Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

СЕЛЕКЦИЯ КЛЕВЕРА ЛУГОВОГО {TRIFOLIUMPRATENSEL.) НА УСТОЙЧИВОСТЬ К КОМПЛЕКСУ СТРЕССОВЫХ ФАКТОРОВ КИСЛЫХ ПОЧВ НА СЕВЕРО-ВОСТОКЕ ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "СЕЛЕКЦИЯ КЛЕВЕРА ЛУГОВОГО {TRIFOLIUMPRATENSEL.) НА УСТОЙЧИВОСТЬ К КОМПЛЕКСУ СТРЕССОВЫХ ФАКТОРОВ КИСЛЫХ ПОЧВ НА СЕВЕРО-ВОСТОКЕ ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ"



На правах рукописи

ОНУЧИНА Ольга Леонидовна

СЕЛЕКЦИЯ КЛЕВЕРА ЛУГОВОГО (TRIFOLIUMPRATENSE L.) НА УСТОЙЧИВОСТЬ К КОМПЛЕКСУ СТРЕССОВЫХ ФАКТОРОВ КИСЛЫХ ПОЧВ НА СЕВЕРО-ВОСТОКЕ ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ

Специальность 06.01.05 — селекция я семеноводство

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Киров-2007

Диссертационная работа выполнена в Государственной учреждении Фаленская селекционная станция НИИСХ Северо-Востока

Научный руководитель: доктор биологических наук

Мазин Валентин Викторович

Официальные оппоненты ¡доктор сельскохозяйственных наук, профессор

Осокин Иван Васильевич

кандидат сельскохозяйственных наук, доцент Юферева Надежда Ильинична

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Ижевская государственная

сельскохозяйственная академия

Защита диссертации состоится « 21 » мая 2007 г. в 14 ч. на заседании диссертационного совета ДМ 220.022.03 при ФГОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 610017, г. Киров, Октябрьский пр-т, д. 133, ЧУД. Б-206.

Факс (8332) 54-86-33, E-mailrvsaa@insysnet.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Вятской государственной сельскохозяйственной академии.

Автореферат разослан « 20 » апреля 2007 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук, доцент CX^jit-cfs^ О.С. Кривошеина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕР!

Актуальность темы. Широкое распространение клевера лугового в России обусловлено его высокими кормовыми достоинствами, разнообразием использования кормовой лассы, положительным воздействием на почвенное плодородие, в т. ч. на баланс азота за счет его азотфгассирующей способности.

В Волго-Вятском регионе наряду с позднеспелыми одноукосными сортами Кировский 159, Фаленский 1, Фаленский 86 в последние годы (1999-2002 гг.) занесены в Госреестр селекционных достижений РФ средне- и раннеспелые двуукосные сорта Орфей, Кудесник (4п), Мзртум (авторство диссертанта 5%).

Фактором, лимитирующим урожайность и замедляющим процессы азот-фиксации клевера лугового, является повышенная кислотность почвы. Проблема рационального использования н изкоплодородных кислых почв во всем мире решается в трех направлениях: 1) известкование, фосфоритование, повышение содержания органического вещества; 2) использование кислотоустойчивых сортов и видов растений; 3) комбинирование первых двух направлений. Обострившийся экономический кризис последних лет привел к резкому снижению темпов известкования и выдвинул проблему создания кислотоустойчивых сортов на первое место. В регионе Евро-Северо-Востока, тле 21,1% пахотных земель занимают сильнокнслые почвы (рН < 4,5), особенно остро стоит необходимость создания кислотоустойчивых сортов с комплексом ценных признаков.

Цель исследований — изучить исходный материал клевера лугового на почвах ^повышенной кислотностью, создать перспективный кислотоустойчивый селекционный материал и сорта, обладающие комплексом ценных хозяйственно-биологических признаков, адаптированные к условиям Северо-Востока европейской части России.

В задачи исследований входило:

• изучить особенности произрастания на кислых почвах сортообразцов клевера лугового из мировой коллекции ВИРа и других научно—исследовательских учреждений;

- выделать источники хозяйственно-ценных признаков для практической селекшш на кислотоустойчивость;

- оценить в полевых условиях растения-регенераты клевера лугового (Ио-В^), созданные методом отбора т \itro', ■ ■

• сформировать к изучить новый селекционный материал по комплексу хозяйственно-ценных признаков на почвах с повышенной кислотностью;

- разработать схему создания кислотоустойчивого селекционного материала клевера лугового с использованием клонального микроразмножения генотипов, прошедших отбор гп лп(го на селективных питательных средах;

- создать сорта клевера лугового, адаптированные к почвенно-клиыатнче-ским условиям Северо-Востока европейской части России.

Научная новизна исследований. Впервые в условиях Северо-Востока европейской части России проведено комплексное изучение на кислой почве по биологическим и хозяйственным признакам 30 коллекционных сортообразцов

— РГАУ-МСХЯ--

имени К.А. Тимирязева ЦНБ имени Н.И. Железное» Фонд научный СТИКА РАБОТЫ

клевера лугового различного эколого-географического происхождения, рсгене-рантов (Ro-Rj) и поликроссных популяций, дана оценка их устойчивости к стрессовым факторам таких почв, выделены источники хозяйственно-ценных признаков для практической селекции на кислогоустойчивость.

Провезена адаптация растений-регенерантов к почвенной культуре. Созданы перспективные селекционные номера.

Созданы два сорта клевера лугового: Грин (доля авторства диссертанта 25%) и Кретуиовский (доля авторства диссертанта 30%). Практическая ценность работы. Выявлены:

- источники ценных хозяйственно-биологических признаков для селекции клевера лугового на устойчивость к комплексу стрессовых факторов кислых почв в условиях Северо-Востока европейской части России;

- растения-регенераты клевера лугового, обладающие ценными признаками для селекции на кислотоустойчивость.

Разработана схема создания кислотоустойчивого селекционного материала клевера лугового с использованием растений-регенерантов.

Созданы перспективные регенератные линии Р-10а и Т-2а, клоновые популяции П-21,П-27 с повышенной устойчивостью к токсическим факторам кислой почвы ц хозяйственно-ценными признаками.

Созданы сорта клевера лугового (в соавторстве): -

- Грин - передан на Государственное сортоиспытание б 2004 году;

- Кретуновский — внесен в Государственный реестр с 2003 года по Северному, Ссверо - Западному, Центральному н Волго - Вятскому регионам РФ.

Положения, выносимые на защиту:

- кислотоустойчивые сортообразцы клевера лугового;

- селекционный материал, созданный in vitro на селективных питательных средах с ионами алюминия и водорода;

- схема создания кислотоустойчивого селекционного материала с использованием растений-регенерантов; <

- новые сорта клевера лугового, адаптированные к почвенно-климатическим условиям Северо-Востока европейской части России.

Апробация работы н публикации, результаты исследований доложены на научной сессии РАСХН (Киров, 199$ г.); V молодежной научной конференции (Сыктывкар, 1998 г.); конференции EUCARPIА (С-Петербург, 1999 г.); Международной научно-практической конференции (Киров, 2005 г.), ежегодных заседаниях методической комиссии и Ученого Совета ЗНИИСХ С-13; совещаниях творческого объединения селекционеров «Клевер» во ВНИИ кормов. Основные материалы и положения диссертации опубликованы в 18 печатных работах.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 176 страницах, состоит из введения, пяти глав, выводов, предложений селекционной практике и производству, содержит 40 таблиц, 14 рисунков н 25 приложений. Список литературы включает 234 источника, в т. ч. 70 иностранных авторов.

Условия, материал и методика исследований

Экспериментальная работа выполнена в 1995-2006 гг. в Государственном учреждении Фаленская селекционная станция НИИСХ Северо-Востока.

Климат Кировской области умеренно-континентальный с продолжительной многоснежной, холодной зимой и умеренно-теплым летом. Продолжительность периода активной вегетации на севере 106, на юге - 145 дней. Сумма осадков за период вегетации составляет 250. ..300 мм на юге и 320. ..400 мм на севере. Сумма активных температур - 1700... 1900 "С, Гидротермический коэффициент - 1,0... 1,5. Неблагоприятной особенностью климата являются поздние весенние и ранние осенние заморозки. Безморозный период длится 94... 115 дней. Вероятность засушливых лет составляет 25%.

Условия перезимовки в большинстве лет исследований были удовлетворительными. Вегетационные периоды различались по температурному режиму и количеству осадков, что позволило объективно оценить изучаемый материал.

Весенней или летней засухой продолжительностью более 10 дней характеризовались 9 из 11 лет исследований. Наиболее благоприятными для формирования кормовой массы были 2004 и 2005 гг. Условия для опыления и созревания семян складывались удовлетворительно, за исключением 2002 г. (сумма эффективных температур 70,3% к норме) н 2005 г. (дожди в период цветения).

Исследования проводились на дерново>среднеподзол истой средиесупли-нистой почве с различными агрохимическими показателями пахотного горизонта: 1) рНип 3,84...3,98 (потенциометрически); А1* - 20,16...24,12 мг/100 г почвы (по Соколову); P2Os — 35...55 мг/кг; КгО - 62. ..84 мг/кг (по Кирсанову); гумус 1,68.. .2,92 % (по Тюрнну) - далее по тексту "кислый фон"; 2)рНш 5,65...6,95, Al5t - 0...0.54 мг/100 г почвы; сумма поглощенных оснований 1,9...17,00 мг-экв/100 г почвы, гндрошггическая кислотность 2,05...3,66 мл-экв/100 г почвы, P2Oj 192.,.255 мг/кг почвы, КгО 133...190 мг/кг почвы, гумус 2,41...2,76%- контрольные участки для оценки регенерантов.

В качестве контроля для коллекционного питомника был взят кислый фон, известкованный по 1,0 Нг.

Материалом исследований служили коллекционные образцы, полученные из ВИРан других научно-исследовательских учреждений, сорта и селекционные номера НИИСХ Северо-Востока и Фаленской селекционной станции.

Коллекционные образцы изучали на делянках площадью I м2, посев рядовой, повторноегь 4-кратная, расположите делянок рендомизированное.

В качестве основных методов создания нового селекционного материала применяли отборы на селективных средах in vitro (Н* и А13+) и в рулонной культуре (Н* и АР) с последующими многократными отборами биотипов на полевых провокационных по содержанию ионов водорода и алюминия фонах.

Отбор генотипов клевера лугового в культуре in vitro и их клоиаяьное микроразмножение проведены J1.A. Солодкой и Л.И. Лапотышкиной (ВНИИ кормов) по методикам, разработанным в отделе биотехнологии и клеточной селекции ВНИИ кормов (1987, 1990,2002); в рулонной культуре - по методике, разработанной в лаборатории эдафической устойчивости растений ЗНИИСХ С-В.

Оценка растений-регенеранто в Ro проводилась при индивидуальном стоянии (40 х 40 см). Семенное потомство растений-регенерантов (Rt) изучали при рядовом способе посева на делянках площадью 1 м!в 3-кратной поеторности при использовании на кормовые цели и семена; линии (Ri). клоновые и поли-кроссные популяции - на делянках площадью 5 м1» 5-ти повторениях.

Закладка опытов, наблюдения, оценки и учеты проводились в соответствии с методическими указаниями ВИРа (1975), ВИКа (1984,1985,1996,2002), методикой Госкомиссии по сортоиспытанию с.-х. культур (1985).

Кислотоустойчиво сть коллекционных сортообразцов, регенерантов и селекционных номеров клевера лугового оценивали по степепи депрессии продуктивности сухого вещества под влиянием комплекса стрессовых факторов кислых почв в сравнении с контропямн (известкованный или естественный фон с pH близкой к нейтральной), исходными формами и стандартами (позднеспелый Фаленский 1, среднеспелый Дымковский и раннеспелый Трио).

Анализ растительных образцов проведен в лаборатории агрохимии и качества Фаленской селекционной станции:' содержание общего азота в сухой массе — по методу Кьельдаля в модификации Сереньева, сырой клетчатки — по методике, описанной A.B. Петербургским (1954).

Статистическая обработка данных проведена по ЕЛ. Доспехову (1985) с использованием «Пакета... программ AGROSt версия 2.06» (1997).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Изучение коллекционных сортообразцов клевера лугового

С целью выявления ценного исходного материала нами в 1995-1997 гг. изучено по комплексу хозяйственно-ценных признаков и устойчивости к кислотности почвы 30 коллекционных сортообразцов, представленные, в основном, Восточноевропейской и Скандинавской группами сортотипов (83,3% от изученных), характеризующихся, по данным ВИРа, высокой зимостойкостью.

Продолжительность вегетационного периода. В качестве источников скороспелости выделены сорта: Йыгева 433 (Эстония), Марс (ВНИИ кормов), Пеликан (Пензенский НИИСХ) и селекционный номер 14595 (Фаленская селекционная станция) с периодами до начала цветения и созревания семян на 2-12 дней короче, чем у среднеспелого стандарта Дымковский.

Зимостойкость сортообразцов на почве с повышенной кислотностью варьировала от 70,0 до 96,7%. Высокозимостойкими в таких условиях (91,095,6%) были сорта Восточноевропейской и Скандинавской групп сортотипов (76% от изученных), Кавказской (Дарьял) и Прибалтийской (Йыгева 433).

Превышали контроль по зимостойкости (на 2,3-5,4%) — позднеспелые сорта Ватажский местный, Сиворицкнн 416, Кильмезский местный, Седум, среднеспелые Уральский двуу косный, ВИК-7, Лобановский, раннеспелый Пеликан.

Высота растений- Стрессовые факторы кислой почвы отрицательно влияли на высоту растений большинства сортообразцов. Выделены сорта (29,6%), у которых высота растений 1-го укоса равна на кислом и известкованном фонах.

Превысит» соответствующие стандарты (на 6,9-30,9%) на почве с повышенной кислотностью: в 1-м укосе — позднеспелые Витязь (4п), Ъширязевец (4п), В адский местный, Пермский местный, среднеспелые Заря и Дарьял; во 2-м укосе - раннеспелые Марс (4п), Йыгева 433, номер 14595, среднеспелый ВИК-7.

Сбор сухого вещества. Основной показатель устойчивости к кислотности почвы — степень снижения урожая под влиянием стрессового воздействия (Удо-вснко Г.В., 198$). Высокой кислотоустойчивостью характеризовались сорта клевера лугового Пермский местный, Сгодолшденский и Кильмезский местный: продуктивность сухого вещества была на уровне контроля (-3,8-4,5%).

Меньшей, чем у стандартов (на 2,5-10,5%), депрессией продуктивности сухого вещества характеризовались позднеспелые сорта кировской селекции Витязь (4п), Фаленский 86 и Кировский 159; Вадский местный (Нижегородская область), Сиворицкий 416 (Ленинградская область); среднеспелые сорта ÍVIVR-68 (Швеция), Уральский двуукосный (Свердловская область), Hija 47004 (Финляндия) и раннеспелый сорт Марс, 4п (Московская область).

Высокопродуктивными по сбору сухого вещества на кислом фоне (прибавки к стандартам 11,1-38,9%) были позднеспелые сорта Витязь (4п), Фаленский 86, Кировский 159, Пермский местный и среднеспелый сорт Hija 47004.

Качество кормовой массы клевера лугового определяется содержанием белка, облиственностъю растений, устойчивостью к антракнозу и др. Выделены источники повышенного содержания сырого протеина - позднеспелые сорта Кировский 159, Фаленский 86, Витязь, СибНИИК-Ю, Вадский местный, Двинский; среднеспелые ЛобановскнЙ, Уральский двуукосный, WWR-68; раннеспелые Йыгева 433 и номер 14595, превысившие на кислом фоне соответствующие стандарты на 7,2-16,4%, и высокооблиственные сортообразцы (25,9% от изученных) с прибавками к стандартам 6,6-20,3%.

Поражение сортов клевера лугового антракиозом в первый и второй roa пользования на естественном кислом фойе было, в основном, слабым и изменялось от 0,4 до 23 балла. Сортов устойчивых к этому заболеванию не выявлено.

Семенная продуктивность клевера лугового является результатом сложного взаимодействия растений с условиями среды. Выявлены сортообразцы (33,3%), превышающие контроль (на 6,8-16,6%) по семенной продуктивности или различающиеся с ним несущественно (± 2,7-3,2%): позднеспелые сорта Кильмезский местный, ВатажскиЙ местный, Сиворицкий 416, Двинскнй, СибНИИК-10, среднеспелые Hija 47004, WWR-6Z, Лобановский и раннеспелый Йыгева 433, который также превысил и стандарт на 27,5%

В результате исследований выделены сортообразцы, обладающие комплексом ценных хозяйственных и биологических признаков для использования в селекции на повышенную кисл стоусто Йчи во стъ (табл. 1).

Таблица 1 - Характеристика кислотоустойчивых сортообразцов клевера лугового по основным хозяйственно-ценным признакам, 1996-1997 гг. _

Сортообразец Группа спелости * Фон** Зимостойкость, % Сбор сухого вещества, кг/м5 Высота растений 1 ук.,см Содерж. сырого протеина, %

Витязь (4п), РФ п 1 95,1 1,25 82,1 14,00

2 95,5 U1 83,3 15 ДО

Фаленский 86, РФ п 1 94,8 1,20 70,8 14,12

2 94,8 1,29 72,5 15,31

Кировский 159, РФ II I 95,6 1,08 71,5 14,37

2 97,8 1,18 73,3 15,81

Пермский мест., РФ п 1 93,4 1,00 72,6 12,87

2 93,9 1,04 72¿ 14,19

Кильмезский м„ РФ п 1 95,0 0,85 70,5 12,56

2 91,2 0,89 70,4 16,31

Стодолишенск., РФ п 1 93,4 0,92 70,1 13,00

2- 97,2 0,96 74,6 16,12

Фаленский 1, станд. п 1 94,5 0,90 67,9 12,35

2 95,8 1,06 71,0 12,44

Нуа 47004, Фннл. с 1 92,9 1,02 69,7 12,25

2 93,2 1,20 77,9 . 15,06

Дымковский, стать с 1 94,9 0,87 67,0 13,47

2 96,1 1,09 69,2 15,50

№14595, РФ р 1 93,4 0,71 59,8 15,69

2 95,7 0,84 64,0 16,62

Йыгева 433, Эстония р I 93,0 0,72 57,6 15,44

2 93,8 0,88 61, t 14,25

Трио, стандарт р 1 92,4 0,76 65,2 13,50

2 94,1 0,91 67¿ 15,56

3,3 0,09 4,3 1,4

НСРв (^м) 1,5 0,05 0,5

НСРАВ(п|шд|) 5,0 0,15 6,2 2,1

* п — позднеспелые (68-76 дней до цветения), с - среднеспелые (63-67), р — раннеспелые (56-59); ** - I — кислый фон; 2—известкованный фон (контроль)

Следует отметить, что более высокой кислотоустойчивостыа в наших исследованиях отличались позднеспелые одноукосные сорта, что и обусловило необходимость повышения устойчивости у раннеспелого селекционного материала.

Оценка нового селекционного материала клевера лугового, созданного методом отбора in vitro

Для селекции in vitro взяты:

- гибрид Fj [Зиновский (позднеспелый сорт селекции НИИСХ Северо-Востока) х Марино (раннеспелый немецкий сорт)] - селекционный номер М 266;

- селекционный номер 14595 (Фаленская селекционная станция), созданный методом массового отбора из местного дикорастущего э котил а;

- сорт Трио (селекши Фаленской селекции гной станции, НИИСХ Северо-Востока и ВНИИ кормов).

На селективных средах было отобрано 50 кислотоустойчивых генотипов, в т.ч. 40 — из гибридной популяции Зиновский х Марино, 7 - из номера 14595 и 3 - из сорта Трио. Растения-регенераты (около 1,5 тыс.) были изучены нами в полевых опытах в условиях Фаленской селекционной станции. Проведена адаптация растений, выращенных in vitro, к условиям почвенной культуры, для чего растения - регенераты из пробирок высаживали в ящики с почвой. Для поддержания влажности накрывали их полиэтиленовой пленкой на 5-7 дней. Нами достигнута высокая приживаемость растений-регекерактов — 95-100%. Растения выращивали в пленочной теплице при естссгвснном освещении до фазы кущения, а затем высаживали в поле, используя в качестве экрановой изоляции между, клонами тимофеевку луговую.

Изучение растени Й-регенерзнтов Rq на кислом и нейтральном фонах

Отмечена высокая сохранность растений-ре генерантов (97,4-100,0%) к концу первого года жизни на кислой почве, что говорит о повышенной кислого* устойчивости селекционного материала, созданного в условиях in vitro.

Ко второму году жизни сохранились также все клоны, но выявлена их различная зимостойкость. К высокозимостойким (перезимовало растений от 90,0 до 100,0%) на кислом фоне отнесены 62,5% клонов гибрида Зиновский х Марино, 42,9% - номера 14595, 50,0% - сорта Трио. У 37,5% клонов гибрша Зиновский х Марино и 66,6% клонов номера 14595 зимостойкость на кислом фоне была выше на 53-55,8% нейтрального.

Визуальная оценка растеннй-регенерантов по морфологическим признакам не выявила значительных отклонений от исходных форм. Отмечено отсутствие рисунка на листочках у Трех клонов гибрида Зиновский х Марино (Р4, Р9 и Р10), но в исходной популяции также встречаются такие растения.

Различия между растениями - регенератами по продолжительности вегетационных периодов определялись исходным материалом. Клоны раннеспелых сорта Трио и номера 14595 незначительно различались (+1-4 дня) по данному

признаку между собой и исходными формами, клоны гибридной популяции — значительнее (до 21 -22 дней), причем основное их количество (75%) были среднеспелыми, как и исходный образец. _ ,

Значительного замедления в наступлении фазы начала цветения под влиянием почвенных стресс-факторов в наших опытах не выявлено. Основная масса растений зацветала одновременно с контролем.

По другим хозяйственно-биологическим признакам отмечена депрессия развития растений-регенерантов под влиянием стресс-факторов, но степень проявления была различной: в меньшей степени снижалось количество листьев, соцветий и высота растений (на 1,2-18,1% в сравнении с нейтральным фоном), значительнее - количество стеблей (на 42,6-51,5%).

Не отмечено четкой закономерности проявления признака семенной продуктивности растений-регенерантов от фона. Все клоны номера 14595 и сорта Трио существенно снизили семенную продуктивность (в среднем на 80,7%). Пять клонов гибридной популяции Зиновский х Марино на 86,7-209,0% превышали контроль по продуктивности семян (рис. I).

■ч^—ИМШаДММ!^!) .........f I ВМ-—

Р-1 Р-2 Р-17 Р-$ Р-16 О нейтральный фон О кислый фон

Рис. 1 — Семенная продуктивность (г/растение) выделившихся клонов (ОД гибридной популяции Зиновский х Марино, 1996 г.

Предварительная оценка клонов в полевых условиях позволила нам предположить, что уже в-йо можно выделить генотипы, превосходящие или, по крайней мере, ие уступающие по некоторым хозяйственно-ценным показателям на кислой почве таковым на нейтральном фоне.

Семенное потомство растений-регенерантов получали путем внутри кл о-нового переопыления в условиях изоляции, в основном, на нейтральном фоне. У части клоков семена были получены и на кислой почве.

Характеристика семенного потомства растений-регенерантов Л^Л

по хозяйственно-ценным признакам ■ Оценка семенного потомства растений-регенерантов {28 линий гибридной популяции Зиновский х Марино и 5 линий номера 14595) на контрастных по содержанию ионов алюминия и водорода почвенных фоках в сравнении с исходными формами и стандартами позволила выделить линии с повышенной кисло-тоусгойчивостью, высокой продуктивностью сухого вещества и другими хозяйственно-ценным и признаками.

Кислотоу стойчивостью характеризовались четыре регенератные линии номера 14595 и три - гибридной популяции Зиновский х Марино г продуктивность сухого вещества на кислом фоне была равна контролю (+ 6,7-7,8%) или

достоверно выше (линия К11а)на 14,9% (рис. 2). ^

0,900,800,70 0,600,500,40 0,30 0,20 0,10 о,оо

б)

К!1* К11 К1а К7а иск. форма Трио. ст.

□ кислый фон В контроль

Рис. 2 — Продуктивность сухого вещества кислотоустойчивых регенератных линий (К)): а) среднеспелой гибридной популяции Зиновский х Марино (19981999 гг.); б) раннеспелого номера 14595 (1999-2000 гг.), кг/м1

Большинство линий снижали продуктивность сухого вещества на почве с повышенной кислотностью, однако, уровень депрессии у половины линий гибридной популяции Зиновский х Марино и 80% линий номера 14595 был ниже (на 7,6-41,6%), чем у исходных форм, что говорит о возможности отбора кислотоустойчивых генотипов в условиях in vitro. Кроме того, большинство регене-рантов в меньшей степени, чем их исходные формы, снижали не только продуктивность сухого вещества, но и другие хозяйственно-ценные признаки (табл. 2).

Таблица 2—Эффективность отбора кислотоустойчивых генотипов клевера лугового методом in vitro

Признак Количество линий (К|) с меньшей депрессией признака к исходной форме(%) Отклонения от исходной формы, %

Зиновский х Марино № 14595 Зиновский х Марино № 14595

Сбор сухого вещества 50,0 80,0 7,6...41,6 8,3...40,0

Зимостойкость 84,6 80,0 0,5...7,0 1,0...10,5

Высота растений 1 укоса 65,4 40,0 0,2...32^ 11,1.„17,6

Семенная продуктивность 92,3 75,0 3,5.. Д 28,9 4,3.. .26,3

Масса 1000 семян 73,1 75,0 0,8... 19,1 8,1... 20,2

Оценка регенерантов (1^) клевера лугового по устойчивости к антракнозу показала, что около половины (46,2%) линий Зиновский х Марино и исходная популяция поражались на уровне контроля или слабее на ОД-1,1 балла, при поражении стандарта - на 0,6-0,9 балла выше контроля.

Отмечено также, что интенсивность развития корневых гнилей на почвах с повышенной кислотностью была слабее, чек в контроле. Так, у регенерантов номера 14595 внутреннее поражение корня снижалось на 0,8-21,8%, наружное-на 0,4-17,2%. Выделена линия К11 (исходная форма — номер 14595) устойчивая к корневым гнил ям (внутреннее поражение корня на кислом фоне — 16,2, стандарта -28,3%, внешнее - соответственно 18,9 и 39,5%).

В результате изучения выделено 18 перспективных линий, которые на почве с повышенной кислотностью превышали не только исходные формы, но и стандарты по ряду хозяйственных и биологических признаков (табл. 3).

Таблица 3 - Характеристика регенератных линий (КО клевера лугового, выделившихся на почвах с повышенной кислотностью

Линия Зимостойкость, % Сбор сухого вещества Высота растений. см Облист-вен- ность, %

кг/м1 % к исх. форме %кст. 1 укос 2 укос

Регенератные линии гибридной популяции ЗиновскиЙ х Марино, 1993-1999 гг.

Pia** 85,0* 0Р75 182,9 156.3* 49,9* 37,9 57.5*

PI 85,5* 0,74 180.5 154,2* 50,7* 38,1 58,9*

Р16 81,5 0,74 1804 154,2* 42,2 54,5 52,7

Р2а 84,0 0,71 173,2 147,9* 53,8* 45,5 53,8

РЮа 84,0 0,66 161,0 137,5* 44,8* 47,2 52,7

РЗ 83,5 0,66 161.0 137,5* 54,1* 423 48,2

Р7 82,0 0,65 158,5 135,4* 38,7 42.7 58,4*

Р8а 82,5 0,62 1513 129,2* 46,0* 41,0 57,9*

Р2 82,0 0,59 143,9 122,9* 44,7* 523* 55,6*

Р30 84,5* 0,58 141,5 120,8* 38,5 49,2* 61,8*

Hex. форма 80,5 0,41 - - 39,7 44,8 58,8*

Дымковский, стандарт 81,5 0,48 - - 40,0 44,1 52,1

НСРо! 3,0 0,09 33 2,2

Регенератные линии номера 14595,1999-2000 гг.

К7а 98,5* 0,86 159,3 134,7* 54,0 53,2* 49.7

К5а 92,5* 0,73 135,2 114,1 50,2 45,7 49,7

К1 90.0 0,69 127,8 107,8 58,5* 55,1* 54,1*

К5 95.0* 0,68 125,9 106,3 42,8 46,2* 52,5

Исх. форма 86,5 0,54 84,4 45.1 50,0* 50,0

Трио, станд. 87,5 0,64 - - 53,6 42,4 51,7

НСРо, 3.8 0,13 4,0 3.8 2,1

* - превышение над стандартом достоверно;

** - индекс «а»: семена получены на кислом фоне

Урожайность семян - один из важных показателей возделывания клевера лугового на почвах с повышенной кислотностью. В наших исследованиях семенная продуктивность была наиболее варьирующим признаком, мало зависящим от происхождения исходного образца (17=38,0-39,3%).

По продуктивности семян выделено 10 линий гибридной популяции Зи-новский х Марино, достоверно превысивших на кислом фоне исходную форму на 63,2-247,1%, в том числе линия Р25 с достоверным превышением и над стандартом Дымковский (табл. 4).

Таблица 4 - Семенная продуктивность регенерантов (R¡) гибридной популяции Зиновский х Марино, 1998-1999 гг.

Линия Кислый фон Контроль

г/м1 %кст. %кисх. ф. % к контр. г/м1

Р25 30,2 177,6* 347,1* 162,4* 18,6

Р15 19,4 114,1 223,0* 87,4 22,2

РЗ 18,7 110,0 214,9* 102,2 18,3

Р7 18,6 - 109,4 . 213,8* 105,1 17,7

Р20 18,6 109,4 213,8* 68,1 27,3

Р4 14,8 87,1 170,1* 80,9 18,3

Р17 14,4 84,7 165,5* 98,6 14,6

Р31 14,4 84,7 . 165,5* 81,8 17,6

Р18 14,2 83,5 163,2* 110,9* .12,8

Р1 14,2 83,5 163,2* 75,9 18,7

Исх. форма 8,7 51,2 100,0 33,5 26,0

Дымковский, ст. 17,0 100,0 - 64,2 26,5

I ICPa («pi) 5,2 5,2

НСРв (фок) 1,2 1,2

НСРшьшмщ) 7,4 7,4

* - превышение достоверно (при Р<0,05)

Половика изучавшихся линий номера 14595 достоверно превысили на почве с повышенной кислотностью исходный образец (на 40,0-110,0%). Выделен клоп К5 с равной стандарту Трио продуктивностью семян на кислом фоне.

На воздействие стрессоров 76,9% линий гибридной популяции и все линии номера 14595 реагировали меньшим, чем исходные формы, снижением семенной продуктивности (на 3,5-53,2%), Кроме того, выделены линии гибридной популяции Зиновский х Марино с продуктивностью семян на кислой почве достоверно выше (на 10,9-62,4%) или равной контролю - Р25, Р18, Р7, РЗ, Р11, Р17(см. табл. 4).

Селекционное использование растений-регенерантов клевера лугового осуществлялось нами в двух направлениях:

- вкутриклоновое переопыление в поколениях Ri-Rj;

- формирование ire семян Rt клоновых популяций, которые мы обозначили как clon Syito, популяции одного-двух циклов переопыления - clon БуП[ - clon Syn2.

Оценка перспективного селекционного материала, созданного с использованием растеин й-регенеоактов

Шесть селекционных номеров, представленных тремя регенератными линиями от внутриклонового переопыления (Ri) и тремя популяциями клонов двух циклов переопыления (clon Synj), изучались нами на почве с повышенной кислотностью.

В результате трехлетней оценки (2004.,.2006 гг) выделены регенерантные линии Р-Юа, Т-2а н клоновая популяция П-27 (созданная путем переопыления семи клонов номера 14595), толерантные к повышенной кислотности почв, с комплексом хозяйственно-ценных признаков: зимостойкие (98*3-99,3%), раннеспелые (на уровне стандарта Трно), превышающие стандарт по сбору сухого вещества на 7,3-8,3%, сборусырого протеина — на 6,3-9,3% (табл.5).

Таблица 5 — Характеристика перспективных селекционных номеров клевера лугового, созданных с использованием культуры in vitro, 2003-2006 гг.

Номер Исходный образец Зимостойкость^ Сбор сухого вещества Сбор сырого протеина

т/га %кст. ц/га %кст.

P-lOa(Ri) Зиновский х Марино 98,3 11,8 108,3 13,06 109,3

П-27 (clon Sytii) № 14595 98,6 П,7 1073 12,70 106,3

Т-2а (Rj) Трио 99,3 11,7 107,3 12,73 106,3

Трио, ст. 97,0 10,9 11,95

НСРм 3,0 0,8 0,75

По урожайности семян в условиях повышенной кислотности почв выделены раннеспелые регенератная линия Т-2а (исходный сорт - Трио) и номер П-21 (клоновая популяция из трех линий номера 14595) — 199-215 кг/га, достоверно превысившие стандарт на ] 5,0-20,8%.

Повышенным содержанием сырого протеина при выращивании на почве с повышенной кислотностью — 13,06% (110,6% к стандарту Дымковский) отличалась среднеспелая регенератная линия Р-1 (исходная форма — гибридная популяция Зиновскнй х Марино), зимостойкая, с урожайностью сухого вещества на уровне стандарта.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о высокой перспективности использования метода отбора in vitro на селективных питательных средах генотипов с повышенной устойчивостью к абиотическим стрессовым факторам.

Результаты исследований позволили нам предложить схему создания кислотоустойчивых сортов клевера лугового на Северо-Востоке европейской части России с использованием селекции in vitro, клонального микроразмножения отобранных генотипов и проработки исходного материала на полевом фоне:

I - Отбор кислотоустойчивых генотипов in vitro из сортов и селекционных номеров, адаптированных к конкретным почвенно-климатическим условиям и их клональное микроразмножение

II - Оценка растений-регенерантов Ro на двух фонах (кислом и нейтральном), получение семян (условия изоляции, индивидуальное стояние)

III - Оценка семенного потомства растений-регенгрантов (Rt) по кисло-тоустойчивости и хозяйствснно-ценным признакам на двух фонах (кислом и нейтральном) и двух режимах использования (сено н семена), подбор клонов для создания популяций (семена Ri)

IV - Получение клоновых популяций clon Syni (условия изоляции, индивидуальное стояние)

V • Оценка клоновых популяций clon Syni на фоне повышенной кислотности и нейтральном фоне;

- Формирование клоновых популяций clon Syn2 (условия изоляции)

VI - Конкурсные сортоиспытания (clon Sym- clon Syn5)

- Размножение (условия изоляции)

Создание сортов клевера лугового, адаптированных к почвенио-климатическим условиям Северо-Востока европейской части России

Сорт клевера лугового Грин

Создание кислого- и алюмотолерантных сортов является основным гарантом надежных урожаев клевера лугового в регионе Северо-Востока европейской части России.

Исходным материалом для создания нового сорта послужила поликросо-ная популяция из селекционных номеров, созданных на основе сортов SV 0105, Hg 1102, ПриекульскиЙ 66, Дымковский, Кировский 112 и Кировский 64, дикорастущих образцов Пермской и Свердловской областей.

Схема создания алюмотолерантного сорта клевера лугового Грин включала отбор генотипов с меньшей депрессией корневой системы в рулонной культуре (рН 3,9, Al3* 1,0 мМ), высадку растений на рассаду, а затем в поле на провокационный графический фон с рН 3,9-4,4 и Al®* 18-27 мг/100 г почвы (Фаленская селекционная станция) и формирование популяций Syni (1994-1995 гг.), Sym (1996-1997 гг.), Sym (1998-1999 гг.).

В результате трех циклов рекуррентных двухэтапных отборов (рулонная культура + поле) и многократного переопыления алюмотолерантных генотипов был создан раннеспелый двуукосный селекционный номер СГПА-51, Сорт клевера лугового Грин (СГПА-51) передан на Государственное сортоиспытание в 2004 пщу. Характеристика сорта представлена в таблице б.

Таблица б — Характеристика сорта клевера лугового Грин (СГПА-51) по данным конкурсных сортоиспытаний, 2001-2004 гг._

Показатели Фон* Грин Дымковский *П)ио

абс. + абс. +

Период от отрастания 1 55-63 60-68 -5 54-63 0

до первого укоса, дни 2 54-62 59-67 -5 54-62 0

Урожайность сухого 1 12,2 11,0 +1,2** 11,9 +0,3

вещества, т/га 2 9,7 9,8 -0,1 8.9 +0,8**

Облиствен ность, % 1 49,6 43,8 +5,8** 48,0 +1.6

Содержание сырого 1 16,58 15,27 +1,31»* 16,22 +0,36

протеина, % 2 14,08 13,49 +0,53 13,83 +0,25

Высота растений, см:

1 укос 1 82 89 -7 76 +6

2 укос 51 40 +11*» 51 0

1 укос 2 65 76 -11 65 0

2 укос 49 37 +12** 51 -2

Урож-ть семян, кг/га 1 169,7 - 143,3 +26,4**

Поражение корневы- 1

ми гиилями, НРБ, %:

наружное 50,0 59,0 -9,0** 62,0 -12,0**

внутреннее 42,2 54,9 -12.7** 48,9 -6,7

* - 1 —нейтральный фон, 2 - кислый фон; ** - отклонения достоверны (при Р<0,05)

Сорт зимостойкий (90-100 %). Отличается толерантностью к повышенной кислотности почвы - урожайность сухого вещества на кислом фоне составила в среднем за годы изучения 9,7 т/га и была выше раннеспелого сорта Т£но на 9,0%, при равной толерантному к кислым почвам (по данным прошлых лет изучения) среднеспелому продуктивному сорту Дымковский, На нейтральном фоне сорт Грин превышает Дымковский достоверно на 10,9%, Трио - на 2^%.

Новый сорт отличается повышенным содержанием сырого протеина.

Семенная продуктивность в среднем из четырех лет учетов составила 1,7 ц/га, на 18,4% выше раннеспелого стандарта Т^ио.

Сорт Грин поражается фузариозом на искусственном инфекционном фоне на уровне стандартов, на естественном фоне — меньше сортов Трио и Дымковский (на 6,7-12,7%) и относится к группе среднеустойчивых, Склеротинио-зом и анхракнозом поражается на уровне стандартов.

Сорт клевера лугового Кретуновский

Исходным материалом для создания ультрараннеспелого сорта Кретуновский послужил местный дикорастущий экотип, собранный в 1985 году в Фа-ленском районе Кировской области. Многократный отбор ультрараннеспелых с компактным цветением высокопродуктивных по кормовой маосе и семенам генотипов, сочетающих раннеспелость с высокой зимостойкостью, проведен в условиях Фаленской селекционной станции в 1985-1995 гг.

По результатам изучения в конкурсных сортоиспытаниях {1996-1999 гг.) сорт передан на Государственное сортоиспытание в 1999 г.

Сорт Кретуновский зимостойкий (4-5 баллов), ультраран неспелый, двуу-косный. Характеризуется дружным цветением. Зацветает на 3-5 дней раньше сорта Трио, на 6-9 - Дымковского, на 18-20 - Фаленского 1. Период от весеннего, отрастания до первого укоса составляет в среднем 51 день, от первого до второго —43 дня, сорта Трио - соответственно 53 и 47, Дымковского — 57 и 50 дней.

Новый сорт в первом укосе формирует в среднем 47,8% от суммы урожая кормовой массы за два укоса, Трио - 58,5%, Дымковский - 60,7%. Следовательно, Кретуновский дает два равноценных укоса, достигающих фазы полного цветения. Зацветает в год посева. Перспективен в качестве ендеральной культуры.

По данным трех циклов конкурсного сортоиспытания средняя урожайность зеленой массы составила 40 т/га, сбор сухого вещества 8,8 т/га. Максимальная урожайность зеленой массы -63 т/га, сухого вещества—11,2 т/га. Содержание сырого протеина в сухом веществе колеблется от 16,06% до 20,37%, клетчатки - от 23,77% до 30,12%, Склеротиниозом, фузариозом и антракнозом новый сорт поражается на уровне стандартов Трио и Дымковский.

Урожайность семян изменялась у Кретуновского от 160 до 360, Трио - от 200 до 300, Дымковского - от 260 до 390 кг/га. При возделывании на семена достигает уборочной спелости раньше Трио на 5-12 дней, Дымковского - на 11-25, Фаленского 1 - на 20-30 дней. Устойчивость к полеганию, дружное созревание и отсутствие подгона обусловливают возможность его уборки без обработки травостоя десикантами или с меньшими дозами десиканта.

Сорт Кретуновский обладает широким адаптивным потенциалом. По результатам Государственного сортоиспытания в 2003 году внесен в Государственный реестр селекционных достижений РФ по Северо-Западному региону, с 2005 г. - Волго-Вятскому, Северному н Центральному.

ВЫВОДЫ:

1. В результате изучения коллекционных сортообразцов клевера лугового на почвах с повышенной кислотностью выделены источники хозяйственно-ценных признаков для селекции на устойчивость к эдафическим стресс-факшрам:

- высокозимостойкие (91,0-95,6%)- сорта Восточноевропейской и Скандинавской групп сортотипов (76% от изученных), Кавказской (Дарьял) и Прибалтийской (Йыгева 433);

- кислотоустойчивые - позднеспелые сорта Пермский местный, Кильмезский местный (Кировская область) и Стодолищенский (Смоленская область), с продуктивностью сухого вещества на кислом фоне на уровне известкованного (-3,8-5,4%);

- сорт Кильмезский местный, сочетающий кнслотоустойчивость по кормовой массе с высокой продуктивностью семян (достоверно выше контроля на 16,6%) и высокой зимостойкостью на кислом фоне (достоверно выше контроля на 3,8%);

- высокоурожайные по сбору сухого вещества на кислом фоне (достоверно выше стандартов на 11,1-38,9%), с повышенной на 5,2-11,3%, в сравнении со стандартами, кислотоустойчивосгью и комплексом ценных признаков — зимостойкие позднеспелые сорта местной селекции Витязь (4п), Фаленский 86 и Кировский 159, Пермский местный, среднеспелый финский сорт Hija 47004;

- высокозимосгойкий (93,0%) раннеспелый сорт Йыгева 433 (Эстония) с высокой продуктивностью семян (на 27,5% выше стандарта), незначительно снижающий ее под влиянием стрессовых факторов (на 1,1%);

- выявлена более высокая кислотоустойчнвостъ позднеспелых одноукосных сортов по сравнению с ранне- и среднеспелыми двуукосными сортами.

2. Изучение растений-регенерантов (Ro) позволило выделить генотипы, превосходящие или не уступающие по ряду хозяйственно-ценных показателей на кислых почвах растениям на нейтральной почве. Клоны Р-1, Р-2 гибридной популяции Зиновский х Марино отличаются высокой продуктивностью семян на кислом фоне (2,36-4,82 г/растение) и превышают контроль на 120,6-209,0%.

3. По результатам оценки семенного поколения растений»регенерантов (Ri) выявлена эффективность отбора генотипов методом in vitro: 50,0„.923% линий гибридной популяции Зиновский х Марино и 40,0-80,0% линий номера 14595 характеризовались на почвах с повышенной кислотностью меньшей депрессией различных признаков в сравнении с исходными формами.

4. В поколении R} выделены:

- кислотоустойчивые линии К11, Klla, Kla, К7а (исходная форма - номер 14595) н Р2, Р16, Р7 (исходная форма — гибридная популяция Зиновский х Марино);

- высокопродуктивные по сбору сухого вещества в условиях кислых почв (на

20,8-563% выше стандартов) - Pia, PI, Р16, Р2а, РЮа, РЗ, Р7, Р8а, Р2,

Р30(исходная форма - Зиновский х Марино) и К7а (исходная форма — номер 14595).

5. На основ« лучших клонов, по результатам оценок в Ко н Ri-no калениях, созданы клоновые популяции двух циклов переопыления, обозначенные нами как clon Буш.

6. При изучении на почвах с повышенным содержанием токсичных ионов алюминия и водорода выделены:

- перспективные раннеспелые кислотоустойчивые регенератные линии Р-10а и Т-2а (Rj) и клоповая популяция П-27 (clon Synj), превышающие стандарт по сбору сухого вещества на 73-83%, сырого протеина - на 63-93% с семенной прощуктивностью равной стандарту (Р-IOa, П-27) или выше на 15,0% (Т-2а);

• среднеспелая регенерантная линия Р1 (Ri) с повышенным содержанием сырого протеина в сухой массе (110,6% к стандарту);

- раннеспелая клоновая популяция П-21 (clon Syn3), высокоурожайная по семенам (иа 20,8% выше стандарта).

7. На основании проведенных исследований предложена схема создания кислотоустойчивых сортов клевера лугового в регионе Северо-Востока европейской части России с использованием селекции ¡n vitro, клонального микроразмножения отобранных генотипов и проработки исходного материала на кислом палевом фоне.

8. Методом многократного отбора в рулонной культуре и на полевом Провокационном по содержанию ионов водорода и алюминия почвенном фоне создан кислотоустойчивый сорт клевера лугового Грин, который в 2004 г. передан на Государственное сортоиспытание. Сорт раннеспелый, двуукосный, зимостойкий (90-100%). Превышает в условиях кислых почв раннеспелый сорт Трио по сбору сухого вещества на 9,0%, содержанию сырого протеина на 1,8% Отличается высокой семенной продуктивностью (на 18,4% выше Трио).

9. Методом массового отбора из местного дикорастущего экотипа создан сорт клевера лугового Кретуновский. Сорт высокозимостойкий (4-5 баллов), ультрараннеспелый (зацветает раньше стандарта Дымковский на 6-9 дней), высокоурожайный по кормовой массе (на уровне стандарта). Сорт включен в Государственный реестр селекционных достижений РФ с 2003 г. по четырем регионам: Северному, Северо-Западному, Центральному и Волго-Вятскому.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКЕ И ПРОИЗВОДСТВУ 1. В селекции на повышенную кислотоустойчивость в условиях Северо-Востока европейской части России рекомендуем использовать:

- сорта Витязь (4п), Фаленский 86, Кировский 159, Пермский местный, Кнльмезский местный, Стодол ищенский, Hija 47004, Йыгева 433;

• перспективные регенератные линии Р-Юа, Т-2а, P-t и клоновые популяции П-27, П-21;

- схему создания сортов клевера лугового с использованием клонального микроразмножения генотипов, прошедших отбор in vitro на селективных питательных средах;

- - перспективный раннеспелый зимостойкий кислотоустойчивый сорт клевера лугового Грин (СГПА-51).

2. Для возделывания в полевых и кормовых севооборотах Северо-Восточного региона европейской части России рекомендуем внедрять в производство диплоидный сорт Кретуновский - раннеспелый, зимостойкий, высокопродуктивный по кормовой массе и семенам.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Никифорова Е.В., Тумасова М.И., Береснева (Онучина) ОЛ. Некоторые результаты изучения сортообразцов клевера лугового на кислых дерново-под-золнетых почвах // Сельскохозяйственная наука Северо-Востока Европейской части России: Сб. науч. трудов к 100-летию с.-х. опытной станции. — Киров, 1995.-Т. 1.-С. 106-109.

2. Лумасова М.И., Никифорова Е.В., Грипась М.Н., Крылова Л.М., Береснева (Онучина) О Л. Селекция клевера лугового на адаптивность П Научные проблемы создания сельскохозяйственных культур, адаптированных к современным условиям производства и переработки: Матер, науч. сессии. — С,-Пб., 1993.-С. 152-154.

3. Tumasova М^ Krylova L., Beresneva (Onuchina) О. Breeding of red ctover for tolerance against environmental stress factors of north-east European region of Russia // New Approaches and Techniques in Breeding Sustainable Fodder Crops and Amenity Grasses: Proceedings of 22"* EUCARIA Fodder Crops and Amenity Grasses Section Meeting.-St. Petersburg, 2000.-P. 109-110.

4. Agafodorova M.N., Solodkaya L.A., Lapotyshkina L.L, Dronova T.N., Beresneva (Onuchina) O.L. Appication of Biotechnological Methods to Develop Alfalfa and Red Clover Cultivars Tolerant to Abiotic Stresses // Proceedings of the International Workshop on Opening for Low-input Sustainable Forage Production and Use. - Lugovaya (Russia), 1999. - P. 130-137.

5. Покрышкина (Онучина) ОЛ., Никифорова E.B , Солодкая JI.A. Использование культуры in vitro в селекции клевера лугового на алюмотолерантность // Селекция, семеноводство и сортовая технология на Северо-Востоке европейской части России: Сб. науч. трудов ГУ ЗНИИСХ Северо-Востока. - Киров, 2001.-С. 17-23.

6. ТУмасова М.И., Покрышкина (Онучина) ОЛ, Грипась МЛ. Адаптивная селекция клевера лугового на Евро-Северо-Востоке // Здоровье — питание -биологические ресурсы: Матер, межцунар. науч.-практ. конф., поев. 125-летию со дня рождения академика Н.В. Рудницкого. — Киров, 2002. — Т. 1, — С. 51-56.

1, Агафодорова М.Н., Солодкая Л.А., Соложенцева Л.Ф., Пайвин С.Г., Соло-женцев ПД., Лапогышкина Л .И., Куренина Л.В., Покрышкина (Онучина) О Л, Создание исходного материала методами биотехнологии // Адаптивное кормопроизводство: проблемы и решения (к 80-летию ВНИИ кормов имени В.Р.Вильямса). - М: ФГНУ «Росинформагротех», 2002. - С, 375-385.

8. Солодкая Л .А., Агафодорова МЛ., Лалотышкина Л.И., КуренинаЛЛ., По-крышкнна (Онучина) О .Л. Методы биотехнологии в селекции клевера лугового // Методические указания по селекции и первичному семеноводству клевера.-М., 2002. - С. 30-33.

9. Онучина О .Л., Солодкая JLA. Оценка и использование в селекции на кислотоустойчив ость регенератов клевера лугового // Основные итоги и приоритеты научного обеспечения АПК Евро-Северо-Востока: Матер, междунар. науч.-практ. конф., поев. 110-летию Вятской с.-х. опытной станции. - Киров, 2005.-С 73-77.

Ю.Тумасова М.И., Грипась МЛ, Онучина ОЛ., Устюжанин И.А. Основные направления селекции и методы создания адаптивных сортов клевера лугового в Северо-Восточном регионе европейской части России // Основные итоги и приоритеты научного обеспечения АПК Евро-Северо-Востока: Матер. междунар. науч.-практ. ионф^ поев. 110-летию Вятской с.-х. опытной станции. - Киров, 2005. - С. 51-56.

H.ТУмасова М.И., Грипась М.Н., Онучина ОЛп Демшина ILA. Результаты селекции клевера лугового иа адаптивность к экологическую устойчивость // Сб. мат. науч.-практ. конф. - Кострома, 2006. - С. 146-148.

12ЛУмасова М.Щ Демшина H.A., Грипась МЛ, Онучина ОЛ. Селекция клевера лугового на алюмотолерантноегь //Аграрная наука Евро-Северо-Востока. - Ш. - Киров, 2006. - С. 34-38.

13.Грипась M.R, Тумасова М.И., Демшина H.A., Онучина ОЛ. Рель сортов многолетних трав местной селекции в укреплении кормовой базы Кировской области // Матер, науч.-практ. конф. — Киров, 2006. — С. 40-44,

14.0нуч1ша ОЛ., Тумасова МЛ. Методы и результаты селекции клевера лугового на повышенную кислотоустойчивость // Кормопроизводство. — 2007. — .Na 4,-С. 27-28. ■

АВТОРСКИЕ СВИДЕТЕЛЬСТВА И ПАТЕНТЫ

I. A.c. № 28462 от 11.02.1999 г., патент № 0789 от 28.11.2000 г. на сорт клевера лугового Мартум (в соавторстве).

2. A.c. № 29820 от 01.02.2000, патент Ks 0955 от 20.04.2001 г. на сорт клевера лугового Орфей (в соавторстве).

3. A.c. № 32007 от 24.01.2002 г„ патент № 1303 от 03.04.2002 г. на сорт клевера лугового Кудесник (в соавторстве).

4. A.c. № 33576 от 17.01.2003 г., патент № 1879 от 10.06.2003 г. на сорт клевера лугового Кретуиовский (в соавторстве).

Подписано в печать 17.04.2007 г. Формат 60x84 1/16 Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 23

Отпечатано с оригинал-макета типография НИИСХ Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого 610007, г, Киров, ул. Ленина, 166а.