Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi) на юге Приморского края

Маняхин, Артем Юрьевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi) на юге Приморского края
ВАК РФ 03.02.14, Биологические ресурсы

Автореферат диссертации по теме "Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi) на юге Приморского края"

0Q46Ulb?o

На правах рукописи

Маняхин Артем Юрьевич

Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi) на юге Приморского края (интродукция, состав флавоноидов, биологическая активность)

03.02.14 - биологические ресурсы

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 3АГ,Р20ю

Владивосток 2010

004601698

Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Горнотаежной станции им. В.Л. Комарова Дальневосточного отделения РАН

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Зориков Петр Семенович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор, чл.-корр. РАН Васьковский Виктор Евгеньевич

кандидат биологических наук Ухваткина Ольга Николаевна

Ведущая организация:

Федеральное Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Дальневосточный государственный аграрный университет, г. Благовещенск

Защита диссертации состоится "12" мая 2010 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 005.005.02 в Учреждении Российской академии наук Тихоокеанском институте биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН по адресу: 690022, г. Владивосток, проспект 100 лет Владивостоку, 159, ТИБОХ ДВО РАН.

Тел.: 8(4232)31-14-09 Факс: 8(4232)31-40-50 E-mail: komand@piboc.dvo.ru

С диссертацией можно ознакомиться в филиале Центральной научной библиотеки ДВО РАН (библиотеке Тихоокеанского института биоорганической химии ДВО РАН г. Владивосток, пр-т. 100 лет Владивостоку, 159). Текст автореферата размещен на сайте совета http://www.piboc.dvo.ru

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат химических наук, доцент

Н.А. Командрова

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Известно, что из произрастающих на Земле высших растений

лишь около 10-15 % исследовано на наличие биологически активных веществ. Такие исследования требуют серьезного вложения материальных средств. Поэтому первостепенное значение приобретают анализ информации уже накопленной в академической и народной медицине о растениях; разработка системного подхода к изучению лекарственного растительного сырья, рациональное использование дикорастущих и культивируемых растений. Требуется реализация новых подходов в создании фитопрепаратов, внедрение современных фюико-химических методов их стандартизации [Завражиов, 1993].

В современной фармацевтической науке существует ряд критериев для оценки лекарственного растительного сырья. С одной стороны, научные исследования химического состава растений показывают широкие возможности получения веществ или лекарственных препаратов с различной фармакологической активностью. С другой стороны, используемая технология переработки растительного сырья, как правило, ориентирована на получение только одного целевого продукта Сложившаяся на сегодняшний день практика промышленной переработки сырья очень часто не отражает степень его изученности. Преодоление этого противоречия, возможно путем внедрения новых подходов к оценке качества сырья и использования комплексных ресурсосберегающих технологий. Предпосылкой да внедрения таких технологий является изучение химического состава лекарственных растений, условий их произрастания, основных физико-химических свойств биологически активных соединений, разработка наиболее подходящих методик экстракции этих веществ.

Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Geoigi, сем. Lamiaceae) является одним из примеров нерационального использования сырья. Истощение запасов природного сырья, массовое исчезновение популяций дикорастущего растения под антропогенным прессом, постояшшй рост спроса промышленности и населения на сырье этого растения вызывает необходимость введения сырья в культуру и более полного и комплексного его использования. [Бухашеева, Асеева, 2002].

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение биологических особенностей S. baicalensis в условиях культивирования и природной популяции с оценкой перспективы его выращивания в условиях юга Приморского края как источника растительных попифенолов, а также разработка методов определения качественного и количественного содержания биологически активных веществ и максимального извлечения суммы флавоноидов из сырья.

Для достижения поставленной цели исследования были определены следующие задачи:

1) изучить биоморфологические особенности и ритм сезонного развития 5. Ьтсакти в условиях культивирования на юге Приморского края;

2) сравнить биоморфологические показатели, семенную продуктивность и биопродуктивность растений из природных популяций и выращенных в условиях интродукции;

3) изучить особенности накопления байкалина и других полифенольных соединений в подземных и надземных органах растения при выращивании в условиях юга Приморского края и природных популяциях;

4) определить оптимальные условия экстракции флавоноидов из корней (способ экстракции, тип растворителя, соотношение сырье - экстрагент, температура и продолжительность экстракции);

5) определить качественный и количественный состав флавоноидов в экстрактах;

6) исследовать биологическую активность флавоноидов культивируемого 5. Ьакакп.т на экспериментальных животных.

Научная новизна работы.

Впервые проведено изучение состояния агропопуляции ¿а/сд/е«^« на юге Приморского края (Хасанский район, окрестности пос. Краскино) и показано, что растение характеризуется высоким содержанием байкалина и других полифенольных соединений. Изучены биологические и морфологические особенности развития интродуцента (семенная продуктивность и урожайность). Изучена динамика накопления и распределения по органам растения полифенолов в условиях юга Приморского края и научно обоснованы оптимальные сроки заготовки сырья. Впервые исследована возрастная структура природной популяции (Октябрьский район, окрестности с. Чернятино).. Исследована биологическая активность полифенолов культивируемого сырья.

Практическая ценность. Разработаны методы интродукции 5 Ьшса1ет15 на юге Приморского края. Даны рекомендации по выращиванию и использованию интродуцента. Разработана схема экстракции без использования токсичных растворителей.

Материалы диссертации используются в технологической схеме культивирования ЬтсаЬтЬ, образовательном процессе при решении вопросов экологического воспитания и образования школьников и студентов края, а также для организации просветительной работы с населением. На основании проведенных исследований, решением Государственной комиссии РФ по испытанию и охране селекционных достижений, 5. Аа/са/ети включен в Государственный реестр селекционных достижений, допущенных к использованию как «Шлемник байкальский Муссон».

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на Всероссийской научной конференции «Состояние лесов Дальнего Востока и актуальные проблемы лесоуправления» [Хабаровск, 2009]; 10-й международной очно-заочной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых исследователей «Интеллектуальный потенциал вузов - на развитие Дальневосточного региона и стран АТР» [Владивосток, 2008], 2-ой международной конференции «Химия, технология и медицинские аспекты природных соединений» [Казахстан, 2007]; всероссийской, конференции молодых ученых «Экология в современном мире: взгляд научной молодежи» [Улан-Удэ, 2007], 11-ой всероссийской конференции «Экосистемы, организмы, инновации» [Москва, 2009].

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе 4 статьи в рецензируемых журналах, входящих в список ВАК.

Структура и объем

Работа изложена на 134 страницах, содержит 22 рисунка, 18 таблиц и 6 приложений. Диссертация состоит из введения, 3 глав, выводов, списка используемой литературы (259 источников, в том числе 162 на русском языке и 97 на иностранных).

Глава 2. Материалы и методы

Полевые исследования по интродукции популяции 5. baicalensis проводились на базе открытого акционерного общества «Юбиком» (Приморский край, Хасанский район). Природная популяция изучалась в окрестностях с. Чернятино Октябрьского района Приморского края общепринятыми методами [Зайцев, 1972; Кузнецова, 1974; Миркин и др., 2000; Морозова и др., 1997; Муравьева, 1991; Пименова и др., 1998].

Изучение семенной продуктивности и урожайности проводили как описано в литературе [Методические..., 1980; Положий и др., 1988].

Экстракты готовили с использованием воды и различных концентраций этилового спирта (0-96 %), варьировали параметры времени, температуры, соотношения сырье : экстрагент, степени измельчения сырья. По окончанию экстрагирования экстракт оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Для проведения ультразвуковой экстракции нами использовалась УЗ ванна «Сапфир» с термостатом. Время воздействия ультразвука - 15 мин первичного озвучивания для активного проникновения экстрагента в сырье и непосредственное время ультразвуковой экстракции в течение 20; 30; 40 минут, при комнатной температуре. Вакуум-фильтрацию проводили на установке ПВФ 47/4 (Россия). Полученные экстракты высушивали с помощью сублимационной сушки Martin Christ Alpha 1-2 (Германия).

Количественное определение байкалина и других полифенольных соединений в сухом экстракте проводили методом обрашено-фазовой высоко эффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на хроматографе Shimadzu LC-10VP (Япония). Идентификацию пиков байкалина проводили, сравнивая время удержания стандарта с хроматограммами испытуемых растворов образца. Концентрацию байкалина определяли по стандартной программе для хроматографа с учетом влажности стандарта и образцов.

Методы исследования биологической активности экстрактов S. baicalensis на экспериментальных животных. В работе использовали 80 белых беспородных половозрелых мышей-самцов массой 20-25 г, 63 беспородных крыс-самцов с исходной массой тела 140-160 г. Животных содержали в стандартных условиях вивария на стандартном пищевом рационе, при свободном доступе к воде и естественном световом режиме с соблюдением всех правил и международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных работах [European..., 1986] и разрешения комиссии по биомедицинской этике при Горнотаежной станции ДВО РАН. При разделении животных на группы проводили ранжирование по массе тела и возрасту.

Влияние техногенного загрязнения моделировали на мышах. Для этого добавляли в их пищу в течение 20 дней по 1 г на особь в день измельченных листьев липы (Tilia amurensis Rupr.) из двух районов г. Владивостока с различным уровнем техногенного загрязнения (ТЗ). Уровень загрязнения в районе с минимальной техногенной нагрузкой (Ботанический сад) составлял по значению индекса загрязнения атмосферы (ИЗА) величину 2,58, тогда как в районе с максимальной техногенной нагрузкой (Луговая, г. Владивосток) ИЗА составлял 6,3 [Ежегодный...,2008]. Животные были разделены на 4 группы по 10 особей в каждой. В 1-ой (фоновое техногенное загрязнение) группе животным в пищу добавляли листья липы из района с минимальным техногенным загрязнением; во 2-й (максимальное техногенное загрязнение) группе - в пищу добавляли листья липы из района с максимальным техногенным загрязнением; в 3-й опытной группе - в пищу добавляли листья липы из района с максимальным техногенным загрязнением + сухой экстракт шлемника (10 мг/кг); 4-й опытной группе в пищу добавляли листья липы из района с максимальным техногенным загрязнением + препарат сравнения - I мл/кг ранее изученного в нашей лаборатории экстракта патринии скабиозолистной (ЭПС) {Patrinia scabiosifolia Fisch, ex Link) [Зорикова, Хасина, 2005].

Алкогольный гепатит вызывали у крыс контрольной и опытной групп введением в желудок 40% этилового спирта по 0,7 мл на 100 г массы крыс 1 раз в сутки в течение 21 дня [Мансурова, Олимова, 1985]. Животным опытной группы вводили в желудок сухой

экстракт шлемника байкальского (СЭШБ) в дозе 10 мг/кг в водном растворе объема 1мл, 1 раз в день на протяжении 21 дня. Интервал между введениями СЭШБ и этанола соответствовал 5-6 часам. Животные интактной группы получали в соответствующем объеме дистиллированную воду.

О степени антиоксидантной эффективности СЭШБ судили по следующим показателям: активность перекисное окисление липидов (ПОЛ) контролировали посредством определения содержания малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови и гомогснате печени по методу И. Д. Стальной и Г. Г. Гаришвили 11977], каталазную активность сыворотки крови определяли методом Г. А. Бабснко, М. Н. Гайнацкого [1976] на 7, 14 и 21-е сутки эксперимента. Статистическая обработка полученных данных проведена с использованием критерия Стьюдента.

Физиологические методы исследования СЭШБ в дозе 10 мг/кг в водном растворе объема 1мл, вводили животным (группа 3) в желудок через зонд. Контрольные группы мышей получали соответствующий объем дистиллированной воды (группа 1 и 2) или препарат сравнения (группа 4) - жидкий экстракт патринии скабиозолистной (ЭПС) в дозе 1 мл/кг по аналогичной схеме.

Для исследования ориентировочно-двигательной активности (ОДА) применяли тест «открытое поле» (ОП) Время наблюдения за поведением мыши - 5 минут. В поведении животного выделяли следующие визуально идентифицируемые поведенческие акты, пересечение диаметров (пробеги), пересечение окружностей (переходы), число актов груминга и замирания, число стоек с опорой на стенки и без опоры. После 5 минут исследования животное возвращали в клетку и тщательно протирали пол после каждого теста.

Метод исследования поведения в приподнятом крестообразном лабиринте (ПКЛ) основан на безусловно-рефлекторном страхе падения с высоты и открытых пространств у 1рызунов [Dawson, Tricklebank, 1995]. Время, проведенное в открытых рукавах ПКЛ, обратно пропорционально уровню тревожности. Таким образом, чем выше показатель предпочтения открытых рукавов лабиринта закрытым, тем ниже уровень тревоги у животных и наоборот. В ходе эксперимента животное помещали на центральную площадку лабиринта и в течение 5 минут визуально регистрировали его поведенческие акты. Рассчитывали индексы тревожного поведения. Эти показателя являются стандартными в методике оценки тревожности лабораторных животных. Чем ниже показатели, тем выше тревожность и наоборот [Воронина, Островская, 1998].

Глава 3. Результаты и обсуждение

3.1. Условия интродукции.

Интродукционные площадки располагались в Хасанском районе Приморского края, окрестности пос. Краскино (42° 44' с.ш., 130° 46' в.д.). Для агрохимической характеристики смешанных образцов почвы были выполнены следующие анализы: содержание гумуса, актуальная кислотность, обменная кислотность, гидролитическая кислотность, содержание подвижных форм фосфора и калия.

Все определения выполнены для трех проб почвы. В табл. 1 представлены средние значения агрохимических характеристик. Пробы 1, 2, 3 соответствуют интродукционным участкам: 1 - уклон 3°, высокий уровень грунтовых вод; 2 - уклон до 6°, высокая минерализация почвы; 3 - отсутствие уклона, средний уровень грунтовых вод.

Таблица 1

Агрохимические показатели почв

Образец Гигроскопическая влажность, % Гумус, % Гк мэкв/1 ООг почвы рН К20 | Р205

НгО КС1 мг/100 г почвы

Проба 1 3,52 4,68 12,06 5,24 3,97 15,98 0,13

Проба 2 5,15 0,27 3,12 6,12 4,21 6,33 0,11

Проба 3 3,41 4,46 12,97 5,11 3,96 6,90 0,16

3.2. Биологические и морфологические особенности развития интродуцента

При подзимнем сроке посева проростки появляются в середине апреля, при весеннем - в третьей декаде апреля, на 14-16 день после посева.

Опадание семядолей означает переход особей шлемника в ювенильное стояние. Для ювенильных особей характерно наличие одного осевого побега, несущего 5-6 пар настоящих листьев, не отличающихся по морфологическим особенностям от листьев проростков и взрослых растений, но увеличивающихся по размерам в акропетальной последовательности. В ювенильном состоянии побег достигает 10-12 см высоты. Стержневой корень проникает в почву на глубину 3-5 см. Главный побег продолжает моноподиальное нарастание, достигает 25-40 см высоты и несет до 18-20 пар листьев. Число боковых побегов 1-го порядка увеличивается до 6-8 пар. На боковых побегах 1-го порядка, образовавшихся из почек, находившихся 4-5-й пары листьев, формируются побеги 2-го порядка. В течение первого года жизни 100% особей переходят из прегенеративного состояния в генеративное. Однолетние особи зацветают в конце лета (в августе), образуют полноценные семена. Осенью, к концу сентября, на корневой шейке закладываются почки возобновления, из которых в следующем году развиваются новые побеги.

Двулетние особи несут вегетативные и генеративные почки, которые трогаются в рост рано весной. Массовое отрастание отмечено в третьей декаде апреля. Из почек развиваются однолетние побеги, несущие одну весенне-лстне-осеннюю генерацию листьев. В конце апреля молодые побеги достигали длины 5-7 см с 4-6 парами листьев, длиной 4,0-1,2 см, ширины 0,15-1,3 см. В последующем наблюдается интенсивный рост побегов и формирование растения. Через месяц растения достигали 30-40 см высоты, а диаметр - 50-60 см, количество побегов было в пределах 40-60 шт. Цветение начиналось 15-20 июля, т.е. в среднем через 70 дней после массового отрастания. Массовое цветение отмечено в конце июля (27.07.), в эту фазу особи достигли максимальной высоты до 60 см. Распускание цветков происходило в акропетальном направлении с центрального побега, вслед за которым распускались цветки из с соцветий на боковых побегах 1 порядка, а затем и 2 порядка. Продолжительность цветения S. baicalensis составляла 60-70 дней. Период созревания семян отмечен в конце августа. Фаза созревания семян не зависит от возраста генеративных растений. Возраст генеративных растений не влияет на сроки наступления и прохождения фенологических фаз, в то время как метеорологические условия вегетационного периода могут сдвинуть сроки прохождения отдельных фаз развития. Вслед за распусканием цветков на центральном побеге распускаются цветки соцветий на боковых побегах 1-го порядка, затем 2-го порядка. Длительность цветения одного цветка 2-5 дней, фаза цветения около 60-70 дней.

Период образования семян и их созревания примерно равен периоду цветения (5565 дней). Длительность фазы созревания семян не зависит от возраста генеративных растений и сроков посева (подзимнего и весеннего). Форма и положение чашечки цветка в период созревания семян не меняются по сравнению с фазой цветения, окраска же ее становится темно-фиолетовой. Из четырех эрем, находящихся в ценобиях, созревают от 2 до 4. К концу октября, с наступлением заморозков, побеги вместе с листьями отмирают. В таком состоянии растения зимуют. Вегетационный период длится 225-300 дней.

3.3. Семенная продуктивность и урожайность S. baicalensis а культуре и природной популяции

В вегетационный сезон 2008 г. было проведено обследование arpo- и природной популяций S. baicalensis. У культивируемых растений зафиксированы следующие показатели: среднее число семян в коробочке 2,7 ± 0,005, среднее число генеративных побегов на 1 растение 6,73 ± 0,03. Потенциальная семенная продуктивность на 1 генеративный побег составляет 251,25 ± 14,6 шт., реальная - 168,99 ± 11,9 шт. Наличие полноценных семян - один из основных показателей соответствия условий произрастания биологическим потребностям вида. Это положение подтверждается высоким

коэффициентом семенной продуктивности интродуцента, который равен 67%, что свидетельствует о хорошей адаптации вида к условиям культивирования.

В природной популяции S. baicalensis в вегетационный период 2008 г среднее число семян в коробочке было равно 2,2 ± 0,005, число генеративных побегов на 1 растение - 4,32 ±0,03. Потенциальная семенная продуктивность растения составляет 123,76±10,3 шт., реальная - 64,8±15,7 шт. Коэффициент семенной продуктивности в природной популяции несколько ниже, чем в культуре и составляет 52,4%.

Качество семян определяется размерами, массой 1000 штук и проверкой на всхожесть. В результате исследования природной популяции оказалось: величина семян составляет 1,8±0,01 мм; масса 1000 семян 1,27±0,05 г. Для культивируемых растений аналогичные показатели равны, соответственно: 2,35±0,01 мм и 1,83±0,03 г. Установлено, что в результате интродукции линейные размеры семян возросли на 30,6 %, вес - 44,1 %.

Для установления ценности полученных при культивировании семян как посевного материала проведены опыты по определению лабораторной всхожести семян. При температуре 25° С прорастание семян начиналось на 3 сутки после закладки. Энергия прорастания семян на 5 день в ipynne без периода покоя составила 37%, у семян годовой выдержки - 32%, лабораторная всхожесть на 10-е сутки равнялась, соответственно 52 и 41%. Анализ значений энергии прорастания и всхожести семян S. baicalensis показал, что при хранении указанные показатели несколько снижаются, приближаясь к показателям природных популяций.

Нами была определена урожайность надземных и подземных частей S. baicalensis на трех интродукционных площадках и в дикой популяции (табл. 2). Наибольшая плотность генеративных особей отмечена на площадке 3, но при этом эксплуатационный запас корней на данном участке является самым низким. Максимальная урожайность корней приходится на площадку 2 при минимальной плотности посадки.

Таблица 2.

Сырьевые ресурсы 51. baicalensis в условиях интродукции и природной популяции

Модельная площадка Плотность роста, экз/ м Эксплуатационный запас корня, кг/га Эксплуатационный запас травы, кг/га

Интродукционная площадка 1 18,6 3200 1143,2

Интродукционная площадка 2 13,4 7475,3 3280,0

Интродукционная площадка 3 21,6 712,8 1468,8

Природная популяция 4,4 954,4 2553,1

3.4. Накопление флаионондок в условиях культивирования и в природной популяции

Результаты исследования корней растений 2-го года культивирования хроматографическим методом показали, что в течение сезона качественный состав фенольных соединений остается постоянным, хотя количественно их характеристики изменяются. Количественная ВЭЖХ показала изменение содержания основного флавоноида - байкалина по фенологическими фазами. Максимальное содержание ею (14,9 % от абс. сух. сырья) приходилось на весенний период. В фазу цветения (июль-август) содержание байкалина в корнях значительно снижалось - до 5,5 %. В начальный осенний период, в фазе формирования семян, количество байкалина несколько увеличивалось (8,3%), и по мере созревания семян продолжало возрастать, хотя и не достигло максимума. В конце октября, к завершению вегетационного цикла, содержание флавоноида в корнях еще более увеличивалось, и приближалось к максимальным значениям (12,5 %).

Определение возрастной динамики накопления флавоноидов проведено на образцах сырья 2- и 3-го года интродукции. Результаты анализа, отраженные в таблице 3, выявили, что на фоне сезонной изменчивости, описанной выше, видно увеличение содержания флавоноидов с возрастом растений.

Для растений 3-го года содержание байкалина в фазы начала вегетации на 23,4 %; цветения - 26,8 %; диссеминации - 46,8 %; конца вегетации - 36,5 % больше, чем в соответствующие фазы растений 2-го года вегетации. Для минорных флавоноидов, в аналогачные фазы, увеличение составляло 14,7 %; 44,3 %; 42,1 %; 21,9 % соответственно. Накопление суммы флавоноидов на 3-м году интродукции по сравнению с показателями 2-го года возросло на 19,7 %; 34,0 %; 44,7 %; 30,3 % в соответствии с фенофазами.

Таблица 3

Динамика накопления флавоноидов & Ьтса1еп$1$ в условиях интродукции (%, уу/уу)

Скутел лярин Байкал ин Норвог ин Орозил ин Вогони н-7-0 Байкал еин Вогони и Хризик Общ. минорн

2- год, начало вегетации 3,3 23,9 2,1 1,1 5,8 3,9 2,6 1,0 19,8

З-.год, начало вегетации 3,8 31,2 2,6 2,0 7,0 3,9 2,7 1,0 23,2

2-й год, цветение 1,8 12,6 0,9 1,0 0,3 2,3 0,3 0,2 6,8

3-й год, цветение 2,7 17,2 1,3 1,2 4,1 2,3 0,4 0,2 12,2

2-й год, диссеминация 2,7 15,8 1,5 1,2 4,1 2,9 0,5 0,2 13,1

3-й год, диссеминация 3,7 29,7 2,8 2,0 6,7 4,0 2,6 0,9 22,6

2-й год, конец вегетации 3,9 19,3 2,4 1,7 0,7 5,5 ■ 2,3 1,1 17,5

3-й год, конец вегетации 3,7 30,4 2,7 2,3 5,9 4,2 2,6 1,2 22,4

Результаты изучения содержания флавоноидов в различных органах растений свидетельствуют о различиях отдельных частей растений по составу и содержанию этих соединений. Исследование распределения флавоноидов по органам & Ьтса1еп.ш проводили на сырье, собранном в фазу диссеминации, когда количество флавоноидов в корнях растений приближается к максимальным значениям. Исследование показало (рис. 1), что главный флавоноид - байкалин - в основном содержится в подземных органах, ценным сырьем является как основной корень, так и его нижние и верхние мелкие боковые корни, которые часто удаляют при заготовках сырья.

Оверхняя часть стебля ¡3 нижняя часть стебля

Ш прикорневищная часть корня

(О срединная часть корня □ нижняя часть корня О верхние доп. корни 0 нижние бок. корни

Рис. 1. Содержание байкалина в органах растения, % от сух. сырья

Так как в стеблях содержание байкалина достаточно мало, их использование в качестве сырья не представляется рациональным.

Приведенные данные по анализу культивируемых растений показали, что наибольшее количество флавоноидов в корнях 5. Ьакактви наблюдается в фазах начала и завершения вегетации у растений 3-го года вегетации. Накопление основного флавоноида -байкалина происходит в подземной части растения, причем во всех частях корня.

Сумма флавоноидов в природном сырье составляет 18,4% от сухого веса, минорных флавоноидов - 10,3%. Таким образом, сопоставляя эти данные с показателями для растений в фазе цветения, можно видеть, что в условиях культуры накопление основного флавоноида - байкалина, возрастает более чем в два раза, тогда как на накопление минорных флавоноидов процесс интродукции оказал менее выраженное воздействие.

3.5. Изучение процесса экстракции корней шлемника байкальского и получение сухого экстракта

С целью установления оптимальных параметров процесса экстракции сырья -корней интродуцированного шлемника байкальского и максимально полного извлечения целевых веществ провели исследование процесса экстракции в различных режимах. Экспериментально установленные оптимальные параметры (табл. 4) были применены для получения сухого экстракта корня 5. ЬшсЫегкгх.

Сухой экстракт шлемника байкальского (СЭШБ) представляет собой коричневый порошок с характерным запахом и горьковато-вяжущим вкусом. Порошок гигроскопичен, при влажности экстракта выше 4% теряется сыпучесть и начинается комкование.

Таблица 4.

Оптимальные параметры экстракции сырья корня S. baicalensis _

Параметр Значение

Степень измельчения сырья 0,5 - 1 мм

Тип экстрагента очищенная вода

Соотношение сырье : экстрагент 1:20

Температура экстракции 60-70° С

Время экстракции 3 часа

Для определения качественного и количественного состава СЭШБ применяли метод ВЭЖХ. Результаты показаны в табл. 5. Экстракт содержал 16% целевого вещества -байкалина, что превышает стандартные требования к качеству экстрактов из природного сырья - 10 % [Лекарственное..., 2006], полный набор минорных флавоноидов составлял 11,9 % и общая сумма флавоноидов - 27,9 %.

Таблица 5

Содержание флавоноидов (байкалина и минорных) в сухом экстракте корня

культивированного шлемника байкальского (%w/w)

Скутел лярин Байкал ин Норвог онин Орозил ин Вогони н-7-G Байкале ин Вогони н Хризин Общ. минорн ые

СЭШБ 2,7 16,0 1,1 1,6 0,5 3,7 1,6 0,7 11,9

Масса сухого экстракта (сумма экстрактивных веществ), полученная из 30 г корня составляла 12,81 г, это соответствует 42,7 % от взятой для экстрагирования навески. Этот показатель превосходит стандартные требования по извлечению из корней шлемника не менее 30 % экстрактивных веществ [Лекарственное..., 2006].

Ультразвуковой (УЗ) метод экстракции показал результаты, сходные с традиционным методом. Содержание байкалина составило 16,2 % - 16 % при экстракции. Степень извлечения минорных флавоноидов так же близка к полученной при обычной экстракции (11,9 %). Это свидетельствуют о пригодности УЗ метода экстракции, бесспорным преимуществом которого является существенное снижение времени экстракции - с 4 часов до 40-60 минут.

3.6 Технологическая схема получения сухого концентрата флавоноидов из шлемника байкальского, выращенного на юге Приморского края

С любезного предложения технологической лаборатории Unigen Korea, дочерней фирмы корпорации Econet, была предоставлена для апробации на выращенном сырье технологическая схема получения концентрата флавоноидов (рис. 2).

Все ранее подобранные оптимальные параметры процесса экстракции были введены в основу балансовой загрузки, на основании которой проводилась апробация предложенной схемы.

Экстрагирование и выделение суммы флавоноидов из водного экстракта корней S. baicalensis проводилось по следующей схеме:

• Измельчение растительного сырья

• Получение суммы экстрактивных веществ

• Получение целевого концентрата

В результате переработки 1050 г измельченного сырья было получено 220 г сухого концентрата флавоноидов, что достаточно близко к расчетным показателям - 234,96 грамм.

Scutellaria baicalensis (корень)

& Водная экстракция (2 раза)

Суммарный экстракт

-а +ЫаОНт> рН=8

Изменение цвета до темно-коричневого

\ V 7 1.+ 2М НЛО4 до рН- 2 2. 1 час на водяной бане I = 65±5°С 3. отстаивание в течение 12 часов 4. фильтрование

Выпадение желтого осадка (сумма флавоноидов) >70%

д Промывка чистой водой 2-3 раза, сушка

Scutellaria baicalensis -концентрат суммы флавоноидов

Рис. 2. Схема процесса выделения суммы флавоноидов из корней шлемника байкальского

Сухой концентрат флавоноидов представляет собой зеленовато-желтый порошок без запаха, с горьким вкусом. Порошок гигроскопичен, комкуется. Исследование качественного и количественного состава концентрата (табл. 6), показало наличие всего спектра идентифицируемых флавоноидов, как гликозилированных, так и агликонов. Количество суммарных флавоноидов составляет 94,7% для образца 1, и 94,8% для образца 2, что говорит о высокой чистоте полученного продукта. При этом, содержание байкалина в обоих случаях составляло не менее 70%.

Таблица б

Содержание флавоноидов (байкалин и минорные) в концентрате флавоноидов корня шлемника байкальского (%

Год вегетации Скугс лляри н Байка лин Норвогон ин Орози лин Вогон ин-7-G Байка леин Вогон ин Хрши н Общ. Мино рные

2- год, начало вегетации 1,9 77,5 1,7 2,4 6,1 3,3 1,2 0,3 16,9

3-год, начало вегетации 1,9 78,1 1,7 2,5 6,1 3,3 1,0 0,2 16,7

Применение технологии, предложенной «Unigen Korea», показало, что сырье

выращенное в Хасанском районе Приморского края на базе ОАО «Юбиком», окрестности пос. Краскино, содержит достаточное количество целевых соединений (флавоноидов) и пригодно для создания концентратов высокого качества. Разработанная нами технология на базе корейской с оптимизацией некоторых стадий процесса позволяет практически исчерпывающе извлекать биологически активные вещества из сырья, что, несомненно, способствует рационному использованию биоресурсов, и, косвенно, сохранению природных популяций 5. Ьтса1ет15.

3.7. Биологическая активность сухого экстракта шлемника байкальского из интродуиированного сырья

Методом «открытого поля» (ОП) исследовали влияние экстракта шлемника байкальского (ЭШБ) на интегративные этологические реакции лабораторных мышей. Как видно из данных, представленных в табл. 7, введение ксенобиотиков вызывает у особей 2-й контрольной группы - максимальное техногенное загрязнение (МТЗ) достоверное изменение всех этологических показателей.

Таблица 7.

Действие ЭШБ при сочетанием действии с ТЗ на этологические реакции в

«открытом поле»

Показатели Группы животных

ДА Фоновое Максимальное МТЗ+ МТЗ+

ТЗ ТЗ (МТЗ) СЭШБ эпс

Пробежки 19,7±0,50 7,9±0,23* 21,4±0,84** 21,0±0,40**

Переходы 6,4±0,20 1,9±0,80* 6,1±0,44** 5,5±0,03**

Заглядывания 7,4±0,42 2,7±0,50* 7,3±0,80** 6,9±0,40**

в лунки

Стойки 5,4±0,50 1,2±0,72* 5,5±0,33** 5,5±0,02**

Груминг 5,7±0,22 12,1±3,47 * 6,1±0,30** 5,8*0,07**

Дефекация 1,9±0,35 3,8±0,47 * 1,5±0,02** 1,5±0,10**

*р<0,005 по сравнению с фоновым уровнем ТЗ **р<0,005 по сравнению с максимальным уровнем ТЗ

Горизонтальная поисковая (пробежки, переходы) и вертикальная

исследовательская (заглядывания в лунки, стойки) активность животных группы М'ГЗ

значимо понижается соответственно на 60 и 70,3 % для первых и 63,5 и 77,8 % для вторых групп показателей. Угнетение поисковой и исследовательской активности свидетельствует о сужении сферы когнитивного поведения, что характерно для стрессовых ситуаций. Эмоциональная активность животных группы МТЗ увеличилась в два раза, как для числа актов груминга (108,6%), так и для числа дефекационных болюсов (100%). Увеличение уровня дефекации и частоты груминга отражают усиление тревожности мышей. Сочетание понижения уровня исследовательской активности животных и развитие эмоциональной реакции страха отражает возрастание тревожности. Подавление двигательной поисковой (пробежки и переходы) и исследовательской (заглядывания и стойки) активности одновременно с эмоциональным возбуждением (дефекационные болюсы и груминг), свидетельствуют о происшедшем под действием техногенного загрязнения (ТЗ) сдвиге эмоционально-мотивационного статуса животных и повышении уровня неспецифической возбудимости. Коррекцию нарушений, вызванных введением ксеноагентов, проводили СЭШБ и, в качестве препарата сравнения, ЭПС. Как видно из данных, представленных в таблице 7, все исследуемые параметры в обоих случаях достоверно отличались от показателей группы «максимального загрязнения».

Поисковая двигательная активность, проявляемая в пробежках, активизировалась на 270 и 265 % у групп с коррекцией СЭШБ и ЭПС, проявляемая в переходах - на 321% у группы СЭШБ и 289% при коррекции ЭПС.

Исследовательская активность в результате коррекции практически нормализовалась. Число вертикальных актов возросло в 2,7 и 2,55 раза (заглядывания) для групп с коррекцией СЭШБ и ЭПС 40%, и в 4,58 раза (стойки) для той и другой группы. Для эмоциональной составляющей поведенческих реакций, оцениваемых по количеству актов автогруминга и дефекаций, наблюдалось снижение активности в 2 и 2,5 раза соответственно для обеих групп. Таким образом, снижение уровня названных показателей, свидетельствует о снижении тревожности и ослаблении стрессорной реакции.

Проведенные исследования показали, что СЭШБ из выращенного сырья, введенный в пищевой рацион лабораторных животных, а также ЭПС в качестве препарата сравнения, обладают свойством нормализовать паттерн поведения, изменившийся на фоне введения ксеноагентов. При этом наблюдается повышение поисковой и исследовательской активности с одновременным снижением уровня эмоционального напряжения, что можно рассматривать как понижение уровня неспецифической возбудимости. Таким образом, экспериментальные исследования показали, что препарат

из, полученного при выращивании сырья, обладает выраженной биологической активностью.

Метод приподнятого крестообразного лабиринта позволяет более подробно оценить действие стресс-агентов и препарата на психофизиологическое состояние мышей.

Поведение в ПКЛ оценивали по следующим показателям: двигательная активность (время пребывания и число выходов в открытые рукава лабиринта); исследовательская активность (стойки, дипинг); эмоциональная активность (автогруминг, дефекационные болюсы). Результаты эксперимента с использованием данного теста отражены в таблице 8.

Таблица 8

Действие препаратов растений при сочетанном действии с ТЗ на иоведенческие __реакции в ПКЛ_

Группы животных

Показатели Фоновое Максимальное МТЗ+ МТЗ+

ТЗ ТЗ (МТЗ) СЭШБ ЭПС

Время в ОР, сек 19,7±0,58 1,7±0,63* 20,1±0,50** 19,6±0,40**

Выходы в ОР 4,0±0,25 0,4±0,02* 4,2±0,56** 3,8±0,35**

Стойки 4,5±0,<10 2,1±0,41* 5,1 ±0,60** 4,9±0,50**

Дипинг 3,0±0,26 0,7±0,30* 3,5±0,33** 2,7±0,32**

Груминг 7,8±0,20 12,7±0,90* 7,1±0,30** 7,9±0,14**

Дефекация 0,4±0,05 1,6±0,07* 0,5±0,02** 0,9±0,04

Прим. *р<0,005 по сравнению с фоновым уровнем ТЗ;

**р<0,005 по сравнению с максимальным уровнем ТЗ

Из данных, представленных в таблице 8, видно что, при воздействии максимальных ТЗ отмечается значимое уменьшение, по сравнению с группой фонового уровня, таких показателей поведенческой активности, как время пребывания животных в открытых рукавах лабиринта в 11,6 раза и выходы в открытый рукав 10 раз.

Показатели вертикальной исследовательской активности (число стоек) в группе МТЗ достоверно снижались практически в 2 раза. Необходимо отметить, что показатель оценки риска - «дипинг» в группе МТЗ также более чем в 3 раза снижался по сравнению с аналогичным показателем фонового стресс-фактора, что свидетельствует о сужении поля когнитивного восприятия вследствие действия стрессора.

Эмоциональная активность у животных при действии стрессора проявилась в усилении груминга (в 1,6 раза) при одновременном увеличении уровня дефекации (в 4 раза), по сравнению с фоновым стрессором. Повышение уровня названных показателей, свидетельствует о возрастании уровня стрессорных гормонов, повышении тревожности и нарастании стрессорной реакции при действии урбанистических ксеноагентов.

Продолжая анализ данных табл. 8, можно видеть, что при сочетанном действии

стрессора и растительных экстрактов (шлемника байкальского и патринии

скабиозолистной) такой показатель поведенческой активности, как время пребывания

животных в открытых рукавах лабиринта, превышает соответственно в 11,8 и 11,5 раз показатели группы максимального стресса (МТЗ). Аналогичные изменения наблюдаются и в показателе выходов в открытый рукав, который возрастал практически в 10 раз в обоих случаях. Также возрастает уровень исследовательской активности, что выражается в увеличении числа стоек с опорой на стенки (в 2,4 и 2,3 раза соответственно) и частоты дипинга (в 5 и 3,8 раза соответственно). Снижение эмоционального напряжения у животных при сочетанном действии стрессора и препаратов выразилось в уменьшении количества актов груминга (в 1,7 и 1,6 раз соответственно) и дефекации (в 3,2 и 1,8 раз соответственно). Снижение уровня названных показателей свидетельствует о снижении уровня стрессорных гормонов, уменьшении тревожности и ослаблении стрессорвой реакции.

Под действием препаратов СЭШБ и ЭПС показатели двигательной, исследовательской и эмоциональной активности достоверно приближались к фоновым показателям, что свидетельствует о нормализации психо-эмоционального состояния животных.

Полученные данные позволяют рассчитать индексы тревожности животных: It -показатель индекса по времени пребывания в открытых рукавах; 1„ - показатель индекса по числу выходов в открытые рукава. Эти показатели являются стандартными в методике оценки тревожности лабораторных животных. Соотношение показателя индекса и уровня тревожности выражается обратной пропорцией. Индексация уровня тревожноста изучаемых групп животных представлена на рис. 3.

Для группы МТЗ индекс тревожности по времени нахождения был в 19,3; 20,3 и 19,5 раз меньше, чем в группах фонового загрязнения и МТЗ+СЭШБ и МТЗ+ЭПС, индекс тревожности по числу выходов был меньше в 2,5 раза по сравнению со всеми группами.

вФТЗ

а мтз

В МТЗ+СЭШБ

ЕЗ МТЗ+ЭПС по времени по числу пребывания выходов

Рис. 3. Действие сухого экстракта шлемника байкальского и экстракта патринии скабиозолисгаой при сочетанном действии с техногенным загрязнением на индекс тревожности в ПКЛ.

индекс 25 тревожности

Исходя из данных, представленных на рисунке, следует, что у животных группы, в пищу которых вводили листья липы из района с максимальным уровнем ТЗ, уровень тревожности достоверно был выше по сравнению с фоновой группой.

В ПКЛ животные групп сочетанного действия МТЗ+СЭШБ и МТЗ+ЭПС успешно преодолевали действие стрессора. У животных этих групп по сравнению с группой максимального ТЗ наблюдается достоверное увеличение индексов тревожности, что свидетельствует о нормализации психосоматического состояния лабораторных животных, и наличии выраженной биологической активности у изучаемого препарата.

3.7.2. Антиоксидантная активность сухого экстракта шлемника байкальского при этаноловом гепатите

На модели этанолового гепатита показано, что СЭШБ обладает антиоксидантным действием, которое предотвращает повреждение печени этанолом, реализуемое гармоничным сочетанием действующих биологически активных веществ, способных подавлять ПОЛ и предупреждать деструкцию мембран. Введение СЭШБ в дозе 10 мг/кг значительно уменьшало токсическое действие этанола, о чем свидетельствуют достоверное снижение интенсивности ПОЛ в печени. На это указывает понижение содержание МДА в гомогенате ткани печени и сыворотке крови крыс, получавших наряду с этанолом СЭШБ, на 46% и 31% соответственно по сравнению с аналогичными показателями у крыс контрольной группы. В 2,3 раза повышается каталазная активность сыворотки крови, что свидетельствует об увеличении потенциала антиокислительной активности сыворотки крови.

Выводы

1. Выращенный в культуре шлемник байкальский в условиях юга Приморского края проходит полный цикл развития с образованием полноценных семян с первого года вегетации. Семенная продуктивность при этом на 14,6 % выше, чем в природных популяциях, что свидетельствует о хорошей адаптации вида к условиям выращивания.

2. Эксплуатационный запас культивируемых растений зависит от плотности посадки, при минимальной плотности урожайность культивируемого S. Ьтса1еп$1з в 7,8 раза превосходит урожайность природной популяции.

3. Наибольшее количество флавоноидов в корнях культивируемых растений наблюдается в фазах начала и завершения вегетации у растений 3-го года интродукции. В условиях культуры накопление основного флавоноида - байкалина возрастает более чем в два раза. Накопление минорных флавоноидов возросло на 18,4 %. Накопление байкалина в корпях природной популяции растения на 52,9 %, а общее содержание флавоноидов на 37,4 % меньше, чем в культивированных.

4. Оптимальные условия экстрагирования сырья: измельчение до размера частиц в диапазоне 0,08 - 0,5 мм, оптимальный экстрагент - очищенная вода, соотношение сырья и экстрагента - 1:20, время экстракции - 3 часа при температуре 65±5° С. Они обеспечивают полное извлечение веществ из сырья и позволяют получить максимальное количество флавоноидов в пересчете на байкалин. УЗ экстракция позволяет существенно (в 3 раза) сократить время процесса.

5. Сухой экстракт из корней выращенных в культуре растений показал наличие биологической активности, что выразилось в нормализации психосоматического состояния животных, подвергнутых действию ксенобиотических агентов. Выявлено аятиоксидантное действие экстракта, которое предотвращает повреждение печени этанолом.

По теме диссертации опубликованы следующие работы:

Зорикова, С.П., Маняхин, А.Ю. Сравнительный анализ надземной и корневой частей Patr'mia scabiosifolia Fisch, ex Link // Экология в современном мире: взгляд научной молодежи : мат. Всеросс. конф. молодых ученых, Улан-Удэ, 24-27 апр. 2007 г. Улан-Удэ : ГУЗРЦМП МЗ РБ, 2007. С. 259-260.

Зорикова, С.П., Маняхин, А.Ю., Зорикова, О.Г. Семенная продуктивность Scutellaria baícalensis Georgí //Естественные и технические науки. 2009. №3 (41). С. 156-158.

Зорикова, С.П., Маняхин, А.Ю., Зорикова, О.Г. Коррекция нарушений, индуцируемых техногенным загрязнением, препаратами Scutellaria baicalensis, Lespedeza bicolor и Patrinia scabiosifolia // Состояние лесов Дальнего востока и актуальные проблемы лесоуправления: тез. Всерос. конф. с междунар. участием, Хабаровск, 6-8 окт. 2009 г. Хабаровск : Б.И., 2009. С. 198-200.

Зорикова, С.П., Маняхин, А.Ю., Черняк, Д.М. Антиоксидантная активность экстрактов из дальневосточных растепий // Естественные и технические науки, 2009. №5 (43). С. 121-124.

Маняхин, А.Ю. Динамика накопления флавоноидов шлемника байкальского, интродуцированного на юге Приморского края // Экосистемы, организмы, инновации: тез. 11-ой Междунар. конф., Москва, 24 июн. 2009 г. М.: МГУ, 2009. С. 43.

Маняхин, AJO. Разработка технологий выделения биологически активных веществ // X Междунар. очно-заочная науч.-практ. конф. студентов, аспирантов и молодых исследователей. Интеллектуальный потенциал вузов - на развитие Дальневосточного региона и стран АТР.- Владивосток, 24 апр. 2008 г. Владивосток : ВГУЭС, 2008. кн. 2. С. 46-47.

Маняхин, А.Ю., Зорикова, СЛ., Зорикова, О.Г. Динамика накопления флавоноидов в корнях шлемника байкальского Scutellaria baicalensis Geovgi // Естественные и технические науки, 2009. №3 (41). С. 159-163.

Маняхин, А.Ю., Зорикова, С.П., Зорикова, О.Г. Динамика накопления и распределение флавоноидов в органах шлемника байкальского Scutellaria baicalensis Georgi // Вест. КрасГАУ., 2009. №11. С. 79-83.

Маняхин, А.Ю., Зорикова, С.П., Зорикова, О.Г. Растительные препараты как корректоры влияния электромагнитных излучений // Состояние лесов Дальнего востока и актуальные проблемы лесоуправления : тез. Всерос. конф. с междунар. участием, Хабаровск, 6-8 окт. 2009 г. Хабаровск : Б.И., 2009. С. 217-219.

На правах рукописи

Маняхин Артём Юрьевич

03.02.14 - биологические ресурсы

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Лицензия № 020572 от 16.09.1997 г.

Подписано в печать 08.04.2010 г. Формат 60 х 84 1/16. Бумага офсетная. Печать БЖОСЗРАРН ТК. 1510. Уч.- изд. л. 1,3. Тираж 100 экз. Заказ № -¡¿О.

Отпечатано участком оперативной полиграфии ФГОУВПО ПГСХА 692508. г. Уссурийск, ул. Раздольная, 8'.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Маняхин, Артем Юрьевич

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Систематическое положение и экологическая характеристика шлемника байкальского.

1.2. Ареал шлемника байкальского.

1.3. Морфология и жизненная форма шлемника байкальского.

1.4. Вторичные метаболиты шлемника байкальского.

1.5. Биологическая активность флавоноидов из корней шлемника байкальского.

1.6. История интродукции шлемника байкальского.

1.7. Характеристика района культивирования.

Глава 2.Материалы и методы.

2.1. Объект исследования.

2.2. Методы полевого исследования.

2.3. Получение экстракта шлемника байкальского.

2.4. Анализ флавоноидов.

2.5. Физиолого-биохимические исследования на экспериментальных животных.

Глава 3. Результаты и обсуждение.

3.1. Условия интродукции.

3.2. Биологические и морфологические особенности развития интродуцента.

3.3. Семенная продуктивность и урожайность шлемника байкальского в культуре и природной популяции в зависимости от экологических условий.

3.4. Накопление флавоноидов шлемника байкальского в условиях интродукции и природной популяции.

3.5. Изучение процесса экстракции корня шлемника байкальского и получение сухого экстракта.

3.5.1. Характеристика сырья.

3.5.2. Определение оптимальных размеров частиц сырья шлемника байкальского.

3.5.3. Тип экстрагента, соотношение массы сырья и объема экстрагента.

3.5.4. Время и температура экстрагирования.

3.5.5. Получение сухого экстракта шлемника байкальского.

3.5.6. Экстракция сырья корня шлемника байкальского УЗ методом.

3.6. Технологическая схема получения сухого концентрата флавонои-дов сырья шлемника байкальского, интродуцированного на юге Приморского края.

3.7. Биологическая активность сухого экстракта шлемника байкальского из интродуцированного сырья.

3.7.1. Влияние сухого экстракта шлемника байкальского на поведенческие реакции мышей при действии ксенобиотиков.

3.7.2. Антиоксидантная активность сухого экстракта шлемника байкальского при этаноловом гепатите.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi) на юге Приморского края"

Лечение целебными травами всегда привлекало к себе внимание человека. Еще первобытные люди запоминали полезные свойства растений и использовали их при том или ином заболевании. Так были открыты первые лекарственные растения, а затем «аптека» наших предков постоянно пополнялась новыми растительными средствами. Сотни лекарственных растений, ранее применявшихся в народной медицине, как свидетельствуют результаты многочисленных исследований, обладают определенными лечебными качествами и вошли в арсенал медикаментозных средств, используемых в современной врачебной практике. Несмотря на появление многих синтетических препаратов, интерес к лекарственным растениям не снизился.

Рациональное использование ресурсов растительного мира является косвенной формой его охраны. Широкое использование в последние годы растительных лекарственных средств повлекло за собой увеличение объёмов заготовок, что наряду с негативным антропогенным воздействием, создает угрозу истощения запасов ряда лекарственных видов. При этом следует отметить, что из всего богатства растительного мира, включающего около 300 тысяч видов высших растений, человек использует только одну сотую часть, которые могут быть применены в виде лекарственных средств, пищевых добавок, окультурены и коммерциолизированы. Флора Дальнего Востока, используемая в качестве лекарственного сырья, представлена 1710 видами растений, из них 1500 видов высших растений, что составляет 48% от числа видов дальневосточной флоры (3100 видов). Из суммарной продукционной флоры выделяется флора лекарственных продуцентов, включающая 1100 видов [Измоденов, 2001]. Применение лекарственной флоры Дальнего Востока в официальной медицине не превышает 1% от всего видового состава; плановой заготовке подлежит всего 35 наименований сырья [Степанова, 1998]. Исследование уникальной и своеобразной флоры Дальнего Востока России и использование ее представителей в медицине, животноводстве, пищевой промышленности является в настоящее время весьма актуальным. В поиске растений, обладающих лечебным действием, используются два принципа -накопленный опыт лечебной этноботаники и ботаническое родство, заключающееся в изучении тех семейств и родов, среди которых есть представители растений с выявленным наукой биологическим или медицинским эффектом.

На современном этапе развития медицины, касающейся лекарственной терапии и профилактики заболеваний, наблюдается нарастающий на протяжении последних нескольких десятилетий кризис. Причина такой ситуации заключается в недостаточно высокой эффективности средств медикаментозной терапии и их токсическими, побочными эффектами, порой сводящими на нет все усилия врачей в деле помощи своим пациентам. Одна из основных причин кризиса кроется в том, что большинство современных лекарственных средств представляют из себя индивидуальные в химическом отношении соединения, которые по сути своей являются ксенобиотиками и чужды организму.

Не удивительно, что отношение населения к лекарственным средствам и научной медицине в целом в последнее время претерпевает существенные изменения. Опросы населения в США и странах Западной Европы свидетельствуют о том, что около 40 % респондентов в последнее время прибегают к услугам фитотерапевтов, гомеопатов и т.п. [Минина, Каухова, 2004].

БАД стремительно ворвались в жизнь современного человека, быстро нашли своего потребителя и стали уверенно конкурировать с лекарственными препаратами. В настоящее время БАД употребляют 90 % населения Японии, 80 % - США, 65 % - Западной Европы и около 20 % (по экспертным оценкам) - Российской Федерации [Нужный, и др., 2006].

БАД, получаемые из растительного сырья, довольно широко представлены в нашей стране, однако возросший интерес неминуемо ведет к истощению природных запасов растительного сырья. Так, согласно С.А. Мининой и И.Е. Кауховой [2004] процент культивируемого растительного сырья по состоянию на 1999 год составляет лишь 16,8 %, оставшиеся 83,2 % изымаются из дикорастущих популяций.

В медицине издавна используются представители сем. Губоцветные. Они применяются как в западной, так и восточной традиционных лечебных практиках. В семействе свыше 200 родов (около 3500 видов), распространенных повсеместно, особенно в Средиземноморье, Западной и Центральной Азии. На территории бывшего СССР - около 70 родов (почти 1000 видов). Наиболее известным и используемым с древнейших времен и по настоящее время являются роды Lavandula, Mentha, Leonurus, Salvia и другие. Менее известен род Шлемник — Scutellaria L., активно применяемый в тибетской и китайской медицине. Из корней его получают настойку, обладающую гипотензивным и седативным свойствами, в народной медицине шлемник применяют при заболеваниях сердца [Базарон, Асеева, 1984; Минаева, 1991; Корр, et. al., 2003]. Отечественные фармакологи впервые обратили внимание на сведения народной медицины, о седативных и гипотензивных свойствах S. baica-lensis во время Великой Отечественной войны в связи с частыми стрессами, приводящими к возникновению неврозов и повышению артериального давления [Варлаков, 1963].

Комплексный анализ дикорастущих видов растений, в первую очередь на популяционном уровне, является принципиальным для экологически ориентированного устойчивого использования и охраны растительных ресурсов.

Ареал S. baicalensis сокращается, а в Приморье, Читинской области и Республике Саха (Якутия), растение включено в региональные Красные книги. В связи с тем, что лекарственным сырьем S. baicalensis являются корни, происходит уменьшение численности данного вида. Надземная часть шлемника изучена недостаточно, несмотря на то, что именно в ней происходят первичные этапы синтеза биологически активных веществ (БАВ) и их предшественников.

Существует несколько путей получения ценного и дефицитного лекарственного сырья: интродукция, создание искусственных плантаций, метод культуры тканей и клеток лекарственных растений.

В настоящее время у многих видов растений происходит сокращение численности и плотности популяций, изменяются границы распространения видов, обедняется флористический состав сообществ. К таким видам, в силу эколого-биологических и ценотических особенностей, относится и S. baica-lensis который реагирует на антропогенные воздействия и включен в Красную книгу России.

В связи с интенсивным освоением природных ресурсов и нарастанием антропогенного пресса (добыча полезных ископаемых, лесозаготовки, распашка земель), а также уничтожением пожарами местообитаний, актуально проведение интродукционных работ для создания устойчивой сырьевой базы и генетического резерва популяций, а также восстановления природных популяций вида. Полное и комплексное использование сырья является одной из косвенных форм охраны биологических ресурсов, отсюда следует актуальность разработки эффективных методов извлечения БАВ. Необходимым является подтверждение наличия биологической активности в интродуциро-ванном сырье.

Цели и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось изучение биологических особенностей S. baicalensis в условиях культивирования и природной популяции с оценкой перспективы его выращивания в условиях юга Приморского края как источника растительных полифенолов, а также разработка методов определения качественного и количественного содержания биологически активных веществ и максимального извлечения суммы флавоноидов из сырья.

Для достижения поставленной цели исследования были определены следующие задачи:

1) изучить биоморфологические особенности и ритм сезонного развития S. baicalensis в условиях культивирования на юге Приморского края;

3) изучить особенности накопления байкалина и других полифенольных. соединений в подземных и надземных органах растения при выращивании в условиях юга Приморского края и природных популяциях;

5) определить качественный и количественный состав флавоноидов в экстрактах;

6) исследовать биологическую активность флавоноидов культивируемого S. baicalensis на экспериментальных животных.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Интродуцированный S. baicalensis в условиях юга Приморского края проходит полный цикл развития с образованием полноценных семян с первого года вегетации. Природная популяция формирует семена среднего качества, что не отрицает его семенного воспроизведения.

2. Максимальное количество флавоноидов содержится в корнях в фазах начала и завершения вегетации у растений 3-го года интродукции. Содержание байкалина в корнях природных популяций S. baicalensis меньше, чем в интродуцентах.

3. Наибольшее количество флавоноидов в корнях культивируемого растения наблюдается в фазах начала и завершения вегетации. В условиях культуры накопление мажорного флавоноида — байкалина, возрастает более чем в два раза.

4. Корень шлемника, интродуцированного на юге Приморского края содержит сумму флавоноидов не менее 30%, из них целевого вещества — байкалина не менее 12%.

5. Препарат из корней интродуцированного S. baicalensis обладает выраженной биологической активностью. Выявлено антиоксидантное действие флавоноидов S. baicalensis.

Научная новизна.

Впервые проведено изучение состояния агропопуляции S. baicalensis на юге Приморского края (Хасанский район, окрестности пос. Краскино) и показано, что растение характеризуется высоким содержанием байкалина и других полифенольных соединений. Изучены биологические и морфологические особенности развития интродуцента (семенная продуктивность и урожайность). Изучена динамика накопления и распределения по органам растения полифенолов в условиях юга Приморского края и научно обоснованы оптимальные сроки заготовки сырья. Впервые исследована возрастная структура природной популяции (Октябрьский район, окрестности с. Чернятино). Исследована биологическая активность полифенолов культивируемого сырья.

Практическая ценность

Разработаны методы интродукции S. baicalensis на юге Приморского края. Даны рекомендации по выращиванию и использованию интродуцента. Разработана схема экстракции без использования токсичных растворителей.

Материалы диссертации используются в технологической схеме культивирования S. baicalensis, образовательном процессе при решении вопросов экологического воспитания и образования школьников и студентов края, а также для организации просветительной работы с населением. На основании проведенных исследований, решением Государственной комиссии РФ по испытанию и охране селекционных достижений, S. baicalensis включен в Государственный реестр селекционных достижений, допущенных к использованию как «Шлемник байкальский Муссон», № 51898/9155064.

Апробация работы

Результаты исследований были представлены на Всероссийской научной конференции «Состояние лесов Дальнего Востока и актуальные проблемы лесоуправления» [Хабаровск, 2009]; 10-я международной очно-заочной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых исследователей «Интеллектуальный потенциал вузов - на развитие Дальневосточного региона и стран АТР» [Владивосток, 2008], 2-я международной конференции «Химия, технология и медицинские аспекты природных соединений» [Казахстан, 2007]; Конференции молодых ученых [Улан-Удэ, 2007], 11-ой всероссийской конференции «Экосистемы, организмы, инновации» [Москва, 2009].

Публикации

Зорикова, С.П., Маняхин, А.Ю. Сравнительный анализ надземной и корневой частей Patrinia scabiosifolia Fisch. ex Link // Экология в современном мире: взгляд научной молодежи : мат. Всеросс. конф. молодых ученых, Улан-Удэ, 24-27 апр. 2007 г. Улан-Удэ : ГУЗРЦМП МЗ РБ, 2007. С. 259-260.

Зорикова, С.П., Маняхин, А.Ю., Зорикова, О.Г. Семенная продуктивность Scutellaria baicalensis Georgi // Естественные и технические науки. 2009. №3 (41). С. 156-158.

Зорикова, С.П., Маняхин, А.Ю., Черняк, Д.М. Антиоксидантная активность экстрактов из дальневосточных растений // Естественные и технические науки, 2009. №5 (43). С.121-124.

Маняхин, А.Ю. Разработка технологий выделения биологически активных веществ // X Междунар. очно-заочная науч.-практ. конф. студентов, аспирантов и молодых исследователей Интеллектуальный потенциал вузов - на развитие Дальневосточного региона и стран АТР — Владивосток, 24 апр. 2008 г. Владивосток : ВГУЭС, 2008. кн. 2. С. 46-47.

Маняхин, А.Ю., Зорикова, С.П., Зорикова, О.Г. Динамика накопления флавоноидов в корнях шлемника байкальского Scutellaria baicalensis Georgi // Естественные и технические науки, 2009. №3 (41). С. 159-163.

Благодарности

Автор выражает глубокую признательность и искреннюю благодарность за оказанную помощь в постановке экспериментов и оказании консультаций М.Н. Чипизубовой (Тихоокеанский институт географии ДВО РАН), сотрудникам компании Юбиком за любезно предоставленную возможность проведения экспериментов на интродукционных участках, Гороховой С.В., Хаси-ной Э.И. за помощь в написании работы, и всем сотрудникам лаборатории лекарственных растений Горнотаежной станции ДВО РАН.

Структура диссертации и ее объем

Заключение Диссертация по теме "Биологические ресурсы", Маняхин, Артем Юрьевич

выводы

2. Эксплуатационный запас культивируемых растений зависит от плотности посадки, при минимальной плотности урожайность культивируемого S. baicalensis в 7,8 раза превосходит урожайность природной популяции.

3. Наибольшее количество флавоноидов в корнях культивируемых растений наблюдается в фазах начала и завершения вегетации у растений 3-го года интродукции. В условиях культуры накопление основного флавоноида — байкалина возрастает более чем в два раза. Накопление минорных флавоноидов возросло на 18,4 %. Накопление байкалина в корнях природной популяции растения на 52,9 %, а общее содержание флавоноидов на 37,4 % меньше, чем в культивированных.

5. Сухой экстракт из корней выращенных в культуре растений показал наличие биологической активности, что выразилось в нормализации психосоматического состояния животных, подвергнутых действию ксенобиотиче-ских агентов. Выявлено антиоксидантное действие экстракта, которое предотвращает повреждение печени этанолом.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Маняхин, Артем Юрьевич, Владивосток

1. Аврорин, Н.А. Переселение растений на Полярный Север, Эколого-географический анализ. — М—Л. : Наука, 1956. — 285 с.

2. Агроклиматические ресурсы Приморского края Л. : Гидрометиздат, 1973.- 147 с.

3. Агрохимические методы исследования почв / гл. ред. А. В. Соколов. -М. : Наука, 1975.-656 с.

4. Алехина, Н.Д., Балнокин, Ю.В., Гавриленко, В.Ф. Физиология растений. Учебник для студ. вузов. М. : Академия, 2007. 2-е изд. - 640 с.

5. Артюшенко, З.Т. Атлас по описательной морфологии высших растений. Плод. Л. : Наука, 1986. - С. 57.

6. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений / под ред. Н.С. Чикова. М.: ГУГК, 1976. - 340 с.

7. Бабенко, Г.А., Гайнацкий, М.Н. Определение активности каталазы в эритроцитах и сыворотке крови йодометрическим методом // Лаб. Дело. 1976. №3. С. 157-158.

8. Базарон, Э.Г., Асеева, Т.А. «Вайдурья-онбо»-трактат индо-тибецкой медицины Новосибирск: Наука, 1984. - 117 с.

9. Базилевская, Н.А. Теории и методы интродукции растений М. : Изд-во МГУ, 1964. - 131 с.

10. Банаева, Ю.А. Некоторые биологические особенности семян Scutellaria baicalensis (Lamiaceae) // 2-ой Ботан. журн. 1998. Т.83, № 26. С.50-55.

11. Банаева, Ю.А. Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi.): экология, биология, интродукция: дис. канд. биол. наук / Рос. акад.наук, Сибирское отд-ие, Центральный Сибирский ботанический сад — Новосибирск, 1994.- 177 с.

12. Барабой, В.А. Антиоксиданты и здоровье. Валеология: диагностика, средства и практика обеспечения здоровья. СПб. : Б.И., 1993. - С. 107—114.

13. Барабой, В.А. Биологическое действие растительных фенольных соединений. Киев : Наукова Думка, 1976. - 260 с.

14. Бариева, Э.Р. Виталитетный состав популяций Amaranthus retroflex-us L. В посадках картофеля и на залежи // Раст. ресурсы. 1999. Т.35, № 3. С. 61-66.

15. Бейдеман, И.Н. Методика изучения фенологии растений и растительных сообществ. — Новосибирск : Наука, 1974. — С. 138.

16. Березнеговская, JI.H. Выращивание лекарственных растений в Томске // Вопросы фармакогнозии. 1960. Т. 12, № 5. С. 305.

17. Биоморфология и продуктивность степных растений Забайкалья / отв.ред. А.А. Горшкова. — Новосибирск : Наука, 1979. 116 с.

18. Борисов, А.А.Климаты СССР. М. : Просвещение, 1967. - 296 с.

19. Буреш, Я., Бурешова, О., Хьюстон, Д. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. М. : Высшая школа. 1991. — С. 119-122.

20. Буторина, JI.K. Календарь фенофаз лекарственных растений в центральном Приморье в условиях питомника. Ритмы сезонного развития растений в Приморье. Владивосток, Б.И., 1980. — С. 145-153.

21. Бухашеева, Т.Г., Асеева, Т.А. Шлемник байкальский в Восточном Забайкалье // Флора и растительность Алтая. 2002. Т. 7, № 1. С. 81—86.

22. Бухашеева, Т. Г. Эколого-биологические особенности Scutellaria baicalensis Georgi в Забайкалье: автореф. дис. канд. биол. наук Сиб. отд-ние, Бурят, гос. ун-т. Улан-Удэ, 2000. - 19 с.

23. Ван Вэй III, Айертон-джонс. Секреты питания. СПб. : Диалект, 2006. 320 с.

24. Варлаков, Н.М. Список растений Восточного Забайкалья, применяемых в тибетской медицине. Избр. тр. — М. : Медгиз, 1963. — 106 с.

25. Вершинин, П.В., Яблоков, Д. Д. Фармакология и клиника сибирских растений с седативным и гипотензивным действием : Новые лечебные растения Сибири их препараты : сб. науч.-иссл. работ. Томск: изд-во Томск, гос. ун-т, 1946. Вып. 2. С. 10-16.

26. Витвицкий, Г.Н. Климат: Южная часть Дальнего Востока. — М. : Наука, 1969. С. 71-96.

27. Воловик, В.Г., Попова, Т.П., Рыбаченко, А.И. Исследование шлемника байкальского, вводимого в культуру // Новые лекарственные препараты из растений Сибири и Дальнего Востока : тез. Всесоюз. конф. Томск, 1989 г. Томск : Б.И., Т.2, С. 36-37.

28. Воронина, Т.А., Островская, Р.У. Экспериментальное изучение препаратов с ноотропным типом действия // Ведомости фармакологического комитета. 1998. № 3. С. 25-31.

29. Воронова, A.M., Толокнова, Е.А. Шлемник байкальский как гипотензивное средство // Новые лечебные растения Сибири их препараты : сб. науч.-иссл. работ. Томск : Изд-во Том.гос. ун-та, 1946. Вып. 2. С. 41-45.

30. Высочина, Г.И. Биохимические аспекты проблем экологии интродукции и систематики: биохимические подходы к познанию разнообразия растительного мира // Сибирский экологический журнал. 1999. № 3. С. 207— 211.

31. Высочина, Г.И. Фенольные соединения в систематике и филогении семейства гречишных. Новосибирск: Наука, 2004. — 240 с.

32. Гармаев, Р.Б., Николаева, С.М., Найдакова, Ц.А. Зубчатка позлняя. Новосибирск : Наука, 1982. — 73 с.

33. Головкин, Б.Н. Культигенный ареал растений. — М. : Наука, 1988.181 с.

34. Голубинская, В.О., Мартьянова, А.А., Тарасова, О.С., и др. Изменения исследовательского поведения и тревожности у неонатально десимпати-зированных крыс // Вестник Моск. ун-та, Серия 16, Биология. 1998. № 1. С. 12-15.

35. Гольдберг, Е.Д., Дыгай, A.M., Литвиненко, В.И., Попов, Т.П., Суслов, Н.И. Шлемник байкальский. Фитохимия и фармакологические свойства. — Томск : Изд-во Томского университета, 1994. — 224 с.

36. Горчаков, Э.В., Пшеничкин, А .Я., Банаева, Ю.А. Благородные металлы в шлемнике байкальском // Фундаментальные исследования. 2008. № 7. С 66-67.

37. Государственный реестр лекарственных средств, разрешённых для применения в медицинской практике. М. : Медицина, 1982. - 96 с.

38. Грубов, В.И. Определитель сосудистых растений Монголии. М. : Наука, 1982. - 442 с.

39. Губанов, И.А., Киселёва, К.В., Новиков, B.C. Дикорастущие полезные растения. М. : МГУ, 1998. - С. 192-193.

40. Дощинская, Н.В. К биологии семян шлемника байкальского. Новые лекарственные растения Сибири, их лекарственные препараты и применение. Томск : Б.И., 1958. - С. 15-20.

41. Дулепова, Б.И. Сезонное развитие и флюктуации степных сообществ да-урской лесостепи : дисс. док. биол. наук / Рос. Акад. Наук, Сиб. отд-ниг, ЗабГГПУ им. Н.Г. Чернышевского. — Чита, 1986. —438 с.

42. Думенова, Е.М. Влияние шлемника байкальского на моторную хронаксию // Новые лекарственные растения Сибири, их лечебные препараты и применение: сб. научно-иссл. работ. Томск : изд-во Зап.-Сиб. отделения АН СССР, 1959. Вып. 5. С.89-92.

43. Думенова, Е.М. К вопросу о гипотензивном действии шлемника и чистеца байкальских // Новые лечебные растения Сибири их препараты: сб. научно-иссл. работ. Томск : изд-во Томск, гос. ун-та, 1946а. Вып. 2. С. 32—37.

44. Елин, Е.С. Фенольные соединения в биосфере. Новосибирск : изд-во СО РАН, 2001.-392 с.

45. Жуков, Д.А. Биология поведения: гуморальные механизмы. СПб. : Речь, 2007. - 443 с.

46. Жуковский, П.М. Ботаника. М. : Высшая школа, 1964. - 667 с.

47. Жучков, А.В., Черенкова, Е.В., Шабанов, И.Е., и др. Ультразвуковая экстракция из фармацевтического сырья // Материалы XLIII отчетной научной конференции за 2004 г. Воронеж, 13-16 дек. 2004 г. Воронеж : Б.И., 2004. С. 132.

48. Зайцев, Г.Н. Краткое пособие по математической обработке данных фенологических наблюдений. — М. : Наука, 1972. — 7 с.

49. Занина, А.А. Климат СССР. Дальний Восток. Л. : Гидрометиздат, 1958. Вып. 6. - 167 с.

50. Запрометов, М.Н. О функциональной роли фенольных соединений в растениях // Физиология растений. 1992. Т. 39, № 6. С. 1197-1207.

51. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения: Распространение, метаболизм и функции в растениях. — М. : Наука, 1993. 272 с.

52. Зилфикаров, И.Н., Челомбитько, В.А., Алиев, A.M. Обработка лекарственного растительного сырья сжиженными газами и сверхкритическими флюидами / под ред. В.А. Челомбитько. Пятигорск, Б.И., 2007. — 244 с.

53. Злобин, Ю.А. Структура фитоценопопуляций. Успехи соврем. Биологии, 1996. Вып. 2. Т. 116, С. 133-146.

54. Зоз, И.Г., Литвиненко, В.И. О расчленении семейства Labiatae Juss. на естественные группы // Ботанический журнал. 1979. Т. 64, С. 989-997.

55. Зорикова, О.Г., Хасина, Э.И. Патриния скабиозолистная. — Владивосток : Дальнаука, 2005. 111 с.

56. Зуев, В.В. Scutellaria L. Шлемник // Флора Сибири. Т. 2. Pyrolaceae -Lamiaceae (Labiatae). — Новосибирск : Наука, 1997. — С. 161—165.

57. Иванов, Г.И. Почвы Приморского края. — Владивосток : Дальне-вост. кн. изд-во, 1964. — 107 с.

58. Иванов, Г.И. Почвообразование на юге Дальнего Востока. — М. : Наука, 1976.-200 с.

59. Ивашенко, А.А. Культура лекарственных растений в Западной Сибири. Растительные ресурсы Сибири, Урала и Дальнего Востока. Новосибирск : Наук, 1965. - С. 147-151.

60. Калуев, А.В. Анализ груминга в нейробиологических исследованиях: нейрогенетика, нейрофармакология и экспериментальные модели стресса //Нейронауки. 2006. №4(6). С. 14-19.

61. Калуев, А.В. Сегодня и завтра фармакоэтология тревожности: методические проблемы и перспективы // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1997. Т. 60, № 8. С. 3-7.

62. Калуев, А.В., Нуца, Н.А.Сегодня и завтра фармакоэтологии тревожности: методологические проблемы и перспективы // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1998. Т. 61, №5. С. 69-74.

63. Карташова, Н.Н., Цитленок, С.И. Гистохимические исследования цветка некоторых растений в онтогенезе в связи с процессом нектарообразо-вания // Вопросы антэкологии: материалы к симп. по антэкологии, Пермь, 26-30 мая 1960 г. Л. : Наука, 1960. С. 23-24.

64. Колесников, Б.П. Природное районирование Приморского края. Материалы по физической географии юга Дальнего Востока. Приханкайская равнина и прилегающие к ней районы Приморского края. М. : Наука, 1958. -С. 5-30.

65. Комарова, Е.Л., Эллер, К.И., Власов, A.M., и др. Оценка подлинности растительных экстрактов как сырья для БАД : электронный журнал. -2007. http://www.naturalingredients.ru/publications (дата обращения 7.08.2009).

66. Коровин, С.Е., Демидов, А.С. Интродукционный прогноз и его методические аспекты // Журн. общ. биологии, 1981. Т. 42, № 5. С. 673-679.

67. Коровин, С.Е. О некоторых антропогенных изменениях растительного покрова Западного Тянь-Шаня // Ботан. журн., 1969. Т. 44, № 4. С. 475482.

68. Коровин, С.Е., Кузьмин, З.Е., Трулевич, Н.В., Швецов, А.Н. Переселение растений. Методические подходы к проведению работ. М. : изд-во МСХА, 2001.-76 с.

69. Красная книга республики Саха (Якутия). Редкие и находящиеся под угрозой исчезновения виды растений и грибов / отв. ред. Н. Дегтярёв Якутск : НИПК Сахаполи-графиздат, 2000, Т.1, 208 с. .

70. Красная книга Читинской области и Агинского Бурятского автономного округа (растения) / Редколл.: А.П. Островский и др. Чита : Стиль, 2002. 280 с.

71. Кудрин, А.Н. Алкоголь и лекарство. М. : Наука, 1987. — 64 с.

72. Кузнецова, М.А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. М. : Медицина, 1974. - 271 с.

73. Купцов, А.И. Введение в географию культурных растений. — М. : Наука, 1975.-295 с.

74. Курганская, С.А. Полезные травы и редкие цветы на садовом учат-ке.-М. : Наука, 1995.-С. 113-115.

75. Куренцова, Г.Э. Растительность Приморского края. — Владивосток : Дальневост. кн. изд-во, 1968. — 191 с.

76. Куренцова, Г.Э. Растительность Приханкайской равнины и окружающих предгорий. — М. : изд-во АН СССР, 1962. — С. 63-64.

77. Лапин, И.П. Личность и лекарство. Введение в психологию фармакотерапии. СПб.: ДЕАН, 2001. - 415 с.

78. Лапин, И.П. Стресс. Тревога. Депрессия. Алкоголизм. Эпилепсия (Нейрокинурениновые механизмы и новые подходы к лечению). — СПб. : ДЕАН, 2004. 224 с.

79. Левина, Р.Е. Морфология и экология плодов. Л. : Наука, 1987. - С.64.

80. Левина, Р.Е. Репродуктивная биология семенных растений. М. : Наука, 1980. - С.21-60.

81. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения. Фармакогнозия: Учеб. пособие / под ред. Г. П. Яковлева — СПб. : СпецЛит, 2006. 845 с.

82. Лекарственные травы электронный ресурс. : лекарственные растения. URL: http://www.mordovnik.ru/shlemnic.

83. Литвиненко, В.И., Попова, Т.П. Флавоноиды шлемников Сибири и Дальнего Востока // Новые лекарственные препараты из растений Сибири и Дальнего Востока: тез. докл. Весоюз. научн. конф., Томск, 1986 г. Томск : Б.И., 1986. С. 91-92.

84. Логвиненко, И.Е., Логвиненко, Л.А. Интродукция лекарственных растений на Украине // Бюллетень Главного ботанического сада им. Цицина. 2003. Вып. 186. С. 4-9.

85. Макаров, А.А. Лекарственные растения Якутии и перспективы их освоения. Якутск : СО РАН, 2002. - 266 с.

86. Максимов, О.Б., Горовой, П.Г. Антиоксидантная активность листьев и коры побегов деревьев и кустарников флоры Приморья // Растительные ресурсы. 1995. Т. 38, Вып. 1. С. 61-67.

87. Мансурова, И.Д., Олимова, С.О. Активность микросомальной эта-нолокисляющей системы при алкогольной интоксикации // Экспериментальная гепатология. 1985. № 4. С. 41.

88. Методические указания по семеноведению интродуцентов / отв. ред. Н.В. Цицин. -М. : Наука, 1980. 64 с.

89. Минаева, В.Г. Лекарственные растения Сибири. Новосибирск: Наука, 1991.-С. 212-213.

90. Минина, С.А., Каухова, И.Е. Химия и технология фитопрепаратов. Учебное пособие. СПб. : ГЭОТАР-Медиа, 2004. - 560 с.

91. Миркин, Б.М., Наумова, Л.Г., Соломещ, А.И. Современная наука о растительности. М. : Логос, 2000. - 264 с.

92. Морозова, Л.М., Степанова, А.В., Магомедова, М.А. Эколого-фитоценотическая приуроченность, возрастной состав ценопопуляций и запас корневищ Rhodiola rosea L. на приполярном Урале // Раст. ресурсы. 1997. Т. 33, № 1. С.3-15.

93. Муравьева, Д.А. Фармакогнозия. — М. : Медицина, 1991. — 560 с.

94. Некрасов В.И. Актуальные вопросы развития теории акклиматизации растений. -М. : Наука, 1980. 102 с.

95. Николаев, С.М. Растительные лекарственные препараты при повреждениях гепатобилиарной системы. — Новосибирск : Наука, 1992. — 153 с.

96. Николаева, И.Г., Хобракова, В.Б., Арьяева, М.М. Серия Лекарственные растения тибетской медицины. Пятилистник кустарниковый (Курильский чай кустарниковый). — Улан-Удэ: БНЦ СО РАН, 2001. 110 с.

97. Нухимовский, Е.Л. Основы биоморфологии семенных растений: Т. 1: Теория организации биоморф. — М.: Недра, 1997. — 630 с.

98. Окладникова, Н.Н. Биологически активные вещества шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi) при интродукции в условиях in vitro : дис. канд. биол. наук / Рос. акад. наук, Сиб. отд-ние, Томск, гос. ун-т. -Томск, 2007.-175 с.

99. Олейников, Д.Н., Чирикова, Н.К., Танхаева, Л.М: Фенольные соединения шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi) // Химия растительного сырья. 2009. № 4. С. 89-981.

100. Перечень объектов растительного и животного мира, включенных в Красную книгу Приморского края: официальное издание / под ред. Н. Дегтярёва — Владивосток: Апостроф, 2002. — С. 9.

101. Петухова, И.П. Эколого-физиологические основы интродукции древесных растений. М. : Наука, 1981. — 124 с.

102. Пешкова, Г.А. Растительность Сибири: Предбайкалье и Забайкалье. — Новосибирск : Наука, 1985. 145 с.

103. Пешкова, Г.А. Степная флора Байкальской Сибири. — М. : Наука, 1972. С. 207.

104. Пименова, М.Е. Инструкция по сбору и сушке корней с корневищами шлемника байкальского. Правила сбора и сушки лекарственных растений: (Сборник инструкций). — М. : Медицина, 1985. С. 297-299.

105. Пименова, М.Е., Федорова, А.И., Белоусова, М.Я. Природная сырьевая база Patrinia intermedia (Hornem.) Roem. et Schult. в Алтайском крае и содержание тяжелых металлов в ее подземных органах. // Раст. ресурсы. 1998. Т.34, № 4. С. 18-27.

106. Поверин, Д.И., Поверин, А.Д. Ультразвуковая экстракция в промышленном производстве инстантных форм растительньх субстратов // Пиво и напитки. 2006. №1. С. 18-20.

107. Поддубная-Арнольди, В.А. Характеристика семейств покрытосеменных по цитоэмбриологическим признакам. М. : Наука, 1982. - 322 с.

108. Полная энциклопедия фитотерапии // сост. А.Н. Носов, А.И. Шретер, С .Я. Соколов и др. / URL: http://urology.com.ua/pagesid-1302.html (дата обращения 15.01.10).

109. Положий, А.В., Некратова, Н.А., Тимошок, Е.Е. Методические указания по изучению ресурсов лекарственных растений Сибири. Абакан : Хакасское книжное издательство, 1988. - 86 с.

110. Положий, А.В. Систематика цветковых растений: Учебник для биологических факультетов вузов. — Томск : изд-во Томск, гос. ун-та, 2001. — С. 240-250.

111. Попова, Т.П., Воловик, В.Г., Литвиненко, В.И. Флавоноиды шлемника байкальского // 5-ый Всесоюзный симпозиум по фенольным соединениям, Таллин, 1987 г. Таллин : Б.И., 1987. С.73-74.

112. Прозоровский, А.В. Полупустыни и пустыни СССР. Растительность СССР. М.-Л. : АН СССР, 1940. - Т. 2, - С. 207-408.

113. Рабинович, A.M., Шретер, Т.К. Изучение охраняемых видов лекарственных растений в условиях культур. М. : Наука, 1986. - 15 с.

114. Работнов, Т.А. Жизненный цикл многолетних травянистых растений в луговых угодьях // Тр. БИН АН СССР. Сер. 3. 1950. Т.6, С. 7-204.

115. Работягов, В.Д., Машанов, В.И., Андреев, Н.Ф. Интродукция эфиромасличных и пряноароматических растений. — Ялта : Б.И., 1999. 32 с.

116. Растения для нас. Справочное издание / под ред. Яковлева, Г.П., Блиновой, К.Ф. — СПб. : Учебная книга, 1996. — 626 с.

117. Саратиков, А.С. Влияние шлемника байкальского на изолированные органы. Новые лекарственные растения Сибири, их лечебные препаратысб. научно-иссл. работ. Томск : изд-во Томск, гос. ун-та, 1946. Вып. 2. С. 3840.

118. Свиридонов, Г.М. К вопросу комплексного использования сырья лекарственных растений Сибири // Растительные ресурсы Южной Сибири, их рациональное использование. 1982. С. 8—11.

119. Сергиевская, Л.П., Блинова, К.Ф., Пименова, Р.Е. О ресурсах шлемника байкальского Scutellaria baicalensis в Восточном Забайкалье // Вопросы фармакогнозии. 1968. Т.2, Вып. 5. С. 61-68.

120. Сергиевская, Л.П. Танацетовые степи Забайкалья // Известия Томского отделения Всесоюзного ботанического общества. 1959. Т.4, С. 41— 49.

121. Соболева, Р.А. Фармакогностические исследования Сибирских видов Scutellaria. Новые лечебные растения Сибири их препараты : сб. научно-иссл. работ. Томск : изд-во Томск, гос. ун-та, 1946. Вып. 2. С. 17—27.

122. Соколова, B.C., Сацыперова, И.Ф. О лекарственных растениях их препаратах и о введении в культуру // Вопросы фармакогнозии. 1961. Т. 12, С. 351-358.

123. Сосудистые растения советского Дальнего Востока / отв. ред. С.С. Харкевич. Л. : Наука, 1988. - 421 с.

124. Справочник по климату СССР / отв. ред. В.К. Храмцова. — Л. : Гидрометиздат, 1966. Вып. 26. ч. 2. — 72 с.

125. Справочник по климату СССР / отв. ред. В.К. Храмцова. — JL : Гидрометиздат, 1968. Вып. 26. ч. 4. —279 с.

126. Стальная, И.Д., Гаришвили, Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты. Современные методы в биохимии / под. ред. акад. АМН СССР В.Н. Ореховича. — М. : Медицина, 1977.-С. 66-68.

127. Стандартизация и контроль качества лекарственных средств / под ред. Н.А. Тюкавкиной. М. : МИА, 2008. - 384 с.

128. Степанова, Т.А. Фармакогностическое изучение викарных видов лекарственных растений Дальнего Востока : автореф. дис. д-ра фармац. наук / ММА им. И.М. Сеченова. Москва, 1998. - 49 с.

129. Телятьев, В.В. Полезные растения Центральной Сибири. — Иркутск : Вост.-Сиб. кн. изд-во, 1987. — 400 с.

130. Уранов, А.А. Ценопопуляции растений. М. : Наука, 1976. — 216с.

131. Фармацевтическая технология. Технология лекарственных форм : учеб. для студ. высш. учеб. заведений / под ред. Краснюка И.И., Михайловой Г.В. 3-е изд., перераб. и доп. М. : Издательский центр «Академия», 2007. -592 с.

132. Федоров, А.А., Кирпичников, Э.М., Артюшенко, З.Т. Атлас по описательной морфологии высших растений. Лист. — М. Л. : Наука, 1956. -304 с.

133. Федоров, А.А. Артюшенко, З.Т. Атлас по описательной морфологии высших растений. Соцветие. — М. : Наука, 1979. — С. 45-49.

134. Федоров, А.А. Артюшенко, З.Т. Атлас по описательной морфологии высших растений. Цветок. — Л. : Наука, 1975. — 352 с.

135. Физическая география Приморского края / отв. ред. С.В. Свину-хов. Владивосток : ДВГУ, 1990. - 208 с.

136. Хайдав, Ц., Меньшикова, Т.А. Лекарственные растения в монгольской медицине. Улан-Батор : АН МНР, 1978. - 191 с.

137. Хмелев, В.Н., Попова, О.В. Многофункциональные ультразвуковые аппараты и их применение в условиях малых производств, сельском и домашнем хозяйстве. -Барнаул : АлтГТУ, 1997. 160 с.

138. Хныкина, Л.А. Фармакологические и биологические свойства шлемника байкальского : автореф. дис. канд. фармац. наук / Томск, гос. ун-т. — Томск, 1963. 13 с.

139. Хромов, С.П. Муссоны в общей циркуляции атмосферы и современные проблемы климатологии. — Л. : Гидрометиздат, 1956. — 247 с.

140. Хромосомные числа цветковых растений / под ред. А. А. Федорова. — Л. : Наука, 1969. — 371 с.

141. Цыганок, С.Н., Шалунов, А.В. Ультразвуковые многофункциональные и специализированные аппараты для интенсификации технологических процессов в промышленности, сельском и домашнем хозяйстве. — Барнаул : алтГТУ, 2007. 400 с

142. Чемесова, И.Н. Флавоноиды видов рода Scutellaria L. // Растительные ресурсы. 1993. Т. 29, № 2. С. 89-90.

143. Чернышев, В.Д. Принципы адаптаций живых организмов. — Владивосток : Дальнаука, 1996. — 384 с.

144. Юзепчук С.В. Флора СССР. Т.20. Губоцветные. 4.1. Род шлемник Scutellaria L. - М.-Л. : Наука, 1954. - С. 72-225.

145. Afanas'ev, I.B., Ostrachovich, Е.А., Korkina, L.G. Effect of rutin and its copper complex on superoxide formation and lipid peroxidation in rat liver microsomes // FEBS letters. 1998. Vol. 425, N 2. P. 256-258.

146. Aguilar, R., Gil, L., Flint, J., et al. Learned fear, emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains // Brain research bulletin. 2002. Vol. 57, P. 17-28.

147. Alcarez, MJ. Ferrandiz, M.L. Modification of arachidonic metabolism by flavonoids // Journal Ethnopharmacology. 1987. Vol. 21, P. 209-229.

148. Anderson, B. Open-field and response-flexibility measures in the rat // Psychobiology. 1991. Vol. 19, N 4. P. 335-358.

149. Barros, H.M., Tannhauser, S.L., Tannhauser, M.A. Effects of sodium valproate on the open field behaviours of rats // Brazilian journal of medical and biological research. 1992. Vol. 25, P. 281-287.

150. Barros, H.M., Tannhauser, S.L., Tannhauser, M.A. The effects of GABAergic drugs on grooming behaviou in the open field // Pharmacology and toxicology. 1994. Vol. 74, N 6. P. 339-344.

151. Baylor, N.W., Fu, Т., Yan, Y.D., Ruscetti, F.W. Inhibition of human T cell leukemia virus by the plant flavonoid baicalin (7-glucuronic acid, 5, 6-dihydroxyflavone) // Journal Infection Diseases. 1992. Vol. 165, P. 433-437.

152. Begon, M., Mortimer, M. Population ecology. Unified study of animals and plants. London : Plenum press, 1986. - 103 p.

153. Bell-Quilley, C.P., Lin, Y.S., Hilchey, S.D. Renovascular actions of angiotensin II in the isolated kidney of the rat: relationship to lipoxygenases // The Journal of pharmacology and experimental therapeutics. 1993. Vol. 267, P. 676682.

154. Benskyn, D, Gamble, A. Chinese Herbal Medicine: Materia Medica. Revised ed. Seattle. WA. : Eastland Press, 1993. - 556 p.

155. Brigham, K.L. The Handbook of Inflammation. Vol. 6. Mediators of the inflammatory process : prostanoids. Amsterdam : Elsevier Science Publishers, 1989.-426 p.

156. Butenko, I.G. Gladtchenko, S.V., Galushko, S.V. Anti-inflammatory properties and inhibition of leukotriene C4 biosynthesis in vitro by flavonoid bai-calein from Scutellaria baicalensis Georgy roots // Journal Agents Actions. 1993. Vol. 39, P. 49-51.

157. Chedeville, O., Tosun-Bayraktar, A., Porte, C. Modeling of fenton reaction for the oxidation of phenol in water // Journal of automated methods and management in chemistry. 2005. Vol. 31, P. 31-36.

158. Chen, J., Yu, Xiao, X.Y. Study on yield and quality of Scutellaria baicalensis from different habitats // Zhongguo zhongyao zazhi., 2005. Vol. 30, N 7. P . 491-^494.

159. Chi, Y.S., Lim, H., Park, H., et al. Effects of wogonin, a plant flavone from Scutellaria radix, on skin inflammation: in vivo regulation of inflammationassociated gene expression // Biochemical pharmacology. 2002. Vol. 66. P. 1271— 1278.

160. Chu, Z.Y., Chu, M., Teng, Y. Effect of baicalin on in vivo anti-virus // China journal of Chinese materia medica. 2007. Vol. 32, P. 2413-2415.tb

161. Cotran, R.S., Kumar, V, Robbins, S.L. Pathologic Basis of Disease. 4 edition. Philadelphia : WB Saunders Co., 1989. - 1519 p.

162. Dawson, G.R., Tricklebank, M.D. Use of elevated plus-maze in the search for novel antiolytic agents // Trends in Pharmacological Sciences. 1995. Vol. 16, N2. P. 33-36.

163. Espejo, E.F. Structure of the mouse behavior on the elevated plus-maze test of anxiety // Behavioural Brain Research. 1997. Vol. 86, N 1-2. P. 105112.

164. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for Experimental and Other Scientific Purposes Strasbourg, 18. III. 1986. URL: http://conventions.coe.int/Treaty/en/Treaties/Html/123 .htm.

165. Ferguson, PJ., Kurowska, E.M., Freeman, D.J., et al. In vivo inhibition of growth of human tumor lines by flavonoid fractions from cranberry extract //Nutrition and cancer. 2006. Vol. 56, N 1. P. 86-94.

166. File, S.E. The interplay of learning and anxiety in the elevated plus-maze // Behavioural Brain Research. 1993. Vol. 58, P. 199-202.

167. Fugh-Berman, A., Cott Dietary, J.M. Supplements and Natural Products as Psychotherapeutic Agents // Psychosomatic Medicine. 1999. Vol. 61, P. 712-728.

168. Gabor, M. Anti-inflammatory and anti-allergic properties of flavono-ids // Progress in clinical and biological research. 1986. Vol. 213, P. 471-489.

169. Gabrielska, J., Oszmianski, J., Zylka, R., et al. Antioxidant activity of flavones from Scutellaria baicalensis in lecithin liposomes // Journal of biosciences. 1997. Vol. 52. P. 817-823.

170. Gao, Z., Huang, K., Xu, H. Protective effects of flavonoids in the roots of Scutellaria baicalensis against hydrogen peroxide-induced oxidative stress in HSSY5Y cells // Pharmacological Research. 2001. Vol. 43, N 2. P. 173-178.

171. Gronquist, M., Bezzerides, A., Attygalle, A., et al. Attractive and defensive functions of the ultraviolet pigments of a flower (Hypericum calycinum) // Proceedings of the National Academy of Sciences. 2001. Vol. 98, P. 745-750.

172. Hackett, A.M. The metabolism of flavonoid compounds in mammals // Progress in clinical and biological research. 1986. Vol. 213, P. 177-194.

173. Harborne, J.B. Nature, distribution and function of plant flavonoids // Progress in clinical and biological research. 1986. Vol. 213, P. 15-24.

174. Harvaux, M., Kloppstech, K. The protective functions of carotenoid and flavonoid pigments against excess visible radiation at chilling temperature investigated in Arabidopsis npq and tt mutants // Planta. 2001. Vol. 213, P. 953-966.

175. Havsteen, B.H. Flavonoids, a class of natural products of high pharmacological potency // Biochemical pharmacology. 1983. Vol. 32, N 7. P. 11411148.

176. Havsteen, B.H. The biochemistry and medical significance of the flavonoids // Pharmacology and therapeutics. 2002. Vol. 96, P. 67-202.

177. Heim, K.E., Tagliaferro, A.R., Bobilya, D.J. Flavonoid antioxidants: chemistry, metabolism and structure-activity relationships // Journal of nutritional biochemistry. 2002. Vol. 13, N 10. P. 572-584.

178. Henderson, W.J. Jr. Products of 12- and 5-lipoxygenase. Handbook of Inflammation, Vol. 6. Mediators of the Inflammatory Process. — Amsterdam : Elsevier Science Publishers, 1990. P. 45-75.

179. Higashitanai, A., Tabata, S., Hayashi, Т., et al. Plant saponins can affect DNA recombination in cultured mammalian cells // Cell structure and function. 1989. Vol. 14, P. 617-624.

180. Ho-Dzun, H., Knupffer, H., Hammer, K. Additional notes to the checklist of Korean cultivated plants. Consolidated summary and indexes // Genetic Resources and Crop Evolution. 1997. Vol. 44, P. 349-391.

181. Hsu, H.Y. Oriental Materia Medica: a concise guide. — Long Beach CA : Oriental Healing Arts Institute. 1986. 960 p.

182. Inflammation: Basic Principles and Clinical Correlates / ed. Gallin, J.I., Snyderman, R. Philadelphia : Lippincott Williams & Wilkins, 1999. — 13351. P

183. Kaluev, AN., Minasyan, A., Yan-Ru, L., et al. What Can We Learn from the Mutant Mice about the Possible Link Between Neurosteroid Vitamin D and Anxiety // Psychopharmacology and Biological Narcology. 2005. Vol. 5, N 2. P. 878-965.

184. Kaptchuk, T.J. The Web That Has No Weaver : Understanding Chinese Medicine. NY. : McGraw-Hill, 2000. - 464 p.

185. Kim, E.H., Shim, В., Kang, S., et al. Anti-inflammatory effects of Scutellaria baicalensis extract via suppression of immune modulators and MAP kinase signaling molecules // Journal of ethnopharmacology. 2009. Vol. 126, P. 320331.

186. Kim, Y.H., Jeong, D.W., Kim, Y.C. Pharmacokinetics of baicalein, baicalin and wogonin after oral administration of a standardized extract of Scutellaria baicalensis, PF-2405 in rats // Archives of pharmacal research. 2007. Vol. 30, N 2. P. 260-265.

187. Kubo, M., Kimura, Y., Odani, T. Studies on Scutellariae radix. Part II: The antibacterial substance // Planta Medica. 1981. Vol. 43, P. 194-201.

188. Kubo, M. Matsuda, H., Tanaka, M. Studies on Scutellariae radix. Anti-arthritic and anti-inflammatory actions of methanolic extract and flavonoid components from Scutellaria radix // Chemical and pharmaceutical bulletin. 1984. Vol. 32, P. 2724-2729.

189. Kummalue, T. Molecular Mechanism of Herbs in Human Lung Cancer Cells // Association medical journal. 2005. Vol. 88, N 11. P. 1725-1734.

190. Lai, M.Y., Hsiu, S.L., Chen, C.C. Urinary pharmacokinetics of baicalein, wogonin and their glycosides after oral administration of Scutellariae Radix in humans // Biological and pharmaceutical bulletin. 2003. Vol. 26, N 1. P. 79-83.

191. Li, В., Fu,T., Dongyan, Y., et al. Flavonoid baicalin inhibits HIV-l infection at the level of viral entiy // Biochemical and biophysical research communications. 2000. Vol. 24, P. 534-538.

192. Li, В., Fu, Т., Yan, Y. Inhibition of HTV infection by baicalin: a flavonoid compound purified from Chinese herbal medicine // Cellular and molecular biology research. 1993. Vol. 39, P. 119-124.

193. Limasset, В., Le Doucen, С., Dore, J. Effects of flavonoids on the release of reactive oxygen species by stimulated human neutrophils // Biochemical pharmacology. 1993. Vol.46, P. 1257-1271.

194. Liu, S., Ma, Z., Cai, H., et al. Inhibitory effect of baicalein on IL-6-mediated signaling cascades in human myeloma cells // European journal of hae-matology. 2010. Vol. 84, N 2. P. 137-144

195. Ma, Y.H., Gebremedhin, D., Schwartzman, M. L. 20-hydroxyeicosatetraenoic acid is an endogenous vasoconstrictor of canine renal arcuate arteris // Circulation research. 1993. Vol. 72, P. 126-136.

196. Mahmood, N., Pizza, C., Aquino, R. Inhibition of HIV infection by flavanoids // Antiviral research. 1993. Vol.22, P. 189-199.

197. Marsh, G.A. Glucuronide metabolism in plants. The isolation of fla-vone glucuronide from plants // Biochemical Journal. 1955. Vol. 59, N 1. P. 58-62.

198. Martin, J., Dusek, J. The Baikal skullcap (Scutallaria baicalensis Georgi) — a potential source of new drugs // Ceska a Slovenska farmacie : casopis Ceske farmaceuticke spolecnosti a Slovenske farmaceuticke spolecnosti. 2002. Vol. 51, P. 277-283.

199. Matthews, D.B., Simson, P.E., Best, P.J. Acute ethanol impairs spatial memory but not stimulus response memory in rats // Alcoholism, clinical and experimental research. 1996. Vol. 20, N 2. P. 404-407.

200. Mills, S.Y. Out of the Earth: The Essential Book of Herbal Medicine. England : Vikino Arkana, 1992. - 704 p.

201. Miyahara, M., Tasumi, Y. Suppression of lipid peroxidation by sho-saiko-to and its components in rat liver subcellular membranes // Yakugaku-Zasshi. 1990. Vol. 10, P. 407-413.

202. Morgan, S.L., Baggott, J.E., Moreland, L., et al. The safety of flavo-coxid, a medical food, in the dietary management of knee osteoarthritis //. Journal of medicinal food. 2009. Vol. 12, P. 1143-1148.

203. Morimoto, P.I., Kline, M.P., Bimston, D.N., et al. The heat shock response: regulation and function of heat-shock proteins and molecular chaperones // Essay Biochemistry. 1997. Vol. 32, P. 17-29.

204. Murray, M. Flavonoids: tissue-specific antioxidants// Abstracts of the GAIA Symposium Proceedings, June 4-7, 1994, Harvard. Harvard, 1994. P. 107110.

205. Nagai, H.K., Osuga, A., Koda, A. Inhibition of hypersensitivity reactions by soluble derivatives of baicalein // Japanese journal of pharmacology. 1975. Vol. 25, P. 763-772.

206. Nagai, Т., Yamada, H., Otsuka, Y. Inhibition of mouse liver sialidase by the root of Scutellaria baicalensis // Planta Medica. 1989. Vol. 55, P. 27-29.

207. Nagai, Т., Miyaichi, Y., Tomimori, T. In vivo anti-influenza virus activity of plant flavonoids possessing inhibitory activity for influenza virus sialidase //Antiviral research. 1992. Vol. 19, P. 207-217.

208. Nishioka, Y., Kyotani, S., Miyamura, M. Influence of time of administration of a Shosaiko-To extract granule on blood concentration of its active constituents // Chemical and Pharmaceutical Bulletin. 1992. Vol. 40, P. 1335-1337.

209. Ono, K., Nakane, H., Fukushima, M. Differential inhibitory effects of various flavonoids on the activities of reverse transcriptase and cellular DNA and RNA polymerases // European journal of biochemistry. 1990. Vol. 190, N 3. P. 469-479.

210. Paton, A. The global taxonomic investigation of Scutellaria (Labiatae) // Kew Bulletin. 1992. Vol. 45, N 3. P. 400-450.

211. Pengelly, A. The constituents of Medicinal plants. An Introduction to the Chemistry and Therapeutics of Herbal Medicines. 2nd edition. England : CA-BI, 2004.-184 p.

212. Peterson, J., Dwyer, J. Flavonoids: Dietary occurrence and biochemical activity // Nutrition research. 1998. Vol. 18, N 12. P. 1995-2018.

213. Pierpoint, W.S. Flavonoids in the human diet // Progress in clinical and biological research. 1986. Vol. 213, P. 125-140.

214. Ross, J.A., Kasum, C.M. Dietary flavonoids: Bioavailability, metabolic effects, and safety // Annual review of nutrition. 2002. Vol. 22, P. 19—34.

215. Santacata, V.P., Alvarez Pelaez, R., Tejedor, P. Effect of the lesion of the mamillary bodies on the performance in the open field // Physiology and behavior. 1982. Vol. 9, P. 501-504.

216. Sato, Т., Kawamoto, A., Tamura, A. Mechanism of antioxidant actions of Pueraria glycoside (PG)-l (an isoflavonoid) and mangiferin (a xanthoid) // Chemical and pharmaceutical bulletin. 1992. Vol. 40, P. 721-724.

217. Spedding, G., Ratty, A., Middleton, E. Jr. Inhibition of reverse transcriptases by flavonoids // Antiviral research. 1989. Vol. 12, P. 99-110.

218. Swain, T. The evolution offlavonoids // Progress in clinical and biological research. 1986. Vol. 213, P. 1-15.

219. Tang, W., Eisenbrand, G. Chinese Drugs of Plant Origin: Chemistry, Pharmacology, and Use in Traditional and Modem Medicine. — NY. : Springer-Verlag, 1992. P. 159.

220. Tierra, L.L. The Herbs of Life: Health and Healing Using Western and Chinese Techniques. — CA : The Crossing Press, 1992. — 250 p.

221. Tsao, T.F., Newman, M.G., Kwok, Y.Y., et al. Effect of Chinese and Western antimicrobial agents on selected oral bacteria // Journal of dental research. 1982. Vol. 61, P. 1103-1106.

222. Tsumura, A. Kampo: How the Japanese Updated Traditional Herbal Medicine. NY. : Japan Publications Inc, 1991. - 283 p.

223. Van Acker, S.A., van Balen, G.P., van den Berg D.J., et al. Influence of iron chelation on the antioxidant activity of flavonoids // Biochemical pharmacology. 1998. Vol. 56, N 8. P. 935-943

224. Walle, T. Absorption and metabolism of flavonoids // Free radical biology and medicine. 2004. Vol. 36, N 7. P. 829-837.

225. Wang, S.R., Guo, Z.Q., Liao, J.Z. Experimental study on effects of 18 kinds of Chinese herbal medicines for synthesis of thromboxane A2 and PGI2 // Chung Kuo Chung Hsi I Chieh Ho Tsa Shin. 1993. Vol. 13, P. 167-170. Article in Chinese.

226. Welton, A.F., Tobia, L.D., Fiedler-Nagy, C. Effect of flavonoids on arachidonic acid metabolism // Progress in clinical and biological research. 1986. Vol. 213, P. 231-242.

227. White, A.M., Simson, P.E., Best, P.J. Comparison between the effects of ethanol and diazepam on spatial working memory in the rat // Psychopharmo-cology. 1997. Vol. 133, N 3. P. 256-261.

228. Yamamoto, H. Scutellaria baicalensis: In Vitro Culture and the Production of Flavonoids. Biotechnology in Agriculture and Forestry. Vol. 15, Medicinal and Aromatic Plants III. Berlin : Springer-Verlag, 1991. -P. 398-418.

229. Yu, J. Study on yield and quality of Scutellaria baicalensis from different habitats // Zhongguo zhongyao zazhi. 2005. Vol. 30, N 7. P. 491-494.

230. Zhang, X.P., Tian, H., Cheng, Q.H. The current situation in pharmacological study on baicalin // Chinese Pharmacological Bulletin. 2003. Vol. 19, N 11. P. 1212-1215.

231. Zhou, X.Q., Liang, H., Lu, X.H., et al. Flavonoids from Scutellaria baicalensis and their bioactivities // Journal of Peking University. Health sciences. 2009. Vol. 41, P. 578-84.

Информация о работе

Маняхин, Артем Юрьевич
кандидата биологических наук
Владивосток, 2010
ВАК 03.02.14

Диссертация

Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi) на юге Приморского края - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы