Совершенствование системы обеспечения безопасности работ с вирусами I-II групп патогенности

Ставский, Евгений Александрович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Совершенствование системы обеспечения безопасности работ с вирусами I-II групп патогенности
ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Автореферат диссертации по теме "Совершенствование системы обеспечения безопасности работ с вирусами I-II групп патогенности"

003453286

На правах рукописи

СТАВСКИЙ Евгений Александрович

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СИСТЕМЫ ОБЕСПЕЧЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ РАБОТ С ВИРУСАМИ 1-Н ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ

03.00.06 - вирусология 14.00.30 - эпидемиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

1 /. '.-пи ч^ч

Кольцове-2008

003453286

Работа выполнена в Федеральном Государственном Учреждении Науки Государственном Научном Центре Вирусологии и Биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор ДРОЗДОВ Илья Геннадиевич Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор ПОКРОВСКИЙ Андрей Георгиевич

доктор биологических наук, профессор ЛОКТЕВ Валерий Борисович

доктор медицинских наук ТОПОРКОВ Владимир Петрович

Ведущая организация: Федеральное государственное учреждение

«48 Центральный научно-исследовательский институт Министерства обороны

Российской Федерации»

Защита состоится 6 февраля 2009 г. в 9 .00 час на заседании диссертационного совета Д 208.020.01 при Федеральном Государственном Учреждении Науки Государственном Научном Центре Вирусологии и Биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Российской Федерации (ГНЦ ВБ "Вектор", п. Кольцове Новосибирской области, 630559, тел. 383-336-74-28).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНЦ ВБ "Вектор".

Автореферат разослан | октября 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор биологических наук

Л. И. Карпенко

Актуальность проблемы. Проблема биологической безопасности вызывает все большую тревогу у населения, политиков и ученых в связи с реальным ростом биологических угроз. Биологическая безопасность включает широкий круг вопросов, решение которых в современных условиях становится частью национальной безопасности как необходимого условия устойчивого развития страны. При этом согласно национальным нормативно-методическим документам под биологической безопасностью понимают систему медико-биологических, организационных и инженерно-технических мероприятий и средств, направленных на защиту работающего персонала, населения и окружающей среды от воздействия патогенных биологических агентов /СП 1.2.731-99/.

Среди биологических факторов дестабилизации биологической безопасности Российской Федерации и других стран мира определяющее значение имеет инфекционная патология / Кондрик Е. К. и др., 2003; Онищенко Г. Г. и др., 2006. К началу XXI века около 70% всех регистрируемых болезней человека относились к инфекционным болезням и более 50 млн. человек на планете ежегодно погибали от инфекций /Воробьев А.А. 2002/. Среди инфекционной патологии особую значимость приобрели особо опасные инфекции, новые и вновь возникающие инфекции /Воробьев А.А. 2002; Львов Д. К., 2002; Раевский К.К., 2002; Ефременко В. И. и др., 2002; Кондрик Е. К. и др., 2003; Toungoussova О. S., et. al., 2006/. В последние десятилетия XX века впервые были выявлены такие заболевания, как легионеллез, геморрагические лихорадки Эбола, Марбург, JIacca, геморрагической лихорадки с почечным синдромом, СПИД, прионовые заболевания и др. /Лебединский В. А., Гарин Н.С., 1988; Пшеничнов В.А., и др., 1992; Воробьев А.А. 2002; Раевский К. К., 2002; Ефременко В. И. и др., 2002; Rajendra A, Wong J. В., et. al., 2007/. Произошла активизация туляремии /Ефременко В. И. и др. 2002; Мельниченко П.П. 2002; Раевский К.К, 2002; В. В. Никифоров, Г. Н. Кареткина, 2007; ЗНиСО, 2008, № 1/. С 1999 г. наблюдается устойчивый рост заболеваемости лихорадки Западного Нила /Ефременко В.И. и др. 2002; Мельниченко П.П. 2002; Раевский К.К, 2002; Галимзянов Х.М., Малеев В.В., Горелов А.В. и др., 2006/. Отмечены эпидемии ^типичной пневмонии и эпизоотии гриппа птиц типа А подтипа H5N1 в Юга- восточной Азии. С 2005 г. в ряде регионов России регистрировалась массовая гибель птиц от вируса гриппа птиц типа А подтипа H5N1, занесенного перелетной птицей из Китая /Ефременко В. И. и др. 2002; Львов Д. К. 2002; Мельниченко П. П., 2002; Раевский К. К, 2002; Онищенко Г.Г., 2002; Онищенко Г. Г. и др., 2005/. В июле 2007 г. в городе Верхняя Пышма Свердловской области возникла эпидемическая вспышка легионеллеза со смертельными исходами среди заболевших людей.

В настоящее время в мире сложилась крайне не благоприятная ситуация с заболеваемостью так называемыми социально-значимыми инфекциями (гепатиты В, С, ВИЧ/ СПИД, туберкулез). По некоторым оценкам в мире уже инфицировано вирусным гепатитом В около 2,0 миллиардов человек /Онищенко Г. Г., Дементьева Л. А., 2003; Kidd-Ljunggren К, et. al., 2004; Баяндин Р. Б. и др., 2004; Бондаренко А. Л., 2005; Rajendra A, Wong J. В. , et. al., 2007/. В Российской Федерации число больных хроническим гепатитом В составляет 7-8 млн.

человек / Баяндин Р. Б. и др., 2004; Бондаренко А. Л., 2005; КочневаТ. В. и др., 2005; Баяндин Р..Б. и др., 2007; ЗНиСО, № 6, 2007/. К апрелю 1993 г. 1/3 населения планеты уже была инфицирована туберкулезом /Волкова К. И. и др., 2001; Петрухина М. И. и др., 2003; Кондратенко Т. А. и др., 2007/ при этом глобальное ухудшение эпидемической ситуации по туберкулезу сопровождается широким распространением лекарственно-устойчивых микобактерий туберкулеза / Волкова К. И. и др., 2001; Surikova О. V. et. al., 2005; Surikova О. V. et. al., 2005; Drobniewski F., et. al., 2005; Mokrousov I., et. al., 2005;Сивков, A. Ю и др., 2006; Toungoussova О. S., et. al., 2006; Воронкова, О. В. и др, 2007/. По экспертным оценкам Объединенной Программы ООН по ВИЧ/СПИД и ВОЗ в мире в настоящее время насчитывается более 40 миллионов ВИЧ - инфицированных, из них только за последние 2 года заразилось ВИЧ 11,5 млн. человек, что составляет почти 30% от всех случаев, зарегистрированных с начала эпидемии. Более 22 млн. человек уже умерли от ВИЧ/ СПИДа. Россия с 2002 года находится в стадии генерализованной эпидемии ВИЧ-инфекции /Волкова К. И. и др., 2001; ЗНиСО, № 7, 2007/.

В условиях возросших миграционных и Туристических потоков в мире, существуют реальные угрозы трансграничного переноса между странами различных вышеуказанных видов возбудителей инфекций, а также ранее не известных, лекарственно-устойчивых или с измененными патогенными свойствами. Молекулярно-биологические работы по выделению и изучению РНК и ДНК патогенных возбудителей, получению ГММ и их применению также требуют решения вопросов обеспечения биологической безопасности /Кондрик Е. К. и др., 2003/. При этом актуальной проблемой является оценка биологических рисков интродукции ГММ для закрытых и открытых систем /Сорокулова И. Б. и др„ 1997; Белявская В. А. и др., 2000; 2001/, в том числе, по оценке отдаленных последствий интродукции ГММ в открытые системы /Ставский Е. А. и др., 2004; 2006; Stavskiy Е. A. et al., 2006/.

Кроме этого человечество относительно недавно столкнулось с новой угрозой - биотеррористическими атаками / J. В. Tucker, 1999; Свальновы В. и В. 2001; Ефременко В.И. и др., 2002; Онищенко Г Г., 2002; Онищенко Г.Г. и др., 2003; Кондрик Е. К. и др., 2003/. Биотерроризм может вызвать значительные людские, политические, а также огромные экономические потери /Kaufmann А. F., et. al., 1997; Воробьев А. А. и др., 1997; Henderson D. A. et. al., 1999; Онищенко Г. Г. и др., 2003; Кондрик Е. К. и др., 2003; Miller Ju., 2004/. В связи с этим рядом исследователей были предприняты шаги по оценке вероятности использования некоторых возбудителей инфекционных болезней в качестве бактериологического оружия /Воробьев А. А. и др., 1997; Atlas R. M., 1998; Воробьев А. А., 2001; Покровский В. И., 2002; Онищенко Г. Г., 2002; Онищенко Г. Г. и др., 2003/. Известны также попытки моделирования различных сценариев актов биотерроризма для прогнозирования и оценки масштабов их последствий в интересах разработки адекватных мер предупреждения или ликвидации их последствий / Г. Н. Хлябич, 1979; O'Toole Т., 1999; O'Toole T. et al., 2002/. В интересах противодействия почтовому биотерроризму рядом исследователей

оценивалась возможность использования пучка ускоренных электронов для обеззараживания образцов, зараженных бактериями, /Ауслендер В. JI. и др., 2002/. 13 отношении образцов, зараженных вирусами, в известной литературе нет сведений.

Вышеизложенные факты обусловили признание проблемы обеспечения биологической безопасности, в целом, в качестве важнейшего направления укрепления национальной безопасности Российской Федерации. Проведение активных действий ко изучению возбудителей инфекционных заболеваний в интересах развития медико-биологических, организационных, инженерно-технических мероприятий и средств, направленных на защиту работающего персонала, населения и окружающей среды от воздействия патогенных биологических агентов / Wedum A.G., 1975; Вотяков В.И. и др., 1984; Whitehead J. Е. М„ 1985; Дроздоз С. Г. и др., 1987; Richmond J.Y. et al., 1994/, требует разработки и постоянного совершенствования нормативных документов, рабочей инструкгив-но-методической документации, а также системы обучения персонала. К 90-м годам XX пека, действующие в Российской Федерации инструктивно-методические документы, к сожалению, устарели /Бургасов П. Н., 1972; 1973; 1974; 1975; 1976; Вотяков В. И. и др., 1984; 1987/, а для персонала вирусологических лабораторий до настоящего времени не разработаны соответствующие учебные программы.

Имеющиеся в доступной литературе данные об устройстве, инженерно-технических системах биобезопасности, о методах организации и проведения работ с патогенами, средствах индивидуальной защиты персонала в микробиологических лабораториях устарели / Вотяков В. И. и др., 1984; 1987; Дроздов С. Г. и др., 1987; Richmond J.Y. et al., 1994/. Материалы о современном состоянии указанных вопросов в новейших зарубежных лабораториях с высшим уровнем биологической безопасности, а также данные о тенденциях в области обеспечения биологической безопасности в этих лабораториях мало доступны, носят разрозненный характер и мало информативны. Однако они необходимы для организации и проведения работ с патогенами в российских лабораториях согласно современным требованиям. В доступной литературе отсутствуют сведе-

ния о защитной эффективности нетканых материалов /Азейштейн Э.М., 2005/ и самой защитной спецодежды медицинского назначения разового использования, изготовленной на их основе.

Таким образом, высокий общественный и индивидуальный уровень опасности вирусов I-II групп патогенности и вызываемых ими инфекций, способных к эпидемическому и пандемическому распространению, риск высвобождения из лабораторий искорененных, искореняемых или редких особо опасных инфекций (вирусы оспы, полиомиелита, Марбург, Эбола, бактерии чумы и т.п.), интенсификация и рост объемов трансграничных людских и материальных потоков, недостаточный уровень разработки или отсутствие нормативной и инст-рукгивно-методической документации, регламентирующей работы с вирусами I-II групп патогенности, необходимость гармонизации и унификации национальных руководств по биобезопасности с международными, необходимость совершенствования средств защиты персонала и технического устройства российских медико-биологических лабораторий до современного уровня зарубежных, несовершенство программ обучения персонала, работающего с особо опасными вирусами, угрозы биотерроризма с применением указанных вирусов явились актуальным основанием для проведения данной исследовательской работы.

Целью настоящей работы явилось оценка современного состояния биологической безопасности в микробиологических лабораториях и совершенствование национальной системы обеспечения безопасности работ с вирусами I-II групп патогенности.

В связи с этим задачами исследований являлись:

1. Сравнительный анализ современных тенденций в развитии теории и практики совершенствования систем обеспечения биологической безопасности при работах с вирусами I-II групп патогенности на примере микробиологических лабораторий с высшим уровнем биобезопасности Швеции, США, Франции, Швейцарии и России.

2. Разработка нормативно-методических документов федерального уровня, регламентирующих требования биологической безопасности при работах с вирусами 1-П групп патогенности.

3. Разработка инструктивно-методической документации внутри объектового уровня, детально регламентирующей обеспечение требований биобезопасности при работах с вирусами I-II групп патогенности.

4. Разработка методов безопасного проведения работ с вирусами I-II групг патогенности, средств защиты и контроля систем обеспечения биобезопасности этих работ.

6. Разработка мер предупреждения и защиты персонала крупного национального вирусологического и биотехнологического опасного биологического объекта (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор"), населения прилегающей к нему территории (р. п. Кольцово, г. Новосибирска) от природных, техногенных угроз биологического характера и актов биотерроризма:

- организация и проведение комплекса экстренных карантинных и обсервационных мероприятий в ГНЦ ВБ "Вектор" при случае подозрительном на завозную легочную чуму;

- анализ аварий и аварийных ситуаций при работах вирусами 1-И групп патоген-ности;

- разработки комплекса противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий по предупреждению и ликвидации последствий чрезвычайных ситуаций и аварий при выполнении работ с возбудителями 1-П групп патогенности, санитарной охране территории, прилегающей к ГНЦ ВБ "Вектор" от завоза, возникновения и распространения карантинных инфекций, а также последствий актов биотерроризма;

- экспериментальная оценка обеззараживания ускоренными электронами образцов и предметов внешней среды, контаминированных или потенциально конта-минированных вирусами.

7. Оценка перспектив применения математического моделирования некоторых сценариев возможных биологических терактов в интересах прогнозирования, разработки мер противодействия и ликвидации их последствий.

8. Разработка программ обучения персонала, привлекаемого к работам с вирусами 1-П групп патогенности.

Научная новизна, полученные результаты.

1. Проведено сравнительное изучение Российских Санитарных Правил с Руководствами по биобезопасности США и ВОЗ, регламентирующими работу с патогенами в медико-биологических лабораториях. Проведен анализ практики применения основных положений указанных руководств в современных и новейших лабораториях с высшим уровнем биобезопасности США, Швеции, Франции, Швейцарии и России. Создана информационная база сравнения национальных и международных руководств по биобезопасности, а также устройства, оснащения, организации и проведения работ с патогенами в отечественных и зарубежных лабораториях. На ее основе выявлено более 20 возможных направлений гармонизации и унификации национальных и международных правил по биобезопасности, а также определены тенденции совершенствования устройства лабораторий и биологической безопасности в них.

2. Получены экспериментальные данные, позволившие сформулировать правила, регламентирующие работу с вирусами 1-Й групп патогенности:

- впервые показана адекватность применения аэрозолей ДОФ и турбинного масла для оценки эффективности фильтров тонкой очистки воздуха с помощью разработанной мобильной установки;

- установлено негативное воздействие на деятельность сердечно-сосудистой системы, органов дыхания и температурный статус у персонала, работающего в ИСИЗ, что привело к необходимости нормирования продолжительности работы в них, а также совершенствованию системы подбора кадров и оценки их пригодности к работам в ИСИЗ;

- продемонстрирована обеззараживающая активность дезинфицирующих и ли-зирующих растворов, использующихся для получения препаратов особо опасных вирусов с целью их выноса из "заразной" зоны.

- определена динамика инактивации вируса натуральной оспы растворами перекиси водорода и едкого натра;

- определен уровень обсеменённости крови, слюны и экскретов экспериментально инфицированных филовирусами животных. Установлено, что наибольший титр вируса Марбург наблюдался в крови (7,0-9,5 lg ЛД50). В слюне, моче и кале концентрация вируса была существенно ниже - на уровне 2,3 - 3,5 lg ЛД50, при этом титр вируса в моче и кале был одинаков и достоверно превышал содержание вируса в слюне. Показано, что наибольшую угрозу заражения для персонала, работающего с филовирусами, представляет кровь инфицированных ими животных.

3. Разработан комплект инструктивно-методических документов, регламентирующих безопасное проведение работ с вирусами I-II групп патогенности в крупном национальном вирусологическом и биотехнологическом опасном биологическом объекте (ГНЦ ВБ "Вектор"), а также усовершенствованы внутри объектовые системы контроля обеспечения биобезопасности указанных работ:

- система контроля над организацией и проведением работ с вирусами I-II групп патогенности;

- система контроля качества текущих и заключительных дезинфекционных мероприятий в "заразной" зоне;

- система контроля соблюдения требований биобезопасности при получении различных препаратов вирусов ООИ и оценки остаточной их инфекционности при выносе из "заразной" зоны;

- усовершенствована система контроля и оценки эффективности функционирования инженерно-технических систем биобезопасности;

- система организации и контроля эксплуатации ИСИЗ персонала, работают,его с высоко патогенными вирусами;

- система предупреждения и ликвидации последствий аварий и аварийных ситуаций.

4. Экспериментально в статических и динамических условиях, впервые оценена проницаемость нетканых материалов Спанбонда, CMC, Сонтары, типа "Tyvek" с использованием физических и биологических тест аэрозолей. Показано, чю повышение плотности и ламинирование материалов повышает их защитные барьерные свойства. Установлено, что наиболее высокими защитными свойствами обладают нетканые материалы CMC, Тайвек, Сонтара и ламинированные ткани Спанбонд. Указанные ткани по своим барьерным защитным свойствам превосходят ткани, используемые для изготовления защитной медицинской одежды многоразового применения и перспективны для конструирования к изготовления одноразовых средств индивидуальной защиты (спецодежды) и средств индивидуальной защиты органов дыхания (масок).

5. Показано, что наиболее подвержены риску внутри лабораторного заражения сотрудники, работающие с нативным материалом особо опасных вирусов или

инфицированными ими жииотными в виварных помещениях. Реальность существования угроз для персонала от выявленных рисков подтверждена двумя случаями внутри лабораторного заражения возбудителями геморрагических лихорадок Марбург и Эбола сотрудников ГНЦ ВБ "Вектор".

6. На основе данных экспериментального моделирования акта почтового биотерроризма предложена математическая модель распространения биологического аэрозоля в закрытом помещении, оснащенном приточно-вытяжной вентиляцией.

7. Показана впервые в эксперименте возможность использования пучка ускоренных электронов для обеззараживания образцов, зараженных вирусами, в интересах противодействия почтовому биотерроризму. Определены дозы и динамика их инактивации, определен диапазон рабочих доз облучения, не приводящих к нарушению функциональных или потребительских свойств облучаемых предметов и образцов.

8. Проведено математическое моделирование возможных сценариев актов биотерроризма на территории опасного биологического объекта и крупного регионального центра на примере научной площадки крупного национального вирусологического и биотехнологического научного учреждения (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор") и города Новосибирска при террористическом применении вируса натуральной оспы. Определены количественные характеристики зон поражения и динамика эпидемического распространения натуральной оспы за пределы очага заражения.

Практическая значимость работы.

1. С использованием полученных в ходе настоящего исследования теоретических и практических результатов разработаны нормативно-методические документы федерального уровня, соавтором которых соискатель является:

1.1. Онищенко Г. Г., Федоров Ю. М., Безсмертный В. Е. и др. Безопасность работы с микроорганизмами I - II групп патогенности (опасности). СП 1.3.128503. - М.: Минздрав России, 2003. - 152 с.

1.2. Онищенко Г. Г., Федоров Ю. М., Ставский Е. А. и др. Организация и проведение противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий при натуральной оспе: Методические указания. МУ 3.1.3.5-07. - М.: Федеральная служба но надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2007.- 63 с.

1.3. Маренникова С. С., Рябчикова Е. И., Зайцев Б. Н. и др. Лабораторная диагностика натуральной оспы. Методические указания (проект) - М.: ФГУ здравоохранения «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2007

1.4. Онищенко Г.Г., Федоров Ю.М., Шевырева М.П. и др. Организация и проведение работ по исследованию методом ПЦР материала, инфицированного вирусами I - II групп патогенности. Методические указания (проект) - М.: ФГУ здравоохранения «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Федеральной

службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2008 — 36 с.

1.5. Шипулин Г. А., Подколзин А. Т., Яцышина С. Б. и др. Организация и г.ро-ведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высоко-вирулентными штаммами вируса гриппа птиц типа А (ВГПА), у людей: Методические указания. МУК. 4.2.2136-06. - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2006. - 23 с.

1.6. Биологическая безопасность. Термины и определения, // Под ред. Г.Г. Они-щенко, В. В. Кутырева. - Саратов: «Приволжское книжное издательство», 2006. -112 с.

2. Разработан для крупного национального вирусологического и биотсхнологи-ческого опасного биологического объекта - ГНЦ ВБ "Вектор" комплект инструктивно-методических документов (более 70 документов), регламентирующих различные аспекты биобезопасности при работах с вирусами 1-Я групп патоген-ности.

3. Разработан комплекс противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий предупреждения вирусных заболеваний персонала и населения при работах с возбудителями особо опасных вирусных инфекций (натуральная оспа, Эбэла, Марбург и др.). Разработаны внутри объектовые системы контроля обеспечения биобезопасности работ с вирусами I - II групп патогенности:

- система контроля над организацией и проведением указанных работ;

- контроля и оценки эффективности функционирования инженерно-технических систем биобезопасности;

- контроля соблюдения требований биобезопасности при получении различных вирусных препаратов возбудителей ООН и оценки остаточной их инфекционное™ при выносе из "заразной" зоны;

- контроля качества проведения дезинфекционных мероприятий в "заразной" зоне;

- система организации и контроля эксплуатации СИЗ, ИСИЗ персонала, работающего с высоко патогенными вирусами.

4. Изучены физиологические показатели деятельности сердечно-сосудисто!) системы, органов дыхания и температурный статус у персонала, работающего в ИСИЗ, в рамках нормирования продолжительности работы в них, а также совершенствования системы подбора кадров и оценки их пригодности к работам в ИСИЗ.

5. Отработан и внедрен в практику применения режим стерилизующего оэлу-чения пучком ускоренных электронов на установке ИЛУ-6 одноразовой мгди-цинской одежды производства ЗАО "Здравмедтех - Новосибирск" (средняя поглощенная доза составила 18 ± 3,0 кГр при 95% вероятности).

6. Разработан костюм "Вектор" для защиты от патогенных биологических агентов на основе нетканых материалов и получен патент № 54519 РФ на полезную модель. Составлены, производятся ЗАО "Здравмедтех" и внедрены в практику применения различные комплекты защитной медицинской одежды и медицинских масок на основе нетканых материалов.

7. Разработан одноразовый стерильный комплект врача-инфекциониста на основе нетканых материалов производства ЗАО "Здравмедтех", который приказом Департамента здравоохранения города Москвы от 05.11.04 г. № 488 "Об усилении мероприятий по санитарной охране территории г. Москвы от заноса и распространения инфекционных заболеваний, представляющих опасность для населения города Москвы" включен в состав комплектов экстренного реагирования лечебно-профилактических учреждений.

8. Полученные теоретические и экспериментальные данные реализованы в разработанных учебных программах, утвержденных руководителем Роспотребнад-зора, и сертифицированном обучении персонала с различным уровнем образования на базе функционирующего в ГНЦ ВБ "Вектор" специализированного отдела научно-методической подготовки персонала по работе с возбудителями 001-1 в соответствии с Федеральной лицензией № 166191 от 30.03.06 г. Положении, выносимые на защиту:

1. С помощью созданной информационной базы сравнения национальных и международных руководств по биобезопасности, а также устройства, оснащения, организации и проведения работ с патогенами в отечественных и зарубежных лабораториях установлено более 20 возможных направлений гармонизации и унификации национальных и международных правил по биобезопасности, а также основные тенденции совершенствования устройства лабораторий и биологической безопасности в них.

2. Разработанные с учетом полученных теоретических и экспериментальных данных нормативно-методические документы федерального уровня адаптированы к современным требованиям биобезопасности при работах с ПБА 1-И групп патогенности, а разработанная инструктивно-методическая документация внутри объектового уровня, детально регламентирует безопасное проведение работ с вирусами 1-Н групп патогенности и обеспечение необходимых требований биобезопасности.

3. Усовершенствованная система обеспечения безопасности работ с вирусами III групп патогенности в крупном национальном вирусологическом и биотехнологическом опасном биологическом объекте:

3.1. Обеспечивает защиту исследователя и окружающей среды от заражения инфекционным материалом или позволяет максимально уменьшить, с учетом возможного негативного действия человеческого фактора, риски возникновения аварийных ситуаций и аварий;

3.2. Обеспечивает санитарную охрану территории опасного биологического объекта (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор"), населения и прилегающих к объекту территорий (наукограда Кольцово, города Новосибирска) от последствий чрезвычайных ситуаций при выполнении работ с возбудителями ООН, завоза карантинных инфекций, а также актов биотерроризма.

4. "Человеческий" фактор даже в условиях бесперебойного и эффективного функционирования полного комплекса инженерно-технических систем биобе-зопасносш, использования кондиционных СИЗ, ИСИЗ, имеет определяющее значение для внутри лабораторного заражения персонала при работах с особо

опасными вирусами. Наибольшему риску внутри лабораторного заражения подвержены сотрудники, работающие с нативным материалом особо опасных вирусов и инфицированными ими животными в виварных помещениях.

5. Предложенные методы математического моделирования возможных сценариев развития почтового биотерроризма с применением спор сибирской язвы в замкнутом помещении, актов биотерроризма на территории крупного национального вирусологического и биотехнологического опасного биологического объекта (ГНЦ ВБ "Вектор"), территории муниципального образования (п. Кош>-цово) и крупнейшего регионального центра (г. Новосибирска) с применением вируса натуральной оспы обеспечивают решение задач прогнозирование и оценки масштабов распространения биологических аэрозолей, заражения объектов, территорий и населения, находящегося на них, планирования и принятия адекватных управленческих решений по ликвидации медико-санитарных последствий биотеракта на местном и региональном уровнях.

6. Нетканые материалы Спанбонд, CMC, Сонтара и типа "Тайвек" обладают высокими барьерными защитными свойствами и перспективны для разработки и производства разовой защитной медицинской спецодежды и средств защиты органов дыхания от патогенных биологических агентов.

Апробация работы. Основные положения работы доложены на:

- Международной научной конференции "Проблемы биологической и экологической безопасности Оболенск, 22 - 24 мая 2000 г.,

- Международной научной конференции "Защита от микробных агентов. Ш ау-гурация Шведской лаборатории максимальной биозащиты ", Стокгольм, 8-10 октября 2000 г.,

- IX Международной конференции и дискуссионном клубе "Новые информационные технологии в медицине и экологии", Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 01 -10 июня 2001 г.,

- 44 -ой Конференции по биобезопасности. 17-ой ежегодной конференции Американской ассоциации биобезопасности, Новый Орлеан, 21-24 октября 2001 г.,

- 45-ой Конференции по биобезопасности. 18-ой ежегодной конференции Американской ассоциации биобезопасности, Сан-Франциско, 20-23 октября 2002 г.,

- Научной конференции "Проблема инфекции в клинической медицине" и VIII съезде Итало - Российского общества по инфекционным болезням 5-6 декабря

2002 г.,

- Межведомственной Комиссии по контролю над генно-инженерной деятельностью (МВКГИД) в Министерстве науки и технологий РФ, Москва, 19 декабря

2003 г.,

- Ежегодной Конференции-семинаре "Биобезопасность, физзащита" Агентства по Снижению Угрозы Министерства Обороны США (DTRA), Будапешт, Венгрия, 24 марта - 3 апреля 2004 г.,

- Научно-практической конференции "Дальнейшее совершенствование природной, техногенной и пожарной безопасности населения и территорий - устойчивое развитие Сибирского региона", 15 сентября 2004 г., Новосибирск,

- Межрегиональном совещании ФУ "Медбиоэкстрем" по вопросам профилактики особо опасных инфекций и дезинфектологии, 11-15 октября 2004 г.,

- Конференции, посвященной 70 - летию Противочумного центра "Противочумные учреждения России и их роль в обеспечении эпидемиологического благополучия населения страны", Москва, 2004,

- VI-OM Международном симпозиуме по методам обнаружения и противодействия химической и биологической угрозе (CBMTS), Шпиц, Швейцария, 30 апреля - 5 мая 2006,

- И-ом Международном Семинаре-Совещании специалистов санитарно-эпидемиологических служб стран СНГ по актуальным вопросам мониторинга за гриппом, в том числе гриппом птиц, Новосибирск, 28-29 мая 2007,

- Российском медицинском форуме-2007. Молекулярная медицина и биобезопасность. Семинаре - тренинге "Актуальные вопросы защиты населения от биологических угроз", 17-19.10.07,

- Научно-практической конференции СПАССИБ СИББЕЗОПАСНОСТЬ - 2008, 16-18 сентября 2008 г., Новосибирск.

Результаты диссертационной работы опубликованы в 27 научных работах (включая три монографии), девять из которых входят в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертации на соискание ученой степени доктора наук.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 535 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения результатов, выводов, списка используемой литературы (том 1 из 495 стр.), приложения из 40 стр. (том 2). Иллюстрирована 78 таблицами и 49 рисунками. Библиография представлена 388 источниками отечественных и зарубежных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ. Глава 1. Материалы и методы исследования.

В работе использованы следующие вирусы: вирус натуральной оспы штаммы Индия -За, Батлер, Нгами, вирус Эбола субтип Заир штамм Mayinga, вирус Марбург, штамм Popp, вирус гриппа А серотипа H5N1 штамма A/Turkey/ Suzdalka/Nov-1/2005, депонированные в музейной коллекции ГНЦ ВБ "Вектор". Вирус осповакцины штамм Л -ИВП коммерческой оспенной живой сухой вакцины производства ФГУП "Вирион". Кроме вирусов использовали также ряд бактерий: Serrada marcescens и Bacillus subtilis var. niger, депонированные в музейной коллекции ГНЦ ВБ "Вектор''. Bacillus thuringiensis (var. dendrolimus), который является действующим началом коммерческих порошковых средств защиты растений - дендробациллина, битоксибациллина лепидоцида - сухих каолин содержащих бактериальных инсектицидных препаратов, выпускаемых российской промышленностью.

Для размножения вирусов использовали перевиваемые культуры клеток почки зеленой мартышки Vero, культуры клеток JI-68 (диплоидные клетки легкого эм-

бриона человека) и др., раствор Хэнкса, среду Игла МЕМ, сыворотку крови крупного рогатого скота, эмбриональную сыворотку плодов коровы (все производства ГНЦ ВБ "Вектор"). Для микробиологических исследований применяли сухие коммерческие бактериальные питательные среды.

При проведении экспериментов использовали следующих животных: 1-2-дневные нелинейные белые мыши; нелинейные белые мыши массой 17-20 г; нелинейные морские свинки массой 180-200 и 250-300 г, кролики породы "Шиншилла" массой (2,5-3,0) кг. Животных получали из вивария ГНЦ ВБ "Вектор" и содержали на стандартном рационе. Все болезненные процедуры проводили с применением обезболивающих препаратов. В опытах также использовали 9 - 12 - ти дневные РКЭ для вирусологических исследований, 6 - 7-недсль-ных цыплят породы Род-Айланд, кросс Изобраун, полученных из ГППЗ Новосибирский.

Полученные в экспериментах данные обрабатывали с применением различных методов статистической обработки и математических моделей.

Глава 2. Современное состояние и тенденции совершенствования биологической безопасности при работах с микроорганизмами I-IV групп патоген-н ости.

Провели сравнительный анализ основных Российских Санитарных Правил и руководств США и ВОЗ по биобезопасности:

1. СП 1.2.1318-03. Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных забэле-ваний человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-моди-фицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами.

2. СП 1.3.1285-03. Безопасность работы с микроорганизмами I - II групп патогенности (опасности).

3. СП 1.2.731-99. Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности и гельминтами.

4. СП 1.2.036-95. Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I - IV групп патогенности.

5. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 4rd Edition, CDC -NIH. - Washington, 1999.

6. Laboratoiy Biosafety Manual, 3rd Edition, World Health Organization, Geneva, 2004.

При этом был выявлен ряд различий между ними по некоторым параметрам (табл. 1), а также проведена по основным критериям устройства сравнительная дифференциация (табл. 2) лабораторий разного уровня биологической безопасности. Установленные в результате анализа различия (табл. 1) представляют собой основные направления унификации и гармонизации национальных и международных правил по биобезопасности.

Анализ устройства современных зарубежных и отечественных лабораю-рий с высшим уровнем биозащиты (BSL-3-BSL-4), в частности, лабораторий

Таблица 1

Основные различия, выявленные между международными и национальными руководствами но биобезопасности

№ЛУ П.II. Критерии сравнения Руководства СБС-МН. ВОЗ Российские Санитарные Правила

1. Техническое оформление документов Единые комплексные Руководства Вопросы биобезопасности изложены в 4-х отдельных Санитарных Правилах

2. Статус документов Рекомендации, компактные и удобные практические справочники Нормативные правовые акты обязательные для граждан, индивидуальных предпринимателей и юридических лиц, за нарушение которых наступает дисциплинарная, административная и уголовная ответственность.

3. Тематическое содержание, состав и объем документов Выявлена тенденция к увеличению числа освещаемых в документах аспектов биобезопасности. Существуют различия по перечню изложенных в документах аспектов биобезопасности, детализации изложения и объёму освещения.

4. Разрешительная система на работы с микроорганизмами 1-1V групп патогенности Отсутствует информация о разрешительной системе Подробно изложена система получения заинтересованными учреждениями санитарно-эпидемиологических заключений на право работы с ПБА 1-1У групп патогенности (опасности),

генно-инженерно-модифи-цированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами, а также соответствующие требования и комплект документации, необходимые для получения заключения

5. Классификация патогенных микроорганизмов Дифференциация и нумерация групп микроорганизмов в принятой в России классификации, отличаются от классификаций ВОЗ и США обратным порядком. Существуют также различия между российской и американской класс-сификациями по составам групп, включению микроорганизмов одних видов в различные группы.

6. Зонирование лабораторных помещений и уровни безопасности лабораторий при работе с патогенными микроорганизмами Уровни биобсзопасности ВБИ-ВБЕ^ "Заразная" и "чистая" зоны

7. Работа с дикими животными и эктопаразитами В Руководствах ВОЗ и США этих материалов нет Изложены принципы безопасного отлова, содержания, доставки в исследовательское учреждение диких животных и эктопаразитов и правила работы с ними

8. Уровни биобезопасности для работы с лабораторными животными Уровни биобезопасности АВ8Ь-1-АВ8Ь4 Нет дифференциации

9. Условия допуска к работе с биологическим ма;е Не содержат тпсбований по Изложена жесткая система

риалом и контроль допуска персонала возрастному, образовательному цензам допуска персонала к работе с биологическим материалом и контроль допуска персонала. Введены требования по возрастному, оо-разовательному и квалификационному цензу к лицам, принимаемым и допускаемым к работам с ПБА

10. Медицинское наблюдение, допуск к работе, медицинское обеспечение Более мягкие требования к состоянию здоровья. Нет жесткого требования по ежедневному медицинскому осмотру при работе с микроорганизмами В8Ь-3-В8Ь-4. Нет требований по обсервации. Нет требований по наличию в учреждении специального инфекционного изолятора. Соответствие строгим требованиям медицинского освидетельствования. Установлены требования по ежедневному медицинскому осмотру при работе с ПБА 1-Н, обсервации, наличию в учреждении специального инфекционного изолятора

11. Ответственность персонала при проведении работ с биологическим материалом Прописана система распределения ответственности В отличие от руководств США и ВОЗ ничего не говорится о мере ответственности персонала ниже уровня заведующего лабораторией

12. Транспортировка и передача биологических агентов Транспортировка и передача биологических агентов регламентируется другими Четко изложены вопросы упаковки ПБА, их транспортировки и передачи

стандартами биобезопасности. Представлены только требования к упаковке материалов.

13. Рекомбинантные молекулы ДНК и генетические манипуляции Имеются небольшие разделы по этим видам работ. Разделов по этим видам работ нет.

14. Культуры клеток животных и ткани В российских СП и руководстве ВОЗ нет информации по этому вопросу. В Руководстве США существует небольшой раздел.

15. Биологические токсины В СП представлены в отдельном подразделе дополнительные требования к работам с ботулиническим токсином, биологическими ядами. В руководстве ВОЗ требования к работам с биологическими ядами отсутствуют. В руководстве США в двух приложениях представлены принципы организации и проведения работ с биологическими токсинами.

16. Действия и мероприятия в чрезвычайных ситуациях В отличие от Руководства США, Российские СП и Руководство ВОЗ содержат более подробные изложения Действий и практических рекомендаций при ликвидации аварий во время работы с биологическим материалом. В руководстве ВОЗ подробно рассмотрены аварии при перевозке, изложен алгоритм действий при различных авариях. В Руководстве США отдельного раздела, посвященного мероприятиям при ликвидации аварий нет. Для каждого уровня безопасности заложены принципы устранения последствий аварий.

17. Первичные и вторичные защитные барьеры Изложены понятия первичных и вторичных защитных барьеров, их описание и назначение Нет подобной информации

18. Защитное оборудование для снижения или исключения рисков, боксы безопасности Приводится более полный список защитного оборудования, предназначенного для уменьшения опасности, описаны ирипципы его Действия. Подробно рассмотрены боксы биологической безопасности разных класс-сов с иллюстрациями, правилами пользования и тестирования. Имсются общие указания на применяемое защитное оборудование, без подробного описания и процедур испытаний.

19. Риски, оценка риска Изложены понятия биорисков, приведены основные виды рисков, дана система оценки рисков Нет подобной информации

20. Организация и проведение учебы Представлены про1раммы обучения, занятий Нет подобной информации

21. Комиссия по контролю за соблюдением требований биологической безопасности (Российские СП) и Комитет (совет) по биобезопасности (Руководства США и ВОЗ) Рекомендательный орган Является исполнительно -консультативным органом и обладает более широким кругом решаемых ею вопросов и ответственности

22. Физическая безопасность Оснащение лабораторий системами контроля допуска персонала и наблюдения за проводимыми работами Нет требований

23. Химическая, противопожарная, электрическая безопасность Изложены в специальных разделах принципы организации химической, проти- Нет подобной информации

вопожарной и электрической безопасности

24. Средства и методы дезинфекции, используемые при работе с ПБА. Режимы обеззараживания различных объектов, зараженных ПБА. В российских СП и зарубежных руководствах указанные вопросы изложены в виде разделов или специальных приложений. При этом в российских СП материал изложен более полно и подробно, однако в СП нет информации по обеззараживанию прионов, «необычных» агентов.

Таблица 2

Сравнительный анализ устройства лабораторий различного уровня биобезопасности

Устройство и оснащенность лаборатории Уровень биологической безопасности согласно СОС-МН, ВОЗ "Заразная" зона согласно СП для работы с Стационарная максимально изолированная лаборатория для работы с ПБА I группы

ВБЫ В8Ь-2 В8Ь-3 ВЭЬ-4 ПБА Ш-1У групп ПБА II группы

Изоляция (расположение) лаборатории Нет Нет Да Да В отдельно стоящем здании или изолированной части здания В отдельно стоящем здании или изолированной части здания В отдельно стоящем здании

Допуск в лабораторию Не ограничен Не ограничен Ограниченный Ограниченный Ограниченный Ограниченный Ограниченный

Герметичность ОСК лаборатории Нет Нет Да . Да. Стены лаборатории не примыкают к наружным ОСК здания ("ядро в ядре") Нет. Окна и двери "заразной" зоны должны быть герметичными. Да Да. Стены лаборатории НС примыкают к наружным ОСК здания ("ядро в ядре")

Приточно-вытяжные вен-тсистемы Нет Желательно Да Да Да Да Да

НЕРА-фильтры или их аналоги на нриточно-вы-гяжных вснтси-стемах Нет . Нет Один каскад на входе-выходе воздуха. Один каскад на входе, два на выходе воздуха. Вытяжная система с одним каскадом ФТО. Или без, но при исоль-зовании БББ И класса. Один каскад на входе-выходе воздуха. Один каскад на входе, два на выходе воздуха.

Предбоксник (вход с двумя дверями) Нет Нет Да Да Да Да Да

Санпропускники с тамбур-шлюзами на входе-выходе Нет Нет Да Да Да. Для вновь строящихся. Да Да

Дездуш на выходе Нет Нет Нет Да Нет Нет Да

Тамбур с душем Нет Нет Да/Нет1 Нет Да. Для вновь строящихся. Нет Нет

Санитарно-гигиенический душ, помывка Нет Нет Да/Нет' Да Да. Для вновь строящихся. Да Да

Сбор и обработка сточных вод Нет Нет Да/Нет1 Да Химическое обеззараживание жидких отходов Да Да

Сбор и обработка душевых вод Нет Нет Нет Да Нет Да Да

Автоклав на месте работы Нет Желательно Да Да Да Да Нет

Автоклав в лаборатории Нет Нет Желательно Да Да Да Нет

Двухдверный проходной автоклав с электроблокировкой дверей Нет Нет Желательно Да Нет Да Да

Камера фумигации (пароформа-линовая камера) Нет Нет Да Да Нет Да Да

Передаточные шлюзы (химические, камера проныривания) Нет Нет Да Да Нет Да Да

Боксы биологической безопасности Нет. Работа на открытых Желательно. (Работа на от- Да. (БББ и/или иная первичная изоляция для Да. БББ III класса (боксовая лаборатория). | Желательно. (Работа на открытых столах и в БББ Да 1 Да. БББ III класса (боксовая лаборатория). |

столах. крытых всех видов БББ И класса для защиты от БББ И класса

столах и работ). (костюмная потенциаль- (костюмная

в БББ лаборатория). ных аэрозо- лаборатория).

для за- лей).

щиты от

потен-

циаль-

ных аэ-

розолей).

Система воздухо- Нет Нет Нет Да. В случае Нет Не! Да. В случае

снабжения пнев- костюмной костюмной

мокостюмов лаборатории лаборатории

Система приго- Нет Нет Желательно Да Нет Да Да

товления и раз-

дачи дезраст-

воров

Дублирование (резервирование) энергоснабжения Нет Нет Да Да Нет Да Да

Дизель-генератор Нет Нет Да Да Нет Да Да

Резервирование, дублирование систем, агрегатов/ оборудования Нет Нет Да Да Нет Да Да

Система водо- Обыч- Обыч- Оснащена Оснащена Обычная Оснащена Оснащена

снабжения ная ная техническими средствами от под- техническими средствами от подсоса или техническими средствами от подсоса или техническими средствами от подсоса или

coca или об-ратно-го тока обратного тока обратного тока обратного тока

Вакуумные линии, линии сжатого воздуха и газов Обычные Обычные Оснащены техническими средствами очистки и НЕРА-фильтрами Оснащены техническими средствами очистки и НЕРА- фильтрами Обычные Оснащены техническими средствами очистки и ФТО Оснащены техническими средствами очистки и ФТО

Тревожно-аварийная сигнализация Нет Нет Да Да Нет Да Да

Пожарная сигнализация, средства пожаротушения Да Да Да Да Да Да Да

Система внешнего контроля Нет Нет Желательно Да"5 Да3 Да3 Нет2-3

Примечание: — В зависимости от используемого в лаборатории патогенного агента;" - Например, окна, системы телевизионного наблюдения, двусторонняя связь;3 - окна.

Швеции (лаборатория BSL-3-BSL-4 Шведского медицинского института по контролю инфекционных заболеваний (SMI), США (лаборатория BSL-4 Центров но контролю и профилактике инфекционных заболеваний (CDC); лаборатории BSL-3 - BSL-4 Научно-исследовательского медицинского института инфекционных заболеваний Армии США (USAMR1ID), Франции (лаборатория BSL-4 Европейского Исследовательского Центра Вирусологии и Иммунологии, Лион), Швейцарии (микробиологическая лаборатория BSL-3 Шпица (Spiez Laboratory), а также России на примере крупного опасного биологического объекта (лаборатория BSL-4 для проведения работ с вирусом натуральной оспы и лаборатория BSL-3 для работы с вирусами геморрагических лихорадок, комплекса клешевых энцефалитов, ВИЧ и других вирусных инфекций ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор " Роспотребнадзора) позволил выявить такие тенденции в создании лабораторий с максимальны м уровнем защиты, как:

- минимизация лабораторных "заразных" площадей;

- создание лабораторий по модульному, блочному типу;

- оснащение лабораторных модулей, блоков автономными инженерно-техническими сис темами биобезопасности;

- максимальное размещение оборудования инженерно-технических систем биобезопасности и коммуникаций герметичного исполнения в "чистых" зонах на технических этажах;

- оснащение лабораторий санпропускниками смешанного использования (мужским и женским персоналом);

- наделение одного устройства несколькими функциями (дездуш, воздушный шлюз, камера фумигации);

- широкое применение микропроцессорной и компьютерной техники в системах контроля, регистрации, управления инженерно-техническими системами биобезопасности и физической защиты;

- оснащение лабораторий современными системами автомагического обнаружения очагов возгорания и пожаротушения;

- оснащение лабораторий системами круглосуточного видеонаблюдения;

- оснащение лабораторий аварийными системами сигнализации, оповещения, а также телефонной, телексной и радиосвязью;

- применение на системах лриточно-вытяжной вентиляции вентагрегатов с изменяемой производительностью;

- повышение сейсмостойкости и прочности корпусов лабораторий;

- повышение устойчивости лабораторий к террористическим проявлениям (применение бронированных или повышенной прочности стекол, развитые системы физической защиты с персонифицированным допуском в лаборатории и

т.п.);

- использование оригинальных архитектурных, проектных решений и новых строительных материалов;

- применение современных инструментальных методов аттестации и контроля как инженерно-технических систем, так и отдельных их составных элементов;

- внедрение инструментальных методов аттестации и контроля средств индивидуальной защиты (СИЗ), изолирующих СИЗ (ИСИЗ).

Глава 3. Биологическая безопасность при работах с вирусами 1-Н групп патогенности.

Сравнительный анализ методов определения защитной эффективности фильтров тонкой очистки воздуха с использованием аэрозолей диоктил-фталата и турбинного масла.

Значительный практический интерес представлял вопрос выяснения равнозначности применения российского тест аэрозоля и корректности получаемых с его использованием показателей задерживающей способности фильтров тонкой очистки воздуха (ФТО) в сравнении с тест аэрозолем, применяемым за рубежом. Для этого изучили методы оценки задерживающей способности различных типов отечественных ФТО впервые в условиях их реальной эксплуатации в ГНЦ ВБ "Вектор" (без демонтажа из работающих на момент испытаний вентиляционных систем) с использованием тест аэрозоля ДОФ (диоктклфгала-та), применяемого в США, и аэрозоля турбинного масла Т22 или Т30, используемого в Российской Федерации.

Таблица 3

Типы и основные характеристики фильтров для высокоэффективной

Типы фильтров для фильт-рую-щего элемента Материал Характеристика

ФТО - 750 (фильтрующий элемент тонкой очистки, производтельность 750 м3-ч'), В-0,4 ФПП- 15-1,5; ФПП-15-4,5 (фильтр Петря-нова перхлорвинило-вый, диаметр волокна 1,5 и 4,5 мкм) Перхлорвиниловое 1 волокно на марлевой основе, термостойкость 70-70°С, гидро-фобен

ФТО - 60, ФТО - 500, ФТО -1000, (фильтрующий элемент тонкой очистки, производительность 60, 500 и 1000 мЧ"1) ФПАН - 10 - 3,0 (фильтр Петрянова ак-рилнитрилвый, диаметр волокна 3,0 мкм) Полиакрилнитриловое волокно на марлевой основе, термостойкость 180°С

ФТО - С - 500 К (фильтр тонкой очистки стерилизуемый) Базальтовая бумага и картон Супертонкое базальтовое волокно с добавлением целлюлозы

ЕО - 16 (противогазовая коробка) Активированный уголь —

Таблица 4

Задержи вающая способность двухкаскадных венткамер систем вытяжной вентиляции С]1Спользованием аэрозолей турбинного масла и ДОФ_

Количество фильтров в двухкаскад-ной венткамере, шт. Производительность системы, м3-ч-' Коэффициент проницаемости по туману турбинного масла, (Х:и95)-10-3,% Коэффициент проницаемости по туману ДОФ, (х±;195)-10-\% Коэффициент корреляции

8 (2 х 4) 3000 0,212±0,021 0,205±0,021 1,0

24 (2 х12) 8300 0,120±0,011 0,125±0,031

16 (2 х 8) 3000 0,130±0,021 0,133±0,021

16(2x8) 1 5000 0,573±0,110 0,538±0,113

Примечание: количество измерений, выполненных на каждой венткамере,

равно пяти.

В результате выполненных исследований установили, что ММАД50 для аэрозольных частиц ДОФ составляли 0,19 - 0,36 мкм, а для турбинного масла -0,17 - 0,34 мкм при Од = 1,5 - 2,0 (геометрическое квадратичное отклонение, характеризую! цее полидисперсность аэрозоля). При этом в аэрозолях, образующихся при диспергировании ДОФ и турбинного масла, количество частиц вышеуказанных размеров составило (97,7±2,3)% и (98,6±1,6)%, соответственно. Полученные данные продемонстрировали отсутствие существенных различий (с вероятностью Р<0,05) ФДС аэрозолен ДОФ и турбинного масла, полученных с помощью генератора ГАК-УМ. В дальнейшем оценили задерживающую способность различных типов отечественных фильтров, применяемых для очистки воздуха. При этом была доказана корректность и правомерность использования турбинного масла в качестве тест аэрозоля и получении при этом равнозначных с ДОФ показателей (Кп). Полученные данные послужили основанием для широкого практического применения в ГНЦ ВБ "Вектор" метода оценки задерживающей способности фильтров очистки воздуха с использованием в качестве тест аэрозоля турбинного масла в научных корпусах Центра, в том числе, в корпусах с высшим уровнем биозащиты.

Биологическая безопасность при проведении научно-исследовательских работ с вирусом натуральной оспы, с возбудителями геморрагических лихорадок, комплекса клещевых энцефалитов, ВИЧ и других вирусных инфекций.

Комплекс мероприятий обеспечения биологической безопасности при организации и проведении научно-исследовательских работ в ГНЦ ВБ "Вектор" с вирусами I - II групп патогенности, разрабатывался и совершенствовался на протяжении многих лет. В частности, для вируса натуральной оспы на базе Сотрудничающего Центра ВОЗ по диагностике ортопоксвирусных инфекций и музее штаммов и ДНК вируса оспы в корпусе 6 с уровнем биобезопасности

BSL-4, и с вирусами Эбола, Марбург в корпусе 1 с уровнем биобезопасности BSL-3. В результате были отработаны вопросы по требованиям, предъявляемым к персоналу и системе его допуска к работам с ООИ; медицинскому обслуживанию, наблюдению и обсервации; вопросы безопасной организации и проведения работы, которые нашли свое отражение более чем в 70 рабочих инструкциях, регламентирующих все виды работ в Центре с микроорганизмами I-IV групп патогеяности. В единый реестр вошли инструкции по соблюдению требований биобезопасности при организации и проведении работ с вирусами натуральной оспы и оспы обезьян в корпусе 6, инструкции но соблюдению требований биобезопасности при организации и проведении работ с вирусами I-IV групп патогенности в корпусе 1, планы противоэпидемических мероприятий, планы ликвидации аварий на случай возникновения аварий и аварийных ситуаций и др. Отработаны методы работы с РКЭ, различными видами животных, использование автоматических пипеток, организация и проведение работ в биохимических комнатах, организация и проведение работ в виварии, содержание инфицированных животных, вскрытие лабораторных животных, взятие кроим у животных, измельчения тканей, центрифугирования вирусного материала. Отработаны режимы лиофилизации вирусного материала на сушильной камерной установке ALPHA-1,5 и коллекторной установке оригинального изготовления КСУ-22. Отработаны режимы обеззараживания пневмокостюмов, предусматривающие двух кратное последовательное обеззараживание дезинфицирующими растворами. Разработаны алгоритмы действий, планы мероприятий и схемы оповещения при различных видах аварий и аварийных ситуаций, оказание медицинской помощи в "заразной" зоне.

Показана роль и функции службы биобезопасности в ГНЦ ВБ "Вектор", разработаны система контроля службы биобезопасности и взаимодействующих с ней смежных служб при работах с ПБА в Центре. Показан перечень и объем выполняемых отделом биобезопасности и отделом контроля инженерно-технических систем мероприятий (санитарно-эпидемиологические обследования подразделений, лабораторных и технологических помещений, контроль специфической контаминации поверхностей и окружающей территории, контроль качества проведенных текущих дезинфекционных обработок лабораторных и технологических помещений "заразной" зоны научных корпусов и др., контроль качества заключительных дезнфекционных обработок "заразной" зоны корпусов, дератизационные и дезинсекционные мероприятия, контроль качества приготовленных дезинфицирующих растворов в корпусах).

Определены виды, периодичность и методы контроля инженерно - технических систем обеспечения биобезопасности (системы ограждающих строительных конструкций; систем приточно-вытяжной вентиляции; специальной канализации, сбора и обработки стоков; передаточных устройств; системы возпу-хообеспечения шланговых средств индивидуальной защиты; системы подачи дезинфицирующих растворов; санитарных пропускников; системы очистки технологического воздуха). Кроме этого боксов биологической безопасности типа 4БП1, биокабинетов II класса безопасности фирмы "Baker", "Labconco".

Установлено, что перед началом работ с инфекционным материалом и после окончания планово-предупредительного (летнего) ремонта (ППР) необходимо проведение обязательной ежегодной проверки (комплексной аттестации и опробования) работоспособности инженерных систем обеспечения биобезопасности с составлением Актов комплексного испытания и проверки на каждую систему. В процессе работы осуществления дополнительного контроля эффективности их работы со стороны отделов биобезопасности и контроля инженерных систем биооезоиасности в соответствии с утвержденными Графиками проверок.

С учетом общемировых тенденций по усилению системы физической защиты и ужесточению контроля доступа в лаборатории, работающие с ООИ, лабораторный корпус 6 был оснащен контрольной круглосуточной системой телевизионного наблюдения. Указанная система дала возможность осуществлять контроль за персоналом, работающим в '"заразной" зоне (помещения с уровнями защиты BSL2 - BSL4) с целью контроля доступа персонала в зонированные помещения и соблюдения им требований биобезопасности. Система состоит из 62 видеокамер установленных в основных лабораторных и технологических помещениях корпуса. Видео камеры помещены в герметичные корпуса, выдерживающие обработку дезинфицирующими средствами. В составе системы видеоконтроля имеются два локальных (корпусных) пульта видеооператора и один центральный видеопульт, расположенный в строго охраняемом специальном помещении в корпусе 1. Связь между корпусами осуществляется по оптоволоконному кабелю.

С целью изучения обеззараживающего действия на вирус натуральной оспы растворов перекиси водорода и едкого натра, а также определения динамики инактивации этими растворами вируса натуральной оспы провели специальную серию экспериментов на штамме Индия - ЗА (гомогенат ХАО РКЭ) с концентрацией 1,2-108 ООЕтмЛ Полное обеззараживание проб и гибель в них указанных вирусов достигалось при использовании 6% раствора перекиси водорода и времени экспозиции 1,0 час. Также полная стерилизация проб происходила после воздействия на вирусы натуральной оспы и осповакцины в течение 1,0 часа 4% раствора щелочи.

Необходимость разработки методики выделения ДНК вируса натуральной оспы и вируса оспы обезьян была обусловлена практикой проведения мо-лекулярно-биологических исследований музейной коллекции штаммов указанных вирусов в корпусе 6. За се основу была взята аналогичная методика, применяемая в Сотрудничающем центре ВОЗ по оспе в CDC, Атланта, США. При этом были решены вопросы выделения ДНК из вирусной культуры, наработанной на перевиваемой культуре клеток, гомогената ХАО РКЭ, из корочек больных натуральной оспой, имеющихся в музейной коллекции, а также комплекс вопросов обеспечения требований биобезопасности при выделении рекомби-нантных плазмид, содержащих фрагменты ДНК вируса вируса натуральной оспы, и определения их специфической контаминации. Кроме этого были отработаны вопросы контроля соблюдения требований биобезопасности при выделе-

нии белков вируса натуральной оспы и их остаточной инфекционности. Плаз-мидная ДНК выделяется из клеток Е.соН, зараженных фагом М13, контактировавшим с вирусом натуральной оспы, и необходима для работ, связанных с получением комбинаторных антител против вируса натуральной оспы. В настоящее время метод электронной микроскопии широко используется при исследованиях вируса натуральной оспы в американском и российских Сотрудничающих Центрах ВОЗ по натуральной оспе. Метод является одним из основных методов диагностики натуральной оспы у человека. Поэтому были отработаны вопросы контроля соблюдения требований биобсзопасности при получении образцов для электронной микроскопии и их остаточной инфекционности. Также в интересах проведения молекулярно-биологических и диагностических работ были разработаны способы контроля соблюдения требований биобезопасности и остаточной инфекционности при выделении лизатов очищенных препаратов вирусов Эбола и Марбург, препаратов РНК вирусов Эбола и Марбург, образцов органов животных, инфицированных вирусами Эбола и Марбург, предназначенных для электронной микроскопии.

Было показано, что при выполнении работ с ВНО может происходи]ь контаминация поверхностей оборудования и лабораторных помещений указанным вирусом, особенно при выполнении манипуляций на открытых стол». Однако это не является нарушением требований биобезопасности, т.к. в лабораториях костюмного типа с высшим уровнем биозащиты персонал защищен ИСИЗ, а в пространстве лаборатории предполагается нахождение патогенных агентов. В связи с этим были разработаны методы контроля специфической контаминации вирусом натуральной оспы как внутри лабораторной среды, так и поверхностей различных объектов и воздуха за пределами лаборатории при возникновении возможных чрезвычайных ситуаций.

Методы специфической детекции филовирусов в пробах воздуха, с поверхностей лабораторных помещений, при работах с экспериментально зараженными животными, а также в различных биологических пробах отрабатывали на примере вирусов Эбола, Марбурга. Исследования проводили с вирусами Эбола, штамм Маут§а и Марбург, штамм Voege, полученными из Белорусского института Эпидемиологии и Микробиологии. В частности, при работе с зараженными животными было показано, что эпидемиологическую опасность больные животные представляют не только в терминальный период, когда из-за нарушения в системе свертывания крови развиваются кровотечения на фоне высокой вирусемии, но и весь период болезни из-за наличия нативного вируса в слюне, моче и фекалиях. Относительно высокое содержание вируса Марбург в исследуемых пробах больных животных в сочетании с его способностью длительно сохраняться на поверхностях требует от исследователей и персонала тщательного соблюдения мер предосторожности при работе с зараженными животными, в том числе из-за опасности образования вторичного аэрозоля от контаминированной экскретами подстилки.

Для подтверждения специфичности положительных проб воздуха и смывов, биопроб от животных, а также обеспечения экстренного эпидемиологиче-

ского контроля острых лихорадочных состояний с анамнезом, подозрительным на филовирусные лихорадки, и принятия своевременных мер по лечению и профилактике заболевания в ГНЦ ВБ "Вектор" были разработаны современные диагностические средства к вирусам Эбола, Марбург (диагностические системы непрямого ичмунофлюоресцентного анализа (НМФА), твердофазного иммуно-ферментного анализа (ТИФА). Было также показано, что для проведения специфической детекции филовирусов и, в частности, вируса Эбола в пробах воздуха, с поверхностей лабораторных помещений, а также в различных биологических материалах и образцах целесообразно применение постановки биологической пробы на чувствительных лабораторных животных, применение имму-нофлюорееиентного и иммуноферментного методов идентификация антигенов и антител вируса Эбола, Марбург. Кроме указанных методов в ГНЦ ВБ "Вектор" также были разработаны лабораторные РНК ПЦР наборы для выявления в плазме крови РНК вируса Эбола. Дополнительно к этим средствам индикации и идентификации филовирусов в практике работы Центра (особенно при необходимости проведения диагностических работ в стационаре особо опасных инфекций ФГУЗ МСЧ-163 ФМБА России) использовали официально утвержденные к применению МЗиСР РФ диагностические тест-системы иммунофермент-ные для выявления антигенов вируса Эбола, Марбург производства Вирусологического Центра НИИМ МО РФ. В целом, в настоящее время согласно действующим СП 1.3.1285-03 при работах с микроорганизмами 1-П групп патогенно-сти на специфическую контаминацию контролируют только стоки. К счастью до настоящего времени нам не удалось даже выявить вирусные маркеры в стоках, т.к. в процессе накопления стоков происходит их многократное разбавление, а также разрушение вирусного материала последующим жестким тепловым обеззараживанием стоков (145±2°С в течение 7-10 мин).

Как известно, летом 2005 года в Новосибирской области, а позднее в ряде других регионов России была зарегистрирована массовая гибель птиц. В результате проведенных исследований в ГНЦ ВБ "Вектор" из органов погибших в Новосибирской области диких и домашних птиц были изолированы и идентифицированы несколько штаммов вируса гриппа А подтипа Н5Ш. Учитывая их возможную высокую эпидемическую опасность, провели цикл предварительных, оценочных экспериментов по определению контаминации воздуха и зоо-боксов при содержании в них птиц, зараженных вирусом гриппа А подтипа Н5М1, по оценке риска заражения здоровых цыплят от больных цыплят фека-льно-оразьным и аэрогенным путями в условиях искусственного их содержания в виварии, а также риска контаминации СИЗ персонала, ухаживающего за инфицированными птицами. При этом считали возможным выделение вирусного аэрозоля при дыхании инфицированных цыплят (первичный аэрозоль) или образование вторичного аэрозоля из инфицированной подстилки. В экспериментах использовали культуру вируса гриппа А серотипа Н5Ш штамма А/ Тигкеу/БигЛаИса/Моу-1/2005, выделенного из селезенки павшей 20.07.05 г. индюшки из с. Суздалка Доволенского района НСО. Штамм депонирован в коллекции культур микроорганизмов ГНЦ ВБ "Вектор". В результате была показа-

на возможность формирования вирусного аэрозоля при содержании инфицированных цыплят и высокая степень защиты зообоксов для их содержания, препятствующая выходу инфекционного материала за пределы зообокса и контаминации СИЗ обслуживающего персонала.

Важнейшее значение при работах с микроорганизмами 1-ГУ групп пато-генности, а тем более с возбудителями ООИ, имеют вопросы проведения текущей и заключительной дезинфекции в "заразной" зоне. На протяжении многих лет практической работы с ПБА в ГНЦ ВБ "Вектор" была разработана система их проведения, а также контроля и оценки её эффективности микробиологическими методами, что было подтверждено большим количеством практических результатов.

Учитывая высокую степень опасности для персонала работ с возбудителями ООИ, особое значение приобретают вопросы подготовки, организации эксплуатации и объективного контроля СИЗ, ИСИЗ (пневмокостюмов). В результате на протяжении ряда лет нами была создана эффективная система организации и контроля эксплуатации СИЗ, ИСИЗ персонала, работающего с высоко патогенными вирусами. Основными ее отличиями от зарубежных систем являются: использование костюма разово в пределах одной рабочей смены; индивидуальная (личная) ответственность сотрудника за правильную эксплуатацию полученного пневмокостюма и комплектного фильтра с момента их получения на централизованном участке контроля и выдачи, на протяжении рабочей (¡мены и до момента его поступления обратно на участок; обязательная проверка пневмокостюма и комплектного к нему фильтра перед выдачей сотрудншсу и после их использования; осуществление контроля целостности пневмокостюма визульным и газоиндикаторным методами; проверка задерживающей способности комплектного к нневмокостюму фильтра инструментальным методом с использованием тумана турбинного масла и др.

Исходя из того, что роль самого важного звена в общей системе биобезопасности принадлежит человеку, выполняющему работу в ИСИЗ в зоне вероятного присутствия возбудителей ООИ, изучили некоторые физиологические показатели деятельности сердечно-сосудистой системы, органов дыхания и температурного статуса у сотрудников в процессе эксплуатации ими пневмокостюмов. Знания о влиянии ИСИЗ на организм работающих являются, безусловно, необходимыми для рациональной организации их труда, совершенствования ИСИЗ, профилактики и снижения заболеваемости персонала лабораторий. Полученные результаты позволили оптимизировать режим и условия труда вирусологов с целью обеспечения его безопасности, совершенствования системы подбора кадров, усовершенствовать систему их медицинского отбора, ежегодных медицинских осмотров, а так же допуска персонала к работам с ООИ.

На основе полученных теоретических и экспериментальных данные по совершенствованию системы биологической безопасности при работах с вирусами 1-11 групп патогенности были разработаны учебные программы и организовано сертифицированное обучение персонала на базе функционирующего в ГНЦ ВБ "Вектор" специализированного отдела научно-методической подготовки персонала по работе с возбудителями ООИ в соответствии с Федеральной

лицензией № 166191 от 30.03.06 г. При этом обучение осуществляется по следующим Программам:

- Программа курсов первичной специализации врачей и биологов по особо опасным вирусным инфекциям, утвержденной руководителем Роспотребнадзора;

- Программа обучающего семинара для специалистов территориальных органов Роспотребнадзора по эпизоотологии, эпидемиологии и лабораторной диагностике высокопатогенного гриппа птиц, утвержденной руководителем Роспотребнадзора;

- Программа теоретических и практических занятий курсов усовершенствования специалистов вирусологических лабораторий с высшим медико-биологическим образованием ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор», утвержденной генеральным директором Центра;

- Программа теоретических и практических занятий курсов специализаций и усовершенствования лаборантов вирусологических лабораторий ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор», утвержденной генеральным директором Центра;

- Перечни контрольных вопросов комиссионной проверки знаний требований биобезопаспосш у научного персонала, инженерно-технических работников, лаборантского и обслуживающего персонала Центра, соответственно, утвержденных генеральным директором Цен тра.

Формы профессиональной подготовки включают в себя:

- аттестационные и сертификационные циклы (от 144 до 540 академических часов, но не менее 144 часов);

- переподготовка (специализация) по специальности "вирусология" (от 500 до 1000 академических часов, но не менее 500 часов);

- тематическое усовершенствование (от 72 до 100 академических часов, но не менее 72 часов).

За 2007-2008 г.г. сертифицированное обучение прошли - 491 сотрудник ГНЦ ВБ "Вектор", Роспотребнадзора, Россельхознадзора, системы лабораторий полно Европейского бюро ВОЗ по России, ФМБА России с различным уровнем образования, а также около 10 вирусологов из Казахстана и Монголии.

Глава 4. Экспериментальная оценка перспективности применения нетканых материалов для разработки и производства средств индивидуальной зашиты при работе с возбудителями вирусных инфекций, включая ООИ.

В связи с тем, что данные о защитной эффективности нетканых материалов спецодежды медицинского назначения в известной литературе отсутствуют, впервые провели экспериментальную оценку в статических и динамических условиях проницаемости материалов и тканей одноразовой медицинской одеждьг ЗАО "Здравмедтех." (Россия) с использованием тест аэрозолей, включая бактериальный. Изучали ткани Spanbond, SMS, "Tyvek", Sontara-F808 различной плотности (15 - 60 пм"2), а также хлопчатобумажную ткань артикул 262 в качестве материала сравнения.

На рис. 2-3 представлены показатели коэффициентов проницаемости указанных тканей полученные в результате их испытаний в динамическом режиме.

Рис. I. Основные элементы и мероприятия системы использования СИЗ, ИСИЗ.

В результате проведенных испытаний была установлена различная степень их проницаемости. Показано, что с повышением плотности исследуемых материалов происходит снижение их проницаемости для бактериального аэрозоля. Ламинирование тканей Спанбонд способствует резкому снижению бакте-риопроницаемости этого вида тканей и позволяет повысить их защитные свойства. Установлено, что наиболее высокими защитными свойствами обладают нетканые материалы CMC, Тайвек, Сонтара и ламинированные ткани Спанбонд. Указанные ткани по своим барьерным защитным свойствам превосходят ткани, используемые для изготовления защитной медицинской одежды многоразового применения. Показана перспективность применения нетканых материалов для изготовления трех-пяти слойных медицинских масок. Коэффициенты проскока бактериального аэрозоля испытанных нетканых материалов масок составили менее 1,0 % и были близки к показателям респиратора "Лепесток". Пяти слойные маски на основе материалов СМС-42 обладают более высокими показателями задержки бактериальных аэрозолей. С учетом полученных результатов нами был разработан перспективный по защитным свойствам костюм разового использования на основе нетканых материалов - костюм "Вектор" для защиты от патогенных биологических агентов [Патент РФ на полезную модель № 54519. Дата поступления заявки- 25.08.05. Регистрационный номер -2005126782]. Запланирован выпуск экспериментальных образцов указанного костюма ЗАО "Здравмедтех" и проведение оценки их защитной эффективности.

Глава 5. Разработка мер защиты персонала опасного биологического объекта, населения прилегающей к нему территории от природных, техногенных и т еррористических угроз биологического характера. Разработка комплекса противоэпидемических мероприятий по защите опасного биологического объекта и населения, прилегающей к нему территории, от особо опасной антропозоопозной инфекции на примере случая подозрительного на завозную легочную чуму.

Известно, что санитарно-противоэпидемические мероприятия по их перечню, срокам и объему выполнения при завозе карантинных инфекций практически аналогичны проводимым мероприятиям при биотеррористических актах /Корбут В. Б и др., 2002/. Подобным примером может служить опыт ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора по предупреждению завоза и распространения легочной чумы в связи с осложнением ситуации в Индии в 1994 г.

В октябре 1994 г. в ГНЦ ВБ "Вектор" были размещены для изоляции и прохождения обсервации 95 пассажиров двух рейсов Аэрофлота. Среди доставленных 11 индийских граждан у пассажирки второго рейса отмечались сильное недомогание, сухой кашель и высокая температура. Местом размещения прибывших авиапассажиров, согласно принятому решению областной ЧПК, был определен ГНЦ ВБ "Вектор". До прибытия самолетов Областная ЧПК, ЧПК

1 2 3 4 5 в 7 8 9 10 11 12 J3 Номер материала

Рис. 2. Коэффициенты проскока нетканых материалов по бактериальному аэрозолю в динамическом режиме J — 5 — материал "Спанбонд" плотностью 15; 20; 35; 50; 60 г/м", соотве-ственно; 6, 7 - материал "Спанбонд" ламинированный плотностью 20: 25 г/м , соответственно; 8 10 материал "CMC" плотностью 20; 35; 45 г/м2, соответственно; 11 - материал "Тайвек" плотностью 35 г/м2; 12 - материал "Сонтара" плотностью 64 г/м2; 13 - х/б ткань (контроль) плотностью 128 г/м'.

"Т---------г -

•8-

•е-

0,01

rfi

if]

3 4 5 Номер материала

Рис. 3. Коэффициенты проскока для некоторых материалов средств защиты органов дыхания по бактериальному аэрозолю (Кп> %).

1 - хлопчатобумажная ткань (61,4%); 2 - трехслойная мака на основе материала Спанбонд плотностью 25 г/мz (< 1,0 %); 3 - пятислойная маска на основе материала Спанбонд плотностью 25 г/м2 (0,3%); 4 - трехслойная маска на основе материала "CMC" плотностью 42 г/м (< 1,0%); 5 - пяти слойная маска на основе материала "CMC" плотностью 42 г/м2 (< 1,0%); 6 - ватно-марлевая повязка (< 1,0%); 7 - ткань Петрянова - ФПП-15-1,5 респиратора "Лепесток-200" (< 0,1%).

Центра, совместно с органами городской и местной власти, санэпиднадзора уточнили порядок эвакуации пассажиров, выделение автотранспорта, экипировку и оснащение эвакуационных бригад. Одновременно с этим были приведены в полную готовность инфекционный изолятор, обсерватор, шлюз-камера и медперсонал. Кроме индийской авиапассажирки, в специальный изолятор ГНЦ ВБ ''Вектор" были доставлены 04.10.94 г. эвакотранспортом гордезстан-ции три жителя г. Новосибирска с высокой температурой, прибывшие из Индии в период 26.09-01.10.94 г. В отношении этих четырех человек был также проведен полный комплекс бактериологических, клинико-биохимических и других исследований. Клинические данные и результаты выполненных исследований ни в одном из указанных случаев не подтвердили предварительно выставленный диагноз чумы. Поэтому после завершения у них соответствующих схем лечения они были выписаны из изолятора. Все обсервируемые лица после прохождения ими кур са экстренной профилактики тетрациклином и завершения сроков обсервации были также выписаны из отделения ООИ ГНЦ ВБ "Вектор".

Проведенный комплекс экстренных противоэпидемических мероприятий продемонстрировал высок)'Ю степень готовности всех звеньев Новосибирского РЦМК; персонала, лечебно-профилактической базы и службы биобезопасности ГНЦ ВБ "Вектор" к случаю подозрительному или реальному на завозную чуму, а также адекватность возможным подобным угрозам мероприятий, предусмотренных разработанным нами "Комплексным планом мероприятий по санитарной охране территории наукограда Кольцово и научной площадки ГНЦ ВБ "Вектор" от завоза, возникновения и распространения карантинных инфекций и при массовых эпидемических осложнениях".

Анализ аварий, аварийных ситуаций на инженерно-технических системах биобезопасности научно-лабораторных корпусов ФГУНГНЦ ВБ "Вектор" при работах с вирусами I - II групп патогенности.

Бесперебойное и надежное функционирование инженерно-технических систем обеспечения биологической безопасности имеет большое значение при проведгнии работ с возбудителями 1-Н групп патогенности в микробиологических лабораториях. От эффективности их работы во многом зависят как безопасность и здоровье работающего персонала, так и надежная защита от специфической контаминации лабораторных, технологических помещений и объектов внешней среды. В табл. 5-6 представлены доступные данные об авариях, аварийных ситуациях и технических неисправностях на инженерно-технических системах научных корпусов за 12 лет наблюдения, а также о мероприятиях, проведенных в связи с ними.

Как следует из представленных данных за анализируемый период времени аварии, аварийные ситуации и технические неисправности касались только ограждающих строительных конструкций, приточно-вытяжной вентиляции, системы спецканализации, сбора и обработки стоков и системы передаточных устройств. При этом следует указать, что аварии за этот период времени произо-

шли только в корпусе № 1. Согласно представленным данным самое большое количество аварий было связано с системами спецканализации, сбора и обработки стоков (70%) и ОСК (17,5%). Аварийные ситуации и технические неисправности наиболее часто были отмечены со стороны систем приточно-вытяж-ной вентиляции (43,6% и 44,4 %, соответственно), систем спецканализацли, сбора и обработки стоков (25,9% и 47,3%, соответственно). Другие научные корпуса за анализируемый период времени не имели аварий.

Таблица 5

Аварии, аварийные ситуации и технические неисправности на инженерно-технических системах научных корпусов Центра

Нарушения и принятые меры Аварии, % Аварийные ситуации, % Технические неисправности,

Ограждающие строительные конструкции 17,5 18,6 -

Приточно-вытяжная вентиляция 10 44,4 43,6

Система спецканализации, сбора и обработки стоков 70 25,9 47,3

Система передаточных устройств 2,5 11,1 9,1

Дезинфекционная обработка оборудования и помещения 40

Проведение ремонта (устранение дефекта, ремонт оборудования) 40 27 55

Проведенные расследования аварий на ОСК показали, что они были связаны с образованием трещин в гидроизоляции межэтажных перекрытий и протечками через них жидкостей из "заразных" зон в "чистые" и "заразные" помещения нижележащих этажей. В связи с нарушением целостности внутренних стекол окон "заразных" помещений при сохранении их наружного остекления были связаны одна авария и все аварийные ситуации в корпусе № 1. В корпусах №№ 6 и 6а до запуска их в эксплуатацию, с целью исключения разрушения стекол окон "заразных" помещений при работах с возбудителями 1-11 групп пнто-генности, оконные рамы были заварены изнутри металлическими листами с последующей герметизацией швов. На протяжении ряда лет для улучшения герметичности гидроизоляции полов, межэтажных перекрытий, сопряжений полов и стен был проведен необходимый комплекс мероприятий, который позволил минимизировать нарушения со стороны этих элементов ОСК. Кроме этого для исключения нарушений со стороны приточно-вытяжных систем, передаточных систем и других, связанных с нештатной работой КИПиА этих систем, были разработаны проекты проведения модернизации указанных систем. Все работы

по ликвидации последствий нарушений, возникших на инженерно-технических системах обеспечения биобезопасности, проводили согласно разработанной нами инструктивно-методической документации.

Таблица 6

Мероприятия, выполненные в отношении попавшего в аварии на инженерно-технических системах персонала____

Проведенные мероприятия, % Ограждающие строительные конструкции Приточно-вытяжная вентиляция Система спецканализации, сбора и обработки стоков Система передаточных устройств

Проведение усиленного медицинского наблюдения 6,0 6,0 25,3

Введение дополнительного контроля температуры тела 6,0 6,0 41,7

Помещение под усиленное медицинское наблюдение в корпус № 20 1,5 4,5 1,5

Помещение под усиленное медицинское наблюдение в корпус № 19 1,5 1

Для подавляющего большинства персонала, попавшего в аварии на системах ОСК, приточно-вытяжной вентиляции, спецканализации, сбора и обработки стоков, передаточных устройств решением Комиссии по контролю соблюдения требований биобезопасности Центра совместно с МСЧ-163 было предписано проведение усиленного медицинского наблюдения с самостоятельным дополнительным (вечером, в выходные дни) ежедневным контролем температуры тела, отображаемым в температурном листе. По окончании наблюдения (период обсервации для конкретного вида инфекции) температурный лист сдавался в отдел биобезопасности. Нахождение под усиленным медицинским наблюдением не ограничивало доступ персонала к работам в "заразной" зоне. Аналогичным правом пользовался также персонал, помещенный в корпус № 20 (обсерва-тор). Сотрудники, помещенные для наблюдения в корпус № 19 (изолятор), такого права не имели. Перечень предписанных к выполнению и осуществленных санитарно-противоэпидемических и медицинских мероприятий в связи с авариями на инженерно-технических системах определялся исходя из анализа возможных уровней рисков для персонала, попавшего в зону аварии. Во всех случаях эти риски были оценены нами как ничтожные, а угрозы заражения персонала лишь как теоретически возможные. Как правило, в момент аварии персонал находился в средствах индивидуальной защиты или успевал до аварии по-

кинуть помещения, случаи протечек были связаны с протеканием стоков, других жидкостей предварительно инактивированных дезрастворами или нагретых до высоких температур (трубопроводы и другое оборудование системы обработки стоков). Случай нарушения герметичности внутреннего остекления о <на в "заразном" виварии произошёл после завершения в нем работ, проведения текущей дезинфекции помещения, после ухода из него сотрудников и при поддержании в этом помещении требуемых режима разрежения и направленности потоков воздуха. Отсутствие заражения сотрудников, находившихся в зоне а.ва-рий, показало правильность проведенного анализа обстоятельств и последстзий аварий, адекватность и достаточность объемов проведенных мероприятий. Анализ случаев нарушения целостности ИСИЗ и внутри лабораторного заражения сотрудников ГНЦ ВБ "Вектор" возбудителями вирусных инфекций 1-Пгрупп патогенности.

При работе с возбудителями I группы патогенности персонал использует изолирующие средства индивидуальной защиты (ИСИЗ), включающие в себя комплект резиновых перчаток и пневмокостюм "Антибелок - 5". При выполнении в ИСИЗ необходимых манипуляций в лабораторных, технологических или ви-варных помещениях существуют риски нарушения целостности перчаток и оболочки пневмокостюма (проколы, разрезы, порывы). При этих нарушениях возможны также и повреждения кожных покровов работающего в ИСИЗ персонала. В табл. 7 представлены доступные нам данные о нарушениях целостности ИСИЗ персонала, работавшего с возбудителями I группы патогенности.

Таблица 7

Нарушения целостности ИСИЗ в корпусах Центра при работах с возбудителями I группы патогенности___

Место повреждения Локализация и количество повреждений пневмокостюмов

Шлем Рукава Штанины Область туловища Воздуховоды Фильтр

Виварные помещения научных корпусов 3 196 50 25 8

Вирусологические и другие помещения "заразной" зоны 13 17 18 1 1

Корпус № 19 - - - 1 - -

Из представленных данных следует, что в виварных помещениях научных ,<ор-пусов произошло 84,9%, в других помещениях "заразной" зоны корпусов -15,1% нарушений целостности ИСИЗ. При этом были повреждены рукава в 59%, штанины пневмокостюмов в 15,1% и область туловища в 7,5% случаев от их общего количества. В корпусе № 19 был отмечен за анализируемый период времени только один случай повреждения пневмокостюма, который был получен при выполнении подготовительных мероприятий к работам с инфекционным материалом. Ретроспективный анализ случаев повреждений ИСИЗ пока-

зал, что 84,9% случаев нарушения целостности пневмокостюмов произошли при кормлении и уходе за инфицированными вирусами Эбола и Марбург лабораторными животными в вивариях. Мероприятия в отношении персонала (табл. 8), получившего повреждения ИСИЗ при работах с возбудителями I группы па-тогенности, осуществляли согласно разработанным нами инструктивно-методическим документам.

Таблица 8

Мероприятия, выполненные в отношении персонала, пневмокостюмы которого получили повреждения при работах с возбудителями I группы патоген-ности

Проведенные мероприятия, % Корпус № 1 Корпус №6 Корпус № 6а Корпус № 19

Проведение усиленного медицинского наблюдения 34,8 0,7 17,8

Введение дополнительного контроля температуры тела 26,7 0,7 16,3 0,4

Помещение под усиленное медицинское наблюдение в корпус № 20

Помещение под усиленное медицинское наблюдение в корпус № 19 1Д и

Обработка раны, изоляция в корпусе № 19, специфическая профилактика гетерологнчным гамма-глобулином 0,4

Из представленных в табл. 8 данных следует, что только в 2,2% случаев повреждений ИСИЗ сотрудники были изолированы в специальном инфекционном стационаре под усиленное медицинское наблюдение без проведения специфической профилактики и лечения. Однако 0,4% повреждений ИСИЗ потребовали проведения обработки раны, изоляции пострадавших в корпусе № 19, специфической профилактики гетерологнчным гамма-глобулином. Тем не менее, все имевшие место случаи нарушения целостности пневмокостюмов не привели к заражению вирусами Эбола и Марбург работавшего в них персонала. Это стало возможным из-за работы персонала на центральном воздухоснабжении пневмокостюмов, обеспечивающего поддержание постоянного избыточного давления в подкостюмных пространствах, в том числе, и в момент их повреждения; эффективным обеззараживанием поверхностей пневмокостюмов при

выходе из вивариев; своевременностью и достаточностью выполненных медицинских мероприятий при нарушениях ИСИЗ с повреждением подлежащих кожных поверхностей пострадавшего персонала. Кроме того, осуществляемый непрерывный медицинский контроль как за работающими в "заразной" зоне, так и за персоналом, получившим повреждение ИСИЗ при этих работах, но не изолированных в стационаре, давал возможность своевременного выявления и немедленной изоляции в корпусе № 19 сотрудников с повышенной температурой тела или другими отклонениями в состоянии их здоровья.

К сожалению, в практике работ с возбудителями 1-И группы патогенное™ в ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора нам не удалось исключить аварии с нарушениями целостности кожных покровов у персонала, работавшего в "заразных" зонах научных корпусов, в том числе, повлекших внутри лабораторные заражения сотрудников, и, что печальнее всего, с трагическим исходом. На рис. 4 представлена структура травм кожных покровов на руках у сотрудников Центра. Из этих данных следует, что повреждения были нанесены посредством укола в 37% случаев (иглой, проволокой, яриколышем), порезом стеклом -30%>, укусом животного - 7%, нанесением плоской раны-ссадины - 22%, повреждение собственным ногтем - 4%> случаев. Анализ состава сотрудников, совершивших аварии или ее участников (рис. 5) показал, что на категорию научных и к ним приравненных сотрудников пришлось 44%; лаборантов и к ним приравненных - 22%; старшие лаборанты и к ним приравненные составили 19%; остальные 15% пришлись на прочие категории персонала (врачи, стажеры-исследователи, аппаратчики и слесари КИПиА).

■ СЗ УКОЛ

к Порез стеклом | о Укус ЖИВОТНОГО □ Рана - ссадина ! м Повреждение ногтем

30%

Рис. 4. Структура травм кожных покровов на руках у сотрудников Центра.

15%

Рис. 5. Состав сотрудников, пострадавших в аварии.

10%

17%

Рис. 6. Распределение мест совершения аварий.

При этом 52% аварий произошли в виварии; 17% - в полости изолирующих боксов 4БШ; 10% - в помещениях вирусологических блоков "заразной" зоны; остальные 21% были совершены в прочих помещениях "заразной" зоны корпусов (автоклавные, центрифужные, помещения участка сбора и обработки стоков, технологические помещения, боксы для больных и др., рис. 6). Полученные данные однозначно свидетельствовали о том, что 85% аварий были совершены или в них участвовали категории сотрудников непосредственно работавшие с активным вирусным материалом, ассистировавшие им, обслуживавшие инфицированных животных, транспортировавшие животных или отходы.

Персонал, попавший в аварию, был изолирован в корпусе № 19 в 89,6% случаев. В 10,4% случаев получения травм кожи рук персонал работал в технологических помещениях "заразной" зоны, в которых на момент травмирования не было инфекционных материалов. В этих случаях согласно совместному решению Комиссии по контролю соблюдения требований биобезопасности Центра и специалистов МСЧ-163 пострадавшим обработали раны, установили усиленное медицинское наблюдение и предоставили возможность работы в "чистой" зоне. Из сотрудников, изолированных в инфекционном стационаре, превентивному специфическому лечению были подвергнуты 80,8%. В результате грубых нарушений требований биобезопасности в виварии получил укол иглой, инфицированной вирусом геморрагической лихорадки Эбола, заболел и, несмотря на предпринятые специфическое, симптоматическое лечения и реанимационные мероприятия умер один сотрудник. В связи с поздним выявлением больного, заразившегося вирусом Марбург, из-за сокрытия им факта нарушения требований биобезопасности предположительно при центрифугировании было назначено этому больному только симптоматическое лечение. Тем не менее, этот больной выздоровел.

Проведенный анализ внутри лабораторных заражений показал, что соблюдение требований биобезопасности еще не стали для персонала осознанной жизненной необходимостью, доминирующей нормой поведения в "заразной"

зоне при работах с подобными особо опасными возбудителями. К сожалению, эти вопросы имеют отношение к проблеме и роли так называемого "человеческого" фактора и по настоящее время являются актуальными как для практики работ с ООИ в Российской Федерации, так и для других стран, проводящих подобные исследования.

Моделирование акта почтового биотеррортма, актов биотерроризма на территории особо опасного биологического объекта и крупного города, а также результатов их последствий

Следует отметить, что на протяжении более 30 лет работы с ООИ в Г'НЦ ВБ "Вектор" не было ни одного случая аварии, повлекшей выход инфекционного материала из "заразных" зон научно-лабораторных корпусов во внешнюю среду на территории научной площадки, а тем более за ее пределы. Это свидетельствует о высокой степени надежности существующей системы биобезолас-ности в Центре. В связи с этим наиболее вероятными причинами вспышек инфекционных заболеваний, включая ООИ, в п. Кольцово, городе Новосибирске, Сибирском регионе, могут быть случаи их заноса или завоза из эндемичных районов, а также возможные акты биотерроризма. В пользу таких возможностей свидетельствовали ранее рассмотренный нами случай подозрительный на завоз легочной чумы в наш регион, а также занос в 2005 г. в Новосибирскую область и другие территории Российской Федерации из сопредельных с не?, государств перелетными птицами вируса гриппа птиц. Поэтому в дальнейшем нами были рассмотрены сценарии и моделирование возможных случаев биотерроризма и ликвидация их последствий.

При моделировании акта почтового биотерроризма определяли возможность аэрозолирования при вскрытии конверта с бактериальным споровым порошком, изменение концентрации частиц указанного порошка в воздухе, а также определяли количество бактерий, остающихся на руках человека, вскрывавшего конверт. В качестве бактериального спорового тест-микроорганизма ei составе сухих образцов применяли Bacillus thuringiensis (var. dendrolimus), который является действующим началом коммерческих порошковых средств защиты растений - лепидоцида, дендробациллина, битоксибациллина - сухих каолин содержащих бактериальных инсектицидных препаратов, выпускаемых российской промышленностью.

Таблица 13

Возможность аэрозолирования при вскрытии конверта с порошком и изменение концентрации частиц в воздухе на примере лепидоцида

Время, прошедшее после вскрытия конверта, мин Концентрация бактерий в воздухе в месте вскрытия конверта и радиусе 1,0 м, КОЕ-дм"3, для Р 95

0 69600 ± 2227

5 1б0±61

15 183 ±110

При вскрытии конвертов, содержащих 0,5 г порошка лепидоцида, установлено, что в воздухе в радиусе 1,0 м происходит образование бактериального аэрозоля с концентрацией около 7,0 • 104 клеток-дм"3 (табл. 13), более 90% которого представлены крупными аэрозольными частицами. При этом средний медианно-массовый аэродинамический диаметр частиц аэрозоля лепидоцида составил 17 мкм при массовом геометрическом квадратичном отклонении ст6-3,1. Через 5,0 мин концентрация аэрозоля падала на 2 - 3 порядка и сохранялась на этом уровне в течение всего времени наблюдения (15 минут). При этом на руках человека, вскрывавшего конверт (в смывах с рук), обнаруживали содержание В. 1Ьиг^1еп518 в количестве около 1,5 • 108 бактериальных клеток.

Математическое моделирование распределения биологического аэрозоля по пространству помещения, в котором происходило вскрытие конверта, показало, что по истечении незначительного времени в объеме помещения не оставалось свободных от биоаэрозоля зон. При этом концентрация биоаэрозоля была достаточно высокой, чтобы вызвать заражение всего находящегося в помещении персонала. Реальность существования угрозы почтового биотерроризма была подтверждена в октябре-декабре 2001 года регистрацией в Российской Федерации более 600 случаев почтовых отправлений, подозрительных на наличие биологических агентов (в одном случае были выявлены споры возбудителя сибирской язвы), а также выявлением в Новосибирске в 2001-2003 годах 89 "подозрительных" проб.

Моделирование и анализ оценки сценария возникновения эпидемии на примере оспы в результате биотеракта в наукограде Кольцово, городе Новосибирске, в условиях современной «подвижности» населения, запаздывания развертывания мер противодействия и недостаточной их эффективностью в связи с ресурсными ограничениями, показали, что экономика Сибирского региона при эпидемии, может оказаться парализованной в течение нескольких месяцев с колоссальными затратами на ликвидацию ее последствий (более 10 млрд. рублей). В результате проведенных исследований была показана перспективность и необходимость моделирования возможных актов биотерроризма для прогнозирования и оценки масштабов их последствий в интересах разработки адекватных и достаточных мер предупреждения или ликвидации их последствий на местном и региональном уровнях.

Экспериментальная оценка обеззараживания ускоренными электронами образцов и предметов внешней среды, контаминированных или потенциально контамипированных бактериальными и вирусными микроорганизмами.

В качестве возможного не разрушаемого метода обеззараживания почтовой корреспонденции и других образцов внешней среды, контаминированных или потенциально контаминированных бактериальными и вирусными микроорганизмами, включая возбудителей ООН (в том числе в результате биотеракта), рассмотрели возможность использования пучка ускоренных электронов. Одновременно с изучением инактивирующего воздействия нучка ускоренных электронов на бактериальный и вирусный образцы оценили возможные морфологи-

ческие изменения, происходящие при облучении в бактериальных спорах и вирусных частицах, методами атомно-силовой микроскопии и негативного контраста при электронной микроскопии.

В работе использовали жидкие и сухие бактериальные и вирусные препараты, содержащие модельные тест микроорганизмы возбудителей сибирской язвы (Bacillus thuringiensis) и натуральной оспы (вирус осповакцины штамм Л -ИВП - штамм Листер, депонированный в Институте вирусных препаратов). В качестве бактериальных сухих и жидких споровых образцов применяли коммерческое порошковое средство защиты растений - лепидоцид. В качестве вирусного тест-микроорганизма использовали вирус осповакцины штамм Л -ИВП коммерческой оспенной живой сухой вакцины производства Г'П НПО "Вири-он". Подготовленные сухие и жидкие бактериальные и вирусные пробы облучали с помощью импульсного линейного ускорителя электронов ИЛУ-6 при рабочем режиме: энергия электронов в пучке 2,4 МэВ, мощность 4,5 кВт, пиковый ток электронного пучка 0,3 А. Испытывали следующие поглощенные дозы (кГр): 1,0; 2,5; 3,0; 5,0; 6,0; 9,0; 10; 12; 15; 20; 25; 30; 35; 40; 50; 60; 70; 80; 90; 100; 200; 300; 400; 500. После облучения в образцах определяли количество выживших бактерий и вирусов (рис, 7-8).

В результате проведенных исследований были определены динамика и дозы инактивации бактериальных (15-20 кГр) и вирусных образцов (не менее 40 кГр). Определен диапазон рабочих доз облучения, не приводящих к нарушению функциональных или потребительских свойств облучаемых предметов (оптические и магнитные носители информации, денежные бумажные российские и американские знаки, писчая бумага и цветная полиграфическая продукция - научные журналы) - не более 200 кГр. Показана стерилизующая эффективность отработанного и внедренного в практику применения режима облучения пучком ускоренных электронов на установке ИЛУ-6 одноразовой медицинской одежды производства ЗАО "Здравмедтех - Новосибирск" (18,5 кГр).

Разработка комплекса защитных мероприятий от чрезвычайных ситуаций при работах с возбудителями 1-11 групп патогенности, санитарной охране территории опасного биологического объекта от завоза, возникновения и распространения карантинных инфекций и при массовых эпидемических осложнениях, включая акты биотерроризма.

На протяжении более чем 30-летнего периода работы с ООИ в ГНЦ ВБ "Вектор" постоянно совершенствовался с учетом приобретаемого практического опыта комплекс мероприятий по предупреждению и ликвидации последствий чрезвычайных ситуаций и аварий при выполнении работ с возбудителями III групп патогенности, санитарной охране территории р.п. Кольцово, научной площадки Центра от завоза, возникновения и распространения карантинных инфекций и при массовых эпидемических осложнениях, включая акты биотеэро-ризма. В результате только за период 1996 - 2007 г.г. были разработаны, утверждены и внедрены в практику следующие основополагающие документы: 1. Планы-инструкции ликвидации аварий и аварийных ситуаций на инженерно-технических системах биобезопасности научно-лабораторных корпусов.

2. Виды возможных аварийных ситуаций или аварий на инженерно-технических системах биобезопасности в научно-лабораторных корпусах и мероприятия по ликвидации их последствий.

3. Комплексный план организационных и противоэпидемических мероприятий по организации безопасных работ с вирусом натуральной оспы, предупреждению заболеваний и ликвидации очагов натуральной оспы.

4. Комплексный план мероприятий по санитарной охране территории р.п. Кольцово и научной площадки ГНЦ ВБ "Вектор" от завоза, возникновения и распространения карантинных инфекций и при массовых эпидемических осложнениях".

5. Комплексный план мероприятий по ГНЦ ВБ "Вектор" по биологической безопасности.

6. План мероприятий по усилению биобезопасности и противодействию биологическому терроризму в ГНЦ ВБ "Вектор".

7. Перечень необходимых работ по реконструкции инженерных систем и мероприятий для обеспечения безопасного проведения исследований с особо опасными патогенами в ГНЦ ВБ "Вектор" (предложения в доклад ФМБА РФ на заседании Совета безопасности РФ).

8. Перечень необходимых работ и мероприятий для повышения биобезопасности проведения исследований с особо опасными патогенами и противодействия терроризму в ГНЦ ВБ "Вектор" (предложения в Региональную антитеррористическую комиссию).

Кроме этого были подготовлены предложения, вошедшие позднее в "Рекомендации о порядке проведения профилактической работы и тушения пожаров в помещениях с особым санитарным режимом", а также 24 рекомендации и дополнения для "Плана бактериологической защиты населения Новосибирской области при возможных биологических террористических актах (Карантин)", утвержденного в 21)02 году.

10 20 30 60 90

Доза облучения (кГр)

О В. 1Мип'пдюп5|'8 (сухой) Н В. ¡Иилг^егтаэ (жидкий) □ В. эиЬШв гидег (жидкий)

Рис. 7. Инактивация спор В. (Иипг^егшз жидких и сухих образцов под действием пучка ускоренных электронов. - концентрация (КОЕ110"); доза облучения (кСу)

- В. Шипг^сгшБ (сухой); - В. йшги^'епв^з (жидкий);

- В. виЫШв niger (жидкий)

оо

10,0

3 8,0 к

I 6,0 %

| 4,0 1 2,0 0,0

Вир\сосповакцины(сухой-ампулэ) п Вирус осповакцины(жидкий)

О 2,5 5 10 20 30 40 50 60 70 Доза облучения (кГр)

Рис. 8. Инактивация вируса осповакцины в жидких и сухих образцах под действием пучка ускоренных электронов.

ВЫВОДЫ

1 .Выявлено более 20 основных различий между российскими, американскими и руководствами ВОЗ по биологической безопасности и определены приоритетные направления гармонизации и унификации национальных и международных правил биобезопасности. Установлены основные тенденции совершенствования устройства лабораторий с высшим уровнем биобезопасности, а также организации и проведения в них работ с патогенными для человека микроорганизмами.

2. Усовершенствованы с использованием полученных теоретических и экспериментальных данных и существенным образом адаптированы к современным требованиям биобезопасности нормативно-методические документы федерального уровня по работе с ПБА 1-Й групп патогенное™.

3. Разработан комплект инструктивно-методической документации, детально регламентирующей безопасное проведение работ с вирусами 1-И групп пато-генности и обеспечение необходимых требований биобезопасности на конкретном вирусологическом и биотехнологическом опасном биологическом объекте.

4. Оптимизирован комплекс элементов системы обеспечения безопасности работ с вирусами 1-Н групп пагогенности:

- порядок организации и осуществления контроля соблюдения требований биобезопасности при работах с нативными вирусами и зараженными ими биологическими моделями (культуры клеток, РКЭ, лабораторные животные);

- порядок проведения контроля и оценки эффективности функционирования инженерно-технических систем биобезопасности;

- организация контроля соблюдения требований биобезопасности при получении различных вирусных препаратов возбудителей ООИ и оценки остаточной их инфекционноети при выносе из "заразной" зоны;

- оценка эффективности дезинфекционных мероприятий, проводимых в "заразной" зоне;

- порядок организации и контроля эксплуатации СИЗ, ИСИЗ персонала.

5. Усовершенствован метод определения защитной эффективности фильтров тонкой очистки воздуха с использованием в качестве тест аэрозоля тумана турбинного масла с помощью разработанной ГНЦ ВБ "Вектор" мобильной установки. Впервые в реальных условиях без демонтажа из технологических систем проведен сравнительный анализ методов определения защитной эффективности фильтров тонкой очистки воздуха с применением аэрозолей турбинного масла и диоктилфталата (ДОФ). Фракционно-дисперсные характеристики указанных аэрозолей идентичны (ММАД аэрозольных частиц ДОФ составил 0,19 - 0,36

мкм, а турбинного масла - ОД 7 - 0,34 мкм; количество частиц данных размеров составило 97,7 ± 2,3% и 98,6±1,6%, соответственно), что позволяет полу лагь равные показатели коэффициентов проницаемости фильтров тонкой очистки воздуха для указанных тест аэрозолей. Данные экспериментов продемонстрировали равнозначность применения тест аэрозолей ДОФ и турбинного масла для оценки защитной эффективности фильтров тонкой очистки воздуха.

6. Впервые экспериментально в статических и динамических условиях определена проницаемость нетканых материалов (Спанбонда, CMC, Сонтары, Тамвек с плотностью 15-64 г-м"2) с использованием физических и биологических тест аэрозолей. Установлена различная степень их проницаемости. Увеличение плотности исследуемых материалов, их ламинирование повышают защитные барьерные свойства тканей по сравнению с обычными тканями защитной медицинской одежды многоразового применения. Материалы CMC, Тайвек, Сонта-ра в динамическом режиме продемонстрировали более высокие барьерные свойства (Кп < 1,0 %), чем хлопчатобумажная ткань (К„ - 61,4%), или вискоз-но-полиэфирная ткань (К„ - 10 - 12%). Показана перспективность применения нетканых материалов для изготовления трех-пяти-слойных защитных медицинских масок (Кп биологического аэрозоля для всех испытанных нетканых материалов масок составили менее 1,0 % и приближались к аналогичным показателям материала ФПП-15-1,5 респиратора "Лепесток-200").

7. Разработан на основе нетканых материалов костюм "Вектор" для защиты от патогенных биологических агентов (Патент РФ RU на полезную модель 54519, Россия, 2005).

8. Установлено, что в процессе трудовой нагрузки у сотрудников, использующих от 2-х до 5-ти лет ИСИЗ, изменялось функциональное состояние сердечнососудистой системы по гипертензивному или гипотензивному типу (33,2% и 2,4%, соответственно). Систематическое перегревание при работе в ИСИЗ приводило к усилению у них легочной вентиляции и снижению на 18% величины коэффициента утилизации кислорода в легких. Повышение средневзвешенной температуры кожи и температуры "ядра" тела у сотрудников свидетельствовало об изменении в сторону перегрева терморегуляторного статуса их организма.

9. Показано, что основное количество аварий, аварийных ситуаций и технических неисправностей на инженерно-технических системах биобезопасности корпусов с высшим уровнем биобезопасности было связано с поврежде-шем ограждающих строительных конструкций, приточно-вытяжной вентиляции, системы спецканализации, сбора и обработки стоков и системы передаточных устройств. Наиболее травмоопасной зоной работы персонала, связанной с повреждением целостности пневмокостюмов и кожных покровов сотрудников является виварий (84,9% и 85%, соответственно).

10. Экспериментально установлено, что при вскрытии конверта, содержащего 0,5 г порошка спор, в радиусе одного метра образуется аэрозоль с концентрацией 7,0-104 клеток-дм"3, а на руках человека, вскрывавшего конверт, остается 1,5-108 бактериальных клеток. На основе полученных данных разработана ма-

тематическая модель распространения аэрозоля в закрытом помещении. На примере возможных сценариев актов биотерроризма с применением вируса натуральной оспы на территории опасного объекта и крупного города методами математического моделирования определены количественные характеристики зон поражения, динамика эпидемического распространения натуральной оспы за пределы очага заражения.

11. Экспериментально впервые показана возможность использования пучка ускоренных электронов для обеззараживания образцов, зараженных вирусами, а также бактериями, в интересах противодействия почтовому биотерроризму. Полная стерилизация жидких и сухих бактериальных образцов достигалась при поглощенных дозах 15-20 кГр, сухих и жидких вирусных образцов - при дозе не менее 40 кГр. Определен диапазон рабочих доз облучения, не приводящих к нарушению функциональных или потребительских свойств облучаемых предметов и образцов (50 - не более 200 кГр). Показана стерилизующая эффективность отработанного и внедренного в практику режима облучения одноразовой медицинской одежды пучком ускоренных электронов на установке ИЛУ-6 (средняя поглощенная доза составила 18 ± 3,0 кГр).

12. Разработаны на основе полученных теоретических и экспериментальных данных учебные программы, используемые в сертифицированном обучении персонала вирусологических лабораторий, осуществляющих работы с вирусами I-IV групп патогенности.

Практические предложения Полученные в результате выполнения настоящей работы теоретические и практические результаты учтены при разработке нормативно-методических документов федерального уровня:

- Безопасность работы с микроорганизмами I - II групп патогенности (опасности). Санитарные правила-. СП 1.3.1285-03.

- Организация и проведение противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий при натуральной оспе: Методические указания. МУ 3.1.3.5-07.

- Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высоко-вирулентными штаммами вируса гриппа птиц типа А (ВГПА), у людей: Методические указания. МУК. 4.2.2136-06.

- Организация и проведение работ по исследованию методом ПЦР материала, инфицированного вирусами 1 - II групп патогенности. Методические указания (проект).

- Лабораторная диагностика натуральной оспы. Методические указания (проект).

- Рекомендации о порядке проведения профилактической работы и тушения пожаров в помещениях с особым санитарным режимом. Москва: 1 Управление ГУ ГПС МВД РФ, 1996. - С. 32.

Полученные данные использованы при разработке более 70 инструктивно-методических документов, детально регламентирующих различные аспекты биобезопасности в крупном опасном биологическом объекте (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор") при работах с вирусами I-IV групп патогенности.

На основании полученных теоретических и экспериментальных данных разработаны учебные программы:

- Программа теоретических и практических занятий курсов усовершенствования специалистов вирусологических лабораторий с высшим медико-биологическим образованием ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора, утвержденной генеральным директором Центра;

- Программа теоретических и практических занятий курсов специализаций и усовершенствования лаборантов вирусологических лабораторий ФГУН Г'НЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора, утвержденной генеральным директором Центра.

Согласно указанным программам проведено сертифицированное обучение: на базе функционирующего в ГНЦ ВБ "Вектор" специализированного отдела научно-методической подготовки персонала по работе с возбудителями особо опасных инфекций 491 сотрудника ГНЦ ВБ "Вектор", Роспотребнадзора, Рос-сельхознадзора, российской системы лабораторий полио ВОЗ, ФМБА России с различным уровнем образования.

Список публикаций по итогам работы:

1. Л. А. Криницин, Е. А. Ставский, С. В. Нетесов, А. С. Едапин, В. А. Даняев, О. В. Пьянков, Л. Е. Булычев. Сравнительный анализ методов определения эффективности фильтров для очистки воздуха с использованием аэрозолей диок-тилфталата и турбинного масла.// Биотехнология. 1999, N 4, с.57-62.

2. L. A. Krinitsyn, Е. A. Stavsky, S. V. Netesov, A. S. Edapin, V. A. Danyaev, О. V. Pyankov, and L. E. Bulychev. Comparative Analysis of the Methods for Determining the Efficiencyof Air-Purification Filters Using Dioctyl Phthalate and Turbine Oil Aerosols // Applied Biosafety, v. 6, n. 1, 2001, p. 6-12.

3. N.B. Cherny, E.A. Stavskiy, S.V. Netesov. Providing biosafety in research work with class I-IV pathogenic viruses at the SRC VB "Vector"// Applied Biosafety, v. 7, n. 1,2002, p. 15.

4. E.A. Stavskiy, N.B. Cherny, L.A Krinitsin, A.S. Edapin, V.A. Danyayev. Isolating class-Ill biosafety cabinet (4BP1, unified cabinet) for microbiology studies // Applied Biosafety, v. 7, n. 1, 2002, p. 18-19.

5. T.S. Chepurnova, N.B. Cherny, E.A. Stavskiy. Monitoring of specific contamination of laboratory during work with Filoviruses // Applied Biosafety, v. 7, n. 1, 2002, p. 19.

6. E.A. Stavskiy, N.B. Cherny, A.A. Chepurnov, S.V. Netesov. Anthology of Some Biosafety Aspects in Russia (up to I960).- Anthology of Biosafety V. BSL-4 Laboratories. Jonathan Y. Richmond, Editor. 2002, pp. 29 - 92.

7. Evgeniy A. Stavskiy, Robert J. Hawley, Jonathan T. Crane. A Comparison of Containment Facilities and Guidelines in Russia and the United States. - Anthology of Biosafety V. BSL-4 Laboratories. Jonathan Y. Richmond, Editor. 2002, pp. 179 -208.

8. A. Ch:purnov, N. Cherny, T. Chepurnova, E. Stavsky. Monitoring of Specific Contamination of Virology Laboratories During Work with Filoviruses.- Anthology of Biosafety V. BSL-4 Laboratories. Jonathan Y. Richmond, Editor. 2002, pp. 301 -310.

9. E. A. Stavskiy, V. N. Bondarenko, N.B. Cherny, S.V. Netesov. Organizing and carrying out works with animals under stationary laboratory and field conditions- Anthology of Biosafety VI. Arthropod Borne Diseases. Jonathan Y. Richmond, Editor. 2003, 178 p., pp. 113-150.

10. Evgeniy A. Stavskiy, Barbara Johnson, Robert J. Hawley, Jonathan T. Crane, Ni-kolay B. Cherny, Irina V. Renau, Sergey V. Netesov. Comparative Analysis of Biosafety Guidelines of the USA, WHO, and Russia (Organizational and Controlling, Medical and sanitary-Antiepidemiological Aspects)// Applied Biosafety, v. 8, n. 3, 2003, p. 118-127.

11. Ставский E. А., Гришаева О. H., Леляк А. И., Ларина Н. М., Тимукина Л. А., Митько Л. В., Коваль Р. С., Серебров В. В., Ренау И. В., Культенко О. В. Экспе-риментапьная оценка возможности передачи искусственного гена лейкоцитарного интерферона - а-2 человека в другие виды микроорганизмов. // Вестник РАМН. 2004, N 11, с. 29- 32.

12. Ставский Е. А., Гришаева О. Н., Леляк А. И., Серебров В. В., Нетесов С. В. Экспериментальная оценка выживания рекомбинантного штамма В. subtilis ВКПМ В-7092 в желудочно-кишечном тракте крупного рогатого скота, его влияния на микробиоценоз кишечника, а также возможности переноса плаз-мидных генов представителям кишечной микрофлоры.// Ветеринария. 2006, №

12. с. 18-22.

13. Ставский Е. А., Киселев С. А., Ренау И. В., Марченко Ю. В., Культенко О. В., Бакшеева Г. П., Криницын Л. А., Чернов В. И., Ручкин А. В., Поляков Н. В., Клевасов А. И., Корнишин С. Н., Сандахчиев Л. С. Экспериментальная оценка защитных свойств нетканых материалов одноразовой медицинской специальной одежды. Н Гигиена и санитария. №6,2006, с. 34-39.

14. Биологическая безопасность. Термины и определения. // Под ред. Г.Г. Они-щенко, В. В. Кутырева. (М. Н. Ляпин, Е. М. Головко, Т. А. Малюкова, И. Н. Ежов, Т. А. Костюкова, В. В. Кутырев, С. Д. Кривуля, Ю. М. Федоров, И. Г. Дроздов, С. В. Нетесов, А. Н. Сергеев, Е. А. Ставский).- Саратов: «Приволжское книжное издательство». 2006, 112 с.

15. Stavskiy Е.А., Lelyak A.I., Larina N. М., Grishaeva O.N., Serebrov V.V., Gorbunov Yu. A., Dubcn' L. G„ Timukhina L. A, Mit'ko L. V., Koval R. S., Khodyrev V.P. Experimental evaluation of biological risks of introduction of the gene-engineering-modified microorganism (GMM) B. subtilis VKPM B-7092 into the environment. // The ASA Newsletter, ASA 06-3, Issue No. 114, June 28,2006- p. 16-21.

16. Ставский Е. А., Киселев С. А., Ренау И. В., Культенко О. В., Бакшеева Г. П., Криницын Л. А., Марченко В. Ю., Яшин В. А., Сандахчиев Л. С., Чернов В И., Ручкин А. В., Поляков Н. В., Клевасов А. И., Корнишин С. Н. Экспериментальная оценка защитных свойств и перспективности применения некоторых нетканых материалов для изготовления средств защиты органов дыхания.// Гигиена и санитария. № 1,2007, с. 31-34.

17. Ставский Е. А., Леляк А. И., Ларина Н. М., Гришаева О. Н., Серебров В. В., Горбунов Ю. А., Дубень Л. Г., Тимукина Л. А., Митько Л. В., Коваль Р. С., Ходырев В. П. Экспериментальная оценка биологических рисков интродукции генетически модифицированного микроорганизма В. subtílis ВКПМ В -7092 в окружающую среду.// Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. -2007, №1,- с. 35-40.

18. Е. А. Ставский, А. И. Леляк, А. Е. Нестеров, И. В. Ренау, Л. Е. Булычев, Ю. В. Немцов, О. В. Культенко, Г. П. Бакшеева. Изучение динамики накопления интерферона - а -2 человека in vivo, продуцируемого генетически модифицированным микроорганизмом В. subtilis.// Молекулярная медицина. 2007, № 2, с.25-28.

19. Бородулин А. И., Ставский Е. А., Михеев В. Н., Десятков Б. М., Иванова Л. К., Криницын Л. А., Сергеев А. Н., Шабанов А. Н., Шульгина Н. И. Оценка риска заболевания гриппом в группах типового детского комбината // Проблемы охраны здоровья населения и обеспечения гигиенической и эпидемиолог веской безопасности окружающей среды.- Новосибирск.- 2007.- С.390-394.

20. Бородулин А. И., Десятков Б. М., Ставский Е. А. и др. Модель для оценки последствий распыла опасных примесей на станции метрополитена. // Безопасность жизнедеятельности.- 2007.- № 11,- С. 28-32.

21. Ставский Б. А., Зубовичене Н. М., Азаев М. Ш., Сергеев А. Н. Использование защитного оборудования и средств индивидуальной защиты при различных уровнях биологической безопасности. - РИА «Индустрия Безопасности»: Magazine UNIFORM Russia - 2008. - С.46-47.

Патенты и авторские свидетельства:

1. Л. С. Сандахчиев, Е. А. Ставский, В. В. Зиновьев, Н. А. Маркович, Е. И. Ряб-чикова, Э. Г. Малыгин. Ю. Н. Мистюрин, Е. Д. Даниленко, Т. В. Воевода, Л. К. Федосова, В. И. Масычева. Средство для лечения гнойно-некротических ран и ожогов "Коллагель". Патент РФ N 2139044. Приоритет от 16.12.97 г. выдан 10.10.99 г. Бюлл. изобр. № 28.

2. Патент РФ на полезную модель № 54519. Костюм "Вектор" для защиты от патогенных биологических агентов. Патент РФ 54519. 545 МПК А62В 17/00. Авторы: Е. А. Ставский, К. Е. Ставский, Ю. Н. Мистюрин, А. И. Клевасов, С. Н. Корнишин, А. В. Ручкин. Регистрационный номер заявки: 2005126782/22. Опубликовано: 2006.07.10. Бюлл. изобр. № 19.

Нормативно-методические документы: 1. Онищенко Г. Г., Федоров Ю. М., Беземергный В. Е. и др. Безопасность работы с микроорганизмами 1 - II групп патогенности (опасности). СП 1.3.1285-03. - М.: Министерство здравоохранения Российской Федерации, 2003.- 152 с.

2. Онищснко Г. Г., Федоров Ю. М., Ставский Е. А. и др. Организация и проведение противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий при натуральной оспе: Методические указания. МУ 3.1.3,5-07. - М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2007. -63 с.

3. Шипулин Г. А., Подколзин А. Т., Яцышина С.Б. и др. Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высоко-вирулентными штаммами вируса гриппа птиц типа А (ВГПА), у людей: Методические указания. МУК. 4.2.2136-06. - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2006. - 23 с.

4. Марснникова С. С., Рябчикова Е. И., Зайцев Б. Н. и др. Методические указания по лабораторной диагностике натуральной оспы Методические указания (проект).

Доклады н тезисы конференций:

1. Antonov N. A., Stavsky Е. A., Masycheva V. I., Kiselev S. A., Fedosova L. К., Danilenko E. D., Kolokol'tsev A. A. Experimental verification of aerosol use of reaf-eron. // Program and Abstracts. 2-nd International Conference "AIDS, Cancer and Human Retroviruses", St.-Petersburg, Russia, November 29-December 3, 1993, (45 p.).P- 34.

2. L. S. Sandakhchiev, S. S. Marennicova, E. A. Stavskiy. Adherence to WHO Containment and Security Recommendations. /V WHO Ad Hoc Meeting, 14-15 January 1999, Geneva, Switzerland, p. 1-18.

3. E. А. Стархкий, JT. А. Криницын, С. В. Нетесов, Н. Б. Черный, С. Н. Бондарев, П. Ф. Иванов, В. Н. Никитин, Г. М. Голошевский. Микропроцессорные контроллеры в системах управления и контроля инженерно - техническими системами биобе ¡опасности корпуса № 1 ГНЦ ВБ "Вектор". // Проблемы биологической и экологической безопасности. Сборник материалов международной научной конференции, Оболенск, 22 - 24 мая 2000, с. 115-116.

4. Е. А. Ставский, Н. Б. Черный, JI. А. Криницын, А. С. Едапин, С. В. Нетесов. Унифицированный бокс 3 класса биобезопасности для микробиологических и вирусологических исследований. // Проблемы биологической и экологической безопасности. Сборник материалов международной научной конференции, Оболенск, 22 - 24 мая 2000, с. 116-117.

5. Н. Б. Черный, Е. А. Ставский, Л. А. Криницын, И. В. Ренау, С. В. Нетесов. Обеспечение биологической безопасности работ с возбудителями особо опасных вирусных инфекций в ГНЦ ВБ "Вектор". // Проблемы биологической и экологической безопасности. Сборник материалов международной научной конференции, Оболенск, 22 - 24 мая 2000, с. 119-120.

6. Е. А. Ставский, Л. А. Криницын, С. В. Нетесов, А. С. Едапин, В. А. Даняев, О. В. Пьянков, Л. Е. Булычев. Оценка возможности равнозначного применения аэрозолей диоктилфталата и турбинного масла для определения защитной эффективности фильтров тонкой очистки воздуха. // Проблемы биологической и экологической безопасности. Сборник материалов международной научной конференции, Оболенск, 22 - 24 мая 2000, с. 436-437.

7. JI. С. Сандахчиев, Е. А. Ставский, Н. Б. Черный. Биологическая безопасность при проведении работ с вирусом натуральной оспы в Сотрудничающем центре ВОЗ Г'НЦ ВБ "Вектор".// Проблемы биологической и экологической безопасности. Сборник материалов международной научной конференции, Оболенск, 22 -24 мая 2000, с. 113-115.

8. L. A. Krinitsyn, Е. A. Stavskiy, S. V. Netesov, A. S. Edapin, V. A. Danyaev, С). V. Pyankov, L. Е. Bulychev. Assessment of the possibility to use aerosolized cliok-tylphtalate and turbine oil for equvivalent testing of HEP A - filter efficacy. // Protection against microbial threats. Inauguration of the Swedish containment laboratories, Stockholm, 8-10 October, 2000, p. 28.

9. Evgeniy A. Stavskiy, Ph.D., Robert J. Hawley, Ph.D., Jonathan T. Crane, AIA. A Comparison of Containment Facilities and Guidelines in Russiu and the United States.// Protection against microbial threats. Inauguration of the Swedish containment laboratories, Stockholm, 8-10 October, 2000, p. 26.

10. E. А. Ставский, В. И. Чернов, В. Г. Орловский. Комплекс экстренных карантинных и обсервационных мероприятий, проведенных в ГНЦ ВБ "Вектор" при случае, подозрительном на завозную чуму// Труды. Новые информационные технологии в медицине и экологии, IX Международная конференция и дискуссионный клуб. Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 1 июня-10 июня 2001 г,с.142-144.

11. Е. А. Ставский, Н. Б. Черный. Биологическая безопасность при проведении работ с вирусами геморрагических лихорадок и натуральной оспы в ГНИ, ВБ "Вектор"// Труды. Новые информационные технологии в медицине и экологии, IX Международная конференция и дискуссионный клуб. Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 1 июня - 10 июня 2001 г, с. 145-147.

12. А. А Чепурнов, Е. А. Ставский. Методы специфической детекции контаминации вирусом Эбола биологических образцов и зонированных помещений ГНЦ ВБ "Вектор"// Труды. Новые информационные технологии в медицине и экологии, IX Международная конференция и дискуссионный клуб. Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 1 июня - 10 июня 2001 г, с.148-151.

13. N. В. Cherny, Е. A. Stavskiy, S. V. Netesov. Providing biosafety in research work with class I-IV pathogenic viruses at the SRC VB "Vector"// Conference proceedings. The 44th Annual Biological Safety Conference. 17th Anniversary of the American Biological Safety Associaton. Radisson Hotel New Orleans, LA, October 21-24,2001, p. 29.

14. E.A. Stavskiy, S.V. Zykov. Evalution of physiological status of virologists working in personal protection clothes // Conference proceedings. The 44th Annual Biological Safety Conference. 17th Anniversary of the American Biological Safety Associaton. Radisson Hotel New Orleans, LA, October 21-24, 2001, p. 35.

15. E.A. Stavskiy, N.B. Cherny, L.A Krinitsin, A.S. Edapin, V.A. Danyayev. Isolating class-Ill biosafety cabinet (4BP1, unified cabinet ) for microbiology studies // Conference proceedings. The 44th Annual Biological Safety Conference. 17th Anniversary of the American Biological Safety Associaton. Radisson Hotel New Orleans, LA, October 21-24, 2001, p.36.

16. Т. S.'Chepurnova. N.B. Cherny, E.A. Stavskiy. Monitoring of specific contamination of laboratory during work with Filoviruses // Conference proceedings. The 44th Annual Biological Safety Conference, 17th Anniversary of the American Biological Safety Associaton. Radisson Hotel New Orleans, LA, October 21-24, ¿001, p.37.

17. E.A. Stavskiy, N.B. Cherny, l.V. Renau, S.V. Netesov. Comparative analysis of biosafety guidelines of the USA, WHO and RUSSIA (organizational and controlling, medical and sanitary-antiepidemiological aspects)// Conference proceedings. The 45th Annual Biological Safety Conference Biosafety by the Bay! 18th Anniversary of the American Biological Safety Associaton. Hyatt Hotel San Francisco, CA, October 20-23, 2002, p.48.

18. Tatiana S. Chepurnova, Nikolai B. Cherny, Evgueni A. Stavsky. Decontamination of laboratory facilities post suspension of work on Filoviruses and assessment of its efficacy/'' Conference proceedings. The 45th Annual Biological Safety Conference Biosafety by the Bay! 18th Anniversary of the American Biological Safety Association. Hyatt Hotel San Francisco, CA, October 20-23, 2002, p.57.

19. Ауслендер В. Л., Горбунов В. А., Зайцев Б. Н., Кругляков Э. П., Культенко О. В., Нетесов С. В., Ренау И.В., Сербии В. И., Ставский Е. А., Ткаченко В. О., Черный Н. Б. Обеззараживание ускоренными электронами предметов, образцов и проб внешней среды, контаминированных или потенциально контаминиро-ванных бактериальными и вирусными микроорганизмами. - Проблема инфекции в клинической медишше//Тезисы докладов научной конференции и VIII съезда Итало - Российского общества по инфекционным болезням 5-6 декабря 2002 г., 430 е., с 23.

20. Александров В. С., Беркутов А. В., Бачинский А. Г., Бородулин А. И., Кри-ницын JI. А., Мартынюк Р. А., Нетесов С. В., Попов А .С., Сандахчиев JI. С., Сафатов А. С., Ставский Е. А. Проблемы защиты населения Сибирского региона от природных и техногенных угроз биологического характера. //Материалы научно-практической конференции "Дальнейшее совершенствование природной , техногенной и пожарной безопасности населения и территорий - устойчивое развитие Сибирского региона" 15 сентября 2004 г., Новосибирск, Агентство "Сибпринг", С.26-27.

21. Ставский Е. А. Биологическая безопасность при проведении работ с вирусами геморрагических лихорадок и натуральной оспы в ГНЦ ВБ "Вектор"// Материалы научно-практической конференции "Дальнейшее совершенствование природной, техногенной и пожарной безопасности населения и территорий -устойчивое развитие Сибирского региона" 15 сентября 2004 г., Новосибирск, Агентство "Сибпринт", С. 126-127.

22. Короткий JI. М., Никифоров В. В., Кузовлев О. П., Локтева Л. И., Акинфее-ва Л. А., Е!асилевич И. В.. Кузубов В. И., Чепурнов А. А., Ставский Е. А., Нетесов С. В., Щербаков Г. Я., Евстигнеев В. И. Иммунобиологические препараты в профилактике и лечении геморрагической лихорадки Эбола. // Противочумные учреждения России и их роль в обеспечении эпидемиологического благополучия населения страны: Материалы конференции, посвященной 70 - летию Противочумного центра - Москва РОО ЛО «Сокольники», 2004. -с. 205-212.

23. Stavskiy E. A., Gorbunov V. A., Zaitsev B. N.. Kultenko О. V., Renau I.V., Serbin V. I., Tkachenko V. O., P'yankov О. V., Netesov S. V., Auslender V. L., Kruglyakov E. P. Decontamination of environmental samples and specimens contaminated or potentially contaminated with bacteria and viruses using accelerated electrons II Technical program. The Sixth International chemical and Biological Medical Treatment Symposium. 30 april - 5 may 2006. Spiez, Switzerland, p.31.

24. Бородулин А. И., Ставский E. А., Шлычков В. А., Бакшеева Г. А., Десятков Б. М., Золин В. В., Культенко О. В., Пьянков О. В., Ренау И. В., Михеев В. П., Докучаева С. Ф., Иванова JI. К., Каримова Т. В., Федянин А. П. Образование и распространение аэрозолей при вскрытии в помещении конверта с «подозрительным порошком» // Тезисы докладов 15 заседания рабочей группы «Аэрозоли Сибири». - Томск. - 2007. - С. 28.

25. Дроздов И. Г., Сергеев А. Н., Ставский Е. А. Актуальные вопросы биологической безопасности. Роль и место ГНЦ ВБ «Вектор» в системе биологической безопасности. //Материалы научно-практической конференции "Проблемы совершенствования природной, техногенной и пожарной безопасности населения и территорий муниципальных образований субъектов Российской Федерации Сибирского федерального округа" 17 сентября 2008 г., Новосибирск, 2008. -С.10-15.

СТАВСКИЙ Евгений Александрович

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СИСТЕМЫ ОБЕСПЕЧЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ РАБОТ С ВИРУСАМИ I II ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ

Автореф. дисс. на соискание ученой степени доктора медицинских наук Подписано в печать 07.10.2008. Заказ №. Формат 60x84/16. Усл. печ. л. 3,5. Тираж 100 экз. Типография Института катализа им. Г.К. Борескова СО РАН

Содержание диссертации, доктора медицинских наук, Ставский, Евгений Александрович

Том I

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Биологические угрозы дестабилизации биологической безопасности Российской Федерации.

1. 2. Общие принципы обеспечения биологической безопасности в микробиологических лабораториях.

1.3. Современное состояние и тенденции совершенствования биологической безопасности при работах с микроорганизмами I-IV групп патогенности.

1.3.1. Сравнительный анализ основных руководств по биобезопасности России, 46 США и ВОЗ.•.

1.3.2. Сравнительный анализ устройства, инженерно-технического оснащения и 79 организации работы в микробиологических лабораториях с высшим уровнем биобезопасности Швеции, США, Франции, Швейцарии и Российской Федерации.

1. 4. Внутри лабораторные заражения персонала.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Вирусы.

2.2. Бактериальные и вирусные препараты.

2.3. Животные, РКЭ.

2.4. Культуры клеток, питательные среды и сыворотки.

2.5. Культивирование и получение очищенного вируса.

2.6. Титрование вирусных препаратов.

2.7. Проверка отсутствия остаточной инфекционности инактивированных препа- 117 ратов вирусов на новорожденных белых мышах.

2.8. Определение виремии в пробах крови экспериментальных животных.

2.9. Серологические реакции.

2.10. Получение ДНК-зондов для определения РНК ВЭ.

2.11. Оценка инфекционности и отбор проб.

2.12. Иммунизация животных.

2.13. Отбор крови у животных.

2.14. Отбор и подготовка проб крови, фекалий, мочи и слюны животных.

2.15. Отбор смывов с поверхностей, из воздуха.

2.16. Определение концентрации белка.

2.17. Анализ физиологического статуса организма персонала, работающего в 124 ИСИЗ.

2.18. Статистическая обработка результатов.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 3. БИОЛОГИЧЕСКАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ ПРИ РАБОТАХ С ВИРУСАМИ 126 I-II ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ.

3.1. Сравнительный анализ методов определения защитной эффективности филь- 126 тров тонкой очистки воздуха с использованием аэрозолей диоктилфталата и турбинного масла.

3.2. Биологическая безопасность при работах с вирусом натуральной оспы.

3.2.1. Обеспечение биологической безопасности при организации и проведении 132 работ с вирусом натуральной оспы.

3.2.2. Контроль соблюдения требований биобезопасности при получении различ- 187 ных препаратов вируса натуральной оспы и остаточной инфекционности этих образцов.

3.2.2.1. Контроль соблюдения требований биобезопасности при выделении ДНК 187 вируса натуральной оспы и ее остаточной инфекционности.

3.2.2.2. Контроль соблюдения требований биобезопасности при выделении белков 194 вируса натуральной оспы и остаточной инфекционности приготовленных белковых препаратов.

3.2.2.3. Контроль соблюдения требований биобезопасности при выделении реком- 196 бинантных плазмид, содержащих фрагменты ДНК вируса вируса натуральной оспы, и определения их специфической контаминации.

3.2.2.4. Контроль соблюдения требований биобезопасности при получении образ- 199 цов для электронной микроскопии и их остаточной инфекционности.

3.3. Биологическая безопасность при работах с возбудителями геморрагических 203 лихорадок, комплекса клещевых энцефалитов, ВИЧ и других вирусных инфекций.

3.3.1. Обеспечение биологической безопасности при организации и проведении 203 работ с вирусами геморрагических лихорадок на примере возбудителей Эбола и Марбурга.

3.3.2. Контроль соблюдения требований биобезопасности при получении различ- 252 ных вирусных препаратов, остаточной инфекционности и специфической контаминации этих образцов.

3.4. Контроль специфической контаминации воздуха, поверхностей окружающей 260 среды вирусами I-II групп патогенности.

3.4.1. Контроль специфической контаминации вирусом натуральной оспы.

3.4.2. Контроль специфической контаминации филовирусами.

3.4.3. Контроль специфической контаминации высоко патогенным вирусом грип- 282 па А подвида H5N1.

3.5. Организация и контроль качества проведения дезинфекционных мероприятий 288 при работах с возбудителями вирусных инфекций I - II групп патогенности.

3.6. Система организации и контроля эксплуатации СИЗ, ИСИЗ персонала, рабо- 295 тающего с высоко патогенными вирусами. Изучение физиологического статуса организма персонала, работающего в ИСИЗ.

ГЛАВА 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПЕРСПЕКТИВНОСТИ ПРИМЕ- 312 НЕНИЯ НЕТКАНЫХ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ РАЗРАБОТКИ И ПРОИЗВОДСТВА СРЕДСТВ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ ПРИ РАБОТЕ С ВОЗБУДИТЕЛЯМИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ, ВКЛЮЧАЯ ООИ.

- 4.1. Экспериментальная оценка защитных свойств нетканых материалов, перепек- 312 тивных для изготовления одноразовой медицинской специальной одежды. Разработка защитной специальной одежды на основе нетканых материалов.

4.2. Экспериментальная оценка защитных свойств нетканых материалов, перепективных для изготовления индивидуальных средств защиты органов дыхания.

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА МЕР ЗАЩИТЫ ПЕРСОНАЛА ОПАСНОГО БИОЛОГИ- 329 ЧЕСКОГО ОБЪЕКТА, НАСЕЛЕНИЯ ПРИЛЕГАЮЩЕЙ К НЕМУ ТЕРРИТОРИИ ОТ ПРИРОДНЫХ, ТЕХНОГЕННЫХ И ТЕРРОРИСТИЧЕСКИХ УГРОЗ БИОЛОГИЧЕСКОГО ХАРАКТЕРА.

5.1. Разработка комплекса противоэпидемических мероприятий по защите опас- 329 ного биологического объекта и населения, прилегающей к нему территории, от особо опасной антропозоонозной инфекции на примере случая подозрительного на завозную легочную чуму.

5.2. Анализ аварий, аварийных ситуаций на инженерно-технических системах био- 337 безопасности научно-лабораторных корпусов ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотреб-надзора при работах с вирусами I - II групп патогенности.

5.3. Анализ случаев нарушения целостности ИСИЗ и внутри лабораторного зара- 340 жения сотрудников ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора при работе с возбудителями вирусных инфекций I - II групп патогенности.

5.4. Моделирование акта почтового биотерроризма, актов биотерроризма на тер- 348 ритории особо опасного биологического объекта и крупного города, а также результатов их последствий.

5.5. Экспериментальная оценка эффективности обеззараживания ускоренными 364 электронами образцов и предметов внешней среды, контаминированных или потенциально контаминированных бактериальными и вирусными микроорганизмами.

5.6. Разработка комплекса защитных мероприятий от чрезвычайных ситуаций при 372 работах с возбудителями I-II групп патогенности, санитарной охране территории опасного биологического объекта от завоза, возникновения и распространения карантинных инфекций и при массовых эпидемических осложнениях, включая акты биотерроризма.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Совершенствование системы обеспечения безопасности работ с вирусами I-II групп патогенности"

Проблема биологической безопасности вызывает все большую тревогу у населения, политиков и ученых в связи с реальным ростом биологических угроз. Биологическая безопасность включает широкий круг вопросов, решение которых в современных условиях становится частью национальной безопасности как необходимого условия устойчивого развития страны. При этом согласно национальным нормативно-методическим документам под биологической безопасностью понимают систему медико-биологических, организационных и инженерно-технических мероприятий и средств, направленных на защиту работающего персонала, населения и окружающей среды от воздействия патогенных биологических агентов [18,26].

Среди биологических факторов дестабилизации биологической безопасности Российской Федерации и других стран мира определяющее значение имеет инфекционная патология [106, 123, 156]. Поэтому на саммите "Группы восьми" в г. Санкт-Петербурге в 2006 г. данному аспекту биобезопасности было уделено значительное внимание. К началу XXI века около 70% всех регистрируемых болезней человека относились к инфекционным болезням и более 50 млн. человек на планете ежегодно погибали от инфекций [48, 49]. Среди инфекции---онной патологии особую значимость приобрели особо опасные инфекции, новые [256, 257,

294, 386] и вновь возникающие инфекции [48, 72, 106, 123, 181, 381]. С 90-х г.г. отмечена активизация эндемичных очагов чумы с двукратным увеличением количества заболеваний чумой, с 1961 г. появились очаги нового биотипа холеры Эль-Тор, с 1992 г. холеры Бенгал. В последние десятилетия XX века впервые были выявлены такие заболевания, как легио-пеллез, геморрагические лихорадки Эбола, Марбург, JIacca [275, 291, 337, 354], геморрагической лихорадки с почечным синдромом, СПИД, прионовые заболевания и др. [49, 72, 120, 180, 181, 302, 349]. Произошла активизация туляремии, лихорадки Западного Нила [72, 132, 181]. Отмечены эпидемии атипичной пневмонии в Юго-восточной Азии, с 1997 г. заболевания и гибель людей от заражения больной птицей при эпизоотии гриппа птиц типа А подтипа H5N1 и др. [263, 264, 276, 306, 380]. Летом 2005 г. в Новосибирской области, а позднее в ряде других регионов России была зарегистрирована эпизоотия и массовая гибель птиц от вируса гриппа птиц типа А подтипа H5N1, занесенного перелетной птицей из Китая, но к счастью без вовлечения в эпидемический процесс человека [63, 72, 123, 132, 180, 155, 217]. В июле 2007 г. в городе Верхняя Пышма Свердловской области возникла эпидемическая вспышка легионеллеза со смертельными исходами среди заболевших людей.

Кроме этого в мире в настоящее время сложилась крайне не благоприятная ситуация с заболеваемостью так называемыми социально-значимыми инфекциями (гепатиты В, С, ВИЧ/

СПИД, туберкулез). По некоторым оценкам в мире уже инфицировано вирусным гепатитом В около 2,0 миллиардов человек [14, 15, 28, 157, 316, 349]. В Российской Федерации число больных хроническим гепатитом В составляет 7-8 млн. человек [14, 15, 28, 73, 112]. К апрелю 1993 г. 1/3 населения планеты уже была инфицирована туберкулезом. Российская Федерация с показателем заболеваемости 70,99 на 100 тыс. населения (2006 г.) относится к странам с относительно высоким уровнем заболеваемости. При этом 95,51% случаев заболеваний приходится на туберкулез органов дыхания (67,80 на 100 тыс. населения), в том числе, 42 % -па бациллярные формы [42, 105, 165, 269]. Глобальное ухудшение эпидемической ситуации по туберкулезу, в частности, на Африканском и Евро-Азийском материках, сопровождается широким распространением лекарственно-устойчивых микобактерий туберкулеза, в том числе, в Российской Федерации [42, 43, 195, 286, 336, 359, 381]. По данным ВОЗ заболеваемость СПИДом к началу XXI века приобрела масштабы пандемии (каждые 5 с на планете появлялся новый случай ВИЧ-инфекции). По экспертным оценкам Объединенной Программы ООН по ВИЧ/СПИД и ВОЗ в мире в настоящее время насчитывается более 40 миллионов ВИЧ -инфицированных, из них только за последние 2 года заразилось ВИЧ 11,5 млн. человек, что составляет почти 30% от всех случаев, зарегистрированных с начала эпидемии. Более 22 млн. человек уже умерли от СПИДа. Россия с 2002 года находится в стадии генерализованной эпидемии ВИЧ-инфекции и стоит в пятерке территорий мира после Африки, Индии, Китая и стран Юго-Восточной Азии по темпам прироста числа новых случаев ВИЧ - инфекции ежегодно [42, 194].

В условиях современного развития авиационного, железнодорожного, автомобильного и др. транспорта, возросших миграционных и туристических потоков в мире, роста числа беженцев существуют реальные угрозы трансграничного переноса между странами различных вышеуказанных видов возбудителей инфекций, включая особо опасные. При этом как уже хорошо известных медицинским специалистам инфекций, так и ранее не известных, лекарственно-устойчивых или с измененными патогенными свойствами. Кроме этого человечество относительно недавно столкнулось с новой угрозой - биотеррористическими атаками [71, 106, 154-157, 193]. За период с 1960 по 1999 г. в мире зарегистрировано 66 преступлений и 55 террористических актов, в которых использовались биологические агенты. Однако ни одна попытка их применения с целью массового поражения не оказалась успешной. Тем не менее, восемь преступлений привели к гибели среди гражданского населения 29 человек [313]. В результате случаев почтового биотерроризма в США этот список пополнился еще пятью жертвами. Эти события показали, что мировое сообщество пока не готово к адекватному реагированию на случаи террористического применения инфекционных патогенов и обречено в связи с этим нести людские, а также огромные экономические и политические потери [48, 49, 106, 156, 297, 315, 333]. В связи с этим рядом исследователей были предприняты шаги по оценке вероятности использования некоторых возбудителей инфекционных болезней в качестве бактериологического оружия [47, 48, 154-156, 169, 241], а также попытки моделирования различных сценариев актов биотерроризма для прогнозирования и оценки масштабов их последствий в интересах разработки адекватных и достаточных мер предупреждения или ликвидации их последствий на местных, региональных и общегосударственных уровнях [342, 343]. В Российской Федерации также предпринимались попытки прогнозирования последствий возможных чрезвычайных ситуаций биологического характера [71]. В интересах противодействия почтовому биотерроризму рядом исследователей оценивалась возможность использования пучка ускоренных электронов для обеззараживания образцов, зараженных бактериями [7]. В отношении образцов, зараженных вирусами, в известной литературе нет сведений.

Вышеизложенные факты обусловили признание проблемы противодействия биологической опасности и обеспечения биологической безопасности, в целом, в качестве важнейшего направления укрепления национальной безопасности Российской Федерации, что нашло свое отражение в ряде федеральных документов. Вчастности,.Федеральном Законе "О безопасности" (1992 г.); "Основы государственной политики в области обеспечения химической и биологической безопасности Российской Федерации на период до 2010 года и дальнейшую перспективу" (2003 г.); Постановление Правительства Российской Федерации № 64 "О правительственной комиссии по вопросам биологической и химической безопасности Российской Федерации" (2005 г.); Постановление Правительства Российской Федерации № 303 "О разграничении полномочий федеральных органов исполнительной власти в области обеспечения биологической и химической безопасности Российской Федерации" (2005 г.); Концепция федеральной целевой программы "Национальная система химической и биологической безопасности Российской Федерации (2009-2013 годы)", утвержденной распоряжением Правительства Российской Федерации от 28 января 2008 г. № 74-р. Кроме этого возникла необходимость разработки законодательных, нормативно-методических документов, соответствующей рабочей инструктивно-методической документации, регламентирующих проведение активных действий по изучению возбудителей инфекционных заболеваний в интересах создания средств профилактики, диагностики и лечения вызываемых ими инфекционных заболеваний. Дальнейшего развития и совершенствования медико-биологических, организационных, инженерно-технических мероприятий и средств, направленных на защиту работающего персонала, населения и окружающей среды от воздействия патогенных биологических агентов, а также системы обучения персонала [158].

Как известно, техника безопасности при проведении исследований с высоко патогенными микроорганизмами включает два основных фактора - технический и человеческий [70,186]. Технические элементы представляют собой систему первичных и вторичных защитных барьеров [50, 51, 70, 186]. Человеческий фактор определяется уровнем подготовки и обучения безопасным методам работы с возбудителями инфекционных заболеваний персонала лабораторий, знанием возможных источников заражения, и таким образом, тесно коррелирует с опытом проведения таких исследований [70, 186, 383, 384]. Важнейшей особенностью исследований, проводимых в вирусологических лабораториях, является потенциальная опасность инфицирования персонала, контактирующих с персоналом лиц и окружающей среды объектами исследования [70, 265 - 268, 278]. При этом отличительной особенностью для вирусологических лабораторий является отсутствие универсальных средств терапии, каковыми являются антибиотики в случае бактериальных и риккетсиозных заболеваний, и средств специфической профилактики для большинства открытых в последние десятилетия возбудителей вирусных инфекций.

Накопление знаний о природе микроорганизмов привело к появлению специализированных по техническому оснащению лабораторий для изучения возбудителей инфекционных заболеваний различной природы [51, 70]. К вирусологии в последние десятилетия тесно примыкают новые научные дисциплины молекулярная биология и генетическая инженерия, объектом исследований, которых служит генетический материал (РНК и ДНК) микроорганизмов. Работы по выделению генетического материала и его использованию, особенно высоко патогенных возбудителей, получению генетически модифицированных микроорганизмов (ГММ) также требуют обеспечения надежной биологической безопасности [20-22, 106, 210, 211].

К моменту начала активных работ по изучению биологии вирусов I-II групп патоген-ности российские научно-исследовательские учреждения различных ведомств столкнулись с проблемой практически полного отсутствия или устаревших нормативных и инструктивно-методических документов, в которых были бы четко изложены вопросы организации и безопасного проведения работ с этими вирусами в лабораториях. В частности, с вирусом натуральной оспы (1994-1995 г.г.). В этот период времени вирусологи могли использовать только федеральные инструкции по лабораторной диагностике натуральной оспы, по организации и проведению дезинфекционных мероприятий при натуральной оспе, по проведению обязательных прививок против натуральной оспы, по проведению мероприятий в случае заноса натуральной оспы, разработанные в 1972-1976 г.г. [83-88, 172]. Однако, указанные документы к этому времени безнадежно устарели и также не содержали никаких указаний и рекомендаций по вопросам организации и безопасного проведения работ в лабораторных условиях. В том числе по таким важным аспектам, как работам с животными, по методам подготовки и контроля использования средств индивидуальной защиты персонала, по проведению дезинфекции и контролю ее эффективности, по контролю работоспособности инженерно-технических систем биобезопасности, по предупреждению аварий, аварийных ситуаций и ликвидации их последствий при работах с вирусами и т.п. На основе известных литературных источников не было возможным произвести выбор наиболее безопасного и рутинного для вирусологической практики способа заражения хорион-аллантоисной оболочки (ХАО) РКЭ. Были известны два способа заражения ХАО РКЭ [134, 204]. При первом способе при подготовке РКЭ и инфицировании использовали ножницы, пинцеты, шприцы, стеклянные колпачки или крышечки от стеклянного бюкса [134, 204]. При втором способе - копья, специальные пилочки, фрезы (диски) бормашины и саму бормашину, иглы, стеклянные шприцы, покровные стекла [134, 204]. Применение этих средств в условиях "заразной" зоны было травмоопасным для персонала и повышало процент отбраковки РКЭ. Необходимо было отработать менее травмоопасный для персонала и РКЭ метод. Действующие - на тот период времени Санитарные правила [16] содержали, к сожалению, только ограниченный набор общих принципов и требований, необходимых для организации и проведения работ с ПБА I-II групп патогенности.

В учреждениях, работающих с патогенными микроорганизмами, для высокоэффективной очистки воздуха в вентиляционных и технологических системах, являющихся одними из основных инженерно-технических систем биобезопасности, применяют различные типы фильтров тонкой очистки воздуха [52, 54, 166, 284, 285]. Контроль задерживающей способности этих фильтров осуществляют с помощью различных методов и тест-аэрозолей [52, 69]. При этом в разных государствах предпочтение отдают какому-то одному из них. В Англии стандартным является метод проверки фильтров по аэрозолю красителя метиленого синего [255], в Германии - с применением аэрозоля турбинного масла [284, 285]. В США для оценки задерживающей способности фильтров тонкой очистки типа НЕРА (High Efficiency Particulate Air Filter), применяющихся в аналогичных учреждениях для тех же целей, используют аэрозоль диоктилфталата (ДОФ) в стационарных и мобильных установках [284, 285, 368, 369]. В России в качестве стандартных используют методики с применением бактериальных тест аэрозолей, масляного тумана или других тестов [16, 59]. При этом в качестве основного применяется до настоящего времени метод с использованием бактериального тест аэрозоля, который позволял испытывать фильтры, как на специальном стационарном стенде, так и после его монтажа в систему и испытания по месту установки без демонтажа из системы [17]. Применение масляного тумана для оценки фильтров тонкой очистки воздуха ограничивалось, в том числе, и, в ГНЦ ВБ "Вектор", рамками испытаний фильтров на специальных стационарных стендах в связи с отсутствием подобных мобильных отечественных установок. В связи с ростом с конца 90-х годов международного сотрудничества между ведущими биологическими отечественными и зарубежными центрами, а также приобретением Российской Федерацией зарубежного защитного лабораторного оборудования (различных типов "ламинарных" шкафов, биокабинетов и т.п., оснащенных НЕРА-фильтрами) встал вопрос по проведению научных исследований и экспериментов в одинаковых или сопоставимых лабораторных условиях. В том числе и по степени очистки подаваемого (в) или удаляемого из Рабочей зоны лаборатории воздуха, адекватности и корректности получаемых результатов аттестации различных фильтров тонкой очистки воздуха с помощью российских методов и тест аэрозолей показателям, получаемым с помощью международных методов и тест аэрозолей. Однако в известной нам литературе эти вопросы не были освещены.

Имеющиеся в доступной литературе данные об устройстве, инженерно-технических системах биобезопасности, о методах организации и проведения работ с патогенами, средствах индивидуальной защиты персонала в микробиологических лабораториях устарели [50, 51, 69]. Материалы о современном состоянии указанных вопросов в новейших зарубежных лабораториях с высшим уровнем биологической безопасности, а также данные о тенденциях в области обеспечения биологической безопасности в этих лабораториях мало доступны, носят разрозненный характер и мало информативны. Однако они необходимы для организации и проведения работ с патогенами в российских лабораториях согласно современным требованиям. В частности, проведения комплекса инженерных мероприятий по снижению риска воздействия опасных биологических факторов на население, производственную и социальную инфраструктуру и экологическую систему при эксплуатации опасных объектов. Совершенствованию систем контроля, управления, в том числе автоматической противоаварийной защиты технологических процессов, обеспечению эффективного функционирования дежур-но-диспетчерской службы предприятий. Разработке для опасных объектов экономически приемлемых технологий, исключающих или в максимальной степени снижающих использование в технологическом цикле патогенных микроорганизмов или минимизирующих их негативное воздействие на население, производственную и социальную инфраструктуру и экологическую систему; по гармонизации нормативно-правовой базы Российской Федерации в области обеспечения биологической безопасности с нормами международного права, международными договорами и соглашениями, участницей которых является Российская Федерация, в области обеспечения биологической безопасности.

В Российской Федерации известны различные виды защитной одежды для работы с микроорганизмами I-IV групп патогенности (противочумный костюм, "Биотехнолог", "СКБ", "Кварц" и др.), изготовленные из натуральных, искусственных или смешанных тканей [17, 35-37, 69, 205]. Указанные СИЗ являются многоразового применения и после каждого использования в работе требуют проведения соответствующих циклов их обеззараживания и стирки [38, 69, 200]. В настоящее время на основе нетканых материалов типа "Melt -Blown", "Spanbond" и др. за рубежом и в нашей стране изготавливают защитную одежду медицинского назначения разового применения [4]. Однако в доступной литературе отсутствуют сведения, как о защитной эффективности нетканых материалов, так и самой защитной спецодежды медицинского назначения, изготовленной на их основе.

Безопасные условия проведения работ с высоко патогенными вирусами в лабораториях безусловно обеспечиваются не только использованием инженерно-технических средств и наличием хорошо подготовленного, обученного персонала к выполнению обычных работ и к ликвидации последствий аварий, но и осуществлением ряда контрольных мероприятий. В - частности, контроль соблюдения персоналом-требований-биологической безопасности, контроль за эффективностью работы инженерных систем защиты, контроль полноты инактивации передаваемых из "заразной" части лаборатории материалов, выявление потенциально опасных лабораторных операций, контроль специфической загрязненности лабораторных помещений и т.п. При этом вопросы разработки методов экстренной диагностики и контроля специфической загрязненности нуждаются в специальной разработке для каждого конкретного вирусного возбудителя. В связи с относительной сложностью и длительностью индикации и идентификации вирусных патогенов в ряде случаев целесообразно оценивать эффективность текущих и заключительных дезинфекционных мероприятий по санитарно-показа-тельной микрофлоре или специально подобранным тест бактериям, обладающим заведомо большей устойчивостью к инактивирующему воздействию, чем возбудитель, против которого направлены мероприятия.

Таким образом, высокий общественный и индивидуальный уровень опасности вирусов 1-Й групп патогенности и вызываемых ими инфекций, способных к эпидемическому и пандемическому распространению, риск высвобождения из лабораторий искорененных, искореняемых или редких особо опасных инфекций (вирусы оспы, полиомиелита, Марбург, Эбола, бактерии чумы и т.п.), интенсификация и рост объемов трансграничных людских и материальных потоков, недостаточный уровень разработки или отсутствие нормативной и инструктивно-методической документации, регламентирующей работы с вирусами I-II групп патогенности, необходимость гармонизации и унификации национальных руководств по биобезопасности с международными, необходимость совершенствования средств защиты персонала и технического устройства российских медико-биологических лабораторий до современного уровня зарубежных, отсутствие программ обучения персонала, работающего с особо опасными вирусами, угрозы биотерроризма с применением указанных вирусов явились актуальным основанием для проведения данной исследовательской работы.

2. Разработка нормативных документов федерального уровня, регламентирующих требования биологической безопасности при работах с вирусами I-II групп патогенности. - -

4. Разработка методов безопасного проведения работ с вирусами I-П групп патогенности, средств защиты и контроля систем обеспечения биобезопасности этих работ.

- анализ аварий и аварийных ситуаций при работах вирусами I-II групп патогенности;

- разработка комплекса противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий по предупреждению и ликвидации последствий чрезвычайных ситуаций и аварий при выполнении работ с возбудителями I-II групп патогенности, санитарной охране территории, прилегающей к ГНЦ ВБ "Вектор" от завоза, возникновения и распространения карантинных инфекций, а также последствий актов биотерроризма;

- экспериментальная оценка обеззараживания ускоренными электронами образцов и предметов внешней среды, контаминированных или потенциально контаминированных вирусами.

8. Разработка программ обучения персонала, привлекаемого к работам с вирусами I-II групп патогенности.

Научная новизна, полученные результаты.

1. Проведено сравнительное изучение Российских Санитарных Правил с Руководствами по биобезопасности США и ВОЗ, регламентирующими работу с патогенами в медико-биологических лабораториях. Проведен анализ практики применения основных положений указанных руководств в современных и новейших лабораториях с высшим уровнем биобезопасности США, Швеции, Франции, Швейцарии и России. Создана информационная база сравнения национальных и международных руководств по биобезопасности, а также устройства, оснащения, организации и проведения работ с патогенами в отечественных и зарубежных лабораториях. На ее основе выявлено более 20 возможных.направлений гармонизации и унификации национальных и международных правил по биобезопасности, а также определены тенденции совершенствования устройства лабораторий и биологической безопасности в них.

2. Получены экспериментальные данные, позволившие сформулировать требования и правила, регламентирующие работу с вирусами I-H групп патогенности:

- продемонстрирована обеззараживающая активность дезинфицирующих и лизирующих растворов, использующихся для получения препаратов особо опасных вирусов с целью их выноса из "заразной" зоны.

- определена динамика инактивации вируса натуральной оспы растворами перекиси водорода и едкого натра;

- определен уровень обееменённоети крови, слюны и экскретов экспериментально инфицированных филовирусами животных. Установлено, что наибольший титр вируса Марбург наблюдался в крови (7,0-9,5 lg ЛД50). В слюне, моче и кале концентрация вируса была существенно ниже - на уровне 2,3 - 3,5 lg ЛД50, при этом титр вируса в моче и кале был одинаков и достоверно превышал содержание вируса в слюне. Показано, что наибольшую угрозу заражения для персонала, работающего с филовирусами, представляет кровь инфицированных ими животных.

3. Разработан комплект инструктивно-методических документов, регламентирующих безопасное проведение работ с вирусами 1-П групп патогенности в крупном национальном вирусологическом и биотехнологическом опасном биологическом объекте (ГНЦ ВБ "Вектор"), а также усовершенствованы внутри объектовые системы контроля обеспечения биобезопасности указанных работ:

- система контроля над организацией и проведением работ с вирусами I-П групп патогенности;

- система контроля качества текущих и заключительных дезинфекционных мероприятий в "заразной" зоне;

- система контроля соблюдения требований биобезопасности при полученииразличных.препаратов вирусов ООИ и оценки остаточной их инфекционности при выносе из "заразной" зоны;

- система организации и контроля эксплуатации ИСИЗ персонала, работающего с высоко патогенными вирусами;

- система предупреждения и ликвидации последствий аварий и аварийных ситуаций.

4. Экспериментально в статических и динамических условиях, впервые оценена проницаемость нетканых материалов Спанбонда, CMC, Сонтары, типа "Tyvek" с использованием физических и биологических тест аэрозолей. Показано, что повышение плотности и ламинирование материалов повышает их защитные барьерные свойства. Установлено, что наиболее высокими защитными свойствами обладают нетканые материалы CMC, Тайвек, Сонтара и ламинированные ткани Спанбонд. Указанные ткани по своим барьерным защитным свойствам превосходят ткани, используемые для изготовления защитной медицинской одежды многоразового применения и перспективны для конструирования и изготовления одноразовых средств индивидуальной защиты (спецодежды) и средств индивидуальной защиты органов дыхания (масок).

5. Показано, что наиболее подвержены риску внутри лабораторного заражения сотрудники, работающие с нативным материалом особо опасных вирусов или инфицированными ими животными в виварных помещениях. Реальность существования угроз для персонала от выявленных рисков подтверждена двумя случаями внутри лабораторного заражения возбудителями геморрагических лихорадок Марбург и Эбола сотрудников ГНЦ ВБ "Вектор".

-учного учреждения (ФГУН ГНЦ ВБ-Вектор") и города Новосибирска при террористическом - . применении вируса натуральной оспы. Определены количественные характеристики зон поражения и динамика эпидемического распространения натуральной оспы за пределы очага заражения.

Практическая значимость работы. 1. С использованием полученных в ходе настоящего исследования теоретических и практических результатов разработаны нормативно-методические документы федерального уровня, соавтором которых соискатель является:

1.1. Онищенко Г. Г., Федоров Ю. М., Безсмертный В. Е. и др. Безопасность работы с микроорганизмами I - II групп патогенности (опасности). СП 1.3.1285-03. - М.: Минздрав России, 2003. - 152 с.

1.2. Онищенко Г. Г., Федоров Ю. М., Ставский Е. А. и др. Организация и проведение противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий при натуральной оспе: Методические указания. МУ 3.1.3.5-07. - М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2007.- 63 с.

1.4. Онищенко Г. Г., Федоров Ю. М., Шевырева М. П. и др. Организация и проведение работ по исследованию методом ПЦР материала, инфициро-ванного вирусами I - II групп патоген-ности. Методические указания (проект) — М.: ФГУ здравоохранения «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2008 — 36 с.

1.5. Шипулин Г. А., Подколзин А. Т., Яцышина С. Б. и др. Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высоко-вирулентными штаммами вируса гриппа птиц типа А (ВГПА), у людей: Методические указания. МУК. 4.2.2136-06. -М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2006. - 23 с.

1.6. Биологическая безопасность. Термины и определения. // Под ред. Г.Г. Онищенко, В. В. Кутырева. - Саратов: «Приволжское книжное издательство», 2006,- 112 с.

2. Разработан для крупного национального вирусологического и биотехнологического опасного биологического объекта - ГНЦ ВБ "Вектор" комплект инструктивно-методических документов (более 70 документов), детально регламентирующих различные аспекты биобезо

-----пасности при работах с вирусами I-II групп патогенности.

3. Разработан комплекс противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий предупреждения вирусных заболеваний персонала и населения при работах с возбудителями особо опасных вирусных инфекций (натуральная оспа, Эбола, Марбург и др.). Разработаны внутри объектовые системы контроля обеспечения биобезопасности работ с вирусами I - II групп патогенности:

- система контроля над организацией и проведением указанных работ;

- контроля и оценки эффективности функционирования инженерно-технических систем биобезопасности;

- контроля соблюдения требований биобезопасности при получении различных вирусных препаратов возбудителей ООИ и оценки остаточной их инфекционности при выносе из "заразной" зоны;

- контроля качества проведения дезинфекционных мероприятий в "заразной" зоне;

4. Изучены физиологические показатели деятельности сердечно-сосудистой системы, органов дыхания и температурный статус у персонала, работающего в ИСИЗ, в рамках нормирования продолжительности работы в них, а также совершенствования системы подбора кадров и оценки их пригодности к работам в ИСИЗ.

5. Отработан и внедрен в практику применения режим стерилизующего облучения пучком ускоренных электронов на установке ИЛУ-6 одноразовой медицинской одежды производства ЗАО "Здравмедтех - Новосибирск" (средняя поглощенная доза составила 18 ± 3,0 кГр при 95% вероятности).

8. Полученные теоретические и экспериментальные данные реализованы.в разработанных . учебных программах, утвержденных руководителем Роспотребнадзора, и сертифицированном обучении персонала с различным уровнем образования на базе функционирующего в ГНЦ ВБ "Вектор" специализированного отдела научно-методической подготовки персонала по работе с возбудителями ООИ в соответствии с Федеральной лицензией № 166191 от 30.03.06 г.

Положения, выносимые на защиту:

2. Разработанные с учетом полученных теоретических и экспериментальных данных нормативно-методические документы федерального уровня адаптированы к современным требованиям биобезопасности при работах с ПБА I-II групп патогенности, а разработанная инструктивно-методическая документация внутри объектового уровня, детально регламентирует безопасное проведение работ с вирусами I-II групп патогенности и обеспечение необходимых требований биобезопасности.

3. Усовершенствованная система обеспечения безопасности работ с вирусами 1-Й групп патогенности в крупном национальном вирусологическом и биотехнологическом опасном биологическом объекте:

3.2. Обеспечивает санитарную охрану территории опасного биологического объекта (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор"), населения и прилегающих к объекту территорий (наукограда Кольцово, города Новосибирска) от последствий чрезвычайных ситуаций при выполнении работ с возбудителями ООИ, завоза карантинных инфекций, а также актов биотерроризма.

4. "Человеческий" фактор даже в условиях бесперебойного и эффективного функционирования полного комплекса инженерно-технических систем биобезопасности, использования кондиционных СИЗ, ИСИЗ, имеет определяющее значение для внутри лабораторного заражения персонала при работах с особо опасными вирусами. Наибольшему риску внутри лабораторного заражения подвержены сотрудники,работающиес нативнымматериалом особо опасных вирусов и инфицированными ими животными в виварных помещениях.

5. Предложенные методы математического моделирования возможных сценариев развития почтового биотерроризма с применением спор сибирской язвы в замкнутом помещении, актов биотерроризма на территории крупного национального вирусологического и биотехнологического опасного биологического объекта (ГНЦ ВБ "Вектор"), территории муниципального образования (п. Кольцово) и крупнейшего регионального центра (г. Новосибирска) с применением вируса натуральной оспы обеспечивают решение задач прогнозирования и оценки масштабов распространения биологических аэрозолей, заражения объектов, территорий и населения, находящегося на них, планирования и принятия адекватных управленческих решений по ликвидации медико-санитарных последствий биотеракта на местном и региональном уровнях.

Апробация работы.

Основные положения работы доложены на:

- Международной научной конференции "Защита от микробных агентов. Инаугурация Шведской лаборатории максимальной биозащиты Стокгольм, 8-10 октября 2000 г.,

- Научной конференции "Проблема инфекции в клинической медицине" и VIII съезде Итало-Российского общества по инфекционным болезням 5-6 декабря 2002 г.,

- Межведомственной Комиссии по контролю над генно-инженерной деятельностью (МВКГИД) в Министерстве науки и технологий РФ, Москва, 19 декабря 2003 г.,

- Ежегодной Конференции - семинаре "Биобезопасность, физзащита" Агентства по Снижению Угрозы Министерства Обороны США (DTRA), Будапешт, Венгрия, 24 марта - 3 апреля

2004 г.,------------

- Научно-практической конференции "Дальнейшее совершенствование природной, техногенной и пожарной безопасности населения и территорий — устойчивое развитие Сибирского региона", 15 сентября 2004 г., Новосибирск,

- Конференции "Противочумные учреждения России и их роль в обеспечении эпидемиологического благополучия населения страны", посвященной 70 - летию Противочумного центра, Москва, 2004.,

- VI-ом Международном симпозиуме по методам обнаружения и противодействия химической и биологической угрозе (CBMTS), Шпиц, Швейцария, 30 апреля - 5 мая 2006.,

- П-ом Международном Семинаре-Совещании специалистов санитарно-эпидемиологических служб стран СНГ по актуальным вопросам мониторинга за гриппом, в том числе гриппом птиц, Новосибирск, 28-29 мая 2007,

- Российском медицинском форуме-2007. Молекулярная медицина и биобезопасность. Семинаре - тренинге "Актуальные вопросы защиты населения от биологических угроз", 17-19 октября 2007,

- Научно-практической конференции в рамках XVII специализированной выставки СИБ-БЕЗОПАСНОСТЬ СПАССИБ, 16-18 сентября 2008 г., Новосибирск.

Автор искренне признателен и благодарен сотрудникам отделов биобезопасности, музея вирусных культур, контроля инженерных систем биобезопасности: В. П. Мунтянову

В. П. Назарову, А. А. Гуськову}, Е. Б. Сокуновой. И. В. Ренау, О. В. Культенко, Г. П. Бакза совшеевой, Н. А. Мыриной, к.т.н. JI. А. Криницыну, В. А. Даняеву, |А. Н. Едапину местную работу.

Глубоко благодарен руководству ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора за предоставление возможности на протяжении ряда лет проводить работы по теме диссертации д.б.н., профессору, академику РАН JI. С. Сандахчиеву , моему научному консультанту, д.м.н., профессору И. Г. Дроздову.

Искренне признателен и благодарен сотрудникам Центра и сотрудникам других учреждений, с которыми автор сотрудничал или обсуждал результаты работ д.б.н., профессору, чл-корр. РАН С. В. Нетесову, д.ф.-м.н. Бородулину, д.м.н., профессору А. Н. Сергееву, д.б.н., профессору Е. И. Рябчиковой, д.б.н., профессору А. А. Ильичеву, к.ф.-м.н. А. С. Сафатову, к.ф.-м.н. А. Г. Бачинскому, С. А. Киселеву, к.т.н. О. В. Пьянкову, к.б.н. С. И. Зыкову, к.б.н. А. П. Агафонову, к.б.н. Р. А. Мартынюк, к.б.н. А. М. Шестопалову, к.б.н. JI. Ф. Бакулиной, д.б.н. Татькову С. И., к.б.н. Кочневой Г. В., к.б.н. Гашниковой Н. М., В. И. Чернову, к. м. н. Н. Н. Головченко, к.м.н. JI. М. Короткину, д.ф.-м.н. В. JI. Ауслендеру, к.ф.-м.н. В. А. Горбунову, А. И. Леляку, к.б.н. О. Н. Гришаевой. Кроме этого моим зарубежным коллегам - ведущим специалистам по биобезопасности США Jonatan Y. Richmond, Robert J. Hawley, Barbara Johnson (экс-президенты ABSA ), Jon Crane (ведущий специалист по строительству, архитектуре и проектированию фирмы CUH2A, Inc., США) в соавторстве с которыми был подготовлен и опубликован ряд научных работ.

Автор глубоко благодарен и признателен семье, предоставившей возможность работать над диссертацией.

Заключение Диссертация по теме "Вирусология", Ставский, Евгений Александрович

выводы

1.Выявлено более 20 основных различий между российскими, американскими и руководствами ВОЗ по биологической безопасности и определены приоритетные направления гармонизации и унификации национальных и международных правил биобезопасности. Установлены основные тенденции совершенствования устройства лабораторий с высшим уровнем биобезопасности, а также организации и проведения в них работ с патогенными для человека микроорганизмами.

3. Разработан комплект инструктивно-методической документации, детально регламентирующей безопасное проведение работ с вирусами I-II групп патогенности и обеспечение необходимых требований биобезопасности на конкретном вирусологическом и биотехнологическом опасном биологическом объекте.

4. Оптимизирован комплекс элементов системы обеспечения безопасности работ с вирусами I-II групп патогенности:

- организация контроля соблюдения требований биобезопасности при получении различных вирусных препаратов возбудителей ООИ и оценки остаточной их инфекционности при выносе из "заразной" зоны;

- оценка эффективности дезинфекционных мероприятий, проводимых в "заразной" зоне;

- порядок организации и контроля эксплуатации СИЗ, ИСИЗ персонала.

5. Разработан комплекс организационных, противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий, направленных на предупреждение и ликвидацию последствий чрезвычайных ситуаций и аварий при выполнении работ с возбудителями I-II групп патогенности, предупреждение вирусных заболеваний населения территорий, расположенных вблизи опасного биологического объекта, завоза карантинных инфекций, а также возможных актов биотерроризма. 5. Усовершенствован метод определения защитной эффективности фильтров тонкой очистки воздуха с использованием в качестве тест аэрозоля тумана турбинного масла с помощью разработанной ГНЦ ВБ "Вектор" мобильной установки. Впервые в реальных условиях без демонтажа из технологических систем проведен сравнительный анализ методов определения защитной эффективности фильтров тонкой очистки воздуха с применением аэрозолей турбинного масла и диоктилфталата (ДОФ). Фракционно-дисперсные характеристики указанных аэрозолей идентичны (ММАД аэрозольных частиц ДОФ составил 0,19 - 0,36 мкм, а турбинного масла - 0,17 - 0,34 мкм; количество частиц данных размеров составило 97,7 ± 2,3% и 98,6±1,6%, соответственно), что позволяет получать равные показатели коэффициентов проницаемости фильтров тонкой очистки воздуха для указанных тест аэрозолей. Данные экспериментов продемонстрировали равнозначность применения тест аэрозолей ДОФ и турбинного масла для оценки защитной эффективности фильтров тонкой очистки воздуха.

6. Впервые экспериментально в статических и динамических условиях определена проницаемость нетканых материалов (Спанбонда, CMC, Сонтары, Тайвек с плотностью 15-64 г-м") с использованием физических и биологических тест аэрозолей. Установлена различная степень их проницаемости. Увеличение плотности исследуемых материалов, их ламинирование повышают защитные барьерные свойства тканей по сравнению с обычными тканями защитной медицинской одежды многоразового применения. Материалы CMC, Тайвек, Сонтара в динамическом режиме продемонстрировали более высокие барьерные свойства (Кп < 1,0 %), чем хлопчатобумажная ткань (Кп - 61,4%), или вискозно-полиэфирная ткань (Кп

10 - 12%).

Показана перспективность-применения-нетканых материалов-для изготовления трех-пяти-слойных защитных медицинских масок (К„ биологического аэрозоля для всех испытанных нетканых материалов масок составили менее 1,0 % и приближались к аналогичным показателям материала ФПП-15-1,5 респиратора "Лепесток-200").

8. Установлено, что в процессе трудовой нагрузки у сотрудников, использующих от 2-х до 5-ти лет ИСИЗ, изменялось функциональное состояние сердечно-сосудистой системы по ги-пертензивному или гипотензивному типу (33,2% и 2,4%, соответственно). Систематическое перегревание при работе в ИСИЗ приводило к усилению у них легочной вентиляции и снижению на 18% величины коэффициента утилизации кислорода в легких. Повышение средневзвешенной температуры кожи и температуры "ядра" тела у сотрудников свидетельствовало об изменении в сторону перегрева терморегуляторного статуса их организма.

9. Показано, что основное количество аварий, аварийных ситуаций и технических неисправностей на инженерно-технических системах биобезопасности корпусов с высшим уровнем биобезопасности было связано с повреждением ограждающих строительных конструкций, приточно-вытяжной вентиляции, системы спецканализации, сбора и обработки стоков и системы передаточных устройств. Наиболее травмоопасной зоной работы персонала, связанной с повреждением целостности пневмокостюмов и кожных покровов сотрудников является виварий (84,9% и 85%, соответственно).

10. Экспериментально установлено, что при вскрытии конверта, содержащего 0,5 г порошка спор, в радиусе одного метра образуется аэрозоль с концентрацией 7,0-104 клеток-дм'3, а на руках человека, вскрывавшего конверт, остается 1,5-108 бактериальных клеток. На основе полученных данных разработана математическая модель распространения аэрозоля в закрытом помещении. На примере возможных сценариев актов биотерроризма с применением вируса натуральной оспы на территории опасного объекта и крупного города методами математического моделирования определены количественные характеристики зон поражения, динамика эпидемического распространения натуральной оспы за пределы очага заражения.

11. Экспериментально впервые показана возможность использования пучка ускоренных электронов для обеззараживания образцов, зараженных вирусами, а также бактериями, в интересах противодействия почтовому биотерроризму. Полная стерилизация жидких и сухих бактериальных образцов достигалась при поглощенных дозах 15-20 кГр, сухих и жидких вирусных образцов - при дозе не менее 40 кГр. Определен диапазон рабочих доз облучения, не приводящих к нарушению функциональных или потребительских свойств облучаемых предметов и образцов (50 — не более 200 кГр). Показана стерилизующая эффективность отработанного и внедренного в практику "режима облучения одноразовой-медицинской одежды пучком ускоренных электронов на установке ИЛУ-6 (средняя поглощенная доза составила 18 ±3,0 кГр).

Библиография Диссертация по биологии, доктора медицинских наук, Ставский, Евгений Александрович, Кольцово

1. Агафонов А.П. Изучение иммуногенных и протективных свойств препаратов вируса Марбург: Дисс. канд. биол. наук. Кольцово, 1996. - 216 с.

2. Ажаев А.Н. Обоснование физиологических критериев оценки функционального состояния организма человека в условиях высоких температур окружающей среды // Физиология человека. 1986. - № 2. - С. 289-295.

3. Азейштейн Э.М. Производство химических волокон: новые скорости, новые возможности. // www.TextileClu b .ru

4. Акинфеева Л. А., Аксёнова О. И., Василевич И. В. и др. Случай вирусной геморрагической лихорадки Эбола // Инфекционные болезни.-2005.-тЗ.-№ 1.-С.85-88.

5. Ауслендер В.Л., Ведерников В.А., Грачев М.А. и др. Стерилизация почтовой корреспонденции промышленным ускорителем электронов // ДАН. 2002. - Т.385, № 3. - С. 412-415.

6. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Ленинград, 1962. - 180 с.

7. Бакулов И.А., Кокурин В.А., Котляров В.М., Ермаков А.Ф. Установка ВНИИВВиМ для сточных вод // Ветеринария. 1983. - № 3. - С. 28 - 30.

8. Батова J1.K., Мотина Г.Л. Корреляционный анализ методов определения эффективности фильтров для стерилизации воздуха. // Хим. фарм. журн. - 1977. - № 9, С. 128 - 132.

9. Баяндин Р. Б., Шустов А. В., Кочнева Г. В., и др. Генотипическое разнообразие изолятов и факторы риска инфекции вирусом гепатита В у отдельных групп населения Новосибирской области// Инфекционные болезни. 2004.- № 3. - С. 39-44.

10. Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности: Санитарные правила. СП 1.2.011—94.- М.: Госкомсанэпиднадзор России,1994 г.

11. Безопасность работы с-микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности): Санитарные правила. СП 1.3.1285-03. Москва: Министерство здравоохранения Российской Федерации,2003, 152 с.

12. Безопасность работы с микроорганизмами III IV групп патогенности и гельминтами: СП 1.2.731-99. - М.: Госкомсанэпиднадзор России,1999 г.

13. Беланов Е.Ф., Мунтянов В.П., Крюк В.Д., Соколов А.В., Бормотов Н.И., Пьянков О.В., Сергеев А.Н. Сохранение инфекционности вируса Марбург па поверхностях и в аэрозоли // Вопросы вирусологии. 1996.- Т. 41, № 1,- С. 32-34.

14. Белявская В.А. Конструирование лечебно-профилактических препаратов на основе живых генетически модифицированных микрорганизмов.: Диссерт. Доктора биол. наук.-Кольцово, 2000. 305с.

15. Белявская В.А., Ромашева Н.Г., Сорокулова И.В., Ильичев А.А., Нестеров А.Н., Подкуйко В.В., Михайлов В.В. Разработка технологии получения таблеточной формы препарата Субалин // Биотехнология. 2001 .- №2,- С. 10-15.

16. Березин В.В., Столбов Д.Н., Зимина Ю.В. Влияние естественных факторов на заболеваемость Крымской геморрагической лихорадкой // Арбовирусы: Материалы 16 научной сессии ИПВЭ АМН СССР. М., 1969 г., вып. 2. - С. 118-120.

17. Березин В.В. Чумаков М.П., Столбов Д.Н., Бутенко A.M. К вопросу о естественных хозяевах вируса Крымской геморрагической лихорадки в Астраханской области // Вирусные геморрагические лихорадки: Труды ИПВЭ АМН СССР.- М., 1971. Т. 19. -С.210-220.

18. Бешенство (Rabies, Lyssa) (гидрофобия).

19. Лекция.11йр://уушш.аогоПпе.ги/о1газ1/уе1/с11а5!/ВезЬеп/1екс-Ьея11.1г1т

20. Биологическая безопасность. Термины и определения. // Под ред. Г.Г. Онищенко, В.В. Кутырева. Саратов: «Приволжское книжное издательство», 2006. -112 с.

21. Бияшев К.Б. и др. Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с болезнями животных. — Новосибирск, 1997.

22. Бондаренко А. Л. Исходы и лечение хронического гепатита В // Инфекционные болезни.-2005.-Т. 3, №4,-С. 44-53.

23. Борисевич И.В. и др. Разработка и получение иммуноглобулина против лихорадки Эбола // Изучение и профилактика особо опасных инфекций. Межведомственная конференция: Тез. докл. Кольцово,-1993. - С. 44.

24. Борисова М.Н., Новоскольцева Т.М., Иренков И.П. и др. Субалин для рыб // Рыбоводство и рыболовство. -2000. №2. - С. 15-20.

25. Бородулин А. И., Ставский Е. А., Шлычков В. А. и др. Образование и распространение аэрозолей при вскрытии в помещении конверта с «подозрительным порошком» // Тезисы докладов 15 заседания рабочей группы «Аэрозоли Сибири». Томск,- 2007. - С. 28.

26. Бородулин А.И. Измерение тензора коэффициентов турбулентной диффузии в атмосфере и его некоторые свойства// Оптика атмосферы и океана.-1996. Т. 9, № 6. - С. 832-836.

27. Бутьянов Д. Д., Карпуть И. М., Якубовский М. В. и др. Справочник по болезням сель-ско-хозяйственных животных. Минск. Издательство "Ураджай". 1990, 352 с.

28. Буянов В.В., Елкин Е.Н., Киршин А.В. и др. Изолирующий костюм: Авт. свид. №233021 от 03.02. 86.

29. Буянов В.В., Колесников Н.В., Супрун И.П. Создание системы средств индивидуальной защиты для персонала микробиологических и вирусологических лабораторий. Черноголовка. Москва: ИПХФ,2000. - С. 190.

30. Буянов В. В., Супрун И. П. Средства индивидуальной защиты для работ в микробиологических и вирусологических лабораториях. Черноголовка, Москва : Редакционно-издатель-ский отдел ИПХФ, 2001, - 324 с.

31. Буянов В.В., Головченко Н.Н., Румянцева Н.П. и др. Выбор текстильных материалов для изготовления специальной одежды для персонала предприятий микробиологической промышленности // Биотехнология. 1985. - № 4. - С. 84-87.

32. Вабищевич П.Н. Метод фиктивных областей в задачах математической физики. М: Изд-во МГУ.-1991,- 157 с.

33. Василенко С.М. Вьерху етиологията епидемиологията и специфичната ваксинопрофи-лактика на кримската хеморагична треска в България : Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук.,. 976 г.

34. Вельков В.В. Интродукция генетически модифицированных микрорганизмов в окружающую среду. Перспективы и риск // Генетика. 1994. - Т.30, № 5. - С. 581-592.

35. Волкова К. И., Кокосов А. Н., Браженко Н. А. Туберкулез в период эпидемии ВИЧ/СПИД и наркомании// Проблемы туберкулеза.-2001.-№ 2.-С.61-65.

36. Воронкова, О. В., В. В. Новицкий, О. И. Уразова и др. Генетическая гетерогенность лекарственно-резистентных штаммов М. tuberculosis, циркулирующих на территории Томской области. // Эпидемиология и вакцинопрофилактика.- 2007.-№ 2.- С.21-27.

37. Вирусные вакцины и противовирусные препараты: Доклады научной группы ВОЗ. Женева, 1985. 78 с.

38. Внутренние болезни животных / Под общ. ред. Г. Г. Щербакова, А. В. Коробова. СПб.: Издательство "Лань", 2002. - 736 с.

39. ВОЗ предупреждает о растущей опасности микробов // Мед. курьер. 1999. - № 3-4. - С. 21-22.

40. Воробьев А.А. Оценка вероятности использования биоагентов в качестве биологического оружия // Эпидемиология, и ифекцион. болезни. 2001. - №6. - С. 54-56.

41. Воробьев А.А. Современные проблемы микробиологической безопасности // Вестн. РАМН. -2002. № 10. - С. 9-12.

42. Вотяков В.И., Борткевич B.C., Мороз А.Г., Пивченко А.Г. О барьерах защиты и зональности помещений в лабораториях максимальной защиты // Гигиена и санитария. 1984. - № 10.-С. 89-91.

43. Вотяков В.И., Борткевич B.C., Сергиев В.П. Общие принципы организации и медико-технические требования к проектированию лабораторий максимальной защиты при вирусологических исследованиях. Москва: МЗ СССР, 1987, 198 с.

44. Высокоэффективная очистка воздуха / Под ред. П.Уайта, С. Смита. М., 1967. - С. 164.

45. Газета "Красная Звезда" от 30 января 1997 г.

46. Галимзянов X. М., Малеев В. В., Горелов А. В. и др. Дифференциальная диагностика крымской геморрагической лихорадки и лихорадки Западного Нила.// Инфекционные болез-1Ш.-2006.-Т.4.- №3.-С.95-96.

47. Гапонов К.П. Процессы и аппараты микробиологических производств. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1981. -240 с.

48. Гапочко К.Г., Мисников О.П., Раевский К.К. Средства и методы изучения микробных аэрозолей. Л.: Медицина. - 1985. -176 с.

49. Глобальная ликвидация оспы.: Доклад Глобальной комиссии на 33-ей сессии Всемирной Организации Здравоохранения 08.05.1980. -130 с.

50. Городинский С.М., Бавро Г.В. и др. Методические подходы к изучению функционального состояния человека при тепловых нагрузках // Медико-технические проблемы индивидуальной защиты человека. Т. 3. - № 3. - М.: Изд. МЗ СССР, 1969. - С. 4

51. Городинский С.М., Денисенко Г.Ф., Романова И.Г. К созданию научно обоснованных требований и нормативов к изолирующим костюмам промышленного назначения // Гигиена труда и профзаболевания. 1980. - № 6. - С. 22 - 24.60. ГОСТ 10189-62.61. ГОСТ 32-74.

52. ГОСТ Р22.0.04-95. Государственный стандарт, устанавливающий термины и определения основных понятий в области безопасности в биосоциальных чрезвычайных ситуациях.

53. Грязнева Т. Н. и др. Биологические средства коррекции микробиоценоза кишечника телят // Ветеринария. 1991.- № 7.- С. 23-24.

54. Гутман JI.H. Введение в нелинейную теорию мезометеорологических процессов. Л.: Гидрометеоиздат,1969. - 295 с.

55. Дебабов В.Г. Интродукция генетически измененных микрорганизмов в окружающую среду // Биотехнология. 1992. - № 6. - С. 8-11.

56. Десятков Б. М., Сарманаев С. Р., Бородулин А. И. Численно-аналитическая модель переноса аэрозолей в термически стратифицированном пограничном слое атмосферы // Оптика атмосферы и океана.-1996.-Т. 9, № 6.-С.815-820.

57. Домарадский И.В. Чума.- М.: Медицина, 1998. 175 с.

58. Дроздов С.Г., Гарин С.Г., Джиндоян Л.С., Тарасенко В.М. Основы техники безопасности в микробиологических и вирусологических лабораториях. М.: Медицина, 1987. - 256 с.

59. Дроздов С.Г., Сергиев В.П. Защита неэндемичных территорий от тропических геморрагических лихорадок. М.: Медицина, 1984. - 288 с.

60. Дрынов И. Д., Сергиев В.П., Малышев Н.А. Классификация болезней человека и профилактика заболеваемости населения // ЖМЭИ. 2000. - № 4, Приложение. - С. 106-109.

61. Ефремепко В. И., Ломов Ю. М., Онищенко Г. Г., Тихонов Н. Г. Особо опасные инфекции // Вестн. РАМН. -2002. № Ю. - С. 34-39.

62. Здоровье населения и среда обитания // Информационный бюллетень.- 2007.- № 6 (171).-С. 50-51. - - - ----

63. Завальный А. Пастеровская станция первая в России. - «Самарское обозрение», N10, 09.03.99, httpi//www.internetelite.ru/so/so2000/secondpage.phtml? 19-3.DOC:s0/so 1999/soO 10

64. Закон Российской Федерации "О государственном регулировании в области генно-инженерной деятельности" (№ 86ФЗ от 05.07.96).

65. Занимательные очерки о деятельности и деятелях противочумной системы России и Советского Союза. Выпуск 2. / М. И. Леви. - М.: Информика, 1995. - 209 с.

66. Зверев В.В., Семенов Б.Ф. Вакцинопрофилактика при биотерроризме и биокатастрофах // Вестн. РАМН. -2002. № 10. - С. 39-41.

67. Здесь вырабатывается иммунитет / / Нижегородский предприниматель. -2000. №1, http://www.innov.ru/rus/content/new2000.htm

68. ЗДРАВМЕДТЕХ: КАТАЛОГ ЗАО "ЗДРАВМЕДТЕХ". Екатеринбург.: ИД "Филантроп". - 17 с.

69. Закс Л. Статистическое оценивание. М.: Статистика, 1976. - 594 с.

70. Игнатьев Г. М. Экспериментальные препараты для профилактики фило- и арепавирусных геморрагических лихорадок.: Дисс. доктора мед. наук. Кольцово, 2002. - 276 с.82. "ИММУНОПРЕПАРАТ". http://www.rbtl.ru/encicl/iii/irnmunoprep.htm

71. Инструкция по лабораторной диагностике натуральной оспы: Утвержденная заместителем министра здравоохранения СССР 04.04.1972 г.

72. Инструкция по организации и проведению дезинфекционных мероприятий при натуральной оспе: Утвержденная заместителем министра здравоохранения СССР 19.07.1973 г.

73. Инструкция по проведению обязательных прививок против натуральной оспы: Утвержденная заместителем министра здравоохранения СССР 27.01.1975 г.

74. Инструкция по проведению мероприятий в случае заноса натуральной оспы: Утвержденная заместителем министра здравоохранения СССР 03.09.1976 г.

75. Инструкция о противоэпидемическом режиме работы с материалом, зараженным или подозрительным на зараженность возбудителями инфекционных заболеваний I II групп. -Саратов, 1979.-91 с.

76. Инструкция по применению диагностикума оспенного сухого: Утверждена Начальником государственного контроля лекарственных средств и медтехники 21.04.98 Минздрав РФ. -ФГУП НПО "Вирион". -

77. Инструкция по применению тест-системы иммуноферментной для выявления антигена ортопоксвирусов. ФГУП НПО "Вирион" Минздрав РФ: Утверждена Начальником Управления государственного контроля лекарственных средств и медтехники 21.04.98 г.

78. Инструкция по применению иммуноглобулина диагностического оспенного люминесци-рующего сухого. ФГУП НПО "Вирион" Минздрав РФ. - Утверждена Начальником Управления государственного контроля лекарственных средств и медтехники 21.04.98 г.

79. Инструкция по применению сыворотки диагностической оспенной сухой. ФГУП НПО "Вирион" Минздрав РФ: Утверждена Начальником Управления государственного контроля лекарственных средств и медтехники 21.04.98 г.

80. Инструкция по применению тест-системы иммуноферментной для выявления антигена вируса Эбола. ВЦ НИИМ МО РФ: Утверждена Главным санитарным государственным врачом Российской Федерации 12.03.01.

81. Инструкция по применению тест-системы иммуноферментной для выявления антигена вируса Марбург. ВЦ НИИМ МО РФ: Утверждена Главным санитарным государственным врачом Российской Федерации 12.03.01.

82. Инструкция по применению иммуноглобулина против лихорадки Эбола из сыворотки крови лошадей жидкого (Иммуноглобулина лошадиного Эбола). ВЦ НИИМ МО РФ: Утверждена Главным санитарным государственным врачом Российской Федерации 12.03.01.

83. Инструкция по применению иммуноглобулина против лихорадки Марбург из сыворотки крови лошадей жидкого (Иммуноглобулина лошадиного Марбург). ВЦ НИИМ МО РФ: Утверждена Главным санитарным государственным врачом Российской Федерации 12.03.01.

84. История и деятельность института в период 1924 — 1999 гг. История создания БелНИИ ЭМ. http://www.briem.ac.by/histopy/index.html

85. Итоговая коллегия Министерства Здравоохранения Российской Федерации // Пробл. туберкулеза. 2001.- №6. - С. 55-59.

86. Каверин Н.В., Смирнов Ю.А. Межвидовая трансмиссия вирусов гриппа А и проблема пандемий // Вопросы вирусологии. -2003. № 3. - С. 4-10.

87. Качанова С.Я. Общие вопросы профилактики болезней сельскохозяйственных животных. -М.: ВНИИТЭИСХ, 1980.

88. Киселев С.А., Рыжиков Г.А., Криводанов Б.А., Загарин М.В. Устройство для экспонирования животных.: Патент РФ № 1692429 от 09.09.1999.

89. Ковалева Е.П. Теоретическое обоснование снижения инфекционной заболеваемости // Эпидемиология, и инфекцион. болезни. 1998. - №3. - С. 4-8.

90. Колесов A.M., Глаголев Л.С. Термический метод обеззараживания сточных вод // Гигиена и санитария. -1978. № 3. - С. 104-105.

91. Коллективные и индивидуальные средства защиты. Контроль защитных свойств: Энциклопедия "Экометрия" из серии справочных изданий по экологическим и медицинским измерениям. М.: ФИД "Деловой экспресс", 2002. -408 с.

92. Кондратенко Т. А., Марченко Б. И., Хазангве П. Л. Перспективные направления совершенствования эпидемиологического надзора за туберкулезной инфекцией // Здоровье населения и среда обитания. Информационный бюллетень.-2007.-№ 7.- С.41-45.

93. Кондрик Е.К., Волков В.Я., Кавызина Л.И., Старицын Н.А., Ураков Н.Н. Аналитическое обоснование концепции биологической безопасности. М., 2003. - 64 с.

94. Контроль дезинфекционных камер: Методические указания. МУК 4.2.1035-01. — М.: Минздрав России, 2002. 19с.

95. Корбут В.Б., Гончаров С.Ф. Проблемы медицинского обеспечения населения в чрезвычайных ситуациях, связанных с воздействием биологических факторов // Вестник PAMII -2002.-№ 11.-С. 7-11.

96. Короткин Л.М., Головченко Н.Н. Комплекс противоэпидемических мероприятий при выявлении больного геморрагической лихорадкой Марбург // Противочумные учреждения

97. России и их роль в обеспечении эпидемиологического благополучия населения страны: Материалы конф., посвящ. 70 летию Противочумного центра. - Москва: POO JIO «Сокольники», 2004. - С. 200 - 205.

98. Коузов П.А. Основы анализа дисперсного состава промышленных пылей и измельченных материалов. Л.: Химия, 1987. - 264 с.

99. Кочнева Г. В., Гражданцева А. А., Сиволобова Г. Ф. и др. Этиология острых гепати-тов и генотипическое разнообразие вирусов гепатитов А, В, С и Е в трех регионах Сибири // Инфекционные болезни,- 2005.- Т.З, №1.- С. 26-31.

100. Краснянский В.П. и др. Получение гипериммунной лошадиной сыворотки к вирусу Эбола// Вопр. вирусологии. 1995. - Т. 40, № 2,- С. 91-92.

101. Куктсико B.C., Кудрявцев Н.И., Чугунов Н.И. Бактериальные аэрозоли и методы их исследования в санитарной микробиологии. М.: Медицина, 1968.- 172 с.

102. Криницын Л.А., Ставский Е.А., Нетесов С.В. и др. Сравнительный анализ методов определения эффективности фильтров для очистки воздуха с использованием аэрозолей диоктилфталата и турбинного масла // Биотехнология. 1999 .- № 4 .- С. 57-62.

103. Лабинская А. С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. — М.: Медицина, 1978. 392 с.

104. Лакин Г. Ф. Биомегрия. М.: Высшая школа, 1980. - 293 с.

105. Лебединский В.А., Гарин Н.С. Эпидемиология, лабораторная диагностика и профилактика легионеллеза// Военно-медицинский журнал. 1988. - № 9. - С. 33-37.

106. Лепко А.И., Плисковский В.Я., Пенчко Е.А. Оборудование для откачки вакуумных приборов. М. - Л.: Энергия, 1965. - 463 с.

107. Львов Д.К. Значение вновь возвращающихся инфекций для биобезопасности // Вестн. РАМН. -2002. № 10. - С. 25-28.

108. Макаров В. Экзотические вирусные зоонозы. История с географией. // Ветеринарная газета. -1996. №8. -С. 1-2; №9.-С. 8.

109. Максимова Е.Е., Шпагина В.В., Попова Л.Ю. и др. Изменение регуляции катаболит-ного Lux- оперона, клонированного в рекомбинантной плазмиде, под действием факторов внешней среды // Микробиология. -1998. Т.67, №2.- С. 170-175.

110. Манвелов М.А. Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве. М., 1986.

111. Марчук Г.И. Методы вычислительной математики. М.: Наука,1977. - 456 с.

112. Марчук Г.И. Математическое моделирование в проблеме окружающей среды. М.: Наука, 1982. - 320 с.

113. Масычева В.И., Даниленко Е Д., Пустошилова Н.М., Белявская В.А. Создание средств стимуляции неспецифической резистентности // Вести РАМН. 1998. - №4. - С. 1317.

114. Мельниченко П.П. Биотерроризм и биокатастрофы: проблемы защиты и безопасности // Бюлл. Вакцинация. -2002. №3(21).

115. Методические указания по дезинфекции, предстерилизациоиной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения. М.: Минздрав России, 2000. - 67 с.

116. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных: Справочник /

117. B.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова ,Б.В.Соловьев ,Н.В.Фомина. М.: Агропромиздат,1986. -351 с.

118. Михайлов В. В. и др. Оценка на павианах гамадрилах возможности специфической профилактики лихорадки Эбола // Вопросы вирусологии. 1994. - Т. 39, № 2. - С. 82-84.

119. Монин А.С., Яглом A.M. Статистическая гидромеханика. Механика турбулентности. -М.: Наука, 1965. 4.1. - 640 с.

120. Моргунова В. И., Алтухов Н. М., Моргунов В. И., Мистюкова О. Н. Профилактика коли-бактериоза у новорожденных поросят // Ветеринария. 2003. - № 1. - С. 18-21.

121. МотинаГ.Л., Басманова П.И., Ревин А.А. Метод определения эффективности фильтрующих материалов для стерилизации воздуха // Хим.- фарм. журн. 1971. - N 12,- С 28-31.

122. Мотина Г.Л., Былинкина Е.С. Вопросы очистки и стерилизации технологического воздуха, применяемого в процессах биосинтеза // Технология производства и изучение антибиотиков: Труды ВНИИ антибиотиков. М., 1974. - С. 37-59.

123. Моряков О.С. Устройство и наладка оборудования полупроводникового производства. -М.: Высшая школа., 1976. 84 с.

124. Никитин Е.Г. Способ контроля герметичности изделий: Авт. свид. № 800756. 1981.

125. Никифоров В.В., Мельникова Л.И., Зарьков К.А., Кузовлев О.П., Лактионова Л.В., Зиновьев Г.А., Жданов А.С. Сап: случай из практики // Инфекционные болезни. -2005. -Т.З, № 1.1. C. 89-92.

126. Никифоров В.В., Туровский Ю.Н., Калинин П.П. и др. Случай лабораторного заражения лихорадкой Марбург // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиологии. —1994. №3. — С. 104-106.

127. Никифоров В. В., Кареткина Г. Н. Туляремия: от открытия до наших дней.//Инфекцион-ные болезни.-2007.-т.5.- №1.-С.67-76.

128. Николаев Н.И., Николаев Н.М. Становление и развитие института "Микроб": Материалы к конференции, посвященной 50-летию института "Микроб". Саратов: НИПЧИ "Микроб", 1968. - С. 3-7

129. Новожилов С.С., Титенко A.M. Вируснейтрализующие антитела в сыворотках морских свинок, иммунизированных вирусом Эбола (шт. Заир) / Иркутск, НИИ п. / чум. ин-т Сибири и Дальнего Востока // РЖ 92. N 9. - Б 1223.

130. Об усилении мероприятий по профилактике гриппа птиц: Постановление № 20 от 11.08.2005. / Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, http://www.gsen.ru/doc/postan/ps 20 2005.html.

131. Общая и частная эпидемиология. Том 1: Общая эпидемиология и эпидемиология кишечных инфекций / Под ред. И. И. Елкина. М.: Медицина, 1973. - 448 с.

132. Общая и частная эпидемиология. Том 2: Инфекции дыхательных путей, кровяные инфекции и инфекции наружных покровов / Под ред. И. И. Елкина. М.: Медицина, 1973. -447 с.

133. Овод А.С. Направленное формирование бактериоценоза кишечника // Ветеринария. -2003. № 2. - С. 23-26.

134. Огарков В.И., Гапочко К.Г. Аэрогенная инфекция. М.: Медицина, 1975. - 232 с.

135. Онищенко Г Г. Противодействие биотерроризму: стратегия национального здравоохранения // Бюлл. Вакцинация. -2002. №3(21).

136. Онищенко Г.Г. Контроль за инфекционными заболеваниями — стратегическая задача здравоохранения в России в XXI веке // Эпидемиол. и инфекцион. болезни. 2002. - № 6. - С. 4-16.

137. Онищенко Г.Г., Пальцев М. А., Зверев В. В. и др. Биологическая безопасность,- М.: ОАО «Издательство «Медицина». 2006. - С.304.

138. Онищенко Г. Г., Дементьева JI. А. Распространение вирусных гепатитов как угроза национальной безопасности // Журнал микробиологии,- 2003,- № 4,- С. 93-99.

139. Определитель бактерий Берджи: В 2-х .Т.2: Пер.с англ. под ред. Г.А. Заварзина / Под ред. Дж. Хоулта и соавт. М.: Мир, 1997. - 800 е., ил.

140. Организация и проведение противоэпидемических мероприятий при террористических актах с применением биологических агентов: Методические рекомендации. MP 2510/1164601-034. М.: Минздрав России, 2001. - 56 с.

141. О санитарно-эпидемиологической обстановке в Российской Федерации: Пресс-релиз. 15.08.2005 18.00: http://www.gsen.ru/info/press/files/psl50805.html

142. О ситуации по заболеваемости гриппом птиц. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. 15.08.2005 № 0100/6551-05-32; http://www.gsen.ru/doc/letter/inf 0100 6551-05-32.html.

143. О ходе реализации концепции развития здравоохранения и медицииской науки, задачах на 2001-2005 годы и на период до 2010 года: Доклад (20 марта 2001г.). М.: Министерство здравоохранения РФ, 2001.

144. Петрянов И.В., Кощеев B.C., Басманов П.И. и др. "Лепесток" (Легкие респираторы). М.: Наука, 1984. -216 с.

145. Петрухина М. И., Русакова Е. В. Ющенко Г. В. Эпидемиологический надзор за туберкулезом в современных условиях // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиологии.- 2003.-№ 5.-С.93-96.

146. Петрянов И.В., Козлов В.И., Басманов . И., Огородников Б.И. Волокнистые фильтрующие материалы ФП. М.: Знание. - 1968. - 79 с.

147. Подзорова Е.А. Комбинированные радиационные методы очистки воды и сточных вод: Автореф. дисс. доктора хим. наук. Москва. - 2001. - 48 с.

148. Подкопаев В. М. и др. Диагностика, лечение и профилактика болезней новорож-денных телят. М.-Т967:- 134 с.

149. Покровский В.И. Медицинские проблемы биобезопасности // Вестн. РАМН. 2002. - № 10.-С. 6-9.

150. Покровский В.И., Онишенко Г.Г., Черкасский Б. Л. Актуальные направления совершенствования профилактики инфекционных болезней // Эпидемиол. и инфекц. болезни, 2000. -№1.-С. 4-8.

151. Покровский В.И., Черкасский Б.Л. Роль эпидемиологии в сохранении здоровья нации // Эпидемиол. и инфекц. болезни. 2003. - № 1. - С. 4-10.

152. Попова Л.Ю., Каргатова Т.В., Максимова Е.Е., Белявская В.А. Адаптация штамма Bacillus subtilis, содержащего рекомбинантную плазмиду с геном интерферона альфа 2 человека, к разным условиям существования // Микробиология. -1997. Т.66, № 6. - С. 761-766.

153. Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I—IV групп патогенности: Санитарные правила: СП 1.2.036—95. М.: Госкомсанэпиднадзор России.— 1995.-80 с.

154. Проведение вакцинопрофилактики натуральной оспы: Методические указания. МУ 2044-06. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2006. - 19 с.

155. Прозоров А. А. Горизонтальный перенос генов у бактерий: лабораторное моделирование, природные популяции, данные геномики// Микробиология.-1999.-Т.68, № 5 .- С.632-646.

156. Птичий грипп, http://gripp.solvav-pharma.ru/about-gripp/ptichi gripp.asp

157. Пугачев B.C. Теория вероятностей и математическая статистика.-М.: Наука, 1979.-496 с.

158. Ппгеничнов В.А., Краснянский В.П., Михайлов В.В. Иммуноглобулины в вирусологических исследованиях и при профилактике некоторых инфекций // Вопр. Вирусологии. -1992.-Т.37.-N4.-С. 178-181.

159. Раевский К.К. О некоторых первоочередных мерах по созданию системы противодействия биологическому терроризму // Бюлл. Вакцинация. 2002. №3(21).

160. Райст П. Аэрозоли. М.: Мир,1987. - 278 с.183.-Роди-В. Модели турбулентности окружающей средыгМетоды расчета турбулентных течений. М.: Мир, 1994. - С. 227-321. "

161. Ромашов Г. И. Основные принципы и методы определения дисперсного состава промышленных пылей. Л.: ЛИОТ, 1938. - 176 с.

162. Российские средства защиты на производстве и в чрезвычайных ситуациях: Каталог. -М.: ОАО РОСЗАЩИТА, 2004. 69 с.

163. Руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях. Женева: ВОЗ, 1985. 128 с.

164. Руководство по эксплуатации и таблица химической устойчивости: Изолирующие костюмы газовой и химической защиты Треллкем (Trellchem) модели Треллкем супер, Треллкем бутил, Треллкем лайт. TRELLEBORG. - 84 с.

165. Ростовский Научно Исследовательский Противочумный Институт. История. — http://hp.ic.ru/rostovpci/history.htm

166. Руководство по вакцинному и сывороточному делу // Под ред. П.Н. Бургасова. — М.: Медицина. 1978. - 439 с.

167. Сажин С. Г. II Всесоюзное совещание по методам и приборам контроля герметичности оборудования и узлов // Ж. хим. и нефт. машиностроения. 1974. - № б. - С. 39 — 41.

168. Свальновы В. и В. Биотерроризм: готовность номер один // Мед. газета. 2001. - № 92. ( 5 дек.). - С. 10.

169. Сведения об инфекционных и паразитарных заболеваниях в Российской Федерации за январь-июнь 2007 г.// Здоровье населения и среда обитания. Информационный бюллетень.-2007.- № 7.-С.54-55.

170. Сведения об инфекционных и паразитарных заболеваниях в Российской Федерации за январь-декабрь 2007 г.// Здоровье населения и среда обитания. Информационный бюлле-тень.-2008.- № 1.-С.44.

171. Сведения об инфекционных и паразитарных заболеваниях в Российской Федерации за январь-декабрь 2006 г.// Здоровье населения и среда обитания. Информационный" бюллетень.-2008.- № 1.-С.50-51.

172. Сергеев А.Н. и др. Эффективность лечебно-профилактического действия лекарственных препаратов при заболеваниях, вызываемых респираторным заражением животных вирусами Эбола и Мачупо // Тезисы докладов I Съезда иммунологов России. М, 1992. - С. 428.

173. Сергиев В.П., Дрынов И.Д., Малышев Н.А. Реальное место инфекционной патологии в общей заболеваемости населения // ЖМЭИ. 1999. - №5. - С. 12-15.

174. Сивков, А. Ю., Болдырев А. Н., Азаев М. Ш. и др. Определение причин распространения MDR-штаммов на основе анализа популяции рифампицин- и/или изониазид-устойчивых изолятов M.tuberculosis // Мол. генетика, микробиология и вирусология.-2006.- С.20-25.

175. Складнев А.А., Падалкин В.П., Вадимов В.М. и др. Производственная санитария в микробиологической промышленности. М.: Лесная промышленность, 1980. - 200 с.

176. Сорокулова И.Б.,. Белявская В.А., Масычева В.И., Смирнов В.В. Рекомбинантные пробиотики: проблемы и перспективы использования в медицине и ветеринарии // Вестн. РАМН. 1997. - №3. - С. 46-49.

177. Софронов Н. В. Эффективность термоустановки для обеззараживания сточных вод, загрязненных бруцеллами: Труды Узбекского науч. исслед. вет. ин -та. Ташкент, 1961. -Вып. 14.-С. 81-83.

178. Спирин А.С. Фундаментальная наука и проблемы биологической безопасности // Вестн. РАМН. 2002. - № 10. - С. 12-14.

179. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследованиям // Под ред. М. О. Биргера. М: Медицина, 1982. - 464 с.

180. Средства индивидуальной защиты: Каталог. Москва: Всесоюзное Объединение "Изотоп", 1981.-99 с.

181. Ставский Е.А., Гришаева О.Н., Леляк А. И. и др. Экспериментальная оценка возможности передачи искусственного гена лейкоцитарного интерферона аг человека в другие виды микроорганизмов. // Вестник РАМН. - 2004. - N 11. - С. 29-32.

182. Ставский Е.А., Киселев С.А., Ренау И.В. и др. Оценка защитных свойств нетканых материалов одноразовой медицинской специальной одежды // Гигиена и санитария. — 2006. -№ 6. С. 36-39.

183. Тараканов Б. В. Механизмы действия пробиотиков на микрофлору пищеварительного тракта и организм животных // Ветеринария. -2000. № 1. - С.47-54.

184. Теверовский Е.Н., Дмитриев Е.С. Перенос аэрозольных частиц турбулентными потоками. М.: Энергоатомиздат,1988. 160 с.

185. Ткачев П. Г. История профилактики в России. Том III. Рязань: Рязанский гос. мед. университет, 1999. - 583 с.

186. Угроза пандемии. Ложная тревога? Посещение сайта 15 августа 2005. http://gnpp.solvaY-pharma.ru/about-gripp/progiiosis.asp

187. Участие врачей России в международном научном сотрудничестве. В АПТЕКАХ / ВЕСТИ НГМА, http://www.apteki.nnov.ru/ngma/41-1 .html

188. Чепурнов А.А., Кудоярова-Зубавичене Н.М., Дедкова Л.М. и др. Разработка методов получения специфических иммуноглобулинов для экстренной профилактики лихорадки

189. Эбола и изучение их свойств // Вестник РАМН. 1998. -№ 4. - С. 24-29. - —

190. Чепурнов А.А., Пьянков О.В., Чепурнова Т.С., и др. Методы контроля обсемененности воздуха и поверхностей лабораторных помещений возбудителями некоторых особо опасных вирусных инфекций. // Вопр. вирусологии. 1997. - N.4. - С. 189-191.

191. Чепурнов А.А., Колесников С.И., Грачев С.В. Патогенез, принципы диагностики и специфической профилактики экспериментальной лихорадки Эбола. М.: Медицинское информационное агентство, 2001. - 160 с.

192. Чепурнова Т. С. Обеспечение противоэпидемического режима при проведении научно-исследовательских работ с особо опасными вирусными инфекциями (на примере филовиру-сов).: Дисс. .к. м. н. Иркутск, 2000. - 116 с.

193. Черкасский Б.Л., Бакулов И.А., Пчелинцев С.Ю. Зоонозы и безопасность // Вестн. РАМН. 2002. - № 10. - С. 30-33.

194. Черный Н.Б., Ставский Е.А., Криницын Л.А., Ренау И.В., Нетесов С.В. Обеспечение биологической безопасности работ с возбудителями особо опасных вирусных инфекций в

195. ГНЦ ВБ "Вектор" // Проблемы биологической и экологической безопасности: Сборник материалов международной научной конференции ( Оболенск, 22 24 мая 2000г.). - С. 119120.

196. Чудновская Н.В., Сорокулова И.Б., Смирнов В.В., Белявская В.А. Антивирусная активность пробиотиков из бацилл // Докл. АН Украины. 1995. - №2. - С. 124-126.

197. Шандала М.Г. Вопросы дезинфектологического обеспечения биобезопасности // Эпидемиология и инфекц. заболевания. 2002. - С. 16-22.

198. Шатский С.Н., Басманов П.И. Противопылевой респиратор модели ШБ-1 "Лепесток" для защиты органов дыхания от радиоактивных аэрозолей // Труды Всесоюз. конф. по медицинской радиологии. Вопросы гигиены и дозиметрии. М.: Медгиз, 1957. - С. 44-48.

199. Шаханина И.Л., Осипова А.А., Радуто О.И. Экономический ущерб, наносимый инфекционными болезнями, в Российской Федерации по состоянию на декабрь 2000 г. // Эпидемиология и инфекц. болезни. 2001. - №6. - С.58.

200. Шевченко Ю.Л. О ходе реализации концепции развития здравоохранения и медицинской науки, задачах на 2001-2005 гг. и на период до 2010г. // Здравоохранение РФ. 2001. -№4. - С. 3-9.

201. Шевченко Ю.Л. Онищенко Г.Г. Микроорганизмы и человек, некоторые особенности их взаимосуществования на современном этапе // ЖМЭИ-.- 2001. №2. - С. 94-104.-

202. Шноль С. Судьба Нобелей в России (по статье из "Общей газеты", 09.03.2000). Педагогический вестник, http://www.nsu.ru/ materials/ssl/text/news/Education/019.hlml

203. Щелкунов С. Н. Генетическая инженерия.Ч.2. Новосибирск.: Издательство НГУ, 1997. - 400 с.

204. Щепин О.П. Здоровье населения Российской Федерации и его прогноз на период до 2005 г. // Вестн. РАМН. 2001. - №8. - С. 10-13.

205. Яковлев К. Чур нас, чума и холера!. -"Владивосток", 22.10.97, http://vl.vladnews/ru/9710/246 22/LIFE11.НТМ

206. Agranovski A., Safatov A.S., P'ankov O.V. et al. Monitoring of Viable Airborne SARS Virus in Ambient Air // Atmospheric Environment. 2004. -V. 38, N. 23. - P. 3879-3884.

207. Agranovskii I.E., Safatov A.S., Borodulin A.I. et al. Inactivation of Viruses in Bubbling Process Utilized for Personal Bioaerosol Monitoring // Applied and Environmental Microbiology. -2004. V. 7, N. 12. - P.6963-6967.

208. Anderson К. et al. Ebola viral proteins that elicit or protective immunity in guinea pigs // Abstracts of 10th Intern. Conf. on Negative Strand Viruses. (Dublin, Ireland, 22-27 Sep., 1997.). -P. 111.

209. An introduction to experimental aerobiology / Ed. R.L. Dimmick, A.B.Akers. New York: Wiley-Interscience, 1969. - 494 p.

210. Atlas R. M. The threat of bioterrorism returns the fear of smallpox // Curr. Opin. Microbiol. 1998.-N l.-P. 719-21.

211. Biosafety in the Laboratory: Prudent Practices for the Handling and Disposal of Infectious Materials./ National Research Council. National Academy Press, Washington, 1989.

212. Berche P. The threat of smallpox and bioterrorism // Trends Microbiol. 2001,- N9. - P. 15-18.

213. Berg G. Water pollution. Microbiology-detection, occurrence, and removal of viruses // J Water Pollut Control Fed. 1974 - V.46, № 6. - P. 1408-1413.

214. Bellanti F.A., Robbins F.B., Immunotherapy: the use of passive immunisation. // Immunology III. London: Academ. Press. - 1985. - P.533-546.

215. Biological and chemical terrorism: Strategic plan for preparedness and response. Recomendations of ihe CDC strategic planning workgroup (Atlanta) // MMWR. 2000. - V.49, N RR-4 (April 21). - P. 1-6.

216. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 4rd. ed. / CDC - NIH/-Washington , 1999,- 250 p.

217. Birnboim H.C., Doly J. A rapid alkaline extraction method for screening recombinant plasmid DNA // Nucl.Acids Res. 1979. - V.7, №6. - P. 1513-1522.

218. Bradford M.M. A rapid and sensitive mehod for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of ptotein-dye binding // Analyt. Biochem. 1976. - V.72. - P.248-254.

219. Breman J.G. et al. International Colloquium on Ebola virus research: summary report // J. Infect. Dis. 1997. - V. 176. - №4. - P. 1058-1063.

220. Binning G., Quate C., Gerber Ch. Atomic force microscope // Phys. Rev. Lett. 1986. - V.56. -P. 930-933.

221. Birnboim H.C., Doly J. A rapid alkaline extraction method for screening recombinant plasmid DNA. // Nucl. Acids Res. 1979. - V 7, N.6. - P.1513-1522.

222. Borodulin A.I., Desyatkov B.M., Lapteva N.A., Sergeev A.N., Agranovski I.E. Personal Sampler of Monitoring of Viable Viruses; Part I. Modelling of Outdoor Sampling Conditions // Atmospheric Environment. 2006. - V. 40, N. 35. - P. 6687-6695.

223. Borrely S.I., Del Mastro N.L., Sampa M.H. O. Improvement of municipal wastewaters by electron beam accelerator in Brasil // Radiat. Phys. Chem. 1998. - V.52, N. 1-6. - P. 333-337.

224. Boyne. L., Dyment J., Thomason H. // Filtration and Separation. 1971. - N6. - P.709.

225. Bowen E.T.W. et al. Virus hemorrhagic fever in southern Sudan and northern Zaire: preliminary studies on the etiological agent // Lancet. 1977. - N. 1 - P. 571-573.

226. Bowen E.T.W. et al. Ebola hemorrhagic fever: experimental infection of monkeys // Trans, roy. Soc. Trap. Med. Hyg. 1978. - Vol. 72. - P. 584-593.

227. Broad W., Miller J. Government report says 3 nations hide shocks of smallpox // New York Times. 13 June 1999; sect 1:1.

228. Brownlee S. Clear and present danger. Washington Post. 28 October 2001; magazine section :W8.

229. Bwaka M.A., Bonnet M-J., Calain P. et al. Ebola hemorrhagic fever in Kikwit, Democratic Republic of the Congo: Clinical observations in 103 patiens // J. Infect. Dis. 1997. - V.179, Suppl.l. - P.S1-S7.

230. Caetano-Annoles G., Bassam B.J, Gresshoff P.M. DNA amplification fingerprinting using very short arbitrary oligonucleotide primers. // Bio.Technology 1991. - N 9. - P.553-556.

231. Canonico P.G. Efficacy, toxicology and clinical applications of ribavirin against virulent RNA viral infections // Antiviral Res. 1985. - Suppl. 1. - P. 75-81.

232. Capua I., Marangon S., Selli L., Alexander D.J., Swayne D.E., Pozza M.D., Parenti E., Cancellotti F.M. Outbreaks of highly pathogenic avian influenza (H5N2) iiTltaly during October 1997 to January 1998. // Avian Pathol. 2000. -V.28(5). - P.455-460.

233. Capua I., Mutinelli F., Marangon S., Alexander D.J. H7N1 avian influenza in Italy (1999 to 2000) in intensively reared chickens and turkeys // Avian Pathol. 2000. - 29(6). - P. 537-543.

234. Centers for Disease Control, Office of Biosafety. Classification of Etiologic Agents on the Basis of Hazard. 4th Ed. /U.S. Department of Health, Education and Welfare, Public Health Service. - 1974.

235. Centers for Disease Control, Office of Biosafety. 1974. - (20).

236. Centers for Disease Control. Update: Universal Precautions for Prevention of Transmission of Human Immunodeficiency Virus, Hepatitis В Virus and Other Bloodborne Pathogens in Healthcare Settings // MMWR. 1988. - V. 37. - PP.377-382; 387: 388.

237. Centers for Disease Control. Guidelines for Preventing the Transmission of Tuberculosis in Health-Care Settings, with Special Focus on HIV-Related Issues // MMWR. 1990. - V.39. P.-17.

238. Chepurnov A., Cherny N., Chepurnova Т., Stavsky E. Monitoring of Specific Contamination of Virology Laboratories During Work with Filoviruses. // Anthology of Biosafety V. BSL-4 Laboratories. / Jonathan Y., Richmond, Ed. 2002. - P. 301 - 310.

239. Chepurnova T.S., Cherny N.B., Stavsky E.A. Monitoring of Specific Contamination of laboratory during work with filoviruses // Applied Biosafety,. 2002. - V.7, №1. - P. 19-20.

240. Chmeilewski A.G., Zimek Z., Bryl-Sandelewska Т., Kosmal W. Disinfection of municipal sewage sludge's in installation equipped with electron accelerator // Radiat. Phys. Chem. 1995. -V.46, N. 4-6. - P. 1071-1074.

241. Child P.L., MacKenzie R.B., Valverde L.R. et al. Bolivian haemorrhagic fever // Arch.Path. -1967.-V.93.-P .434-445.

242. Claas E.C., Osterhaus A.D., van Beek R., De Jong J.C., Rimmelzwaan G.F., Serine D.A., Krauss S., Shortridge K.F., Webster R.G. Human influenza A H5N1 virus related to a highly pathogenic avian influenza virus // Lancet. 1998. 351(9111). - P. 472-477.

243. Cohn E.J., Strong L.R., Hughes W.L. Preparation and properties of serum and plasma proteins // J. Amer. Chem. Soc. 1976. - Vol.68, N 3. - P. 459-475.

244. Collins C. Laboratory-acguired infections. London etc: Butterworths, 1983.

245. Collins C. The metric system is here // J Fla Med Assoc. 1975. - 62(3). - P.34.

246. Collins C. Safety in microbiology: a review. // Biotechnology and genetic engineering reviews /Ed. G.E. Russel.-Newcastle upon Tyne: Intercept, 1984. .V. l.-P. 141-165.

247. Cummins D. Arenaviral haemorrhagic fever // Blood Rev. 1991. - N 5. - P. 129-137.

248. Dimmick R.L., Vogl W.F., Chatigny M.A. Potential for accidental microbial aerosol transmission in the biological laboratory // Biohazards in biological research / Eds. A Hellman, M. N. Oxman, R. Pollack. New York, 1973. - P. 246-266.

249. Dimmick R.L. Laboratory hazards from accidentally produced airborn microbes. // Dev. ind. Microbiol. 1974. - Vol. 15, N 1. - P. 44-47.

250. Dorman RG. The dynamics of air sterilisation. // Chem. Ind. 1967. № 46. - P. 1946-1949.

251. Dorman R.G. // Filtration and Separation. 1968. - N 1. - P.24.

252. Drobniewski F., Balabanova Y. , Nikolayevsky V., Ruddy M. et al. Drug-resistant tuberculosis, clinical virulence and the dominance of the Beijing strain family in Russia // JAMA.-2005.-N293.- P.2726-2731.

253. Eddy G.A., Wagner F.S., Scott S.K. et al. Protection of monkes against Machupo virus by the passive administration of Bolivian hemorrhagic fever immunoglobulin (human original) // Bull. WHO. 1975. - V.52. - P. 723-727.

254. Emond R. T. D. et al. A case of Ebola virus infection // Brit. Med. J. 1977. - Vol. 2. - P. 541545.

255. Fisher-Hoch S. P. The danger from imported virus the filoviruses // Virus & Life. - 1993. -V. 6. - P. 13-16.

256. Fisher-Hoch S.P. The haemostatic defect in viral haemorrhagic fevers // Brit. J. Haemat. -1983.-Vol. 55.-P. 565-571.

257. Frame J.D. Clinical Features of Lassa Fever in Liberis // Reviews of infections dis. 1989. -V.ll. - Suppl.4. - P.762-770.

258. Gani H, Leach S. Transmission potential of smallpox in contemporary populations // Nature 2001.- V.414. P. 748-51.

259. Georges-Courbot M. C., Vallet Т., Fisher-Hoch S. Le laboratoire P4 Jean Merieux de Lyo // Bull.Soc. Fr. Microbiol. -V.15.N3. -P.164-174. ~~

260. Gerald A. E., Francis E.C. Ebola virus hemorrhagic fever / Ed. S. R. Pattyn. Amsterdam, New York, 1978.

261. Hanson R.P., Sulkin S.E., Buescher E.L., et al. Arbovirus infections of laboratory workers. // Science. 1967. - V.158. - P. 1283-1286.

262. Harrington J.M., Shannon H.S. Incidence of tuberculosis, hepatitis, brucellosis and shigellosis in British medical laboratory workers // Br Med J. 1976. - P. 759-762.

263. Henderson D. A. The looming treat of bioterrorism // Science. 1999.-Vol.283, N.5406. -P. 1279-1282.

264. Henderson D. A. Smallpox: clinical and epidemiologic features // Emerg. Infect. Dis. -1999. -V.5. P.537-539.

265. Henderson D.A., Ingekby T.V., Barllelt J.G., et al. Smallpox as a biological weapon: mcdical and public health management. Working Group on Civilian Biodefense // IAMA. 1999. - V.281. -P.2127-2137.

266. Henderson D.A. Smallpox is dead // WHO Mag. 1980. - May, 3-5.

267. Henderson D.A. Countering ihe post eradication threat of small рок and polio // Clin. Infect. Dis. 2002. - V.34. - P. 79-83.

268. Hilfenhaus J., Geiger H., Lemp J., Hung C. L. A strategy for testing established human plasma protein manufacturing procedures for their ability to inactivate or eliminate human immunodeficiency virus // J Biol Stand. 1987. - 15(3). - P. 251-263.

269. Holmes G.P., Hilliard J.K., Klontz,K.C., et al. Virus (Herpesvirus simiae) Infection in Humans: Epidemiologic Investigation of a Cluster // Ann of Int Med. 1990. - V.l 12. -P. 833-839.

270. Influenza. Report by the Secretariat // WORLD HEALTH ORGANIZATION, EXECUTIVE BOARD EB111/10, 111th Session 26 November 2002, Provisional agenda item 5.8.

271. Johnson N.P., Mueller J. Updating the accounts: global mortality of the 1918-1920 "Spanish" influenza pandemic // Bull. Hist. Med. 2002. - V.76 (1). - P. 105-115.

272. Jahrling P.B. Protection of Lassa virus-infected quinea pigs with Lassa-immune plasma of quinea pig, primate and human origin // J. Med. Virol. 1983. - V. 12, N2 - P. 93-102.

273. Jahrling P.B., Peters C.I. Passive antibody therapy of Lassa fever in Cynomolgus Monceys: importance of neutralizing antibody and Lassa virus strain. // Infect, and Immunol. 1984 - V. 44 -N2-P. 528-533.

274. Jahrling P.B., Peters C.I., Stephen E.L. Enhanced treatmentofLassafever by immune plasma-combined with Ribavirin in Cynomolgus Monceys. // J. Infect. Dis. 1984. - V. 149, N 3 - P. 420427.

275. Jahrling P. В., Frano J. D., Monson M. H. Endemic Lassa fever in Liberia. IV. Selection of ptimally effective plasma for treatment by passive immunization. // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. -1985.-V.79.-P. 380-384.

276. Jahrling P. B. et al. Passive immunization of Ebola virus-infected cynomolgus monkeys with immunoglobulin from hyperimmune horses // Arch. Virol. (Suppl) 1996. - Vol. 11. - P. 135-140.

277. Jonathan B. Tucker. Historical Trends Related to Bioterrorism: An Empirical Analysis // Emerg. Infect. Dis. 1999. -Vol.5, N.4. - P. 498-504.

278. Johnson B.K. et al. Seasonal variation in antibodies against Ebola virus in Kenyan fever patients // Lancet. 1986. - N. 1. - P. 1160.

279. Kaufmann A.F., Mellzer M.I., Schmid C.P. The economic impact of biolerrorist attack: a prevenlion and postattack intervention program justible? // Emerg. Infect. Dis. 1997. - Vol.3, N.2. -P. 83-93.

280. Kidd-Ljunggren K, Myhre E, Blackberg J. Clinical and serological variation between patients infected with different hepatitis В virus genotypes // J. Clin. Microbiol.- 2004.- N. 42.- P. 58375841.

281. Kushner S.R. Genetic engineering / Eds. H.B. Boyer and S. Nicosia. -Amsterdam: Elsevier/North-Holland Biomedical Press, 1978. P. 17.

282. Krinitsyn L.A., Stavsky E.A., Netesov S.V. et al. Comparative Analysis of the Methods for Determining the Efficiency of Air-Purification Filters Using Dioctyl Phthalate and Turbine Oil Aerosols // Applied Biosafety. 2001. -V. - 6, N. 1. - P. 6-12.

283. Laboratory Biosafety Manual. 2nd Edition, Geneva: World Health Organization, 1993.

284. Laboratory Biosafety Manual. -3rd Edition, Geneva: World Health Organization, 2004.

285. Leculier C., Marianneau P., Georges-Courbot M.C., Vallet Т., Deubel V. Validation of BSL-4 Laboratory / Jonathan Y., Richmond, ed. // Anthology of Biosafety V. BSL-4 Laboratories. 2002. -P. 283-293.

286. Lee M.-S., Chang P.-C., Shien J.-H., Cheng M.-C., Shieh H.K. Identification and subtyping of avian influenza viruses by reverse transcription-PCR // J. Virol. Methods. 2001. - V. 97(1-2). - P. 13-22.

287. Lupton H. W. et al. The effect of inactivated vaccine against Ebola fever in the investigation on guinea pigs // Lancet. —1980.-- Vol. 13, N-l-(8207). P. 1294-1295.— - --

288. Lupton H.W., Lambert R.D., Beauchamp B.M. Мое J.B., Eddy G.A. Method of plaque neutralization for Ebola virus // Abstracts of Annual Meeting of American Society of Microbiology. (Dallas, 1-6 Mar, 1981). - P.251.

289. Markin V.A. et al. Investigation of the possibility for urgent prophylactics and treatment of experimental filoviral infection//Abstr. of Intern. Symp. "100 Years of Virology" (St. Petersburg). -M., 1992.-P. 57-58.

290. McSweegan E. Hot Times for Hot Labs // ASM News. V. 65. - № 11. - P. 743-744.

291. Meijer A., van der Goot J.A., Koch G., van Boven M., Kimman T.G. Oseltamivir reduces transmission, morbidity, and mortality of highly pathogenic avian influenza in chickens // International Congress Series, 1263. 2004. - P. 495-498.

292. Meyer K. F., Eddie B. Laboratory infections due to Brucella // J. Infect. Dis. 1941. - V 68. -P.24-32.

293. Maniatis Т., Fritsch E.F., Sambrook J. // Gold Spring Harbor Laboratory. -New York .: Gold Spring Harbor, 1982. 310 p.

294. Martini G.A., Schmidt H.A. Spermatogenic transmission of Marburg virus // Klin Wsch. -1968.-V. 46.-P. 398-400.

295. Miller Ju. // International Herald Tribune. Wednesday, February 11, 2004. P.2.

296. Mitchell S.W., McCormick J.B. Phycochemical inactivation of Lassa, Ebola and Marburg viruses and effect of clinical laboratory analysis // J. Clin. Microbiol. 1984. - V.20, N 3. - P.486-489.

297. Мое J.B., Lambert R.D., Lupton H. W. The plaque-forming test for Ebola virus // J.Clin. Microbiol. 1981.-Vol. 13, N 4. - P.791-793.

298. Mokrousov I., Ly H. M., Otten T. ct al. Origin and primary dispersal of the Mycobacterium tuberculosis Beijing genotype: clues from human phylogeography // Genome Res.- 2005.- N 15,-P. 1357-64.

299. Murphy B. R., Webster R. G. Orthomyxoviruses // B. N. Fields, D. M. Knipe . Virology / P. M. Howley (ed.). 3rd ed. -New - York: Lippincott-Raven, Philadelphia, 1996 - P.1397-1448.

300. Muyembee Т., Kipasa M. Ebola haemorrhagic fever in Kikvit, Zaire // Lancet. 1995. - Vol. 345. p. 1448.

301. National Institutes of Health. 1994. Guidelines for Research Involving Recombinant DNA Molecules. (Washington: GPO) // Federal Register. 59FR34496.

302. Oliphant J. W., Parker R. R. Q fever: Three cases of laboratory infection // Public Health Rep. 1948,-V. 63(42). - P. 1364-1370.

303. O'Toole T. Smallpox; an attack scenario // Emerg. Infect. Dis. 1999. - V.5. - N. 4, July-August . - P.540-546.

304. O'Toole Т., Mair M., Inglesby T.V. Shining light on "dark winter" // Clinical Infectious Diseases. 2002. -Vol. 34, N 7; P. 972-983.

305. Pattyn S., Van der Groen G., Jacob W., et al. // Lancet. -1977. V.l. - N.8011. - P.573-574.

306. Pike R.M. Laboratory-associated infections: Summary and analysis of 3,921 cases. // Hlth. Lab Sci. 1976. - V. 13, N6. - P.105-114.

307. Pike R. M. Laboratory-associated infections: incidence, fatalities, causes and prevention // Ann Rev Microbiol. 1979 - V.33. - P.41-66.

308. Pike R.M., Sulkin S.E., Schulze M.L. Continuing importance of laboratory-acquired infections // Am J Public Health . 1965. - V.55. - P. 190-199.

309. Potter C. W. A history of influenza // J. Appl. Microbiol. 2001. - V.91 (4). - P. 572-579.

310. Rajendra A, Wong J. B. Economics of chronic hepatitis В and hepatitis С // J. Hepatology.-2007.-N. 47.-P. 608-617.

311. Recorbet G., Steinberg C., Faurie G. Survival in soil of Genetically Engineered Escherichia coli as related to inoculum density, predation and competition // FEMS Microbiol.Lett. 1992. -Vol. 65, N 9. - P.3763-3766.

312. Report of the Committee of Inquiry into the Smallpox Outbreak in London ( March April 1973.).- London: Her Majesty's Stationery Office, 1974.

313. Richardson J.H. Provisional summary of 109 laboratory-associated infections at the Centers for Disease Control, 1947-1973: Presented at the 16th Annual Biosafety Conference,( Ames, Iowa, 1973).

314. Rigby P. W., Dieckmann M., Rhodes C., Berg P. Labeling deoxyribonucleic acid to high specific activity in vitro by nick translation with DNA polymerase I. // J. Mol. Biol. 1977. -Vol.133.-P.237-251.

315. Rodrigues L.I., Maupin C.O., Ksiazek T. G. et al. Molecular investigation of multisource outbreak of Crimean-Congo Hemorrhagic fever in the United Emirates // Am. J. Trop. Hyg. 1997. -V.57.-N5.-P. 512-518.

316. Ruggiero H. A., Magnoni C., Guerro L. B. et al. Persistence of antibodies and clinical evalution in volunteers 7 to 9 years foolowing the vaccination against Argetine hemorrhagic fever // J. Med. Virol. 1981. - V.7.—P:227-232.

317. Sandakhchiev L.S., Marennicova S.S., Stavskiy E.A. Adherence to WHO Containment and Security Recommendations // WHO Ad Hoc Meeting, (14 15 Jan. 1999, Geneva, Switzerland). -P. 1-18.

318. Shortridge K. F., Zhou N. N., Guan Y. et al. Characterization of avian H5N1 influenza viruses from poultry in Hong Kong. // Virology. 1998. - V. 252(2). - P.331-342.

319. Shlychkov V.A., Borodulin A.I., Desyatkov B.M., Agranovski I.E. Personal Sampler of Monitoring of Viable Viruses; Part II: Modelling of Indoor Sampling Conditions. // Aerosol Science & Technology. 2006. V. - В печати.

320. Surikova, О. V., D. V. Voitykh, G. A. Kuz'micheva et al. Differentiation of the Mycobacterium tuberculosis W-Beijing family strains from the Russian Federation by the VNTR-typing // Mol Gen Microbiol Virusol. 2005. - P.22-29.

321. Skinholj P. Occupational risks in Danish clinical chemical laboratories. II Infections. // Scand. J Clin Lab Invest. 1974. - V. 33. - P.27-29.

322. Smagorinsky J. General Circulation Experiments with the Primitive Equations: 1. The basic experiment // Mon. Weather Rev. 1963. - V. 91, N 2. - P. 99-164.

323. Smil E., van Elsas J.D., van Veen J. A. Risks associated with the application of genetically modified microorganisms in terrestrial ecosystems// FEMS Microb.Rev.-1992.-Vol.88.- P.263-339.

324. Spendlovc J.C., Fannin K.F. Source, significance and control of indoor microbial aerosols: human health aspccts // Publ. Hlth Rep. 1983. - V. 98, N 3. - P. 229-244.

325. Suarez D.L., Schultz-Cherry S. Immunology of avian influenza virus: a review // Developmental and Comparative Immunology. 2000. - V.24 (2-3). - P. 269-283.

326. Sulkin S.E., Pike R.M. Viral Infections Contracted in the Laboratory // New Engl J Med. -1949. V. 241(5). - P.205-213.

327. Sulkin S.E., Pike R.M. Survey of laboratory-acquired infections // Am J Public Health. 1951. -V. 41(7).-P.769-781.

328. Sullivan J.F., Songer J.R., Estrem I.E. Laboratory-acquired infections at the National Animal Disease Center, 1960-1976 //Health Lab Sci. 1978. -V. 15(1). -P.58-64.

329. Standard 49, NSF, USA, 1992.

330. Standard JES-PR-00-001-83, USA.

331. Stavskiy E.A., Hawley R.J., Crane J.T. A comparison of Containment Facilities and Guidelines in Russia and the United States // Protection Against Microbial Threats, October 8-10.2000. -P. 26. -- -- --

332. Stavskiy E. A, Hawley R.J., Crane J.T. A Comparison of Containment Facilities and Guidelines in Russia and the United States // Anthology of Biosafety V. BSL-4 Laboratories. / Jonathan Y. Richmond, Editor. 2002. - P. 179 - 208.

333. Stavskiy E.A., Cherny N.B., Chepurnov A.A., Netesov S.V. // Anthology of Some Biosafety Aspects in Russia (up to 1960) // Anthology of Biosafety V. BSL-4 Laboratories / Jonathan Y. Richmond, Editor. Washington, 2002. - P. 29 - 92.

334. Stavskiy E.A., Cherny N.B., Krinitsin L.A. et al. Isolating class-Ill biosafety cabinet (4BP1, unified cabinet) for microbiology studies // Applied Biosafety. 2002. - V. 7, N 1. - P. 18-19.

335. Stavskiy E.A., Zykov S.V. Evalution of physiological status of virologists working in personal protection clothes // Conference proceedings. The 44th Annual Biological Safety Conference. 17th

336. Anniversary of the American Biological Safety Associaton.( Radisson Hotel New Orleans, LA, October 21-24, 2001). P.35.

337. Toungoussova O. S., G. Bjune, and D. A. Caugant. Epidemic of tuberculosis in the former Soviet Union: social and biological reasons // Tuberculosis (Edinb).- 2006.-N 86.- P. 1-10.

338. Trampuz A., Prabhu R.M., Smith T.F., Baddour L.M. Avian influenza: a new pandemic threat? // Mayo Clin. Proc. 2004. -79(6). - P. 523- 530.

339. Tsutsumi H., Ogra Р.Д., Tsutsumi II., Ogra P.L. Antibodies: protective, destructive and regulatory role. New York, 1984. - P. 98-103.

340. Tyvek защитная одежда. // www.tyvekprotech.com

341. U.S. Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration. Occupational Exposure to Bloodborne Pathogens, Final Rule // Fed. Register . 1991. - N.56. - P.64175-64182.

342. U.S. Congress, 1988. Medical Waste Tracking Act of 1988. H.R. 3515, 42 U.S. C. 6992.

343. Wedum A.G. History of Microbiological Safety // 18th Biological Safely Conference. (Lexington, Kentucky.). 1975.

344. Wilson J.A., Bosio C.M., Hart M.K. Ebola virus: the search for vaccines and treatments // Cellular and Molecular life Sciences. 2001. - V.58. - P. 1826-1841.

345. Wilson M.B., Nakane P.K. Immunofluorescence and Relaied Staining Technigues. / Eds. W.Knapp, K.Holubar, G. Wick. Amsterdam: Elsevier/North-Holland Biomedical Press, 1978. -P.215-224.

346. World Health Organization. Smallpox surveillance // Weekly Epidemiological Record. 1978. -V. 53(35).-P.265-266.

347. ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ВИРУСОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ "ВЕКТОР"

348. ФЕДЕРАЛЬНОЙ СЛУЖБЫ ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И БЛАГОПОЛУЧИЯ ЧЕЛОВЕКА

349. Ставский Евгений Александрович

350. СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СИСТЕМЫ ОБЕСПЕЧЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ РАБОТ С ВИРУСАМИ I-II ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ1. На правах рукописи0300.06 вирусология; 14.00.30 — эпидемиология1. Диссертацияна соискание ученой степени доктора медицинских наук1. Том II

Информация о работе

Ставский, Евгений Александрович
доктора медицинских наук
Кольцово, 2009
ВАК 03.00.06

Диссертация

Совершенствование системы обеспечения безопасности работ с вирусами I-II групп патогенности - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы