Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Щитовидная железа и гипоталамо-гипофизарная нейросекреторная система у ANAMNIA после гипофизэктомии и воздействия нонапептидными нейрогормонами

ВАК РФ 03.00.11, Эмбриология, гистология и цитология

Автореферат диссертации по теме "Щитовидная железа и гипоталамо-гипофизарная нейросекреторная система у ANAMNIA после гипофизэктомии и воздействия нонапептидными нейрогормонами"

академия наук ссср

ИНСТИТУТ ЭВОЛЮЦИОННОЙ ФИЗИОЛОГИИ И БИОХИМИИ им. И. М. СЕЧЕНОВА

ЩИТОВИДНАЯ ЖЕЛЕЗА И ГИПОТАЛАМО-ГИПОФИЗАРНАЯ НЕЙРОСЕКРЕТОРНАЯ СИСТЕМА У А№ММА ПОСЛЕ ГИПОФИЗЭКТОМИИ И ВОЗДЕЙСТВИЯ НОНАПЕПТИДНЫМИ НЕЙРОГОРМОНАМИ

Специальность: 03.00.11 — Эмбриология, гистология и цитология

На правах рукописи

РОМАНОВА

Ирина Владимировна

удк 612.44+612.822:597.0/.5 + 597.6./9:615.34./54

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

санкт-петербург 1991

Работа выполнена в лаборатории нейроэндокринологии Института' эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова АН СССР.

Научный руководитель — доктор биологических наук, чл.-корр. АН" СССР, профессор А. Л. Поленов.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук С. П. Гамба-рян; кандидат биологических наук Р. И. Коваленко.

Ведущая организация — Санитарно-гигиенический медицинский институт им. И. И. Мечникова.

Защита диссертации состоится » 1992 г. в ¿г

часов на заседании Специализированного совета К 602.89.01. при Институте эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова АН СССР по адресу: 194223, Ленинград, пр. М. Тореза, 44.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института.

<-7

Автореферат разослан 1991 г.

Ученый секретарь Специализированного совета, кандидат биологических наук

Л. В. Зуева

- 3 -

ОЩАЯ ХАР/УСГЕГИСтаКА РЛБОТЦ. Актуальность проблемы. В настоящее время изучение защитно-приспособительных механизмов, обеспечивающих выживание организмов в изменяющейся среде обитания, приобретает особую значимость. Известно, что гомориположительная гипоталамо-гипофизарная нейросекреторная система (ГГНС) участвует в поддержании различных сторон гомеостоза и активно вовлечена в реализацию защитных реакций организма в ответ на действие различных стрессорных, в том числе и повреждающих, факторов. В последние годы показано, что нонапептидные нейрогормони ГГНС ( вазопрессин, окситоцин и их гомологи ), кроме общеизвестных физиологических эффектов, оказывают влияние на функции эндокринных желез. В норме у взрослых животных регуляция функции периферических эндокринных желез со стороны гипоталамуса осуществляется специфическими нейрогормонами - либеринами и статинами, а также и нонапепти-дани трансаденогипофизарным путем, т.е. опосредованно через тропные гормоны аденогипофиза.

Было высказано предположение, что при сильном или длительном стрессе и в условиях патологии ионапептиды, поступающие из заднего неЯрогипофиза (ЗНГ) в общий кровоток, воздействуют на активность периферических эндокринных желеэ непосредственно, т.е. без участия гормонов еденогипофиза парааденогипофизарним путем /Поленов, 1962, 1968/. "

Данные морфофункциональных исследований становления ГГНС в снто-и филогенезе позвоночных позволили сделать вывод о том, что пара-аденогипофизарныЯ путь является филогенетически более древним механизмом гипогаламической нейрогормональной регуляции, чем трансаде-ногипофизарный /Поленов, 1981/. Согласно представления^ Л.А.Орбели, в условиях патологии в организме начинают функционировать филогенетически более древние механизмы /1959/. Если рассматривать глубокий и продолжительный стресс как состояние, близкое к патологии, то' вполне вероятно, что в этих условиях должен проявляться именно па-рааденогипофизарный путь.

В. последние годы получены доказательства регуляции парааденогн-пофизарным путем функции коры надпочечников у млекопитающих и ее гомолога - интерреналовой железы уАпшш1а /¡апке ег. а1., 1984; Елифанов и др., 1988, 1989; К1оаа, Капке, 1990/. Единичные данные,, полученные только на млекопитающих, свидетельствуют о возможности прямого влияния нонапептидов гипоталамуса на щитовидную железу (ЩЖ) 1 /оагз1а а1.Д964; Красновская. и др., 1988; Дитятева и др., 1990Л

У АпажгЛ-а периферические ондокришше келеаи и, в частности, ШД обладают относительно большей.автономностью от аденогипофиза, чем у Аш1хо1а /Пуаап, 1; Ьагаод, КоьЬ'ло11,19?2/. Поэтому исследования на Аг>маги.а , направленные на выяснение универсальности роли па-рааденогипофизарного пути и закономерностей его становления в ходе филогенеза, Необходимы для понимания эволюции механизмов нейрогор-мональной регуляции в целом.

Цепь исследования состояла в том, чтобы выяснить возможность регуляции функции ЩК нонапептидными нейрогормонами гипоталамуса параа-деногипофиэарннм путем у представителей двух классов позвоночных, находящихся на разных уровнях филогенетического развития: I) у волжской стерлиди - представителе хрдщевюс ганоидов и ЕЛ у травиной лягушки - представителе филогенетически более молодого, чем рыбы, класса амфибий. -

В .соответствии с этим били-поставлены следующий задачи:

1. Выяснить возможность прямого влияния экзогенных гипоталамических нонапеп'тидов - вааотоцина (ВТ) и ыезотоцина '(МТ) - на ЩЖ неопериро-ванных особей стерляди и лягушки, а также особей, у которых удален-гипофиз, а следовательно отсутствует влияние тиротропного гормона (ТТП передней доли гипофиза (ОД1) на Посредством иньекций ней-рогормонов в таких дозах, которые определялись в организме низших позвоночных при сильном стрессе /Ьеягху, 1976/, мы моделировали 1в организме этих: животных состояние чрезвычайного напряжения.

2. Дать морфофункциональную характеристику нонапептидергической ГШ у исследованных животных и выяснить возможность ее участия в регуляции ЩД в условиях наших экспериментов.

Основные положения, выносимые на защиту: -

1. Введение ВТ неоперированным и гипофизэктомированным особям стерляди и лягушки вызывает активацию ЩНС. Эти данные свидетельствуют о том, что ВТ может действовать на функции ЩЖ как опосредованно, через тропные гормоны аденогипофиза, т.е. трансаденогипофиэарным путем, так и прямым пар>ааденогипофизарным путем гипоталамической найг рогормональной регуляции. '

2. Введение МТ лягушке у неоперированшх особей вызывает снижение функционирования 1ДЖ, а у особей с удаленной ВДГ существенных изме-

' нений не вызывает. Эти данные свидетельствуют о том, что МТ, в от-г личие от ЕТ, участвует в регуляции 1ЦЕ преимущественно трансаденоги-пофизарным путем.

3. Реакция ЩЖ на воздействие ВТ сильнее выражена у стерляди - пред-

ставителя филогенетически более древней группы позвоночных - чей у лягушки.

4. Введение ВТ вызывает изменение монофункционального состояния ГП1С как у неопорироввнных, так и у гипифнзэктомировпнкмх особей стерляди и лягушки. При этом вняпляется корреляция мижду степенью активации нейросекреторннх плеток (ИСК) преоптического ядра (Ш) и тироцитов l®t; причем это более ярко выражено у оперированных животных обоих изученных видов, у которых выявлены однонаправленные изменения, в отличие от неоперированных животных, у которых корреляция носила отрицательный характер. Научная новизна результатов.

Впервые на представителях половозрелых осетровых и бесхвостых амфибий получены данные морфометрического анализа, отражающие изменение функциональной активности ЩЖ и нонапептидергических ИСК из Ш после воздействия ВТ; эти изменения оказались зависимыми как от числа шп.екций, так и от времени после воздействия.

У тотально птефизоктомированных особей стерляди и у лягушек с удаленной ВДГ показана возможность активации ЩЖ после воздействия ВТ в стрессорных концентрациях. •

У лягушек выявлен принципиально различный характер поздействия на ЦЯ двух гипоталамических нонапептидов: если ВТ пиэипает активацию этой железы, то МТ либо снижает ее активность у кооперированных особей, либо не вызывает заметного эффекта у особей с удаленной ГЩГ. Это дает основание предполагать, что ВТ действует на ЩЖ преимущественно парааденогипофйзарным, т.е. филогенетически более древним путем, а МТ - трансаденогипофизарньм путем, являющимся филогенетически более молодым.

У осетровых, занимающих более низкую ступень в эволюционном ряду позвоночных, чем Apura , парааденогипофизарный механизм гипота-ламической нейрогормональной регуляции проявляется в большей степени.

Теоретическая и практическая значимость.

. Приведенные в работе результаты, демонстрирующие возможность изменения функциональной активности ЩЖ гипоталамическими нонапептида-ми у Anamnia , особенно у животных, лишенных ТТГ, могут быть по- ■ лезны для понимания общебиологического значения парааденогипофиэар-ного механизма гипоталамической нейрогормональной регуляции функций периферических эндокринных желез, а также становления этого механизма в филогенезе. Кроме того, эти данные представляют интерес

для понимания механизма взаимосвязи и смысла существования в организме, причем не только у позвоночных, но и у высших членистоногих: /Поленои, Кулаковский, 1969/, одновременно нескольких путей нейро-гормонального контроля функций периферических эндокринных желез. Приведенные в работе данный полезны и в практическом отношении, т.н расширяют теоретическую базу, на основании которой гипоталаыичос-кие нонапептиды могут быть полнее использованы в медицине; ветеринарии, животноводстве-и рыбоводстве. Материалы настоящего исследования используются при чтении курсов лекций по сравнительной гис-тофизиол9гик эндокринных систем на кафедре цитологии и гистологии биолого-почвенного факультета ЛГУ, но эволюции нейроэндокринной регуляции для слушателей ФЖ на кафедре физиологии человека и животных 1ГПУ им. Л.И.Герцена.

• Апробация работы, публикации. Материалы диссертации.были доложены и обсуждены на заседаниях Ленинградского общества анатомов, гистологов и эмбриологов (1966,. 19в8-1990гг.), на III Всесоюзной конференции по нейроэндокринологии {Харьков, 1988), на городской конференции "Механизмы регуляции физиологически* функций" (Ленинград, 1988), на конференции молодых ученых ИЭФиБ им. И.М.Сеченова АН CCCI (Ленинград, 1989), на заседаниях ленинградского городского семинара по нейроэндокринологии (1988, 1990), на ХУ Конференции Европейского общества по сравнительной эндокринологии (Лювен, I9S0), на Всесоюзном Симпозиуме "Физиологическое и клинической значение ре-гуляторных пептидов" (Нижний Новгород, 1990). По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ, из них одна за рубежом.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава,I), описания объектов и методик исследования, результатов поисковых опытов (глава 2), изложения результатов собственных исследований (глава 3), обсуждения результатов (глава 4), заключения, "выводов и списка литературы. Материалы диссертации изложены настраницах машинописного текста, включая таблицы и рисунки, в том числе jf- микрофотографий. Список литературы состоит из J9Í источников, в том числе fQ3 иностранных. ^ МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Материал. В работе использованы .половозрелые особи нижневолжско; стерляди Acirenser rather.ua L. к травяной лягушки Rana temporaria В предварительных экспериментах на 30 рыбах изучалось влияние ВТ hi ЩЖ через разные сроки после его введения. В основном эксперименте особи стерляди (всего 8? рыб), преимущественно самки II и III ста-

дий зрелости гонад, массой -UXl-ШО гр., мловлянш.".? в дельте Волги в мае-апреле 1987г., в течение нескольких дней били лкилимирорянн в басиейнах, в которых п дальне Гпем проводили эксперимент. РыСн в соответствии с задачами исследования били разделены на 3 оенош».«? грушш: I - контрольные, 2 - после одноразового введения ЬТ, 3 -после трехразового введения ВТ.

Cam-j лягушки (219 особей) массой 35-40 гр., выловленные в октябре-ноябре в окрестностях Ленинграда, содержались в условиях вивария без корма. На лягушках било проведено 4 эксперимента, состоящих из следующих групп животных: I. а - контроль, б - после одноразового введения ВТ, в - после трехразового »ведения ВТ; II. а-контроль, б - после трехразового введения ВТ; III. о - контроль, б - после'трехразового введения МТ; 1У. а - контроль, б - после трехразового введения МТ. В экспериментах как но рыбах, так и на лягушках, каждая из групп животных, состояла из трех серий: неоперч-ровпннне, гипофиээктомированные и лолшооперироьшпше. Рыб брали в опыт через 10 дней после операции , лягушек из I и III экспериментов - через 10 дней, а из II и 1У - через 60 дней после операции.

Гипофизоктомим стерляди и лягушки проводили транесфонои,дольно /Kuailc, Polenov, 1985/. О полноте удаления гипофиза <:\.;;/.!ли. на основании анализа серийных срезов мозга. У стерляди были удалены все части гипофиза, а у лягушки гипофизэктомия была частичной, т.к. была удалена только ЦцГ. БТ и МТ, доведенные физиологическим раствором (ОР) для пойкилотермннх животных до концентрации Ю'^.'/мл, вводили в одно и то же время суток внутримышечно один либо три.раза с интервалами по 30 мин. Доза каждой инъекции составляла 5'10~®М/кг массы тела. Контрольные животные каждой экспериментальной группы ,получали соответствующие количества ФР.

Гистологические и ^оофснетрнческие методики.

Во всех экспериментах мозг и ЩХ (у лягушек вместе с участком трахеи) фиксировали в жидкости Буэна у рыб через SO и 180 мин., а у лягушек через 30 мин. после последней инъекции.

а) Щитовидная железа. Ид полной серии парафин-целлоидиновых срезов толщиной 5 мкм выбирали срезм, соответствующие 10, 35, 60 и 85-процентным уровням железы и окрашивали их азан по Гейденгайну. Для оценки.функционального состояния использовали общепринятые для этого органа морфометрические показатели: отношение эпителий/коллоид (Э/К) н высота тироцитов. На каждом из четырех уровней железы с помощью окуляр-микрометра делали по 25 измерений для каждого из по-

казателой (всего 100 измерений на одну железу), б) Гипстапьмо-гигюДтзарная нейросекретарная система. Чередующиеся серии фронтальных и сагиттальных срезов мозга рыб и лягушек из I эксперимента окрашивали парьльдегидфуксином по Гомори-Габу с док-раской азан по Гейденгайну.

С помощью антисывороток к ЬТ выявляли БТ-положительные структуры ГП1С методом пероксидаэа-антипероксидаза с дальнейшей конъюгацией с 3,3' - диаминоб'ензидином. Срезы докрашивали гематоксилином Эрлиха. Функциональное состояние ГГНС оценивали по следующим показателям: I) Измеряли объемы ядер и ядрышек в 100 ВТ-положительных ИСК из Щ; общеизвестно, что эти показатели, особенно объем ядрышек, характеризуют уровень синтетической активности клетки. 2) В Гй среди светлоокрашивающихся доминирующих наиболее активных ИСК 1-го типа подсчитывали (в %) количество клеток трех подтипов (из 2Q0 клеток), содержащих мало (1а), умеренное количество (16) и много (1в - состояние депонирования) БТ-положительиого нейросекретор-ного материала (НСМ). Изменение количества клеток этих трех подтипов является показателем изменения интенсивности выведения НСМ из • НСК. 3) Содержание ВТ- и ПА ^-положительного НСМ оценивали визуально по трех- и пятибальной шкале в волокнах преоптико-гипофрзарного тракта (1-3 балла), в переднем нейрогипофиэе (ГИГ, 1-3 балла) и в ЗНГ (I - 5 баллов). ..,/.' . '

Оценка достоверности различий морфометрических данных проводилась с помощью непараметрического и - критерия Манна-Уитнея-Вил-коксона /Ашмарин и др., 1971/;

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУВДЕНИЕ. /.

У стерляди ЩЖ - компактный непарный орган, состоящий из небольша го числа фолликулов, разнообразных по размерам. У лягушки ЩЖ ранее была описана как парное образование. Однако у многих животных при просмотре серийных срезов железы мы выявили узкий перешеек, состоящий из 1-2 крупных,' активно функционирующих фолликулов, которые соединяют обе части железы в единое целое. Каждая "половинка" состоит из небольшого числа фолликулов (до 25) и покрыта тонкой соединительнотканной капсулой. Однако по общему плану строения ЩЖ стерлядь и лягушка не отличаются друг от друга. Наши сравнительно-мор-фолсгические данные о строении ЩЖ у исследованных животных на све-тооптическом уровне согласуются с данными"других авторов /вогЪтаа, 1964; Яковлева, Ферхмин, 1971; Баранникова, 1975; Степанов, 1986; Гербильский, 1989/.

I. Пук и ПИС у интактннх стерляди и лягушки.

ЩИ у изученных нами контрольных особей обоих видов состояли из крупных фолликулов с плотным, слабовнкуолизированным коллоидом. Ти-роциты в фолликулах в основном кубической, ниэкопризматической, реже уплощенной формы. Синусоидные капилляры, окружающие фолликулы, умеренно расширены и содержат мало форменных элементов крови (ФЭК), Все это свидетельствует о том, что ЩИ у интактных особей находились в малоактивном состоянии.

ГГНС у лягушки и стерляди представлена парным пептидергическин гомориположительным нейросекреторным центром (ПЯ), от которого от ходят нейросекреторные волокна, идущие в составе преоптико-гипофи-зарного тракта и заканчивающиеся терминальными расширениями в переднем нейрогипофизе (ПНГ) и в ЗНГ.

У стерляди обьем ядра и ядрышка НСК из ПЯ составлял соответственно 839 и 18 у.ед?, НСК 1а, 16 и 1в подтипов составляли соответственно 24%, 58& и 18%. Капилляры в области ПЯ в основном спавшиеся. Изредка выявлялись дендро-вентрикулярные контакты НСК. Содержание ВТ- и ПАФ-положительного НСМ в ПНГ оценено в 2 балла, а в ЗНГ - в 4,5 балла. У лягушки обьем Адра и ядрышка составлял соответственно 834 и 16 у.ед?, НСК трех подтипов распределялись поч«н так же, как и у стерляди: 1а - 21,55?, 16 - 54,и 1в - 24%. В Ш выявлено небольшое число дендро-вентрикулярных контактов, капилляры умеренно расширены и содержат мало ФЭК. Количество НСМ в ПНГ оценено в 1,5, а в ЗНГ - в 4,5 балла.

Таким образом, структура ПНС интактных особей стерляди и лягушки сходна и характерна для низкого уровня функциональной активности.

2-. ЩЖ и ГГОС у гипофизэктомированных особей.

В ЩЖ стерляди через 10 дней после тотальной гипофизэктомии мор-фометрически не выявлено существенных изменений: показатель Э/К возрос на 23% (Е>0,05), а высота тироцитбв уменьшилась на 10% (Е>0,05) по сравнению с таковыми у интактных рыб (рисЛ). При этом, однако, в эпителии чаще, чем у интактных рыб, встречались тироциты уплощенной формы. В Щ лягушки уже через 10, и особенно через 60 дней после удаления ПДГ отчетливо выражены признаки снижения её активности: выявлено уменьшение показателя Э/К соответственно на 20% и 55% (Р<0,05), высота тироцитов уменьшалась на 25% и 35% (Р<0,05) по сравнению с аналогичными показателями у интактных лягушек (рис.2, 3). Тироциты в основном кубической и уплощенной фор-

1Л1, фиМИХуШГ ТеСИО ИрИЛ&ГОД'« Друг к ДРУ1'У, просеет капилляров Ме*-ду нами слабо аылвтен и в нем содержится мало Наши наблюдении как и данные других авторов /ОогЬлли, ¿¿аео, Ьоичкх-,

и др./, свидетельствую'!- о том, что у лягушек после удаления ЦДГ, кидо в кроьи отсутствует Т1'Г, происходит заметнее снижение активности !!у((. У осетровых л.е (по-видимому, как и у круглоротых и пластиножабериых рыб, филогаиетически более древних, чем Анита , позвоночных ) 1р.{ обладает большая автономностью от аденогипофиза . /Vivi.au, 'ЮбЗ} 1агйбп, 1юк!оп;.х1а, Ю'Л; 1агаел,Но№юо11,197^. Однако исследования на стерляди покакали, что на более поздних срока.; после гипофизакгоыии (через I, 2 и б месяцев) у них также происходят а трофический изменения в /Степанов, 1966/.

200' 180 160

140 120

100

А

р

а.

340$

•jr •

И .

J *

р

/

/

/

/

/ ■к

/ У

/ /

/ S

У

/

/ у /

/

^ _

«)

160

140

120 1Q£L

15

КОНТРОЛЬ

90 1В0 +БТ ■

90 180 -Н-+ВТ

ш

шгароль so

р— г-

/

У

_

71 У у

л ГГ> . К

i

180

+бт

SO 180 +++ВТ

Рис. I. Реакция 11РИ'стерляди через 90 и Х80 мин, после однотрааовс-..вог.о (■>-) и трехразового (+•+■+) воздействия ВТ. А - показатель Ь/К, Б - высота тироцитов; достоверность различия (Р<0,05):*- с не оперированным контролем,» - с гипофизэктомироваи-ным контролем; за 100$ приняты показатели контрольных интактныгх. животных. . Q - неоперирсванные' животные

. рп - через 10 дней пооле гинофизактомди.■

' Ь ПИС через 10 дней поело операции у стерляди и у лы/ил,и «и. -чей о некоторое уменьшение обьенов ядршгек ВГ-пололчтглььил: ШС и а [Ы соответственно на и 26}1 (Р>0,05), что р.гидотзльсп^и'г о иы-»енми в них синтетических процессов. У стерляди, ь сглич.юг лигу -цок, наблюдалось эиччпт.злыгое увеличение количества клетм подтипа (67,4%, Р40.05) и уменьшение 16 (20,2%, Р<0,05) и Ь (2.1',.', КО,05) подтипов. Среди ИСК, содержащих мало НСМ, ьыивлнлась "¡слетки гииофизиктсмли", для которых характерно снащенное на иари »»„'рио ядро и блодн.чя гомогенная цитоплазма. Ьти клетки, по-видиь£Ску, находятся в начально.'! ащг.а состояния дегенерации /Кузин, 19<ЭI/ и отражаю? состоянии пзрвачного раздраиения по Ниссло, которое характерно для ««¡¡ронов с пзрзреаашыми аксонами. У лягуиок "клеток гаио-фиээктокии" не было обнаружено, очевидно, потому, что терминальные отдели ИСК не били поври^дены. У отих «квотных существенно не маня-лезь соотношение подтипов НСК: 1а - 17%, 16 - 56% и 1и - «¿6%, что свидетельствуьт о некотором накоплении НСМ в перикарионах ИСК. У стерляди и лягушек отмечено накопление НСМ в волокнах преоптико-ги-пофизарного тракта, что, очевидно, связано о нарушением нормального способа выведения иейрогорыонов из терминалей аксонов. В ПЛ у обоих видов животных выявлялось большее, чем у интактних особей, количество дендро-ьентрикулярних контактов, а у лягушек в области ин-фундибулярной бухты выявлялись структуры, похожие на аксо-вентрику-•лярныв контакты. Через дендро- и аксо-венгрикулярнце контакты возможно поступление нейрогормонов в спинномозговую жидкость. Таким . способом в этих патологических условиях реализуется наиболее ^нло-•, генетически древний трансвентрнкулярный путь нейрогормональней регуляции, имеющий, по-видимому, компенсаторное значение /Асланов, Константинова, 1990/.

3.- ЩЖ и ГТНС после введения ВТ и ЭТ.

В ИИ после введения ВТ как' неоперированным, так и оперированным , рыбам и лягушкам отыёчены признаки активации. Тироцлты фолликулов ' в основной кубическЬй и призматической формы с овальны«! ядрами, расположенными в центре клетки, а в апикальной зоне цитоплазмы выявлены капли интрацеллюлярного коллоида. Отмечено увеличение степени - вакуолизации коллоида, расширение просвета синусоидных капилляров и заполнение их ФЭК. У не оперированных особей активация в большей степени выражена после одной инюкции: выявлено достоверное увеличение показателя О/К и высоты тироЦитов у стерляди соответственно до 230% н 150% (рис.1), а у лягушек - на 20% и 13% (рис.2); эти пока-

затели достоверно также отличались от таковых у особей, которым вводили соответствующие количества ФР.

У оперированных особей стерляди и лягушки достоверные изменения в tifl! выявлены после трех иньекций ВТ: показатель Э/К и высота тиро-цитов у рыб возрастает соответственно до 340£ и 150% по сравнению с контрольным уровнем Срис.1); у лягушек показатель Э/К возрос на 53* и 81%, а высота тирсцитов - на 2(Й и 50$ по сравнению с таковыми у контрольных лягушек с удаленной ПДГ Срис. 2, 3).

После введения ВТ степень активации Н'Д сильнее выражена у лягушек, прооперированных за 60 суток до опыта, чем за 10 суток, нес-ммря на то, что через 6Q суток после удаления ПДГ ШД находилась в более угнетенном состоянии, чом через 10 суток после операции.

. fP<0,0? '

Ч)

120

100 • г—

80 <*

50 ✓

гр=0,05

Р=0,05-

Ld

КОНТРОЛЬ +ФР

+ВТ

+++фр +++вт -н-+фр +++мт

(%)

120 100 80

50

р=0,05

¡Р<0,05

*

14),05-1

, КОНТРОЛЬ +ФР +ВТ +++ФР +++ВТ +++ФР +++ЫТ

Рис.2. Реакция ИКС лягушки через 30 мин, после одноразового (+) и трехразового (+-н-) воздействия ФР. ВТ и №. А - показатель Э/К, Б - высота тироцитов; достоверность различия (Р<0,05): *- с неоперированным контролем,» - с контрольными животными с удаленной ПДГ; за 10055 приняты показатели контрольных ин-тактных животных. (3 - неоперированные животные,

^ - через Ю-дней после удаления ПДГ.

Наши данные согласуются с предположением о стимулирующем блилшш Ь'Г на ЩЖ как транс-, так и парааденогипофизарьыы путем /Поленов, i960/. У неоперированных особей активация ЩЖ могла произойти вследствие воздействия как ВТ, так и ТТГ. Результаты опытов in vitro свидетельствуют об активирующем влиянии ваэопрессина на тирогропоциты /tjumpfcin et, al., 1987/ и тироциты /Дитятева и др., 1990/ у крыс. В свою очередь, увеличение в крови тироидных гормонов (Та и Т^) приводит к торможению выведения ТТГ по механизму отрицательной обратной связи, что через некоторое время вызывает и уменьшение активности самой D(S. У оперированных особей, у которых отсутствует ТГГ, а, следовательно, исключается возможность трансаденогипофиэарного

(%) 120

100

. 80 J 60 40

к

-Р<0,05

1

Р<0,05

P<0,05-i

1%)

120 100

80

60

40

КОНТРОЛЬ +++ФР +++ВТ •-.+ ++ФР +++МГ

f-P=0,05-1

р<о,обГ

rF<0,05—j

КОНТРОЛЬ +++ФР . +++ВТ +++ФР +++НТ

.Рис. 3; Реакция ЩЖ*лягушки через 30 мин, после трехразового (н<) воздействия ФР. ВТ и МТ. А - показатель Э/К, Б - высота тироцитоа; достоверность различия (Р<0,05): * - с неоперированным контролем, • - с контрольными животными с удаленной ЦЦГ; за 10056 приняты показатели контрольных интактных животных.

- кооперированные животные,- через 60 дней после удаления ПДГ,

плимтн и Г на Н^Г, чктипация этой колезы могла бить вызвана тоиько прягчч влипшем па нее ВТ, т.е. паразденогипофигарнич путем. За,-тодуиашю реакции у оперированных животнчх по сравнению с иеопори-ровир'нми, по-видимому, обусловлено отсутствием ТТГ, который, очевидно, б елее спепифичс-н для Щ"К, чем ВТ. Поскольку тироциты не имс-г.'Т ;,ск-р"глрпс11 иннервации, то вряд ли возможна активация !!"К у ки-НОШТС, подъергнутил ГИПОфИЗЭКТОЧИИ и удаления ПДГ, цлрино-пропод-¡пь'(,':•},ил ¡:;цппту]>пзар1{ым путем /Алешич, 1901/.

Достоверных иамоч^чяй после ложноЛ операция, а такме введения §1' кпк леоиерировшишм, так и гипофизэнтоюфов'ишда особям стерляди и лягушкам с удаленной ПДГ не било выявлено.

В С!,1'. поел" вп-'до;гпл МТ у неопермрсвашнх лягушек манометрически выявлено уменьшение показателя Э/К до 70^ и [У& (Р<0,05) и уменьшение высот!,1 тиром,1ггов до 01-12% (Р<0,05) по сравнению с интактшми ^иротнымч (рис. 2, 3). У лягушек с уделенной ПДГ из II и 1У экспериментов после введения МТ существенных изменений в железе не обнаружено Срис. 2, 3). Эти результаты согласуются с данными литературы, в которых было показано, ч?о окситоцин у млекопитающих может подавлять выведение ТТГ из тиротрэпоцитов / Упш-а1су еЬ, а1., 1905/ В экспериментах на гипофиззктомированных крысах также не било выявлено существенных морфологических изменений в ЩЖ после введения окситоцина /ШеПбак, Ирасновскан, 1206/. Эти данные, по-видимому, свидетельствуют о том, что !,!Т, в отличие-от ВТ, является более специализированным нонапептидом и участвует в регуляции функции Щ/К преимущественно трансаденогипофизарнии путем.

В ГГНС после введения ВТ не оперированным рыбам и лягушкам наблюдалось уменьшение объемов ядер и ядрышек ИСК из ПЯ, увеличение количества клеток 1а подтипа и уменьшение числа НСК 1в подтипа. Зти изменения в большей степени выражены у стерляди и свидетельствуют о снижении уровня синтетических процессов в зтих НСК. Но НСМ все же продолжает транспортироваться по их аксонам, о чем косвенно свидетельствуют данные о накоплении нейросекрета в волокнах преоп-тико-гипофизарного тракта и ШГ, а у лягушек - и в ЗНГ. У стерляди, напротив, выявлено уменьшение содержания НСМ в ЗНГ по сравнению с интактными рыбами, что, по-видимому, объясняется тем, что морфофун-к^юнальная организация ГГБС и, в частности, ЗНГ у осетровых более примитивна, чем у бесхвостых амфибий.

После введения ВТ гипофизэктомированным особям стерляди и лягушкам с удаленной ПДГ, прооперированным за 10 суток до эксперимента,

отмечено увеличение объемов ядер и ядрышек НСК СР<0,05), что особенно выражено после трехразового введения ВТ. При эгсм наблюдалось значительное увеличение количества клеток 1а подтипа и уменьшение количества НСК 16 и 1в подтипов. Эти данные свидетельствуют об активации процессов как синтеза НСМ, так и его выведения из пе~ рикарионов НСК. У обоих видов в аксонах преоптико-гнпофиэарного тракта и в ПНГ (а у лягушек и в ЗНГ) отмечено накопление НСМ. Это, по-видимому, свидетельствует о том, что регуляция синтеза нейро-горыонов в перикарионах НСК и их выведения из терминалей аксонов осуществляется разными механизмами. Нарушение зтих механизмов вследствие удаления ПДГ приводит к активации НСК после введения ВТ у оперированных особей, в' отличие от неоперированных, у которых наблюдалось снижение активности синтетических процессов в зтих клетках. . • .

--активация,!—— - торможение

---■---предполагаемое влияние.

4. Взаимосвязь между функционированием ГПЮ и ВД.

В наших экспериментах была выявлена корреляция между уровнем синтетической активности ИСК из ПЯ и тироцигамп !фК. У неонериро-ванннх. особей обоих видов увеличение высоты тироцитов после введения ВГ сопровождалось уменьшением обьемов ядер и ядрышек ИСК. У оперированных особей выявлена отчетливая положительная корреляция: увеличение высоты тироцитов сопровождалось увеличением обьемов ядер и ядрышек НСК. У стерляди через 160 мин. поело одной иньекцил отмечено уменьшение высоты тироцитов по сравнению с тем, что наблюдалось через 90 мин.; причем ото сопровождалось и уменьшением обьемов ядер и ядрышек НСК. Приведенные данные'наводят на мель о том, что в отсутствие гормонов аденогипофиза выявляется прямое действие тироидных гормонов на синтетическую активность ИСК. '

Наши, представления о путях влияния нонапептидных нейрогормонов на НуК У Ana''11lia и на характер взаимоотношений этой железы с ГГНС ■и ПДГ отражены на итоговой схеме (рис. 4).

вывода.-

I. У половозрелых особей травяной лягушки Rima temporaria L. уже через 10 и особенно через 60 суток после удаления передней доли гипофиза морфометрически выполаются достоверные признаки снижения функциональной активности щитовидной железы, в то время как у половозрелых особей волжской стерляди Acipenser ruthenus Ь. через 10 суток после тотальной гипофиээктомии существенных изменений в железе не обнаружено. В нонапептидергической гипоталамо-гипофи-зарной нейросекреторной системе.у представителей обоих классов жи-' вогных через 10 суток после операции морфометрически отмечено некоторое снижение функции нейросекреторных клеток преоптического ядра.

'¿.- У лягушки после трехразового введения меэотоцина в дозе 5'10~® М/кг у неоперированных.особей выявлено угнетение функции щитовидной железы, а у оперированных существенных изменений в железе не обнаружено. Зто свидетельствует о том, что мезотоцин может влиять на тцитовидную железу опосредованно, тормозя функцию тиротропоци-тов, т.е. филогенетически более молодым трансаденогипофизарным путем.

3. У стерляди и лягушки введение вазотоцина в дозе 5'10~®М/кг вы-

зывает активацию щитовидной железы как у не оперированных, так и у оперированных особей; причем активация у неоперированных животных отмечается уже после перьой, а у оперированных - после третьей инъекции нейрогормона, что свидетельствует о снижении реактивности щитовидной железы в отсутствие тиротропного гормона гипофиза. Эти данные свидетельствуют о возможности влияния ваэотоцина на щитовидную келезу как- трансаденогипофизарным, так и нарааденогипофизарным путем.

4. Степень активации щитовидной железы после воздействия вазотоци-ном как у неоперированных, так и у оперированных особей сильнее выражена у стерляди - представителя филогенетически более древней, чем лягушки, группы позвоночных.

5. В гипоталамо-гипофизарной нейросенреторной системе у неоперированных особей стерляди и лягушки введение ваэотоцина приводит к снижению синтеза нейрогормонов, о чем свидетельствует достоверное уменьшение объемов ядрышек нейросекреторних клеток. При этой в заднем нейрогипофизэ у стерляди отмечено уменьшение содержания нейро-секрета, а у лягушки, напротив, его накопление,.что косвенно свидетельствует о различиях в процессах выведения нонапептидов в общий кровоток у представителей обоих классов.

6. Введение ваэотоцина сопровождается увеличением содержания вазо-тоцнн-' и паральдегидфуксинлоложительного материала в аксонах ней-

.росекреторних клеток преоптпческого'ядра и их терминалах в переднем нейрогипофипе как у неоперированных, так и.у оперированных осо-..бей стерляди и лягушки. •

7. Введение ваэотоцина оперированным особяи стерляди и лягушки позволило выявить отчетливую функциональную корреляцию между состоянием нейросекреторних клеток преоптического ядра (усиление синтеза цейросекрета) и степенью активации щитовидной железы: в отсутствие тиротропного гормона гипофиза' выявляется положительная обратная связь между уровнем Тироидннх гормонов в крови и синтетической активностью нейросекреторних клеток.

Список работ, опубликованных по материалам диссертации:

I. Романова И.В., Кузик В.В., Беленький ПЛ., Поленов А.Л. • Реакция'щитовидной железы'травяной лягушки R&aa temporaria Ъ. на введение аргинин-вааотоцина (АВТ).//Теэ. докл. 3-й Всесопзн. конф. по нейропндокринологии. - Ленинград, 1968.- С.201.

2. Романова И.В., Поленов А.Л.

Реакция щитовидной железы Anamnia на введение аргинин-вазотоци-на./Дез. докл. конф.*"Механизмы регуляции физиологических функций". - Ленинград, 1988. - С.64-65.

3. }£узик В.В., Поленов А.Л., Романова И.В., Елифанов A.B. Состояние гипоталамо-гипофизарного нейроэндокринного комплекса у интактной и гипофизэктомировашой стерляди при введении аргинин- ■ вазотоцина (АВТ).//Тез. докл. 7-й Всесоюзн. конф. по экологической физиологии и биохимии рыб; - Рыбинск, 1989. - Т.2. - С.227-228, .

4. Романова И.В., Глазова М.В., Поленов А.Л.

Влияние ы'езотоцина (MI) на морфофункциональное состояние щитовид-■ ной железы (ЩЮ неоперированных (НО) и гипофиззктомированных (ГЭ) лягущек.//Тез. докл. Всесоюзн. симпозиума "Физиологическое и клиническое значение регуляторных пептидов". - Нижний Новгород, 1990. C.I53. •

5. Романова И.В., Поленов А.Л,, Беленький М.А., Кузик В.В. Реакция щитовидной железы лягушки Rana temporaria на введение ар-гинин-вазогоцина.//Журн. эвол. биохим. и физиол. - 1991.- Т.27, Ж.-С. 239-248. •

•6. Романова И.В., Поленов А.Л., Беленький М.А., Кузик В.В. Морфофункциональное состояние щитовидной железы yAnamnia после .гиПофизэктомии и введения гипоталамических нонапептидов. Щитовидная железа стерляди Aoipenser ruthenur, L. после введения аргинин-вазотоцина.//Журн. эвол. биохим.- и физиол. - 1991.- Т.27, №3.-С.351-357.

7« Polenor A.b., Ronanova I.V., Belenky Ы.А, Effect of arginin-vasotocin (AVT) on the thyroid gland (TG) of liypophysectomyzed Anamniotes.//Gen. Comp. Endocrinol.- "1991*-V.82,H2.- P.305.

РТ!1.'Гш1.Гь1?.:Зак.825.Тяр.1С)0. I4.II.tI.Бесплатно.