feliu Jordi X. An optimized ultrasomcation protocol for bacterial celf disruption and recovery of 6-galactosidase fusioi proteins / X. Feliu Jordi, Antonio Villaverde // Biotechnol. Techn.-1994.-Vol. 8.-N 7. -C.509-514.

180. Fleming S.E. Volatile fatty acids: their production, absorption, utilization and roles in human health / S.E.Fleming, D.S Arce/ / Clin. Gastroenterol. -1986. -Vol.15, №4.-P.787-814.

181. Freter R. Function of various intestinal bacteria in converting germfree mice to the normal state / R.Freter, G. Abrams // Inf. and Immunity. -1972. Vol.6, №2. -P. 119-126.

182. Fukushima Y., Kawata Y., Нага H. et al. Effect of a probiotic formula on intestinal immunoglobulin A production in healthy children // Int. J. Food Microbiol. 1998. - Vol.42, №1-2. - P.39-44.

183. Functional food science and gastrointestinal physiology and function // Salminen S., Bouly C., BoutronRuault M.C., Cummings J.H. and oil // Br. J. Nutr.-1998.-Vol.80.-P. 147-171.

184. Gavini F., Pourcher A.M., Bahaka D. Le genre bifidobacterium. Classification, identification, aspects critiques. Med. Mai. Infect.- 1990.-Vol. 20.-P.53 62.

185. Gibbons R.J. Bacterial adhesion to oral tissues- a model for infectious diseases // J. Gen. Microbiol. 1989. - Vol.135. - P.l 167-1173.

186. Gram-positive cell walls stimulate synthesis of tumor necrosis factor alpha and interleukin-6 by human monocytes / D.Heumann, C. Barras, A. Severin et al. // Infect.Immunol.-1994.-Vol.62.- 2715-2721.

187. Holdeman L. Human fecal flora: variation in bacterial composition with in individuals and possible effect of emotional stress/ L. Holdeman, I. Good, W. Moore // V. Appl. a. Env. Microbiol.- 1976. № 3. - P. 359 - 375.

188. Hood S.K. An electron-microscopic study of the adherence of Lactobacillus acidophilus to human intestinal cells in vitro / S.K. Hood, E.A. Zottola // Food Microstruct. 1989. - Vol.8.- №1. - P.91-97.

189. Hoover D.G. Bifidobacteria: activity and potential benefits // Food technology. -1993. Vol.47, №6. - P.l20-124.

190. Hovi T. Proliferation of human periferal blood lymphocytes induced by A23187, a streptomyces antibiotic / T. Hovi, R. C.Allison, S. C. Williams // Exp. Cell/ Res.-1976. Vol. 97.-P. 92-100.

191. Immune modulation of blood leucocytes in human by lactic acid bacteria: criteria for strain selections/ E. J. Schifrin., D.Brassart, A. L. Servin et al. // Am. J. Clin. Nutr. 1997. - Vol. 66.-№2.- P. 515-520.

192. Ishibashi N. Bifidobacteria: research and development in Japan / N. Ishibashi, S. Shimamura// Food technology. 1993. - Vol.47, №6. - P.126-136.

193. Jwata M. The presence of plasmids in Bifidobacterium breve / M.Jwata, T. Morishita// Lett. Appl. Microbiol. 1989. - Vol.9., №5. - P.165-168.

194. King С A. Gangliosides as possible membrane receptors for cholera foxin. — In: Surface membrane receptors. Interface between cells and their environment.

195. Eds. R. A. Bradshaw, W. A. Frazier. — New York—London: Plenum press, 1976, p. 169—178.

196. Koblin B. Overview of gut flora and probiotics / B. Koblin, T. Townsend, J. Aver // J.Publ.Hith. 1989. - № 79. - 1279.

197. Kontiokari T. Antiadhesive effects of xylitol on otopathogenic bacteria/ T. Kontiokari, M. Uhari, M. Koskela // Clinical Microbiol, and infection.-1997.-Vol.4.-Suppl. 2. P. 195.

198. Laemmli U.K. Cleavage of proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature.-1970.-Vol. 227. -P. 680—685.

199. Lankaputhra W.E. Antimutagenic properties of probiotic bacteria and of organic acids / W.E. Lankaputhra, N.P. Shan // Mutation Research. — 1998. — Vol. 397 (2). —P. 169 — 182.

200. Le Chevallier M.W. Inactivation of biofilm bacteria/ M.W. Le Chevallier, D. Cawthen, R.G. Lee // Appl. Environm. Microbiol. 1988. - vol. 54. - N 10.

201. Lee A, Ogilvy B.M. The intestinal mucos barrier to parasites and bacteria// Adv. Exp. Med. Biol. 1982. - Vol.144. - P. 247-248.

202. Lebedeva TN. Antigenic diagnosticum for determining antibodies in candidiasis //Lab. Delo.-1981.-Vol.10.-P.620-621.

203. Loor F., Forni L., Pernis B. The dynamic state of the lymphocyte membrane. Factors affeating the distribution and turnover of surface immunoglobulins / F.Loor, L.Forni, B. Pernis. Eur. J. Immunol.-1972.-Vol. 2.-P. 203—212.

204. Luckey T.D. Gnotobiology is ecology // Amer. J. Clin. Nutr. -Vol. 23.-№ll.- P-1533-1540.813

205. Mahida Y.R. Antimicrobial peptides in the gastrointestinal tract/ Y.R. Mahida, F. Rose, W.C. Chan // Gut. 1997. - Vol.40.- P. 161- 163.

206. Mainvo V. C.The role of calcium ions in initiating transformation of lymphocytes / V. C. Mainvo, N. M Green, M. I. Crumpton //Nature.- 1974.-Vol. 251.- P. 324-327.

207. Monoassociation with Lactobacillus acidophilus UFV-H2b20 stimulates the immune defense mechanisms of germfree mice / E.Neumann, M.A.Oliveira, C.M.Cabral et al // Braz. J. Med. Biol. Res. 1998. - Vol. 31.-№12. - P. 15651573.

208. Mutai M. Factor's influencing bacterial colonization/ M. Mutai, Y. Kawai-Recent advances in germfree research (eds. Sasaki S. Et al.). Tokai Univer. Press, 1981.-325 p.

209. Nagura H. Mucosal defense mechanism and secretory IgA system // Bifidobacteria and Microflora. 1990. - Vol.9, №1. - P. 17-25.

210. Namba Y. Effect of oral administration of lysozyme or digested bacterial cell walls on immunostimulation in gunea pigs / Y. Namba, Hidaka Y., T.Morimoto //Infect Immun.- 1981 Vol.31.-P.580-583.

211. Oral probiotics prevent necrotizing enterocolitis in very low birth weight neonates / Bin-Nun A, Bromiker R, Wilschanski M, Kaplan M. and oil // J. Pediatr.- 2005.- P.2.-Vol. 192-196.

212. Parry S.H. Immunological aspects of cell membrane adhesion demonstrated by porcine enteropathogenic E.coli/ S.H. Parry, P. Porter // Immunology.-1978.-№ 34.-P.41-49.

213. Perdigon G. Lactic acid bacteria and their effect on the immune system /G. Perdigon, R. Fuller, R. Raya // Curr.Issues Intest.Microbiol.-2001.-Vol.2(l).-P.27-42.

214. Petit I.F. Structure chimique de la paroi des mycobacteries // Ann.microbiol. -1978. Vol.129. -№ 1. - P.39-48.

215. Pimsler M., Sponsler -T.A., Meyers W.M. Immunosuppressive properties of the soluble toxin from Mycobacterium ulcerans // J.Infec.Diseases. -1988. -Vol.157. № 3. - P.577-580.

216. Production of an diagnostic erythrocyte agent from Pseudomonas aeruginosa exotoxin A / S.A. Egizova, P.N. Deriabin, B.V. Karal'nik, A.Sh. Kanapina // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol.-1988.-Vol.l2.-P.38-41.

217. Protection against influenza virus infection of mice fed Bifidobacterium breve YIT4064 / H. Yasui, J. Kiyoshima, T. Hori et al.//Clinical & Diagnostic Laboratory Immunology. — 1999. — Vol. 6, Suppl. 2. — P. 186— 192.

218. Protein measurement with the Folin phenol reagent / О. H. Lowry, N. J.Rosenbrough, A. L.Farr, R. J. Randell // Biol. Chem.-1951.-Vol.l93.-P.265-275.

219. Purification and characterization of D-Xylose Isomerase from Bifidobacterium adolescentis / Y.Kawai, H. Konishi, H. Horitsu et al. / Biosci. Biotechnol. Biochem. 1994. - Vol.58, №4. - P.691-694.

220. Resch K. Membrane associated events in lymphocyte activation. — In: Receptors and recognition. Ser. A. Eds. P. Cuatrecasas, M. E. Greaves. — London: Chapman and Hall, 1976, Vol. 1.-P.59-117.

221. Rolfe R.D. The role of probiotic cultures in the control of gastrointestinal health //J. Nutrition. 2000. - Vol.130, Suppl.2. - P.396-402.

222. Ruben F. Normal alimentary tract flora of human //Amer.J.Epidemiol.- 1979.-Vol.108.-P. 145-149.

223. Rusch V.C Okologische Aspekte der Dysbiosetherapie // Mikrobiol. Ther.-1978. -Vol.1.-P. 18 — 31.

224. Saliers AA. Bacteroides of the human lower intestinal tract // Ann. Rev. Microbiol. 1984. - Vol.38. - P.293-313.

225. Sarazin E. Role of fimbriae for actively acquired immunity against porcine enterotoxigenic E.coli / E. Sarazin, H.U. Bertschinger // Veterinary Microbiol.-1997.-Vol. 54.-P. 133-144.

226. Sato S. Comparative distribution of immu-noglobulin containing cells in stomach, intestine and assotiated lymph nodes of cattle / S.Sato, K.Ogimoto, Y.Nakai // Int. J. Vet. Sci. 1990. - Vol.52. - №1. - P.63-70.

227. Savage D.C. The normal human microflora composition/ D.C. Savage. The regulatory and protective role of the normal microflora (eds. Grubb R. Et al.). -M-Stocton Press, New York. - 1989.

228. Schleifer K.M. Peptidoglycan types of bacterial cell walls and their taxonomic implications / K.M Schleifer, O. Kander // Bact. Rev.- 1972.-Vol. 36 (4).-P. 428- 430.

229. Serological diagnosis of tuberculosis in children by using erythrocyte preparations /E.A.Stepanova, A.I.Odintsov, S.N. Golovacheva, M.V. Dulatova et ol // Probl. Tuberk.- 1993.-Vol.2.-P.24-27.

230. Shuratov I.Kh. The improvement of the immunodiagnosis of para-influenza infection based on erythrocyte reagents / I.Kh. Shuratov, B.V. Karali'nik, T.D. Ukbaeva // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol.- 1992.- Vol.4.-P.37-39.

231. Simon G.L. Intestinal flora in health and disease / G.L.Simon, S.L Gorbach// Gastroenterology. 1984. - Vol.86. - P.174-193.

232. Sjostedt S. The upper gastrointestinal microflora in relation to gastric diseases and gastric surgey // Acta Chirurgica Scand. Suppl. -1989. -Vol.551. -P.7-57.

233. Systemic immunityenchanting effects in healthy subjects following dietary consumption of the lactic acid bacterium Lactobacillus rhamnosus HN001/ Y. H. Sheih, B. L.Chiang, L. H. Wang et al. //J. Am. Coll. Nutr. 2001. - Vol. 20.-№2.-P. 149-156.

234. Use of a polyvalent erythrocyte diagnostic agent for determining antibodies to Pseudomonas aeruginosa in clinical practice / I.A. Aleksandrova, T.I. Titova, A.D. Aleksandrov , A.F. Moroz // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol.-1989.-Vol.l.-P.46-50.

235. Van der Waaij D. Evidence of immunoregulation of the composition of intestinal microflora and its practical on sequences // Eur.J. Clin. Microbiol. -1988.-Vol. 7(1).-P. 101-106.

236. Van der Waaij D. The immunoregulation of the intestinal flora. Consequences of decreased thymus activity and broad-spectrum antibiotic treatment/ D. Van der Waaij // Zbl. Bact. Suppl. 1984. - Vol. 13.-P. 234-238.

237. Vanderhoof J.A. Use of Probiotics in Childhood Gastrointestinal Disorders/ J.A. Vanderhoof, R.J. Young // J. of Pediatric Gastro and Nutrition. 1998. - Vol. 27.-№3.-P. 323 -332.

238. Weinbach R. Die Vermendbarkeit formolbehandelter Erytrocyten als Antigentrager inder inderecten Haemagglutination/ R. Weinbach Schweiz. Z. allerg. Path. - 1959. - Vol. 22. - P. 1-8.

239. Woolverton C.J. The immunoregulation of the intestinal flora/C.J. Woolverton, L.C. Holt, D. Mitshell, R.B. Sartor//Vet.Immunol.Immunopathol.-1992.-Vol.34.-P.127-138.

240. Yasui H., Mike A., Chlwaki M. Immunogenicity of Bifidobacterium breve and change in antibody production in Peyer's patches after oral administration // J. of Dairy Sci. 1989. - Vol.72. - P.30-35.

241. Yildirim Z. Purification, amino acid sequence and mode of action of bifidocin В produced by Bifidobacterium bifidum NCFB-1454 / Z. Yildirim, D.K. Winters, M.G. Johnson//J. Appl. Microbiol. 1999. - Vol.86, №1. - P.45-54.

Информация о работе
  • Юринова, Галина Валерьевна
  • кандидата биологических наук
  • Улан-Удэ, 2005
  • ВАК 03.00.23
Диссертация
Совершенствование технологии приготовления эритроцитарных иммунодиагностикумов для РПГА на основе клеточных фракций бифидобактерий с использованием синтетических полимеров - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно
Автореферат
Совершенствование технологии приготовления эритроцитарных иммунодиагностикумов для РПГА на основе клеточных фракций бифидобактерий с использованием синтетических полимеров - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации
Похожие работы