Совершенствование генетической структуры стада крупного рогатого скота по локусу BoLA DRB 3 как фактор оздоровления от лейкоза

Якушева, Людмила Ивановна

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Совершенствование генетической структуры стада крупного рогатого скота по локусу BoLA DRB 3 как фактор оздоровления от лейкоза
ВАК РФ 06.02.07, Разведение, селекция и генетика сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Совершенствование генетической структуры стада крупного рогатого скота по локусу BoLA DRB 3 как фактор оздоровления от лейкоза"

005055640

На правах рукописи

Якушева Людмила Ивановна

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ

СТАДА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПО ЛОКУСУ BOLA DRB 3 КАК ФАКТОР ОЗДОРОВЛЕНИЯ ОТ ЛЕЙКОЗА

06.02.07 - разведение, селекция и генетика сельскохозяйственных животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 2 НОЯ 2012

Ставрополь - 2012

005055640

Работа выполнена в Государственном научном учреждении Северо - Кавказский научно - исследовательский институт животноводства Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ СКНИИЖ Россельхозакадемии)

Научный руководитель: доктор биологических наук

Ковалюк Наталья Викторовна

Официальные оппоненты:

Чижова Людмила Николаевна - доктор сельскохозяйственных наук, профессор, ГНУ Ставропольский научно - исследовательский институт животноводства и кормопроизводства Россельхозакадемии, заведующая лабораторией иммунологии, биохимии и общей химии

Мачкаева Наталья Тухтаровна - кандидат биологических наук ФГБОУ «Калмыцкий государственный университет» старший преподаватель кафедры общей биологии и физиологии

Ведущая организация:

ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет»

Защита диссертации состоится «7» декабря 2012 года в «13 00» часов на заседании диссертационного совета Д 006.078.01 при Ставропольском научно - исследовательском институте животноводства и кормопроизводства по адресу: Россия, 355017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 15, тел./ факс (8652) 71-70-33, 71-70-08

E-mail: dissovetsniizhk@vanclex.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ Ставропольского научно - исследовательского института животноводства и кормопроизводства

Автореферат разослан « 7 » ноября 2012 года

Ученый секретарь диссертационного совета

Кононова Лидия Валентиновна

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Проблема лейкоза крупного рогатого скота является приоритетной для молочного скотоводства России (Гулюкин М.И., Симонян Г.А., Шишкин A.B., 2004). Существует как минимум два альтернативных подхода для повышения эффективности традиционных противолейкозных мероприятий: разработка методов эффективной ранней диагностики (Макаров В.В., Гринишин Д.П., 2005) и использование в селекционной практике признака устойчивости к персистентному лимфоцитозу (Сулимова Г.Е., Удина И.Г., Шайхаев Г.О., Захаров А., 1995).

Известно, что разные аллели гена BoLA DRB 3 играют не одинаковую роль в формировании устойчивости животных к персистентному лимфоцитозу, вызываемому вирусом лейкоза крупного рогатого скота (Levin H.A., Wu М.С., Steward J.A., 1988; Van Eijk M.J.T., Stewart - Haynes J.A., Beever J.E., 1992; Xu A., Van Eijk M.J.T., Park Ch., 1993; Mirsky M.L., Lewin H.A., 1998; Ковалюк H.B., Сацук В.Ф., Марков А., Пищулина В., 2010). Доказано, что животные, несущие аллели *11, *23, *28 -устойчивые (У), не склонны к переходу лейкоза в стадию перси-стентного лимфоцитоза, а животные, несущие в своем генотипе аллели *8, *16, *22, *24 - чувствительные (Ч), напротив, чаще других оказываются в выборке больных. Нейтральные (Н) аллели не ассоциируются ни с устойчивостью, ни с чувствительностью к персистентному лимфоцитозу.

Внедрение новых подходов в практику требует проведения широкого спектра исследований, направленных на оценку их прикладной значимости.

1.2. Цель исследований. Целью настоящей работы явилось изучение роли и результативности применения молекулярно - биологических методов в селекционной работе, для повышения ре-

зистентности крупного рогатого скота, и в ранней диагностике лейкоза.

Для достижения цели были поставлены и решены следующие задачи:

- проанализировать генетическую структуру стада айрширского скота по локусу ВоЬА ОЯВ 3 и определить частоту встречаемости аллелей, ассоциированных с устойчивостью к развитию лейкоза;

- путём соответствующего подбора быков - производителей, создать ВоЬА ОЯВ 3 генетическую структуру стада крупного рогатого скота айрширской породы с усиленной генетической составляющей устойчивости к персистентному лимфоцитозу;

- разработать схему эффективной ранней диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) на основе использования ДНК - анализа;

- определить экономическую эффективность использования мо-лекулярно - биологических методов.

1.3. Научная новизна работы состоит в том, что создана новая ВоЬА ОЯВ 3 генетическая структура стада крупного рогатого скота айрширской породы с повышенной частотой встречаемости аллелей, ассоциированных с устойчивостью к развитию лейкоза.

Разработана и апробирована диагностическая схема с использованием ДНК - анализа, эффективно позволяющая оздо-равливать хозяйство от лейкоза крупного рогатого скота.

1.4. Практическая значимость исследований. На основании генотипирования по гену ВоЬА ОЯВ 3 разработан способ подбора быков - производителей, направленный на повышение в стаде доли животных, с высоким уровнем устойчивости к персистентному лимфоцитозу. С использованием диагностической схемы, разработанной в ходе выполнения диссертационной ра-

боты, показана результативность выявления в раннем возрасте телят - носителей ВЛКРС.

1.5. Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ГНУ СКНИИЖ Россельхозакадемии в 2011 - 2012 г., региональной научно - практической конференции «Инновационные разработки молодых учёных Юга России (Ставрополь, 2012), на 5 международной научно - практической конференции «Научные основы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных» (Краснодар, 2012)

1.6. Связь темы с планом научных исследований. Настоящая работа проводилась в соответствии с государственным тематическим планом НИР Северо - Кавказского НИИ животноводства Россельхозакадемии по теме 01.2.006 07557 «Разработать программу использования генетических маркеров в селекции сельскохозяйственных животных».

1.7. Основные положения, выносимые на защиту:

-создание новой ВоЬА ОЯВ 3 генетической структуры стада крупного рогатого скота айрширской породы с повышенной устойчивостью к персистентному лимфоцитозу; -схема оздоровления стада от лейкоза, основанная на использовании технологии ДНК - анализа.

1.8. Публикации результатов исследований. Автором опубликовано 4 печатных работы, в том числе 2 публикации в изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ: Якушева, Л.И. Изменение генетической структуры стада крупного рогатого скота как первый этап оздоровления от лейкоза /Л.И. Якушева, Н.В. Ковалюк // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2012. -№ 3. (36). - С. 260-263.

Якушева, Л.И. Совершенствование генетической структуры стада крупного рогатого скота айрширской породы с использованием маркера ВоЬА 3 / Л.И. Якушева, В.Ф. Сацук,

H.В. Ковалюк, Е.В. Мачульская, Т.П. Горбунова // Проблемы биологии продуктивных животных.- 2012. -№ 3. - С.69-75.

I.9. Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, глав: материалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение результатов; выводов, предложений производству, списка литературы, включающего 181 источник, в том числе 99 - зарубежных авторов.

Диссертация изложена на 108 страницах компьютерного текста, включает 25 таблиц и 9 рисунков.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводились на базе лаборатории биотехнологии Северо - Кавказского научно исследовательского института животноводства Россельхозакадемии в период с 2010 -2012 гг.

Объектом исследования были коровы и быки айрширской породы и их потомство. Материалом для исследований служила кровь животных ОАО «Племзавод «Дружба» Калининского района, п = 841 и сперма быков-производителей, предоставленных ООО НПСХП «Астер» г. Краснодар, п = 23. Общий объём выборки составил 864 животных. Исследования проводили по схеме:

_____Схема 1

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ СТАДА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПО ЛОКУСУ BOLA DRB 3 КАК ФАКТОР ОЗДОРОВЛЕНИЯ ОТ ____ЛЕЙКОЗА

Генотипирование групп животных по локусу BoLA DRB 3(n=161)

Разработка схемы ранней диагностики лейкоза крупного рогатого скота

Быков - производителей (п=23)

ей I

Репрезентативной выборки животных ОАО «ПЗ «Дружба» (п=50)

Выявление провирусной ДНК в крови телят (п=703)

Разработка схемы подбора с целью улучшения Во1_А Р [1В 3 структуры стада

Разработка схемы эффективной ранней диагностики

Изучение частот встречаемости аллелей и генотипов в потомстве (п=88)

Рисунок 1. Схема исследований

Сравнительный РИД и ПЦР анализ потомства от закреплённых быков - производителей (п=93)

Забор крови проводился с использованием одноразовых инструментов - вакуумных шприцов S - Monovette. Образцы семени быков поступали на анализ в пайегтах.

Для выделения ДНК из крови и семени, постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР), анализа полиморфизма длин фрагментов рестрикции (ПДРФ), электрофореза использовались стандартные методики (Van Eijk M.J.T., Stewart - Haynes J.A., Lewin H.A., 1992; Xu A., Van Eijk V.J.Т.,' Park Ch., 1993; Херринггон С., и др., 1999).

На рисунках 2 - 5 представлены электрофореграммы продуктов рестрикции амплификата участка гена BoLA DRB 3 размером 284 пары нуклеотидов (пн) эндонуклеазами НаеШ, BstX2I, Bst2UI и Rsal, позволяющие определить BoLA DRB 3 генотип животного.

ЯШ

_______ДИН__I —......... —------

Рис. 2. Электрофореграмма продуктов Рис. 3. Электрофореграмма продуют

На рисунке 6 представлена электрофореграмма продуктов амплификации участка гена gag провируса лейкоза крупного рогатого скота величиной 347 пар нуклеотидов.

Рис. 6. Выявление провирусной ДНК лейкоза крупного рогатого скота методом ПЦР.

№13 и №15 - носители провыруса лейкоза крупного рогатого скота

-К 17 - отрицательный контроль

+К18 - положительный контроль амплификации

Статистическая обработка результатов производилась по стандартным методикам Т.Ф. Лакина (1980) и с использованием программных возможностей Microsoft Exel.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3Л.Изучение генетической структуры стада по локусу BoLA DRB 3.

Нами проанализирована генетическая структура стада по локусу BoLA DRB 3 и определена частота встречаемости аллелей, ассоциированных с устойчивостью к развитию лейкоза.

Для этого была генотипирована выборка коров и тёлок (п=50). Принцип отбора животных заключался в том, чтобы в группу для генотипирования пропорционально попадали дочери разных быков. При этом анализировалась таблица 14 «СЕЛ-ЭКС». Для анализа отбирались молодые животные (тёлки старше 10 месяцев, нетели и первотелки).

Р(А)=2ВД.

С использованием формулы: 2п , Где N, - чис-

ло гомозигот по исследуемому аллелю, a N2 - число гетерозигот, п - объем выборки, нами были установлены следующие частоты встречаемости аллелей BoLA DRB 3 (таблица 1). Очевидно, что в настоящее время в генетическом профиле животных хозяйства ОАО «Племзавод «Дружба» преобладают аллели: BoLA DRB 3 *7, BoLA DRB 3 *24, BoLA DRB 3 *27.

Установлено, что частота встречаемости устойчивых аллелей в данном стаде очень низкая (в сумме ВоЬА БЫВ 3*11, *23, *28 аллелей всего 7%). Это свидетельствует о том, что основная масса животных генетически предрасположена к инфекционным заболеваниям, в частности к лейкозу (таблица 1).

Генотипирование выборки показало, что количество гомозиготных животных составляет 14 %, гетерозиготных животных 86%. Таблица 1. Результат анализа ВоЬА БИВЗ генетического профиля стада ОАО « ПЗ «Дружба»

Аллель ВоЬА ШШ 3 1

Итого:

10 11 12

20 21 22

Статус аллеля Н

_Н

_н

_ч

_н

н н н н ч н н н н н

н н н

Частота аллеля, %

встречаемости

4 2

7Г

68 7

.2. Разработка схемы закрепления быков - производителей

Нами создана схема закрепления быков производителей, позволяющая повысить ВоЬА БЯВ 3 гетерогенность стада и увеличить генетически обусловленную резистентность животных к лейкозу.

Быки были отобраны из базы данных по быкам -производителям ведущих племенных предприятий России, сформированной в лаборатории. Всего база содержит полную информацию (племенную и генетическую) по 800 быкам - производителям, принадлежащим 7 племенным предприятиям. Перечень айрширских быков, из которых был произведён отбор по всем традиционным критериям, был представлен 110 животными, генотипированными по ВоЬА ОЛВ 3. Из них, 23 быка - производителя, были генотипирова-ны в рамках проведённого исследования.

Выборка включала молодых быков 2007-2008-2009 годов рождения, принадлежащих ОАО «Краснодарское» по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, ОАО «Невское» по племенной работе, ОАО «Головной центр по воспроизводству сельскохозяйственных животных». Результаты генотипирования этих животных представлены в таблице 2.

Анализ генетического профиля животных и геногипированных быков - производителей, а так же генеалогической структуры стада позволил подобрать наиболее подходящих для данного стада быков -производителей. Для закрепления подбирали быков - производителей таким образом, чтоб они, во - первых, не имели общих предков с использованными ранее быками - производителями, во - вторых, имели высокий потенциал продуктивности, в третьих - несли в стадо редко встречающиеся в нём аллели, в - четвёртых, несли аллели устойчивости к лейкозу.

Таблица 2. Результаты генотипирования быков - производителей

№ животного Линия BoLA DRB i енотип

Тупеи, 45585 Дик 768 1 12

Лоск, 45587 Р. Лихтинг 120135 1 27

Круиз, 45586 Дик 768 18 22

Гламур, 45588 Дик 768 1 18

Сэйл, 45583 Дик 768 1 12

Ракурс, 45584 Дик 768 1 27

Рекорд, 45590 Дик 768 1 1

Вельвет, 45589 Дик 768 12 18

Сталь, 1343 Б.Юнкера 15635 22 28

Силвуд, 9756875 O.P. Лихтинг 120135 3 7

Волан, 106202505 снипетрум SRB-63640 1 18

Олшивер, 431 O.P. Лихтинг 120135 3 24

Олимп, 251 O.P. Лихтинг120135 7 12

Гейзер441, C.B. Командор 174233 11 8

Галилей, 1181 O.P. Лихтинг 120135 7 2

Гранат, 711 O.P. Лихтинг 120135 3 - 12

Пан, 496 Сниперум 63640 8 18

Пегас, 502 Сниперум 63640 1 18

Отелло,5158 С.Б. Командор 174233 8 18

Исканлаке, 574 линия Лихтинга 120135 3 8

Зенит,727 прочие 1 24

Ауди, 715 прочие 8 27

Уникум,684 прочие 8 18

Исходя из этих требований, нами д ля закрепления были рекомендованы три быка: Гейзер 441, имеющий генотип BoLA DRB 3 8*11, Круиз 45586 - с BoLA DRB 3 генотипом - 18 *22, Тупеи 76849 - с BoLA DRB 3 генотипом -1*12 (таблица 3).

Закрепление быков было произведено «тройкой», со сменой быка после каждого перегула Например, если после осеменения быком - производителем Гейзер 441, корова пришла в охоту (по нашим данным, на долю первого быка в «тройке» приходилось около 60% плодотворных осеменений), проводили осеменение быком - производителем Круиз 45586 (20 - 30 % плодотворных осеменений), а в случае следующего переела - Тупеи 76849 (около 10 - 20% плодотворных осеменений).

Таблица 3. Характеристики закреплённых быков производителей и молочная продуктивность их матерей по 1 высшей лактации

Кличка, № Линия Продуктивность матери Генотип BoLA DRB 3

удой по наивысшей лактации, кг содержание жира, % содержание белка,%

Гейзер 441 С.В. Командор 174233 14308 4,73 3,10 П (У) 8(4)

Круиз 45586 Дик 768 10875 4,12 3,52 18 (Н) 22 (Ч)

Тупеи 76849 Дик 768 10991 4,28 3,50 1(Н) 12 (Н)

Увеличение количества чувствительных аллелей, которое произойдёт при данном закреплении, судя по литературным данным (Shatif S., 2000), должно способствовать повышению обильномо-лочности стада, что было прописано хозяйством как обязательное условие при закреплении быков.

Подбор новых быков - производителей, несущих редкие для данного стада генетические блоки (аллели), способствовал значительному (на 19%) снижению расхода семени на одно плодотворное осеменение по данным зоотехнического учёта. По нашему мнению, это, вероятно, объясняется устранением генетической несовместимости отцов и матерей.

Нами проанализированы 2 группы телят в возрасте до 2 -х месяцев. Телята первой группы (п=38) получены от быков - производителей, использовавшихся в хозяйстве до предложенного нами закрепления. В результате генотипирования установлено преобладание BoLA DRB 3 генотипов Н/Н - 52,63% (20 голов) и Н/Ч - 42,11 % (16 гол.). Полученные данные свидетельствуют о том, что если бы в хозяйстве не было изменено закрепление быков - производителей, устойчивые аллели в данном стаде были бы элиминированы.

Вторая группа телят (п=50) была получена уже от предложенных нами быков - производителей (через 1 год после закрепления). Результаты генотипирования показали, что в результате нового закрепления быков - производителей, частота встречаемости устойчивых аллелей увеличилась до 22%, чувствительных аллелей до 29%, нейтральных аллелей - снизилась до 49% (таблица 4).

Таблица 4. Частоты встречаемости аллелей ВоЬА ЭКВ 3 в группе телят, полученных от предложенного закрепления (п=50)

Аллель

10 11 12

20 21 22

Статус аллсля

н н ч н н н н

Частота встречаемости аллеля,'

в результате закрепления у потомков

Итого

12 14

49 22 29

Такое закрепление способствовало увеличению разнообразия ВоЬА БИВ 3 аллелей в стаде.

При сопоставлении частот встречаемости ВоЬА БЯВ 3 аллелей в материнском стаде с частотами встречаемости аллелей в группе телят, полученных от предложенного закрепления, выявлена существенная разница (Р<0,01). В качестве критерия оценки достоверности разницы частот встречаемости генотипов применен критерий Фишера ("//) (соответствующий расчёт приведён в таблице 5)

Таблица 5. Расчет критерия у2

Аллели Частоты встречаемости (р-р') (Р-РТ (Р-Р')2/ Р' X2

в материнском стаде (р) у телят (Р')

н 34 24 10 100 4,2 10,3

ч 13 15 -2 4 0,3

У 3 11 -8 64 5,8

Для расчета в качестве исходных данных использовано количество животных, носителей определённых аллелей (а не частоты встречаемости аллелей).

Таким образом, в хозяйстве ОАО «ПЗ «Дружба» на основании генетических исследований заложена и практически получена новая ВоЬА ЭЛВ 3 структура стада.

3.3. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота с использованием полимеразной цепной реакции

С целью экспериментального подтверждения возможности снижения количества инфицированных телят при 100 % инфицированное™ матерей был поставлен эксперимент 1.

В хозяйстве выделили группу глубокостельных коров. Она состояла из 30 животных положительно реагировавших в РИД. После отёла у матери и телёнка брали пробы крови, которые ис-

следовали на наличие провирусной ДНК ВЛКРС с использованием ПНР, Процедуру повторяли каждые полтора месяца до достижения телятами возраста 6 месяцев. Полученные данные приведены в таблице 6.

Таблица 6. Динамика выявления инфицированных провиру-сом ВЛКРС телят в зависимости от возраста_

Хозяйство Инфицировано телят, %

при рождении 1,5 мес. 3 мес. 4,5 мес. 6 мес.

ОАО «ПЗ «Дружба» 0 7 7 7 7

Последнее ПЦР исследование совместили с плановым серологическим исследованием. По результатам первого исследования (при рождении) среди телят не было выявлено ни одного носителя провирусной ДНК. Вирусоносители выявлены по результатам

второго исследования.

Важно отметить, что животные после рождения содержались в индивидуальных домиках, выпаивались молоком от РИД -отрицательных коров - кормилиц, инфицированных телят изолировали от здоровых. РИД - исследования в 6 месяцев дали положительный результат именно у ПЦР - положительных телят. Таким образом, уровень инфицированное™ удалось остановить на 7% рубеже при 100% инфицированное™ матерей.

В эксперименте 2 (таблица 7) были исследованы методом ПЦР две группы телят (п=50 и п=37). По результатам первого исследования (возраст 1 месяц) в первой группе от РИД отрицательных матерей не было выявлено инфицированных телят, а от РИД положительных было выявлено 2 (10%) инфицированных телёнка. Во второй группе от РИД негативных матерей не выявлено ни одного инфицированного животного, однако от РИД позитивных было выявлено 2 (13%) ПЦР положительных телёнка. Из второй

опытной группы телята - вирусоносители были немедленно удалены, а в первой - оставлены со здоровыми.

Второе исследование было проведено через два месяца, по достижению трехмесячного возраста телят. В группе телят, полученных от РИД - негативных матерей, но содержащихся совместно с телятами, полученными от РИД - позитивных, добавилось два инфицированных телёнка.

Во второй группе после выведения животных - вирусоно-сителей не добавилось ни одного инфицированного телёнка. Это можно объяснить только тем, что перезаражение животных происходит при совместном содержании здоровых телят и вирусоноси-телей. РИД исследования телят обеих групп, проведённые в возрасте шести месяцев, полностью подтвердили результаты ПЦР -исследований.

Таблица 7. Выявление провирусной ДНК

Время проведения ис-1 следований I - опытная группа (п=50) II - опытная группа (п=37)

от РИД негативных матерей от РИД позитивных матерей от РИД негативных матерей от РИД позитивных матерей

количество животных

30 20 22 15

1 исследование -1 мес - 2(10%) - 2(13%)

2 исследование -3 мес. 2 (7%) 2 (10%) - -

Таким образом, нами было установлено:

1. ПЦР позволяет диагностировать вирусоносительство на ранних сроках жизни животного (в возрасте около 1 месяца);

2. ПЦР диагностика позволяет предотвратить перезаражение животных при условии изоляции вирусоносителей.

До проведения противолейкозных оздоровительных мероприятий уровень инфицированности животных в 6 -месячном возрасте составлял 20%.

Всего нами было проанализировано методом ПЦР в период с

октября 2011 по март 2012 года 444 пробы крови телят айрширской породы, принадлежащих ОАО «Племзавод «Дружба».

Анализ полученных результатов показал, что с использованием ПЦР удалось выявить 26 голов (или 6%) инфицированных телят.

Все ПЦР - положительные телята немедленно изолировались из стада. РИД - исследование группы телят, отрицательно прореагировавших в ПЦР (п = 418) и достигших возраста 6 месяцев дало отрицательный результат в 100% случаев.

В потомстве закреплённых нами быков - производителей произошло снижение количества телят - вирусоносителей. Так, из 351 телёнка, полученных от быков - производителей без учёта ВоЬА 3 генотипов, вирусоносителями оказались 25 (или

7% телят), а из телят, полученных от закреплённых нами быков (п=93) лишь 1 оказался вирусоносителем (1%).

Таким образом, в ОАО «Племзавод «Дружба» разработана эффективная схема оздоровления молодняка от лейкоза крупного рогатого скота, основанная на использовании молекулярно - биологических методов (рисунок 7).

ИЗМЕНЕНИЕ. В.ОХ.АГЖВЗ ГЕНЕП'РГЕ'СКОЙ •СТР'ДСП'РЫ II ГЗДХ* Д1-1.АЛ~НООТНЬСА — КАК

^-АКГГОР-ЬХ УСТТЕИЕНОГО ОЗДОРОВЛЕШЬЗ .АЙРОГОХРСКОГО СТАДА -ОТ ЛЕЙКОЗА

:<^УПНОГО РОГ-ЙТОГО СКОТА

ГЛвзрвииммая* •структура сгтаьва

Ч!- алг-**-.« -риАШ^^т^Ь^' СНИЖЕНИЕ УРОВНЯ ИНФИЦИРОВАНности К

У -агг^г^ 6 МЕСЯ ^ НА

"Замерчвпип>евши>& — л^роюво^итепв!» -с I

'У-ОТОЙиивВЫШ ЗктЯ&ЛЯХЫШ!.

тир' — ямэг!че»стм«са у таига-ит до '2 — х ««вееяммсиго жозрэстз

Рисунок 7.Схема использования методов анализа ДНК для снижения уровня инфицированности

3.4. Геногеографические исследования вируса лейкоза крупного рогатого скота

Совместно с ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии, на базе Центра коллективного пользования научным оборудованием «Биоресурсы и биоинженерия сельскохозяйственных животных» в рамках выполнения государственных контрактов с Минобр-науки России № 16.М04.11.0018 и № 14.740.12.0821. проведено типирование вируса лейкоза крупного рогатого скота, провирус-ная ДНК которого была выделена из крови животных айршир-ской породы. Материалом для исследований являлись пробы крови от РИД положительных коров.

ПЦР - анализ, направленный на выявление провируса лейкоза в крови коров показал, что не все РИД - положительные животные являются вирусоносителями детектируемых фрагментов генов gag и env. Исследованием ДНК 20 коров установлено что 80 % РИД положительных животных оказались носителями вируса лейкоза, детектируемого методом ПЦР. Как было показано ранее (Виноградова И.В., Гладырь Е.А., Зиновьева H.A., 2011), данный факт может быть связан с тем, что либо животные находятся в стойкой алимфатической стадии, либо в начальной стадии персистирующего лимфоцитоза, чем и обусловлено низкое содержание провирусной ДНК в крови коров.

Молекулярно - генетические свойства провирусной ДНК гена env определяли с помощью методов «nested» - ПЦР (Гладырь Е.А., Зиновьева H.A., Ермилов A.A., и др. 2006), ПДРФ анализа (RFLP) (Beier D., Blankenstein Р., Marquardt О., et al., 2001) и по методикам Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии (Виноградова И.В, Гладырь Е.А., Зиновьева Н.А, 2011).

Проведенный ПЦР - ПДРФ анализ фрагмента гена env BJIKPC длиной 444 п.о. показал, что в изученном нами хозяйстве циркулирует две генетические разновидности вируса лейкоза,

относящиеся по международной классификации к вирусам - «австралийской» и «бельгийской» подгрупп.

Таким образом, проведенные исследования позволили получить дополнительные данные по региональной филогении участка гена епу вируса лейкоза крупного рогатого скота. 3.6. Экономическое обоснование исследований Как отмечалось выше, одним из приемов повышения эффективности молочного скотоводства является получение здорового молодняка устойчивого к заболеваниям, неблагоприятным факторам, способного максимально реализовать свой генетический потенциал. Экономическая эффективность проводимых исследований оценивалась исходя из:

- сокращения расхода спермы на одно плодотворное осеменение в результате закрепления на 19% (по данным зоотехнического учёта) (таблица 8),

- сокращения выбраковки животных на 19% (таблица 9). Таблица 8. Экономический эффект от сокращения расхода спермы

Количество коров в хозяйстве

Количество тёлок в хозяйстве

Количество доз спермы на одно плодотворное осеменение коровы

Количество доз спермы на одно плодотворное осеме нение тёлки____

Цена одной спермадозы, руб.

Итого, руб.

Стоимость генетических анализов (1000 руб. / исследование), руб.

Снижение расхода спермы на одно плодотворное осеменение, %

Итого новые затраты на сперму в год, руб.

Прибыль от экономии средств на сперму в год, руб.

720,0

280,0

3,9

2,0

130,0

437840,0

50000,0

19,0

354650,4

Рентабельность, %

Окупаемость затрат, мес.

33189,6

66,4

7,0

Таблица 9. Расчёт экономического эффекта за счет снижения выбраковки животных - вирусоносителей_

Количество тёлок, (голов/год) 446,0

Стоимость ДНК - анализов, руб. (150 руб ./исследование) 67000,0

Живая масса телёнка в 6 мес., кг. 147,0

Себестоимость 1 кг привеса, руб. 11,8

Дополнительная прибыль за счёт снижения выбраковки на 19%, руб. 80441,0

Таким образом фактический экономический эффект от сокращения расхода семени составил 33189,6 рублей в год. Суммарный ожидаемый ежегодный экономический эффект от внедрения методов ДНК - анализа в данном хозяйстве составит 113630,6 рублей.

ВЫВОДЫ

1. В стаде крупного рогатого скота айрширской породы ОАО «ПЗ «Дружба» преобладают аллели BoLA DRB 3 *7, *24, *27, а частота встречаемости аллелей, детерминирующих устойчивость к персистентному лимфоцитозу, низка (в сумме BoLA DRB 3 *11, *23, *28 аллели встречаются с частотой всего 7%).

2. Разработанная схема закрепления быков - производителей, позволила выровнять аллельный BoLA DRB 3 - профиль стада, увеличить количество животных - носителей аллелей устойчивости к персистентному лимфоцитозу на (15%), увеличить количество животных с гетерозиготными генотипами (на 12%).

3. Реализована схема закрепления быков - производителей способствовала значительному (на 19%) снижению расхода спермы на одно плодотворное осеменение.

4. Экспериментальными исследованиями установлено, что; -ПЦР позволяет выявлять вирусоносительство на ранних сроках

жизни животного (в возрасте около 1 месяца); -ПЦР позволяет предотвратить перезаражение животных при условии изоляции вирусоносителей.

5. В потомстве, закреплённых нами быков - производителей, произошло снижение количества телят - вирусоносителей в 7 раз.

6. Комплекс генетических и диагностических исследований, проведённых в хозяйстве, способствовал снижению количества вирусоносителей в общей сложности с 20 до 1%.

7. Титрование вируса лейкоза, выделенного у животных хозяйства показало, что в изученном нами стаде циркулирует две генетические разновидности вируса лейкоза, относящиеся по международной классификации к вирусам «австралийской» и «бельгийской» подгрупп.

8. Ожидаемый общий экономический эффект от внедрения предложенной схемы в хозяйстве составит в год 113630,6 рублей.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

Сельхозпредприятиям по разведению крупного рогатого скота молочного направления продуктивности рекомендуется:

- проводить подбор родительских пар с учетом генотипа по ло-кусу ВоЬА ЭИВ 3, для повышения резистентности коров к пер-систентному лимфоцитозу, снижения количества телят - вирусоносителей и сокращения расхода семени на плодотворное осеменение;

- разделять телят с 1 месячного возраста на здоровых и вирусоносителей с изоляцией последних на основании результатов ДНК - анализа по предложенной нами схеме для оздоровления стад от лейкоза.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

Публикации в изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ:

1. Якушева, Л.И. Изменение генетической структуры стада крупного рогатого скота как первый этап оздоровления от лейкоза / Л.И. Якушева, Н.В. Ковалюк // Труды Кубанского государственного аграрного университета -2012.-№3 (36). С. 260-263.

2. Якушева, Л.И. Совершенствование генетической структуры стада крупного рогатого скота айрширской породы с использованием маркера ВоЬА БЯВ 3 / Л.И. Якушева, В.Ф. Сацук, Н.В. Ковалюк, Е.В. Мачульская' Т.П. Горбунова // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2012. -№3. _ С.69-75.

Публикации в других изданиях:

1. Якушева, Л.И. Практический опыт использования ПЦР -диагностики для оздоровления стада от лейкоза КРС / Л.И. Якушева, В.Ф. Сацук, Н.В. Ковалюк, Е.В. Мачульская, Т.П. Горбунова // Материалы научно -практической конференции «Инновационные разработки молодых ученых Юга России». Ставрополь - 2012 С185 -187.

2. Мачульская, Е.В. Повышение генетической гетерогенности стада, как фактор увеличения резистентности к инфекционным заболеваниям / Е.В. Мачульская, Н.В. Ковалюк, Л.И. Якушева, В.Ф. Сацук // Научные основы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных. Краснодар 2012,- С12-14.

Якушева Людмила Ивановна

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ

СТАДА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПО ЛОКУСУ BOLA DRB 3 КАК ФАКТОР ОЗДОРОВЛЕНИЯ ОТ ЛЕЙКОЗА

автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Бумага тип. № 2. Печать трафаретная. Тираж 100 экз. Заказ № 1008

350040, г. Краснодар, ул. Ставропольская, 149, Центр "Универсервис", тел. 21-99-551

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Якушева, Людмила Ивановна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Состояние структуры поголовья коров молочного направления продуктивности в Краснодарском крае

1.2. Полиморфизм локуса ВоЬА ЭКВ 3, методы его выявления и возможность использования в селекции молочного скота

1.3. Лейкоз крупного рогатого скота, этиология и методы диагностики

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Выделение ДНК

2.2. Проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР)

2.3. Анализ полиморфизма длин фрагментов рестрикции (ПДРФ)

2.4. Электрофорез

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Анализ работы отрасли молочного скотоводства в ОАО «Племзавод «Дружба» Калининского района

3.2. Изучение генетической структуры стада по локусу ВоЬА ЭИВ

3.3. Характеристика быков - производителей, использовавшихся в хозяйстве

3.4. Подбор быков - производителей с использованием информации по локусу ВоЬА ОЯВ

3.5. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота с использованием полимеразной цепной реакции

3.6. Генеографические исследования вируса лейкоза крупного рогатого скота

3.7. Экономический эффект использования молекулярно-биологических методов в молочном скотоводстве

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Совершенствование генетической структуры стада крупного рогатого скота по локусу BoLA DRB 3 как фактор оздоровления от лейкоза"

Актуальность темы. Проблема лейкоза крупного рогатого скота является приоритетной для молочного скотоводства России (Гулюкин М.И., Симонян Г.А., Шишкин A.B., 2004). Существует как минимум два альтернативных подхода для повышения эффективности традиционных противолейкозных мероприятий: разработка методов эффективной ранней диагностики (Макаров В.В., Гринишин Д.П., 2005) и использование в селекционной практике признака устойчивости к персистентному лимфоцитозу (Сулимова Г.Е., Удина И.Г., Шайхаев Г.О., Захаров И.А., 1995).

Известно, что разные аллели гена BoLA DRB 3 играют не одинаковую роль в формировании устойчивости животных к персистентному лимфоцитозу, вызываемому вирусом лейкоза крупного рогатого скота (Levin H.A., Wu М.С., Steward J.А., 1988; Van Eijk M.J.T., Stewart - Haynes J.A., Beever J.E., 1992; Xu A., Van Eijk M.J.T., Park Ch., 1993; Mirsky M.L., Lewin H.A., 1998). Доказано, что животные, несущие аллели *11, *23, *28 - устойчивые (У), не склонны к переходу лейкоза в стадию персистентного лимфоцитоза, а животные, несущие в своем генотипе аллели *8, *16, *22, *24 -чувствительные (Ч), напротив, чаще других оказываются в выборке больных. Нейтральные (Н) аллели не ассоциируются ни с устойчивостью, ни с чувствительностью к персистентному лимфоцитозу.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение роли и результативности применения молекулярно - биологических методов в селекционной работе, для повышения резистентности крупного рогатого скота, и в ранней диагностике лейкоза.

Для достижения цели были поставлены и решены следующие задачи: - проанализировать генетическую структуру стада айрширской породы по локусу ВоЬА ОКВ 3 и определить частоту встречаемости аллелей, ассоциированных с устойчивостью к развитию лейкоза;

- путём соответствующего подбора быков - производителей, создать ВоЬА БИВ 3 генетическую структуру стада крупного рогатого скота айрширской породы с усиленной генетической составляющей устойчивости к персистентному лимфоцитозу;

- определить экономическую эффективность использования молекулярно -биологических методов.

Научная новизна исследований состоит в том, что создана новая ВоЬА БИВ 3 генетическая структура стада крупного рогатого скота айрширской породы с повышенной частотой встречаемости аллелей, ассоциированных с устойчивостью к развитию лейкоза.

Разработана и апробирована диагностическая схема с использованием ДНК - анализа, эффективно позволяющая оздоравливать хозяйство от лейкоза крупного рогатого скота.

Практическая значимость и реализация результатов исследований. На основании генотипирования по гену ВоЬА ОЯВ 3 разработан способ подбора быков - производителей, направленный на повышение в стаде доли животных, с высоким уровнем устойчивости к персистентному лимфоцитозу. С использованием диагностической схемы, разработанной в ходе выполнения диссертационной работы, показана результативность выявления в раннем возрасте телят - носителей ВЛКРС.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

-создание новой ВоЬА ОЯВ 3 генетической структуры стада крупного рогатого скота айрширской породы с повышенной устойчивостью к персистентному лимфоцитозу;

-схема оздоровления стада от лейкоза, основанная на использовании технологии ДНК - анализа.

Заключение Диссертация по теме "Разведение, селекция и генетика сельскохозяйственных животных", Якушева, Людмила Ивановна

ВЫВОДЫ

4. Экспериментальными исследованиями установлено, что;

-ПЦР позволяет выявлять вирусоносительство на ранних сроках жизни животного (в возрасте около 1 месяца);

-ПЦР позволяет предотвратить перезаражение животных при условии изоляции вирусоносителей.

7. Типирование вируса лейкоза, выделенного у животных хозяйства показало, что в изученном нами стаде циркулирует две генетические разновидности вируса лейкоза, относящиеся по международной классификации к вирусам «австралийской» и «бельгийской» подгрупп.

8. Ожидаемый общий экономический эффект от внедрения предложенного метода в хозяйстве составит в год 113630,6 рублей.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

- проводить подбор родительских пар с учетом генотипа по локусу ВоЬА 011В 3, для повышения резистентности коров к персистентному лимфоцитозу, снижения количества телят - вирусоносителей и сокращения расхода семени на плодотворное осеменение;

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Якушева, Людмила Ивановна, Краснодар

1. Авилов, В.М. Проблемы оздоровления крупного рогатого скота от лейкоза / В.М. Авилов, В.М. Нахмансон // Ветеринария. -1995. -№ 11. С. 3-6.

2. Альберте, Б. Молекулярная биология клетки / Б.Альберте, Д.Брей, Дж. Льюис. М.: Мир, 1987. 1050 с.

3. Алыптеин, А.Д. Подходы к созданию генно инженерной вакцины против лейкоза на основе вируса осповакцины / А.Д. Алыптеин // Тез. докл. II международной научн. конф.: Биотехнология в животноводстве и ветеринарии. -М., 2000.-С. 149-151.

4. Апалькин, В.А. Лейкоз крупного рогатого скота / В.А. Апалькин, М.И. Гулюкин, Н.И. Петров // Петролазер. Санкт Петербург. 2005. -106 с.

5. Белов, А.Д. О патогенезе лейкозов крупного рогатого скота / А.Д. Белов, Г.В. Рогожина // Ветеринария. -1997. № 12. - С. 16- 19.

6. Берзяк, А.Г. Опыт ускоренного оздоровления племенного хозяйства от лейкоза /А.Г. Берзяк, B.C. Ковалючко, B.C. Гротевич, Л.И. Киричук // Ветеринария -№12. 1990. - С. 13-15.

7. Бурба, Л. Г. Лейкозы и злокачественные опухоли животных / Л.Г. Бурба, А. Ф. Вахилов, В. А. Горбатов // М.: Агропромиздат, 1988. 399 с.

8. Бусол, В.А. ПЦР диагностика ВЛКРС / В.А. Бусол, О.Ю. Лиманская, А.П. Лиманский // Ветеринарная медицина. - 1998. - В. 74. - С. 35-44.

9. Валихов, А.Ф. Лейкозы и злокачественные опухоли животных / Валихов А.Ф // Под ред. В.П.Шишкова, Л.Г.Бурбы. М., 1988. - С. 173-194.

10. Виноградова И.В. Сравнительная оценка результативности РИД и ДНК-диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота/ И.В. Виноградова,

11. Е.А. Гладырь, Н.А.Зиновьева // Проблемы биологии продуктивных животных. -2011.-Т. 1. С. 15-16.

12. Волкова, Р. А. Молекулярно генетическая диагностика гепатита «В» /Р. А. Волкова // Генодиагностика в современной медицине: Тез. докл. III Всероссийской научн.-практ. конф.: - М., 2000. -С. 45-47.

13. Галеев, Р. Ф. Вирус лейкоза КРС (культуральные, инфекционные и иммунологические свойства) / Р. Ф. Галлеев. Уфа: Ветеринарная медицина, 1999. - 147 с.

14. Глазко, В.И. Полиморфизм молекулярно генетических маркеров у домашней лошади и лошади Пржевальского / Глазко В.И. и др. // Тез. докл. II международной научн. конф.: Биотехнология в животноводстве и ветеринарии. -М., 2000.-С. 151-152.

15. Глазко, В.И. Ведение в ДНК технологии / В.И. Глазко, И.М. Дунин, Г.В.Глазко, JI.A. Калашникова//М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2001.- 436 с.

16. Горковенко, Л. Дойное стадо юга страны. /Л. Горковенко, В. Шостак, Н. Ковалюк // Животноводство России. 2005. - № 9. - С. 40-42.

17. Гулюкин, М.И. О распространении лейкоза крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин, Г.А. Симонян, A.B. Шишкин // Ветеринарный консультант. №18. -2004.-С. 4-5.

18. Гулюкин, М.И. Особенности противолейкозных мероприятий, обеспечивающих высокую молочную продуктивность / М.И. Гулюкин, Г.А. Симонян, А.К. Мироменко //Сборник научных трудов. Екатеринбург, -2005. С.28-34.

19. Гулюкин, М.И. Разработка эффективных мероприятий против лейкоза крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин // Ветеринария. 2002. - № 12.- С. 3-8.

20. Гулюкин, М.И. Основные тенденции в организации и проведении противолейкозных мероприятий / М.И. Гулюкин, Н. В. Замараева, В. А. Седов и др. // Труды ВИЭВ. М. - 1999. - Т. 72. - С. 16 - 22.

21. Гулюкин, М.И. Разработка эффективных мероприятий против лейкоза крупного рогатого скота / Гулюкин М.И. и др. // Ветеринария. 2002. - № 12.- С. 3 8.

22. Гулюкин, М.И. Экспериментальное заражение кроликов вирусом лейкоза крупного рогатого скота /М.И. Гулюкин, J1.A. Иванова, Е.А. Шишкина, A.B. Шишкин, Л.Б. Прохватилова // Ветеринария. 2008. - № 11. - С. 23-27.

23. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота. Методические указания. -М.: Агропромиздат, 1998. 29 с.

24. Деринов, А.Н. Псевдоаллергические реакции на туберкулин при лейкозе КРС / А.Н. Деринов, Н.П. Овдиенко, А.Х. Найманов // Ветеринария. 2006. №-11. -С.20-23.

25. Замараева, Н. В. Экспериментальные исследования по выявлению возможности передачи вируса лейкоза крупного рогатого скота через молоко лабораторным животным / Н.В. Замараева, М.И. Гулюкин, М.Н. Снежков // Бюлл. ВИЭВ. 1996. - № 77. - С. 66.

26. Ковалюк, Н.В. Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота / Н.В. Ковалюк, В.Ф. Сацук, Е.В. Мачульская // Ветеринария Кубани. -2007. -№ 1. С. 18-20.

27. Ковалюк, Н.В. Выявление возможных причин и последствий распространения отдельных аллельных вариантов локуса BoLA-DRB3 в группах голштинского и айрширского скота/ Н.В. Ковалюк, В.Ф.Сацук,

28. A.B. Матвиец, Е.В. Мачульская // Генетика. 2010. Т.46. №3. С.429-432.

29. Ковалюк, Н.В. Использование генетического маркера BoLA -DRB3 для оптимизации селекционного процесса при скрещивании/ Н.В. Ковалюк,

30. B.Ф.Сацук // Молочное и мясное скотоводство,- 2010. -№ 2. С. 10-12.

31. Коромыслов, Г.Ф. Основы профилактики и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота / Г.Ф. Коромыслов, В.П. Шишков // Ветеринария. -1993.-№4.-С. 15-18.

32. Коромыслов, Г.Ф. Основные итоги и перспективы научных исследований по проблеме лейкозов сельскохозяйственных животных / Г.Ф. Коромыслов, М.И. Гулюкин, Г.А. Симонян //Тр. ВИЭВ. т. 72. - М.: 1999. -С.3-11.

33. Костенко, Т.С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии /Т.С. Костенко и др. М.: Агропромиздат. -1989. 272 с.

34. Крикун, В.А. Лейкоз крупного рогатого скота и иммунологическая толерантность / В.А. Крикун // Ветеринария. 2002. -№ 6. С. 7-9.

35. Кузнецова, А.П. Проблемы лейкоза сельскохозяйственных животных / А.П. Кузнецова, В.П. Смирнов // Ветеринария. №3 1998 - С.32-33.

36. Кузнецова, Н.В. Использование полимеразной цепной реакции для выявления инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота / Кузнецова Н.В. и др.// Ветеринария. 1997. - С. 12 - 13.

37. Лакин, Т.Ф. Биометрия / Т.Ф. Лакин: М.: Высшая школа, 1980. 293 с

38. Лемеш, В.М. Лейкоз крупного рогатого скота / В.М. Лемеш и др.: Минск: «Ураджай», 1987. 220 с.

39. Лиманский, А.П. Молекулярно генетические методы - основа программ по искоренению лейкоза крупного рогатого скота / А.П. Лиманский, О.Ю. Лиманская // Биотехнология. - 2001. - № 3. - С. 40-50

40. Мазин, A.B. Анализ генома. Методы. / A.B. Мазин, A.C. Краев, В.А. Потапов: М.: Мир, 1990 . 176 с.

41. Макаров, В.В. Эпизоотологические перспективы лейкоза крупного рогатого скота / В.В.Макаров, Д.П. Гринишин// Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 2005. - № 2. - С. 70-73.

42. Макаров, В.В. Избранные вопросы общей эпизоотологии и инфектологии / В.В. Макаров. М., 1999. 224 с.

43. Нахмансон, В.М. Эпизоотология лейкоза крупного рогатого скота и меры борьбы с ним / В.М. Нахмансон, Е.А. Дун // Итоги науки и техники. -1986.-С.146- 149

44. Нахмансон, В.М. Лейкоз крупного рогатого скота. / В.М. Нахмансон// М.: Россельхоз-издат, 1986.

45. Новиков, A.A. Генетическая экспертиза племенного материала / A.A. Новиков, H.H. Романенко // Зоотехния. 2001.-№7. - С. 14-17.

46. Облап, Р.В. Вирус бычьего лейкоза и диагностика инфицированных животных / Р.В. Облап, В.И. Глазко, A.A. Созинов // Аграр. Наука. 1998.4. С. 43-44.

47. Орлянкин, Б.Г. Классификация и номенклатура РНК содержащих вирусов позвоночных /Б.Г. Орлянкин// Сельскохозяйственная биология. - 1996. - № 2. - С. 3-24.

48. Петров, Н.И. Оздоровление хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота / Н.И. Петров // Ветеринария. -1997.- М9.-С. 10-12.

49. Перепечина, И.О. Исследование объектов судебно-биологической экспертизы полимеразной цепной реакцией / И.О.Перепечина, Т.В. Стегнова, М.Г. Пименов // Методические рекомендации: М., ЭКЦ МВД РФ, 1996. 24 с.

50. Пономарева, И.С. Биологический круговорот радионуклидов и динамика лейкозов в Оренбуржье/ И.С. Пономарева // Радиационная биология. Радиоэкология. 2008. Т.48. №5. С.606-610.

51. Прохватилова, Л.Б. Диагностика лейкоза КРС методом ПЦР /Л.Б. Прохватилова и др //Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 1998. - № 5 . - С. 65 - 68.

52. Прохватилова, Jl.Б. Применение ПЦР для раннего обнаружения провируса лейкоза крупного рогатого скота у экспериментально инфицированных животных / Л.Б. Прохватилова и др. // Ветеринария. 2001. -№ 8. - С. 17-21.

53. Рис, Э. Введение в молекулярную биологию/ Э. Рис, М.Стернберг. М.: Мир, 2002. 142 с.

54. Сацук, В.Ф. Способ повышения гетерогенности по локусу BoLA DRB 3 в стадах крупного рогатого скота/ В.Ф. Сацук, Н.В. Ковалюк, А.Е. Волченко // Проблемы биологии продуктивных животных.- 2011, №4. С. 126-129.

55. Сацук, В.Ф. Влияние «скрытого» селекционного инбридинга на хозяйственно полезные признаки скота / В.Ф. Сацук, A.B. Матвиец, Н.В. Ковалюк // Молочное и мясное скотоводство.- 2010. -№ 7. - С. 10-12

56. Симонян, Г. А. Ветеринарная гематология / Г.А.Симонян, Ф.Ф. Хисамугдинов: М.: Колос. -1995. 254 с.

57. Симонян, Г.А. Разработка и совершенствование оздоровительных противолейкозных мероприятий / Г.А. Симонян // Ветеринария. 2007. -№ 7. -С. 3-7.

58. Слепченко, А.Р. Главный комплекс гистосовместимости сельскохозяйственных животных: иммуногенетические и популяционные аспекты / А.Р. Слепченко// Успехи современной генетики. 1994. - № 19. - С. 178-205

59. Снежков, Н.И. Молоко лейкозных животных фактор эпизоотического процесса / Н.И. Снежков. Ученые-аграрники - с.-х. пр-ву. - Кострома. - 1995. -Т. 1.-С. 35.

60. Смирнов, П.Н. Практические аспекты лейкоза крупного рогатого скота / П.Н. Смирнов // Ветеринарная газета .-№13. -1998. 4с.

61. Стегнова, T.B. Исследование спермы при идентификации личности методом генотипоскопии / Т.В. Стегнова, И.О. Перепечина, М.Г.Пименов, Е.Ю.Сыроквашева // Методические рекомендации: М., ЭКЦ МВД РФ, 1993. -24

62. Сулимова, Г.Е. ДНК-полиморфизм гена BoLA-DRB 3 у крупного рогатого скота в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу / Г.Е. Сулимова, И.Г. Удина, Г.О. Шайхаев, И.А. Захаров // Генетика. 1995. -№. 9.-С. 1294-1299

63. Сюрин, В.Н. Ветеринарная вирусология./ В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В.Фомина. М.: Агропромиздат, 1991. 431с.

64. Тузов, И.Н. Результаты совершенствования красной степной породы голштинскими красно-пёстрыми быками. / И.Н. Тузов, Х.А. Одабашян // Труды Кубанского аграрного университета. Краснодар, 2005. - Вып. 414 (442). - С. 24-27

65. Тузов, И.Н. Взаимосвязь хозяйственно полезных признаков у голштинизированных коров. / И.Н. Тузов, С.А. Гнатышак // Труды Кубанского аграрного университета. - Краснодар, 2005. - Вып. 414 (442). - С. 15-19.

66. Тучемский, Л.И. Новое селекционное достижение в айрширской породе тип Смена / Л.И. Тучемский, Г.Г. Макарова, П.Н. Прохоренко, Ю.В. Бойков, Е.Н. Васильева, Н.Ю. Чекменёва // Зоотехния. - 2008. -№ 6. - С.2-4.

67. Удина, И.Г. Гены главного комплекса гистосовместимости человека и животных / И.Г. Удина // Успехи современной генетики. 1994. - № 19. -С. 133-177

68. Уильяме, Б. Методы практической биохимии / Б. Уильяме, К. Уилсон: М.: Мир, 1978.-272 с.

69. Херингтон, С. Молекулярная клиническая диагностика. Методы. С. Херингтон и др.: М.: Мир, 1999. 558 с.

70. Шаров, А.Н. Тест-системы ПЦР при диагностике лейкоза КРС /А.Н. Шаров// Ветеринарный консультант. 2006.- №5. - С. 5-9.

71. Шипицын, А.Г. Лейкоз крупного рогатого скота в краснодарском крае / А.Г. Шипицын, А.К. Схатум, Н.Ю. Басова, В.В. Пачина, А.В. Скориков, Т.Н. Чопик // Методические рекомендации. Краснодар, 2006 с. 1-28.

72. Aida, Y. Identification of a New Bovine МНС Class II DRB Allele by Nucleotide Sequencing and an Analysis of Phylogenetic Relationships / Aida Y. et al. // Biochemical and Biophysical Research Communications. -1995.-vol. 209. -№ 3, P. 981-988.

73. Altanerova, V. Induction of immune deficiency syndrome in rabbits by bovine leukaemia virus / V. Altanerova, J. Ban, С Altaner // AIDS. 1989. V.3. P.755-758.

74. Ammer, H. Exonic polymorphism versus intronic simple repeat hypervariability in MHC-DRB genes / H. Ammer, F-W. Schwaiger, C. Kammerbauer // Immunogenetics. 1991 - № 35. - P. 332-340.

75. Amorena, B. Serologically defined SD locus in cattle / B. Amorena, W.H.Stone // Science. 1978. V.201. P. 159-160.

76. Behl, J.D. Characterization of genetic polymorphism of the bovine lymphocyte antigen DRB3.2 locus in Kankrej cattle (Bos indicus) / J.D. Behl, N.K. Verma, R.Behl et al. // J. Dairy Sei. 2007. V.90. №6. P. 2997-3001.

77. Beier, D. Identification of different BLV provirus isolates by PCR, RFLPA and DNA sequencing / D. Beier, P. Blankenstein, O. Marquardt, J. Kuzmak // Berl. Munch Tierarztl Wochenschr. 2001 Jul-Aug; 114 (7-8):252-6.

78. Brujeni, G.N. Bovine immunodeficiency virus and bovine leukemia virus and their mixed infection in Iranian Holstein cattle / G.N. Brujeni, T.T. Poorbazargani,S.Nadin-Davis et al. // J.Infect.Dev.Ctries. 2010. V.4. №4(9). P576-579.

79. Brown, J.H. A hypothetical model of the foreign antigen binding site of class II histocompatibility molecules / J.H. Brown, T. Jardetzry, M Saper // Nature. 1998. -P. 845.

80. Boris Lawrie, K. In vivo study of genetically simplified bovine leukemia virus derivatives that lack tax and rex/ K. Boris-Lawrie, V. Altanerova, C. Altaner, L. Kucerova, H.M. Temin// J.Virol. 1997. V.71. P. 1514-1520.

81. Burke, M.G. Nucleotide sequence and northern analysis of a bovine major histocompatibility class II DR beta-like cDNA / M.G. Burke, R.T. Stone, N.E. Muggli Cockett // Anim. Genet. - 1991. - № 22 (4). P. 343-352.

82. Da, Y. Milk and fat yields decline in bovine leukemia virus-infected dairy cattle with persistent lymphocytosis / Y. Da, R.D. Shanks, J.A. Stewart, H.A. Lewin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - № 94. - P. 6538-6541.

83. Derse, D. Nucleotide sequence and structure of integrated bovine leukemia virus long terminal repeats/ D. Derse, A.J. Diniak, J.W. Casey, P.L.Deininger // Virology. 1985. V. 141. P. 162-166.

84. Deren, W. The eradication of enzootic bovine leucosis in a large farm population / W. Deren, A. Szewczyk-Sadowska, J. Rulka // Pol J Vet Sci. 2003. -№ 6. - P. 12-14.

85. Djilali, S. Development of leukemia and lymphosarcoma induced by bovine leukemia virus in sheep: a hematopathological study/ S. Djilali, A.L. Parodi, D.Levy, G.L. Cockerel 1 // Leukemia. 1987. V.l. P.777-781.

86. Djilali, S. The BLV-induced leukemia lymphosarcoma complex in sheep / S. Djilali, A.L. Parodi// Vet.Immunol.Immunopathol. 1989. V.22. P.233-244.

87. Dietz, A.B. Bovine lymphocyte antigen Class II Alleles as risk factors for high somatic cell counts in milk of lactating dairy cows / A.B. Dietz, N.D. Conen // J Dairy Sci. -1997. № 80. - P. 406 - 412.

88. Dodol, G.J. Serological analysis for linked BoLA loci / G.J. Dodol, D. Bernoco, C.Stormont // Anim. Blood Grps. and Biochem. Genet. 1980. №11(1). P.28-29.

89. Dus Santo, M.J. Development of a PCR to diagnose BLV genome in frozen semen samples/ M.J. Dus Santo, K. Trono, I. Lager, A. Wigdorovitz // Vet.Microbiol. 2007. V.17. №119(1). P.10-18.

90. Dube, S. The complete genomic sequence of an in vivo low replicating BLV strain / S. Dube, L. Abbott, D.K. Dube, G. Dolcini, S. Gutierrez, C. Ceriani, M. Juliarena, J. Ferrer, R. Perzova, B.J. Poiesz // Virol.J. 2009. V.3. №6. P. 120.

91. Dube, S. The complete genomic sequence of a BLV strain from a Holstein cow from Argentina / S. Dube, L. Abbott, S. Mehta, D. Dube, S. Gutierrez,

92. C. Ceriani, E.Esteban, J.Ferrer, B. Poiesz // Virology. 2000. V.277. P.379-386.

93. Fechner, H. Provirus variants of the bovine leukemia virus and their relation to the serological status of naturally infected cattle/ H. Fechner, P. Blankenstein, A.C. Looman, J. Elwert, L. Geue, C. Albrecht, A. Kurg, D. Beier, O. Marquardt,

94. D.Ebner//Virology. 1997. V.237. P.261-269.

95. Fries, R. The bovine genome map / R. Fries, A. Eggen, J.E.Womack // Mamm. Genome. -1993.-№ 4.-P. 405-428

96. Gilliespie, B.E. Analysis and frequency of bovine lymphocyte antigen DRB3.2 alleles in Jersey cows. / B.E. Gilliespie, B.M. Jayarao, H.H. Dowlen & S.P. Oliver//J. Dairy Sci. 1999. V.82. P.2049-2053.

97. Giovambattista, G. Gene frequencies of DRB3.2 locus of Argentine Creole cattle / G. Giovambattista, C.D. Golijow, F.N. Dulout, M.M. Lojo // Anim.Genet. 1996. V.27. №1. P.55-56.

98. Gelhaus, A. Sequence and PCR-RFLP analysis of 14 novel BoLA-DRB3 alleles / A. Gelhaus, L. Schnittger, D.Mehlitz, R.D. Horstmann, C.G. Meyer// Anim. Genet. 1995. - № 26(3). - P. 147-153.

99. Groenen, M.A. The nucleotide sequence of bovine MHC class II DQB and DRB genes / M.A. Groenen et al.// Immunogenetics. 1990. -№ 31. - P. 37.

100. Casas, E. Detection of quantitative trait loci for growth and carcass composition in cattle. / E Casas, S. D. Shackelford, J. W Keele, M. Koohmaraie, T. P. Smith, R. T. Stone//J. Anim. Sci. 2003. -№ 81. - P. 2976-2983.

101. Carli, K.T. Detection of IgG antibody to bovine leukemia virus in urine and serum by two enzyme immunoassays / K.T. Carli, A. Sen, H.Batmaz, E. Kennerman // Lett. Appl. Microbiol. 1999.- Vol.28, N.6.- P.416-418.

102. Carli, K.T. Comparison of Serum, Milk and Urine as Samples in an Enzyme-Immunoassay for Bovine Leukemia Virus Infection / K.T.Carli, H.Batmaz, A.Sen, A. Minbay // Res.Vet.Sci.- 1993.- Vol.55.-№ 3.- P.394-395.

103. Creighton, P. Mapping of bovine markers CYP21, PRL, and BoLA DRBP1 by genetic linkage analysis in reference pedigrees / P. Creighton, A. Eggen, R. Fries, SA. Jordan, J. Hetzel, EP. Cunningham, P. Humphries // Genomics. 1992. - № 14. -P. 526-528.

104. Juliarena, M.A. Antibody response against three widespread bovine viruses is not impaired in Holstein cattle carrying bovine leukocyte antigen DRB3.2 alleles associated with bovine leukemia virus resistance / M.A. Juliarena, M. Poli,

105. C. Ceriani, L. Sala, E. Rodriguez, S. Gutierrez. G. Dolcini, A. Odeon, E.N. Esteban J.Dairy //Sci. 2009. V.92. №1. P.375-381.

106. Jimba, M. BLV-CoCoMo-qPCR: Quantitation of bovine leukemia virus proviral load using the CoCoMo algorithm / M. Jimba, S.N. Takeshima, K. Matoba,

107. D. Endoh Y. Aida// Retrovirology. 2010. V.2. №7. P.91.

108. Haghparast, A. Selection of T-cell epitopes from foot-and-mouth disease virus reflects the binding affinity to different cattle MHC class II molecules. /A. Haghparast, M.H. Wauben, M.C. Grosfeld-Stulemeyer, P. van Kooten,

109. E.J. Hensen // Immunogenetics. 2000. V. 51 (8-9). P.733-742.

110. Horin, P. BoLA DYA polymorphism in Czech cattle / P. Horin, J. Matiasovic// Exp. Clin Immunogenet. 1998. -15 (1). - P. 56 - 60

111. Kabeya, H. Host immune responses in the course of bovine leukemia virus infection / H. Kabeya, K. Ohashi, M.Onuma // J Vet Med Sei. -2001.- Jul.-№ 63(7). P. 703-708

112. Kobayashi, S. Risk factors associated with within-herd transmission of bovine leukemia virus on dairy farms in Japan / S. Kobayashi, T.Tsutsui, T.Yamamoto.et al //BMC.Vet.Res. 2010. V6. P.6.

113. Kale, M. Effects of subclinical bovine leukemia virus infection on some production parameters in a dairy farm in southern Turkey/ M. Kale, O. Bulut,

114. Yapkic, M.S. Gulay, F. Pehlivanoglu, A. Ata, S. Yavru //J.S.Afr.Vet.Assoc. 2007. V.78. №3. P.130-132.

115. Knapen, K. Epidemiological evaluation of a monoclonal ELISA detecting antibodies against bovine leukaemia virus in serum pools / K. Knapen, P. Kerkhofs, E. Thiry, M.Mammerickx / Epidemiol.Infect. 1994. V.l 13. №3. P.563-569.

116. Kobayashi, S. Risk factors associated with within-herd transmission of bovine leukemia virus on dairy farms in Japan / S Kobayashi, T. Tsutsui, T.Yamamoto, et al. //BMC.Vet.Res. 2010. V6. P.6.

117. Kohara, J. Experimental transmission of Bovine leukemia virus in cattle via rectal palpation / J. Kohara, S. Konnai, M. Onuma// Jpn. J Vet Res.- 2006.- May. -№ 54(1 ).P. 25-30

118. Kulberg, S. Study on the association of BoLA-DRB3.2 alleles with clinical mastitis in Norwegian Red cows / S. Kulberg, B.Heringstad, O.A. Guttersrud,

119. Olsaker// J Anim Breed Genet.- 2007. Aug; 124(4). - P.201-207

120. Levin, H.A. Association between BoLA and subclinical in bovine leukemia virus infection in a herd of Holstein Friesian cows / H.A. Levin, M.C. Wu, J.A. Steward // Immunogenetics. - 1988. -27(5). - P. 338 - 344

121. Lewin, H.A. Close linkage between bovine prolactin and BoLA-DRB3 genes: Genetic mapping in cattle by single sperm typing. / H.A. Lewin, K. Schmitt, R. Hubert et al. // Genomies. 1992. №12. P.44-48.

122. Licursi, M. Provirus variants of bovine leukemia virus in naturally infected cattle from Argentina and Japan / M. Licursi, Y. Inoshima, D.Wu, T. Yokoyama, E.T., Gonzalez, H. Sentsui // Vet.Microbiol. -2003. V-.96. P. 17-23.

123. Lim, S.I. Agar gel immunodiffusion analysis using baculovirus-expressed recombinant bovine leukemia virus envelope glycoprotein (gp51/gp30T-) / S.I. Lim, W.Jeong, D.S. Tark, D.K.Yang, C.H. Kweon // J.Vet.Sci. 2009. V. 10(4). P.331-336.

124. Limanskaia, O. Distribution of potentially hairpin-loop structures in the genome of bovine retroviruses/ O. Limanskaia, A.P. Limanskii // Vopr.Virusol. 2009. V.54. №4. P.27-32.

125. Lymans'ka, O. Polypurine/polypyrimidine sequences with potential of forming triplexes in the proviral DNA of bovine retroviruses / O. Lymans'ka //Tsitol.Genet. 2010. V.44. №1. P. 10-18.

126. Maillard, J.C. Characterization of 18 new BoLA-DRB3 alleles / J.C. Maillard,

127. C. Renard, P Chardon., I.Chantal, A. Bensaid // Anim. Genet. 1999. -№ 30(3). -P.200-203.

128. Mammerickx, M. Experimental cross-transmissions of bovine leukemia virus (BLV) between several animal species/ M. Mammerickx, D. Portetelle, A. Burny //Zentralbl.Veterinarmed. 1981. V.28. P.69-81.

129. Mammerickx, M. Experimental transmission of enzootic bovine leukosis to sheep: latency period of the tumoral disease/ M. Mammerickx, R. Palm,

130. D. Portetelle, A. Burny//Leukemia. 1988. V.2. P.103-107.

131. Matsumura, K. Molecular epidemiology of bovine leukemia virus associated with enzootic bovine leukosis in Japan/ K. Matsumura, E. Inoue, Y. Osawa, K.Okazaki// Virus Research Volume 155, Issue 1, January 2011, P. 343-348.

132. Meas, S. Vertical transmission of bovine leukemia virus and bovine immunodeficiency virus in dairy cattle herds / S. Meas, T. Usui, K. Ohashi, et al // Vet.Microbiol. 2002. V.84. P.275-282.

133. Mikko, S. Extensive MHC class II DRB3 diversity in African and European cattle / S.Mikko, L.Andersson // Immunogenetics. 1995. - № 42 (5). - P. 408-413.

134. Miller, J.M. Virus like particles in phytohemagglutinin - stimulated lymphocyte cultures with referent to bovine lymphosarcoma / J.M. Miller, L.D. Miller, C. Olson, K.G. Gillette // J. Natl. Cancer Inst. - 1969. - № 43. -P. 1297- 1305.

135. Miltiadou, D. Establishment of a sequence-based typing system for BoLA-DRB3 exon 2 / D. Miltiadou, A.S. Law, G.C.Russell // Tissue Antigens. -2003. Jul.-№ 62.- P. 55-65.

136. Miretti, M.M. Restriction fragment length polymorphism (RLFP) in exon 2 of the BoLA DRB 3 gene in South American cattle / M.M.Miretti, J.A Ferro// Biochem Genet. 2001. -№ 39. - P. 311- 324.

137. Mirsky, M.L. Reduced bovine leukaemia virus proviral load in genetically resistant cattle / M.L. Mirsky, H.A. Lewin // Anim. Genet. 1998. - 29. -P. 145-252.

138. Monti, G.E. Evaluation of natural transmission of bovine leukaemia virus within dairy herds of Argentina/ G.E. Monti, K. Frankena, M.C. De Jong // Epidemiology and Infection. 2007. V.135. P.228-237.

139. Murakami, K. The recent prevalence of bovine leukemia virus (BLV) infection among Japanese cattle / K. Murakami, S. Kobayashi, M. Konishi, et al. //Vet.Microbiol. 2011. V.24. №148 (1). P.84-88.

140. Norimine, J. Quantitation of Anaplasma marginale major surface protein (MSP) and MSP2 epitope-specific CD4+ T lymphocytes using bovine DRB3*1101and DRB3*1201 tetramers / J. Norimine, S. Han, W.C. Brown // Immunogenetics. 2006. V.58. №9. P.726-739.

141. Onuma, M. Suppression of immunological responses in rabbits experimentally infected with bovine leukemia virus / M. Onuma, M. Wada, Y. Yasutomi, M. Yamamoto, H.M. Okada, Y Kawakami // Vet.Microbiol. 1990. V.25. P.131-141.

142. Olson, C. Goat lymphosarcoma from bovina leukemia virus / C. Olson, R.Kettmann, A. Burny, R. Kaja// J. Nuit Gmcer. Inst. 1981. - v. 67.- P. 671-675.

143. Oshima, K. Evidence on Horisontal Transmission of Bovine Leukemia Virus due to Bloodsucking Tabanid flies / K.Oshima, et al. // Jap.J. Vet.Sci. -1981. -v. 43. P.70-80.

144. Pashmi, M. PCR based RFLP genotyping of bovine lymphocyte antigen DRB3.2 in Iranian Holstein population / M. Pashmi, S. Qanbari, S.A.Ghorashi and A. Salehi // Pak. J. Biol. Sci. 2007. V. 10. № 3. P. 383-387.

145. Petropoulos, C.J. Appendix 2: Retroviral taxonomy, protein structure, sequences, and genetic maps (In) Coffin, J.M. (Ed.); Retroviruses // Cold Spring Harbor, New York, NY, USA, Cold Spring Harbor Laboratory Press. 1997. P.757.

146. Ripoli, M.V. New polymorphisms for the BoLA-DRB3 upstream regulatory region / M.V. Ripoli, E.E.Villegas-Castagnasso, P. Peral-Garcia, G. Giovambattista //Tissue Antigens. 2005. - № 66 (2). - P. 136 - 137.

147. Ripoli, M.V. Gene frequency distribution of the BoLA-DRB3 locus in saavedreno Creole dairy cattle/ M.V. Ripoli, J.P. Liron, J.C. De Luca, F. Rojas, F.N.Dulout // Biochemical genetics. 2004. V.42. №7-8. P.231-240.

148. Rola, M. The detection of bovine leukemia virus proviral DNA by PCR-ELISA / M. Rola, J. Kuzmak // J.Virol.Methods. 2002. V.99. P.33-40.

149. Rupp, R. Association of bovine leukocyte antigen (BoLA) DRB3.2 with immune response, mastitis, and production and type traits in Canadian Holsteins / R. Rupp, A. Hernandez, B.A. Mallard // J.Dairy.Sci. 2007. V.90. №2. P.1029-1038.

150. Rumyantsev, S. N. Observations on constitutional resistance to infection / S. N. Rumyantsev// Immunology Today. 1992. - № 13. - P. 184 - 187.

151. Sagata, N. Complete nucleotide sequence of the genome of bovine leukemia virus: its evolutionary relationship to other retroviruses/ N. Sagata, T. Yasunaga, J. Tsuzuku Kawamura, et al. // Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. -1985. -V.82. - №3. P.677-681.

152. Sitte, K. Identification and characterization of new BoLA-DRB3 alleles by heteroduplex analysis and direct sequencing / K. Sitte, I.J. East, M.F. Lavin, E.C. Jazwinska// Anim. Genet.-1995. -№ 26(6). P. 413-417.

153. Sharif, S. Presence of glutamine at position 74 of pocket 4 in the BoLA DR antigen binding groove with occurrence of clinical mastitis caused by Staphylococcus species / S. Sharif, B.A. Mallard // Immunogenetics.- 2000. - № 51. - P. 733 - 742.

154. Spooner, R. Evidence for a possible major histocompatibility complex (BoLA) in cattle / R. Spooner, H. Leveziel, F. Grosclaude et.al. // Immunogenetics. 1978. №5.P.335-346.

155. Straub, O.C. Horisontal Transmission studies on enzootic bovine leucosis / O.C. Straub// Ann. Rech. vet. 1978.- V.9. - № 4- P. 809-813.

156. Suh, G. H. Establishment of a bovine leukemia virus-free dairy herd in Korea / G. H. Suh, J.C. Lee, C.Y. Lee // J Vet Sci.- 2005. Sep. - № 6(3).- P. 227-230.

157. Tajima, S. Induction of expression of bovine leukemia virus (BLV) in blood taken from BLV-infected cows without removal of plasma / S. Tajima, Y. Aida// Microbes Infect.- 2005.- Aug-Sep.- № 7.- P. 1211-1216.

158. Van Eijk, M.J.T. Extensive polymorphism of the BoLA DRB 3 gene distinguished PCR-RFLP / M.J.T. Van Eijk, J.A. Stewart-Haynes, H.A. Lewin // Anim. Genet. 1992. V.-23. - P.483 - 496

159. Wyatt, C.R. Persistent infection of rabbits with bovine leukemia virus associated with development of immune dysfunction/ C.R. Wyatt, D. Wingett, J.C. White, C.D. Buck, D.Knowles, R. Reeves, N.S. Magnuson // J.Virol. 1989. V.63. P.4498-4506.

160. Xu, A. Polymorphism in BoLA DRB3 Exon 2 correlates with resistance to persistent lymphocytosis caused by bovine leukemia virus / A. Xu, V.J. T. Van Eijk, Ch.Park // J. of Immunology. - 1993. -V. 151. -№ 12. - P. 6977 - 6985

161. Zhao, T.M. Quantification of HTLV-I proviral load in experimentally infected rabbits/ T.M. Zhao, B. Hague, D.L. Caudell, R.M. Simpson, T.J. Kindt //Retrovirology. 2005. V.2. P.34.

162. Zanotti, M. Association of BoLA Class II Haplotypes with Subclinical Progression of Bovine Leukemia Virus Infection in Holstein-Friesian Cattle /M. Zanotti, G. Poli, W. Ponti et al. // Animal Genetics. 1996. V.27. P.337-341.

163. Zanotti, M. Association of BoLA class II haplotypes with subclinical progression of bovine leukaemia virus infection in Holstein Friesian cattle / M. Zanotti et al. // Anim. Genet. -1996. - 27. - P.337 - 341

Информация о работе

Якушева, Людмила Ивановна
кандидата биологических наук
Краснодар, 2012
ВАК 06.02.07

Диссертация

Совершенствование генетической структуры стада крупного рогатого скота по локусу BoLA DRB 3 как фактор оздоровления от лейкоза - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Совершенствование генетической структуры стада крупного рогатого скота по локусу BoLA DRB 3 как фактор оздоровления от лейкоза - тема автореферата по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы