Полиморфизм гена BoLA-DRB3 в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород в условиях Республики Башкортостан

Шарифуллина, Наиля Мусагитовна

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Полиморфизм гена BoLA-DRB3 в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород в условиях Республики Башкортостан
ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Полиморфизм гена BoLA-DRB3 в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород в условиях Республики Башкортостан"

На правах рукописи

ШАРИФУЛЛИНА НАИЛЯ МУСАГИТОВНА

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ВОЬА-ОЯВЗ В СВЯЗИ С УСТОЙЧИВОСТЬЮ И ВОСПРИИМЧИВОСТЬЮ К ЛЕЙКОЗУ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ЧЕРНО-ПЕСТРОЙ И СИММЕНТАЛЬСКОЙ ПОРОД В УСЛОВИЯХ РЕСПУБЛИКИ БАШКОРТОСТАН

06.02.01 - разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Щ-'Ч

На правах рукописи /

ШАРИФУЛЛИНА НАИЛЯ МУСАГИТОВНА

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ВОЬА-Б1ШЗ В СВЯЗИ С УСТОЙЧИВОСТЬЮ И ВОСПРИИМЧИВОСТЬЮ К ЛЕЙКОЗУ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ЧЕРНО-ПЕСТРОЙ И СИММЕНТАЛЬСКОЙ ПОРОД В УСЛОВИЯХ РЕСПУБЛИКИ БАШКОРТОСТАН

06.02.01 - разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Работа выполнена на кафедре разведения сельскохозяйственных животных и в лаборатории молекулярной генетики при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Научный руководитель -

Заслуженный деятель науки РБ, доктор сельскохозяйственных наук, профессор Ахатова Ираида Абубакировна

Официальные оппоненты:

доктор сельскохозяйственных наук Саитбаталов Тагир Файзрахманович кандидат сельскохозяйственных наук Гизатуллин Ринат Сахиевич

Ведущая организация - ГНУ «Башкирский научно-исследовательский

институт сельского хозяйства»

Зашита диссертации состоится «4» марта 2005 г. в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.03 при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» по адресу: 450001, г.Уфа, ул. 50 лет Октября, 34.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Башкирского государственного аграрного университета

Автореферат разослан «_»_2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета _

доктор сельскохозяйственных наук, профессор!^®^ --Гиниятуллин М.Г.

- . .ь,.. .».1>м«ЫМ|1|

, ЬМММОТЖКА

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Многочисленные публикации и данные официальной ветеринарной статистики свидетельствуют о том, что среди инфекционных болезней крупного рогатого скота лейкоз по тяжести поражения органов, тканей, массовости проявления и экономическим последствиям занимает ведущее место. Заболевание наносит значительный экономический ущерб животноводству страны вследствие гибели и вынужденной выбраковки высокопродуктивных племенных животных, утилизации туш и органов с опухолевыми изменениями, расходов, связанных с ограничительными мероприятиями. Заболеваемость крупного рогатого скота лейкозом - одна из наиболее важных проблем не только ветеринарной медицины, животноводства, но и биологии, экологии в целом, имеющая непосредственное отношение к безопасности здоровья человека, так как вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) имеет близкое морфологическое и эволюционное родство с вирусом Т-клеточного лейкоза человека. В связи с этим актуальным является проблема диагностики лейкоза на ранних стадиях заболевания. С помощью применяемых в настоящее время серологических методов диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота полностью искоренить заболевание невозможно. Поэтому особую значимость для точной диагностики вируса представляют методы молекулярной биологии, в частности, полимеразная цепная реакция (ГТЦР), которая зарекомендовала себя как надежный, специфичный, достоверный и чувствительный тест для раннего выявления инфицированных ВЛКРС животных.

Для борьбы с лейкозом крупного рогатого скота разрабатываются селекционно-генетические методы с целью получения здорового, резистентного потомства. Работы многих ученых посвящены изучению механизмов генетической устойчивости животных к лейкозу (В.М. Нахмансон, 1973, 1986, 1997; Л.К.Эрнст и соавт., 1979; О.К.Гаврилов, В.П.Шишков, 1983; А.Г.Незавитин, 1992, 1995 и др.). Многие годы основу селекции сельскохозяйственных животных составляла, и продолжает оставаться актуальной, оценка генотипов животных по частоте заболеваемости особей, связанных родством и инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота. В последние годы, в связи с бурным развитием молекулярной генетики, особое значение приобретает ПЦР-метод для раннего отбора по устойчивости и восприимчивости к лейкозу и изучения главного комплекса гистосовместимости, участвующего в регуляции иммунного ответа организма, в частности, в осуществлении клеточного взаимодействия при трансплантации органов и тканей, а также связанного с развитием многих заболеваний, в первую очередь аутоиммунных, онкологических, инфекционных (А.Р.Спепченко, 1994; И.Г.Удина, 1994, 2001, 2003; Г.Е.Сулимова, 1995, 1996; С.П.Павленко и соавт., 1996; Л.К.Эрнст и соавт., 1997).

Целью работы явилось изучение полиморфизма гена класса И главного комплекса гистосовместимости крупного рогатого скота (ВоЬА-ОЯВЗ) в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу крупного рогатого скота

черно-пестрой и симментальской пород в условиях Республики Башкортостан. Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

• сформировать банк ДНК изучаемых популяций крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород;

• исследовать ДНК-полиморфизм гена ВоЬА-ЭЯВЗ у крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород с различным уровнем инфицированное™ вирусом лейкоза крупного рогатого скота;

• провести анализ распределения частот аллелей и генотипов в группах вирусоносителей и здоровых животных;

• оценить генетическую структуру изучаемых популяций по восприимчивости и устойчивости к лейкозу;

• разработать научно обоснованные рекомендации по ранней оценке уровня устойчивости и восприимчивости ремонтного молодняка крупного рогатого скота к лейкозу и повышению генетической детерминированности устойчивости племенных стад к заболеванию;

• определить экономическую эффективность анализа ДНК -полиморфизма при профилактике лейкоза крупного рогатого скота.

Научная новизна. Впервые в условиях Республики Башкортостан с использованием современных молекулярно-генетических методов изучен ДНК-полиморфизма гена класса II главного комплекса гистосовместимости (ВоЬА-ОЯВЗ) у племенного крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород. Создан банк ДНК объемом 300 проб как база для дальнейших исследований в области популяционной генетики. Проанализирована генетическая структура стад трех племенных хозяйств с установлением в них доли животных, несущих устойчивые и чувствительные к лейкозу генотипы. Подтверждена роль уровня гетерозиготности как неспецифического фактора устойчивости к лейкозу. Предложена и обоснована экономическая эффективность повышения уровня генетической детерминированности устойчивости стад к лейкозу на основе раннего отбора племенного молодняка при помощи ПЦР - тестирования на восприимчивость к заболеванию.

Теоретическая и практическая значимость работы. На основе изучения полиморфизма гена ВоЬА ОЯВЗ крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород, генетической структуры популяций, частоты аллелей, ответственных за устойчивость и чувствительность к лейкозу, подтверждена генетическая детерминированность предрасположенности к заболеванию и предложен метод отбора молодняка на основе ПЦР -тестирования на первом месяце жизни. Ранний отбор и использование для ремонта стад устойчивого к заболеванию молодняка одновременно обеспечивает сокращение непроизводительных затрат по выращиванию на племенные цели особей с высоким риском развития лейкоза и повышение уровня резистентности за счет наследственного закрепления признака.

«Проблемы и пути интенсификации племенной работы в отраслях животноводства» (г. Уфа, 2004); на республиканских научно-практических конференциях молодых ученых и аспирантов (г. Уфа, 2003, 2004); на 110-ой научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов университета «Достижения аграрной науки - производству» (г. Уфа, 2004).

Публикация результатов исследований. Основные результаты исследований опубликованы в 6 научных статьях.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, предложений производству, библиографического списка. Она изложена на 120 страницах компьютерного текста, включает 10 таблиц, 13 рисунков. Библиографический список включает 226 наименований, в том числе 90 -иностранных авторов.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Генетический полиморфизм гена BoLA - DRB3 у здоровых и инфицированных вирусом лейкоза племенных животных черно-пестрой и симментальской пород.

2. Ассоциативная связь выявленных ранее молекулярно-генетических маркеров предрасположенности и устойчивости с заболеваемостью лейкозом крупного рогатого скота.

3. Породные особенности аллелофонда по уровню распространения аллелей, ответственных за устойчивость и чувствительность к лейкозу.

4. Гетерозиготность как неспецифический фактор устойчивости к лейкозу.

5. Раннее прогнозирование восприимчивости к лейкозу методом типирования аллелей и генотипов и его использование для повышения резистентности племенного поголовья к заболеванию.

Исследования проводились в рамках ГНТП РБ по программе №11 «Научное обеспечение устойчивого развития агропромышленного комплекса РБ, утвержденной Постановлением Кабинета Министров РБ К? 285 от 26 сентября 2002 г.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материал и методы исследований

Работа выполнялась в 2002-2004 г.г. на базе кафедры разведения сельскохозяйственных животных и лаборатории молекулярной генетики при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет».

Общая схема исследований приведена на рисунке 1.

Объектами исследования явились 100 коров черно-пестрой породы и 100 симментальской породы, принадлежавшие ФГУП СПО «Стерлитамакский совхоз-техникум», 100 коров черно-пестрой породы из ККХ «Заря» Стерлитамакского района Республики Башкортостан. На

основе серологического исследования (РИД в геле агара) гюпуляции черно; пестрого и симментальского скота подразделили на две группы: здоровые и вирусоносители.

Кровь для исследований брали по общепринятой методике. В качестве антикоагулянта применяли стерильный раствор «Глюгицир» в соотношении препарата и крови 1:4. ДНК выделяли из лейкоцитов крови по стандартной методике с использованием протеиназы К, фенол-хлороформенной очистки с последующим осаждением этанолом (В.Н.Горбунова, 1999).

Реактивы для полимеразной цепной реакции и рестрикционного анализа были получены из фирмы «СибЭнзим», г. Новосибирск. Олигонуклеотидные праймеры HL030 и HL032 были синтезированы в ЗАО «Синтол», г. Москва. Полимеразную цепную реакцию проводили в амплификаторе ТП4-ПЦР-01-«Терцик» (Россия) по методике Г.Е.Сулимовой (2002) в один этап в следующем режиме: денатурация - 0,8 мин при 94°С, отжиг - 0,8 мин при 68"С, синтез - 0,8 мин при 72"С, всего 30 циклов.

Смесь для ПЦР содержала по 1 мкл препарата ДНК, по 1 мкл каждого праймера (HL030 и HL032), 2,5 мкл 10х буфера для амплификации, 18,5 мкл дистиллированной воды, 1 мкл суммарного dNTP и 1 мкл Taq-полимерэзы под слоем вазелинового масла.

Рестрикционный анализ амплифицированных ДНК проводили эндонукдеазами Rsa I,Hae III и Xho И. Для рестрикции отбирали 8,5 мкл амплификата, добавляли 2,5 мкл смеси одной из эндонуклеаз с буфером. Реакционную смесь инкубировали при 37°С в течение 16 часов.

В качестве маркера молекулярных масс использовали ДНК плазмид pUC19 или pBR322, обработанных рестрикгазой Mspl.

Продукты рестрикции разделяли электрофоретически в 7,5% полиакриламидном геле и тестировали в ультрафиолетовом свете после прокрашивания бромистым этидием. Присутствие того или иного аллеля гена DRB 3 определяли по наличию или отсутствию сайтов рестрикции (Г.Е. Сулимова и соавт., 2002; M.J.T.Van Eijk et. al., 1992).

Изображения гелей фиксировали с помощью видеосистемы «DNA Analyzer» и прилагаемого к ней программного обеспечения «Gel-lmager» и «Gel-Analysis» в версии 1.0. Частоту аллелей и генотипов определяли по формуле Меркурьевой Е.К. (1977).

Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием программного обеспечения MS Excel 2000 (Microsoft) и компьютерной программы RxC (Rows х Columns) (Roff, Bentzen, 1989).

При попарном сравнении частот генотипов и аллелей в группах вирусоносителей и здоровых животных использовали критерий х2(Р) для таблиц сопряженности 2x2 с поправкой Йетса на непрерывность.

Сила ассоциаций с риском развития лейкоза для конкретных аллелей и генотипов оценивали в значениях показателя соотношения шансов (odds ratio, OR) (Bland, 2000). При OR > 1 ассоциацию заболевания с аллелем или генотипом рассматривали как положительную («фактор риска») и OR < 1 -как отрицательную ассоциацию («фактор устойчивости»).

Рисунок 1 Схема проведения исследований

2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1 Распределение частот аллелей гена ВоЬА-ОИ.ВЗ в исследуемых популяциях крупного рогатого скота черно-пестрой породы

Результаты распределения частот аллелей гена ВоЬА-ОКВЗ в популяции черно-пестрого скота из ФГУП СПО «Стерлитамакский совхоз-техникум» представлены в таблице 1.

В исследованной нами популяции крупного рогатого скота черно-пестрой породы, принадлежавшей ФГУП СПО «Стерлитамакский совхоз-техникум», выявлено 17 аллельных вариантов. Выявленные аллельные варианты составили среди 100 обследованных животных 17 генотипов. Не были обнаружены аллели: ОЯВ3.2«1, *2, *5, *9, *10, »12, »13, »14, »17, * 19, *20, *21, *29, "30.

В подвыборке вирусоносителей, в которой количество животных составило 50 голов, достаточно частыми являются аллели: *16 (0,1), *18 (0,072), *22 (0,163), »24 (0,182), три из которых - *16, *22, *24 - определяют чувствительность к развитию лейкоза у крупного рогатого скота. Частота остальных 11 аллелей не превышает 0,06.

В подвыборке из здоровых животных, количество которых составило 45 животных, выявлено 16 аллельных вариантов. Данная группа животных характеризуется относительно равномерным распределением частот аллелей. Наиболее часто встречаются: *] 1 с частотой 0,08, *22 - 0,111, *23 -0,155, »24- 0,133, »28-0,111.

В результате Исследования популяции крупного рогатого скота черно-пестрой породы, принадлежавшего ККХ «Заря», выявлено 19 аллельных вариантов гена ВоЬА-ОЯВЗ. Данные аллельные типы составили 18 генотипов среди 100 обследованных животных. Характер распределения аллелей гена ОЯВ3.2 и их частот в данной популяции крупного рогатого скота представлен в таблице 2.

В подвыборке животных-вирусоносителей, количество которых составило 46 голов, наиболее часто представлены следующие аллели: * 16 с частотой 0,130, *18 - 0,109, *22 - 0,174, *24 - 0,152, из которых *16, »22, ♦24 - ответственны за чувствительность к лейкозу крупного рогатого скота.

Среди животных, оставшихся здоровыми, преобладают аллели: *16 (0,093), »18 (0,148), *22 (0,083), »23 (0,130), »24 (0,074), *28 (0,111). Частота остальных аллелей не превышает 0,046.

Данные по распределению частот аллелей *8, *!6,*22,*24, *11, *23, *28 в изученных популяциях крупного рогатого скота черно-пестрой породы в группах вирусоносителей и здоровых животных показаны на рисунках 2 и 3.

аллеля

|И вирусоносетели О хюр^нке

Рисунок 2 Частоты аллелей, ответственных за чувствительность (*8, *16, *22, *24) и устойчивость (*11,*23, *28) к лейкозу в популяции черно-пестрого скота (ФГУП СПО «Стерлитамакский совхоз-техникум»)

I вирусоносигели □ здоровые I

Рисунок 3 Частоты аллелей, ответственных за чувствительность (*8, *16, *22, *24) и устойчивость (*11,*23, *28) к лейкозу в популяции черно-пестрого скота (ККХ «Заря»)

Таблица 1 Частоты аллелей гена ВоЬА-ОЯВЗ в популяции 1 крупного рогатого скота черно-пестрой породы

Группа животных

Аллели гена ВоЬА- вирусоносители общая

ЭЯВЗ здоровые(п=4Э) (п=55) популяция

(п= 100)

п частота п частота п частота

А ллел и, о пред еляю щ ие 1

чувствительность к I

лейкозу: 1 j

ОЯВ3.2*8 - - 7 0,06 7 0,035

ОЯВ3.2*16 6 0,066 11 0,1 17 0,085

ОЯВ3.2*22 10 0,111 18 0,163 28 0,14

ОЯВ3.2*24 12 0,133 20 0,182 32 0,16

Аллели,определяющие

устойчивость к I

лейкозу: 1 1

ОЯВ3.2*11 7 0,08 - - 7 0,035 !

ОЯВ3.2*23 14 0,155 8 0,072 22 0,11 1

ОЯВ3.2*28 10 0,111 4 0,036 14 0,07 !

Нейтральные аллели: 1

ОЯВ3.2*3 2 0,022 3 0,027 5 0,025

ОЯВ3.2*4 2 0,022 4 0,036 6 0,03

ОЯВ3.2*6 3 0,033 4 0,036 7 0,035

ОЯВ3.2*7 7 0,08 5 0,045 12 0,06

ОЯВ3.2*15 2 0,022 3 0,027 5 0,025

ОЯВ3.2*18 6 0,066 8 0,072 14 0,07

ОЯВ3.2*20 2 0,022 - - 2 0,01

ЭЯВ3.2*25 3 0,033 6 0,054 9 0,045

ОЯВ3.2*26 2 0,022 5 0,045 7 0,035

БЯВ3.2*27 2 0,022 4 0,036 6 0,03

Сумма 90 1,000 110 1,000 200 1,000

Примечания: Номенклатура аллелей дана в соответствии с данными M.J.T. Van Eijk (1992). Статус аллелей по отношению к лейкозу определяли по данным Г.Е.Сулимовой (1995).

Таблица 2 Частоты аллелей гена ВоЬА-ОЛВЗ в популяции 2 крупного рогатого скота черно-пестрой породы

Группа животных

Аллели гена ВоЬА-ОЯВЗ здоровые(п=54) вирусоносители (п=46) общая популяция (п=100)

п частота п частота п частота

Алл ели,определяющие чувствительность к лейкозу: ОЯВ3.2*8 ОЯВ3.2*16 ОЯВ3.2*22 ОЯВ3.2*24 2 10 9 8 0,019 0,093 0,083 0,074 8 12 16 14 0,087 0,130 0,174 0,152 10 22 25 22 0,05 0,11 0,125 0,11

Аллели,определяющие устойчивость к лейкозу: 01153.2*11 ОЯВ3.2*23 ОЯВ3.2*28 5 14 13 0,046 0,130 0,120 4 6 0,057 0,028 5 18 19 0,025 0,09 0,095

Нейтральные аллели: ОЯВ3.2*2 Бавз.2*з ЭЯВ3.2*4 ЭЯВ3.2*6 ОЯВ3.2*7 ОЯВ3.2*12 ОЛВ3.2*15 ОЯВ3.2*18 ЭЯВ3.2*20 ОЯВ3.2*21 ЭЯВ3.2*25 2 4 2 3 5 2 3 16 5 2 3 0,019 0,037 0,019 0,027 0,046 0,019 0,027 0,148 0,046 0,019 0,027 3 2 4 3 -1 ' 2 10 2 1 4 0,033 0,022 0,043 0,033 0,011 0,022 0,109 0,022 0,011 0,043 2 7 4 7 8 3 5 26 7 3 7 0,01 0,035 0,02 0,035 0,04 0,015 0,025 0,13 0,035 0,015 0,035

Сумма _ _.„ — ........ 108 1,000 92 1,000 200 1,000

2.2.2 Распределение частот аллелей гена ВоЬА-ОЯВЗ в популяции крупного рогатого скота симментальской породы

В изученной популяции крупного рогатого скота симментальской породы выявлено 18 аллелей гена ВоЬА-БЯВЗ, которые составили 23 вида генотипа в выборке из 100 животных. Частоты аллелей в группах вирусоносителей и здоровых животных представлены в таблице 3.

В целом по популяции можно отметить, что спектр аллелей гена ВоЬА-ОЯВЗ, изученный на черно-пестрой породе, подтвердился и для симментальской породы крупного рогатого скота.

Среди 50 вирусоносителей наиболее часто встречались аллели: *8, *16, *24, *25 с частотами 0,09, 0,1, 0,08, 0,1 соответственно, из которых первые три обуславливают чувствительность к развитию лейкоза.

Аллели, ответственные за устойчивость (*11, *23, *28), встречаются в подвыборке с частотами от 0,04 до 0,08.

В группе здоровых животных (50 голов) наибольшую частоту отмечали у аллелей *11 (0,12), *23 (0,14), *28 (0,1), которые ответственны за устойчивость крупного рогатого скота к лейкозу. Частоты аллелей, определяющих чувствительность к лейкозу, составили от 0,02 до 0,06.

В целом в популяции доля аллелей, обуславливающих устойчивость к лейкозу, составила 28,5%, аллелей, обуславливающих восприимчивость -25,5%.

Распределение частот аллелей *8, *16,*22,*24, *11, »23, *28 в изученной популяции крупного рогатого скота симментальской породы в группах здоровых животных и вирусоносителей показано на рисунке 4.

■8 44 «22 *!4 *11 *и *2»

■ кярусонооп-мн О цррорыг~

Рисунок 4 Частоты аллелей, ответственных за чувствительность (*8, ♦16, *22, *24) и устойчивость (*1 1,*23, *28) к лейкозу в популяции крупного рогатого скота симментальской породы

Таблица 3 Частоты аллелей гена ВоЬА-ВЯВЗ в популяции крупного рогатого скота симментальской породы

Группа животных

Аллели гена ВоЬА-ОЯВЗ здоровые(п=50) вирусоносители (п=50) общая популяция (п=100)

п частота п частота п частота

Аллели,определяющие

чувствительность к лейкозу:

ОЯВ3.2*8 2 0,02 9 0,09 11 0,055

ОЯВ3.2*16 5 0,05 10 0,1 15 0,075

ОЯВ3.2*22 6 0,06 7 0,07 13 0,065

ОЯВ3.2*24 4 0,04 8 0,08 12 0,06

Аллели,определяющие устойчивость к лейкозу: ОЛВ3.2*11 12 0,12 4 0,04 16 0,08

ОЯВ3.2*23 14 0,14 8 0,08 22 0,11

ОЯВ3.2*28 10 0,1 9 0,09 19 0,095

Нейтральные аллели:

ЭЯВ3.2*2 5 0,05 2 0,02 7 0,035

ОЯВ3.2*3 5 0,05 4 0,04 9 0,045

DR.B3.2M 4 0,04 2 0,02 6 0,03

ОЯВ3.2*6 2 0,02 2 0,02 4 0,04

ОЯВ3.2*14 1 0,01 2 0,02 3 0,015

ОЯВ3.2*15 2 0,02 4 0,04 6 0,03

ОЯВ3.2*18 5 0,05 6 0,06 11 0,055

ОЯВ3.2*20 4 0,04 6 0,06 10 0,05

БЯВ3.2*21 4 0,04 3 0,03 7 0,035

ОЯВ3.2*25 10 0,1 10 0,1 20 0,1

ЭЯВ3.2*27 5 0,05 4 0,04 9 0,045

Сумма 100 1,000 100 1,000 200 1,000

2.2.3 Изучение ассоциаций аллелей гена BoLA-DRB3 с риском развития лейкоза у крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород

Известно, что риск развития того или иного заболевания зависит от многих факторов, в том числе и от наличия в генотипе организма аллелей предрасположенности или резистентности. В случае для лейкоза крупного рогатого скота в системе BoLA аллелями, ассоциированными с предрасположенностью, являются: *8, *16, *22, *24 и ассоциированными с резистентностью к развитию лейкоза - *11, *23, *28. Для более достоверного определения силы ассоциаций аллелей гена с риском развития заболевания определяли показатель соотношения шансов (odds ratio, OR). При значениях OR > 1 ассоциацию аллеля с заболеваемостью считали положительной, при OR < 1 - отрицательной.

Наибольшие значения OR во всех изученных популяциях крупного рогатого скота отмечались для аллеля *8, ассоциированного с предрасположенностью к заболеванию лейкозом. Так, в популяциях черно-пестрого скота значения OR составили соответственно: 6,41 (С1=0,7-46,7; Р<0,01) и 5,47 (С1=0,98-39,6; Р<0,05), в популяции симментальского скота -5,26 (С1=0,97-37,6; Р<0,05), то есть при наличии данного аллеля в генотипе животного риск заболеваемости достоверно возрастает. Значения OR > 1 отмечались для всех аллелей, ответственных за восприимчивость к лейкозу в изученных популяциях: »16 - 1,62; 1,55; 2,25; *22 - 1,7; 2,66; 1,19; *24 -1,57; 2,51; 2,19. Полученные значения показателя соотношения шансов подтверждают ассоциацию этих аллелей с лейкозом в изучаемых породах.

Наименьшие значения соотношения шансов - OR выявлены для аллеля *11, являющегося аллелем устойчивости: 0,005, 0,005 и 0,27. Также значения OR < 1 отмечались для остальных аллелей, ответственных за устойчивость к заболеванию лейкозом - *23 (0,37, 0,27 и 0,49), *28 (0,27 0,47 и 0,87).

2.2.4 Распределение уровня гетерозиготности в изученных популяциях крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород

Показатели фактической гетерозиготности гена DRB3 в популяциях оказались достаточно высокими и составили: в популяции черно-пестрого '

скота из ФГУП СПО «Стерлитамакский совхоз-техникум» - 95%, в популяции черно-пестрого скота из ККХ «Заря» - 96%, в популяции симментальского скота - 96%, В таблице 4 приведены данные по определению фактического и теоретического уровней гетерозиготности в изученных популяциях крупного рогатого скота в группах вирусоносителей и здоровых животных.

Таблица 4 Показатели уровня гетерозиготности в популяциях черно-пестрой и симментальской пород

Гетерозиготность Популяция 1 Популяция 2 Популяция 3

здоровые вирусоно-сители здоровые виру (»носители i вирусоно- здоровые г сители

Фактическая 0,98±0,02 0,93±0,03 0,98±0,01 0,95±0,03 1,00 0,98±0,01

Теоретическая 0,92±0,01 0,91 ±0,01 0,92±0,01 0,91±0,01 0,92±0,01 0,96±0,01

Примечание: популяция 1 - черно-пестрый скот из ФГУП СПО «Стерлитамакский совхоз-техникум»; популяция 2 - черно-пестрый скот из ККХ «Заря»; популяция 3 - крупный рогатый скот симментальской породы.

Во всех трех популяциях, в группах инфицированных животных уровни гетерозиготности оказались ниже по сравнению со здоровыми животными. В симментальской породе отмечен самый высокий уровень фактической гетерозиготности в группе здоровых особей (100%), что, по сравнению с черно-пестрой, указывает на пониженный риск заболеваемости лейкозом. Во всех группах черно-пестрого скота фактический уровень гетерозиготности был несколько выше, чем теоретический, в симментальской породе аналогичные особенности наблюдали в группе вирусоносителей.

2.2.5 Результаты анализа ассоциаций генотипов с риском развития лейкоза в изученных популяциях крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород

В группе здоровых животных черно-пестрой породы из ФГУП СПО «Стерлитамакский совхоз-техникум», число которых составило 45, наблюдали следующее распределение частот генотипов. С высокой частотой встречаемости отметили генотип 28/7 - 0,155, у которого аллель *28 определяет устойчивость к лейкозу, аллель *7 - нейтральность, отношение шансов (OR) составляет 0,0005, = 6,95, уровень значимости Р<0,001, доверительный интервал (CI) = 0,45-0,58. С такой же частотой встречался генотип 22/23, у которого аллель *22 - определяет чувствительность, *23 - устойчивость, отношение шансов для этого генотипа составило. OR = 0,54 (%2 = 2,46, Р<0,05, С1=0,13-2,11).

В группе вирусоносителей, число которых составило 55 животных, с наибольшей частотой встречался генотип 22/24 - 0,16 (OR = 8,61, х2 = 4,04, Р<0,01, CI = 1,03-191,7). Оба аллеля ассоциированы с чувствительностью к лейкозу, а высокое значение отношения шансов (OR) подтверждает повышенный риск заболевания лейкозом животных с данным генотипом.

Частота другого генотипа, ассоциированного с чувствительностью к лейкозу, 8/16 составила 0,13, значение (Ж также оказалось достаточно высоким - 6,42 (X2 = 5,42, Р<0,01, С1 = 0,74-146,7). Генотип 16/22 ассоциирован с чувствительностью к лейкозу, частота составила - 0,07, (Ж = 3,45 (х2 = 1,4, Р<0,04, СГ = 0.34-82.7). Генотип 22/23 отмечали с частотой 0,09, значение (Ж = 0,54 (х2 =1,46, Р<0,05, С1 = 0,13-2,11). ,

При анализе распространения генотипов в группе здоровых животных из ККХ «Заря» отметили наиболее представительный генотип - 16/23 с частотой 0,13, один аллель которого (*16) ассоциирован с чувствительностью к лейкозу, *23 - с устойчивостью. Значение (Ж составило 0,15, (%2 = 4,6, Р<0,01, С1 = 0,007-1,29). Генотип 22/23 с частотой 0,11 также имеет в своем составе аллель, ответственный за устойчивость (*23) и аллель, ответственный за чувствительность к лейкозу (■"22), значение (Ж составило 0,76 (х2=2,3, Р0,04,0 = 0,16-3,34).

В группе инфицированных наиболее часто отмечали животных с генотипом 8/16 - 0,17, аллели которого ассоциированы с чувствительностью к лейкозу. Значение СЖ для данного генотипа составило 11,1 (х2 = 5,54, Р<0,01, С1 = 1,31-251,7). Для генотипа 28/18 (частота 0,13) значение (Ж составило 1,87 (Х2= 2,36, Р<0,05, С1 = 0,43-8,61) Генотипы с чувствительными аллелями 16/22 и 22/24 отмечали с одинаковой частотой 0,08, значение (Ж составило соответственно - 5,05 и 2,4. Генотип 22/23 с частотой 0,08, один аллель которого ассоциирован с чувствительностью (*22), другой - с устойчивостью (*23), значение ОЯ = 0,76 (х2= 5,5, Р<0,01, С1 = 0,16-3,34). Частоты остальных генотипов составили 0,02-0,06.

В группе здоровых животных симментальской породы наиболее высокую частоту встречаемости отметили у генотипа 11/22 - 0,12, у которого *11 аллель ассоциирован с устойчивостью, *22 - ассоциирован с чувствительностью к лейкозу, значение ОЯ = 0,47 (х2 = 4,8, Р<0,01, С1 = 0,08-2,29). Генотипы 23/3 и 23/4 выявлены с одинаковой частотой 0,1 и значение отношения шансов развития заболевания составило 0,18. Частота генотипа 16/11, у которого аллель *16 обуславливает предрасположенность, а аллель *11 - устойчивость к лейкозу составила 0,06, а значение (Ж = 0,32 =2,6, Р<0,05, С1 = 0,01-3,65). Частоты остальных генотипов составили 0,02-0,06.

Среди изученной выборки инфицированных животных симментальской породы наиболее представительным генотипом является 8/16 с частотой 0,18, *

оба аллеля ассоциированы с предрасположенностью к лейкозу - ОЯ = 5,27 (%2'= 3,67, Р<0,05, С! = 0,97-37,6). Также отметили генотип 22/23 с частотой 0,08, ОЯ = 4,26 (%2 = 2,8, Р<0,05, С1 = 0,42-102,1) Частоты остальных генотипов составили 0,04-0,08.

2.2.6 Экономическая эффективность результатов исследований

При определении экономической эффективности исследований нами за основу взят уровень предотвращенного ущерба при раннем прогнозировании

предрасположенности к лейкозу, которое достигается при проведении ПЦР -анализа на 1 месяце жизни племенного молодняка. Расчеты проводили в соответствии с формулой, приведенной в Ветеринарном законодательстве (2000):

Пу=М0хКзвхКп хЦ, где

П у- предотвращенный экономический ущерб;

Мо - поголовье животных;

К3, - коэффициент возможной заболеваемости животных;

Кп - удельная величина потерь основной продукции в расчете на одно заболевшее животное, кг;

Ц - цена реализации единицы продукции, руб Пу= 300x0,011x36,7x30000 = 3633300

Экономический эффект, полученный в результате осуществления профилактических мероприятий, определяли по формуле:

Эв=Пу-Зв,где

3 в - затраты на мероприятия.

Э ,= 3633300-60000 = 3573300 рублей.

В расчете на 1 голову экономический эффект составил 11911 рублей.

ВЫВОДЫ

1. Создан банк ДНК крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород племенного назначения объемом 300 проб как база для дальнейших исследований в области популяционной генетики.

2. Изучением Генетического полиморфизма гена ВоЬА - ЭЯВЗ в группах здоровых и инфицированных животных трех племенных стад: черно-пестрой и симментальской пород из Стерлитамакского совхоз-техникума и черно-пестрой породы - из ККХ «Заря» установлена наибольшая частота встречаемости для аллелей в популяциях:

- а) черно-пестрой породы Стерлитамакского совхоз-техникума 01*В3.2*7,*16, *18, *22, *23, *24, *25 с частотами 0,06, 0,085, 0,07, 0,14, 0,11, 0,16, 0,045 соответственно;

- б) черно-пестрой породы из ККХ «Заря» - ОЯВ3.2*8, *16, * 18, *22, »23, *24, *28 с частотами 0,05, 0,11, 0,13, 0,125, 0,09, 0,11. 0,095 соответственно;

- в) симментальского скота - ОЯВЗ.2*8, »11, *16, »18, *22, *23, *24, *28 с частотами 0,055,0,08,0,075, 0,055,0.065,0,11,0,06,0,095 соответственно.

лейкозу: ОЯВ3.2*22: 14% и 12,5%, в популяции симментальского скота -6,5%. Аллели, ответственные за устойчивость к лейкозу, в обеих породах представлены примерно с одинаковой частотой, кроме аллеля ОЯВ3.2*11, который в симментальской породе встречался с частотой 8%, в черно-пестрой породе - 3,5% и 2,5%.

4. Проанализирована генетическая структура изучаемых популяций на основе степени чувствительности к лейкозу:

- а) доля животных, несущих устойчивые генотипы в популяции черно-пестрого скота из Стерлитамакского совхоз-техникума составляет 43%, восприимчивые генотипы - 57%;

- б) доля животных с чувствительными генотипами в популяции черно-пестрого скота из ККХ «Заря» составляет 39%, с устойчивыми генотипами 44%;

в) в популяции симментальского скота доля животных с чувствительными генотипами составляет 19%, с резистентными - 56%.

5. В изученных популяциях показатели соотношения шансов по аллелям 01*В3.2*8, *16, *22, *24 составили ОЯ>1. Следовательно, 42% изученного поголовья черно-пестрой породы Стерлитамакского совхоз-техникума и 39,5% - ККХ «Заря» имеют повышенный риск развития лейкоза крупного рогатого скота. Для популяции симментальского скота риск значительно ниже и составляет 25,5%.

6. Генетические маркеры устойчивости к лейкозу - ВоЬА - ОНВЗ*11, *23, *28 имеют низкие значения показателя соотношения шансов - (Ж<1. В популяции черно-пестрого скота устойчивость к заболеванию имеют 21,5% (Стерлитамакский совхоз-техникум) и 21% животных (ККХ «Заря»); симментальского - 28,5%.

7. Предрасположенность к заболеванию лейкозом имеет четко выраженную генетическую детерминированность: генотипы, устойчивые к лейкозу, в группах здоровых животных черно-пестрой породы составили 68% (Стерлитамакский совхоз-техникум) и 63% (ККХ «Заря»), симментальской -72%, в группах вирусоносителей - соответственно 21,8; 21,7 и 40%. Генотипы, ответственные за чувствительность к лейкозу, по черно-пестрой породе в группе вирусоносителей составили 51% (Стерлитамакский совхоз-техникум) и 56% (ККХ «Заря»), симментальской - 30%; а в группе здоровых -соответственно 20,0; 24,1 и 8%.

8. Обоснована роль уровня гетерозиготности как неспецифического фактора устойчивости к развитию лейкоза крупного рогатого скота: в группах инфицированных животных изученных популяций уровень гетерозиготности колебался в пределах 0,93 - 0,98, в группах здоровых животных- 0,98 - 1,0.

9. Определена экономическая эффективность раннего выявления и выранжирования ремонтного молодняка с аллелями, ответственными за предрасположенность к лейкозу (ВЯВ3.2*8, *16, *22, *24) за счет сокращения непроизводительных затрат на выращивание потенциально больных животных предотвращенный ущерб в расчете на 1 голову составит 11911 рублей.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основе проведенных исследований считаем целесообразным внедрение в систему борьбы с лейкозом следующих мероприятий.

1. Учитывая высокую информативность, точность, быстроту и возможность использования в раннем возрасте животных, в ветеринарную

» практику внедрить метод ПЦР - анализа, особенно при необходимости

выявления предрасположенности к заболеванию у молодняка до шестимесячного возраста и необходимости оценки оздоровления стад после проведенных противолейкозных мероприятий.

2. Молодняк от высокоценных племенных животных в неблагополучных по лейкозу хозяйствах необходимо на первом месяце жизни протестировать методом ПЦР - анализа. Всех особей, несущих аллели, связанных с предрасположенностью к лейкозу (ОЯВ3.2*8, *16, *22, *24) для сокращения непроизводственных затрат необходимо исключить из группы ремонтного молодняка и выращивать как неплеменных животных.

3. Для оптимизации уровня генетической устойчивости поголовья племенных хозяйств к лейкозу, для широкого использования при искусственном осеменении, быков-производителей следует допускать только после генетического тестирования на носительство аллелей, ответственных за чувствительность к заболеванию.

Список опубликованных работ по теме диссертации:

1. Шарифуллина Н.М. Динамика инфицированное™ крупного рогатого скота вирусом лейкоза в Республике Башкортостан / Н.М.111арифуллина, И.А.Ахатова // Пути повышения эффективности АПК в условиях вступления России в ВТО: Материалы международной научно-практической конференции (19-20 февраля 2003 г.). - Уфа, 2003. - С.394-396.

2. Шарифуллина Н.М. К вопросу о генетико-селекционной оценке устойчивости к лейкозу крупного рогатого скота У Н.М.Шарифуллина, И.А.Ахатова // Аграрная наука в XXI веке: Материалы республиканской научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов (21-22 мая 2003 г.). - Уфа, 2003. - С.141-142.

^ 3. Шарифуллина Н.М. Изучение ДНК-полиморфизма гена ВоЬА-

Э1ШЗ в популяции черно-пестрого скота при помощи полимеразной цепной реакции / Н.М.Шарифуллина, И.А.Ахатова // Современные проблемы „ иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и

инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных: Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РФ и РБ, доктора ветеринарных наук, профессора Х.В.Аюпова и 55-летию кафедры паразитологии, микробиологии и вирусологии БГАУ (26-28 января 2004 г.). - Москва-Уфа, 2004. - С.321-323.

4. Шарифуллина Н.М. Распространение аллелей гена ВоЬА-ОЯВЗ, ответственных за устойчивость и восприимчивость к лейкозу в популяции черно-пестрого скота / Н.М.Шарифуллина // Материалы НО научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов университета «Достижения аграрной науки - производству». (19 января-3 февраля 2004 г.). - Уфа, 2004 г. - С. 157-161.

5. Ахатова И.А. Селекция крупного рогатого скота на устойчивость к лейкозу / И.А.Ахатова, Н.М Шарифуллина // Проблемы и пути интенсификации племенной работы в отраслях животноводства: Материалы международной научно-практической конференции (26-28 апреля 2004 г.). -Уфа, 2004. - С.87-90.

6. Шарифуллина Н.М. Новое в селекции крупного рогатого скота на устойчивость к лейкозу / Н.М.Шарифуллина // Материалы научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов (12 мая 2004 г.)-Уфа, 2004. - С-149-151.

MV.

Лицензия РБ на издательскую деятельность № 0261 от 10 апреля 1998 года. Подписано в печать 01 • 2005 г. Формат 60x84. Бумага типографская.

Гарнитура Тайме. Усл. печ. л. -/, . Усл. изд. л. /. Тираж 100 экз. Заказ № 59 .

Издательство Башкирского государственного аграрного университета. Типография Башкирского государственного аграрного университета. Адрес издательства и типографии: 450001, г. Уфа, ул. 50 лет Октября, 34.

'P-2Q 4ß

РНБ Русский фонд

2005-4 48239

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Шарифуллина, Наиля Мусагитовна

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Определение и сущность лейкоза крупного рогатого скота

1.1.1 Определение лейкоза, этиология и пути передачи вируса лейкоза

1.1.2 Стадии течения лейкоза крупного рогатого скота

1.1.3 Патологоанатомические изменения при лейкозе крупного рогатого скота

1.1.4 Распространенность лейкоза крупного рогатого скота в Российской Федерации

1.1.5 Реакция иммунодиффузии и полимеразная цепная реакция в диагностике вируса лейкоза крупного рогатого скота

1.2 Генетическая обусловленность устойчивости и восприимчивости крупного рогатого скота к заболеванию лейкозом

1.3 Главный комплекс гистосовместимости крупного рогатого скота

1.4 Главный комплекс гистосовместимости и болезни

1.5 Методы изучения главного комплекса гистосовместимости

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы и методы исследования

2.2 Результаты собственных исследований 54 2.2.1 Распределение частот аллелей гена ВоЬА-ВЯВЗ в исследуемых популяциях крупного рогатого скота черно-пестрой породы

2.2.2. Распределение частот аллелей гена ВоЬА-ОШЗЗ в популяции крупного рогатого скота симментальской породы

2.2.3 Изучение ассоциаций аллелей гена ВоЬА-ОЯВЗ с риском развития лейкоза у крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород

2.2.4 Распределение частот генотипов и ассоциаций с восприимчивостью к лейкозу в изученных популяциях крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород

2.2.5 Экономическая эффективность результатов исследований 80 3 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Полиморфизм гена BoLA-DRB3 в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород в условиях Республики Башкортостан"

Актуальность темы. Многочисленные публикации и данные официальной ветеринарной статистики свидетельствуют о том, что среди инфекционных болезней крупного рогатого скота лейкоз по тяжести поражения органов, тканей, массовости проявления и экономическим последствиям занимает ведущее место. Заболевание наносит значительный экономический ущерб животноводству страны вследствие гибели и вынужденной выбраковки высокопродуктивных племенных животных, утилизации туш и органов с опухолевыми изменениями, расходов, связанных с ограничительными мероприятиями. Заболеваемость лейкозом крупного рогатого скота - одна из наиболее важных проблем не только ветеринарной медицины, животноводства, но и биологии, экологии в целом, имеющая непосредственное отношение к безопасности здоровья человека, так как ВЛКРС имеет близкое морфологическое и эволюционное родство с вирусом Т-клеточного лейкоза человека. Несомненно, одной из важнейших проблем онкологии и лейкозологии является возможная связь между заболеваемостью лейкозами и опухолями животных и человека. Большой интерес представляют проблемы потенциальной опасности для человека продуктов питания от животных из стад, неблагополучных по лейкозу, влияния вредных метаболитов, накапливающихся в организме больных коров, на организм человека, а также использования животных для получения биопрепаратов. Имеются данные об экспериментальном заражении обезьян бычьим лейкозом (Н.М.МсОиге, 1974). В связи с этим актуальным является проблема диагностики лейкоза на ранних стадиях заболевания. С помощью применяемых в настоящее время серологических методов диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота полностью искоренить заболевание невозможно. Поэтому особую значимость для точной диагностики вируса представляют методы молекулярной биологии, в частности, полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая зарекомендовала себя как надежный, специфичный, достоверный и чувствительный тест для раннего выявления инфицированных ВЛКРС животных.

Для борьбы с лейкозной инфекцией и лейкозом в нашей стране в разные годы были разработаны и использованы в ветеринарной практике Инструкции о мероприятиях по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота, утвержденные Главным управлением ветеринарии МСХ СССР в 1969, 1970, 1975, 1984 и 1989 годах. В 1999 году утверждены Правила по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота, в которых определены: Сведения о лейкозе. Требования по профилактике лейкоза крупного рогатого скота. Эпизоотический контроль и постановка диагноза на лейкоз. Ограничительные мероприятия в пунктах, неблагополучных по лейкозу. Оздоровительные мероприятия в неблагополучных по лейкозу животноводческих хозяйствах. Оздоровительные мероприятия в племенных хозяйствах. Требования к транспортировке, приему, предубойному содержанию и переработке больных лейкозом и инфицированных вирусом лейкоза животных.

Подобные Инструкции и программы борьбы с лейкозом крупного рогатого скота разработаны и реализованы практически во всех странах мира, что свидетельствует о том, что проблема лейкоза крупного рогатого скота признана актуальной в мировом масштабе, для решения которой необходим комплекс эффективных мероприятий.

Наряду с ветеринарными мероприятиями, для борьбы с лейкозами разрабатываются селекционно-генетические методы с целью получения здорового, резистентного к лейкозу крупного рогатого скота потомства. Работы многих ученых посвящены изучению механизмов генетической устойчивости животных к лейкозу (В.М. Нахмансон, 1973, 1986, 1997; Л.К.Эрнст и соавт., 1979; О.К.Гаврилов, В.П.Шишков, 1983; А.Г.Незавитин, 1992, 1995 и др.).

Многие годы основу селекции сельскохозяйственных животных составляла, и продолжает оставаться актуальной, оценка генотипов животных по частоте заболеваемости особей, связанных родством и инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота.

Результатами многолетних исследований установлено, что инфицированные животные не всегда болеют лейкозом: частота заболеваемости в значительной степени зависит от генотипа. Данное обстоятельство подтверждает правомочность вирусоиммуногенетической теории этиопатогене-за гемобластозов, выдвинутой В.П.Шишковым в 1979 году, заключающейся в том, что клиническому и патоморфологическому проявлению болезни способствуют генетическая предрасположенность и иммунологическая недостаточность организма.

Исходя из изложенного, становится очевидной необходимость комплексного подхода в разработке эффективной системы борьбы с лейкозом крупного рогатого скота. Здесь особое значение приобретают методы молекулярной генетики, особенно методы изучения генов главного комплекса гистосовместимости, участвующих в регуляции иммунного ответа организма, в частности, в осуществлении клеточного взаимодействия при трансплантации органов и тканей, а также связанных с развитием многих заболеваний, в первую очередь аутоиммунных, онкологических, инфекционных (Г.Е.Сулимова и др., 1995).

В связи с этим, важным направлением в плане разработки селекционно-генетических подходов к оздоровлению животных от лейкозов является изучение ассоциативных связей между определенными аллелями гена класса II главного комплекса гистосовместимости крупного рогатого скота (ВоЬА-ВЯВЗ) с восприимчивостью и устойчивостью к лейкозам.

Цель и задачи исследования. Целью работы явилось изучение полиморфизма гена класса II главного комплекса гистосовместимости крупного рогатого скота (ВоЬА-Б11ВЗ) в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород в условиях Республики Башкортостан. Эта цель была достигнута через решение следующих задач:

• сформировать банк ДНК изучаемых популяций крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород;

• исследовать ДНК-полиморфизм гена ВоЬА-БКБЗ у крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород с различным уровнем инфицированности вирусом лейкоза крупного рогатого скота;

• провести анализ распределения частот аллелей и генотипоь в группах вирусоносителей и здоровых животных;

• оценить генетическую структуру изучаемых популяций по восприимчивости и устойчивости к лейкозу;

• разработать научно-обоснованные рекомендации по ранней оценке уровня устойчивости и восприимчивости ремонтного молодняка крупного рогатого скота к лейкозу и повышению генетической детерминированности устойчивости племенных стад к заболеванию.

• определить экономическую эффективность анализа ДНК - полиморфизма при профилактике лейкоза крупного рогатого скота. Научная новизна. Полученные данные представляют интерес для понимания молекулярно-генетических механизмов формирования устойчивости и восприимчивости к лейкозу, а также позволяют предложить новые направления в разработке подходов для оценки групп риска заболеваемости лейкозом.

Впервые в условиях Республики Башкортостан с использованием современных молекулярно-генетических методов изучен ДНК-полиморфизм гена класса II главного комплекса гистосовместимости крупного рогатого скота (ВоЬА-ВЯВЗ) у племенного крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород. Создан банк ДНК популяций данных пород объемом 300 проб как база для дальнейших исследований в области популя-ционной генетики. Впервые определён относительный риск заболеваемости лейкозом разных генотипов. Проанализирована генетическая структура стад трех племенных хозяйств с установлением в них доли животных, несущих устойчивые и чувствительные к лейкозу генотипы. Подтверждена роль уровня гетерозиготности как неспецифического фактора устойчивости к лейкозу. Предложена и обоснована экономическая эффективность повышения уровня генетической детерминированности устойчивости стад к лейкозу на основе раннего отбора племенного молодняка при помощи ПЦР — тестирования на восприимчивость к заболеванию.

Практическая ценность. На основе изучения полиморфизма гена ВоЬА БКВЗ крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород, генетической структуры популяций, частоты аллелей, ответственных за устойчивость и чувствительность к лейкозу, подтверждена генетическая детерминированность предрасположенности к заболеванию и предложен метод отбора молодняка на основе ПЦР - тестирования на первом месяце жизни. Ранний отбор и использование для ремонта стад устойчивого к заболеванию молодняка одновременно обеспечивает сокращение непроизводительных затрат по выращиванию на племенные цели особей с высоким риском развития лейкоза и повышение уровня резистентности за счет наследственного закрепления признака.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на двух международных научно-практических конференциях: «Пути повышения эффективности АПК в условиях вступления России в ВТО» (г.Уфа, 2003) и «Проблемы и пути интенсификации племенной работы в отраслях животноводства» (г.Уфа, 2004); на республиканских научно-практических конференциях молодых ученых и аспирантов (г.Уфа, 2003, 2004); на 110ой научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов университета «Достижения аграрной науки - производству» (г.Уфа, 2004).

Публикация результатов исследований. Основные результаты исследований опубликованы в 6 научных статьях.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, предложений производству, библиографического списка. Она изложена на 120 страницах компьютерного текста, включает 8 таблиц, 13 рисунков. Библиографический список включает 226 наименований, в том числе 90 - иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных", Шарифуллина, Наиля Мусагитовна

выводы

1. Создан банк ДНК популяций крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород племенного назначения объемом 300 проб как база для дальнейших исследований в области популяционной генетики.

2. Изучением генетического полиморфизма гена ВоЬА — Б11ВЗ в группах здоровых и инфицированных животных трех племенных стад: черно-пестрой и симментальской пород из Стерлитамакского совхоз-техникума и черно-пестрой породы - из ККХ «Заря» установлена наибольшая частота встречаемости для аллелей в популяции:

- а) черно-пестрой породы Стерлитамакского совхоз-техникума Б11В3.2*7,*16, *18, *22, *23, *24, *25 с частотами 0,06, 0,085, 0,07, 0,14, 0,11, 0,16, 0,045 соответственно;

- б) черно-пестрой породы из ККХ «Заря» - Б11В3.2*8, *16, *18, *22, *23, *24, *28 с частотами 0,05, 0,11, 0,13, 0,125, 0,09, 0,11, 0,095 соответственно;

- в) симментальского скота - ОКВ3.2*8, *11, *16, *18, *22, *23, *24, *28 с частотами 0,055, 0,08, 0,075, 0,055, 0,065, 0,11, 0,06, 0,095 соответственно.

3. Установлено существование межпородных различий по уровню распространения аллелей, ответственных за устойчивость и предрасположенность к лейкозу. В черно-пестрой породе, по сравнению с симментальской, более представлены аллели, ответственные за предрасположенность к лейкозу: В1Ш3.2*22: 14% и 12,5% - в двух популяциях черно-пестрого, 6,5% - в популяции симментальского скота. Аллели, ответственные за устойчивость к лейкозу, в обеих породах представлены примерно с одинаковой частотой, кроме аллеля В11В3.2*11, который в симментальской породе встречался с частотой 8%, в черно-пестрой породе - 3,5% и 2,5%.

- в) в популяции симментальского скота доля животных с чувствительными генотипами составляет 19%, резистентными — 56%.

5. В изученных популяциях показатели соотношения шансов по аллелям БКВ3.2*8, *16, *22, *24 составили СЖ>1. Следовательно, 42% изученного поголовья черно-пестрой породы Стерлитамакского совхоз-техникума и 39,5% -ККХ «Заря» имеют повышенный риск развития лейкоза крупного рогатого скота. Для популяции симментальского скота риск значительно ниже и составляет 25,5%.

6. Генетические маркеры устойчивости к лейкозу - ВоЬА — БКВЗ*11, *23, *28 имеют низкие значения показателя соотношения шансов — СЖ<1.'В популяции черно-пестрого скота устойчивость к заболеванию имеют 21,5% (Стер-литамакский совхоз-техникум) и 21% животных (ККХ «Заря»); симментальского - 28,5%.

7. Предрасположенность к заболеванию лейкозом имеет четко выраженную генетическую детерминированность: генотипы, устойчивые к лейкозу, в группах здоровых животных черно-пестрой породы составили 68% (Стерлита-макский совхоз-техникум) и 63% (ККХ «Заря»), симментальской - 72%, в группах вирусоносителей - соответственно 21,8; 21,7 и 40%. Генотипы, ответственные за чувствительность к лейкозу, по черно-пестрой породе в группе вирусоносителей составили 51% (Стерлитамакский совхоз-техникум) и 56% (ККХ «Заря»), симментальской - 30%; а в группе здоровых - соответственно 20,0; 24,1 и 8%.

9. Определена экономическая эффективность раннего выявления и вы-ранжирования ремонтного молодняка с аллелями, ответственными за предрасположенность к лейкозу (ВКВ3.2*8, *16, *22, *24). За счет сокращения непроизводительных затрат на выращивание потенциально больных животных предотвращенный ущерб в расчете на 1 голову составит 11911 рублей.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Учитывая высокую информативность, точность, быстроту и возможность использования в раннем возрасте животных, в ветеринарную практику внедрить метод ПЦР - анализа, особенно при необходимости выявления предрасположенности к заболеванию у молодняка до шести месячного возраста и необходимости оценки оздоровления стад после проведенных проти-волейкозных мероприятий.

2. Молодняк от высокоценных племенных животных в неблагополучных по лейкозу хозяйствах необходимо на первом месяце жизни протестировать методом ПЦР - анализа. Всех особей, несущих аллели, связанных с предрасположенностью к лейкозу (Б11В3.2*8, *16, *22, *24) для сокращения непроизводственных затрат необходимо исключить из группы ремонтного молодняка и выращивать как неплеменных животных.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата сельскохозяйственных наук, Шарифуллина, Наиля Мусагитовна, Уфа

1. Абакин С.С. Диагностика, распространенность онковирусной инфекции крупного рогатого скота и овец в Ставропольском крае / С.С.Абакин // Тез. докл. III Всесоюз. конф. Новосибирск, 1990. - С. 71-73.

2. Алтухов Ю.П. Генетические процессы в популяциях / Ю.П.Алтухов. М.: Наука, 1983.-278 с.

3. Алтухов Ю.П. Полиморфизм ДНК в популяционной генетике / Ю.П.Алтухов, Е.А.Салменкова // Генетика. 2002. - Т.39, № 9 - С. 1173-1195.

4. Анализ полиморфизма гена HLA-DRB 1 в популяциях Волго-Уральского региона / И.М.Хидиятова, А.Т.Ишмухаметова, Г.И.Лукманова, Э.К.Хуснутдинова // Генетика 2004. - Том 40, № 2. - С. 267-271.

5. Анализ полиморфизма ДНК кластерных генов у крупного рогатого скота: гены казеинов и гены главного комплекса гистосовместимости (BoLA) / Г.Е.Сулимова, С.С.Соколова, О.П.Семикозова и др. // Цитология и генетика. 1992. - Т.26, №5. — С. 18-25.

6. Ахмедова Ш.У. Полиморфизм генов HLA II класса у больных инсулинзави-симым сахарным диабетом в узбекской популяции / Ш.У.Ахмедова, Д.А.Рахимова // Иммунология. 2002. - №5. - С. 298-300.

7. Белохвостов A.C. Полимеразная цепная реакция и лигазные реакции, принципы, традиционные методики и нововведения / А.С.Белохвостов // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. — 1995. №2. - С. 21-26.

8. Биологические свойства молока и его роль в распространении возбудителя лейкоза крупного рогатого скота / Н.И.Снежков, М.И.Гулюкин, Л.Г.Бурба и др. //Ветеринария. 1991. - №11. - С. 30-31.

9. Бороздин Э.К. Роль генетического фактора в эпизоотическом процессе / Э.К.Бороздин//Пути повышения резистентности с.-х. животных: Сб. науч. тр. -М., 1985. С. 3-9.

10. Булат С.А. Идентификация маркерных штаммов Leishmania major, L. turanica, L. gerbilli методом полимеразной цепной реакции с универсальным праймером / С.А.Булат, М.В.Стрелкова, В.В.Сысоев // Мед. парази-тол. и паразитар. болезни. 1992. - №1. - С. 21-22.

11. Бурба Л.Г. Вирусологические и иммунологические аспекты лейкозов крупного рогатого скота / Л.Г.Бурба // Сельскохозяйственная биология. — 1979. №3. - С. 361-366.

12. Бурба Л.Г. Сравнительная оценка семейств животных по лейкозам и онкорновирусной инфекции крупного рогатого скота / Л.Г.Бурба //: Тр. Всесоюзного института экспериментальной ветеринарии М., 1983. - Т. XXXXXVII. - С. 129-130.

13. Васюков А.И. Изучение факторов устойчивости при лейкозе крупного рогатого скота / А.И.Васюков, Л.В.Садовская // Профилактика и меры борьбы с болезнями животных в условиях промышленного животноводства: Сб. науч. тр. Горький, 1979. - С. 10-11.

14. Билль Т.М. Генетические аспекты этиологии лейкозов крупного рогатого скота / Т.М.Вилль, Т.П.Сторожилова, С.М.Федорова // Бюллетень ВНИИГРЖ.- Л., 1980. Вып.44. - С. 21-23.

15. Гаврилов O.K. Состояние и перспективы развития лейкозологии / О.К.Гаврилов, В.П.Шишков // Вестник с.-х. науки. 1983. - №2. - С. 69-76.

16. Галеев Р.Ф. Вирус лейкоза крупного рогатого скота / Р.Ф.Галеев. Уфа:- Ветеринарная медицина, 1999. 147 с.

17. Гизитдинов H.H. Лейкоз у крупного рогатого скота / Н.Н.Гизитдинов,

18. A.Ахмедьяров // Ветеринария. 1979. - №10. - С. 71.

19. Горбунова В.Н. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний / В.Н.Горбунова, В.С.Баранов. С-Петербург: Специальная литература, 1997. —286 с.

20. Горбунова В.Н. Молекулярные основы медицинской генетики. /

21. B.Н.Горбунова. Санкт-Петербург: - Интермедика, 1999. - 59-196.

22. Гулюкин М.И. Научные основы борьбы с лейкозом крупного рогатого скота и профилактика этой инфекции / М.И.Гулюкин, П.Н.Смирнов // Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России. -М., 1999.-Т.1.-С. 196-199.

23. ДНК- технологии оценки сельскохозяйственных животных / Л.А.Калашникова, И.М.Дунин, В.И. Глазко и др. Моск. обл., Лесные Поляны: ВНИИплем, 1999. - 436 с.

24. ДНК-полиморфизм гена BoLA- DRB3 у крупного рогатого скота в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу / Г.Е.Сулимова, И.Г.Удина, Г.О. Шайхаев, И.А. Захаров //Генетика. 1995.- Т.31, №9. - С. 1294-1299.

25. Докунин И.С. Наследственная предрасположенность различных пород крупного рогатого скота к лейкозам / И.С.Докунин //: Тр. Казанского ветеринарного института Казань, 1980. - Т. 136. - С. 6-8.

26. Донник И.М. Биологические особенности и устойчивость к лейкозу крупного рогатого скота в различных экологических условиях Урала: Автореф. дис. докт. биол. наук. /И.М.Донник Екатеринбург, 1997. - 43 с.

27. Донник И.М. Распространение лейкоза крупного рогатого скота в экологически неблагополучных территориях Свердловской и Курганской областей / И.М.Донник, А.Т.Татарчук // Труды Свердловской н.-и. вет. станции. 1995. — Вып.10. — С. 53-57.

28. Дрыгин В.В. Современные методы лабораторной диагностики инфекционных болезней животных / В.В.Дрыгин // Ветеринарная газета. 2002. - №5. - С. 3.

29. Дун Е.А. Об устойчивости к лейкозу некоторых пород крупного рогатого скота / Е.А.Дун // Ветеринария. 1988. - №1. - С. 29-31.

30. Дун Е.А. Роль быков-производителей в распространении лейкоза крупного рогатого скота / Е.А. Дун //: Тр. Всесоюзного института экспериментальной ветеринарии. М., 1968. - Т. V. - С. 92-95.

31. Емельянов A.C. Зоотехнические меры борьбы с заболеванием крупного рогатого скота лейкозом / А.С.Емельянов, К.А.Смолина, Г.К.Сметанина // Проблемы лейкозов: Сб. науч. тр. М., 1967. - С. 42-45.

32. Желтиков А.И. Оценка коров черно-пестрой породы разного экогенеза по устойчивости к некоторым заболеваниям / А.И.Желтиков, Т.В.Макеева // Генетика устойчивости животных к заболеваниям: Сб. науч. тр. — Новосибирск, 1992. С. 12-16.

33. Зарецкая Ю.М. Клиническая иммуногенетика / Ю.М.Зарецкая. М.: Медицина, 1986. - 175 с.

34. Изучение генетической устойчивости к лейкозу животных бурой латвийской породы при разведении их по линиям / Л.К.Эрнст, П.Г.Клабуков, Л.В.Карликов и др. // Сб. науч. тр. ВНИИЖ. М., 1976. - Вып. 48. - С. 3-7.

35. Иммуногенетическая реактивность и возможности ее использования для оценки резистентности животных / Г.Н.Сердюк, Ю.В.Силин, Т.П.Сторожилова и др. // Молекулярно-генетические маркеры животных: Сб. науч. тр. Киев, 1996. - С. 73.

36. Карликов Д.В. Заболеваемость лейкозами крупного рогатого скота при скрещивании, чистопородном и родственном разведении / Д.В.Карликов, П.Г.Каблуков, A.M. Якушенков // Бюлл. науч. раб. ВНИИЖИВ - М., 1978. - Вып. 54.-С. 56 - 58.

37. Карликов Д.В. Селекция скота на устойчивость к заболеваниям / Д.В.Карликов. -М.: Россельхозиздат, 1984. 191 с.

38. Карташова В.М. Уровень соматических клеток в молоке коров, больных лейкозом / В.М.Карташова, В.В.Касянчук // Ветеринария. 1997. -№11.-С. 43-44.

39. Карягин А.Д. Наследственная обусловленность устойчивости крупного рогатого скота к инфекции ВЛКРС и лейкозу / А.Д.Карягин // Селекция, ветеринарная генетика и экология: Сб. науч. тр. Новосибирск, 2001. С. 62.

40. Классификация ретровирусов и характеристика вируса лейкоза крупного рогатого скота / Б.Г.Орлянкин, М.И.Гулюкин, Н.В.Замараева, К.Ю. Кунаков // Ветеринария. 2000. - №5. - С. 17-19.

41. Климова Г.В. Ранняя диагностика лейкозов животных методом проточной ДНК-цитометрии / Г.В.Климова, Н.А.Верещак, О.В.Сазонов // Труды Свердловской н.-и. вет. станции. 1995. - Вып. 10. - С. 66-67.

42. Колесников А.Я. Научные исследования по проблеме лейкоза / А.Я.Колесников, А.АЛСунаков // Ветеринария. 1986. - №12. - С. 28-29.

43. Колесников В.И. Эпизоотическая обстановка по лейкозу крупного рогатого скота в Ставропольском крае / В.И.Колесников, Т.И.Чайка, С.С.Абакин // Ветеринарная газета. 2002. - № 19. - С. 4-6.

44. Колесников В.И. Эпизоотическая ситуация и ветеринарно-социальные аспекты лейкоза крупного рогатого скота в Ставропольском крае / В.И. Колесников, Т.И. Чайка, С.С.Абакин // Вестник ветеринарии. 2001. - №2. - С.30-32.

45. Конарев A.B. Использование молекулярных маркеров в работе с генетическими ресурсами растений / А.В.Конарев // Сельскохозяйственная биология. 1998. - №5. - С. 3-25.

46. Коростелева Н.И. Влияние генетических факторов на частоту инфици-рованности BJIKPC и заболеваемости лейкозом / Н.И.Коростелева, И.С.Ощепкова // Актуальные проблемы животных и человека: Сб. науч. тр. Барнаул, 1996. - С. 29-31.

47. Короткевич О.С. Связь пораженности ВЛКРС с заболеваемостью животных лейкозом / О.С.Короткевич // Генетика устойчивости животных к заболеваниям: Сб. науч. тр. Новосибирск, 1992. - С. 20-24.

48. Костомахин Н.М. Взаимосвязь между факторами естественной резистентности и селекционно-генетическими особенностями крупного рогатого скота черно-пестрой породы / Н.М.Костомахин // Сельскохозяйственная биология. 1987. -№10.-С. 100-103.

49. Кочнев H.H. Генетика устойчивости крупного рогатого скота к кетозу / Н.Н.Кочнев, В.JI.Петухов, J1.K. Эрнст //Генетика. 1998. - Т. 34, №9.- С. 285-289.

50. Крикун В.А. Лейкоз крупного рогатого скота и иммунологическая толерантность / В.А. Крикун // Ветеринария. 2002. - №6. - С. 7-9.

51. Кузин А.И. Влияние лейкоза на продуктивность коров и качество молока / А.И.Кузин, Е.Н.Закрепина // Ветеринария. 1997. - №2. - С. 19-20.

52. Кузнецова Н.В. Использование ПЦР для выявления инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота / Н.В.Кузнецова, Н.В.Кузнецов, Г.А.Симонян // Ветеринария. 1997. - №5. - С. 12-14.

53. Кукайн P.A. Вирусологические и иммунологические аспекты лейкоза крупного рогатого скота / Р.А.Кукайн, Л.И.Нагаева // Вестник с.-х. науки. 1983. - №2.-С. 76-79.

54. Лактионов A.M. Селекционно-генетические аспекты лейкозов крупного рогатого скота / А.М.Лактионов, В.М.Нахмансон // Ветеринария. 1972. -№6. - С. 66-69.

55. Лейкоз крупного рогатого скота и стратегия мер борьбы с заболеванием во Владимирской области / А.А.Гусев, Ю.Т.Киселев, В.М.Захарова и др. // Проблемы инфекционной патологии с.-х. животных: Сб. науч. тр. Владимир, 1997. - С. 77-78.

56. Лемеш В.М. Эпизоотологические особенности лейкоза крупного рогатого скота в Калининградской области / В.М.Лемеш, В.Г.Минасян // Тез. докл. III Всесоюз. конф. Новосибирск, 1990. С. 44-45.

57. Лиманский А.П. Молекулярно-генетические методы основа программ по искоренению лейкоза крупного рогатого скота / А.П.Лиманский, О.Ю.Лиманская // Биотехнология. - 2001. - №3. - С. 40-50.

58. Мандыгра Н.С. Крупномасштабные оздоровительные мероприятия против лейкоза крупного рогатого скота / Н.С.Мандыгра // Труды Свердловской н.-и. вет. станции. 1995. - Вып. 10. - С. 9-12.

59. Мандыгра Н.С. Эпизоотологическое значение прижизненной диагностики лейкоза крупного рогатого скота / Н.С.Мандыгра // Ветеринария. — 2000. №6.-С. 15-17.

60. Маринин Е.А. Прогнозирование сроков оздоровления хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота / Е.А.Маринин, А.П. Кузнецов. // Ветеринария. 1997. - №17. - С. 17-19.

61. Меркурьева Е.К. Генетические основы селекции в скотоводстве / Е.К.Меркурьева. М.: «Колос», 1977. - 238 с.

62. Москалик P.C. Инфицированность и гематологические показатели у потомства здоровых и больных лейкозом коров / Р.С.Москалик, А.И.Макаршина, А.В.Николаева // Ветеринария. 1986. - №7. - С. 34-35.

63. Нахмансон В.М. Генетические особенности возникновения лейкоза у крупного рогатого скота / В.М.Нахмансон // Сб. науч. тр. Всесоюзной конференции Рига, 1973. - С. 23-25.

64. Нахмансон В.М. Лейкоз крупного рогатого скота / В.М.Нахмансон. -М.: Россельхозиздат, 1986. 221 с.

65. Нахмансон В.М. Наследственная передача предрасположенности к лейкозу крупного рогатого скота / В.М.Нахмансон // Ветеринария. 1973. -№11. - С. 52-54.

66. Нахмансон В.М. Распространение лейкоза крупного рогатого скота в связи с наследственностью и другими факторами / В.М.Нахмансон // Сельское хозяйство за рубежом 1972 - № 11. — С. 33-38.

67. Нахмансон В.М. Серологический метод диагностики в системе проти-волейкозных мероприятий / В.М.Нахмансон, М.И. Гулюкин, Е.А. Дун // Ветеринария. 1997. - №3. - С. 7-9.

68. Нахмансон В.М. Сравнительная оценка семейств животных по лейкозам и онковирусной инфекции крупного рогатого скота / В.М.Нахмансон, Е.А.Дун, Л.Г.Бурба // Сб. науч. тр. ВИЭВ. М.,1983. - Т. 57. - С. 129-132.

69. Нахмансон В.М. Сравнительная характеристика некоторых хозяйственно-полезных признаков у коров с положительной и отрицательной РИД / В.М.Нахмансон, Е.А.Дун, Л.Г.Бурба // Ветеринария. 1983. - №2. — С. 3840.

70. Нахмансон В.М. Эпизоотологические аспекты лейкоза крупного рогатого скота / В.М.Нахмансон // Всесоюзный симпозиум по проблеме лейкозов сельскохозяйственных животных М., 1972. - С. 127-129.

71. Незавитин А.Г. Влияние линейной принадлежности, семей и матерей на устойчивость к лейкозу крупного рогатого скота / А.Г.Незавитин // Генетика устойчивости животных к заболеваниям: Сб. науч. тр. Новосибирск, 1992.-С. 16-20.

72. Незавитин А.Г. Влияние наследуемости на устойчивость животных к заражению вирусом лейкоза крупного рогатого скота / А.Г.Незавитин // Сиб. вестник с.-х. науки. 1994. - №1-2. С. 70-72.

73. Никитченко И.Н. О возможности селекции скота на устойчивость к лейкозу / И.Н.Никитченко, В.А.Джумков // Генетическая устойчивость с. — х. животных к заболеваниям: Сб. науч. тр. М., 1983. - Вып. 3. — С. 74-75.

74. О путях передачи вируса лейкоза / П.Н.Смирнов, А.В.Киселев, А.Т. Ле-вашев и др. // Ветеринария. 1988. - №12. - С. 28-30.

75. Облап Р.В. Выявление провирусной ДНК вируса лейкоза крупного рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (PCR) / Р.В.Облап, С.Б.Зеленый, В.И.Глазко // Молекулярно-генетические маркеры животных: Сб. науч. тр. Киев, 1996. - С. 17-18.

76. Обухов И.Л. Использование полимеразной цепной реакции в практических ветеринарных лабораториях / И.Л.Обухов, К.Н.Груздев, А.Н. Панин // Ветеринария. 1997. - №2. - С. 24-26.

77. Орешкина С.П. Распространение антигенов Главного комплекса гисто-совместимости в линиях и семействах черно-пестрого скота в связи с заболеваемостью лейкозом / С.П.Орешкина, Т.М.Вилль, А.Р.Слепченко // Сб. науч. тр. ВНИИплем. М., 1986. - С. 71-72.

78. Орлова А.Р. Молекулярные аспекты резистентности и восприимчивости к гемобластозам крупного рогатого скота / А.Р.Орлова, Г.Е.Сулимова, И.Г.Удина // Молекулярно-генетические маркеры животных: Сб. науч. тр. -Киев, 1996. С. 66.

79. Особенности распространения антигенов BoLA- А и аллелей гена BoLA- DRB3 у черно-пестрого скота в связи с ассоциацией с лейкозом /

80. Л.К.Эрнст, Г.Е.Сулимова, А.Р.Орлова и др. // Генетика. 1997. -Т. 33 -№1. - С. 87-95.

81. Павленко С.П. Роль ВоЬА-системы в генетическом контроле резистентности к гемобластозам / С.П.Павленко, А.Р.Орлова, В.И.Романов // Молекулярно-генетические маркеры животных: Сб. науч. тр. — Киев, 1996. — С. 67.

82. Парфанович М.И. Некоторые аспекты специфической иммунопрофилактики онкорнавирусной инфекции и лейкоза крупного рогатого скота / М.И.Парфанович, В.М. Жданов, А.А.Лазаренко// Труды ВИЭВ М., 1983. -Т.59.-С. 59-64.

83. Патрушев Л.И. Экспрессия генов / Л.И.Патрушев. М.: Наука, 2000. - 527 с.

84. Петров Н.И. Оздоровление хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота / Н.И. Петров //Ветеринария, 1997. - №9. - С. 10-11.

85. Петухов В.Л. Ветеринарная генетика / В.Л.Петухов, А.И.Жигачев, Г.А. Назарова. М.: Колос, 1996. - 384 с.

86. Практикум по полиморфизму ДНК и белков./ Г.Е.Сулимова, Е.А. Сал-менкова и др. М., 2002. - 80 с.

87. Применение метода «гнездовой» ПЦР для диагностики лейкоза крупного рогатого скота / Л.Б.Прохватилова, Т.Б.Манин, С.Н.Колосов и др. // Проблемы инфекционной патологии с.-х. животных: Сб. науч. тр. — Владимир, 1997. С. 83-84.

88. Проблема лейкоза и пути ее решения в Республике Башкортостан / П.Я.Гущин, Ф.В.Шайнуров, И.Ф.Лукманов, И.Ш.Самигуллин // Современныенаучные и практические проблемы животноводства, ветеринарной медицины перспективы их решения Уфа, 1999. - С. 152-158.

89. Прохватилова Л.Б. Применение ПЦР для раннего обнаружения прови-руса лейкоза крупного рогатого скота у экспериментально инфицированных животных / Л.Б.Прохватилова, С.Н.Колосов, А.И. Ломакин// Ветеринария. 2001. - №8. - С. 17-19.

90. Разумовская В.В. Совершенствование мер борьбы с лейкозом крупного рогатого скота в Алтайском крае / В.В.Разумовская // Проблемы профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр. Екатеринбург, 1995. - С. 71-73.

91. Распространение онковирусной инфекции в длительно неблагополучном по лейкозу стаде крупного рогатого скота / Р.С.Москалик, Л.Е.Жуцкая, Г.К.Агоп и др. // Технология вет.обеспечения животноводства. Кишинев, 1988. - С.115-120.

92. Селекционно-генетическая оценка устойчивости крупного рогатого скота к болезням конечностей / Н.Н.Кочнев, Л.К.Эрнст, В. Л.Петухов, А.В.Косолапиков // Сельскохозяйственная биология. 2001. - №6. — С. 23-28.

93. Симонян Г. Лейкоз и молочная продуктивность / Г.Симонян // Животноводство. 1997. - №3. - С. 16-17.

94. Слепченко А.Р. Главный комплекс гистосовместимости сельскохозяйственных животных: иммуногенетические и популяционные аспекты / А.Р.Слепченко // Успехи современной генетики. 1994. - Вып. 19. - С. 178-205.

95. Слепченко А.Р. Изучение Главного комплекса гистосовместимости в свя-*зи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозам / А.Р.Слепченко, В.А.Крикун, С.П.Орешкина // Сб. науч. тр. ВНИИплем. М., 1983. - С. 83-86.

96. Смирнов П.Н. Практические аспекты лейкоза крупного рогатого скота / П.Н.Смирнов, В.В.Храмцов, В.В.Смирнова // Ветеринария. 1998. - №8. -С. 6-8.

97. Смирнов Ю.П. Лейкоз крупного рогатого скота в Нечерноземной зоне РФ: Автореф. дис.д-ра вет. наук / Ю.П.Смирнов СПб., 1995. - 43 с.

98. Смирнов Ю.П. Основные пути распространения лейкоза / Ю.П.Смирнов // Ветеринарная газета. 1999. - №4. - С. 3-4.

99. Смирнов Ю.П. Эпизоотологические аспекты лейкоза крупного рогатого скота и проблема мер борьбы / Ю.П.Смирнов // Проблемы инфекционной, инвазионной и незаразной патологии животных в Нечерноземной зоне РФ: Сб. науч. тр. Н.Новгород, 2001. - С. 12-17.

100. Смирнов Ю.П. Эффективность мероприятий при различных способах оздоровления от лейкоза стад крупного рогатого скота / Ю.П.Смирнов // Труды Свердловской н.-и. вет. станции. 1995. - Вып.10. - С. 68-70.

101. Смирнов Ю.П. Эффективность противолейкозных мероприятий в зависимости от кратности и интервалов серологических исследований / Ю П.Смирнов. //Ветеринария. 1991. - №11. - С. 29-30.

102. Состояние и перспективы борьбы с лейкозом крупного рогатого скота /М.И.Гулюкин, Н.В.Замараева, В.Н.Абрамов, И.И.Барабанов // Ветеринария. 1999. -№12.-С. 3-8.

103. Стародубцов В.М. Факторы, влияющие на устойчивость коров черно-пестрой породы к маститам / В.М.Стародубцов, В.А.Захаров // Животноводство. 1983. - № 4. - С. 43-45.

104. Сулимова Г.Е. Молекулярно-генетический анализ генома животных и человека с использованием ДНК- маркеров: Автореф. дис. докт. био'л. наук/ Г.Е.Сулимова. М., 1998. - 42 с.

105. Сулимова Г.Е. Полиморфизм длин рестриктных фрагментов ДНК. Методология и свойства / Г.Е.Сулимова // Сельскохозяйственная биология. — 1989. №1. - С. 60-67.

106. Сулимова Г.Е. Полиморфизм длин рестрикционных фрагментов ДНК у сельскохозяйственных животных: методы изучения и перспективы использования / Г.Е.Сулимова // Успехи современной генетики. — 1993. — Вып. 18. С. 3-35.

107. Сулимова Г.Е. ДНК маркеры и возможности их использования в ге-нетико-селекционных исследованиях / Г.Е.Сулимова / Молекулярно-генетические маркеры животных: Сб. науч. тр. - Киев, 1996. - С. 20.

108. Сулимова Г.Е. Генотипирование животных черно-пестрой породы крупного рогатого скота по локусу DRB3 системы BoLA / Г.Е.Сулимова, Д.В.Хныкин, И.Г.Удина / Молекулярно-генетические маркеры животных: Сб. науч. тр. Киев, 1996. - С. 20-21. ■

109. Удина И.Г. Генетические механизмы устойчивости к лейкозу у крупного рогатого скота / И.Г. Удина // ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр. Дубровицы, 2001. - С. 93-96.

110. Удина И.Г. Гены главного комплекса гистосовместимости человека и животных / И.Г.Удина // Успехи современной генетики. 1994. — Вып. 19. -С. 133-177.

111. Уфимцева Н.С. Влияние наследственных факторов на устойчивость-восприимчивость коров к некоторым заболеваниям / Н.С.Уфимцева, Е.В.Терентьева // Генетика устойчивости животных к заболеваниям: Сб. науч. тр. Новосибирск, 1992. - С. 6-12.

112. Федоров С.М. Генетический контроль предрасположенности к лейкозам крупного рогатого скота / С.М.Федоров, Т.М.Вилль, Т.П.Сторожилова // Распознавание и меры борьбы с лейкозом человека и животных: Сб. науч. тр. Москва, 1982. - С. 200-201.

113. Филатов П.В. О наследственной природе лейкоза крупного рогатого скота / П.В.Филатов, Е.А.Дун, Л.А.Князева // Труды ВИЭВ М., 1970 - Т. XXXVII.-С. 127-130.

114. Хатт Ф.В. Наследственная устойчивость домашних животных к заболеваниям / Ф.В.Хатт. М.: Сельхозиздат. 1963. - 239 с.

115. Шабалин В.П. Клиническая иммуногематология / В.П.Шабалин, Л.Д.Серова. Л.: Медицина, 1988. - 312 с.

116. Шинкаренко A.C. О генетической устойчивости крупного рогатого скота к лейкозу / А.С.Шинкаренко // Ветеринария. 1987. - №2. - С. 28-30.

117. Шишков В.П. Вирусо-иммуногенетическая теория этиологии, патогенеза и профилактики лейкозов и других гемобластозов животных / В.П.Шишков // Сб. науч. тр. ВНИИплем. М., 1983. - С. 67-68.

118. Шишков В.П. Оздоровление хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота / В.П.Шишков, Г.А.Симонян, П.Д.Колчин // Ветеринария. 1988. -№10.-С. 13-17.

119. Шишков В.П. Поэтапное оздоровление хозяйства от лейкоза / В.П.Шишков, Б.З.Иткин // Ветеринария. 1986. - №5. - С. 40-42.

120. Эпизоотическая ситуация по лейкозу быков-производителей / Г.А.Гаврилова, Ю.А.Макаров, С.В.Бахметьева, Я.Г.Диких // Ветеринария. -2003. №6.-С. 10-12.

121. Эпизоотическая ситуация по лейкозу крупного рогатого скота в Российской Федерации / М.И.Гулюкин, Л.А. Иванова, Н.В.Замараева и др. // Ветеринарная газета. — 2002. №10. - С. 4-5.

122. Эпизоотологическая оценка методов прижизненной диагностики лейкоза крупного рогатого скота / М.И.Гулюкин, Е.А.Дун, Н.В.Замараева и др. // Вестник РАСХН. 2000. - №3. - С. 60-62.

123. Эрнст JI.K. Наследование устойчивости к лейкозу животных бурой латвийской породы. / Л.К.Эрнст, А.А.Цалитис, Р.О.Гринберг // Вестник с.-х. науки. 1971. -№11. - С. 8-18.

124. Эрнст Л.К. Новые аспекты селекции крупного рогатого скота на устойчивость к лейкозу / Л.К.Эрнст, В.П.Шишков // Сельскохозяйственная биология. 1984. - №2. - С. 96-103.

125. Эрнст Л.К. Проблемы устойчивости сельскохозяйственных животных к болезням и пути их решения / Л.К.Эрнст // Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России: Сб. науч. тр. М., 1999 -Т. 1. - С. 25-37.

126. Эрнст Л.К. Современные проблемы селекции животных на резистентность к болезням / Л.К.Эрнст, Н.Г.Дмитриев, А.И.Жигачев // Сельскохозяйственная биология. 1979. - №3. - С. 345-347.

127. Яковлев А.Ф. Развитие методов оценки генотипов сельскохозяйственных животных / А.Ф.Яковлев // Цитогенетика и молекулярная генетика сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр. Л., 1987. - С.-5-19.

128. Amorena В. Bovine Lymphocyte Antigens (BoLA: A serologic, genetic and histocompatibility antigens) / B.Amorena, W.H.Stone // Tisaue Antigens. -1980. Vol. 16.-P. 212-225.

129. Andersson L. Analysis of class II genes of the chicken МНС (B) by use of human DNA probes / L.Andersson, C.Lundberg, L. Rask // Ibid. 1987. - Vol. 26. - P. 79-84.

130. Association between BoLA and subclinical bovine leukemia virus infection in a herd of Holstein Friesian cows / H.A.Lewin, M.-C.Wu, J.A.Stewart, T.J.Nolan // Immunogenetics. - 1988. - Vol. 27. - P. 338-344.

131. Association between BoLA-DRB genotypes and development of persistent lymphocytosis in bovine leukaemia virus-infected cows / M.J.T.Van Eijk, A.Xu, H.A.Lewin, N.E.Muggli-Cockett // Ibid. 1991. Vol. 1. -P. 99.

132. Association of BoLA antigens with production traits in cows / T.R.Barta, M.J. Stear, A.J. Lee, J.S. Gavora // Animal Genetics. 1989. - Vol. 20. - P. 32.

133. Bell J.I. The molecular basis of HLA-disease association / J.I.Bell, J.A.Todd, H.O.McDevitt // Adv. Human Genet. 1989. - Vol. 18. - P. 1-42.

134. Bernoco D. Soint report of the Fourth International bovine lymphocyte antigen (BoLA) Workshop / D Bernoco, H.A.Lewin, L Andersson // Ibid. 1991. -Vol. 22.-P. 477-496.

135. Bignon J.D. Selective PCR-RFLP method to distinguish HLA-DR1 from HLA-DR-"Br" (Dw Bon) alleles: Applications in clinical histocompatibility testing / J.D.Bignon, A.Casbron, M.L. Cheneau // Tissue Antigens. 1990. -Vol.30. -P. 171-173.

136. Biochemical characterization of class II bovine major histocompatibility complex antigens using cross-species reactue andobies / M.Hoang-Xu?n, D.Charron, M.T.Zilber, D.Levy//Immunogenetics. 1982. - Vol. 15. - P. 621.

137. Bodmer W.F. HLA structure and function: A contemporary view / W.F.Bodmer//Tiasue Antigens. 1981.- Vol. 17.-P. 9-11.

138. BoLA antigens are associated with increased frequency of persistent lymphocytosis in bovine leukemia virus / M.J.Stear, C.K.Dimmock, M.J.Newman, F.W.Nickolas //Animal Genetics. 1988. - Vol. 19. - P. 151-158.

139. Breed différencies in frequency of BoLA specificities / J.Caldwell, P.A.Cumberland, D.F.Weseti, J.D.Williams // Animal Blood. Groups, and Biochemie Genetics. 1979. - Vol. 10. - P. 93-98.

140. Brewerton D.A. Ankylosing spondylitis and HLA-27 / D.A.Brewerton, M.Caffrey, F.Hart // Lancet. 1973. - Vol. 1. - P. 904-997.

141. Brostorm H. Cell-mediated immunity in sarcoid'horses against sarcoid cells in vitro and association to MHC gene products / H.Brostorm, M.L.Dubath, S.Lazary // Animal Genetics. 1987. - Vol. 18. - P. 24-30.

142. Caetano-Anolles G. DNA amplification finderprinting: A strategy for genome analysis / G.Caetano-Anolles, B.J.Bassam, P.M.Gresshoff // Plant. Mol. Biol. Rep. 1991. - Vol. 9. - P. 292-305.

143. Gasati M.Z. Association of BoLA antigens with milk production traits in Hoistein Fresian cows / M.Z.Casati, G.Ceriotti, M.Polli // Animal Genetics -1991.-Vol. l.-P. 102.

144. Chardon P. Restriction fragment length poiymorphism of the major histocompatibility complex of the pig / P.Chardon, M.Vaiman, M.Kirszenbaum // Immunogenetics. 1985. - Vol. 21. - P. 161-171.

145. Cloning and sequense analysis of 14 DRB alleles of the bovine major histocompatibility complex by using the polymerase chain reaction*- / S.Sigurdardottir, C.Borsch; K.Gustafsson, L.Anndersson // Animal Genetics. — 1991. Vol. 22.-P. 199-209.

146. Cohn M. T cell inhibition of humoral responsiveness. II Theory on the role of restrictive recognition in immune regulation / M.Cohn, R.Epstein* // Cells Immunology. - 1978. - Vol. 39. - P. 125-153.

147. Collins1 W.M. Renponse of two*B (MHC) recombinants to Rous sarcoma virus -induced tumours / W.M.Collins, W.E.Briles // Anim. Blood Groups and Biochem. Genet. 1980. - Vol. 11. - P. 38.

148. Davies C.J. Comparison of three methods for bovine lymphocyte antigen class II typing: Serology, isoelectric focusing and restriction fragment length polymorphism / C.J.Davies, I Joosten, E.J. Hensen // Ibid. 1991. - Vol. 22. - P. - 26.

149. Davies C.J. Polymorphism of bovine MHC class I genes. Soint report of the fifth International bovine lymphocyte antigen (BoLA) Workshop. Interlaken, 1992.-P. 18-20.

150. Degos L. Le systeme HLA et ses applications en pathologie humaine / L.Degos, V.Lepage // Rev. med. 1981. - Vol. 22. - P. 1467-1472.

151. Dusinsky R. Study of bovine lymphocyte antigens in the Slovac pied breed population / R.Dusinsky, M.Simon, D.Nouzovska // Annu. Rep. Inst. Anim. Physiol. Slovak Acad.Sci. 1987. - Vol. 35-43.

152. Dyer P.A. Techniques used to define human MHC antigens: Serology / P.A.Dyer, S.Martin // Immunol, lett. 1991. - Vol. 29. - P. 9-14.

153. Evolution of MHC polymorphism: extensive sharing of polymorph sequence motifs between human and bovine DRB alleles / L.Andersson, S.Sigurdardottir, C.Borsch, K.Gustafsson // Immunogenetics. 1991. - Vol. 33. -P.-235-245.

154. Fries R. Assingment of an evolutionary conserved linkade group to bovine chromosome 15 / R.Fries, R Hediger, G. Stranzinger // Abst. of the XXI Intern, conf. on anim. blood groups and biochem. genet. Turin, 1988. - P. 33.

155. Gautschi C. Influence of major hictocompatibility complex on reproduction and production traits in swine / C.Gautschi, C. Gaillard // Animal Genetics. 1990.-Vol. 21.-P. 161-170.

156. Germain R.N. Influence of allelic polymorphism on the assembly and sur-faceexpression of class II MHC (la) molecules / R.N.Germain, D.M. Bentley, H.Quill // Cells. 1985. - Vol. 43. - P. 233-242.

157. Giles R.S. Structure, function and genetics of human class II molecules / Giles R.S., Capra J.D//Immunology. 1985.-Vol. 37.-P. 1-71.

158. Gyllensten U.B., Erlich H.A. Ancient roots for polymorphism at the HLA-DQa locus in primates / U.B.Gyllensten, H.A.Erlich // Ibid. 1989. - Vol. 86. -P. 9986-9990.

159. Hala K. Chicken major histocompatibility complex and disease / K.Hala, R.Boyd, G.Wick. // Scand. J. Immunol. 1981. - Vol. 14. - P. 607-616.

160. Hines H.C. Relationship of the bovine major histocompatibility complex with aspects of persistent lymphocytosis / leukaemia / H.C.Hines, E.Bailey,

161. C.A. Park // Animal Genetic. 1991. - Vol. 22. - P. 93.

162. Hines H.C. The association of BoLA antigens with milk production and animal blood groups and biochemical polymorphisms / H.C.Hines Gottingen, 1984. - 112 p.

163. HLA-Dqa polymorphisms: Oligonucleotide probes characterize the contribution of first and second domains to electrophoretic variants / B.S.Nepom,

164. D.A.Schwarz, J.V.Johnston, S.Radka // Ibid. 1989. - Vol. 25. - P. 257-267.

165. Johannsen R. HLA and disease associations / R.Johannsen // Immunology. 1981.-Vol. 5.-P. 331-345.

166. Johansson S. Extreme diversity in the bovine MHC class II region revealed by sequencing the DRB3 exon 2 from African cattle / S.Johansson, L.Andersson // XXIII Intern, conf. on animal genetics. Interlaken, 1992. - P.34.

167. Joosten I. MHC class I compatibility between dam and calf increases the risk of bovine retained placenta / I. Joosten, M.F.Sanders, E.J.Hensen // Animal Genetics. Vol. 22. - P. 114.

168. Kroemer G. Structure and expression of a chicken MHC class I gene / G.Kroemer, R.Zoorob, Ch.Auffrau // Ibid. 1990. - Vol. 31. - P. 405-409.

169. Kuzmak J. Diagnosis of bovine leukemia virus (BLV) infection in newborn calves by use of PCR / J.Kuzmak, B.Kozaczynska, L.Bicka / Bull. Veter. Inst, in Pulawy. — 1999.-Vol. 43.-P. 125-131.

170. Lanchbury J.S.S. Techniques used to define human MHC antigens: Mono-clonals, class I and class II, biochemistry / J.S.S.Lanchbury // Immunol, lett. -1991. Vol. 29.-P. 15-22.

171. Lazary S. Equine leucocyte antigens in sarcoid-affected horses / S.Lazary, H.Gerber, P.Glatt // Equine Vet. J. 1985. - Vol. 17. - P. 283-286.

172. Lewin H.A. Evidence for BoLA linked resistance and susceptibility to subclinical progression of bovine leukaemia virus infection / H.A.Lewin,

173. D.Bernoco // Animal Genetics. 1986. - Vol. 17. - P. 197-207.

174. Lewin H.A. Monoclonal antibodies that recognine bovine T and B-lymphocytes / H.A.Lewin, W.C.Davis, D.Bernoco // Vet. Immunol. Immunopathol. 1985. - Vol 9. - P. 87-102.

175. Lilly F. The inheritance of susceptibility to the gross leukaemia virus in mice / F.Lilly // Genetics. 1966. Vol. 53. - P. 529.

176. Lunden A. The relationship between major histocompatibility complex class II polymorphism and disease studied by use of bull breeding values / A.Lunden, S.Sigurdardottir, I.Edfords-Lilja // Ibid. 1990. - Vol. 21. - P. 221-232.

177. Maeda M. A simple and rapid method for HLA DQA1 genotyping by digestion of PCR-amplified DNA with allele-specific restriction endonucleasis / M.Maeda, N.Murayama, H.Ishii // Tissue Antigens 1989. - Vol. 34. - P. 290-298.

178. Mapping of bovine prolactin and rhodopsin genes in hybrid somatic cells /

179. E.M.Halleman, J.L. Theilman, J.S.Beckmann et. al. // Animal Genetics. 1988. -Vol. 19. -P. 123-131.

180. Marek's disease resistance in chickens affected by commercial parent stocks / W.E.Briles, R.W.Briles, D.L.Pollock, M.Pattison // Anim. Blood Groups and Biochem. Genet. 1980. - Vol. 11. - P. 27-28.

181. McGary D.R. Immunogenetic studies of cattle lymphocytes / D.R.McGary, W.H. Stone // Fed. Proc. 1970. - Vol. 29. - P. 508.

182. Mirsky M.L. Reduced bovine leukemia virus proviral load in genetically resistant cattle / M.L.Mirsky, C.D.Olmstead, H.A.Lewin / Anim. Genet. 1998. -Vol. 29. - P. 245-252.

183. Molecular map of the human major histocompatibility complex by pulsed-field gel electrophoresis / I. Dunham, C.A.Sargent, J.Trowsdale, R.Campbell // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1987. Vol. 84. - P. 7237-7241.

184. Mullis K. A specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase catalyzed chain reaction. / K.Mullis, F.Faloona // Meth. Enzymol. 1987. - Vol. 155. -P. 335-350.

185. Neredith D. Equine leukocyte antigens: Relationships with sarcoid tumors and laminitis in two pure breeds / D. Neredith, A.H.Elser, B.Wolf // Immuno-genetics. 1986. - Vol. 23. - P. 221-225.

186. Nucleotide seguence, polymorphism and evolution of ovine MHC / P.C.Scott, R.J.Gogolin-Ewens, T.E.Adams, M.R.Brandon // Ibid. -1991.- Vol. 34. P. 69-79.

187. Ostergard H. Cattle MHC (BoLA) class I variation and female fertility / H.Ostergard, P.Berg // Animal Genetics. -1991.- Vol. 1. P. 104.

188. Park C.A. Association between the bovine major histocompatibility complex and posterior spinal paresis in Holstein bulls / C.A.Park, H.C.Hines, D.R.Monke //Animal Genetics. 1991. - Vol. 1. - P. 94-95.

189. Pazderka R. Histocompatibility of chickens selected for resistence to Marek's disease / R.Pazderka, B.Longenecker, G.Law // Immunogenetics. -1975. Vol. 2. - P. 93-100.

190. Polymorphism in BoLA-DRB3 exon 2 correlates with resistance to resistant lymphocytosis caused by bovine leukemia virus / A.Xu, M.J.T.Van Eijk, C.A.Park et. al. //J. Immunology. 1993. - Vol. 151. - P. 6977-6985.

191. Polymorphism of class II MHC genes in the domestic fowl / R.Zoorob, G.Behar, C.Kroemer, C.Auffray // Animal Genetics. 1991. - Vol. 22. - P. 62-65.

192. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase / R.K.Saiki, D.H.Gelfand, S.Stoffel et. al. // Science. 1988. - Vol. 239.-P. 487-491.

193. Sachs D.H. Complementation between I region genes is revealed by a hybridoma anti la anribody / D.H.Sachs, M.El-Gamil, J.S.Arn // Transplantation. - 1981. - Vol. 31. - P. 308-310.

194. Schmutz S.M. Comparison of RFLP patterns between Holstein and Sim-mental cattle with DRB / S.M.Schmutz, Y.Plante, T.Berryere // Animal Genetics. 1991.-Vol. 22.-P. 53.

195. Serjeanson S.W. RFLP genomic typing in Polynesians and Melanesians / S.W.Serjeanson, B.S.White, E.C.Jazwinska // Human Immunology. 1987. -Vol. 20.-P. 145-153.

196. Serologically detected lymphocyte antigens in Holstein cattle / J Caldwell, C.F.Bryar, P.A.Cumberland, D.I.Weseli // Animal Blood Groups and Biochemie Genetics. 1977. - Vol. 8. - P. 187-207.

197. Sigurdardettir S. Cloning and characterization of highti polymorphic class II in cattle / S.Sigurdardettir, L.Andersson // Thes. XXI Int. conf. on Animal Blood Groups and Biochem. polymorphisms Turin, 1988. - P. 122.

198. Soint report of the third international bovine lymphocyte antigen (BoLA) Workshop / R.W. Bull, H.A.Lewin, K.Peterbaugh et. al. // Animal Genetics. -1989. Vol. 20. - P. 109.

199. Spooner R.L. Evidence for a poseible major histocompatibility complex (BoLA) in cattle / R.L.Spooner, H.Leveziel, F.Groscleuce // J. Immunogenetics.- 1978. Vol. 5. - P. 335-346.

200. Spooner R.L. Evidence for a possible major histocompatibility complex (BoLA) in cattle / R.L.Spooner, H.Leveziel, F.Grosclaude // J. Immunogenetics. 1978. - Vol. 5. - P. 335-346.

201. Stear M.J. Class I antigens of the bovine major histocompatibility system are weakly associated with variation in faecal worm egg counts in naturally infected cattle / M.J.Stear, T.J.Tierney, F.C.Baldock // Ibid. 1998. - Vol. 19. -P. 115-122.

202. Svejgaard A. Clinical implications of associations between HLA ana disease / A.Svejgaard, N.Morling, P.Platz // Clinical immunology and allergology.- 1981.-P. 121-128.

203. Takashima I. A preliminary study / I.Takashima, C.Olson // Ann. rech. vet.- 1982. Vol. 9. - P. 821-823.

204. Teodore L.G. Immunochimical and electrophoretic analysis of BoLA class I antigens / L.G.Teodore // Thes. XXI Int. conf. on Animal Blood Groups and Biochem. polymorphisms Turin, 1988. - P. 21.

205. The influence of chicker mayor histocompatibility on production traits in egg-laying hens / A.Lunden, I.Edfors-Lilya, M.Simonsen, L.E.Lilyedahl // Ibid.- 1991.-Vol. l.-P. 103-104.

206. Todd J.A. A molecular basis for MHC class II associated autoimmunity / J.A.Todd, H.Acha-Orbea, J.I.Bell // Science. 1988. - Vol. 240. - P. 1003-1009.

207. Trowsdale J. Molecular organization of the MHC molecules / J.Trowsdale // Immunol, lett. 1991. - Vol. 29. - P. 178.

208. Usinger W. Lymphocyte defined loci in cattle / W.Usinger, M.Curie-Cohen, W.Stone // Science. 1977. - Vol. 196. - P. 1017-1017.

209. Van Eijk M.J.T. Bovine lymphocyte antigen (BoLA) class II genes: Polymorphism, disease association and linkage relationship with the prolactin and BoLA-A genes / M.J.T. Van Eijk // Thesis Urbana (III), 1993.-365 p.

210. Van Eijk M.J.T. Extensive polymorphism of the BoLA-DRB3 gene distinguished by PCR RFLP / M.J.T.Van Eijk, S.A.Stewart-Haynes, H.A. Lewin // Animal Genetics. - 1992. - Vol. 23. - P. 483-496.

211. Walford R.L. Acute childhood leukaemia in relation to the HLA human transplantation genes / R.L.Walford, S.Rinkelstein, R.Neerhout // Nature. -1970. Vol. 225.-P. 461-463.

212. Walford R.L. Antibody diversity, histocompatibility sysyems, disease states and ageing / R.L.Walford // Lancet. 1970. - Vol. 2. - P. 1226-1229.

213. Weber J.L. Abundant class of human DNA polymorphisms which can be typed using the polymerase chain reaction / J.L.Weber, P.E.May // Amer. J. Hum. Genet. 1989. - Vol. 44. - P. 388-396.

214. White T.J. The polymerase chain reaction / T.J.White, N.Arnheim, H.A.Erlich // Trends Genet. 1989. - Vol. 5. - P. 185-189.

215. Williams J.L. Variation in BoLA class I antigens on bovine lymphocytes following infection with Theileria annulata / J.L.Williams, R.A.Oliver, R.L.Spooner // Animal Genetics. 1991. - Vol. 22. - P. 43.

216. Xu A. Characterization of bovine major histocompatibility complex class II genes using the polymerase chain reaction / A.Xu, H.A.Lewin // Animal Genetics. 1991. - Vol. 1. - P. 61-62.

217. Xu A. Polymorphism of bovine MHC class II genes: association with persistent lymphocytosis caused by bovine leukemia virus / A.Xu // Thesis University of Illinois-Urbana, 1992.-P. 145.

218. Yuhki N. DNA variation of the mammalian major histocompatibility complex reflects genomic diversity and population history / N.Yuhki, S.J.O'Brien // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1990. - Vol. 87. - P. 836-840.

Информация о работе

Шарифуллина, Наиля Мусагитовна
кандидата сельскохозяйственных наук
Уфа, 2005
ВАК 06.02.01

Диссертация

Полиморфизм гена BoLA-DRB3 в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозу крупного рогатого скота черно-пестрой и симментальской пород в условиях Республики Башкортостан - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы